JPH0660426B2 - パルス電界ゲル電気泳動装置および方法 - Google Patents

パルス電界ゲル電気泳動装置および方法

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JPH0660426B2
JPH0660426B2 JP62044042A JP4404287A JPH0660426B2 JP H0660426 B2 JPH0660426 B2 JP H0660426B2 JP 62044042 A JP62044042 A JP 62044042A JP 4404287 A JP4404287 A JP 4404287A JP H0660426 B2 JPH0660426 B2 JP H0660426B2
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Description

【発明の詳細な説明】 ＜発明の技術分野＞ 本発明はパルス電界ゲル電気泳動法および装置に関す
る。
＜背 景＞ 最近、電気泳動装置により、ＤＮＡ高分子を分離できる
ようになってきた。この種の装置では、ＤＮＡ分子を含
有するゲルに与える電界の方向をくり返し切り換えるよ
うにしている。このような電界の方向の切換えにより分
子を分離できる理由は、分子量や長さ(contour length)
によって分子が向きを変えるのに要する時間が違うこと
による。
＜発明の目的、構成＞ 本発明の目的はパルス式電位勾配によるゲル電気泳動装
置において、すべての分離トラック(分離レーン、分離バ
ンド、ゲルレーンと呼ぶこともある)に同じ向きで強さの
電界を印加でき、容易に読み取れる分離トラックを形成
でき、分離される分子がリニアで正確な径路に沿って動
き、それぞれの分離トラック上の分子の分離度(resolut
ion)をよくすることができ、しかもこのようにして得ら
れた分離トラックから分子を別のサブストレートに転写
(トランスファ、ブロッティング)するのにも使用できる
ゲル電気泳動装置を提供することである。
本発明によるパルス電界ゲル電気泳動装置ではゲルとし
て自立構造(free standing)のゲルを使用する。そし
て、ゲルの面と平行ではなく、ゲルの面と交差し、ゲル
の面を貫通する３次元の電界が形成されるように電極の
アレーを配置する。さらに、これらの電極(分離用電極)
によってつくられる２種類の電界を互いにほぼ直角に交
じわらせることにより、分子がゲル内をその両面の間で
のこぎり歯のような径路をたどって進むようにする。あ
るいは、２種類の電界が成す角度を90度より広くして自
立ゲルの上端で電界の強さが一番強くなるようにし、こ
れにより分子の分離度の向上を図ってもよい。分離後
は、分子を効率よく収集するため、上記分離用電極の代
わりに分子転写用の電極(トランスファ電極)をセット
し、分離のときと同じ電源を使用して分子をゲルから別
のサブストレート上に移しかえる。
＜実施例＞ 以下、図面を参照して本発明の実施例を説明する。
第１図と第２図において、電気泳動装置10はゲルボック
ス(ゲルハウジング)12内に収容されており、ゲルボック
ス12の上部14は容易に取り外すことができるようになっ
ている。装置10は緩衝液15で満たされ、緩衝液の入口1
6,18と緩衝液の出口20,22が設けられている。緩衝液は
両方の出口20,22からポンプ24を通り冷却水槽の熱交換
器26に至り、ここで冷却された緩衝液15が再びゲルボッ
クス12に戻って循環するようになっている。
ゲル28は自立構造であり、複数のウェル30が形成されて
いる。ゲル28はガラス板の間に挾んで型をとり、冷却し
た後ガラス板を取り外し、しかる後、そのゲルをゲルボ
ックス12内に垂直に立てる。第２図に示すように、ゲル
28はボックス12の内面の２本の柱32の間にできたスロッ
トにより支持される。１％の寒天ゲルであれば、支持板
がなくてもスロット内でまっすぐに立つ。
２つの同様な白金線電極アレイ40,46と42,44とにより、
ゲル28の面に対し鋭角で交わる２つの方向の電界が交互
に発生する。電極40と42はいずれも、一本の白金線をく
つひものように左右に通してむき出しの４本の白金線が
水平に張られるようにして形成する。そしてそれらの間
の部分は短いチューブで覆って絶縁をとる。第１図に示
すように、電極40の面と電極42の面は互いにほぼ直角を
成すとともに、それぞれ電極46と44に対しても直角に配
置されている。したがって、電極40と46との間に電圧を
印加することにより、ゲル28を貫通する矢印48の向きの
３次元電界が発生する。同様にして電極42と44の間に電
圧を印加することにより、電界50が発生し、ゲル28内の
すべてのゲルレーンは等しい電界にさらされ、この結
果、ウェル30内の試料はゲルレーンをまっすぐに下って
いくことになる。
電源50の正と負の出力線52と54は双極双投リレー62の可
動片58と60に接続されている。可動片58,60の位置はリ
レー62のコイルに接続された切替用のタイマー64により
制御される。タイマー64の出力が発生するとリレーの可
動片58と60は接点66と68に接触し、このため、負と正の
電圧が端子72と76を介してそれぞれ電極40と46に印加さ
れる。一方、タイマー64の出力がなくなると、可動片58
と60は接点67と69に接触し、負と正の電圧が端子75と70
を介してそれぞれ電極42と44に印加される。
ゲル28をボックス12の真中に置いた状態で、２種類の電
極対により、等しい時間ずつ交互に電界パルスを与える
ことにより、分離される試料はゲル28の上部から下方に
動かされる。このような電界方向の切換をくり返すこと
によりＤＮＡ高分子が分離(分画)されていく。
以上説明した装置は実際に製作され、良好に動作した。
製作した装置では以下の部品を使用した。ＩＳＣＯモデ
ル493電源。Ｇray Ｌabモデル625タイマー起動の双極双
投リレー。緩衝液循環冷却システムの各部品として振動
ポンプ(Ｃold-Parmer)、冷却水槽(ＬaudaモデルＲＭ
６)、及び径1/4インチ(0.63cm)長さ12フィート(3.6m)の
ポリエチレンチューブの２本のループをコイル状にして
対向させ、水を満たした発泡スチロールボックス内に浸
して成る熱交換器。片方のループには水槽とボックスと
の間で冷却剤を循環させ、他方のループには熱交換器ボ
ックスとゲルボックスとの間で緩衝液を循環させた。ゲ
ルボックスは1/4インチ(0.63cm)厚の透明なプレクシグ
ラスシートで構成し、その内側寸法は６インチ×３イン
チ×6.5インチ(15.2×7.62×16.5cm)とした。寒天ゲル
の寸法は幅7.6cm、高さ10cm、厚さ0.64cmとした。１％
ゲルを使用した。白金線は線番28。
従来技術ではゲル面内を電界が通るようにしているのに
対し、本発明ではゲルの厚みを電界が貫通するようにし
ている。したがって、各ゲルレーンに等しい強さの電界
を与えることができ、分離される分子の動きを完全にゲ
ルレーンの内部に制御できる。電界方向の切換周波数は
分析対象である分子の大きさや種類で決まる。200キロ
から200キロの塩基をもつ試料に対しては、40〜60秒の
パルス時間を使用した。
分離レーンに沿う電界強度分布を変えるため、電極40,4
2に凹または凸の曲率をもたせることにより、試料がゲ
ル中を下降するのにつれて除去に強度の弱い電界領域に
入るようにしてもよい。図では電極40と42は定位置に置
かれているが、両電極による電界相互間の交差角度が変
えられるような可動構成にしてもよい。また、ゲル28は
自立構造として示されているが、ゲルボックス内を移動
可能なケース内にゲル28を収容し、分離工程の各ステッ
プごとに電極に対するゲルの位置を変えるようにしても
よい。また、ゲルの限られた選択領域のみに電極40と42
からの電界をフォーカスさせる一方で可変速の駆動機構
により、ゲルを縦方向に移動させることにより、電界に
さらされるゲルの選択領域が順次シフトされるようにし
てもよい(印加電圧の範囲、パルス時間、駆動速度を選
択することにより、分離を最適化することができる)。電
極40,42,44,46の方を動かし、ゲル28の方を固定した構
成によって電界にさらされるゲルの部分を順次ずらすよ
うにしてもよい。
第３図かつ第８図に別の実施例を示してある。図示のよ
うに、ゲルボックス80は両側面82、両端面84、底面86を
有する長方体の形状を成している。各側面82からは対応
する位置に対を成す内柱87が突設されており(第７図、
第８図参照)、上述した第１図と第２図の場合と同様
に、この内柱87間のスロットに自立ゲル28が支持され
る。さらに、両側面82からは対を成す外柱88が対応する
位置に突設されている。外柱88は内柱87よりやや短か
く、トランスファ(ゲル転写)工程の際に利用される。
ゲルボックス(ゲルハウジング)80は上端が開口してお
り、両側面82間には緩衝液循環用の多孔チューブ90(上
側)91(下側)が渡されており上記柱87，88の両側に対称
に位置している。第３図と第４図に示すように、緩衝液
入口92は上側ポート90とつながっており、下側の緩衝液
出口94は下側ポート91とつながっている。第１図、第２
図と同様に、冷却水槽の熱交換器がこの緩衝液入口91と
出口94につながっていて循環系統を形成し、ゲルボック
ス80内に緩衝液を循環供給し、ゲルボックス80内の緩衝
液温度を一定に保つようにしている。ゲル28に交互にパ
ルス電界を与えるために、２つの分離間インサート装置
96が共通ハウジング80に着脱自由に組み込まれる(第７
図参照)。各インサート装置はハウジング80と組み合わ
せられるように、上面98、上面98より下方へ延びる両側
面99、両側面99間を渡る２本の横棒100を備えている。
すなわち、両側面99はハウジング80に組み込んだ際にハ
ウジングの両側面82の間に無理なく収まる間隔になって
いる。また、各側面99には、組み込んだ際にハウジング
の端面84に沿う、下方に延びた脚部102が形成されると
ともに、下側循環用チューブ91より上方に位置する段部
104が形成され、また上側循環用チューブ90を包み込む
逆Ｕ字状の凹部106が形成されている。さらに各インサ
ート装置96は上方電極線108と下方電極線112を備える。
すなわち、上方電極線108は各側面99の前縁110の切り込
み109の間を通され、下方電極線112は脚部102の切り込
み114の間を通されている。インサート装置の上面98は
ハウジング80の上縁を覆う寸法であり、組み込み後は両
者は付き合わされた状態となり、インサート装置の脚部
102はハウジング80の端面84に寄りかかった状態にな
る。第３図に示すように各上方電極線108はインサート
装置上面98の負端子115または115′に電気接続されてい
る。下方電極線112の方は上面98の正端子116または11
6′に電気接続されている。
第３図からわかるように、２つの上方電極108はゲル28
の中心線から等距離に位置し、かつゲル28のウェルもし
くは上端より少し高い位置にある。一方、２つの下方電
極112はゲル28の中心線から等距離にあり、ゲルの下端
もしくはハウジング80の底面86より上方において互いに
水平方向に隔てられている。各電極108,112は一本の白
金線で構成するのがよく、その両端を上述したように切
り込み109と114内に挿入し、必要なところ、例えば接続
端や、各端子115,115′，116,116′から切り込みまでの
間はシールドする。第３図と第４図にあっては、電極線
同士は水平方向に隔たっており、垂直の自立ゲル28に対
して並行に配置されている。したがって、ゲル28の片側
にある各負電極108と反対側にある各正電極112との間に
電圧を交互に印加することにより、電界が発生し、その
うちでゲルの上端近くと交差するところの電界120,122
が最大の強度となる。この最大電界120と122はゲル厚を
鋭角で貫通し、電界同士の成す角度は直角より広くな
る。
電界間の角度が広くなったことにより、先の例より分解
度(resolution)を高くすることができる。すなわち200
〜250Ｖの印加電圧条件でより大きな分子を分離でき
る。印加電圧は高くなるが、電流は少なくてよく、それ
でいてゲル内のより大きな分子を分離できる。例えば、
第３図の場合、最大電界120と122の成す内角123は110度
から120度のオーダーである。この構成の場合、発生す
る全電界はゲルの全長にわたりゲルを貫通する。しか
し、その強度はゲルの下方に進み、最大電界120,122か
ら離れるほど弱くなっていく。
第１図、第２図の例と同様に、第３図、第４図の場合
も、電源50′の負と正の線52′，54′が双極双投リレー
62′の可動片58′,60′にそれぞれ接続される。リレー6
2のコイルにはタイマー64′が接続され、タイマー64′
の出力があるときはリレーの可動片58′と60′はそれぞ
れ接点66′と68′に接触し、端子115と116を介して電極
線108と112にそれぞれ負と正の電圧が加えられて電界12
0が発生する。一方、タイマー64′の出力がないときに
は可動片58′と60′は接点67′と69′側に切り換わり、
端子115′と116′を介して電圧が供給され、電界122が
発生する。同じく、ゲル28は電極アレーの中心に位置し
ており、各電極対に同じ時間ずつ交互にパルスを与えて
電界120と122を代わる代わる発生させることにより、Ｄ
ＮＡ分子はゲルの頂部から底部へとレーンに沿って蛇行
しながら下降していく。
電気泳動による分離工程完了後、インサート装置96を取
り外し、ＤＮＡ分子を膜ないしフィルタにブロッティン
グするブロッティング(トランスファ)工程の前処理のた
めに、ゲルボックス80からゲル28をいったん取り出す。
この前処理では、ゲルを臭化エチジウムにより着色して
ＤＮＡ分子が紫外線のもとで蛍光を出すようにする。次
に、ゲルを水酸化ナトリウム溶液に漬けてＤＮＡ分子を
変性しＤＮＡの２重鎖をほどく。ついで、中和してpHを
下げ、残っている塩や水酸化ナトリウムを除去する。次
にゲルを２つの面(一方は膜ないしフィルタ130)の間に
サンドウィッチ化する。ゲルの裏面にバックプレート13
2を設け、このようにして組み立てたゲルをゲルハウジ
ング80の外柱88の間に配置する。
第８図に示すように、対をなすトランスファ用インサー
ト装置134はゲルハウジング80の外柱88の両側に配置さ
れる。各インサート装置134の両側面136はほぼ長方形を
成していて、ほぼ長方形の上面138の下側から延びてい
る。両側面136間の隔たりは上面138の幅より狭く、かつ
ゲルハウジング80に組み込んだ場合にはハウジングの両
側面82の間に無理なく収まるようになっている。さら
に、各側面136は上面138の外側の端140からは遠くて内
側の端139寄りに設けられている。また、両側面136間の
補強材として、両側面をつなぐ２本の補強棒142が、各
側壁136の内面に傾斜して設けられた電極支持リブ(ホル
ダー)144の上端と下端の近くに設けられている。第５図
に示すように、各電極アレー146は一本の導線から成
り、この一本の導線を各電極ホルダー144の上端と下端
の間において、水平方向に複数回前後させて張設してい
る。電極ホルダー144には切り込みがあり、ここに電極
線の斜行部を収容してシールドを図っている。インサー
ト装置134が確実に装着できるようにするため、側面136
をハウジングに挿入したとき上面138がゲルハウジング8
0の上縁をぴったりと覆い、側面136の後縁が柱88から隔
たり、上方の緩衝液循環ポート90の手前に位置するよう
に構成されている。
第５図と第６図において、各導線148の上端は端子150ま
たは150′に接続され、端子150は電源50′の負側に接続
され、端子150′は電源50′の正側に接続されている。
図示のように、各インサート装置134の電極アレーは一
番上の水平線から離れるにつれ斜め下方に広がって配置
されており、ハウジング80内に収容した状態では、ゲル
の中心線から等距離にある。したがって負アレーから正
アレーに向って水平方向に進む３次元電界152が形成さ
れることになる。電極アレー146がゲルの上端から下端
に向けて、次第に広がって配置されていることには意味
がある。すなわち、この配置構成によれば、ゲルの上端
にある大きいＤＮＡ分子をトランスファできる。また、
電極アレーとゲルとの距離は下方ほど離れているのでゲ
ル28の厚みに加わる電圧も下方に進むにつれ次第に小さ
くなる。
トランスファ工程では、電界はゲルの厚みを貫通する２
つの方向のうち１つの方向だけを使用し、この片方向電
界印加によりＤＮＡ分子をゲルから膜ないしサブストレ
ート130に転写する。なお、膜130は負の電極とは反対側
のゲル面に沿って配置する。
緩衝液を循環させてゲルハウジング内を恒温に保ち、電
極50′によりゲルの両側に電圧を印加する。代表的な印
加電圧は120Ｖ程度であり、ＤＮＡ分子を完全にトラン
スファするため約２時間印加する。インサート装置96と
134は交換可能であるので共通のゲルハウジング80が使
用できるとともに、各工程(分離とトランスファ工程)に
おける電極間の成す角度を最適にできる。なお、例え
ば、第１図と第２図で述べた電極間の角度と同様の所望
角度をもたせながら、電極ホルダー144をゲルハウジン
グ80の側面に直接取り付けることにより、電極と導線を
別のハウジングに設けるようにしてもよい。また、負電
極として一本の電極線108(第３図、第４図参照)を使用
する電極構成は第１図や第２図に示す電極アレーの構成
に比べ、電界間の成す角度の選択に関してより自由で制
約が少ない。すなわち、ゲルが電極間の中央に位置し、
全電界がゲルの全長(全長)にわたってゲルを貫通する条
件が満足される限り、負の電極108あるいは正の電極112
をシフトすることにより、電界120と122の成す角度を変
化させることができる。電界角度123を小さくすると、
ゲルボックス80の高さを高くし、正電極112をゲルの下
端近くに配置して全電界がゲルの全長にわたって作用す
るようにしなければならない。また、最大電界120と122
がＤＮＡ分子を含むレーンないしバンドの上端で交差し
ていることも、ＤＮＡ分子を下方に移動させ、各レーン
(バンド)に沿う分子の分離をよくする上で重要なポイン
トになっている。電界角度123を90゜より広くし、110゜
〜120゜程度にすることにより、2,000,000個のオーダー
の塩基をもつ非常に大きな分子を動かし、分離させるこ
とができる。2,000,000個以上の塩基をもつ分子の移動
ないし分離は、電圧やパルス時間を調整しつつ電界角度
123を120゜より広くすることにより可能である。
＜効果＞ この発明は、第１および第２電極手段がゲル媒体の対向
する２つの平面に対し設けられ、ゲル媒体を２つの平面
と交差しかつ第１の平面および第２の平面に対してそれ
ぞれ鋭角をなす第１および第２の電界を生成している。
従って、各ゲルレーンに等しい対称な３次元電界を与え
ることができ、分離される分子の動きを完全に分離トラ
ック内部に制御することができ、分離される分子はリニ
アで正確な経路に沿って動き、分子の分離度を良くする
ことができる。
【図面の簡単な説明】
第１図は本発明の一実施例の断面図、 第２図は第１図の線Ａ−Ａに沿う断面図、 第３図は別の実施例の断面図、 第４図は第３図の線Ｂ−Ｂに沿う断面図、 第５図はさらに別の実施例の断面図、 第６図は第５図の線Ｃ−Ｃに沿う断面図、 第７図はゲルハウジングとゲル分離用インサート装置の
斜視図、 第８図はゲルハウジングとゲルトランスファ用インサー
ト装置の斜視図である。 12:ゲルハウジング、28:ゲル 32:柱(ゲル支持用)、30:試料ウェル 40,42,44,46:電極(分離用)、48,50:電界 80:ゲルハウジング(共通ハウジング) 87,88:柱、96:分離用インサート装置 108,112:電極(分離用)、120,122:最大電界 130:サブストレート(高分子が転写されるフィルター) 134:トランスファ用インサート装置 144:電極(トランスファ用)、152:電界
フロントページの続き (51)Int.Cl.5 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ｇ０１Ｎ 27/447 (72)発明者 キャサリーン・ジェイ・ガーディナー アメリカ合衆国コロラド州80218，デンヴ ァー，マリオン 970，アパートメント 24 (56)参考文献 特表 昭59−502037（ＪＰ，Ａ) 米国特許4148703（ＵＳ，Ａ)

Claims (16)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項１】（イ）分離すべき高分子を支持する媒体
    と、 （ロ）上記媒体は対向する２つの平面が面間の距離、す
    なわち媒体の厚みに比べて大きな寸法になっていること
    と、 （ハ）上記媒体は１つ以上の分離トラックを有すること
    と、 （ニ）上記媒体のまわりに配置され、動作時には上記分
    離トラックに対して第１の電界を印加する第１の電極手
    段と、 （ホ）上記第１の電界の方向は上記２つの平面のいずれ
    とも交差し、かつ第１の平面に対して鋭角を成す方向で
    あることと、 （ヘ）上記媒体のまわりに配置され、動作時には上記分
    離トラックに対して第２の電界を印加する第２の電極手
    段と、 （ト）上記第２の電界の方向は上記２つの平面のいずれ
    とも交差し、かつ第２の平面に対して鋭角をなす方向で
    あることと、 （チ）上記第１の電極手段と上記第２の電極手段とを交
    互にくり返し作動する手段と、 を含むパルス電界ゲル電気泳動装置。
  2. 【請求項２】特許請求の範囲第１項に記載の装置におい
    て、上記第１の電界と上記第２の電界とが成す角度は少
    なくとも９０度あることを特徴とする装置。
  3. 【請求項３】特許請求の範囲第２項に記載の装置におい
    て、上記第１と第２の電極手段のそれぞれは、２つの部
    分から成り、第１の部分は上記媒体の一方の平面と対向
    しており、第２の部分は上記媒体の他方の平面と対向し
    ていることを特徴とする装置。
  4. 【請求項４】特許請求の範囲第３項に記載の装置におい
    て、上記第１の部分はすべての分離トラックの全長にわ
    たる３次元電界を発生するグリッド導体から成ることを
    特徴とする装置。
  5. 【請求項５】特許請求の範囲第１項に記載の装置におい
    て、上記媒体は上記高分子が移動可能なゲル状の平らな
    ものでできており、かつ自立するのに十分な物理的強度
    を有していることを特徴とする装置。
  6. 【請求項６】特許請求の範囲第５項に記載の装置におい
    て、上記電極手段は、上記媒体の一方の平面の隣りに配
    置され、ほぼ平らなアレイを形成する複数の導体と、上
    記媒体の他方の平面の側に配置される逆極性の電極とか
    ら構成されていることを特徴とする装置。
  7. 【請求項７】特許請求の範囲第１項に記載の装置におい
    て、上記第１電極手段が発生する最大電界と上記第２電
    極手段が発生する最大電界とが互いに９０度から１２０
    度の範囲の角度で交差することを特徴とする装置。
  8. 【請求項８】特許請求の範囲第７項に記載の装置におい
    て、上記第１及び第２の電極手段は前記媒体のひとつの
    平面に隣接して配置された負電極と前記媒体の他方の平
    面に対向して配置された正電極を含み、各上記正電極と
    上記媒体間の距離は各上記負電極と上記媒体間の距離よ
    りも大きいことを特徴とする装置。
  9. 【請求項９】特許請求の範囲第１項に記載の装置におい
    て、上記媒体は上記第１電極手段と第２電極手段の中央
    にある直立したゲル状の平面のサブストレートであり、
    上記媒体は上記分離トラックの一端と通信するウェルを
    有し、前記第１と第２電界は前記分離トラックの対向端
    の間の前記媒体の厚さを通って下方向の角度有して延び
    ることを特徴とする装置。
  10. 【請求項１０】特許請求の範囲第９項に記載の装置にお
    いて、上記第１電極手段と第２電極手段は夫々、上記媒
    体と平行に延びる少なくとも１本の導体からなることを
    特徴とする装置。
  11. 【請求項１１】特許請求の範囲第９項に記載の装置にお
    いて、上記第１および第２電極手段は負電極と正電極を
    含み、上記負と正の電極間に対称に上記平面の媒体を取
    外し自由に支持する媒体支持手段、共通ハウジング内で
    上記負及び正の電極を取外し自由に支持する電極支持手
    段、及び上記媒体を貫通する片方向の電界を供給するた
    めに前記共通ハウジング内でトランスファ電極手段を取
    り外し自由に位置する手段を含むトランスファ電極手段
    を有する該共通ハウジングを含むことを特徴とする装
    置。
  12. 【請求項１２】特許請求の範囲第１１項に記載の装置に
    おいて、上記トランスファ電極手段は上記媒体の一端か
    ら他端に進むにつれて次第に小さくなる電圧を供給する
    ために動作することを特徴とする装置。
  13. 【請求項１３】特許請求の範囲１２項に記載の装置にお
    いて、上記トランスファ電極手段は上記媒体の対向平面
    から下方に離れる多数導体アレイの形の正及び負の電極
    を含むことを特徴とする装置。
  14. 【請求項１４】サブストレート上の支持媒体の分離トラ
    ックからの高分子の分離およびトランスファを実施する
    方法であって、 （１）分離される高分子を支持する媒体を与える段階で
    あって、該媒体は、平面の厚さに比べて小さい大きさの
    該媒体の厚さによって分離された少なくとも一対の対向
    する通常は平らな平面を有しそして少なくともひとつの
    分離トラック含み、 （２）前記分離トラックを渡って第１電界を供給するた
    め前記媒体の付近に配置された第１電極手段、および前
    記分離トラックを渡って第２の電界を供給するために前
    記媒体の付近に配置された第２電極手段により生成され
    た第１および第２電界を交差する間に垂直平面において
    該媒体を対称に方向付ける段階であって、上記第１及び
    第２電界は上記両平面と交差しそして、それぞれ第１お
    よび第２の平面に関して鋭角に方向付けられており、 （３）上記高分子が上記分離トラックに沿って分離され
    るまで前記媒体の上端を介して下方に向かう角度で前記
    第１および第２電極手段を交互にそして繰り返し印加す
    る手段を使用して上記第１および第２電界を交互にそし
    て繰り返して導く段階、 （４）上記媒体のひとつの平面に対してサブストレート
    を供給する段階、 （５）上記サブストレート上の前記分離トラックから上
    記高分子をトランスファされるべき方向に上記媒体を通
    って延びる第３の電界を上記媒体にさらす段階、を含む
    方法。
  15. 【請求項１５】特許請求の範囲１４項に記載の方法にお
    いて、上記第１および第２電界の角度は少なくとも９０
    度であることを特徴とする方法。
  16. 【請求項１６】特許請求の範囲１４項に記載の方法にお
    いて、上記媒体をさらす段階（５）は上記上端から下方
    の端まで上記媒体を通じて次第に減少する電圧を供給す
    ることを特徴とする方法。
JP62044042A 1986-02-27 1987-02-26 パルス電界ゲル電気泳動装置および方法 Expired - Lifetime JPH0660426B2 (ja)

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