JPH07124543A - Purification of polluted soil using highly water-absorbent polymer - Google Patents

Purification of polluted soil using highly water-absorbent polymer

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JPH07124543A
JPH07124543A JP5274079A JP27407993A JPH07124543A JP H07124543 A JPH07124543 A JP H07124543A JP 5274079 A JP5274079 A JP 5274079A JP 27407993 A JP27407993 A JP 27407993A JP H07124543 A JPH07124543 A JP H07124543A
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microorganisms
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Abstract

PURPOSE:To hold the number of charged bacteria or the decomposition activity of pollutants to a good state by protecting charged bacteria from the predation due to a protozoan by charging bacteria for purifying soil pollutants to polluted soil in a state held to a carrier containing a highly water-absorbable polymer. CONSTITUTION:In the purification of polluted soil, bacteria are supported on a carrier containing a highly water-absorbable polymer to be charged to soil. By this method, moisture is properly supplied to charged bacteria and these bacteria are protected from the competition with indigenous bacteria and the predation due to soil bacteria and the decomposition activity of charged bacteria to pollutans (especially, volatile organochlorine compd. such as trichloroethylene) in soil is kept. As a carrier structure, porous materials are bonded to highly water-absorbable polymer particles 1 or highly water-absorbable polymer particles are interposed between the porous materials 2 as a binder. As bacteria, aerobic bacteria belonging to the genus Pseudomonas are pref. used.

Description

【発明の詳細な説明】Detailed Description of the Invention

【0001】[0001]

【産業上の利用分野】本発明は、土壌汚染物質の分解能
を有する土壌汚染物質浄化用の微生物を高吸水性ポリマ
ーを有する担体に保持させて土壌に投与する土壌浄化法
に関する。
BACKGROUND OF THE INVENTION 1. Field of the Invention The present invention relates to a soil purification method in which a microorganism having a capability of degrading soil pollutants for purification of soil pollutants is supported on a carrier having a superabsorbent polymer and administered to the soil.

【0002】[0002]

【従来の技術】近年、各種の有害難分解性化学物質が土
壌、河川、海、空気中等において検出されており、これ
らの物質による汚染の進行が問題となっている。なかで
も有機塩素系化合物による土壌汚染は深刻な問題となっ
てきており、汚染の拡大を防止していくとともに、汚染
された環境を再生していく技術の確立が強く望まれてい
る。例えば、ガス製造プラントサイト、製油所、石油精
製所跡地、燃料基地跡地、パルプ工場跡地などにおいて
土壌汚染が問題となっており、これらの汚染土壌のを浄
化するための土壌修復法に対するニーズが高い。
2. Description of the Related Art In recent years, various harmful persistent chemical substances have been detected in soil, rivers, sea, air, etc., and progress of pollution by these substances has become a problem. In particular, soil pollution due to organochlorine compounds has become a serious problem, and it is strongly desired to establish a technique for preventing the spread of pollution and regenerating the polluted environment. For example, soil pollution is a problem at gas manufacturing plant sites, refineries, oil refinery sites, fuel base sites, pulp factory sites, etc., and there is a great need for soil remediation methods to purify these contaminated soils. .

【0003】また、土壌汚染は土地の再利用を妨げるば
かりでなく、汚染物質が地下水に流れ込んで拡散するこ
とによる汚染地域の拡大を引き起こす危険性が大きいの
で、土壌修復技術が早急に確立されることが強く要望さ
れている。
Further, soil pollution not only hinders the reuse of land, but also has a high risk of causing the expansion of the contaminated area due to the pollutants flowing into groundwater and diffusing. Is strongly requested.

【0004】汚染された土壌から汚染物質を取り除くこ
とにより土壌を元の状態に復帰させる土壌修復法として
は種々の方法が知られ、また試みられている。
Various methods have been known and tried as soil restoration methods for restoring soil to its original state by removing pollutants from polluted soil.

【0005】例えば、土壌中より汚染物質を吸引する真
空抽出法等の物理化学的な方法がある。しかしながら、
物理化学的方法には、高いコスト、低い操作性、低濃度
で存在する汚染物質の処理の困難性など、数多くの問題
がある。
For example, there is a physicochemical method such as a vacuum extraction method for sucking pollutants from the soil. However,
Physicochemical methods have many problems, such as high cost, low operability, and difficulty in treating pollutants present in low concentrations.

【0006】こうしたなかで、微生物を利用した土壌の
浄化方法、いわゆるバイオレメディエーションに対する
期待が高まっている。微生物を利用する方法としては、
例えば対象とされる土壌中にもともと自然に存在する微
生物の機能を高めて汚染物質を分解して無害化するとい
った生態系の自浄能力を強化するものから、更にこの技
術を一歩進めた方法として汚染物質の分解能を有する菌
を外部から積極的に汚染土壌に導入し、汚染土壌の修復
を促進する方法等が試みられている。
Under these circumstances, expectations for a soil remediation method using microorganisms, so-called bioremediation, are increasing. As a method of utilizing microorganisms,
For example, from the one that enhances the self-cleaning ability of the ecosystem by degrading pollutants and detoxifying them by enhancing the function of microorganisms that naturally exist in the target soil, pollution as a way to take this technology one step further Attempts have been made, for example, to positively introduce bacteria having the ability to decompose substances into the contaminated soil from the outside to promote the repair of the contaminated soil.

【0007】[0007]

【発明が解決しようとする課題】土壌中に検出される汚
染物質の分解能を有する微生物としては数多くのものが
知られている。しかし、こうした微生物を土壌に直接投
与しても、その微生物の数は土壌中で短期間の内に急激
に減少してしまい、所期の浄化効果が得られないことが
多い。
There are many known microorganisms capable of degrading pollutants detected in soil. However, even if such microorganisms are directly administered to the soil, the number of the microorganisms rapidly decreases in the soil within a short period of time, and the desired purification effect is often not obtained.

【0008】そこで従来、土壌中に投与した微生物の減
少という問題を解決するため、投与した微生物の生育に
適した培地を大量に土壌に投与することが行われている
が、コストの問題や培地による二次汚染の懸念を憂慮す
る声もある。このため培地の大量投入を必要とせず、土
壌中での投与微生物の生存を長期化させ、汚染処理能力
を維持する方法の開発が要望されている。
Therefore, in order to solve the problem of the decrease of microorganisms administered to the soil, a large amount of medium suitable for the growth of the administered microorganisms has been conventionally administered to the soil. Some people are worried about the possibility of secondary pollution caused by. Therefore, there is a demand for the development of a method for prolonging the survival of administered microorganisms in soil and maintaining the ability to treat pollution without requiring a large amount of medium to be added.

【0009】土壌中に投与した微生物の数に影響を与え
る因子で重要なものの一つとして土壌の水分含量による
微生物への影響を挙げることができる。土壌は、その土
壌のある地域、地形、その土壌における植生、深度、組
成などによって様々な水分含量を示し、これがそこに生
育する微生物の生理活性に多大な影響をもたらしてお
り、汚染された土壌もその例外ではない。
One of the important factors affecting the number of microorganisms administered to soil is the influence of soil water content on microorganisms. Soil shows various water contents depending on the area where the soil is located, topography, vegetation, depth, composition, etc. in the soil, which has a great influence on the physiological activity of microorganisms growing in the soil. Is no exception.

【0010】土壌の水分含量、正確に言うと微生物にと
って利用可能な水分含量が微生物にとって適した値から
はずれと、投与した微生物に良好な増殖や活性が得られ
ない場合が多い。すなわち、一般に、微生物は周囲の環
境の水分が不足してくると活性が低下し、分解微生物の
場合であればその分解速度は低下していく。さらに水分
の不足が進むと耐乾性のない微生物であれば減少、死滅
し、耐乾性のある微生物であっても胞子を形成するなど
活性を極端に低下させたり、休眠してしまい、有害物質
の分解を期待することができなくなる。また、以上のよ
うな乾燥状態とは逆に、環境中の水分が過剰になってく
ると液中の酸素濃度が不足し、投与微生物が好気性であ
る場合には微生物にとって不利な環境となり、活性の低
下や菌数の減少が起る。特に、汚染物質の分解活性が高
い微生物には好気性のものが多いので、このような酸欠
状態は好ましくない場合が多い。
If the water content of the soil, to be precise, the water content available to the microorganism deviates from the value suitable for the microorganism, the administered microorganism often cannot obtain good growth and activity. That is, in general, the activity of microorganisms decreases when the water content of the surrounding environment becomes insufficient, and in the case of degrading microorganisms, the rate of degradation decreases. If the water shortage further progresses, microorganisms that are not drought-resistant will decrease and die, and even drought-resistant microorganisms will have extremely reduced activity such as forming spores, or will be dormant, and will It becomes impossible to expect disassembly. Further, contrary to the dry state as described above, when the water content in the environment becomes excessive, the oxygen concentration in the liquid becomes insufficient, and when the administered microorganism is aerobic, it becomes a disadvantageous environment for the microorganism, A decrease in activity and a decrease in the number of bacteria occur. In particular, since many microorganisms having a high activity of decomposing pollutants are aerobic, such an oxygen-deficient state is often not preferable.

【0011】土壌中での微生物の減少の他の原因として
は、もともと土壌中に分布していた微生物との競合関
係、特に原生動物による投与微生物の捕食があり、原生
動物による捕食を回避することも投与した微生物の生残
性向上に必要である。
Another cause of reduction of microorganisms in soil is competition with microorganisms originally distributed in soil, especially predation of administered microorganisms by protozoa, and avoiding predation by protozoa. Is also required to improve the survival of the administered microorganisms.

【0012】一方、バイオレメディエーションでは以上
のような微生物の生残性向上の他に、投与した微生物を
土壌中にいかに効率良く拡散させるかという問題もかか
えている。バイオレメディエーションでは、真空抽出等
の物理化学的な方法では処理できなかった低濃度かつ広
範囲の汚染地が対象となるが、実際にこうした土壌を浄
化するためにはその前提条件として分解微生物が汚染土
壌中に拡散することが必要である。しかしながら微生物
の土壌中での移動は容易ではなく、有害物質の存在する
土壌の近傍に微生物が到達させる方法の開発が課題とな
っている。水や空気等を用いて土壌に分解微生物を圧入
する方法、大量の分解微生物を土壌に投与する方法等
が、分解微生物の土壌中での拡散方法として現在採られ
ているが、粘土含有量の多い土壌や低水分含量の土壌な
ど、土壌の種類によって微生物の拡散性は著しく低下す
る。このためさらに現行以外の方法が求められている。
On the other hand, in bioremediation, in addition to the above-mentioned improvement of survival of microorganisms, there is a problem of how to efficiently diffuse the administered microorganisms into the soil. Bioremediation targets low-concentration and wide-range contaminated areas that could not be treated by physicochemical methods such as vacuum extraction, but in order to actually purify such soil, degrading microorganisms are a prerequisite for contaminated soil. It is necessary to diffuse in. However, the movement of microorganisms in soil is not easy, and the development of a method for allowing microorganisms to reach the vicinity of soil in which harmful substances are present has been an issue. The method of injecting degrading microorganisms into soil using water, air, etc., the method of administering a large amount of degrading microorganisms to soil, etc. are currently adopted as the diffusion method of degrading microorganisms in soil. Microbial diffusivity is significantly reduced depending on the type of soil, such as high soil or low water content soil. Therefore, a method other than the current method is required.

【0013】本発明の目的は、土壌に投与した微生物へ
の適度な給水とともに、投与した微生物を原生動物等に
よる捕食から守り、投与微生物数や汚染物質分解活性を
良好な状態に維持し得る土壌浄化法を提供することにあ
る。
The object of the present invention is to provide a suitable water supply to the microorganisms administered to the soil, protect the administered microorganisms from predation by protozoa, etc., and maintain the number of administered microorganisms and the activity of decomposing pollutants in good condition. To provide a purification method.

【0014】本発明の他の目的は、土壌の汚染領域内に
微生物を効果的に拡散させることのできる土壌浄化法を
提供することにある。
Another object of the present invention is to provide a soil remediation method capable of effectively diffusing microorganisms in a contaminated area of soil.

【0015】[0015]

【課題を解決するための手段】上記課題を達成できる本
発明の土壌浄化法は、土壌汚染物質浄化用の微生物を、
高吸水性ポリマー担体に保持させて汚染土壌に投与し、
該汚染土壌を浄化することを特徴とする。
Means for Solving the Problems The soil purification method of the present invention, which can achieve the above-mentioned objects, comprises a microorganism for purification of soil pollutants,
It is held in a super absorbent polymer carrier and administered to contaminated soil,
It is characterized in that the contaminated soil is purified.

【0016】本発明の方法は、担体に土壌に投与する微
生物を保持させて投与することで、投与微生物への適度
な水分の供給と、投与微生物を土着微生物との競合や土
壌微生物による捕食から守り、土壌中での投与微生物の
汚染物質分解活性を維持するものであり、この微生物を
保持させる担体に高吸水性ポリマーが用いられているこ
とによって、保持微生物への水分の適度な供給が確実な
ものとなる。
In the method of the present invention, a carrier is used to hold the microorganisms to be administered to the soil so that the microorganisms to be administered are appropriately supplied with water, and the microorganisms to be administered are prevented from competing with the indigenous microorganisms and predation by the soil microorganisms. It protects and maintains the activity of the administered microorganisms to decompose pollutants in the soil.The superabsorbent polymer is used as a carrier to hold the microorganisms, which ensures the proper supply of water to the retained microorganisms. It will be

【0017】この高吸水性ポリマーとは、水に溶けるこ
となく自重の数十〜数百培もの水を吸収し、保持する能
力を有するポリマーである。水と親和性の高いイオン性
基を持ち、ポリマー分子鎖が水中に拡散、溶解してしま
わないよう架橋、不溶化した構造を有している。
This highly water-absorbent polymer is a polymer having the ability to absorb and retain several tens to several hundreds of water of its own weight without dissolving in water. It has an ionic group that has a high affinity for water, and has a structure in which the polymer molecular chain is crosslinked and insolubilized so as not to diffuse and dissolve in water.

【0018】本発明の方法に用いる担体を構成するため
の高吸水性ポリマーとしては、土壌に投入して用いると
いう使用状況を考慮して、ゲル強度が高く耐塩性に優れ
たものが望ましく、例えば農園芸分野で用いられている
ものを利用することができる。具体的には、デンプン−
アクリロニトリルグラフト重合体加水分解物、デンプン
−アクリル酸グラフト重合体、デンプン−スチレンスル
ホン酸グラフト重合体、デンプン−ビニルスルホン酸グ
ラフト重合体、デンプン−アクリルアミドグラフト重合
体、セルロース−アクリロニトリルグラフト重合体、セ
ルロース−スチレンスルホン酸グラフト重合体、カルボ
キシメチルセルロース架橋体、ヒアルロン酸、アガロー
ス、ポリビニルアルコール架橋重合体、ポリアクリル酸
ナトリウム架橋体、アクリル酸ナトリウム−ビニルアル
コール共重合体、ポリアクリロニトリル系重合体ケン化
物などを挙げることができ、これらの1種を、または2
種以上を組合せて用いることができる。
As the highly water-absorbent polymer for constituting the carrier used in the method of the present invention, one having high gel strength and excellent salt resistance is desirable in consideration of the situation of use by putting it into soil. What is used in the agricultural and horticultural field can be used. Specifically, starch-
Acrylonitrile graft polymer hydrolyzate, starch-acrylic acid graft polymer, starch-styrene sulfonic acid graft polymer, starch-vinyl sulfonic acid graft polymer, starch-acrylamide graft polymer, cellulose-acrylonitrile graft polymer, cellulose- Styrene sulfonic acid graft polymer, carboxymethyl cellulose cross-linked product, hyaluronic acid, agarose, polyvinyl alcohol cross-linked polymer, sodium polyacrylate cross-linked product, sodium acrylate-vinyl alcohol copolymer, saponified polyacrylonitrile polymer and the like. Can be one of these, or two
A combination of two or more species can be used.

【0019】高吸水性ポリマーを単独で用いる場合、粉
末状、パウダー状、微粉末状、パール状、ビーズ状、フ
レーク状、ブロック状等の各種の形態のものが利用で
き、粒径としては数百μm〜数mmのものが好ましい。
When the super absorbent polymer is used alone, it can be used in various forms such as powder, powder, fine powder, pearl, beads, flakes and blocks, and the particle size is several. It is preferably 100 μm to several mm.

【0020】高吸水性ポリマーは、親水性モノマー(疎
水性モノマーを親水化したものでもよい)を重合し、得
られたポリマーを架橋する方法や、重合によって得られ
たポリマーを架橋し、それを親水化する方法などによっ
て製造することができる。ポリマーの親水化処理として
は、親水性基含有モノマーの重合によるポリマー調製、
ポリマーへの親水性基の導入、親水性基含有モノマーに
よるポリマーのグラフト化、親水性基含有ポリマーによ
るポリマーのグラフト化、ポリマーのケン化あるいは加
水分解処理などの方法が利用できる。また、親水性モノ
マーの重合により得られたポリマーの架橋・不溶化処理
としては、架橋剤による網状化、架橋性モノマーの導入
による網状化、自己架橋による網状化、光・放射線照射
による網状化、疎水性モノマーの共重合による不溶化、
結晶ポリマーブロックの導入による不溶化、多価金属イ
オンによる架橋等の方法がある。
The superabsorbent polymer is obtained by polymerizing a hydrophilic monomer (which may be a hydrophobized hydrophobic monomer) and crosslinking the obtained polymer, or by crosslinking the polymer obtained by the polymerization. It can be produced by a method of making hydrophilic. As the polymer hydrophilization treatment, polymer preparation by polymerizing a hydrophilic group-containing monomer,
Methods such as introduction of a hydrophilic group into the polymer, grafting of the polymer with a hydrophilic group-containing monomer, grafting of the polymer with a hydrophilic group-containing polymer, saponification or hydrolysis treatment of the polymer can be used. Further, as a cross-linking / insolubilizing treatment of a polymer obtained by polymerizing a hydrophilic monomer, reticulation by a cross-linking agent, reticulation by introducing a cross-linking monomer, reticulation by self-crosslinking, reticulation by light / radiation irradiation, hydrophobic treatment Insolubilization due to the copolymerization of hydrophilic monomers
There are methods such as insolubilization by introducing a crystalline polymer block and cross-linking with a polyvalent metal ion.

【0021】本発明の方法に用いる担体は、微生物を保
持できる多孔質体を更に含むもので合ってもよい。この
ような多孔質体としては、例えば、微生物のマイクロハ
ビタットを形成できる多孔質のものが好ましい。多孔質
体を併用した場合の担体の構造の一例を図1(a)〜
(d)に模式的に示した。図1(a)、(b)は高吸水
性ポリマーと多孔質体を混合、攪拌して作製した担体の
構造を示し、図1(a)は高吸水性ポリマー粒子に多孔
質体が付着したもの、図1(b)は多孔質体の間隙に高
吸水性ポリマーがバインダーとして介在してこれらの集
合体を形成したものを示す。図1(c)は高吸水性ポリ
マー表面に多孔質体層を形成させた担体であり、図1
(d)は高吸水性ポリマー表面層に多孔質体が埋め込ま
れた構造の担体である。これらの担体は、例えば高吸水
性ポリマーからなる粒状体を形成する際の造粒条件や高
吸水性ポリマーと多孔質体の材質、混合比等を選択する
ことで得られる。形状は主に粒状またはブロック状で、
大きさは最小で約500μm、最大2〜3cm、平均的
には1〜5mm程度になる。
The carrier used in the method of the present invention may be a carrier further containing a porous material capable of retaining microorganisms. As such a porous body, for example, a porous body capable of forming a microhabitat of microorganisms is preferable. An example of the structure of a carrier when a porous body is used in combination is shown in FIG.
It is schematically shown in (d). FIGS. 1 (a) and 1 (b) show the structure of a carrier prepared by mixing and stirring a superabsorbent polymer and a porous body, and FIG. 1 (a) shows a porous body attached to superabsorbent polymer particles. FIG. 1 (b) shows a structure in which a super absorbent polymer is present as a binder in the gap between the porous bodies to form these aggregates. FIG. 1 (c) shows a carrier in which a porous layer is formed on the surface of a super absorbent polymer.
(D) is a carrier having a structure in which a porous body is embedded in the superabsorbent polymer surface layer. These carriers can be obtained, for example, by selecting the granulation conditions for forming granules made of the superabsorbent polymer, the materials of the superabsorbent polymer and the porous material, the mixing ratio, and the like. The shape is mainly granular or block-shaped,
The minimum size is about 500 μm, the maximum is 2 to 3 cm, and the average size is about 1 to 5 mm.

【0022】マイクロハビタットとは数μm程度の孔隙
中の微生物の微小な住みかのことをいい、微生物を過酷
な外部環境から守る働きを持つ。例えば、孔隙外が微生
物生存に影響を及ぼすような乾燥状態になっても、マイ
クロハビタット中は毛管水が保持されているため微生物
への水分供給は保たれる。またマイクロハビタット中の
微生物は土壌中の原生動物による捕食を回避することが
できる。そこで投与する微生物のマイクロハビタットを
担体中に人工的に形成させ、この担体を土壌中に投与す
ることにより、微生物の生残性を向上させることが可能
となる。更に、担体を土壌中での拡散に好適な形態とす
ることで、投与微生物の土壌内への分散を効果的に行う
ことが可能となる。
The micro habitat is a minute residence of microorganisms in pores of about several μm and has a function of protecting the microorganisms from a harsh external environment. For example, even if the outside of the pores is in a dry state where it affects the survival of the microorganisms, the water supply to the microorganisms is maintained because the capillary water is retained in the microhabitat. Microorganisms in the microhabitat can also avoid predation by protozoa in the soil. By artificially forming a microhabitat of the microorganism to be administered in a carrier and administering this carrier into the soil, the survival of the microorganism can be improved. Furthermore, by making the carrier into a form suitable for diffusion in the soil, it becomes possible to effectively disperse the administered microorganisms in the soil.

【0023】この多孔質体は粒状、層状など種々の形態
で用いることができ、例えば、セラミックス、ガラス、
ケイ酸カルシウム、シリカ、鹿沼土などのような団粒構
造を持つ土壌粒子のような無機材料、活性炭、ウレタン
フォーム、アニオン交換樹脂、セルロース、リグニン、
キチン、キトサンなどの有機材料からなる多孔質体の1
種又はその2種以上を組合せて用いることができる。こ
の多孔質体としては、土壌中への大量投与を考慮する
と、安価なものが好ましい。
The porous body can be used in various forms such as granular form and layer form. Examples thereof include ceramics, glass,
Inorganic materials such as soil particles with aggregate structure such as calcium silicate, silica, Kanuma soil, activated carbon, urethane foam, anion exchange resin, cellulose, lignin,
One of the porous materials made of organic materials such as chitin and chitosan
It is possible to use one species or a combination of two or more species. As the porous body, an inexpensive one is preferable in consideration of large-scale administration into soil.

【0024】多孔質体を含有する担体を作製する方法と
しては、例えば、吸水前の高吸水性ポリマー粉末に、希
望する微生物を保持させた多孔質体を混合し、ゆるやか
に攪拌しながら適当量の水あるいは培地を注入する。微
生物も同時に保持させる場合にはこので注入される水あ
るいは培地中に微生物菌体を懸濁しておけば良い。もち
ろん微生物の多孔質体への吸着保持量をより多くするた
めに、あらかじめ多孔質体へ微生物を吸着・馴化させて
から高吸水性ポリマーに混合してもよい。高吸水性ポリ
マーと多孔質体の混合物をこのような構成で土壌に散布
した場合、土壌体積あたりの散布量にもよるが、多孔質
体が外部土壌との接触面を持ちながら高吸水性ポリマー
を随伴している状態になっている。
As a method for producing a carrier containing a porous material, for example, a superabsorbent polymer powder before water absorption is mixed with a porous material carrying desired microorganisms, and an appropriate amount is added with gentle stirring. Pour water or culture medium. When the microorganisms are also held at the same time, the microbial cells may be suspended in the water or the medium injected. Of course, in order to increase the amount of the microorganisms adsorbed and retained on the porous body, the microorganisms may be adsorbed and acclimated to the porous body in advance and then mixed with the superabsorbent polymer. When a mixture of superabsorbent polymer and porous material is sprayed on the soil in such a configuration, the superabsorbent polymer while the porous material has a contact surface with the external soil depends on the spray amount per soil volume. It is in a state of being accompanied by.

【0025】以上のような作製方法よりもさらに厳密に
両者を構成させることを要求するときは、高吸水性ポリ
マー担体の周囲の一部分あるいは全体に多孔質体の層が
形成されるように造粒する方法や、高吸水性ポリマー担
体の表面に多孔質体を埋め込稀るように造粒する方法が
用いられる。
When it is required to configure both of them more strictly than the above-mentioned production method, the granulation is performed so that a layer of the porous body is formed on a part or the whole of the periphery of the superabsorbent polymer carrier. And a method of granulating so that the porous body is embedded in the surface of the superabsorbent polymer carrier so as to be rarely used.

【0026】多孔質体の種類は特に限定されないが、担
体の土壌中での移動性や分散性を損なわないものが好ま
しく、例えば数百μm〜数mm程度の粒径の粒子状のも
のが望ましい。また、微生物の吸着や生育に適した構造
や性質を有したもの、例えば数μm〜数十μmの孔隙を
持つ多孔質体や、イオン交換基を表面に持つイオン吸着
性に優れた多孔質体が好適である。
The type of the porous material is not particularly limited, but it is preferable that the mobility or dispersibility of the carrier in the soil is not impaired, and for example, a particulate material having a particle diameter of about several hundred μm to several mm is desirable. . Further, those having a structure and properties suitable for adsorption and growth of microorganisms, for example, a porous body having a pore size of several μm to several tens of μm, or a porous body having an ion exchange group on the surface and excellent in ion adsorption property Is preferred.

【0027】このような高吸水性ポリマーに水分を吸収
させ、これに微生物を保持させれば、浄化の対象となる
土壌が水分含量の低い場合であっても、保持された微生
物は土壌の低水分環境にさらされることなく生残性、増
殖性、分解活性を維持することができる。
When such superabsorbent polymer absorbs water and retains the microorganisms, the retained microorganisms retain the microorganisms in the soil even if the soil to be purified has a low moisture content. It is possible to maintain viability, proliferative activity, and degradative activity without being exposed to a water environment.

【0028】さらに高吸水性ポリマーに水分の代わりに
微生物の生育を促す培地を含浸させれば、水分の供給と
共に栄養素も供給できることになり、汚染土壌が貧栄養
の場合に特に微生物の活性促進に効果を表す。また有害
物質を分解する微生物の中には、有害物質の分解を行う
ために、インデューサーと呼ばれる他の物質の共存が必
要となってくるものもある。例えば、トリクロロエチレ
ン分解菌として知られるいくつかのシュードモナス属の
細菌は、トリクロロエチレンの分解にインデューサーと
して芳香族系有機化合物の存在が必要な場合が多い。こ
うした場合、有害物質の分解が維持されるためには、微
生物の生残もさることながら、インデューサー物質が土
壌中で長期間保持され、かつ分解微生物に供給され続け
ることが必要である。インデューサー物質は、土壌中の
土着の微生物に栄養源として利用されることも多く、ま
た分解微生物の近傍に局所的に存在させることも難し
い。そこでこのインデューサー物質を高吸水性ポリマー
に他の培地と共に含浸させれば、インデューサーが土着
微生物に利用されることなく分解微生物に常時供給さ
れ、微生物の分解活性が維持される。
Furthermore, by impregnating the superabsorbent polymer with a medium that promotes the growth of microorganisms instead of water, nutrients can be supplied together with the supply of water, particularly when the contaminated soil is oligotrophic, to promote the activity of microorganisms. Show the effect. In addition, some microorganisms that decompose harmful substances require the coexistence of other substances called inducers in order to decompose the harmful substances. For example, some Pseudomonas bacteria known as trichlorethylene-degrading bacteria often require the presence of aromatic organic compounds as inducers for the degradation of trichlorethylene. In such a case, in order to maintain the decomposition of harmful substances, it is necessary for the inducer substance to be retained in the soil for a long period of time and to be continuously supplied to the decomposing microorganisms, in addition to survival of the microorganisms. Inducer substances are often used as nutrient sources by indigenous microorganisms in soil, and it is also difficult to make them locally present in the vicinity of degrading microorganisms. Therefore, if this inducer substance is impregnated with a superabsorbent polymer together with another medium, the inducer is constantly supplied to the degrading microorganisms without being utilized by the indigenous microorganisms, and the degrading activity of the microorganisms is maintained.

【0029】また以上のような水分含量の少ない土壌と
は逆に、汚染土壌の水分含量が非常に高い場合(最大溶
水量が90%以上のような場合)、土壌中の酸素濃度は
低下し、好気性分解菌の活性が極度に低下することが問
題となっていたが、こうした好気性分解菌を保持した水
分未吸収の高吸水性ポリマーを投与すれば、高吸水性ポ
リマーが過剰の水分を吸収することにより、ポリマー周
辺に気相空間を形成させ、通気性を向上させることで保
持した微生物に酸素を供給することができる。
Contrary to the soil having a low water content as described above, when the water content of the contaminated soil is very high (when the maximum amount of dissolved water is 90% or more), the oxygen concentration in the soil decreases. However, it has been a problem that the activity of aerobic degrading bacteria is extremely reduced. However, if such a water-absorptive superabsorbent polymer retaining aerobic degrading bacteria is administered, the superabsorbent polymer will have excessive water content. It is possible to supply oxygen to the retained microorganisms by forming a gas phase space around the polymer by improving the air permeability by absorbing the oxygen.

【0030】高吸水性ポリマーが保持している微生物さ
らには増殖によってポリマーから脱離した微生物に水分
を供給しつつ、土壌中の過剰な水分を除去するという作
用は、原生動物による分解微生物の捕食を回避する上で
も有効である。土壌中の原生動物の移動は主に土壌水分
を介して行われており、土壌の含水量によって大きく左
右される。例えば細菌を捕食する原生動物の代表である
コルポーダ(colpoda)属は最大容水量が60%
以下の土壌中では極端に移動を制限されてその細菌捕食
量もわずかだが、最大容水量が80%以上では土壌中で
の移動が盛んになり、旺盛に細菌を捕食することがわか
っている(Ronald Vargas,Tsutom
u Hattori:FEMS Microbiolo
gy Ecology 38(1986)233−24
2)。
The action of removing excess water in the soil while supplying water to the microorganisms retained by the superabsorbent polymer and further to the microorganisms detached from the polymer by growth is the predation of the degraded microorganisms by the protozoa. It is also effective in avoiding. The movement of protozoa in soil is mainly mediated by soil moisture, and is largely influenced by soil water content. For example, the genus Colpoda, which is a representative of protozoa that prey on bacteria, has a maximum water capacity of 60%.
In the following soils, migration is extremely limited and the amount of bacterial predation is small, but when the maximum water capacity is 80% or more, migration in soil becomes active and it is known that bacteria are actively predated ( Ronald Vargas, Tsutom
u Hattori: FEMS Microbiolo
gy Ecology 38 (1986) 233-24
2).

【0031】そこで原生動物が移動に利用するこうした
土壌中の水分を、分解微生物の利用の妨げにならない程
度高吸水性ポリマーを用いて減少させることで、原生動
物の移動を制限し、微生物の捕食量を減少させ、分解微
生物の生残性を高めることができる。
Therefore, by reducing the water content in the soil used by the protozoa for migration by using a superabsorbent polymer which does not hinder the utilization of the degrading microorganisms, the migration of the protozoa is restricted and the microbial predation is restricted. The amount can be reduced and the viability of degrading microorganisms can be increased.

【0032】また高吸水性ポリマーは土壌中の水分の吸
水、土壌中への水分の供給(徐放)の機能が各々一方的
になされるのではなく、土壌中の水分含量に応じて吸水
−徐放のサイクルを繰り返す機能も持ち合わせている。
そのため、次のような方法にって処理の困難であった低
水分含量の土壌中の低濃度の汚染物質の分解を促進する
ことができる。すなわち汚染土壌中に分解微生物を保持
させた未吸水状態の高吸水性ポリマーを投与した後、土
壌の水分含量を考慮しつつこの土壌に水あるいは培地を
注入する。微量の有害物質が溶けこんだ注入水や培地は
しだいに投与した高吸水性ポリマーに吸収され、分解微
生物の近傍に集められる。このとき一部の有害物質は微
生物によって分解を受ける。注入された水や培地によっ
ていくぶん上昇した土壌含水量が時間の経過に従って低
下していくと、高吸水性ポリマーに吸収された水分が徐
々に放出される。このときも放出された溶液中の有害物
質が微生物によって分解を受ける。高吸水性ポリマーが
水分含量を低下させたある一定時間の後、再び水や培地
を注入し、依然残留している微量の有害物質を液中に溶
かしこみ、それを高吸水性ポリマーに吸収させることで
同様に保持微生物によって分解を行わせる。これを繰り
返すことで低濃度に汚染物質の存在する低水分含量の土
壌の浄化が効率よく行われる。本方法は従来のバイオレ
メディエーションの方法のように土壌中に拡散している
有害物質の近傍に微生物を集めるのとは逆に、高吸水性
ポリマーの吸水力を動力として有害物質を土壌中で移動
させ、分解微生物の近傍に有害物質を集めることを特徴
とする。この方法によれば微生物の拡散しにくい土壌、
例えば粘土含量の多い土壌の浄化も比較的行いやすい。
水や培地の注入方法も、従来行われている方法と同様に
行えば良い。
Further, the superabsorbent polymer does not unilaterally perform the functions of absorbing water in the soil and supplying (slowly releasing) water into the soil, but absorbs water depending on the water content in the soil. It also has the function of repeating the sustained release cycle.
Therefore, it is possible to promote the decomposition of low-concentration pollutants in soil having a low water content, which has been difficult to treat by the following method. That is, a superabsorbent polymer in an unabsorbed state in which degrading microorganisms are retained is administered to contaminated soil, and then water or a medium is injected into the soil while considering the water content of the soil. Injected water and medium in which trace amounts of harmful substances are dissolved are gradually absorbed by the superabsorbent polymer that has been administered, and are collected in the vicinity of degrading microorganisms. At this time, some harmful substances are decomposed by microorganisms. The water absorbed by the superabsorbent polymer is gradually released when the soil water content, which has been raised to some extent by the injected water or the culture medium, decreases over time. Also at this time, the harmful substances in the released solution are decomposed by the microorganisms. After a certain period of time when the water content of the superabsorbent polymer has decreased, water or medium is injected again to dissolve the trace amount of the harmful substances that still remain in the liquid and absorb it into the superabsorbent polymer. By doing so, the microorganisms are similarly decomposed. By repeating this, the soil having a low water content in which pollutants are present in a low concentration is efficiently purified. Unlike the conventional bioremediation method, this method collects microorganisms in the vicinity of harmful substances that are diffused in the soil, while moving the harmful substances in the soil by using the water absorption capacity of the superabsorbent polymer as a power source. It is characterized by collecting harmful substances in the vicinity of the degrading microorganisms. According to this method, soil in which microorganisms are difficult to diffuse,
For example, soil with a high clay content is relatively easy to purify.
The method of injecting water or medium may be the same as the conventionally used method.

【0033】高吸水性ポリマーは固定化担体としてバイ
オリアクター等の閉鎖系において、微生物の処理能力向
上を目的として用いられているが、この場合は架橋法、
包括法といった、担体から微生物が全く脱離しないよう
な固定方法が望まれている。一方、本発明で用いる高吸
水性ポリマーの機能としては、土壌環境中の水分を調整
することによって保持している微生物の生残性、活性を
維持することが主たる目的であり、次に増殖して高吸水
性ポリマーから脱離した微生物に関しては、できるだけ
広範囲にわたって土壌中に拡散し、積極的に汚染物質と
接触し、分解することが期待される。このため、閉鎖系
で用いられるような固定化方法はこの目的とはなじま
ず、増殖した微生物が外部に脱離していくためには、保
持している微生物が高吸水性ポリマーの表面あるいは高
吸水性ポリマーと複合している担体表面に吸着してある
ことが要求される。本発明はこの要件を満たすものであ
る。
The superabsorbent polymer is used as an immobilizing carrier in a closed system such as a bioreactor for the purpose of improving the treatment capacity of microorganisms. In this case, a crosslinking method,
There is a demand for an immobilization method, such as an encapsulation method, in which microorganisms are not detached from the carrier. On the other hand, as the function of the superabsorbent polymer used in the present invention, the main purpose is to maintain the survival and activity of the microorganisms retained by adjusting the water content in the soil environment, and then to proliferate. It is expected that microorganisms desorbed from the superabsorbent polymer will diffuse into the soil as widely as possible, actively contact with pollutants, and decompose. For this reason, immobilization methods such as those used in closed systems are not compatible with this purpose, and in order for the proliferated microorganisms to be released to the outside, the retained microorganisms must be on the surface of the superabsorbent polymer or the superabsorbent polymer. It is required to be adsorbed on the surface of the carrier that is complexed with the water-soluble polymer. The present invention meets this requirement.

【0034】本発明の方法は、一部好気性菌に適した方
法があるものの、一般にどのような種類の微生物に対し
ても適用でき、除去を目的とする汚染物質の特性に合わ
せ微生物種や高吸水性ポリマー及び担体を適宜選択でき
る。
Although the method of the present invention has a method that is partially suitable for aerobic bacteria, it can be generally applied to any kind of microorganisms, and depending on the characteristics of the contaminant to be removed, the microbial species and A super absorbent polymer and a carrier can be appropriately selected.

【0035】なお、投与する微生物としては、既に単離
されているもの、土壌等から目的に応じて新たにスクリ
ーニングしたものが利用でき、複数種の微生物の混合系
でもよい。
As the microorganisms to be administered, those already isolated, those newly screened from the soil or the like according to the purpose can be used, and a mixed system of plural kinds of microorganisms may be used.

【0036】以上の構成の土壌浄化剤を土壌に投与する
ことによって土壌の浄化処理を行うことができる。また
この土壌浄化剤の土壌への投与方法としては、散布処
理、土壌との混合処理等、常法によって行うことができ
る。さらに土壌の比較的深部への投与には、掘削孔を設
けてそこから土壌浄化剤を投与・分散させる方法が利用
できる。
The soil purifying treatment can be performed by administering the soil purifying agent having the above constitution to the soil. The soil purifying agent can be applied to the soil by a conventional method such as spraying treatment or mixing treatment with soil. Further, for administration to a relatively deep portion of the soil, a method in which a drill hole is provided and a soil purifying agent is administered and dispersed from there can be used.

【0037】[0037]

【実施例】以下に実施例を示すが、これらは本発明の範
囲を何ら限定するものではない。
EXAMPLES Examples will be shown below, but these do not limit the scope of the present invention.

【0038】実施例1 Pseudomonas cepaciaの生残性に及
ぼす高吸水性ポリマーの影響 フェノール分解菌Pseudomonas cepac
iaKK01(受託番号;FERM BP−4235、
寄託日;平成4年3月11日で、通産省工業技術院生命
工学工業技術研究所にブタペスト条約に基づいて寄託さ
れている)を10mlのM9+酵母エキス培地(以下の
組成のM9培地に0.05%酵母エキスを追加したも
の)に接種し、30℃で培養を行なった。 M9培地組成(水1リットル中); Na2HPO4 ・・・6.2g KH2PO4 ・・・3.0g NaCl ・・・0.5g NH4Cl ・・・1.0g O.D.(550nm)が約0.7に達した後、この溶
液にセルロース微粉末担体(旭化成社製マイクロキャリ
ア)100mgを加え、耐圧びん中で減圧して微小孔隙
中に菌を導入した。
Example 1 Effect of Superabsorbent Polymer on Survivability of Pseudomonas cepacia Pseudomonas cepac
iaKK01 (accession number; FERM BP-4235,
Date of deposit: On March 11, 1992, 10 ml of M9 + yeast extract medium (deposited at the Institute of Biotechnology, Institute of Biotechnology, Ministry of International Trade and Industry, under the Budapest Treaty) was added to M9 medium of the following composition. (05% yeast extract was added) and the cells were cultured at 30 ° C. M9 medium composition (in 1 liter of water); Na 2 HPO 4 ... 6.2 g KH 2 PO 4 ... 3.0 g NaCl ... 0.5 g NH 4 Cl ... 1.0 g O. D. After (550 nm) reached about 0.7, 100 mg of cellulose fine powder carrier (Microcarrier manufactured by Asahi Kasei Corporation) was added to this solution, and the pressure was reduced in a pressure bottle to introduce bacteria into the micropores.

【0039】菌の吸着したこのセルロース微粉末担体を
ポリアクリル酸架橋体高吸水性ポリマー(三洋化成工業
社製サンウエットIM−5000D)200mgと混合
し、撹拌機(藤原製作所製PR−300)で30rpm
にて緩やかに攪拌しつつ水20mlを少しずつ添加し、
高吸水性ポリマー・多孔性担体複合体からなる担体を得
た。得られた担体は、図1(a)の構造を有し、高吸水
性ポマー粒子の粒径は3〜4mmであった。
This cellulose fine powder carrier adsorbed by bacteria was mixed with 200 mg of a polyacrylic acid cross-linked superabsorbent polymer (Sunwet IM-5000D manufactured by Sanyo Chemical Industry Co., Ltd.), and stirred at 30 rpm with a stirrer (PR-300 manufactured by Fujiwara Seisakusho).
Add 20 ml of water little by little while gently stirring at
A carrier comprising a superabsorbent polymer / porous carrier composite was obtained. The obtained carrier had the structure shown in FIG. 1 (a), and the particle diameter of superabsorbent pomer particles was 3 to 4 mm.

【0040】こうしてでき上がった高吸水性ポリマー・
多孔性担体複合体からなる担体を含水比50%に調整し
た未滅菌褐色森林土100gに500ml容ビーカー中
で添加・混合し、ろ紙(ワットマンNo.44)で蓋を
した。このとき土壌の最終含水比は約80%になった。
同様のものを15個準備し、30℃の恒温培養器中に静
置した。培養開始後0日、3日、7日、10日、14日
目に各ビーカーの土壌中のP.cepaciaの菌数を
測定した。菌の計数方法は、フェノール単一炭素源寒天
培地を用いた希釈平板法によった。実験は3連ずつ行
い、菌数の平均をとった。その結果を図2に示す。
[0040] The super absorbent polymer thus prepared
A carrier composed of a porous carrier complex was added to 100 g of unsterilized brown forest soil adjusted to have a water content ratio of 50% in a 500 ml beaker, mixed and covered with a filter paper (Whatman No. 44). At this time, the final water content of the soil was about 80%.
Fifteen similar products were prepared and allowed to stand in a constant temperature incubator at 30 ° C. On the 0th, 3rd, 7th, 10th, and 14th days after the start of the culture, P. The number of bacteria of cepacia was measured. The bacteria were counted by the dilution plate method using a phenol single carbon source agar medium. The experiment was performed in triplicate and the average number of bacteria was taken. The result is shown in FIG.

【0041】比較例1 実施例1と同様の方法により得たP.cepaciaK
K01を吸着させたセルロース担体を蒸留水20と混合
して、これを含水比50%に調整した未滅菌褐色森林土
100gに500ml容ビーカー中で添加・混合し、ろ
紙(ワットマンNo.44)で蓋をした。このとき土壌
の最終含水比は約80%になった。同様のものを15個
準備し、30℃の恒温培養器中に静置した。培養開始後
0日、3日、7日、10日、14日目に各ビーカーの土
壌中のP.cepaciaの菌数を測定した。菌の計数
方法は、フェノール単一炭素源寒天培地を用いた希釈平
板法によった。実験は3連ずつ行い、菌数の平均をとっ
た。その結果を図2に示す。
Comparative Example 1 P. cerevisiae obtained by the same method as in Example 1 cepaciaK
The cellulose carrier on which K01 was adsorbed was mixed with distilled water 20, and this was added and mixed with 100 g of unsterilized brown forest soil adjusted to a water content ratio of 50% in a 500 ml beaker, and filtered with a filter paper (Whatman No. 44). I covered it. At this time, the final water content of the soil was about 80%. Fifteen similar products were prepared and allowed to stand in a constant temperature incubator at 30 ° C. On the 0th, 3rd, 7th, 10th, and 14th days after the start of the culture, P. The number of bacteria of cepacia was measured. The bacteria were counted by the dilution plate method using a phenol single carbon source agar medium. The experiment was performed in triplicate and the average number of bacteria was taken. The result is shown in FIG.

【0042】実施例2 Pseudomonas cepaciaのTCE分解
性に及ぼす高吸水性ポリマーの影響 フェノールをインデューサーとするTCE分解菌Pse
udomonas cepaciaKK01を実施例1
と同様に10mlの培地(0.05%酵母エキス+M9
培地)に接種し、30℃で培養を行なった。O.D.
(550nm)が約0.7に達した後、これにフェノー
ル200ppmを含むM9培地10mlを加え、ポリア
クリル酸架橋体高吸水性ポリマー(三洋化成工業社製サ
ンウエットIM−5000D)100mgと撹拌機(藤
原製作所製PR−300)で30rpmにて緩やかに攪
拌しつつ添加し、高吸水性ポリマー担体を得た。
Example 2 Effect of superabsorbent polymer on TCE degradability of Pseudomonas cepacia PSE degrading bacterium Pse using phenol as an inducer
Example 1 Udomonas cepacia KK01
10 ml of medium (0.05% yeast extract + M9
The medium was inoculated and cultured at 30 ° C. O. D.
(550 nm) reached about 0.7, 10 ml of M9 medium containing 200 ppm of phenol was added thereto, 100 mg of polyacrylic acid crosslinked superabsorbent polymer (Sunwet IM-5000D manufactured by Sanyo Chemical Industry Co., Ltd.) and a stirrer ( Fujiwara Seisakusho PR-300) was added with gentle stirring at 30 rpm to obtain a superabsorbent polymer carrier.

【0043】この高吸水性ポリマー担体をTCE1mg
を添加した含水比50%の未滅菌褐色森林土50gに1
00ml容バイアルびん中で添加・混合し、シリコン栓
で密封した。同様のものを15個準備し、30℃の恒温
培養器中に静置した。
1 mg of TCE was added to the super absorbent polymer carrier.
1 to 50g of unsterilized brown forest soil containing 50% water
Add and mix in a 00 ml vial and seal with a silicone stopper. Fifteen similar products were prepared and allowed to stand in a constant temperature incubator at 30 ° C.

【0044】培養開始後0日、1日、2日、3日、4日
目に各バイアルびん気相中のTCE濃度をガスクローヘ
ッドスペース法によって測定した。実験は3連ずつ行
い、TCE濃度の平均をとった。その結果を図3に示
す。
On the 0th, 1st, 2nd, 3rd, and 4th days after the start of culture, the TCE concentration in the gas phase of each vial was measured by the gas claw headspace method. The experiment was performed in triplicate and the TCE concentration was averaged. The result is shown in FIG.

【0045】比較例2 実施例2と同様に培養したP.cepaciaKK01
株の菌懸濁液10mlにフェノール200ppmを含む
M9培地10mlを加え、これにフェノール200pp
mを含むM9培地10mlを加え、実施例2と同様の土
壌に添加・混合し、30℃で培養して0日、1日、2
日、3日、4日目に各バイアルびん気相中のTCE濃度
をガスクローヘッドスペース法によって測定した。実験
は3連ずつ行い、TCE濃度の平均をとった。その結果
を図3に示す。
Comparative Example 2 P. cerevisiae cultured in the same manner as in Example 2 cepaciaKK01
To 10 ml of the bacterial suspension of the strain was added 10 ml of M9 medium containing 200 ppm of phenol, and 200 pp of phenol was added to this.
10 ml of M9 medium containing m was added to the same soil as in Example 2, mixed and cultivated at 30 ° C. for 0 days, 1 day, 2 days.
On the 3rd and 4th days, the TCE concentration in the gas phase of each vial was measured by the gas claw headspace method. The experiment was performed in triplicate and the TCE concentration was averaged. The result is shown in FIG.

【0046】実施例3 Escherichia coliの生残性に及ぼす高
吸水性ポリマーの影響 ベクターpHSG298とpHSG396を組み換えて
作成した、図4の構造のカナマイシンおよびクロラムフ
ェニコール両耐性ベクターpUS0800をEcher
ichia coliHB10に塩化カルシウム法で形
質転換した。これをLB培地(バクトペプトン10g/
1、イーストエクストラクト5g/1、塩化ナトリウム
10g/1、pH7.5)10mlに接種し、37℃で
O.D.が約0.7に至るまで振盪培養した。
Example 3 Effect of superabsorbent polymer on survival of Escherichia coli Escherichia coli kanamycin and chloramphenicol resistance vector pUS0800 having the structure shown in FIG.
ichia coli HB10 was transformed by the calcium chloride method. LB medium (10 g of bactopeptone /
1, yeast extract 5 g / 1, sodium chloride 10 g / 1, pH 7.5) 10 ml and inoculated at 37 ° C. D. The culture was carried out with shaking until it reached about 0.7.

【0047】この培養液とポリアクリル酸架橋体高吸水
性ポリマー(三洋化成工業社製サンウエットIM−50
00D)200mgとを攪拌機(藤原製作所製PR−3
00)を用いて30rpmにて緩やかに攪拌しつつ混合
し、高吸水性ポリマー担体を得た。
This culture solution and a polyacrylic acid crosslinked superabsorbent polymer (Sunwet IM-50 manufactured by Sanyo Kasei Co., Ltd.)
00D) 200 mg with a stirrer (PR-3 manufactured by Fujiwara Seisakusho)
00) was mixed with gentle stirring at 30 rpm to obtain a super absorbent polymer carrier.

【0048】次に、この高吸水性ポリマー担体を、土壌
から単離した細菌捕食性原生動物Colpoda s
p.をE.coliをえさにしてチョークレー塩類溶液
で培養した培養液10ml(原生動物数約2×10
4 個)とともに含水比80%に調整した滅菌褐色森林土
100gに500ml容ビーカー中で添加・混合し、ろ
紙(ワットマンN.44)で蓋をした。同様のものを1
5個準備し、30℃の恒温培養器中に静置した。
Next, this superabsorbent polymer carrier was used to collect the bacterial predatory protozoan Colpodas isolated from soil.
p. To E. 10 ml of culture broth which was cultivated with chokeley salt solution using E. coli as the bait
4 pieces) and 100 g of sterilized brown forest soil whose water content was adjusted to 80% were added and mixed in a 500 ml beaker, and the lid was covered with filter paper (Whatman N.44). Similar one
Five pieces were prepared and left still in a constant temperature incubator at 30 ° C.

【0049】培養開始後0日、1日、2日、3日、4日
目に各ビーカーの土壌中のE.coli菌数を測定し
た。菌の計数方法は、カナマイシン及びクロラムフェニ
コールを含むニュートリエントアガーを用いた希釈平板
法による菌数測定から求めた。実験は3連ずつ行い、菌
数の平均をとった。その結果を図5に示す。
On the 0th, 1st, 2nd, 3rd, and 4th days after the start of culturing, the E. The number of E. coli bacteria was measured. The number of bacteria was determined by measuring the number of bacteria by the dilution plate method using nutrient agar containing kanamycin and chloramphenicol. The experiment was performed in triplicate and the average number of bacteria was taken. The result is shown in FIG.

【0050】比較例3 実施例3と同様に培養したE.coli懸濁液10ml
を、これも実施例3と同様に培養したColpoda
sp.培養液10mlとともに土壌100gに500m
l容ビーカー中で添加・混合し、ろ紙でふたをした。同
様のものを15個準備し、30℃で培養し、0日、1
日、2日、3日、4日目に各ビーカーの土壌中のE.c
oli菌数を測定した。実験は3連ずつ行い、菌数の平
均をとった。その結果を図5に示す。
Comparative Example 3 E. coli cultured in the same manner as in Example 3 was used. 10 ml of E.coli suspension
Was cultured in the same manner as in Example 3 to produce Colpoda.
sp. 500m per 100g soil with 10ml culture solution
The mixture was added and mixed in a 1-liter beaker and covered with a filter paper. Prepare 15 similar ones, incubate at 30 ℃, 0 day, 1
E. coli in the soil of each beaker on the 2nd, 3rd, 4th day. c
The number of oli bacteria was measured. The experiment was performed in triplicate and the average number of bacteria was taken. The result is shown in FIG.

【0051】[0051]

【発明の効果】本発明によれば、高吸水性ポリマーを含
む担体に微生物を保持させて土壌に投与することで、土
壌中での投与微生物の菌数を維持することが可能とな
り、また投与微生物の良好な移動性または分散性を確保
することが可能となる。
INDUSTRIAL APPLICABILITY According to the present invention, it is possible to maintain the number of administered microorganisms in the soil by retaining the microorganisms in a carrier containing a superabsorbent polymer and administering the microorganisms to the soil. It becomes possible to secure good mobility or dispersibility of microorganisms.

【図面の簡単な説明】[Brief description of drawings]

【図1】本発明の担体の構造の一例を示す図であり、
(a)は高吸水性ポリマー粒子に多孔質体が付着したも
の、(b)は多孔質体の間隙に高吸水性ポリマーがバイ
ンダーとして介在してこれらの集合体を形成したもの、
(c)は高吸水性ポリマー表面に多孔質体層を形成させ
たもの、(d)は高吸水性ポリマー表面層に多孔質体が
埋め込まれた構造のものをそれぞれ示す。
FIG. 1 is a diagram showing an example of a structure of a carrier of the present invention,
(A) is a superabsorbent polymer particle having a porous body attached thereto, (b) is a porous body having a superabsorbent polymer interposed as a binder to form these aggregates,
(C) shows a structure in which a porous body layer is formed on the surface of a super absorbent polymer, and (d) shows a structure in which a porous body is embedded in the super absorbent polymer surface layer.

【図2】実施例1及び比較例1で得られた試験土壌中の
菌数の変化を示すグラフである。
FIG. 2 is a graph showing changes in the number of bacteria in the test soil obtained in Example 1 and Comparative Example 1.

【図3】実施例2及び比較例2で得られた試験土壌中の
菌数の変化を示すグラフである。
FIG. 3 is a graph showing changes in the number of bacteria in the test soil obtained in Example 2 and Comparative Example 2.

【図4】ベクターpUS0800の構造を示す図であ
る。
FIG. 4 shows the structure of vector pUS0800.

【図5】実施例3及び比較例3で得られた試験土壌中の
菌数の変化を示すグラフである。
FIG. 5 is a graph showing changes in the number of bacteria in the test soil obtained in Example 3 and Comparative Example 3.

Claims (12)

【特許請求の範囲】[Claims] 【請求項1】 土壌汚染物質浄化用の微生物を、高吸水
性ポリマーを含む担体に保持させて汚染土壌に投与し、
該汚染土壌を浄化することを特徴とする土壌浄化法。
1. A microorganism for purifying soil pollutants is held in a carrier containing a superabsorbent polymer and administered to a polluted soil,
A soil purification method comprising purifying the contaminated soil.
【請求項2】 前記担体が多孔質体からなる部分と前記
高吸水性ポリマーからなる部分とを有する請求項1に記
載の土壌浄化法。
2. The soil purification method according to claim 1, wherein the carrier has a portion made of a porous body and a portion made of the superabsorbent polymer.
【請求項3】 前記担体が前記高吸水性ポリマー担体の
少なくとも表面に前記多孔質体が保持された構造を有す
る請求項2に記載の土壌浄化法。
3. The soil purification method according to claim 2, wherein the carrier has a structure in which the porous body is held on at least the surface of the superabsorbent polymer carrier.
【請求項4】 前記多孔質体の表面に前記吸水性ポリマ
ーの層を有する請求項2に記載の土壌浄化法。
4. The soil purification method according to claim 2, wherein the surface of the porous body has a layer of the water-absorbing polymer.
【請求項5】 前記微生物が細菌である請求項1〜4の
いずれかに記載の土壌浄化法。
5. The soil purification method according to claim 1, wherein the microorganism is a bacterium.
【請求項6】 前記微生物が好気性菌である請求項1〜
5のいずれかに記載の土壌浄化法。
6. The method according to claim 1, wherein the microorganism is an aerobic bacterium.
The soil purification method according to any one of 5 above.
【請求項7】 前記微生物がシュードモナス(Pseu
domonas)属に属する細菌である請求項6に記載
の土壌浄化法。
7. The microorganism is Pseudomonas (Pseu).
The soil purification method according to claim 6, which is a bacterium belonging to the genus Domonas.
【請求項8】 前記微生物がシュードモナス・セパシア
(Pseudomonas cepacia)である請
求項7に記載の土壌浄化法。
8. The soil purification method according to claim 7, wherein the microorganism is Pseudomonas cepacia.
【請求項9】 前記微生物がシュードモナス・セパシア
(Pseudomonas cepacia)KK01
株である請求項8に記載の土壌浄化法。
9. The microorganism is Pseudomonas cepacia KK01.
The soil purification method according to claim 8, which is a strain.
【請求項10】 前記土壌汚染物質が揮発性有機塩素化
合物である請求項1〜9のいずれかに記載の土壌浄化
法。
10. The soil purification method according to claim 1, wherein the soil pollutant is a volatile organic chlorine compound.
【請求項11】 前記該揮発性有機塩素化合物がトリク
ロロエチレンである請求項10に記載の土壌浄化法。
11. The soil purification method according to claim 10, wherein the volatile organic chlorine compound is trichlorethylene.
【請求項12】 前記土壌汚染物質の分解がインデュー
サー物質によって誘導される請求項1〜11のいずれか
に記載の土壌浄化法。
12. The soil purification method according to claim 1, wherein decomposition of the soil pollutant is induced by an inducer substance.
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JP2009039616A (en) * 2007-08-07 2009-02-26 Cosmo Oil Co Ltd Cleaning accelerator and cleaning method of soil and underground water
JP2009233553A (en) * 2008-03-26 2009-10-15 Tokyo Metropolitan Industrial Technology Research Institute Carrier for volatile organic compound decomposing fungus, and method for clalifying contaminated soil

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