JPH07500838A - Ｃｄ８↑＋細胞抗ウィルス因子 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ＣＤ８”細胞抗ウイルス因子 本発明は、ＣＤ８”″細胞抗ウィルス因子（ＣＡＦ）と表される精製細胞性因子 を提供する。この細胞因子は活性化ＣＤ８”　Ｔ細胞によって産生される。この 因子は、ヒト免疫不全ウィルス（ＨＴＶ）の複製を阻害するために用いられ、感 染された哺乳類中のレトロウィルスに関係する。

情報開示 ＣＡＦ活性は未精製及び複合培地中で説明されている。この培地はｉｎ　ｖｉｔ ｒ。

てＨＩＶ複製を阻害することが証明されている。本発明者が知っているどの文献 にも、単一、独特且つ新規な細胞産生因子がこの抗ウィルス活性の基因であると いうことを証明するものはない。ウォーカー（Ｗａｌｋｅｒ）、Ｃ，Ｍ、とレヴ イ（Ｌｅｖｙ）。

Ｊ、Ａ、、１９８９．ＡＤｉｆｆｕｓｉｂｌｅＩ、ｙｍｐｈｏｋｉｎｅＰｒｏｄ ｕｃｅｄｂｙＣＤ８”ＴＬｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓＳｕｐｐｒｅｓｓｅｓ　ＨＩＶ 　Ｒｅｐｌｉｃａｔｉｏｎ、Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ、６６．６２８−６３０．１ ９８９　；ブリンクマン（Ｂｒｉｎｃｋｍａｎｎ）、Ｊ、Ｅ、ら、ＣＤ８”　Ｔ 　Ｃｅ１ｌｓ　１曲１ｂｉｔ　ＨＩＶ　Ｒｅｐｌｉｃａｔｉｏｎ　ｉｎ　Ｎａｔ ｕｒａｌｌｙ　Ｉｎｆｅｃｔｅｄ　ＣＤ４”　Ｔ　Ｃｅ１ｌｓ、　Ｊ、　１ｍｍ ｕｎｏｌｏｇｙ、　１４４．２９６１−２９６６、１９９０　：並び■Aウ ォーカー、Ｃ，Ｍ　ら、ＣＤ８”　Ｔ　Ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ　ｃａｎ　Ｃｏ ｎｔｒｏｌ　Ｈ［Ｖ　１ｎｆｅｃｒｉｏｎ　ｉｎ　Ｖｉｔｒｏ　ｂｙ　Ｓｕｐｐ ｒｅｓｓｉｎｇ　Ｖｉｒｕｓ　Ｒｅｐｌｉｃａｔｉｏｎ、５ｃｉｅｎｃｅ、２３ ４．１５６３−１５６６．１９８U゜ ＣＤ８’細胞抗ＨＩＶ活性は患者の臨床状態と相互関係かある。マカウイッツＱ ｔａｃｋｅｗｉｃｚ）、Ｃ，Ｅ　ら、ＣＤ８’　Ｃｅ１ｌｓ　ａｎｔｉ−ＨＩＶ 　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｃｏｒｒｅｌａｔｅｓ　ｗｉｔｈｔｈｅ　ｃｌｉｎｉｃａ ｌ　５ｔａｔｅ　ｏｆ　Ｔｈｅ　１ｎｆｅｃｔｅｄ　１ｎｄｉｖｉｄｕａ１．、 　Ｊ、Ｃｌ１ｎ、［ｎｖｅｓｔ、、W７．１４６２− １４６６、１９９１゜ 発明の概要 本発明は、後述の特性によって定義される実質的に純性のＣＤ８”細胞抗ウイル ス因子を提供する　即ち、活性化ＣＤ８”細胞から放出される１１０〜１２の範 囲のｐＨによって生物学的に不活性化される。酸非感受性である。エーテルに非 感受性である：５６°Ｃ３０分の加熱に耐性である；ロイペプチンに感受性であ るニトリプシン処理に耐性である、並びに、ＩＦＮα、ＩＦＮβ、ＩＦＮγ、Ｔ ＮＦβ、ＩＬ６、ＩＬ４、ＴＧＦ−β又はＴＮＦαに特異的な抗体に結合しない 。

ＣＡＦはＣＤ４”細胞の活性化又は増殖に影響せず、ＲＮＡ転写を妨害すること によってウィルス複製を阻害する。ＣＡＦは生物学的、分子的及び血清学的なア ッセイによって決定される既述のサイトカインのいずれでもない。これらのサイ トカインは表１にあるものが含まれる。更に、本発明は、ユニット投与量形態の 医薬組成物を提供し、これは１以上の活性成分と１以上の医薬的に許容可能な賦 形剤の両方からなり、ここで活性成分の１つは上述の特性によって定義されるＣ Ｄ８’細胞抗ウイルス因子である。賦形剤は薬理的に不活性の成分例えば滅菌水 、塩、６．０〜８．０の生理学的範囲にあるｐ　Ｋ　ａを有する緩衝剤等である 。活性成分は薬理的に活性化合物例えば抗生物質、ホルモン、免疫刺激物等であ る。

上記因子は通常レトロウィルス例えばレンチウィルスに感染された哺乳類を治療 するために用いられる。レンチウィルスは逆転写酵素を含有するウィルスの群に 属する。それらは複合ゲノム、電子顕微鏡下での特徴的な形態を有し、一般に免 疫系及び神経系の細胞に感染する。治療は、ＣＤ８＋細胞抗ウイルス因子を、ウ ィルスの複製を阻害するために有効な量で投与することを含む。好ましい投与の 経路は静脈である。好ましい投与量は、ヒトの体重のキログラム当たり約１００ ０〜約１００００ユニツトの間である。ｌユニットはここで記述されるアッセイ を用いて末梢単核細胞中のＨＴＶ？！製を約７５％分減少させるために必要なＣ ＡＦの濃度として定義される。

本発明は更に、細胞中のレンチウィルスの複製を、該細胞を上述のようなＣＤ８ ゛細胞抗ウイルス因子の実質的に純性な組成物に暴露することによって阻害する 方法を提供する。この阻害はｉｎ　ｖｉｔｒｏ又はｉｎ　ｖｉｖｏ共に行うこと ができる。

好適具体例の説明 既述したように、本発明は、精製細胞因子即ち、ＣＤ８として定義される分子を その細胞表面に発現している末梢血単核細胞（ＰＭＣ）によって産生されるＣＤ ８”抗ＨＴＶ因子（ＣＡＦ）を提供する。これらの細胞は、初期の活性表現型即 ちＣＤ８”　ＣＤＩ　Ｉ　ｂ−、ＣＤ３８’　及びＨＬＡ−ＤＲ”　である。Ｃ Ａ　Ｆ　ｉｔ、ＨＩＶ感染中に活性化されるＣＤ８”Ｔｍ胞から得られる。

ＣＡＦは活性化ＣＤ８′″細胞が培養されている調整培地中から精製される。Ｃ Ｄ８’細胞は、好ましくは、ＨＩＶを有するが末だＨＩＶ誘導疾患に関連する症 状を示していない個体から得られる。この細胞は標準的静脈注射によって取り出 される。その後ＰＭＣは、密度勾配遠心分離例えばＦｉｃｏｌ　１／Ｈｙｐａｑ ｕｅによって抗凝結血液又はバフィコートから得られる。

ＣＤ８”″細胞を他のＰＭＣから分離するために、ＣＤ８”特異的抗体例えばＩ Ｔ　Ｊ　−５Ｃ２−／　Ｉ　ｇＭ　（Ｊ、　Ｉｍｍｕｎｏ口１ｅｔｈｏｄｓ、　 ９０：１７９）が、細胞をコートするために用いられる。この抗体はＣＤ８＋細 胞に特異的に結合する。その後ＣＤ８”細胞は、細胞に付着した抗体に特異的な 支持体結合抗体を用いて捕獲される。カラムクロマトグラフィー、磁気ピース又 はペトリ皿におけるバンニングがこのような細胞分離のために好適なマトリクス の例である。

ＣＤ８”″細胞は如何なる適当な細胞中でも培養されるが、最も好ましいのは、 汚染を防止するための抗生物質、インターロイキン２　（ＩＬ２）を有し、ＣＡ Ｆの産生を促進するためにマイトジェン刺激物質（例えばフィトヘムアグルチニ ン又は抗Ｔ細胞すセブタ−（Ｔ　ＣＲ）を２〜３日被覆したピース）を有するＲ ＰＭＩ主体培地である。この因子の精製のために、如何なる適当な無血清培地中 でもＣＤ８’細胞の培養が行われるが、好ましいのはＡＩＭ　Ｖ（ＧＩＢＣＯ） 無血清培地である。

適当な培養（５〜１３日）の後、調整細胞培地は精密ろ過又は分画遠心分離によ って得ることができる。細胞は回収されることができ、新鮮な培地を与えらえ又 は移し替えられることができる。その後、調整培地は副産物による汚染を排除し 各工程においてＣＡＦを濃縮するように設計されたタンパク質精製法に付される 。加熱は存在し得る汚染細胞性タンパク質を不活性化し、それから標準タンパク 質精製法例えば分子サイズ決定法、免疫特異的アフィニティ又は他のクロマトク ゛ラフイックカラムか用いられる。

因子かポリアクリルアミドゲルにおける単一バンド又はＨＰＬＣカラム（約り０ ％純度）で精製された後、ＣＡＦは標準医薬賦形剤（例えば生理食塩水）を用い て配合される。これは凍結乾燥状態又は−２０°Ｃ又は−７０°Ｃにおける液体 培地中ての冷凍て保管される。ＣＡＦは循環系への注入で投与される。例えばＣ ＡＦは滅菌水又はｐＨ６，４〜８．４の生理的範囲で緩衝された他の水性滅菌溶 液に溶解し得る。配合物は好ましくは血液細胞に対して等張性にされる。配合物 は医薬的に活性な成分例えは抗生物質、抗ウィルス剤、ホルモン等も含み得る。

ＣＡＦは哺乳類中てのレトロウィルス（例えばレンチウィルス）の複製、例えは ヒトにおけるＨＩＶ又はネコにおける免疫不全ウィルスの複製を阻害するために 用いられる。典型的な患者は、臨床的に回復してＴ細胞数が正常に戻るまで、毎 日体重キログラム当たり１０００〜１００００ユニツトのＣＡＦを注入すること によって治療される。

ＣＡＦの純度又は効率をモニタするためには、ＣＤ４”細胞におけるＨＩＶの複 製の阻害をアッセイすることが有効である。細胞は自然に感染（内因性ウィルス アッセイ）又は人工的に感染（急性ウィルス感染アッセイ）される。内因性ウィ ルスアッセイでは、ＣＤ４”細胞はＨＩＶに感染されているとわかっている患者 から免疫的選択法例えは免疫磁気ピースを用いて得られる。この方法によって、 ＣＤ４若しくはＣＤ８細胞表面タンパク質に対するモノクローナル抗体でコート された酸化鉄コアを有するポリスチレン小球（ダイナル（Ｄｙｎａｌ）社）が分 離（Ｆｉ　ｃｏ　］　］／Ｈｙｐａｑｕｅによる）ＰＭＣの試料に添加される。

２０−４０分間の培養後、ＣＤ４’若しくはＣＤ８”″細胞か磁気捕獲装置によ って取り出される。細胞は、洗浄されて、１０％ＦＢＳ、２ｍＭグルタミン、１ ％抗生物質（ｌＯＯユニット／ｍｌペニノリン及び１００μｇ／ｍｌストレプト マイシン）並びに１０％ヒ１ｉＬ２（エレクトロヌクレオニクス、シルバースプ リング、メリーラント州）添加ＲＰＭＩ１６４０培地中て培養される。

或いは、９、性ウィルス感染アッセイを用いると、ＣＤ４＋細胞は非感染のし１ −から得られ、一定量のＨＩＶて感染される。その後、この細胞はトリプシン処 理さ第１て投入ウィルスを除去してから培養される。

内因性ウィルスアッセイでは、ＣＤ４”細胞は、ＨＩＶを急速に分裂し産生ずる ためにフィトヘムアグルチニン又は抗ＴＣＲヒースを用いて活性化される。ＣＡ Ｆ又は精製ＣＡＦを含有する培養液はウィルス性マグネシウム依存逆転写酵素活 性について３日間隔てホフマン（Ｈｏｆｆｍａｎ）ら、Ｖｉｒｏｌｏｇｙ、　１ ４７．３２６　（１９８５）に記述されたようにアッセイされる。或いは、ウィ ルスの複製は、他のウィルス特異的産物例えばＪ、　１ｍｍｕｎｏｌｏｇｙ、　 １４４．２９６１−２９６６　（１９９０）に記載されたようなウィルスタンパ ク質ｐ２４に対するアッセイによってモニタされることができる。

全ての文献を援用して本文の一部とする。

寒旌皿 後述する実施例は、説明のために示されるのであって、制限するためのものでは ない。当業者は、後述のプロトコールが重要でないように改変され得る多くのや り方を容易に同定するであろう。

実施例１　活性化ＣＤ８”細胞の培養 ＣＡＦを活性ＣＤ８“細胞を含む調整培地から精製する。ＣＤ８″″細胞をＨＩ Ｖ感染の患者の末梢血単核細胞（ＰＭＣ）から得る。ＰＭＣをＦｉｃｏｌｌ／Ｈ ｙｐａｑｕｅ勾配の分離によって血液から得る。この細胞を洗浄し、１０％ウシ 胎児血清（ＦＢＳ）、１％抗生物質、１０％ヒトＩＬ２を含有するＲＰＭＩ　１ ６４０培地中て培養する。フイトヘムアグルチニン（３μｇ／ｍ１、ングマ）を ２５ｃｍ’フラスコ中で５ｍｌ細胞培養の開始時に添加する。細胞を、約６〜１ ＯＸＩＯ’細胞／ｍｌに達するまで増殖させる。

ＰＭＣの細胞培養物に対し、ウイソクキ（Ｗｙｓｏｃｋｉ）とサトウ、ＰＮＡＳ 、　ＵＳＡ、　、　７５．２８４４（１９７８）のパンニング方法を用いてＣＤ ８”″若しくはＣＤｌ６”細胞の富裕化若しくは（Ｊ１除化を行う。まとめると 、プラスチ・ツク接着細胞（マクロファージ）をまず除去し、そねから、２０Ｘ ＩＯ’〜３０ＸＩＯ＠の非接着ＰＭＣをＬｅｕ−２ａ及びＬｅｕ−１１ｂ（ベク ）・ン・デイツキン゛ノン）のいずれかに対するモノクローナル抗体ＩＯμｇ／ ｍｌを含有する２ｍｌのリン酸緩衝液（ＰＢＳ）中で１０分間室温にて培養する 。これらの抗体は各々ＣＤ８及びＣＤｌ６抗原上のエピトープを認識する。その 後、この細胞を２回洗浄し、１％ウシ胎児血清を含む４ｍｌのＰＢＳに再せ濁し 、抗体てコートされた捕獲プラスチ・ノクベトリ皿上て２時間４°Ｃにて培養す る。

捕獲プレートを、マウス免疫グロブリンＩｇＧに対するヤギ抗体のＦ（Ａｂ’　 ）ｔ部分（タボ、バーリンゲーム、カリフォルニア州）でコートされた生物学級 ベトリブレートを用いて調製する。このプレートを捕獲抗体（ｌＯμｇ／ｍｌ、 ０．０５モルＴｒｉｓ中、ｐＨ９，５）で４０分間室温にてコートした。過剰の 抗体をＰＢＳてプレートから洗い流す。

ＰＭＣの非特異的付着を防ぐために、使用する前に１％ＦＢＳを含むＰＢＳでプ レートをコートする。培養後、非接着性細胞（即ち、ＣＤ８−若しくはＣＤ１６ −分画）を冷ＰＢＳてプレートから洗い流し、接着細胞（ＣＤ８＋若しくはＣＤ １６”）をＰＢＳの強い噴射によってプレートから剥がす。Ｌｅｕ　ｌｌｂモノ クローナル抗体方法を、必要ならば行って、ＣＤ８”細胞からＮＫ細胞を除去す る。記述された方法の効率をＪ、　Ａ、レヴイら、ＣＩ　ｉｎ、　Ｉｍｍｕｎｏ 、　Ｉｍｍｕｎｏｐａｔｈ、　、　３５゜３２８（＋９８−１’）に記載された ようにフローサイトメトリーによって評価する。

その後、ＣＤ８”″富裕化細胞を２００　Ｕ／ｍ　ｌリコンビナントＩＬ−２（ コラホラティヴ・リサーチ、ベノドフ十−ド、マサチューセッツ州）、１％抗生 物質（１００ユニツト／ｍｌペニシリン及び１００μｇ／ｍｌストレプトマイシ ン）並びに１０％ヒトＩＬ２（エレクトロヌクレオニクス、シルバー・スプリン グ、メリーラント州）を添加したＡＩＭＶ培地中で培養する。この細胞を６〜１ ０×１０８細胞／ｍｌのｉ細胞−達するまで増殖させる。その後、この培地をＣ Ｄ８”細胞から、精密ろ過：特に、４５μｍミリポアフィルタの使用を経て分離 する。

ＣＡＦの存在は、疑わしいＰＭＣ細胞におけるＨＩＶ複製の阻害能を用いてモニ タされる。

実施例２　ＣＡＦ活性のアッセイ ＣＡＦの純度をモニタするために、ＣＤ４“細胞におけるＨＩＶの複製の相対的 阻害か、段階的に精製されたＣＡＦを用いてアッセイされる。この細胞をＨＩＶ を有しない患者から得て、洗浄し、１０％ＦＢＳ、２ｍＭグルタミン、１％抗生 物質（＋００ユニッｈ／ｍｌペニシリン及び１００μｇ／ｍｌストレプトマイノ ン）並びにｌＯ％ヒトＩＬ２　（エレクトロヌクレオニクス、シルバー・スプリ ング、メリーラント州）を含有するＲＰＭＩ　１６４０培地中で培養する。フィ トヘムアグルチニン（３μｇ／ｍ］、シグマ社、セントルイス、ミズーリ州）を 該培養の開始時に添加する。３日後、チャンバ中の細胞を洗浄し、上述の新鮮な ＩＬ−２含有培地で再補充する。その後、この細胞を１００ＴＣＩＤＨ（組織培 養感染量）のＨＩＶ−１で接種する。接種１時間後、この細胞をトリプシン処理 して投入したウィルスを除去する。ＣＡＦ因子を添加し、ウィルス複製における 影響を２．３日間隔て１２日までモニタする。特に、ウィルス複製を、ＨＩＶ複 製のＣＡＦ仲介阻害についてアッセイする。これは、ホフマンら、Ｖｉｒｏｌｏ ｇｙ、１４７゜３２６　（１９８５）に記載されたようなマグネシウム依存性逆 転写酵素活性又はｐ２４抗原方法によって測定される。有効ＣＡＦ活性に対する 阻止としての逆転写酵素活性の９０％阻害を用いた滴定実験が実施される。

実施例３　ＣＡＦのアッセイ ＣＡＦを同定し、後述の物理化学的アッセイによって他の細胞産生因子と区別す ることができる。

ＣＡＦは、エーテル処理に感受性を示さない。精製ＣＡＦの１ｍｌ試料をｉｌｌ のエチルエーテルに暴露することができる。４℃におけるエーテルに対する１０ 分間の暴露後、エーテル（極性）分画を取り出し、エーテルを蒸発によって排除 する。その後、この極性分画を培地中に再懸濁する。これらの条件下で、ＣＡＦ 活性はその活性を低下することなく水溶液中に見出される。

ＣＡＦは、比較的、酸非感受性である。ＣＡＦのわずがな試料を２〜４又はｌＯ 〜１２の範囲のｐＨに暴露する。これらの極端なｐＨで２０時間まで暴露した後 、ＣＡＦを生理学的範囲のｐＨ７に再緩衝して逆転写酵素活性の阻害能を試験す る。ｐＨＩｏ〜１２に暴露した場合、ＣＡＦはもはやＨＩＶ活性を阻害しない。

ＣＡＦ活性はｐＨ３及び４ては変化せず、ｐＨ２ではわずか１０％活性を失う。

ＣＡＦは、更に高熱に対する比較的非感受性であることによって同定される。

ＣＡＦの水性試料を５６°Ｃ３０分又は１００℃ｌＯ分で処理する。その後、こ の溶液を冷却し、抗ＨＩＶ活性を再検査する。これらの条件下で完全な抗ウィル ス作用が存在される。しかし、３０分後の１００″Ｃ処理物質において６０％の 低下か認められる。

ＣＡＦは、選択的プロテアーゼ耐性を存するタンパク質である。ＣＡＦは１時間 ３７°Ｃにおいてトリプシン活性に対して非感受性である。まとめると、５００ μｇ／ｍｌのトリプシンに暴露した後、大豆トリプシン阻害剤をＣＡＦの水溶液 に添加する。ＣＡＦをその逆転写酵素活性の阻害能について再びアッセイする。

これらの条件下では活性の損失は認められない。

更に、ＣＡＦはスタフＶ８プロテアーゼビーズ（シグマ社）に感受性である。

ＣＡＦをこのビーズ（１，５ｍｇ／ｍｌ　２時間３７°Ｃにおける上清）に暴露 した後、４０〜５０％活性低下が認められる。ビーズの濃度を１０倍まで上昇さ せると、７５％まてのＣＡＦ活性を取り除くことができる。更にアガローズビー ズ（シグマ社、３０ｍｇまで／ｍｌ上清）に連結されたプロテアーゼ、タイプＸ ＩＡ（プロテアーゼＫ）はＣＡＦ活性に対して殆と影響ないことを示した。

ＣＡＦは、一般に知られているサイトカインのいずれてもない。α、β若しくは γインターフェロン、同様にインターロイキン４及び６、ＴＧＦ−β並びに腫瘍 壊死因子α及びβに対する抗体は、ｉｎ　ｖｉｔｒｏての抗ＨＩＶ活性を阻害し ない。

比較研究では、試験されたサイトカインのいずれも、α及びβインターロイキン 並びにＴＮＦαを除いて、ＣＡＦによってもたらされるウィルス阻害の程度を提 供しない。ＣＡＦは明らかにインターロイキンｌ−１０又は１２のいずれでもな い。（表１参照。） ＣＡＦは、ロイペプチン（１〜ｌ０ｍｇ／ｍｌ）によって非活性化され、これは ＣＡＦかプロテアーゼであり１辱ることを示している。

ＣＡ　ＦはＣｏｎＡカラムに結合しない。

予想分子量は３０ｋＤ未満である。

ＣＡＦは、更にＣＤ４”細胞の活性又は増殖に影響を与えないとして定義され、 ＣＡＦはＲＮＡ転写においてＨＩＶの複製を阻止する。

急性感染ＣＤ４”細胞てのＨＩＶＰｉ製におけるサイトカイン効果ウィルス複製 のピーク時てのサイトカインの飽和量による結果°このサイトカインに対する抗 体はＣＤ８＋細胞抗ＨＩＶ活性を阻止しない。

１３〜６日、ＨＩＶ複製が遅れた。

°”％コントロールは、サイトカインと培養していない末梢血単核細胞（即ち、 コントロール細胞）におけるＨＩＶの複製の％として定義される。

本発明は、ここで十分に説明され、これは多くの変化及び改変が、ここで説明さ れる本発明の精神又は範囲を逸脱することなく、これに対して成され得るという ことは、当業者に明らかてあろう。

フロントページの続き （７２）発明者　マカウィッッ、カール　イー。

アメリカ合衆国　９４１３１　カリフォルニア州　サンフランシスコ　ノウルビ ュー　ウェイ　２８

Claims (14)

【特許請求の範囲】
1. １．下記の特性によって定義されるＣＤ８＋細胞抗ウィルス因子の実質的に純性 の組成物： ａ．活性化ＣＤ８＋細胞から放出される；ｂ．１０〜１２の範囲のｐＨによって 生物学的に不活性化される；ｃ．酸非感受性； ｄ．エーテルに非感受性； ｅ．５６℃３０分間の加熱に耐性； ｆ．トリプシンに耐性； ｇ．ＣＤ４＋細胞の活性化又は増殖に影響を与えない；ｈ．ＲＮＡ転写の阻害に よってウィルス複製を阻止する；ｉ．ロイペプチンに感受性； ｊ．ＩＦＮα、ＩＦＮβ、ＩＦＮγ、ＩＬ４、ＩＬ６、ＴＧＦ−β、ＴＮＦα若 しくはＴＮＦβに特異的な抗体に結合しない；並びに、ｋ．表１に挙げられてい るサイトカインのいずれでもない。
2. ２．１以上の活性成分及び１以上の医薬的に許容可能な賦形剤の両方からなるユ ニット投与量形態の医薬組成物であって、１つの活性成分がＣＤ８＋細胞抗ウィ ルス因子であり、該因子は下記の特性によって定義される：ａ．活性化ＣＤ８＋ 細胞から放出される；ｂ．１０〜１２の範囲のｐＨによって生物学的に不活性化 される；ｃ．酸非感受性； ｄ．エーテルに非感受性； ｅ．５６℃３０分間の加熱に耐性； ｆ．トリプシンに耐性； ｇ．ＣＤ４＋細胞の活性化又は増殖に影響を与えない；ｈ．ＲＮＡ転写の阻害に よってウィルス複製を阻止する；ｉ．ロイペプチンに感受性； ｊ．ＩＦＮα、ＩＦＮβ、ＩＦＮγ、ＩＬ４、ＩＬ６、ＴＧＦ−β、ＴＮＦα若 しくはＴＮＦβに特異的な抗体に結合しない；並びに、ｋ．表１に挙げられてい るサイトカインのいずれでもない。
3. ３．前記賦形剤が滅菌水を含む請求の範囲第２項に記載の組成物。
4. ４．前記賦形剤が８．０と６．０の間のｐＫａを有する緩衝剤を更に含む請求の 範囲第３項に記載の組成物。
5. ５．レトロウィルスに感染された哺乳類を治療する方法であって、ＣＤ８＋細胞 抗ウィルス因子を、ウィルスの複製を阻害するために有効な量で投与することを 含み、ここで前記因子は下記特性によって定義される：ａ．活性化ＣＤ８＋細胞 から放出される；ｂ．１０〜１２の範囲のｐＨによって生物学的に不活性化され る；ｃ．酸非感受性； ｄ．エーテルに非感受性； ｅ．５６℃３０分間の加熱に耐性； ｆ．トリプシンに耐性； ｇ．ＣＤ４＋細胞の活性化又は増殖に影響を与えない；ｈ．ＲＮＡ転写の阻害に よってウィルス複製を阻止する；ｉ．ロイペプチンに感受性； ｊ．ＩＦＮα、ＩＦＮβ、ＩＦＮγ、ＩＬ４、ＩＬ６、ＴＧＦ−β、ＴＮＦα若 しくはＴＮＦβに特異的な抗体に結合しない；並びに、ｋ．表１に挙げられてい るサイトカインのいずれでもない。
6. ６．前記レトロウイルスがレンチウィルスである請求の範囲第５項に記載の方法 。
7. ７．前記レンチウィルスがヒト免疫不全ウィルスである請求の範囲第６項に記載 の方法。
8. ８．前記哺乳類がヒトである請求の範囲第５項に記載の方法。
9. ９．前記投与が静脈経路である請求の範囲第５項に記載の方法。
10. １０．前記投与量がヒト体重キログラム当たり約１０００〜約１００００ユニッ トである請求の範囲第５項に記載の方法。
11. １１．細胞中のレトロウイルスの複製を、該細胞を下記の特性によって定義され るＣＤ８＋細胞抗ウィルス因子の実質的に純性な組成物に暴露することによって 阻害する方法： ａ．活性化ＣＤ８＋細胞から放出される；ｂ．１０〜１２の範囲のｐＨによって 生物学的に不活性化される；ｃ．酸非感受性； ｄ．エーテルに非感受性； ｅ．５６℃３０分間の加熱に耐性； ｆ．トリプシンに耐性； ｇ．ＣＤ４＋細胞の活性化又は増殖に影響を与えない；ｈ．ＲＮＡ転写の阻害に よってウィルス複製を阻止する；ｉ．ロイペプチンに感受性； ｊ．ＩＦＮα、ＩＦＮβ、ＩＦＮγ、ＩＬ４、ＩＬ６、ＴＧＦ−β、ＴＮＦα若 しくはＴＮＦβに特異的な抗体に結合しない；並びに、ｋ．表１に挙げられてい るサイトカインのいずれでもない。
12. １２．前記レトロウイルスがレンチウィルスである請求の範囲第１１項に記載の 方法。
13. １３．前記レンチウィルスがヒト免疫不全ウィルスである請求の範囲第１１項に 記載の方法。
14. １４．前記暴露がｉｎ　ｖｉｖｏで生じる請求の範囲第１１項に記載の方法。