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JPH07121869B2 - Inflammatory edema enhancing inhibitor - Google Patents

Inflammatory edema enhancing inhibitor


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JPH07121869B2 JP5253853A JP25385393A JPH07121869B2 JP H07121869 B2 JPH07121869 B2 JP H07121869B2 JP 5253853 A JP5253853 A JP 5253853A JP 25385393 A JP25385393 A JP 25385393A JP H07121869 B2 JPH07121869 B2 JP H07121869B2
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【0001】 [0001]

【産業上の利用分野】この発明は、炎症性浮腫亢進抑制剤に関するものである。 BACKGROUND OF THE INVENTION This invention relates to inflammatory edema enhancing inhibitor.

【0002】 [0002]

【従来の技術】従来から植物由来のプロテアーゼインヒビターが種々報告されている。 BACKGROUND OF THE INVENTION protease inhibitors of plant-derived from conventionally have been variously reported. これらインヒビターには特異性があり、例えば、トウモロコシトリプシンインヒビターやカボチャトリプシンインヒビターは、トリプシンと活性型ハーゲマン因子に抑制活性を示し (Thromb. These inhibitors have specificity, for example, corn trypsin inhibitor and pumpkin trypsin inhibitor showed inhibitory activity trypsin activated Hageman factor (Thromb.
Res. 20 , 149,1980等) 、ダイズトリプシンインヒビターのうちクニッツ(Kunitz)型トリプシンインヒビターは、トリプシン、血漿カリクレイン、活性型第X因子等に抑制効果を有することが知られている。 Res. 20, etc. 149,1980), Kunitz (Kunitz) trypsin inhibitor of soybean trypsin inhibitor, trypsin, plasma kallikrein, are known to have an active inhibitory effect on factor X and the like. また炎症性浮腫亢進の際には、ブラジキニンの活性が発現し、疼痛や血管透過性が増大するが、ブラジキニンの活性発現にはハーゲマン因子やカリクレインが関与するスキームが提案されている。 Also during the inflammatory edema enhancing the activity of bradykinin it is expressed, but pain and vascular permeability increases, the active expression of the bradykinin has been proposed schemes involving Hageman factor or kallikrein.

【0003】しかし、プロテアーゼインヒビターと炎症の関係は、in vitroでの研究の段階にとどまっているのが現状で、in vivo での効果を実証した報告例は極めて少ない。 [0003] However, the relationship between protease inhibitors and inflammation, in the current situation has remained at the stage of research in the in vitro, it reported examples to demonstrate the effect of the in vivo are very few.

【0004】一方、胃癌、腎癌、卵巣癌、肝癌等の患者には腹水が、肺癌の患者の場合には胸水が、屡々貯留し、またこれら固形腫瘍の術後播種によって高い確率で腹腔或いは胸腔内に腫瘍が転移し、その結果同様の貯留が認められる。 On the other hand, gastric cancer, renal cancer, ovarian cancer, ascites in patients with liver cancer and the like, pleural effusion in the case of patients with lung cancer is often pooled and abdominal or with a high probability by postoperative seeding of solid tumors tumors metastasized to the thoracic cavity, as a result the same reservoir is observed. 腹水の貯留が生じると、血漿タンパクの低下を来し、患者の体力低下その他の増悪を来すので、 When ascites occurs, Kitashi a decrease in plasma proteins, because the cause of the other exacerbation reduction in the patient's physical strength,
治療効果の低下、多量輸血漿の必要性が生じ又、胸水の貯留が生じると呼吸不全をもたらし、ひいては患者の悪疫質の導入を速める等、癌の治療上重大な結末をもたらす。 Decrease in the therapeutic effect, it is necessary of the large amount transfusion whey also lead to respiratory failure retention of pleural effusion occurs, resulting in turn like accelerate the introduction of cachexia patients, the therapeutically significant outcome of cancer.

【0005】 [0005]

【発明が解決しようとする課題】本発明者は、炎症抑制とプロテアーゼインヒビターの関連について種々検討した結果、大豆クニッツ (Kunitz)型トリプシンインヒビター、とりわけその誘導体が、in vivo において炎症性浮腫の抑制に著しい効果があることを見出した。 The present inventors [0005] As a result of various investigations on related anti-inflammatory and protease inhibitors, soybean Kunitz (Kunitz) trypsin inhibitor, especially its derivatives, the suppression of inflammatory edema in in vivo It found that there is a significant effect. また、 Also,
炎症における血管透過性増大と固形腫瘍における血管透過性増大の機構が類似していること( 固形腫瘍及び炎症部位における血管透過性亢進と血漿成分の漏出が類似) The mechanism of vascular permeability increase in vascular permeability increases and solid tumor in inflammation are similar (leak similar vascular hyperpermeability and plasma components in solid tumors and inflammatory sites)
に着目して種々検討する中で、該インヒビター及びその誘導体が癌性胸・腹水貯留抑制にも効果を有すること、 Focusing on in the various studies, that the inhibitor and its derivatives has an effect in cancerous breast, ascites suppressed,
即ち、該インヒビターが癌組織における血管透過性を強く阻害し、腹水癌(Meth A, Sarcoma 180 )の系に於いて上記阻害物質の連続投与によって、腹水の貯留を顕著に抑えて、担癌マウスに延命効果をもたらすこと等を見出し、癌治療上にも有益な薬剤になるとの知見を得、この発明を完成したものである。 That is, the inhibitor strongly inhibited vascular permeability in cancer tissue, ascites carcinoma (Meth A, Sarcoma 180) by continuous administration of the inhibitors at the systems, is suppressed significantly the ascites, tumor-bearing mice It found like to bring survival benefit to obtain a knowledge that becomes beneficial agent to the cancer treatment, and completed the present invention.

【0006】 [0006]

【課題を解決するための手段】 即ち、この発明は、一つは、大豆クニッツ(Kunitz) 型トリプシンインヒビターまたはその誘導体を活性成分とする癌性胸・腹水貯留抑制剤及び炎症性浮腫亢進抑制剤であり、他の一つは、 Means for Solving the Problems] That is, the present invention is one, soybean Kunitz (Kunitz) trypsin inhibitor or a derivative thereof cancerous breast, ascites inhibitor as an active ingredient and inflammatory edema enhancing inhibitor , and the other one is,
大豆クニッツ (Kunitz)型トリプシンインヒビターまたはその誘導体を活性成分とする制癌作用増強剤である。 Soybean Kunitz a (Kunitz) trypsin inhibitor or a derivative thereof is a carcinostatic effect enhancer for the active ingredient.

【0007】大豆トリプシンインヒビターは、分子量約2万のクニッツ (Kunitz)型トリプシンインヒビターと分子量約6千〜8千のボウマン─バーク(Bowman- Bir [0007] soybean trypsin inhibitor has a molecular weight of about 20,000 of Kunitz (Kunitz) trypsin inhibitor and a molecular weight of about 6 1000-8 thousand of Bowman ─ Burke (Bowman- Bir
k) 型トリプシンインヒビターに二大別される。 Is secondarily divided into k) type trypsin inhibitor. それらの基本的性質はMethods in Enzymology 19 , 853 (197 Their fundamental nature of Methods in Enzymology 19, 853 (197
0)、及び、「タン白質研究の新しい視点( 化学的研究を中心として) 」第1738頁(1982)( 共立出版) 等によって明らかにされており、その内代表的なクニッツ (Kunit 0), and, "as a new view (about a chemical studies of proteins Research)", pp. 1738 (1982) (which is revealed by Kyoritsu Shuppan), etc., of which typical Kunitz (Kunit
z)トリプシンインヒビターやボウマン─バーク(Bowma z) trypsin inhibitor and Bowman ─ Burke (Bowma
n- Birk) インヒビターの構造はすでに決定されており Structure of n-Birk) inhibitors has already been determined
(Eur.J.Biochem.,32,417 (1973)、J. Biochem.74, 697 (Eur.J.Biochem., 32,417 (1973), J. Biochem.74, 697
(1973) ) 、従って、それらの化学的、生物学的方法( (1973)), therefore, their chemical, biological methods (
細胞培養、遺伝子組替等) による合成も今日可能である。 Cell culture, synthesis by genetic exchange, etc.) is also possible today.

【0008】この発明の剤は、大豆クニッツ (Kunitz) [0008] The agent of the present invention, the soybean Kunitz (Kunitz)
型トリプシンインヒビター( 以下KTI という) を活性成分とするが、KTI は大豆由来のもの、及びこれを限定分解して尚KTI 固有の活性を保持するもの、並びにこれらを上記化学的、生物学的方法により合成して得たものを包含する。 Although type trypsin inhibitor (hereinafter referred KTI) and the active ingredient, KTI those derived from soybean, and holds the limited proteolysis to Note KTI intrinsic activity which, as well as their the chemical, biological methods including those obtained by combining a.

【0009】大豆由来のKTI の調製方法は、すでにいくつかの具体的方法が提案されていて、いずれの方法を採用してもよいが、一般的には大豆, 脱脂大豆, 大豆ホエーなどを原料にし、これらから、水性媒体または極性有機溶剤( 例えばエタノール、アセトンなど) による抽出、膜分離, 等電点沈澱、塩析等による濃縮、分画によって粗精製物を得、これをさらに、ゲル濾過、イオン交換、物理的若しくは化学的吸着手段などによりさらに精製された標品を得ることができ、その活性や純度も、公知の方法例えばクニッツ(Kunitz)のカゼイン消化法[ 本明細書での表記は、この方法で測定し、Sigma 社製トリプシン「タイプ-XI 」(7500 〜9000 BAEEUnit/mg の活性蛋白) 1mg を阻害する量を1 Unitとした] やSDS 含有ポリアクリルアミドゲル電気泳動法等により測定 [0009] KTI process for the preparation of soy-derived, already been proposed several specific methods, may be employed either method, generally soybeans, defatted soybeans, soybean whey and raw materials to, from these, to obtain an aqueous medium or a polar organic solvent (e.g. ethanol, acetone) extraction with membrane separation, isoelectric point precipitation, concentration by salting, the crude product by fractionation, which further gel filtration , ion exchange, etc. can be obtained further purified preparation by physical or chemical adsorption unit, also its activity and purity, notation casein digestion method [herein known methods e.g. Kunitz (Kunitz) is measured in this way, by Sigma Co. trypsin "type -XI" the amount that inhibits 1mg (7500 ~9000 BAEEUnit / activity protein mg) was 1 Unit] and SDS-containing polyacrylamide gel electrophoresis, etc. measurement ることができる。 Rukoto can.

【0010】活性成分としての量は、精製度、投与方法、残存活性により多少相違するが、1.5 〜2.5 Unit/ [0010] The amount of the active ingredient, purity, administration method, somewhat differs by residual activity, 1.5 to 2.5 Unit /
mgの活性を有するKTI 蛋白質重量に換算して、概ね腹腔内投与の場合1〜3000mg/60kg体重の範囲、静脈注射の場合1〜300mg /60kg体重の範囲を目安として定めた含量が適当である。 In terms of KTI protein weight having mg of active, it is appropriate content as generally defined range for 1 to 3000 mg / 60 kg body weight intraperitoneal administration, in the case of intravenous injection 1 to 300 mg / 60 kg body weight as a guide .

【0011】誘導体は、蛋白質であるKTI の抗原性を低下させ、また分解物質(SH-プロテアーゼなど) に対する安定性を増し( 生体内半減期の改善) 、或いは疎水性を賦与することにより両親媒性を増すといった一または二以上の目的のために使用することができる。 [0011] Derivatives, amphiphilic by reducing the antigenicity of KTI is a protein, also increased stability against degradation agents (SH- proteases, etc.) (improvement in vivo half-life), or impart hydrophobic it can be used for one or more purposes, such as increasing the resistance. このような誘導体は、KTI と、種々の修飾体、例えばスチレンマレイン酸無水物共重合体(SMA) 及びその部分エステル化物、ポリエチレングライコール、ビニールエーテル共重合体、ピラン、西独公開特許第315541号に例示のもの等、との結合物、その他低分子の修飾体との結合物等が挙げられ、これらとの結合方法は既知に属するが、上記一または二以上の目的が達成されるものであればどの様な方法によってもよい。 Such derivatives, and KTI, various modifications, for example, styrene-maleic anhydride copolymer (SMA) and partial ester, polyethylene of glycol, vinyl ether copolymer, pyran, West German Patent Publication No. 315,541 binding of such exemplary ones, and the other coupling products of the modifications of small molecules include, coupling method between these belong to a known, but the above one or more objects are achieved it may be by any such method, if any. 例えば修飾体がSMA またはその部分エステル化物の場合は、KTI のN-末端アミノ基乃至リジン残基のε─アミノ基に対して中性乃至アルカリ性溶液中で直接反応させ、ペプチド結合を形成する方法が本発明者である前田らにより報告されている(Journal o METHOD example modifications are in the case of SMA or a partial esterification product, which is reacted directly with a neutral or alkaline solution with respect ε─ amino group of the N- terminal amino group to a lysine residue of KTI, to form a peptide bond There has been reported by Maeda et al. is the present inventors (Journal o
f Medicinal Chemistry, 28, 455-461,(1985))。 f Medicinal Chemistry, 28, 455-461, (1985)).

【0012】本物質及びその誘導体は、局所的、経静脈的、経動脈的、経粘膜的、経皮的、経口的な投与及び腹腔内投与することが可能である。 [0012] The substances and their derivatives, topical, intravenous, transcutaneous arterial, transmucosally, transdermally, and can be administered orally administration and intraperitoneal.

【0013】即ち、例えば静脈注射用の水溶性薬剤として、KTI そのまま、又は生理食塩水、5%グルコース溶液、若しくはその他の水溶性注射剤に溶解しての使用をすることができ、動脈注射用の油剤としてリピオドール化した製剤としても使用することができ、その他、KTI [0013] That is, water-soluble drugs for example intravenous, KTI it, or saline, it can be 5% glucose solution, or dissolved in other water-soluble injection the use of, for intraarterial as oil agent can also be used as Lipiodol of the formulations, other, KTI
を溶解した水溶液を乳化剤を用いオリーブ油、中鎖脂肪酸エステル、リノール酸エステル、大豆油、桐油等の油脂と乳化しての使用、リポゾームの形態での使用も可能である。 Olive oil with emulsifier aqueous solution of medium chain fatty acid esters, linoleic acid esters, soybean oil, emulsified oil and fat, such as tung oil, used in the form of a liposome are possible.

【0014】KTI またはその誘導体は、自体制癌作用を有する剤と併用することが出来る。 [0014] KTI or its derivatives can be used in combination with agents having itself carcinostatic action. 自体制癌作用を有する剤としては、ネオカルチノスタン(NCS) 、スマンクス The agent has a itself anticancer effect, neo Cultivators Roh Stan (NCS), Sumankusu
[SMANCS:スチレンマレイン酸(SMA) 共重合体とネオカルチノスタン(NCS) のアミノ基を介して結合させたもの] [SMANCS: those bound through the amino group of the styrene-maleic acid (SMA) copolymer and neo Calci Bruno Stan (NCS)]
、マイトマイシン( 商品名) 等の抗癌性抗生物質、5-F , Anti-cancer antibiotics such as mitomycin (trade name), 5-F
u( 商品名) 等の代謝拮抗剤、ピシバニール( 商品名) u antimetabolite agent (trade name), etc., Picibanil (trade name)
等の免疫賦活剤、又はその他の抗癌性薬剤を使用することができ、KTI との併用の態様としては、一製剤に加工して、若しくは単味体を各々個別に投与する方法があげられる。 Immunostimulant and the like, or can use other anti-cancer agents, as the mode of combination with KTI, the method of administering and processing to one formulation, or a Tan'ajitai each individually can be mentioned .

【0015】 [0015]

【作用】KTI は炎症性浮腫亢進抑制効果、及び癌性腹水, 胸水貯留抑制効果を有し、結果として延命効果を示す。 [Action] KTI has inflammatory edema enhanced inhibitory effect, and cancerous ascites, pleural effusion inhibitory effect, indicating the survival benefit as a result. KTI は、さらに、自体制癌作用を有する剤と併用することにより、該剤の有する抗癌作用を増強する。 KTI further by combination with agents having itself carcinostatic action, enhancing the anti-cancer activity possessed by the agent. これらの効果の生じる理由は完全には明らかではないが、炎症性浮腫の場合に関与すると考えられるカリクレイン− For reasons not entirely clear of occurrence of these effects is believed to be involved in the case of inflammatory edema kallikrein -
ブラジキニン系をin vivo においてKTI が効果的に阻止し、ブラジキニンの発現による疼痛発生と血管透過性の亢進を抑制すること、及び、癌組織の血管透過性増大に同様の系が存在して血管透過性を抑制、即ち、該組織への血漿蛋白質などの漏出が抑制され、胸水, 腹水の貯留を抑制すること、並びに、該組織への血漿成分─栄養補給が遮断され、抗癌剤の直接の作用力を高めるのではないかと推定される。 Bradykinin system KTI is effectively blocked in in vivo, to inhibit pain generation and increased vascular permeability due to the expression of bradykinin, and, if there is a system similar to the increase vascular permeability cancer tissue vascular permeability suppressing sex, namely, leakage of such plasma proteins into the tissue is suppressed, pleural effusion, inhibiting the accumulation of ascites, and the plasma component ─ nutrition to the tissue is cut off, the direct acting force anticancer agents it is estimated that it would be enhanced. 又プロテアーゼによる癌細胞増殖促進作用を一部には抑制している可能性がある。 Also a part of the cancer cell growth promoting action by proteases is likely to have suppressed. さらに、 further,
KTI の分子量は約2万(誘導体はこれ以上)であるため、血管透過性の亢進していない正常組織への漏出は殆どなく、ある程度血管透過性の亢進した組織への選択的な透過・作用に寄与し、浮腫や癌組織の成長を抑制することも推定される。 Since the molecular weight of KTI is about 20,000 (derivatives more), almost no leakage into the normal tissue that is not increased vascular permeability, selective transmission and effects on tissues some vascular hyperpermeability contribute to, is also estimated to inhibit the growth of edema and cancer tissues. また、炎症局所の浸出液(漏出液) Inflammation localized in leachate (transudate)
はリンパから回収されるが、腫瘍組織においてはリンパ系がないので浸出した高分子は回収されずに長期間そこに留まると考えられ、この性質も患部への選択的作用に有用であると考えられる。 Considered is recovered from the lymph, the polymer in tumor tissues leached because there is no lymphatic system is considered to remain there long time without being recovered, this property is also useful for the selective action on the affected area It is.

【0016】尚、癌組織への栄養供給の遮断は、物理的塞栓療法による栄養供給抑制の考え方と類似するが、物理的塞栓は屡々正常な組織までも壊す弊害があるのに比べ、本発明剤ではこのような副作用は生じない。 [0016] Incidentally, blocking nutrient supply to the cancerous tissue is similar to the concept of nutrition suppression by physical embolization therapy, compared to the physical embolic is an adverse effect to break even often normal tissues, the present invention such side effects do not occur at the agent.

【0017】 [0017]

【実施例】以下この発明の実施例を説明するが、例示は説明用のものであって発明精神の限定を意図したものではない。 EXAMPLES Hereinafter will be described an embodiment of the invention, illustrative are not intended to limit the invention spirit be of a description. 実施例1(KTI の調製例) 低変性脱脂大豆から分離大豆蛋白を製造する過程で得られる大豆ホエーを濃縮し、この濃縮物( 粗蛋白質含量5. Example 1 was concentrated soybean whey obtained in the process for producing a soy protein isolate from low-denatured defatted soybeans (Preparation of KTI), this concentrate (crude protein content of 5.
5%)1容に対し0.5 容のアセトンを加えて約1時間攪拌し、遠心分離により得られた上清に対し、さらに1.5 容のアセトンを加えて約1時間攪拌し、遠心分離して得られた沈澱画分を、水に対して透析した。 5%) was added to acetone 0.5 ml to 1 ml and stirred for about 1 hour, to the supernatant obtained by centrifugation, approximately 1 hour and stirred further added 1.5 ml of acetone, obtained by centrifugation the precipitate fraction was, was dialyzed against water. この透析液に1 In the dialysate 1
/50量の0.5M- 燐酸ナトリウム緩衝液(pH7.0) を加え、 / 50 amount of 0.5M- sodium phosphate buffer (pH 7.0) was added,
pHを7.0に調節し、DEAE- セルロースイオン交換カラムに通して、該樹脂に吸着させ、次いで0〜0.4Mの直線食塩濃度勾配を有する溶出液を、フラクションコレクターにより分画し、BBI 型トリプシンインヒビター又はKTI The pH was adjusted to 7.0, DEAE-cellulose through an ion exchange column, was adsorbed to the resin, and then the eluate with a linear salt gradient of 0~0.4M, fractionated by a fraction collector, BBI trypsin inhibitor or KTI
に富む画分をさらに各々塩析濃縮し、( BBI 型トリプシンインヒビターについてはCMセルロースイオン交換樹脂でさらに精製し) 、各濃縮精製物を等電点沈澱後、凍結乾燥してKTI 評品及びBBI 型トリプシンインヒビターを得た。 Further each salted concentrated rich fraction, (further purified by CM cellulose ion-exchange resin for the BBI trypsin inhibitor), after isoelectric precipitate the concentrate purified product, KTI Review article by freeze-drying and BBI to obtain the type trypsin inhibitor. 各評品の純度は、SDS 含有ポリアクリルアミドゲル電気泳動で、蛋白質中95% 以上であった。 The purity of each commentary article, in SDS-containing polyacrylamide gel electrophoresis, was 95% or more in the protein. 又、比活性は前者が1.97Unit /mg蛋白、後者が3.37 Unit /mg蛋白であった。 The specific activity of the former is 1.97Unit / mg protein, the latter was 3.37 Unit / mg protein. 実施例2(腹水貯留抑制及び延命効果) 生後8週目の雌のddY-マウス(1群7匹)の腹腔内にSa Sa intraperitoneally in Example 2 (ascites inhibition and survival advantage) 8 week female birth ddY- mice (1 group 7 mice)
rcoma 180 懸濁液を50万セル/匹になるように移植し、 Transplanted Rcoma 180 suspension so that 500,000 cells / animal,
その日から生理食塩水1ccに対して上記調製例で得たKT KT obtained in Preparation Example against saline 1cc from day
I 若しくはBBI 型トリプシンインヒビターを3mg溶解した水溶性薬剤又は溶解しない生理食塩水を1日、1匹あたり1ccづつ4日又は14日連続して腹腔内に投与し、その間自由摂食・自由摂水させた。 Saline without a water-soluble drug or dissolved dissolved 3mg an I or BBI trypsin inhibitor per day, sequentially one animal per 1cc increments 04 or 14 days was administered intraperitoneally, free eating-free during water consumption It was. Sarcoma 180 を全く移植しない無処置例も並行して実施した。 Untreated example not at all transplanted Sarcoma 180 were also performed in parallel.

【0018】この間の体重測定を行った結果を第1図(14日間投与) 及び第2図(4日間投与) に示した。 [0018] shows the results of this period of weight measurement in FIG. 1 (14 days administration) and FIG. 2 (4 days administration). 両図に示された結果及び肉眼的観察により、KTI による体重増加の抑制効果( 腹水貯留の抑制効果) が明らかに認められ、無処置群との差異が殆ど無かったのに対して、 The results and gross observations shown in both figures, the effect of suppressing body weight gain (suppression of ascites) are clearly observed by KTI, whereas the difference between the non-treatment group was little,
BBI 型トリプシンインヒビターによる該抑制効果は殆ど認められなかった。 The inhibitory effect of BBI-type trypsin inhibitor was hardly observed.

【0019】さらに上記投与例での平均生存日数等は次表の通りで、延命効果が認められた。 Furthermore the average survival days and the like in the treated patients is shown in the table below, survival benefit was observed.

【0020】 [0020]

【表1】 [Table 1] 実施例3(部分ブチル化SMA と結合した誘導体の調製例) 実施例1の方法で調製したKTI 300mgを、30ccの 0.5M The KTI 300 mg prepared in Example 3 (Preparation of partially butylated SMA and bound derivative) of Example 1 method, 0.5M of 30cc
炭酸水素ナトリウム液に溶解し、部分ブチル化SMA(平均分子量約2000) を150mg 加えて25℃で90分間攪拌した後、グリシン溶液を加えて反応を停止した。 Was dissolved in sodium bicarbonate solution, and the mixture was stirred for 90 minutes at a partial butylated SMA (average molecular weight of about 2000) 150 mg was added to 25 ° C., the reaction was stopped by adding a glycine solution. このものの残存活性は36.3%であり、TNBS法( 蛋白質, 核酸, 酵素, Residual activity of this compound is 36.3%, TNBS method (protein, nucleic acid, enzyme,
18 (13), 1153-1159, (1973))にて測定した修飾されたアミノ基の個数は1.94個/分子であった。 18 (13), 1153-1159, (1973)) modified the number of amino groups measured at was 1.94 groups / molecule. さらに炭酸水素アンモニウム溶液に透析し、凍結乾燥してKTI のSMA Further dialyzed against ammonium bicarbonate solution, SMA of KTI and lyophilized
で修飾された誘導体 (KTI-SMA)を得た。 In to obtain a modified derivatives (KTI-SMA). 実施例4(炎症性浮腫亢進抑制剤) 実施例3で得た修飾したKTI-SMA を生理食塩水に溶解したものを被験薬とし、該被験薬又は生理食塩水と混合して調製した1%カラゲニン溶液 (KTI-SMA の含量は各々 Example 4 (inflammatory edema enhancing inhibitor) dissolved the KTI-SMA which modified obtained in Example 3 in physiological saline and test drug, 1% was prepared by mixing with said test agent or saline the content of carrageenan solution (KTI-SMA each
5mg/cc, 又は15mg/cc) をSD系雄ラット( 平均体重 1 5mg / cc, or 15mg / cc) SD male rats (average weight 1
50g ± 5g 、1群5匹)に対して、0.1cc /部位投与して炎症を惹起し、経時的に足容積を測定することにより、カラゲニン誘発足浮腫に対する抑制効果を調べた結果は第3図の通りであった。 Against 50 g ± 5 g, 1 group 5 mice), and induce inflammation by administering 0.1 cc / site, by measuring over time the foot volume, the result of examining the inhibitory effect on carrageenin-induced paw edema third It was as Fig.

【0021】同図に示されるように、炎症惹起後3時間の時点において、KTI-SMA 15mg/cc投与群に顕著な炎症性足浮腫抑制効果が認められた。 [0021] As shown in the figure, at the time of 3 hours after inducing inflammation, marked inflammatory paw edema inhibitory effect was observed in KTI-SMA 15mg / cc dose group.

【0022】尚、KTI-SMA に代えて実施例1で得た無修飾のKTI 20mg/ccを使用したものの抑制効果はKTI-SMA [0022] Incidentally, inhibitory effect despite using KTI 20 mg / cc of unmodified obtained in Example 1 in place of KTI-SMA is KTI-SMA
5mg/cc投与群と同程度の効果にとどまった。 It stayed in 5mg / cc administration group and the same degree of effect. 実施例5(制癌剤増強作用の効果) 生後8週目の雌のddY−マウス(1群10匹) の腹腔内にSarcoma 180 懸濁液を 50 万 cell /匹になるよう移植し、その日から生理食塩水に対して前記調製例で得た Example 5 Sarcoma 180 suspension intraperitoneally (anticancer drug enhancing the effect of the action) 8 week female birth ddY- mice (10 mice per group) were transplanted to be 500,000 cell / animal, physiological from day obtained in preparation example vs. saline
KTI 、ネオカルチノスタチン(NCS) 又は両者の混合物を1日、1回7日間連続投与し、生理食塩水のみを投与した群をコントロールとした。 KTI, neocarzinostatin (NCS) or a mixture of both 1 day, continuously administered once 7 days before the control group was administered only saline. 実験期間中は自由摂食・自由摂水させた。 The duration of the experiment was allowed to freely feeding, free water consumption.

【0023】投与量及び、生存率(%)の推移を次表に示した。 [0023] showed a dose and the transition of viability (%) in the following table.

【0024】 [0024]

【表2】 [Table 2] 上表の結果が示すように、KTI は自ら延命効果を有するのみならず、制癌剤 (NCS)の効果を高める相乗作用を有することが認められた。 As the table above result, KTI not only have their own survival benefit, it was found to have a synergistic effect of enhancing the effect of anticancer drugs (NCS).

【0025】 [0025]

【発明の効果】以上説明したように、KTI 及びその誘導体を有効成分とする剤は、炎症性浮腫の抑制及び癌性胸水腹水の貯留抑制効果並びに制癌作用増強効果を有する。 As described above, according to the present invention, agents and KTI and an active ingredient a derivative thereof has a reservoir inhibitory effect and anti-cancer activity potentiating effect of suppression of inflammatory edema and cancerous pleural effusion ascites. 炎症性浮腫の抑制は浮腫による疼痛の発生または亢進を未然に抑制し、胸水腹水の貯留抑制により、該貯留による弊害例えば、患者の体力低下、治療効果の低下、 Suppression of inflammatory edema is suppressed in advance the occurrence or enhancement of pain due to edema, the retention inhibition of pleural effusion ascites, adverse effects such as by the reservoir, lowering patient's physical strength, decrease in the therapeutic effect,
多量の輸血漿、呼吸不全、悪疫質の導入等を未然に防止乃至抑制し、治療効果を高める等、延命させる効果がある。 A large amount of blood transfusion whey, respiratory failure, and prevent or inhibit such in advance the introduction of cachexia, such as enhancing the therapeutic effect, an effect to prolong life.


【図1】実施例2における投与薬剤と体重増加(≒腹水貯留量)の関係を示すグラフである。 1 is a graph showing the relationship between the administration drugs and weight gain in Example 2 (≒ ascites amount).

【図2】実施例2における投与薬剤と体重増加(≒腹水貯留量)の関係を示すグラフである。 2 is a graph showing the relationship between the administration drugs and weight gain in Example 2 (≒ ascites amount).

【図3】実施例4における足浮腫の容積変化を示すグラフである。 3 is a graph showing the change in volume of paw edema in Example 4.


図1中(1)(△).... 生理食塩水投与群(Sarcoma 180 担癌対照) 、(2)(◇).... BBI トリプシンインヒビター投与群、(3)(□).... KTI 投与群、(4)(○)....無処置群 In Figure 1 (1) (△) .... saline administered group (Sarcoma 180 tumor-bearing control), (2) (◇) .... BBI trypsin inhibitor administration group, (3) (□) .. .. KTI administration group, (4) (○) .... non-treated group
( 非癌対照) 、 (白抜き矢印).... 癌細胞移植日、( (Non-cancer control), (white arrow) .... cancer cell transplantation date, (
↓).... 薬剤投与日。 ↓) .... drug administration date. 図2中(1)(○).... 生理食塩水投与群(Sarcoma 180 担癌対照) 、(2)(△).... BBI トリプシンインヒビター投与群、(3)(□).... KTI 投与群、 In FIG. 2 (1) (○) .... saline administered group (Sarcoma 180 tumor-bearing control), (2) (△) .... BBI trypsin inhibitor administration group, (3) (□) .. .. KTI administration group,
(折破線).... 無処置群( 非癌対照) 、(白抜き矢印).... 癌細胞移植日、( ↓).... 薬剤投与日。 (Folding broken line) .... untreated group (non-cancer control) (white arrow) .... cancer cell transplantation day, (↓) .... drug administration date. 図3 Figure 3
中、(1)(○).... 生理食塩水投与群、(2)(△).... KTI- In, (1) (○) .... saline administered group, (2) (△) .... KTI-
SMA 5mg /cc投与群、(3)(□).... KTI-SMA 15mg/cc投与群。 SMA 5mg / cc dose group, (3) (□) .... KTI-SMA 15mg / cc dose group.

Claims (1)

    【特許請求の範囲】 [The claims]
  1. 【請求項1】大豆クニッツ (Kunitz)型トリプシンインヒビターまたはその誘導体を活性成分とすることを特徴とする炎症性浮腫亢進抑制剤。 1. A Inflammatory edema enhancing inhibitor which is characterized in that the soybean Kunitz (Kunitz) trypsin inhibitor or a derivative thereof as an active ingredient.
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US8106094B2 (en) 1998-07-06 2012-01-31 Johnson & Johnson Consumer Companies, Inc. Compositions and methods for treating skin conditions
US7985404B1 (en) 1999-07-27 2011-07-26 Johnson & Johnson Consumer Companies, Inc. Reducing hair growth, hair follicle and hair shaft size and hair pigmentation
US7309688B2 (en) * 2000-10-27 2007-12-18 Johnson & Johnson Consumer Companies Topical anti-cancer compositions and methods of use thereof
US8431550B2 (en) 2000-10-27 2013-04-30 Johnson & Johnson Consumer Companies, Inc. Topical anti-cancer compositions and methods of use thereof
US7192615B2 (en) 2001-02-28 2007-03-20 J&J Consumer Companies, Inc. Compositions containing legume products
JP4912875B2 (en) * 2004-02-27 2012-04-11 不二製油株式会社 Cancer metastasis inhibiting composition
CN104922528B (en) * 2015-07-14 2018-08-28 花宝金 Pharmaceutical compositions and their preparation and use in the treatment of malignant pleural effusion

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