JPH0782010B2 - Sheath liquid for particle analyzer - Google Patents

Sheath liquid for particle analyzer

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JPH0782010B2
JPH0782010B2 JP62261386A JP26138687A JPH0782010B2 JP H0782010 B2 JPH0782010 B2 JP H0782010B2 JP 62261386 A JP62261386 A JP 62261386A JP 26138687 A JP26138687 A JP 26138687A JP H0782010 B2 JPH0782010 B2 JP H0782010B2
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sheath liquid
particle analyzer
surfactant
osmotic pressure
liquid
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勝 米村
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東亜医用電子株式会社
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Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は、臨床検査分野等において血球等の粒子計数お
よび分類を目的とした粒子分析装置に使用される試薬
(シース液)、さらに詳しくは緩衝剤、浸透圧調整用添
加剤および水溶性界面活性剤を含有する水溶液からなる
シース液に関する。
DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION [Industrial field of application] The present invention relates to a reagent (sheath liquid) used in a particle analyzer for the purpose of counting and classifying particles such as blood cells in the field of clinical examination, and more specifically, The present invention relates to a sheath liquid composed of an aqueous solution containing a buffer, an osmotic pressure adjusting additive, and a water-soluble surfactant.

〔従来の技術〕[Conventional technology]

血液中に存在する血球は白血球、赤血球および血小板か
らなり、特に赤血球の測定においては赤血球の個数のみ
ならず、赤血球の大小を計数することによって、先天的
異常や後天的異常を判定する材料を得ることができる。
近年、この血球計数の分野においてはシースフローシス
テムを用いた機器が出現し、血球計数の自動化・高速化
が進んでいる。シースフローシステムとは細管中を最適
流量・最適流速で粒子懸濁試料を通過させ、細管中の検
出部を粒子が通過するとき発生する電気的あるいは光学
的パルスを検出することによって粒子の計数を行う方法
である。このシースフローシステムでは粒子を一列に並
べて細管中を通過させる必要から、粒子懸濁試料を「さ
や状」に包んで流す。この「さや状」に包む液をシース
液と呼んでいる。
Blood cells present in blood consist of white blood cells, red blood cells, and platelets. Especially in the measurement of red blood cells, not only the number of red blood cells but also the size of red blood cells is counted to obtain a material for determining a congenital abnormality or an acquired abnormality. be able to.
In recent years, a device using a sheath flow system has appeared in the field of blood cell counting, and automation and speedup of blood cell counting have been advanced. The sheath flow system allows particle suspension samples to pass through a capillary at an optimum flow rate and flow rate, and counts particles by detecting electrical or optical pulses generated when particles pass through the detection section in the capillary. Is the way to do it. In this sheath flow system, it is necessary to arrange the particles in a line and pass through the capillaries. Therefore, the particle suspension sample is wrapped in a "sheath" and then flowed. The liquid wrapped in this "pod" is called sheath liquid.

シースフローシステムを利用した装置は厳密に調製・構
成されねばならず、そのため目的に応じて種々の材質か
らなる部品が使用されている。しかしながら種々の部品
のある材質のものはそれ自体が単独で、あるいは種々の
材質の相互作用によって水溶液中に含有される空気を部
品表面に気泡として発生・付着させ、さらに大きな気泡
となるまで保持する。発生した気泡がシース液の流れに
のってフローセル(細管)を通過すると、正常な流れを
乱し、したがって粒子検出における異常の原因となる。
また誤って気泡が粒子として検知されることもある。
A device using the sheath flow system must be strictly prepared and constructed, and therefore parts made of various materials are used according to the purpose. However, for materials with various parts, the air contained in the aqueous solution is generated and adhered as air bubbles to the surface of parts either by itself or by the interaction of various materials, and held until larger bubbles are formed. . When the generated bubbles follow the flow of the sheath liquid and pass through the flow cell (capillary tube), the normal flow is disturbed, which causes an abnormality in particle detection.
In addition, bubbles may be erroneously detected as particles.

一方、シース液は前述のように粒子懸濁試料を包むもの
であり、粒子を懸濁させる希釈液を介して粒子に接す
る。希釈液自体は粒子を保護する機能を有するが、この
保護機能がシース液の組成物によって妨害されると、粒
子の変形・破壊がひき起される。一般に、鉄欠乏性の貧
血の場合には、赤血球粒子の小球化が起ることが観察さ
れ、悪性貧血の場合には、赤血球粒子の大球化が起るこ
とが観察されている。したがって赤血球粒子の大きさを
正確に測定することは、病気の診断上重要である。とこ
ろが、一般に赤血球粒子では液の浸透圧等が低下した場
合には、赤血球粒子の膨化(大球化)が起り、浸透圧等
が増大した場合には、赤血球粒子の小球化が起ることが
知られている。したがって浸透圧等が適正に調整されて
いない場合には、赤血球粒子の正確な大きさを測定でき
ないことになる。これらのことはシース液の性能におい
て粒子自体の性質を正しく保持できることが、極めて重
要な要素として要求されることを意味する。したがっ
て、粒子の影響せず、かつ、気泡を発生しないシース液
が必要である。
On the other hand, the sheath liquid encloses the particle suspension sample as described above, and comes into contact with the particles via the diluent for suspending the particles. The diluent itself has a function of protecting the particles, but if this protecting function is hindered by the composition of the sheath liquid, the particles will be deformed or destroyed. In general, it has been observed that in the case of iron deficiency anemia, globulization of red blood cell particles occurs, and in the case of pernicious anemia, globulization of red blood cell particles occurs. Therefore, accurate measurement of red blood cell particle size is important for the diagnosis of diseases. However, in general, when the osmotic pressure of a red blood cell decreases, swelling (globulization) of the red blood cell occurs, and when the osmotic pressure increases, the red blood cell becomes smaller. It has been known. Therefore, if the osmotic pressure and the like are not properly adjusted, the accurate size of red blood cell particles cannot be measured. These means that it is extremely important that the properties of the particles themselves be properly retained in the performance of the sheath liquid. Therefore, a sheath liquid that is not affected by particles and does not generate bubbles is required.

ところで、界面活性剤はその界面活性効果により気泡の
発生を抑えることが知られている。一般に水溶性界面活
性剤は、その特性としてミセル形成臨界濃度(CMC)以
下では、溶液中に「つぶ」を形成し、かつ壜点以上の温
度では、「濁り」を生じることが知られている。粒子分
析装置では「つぶ」および「濁り」は検出異常の原因と
なる。特開昭62−87233号公報には気泡の発生を抑える
ため界面活性剤を添加したシース液を調製することが記
載されている。
By the way, it is known that a surfactant suppresses the generation of bubbles due to its surfactant effect. In general, water-soluble surfactants are known to form "crush" in a solution at a micelle formation critical concentration (CMC) or less, and "turbidity" at a temperature above a bottle point. . In the particle analyzer, "crush" and "turbidity" cause abnormal detection. Japanese Unexamined Patent Publication (Kokai) No. 62-87233 describes the preparation of a sheath liquid containing a surfactant in order to suppress the generation of bubbles.

〔発明が解決しようとする問題点〕[Problems to be solved by the invention]

界面活性剤をシース液に添加することにより、気泡の発
生を抑制することは有用であるが、シース液は蒸留水に
比べはるかに浸透圧が高いため、一般に明示されている
各種界面活性剤の壜点よりかなり低い温度で濁りを生
じ、粒子分析装置においてノイズとして計数されるとい
う問題が生じている。例えば前記公報に界面活性剤とし
て開示されたポリオキシエチレンポリオキシプロピレン
ブロックポリマーのうち、あるものは壜点よりはるかに
低い温度においても目に見えない「濁り」が発生し、粒
子分析装置においてノイズとして検出され、正常な粒子
計数を行えないという不具合が生じている。
Although it is useful to suppress the generation of air bubbles by adding a surfactant to the sheath liquid, the sheath liquid has a much higher osmotic pressure than distilled water, so There is a problem that turbidity occurs at a temperature considerably lower than the bottle point and is counted as noise in the particle analyzer. For example, among the polyoxyethylene polyoxypropylene block polymers disclosed as surfactants in the above-mentioned publication, some of them generate invisible "turbidity" even at a temperature far lower than the bottle point, which causes noise in the particle analyzer. Is detected, and there is a problem that normal particle counting cannot be performed.

本発明者は前記問題点を解決するため鋭意検討した結
果、流体系内において気泡の発生を抑制し、かつ粒子に
影響を与えず、さらには、また、粒子分析装置用シース
液の含有物質として使用した場合において「濁り」を発
生させない水溶性界面活性剤が存在することを見い出
し、本発明に到達したものである。
As a result of intensive studies to solve the above-mentioned problems, the present inventor suppressed the generation of bubbles in the fluid system and did not affect the particles, and further, as a substance contained in the sheath liquid for a particle analyzer. The present invention has been accomplished by finding the presence of a water-soluble surfactant that does not cause "turbidity" when used.

本発明は上記の諸点に鑑みなされたもので、粒子に影響
を与えず、かつ正確に粒子計数を行うのに役立つ粒子分
析装置用シース液の組成物の提供を目的とするものであ
る。
The present invention has been made in view of the above points, and an object thereof is to provide a composition of a sheath liquid for a particle analyzer, which does not affect particles and is useful for performing accurate particle counting.

〔問題点を解決するための手段および作用〕[Means and Actions for Solving Problems]

本発明の粒子分析装置用シース液は、つぎの(a)〜
(d)の4成分、すなわち、 (a) 緩衝剤、 (b) 浸透圧調整用添加剤、 (c) ポリオキシエチレンソルビタンアルキルエステ
ル系界面活性剤、 (ただし、アルキル基の炭素原子数は16個以上であり、
オキシエチレンの付加モル数は15〜40である。) (d) 水、 を含有することを特徴としている。
The sheath liquid for a particle analyzer of the present invention has the following (a)-
4 components of (d), that is, (a) buffer agent, (b) osmotic pressure adjusting additive, (c) polyoxyethylene sorbitan alkyl ester surfactant, (provided that the number of carbon atoms in the alkyl group is 16) More than
The added mole number of oxyethylene is 15 to 40. ) (D) Water is contained.

また本発明の粒子分析装置用シース液の各組成の割合
は、 (a) 緩衝剤:0.01〜3.0wt%、望ましくは0.017〜1.0
wt% (b) 浸透圧調製用添加剤:0.25〜2.5wt%、望ましく
は0.58〜1.12wt% (c) ポリオキシエチレンソルビタンアルキルエステ
ル系界面活性剤:0.01〜1.0wt%、望ましくは0.01〜0.5w
t% (2) 水:93.50〜99.73wt%、望ましくは97.38〜99.3
9wt% である。
The ratio of each composition of the sheath liquid for a particle analyzer of the present invention is as follows: (a) Buffer: 0.01 to 3.0 wt%, desirably 0.017 to 1.0
wt% (b) Additive for adjusting osmotic pressure: 0.25 to 2.5 wt%, preferably 0.58 to 1.12 wt% (c) Polyoxyethylene sorbitan alkyl ester surfactant: 0.01 to 1.0 wt%, preferably 0.01 to 0.5 w
t% (2) Water: 93.50 to 99.73wt%, preferably 97.38 to 99.3
It is 9wt%.

本発明のシース液に有用な緩衝剤はリン酸、炭酸、ホウ
酸、有機酸および/またはそれらの金属塩が含まれ、そ
れらの1つあるいは2つ以上の混合物である。好ましい
緩衝剤濃度は5〜30mMである。緩衝剤はpHを6.0〜8.5、
より好ましくは7.0〜8.5に維持するのに適した組成であ
ることが好ましい。
Buffering agents useful in the sheath fluid of the present invention include phosphoric acid, carbonic acid, boric acid, organic acids and / or their metal salts, one or a mixture of two or more thereof. A preferred buffer concentration is 5-30 mM. The buffer has a pH of 6.0 to 8.5,
More preferably, the composition is suitable for maintaining at 7.0 to 8.5.

本発明のシース液の調製に有用な浸透圧調整用添加剤は
アルカリ金属塩であり、好ましくはNaClおよび/または
KClである。浸透圧調整用添加剤は浸透圧を245〜330mOs
m/kgとなるよう添加する。このときの添加物の濃度は10
0〜150mMである。
The osmotic pressure adjusting additive useful for the preparation of the sheath liquid of the present invention is an alkali metal salt, preferably NaCl and / or
It is KCl. The osmotic pressure adjusting additive has an osmotic pressure of 245 to 330 mOs.
Add so that it becomes m / kg. The concentration of the additive at this time is 10
It is 0 to 150 mM.

本発明に用いることのできる水溶性界面活性剤はオキシ
エチレン、ソルビトールおよび脂肪酸からなる共重合体
である。
The water-soluble surfactant that can be used in the present invention is a copolymer composed of oxyethylene, sorbitol and fatty acid.

オキシエチレン、ソルビトールおよび脂肪酸からなる共
重合体は、一般に「ポリオキシエチレンソルビタンアル
キルエステル」と称されている。本発明が有用とするポ
リオキシエチレンソルビタンアルキルエステル系界面活
性剤は、脂肪酸(アルキル)基の炭素原子が16個以上か
らなり、オキシエチレンの付加モル数(n)が15〜40の
ものであり、特に脂肪酸炭素原子が16個または18個から
なりオキシエチレンの付加モル数が17〜23であるポリオ
キシエチレンソルビタンモノパルミテートまたはポリオ
キシエチレンソルビタンモノオレートが好ましい。脂肪
酸炭素原子が14個以下の場合には、界面活性剤が水に溶
解しにくくなり、界面活性作用も落ちる。またnが15未
満では、界面活性剤が水に溶解しにくくなり、nが40を
越えると赤血球等に対して溶血性を示す。上記界面活性
剤は当業者周知の方法によって製造されているが、当業
者が示す化学構造式は若干異なるので、一例として花王
株式会社が示すレオドールTW−0120(登録商標)の化学
構造式を下記に示す。
The copolymer composed of oxyethylene, sorbitol and fatty acid is generally referred to as "polyoxyethylene sorbitan alkyl ester". The polyoxyethylene sorbitan alkyl ester-based surfactant that is useful in the present invention has a fatty acid (alkyl) group having 16 or more carbon atoms and an addition mole number (n) of oxyethylene of 15 to 40. Particularly preferred is polyoxyethylene sorbitan monopalmitate or polyoxyethylene sorbitan monooleate having 16 or 18 fatty acid carbon atoms and having 17 to 23 added moles of oxyethylene. When the fatty acid carbon atom is 14 or less, the surfactant is less likely to be dissolved in water, and the surfactant effect is reduced. On the other hand, when n is less than 15, the surfactant becomes difficult to dissolve in water, and when n exceeds 40, it exhibits hemolytic properties to red blood cells and the like. The above-mentioned surfactant is manufactured by a method well known to those skilled in the art, but the chemical structural formulas shown by those skilled in the art are slightly different. Therefore, as an example, the chemical structural formula of Leodol TW-0120 (registered trademark) shown by Kao Corporation is shown below. Shown in.

R:炭素原子18個からなる脂肪酸であって不飽和結合1個
を含む。
R: A fatty acid having 18 carbon atoms and containing 1 unsaturated bond.

n:17〜23である。n: 17-23.

ただし、n=n1+n2+n3 ポリオキシエチレンソルビタンモノパルミテートおよび
ポリオキシエチレンソルビタンモノオレートは当業者周
知の方法によって製造され、国内においては日本油脂
(株)、花王(株)、松本油脂(株)、三洋化成工業
(株)、ライオン油脂(株)、第一工業(株)等から市
販されているのでこれらを利用できる。本発明に使用さ
れる界面活性剤のうち、特にポリオキシエチレンソルビ
タンモノパルミテートおよびポリオキシエチレンソルビ
タンモノオレートは、オキシエチレン重合度が約20と低
く、生物分解性の面において優れ、公害防止上の効果が
期待できる。本発明における最も好ましい界面活性剤
は、花王(株)社製のレオドールTW−0120(登録商標)
である。
However, n = n1 + n2 + n3 polyoxyethylene sorbitan monopalmitate and polyoxyethylene sorbitan monooleate are produced by a method well known to those skilled in the art. These are available since they are commercially available from Kasei Kogyo Co., Ltd., Lion Oil & Fat Co., Ltd., Daiichi Kogyo Co., Ltd., etc. Among the surfactants used in the present invention, particularly polyoxyethylene sorbitan monopalmitate and polyoxyethylene sorbitan monooleate have a low degree of oxyethylene polymerization of about 20, which is excellent in terms of biodegradability and is effective in preventing pollution. The effect of can be expected. The most preferred surfactant in the present invention is Leodol TW-0120 (registered trademark) manufactured by Kao Corporation.
Is.

本発明においてシース液に含まれる界面活性剤濃度は0.
1〜5.0g/が好ましく、これらの濃度では、本発明に使
用される界面活性剤は、シース液のpHおよび浸透圧に影
響をおよぼさない。したがって、粒子、特に赤血球の大
球化あるいは小球化等の変形がひき起されることなく、
粒子分析装置内の流体系を湿潤させ、気泡の発生・保持
をかなりの程度阻止することができる。
In the present invention, the concentration of the surfactant contained in the sheath liquid is 0.
1 to 5.0 g / is preferable, and at these concentrations, the surfactant used in the present invention does not affect the pH and osmotic pressure of the sheath liquid. Therefore, the deformation of the particles, especially red blood cells, such as globulization or globulization, is not caused,
The fluid system in the particle analyzer can be moistened and the generation and retention of bubbles can be prevented to a large extent.

本発明のシース液には、防菌剤を含有することもでき
る。適当な防菌剤には2−ピリヂオ−1−オキシドナト
リウム、8−ヒドロキシキノリンおよびその誘導体、イ
ソチアゼノン誘導体が挙げられる。これらの防菌剤の濃
度は0.01〜0.1%容量/容量が好ましく、より好ましく
は0.02〜0.04%容量/容量である。
The sheath liquid of the present invention may also contain an antibacterial agent. Suitable fungicides include sodium 2-pyridio-1-oxide, 8-hydroxyquinoline and its derivatives, isothiazenone derivatives. The concentration of these antibacterial agents is preferably 0.01 to 0.1% volume / volume, and more preferably 0.02 to 0.04% volume / volume.

また本発明においては、組成物の金属イオンの自動酸化
を防止するため、抗酸化剤としキレート剤を添加するこ
ともできる。キレート剤にはo−ベンゼンジスルホン酸
またはそのジナトリウム塩あるいはジカリウム塩、およ
び/またはエチレンジアミン4酢酸またはそのジナトリ
ウム塩あるいはジカリウム塩がある。最も好ましくはエ
チレンジアミン4酢酸ジカリウム(EDTA・2K)であり、
0.2〜0.4g/の濃度で使用することが好ましい。
Further, in the present invention, a chelating agent may be added as an antioxidant in order to prevent autoxidation of metal ions of the composition. The chelating agent includes o-benzenedisulfonic acid or its disodium salt or dipotassium salt, and / or ethylenediaminetetraacetic acid or its disodium salt or dipotassium salt. Most preferred is ethylenediaminetetradipotassium acetate (EDTA / 2K),
It is preferably used at a concentration of 0.2 to 0.4 g /.

既述のように、本発明のシース液は水溶液である。した
がって溶液の残部は水であり、好ましくは脱イオン化し
た水である。
As described above, the sheath liquid of the present invention is an aqueous solution. Therefore, the balance of the solution is water, preferably deionized water.

〔実施例〕〔Example〕

以下、実施例を挙げて本発明をさらに説明する。 Hereinafter, the present invention will be further described with reference to examples.

実施例1 本発明の粒子分析装置用シース液のpH、浸透圧および電
気伝導度を調べるため、下記の組成でシース液を調製し
た。
Example 1 In order to examine the pH, osmotic pressure and electric conductivity of the sheath liquid for particle analyzer of the present invention, a sheath liquid having the following composition was prepared.

組成 NaCl 6.38 g KCl 1.00 g Na2HPO4 0.275 g NaH2PO4・H2O 0.18 g EDTA・2K 0.20 g レオドールTW−0120(登録商標)※1 0.75 g トミサイド−S(登録商標)※2 0.2 ml 脱イオン水 残部 計 1 ※1:界面活性剤(ポリオキシエチレンソルビタンモノオ
レート)、花王(株)社製。
Composition NaCl 6.38 g KCl 1.00 g Na 2 HPO 4 0.275 g NaH 2 PO 4 .H 2 O 0.18 g EDTA.2K 0.20 g Leodol TW-0120 (registered trademark) * 1 0.75 g Tomicide-S (registered trademark) * 2 0.2 ml Deionized water balance 1 * 1: Surfactant (polyoxyethylene sorbitan monooleate), manufactured by Kao Corporation.

※2:防菌剤(2−ピリヂオ−1−オキシドナトリウ
ム)、吉富製薬(株)社製。
* 2: Antibacterial agent (2-pyridio-1-oxide sodium), manufactured by Yoshitomi Pharmaceutical Co., Ltd.

調製したシース液はpH7.20、浸透圧260mOsm/kg、電気伝
導度13.40mS/cmであった。自動血小板計数装置PL−100
(東亜医用電子(株)社製)により、上記シース液を測
定したときの計数値は0であり、調製したシース液にノ
イズの発生はなかった。
The prepared sheath liquid had a pH of 7.20, an osmotic pressure of 260 mOsm / kg, and an electric conductivity of 13.40 mS / cm. Automatic platelet counter PL-100
The count value when the above sheath liquid was measured by (manufactured by Toa Medical Electronics Co., Ltd.) was 0, and no noise was generated in the prepared sheath liquid.

実施例2 本発明による粒子分析装置用シース液が、赤血球に影響
するか否かを調べるため、赤血球を本発明シース液中に
浸漬し、赤血球の大きさの変化を調べた。
Example 2 In order to examine whether or not the sheath liquid for particle analyzer according to the present invention affects red blood cells, red blood cells were immersed in the sheath liquid of the present invention, and changes in the size of red blood cells were examined.

すなわち、抗凝固剤としてEDTAを添加した正常人血(1m
l)に実施例1と同様にして調製したシース液9mlを加
え、撹拌し、遠心分離(3000回転、10分間)した。上澄
を除くことによって血漿成分を除去した後、シース液を
加えて再び1mlとした。以上の操作によって得たシース
液に浸漬された血球と、何も処理しない正常人血(血漿
を含む)との平均赤血球容積(MCV)および赤血球分布
幅(RDW)を比較するため、全自動血球計数装置E−400
0(東亜医用電子(株)社製)を用いて測定を行った。
結果を第1表に示す。
That is, normal human blood (1 m
9 ml of the sheath liquid prepared in the same manner as in Example 1 was added to l), and the mixture was stirred and centrifuged (3,000 rotations, 10 minutes). After removing the plasma component by removing the supernatant, a sheath liquid was added to make 1 ml again. To compare the mean erythrocyte volume (MCV) and erythrocyte distribution width (RDW) of blood cells immersed in the sheath fluid obtained by the above operation and normal human blood (including plasma) that has not been treated, fully automated blood cells Counter E-400
The measurement was performed using 0 (manufactured by Toa Medical Electronics Co., Ltd.).
The results are shown in Table 1.

実施例3 粒子分析装置において、ノイズが発生するか否かを判定
するため、実施例1と全く同様にして調製したシース液
を用いて、温度負荷条件下でブランク計数を行った。温
度条件は35℃および40℃で行い、計数には全自動血球計
数装置E−4000(東亜医用電子(株)社製)を用いた。
対照として下記に示す化学構造および性状をもつ界面活
性剤(ポリオキシエチレンポリオキシプロピレンブロッ
クポリマー)を使用した。
Example 3 In a particle analyzer, in order to determine whether or not noise was generated, a sheath liquid prepared in exactly the same manner as in Example 1 was used to perform blank counting under temperature load conditions. Temperature conditions were 35 ° C. and 40 ° C., and a fully automatic blood cell counter E-4000 (manufactured by Toa Medical Electronics Co., Ltd.) was used for counting.
As a control, a surfactant (polyoxyethylene polyoxypropylene block polymer) having the chemical structure and properties shown below was used.

構造式: HO−(CH2CH2O)−(CH2CH2CH2O)−H n:オキシエチレン鎖、約22 m:オキシプロピレン鎖、約37 名称:ポリオキシエチレンポリオキシプロピレンブロッ
クポリマー(三洋化成(株) PE−75(登録商標)を使
用) 壜点:66〜72℃ 結果を第2表に示す。なおノイズ測定値として、各20回
測定した平均値を示している。
Structural formula: HO- (CH 2 CH 2 O ) n - (CH 2 CH 2 CH 2 O) m -H n: oxyethylene chains, about 22 m: oxypropylene chains, about 37 name: polyoxyethylene polyoxypropylene Block polymer (using PE-75 (registered trademark) of Sanyo Kasei Co., Ltd.) Bottle point: 66 to 72 ° C. The results are shown in Table 2. As the noise measurement value, the average value measured 20 times each is shown.

実施例4 粒子分析装置に使用される各材質の部品と、本発明によ
るシース液との湿潤性および気泡発生抑制力を調べるた
め、実施例1と全く同じ方法で調製したシース液中にテ
フロン、ポリアスタール樹脂、ポリカーボネート樹脂に
より成型された粒子分析装置部品を浸漬し、60℃で1時
間加熱処理した。対照として界面活性剤を添加しないこ
と以外は実施例1と全く同様にして調製したシース液を
使用した。
Example 4 In order to investigate the wettability between the components of each material used in the particle analyzer and the sheath liquid according to the present invention and the bubble generation suppressing power, Teflon was added to the sheath liquid prepared by exactly the same method as in Example 1. A particle analyzer component molded of a polyastral resin or a polycarbonate resin was dipped and heat-treated at 60 ° C. for 1 hour. As a control, a sheath liquid prepared in exactly the same manner as in Example 1 except that no surfactant was added was used.

その結果、対照として用いた界面活性剤無添加のシース
液では、各材質の粒子分析装置部品の表面に多数の気泡
の付着が観察されるとともに、これらの気泡は振盪処理
しても部品表面よりはがれにくかった。しかしながら、
本発明による界面活性剤添加シース液では、気泡そのも
のの発生がないか、または発生しても極めてわずかであ
り、気泡自体の大きさも小さいことが観察された。さら
に粒子分析装置部品表面に発生した気泡は軽度の振盪処
理によっても容易に剥離した。
As a result, with the surfactant-free sheath liquid used as a control, many bubbles were observed to adhere to the surfaces of the particle analyzer parts of each material, and even if these bubbles were shaken, they could be seen from the surface of the parts. It was hard to peel off. However,
It was observed that in the surfactant-added sheath liquid according to the present invention, the bubbles themselves were not generated, or when the bubbles were generated, they were extremely small, and the size of the bubbles themselves was also small. Furthermore, the bubbles generated on the surface of the particle analyzer part were easily peeled off even by a mild shaking treatment.

〔発明の効果〕〔The invention's effect〕

以上説明したように、本発明の粒子分析装置用シース液
は、粒子分析装置内の流体系において、気泡の発生・保
持を抑制し、かつ特に粒子が赤血球である場合には、赤
血球粒子を変形させることなく測定することができる。
さらにシース液の温度が40℃以下においては、シース液
組成物による濁りの発生が防止され、粒子分析装置にお
いてノイズが検出されることがないなどの効果を有して
いる。
As described above, the sheath liquid for particle analysis device of the present invention suppresses the generation and retention of bubbles in the fluid system in the particle analysis device, and deforms red blood cell particles particularly when the particles are red blood cells. It is possible to measure without causing it.
Further, when the temperature of the sheath liquid is 40 ° C. or lower, turbidity due to the sheath liquid composition is prevented, and noise is not detected in the particle analyzer.

Claims (9)

【特許請求の範囲】[Claims] 【請求項1】つぎの(a)〜(d)の4成分、すなわ
ち、 (a) 緩衝剤、 (b) 浸透圧調整用添加剤、 (c) ポリオキシエチレンソルビタンアルキルエステ
ル系界面活性剤、 (ただし、アルキル基の炭素原子数は16個以上であり、
オキシエチレンの付加モル数は15〜40である。) (d) 水、 を含有することを特徴とする粒子分析装置用シース液。
1. The following four components (a) to (d): (a) buffer, (b) osmotic pressure adjusting additive, (c) polyoxyethylene sorbitan alkyl ester surfactant, (However, the number of carbon atoms in the alkyl group is 16 or more,
The added mole number of oxyethylene is 15 to 40. ) (D) Water, The sheath liquid for particle analyzers, which comprises:
【請求項2】ポリオキシエチレンソルビタンアルキルエ
ステル系界面活性剤のアルキル基の炭素原子数が16また
は18であり、オキシエチレンの付加モル数が17〜23であ
る特許請求の範囲第1項記載の粒子分析装置用シース
液。
2. The polyoxyethylene sorbitan alkyl ester-based surfactant as claimed in claim 1, wherein the alkyl group has 16 or 18 carbon atoms and the added mole number of oxyethylene is 17 to 23. Sheath liquid for particle analyzer.
【請求項3】緩衝剤がリン酸、炭酸、ホウ酸、有機酸お
よびそれらの金属塩からなる群から選ばれる1種または
2種以上の物質である特許請求の範囲第1項または第2
項記載の粒子分析装置用シース液。
3. The buffer according to claim 1, wherein the buffer is one or more substances selected from the group consisting of phosphoric acid, carbonic acid, boric acid, organic acids and metal salts thereof.
A sheath liquid for a particle analyzer according to the item.
【請求項4】浸透圧調整用添加剤がアルカリ金属塩であ
る特許請求の範囲第1項〜第3項のいずれかに記載の粒
子分析装置用シース液。
4. The sheath liquid for a particle analyzer according to any one of claims 1 to 3, wherein the osmotic pressure adjusting additive is an alkali metal salt.
【請求項5】アルカリ金属塩がKClおよび/またはNaCl
である特許請求の範囲第4項記載の粒子分析装置用シー
ス液。
5. The alkali metal salt is KCl and / or NaCl.
The sheath liquid for a particle analyzer according to claim 4, wherein
【請求項6】緩衝剤の濃度が5〜30mMであり、浸透圧調
整用添加剤の濃度が100〜150mMであり、さらに界面活性
剤の量が0.1〜5.0g/である特許請求の範囲第1項〜第
5項のいずれかに記載の粒子分析装置用シース液。
6. The method according to claim 1, wherein the concentration of the buffer is 5 to 30 mM, the concentration of the osmotic pressure adjusting additive is 100 to 150 mM, and the amount of the surfactant is 0.1 to 5.0 g /. The sheath liquid for particle analyzer according to any one of 1 to 5.
【請求項7】液のpHが6.0〜8.5であり、浸透圧が245〜3
30mOsm/kgである特許請求の範囲第1項〜第6項のいず
れかに記載の粒子分析装置用シース液。
7. A liquid having a pH of 6.0 to 8.5 and an osmotic pressure of 245 to 3
The sheath liquid for a particle analyzer according to any one of claims 1 to 6, wherein the sheath liquid is 30 mOsm / kg.
【請求項8】液のpHが7.0〜8.5である特許請求の範囲第
7項記載の粒子分析装置用シース液。
8. The sheath liquid for a particle analyzer according to claim 7, wherein the pH of the liquid is 7.0 to 8.5.
【請求項9】抗酸化剤および/または防菌剤を含有する
特許請求の範囲第1項〜第8項のいずれかに記載の粒子
分析装置用シース液。
9. The sheath liquid for a particle analyzer according to claim 1, which contains an antioxidant and / or an antibacterial agent.
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
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US6225124B1 (en) * 1999-06-02 2001-05-01 Sysmex Corporation Diluting reagent and method compelling time-independent consistency in MCV assay
JP5288970B2 (en) * 2008-09-26 2013-09-11 シスメックス株式会社 Method for measuring mean red blood cell volume using a reagent for diluting blood samples
JP5461642B2 (en) * 2012-09-06 2014-04-02 シスメックス株式会社 A reagent for diluting a blood sample for measuring the average red blood cell volume of a blood sample

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AU587491B2 (en) * 1985-09-06 1989-08-17 Technicon Instruments Corportion Non-lytic sheath composition

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
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US6750060B2 (en) 2002-03-25 2004-06-15 Sysmex Corporation Sheath liquid for particle analyzer

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