JPH08217620A - メラニン生成抑制剤及び皮膚化粧料 - Google Patents
メラニン生成抑制剤及び皮膚化粧料Info
- Publication number
- JPH08217620A JPH08217620A JP7026718A JP2671895A JPH08217620A JP H08217620 A JPH08217620 A JP H08217620A JP 7026718 A JP7026718 A JP 7026718A JP 2671895 A JP2671895 A JP 2671895A JP H08217620 A JPH08217620 A JP H08217620A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- echinomycin
- cells
- melanin
- prepared
- skin cosmetic
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- Pending
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- Cosmetics (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
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Abstract
(57)【要約】
【構成】 エチノマイシンを有効成分とするメラニン生
成抑制剤。 【効果】 優れたメラニン生成抑制作用を示し、皮膚化
粧料成分としても有用である。
成抑制剤。 【効果】 優れたメラニン生成抑制作用を示し、皮膚化
粧料成分としても有用である。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明はメラニン生成抑制剤及び
それを含有する皮膚化粧料に関する。
それを含有する皮膚化粧料に関する。
【０００２】
【従来の技術及び発明が解決しようとする課題】メラニ
ンは、通常皮膚に存在し、紫外線による影響から身体を
保護するという重要な役割を担う医学上並びに美容上重
要な因子である。
ンは、通常皮膚に存在し、紫外線による影響から身体を
保護するという重要な役割を担う医学上並びに美容上重
要な因子である。
【０００３】メラニンの合成は、皮膚組織中の色素細胞
内において、チロシナーゼの作用により、チロシンがド
ーパ、次いでドーパキノンに変化し、５，６−ジヒドロ
キシインドール等を経てなされるものといわれている。
メラニンが過剰に合成された場合には色黒を呈し、一
方、メラニンの皮膚上での不均一分布はシミ、ソバカス
等を形成するため、いずれも美容上の大きな問題となっ
ている。このシミ、ソバカス等の色素沈着は、紫外線照
射によって増悪するものである。この紫外線照射によっ
て誘導される色素細胞内でのメラニン生成の促進には、
メラニン細胞刺激ホルモン（α−ＭＳＨ）が深くかかわ
っている。
内において、チロシナーゼの作用により、チロシンがド
ーパ、次いでドーパキノンに変化し、５，６−ジヒドロ
キシインドール等を経てなされるものといわれている。
メラニンが過剰に合成された場合には色黒を呈し、一
方、メラニンの皮膚上での不均一分布はシミ、ソバカス
等を形成するため、いずれも美容上の大きな問題となっ
ている。このシミ、ソバカス等の色素沈着は、紫外線照
射によって増悪するものである。この紫外線照射によっ
て誘導される色素細胞内でのメラニン生成の促進には、
メラニン細胞刺激ホルモン（α−ＭＳＨ）が深くかかわ
っている。
【０００４】従来、メラニン生成抑制物質としてチロシ
ナーゼ活性を阻害する物質の探索が主として行われ、チ
ロシナーゼ活性の阻害物質としてアルブチン（特開昭６
０−５６９１２号公報、特開昭６１−２０７３１６号公
報等）、コウジ酸及びその誘導体（特開昭５６−７７７
６号公報、特開昭５６−７７２７２号公報、特開昭５９
−１２２４８５号公報、特開昭６０−２３３０７１号公
報等）、ビタミンＣとその誘導体（特開昭５６−１３５
４１１号公報、特開昭６０−２３７０８３号公報、特開
昭６１−２８６３９７号公報）、システイン（特開昭６
１−２３９０１７号公報）、グルタチオン（特開昭６１
−１８９２９６号公報）、その他天然物由来のものとし
て、セリ科植物抽出液（特開昭５３−８８３３３号公
報）をはじめとして、多数の植物抽出液などが開示され
ている。最近、素本らはＬａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ
ｈｅｌｖｅｔｉｃｕｓ ＪＣＭ１１２０の培養上清中の
分子量４５６の環状ペプチドにチロシナーゼ阻害活性が
あることを見出した（１９９３年度日本農芸化学会
誌）。さらにはチロシナーゼそのものの生成を抑制し、
メラニン生成抑制作用を示す物質として有機酸及びその
塩類（特開平２−１９３９１７号公報、特開平２−１９
３９１８号公報、特開平３−１０６８１０号公報）が開
示されている。
ナーゼ活性を阻害する物質の探索が主として行われ、チ
ロシナーゼ活性の阻害物質としてアルブチン（特開昭６
０−５６９１２号公報、特開昭６１−２０７３１６号公
報等）、コウジ酸及びその誘導体（特開昭５６−７７７
６号公報、特開昭５６−７７２７２号公報、特開昭５９
−１２２４８５号公報、特開昭６０−２３３０７１号公
報等）、ビタミンＣとその誘導体（特開昭５６−１３５
４１１号公報、特開昭６０−２３７０８３号公報、特開
昭６１−２８６３９７号公報）、システイン（特開昭６
１−２３９０１７号公報）、グルタチオン（特開昭６１
−１８９２９６号公報）、その他天然物由来のものとし
て、セリ科植物抽出液（特開昭５３−８８３３３号公
報）をはじめとして、多数の植物抽出液などが開示され
ている。最近、素本らはＬａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ
ｈｅｌｖｅｔｉｃｕｓ ＪＣＭ１１２０の培養上清中の
分子量４５６の環状ペプチドにチロシナーゼ阻害活性が
あることを見出した（１９９３年度日本農芸化学会
誌）。さらにはチロシナーゼそのものの生成を抑制し、
メラニン生成抑制作用を示す物質として有機酸及びその
塩類（特開平２−１９３９１７号公報、特開平２−１９
３９１８号公報、特開平３−１０６８１０号公報）が開
示されている。
【０００５】しかし、これら従来のメラニン生成抑制剤
は、チロシナーゼ阻害活性が高いにも関わらず、メラニ
ン生成細胞でのメラニン生成抑制効果が十分でないもの
がある。
は、チロシナーゼ阻害活性が高いにも関わらず、メラニ
ン生成細胞でのメラニン生成抑制効果が十分でないもの
がある。
【０００６】そこで、優れたメラニン生成抑制作用を安
定して示す物質の開発が望まれていた。
定して示す物質の開発が望まれていた。
【０００７】
【課題を解決するための手段】本発明者は、かかる実情
に鑑み鋭意検討した結果、キノサリン系抗生物質の一種
であるエチノマイシンが極めて低濃度で優れたメラニン
生成抑制作用を示すことを見い出し、本発明を完成する
に至った。
に鑑み鋭意検討した結果、キノサリン系抗生物質の一種
であるエチノマイシンが極めて低濃度で優れたメラニン
生成抑制作用を示すことを見い出し、本発明を完成する
に至った。
【０００８】すなわち、本発明は、エチノマイシンを有
効成分とするメラニン生成抑制剤を提供するものであ
る。
効成分とするメラニン生成抑制剤を提供するものであ
る。
【０００９】さらに、本発明はエチノマイシンを含有す
る皮膚化粧料を提供するものである。
る皮膚化粧料を提供するものである。
【００１０】本発明に使用されるエチノマイシンは、ス
トレプトミセス属エチナタス（ｅｃｈｉｎａｔｕｓ）か
ら見い出され、Ｋｅｌｌｅｒ−Ｓｃｈｉｅｒｌｅｉｎ．
Ｗ．ら（Ｈｅｌｖ．Ｃｈｉｍ．Ａｃｔａ ４２，３０５
−３２２，１９５９）及びＡｎｎｅ Ｄｅｌｌら（Ｊ．
ｏｆ ｔｈｅ Ａｍｅｒｉｃａｎ ＣｈｅｍｉｃａｌＳ
ｏｃｉｅｔｙ ９７：９ ２４９７−２５０２，１９７
５）によって下記式で表される構造を有することが明ら
かにされた。以来エチノマイシンが二重鎖ＤＮＡの５′
−ＣｐＧ−３′に結合し、ＤＮＡ及びＲＮＡ合成を阻害
する性質を有していることが明らかにされている。ま
た、現在種々の癌に対する抗癌剤として臨床試験が実施
されている。
トレプトミセス属エチナタス（ｅｃｈｉｎａｔｕｓ）か
ら見い出され、Ｋｅｌｌｅｒ−Ｓｃｈｉｅｒｌｅｉｎ．
Ｗ．ら（Ｈｅｌｖ．Ｃｈｉｍ．Ａｃｔａ ４２，３０５
−３２２，１９５９）及びＡｎｎｅ Ｄｅｌｌら（Ｊ．
ｏｆ ｔｈｅ Ａｍｅｒｉｃａｎ ＣｈｅｍｉｃａｌＳ
ｏｃｉｅｔｙ ９７：９ ２４９７−２５０２，１９７
５）によって下記式で表される構造を有することが明ら
かにされた。以来エチノマイシンが二重鎖ＤＮＡの５′
−ＣｐＧ−３′に結合し、ＤＮＡ及びＲＮＡ合成を阻害
する性質を有していることが明らかにされている。ま
た、現在種々の癌に対する抗癌剤として臨床試験が実施
されている。
【００１１】
【化１】
【００１２】本発明のエチノマイシンは、例えば放線菌
の培養抽出液からＢ１６マウスメラノーマ細胞でのメラ
ニン生成抑制活性を指標として精製単離することにより
得ることができ、また、かかるエチノマイシンは市販の
ものも用いることができる。
の培養抽出液からＢ１６マウスメラノーマ細胞でのメラ
ニン生成抑制活性を指標として精製単離することにより
得ることができ、また、かかるエチノマイシンは市販の
ものも用いることができる。
【００１３】本発明のメラニン生成抑制剤は、エチノマ
イシンに本発明の効果を損なわない範囲で任意の成分を
添加し、常法に従い調製することができる。
イシンに本発明の効果を損なわない範囲で任意の成分を
添加し、常法に従い調製することができる。
【００１４】また、上記エチノマイシンを種々の化粧料
用基剤に配合すれば、そのメラニン生成抑制作用の故
に、美白を目的とする皮膚化粧料を得ることができる。
本発明化粧料へのエチノマイシンの配合量は、化粧料の
形態等によって異なるが、１０ -7〜１０-5重量％、特に
１０-6〜５×１０-6重量％配合することが好ましい。
用基剤に配合すれば、そのメラニン生成抑制作用の故
に、美白を目的とする皮膚化粧料を得ることができる。
本発明化粧料へのエチノマイシンの配合量は、化粧料の
形態等によって異なるが、１０ -7〜１０-5重量％、特に
１０-6〜５×１０-6重量％配合することが好ましい。
【００１５】本発明の皮膚化粧料には、通常の化粧料、
医薬部外品、医薬品等に用いられる各種任意成分、例え
ば油剤、保湿剤、増粘剤、防腐剤、乳化剤、顔料、粉
体、pH調整剤、薬効成分、紫外線吸収剤、抗酸化剤、香
料等を適宜配合することができる。
医薬部外品、医薬品等に用いられる各種任意成分、例え
ば油剤、保湿剤、増粘剤、防腐剤、乳化剤、顔料、粉
体、pH調整剤、薬効成分、紫外線吸収剤、抗酸化剤、香
料等を適宜配合することができる。
【００１６】本発明の皮膚化粧料は常法に従って製造す
ることができる。また、本発明の皮膚化粧料は、一般皮
膚化粧料に限定されるものではなく、医薬部外品、外用
医薬品等を包含するものであり、その剤型もクリーム、
乳液、化粧水、ファンデーション、パック、ローション
状、ゲル状、溶液状、スティック状等、その目的に応じ
て任意に選択することができる。
ることができる。また、本発明の皮膚化粧料は、一般皮
膚化粧料に限定されるものではなく、医薬部外品、外用
医薬品等を包含するものであり、その剤型もクリーム、
乳液、化粧水、ファンデーション、パック、ローション
状、ゲル状、溶液状、スティック状等、その目的に応じ
て任意に選択することができる。
【００１７】
【実施例】以下に本発明を実施例により更に具体的に説
明するが、これは単に例示であって本発明を制限するも
のではない。
明するが、これは単に例示であって本発明を制限するも
のではない。
【００１８】実施例１（メラニン生成抑制活性の測定） エチノマイシンのメラニン生成抑制活性をＢ１６マウス
メラノーマ細胞を用いて測定した。Ｂ１６マウスメラノ
ーマ細胞を９６穴プレートを用いて１０％ＦＣＳを含む
ＤＭＥＭ培地中に１ウェル８００個播種し、３７℃４時
間培養し細胞を付着させた。その後培地を除去し、α−
ＭＳＨ（終濃度０．２μＭ）と各種濃度のエチノマイシ
ンを加えた培地中で３７℃、４〜５日間培養した。な
お、細胞培養は３７℃のＣＯ2インキュベーター中で、
５％ＣＯ2−９５％空気の条件下で行った。生細胞数は
ＭＴＴ法（ＣＨＥＭＩＣＯＮ ＩＮＴＥＲＮＡＴＩＯＮ
ＡＬ ＩＮＣ．資料 Ｃｏｌｏｒｉｍｅｔｒｉｃ（ＭＴ
Ｔ）Ａｓｓａｙ ｆｏｒ ＣｅｌｌＳｕｒｖｉｖａｌ
ａｎｄ Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ）に従って、オー
トリーダーで６３０nmをバックに５７０nmでの吸光度を
測定し、生細胞数を表す相対値とした。メラニン生成量
は細胞を０．２Ｎ ＮａＯＨに溶解し４９０nmでの吸光
度をオートリーダーで測定しその値をメラニン生成量を
表す相対値とした。生細胞数のメラニン生成量は下記式
で示される。
メラノーマ細胞を用いて測定した。Ｂ１６マウスメラノ
ーマ細胞を９６穴プレートを用いて１０％ＦＣＳを含む
ＤＭＥＭ培地中に１ウェル８００個播種し、３７℃４時
間培養し細胞を付着させた。その後培地を除去し、α−
ＭＳＨ（終濃度０．２μＭ）と各種濃度のエチノマイシ
ンを加えた培地中で３７℃、４〜５日間培養した。な
お、細胞培養は３７℃のＣＯ2インキュベーター中で、
５％ＣＯ2−９５％空気の条件下で行った。生細胞数は
ＭＴＴ法（ＣＨＥＭＩＣＯＮ ＩＮＴＥＲＮＡＴＩＯＮ
ＡＬ ＩＮＣ．資料 Ｃｏｌｏｒｉｍｅｔｒｉｃ（ＭＴ
Ｔ）Ａｓｓａｙ ｆｏｒ ＣｅｌｌＳｕｒｖｉｖａｌ
ａｎｄ Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ）に従って、オー
トリーダーで６３０nmをバックに５７０nmでの吸光度を
測定し、生細胞数を表す相対値とした。メラニン生成量
は細胞を０．２Ｎ ＮａＯＨに溶解し４９０nmでの吸光
度をオートリーダーで測定しその値をメラニン生成量を
表す相対値とした。生細胞数のメラニン生成量は下記式
で示される。
【００１９】
【数１】
【００２０】図１に、エチノマイシンの濃度に対する生
細胞当りのメラニン生成量を示す。試料濃度の増加に従
いメラニン生成量が著しく減少していることがわかる。
細胞当りのメラニン生成量を示す。試料濃度の増加に従
いメラニン生成量が著しく減少していることがわかる。
【００２１】実施例２（Ｂ１６マウスメラノーマ細胞の
白色化試験） 表１に示す濃度のエチノマイシンをそれぞれ調製し、試
料として供した。
白色化試験） 表１に示す濃度のエチノマイシンをそれぞれ調製し、試
料として供した。
【００２２】Ｂ１６マウスメラノーマ細胞を６ウエルプ
レートの各ウエルに１．０×１０4個（約１．１×１０3
個／cm2）播種し、培地（１０％ＦＣＳを含むＤＭＥＭ
培地）中で３７℃、５％ＣＯ2−９５％空気中、４時間
培養し細胞をウエルに付着させた。その後、培地を除去
し、各濃度の上記試料のエチノマイシンを含むα−ＭＳ
Ｈ含有（終濃度０．２μＭ）培地で５日間培養を行っ
た。培養は、１試料１濃度につき３ウエルを使用して行
った。１ウェル当たりの培地量は２mlとした。培養５日
目に細胞をＰＢＳで洗浄し、０．１２５％トリプシン液
で細胞を剥離し、その一部についてトリパンブルー染色
後の生細胞数を測定した。残りの細胞を遠心分離により
ガラス管に回収し、細胞の色調を肉眼的に観察し、細胞
の白色化度を次の５段階で評価した。＋は白色度を示
す。４＋：白色、３＋：白色〜灰色、２＋：灰色、１＋
灰色〜黒色、−：黒色。その後細胞を０．２Ｎ ＮａＯ
Ｈ（細胞数によって０．５〜１．０ml使用）に溶解し、
４７５nmでの吸光度を測定した。別にメラニン溶液で作
成した検量線に基づき細胞に含まれる総メラニン量を求
め、さらに細胞当たりのメラニン量を算出した。結果を
表１に示す。
レートの各ウエルに１．０×１０4個（約１．１×１０3
個／cm2）播種し、培地（１０％ＦＣＳを含むＤＭＥＭ
培地）中で３７℃、５％ＣＯ2−９５％空気中、４時間
培養し細胞をウエルに付着させた。その後、培地を除去
し、各濃度の上記試料のエチノマイシンを含むα−ＭＳ
Ｈ含有（終濃度０．２μＭ）培地で５日間培養を行っ
た。培養は、１試料１濃度につき３ウエルを使用して行
った。１ウェル当たりの培地量は２mlとした。培養５日
目に細胞をＰＢＳで洗浄し、０．１２５％トリプシン液
で細胞を剥離し、その一部についてトリパンブルー染色
後の生細胞数を測定した。残りの細胞を遠心分離により
ガラス管に回収し、細胞の色調を肉眼的に観察し、細胞
の白色化度を次の５段階で評価した。＋は白色度を示
す。４＋：白色、３＋：白色〜灰色、２＋：灰色、１＋
灰色〜黒色、−：黒色。その後細胞を０．２Ｎ ＮａＯ
Ｈ（細胞数によって０．５〜１．０ml使用）に溶解し、
４７５nmでの吸光度を測定した。別にメラニン溶液で作
成した検量線に基づき細胞に含まれる総メラニン量を求
め、さらに細胞当たりのメラニン量を算出した。結果を
表１に示す。
【００２３】
【表１】
【００２４】表１から明らかなように、細胞増殖を抑制
しない試料添加濃度において細胞当りのメラニン量の低
下及び細胞の白色化が認められた。
しない試料添加濃度において細胞当りのメラニン量の低
下及び細胞の白色化が認められた。
【００２５】比較例１（エチノマイシンとアルブチンと
のメラニン生成抑制活性の比較） エチノマイシンの代わりにアルブチンを用いた以外は実
施例１と同様の方法に従いアルブチンのメラニン生成抑
制活性を評価した。結果を図２に示す。
のメラニン生成抑制活性の比較） エチノマイシンの代わりにアルブチンを用いた以外は実
施例１と同様の方法に従いアルブチンのメラニン生成抑
制活性を評価した。結果を図２に示す。
【００２６】図２に示されるように、本試験方法では細
胞当たりのメラニン量を半分に減少させるために必要な
試料濃度はアルブチンでは９．５２μｇ／ml、エチノマ
イシンでは０．２５ｎｇ／mlであり、本精製単離物での
５０％阻害濃度はアルブチンの約４万分の１であった。
胞当たりのメラニン量を半分に減少させるために必要な
試料濃度はアルブチンでは９．５２μｇ／ml、エチノマ
イシンでは０．２５ｎｇ／mlであり、本精製単離物での
５０％阻害濃度はアルブチンの約４万分の１であった。
【００２７】実施例３（バニシングクリームの調製） エチノマイシン５×１０-6重量％を含むバニシングクリ
ーム（Ｏ／Ｗ型）を下記製造方法により調製した。
ーム（Ｏ／Ｗ型）を下記製造方法により調製した。
【００２８】
【表２】 （組成） （重量％） Ａ液 ステアリン酸 １０．０ ステアリルアルコール ４．０ ステアリン酸ブチル ８．０ モノステアリン酸グリセリン ２．０ エチノマイシン ５．０×１０-6 メチルパラベン ０．０４８ ジブチルハイドロキシトルエン ０．０１ Ｂ液 プロピレングリコール １０．０ グリセリン ４．０ 水酸化カリウム ０．４ 精製水 残量 メチルパラベン ０．１５２
【００２９】（製造方法） １）Ａ液を７０℃の水浴中にて加熱溶解する。 ２）７０℃の水浴中で加温・攪拌しながら先ず精製水に
水酸化カリウム、メチルパラベンの順に加えて十分に溶
解し、そこにプロピレングリコール及びグリセリンを加
える。 ３）Ｂ液を７０℃の水浴中で攪拌しつつ、そこに加熱溶
解したＡ液を徐々に加える。 ４）Ａ液及びＢ液が乳化した後、攪拌した状態で水温を
３０℃程度までゆっくりと下げる。 ５）冷却により安定したバニシングクリームを得る。
水酸化カリウム、メチルパラベンの順に加えて十分に溶
解し、そこにプロピレングリコール及びグリセリンを加
える。 ３）Ｂ液を７０℃の水浴中で攪拌しつつ、そこに加熱溶
解したＡ液を徐々に加える。 ４）Ａ液及びＢ液が乳化した後、攪拌した状態で水温を
３０℃程度までゆっくりと下げる。 ５）冷却により安定したバニシングクリームを得る。
【００３０】
【発明の効果】本発明のメラニン生成抑制剤は、優れた
メラニン生成抑制作用を示すことから皮膚化粧料成分と
して有用なものである。
メラニン生成抑制作用を示すことから皮膚化粧料成分と
して有用なものである。
【図１】メラニンの濃度と生細胞数及び生細胞当りのメ
ラニン生成量との関係を示す図面である。
ラニン生成量との関係を示す図面である。
【図２】アルブチンの濃度と生細胞数及び生細胞当りの
メラニン生成量との関係を示す図面である。
メラニン生成量との関係を示す図面である。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 吉山 良博 神奈川県小田原市成田540番地 明治乳業 株式会社ヘルスサイエンス研究所内
Claims (3)
- 【請求項１】 エチノマイシンを有効成分とするメラニ
ン生成抑制剤。 - 【請求項２】 エチノマイシンを含有する皮膚化粧料。
- 【請求項３】 エチノマイシンを化粧料中１０-7〜１０
-5重量％含有する請求項２記載の皮膚化粧料。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP7026718A JPH08217620A (ja) | 1995-02-15 | 1995-02-15 | メラニン生成抑制剤及び皮膚化粧料 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP7026718A JPH08217620A (ja) | 1995-02-15 | 1995-02-15 | メラニン生成抑制剤及び皮膚化粧料 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH08217620A true JPH08217620A (ja) | 1996-08-27 |
Family
ID=12201133
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP7026718A Pending JPH08217620A (ja) | 1995-02-15 | 1995-02-15 | メラニン生成抑制剤及び皮膚化粧料 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH08217620A (ja) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP1007727A4 (en) * | 1996-07-09 | 2000-08-23 | Diversa Corp | METHOD FOR MIXING DNA BY MEANS OF POLYNUCLEOTIDES WHICH ARE OBTAINED BY THE TERMINATION OR INTERRUPTION OF A SYNTHESIS OR REPRODUCTION PROCESS |
| US6489145B1 (en) | 1996-07-09 | 2002-12-03 | Diversa Corporation | Method of DNA shuffling |
| CN113827543A (zh) * | 2021-10-29 | 2021-12-24 | 新疆师范大学 | 一种西唐氏链霉菌在抑制黑色素合成中的应用 |
-
1995
- 1995-02-15 JP JP7026718A patent/JPH08217620A/ja active Pending
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP1007727A4 (en) * | 1996-07-09 | 2000-08-23 | Diversa Corp | METHOD FOR MIXING DNA BY MEANS OF POLYNUCLEOTIDES WHICH ARE OBTAINED BY THE TERMINATION OR INTERRUPTION OF A SYNTHESIS OR REPRODUCTION PROCESS |
| US6489145B1 (en) | 1996-07-09 | 2002-12-03 | Diversa Corporation | Method of DNA shuffling |
| CN113827543A (zh) * | 2021-10-29 | 2021-12-24 | 新疆师范大学 | 一种西唐氏链霉菌在抑制黑色素合成中的应用 |
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