JPH08275773A - Microorganism and its culture and treatment of hardly decomposable substance utilizing the same microorganism - Google Patents
Microorganism and its culture and treatment of hardly decomposable substance utilizing the same microorganismInfo
- Publication number
- JPH08275773A JPH08275773A JP7071549A JP7154995A JPH08275773A JP H08275773 A JPH08275773 A JP H08275773A JP 7071549 A JP7071549 A JP 7071549A JP 7154995 A JP7154995 A JP 7154995A JP H08275773 A JPH08275773 A JP H08275773A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- microorganism
- polyvinyl alcohol
- hydrogen peroxide
- organic compound
- enzyme
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Landscapes
- Processing Of Solid Wastes (AREA)
- Biological Depolymerization Polymers (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Description
【０００１】[0001]
【産業上の利用分野】本発明は、微生物及びその培養方
法、並びに該微生物を利用した難分解性物質の処理方法
に関する。TECHNICAL FIELD The present invention relates to a microorganism, a method for culturing the same, and a method for treating a hardly decomposable substance using the microorganism.
【０００２】[0002]
【従来の技術】近年、自然環境保護の観点から、廃棄物
処理の方法として、エネルギー損失が少なく、有毒ガス
の発生の心配の無い微生物処理方法が、大変注目されて
いる。しかしながら、廃棄物の中には、合成高分子をは
じめ、微生物による分解を受けにくいものが多数存在す
る。また、処理したい物質を分解する微生物を発見し
て、実際の処理においてその能力を活用したとしても、
その分解能を効果的に発現、維持するのは非常に難しい
問題である。2. Description of the Related Art In recent years, from the viewpoint of protecting the natural environment, as a waste treatment method, a microbial treatment method with little energy loss and no fear of generation of toxic gas has attracted much attention. However, many wastes, including synthetic polymers, are difficult to be decomposed by microorganisms. Also, even if you discover a microorganism that decomposes the substance you want to treat and utilize its ability in actual treatment,
It is a very difficult problem to effectively develop and maintain the resolution.
【０００３】[0003]
【発明が解決しようとする課題】本発明は、微生物及び
その培養方法、並びに該微生物を利用した難分解性物質
の処理方法を提供することを目的とする。SUMMARY OF THE INVENTION It is an object of the present invention to provide a microorganism, a method for culturing the same, and a method for treating a hardly decomposable substance using the microorganism.
【０００４】[0004]
【課題を解決するための手段】本発明者らは、上記の課
題に鑑み、鋭意検討した結果、培地に過酸化水素分解力
を有する酵素を添加することによって得られる微生物
が、ポリビニルアルコール等の難分解性物質の処理等に
効果があることを見い出した。Means for Solving the Problems The inventors of the present invention have made extensive studies in view of the above problems, and as a result, a microorganism obtained by adding an enzyme having a hydrogen peroxide decomposing ability to a medium is polyvinyl alcohol or the like. It has been found that it is effective in treating persistent substances.
【０００５】即ち、本発明は、培地に過酸化水素分解力
を有する酵素を添加することを特徴とする微生物の培養
方法、特定の有機化合物、該有機化合物を分解する微生
物及び過酸化水素分解力を有する酵素からなる組成物、
特定の有機化合物の酸化能又は資化能を示す微生物の培
養菌体又は培養菌体成分を、過酸化水素分解力を有する
酵素の存在下で、該有機化合物に作用させることを特徴
とする該有機化合物の分解方法、受託番号「ＦＥＲＭ
Ｐ−１４７７３」のポリビニルアルコール資化菌、並び
に、受託番号「ＦＥＲＭ Ｐ−１４８５７」のポリビニ
ルアルコール資化菌である。That is, the present invention provides a method for culturing a microorganism characterized by adding an enzyme having a hydrogen peroxide decomposing ability to a medium, a specific organic compound, a microorganism decomposing the organic compound and a hydrogen peroxide decomposing ability. A composition comprising an enzyme having
Characterized in that a cultured bacterial cell or a cultured bacterial cell component of a microorganism exhibiting an oxidizing ability or assimilating ability of a specific organic compound is allowed to act on the organic compound in the presence of an enzyme having a hydrogen peroxide decomposing ability. Decomposition method of organic compounds, accession number "FERM
P-14773 "polyvinyl alcohol-utilizing bacterium, and accession number" FERM P-14857 "polyvinyl alcohol-utilizing bacterium.
【０００６】以下、本発明を詳細に説明する。The present invention will be described in detail below.
【０００７】まず、培地に過酸化水素分解力を有する酵
素を添加することを特徴とする微生物の培養方法につい
て、説明する。First, a method for culturing a microorganism characterized by adding an enzyme having a hydrogen peroxide decomposing ability to a medium will be described.
【０００８】本発明において、培地とは、各種の微生物
培養用培地を示し、廃棄物処理槽、排水処理槽等の内容
物も挙げられ、培地形態は、液体、固体等のいずれでも
よい。また、コロニー形成のための寒天培地も含む。[0008] In the present invention, the term "medium" refers to various types of microorganism culture media, including the contents of waste treatment tanks, waste water treatment tanks, etc. The form of the medium may be liquid, solid or the like. It also contains an agar medium for colony formation.
【０００９】本発明において、過酸化水素分解力を有す
る酵素は、動物起源、植物起源、微生物起源を問わず、
過酸化水素分解力があればいずれも使用できる。In the present invention, the enzyme capable of decomposing hydrogen peroxide may be of animal origin, plant origin or microbial origin,
Any one can be used as long as it has the ability to decompose hydrogen peroxide.
【００１０】具体的には、カタラーゼ、ペロキシダー
ゼ、ＮＡＤ+ ペロキシダーゼ、ＮＡＤＰ+ ペロキシダー
ゼ、シトクロムペロキシダーゼ、グルタチオンペロキシ
ダーゼ等が例示でき、好ましくは、カタラーゼ、ペロキ
シダーゼである。Specific examples thereof include catalase, peroxidase, NAD + peroxidase, NADP + peroxidase, cytochrome peroxidase, glutathione peroxidase, and the like, with preference given to catalase and peroxidase.
【００１１】上記酵素の添加濃度は、培地に対して、
０．１ unit/ml〜１００００００ unit/ml、好ましく
は、１０ unit/ml〜１０００ unit/mlである。The concentration of the enzyme added is
0.1 unit / ml to 1,000,000 unit / ml, preferably 10 unit / ml to 1000 unit / ml.
【００１２】尚、１ unit とは、ｐＨ７．０、２５℃に
おいて１分間に過酸化水素を１μｍｏｌ分解するのに必
要な酵素量である。1 unit is the amount of enzyme required to decompose 1 μmol of hydrogen peroxide in 1 minute at pH 7.0 and 25 ° C.
【００１３】培養は、上記培地に上記過酸化水素分解力
を有する酵素を添加し、通常、１０℃〜４０℃で、１０
〜２４０時間行う。For the culture, the above-mentioned enzyme having a hydrogen peroxide decomposing ability is added to the above medium, and the culture is usually performed at 10 to 40 ° C. for 10 hours.
~ 240 hours.
【００１４】上記培養方法によって培養される微生物
は、有機物資化において、過酸化水素を発生しやすい微
生物であり、例えばシトクロムオキシダーゼ試験におい
て陽性を示す細菌である。The microorganisms cultivated by the above-mentioned culturing method are microorganisms that easily generate hydrogen peroxide in the assimilation of organic substances, and for example, bacteria that show a positive result in the cytochrome oxidase test.
【００１５】このような細菌としては、ナイセリア属、
アエロモナス属、ビブリオ属、シュードモナス属、フラ
ボバクテリウム属、アルカリゲネス属、ブルセラ属、モ
ラクセラ属、バチルス属等が挙げられる。具体例として
は、シュードモナス属細菌ＲＳ６０５Ｓ株「受託番号：
ＦＥＲＭ Ｐ−１４８５７」が挙げられ、これら以外に
も、ポリビニルアルコール資化菌ＲＳ２０５株「受託番
号：ＦＥＲＭ Ｐ−１４７７３」が挙げられる。Examples of such bacteria include the genus Neisseria,
Examples include Aeromonas, Vibrio, Pseudomonas, Flavobacterium, Alcaligenes, Brucella, Moraxella, Bacillus, and the like. As a specific example, the Pseudomonas bacterium RS605S strain "accession number:
FERM P-14857 "and other than these, polyvinyl alcohol-assimilating bacterium RS205 strain" accession number: FERM P-14773 ".
【００１６】例えば、ポリビニルアルコール分解菌を培
養するには、通常の微生物培養用培地にポリビニルアル
コールを０．０５〜２．０％程度添加し、過酸化水素分
解力を有する酵素を添加することで培養できる。For example, in order to culture polyvinyl alcohol-decomposing bacteria, polyvinyl alcohol is added to an ordinary microorganism culture medium in an amount of about 0.05 to 2.0% and an enzyme having a hydrogen peroxide decomposing ability is added. Can be cultured.
【００１７】本発明において、培養条件は、菌の有機物
酸化によって発生した過酸化水素が、菌体近くに局在す
るような条件が好ましい。例えば、寒天培地での固体培
養が挙げられる。In the present invention, the culture conditions are preferably such that hydrogen peroxide generated by the oxidation of the organic matter of the bacteria is localized near the cells. For example, solid culture in an agar medium can be mentioned.
【００１８】本発明において、培地に過酸化水素分解力
を有する酵素を添加することの理由については、次のよ
うに説明される。In the present invention, the reason why the enzyme having hydrogen peroxide decomposing ability is added to the medium is explained as follows.
【００１９】微生物の多くは、有機化合物の代謝におい
て、様々な酸化酵素を生産し、活用しており、酸化酵素
の中には次式で表わせるような反応を触媒する酵素群が
ある。Many microorganisms produce and utilize various oxidases in the metabolism of organic compounds, and among the oxidases, there are enzyme groups that catalyze the reactions represented by the following formula.
【００２０】[0020]
【数１】 Ａ ＋ Ｏ2 → 酸化されたＡ ＋ 過酸化水素 （Ａは、任意の有機化合物を示す。） 通常生体においては、生成した過酸化水素は、その菌の
もつカタラーゼによって分解解毒されるが、ある種の微
生物においては、カタラーゼ活性が過酸化水素発生量に
追いつかないため、過酸化水素が分解されず、その増殖
が抑制されることがある。そこで、本発明では、培地に
過酸化水素分解力を有する酵素を添加することにより、
このような過酸化水素を分解し、菌の上記Ａに相当する
有機化合物の酸化・資化を助長し、菌の増殖を正常、活
性化している。[Equation 1] A + O 2 → Oxidized A + hydrogen peroxide (A represents any organic compound.) Normally, in the living body, the produced hydrogen peroxide is decomposed and detoxified by catalase possessed by the bacterium. However, in some microorganisms, the catalase activity cannot keep up with the amount of hydrogen peroxide generated, so that hydrogen peroxide may not be decomposed and its growth may be suppressed. Therefore, in the present invention, by adding an enzyme having a hydrogen peroxide decomposing power to the medium,
Such hydrogen peroxide is decomposed to promote the oxidation and assimilation of the organic compound corresponding to the above-mentioned A of the bacterium, thereby normalizing and activating the growth of the bacterium.
【００２１】次に、特定の有機化合物、該有機化合物を
分解する微生物及び過酸化水素分解力を有する酵素から
なる組成物について説明する。Next, a composition comprising a specific organic compound, a microorganism decomposing the organic compound, and an enzyme having a hydrogen peroxide decomposing ability will be described.
【００２２】特定の有機化合物とは、前記Ａに相当する
有機化合物のことであり、培地中のあらゆる天然有機化
合物、合成有機化合物であれば特に制限はなく、一般
に、補酵素等や寒天等の固化剤以外の炭素源である。The specific organic compound is an organic compound corresponding to the above A and is not particularly limited as long as it is any natural organic compound or synthetic organic compound in the medium, and generally, such as coenzyme and agar. It is a carbon source other than the solidifying agent.
【００２３】このような有機化合物としては、例えば、
グルコース、キシロース、ガラクトース、マンノース等
の糖類、アラニン、リジン、アスパラギン、グルタミン
酸等のアミノ酸類、メタノール、エタノール、エタノー
ルアミン、シクロヘキシルアミン、リンゴ酸、コレステ
ロールが挙げられ、また、ポリビニルアルコール、ポリ
エチレングリコール、ポリプロピレングリコール、ポリ
カプロラクトン、ポリプロピオラクトン、ポリ乳酸、ポ
リブチレンサクシネート等の合成高分子も挙げられ、好
ましくは、ポリビニルアルコールである。As such an organic compound, for example,
Glucose, xylose, galactose, saccharides such as mannose, alanine, lysine, asparagine, amino acids such as glutamic acid, methanol, ethanol, ethanolamine, cyclohexylamine, malic acid, cholesterol, polyvinyl alcohol, polyethylene glycol, polypropylene. Synthetic polymers such as glycol, polycaprolactone, polypropiolactone, polylactic acid, and polybutylene succinate are also included, and polyvinyl alcohol is preferable.
【００２４】特定の有機化合物を分解する微生物とは、
上記有機化合物を炭素源とする寒天培地において過酸化
水素分解力を有する酵素を添加することによって培養さ
れる、該有機化合物を酸化・資化することができる微生
物である。Microorganisms that decompose specific organic compounds are
A microorganism capable of oxidizing and assimilating the organic compound, which is cultivated by adding an enzyme having a hydrogen peroxide decomposing ability to an agar medium containing the organic compound as a carbon source.
【００２５】このような微生物としては、例えば、前記
したシトクロムオキシダーゼ試験において陽性を示す細
菌が挙げられる。Examples of such microorganisms include bacteria that are positive in the cytochrome oxidase test described above.
【００２６】このような細菌としては、ナイセリア属、
アエロモナス属、ビブリオ属、シュードモナス属、フラ
ボバクテリウム属、アルカリゲネス属、ブルセラ属、モ
ラクセラ属、バチルス属等が挙げられる。具体例として
は、シュードモナス属細菌ＲＳ６０５Ｓ株「受託番号：
ＦＥＲＭ Ｐ−１４８５７」が挙げられ、これら以外に
も、ポリビニルアルコール資化菌ＲＳ２０５株「受託番
号：ＦＥＲＭ Ｐ−１４７７３」が挙げられる。Examples of such bacteria include Neisseria,
Examples include Aeromonas, Vibrio, Pseudomonas, Flavobacterium, Alcaligenes, Brucella, Moraxella, Bacillus, and the like. As a specific example, the Pseudomonas bacterium RS605S strain "accession number:
FERM P-14857 "and other than these, polyvinyl alcohol-assimilating bacterium RS205 strain" accession number: FERM P-14773 ".
【００２７】また、本組成物で使用する過酸化水素分解
力を有する酵素は、前記した通りである。The enzyme having a decomposing power for hydrogen peroxide used in the present composition is as described above.
【００２８】本組成物の組成比は、特定の有機化合物
が、０．１ｇ／ｌ〜１０ｇ／ｌ、該有機化合物を分解す
る微生物が、菌体懸濁液として最終濃度が６６０ｎｍの
吸光度で０．１〜３０、過酸化水素分解力を有する酵素
が１０００ unit/l 〜１００００００ unit/l である。The composition ratio of the present composition is such that the specific organic compound is 0.1 g / l to 10 g / l, and the microorganism degrading the organic compound is a bacterial cell suspension with a final concentration of 0 at an absorbance of 660 nm. 1 to 30, and the enzyme having a hydrogen peroxide decomposing power is 1000 unit / l to 1,000,000 unit / l.
【００２９】本組成物において使用する培地は、各種の
微生物培養用培地であり、廃棄物処理槽、排水処理槽等
の内容物も挙げられ、培地形態は、液体、固体等のいず
れでもよい。また、コロニー形成のための寒天培地も含
む。The medium used in the present composition is a medium for culturing various microorganisms, and examples thereof include contents such as a waste treatment tank and a waste water treatment tank, and the medium form may be liquid, solid or the like. It also contains an agar medium for colony formation.
【００３０】次に、特定の有機化合物の酸化能又は資化
能を示す微生物の培養菌体又は培養菌体成分を、過酸化
水素分解力を有する酵素の存在下で、該有機化合物に作
用させることを特徴とする該有機化合物の分解方法につ
いて説明する。Next, a cultured bacterial cell or a cultured bacterial cell component of a microorganism exhibiting an oxidizing ability or an assimilating ability of a specific organic compound is allowed to act on the organic compound in the presence of an enzyme capable of decomposing hydrogen peroxide. The method for decomposing the organic compound, which is characterized by the above, will be described.
【００３１】菌体成分とは、前記特定の有機化合物を酸
化又は資化することができる微生物の培養菌体、固定化
した菌体、菌体抽出物、固定化した菌体抽出物、菌体抽
出液、培養液、培養濾液、精製した酵素、固定化した酵
素等を含む。The bacterial cell component is a cultured bacterial cell of a microorganism capable of oxidizing or assimilating the above-mentioned specific organic compound, immobilized bacterial cell, bacterial cell extract, immobilized bacterial cell extract, bacterial cell. It includes an extract, a culture solution, a culture filtrate, a purified enzyme, an immobilized enzyme and the like.
【００３２】上記分解方法において、特定の有機化合物
としては、前記した有機化合物が挙げられ、特に、ポリ
ビニルアルコールが好ましい。In the above decomposition method, examples of the specific organic compound include the above-mentioned organic compounds, and polyvinyl alcohol is particularly preferable.
【００３３】本分解方法では、培養菌体の濃度は、特定
の有機化合物０．１〜１０ｇ／ｌに対し、菌体懸濁液と
して最終濃度が、６６０ｎｍの吸光度で、０．１以上、
通常は、０．５〜３０である。In this decomposition method, the concentration of the cultured cells is 0.1 to 10 g / l of the specific organic compound, and the final concentration of the suspension is 0.1 or more at the absorbance of 660 nm.
Usually, it is 0.5 to 30.
【００３４】また、酵素、菌体抽出物は、特定の有機化
合物０．１〜１０ｇ／ｌに対し、最終濃度が２８０ｎｍ
の吸光度で、０．１以上、通常は、０．５〜５．０であ
る。The final concentration of the enzyme or microbial cell extract is 280 nm for a specific organic compound of 0.1 to 10 g / l.
The absorbance is 0.1 or more, usually 0.5 to 5.0.
【００３５】また、過酸化水素分解力を有する酵素は、
１０００ unit/l 〜１００００００unit/l である。The enzyme having the ability to decompose hydrogen peroxide is
It is 1000 unit / l to 1,000,000 unit / l.
【００３６】特定の有機化合物がポリビニルアルコール
の場合は、ポリビニルアルコール資化菌の培養菌体、菌
体抽出物、菌体抽出液、培養液、培養濾液又は精製した
酵素を適量、ポリビニルアルコールを含む溶液、例え
ば、廃水、コンポスト等に添加することによって、ポリ
ビニルアルコールの分解・資化を行うことができる。When the specific organic compound is polyvinyl alcohol, it contains polyvinyl alcohol, which is an appropriate amount of cultured bacterial cells of polyvinyl alcohol-utilizing bacteria, bacterial cell extract, bacterial cell extract, culture solution, culture filtrate or purified enzyme. Polyvinyl alcohol can be decomposed and assimilated by adding it to a solution such as waste water or compost.
【００３７】当業者であれば、ポリビニルアルコールの
濃度に対するポリビニルアルコール資化菌の培養菌体、
菌体抽出物、菌体抽出液、培養液、培養濾液又は精製し
た酵素の量を適宜選択して実施することができる。Those skilled in the art will appreciate that cultured cells of polyvinyl alcohol-assimilating bacteria with respect to the concentration of polyvinyl alcohol,
The amount of the bacterial cell extract, bacterial cell extract, culture solution, culture filtrate, or purified enzyme can be appropriately selected for implementation.
【００３８】また、本発明では、ポリビニルアルコール
資化菌の培養菌体、菌体抽出物、菌体抽出液、培養液、
培養濾液又は精製した酵素を担体に固定化させ、この固
定化させた菌体成分を、ポリビニルアルコールを含む、
例えば、廃水、コンポスト等に作用させることによっ
て、ポリビニルアルコールを分解、資化させることもで
きる。Further, in the present invention, cultured bacterial cells of polyvinyl alcohol-utilizing bacteria, bacterial cell extract, bacterial cell extract, culture solution,
The culture filtrate or the purified enzyme is immobilized on a carrier, and the immobilized bacterial cell component contains polyvinyl alcohol,
For example, polyvinyl alcohol can be decomposed and assimilated by acting on waste water, compost and the like.
【００３９】利用できる担体としては、例えば、活性
炭、多孔性ガラス、酸性白土、ＤＥＡＥ−セルロース、
ＤＥＡＥ−セファデックス、ＤＭＡ−ポリビニルアルコ
ール、セロハン膜、セルロース、ナイロン管等が挙げら
れる。Examples of usable carriers include activated carbon, porous glass, acid clay, DEAE-cellulose,
DEAE-Sephadex, DMA-polyvinyl alcohol, cellophane membrane, cellulose, nylon tube and the like can be mentioned.
【００４０】このようなポリビニルアルコール資化菌と
しては、シュードモナス属、アルカリゲネス属細菌が挙
げられ、具体例としては、シュードモナス属細菌ＲＳ６
０５Ｓ株「受託番号：ＦＥＲＭ Ｐ−１４８５７」が挙
げられ、これら以外にもポリビニルアルコール資化菌Ｒ
Ｓ２０５株「受託番号ＦＥＲＭ Ｐ−１４７７３」が挙
げられる。Examples of such polyvinyl alcohol-utilizing bacteria include Pseudomonas spp. And Alcaligenes spp., And specific examples include Pseudomonas spp. RS6.
05S strain "accession number: FERM P-14857" and the like. In addition to these, polyvinyl alcohol assimilating bacterium R
The S205 strain "trust number FERM P-14773" can be mentioned.
【００４１】ポリビニルアルコール資化菌の培養菌体、
菌体抽出物又は精製した酵素を担体に固定化する方法と
しては、例えば、物理吸着法、イオン結合法、架橋法、
共有結合法が挙げられる。また、ポリアクリルアミド、
寒天等による微生物包括法も適用できる。Cultured cells of polyvinyl alcohol-utilizing bacteria,
Examples of the method for immobilizing the cell extract or the purified enzyme on the carrier include, for example, physical adsorption method, ionic bond method, cross-linking method,
A covalent bond method is mentioned. Also, polyacrylamide,
A microbial inclusion method using agar or the like can also be applied.
【００４２】このように菌体、菌体抽出物又は精製した
酵素を適当な担体に固定化することによって、ポリビニ
ルアルコール資化能菌の濃度を高く維持することがで
き、容易に管理できる等の利点がある。By immobilizing the cells, the cell extract or the purified enzyme on a suitable carrier, the concentration of polyvinyl alcohol-assimilating bacteria can be maintained at a high level and can be easily controlled. There are advantages.
【００４３】受託番号「ＦＥＲＭ Ｐ−１４７７３」及
び受託番号「ＦＥＲＭ Ｐ−１４８５７」であるポリビ
ニルアルコール資化菌の菌学的性質については、実施例
に示す通りである。The mycological properties of the polyvinyl alcohol-assimilating bacteria with the accession number "FERM P-14773" and the accession number "FERM P-14857" are as shown in the examples.
【００４４】[0044]
【発明の効果】本発明によって、従来の方法では分離で
きなかった微生物が、自然界から得ることができる。そ
の結果、今までは、微生物分解されないとされたきた有
機化合物でも、その分解菌が発見される可能性が広が
る。また、種々の微生物の培養生産においても、過酸化
水素分解力を有する酵素を培地に添加することによっ
て、菌の生育を向上させ、物質生産を向上させることも
できる。According to the present invention, microorganisms which could not be separated by the conventional method can be obtained from nature. As a result, there is a greater possibility that the degrading bacteria will be found even with organic compounds that have been said not to be decomposed by microorganisms. In addition, in the culture production of various microorganisms, the growth of bacteria and the substance production can also be improved by adding an enzyme having a hydrogen peroxide decomposing ability to the medium.
【００４５】[0045]
【実施例】次に実施例を挙げて、更に詳細に説明する。EXAMPLES Next, examples will be described in more detail.
【００４６】〔実施例１〕ポリビニルアルコール資化菌ＲＳ２０５株のポリビニル
アルコール資化におけるカタラーゼ添加の効果 ポリビニルアルコール資化菌ＲＳ２０５株は本発明者ら
が１９９４年１２月１日に、土壌から新たに分離したも
ので、通商産業省工業技術院生命工学工業技術研究所に
「微生物の表示：ＲＳ２０５」「受託番号：ＦＥＲＭ
Ｐ−１４７７３」として寄託されている。[Example 1] Polyvinyl alcohol assimilating bacteria RS205 strain polyvinyl
Effect of Catalase Addition on Alcohol Utilization The polyvinyl alcohol-assimilating bacterium RS205 strain was newly separated from soil on December 1, 1994 by the present inventors. "Display of microorganisms: RS205""Accession number: FERM
P-14773 ".
【００４７】ポリビニルアルコール資化菌ＲＳ２０５株
の菌学的性質は次の通りである。The mycological properties of the polyvinyl alcohol-assimilating strain RS205 strain are as follows.
【００４８】（１）形態 ニュートリエントブロス（ディフコ社製）寒天培地に生
育した細胞について以下の形態を調べた。(1) Morphology The following morphology was examined for cells grown on nutrient broth (manufactured by Difco) agar medium.
【００４９】[0049]
【表１】 [Table 1]
【００５０】（２）生理学的性質(2) Physiological properties
【００５１】[0051]
【表２】 [Table 2]
【００５２】以上の菌学的性質から、本菌は「バージイ
ズ マニュアル オブ システマチック バクテリオロ
ジー １巻 １９８４年（Bergey's manual of systema
tic bacteriology volume 1 1984）」の細菌分類書を参
考にして検討した結果、新種のポリビニルアルコール分
解菌であることが判った。Based on the above-mentioned mycological properties, the present bacterium is "Bergey's manual of systema 1", 1984.
tic bacteriology volume 1 1984) ”, the results of the examination revealed that it was a new type of polyvinyl alcohol-degrading bacterium.
【００５３】（実験方法）ポリビニルアルコール合成寒
天培地を下記表３の培地に寒天１５ｇを加えて調製し、
試験区にはカタラーゼを１０００unit/ml となるように
添加し、対照区には同培地を熱処理しカタラーゼを失活
させたものを用いた。(Experimental Method) A polyvinyl alcohol synthetic agar medium was prepared by adding 15 g of agar to the medium shown in Table 3 below.
Catalase was added at 1000 unit / ml to the test section, and the same medium was heat-treated to inactivate the catalase as the control section.
【００５４】[0054]
【表３】 [Table 3]
【００５５】尚、使用したポリビニルアルコールは、
（株）クラレ製ＰＶＡ１１７（重合度１７００、鹸化度
約９９％）、使用したカタラーゼは、和光純薬工業
（株）製ウシ肝臓由来カタラーゼ（５９００unit/mg ）
である。The polyvinyl alcohol used was
Kuraray's PVA117 (polymerization degree 1700, saponification degree about 99%), catalase used is Wako Pure Chemical Industries' cattle liver-derived catalase (5900 unit / mg).
Is.
【００５６】このポリビニルアルコール合成寒天培地
に、ニュートリエントブロス液体培地（ディフコ社製）
で５日間、３０℃で往復振盪培養したＲＳ２０５株の培
養液を、滅菌水で適宜希釈したものを撒き、３０℃で培
養した。On this polyvinyl alcohol synthetic agar medium, a nutrient broth liquid medium (manufactured by Difco)
The culture solution of RS205 strain, which had been subjected to reciprocal shaking culture at 30 ° C. for 5 days, was seeded by appropriately diluting with sterile water, and cultured at 30 ° C.
【００５７】（結果）試験区のプレートには約１週間
で、直径１ｍｍ程度のコロニーが形成され、２週間後に
は、直径２ｍｍ程度のコロニーにまで成長し、ポリビニ
ルアルコール資化が認められた。一方、対照区は培養２
週間経過してもコロニー形成は、全く認められなかっ
た。このことから本菌は、ポリビニルアルコールを唯一
の炭素源とした寒天培地においては、過酸化水素分解力
のある酵素を添加することによって、初めてポリビニル
アルコールを資化できることが判った。(Results) Colonies with a diameter of about 1 mm were formed on the plate of the test section in about 1 week, and after 2 weeks, colonies with a diameter of about 2 mm were grown, and polyvinyl alcohol assimilation was observed. On the other hand, the control section is culture 2
No colony formation was observed even after a lapse of weeks. From this result, it was found that the bacterium can assimilate polyvinyl alcohol for the first time in an agar medium containing polyvinyl alcohol as the only carbon source by adding an enzyme capable of decomposing hydrogen peroxide.
【００５８】〔実施例２〕シュードモナス属細菌ＲＳ６０５Ｓ株のポリビニルアル
コール資化におけるカタラーゼ添加の効果 シュードモナス属細菌ＲＳ６０５Ｓ株は、本発明者らが
１９９５年３月１１日に、土壌から新たに分離したもの
で、通商産業省工業技術院生命工学工業技術研究所に
「微生物の表示：ＲＳ６０５Ｓ」「受託番号：ＦＥＲＭ
Ｐ−１４８５７」として寄託されている。[Example 2] Polyvinyl alcohol of Pseudomonas genus RS605S strain
Effect of addition of catalase on cole assimilation Pseudomonas bacterium RS605S strain was newly separated from soil on March 11, 1995 by the present inventors. "Display of microorganisms: RS605S""Consignment number: FERM
P-14857 ".
【００５９】シュードモナス属細菌ＲＳ６０５Ｓ株の菌
学的性質は次の通りである。The mycological properties of the Pseudomonas bacterium strain RS605S are as follows.
【００６０】（１）形態 ニュートリエントブロス（ディフコ社製）寒天培地に生
育した細胞について以下の形態を調べた。(1) Morphology The following morphology was examined for cells grown on Nutrient Broth (Difco) agar medium.
【００６１】[0061]
【表４】 [Table 4]
【００６２】（２）生理学的性質(2) Physiological properties
【００６３】[0063]
【表５】 [Table 5]
【００６４】以上の菌学的性質を「バージイズ マニュ
アル オブ システマチック バクテリオロジー １巻
１９８４年（Bergey's manual of systematic bacter
iologyvolume 1 1984）」の細菌分類書を参考にして検
討した結果、シュードモナス属に属する細菌であると同
定した。ＲＳ６０５Ｓ株を他の公知のシュードモナス属
細菌と比較した場合、菌学的性質がシュードモナス ベ
シキュラリスに近似している。しかしながら、ＲＳ６０
５Ｓ株は、硝酸塩の還元性およびコロニー色調におい
て、シュードモナス ベシキュラリスと相違する。また
他のシュードモナス属細菌のいずれの標準種とも菌学的
性質が相違することから、ＲＳ６０５Ｓ株は、シュード
モナス属に属する新菌種と判定した。The above-mentioned mycological properties are described in "Bergey's manual of systematic bacter", 1984.
As a result of examination with reference to the bacterial taxonomy of “Biological volume 1 1984)”, it was identified as a bacterium belonging to the genus Pseudomonas. When the RS605S strain is compared with other known Pseudomonas bacteria, the mycological properties are close to those of Pseudomonas vesicularis. However, RS60
The 5S strain differs from Pseudomonas vesicularis in nitrate reducibility and colony tone. Further, since the mycological properties differ from any other standard species of Pseudomonas bacteria, the RS605S strain was determined to be a new strain belonging to the genus Pseudomonas.
【００６５】（実験方法）培地を下記表６のものに代え
た以外は、実施例１と同様に行った。(Experimental Method) The same procedure as in Example 1 was carried out except that the medium shown in Table 6 was changed.
【００６６】[0066]
【表６】 [Table 6]
【００６７】（結果）試験区のプレートには培養４日
で、直径１ｍｍ程度のコロニーが形成され、１週間後に
は、直径２ｍｍ程度のコロニーにまで成長し、ポリビニ
ルアルコール資化が認められた。一方、対照区は培養２
週間経過してもコロニー形成は、全く認められなかっ
た。このことから本菌は、ポリビニルアルコールを唯一
の炭素源とした寒天培地においては、過酸化水素分解力
のある酵素を添加することによって、初めてポリビニル
アルコールを資化できることが判った。(Results) Colonies with a diameter of about 1 mm were formed on the plate of the test section after 4 days of culture, and after one week, colonies with a diameter of about 2 mm were grown, and polyvinyl alcohol assimilation was observed. On the other hand, the control section is culture 2
No colony formation was observed even after a lapse of weeks. From this result, it was found that the bacterium can assimilate polyvinyl alcohol for the first time in an agar medium containing polyvinyl alcohol as the only carbon source by adding an enzyme capable of decomposing hydrogen peroxide.
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.6 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ｃ１２Ｒ 1:38） (Ｃ１２Ｎ 1/38 Ｃ１２Ｒ 1:01） (Ｃ１２Ｎ 1/20 Ｃ１２Ｒ 1:38） (Ｃ１２Ｎ 1/20 Ｃ１２Ｒ 1:01） (72)発明者 川畑 悟郎 滋賀県大津市関津４丁目５番１号 洛東化 成工業株式会社内─────────────────────────────────────────────────── ─── Continuation of the front page (51) Int.Cl. 6 Identification code Internal reference number FI Technical display location C12R 1:38) (C12N 1/38 C12R 1:01) (C12N 1/20 C12R 1:38) (C12N 1/20 C12R 1:01) (72) Inventor Goro Kawabata 4-5-1 Kanzu, Otsu City, Shiga Prefecture Rakuto Kasei Kogyo Co., Ltd.
Claims (9)
添加することを特徴とする微生物の培養方法。1. A method for culturing a microorganism, which comprises adding an enzyme having a hydrogen peroxide decomposing ability to a medium.
ーゼ又はペロキシダーゼである請求項１に記載の微生物
の培養方法。2. The method for culturing a microorganism according to claim 1, wherein the enzyme having a hydrogen peroxide decomposing ability is catalase or peroxidase.
する微生物及び過酸化水素分解力を有する酵素からなる
組成物。3. A composition comprising a specific organic compound, a microorganism degrading the organic compound, and an enzyme capable of decomposing hydrogen peroxide.
ルである請求項３に記載の組成物。4. The composition according to claim 3, wherein the specific organic compound is polyvinyl alcohol.
ーゼ又はペロキシダーゼである請求項４に記載の組成
物。5. The composition according to claim 4, wherein the enzyme capable of decomposing hydrogen peroxide is catalase or peroxidase.
示す微生物の培養菌体又は培養菌体成分を、過酸化水素
分解力を有する酵素の存在下で、該有機化合物に作用さ
せることを特徴とする該有機化合物の分解方法。6. A method of causing a cultured bacterial cell or a cultured bacterial cell component of a microorganism exhibiting an oxidizing ability or assimilating ability of a specific organic compound to act on the organic compound in the presence of an enzyme capable of decomposing hydrogen peroxide. A method for decomposing the organic compound, comprising:
ルである請求項６に記載の分解方法。7. The decomposition method according to claim 6, wherein the specific organic compound is polyvinyl alcohol.
のポリビニルアルコール資化菌。8. An acceptance number "FERM P-14773"
Polyvinyl alcohol utilizing bacteria.
のポリビニルアルコール資化菌。9. An accession number "FERM P-14857"
Polyvinyl alcohol utilizing bacteria.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP7071549A JPH08275773A (en) | 1995-03-29 | 1995-03-29 | Microorganism and its culture and treatment of hardly decomposable substance utilizing the same microorganism |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP7071549A JPH08275773A (en) | 1995-03-29 | 1995-03-29 | Microorganism and its culture and treatment of hardly decomposable substance utilizing the same microorganism |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH08275773A true JPH08275773A (en) | 1996-10-22 |
Family
ID=13463934
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP7071549A Pending JPH08275773A (en) | 1995-03-29 | 1995-03-29 | Microorganism and its culture and treatment of hardly decomposable substance utilizing the same microorganism |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH08275773A (en) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2006500940A (en) * | 2002-10-01 | 2006-01-12 | メティス バイオテクノロジーズ | Method for detecting and counting microorganisms in a sample |
| JP2012245497A (en) * | 2011-05-31 | 2012-12-13 | Miki Riken Kogyo Kk | Method and apparatus for treating wastewater |
| JP2013116959A (en) * | 2011-12-02 | 2013-06-13 | Osaka Municipal Technical Research Institute | Method of removing polyvinyl alcohol from cultural properties |
-
1995
- 1995-03-29 JP JP7071549A patent/JPH08275773A/en active Pending
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2006500940A (en) * | 2002-10-01 | 2006-01-12 | メティス バイオテクノロジーズ | Method for detecting and counting microorganisms in a sample |
| US8883441B2 (en) | 2002-10-01 | 2014-11-11 | Metis Biotechnologies | Method for detecting and counting micro-organisms in a sample |
| JP2012245497A (en) * | 2011-05-31 | 2012-12-13 | Miki Riken Kogyo Kk | Method and apparatus for treating wastewater |
| JP2013116959A (en) * | 2011-12-02 | 2013-06-13 | Osaka Municipal Technical Research Institute | Method of removing polyvinyl alcohol from cultural properties |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Butlin et al. | The isolation and cultivation of sulphate-reducing bacteria | |
| EP0714858B1 (en) | Microorganism and process for degrading at least one of aromatic componds and haloorganic compounds using microorganism, and process for remedying environment | |
| US5807736A (en) | Method for biodegradation of aromatic and chlorinated compounds using microorganism strain FERM BP-5102 | |
| JP2004248618A (en) | Bacterial group symbiotically living with fungus used for treating organic material and its application | |
| JP2001037469A (en) | Biodegradation of epichlorohydrin | |
| KR20070077149A (en) | Novel bacillus cereus enb-02 strain having foodwaste decompositing capability and microbial agent | |
| JP2787015B2 (en) | Fat-and-assimilating bacteria and method of treating fat and oil using the same | |
| JPH08275773A (en) | Microorganism and its culture and treatment of hardly decomposable substance utilizing the same microorganism | |
| JP2002301494A (en) | Activated sludge and wastewater disposal method | |
| RU2502569C1 (en) | Method of removing hydrocarbon contaminants from soils | |
| JP3866468B2 (en) | Degradation method of polylactic acid | |
| JP3154349B2 (en) | Microorganisms with Skatole Degradability and Microbial Degradation of Skatole | |
| JPH09308494A (en) | Production of lactic acid | |
| JP3547105B2 (en) | New microorganism | |
| JPH05304947A (en) | Bacterium having skatole decomposing ability and microbial method for decomposing skatole | |
| JP2006501810A (en) | Pseudomonas genus FK916 producing organic matter degrading enzyme and method for treating organic waste using the same | |
| KR100292879B1 (en) | Microorganism composition for treating the livestock dung and method for treating the livestock dung using the same | |
| JPS5925596B2 (en) | Oxidative decomposition method of dimethyl phosphate using microorganisms | |
| JP3212904B2 (en) | Organic wastewater treatment method | |
| JPH02307599A (en) | Anaerobic digestion | |
| JPH0871587A (en) | Treatment of waste water | |
| JPS589672B2 (en) | Biseibutsunobayouhouhou | |
| JPH0367581A (en) | Phenol assimilating bacterium | |
| JP2640630B2 (en) | Decomposition method of aliphatic polycarbonate resin | |
| JP3022513B1 (en) | Pitch control method using microorganisms to prevent pulp brightness reduction |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20050119 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20050322 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821 Effective date: 20050322 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20070314 |
|
| A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20070704 |