JPH07260763A - 高速液体クロマトグラフィー用カラム - Google Patents
高速液体クロマトグラフィー用カラムInfo
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- JPH07260763A JPH07260763A JP5582494A JP5582494A JPH07260763A JP H07260763 A JPH07260763 A JP H07260763A JP 5582494 A JP5582494 A JP 5582494A JP 5582494 A JP5582494 A JP 5582494A JP H07260763 A JPH07260763 A JP H07260763A
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-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/60—Construction of the column
- G01N30/6052—Construction of the column body
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/60—Construction of the column
- G01N30/6095—Micromachined or nanomachined, e.g. micro- or nanosize
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- Treatment Of Liquids With Adsorbents In General (AREA)
- Filtering Materials (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【目的】 目詰まりが生じにくく、低圧力で長時間通液
することができる高速液体クロマトグラフィー用カラム
を提供する。 【構成】 カラム本体１のエンドフィッティングフィル
タとして、ステンレス鋼繊維を積層しそれを焼結圧縮成
形して空隙率を40〜90％とした繊維焼結フィルタ４を用
いる。 【効果】 従来品に比較して目詰まりしにくく、また再
生も容易である。
することができる高速液体クロマトグラフィー用カラム
を提供する。 【構成】 カラム本体１のエンドフィッティングフィル
タとして、ステンレス鋼繊維を積層しそれを焼結圧縮成
形して空隙率を40〜90％とした繊維焼結フィルタ４を用
いる。 【効果】 従来品に比較して目詰まりしにくく、また再
生も容易である。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、イオン交換クロマトグ
ラフィー、疏水性クロマトグラフィー、ゲルろ過クロマ
トグラフィー、アフィニティクロマトグラフィー等の各
種クロマトグラフィーや、蛋白質またはペプチドの分離
・精製等に使用される高速液体クロマトグラフィー用カ
ラムに関するものである。
ラフィー、疏水性クロマトグラフィー、ゲルろ過クロマ
トグラフィー、アフィニティクロマトグラフィー等の各
種クロマトグラフィーや、蛋白質またはペプチドの分離
・精製等に使用される高速液体クロマトグラフィー用カ
ラムに関するものである。
【０００２】
【従来の技術】上記のような目的で使用される高速液体
クロマトグラフィー用カラムとしては、内部に充填剤を
収納したステンレス等からなるカラム本体に、ゴミ、ほ
こり等の夾雑物を除去するためのエンドフィッティング
フィルタを組み合わせたものが一般的である。そしてこ
のエンドフィッティングフィルタとしては、ステンレス
鋼粉末を均一焼結した焼結フィルタが用いられてきた。
この焼結フィルタは強度や耐化学薬品性に優れ、NaOHで
カラムの再生を行うことができるとともに、耐圧性にも
優れており、100kg/cm2 の圧力に耐える利点がある。
クロマトグラフィー用カラムとしては、内部に充填剤を
収納したステンレス等からなるカラム本体に、ゴミ、ほ
こり等の夾雑物を除去するためのエンドフィッティング
フィルタを組み合わせたものが一般的である。そしてこ
のエンドフィッティングフィルタとしては、ステンレス
鋼粉末を均一焼結した焼結フィルタが用いられてきた。
この焼結フィルタは強度や耐化学薬品性に優れ、NaOHで
カラムの再生を行うことができるとともに、耐圧性にも
優れており、100kg/cm2 の圧力に耐える利点がある。
【０００３】ところがこのようなステンレス鋼粉末焼結
フィルタは空隙率が30％程度と小さいために目詰まりし
易いという欠点がある。このため、例えば血漿蛋白質の
分離・精製を行うような場合には、0.45μm のフィルタ
を用いて糖蛋白であるフィブリノーゲンや脂質を予備的
にろ過したうえでサンプルを高速液体クロマトグラフィ
ー用カラムに通液しているが、それでも短時間のうちに
ステンレス鋼粉末焼結フィルタが目詰まりして圧力損失
が上昇し、100kg/cm2 以上の高圧を加えなければならな
くなって使用不能となっていた。また目詰まりしていな
い状態でも圧力損失が大きいという問題点があった。
フィルタは空隙率が30％程度と小さいために目詰まりし
易いという欠点がある。このため、例えば血漿蛋白質の
分離・精製を行うような場合には、0.45μm のフィルタ
を用いて糖蛋白であるフィブリノーゲンや脂質を予備的
にろ過したうえでサンプルを高速液体クロマトグラフィ
ー用カラムに通液しているが、それでも短時間のうちに
ステンレス鋼粉末焼結フィルタが目詰まりして圧力損失
が上昇し、100kg/cm2 以上の高圧を加えなければならな
くなって使用不能となっていた。また目詰まりしていな
い状態でも圧力損失が大きいという問題点があった。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】本発明は上記した従来
の問題点を解決し、目詰まりが生じにくく低圧力で長時
間通液することができる高速液体クロマトグラフィー用
カラムを提供するためになされたものである。
の問題点を解決し、目詰まりが生じにくく低圧力で長時
間通液することができる高速液体クロマトグラフィー用
カラムを提供するためになされたものである。
【０００５】
【課題を解決するための手段】上記の課題を解決するた
めになされた本発明は、充填剤が収納されたカラム本体
のエンドフィッティングフィルタとして、ステンレス鋼
繊維を積層しそれを焼結した繊維焼結フィルタを用いた
ことを特徴とするものである。なお、強度を高めるため
に繊維焼結フィルタに金網を挟みこんでおくことが好ま
しい。
めになされた本発明は、充填剤が収納されたカラム本体
のエンドフィッティングフィルタとして、ステンレス鋼
繊維を積層しそれを焼結した繊維焼結フィルタを用いた
ことを特徴とするものである。なお、強度を高めるため
に繊維焼結フィルタに金網を挟みこんでおくことが好ま
しい。
【０００６】
【作用】本発明の高速液体クロマトグラフィー用カラム
は、エンドフィッティングフィルタとして、ステンレス
鋼短繊維を積層し、それを焼結圧縮成型した繊維焼結フ
ィルタを用いたので、ゴミ、ほこり等の夾雑物をろ過し
てカラム本体に夾雑物が侵入することを防止することが
できる。しかもこの繊維焼結フィルタは実施例に示すよ
うに目詰まりを生じにくく、従来のような予備的なろ過
を施すことなく直接サンプルをカラムにチャージして
も、目詰まりや圧力上昇を生ずることなく分離・精製が
可能である。なお、繊維焼結フィルタの空隙率が40％未
満であると目詰まりが生じ易くなり、空隙率が90％を越
えると金網で挟み込んでも強度的に耐えられずつぶれて
しまうため、高速液体クロマトグラフィー用カラムとし
ては使用できなくなる。
は、エンドフィッティングフィルタとして、ステンレス
鋼短繊維を積層し、それを焼結圧縮成型した繊維焼結フ
ィルタを用いたので、ゴミ、ほこり等の夾雑物をろ過し
てカラム本体に夾雑物が侵入することを防止することが
できる。しかもこの繊維焼結フィルタは実施例に示すよ
うに目詰まりを生じにくく、従来のような予備的なろ過
を施すことなく直接サンプルをカラムにチャージして
も、目詰まりや圧力上昇を生ずることなく分離・精製が
可能である。なお、繊維焼結フィルタの空隙率が40％未
満であると目詰まりが生じ易くなり、空隙率が90％を越
えると金網で挟み込んでも強度的に耐えられずつぶれて
しまうため、高速液体クロマトグラフィー用カラムとし
ては使用できなくなる。
【０００７】
【実施例】以下に本発明を図示の実施例によって更に詳
細に説明する。図１はコンプレッションタイプの高速液
体クロマトグラフィー用カラムを示すもので、１は内部
に充填剤が収納されたパイプ状のカラム本体、２はナッ
ト３によってカラム本体１に接続されるエンドフィッテ
ィングである。このエンドフィッティング２の内部に
は、エンドフィッティングフィルタとしてステンレス鋼
繊維を積層しそれを焼結した繊維焼結フィルタ４が設け
られている。
細に説明する。図１はコンプレッションタイプの高速液
体クロマトグラフィー用カラムを示すもので、１は内部
に充填剤が収納されたパイプ状のカラム本体、２はナッ
ト３によってカラム本体１に接続されるエンドフィッテ
ィングである。このエンドフィッティング２の内部に
は、エンドフィッティングフィルタとしてステンレス鋼
繊維を積層しそれを焼結した繊維焼結フィルタ４が設け
られている。
【０００８】この繊維焼結フィルタ４はその周囲にテフ
ロンシール５を備え、エンドフィッティング２の内部に
密着するように構成されている。そしてプラグ６を通じ
て供給されるサンプル中のゴミ、ほこり等の夾雑物をろ
過し、カラム本体１に夾雑物が侵入することを防止して
いる。
ロンシール５を備え、エンドフィッティング２の内部に
密着するように構成されている。そしてプラグ６を通じ
て供給されるサンプル中のゴミ、ほこり等の夾雑物をろ
過し、カラム本体１に夾雑物が侵入することを防止して
いる。
【０００９】焼結金網フィルタ４はステンレス鋼短繊維
を焼結して空隙率を40〜90％としたものであり、図２に
その構造を概念的に示す。繊維直径が５〜20μm程度の
ステンレス鋼短繊維を積層し、高温の制御雰囲気の中で
焼結圧縮成形し、その焼結体をより太径で目の粗いステ
ンレス鋼の金網で挟み込んで強度を持たせてある。
を焼結して空隙率を40〜90％としたものであり、図２に
その構造を概念的に示す。繊維直径が５〜20μm程度の
ステンレス鋼短繊維を積層し、高温の制御雰囲気の中で
焼結圧縮成形し、その焼結体をより太径で目の粗いステ
ンレス鋼の金網で挟み込んで強度を持たせてある。
【００１０】この繊維焼結フィルタ４はステンレス鋼繊
維どうしが焼結されているために線切れが少なく、安定
したろ過精度が得られること、大きな耐圧性が得られる
こと、耐化学薬品性に優れること、そして他の構造のフ
ィルタに比較して目詰まりが生じにくく、また洗浄によ
り容易に再生できること等の優れた特徴を持っている。
しかもステンレスは蛋白を吸着しにくいので、この意味
からも目詰まりが生じにくいものである。従って本発明
の高速液体クロマトグラフィー用カラムは、直接サンプ
ルをカラムにチャージしても繊維焼結フィルタ４が目詰
まりすることなく、長時間にわたり分離・精製が可能で
ある。
維どうしが焼結されているために線切れが少なく、安定
したろ過精度が得られること、大きな耐圧性が得られる
こと、耐化学薬品性に優れること、そして他の構造のフ
ィルタに比較して目詰まりが生じにくく、また洗浄によ
り容易に再生できること等の優れた特徴を持っている。
しかもステンレスは蛋白を吸着しにくいので、この意味
からも目詰まりが生じにくいものである。従って本発明
の高速液体クロマトグラフィー用カラムは、直接サンプ
ルをカラムにチャージしても繊維焼結フィルタ４が目詰
まりすることなく、長時間にわたり分離・精製が可能で
ある。
【００１１】図３は低圧用カラムの実施例を示すもの
で、カラム本体１はガラスチューブにより構成されてお
り、充填剤の両端面にエンドフィッティングフィルタと
して、図４に示す繊維焼結フィルタ４が設けられてい
る。図４のフィルタも周囲にテフロンシール５を備えて
いる。
で、カラム本体１はガラスチューブにより構成されてお
り、充填剤の両端面にエンドフィッティングフィルタと
して、図４に示す繊維焼結フィルタ４が設けられてい
る。図４のフィルタも周囲にテフロンシール５を備えて
いる。
【００１２】図５は低圧用カラムの他の実施例を示すも
ので、カラム本体１はプラスチック製であり、やはり充
填剤の両端面にエンドフィッティングフィルタとして繊
維焼結フィルタ４が設けられている。図５のカラムはカ
ラム本体１にプラスチック製のキャップ７を嵌合して使
用される。
ので、カラム本体１はプラスチック製であり、やはり充
填剤の両端面にエンドフィッティングフィルタとして繊
維焼結フィルタ４が設けられている。図５のカラムはカ
ラム本体１にプラスチック製のキャップ７を嵌合して使
用される。
【００１３】図６は各種のフィルタをエンドフィッティ
ングフィルタとした高速液体クロマトグラフィー用カラ
ムについて、その使用寿命をテストした結果を示すグラ
フである。フィルタの直径はいずれも2.54mm、表面積は
0.05cm2 、厚さ３mm、ろ過孔径は５μm である。このカ
ラムに腹水を毎分10mLの流量で流し、カラムの腹水透過
量と圧損の増加量との関係をプロットした。
ングフィルタとした高速液体クロマトグラフィー用カラ
ムについて、その使用寿命をテストした結果を示すグラ
フである。フィルタの直径はいずれも2.54mm、表面積は
0.05cm2 、厚さ３mm、ろ過孔径は５μm である。このカ
ラムに腹水を毎分10mLの流量で流し、カラムの腹水透過
量と圧損の増加量との関係をプロットした。
【００１４】その結果、白丸で示した繊維焼結フィルタ
４を使用したカラムは腹水透過量が５mLとなっても圧損
の増加は小さく、特に空隙率を60％とした場合には圧損
の増加はゼロであった。また空隙率を50％としたものは
腹水透過量が５mLにおける圧損の増加は１kg/cm2であ
り、空隙率を40％とすると腹水透過量が５mLにおける圧
損の増加は８kg/cm2まで上昇したが、従来品に比べ十分
に効果のあることが分かる。このデータからも、繊維焼
結フィルタ４の空隙率を40％以上とすることで従来品に
比べ目詰まりしにくくなることが分かる。なおその他の
フィルタはいずれも圧損の増加が本発明に比較してはる
かに大きく、従来技術として示したステンレス粉末を均
一焼結した焼結フィルタ（黒丸）は、腹水透過量が3.5m
Lにおいて圧損の増加が既に10kg/cm2に達することが分
かる。
４を使用したカラムは腹水透過量が５mLとなっても圧損
の増加は小さく、特に空隙率を60％とした場合には圧損
の増加はゼロであった。また空隙率を50％としたものは
腹水透過量が５mLにおける圧損の増加は１kg/cm2であ
り、空隙率を40％とすると腹水透過量が５mLにおける圧
損の増加は８kg/cm2まで上昇したが、従来品に比べ十分
に効果のあることが分かる。このデータからも、繊維焼
結フィルタ４の空隙率を40％以上とすることで従来品に
比べ目詰まりしにくくなることが分かる。なおその他の
フィルタはいずれも圧損の増加が本発明に比較してはる
かに大きく、従来技術として示したステンレス粉末を均
一焼結した焼結フィルタ（黒丸）は、腹水透過量が3.5m
Lにおいて圧損の増加が既に10kg/cm2に達することが分
かる。
【００１５】図７は従来技術として示したステンレス鋼
粉末焼結フィルタとステンレス鋼繊維焼結フィルタにつ
いて、その流量と圧力損失の相関をテストした結果を示
すグラフである。操作条件は図６と同様であり、ステン
レス鋼繊維焼結フィルタの空隙率は60％のものであっ
た。その結果、黒丸で示したステンレス鋼繊維焼結フィ
ルタに比べて、白丸で示した従来技術の粉末焼結フィル
タは圧力損失が1.6 倍大きいことが分かる。
粉末焼結フィルタとステンレス鋼繊維焼結フィルタにつ
いて、その流量と圧力損失の相関をテストした結果を示
すグラフである。操作条件は図６と同様であり、ステン
レス鋼繊維焼結フィルタの空隙率は60％のものであっ
た。その結果、黒丸で示したステンレス鋼繊維焼結フィ
ルタに比べて、白丸で示した従来技術の粉末焼結フィル
タは圧力損失が1.6 倍大きいことが分かる。
【００１６】図８はステンレス鋼粉末焼結フィルタと
ステンレス鋼繊維焼結フィルタ（空隙率60％) につい
て、サンプル１mL処理の実験を繰り返し行うことにより
上昇した圧力損失をプロットしたグラフである。アフィ
ニティークロマトグラフィーカラムにそれぞれのフィル
タを取付け、血漿サンプル１mL処理の実験を繰り返し行
った。その結果、従来品が５回で使用不能になるのに対
し、本発明品はその４倍の寿命である20回まで使うこと
ができた。
ステンレス鋼繊維焼結フィルタ（空隙率60％) につい
て、サンプル１mL処理の実験を繰り返し行うことにより
上昇した圧力損失をプロットしたグラフである。アフィ
ニティークロマトグラフィーカラムにそれぞれのフィル
タを取付け、血漿サンプル１mL処理の実験を繰り返し行
った。その結果、従来品が５回で使用不能になるのに対
し、本発明品はその４倍の寿命である20回まで使うこと
ができた。
【００１７】
【発明の効果】以上に説明したように、本発明の高速液
体クロマトグラフィー用カラムは、エンドフィッティン
グフィルタとして、ステンレス鋼繊維を積層しそれを焼
結圧縮成形して空隙率を40〜90％とした繊維焼結フィル
タを用いたので、目詰まりが生じにくく、低圧力で長時
間通液することができる利点がある。
体クロマトグラフィー用カラムは、エンドフィッティン
グフィルタとして、ステンレス鋼繊維を積層しそれを焼
結圧縮成形して空隙率を40〜90％とした繊維焼結フィル
タを用いたので、目詰まりが生じにくく、低圧力で長時
間通液することができる利点がある。
【図１】本発明の第１の実施例を示す一部切欠正面図で
ある。
ある。
【図２】実施例の繊維焼結フィルタを示す拡大図であ
る。
る。
【図３】本発明の第２の実施例を示す一部切欠正面図で
ある。
ある。
【図４】第２の実施例の繊維焼結フィルタを示す正面図
と断面図である。
と断面図である。
【図５】本発明の第３の実施例を示す一部切欠正面図で
ある。
ある。
【図６】各種フィルタを用いたカラムについての、腹水
透過量と圧損の増加量との関係を示すグラフである。
透過量と圧損の増加量との関係を示すグラフである。
【図７】本発明品と従来品についての、流量と圧力損失
の関係を示すグラフである。
の関係を示すグラフである。
【図８】本発明品と従来品についての、実験回数と圧力
損失の増加量との関係を示すグラフである。
損失の増加量との関係を示すグラフである。
１ カラム本体、２ エンドフィッティング、４ 繊維
焼結フィルタ
焼結フィルタ
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 山田 佐一 愛知県名古屋市瑞穂区須田町２番56号 日 本碍子株式会社内
Claims (2)
- 【請求項１】 充填剤が収納されたカラム本体のエンド
フィッティングフィルタとして、ステンレス鋼繊維を積
層しそれを焼結した繊維焼結フィルタを用いたことを特
徴とする高速液体クロマトグラフィー用カラム。 - 【請求項２】 ステンレス鋼繊維の繊維直径が５〜20μ
m 、空隙率が40〜90％である請求項１に記載の高速液体
クロマトグラフィー用カラム。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP5582494A JPH07260763A (ja) | 1994-03-25 | 1994-03-25 | 高速液体クロマトグラフィー用カラム |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP5582494A JPH07260763A (ja) | 1994-03-25 | 1994-03-25 | 高速液体クロマトグラフィー用カラム |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH07260763A true JPH07260763A (ja) | 1995-10-13 |
Family
ID=13009715
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP5582494A Withdrawn JPH07260763A (ja) | 1994-03-25 | 1994-03-25 | 高速液体クロマトグラフィー用カラム |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH07260763A (ja) |
Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2006138724A (ja) * | 2004-11-11 | 2006-06-01 | Sekisui Chem Co Ltd | 液体クロマトグラフィー用フィルター、該フィルターが一体化された液体クロマトグラフィー用カラム、該フィルターを用いた液体クロマトグラフィーシステム、及び該フィルターを用いた液体クロマトグラフィーによる測定方法 |
| JP2006189427A (ja) * | 2004-12-09 | 2006-07-20 | Sekisui Chem Co Ltd | 液体クロマトグラフィー用フィルタ及び液体クロマトグラフィー用カラム |
| JP2008256364A (ja) * | 2007-03-30 | 2008-10-23 | Kurita Water Ind Ltd | 液体クロマトグラフィ用のフィルタ、その製造方法および液体クロマトグラフィ装置 |
| JP2010014545A (ja) * | 2008-07-03 | 2010-01-21 | Kurita Water Ind Ltd | 液体クロマトグラフィ装置 |
| WO2013047563A1 (ja) | 2011-09-29 | 2013-04-04 | 積水メディカル株式会社 | 液体クロマトグラフィーによる安定型ヘモグロビンＡ１ｃの測定方法、並びに、液体クロマトグラフィーによる安定型ヘモグロビンＡ１ｃと異常ヘモグロビンとの同時測定法 |
| US8999156B2 (en) | 2004-03-05 | 2015-04-07 | Waters Technologies Corporation | Frit for high pressure liquid chromatography |
-
1994
- 1994-03-25 JP JP5582494A patent/JPH07260763A/ja not_active Withdrawn
Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US8999156B2 (en) | 2004-03-05 | 2015-04-07 | Waters Technologies Corporation | Frit for high pressure liquid chromatography |
| JP2006138724A (ja) * | 2004-11-11 | 2006-06-01 | Sekisui Chem Co Ltd | 液体クロマトグラフィー用フィルター、該フィルターが一体化された液体クロマトグラフィー用カラム、該フィルターを用いた液体クロマトグラフィーシステム、及び該フィルターを用いた液体クロマトグラフィーによる測定方法 |
| JP2006189427A (ja) * | 2004-12-09 | 2006-07-20 | Sekisui Chem Co Ltd | 液体クロマトグラフィー用フィルタ及び液体クロマトグラフィー用カラム |
| JP2008256364A (ja) * | 2007-03-30 | 2008-10-23 | Kurita Water Ind Ltd | 液体クロマトグラフィ用のフィルタ、その製造方法および液体クロマトグラフィ装置 |
| JP2010014545A (ja) * | 2008-07-03 | 2010-01-21 | Kurita Water Ind Ltd | 液体クロマトグラフィ装置 |
| WO2013047563A1 (ja) | 2011-09-29 | 2013-04-04 | 積水メディカル株式会社 | 液体クロマトグラフィーによる安定型ヘモグロビンＡ１ｃの測定方法、並びに、液体クロマトグラフィーによる安定型ヘモグロビンＡ１ｃと異常ヘモグロビンとの同時測定法 |
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A300 | Withdrawal of application because of no request for examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A300 Effective date: 20010605 |