JPH076800Y2 - Culture bag - Google Patents

Culture bag

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JPH076800Y2
JPH076800Y2 JP7027690U JP7027690U JPH076800Y2 JP H076800 Y2 JPH076800 Y2 JP H076800Y2 JP 7027690 U JP7027690 U JP 7027690U JP 7027690 U JP7027690 U JP 7027690U JP H076800 Y2 JPH076800 Y2 JP H076800Y2
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culture
culture solution
chamber
storage chamber
atm
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和夫 坂本
省三 白石
昭二 ▲榊▼山
正八 吉岡
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Sekisui Chemical Co Ltd
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Sekisui Chemical Co Ltd
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  • Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)

Description

【考案の詳細な説明】 (産業上の利用分野) 本考案は、動物組織等の細胞の培養に使用される培養用
バックに関するものである。
DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION (Industrial field of use) The present invention relates to a culture bag used for culturing cells such as animal tissues.

(従来の技術) 動物組織等の培養を行う場合、従来はシャーレまたはフ
ラスコに細胞と培養液とを入れ、これを炭酸ガス培養器
内に置き、この培養器内に滅菌された空気/炭酸ガスの
混合ガス(一般には炭酸ガス濃度5容量%)を導入し、
この混合ガス雰囲気下に細胞と培養液とを置くことによ
って行っていた。
(Prior Art) When culturing animal tissue or the like, conventionally, cells and a culture solution are put into a petri dish or a flask, and this is placed in a carbon dioxide gas incubator, and sterilized air / carbon dioxide gas is placed in this incubator. Introduced mixed gas (generally 5% by volume of carbon dioxide),
This was done by placing the cells and the culture solution in this mixed gas atmosphere.

この混合ガス雰囲気下に細胞と培養液とを置く方法は、
シャーレまたはフラスコに気体が通過できるような僅か
な隙間をつくり、その隙間から炭酸ガス培養器内の混合
ガスをシャーレまたはフラスコ内に入れ、培養液と接触
させることにより行っていた。
The method of placing the cells and the culture solution in this mixed gas atmosphere is
A small gap is formed in the petri dish or flask so that gas can pass therethrough, and the mixed gas in the carbon dioxide incubator is put into the dish or flask through the gap and brought into contact with the culture solution.

(考案が解決しようとする課題) 炭酸ガス培養器内の混合ガスは、あらかじめ滅菌されて
いるので、これを培養液を接触させても、培養液を雑菌
汚染することはない。しかし、炭酸ガス培養器の扉を開
けた時などに、空気中の雑菌が培養器内に取り込まれ、
それが培養液と接触して、該培養液を汚染するといった
不都合を生じることとなる。
(Problems to be Solved by the Invention) Since the mixed gas in the carbon dioxide incubator has been sterilized in advance, even if it is brought into contact with the culture solution, the culture solution is not contaminated with various bacteria. However, when the door of the carbon dioxide incubator is opened, bacteria in the air are taken into the incubator,
It comes into contact with the culture solution and causes the inconvenience of contaminating the culture solution.

そのため、フラスコ等のキャップ口に滅菌フィルタを取
り付けることも考えられているが、この場合、フィルタ
の取付け面積に制約があり、大量培養には適当でない。
Therefore, it is considered to attach a sterilizing filter to the cap mouth of a flask or the like, but in this case, the filter mounting area is limited and it is not suitable for mass culture.

本考案は、係る実情に鑑みてなされたもので、密閉状態
で培養液の導入を行うことによって培養液の雑菌汚染を
防止することのできる培養用バックを提供することを目
的としている。
The present invention has been made in view of the above circumstances, and an object of the present invention is to provide a culture bag capable of preventing contamination of various bacteria in the culture solution by introducing the culture solution in a sealed state.

(課題を解決するための手段) 本考案の培養用バックは、シート状材料を融着加工して
なるバックであって、酸素ガス透過性200ml/m2・24hr・
atm以下、炭酸ガス透過性1000ml/m2・24hr・atm以下の
特性を有する塩化ビニル樹脂系の保存シートからなる培
養液保存室と、酸素ガス透過性600ml/m2・24hr・atm以
上、炭酸ガス透過性2000ml/m2・24hr・atm以上の特性を
有する塩化ビニル樹脂系の透明の培養シートからなる培
養室とが形成され、前記培養室には細胞注入口および培
養液排出口が少なくとも各1ヵ所形成されるとともに、
前記培養液保存室には培養液注入口が形成され、かつ、
これら培養室および培養液保存室に、該培養室および培
養液保存室を連通する連通路が形成されたものである。
(Means for Solving the Problems) The culture bag of the present invention is a bag obtained by fusion-bonding a sheet-shaped material, and has an oxygen gas permeability of 200 ml / m 2 · 24 hr ·
Atm or less, carbon dioxide permeability 1000ml / m 2 · 24hr · atm or less culture medium storage chamber consisting of vinyl chloride resin-based storage sheet, oxygen gas permeability 600ml / m 2 · 24hr · atm or more, carbon dioxide A culture chamber consisting of a vinyl chloride resin-based transparent culture sheet having a gas permeability of 2000 ml / m 2 , 24 hr, atm or more is formed, and at least each of the cell injection port and the culture solution discharge port is formed in the culture chamber. With the formation of one place,
A culture solution inlet is formed in the culture solution storage chamber, and
A communication passage that connects the culture chamber and the culture solution storage chamber is formed in the culture chamber and the culture solution storage chamber.

(作用) 本考案の培養用バックは、あらかじめ連通路を閉じた状
態で培養液保存室に培養液を保存しておく。そして、使
用時に、連通路を開いて培養液保存室の培養液を培養室
へ移すとともに、細胞注入口から細胞を注入する。そし
て、これを培養に必要なガス雰囲気下で静置培養し、そ
の後検出用取出口から培養液および細胞の検出をするこ
とによって使用される。
(Operation) In the culture bag of the present invention, the culture solution is stored in advance in the culture solution storage chamber with the communication passage closed. Then, at the time of use, the communication passage is opened, the culture solution in the culture solution storage chamber is transferred to the culture chamber, and cells are injected from the cell injection port. Then, it is used by statically culturing it in a gas atmosphere necessary for culturing, and then detecting the culture solution and cells from the detection outlet.

この際、培養液保存室は、酸素ガス透過性200ml/m2・24
hr・atm以下、炭酸ガス透過性1000ml/m2・24hr・atm以
下の特性を有する塩化ビニル樹脂系の2枚の保存シート
によって構成されているため、培養液の保存性に優れ
る。また、培養室は、酸素ガス透過性600ml/m2・24hr・
atm以上、炭酸ガス透過性2000ml/m2・24hr・atm以上の
特性を有する塩化ビニル樹脂系の透明の培養シートによ
って構成されているため、この培養シートを介してガス
が透過するとともに、内容物を観察することができる。
さらに、培養液保存室と培養室とが連通路によって連通
しているため、培養液を密閉状態で培養室に移すことが
できる。
At this time, the culture solution storage room has an oxygen gas permeability of 200 ml / m 2 · 24.
Since it is composed of two vinyl chloride resin-based storage sheets that have the characteristics of hr · atm or less and carbon dioxide gas permeability of 1000 ml / m 2 · 24 hr · atm or less, it is excellent in storage stability of the culture solution. In addition, the culture chamber has an oxygen gas permeability of 600 ml / m 2 · 24 hr ·
Since it is composed of a transparent vinyl chloride resin-based culture sheet having the characteristics of atm or more and carbon dioxide gas permeability of 2000 ml / m 2 , 24 hr, atm or more, the gas permeates through this culture sheet and the contents Can be observed.
Furthermore, since the culture solution storage chamber and the culture chamber are connected by the communication passage, the culture solution can be transferred to the culture chamber in a sealed state.

(実施例) 以下、本考案の一実施例を図面を参照して説明する。Embodiment An embodiment of the present invention will be described below with reference to the drawings.

第1図は、培養用バック1の全体構成の概略を示してい
る。
FIG. 1 shows an outline of the entire structure of the culture bag 1.

すなわち、この培養用バック1は、保存シート2からな
る培養液保存室5と、培養シート3からなる培養室4と
を形成し、前記培養室4には細胞注入口6および培養液
排出口7を形成するとともに、前記培養液保存室5には
培養液注入口8を形成し、かつ、これら培養室4および
培養液保存室5に、該培養室4および培養液保存室5を
連通する連通路9を形成したものである。
That is, the culture bag 1 forms a culture medium storage chamber 5 made of a storage sheet 2 and a culture chamber 4 made of a culture sheet 3, and the culture chamber 4 has a cell inlet 6 and a culture liquid outlet 7. And a culture solution injection port 8 is formed in the culture solution storage chamber 5, and the culture chamber 4 and the culture solution storage chamber 5 are communicated with each other. The passage 9 is formed.

保存シート2は、酸化等によって培養液を変質させない
ように、通気性の低い材料でなければならない。また、
バックの密閉性を確保するために、融着接合が可能な材
料でなければならない。これらの要求を満たす材料とし
て、酸素ガス透過性200ml/m2・24hr・atm以下、炭酸ガ
ス透過性1000ml/m2・24hr・atm以下の特性を有する塩化
ビニル系樹脂が使用される。具体的には、塩化ビニル樹
脂または塩化ビニルとこれと共重合しうる単量体との共
重合樹脂100重量部と、エチレン・酢酸ビニル・一酸化
炭素共重合体30〜150重量部とからなる厚さ0.2〜0.5mm
のシート状材料が使用される。
The storage sheet 2 must be a material having low air permeability so as not to deteriorate the culture solution by oxidation or the like. Also,
In order to ensure the airtightness of the bag, it must be a material that can be fusion-bonded. As a material satisfying these requirements, a vinyl chloride resin having oxygen gas permeability of 200 ml / m 2 · 24 hr · atm or less and carbon dioxide gas permeability of 1000 ml / m 2 · 24 hr · atm or less is used. Specifically, it is composed of 100 parts by weight of a vinyl chloride resin or a copolymer resin of vinyl chloride and a monomer copolymerizable therewith, and 30 to 150 parts by weight of an ethylene / vinyl acetate / carbon monoxide copolymer. Thickness 0.2-0.5mm
Sheet material is used.

培養シート3は、細胞を生長するための酸素ガスの通過
性と、培養系内のPHを約7.4〜7.6にコントロールするた
めの炭酸ガス通過性に優れた材料でなければならない。
また、バックの密閉性を確保するために、融着接合が可
能な材料でなければならない。さらに、顕微鏡等で細胞
の生長度合を調べるため、透明なフィルムであることが
要求される。これらの要求を満たす材料として、炭酸ガ
ス透過性600ml/m2・24hr・atm以上、炭酸ガス透過性200
0ml/m2・24hr・atm以上の特性を有する透明の塩化ビニ
ル系樹脂が使用される。具体的には、塩化ビニル樹脂ま
たは塩化ビニルとこれと共重合しうる単量体との共重合
樹脂100重量部と、エチレン・n−ブチルアクリレート
・一酸化炭素共重合体150〜260重量部とからなる厚さ0.
1〜0.5mmのシート状材料が使用される。
The culture sheet 3 must be a material excellent in oxygen gas permeability for growing cells and carbon dioxide gas permeability for controlling PH in the culture system to about 7.4 to 7.6.
Further, in order to secure the airtightness of the bag, it must be a material that can be fusion-bonded. In addition, a transparent film is required for examining the growth degree of cells with a microscope or the like. As a material that meets these requirements, carbon dioxide permeability of 600 ml / m 2 · 24 hr · atm or more, carbon dioxide permeability of 200
A transparent vinyl chloride resin having a characteristic of 0 ml / m 2 · 24 hr · atm or more is used. Specifically, 100 parts by weight of a vinyl chloride resin or a copolymer resin of vinyl chloride and a monomer copolymerizable therewith, and 150 to 260 parts by weight of an ethylene / n-butyl acrylate / carbon monoxide copolymer. Thickness consisting of 0.
Sheet material of 1-0.5 mm is used.

なお、培養シート3の厚みとしては、ガス透過性と、内
容液を充填した際に容器が破裂することがない厚みとさ
れる。好適には、0.1〜0.5mmである。0.5mmを越える
と、培養シート3の透明性が劣り、内容物の検査に支障
をきたすこととなる。
The culture sheet 3 has a gas permeability and a thickness that prevents the container from bursting when filled with the content liquid. It is preferably 0.1 to 0.5 mm. When it exceeds 0.5 mm, the transparency of the culture sheet 3 is deteriorated, which hinders the inspection of the contents.

培養室4には、細胞注入口6と、培養液排出口7と培養
液保存室5の培養液を導入するための連通路9とが必要
とされる。
The culture chamber 4 requires a cell inlet 6, a culture medium outlet 7, and a communication passage 9 for introducing the culture medium in the culture medium storage chamber 5.

また、培養液保存室5には、培養液注入口8と、培養液
を培養室4へ移すための連通路9とが必要とされる。
Further, the culture solution storage chamber 5 requires a culture solution injection port 8 and a communication passage 9 for transferring the culture solution to the culture chamber 4.

これら注入口6,8、排出口7および連通路9は、培養室
4および培養液保存室5に、該培養室4および培養液保
存室5を構成する材料と同じ材料で構成されたチューブ
(例えば、内径3〜5Φのチューブ)を取り付けること
によって設けることができる。これら、培養室4、培養
液保存室5およびチューブ等は、高周波融着または熱融
着等により融着接合しうるので、完全な密閉性が保持さ
れる。
These inlets 6, 8 and outlets 7 and the communication passages 9 are provided in the culture chamber 4 and the culture solution storage chamber 5 in a tube made of the same material as that of the culture chamber 4 and the culture solution storage chamber 5 ( For example, it can be provided by attaching a tube having an inner diameter of 3 to 5Φ. Since the culture chamber 4, the culture solution storage chamber 5, the tube, and the like can be fusion-bonded by high-frequency fusion or heat fusion, perfect hermeticity is maintained.

なお、連通路9には、未使用状態で培養液保存室5の培
養液が培養室4へ流入しないように、ストッパ90を設け
ておかなければならない。このストッパ90としては、特
に限定されるものではないが、第2図に示すように、連
通路9内に配設するストッパ90を使用することができ
る。すなわち、このストッパ90は、使用時に、連通路9
の外部からストッパ90を折ることによって連通路9を連
通させ、培養液を導入することができる。このストッパ
90によると、折れた後の破断片91が培養液の逆流止めと
なり、効果的である。
A stopper 90 must be provided in the communication passage 9 so that the culture solution in the culture solution storage chamber 5 does not flow into the culture chamber 4 in an unused state. The stopper 90 is not particularly limited, but as shown in FIG. 2, a stopper 90 arranged in the communication passage 9 can be used. That is, this stopper 90 is used when the communication passage 9 is used.
The culture medium can be introduced by connecting the communication passage 9 by breaking the stopper 90 from the outside. This stopper
According to 90, the broken pieces 91 after breaking serve as a backflow stopper for the culture solution, which is effective.

次に、このようになる培養用バッグ1の使用方法につい
て説明する。
Next, a method of using the culture bag 1 thus configured will be described.

まず、あらかじめ連通路9をストッパ90によって閉じた
状態とし、培養液注入口8から、培養液保存室5に培養
液を保存しておく。
First, the communication passage 9 is closed in advance by the stopper 90, and the culture solution is stored in the culture solution storage chamber 5 through the culture solution injection port 8.

そして、使用時に、連通路9に配設されたストッパ90を
折って連通路9を開いた状態とし、培養液保存室5の培
養液を培養室4へ移すとともに、細胞注入口6から細胞
を注入する。この際、培養液の培養室4への導入は、培
養液保存室5を逆さにする、または手で押さえることに
よって簡単に行うことできる。
Then, at the time of use, the stopper 90 disposed in the communication passage 9 is folded to open the communication passage 9, the culture solution in the culture solution storage chamber 5 is transferred to the culture chamber 4, and cells are injected from the cell injection port 6 at the same time. inject. At this time, the introduction of the culture solution into the culture chamber 4 can be easily performed by turning the culture solution storage chamber 5 upside down or pressing it by hand.

そして、これを培養に必要なガス雰囲気下で静置培養
し、その後、培養液排出口7から培養液および細胞の検
出をすることによって使用される。
Then, this is used by statically culturing it under a gas atmosphere necessary for culturing, and then detecting the culture solution and cells from the culture solution outlet 7.

(考案の効果) 以上述べたように、本考案によると、培養液の保存性に
優れる培養液保存室と、培養に必要なガスが透過すると
ともに内容物を観察することができる培養室とが連通路
によって連通し、この連通路を介して培養液保存室の培
養液を密閉状態で培養室に移すことができるので、培養
液の汚染を防止するとともに、極めて短時間で容易に培
養液を導入することができる。また、これら培養室およ
び培養液保存室は、融着加工によって構成されているの
で、該培養室および培養液保存室をそれぞれ任意の大き
さに容易に作ることができる。さらに、シート材料自体
がガスの透過性を有するので、ガス透過量も自由にコン
トロールすることができる。
(Effects of the Invention) As described above, according to the present invention, a culture solution storage chamber having excellent storage stability of the culture solution and a culture chamber capable of observing the contents while allowing gas required for culture to permeate are provided. Since the culture fluid in the culture fluid storage chamber can be transferred to the culture chamber in a sealed state through the communication passage, the culture fluid can be prevented from being contaminated and the culture fluid can be easily transferred in an extremely short time. Can be introduced. Moreover, since the culture chamber and the culture solution storage chamber are configured by fusion bonding, the culture chamber and the culture solution storage chamber can be easily made to have arbitrary sizes. Furthermore, since the sheet material itself has gas permeability, the amount of gas permeation can be freely controlled.

【図面の簡単な説明】[Brief description of drawings]

第1図は、本考案に係る培養用バックの全体構成の概略
を示す平面図、第2図(a)はストッパの使用前の状態
を示す断面図、第2図(b)は同ストッパの使用後の状
態を示す断面図である。 1……培養用バック 2……保存シート 3……培養シート 4……培養室 5……培養液保存室 ……細胞注入口 7……培養液排出口 8……培養液注入口 9……連通路
FIG. 1 is a plan view showing the outline of the entire structure of the culture bag according to the present invention, FIG. 2 (a) is a sectional view showing the state before the stopper is used, and FIG. 2 (b) is the same. It is sectional drawing which shows the state after use. 1 …… Bag for culture 2 …… Storing sheet 3 …… Culture sheet 4 …… Culture chamber 5 …… Culture storage chamber …… Cell inlet 7 …… Culture outlet 8 …… Culture inlet 9 …… Communication passage

Claims (1)

【実用新案登録請求の範囲】[Scope of utility model registration request] 【請求項1】シート状材料を融着加工してなるバックで
あって、 酸素ガス透過性200ml/m2・24hr・atm以下、炭酸ガス透
過性1000ml/m2・24hr・atm以下の特性を有する塩化ビニ
ル樹脂系の保存シートからなる培養液保存室と、酸素ガ
ス透過性600ml/m2・24hr・atm以上、炭酸ガス透過性200
0ml/m2・24hr・atm以上の特性を有する塩化ビニル樹脂
系の透明の培養シートからなる培養室とが形成され、前
記培養室には細胞注入口および培養液排出口が少なくと
も各1ヵ所形成されるとともに、前記培養液保存室には
培養液注入口が形成され、かつ、これら培養室および培
養液保存室に、該培養室および培養液保存室を連通する
連通路が形成されたことを特徴とする培養用バック。
1. A bag obtained by fusion-bonding a sheet-like material, which has characteristics of oxygen gas permeability of 200 ml / m 2 · 24 hr · atm or less and carbon dioxide gas permeability of 1000 ml / m 2 · 24 hr · atm or less. A culture solution storage chamber consisting of a vinyl chloride resin-based storage sheet that has an oxygen gas permeability of 600 ml / m 2 , 24 hr atm or more, and a carbon dioxide gas permeability of 200.
A culture chamber made of a vinyl chloride resin-based transparent culture sheet having a characteristic of 0 ml / m 2 · 24 hr · atm or more is formed, and at least one cell inlet and one culture medium outlet are formed in the culture chamber. At the same time, a culture solution inlet is formed in the culture solution storage chamber, and a communication passage that connects the culture chamber and the culture solution storage chamber is formed in the culture chamber and the culture solution storage chamber. Characteristic culture bag.
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