JPH06511477A - 炎症のペプチド阻害剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 炎症のペプチド阻害剤 発明の背景 本発明は一般に、ＧＭＰ−１４０，Ｅｌ、ＡＭ−１、およびリンパ球指向性レセ プターを含むセレクチン由来のペプチドを使用した炎症応答の治療および予防の 方法の分野に関する。

血小板および白血球の血管表面への粘着は炎症応答の重要成分であり、補体、凝 固、および免疫系の同時に起こり相互に関連する活性化を伴う、一連の複雑な反 応の一部である。

Ｍｕｌｌｅｒ−Ｅｂａｒｈａｒｄ、　Ｈｊ、、　Ａｎｎ、　Ｒｅｖ、　Ｂｉｏｃ ｈｅ＊、　５７：３２１−３４７（１９８８）に総説が記載されているように、 異物および免疫複合体の同定においても除去においても、補体タンパク質は免疫 系における先導的役割を集合的に果たす。中心的な補体系はＣ３およびＣ４タン パク質であり、これは活性化されると標的付近に共有的に付着し、標的にクリア ランスの目印をつける。このプロセスの制御を助けるため、可溶性および膜結合 性調節タノバク質の注目すべきファミリーが開発され、各々が活性化Ｃ３および ／またはｃ４誘導体と相互作用する。凝固および炎症経路は、組織損傷に応じて 同等の様式で調節されている。例えば、活性化内皮細胞は、白血球に対して粘着 性になる以外に、細胞表面に組織因子を発現し、トロンボモジ、　＋７ンの内皮 細胞表面の発現を減少し、細胞表面での凝固反応の正味の促進を導く。いくっが の場合では１個のレセプターが炎症プロセスおよび凝固プロセスの両方に関連し 得る。

血管内皮への白血球の粘着は、微生物の侵入に応答して白血球が組織に移動する 重要な初期段階である。誘導可能な白血球レセプターの１つのクラスであるＣＤ ｌｌ−ＣＤ１８分子は、内皮への粘着において何らかの役割を有すると考えられ るが、白血球粘着について同等またはそれ以上重要な機序は、内皮自身の誘導可 能な変化に起因すると思われる。

活性化血小板が、インビトロで好中球および単球の両方と相互作用することも判 明している。血小板と単球との相互作用は、血小板および単球へのトロンポスボ ンジンの結合が一部介在し得るが、その他の機序は除外されていない。好中球が 活性化血小板に結合する機序は、２価陽イオンを必要とすることがわかっている 以外、十分に解明されていない。血管の傷害に応答して、血小板が内皮下表面に 粘着し、活性になって凝固を支持することは周知である。微生物の侵入を押える ために、血小板およびその他の細胞も、創傷内への白血球の供給に重要な役割を 果たし得る。

トロンビンおよびヒスタミンのような「迅速な」活性化因子に曝露された内皮は 、２〜ｌＯ分以内に好中球に対して粘着性になり、一方、腫瘍壊死因子およびイ ンターロイキン−１などのサイトカイン順に［［ｉｎされた内皮は１〜６時間後 に粘着性になる。迅速な内皮依存性の白血球粘着は、細胞表面の脂質メディエー タ血小板活性化因子（ＰＡＦ）の発現、およびおそらく、その他の内皮表面レセ プターの出現に関連がある。白血球に対するサイトカイン誘導性の内皮の緩徐な 粘着には、少なくともその一部に、サイトカインに曝露された後に内皮細胞によ り合成され、好中球を結合する細胞表面に移送される内皮細胞レセプター、ＥＬ ＾ト１が介在する。ＥＬＡＭ−１の単離、特性決定およびクローニングは、Ｂｅ ｖｊｌａｅｑｕａら、　５ｅｉｅ±２４３．１１６０−１１６５　（＋９８９） に総説が記載されている。「ネズミＭｅｌ　１４抗原Ｊ、ｒＬｅｕ８Ｊ、ｒＬｅ ｕ８抗原」およびｒＬＡＭ−ＩＪとも呼ばれる末梢リンパ節指向性レセプターは 、リンパ球を末梢リンパ節の高内皮細静脈に結合させる好中球、単球およびリン パ球のもう１つの構造である。このタンパク質の特性決定およびクローニングは 、Ｌａ５ｋｙら、　Ｃｅ１ｌ　５６．１０４５−１０５５（１９８９）　（７ウ ス）およびＴｅｄｄｅｒら、　Ｌ−ム１工１回工１７０．　１２３−１３３　（ １９８９）に総説が記載されている。

ＧＭＰ−１４０（顆粒膜タンパク質１４０）は、ＰＡＤＧＥＭとしても周知であ るが、ドデシル硫酸ナトリウムポリアクリルアミドゲル電気泳動（５ＤＳ−ＰＡ ＧＥ）で評価すると、みかけ上の分子量が１４ｏ、ｏｏｏの、システインに富む 、高度にグリコジル化された細胞膜白糖タンパク質である。ＧＭＰ−１４０は最 初に、ＭｃＥｖｅｒおよびＭａｒｔｉｎ、Ｊ、　Ｂｉｏｌ、　Ｃｈｅｗ、　２５ ９＋９７９９−９８０４　（１９８４）により、ヒト血小板から精製された。こ のタンパク質は静止血小板のα顆粒に存在しているが、Ｓｔｅｎｂｅｒｇら、　 （１９８５）により報告されているように、血小板活性化後、原形質膜に速やか に再分布される。内皮細胞内にＧＭＰ−１４０が存在すること、およびこれらの 細胞によって生合成されることは、ＭｃＥｖｅｒら、　Ｂｌｏｏｄ　７０（５） Ｓｕｐｐｌ、　１：３Ｓ５ａ、　Ａｂｓｔｒａｃｔ　Ｎｏ、１２７４　（１９８ ７）により報告されている。内皮細胞内では、ＧＭＰ−１４０はＷｅｉｂｅｌ− Ｐａｌａｄｅ体として知られる貯蔵顆粒中に見いだされる（　ＭｃＥｖｅｒら、 Ｌユ且しユ■ｅｓｔ、８４：９２−９９　（１９８９）およびＨａｔｔｏｒｉら 、Ｊ、　Ｂｉｔ江−Ｃｈｅｗ、　２６４ニア７６８−７７７１　（１９８９）） 。Ｌａｒｓｅｎら、Ｃｅ１１　５９．　３０５−３１２　（１９８９年１０月） 、ならびにＨａｍｂｕｒｇｅｒおよびＭｃＥｖｅｒ、　Ｂｌｏｏｄ　７５：５５ ０−５５４　（１９９０）により、ＧＭＰ−１４０（ＰＡＤＧＥＭを呼ばれる） が、活性化血小板と好中球および単球との相互作用を媒介することも報告されて いる。

Ｊｏｈｎｓｔｏｎら、　Ｃｅ１ｌ　５６．１０３３−１０４４　（１９８９年３ 月２４日）および１９８９年３月８日に出願された米国特許出願番号０７／３２ ０，４０８で報告されたｃＤＮＡ由来のアミノ酸配列は、独立して折り返すと、 υわれる多数のモジコラ−ドメインを含有していることを示している。これらは Ｎ末端で開始し、「レクチン」　ト′メイン、ｒ　ＥＧＦＪ　ドメイン、補体結 合タン／くり質中のものと類似した９つの縦列共通配列の反復、貫膜ドメイン（ 鑑別スプラインングに起因すると思われる可溶型を除く）、および細胞質尾部を 含む。

血小板または内皮細胞がトロンビンなどの媒体により活性化されると、貯蔵顆粒 の膜は原形質膜と融合し、顆粒の可溶性内容物が外部環境に放出され、ＧＭＰ− １４０結合膜が数秒以内に細胞表面に現れる。活性化の結果として血小板および 内皮細胞の表面にＧＭＰ−１４０が迅速に再分布することは、この糖タンノくり 質が炎症または血管破裂部位で重要な役割を果たし得ることを示した。

この重要な役割は、ＧＭＰ−１４０が好中球（Ｇｅｎｇら、　Ｎａｔｕｒｅ　３ ４３ニア５７−７６０　（１９９０）；　Ｈａｗ＋ｂｕｒｇｅｒおよびＭｃＥｖ ｅｒ、　Ｂｌｏｏｄ　７５’：５５０−５５４　（１９９０））、単球（Ｌａｒ ｓｅｎら、廁且５９：３０５−３１２　（１９８９）：Ｍｏｏｒｅら、　Ｊ、　 Ｃｅ１ｌ　Ｂｉｏｌ、　１１２：４９１−４９９　（１９９１））、およびリン パ球のサブセット（Ｍｏｏｒｅら、　Ｊ、　Ｃｅ１ｌ　Ｂｉｏｌ、　１１２：４ ９１−４９９　（１９９１）およびＭｏｏｒｅら、旧ｏｏｄ　（Ｓｕｐｐｌ　１ ）　７８：４３９ａ　（１９９１））に対するレセプターであるという観察によ り確認されている。このようにＧＭＰ−１４０は、トロンビンのような作動薬で 刺激した血小板および内皮細胞の表面に迅速に移動した後、白血球に対するレセ プターとして働き得る。白血球供給におけるこの役割は、生理学的および病理状 態の両方における止血および炎症プロセスに重要であり得る。

ＧＭＰ−１４０由来のペプチドは、Ｒｏｄｇｅｒ　Ｐ、　ＭｃＥｖｅｒにより１ ９９０年７月１７日に出願された「機能的に活性なセレクチン由来のペプチド」 と題する、米国特許出願番号０７１５５４．１９９に記載されている。これらの ペプチドは患者の止血および炎症応答の診断および調節に有用であり、ＧＭＰ− １４０の白血球による認識を遮断することができるペプチドの、治療上有効な量 が投与される。

また１９９０年７月１７日に出願された米国特許出願番号０７１５５４．１９９ には、ＧＭＰ−１４０のレクチンドメイン内のペプチド配列が、他のタンパク質 、特にＥＬＡＭ−１および指向性レセプターのレクチンドメインとの相同性を有 し、これが精製ＧＭＰ−１４０への好中球粘着を選択的に阻害し、したがってこ れらの分子によって結合が変化したことを特徴とする患者および疾患の診断ア、 、セイ、この結合を変化させている化合物のスクリーニングア、２セイ、ならび に凝固および／′または炎症プロセスを含む血小板または細胞と白血球との相互 作用を阻害もしくは調節するための臨床用途に使用し得ると開示している。

ＥＬＡＭ−１、指向性レセプター、およびＧＭＰ−１４０は、その関連構造およ び機能に基づいて、「セレクチン類」と称せられてきた。ＥＬＡＭ−１は非刺激 内皮に存在しない。しかし、内皮が腫瘍壊死因子またはインターロイキン−１の ようなサイトカイン類に曝露されると、ＥＬＡＭ−１の遺伝子が転写され、次に はタンパク質に翻訳されるＲＮＡを生じる。その結果、Ｂｅｖｉ　１ａｃｑｕａ ら、ｏｃ、Ｎａｔｌ。Ａｃａｄ、　Ｓｃｉ、　ＵＳＡ　８４：９２３Ｂ−９２４ ２（１９８？）で報告されているように、サイトカイン類に曝露した１〜４時間 後に内皮細胞の表面にＥＬＡＭ−１が発現する（顆粒に貯蔵されて、活性化後数 秒以内に細胞表面上に現れるＧＭＰ−１４０と対照的）。

ＥＬＡＭ−１は、サイトカイン処理内皮への好中球の粘着を引き起こすことが判 明しており、したがってサイトカイン刺激内皮を通って組織内に白血球を移動さ せる際に重要と思われる。

ＥＬＡＭ−１のｃ　ＤＮＡ由来の一次構造は、その中に「レクチン」ドメイン、 ＥＧＦドメイン、および補体調節タンパク質のものに類似した（ＧＭＰ−１４０ における９つの代わりに）６つの反復、貫膜ドメイン、および短細胞質尾部を包 むことを示している。

ＧＭＰ−１４０とＥＬＡＭ−１との間には、両タンパク質の全体を通じて広範囲 な配列相同性があるが、レクチンおよびＥＧＦドメインにおける、その類似性は 特に著しい。

指向性レセプターは、リンパ組織内で特殊化された内皮細胞にリンパ球を結合さ せるリンパ球表面構造であり、高内皮細胞または高内皮細静脈と呼ばれる（　Ｙ ｅｄｎｏｃｋおよびＲｏｓｅ、Δｄｖａｎｃｅｓ　ｉｎ　Ｉ＋ｕ＋ｕｎｏｌｏ　 、　Ｖｏｌ、４４．　Ｆ、１．Ｄｉｘｏｎ編、３１３−３７８　（Ａｃａｄｅ■ ｉｃ　Ｐｒｅｓｓ、ニューヨーク）　１９８９に総説が記載されている）。この 結合により、リンパ球は内皮を横切って、プロセス抗原に曝露されるリンパ組織 内に移動することができる。リンパ球は次に、リンパ系を通って血液中に再入す る。指向性レセプターはレクチンドメイン、ＥＧＦドメイン、２つの補体結合反 復、貫膜ドメイン、および短細胞質尾部を含む。指向性レセプターも、特にレク チンおよびＥＧＦドメインにおいてＧＭＰ−１４０との広範囲な配列相同性を共 有する。

ＧＭＰ−１４０，ＥＬＡＭ−１、および指向性レセプター（ＬＥＬＩ−８）間の レクチンドメインの比較に基づいて、ＥＬＡＭ−１、指向性レセプター、および その他の相同セレクチン類が炎症プロセスの成分に結合するのを阻害するか、ま たは逆にＧＭＰ−１４０結合のみを阻害する、ＧＭＰ−１４０への好中球の結合 を阻害するペプチドを選択することが可能であり得る。

血小板−白血球相互作用のインビボでの意義は、注意深く研究されていない。し かし、血管傷害に応答して、血小板が内皮下表面に粘着し、活性になり、凝固を 支持することは周知である。微生物の侵入を阻止するために、血小板およびその 他の細胞は、創傷内への白血球の供給に重要な役割も演じ得る。逆に、ｌ５ｓｅ ｋｕｔｚら、　Ｌａｂ、Ｉｎｖｅｓｔ、　４９ニア１６　（１９８３）に報告さ れているように、白血球が炎症部位の組織内に血小板を供給し得る。

凝固および炎症経路は、組織損傷に応じて協調様式で調節されている。例えば、 活性化内皮細胞は、白血球に対して粘着性になる以外に、細胞表面に組織因子を 発現し、トロンボモジュリンの内皮細胞表面の発現を減少し、細胞表面での凝固 反応の正味の促進を導く。いくつかの場合では１個のレセプターが炎症プロセス にも凝固プロセスの両方に関連し得る。

止血および炎症経路に関与するタンパク質は、ヒトの疾もの診断目的および治療 にとって重要である。しかし、タンパク質を治療に使用するには多くの問題があ る。タンパク質は通常、患者に投与するのに十分な量を生産するには費用がかか る。さらに、患者に１回以上投与した後、そのタンパク質に対する反応が生じ得 る。したがって、そのタンパク質と同じ、またはそれより優れた活性を有し、合 成に費用がかからず、再現性があり、比較的無害なペプチドを開発することが望 ましい。

合成的にＲ１！され得、タンパク質そのものから誘導されるペプチドと少なくと も同等、またはそれ以上の活性を有するペプチドを開発することが好ましい。

したがって、本発明の目的は、ＧＭＰ−１４０、ＥＬＡＭ−１、およびリンパ球 指向性レセプターを含むセレクチン類により認識される細胞と相互作用するペプ チドを提供することである。

本発明の池の目的は、内皮または血小板への白血球の粘着を阻害するのにこれら のペプチドを使用する方法を提供することである。

本発明のさらなる目的は、免疫応答および止血経路を調節するのにこれらのペプ チドを使用する方法を提供することである。

本発明のさらに他の目的は、ＧＭＰ−１４０、ＥＬＡＭ−１、およびリンパ球指 向性レセプターに関連する診断アッセイに使用するペプチドを提供することであ る。

発明の要約 ＧＭＰ−１４０のレクチンドメインの３つの領域由来のペプチドおよび関連セレ クチンであるＥＬＡＭ−１およびリンパ球指向性レセプターは、ＧＭＰ−１４０ への好中球粘着を阻害することが見いだされている。

以下の式を有するこれらおよび他のペプチドまたはその薬学的に許容され得る塩 が合成されている：Ｒ’−Ｘ−Ｐ−Ｑ−３−Ｔ−Ｕ−Ｖ−Ｗ−Ｚ−Ｙ−Ｒ２（１ ）Ｒ’−Ｐ−Ｑ−５−Ｔ−Ｕ−Ｖ−Ｗ−Ｚ−Ｒ２（１１）ここで、式（１）のＸ および式（１１）のＰはＮ末端アミノ酸であり、Ｒ１は官能基に結合した部分（ ＮＨＲ’）であり、式（１）のＹおよび式（１１）のＺはＣ末端アミノ酸であり 、Ｒ２はカルボキシ官能基における単結合した酸素に結合した部分（Ｃ（０）Ｏ Ｒ２）であり、 ＰはＤ−またはＬ−チロシン、Ｄ−またはＬ−フェニルアラニン、Ｄ−またはＬ −リジン、Ｄ−またはＬ−グルタミン酸、Ｄ−またはＬ−アルギニン、Ｄ−また はＬ−システィン、Ｄ−またはＬ−ＯＲ”−チｏシフ、Ｄ　−＊　タハＬ　−Ｎ ｅ′−Ｒ３−ｆ　ｏ　シフ、Ｄ−マｆ、−はＬ−４−アミ／フェニルアラニン、 Ｄ−またはＬ−Ｒ’−フェニルアラニン、Ｄ−またはＬ−ピリジルアラニン、Ｄ −またはＬ−ナフチルアラニン、またはＤ−またはＬ−テトラヒドロイソキノリ ンカルボン酸であって、ここでＲ３は低級アルキルまたはアリールであり、Ｒ′ はハロゲン（７）素、塩素、臭素またはヨウ素）であって、 ＱはＤ−またはＬ−トレオニン、Ｄ−またはＬ−リジン、Ｄ−またはＬ−グルタ ミン酸、Ｄ−またはＬ−システィン、またはグリシンであり、 Ｓ　ＩＩ　Ｄ−またはＬ−アスパラギン酸、Ｄ−またはＬ−ヒスチジン、Ｄ−ま たはＬ−グルタミン酸、Ｄ−またはＬ−アスパラギン、ＤまたはＬ−グルタミン 、Ｄ−またはＬ−アラニン、Ｄ−またはＬ−フェニルアラニン、Ｄ−またはＬ− リジン、またはグリシンであり、 Ｔ、Ｕ、、ＶおよびＮｌ１、独立して、Ｄ−またはＬ−ｏイ７ン、Ｄ−またはＬ −インロイシン、Ｄ−またはＬ−アラニン、Ｄ−またはＬ−バリン、Ｄ−または Ｌ−アロイソロイシン、グリシン、Ｄ−またはＬ−グルタミン酸、Ｄ−またはＬ −アスパラギン酸、Ｄ−またはＬ−アスパラギン、Ｄ−またはＬ−グルタミン、 Ｄ−または■、−トレオニン、または脱アミノ酸であり、ここで脱アミノ酸とは 残基Ｔ、Ｕ、Ｖ、またはＷのいずれかがペプチド式■またはＩＩから、欠如して いるものを意味し、ＺはＤ−またはＬ−グルタミン、Ｄ−またはＬ−グルタミン 酸およびＤ−またはＬ−アスパラギンであり、Ｒ１はＨ（遊離のＮ末端基を意味 する）、ポルミル、低級アルカノイル、アロイルまたは脱アミ／（基Ｒ１に隣接 し、式ＩのＸまたは式２のＰのいずれかがアミノ酸のαアミノ基を欠如しており 、Ｈで置き換えられていることを意味する）であり、 Ｒ２はＨ（遊離のＣ末端カルボン酸を示す）、０（低級アルキル）、０（アリー ル）、ＮＲ’Ｒ’であり、ここでＲ３およびＲ′は独立して、Ｈまたは低級アル キル、または脱カルボキシ（ＲＩが式■または２においてそれに隣接しており、 ＹまたはＺがそれぞれＨで置き換えられるアミノ酸のαカルボン酸基を意味する ）であり、そして ＸおよびＹは１〜１０個の直鎖のアミノ酸である。

式■およびＩＩのペプチドは、シグナルペプチドの開裂後に成熟タンパク貫のＮ 末端として定義された残基１とともに、そのコア領域としてＧＭＰ−１４０の２ ３〜３０個のアミノ酸配列部分を有する。

実施例は、５〜１５００μＭの範囲の濃度における式ＩまたはＩＩのペプチドが 、ＧＭＰ−１４０への好中球の結合を阻害することを示す。コア配列内、および Ｎ末端およびＣ末端隣接領域内の変化により、生物学的活性を失わないことが見 いだされた。

これらのいくつかの改変は、ヒト血清中に見いだされる酵素による分解に対する 、式！またはＩＩのペプチドの安定性を著しく高め得ることも見いだされている 。

本発明のペプチドは診断剤として、また適切な薬学的担体と組み合わせて、凝固 プロセスまたは炎症プロセスの調節または阻害における臨床用途に有用である。

図面の簡単な説明 図１は、ＧＭＰ−１４０への好中球の結合阻害における、式Ｉおよび１１の数種 のペプチドの活性、％阻害対ペプチド濃度（ｍＭ）をＧｌｎ−Ａｓｎ−Ａｒｇ− Ｔｙｒ−Ｔｈｒ−Ａｓｐ−Ｌａｕ−Ｖａｌ−Ａｌａ−工１ａ−Ｇｉｎ−７＝ｖ’ 　；白いａｎｄ　、Ａｓｎ−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−Ｔｈｒ−Ａｓｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ −Ａｌａ−工１ｅ−Ｇｌｎ−了ミ白　Ｊ、ｔ＋ＴｉＨｊ’ｆ７　、Ａｒｑ−Ｔ” ）／ｒ−Ｔｈｒ−Ａｓｐ−Ｌａｕ−Ｖａｌ−Ａｌａ−工１ｅ−Ｇｌｎ−７ｔ　） ”　：　白ｔｔ　％丑り　、Ｔｙｒ−Ｔｈｒ−Ａｓｐ−Ｌａｕ−Ｖａｌ−Ａｌａ −工１ａ−Ｇｌｎ−Ｔ＝ニド；　％、イ＝丙ｒ　？ｔＰ’し−Ｔｙｒ−Ｔｈｒ− Ａｓｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ａｌａ−工１ｅ−Ｇｌｎ−丁二ド；　臼（・　三ｌ　 、’Ｉ’ｙｒ−Ｔｈｒ−Ｇｌｕ−Ｌａｕ−Ｖａｌ−Ａｌａ−工１ｅ−Ｇｌｎ−７ ミト’；　Ｘ、Ｔｙｒ−Ｔｈｒ−Ｈｉｓ−Ｌａｕ−Ｖａｌ−Ａｌａ−工１ａ−Ｇ ｌｎ−アミＩ′ｌ　★、Ｔｙｒ−Ｔｈｒ−Ａｓｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ａｌａ−工 １ａ−Ｇｌｎ−Ａｓｎ−Ｌｙｓ−Ａｓｎ−Ｇｌｕ−７ミト　；　＋＋、Ｌｅｕ− Ｇｌｎ−Ｔｈｒ−Ａｌａ−Ｔｙｒ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−１１ａ−ＴＥＩ−”　（亀 　”コ〉ト０−ＩＬ　）。

図２は、式■および１１に描かれている改変により、ヒト血清中に見いだされる 酵素に対する安定性が著しく高められることを示すもので、残留ペプチドの％対 時間（分）をグラフで表シテイル（黒イ三角、Ａｃ−ＹＴＤＬｖＡＩＱ−ＮＴｏ 、０．　ＹＴＤＬＶＡＩＱ−Ｎｌ２）。

発明の詳細な説明 ＧＭＰ−１４（ｌ活性を有するペプチド、これらのペプチドを含有する治療組成 物、これらのペプチドの調製方法およびその使用方法が開示されている。これら のペプチドは以下の式のいずれかまたはその薬学的に許容され得る塩を有する： Ｒ’−Ｘ−Ｐ−Ｑ−３−Ｔ−Ｕ−Ｖ−Ｗ−Ｚ−Ｙ−Ｒ２（ｒ）Ｒ’−Ｐ−Ｑ−３ −Ｔ−Ｕ−Ｖ−Ｗ−Ｚ−Ｒ２（ＩＩ）ここで、式（１）のＸおよび式（１１）の ＰはＮ末端アミノ酸であり、Ｒ１はアミン官能基に結合した部分（ＮＨＲ’）で あり、 式（＋）のＹおよび式（ＩＩ）のＺはＣ末端アミノ酸であり、Ｒ２はカルボキシ 官能基における単結合した酸素に結合した部分（Ｃ（０）ＯＲ２）であり、 ＰはＤ−またはＬ−チロシン、Ｄ−またはＬ−フェニルアラニン、Ｄ−またはＬ −リジン、Ｄ〜またはＬ−グルタミン酸、Ｄ−またはＬ−アルギニン、Ｄ−また はＬ−システィン、Ｄ−またはＬ−ＯＲ３−チロシン、Ｄ−またはＬ−Ｎ”−Ｒ ３−チロシン、Ｄ−またはＬ−４−アミノフェニルアラニン、Ｄ−またはＬ−Ｒ ’−フェニルアラニン、Ｄ−またはＬ−ピリジルアラニン、Ｄ−またはＬ−ナフ チルアラニン、またはＤ−またはＬ−テトラヒドロイソキノリンカルボン酸であ って、ここでＲ３は低級アルキルまたはアリールであり、Ｒ′はハロゲン（フッ 素、塩素、臭素またはヨウ素）であって、 ＱはＤ−また；よＬ４レオニン、Ｄ−またはＬ−リジン、　Ｄ−またはＬ−グル タミン酸、Ｄ−またはＬ−システィン、またはグリシンであり、 ＳはＤ−またはＬ−アスパラギン酸、Ｄ−またはＬ−ヒスチジン、Ｄ−ｔたはＬ −グルタミン酸、Ｄ−またはし−アスパラギン、ＤまたはＬ−グルタミン、Ｄ− またはＬ−アラニン、Ｄ−またはＬ−フェニルアラニン、Ｄ−またはＬ−リジン 、またはグリシンであり、 Ｔ、Ｕ、ＶおよびＷは、独立して、Ｄ−またはＬ−ロイシン、Ｄ−またはＬ−イ ソロイシン、Ｄ−またはＬ−アラニン、Ｄ−またはＬ−バリン、Ｄ−またはＬ− アロイソロイシン、グツシン、Ｄ−またはＬ−グルタミン酸、Ｄ−またはＬ−ア スパラギン酸、Ｄ−またはＬ−アスパラギン、Ｄ−またはＬ−グルタミン、Ｄ− またはＬ−）レオニン、または脱アミノ酸であり、ここで脱アミノ酸とは残基Ｔ 、Ｕ、■、またはＷのいずれかが、ペプチド式Ｉまたは１１から、欠如している ものを意味し、ＺはＤ−またはＬ−グルタミン、Ｄ−またはＬ−グルタミン酸お よびＤ−またはＬ−アスパラギンであり、Ｒ１はＨ（Ｉｎ離のＮ末端基を意味す る）、ホルミル、低級アルカ／イル、アロイルまたは脱アミノ（基Ｒ１に隣接し 、式！のＸまたは式２のＰのいずれかが、アミノ酸のαアミ７基を欠如しており 、Ｈて置き換えられているアミノ酸を意味する）であり、 Ｒ２はＨ（遊離のＣ末端カルボン酸を示す）、Ｏ（低級アルキル）、０（アリー ル）、ＮＲ’Ｒ’であり、ここでＲ３およびＲ′は独立して、Ｈまたは低級アル キル、または脱カルボキシ（Ｒｌが式Ｉまたは２においてそれに隣接しており、 ＹまたはＺがそれぞれＨで置き換えられるアミノ酸のαカルボン酸基を意味する ）であり、 ＸおよびＹは１−１０個の直鎖のアミノ酸である。

好ましいペプチドは、Ｒ１がＨであり、Ｒ２がＮＲ３Ｒ’である式Ｉ、およびＲ １がＨまたはアセチルであり、Ｒ１がＮＲ３Ｒ４である式１１のペプチドであり 、ここでＳはアスパラギン酸、グルタミン酸またはヒスチジンでアル。

最も好ましいペプチドは、以下のペプチドである：Ｔｙｒ−Ｔｈｒ−Ａｓｐ−Ｌ ａｕ− Ｖａｌ−Ａｌａ−工１ａ−Ｇｉｎ−ＮＨ２；　Ｔｙｒ−Ｔｈｒ−１（ｉｓ−Ｌａ ｕ−Ｖａｌ−Ａｌａ−工１＊−Ｇｌｎ−Ｎ’Ｈ，；　Ａｃ＠ｔｙｌ−Ｔｙｒ−Ｔ ｈｒ−Ａｓｐ−Ｌａｕ−Ｖａｌ−Ａｌａ−工１ａ−Ｇｉｎ−ＮＨ，；　Ｃｙｓ− Ｇｌｎ−Ａｓｎ−Ａｒｑ−Ｔｙｒ−Ｔｈｒ−Ａｓｐ−Ｌ＠ｕ−ＶａＬ−Ａｌａ− １１＠−ＧＬｎ−ＮＨ２；　Ａｓｎ−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−Ｔｈｒ−Ａｓｐ−Ｌａｕ −Ｖａｌ−Ａｌａ−工１ｅ−Ｇｌｎ−Ｎｌ（２；　Ａｒｇ−Ｔｙｒ−Ｔｈｒ−Ａ ｓｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ａｌａ−１１ｅ−Ｇｌｎ−ＮＨ，；　Ｔｙｒ−Ｔｈｒ− Ｇｌｕ−Ｌａｕ−Ｖａｌ−Ａｌａ−工１ｅ−Ｇｌｎ−Ｎ’Ｈ，；　Ｔｙｒ−Ｔｈ ｒ−Ａｓｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ａｌａ−工１ｅ−Ｇｌｎ−Ａｓｎ−Ｌｙｓ−Ａｇ ｎ−Ｇｌｕ−ＮＨ，；　Ｄ−Ｔｙｒ−Ｔｈｒ−Ａｓｐ−Ｌａｕ−Ｖａｌ−Ａｌａ −工１ａ−Ｇｉｎ−）Ｊ’Ｈ２；Ｔｙｒ−Ｄ−Ｔｈｒ−Ａｓｐ−Ｌａｕ−Ｖａｌ −人１ａ−工１ａ−Ｇｉｎ−Ｎ’Ｈ，；　Ｔｌ／ｒ−Ｔｈｒ−Ｄ−Ａｓｐ−Ｌｇ ｕ−Ｖａｌ−Ａｌａ−工１ｅ−Ｇｌｎ−ＮＨ２；　Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ａｓｐ−Ｌ ａｕ−Ｖａｌ−Ａｌａ−工１ｅ−Ｇｌｎ−Ｎ）（、；　Ｇｌｎ−Ａｓｎ−Ａｒｇ −Ｔｙｒ−Ｔｈｒ−Ａｓｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ａｌａ−工１ｅ−Ｇｌｎ一本明細 書中で使用した「低級アルキル」という用語は、メチル、エチル、プロピル、イ ソプロピル、ブチル、イソブチル、ｔ−ブチル、ペンチル、インペンチル、ネオ ペンチル、およびへキ／ルのような、１〜６個の炭素原子を有する分枝鎖、直鎖 および環状の飽和炭化水素を含む。「低級アルカノイル」という用語はＲＣ（０ ）を意味し、ここでＲは低級アルキル基である。アロイルという用語はＡｒＣ（ ０）を意味し、ここでＡｒはアリール基であり、すなわち環を１〜３個有する芳 香族または攬素環構造であって、これは環の融合構造であってもなくてもよく、 ハロゲン、炭素、または窒素（Ｎ）、硫黄（Ｓ）、リン（Ｐ）、およびホウ素（ Ｂ）のような他のへテロ原子で最適に置換されている。

式■のペプチドは、遊離のペプチドまたは薬学的に許容され得る塩の形もで使用 し得る。周知の方法に従ってペプチドと酸を混合することにより、アミン塩を調 製し得る。適切な塩として、塩酸、臭化水素酸、過塩素酸、硝酸、チオシアン酸 、硫酸、およびリン酸のような無機酸、ならびにギ酸、酢酸、プロピオン酸、グ リコール酸、乳酸、ピルビン酸、ンユウ酸、マロン酸、コハク酸、マレイン酸、 フマル酸、アントラニル酸、ケイ皮酸、ナフタレンスルホン酸、およびスルファ ニル酸などの有機酸が含まれる。

周知の方法に従ってペプチドを塩基と混合することにより、ペプチド中のカルボ ン酸を塩に変換し得る。適切な塩基には、水酸化ナトリウム、水酸化アンモニウ ム、および水酸化カリウムなどの無機塩基、ならびにモノ−、ジー、およびトリ ーアルキルおよびアリールアミン（例えば、トリエチルアミン、ジイソプロピル アミン、メチルアミン、およびジメチルアミン、ならびに任意に置換されたモノ −、ジー、およびトリーエタノールアミン）などの有機塩基が含まれる。

本明細書中に言及したように、ペプチドのアミノ酸成分およびその調製に使用し た一部の物質は、便宜上省略形で示す。

これらの省略形は以下のとおりである。

（以下余白） アミノ酸　省略形 Ｄ−アラニノ　Ｄ−Ａｌａ Ｌ−アロイソロイ７ノ　Ａｌ１ｅ Ｄ−Ｔロイソｏイ／７　Ｄ−ＡＩｌｅ Ｄ−アスパラギ：／　Ｄ−Ａｓｎ　Ｎ Ｌ−アスパラギン　Ｌ−Ａｓｎ Ｌ−アスパラギン酸　７．　ｓ　ｐ　ＤＤ−了ス／４ラギ７ａ！　Ｄ−Ａｓｐ　 ＋ＩＬ−７ステイン　Ｃｙｓ　Ｃ ｐ−／スティン　Ｄ−Ｃｙｓ ｌ、−グルタミン酸　Ｇｌｕ　Ｅ Ｄ−グルタミン酸　Ｄ−Ｇ　ｌ　ｕ Ｌ−グルタミノ　Ｇｌｎ　Ｋ Ｄ−グルタミン　Ｄ−Ｇｌｎ　ｋ グリノン　Ｇｌｙ　Ｇ Ｌ−ヒスチジン　ＨＩ　ｓ　Ｈ Ｄ−ヒスチジン　Ｄ−Ｈｌｓ　ｈ Ｌ−イノロイシン　！１ｅ　Ｉ Ｄ−イア０イ／ノ　Ｄ−１１ｅ　ｌ Ｌ−ロイシン　Ｌ、ｅｕ　Ｌ Ｄ−ロイ／ノ　Ｄ−Ｌ　ｅ　ｕ　Ｉ Ｌ−フェニルアラニア　Ｐｈｅ　Ｆ Ｄ−フェニルアラニン　Ｄ−Ｐｈｅ　ｆＬ−ピログルタミン酸　ｐＧｌｕ Ｄ−ピログルタミノ酸　Ｄ−１１１ＧＩｕＬ−セリフ　Ｌ−５ｅｒ　Ｓ Ｄ−セリン　Ｄ−５ｅ　ｒ し一トレオニ７　Ｌ−Ｔｈｒ　Ｔ Ｄ−トレオニン　Ｄ−Ｔｈｒ　Ｌ Ｄ−トリブトファ：’　Ｄ−Ｔｒｐ　ｗＬ−バリン　Ｖａｌ　Ｖ Ｄ−バリン　Ｄ−Ｖａｌ 試薬　省略形 Ｎ、Ｎ−ノイソプロピルエチルアミン　ＤＩＥＡＮ−メチルピロリドン　ＮＭＰ ｌ−ヒドロキシベンゾトリアゾール　ＨＯＢＴペプチドの調製方法 本発明のペプチドは、一般に、例えば引用刊行物に記載されている、下記の周知 の方法で調製し得る。なおその周知の方法は本願に援用するものとする。好まし い方法では、本発明のペプチドは、ｊ、ＡＩＩｅｒ、　Ｃｈｅｍ、Ｓｏｃ、、　 ８５．２１４９−２１５４（１９６３）にＭｅｒｒＨｉｅｌｄが初めて報告した 固相合成法にしたがって調製される。他の方法は、例えばＭ、　Ｂｏｄａｎｓｚ ｋｙら、Ｐｅ　ｔｉｄｅ　ｓ　ｎｔｈｅｓｉｓ、第２版（Ｊｏｈｎ　Ｗｉｌｅｙ 　＆　５ｏｎｓ、　１９７１ｉ）、および当該技術分野の当業者にとって周知の 他の参考論文に記載されている。

このような合成において使用可能な適切な保護基とその略号は、上記のテキスト およびＪ、Ｆ、ｌｆ、ＭｃＯｍｉｅ、　Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ　Ｇｒ。

ｕ　ｓ　ｉｎ　Ｏｒ　ａｎｉｃ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒ　（Ｐｌｅｎｕｍ　Ｐｒｅｓ ｓ、二１−ヨーク、　１９７３）に記載されている。本願に用いられる共通の保 護基は、ｔ−ブチルオキシカルボニル（Ｂｏｃ）、フルオレニルメトキシカルボ ニル（ＦＭＯＣ）、ベンジル（Ｂｚｌ）、ト／ル（Ｔｏｓ）、Ｏ−プロセフ５ニ ルメトキンカルボニル（ＢｒＣＢＺ）　、フェニルメトキシカルボニル（ＣＢＺ ）　、２−クロロフェニルメトキノカルボニル（２−ＣＩ−ＣＢＺ）、４−メト キン−２，３，６−トリメチルベンゼンスルホニル（Ｍｔｒ）、トリチル（Ｔｒ ｔ）、ホルミル（ＣＨＯ）、およびｔ−ブチル（ｔ−Ｂｕ）である。

固相法によって式１および■のペプチドを合成する一般的な合成手順は下記のと おりである。

Ａ、Ｎ’−Ｂｏｃ保護を用いた固相ペプチド合成のための一般的な合成手順ｃ、 ＤＩＥＡ　５分 ７．１Ｏ％ＡＣ２０，５％ＤＩＥ＾のＮ　Ｍ　Ｐ溶液　１　９分ｇ、　ＣＨ２Ｃ ｌ２　５　３分 ｇ、Ｎ”−Ｆ　Ｍ　ＯＣ保護を用いた固相ペプチド合成のための一般的な合成手 順２．２０％ピペリノンのＮＭＰ溶液　１　１５分３、ＮＭＰ　６　９分 ４、カアプリング　ｌ　７１分 前もって形成されたＦＭＯＣ−アミノ酸−＋１０ＢＴ活性エステルのＮＭＰ溶液 ５、ＮＭＰ　６　７分 ＢｏｃまたはＦＭＯＣのいずれかの方法を用いて合成したペプチドの脱保護され たＮ′ｘ−アミノ基のＮ末端アセチル化はＮＭＰ中１０％Ａｃ２０と５％Ｄ　Ｉ ＥＡで行われ、生成したペプチドレジンをＮＭＰおよび／またはＣ１１２Ｃ１２ で洗浄する。

これらのペプチドは、当該技術分野の当業者にとって周知の標準の遺伝子工学技 術を用いても調製し得る。例えば、本発明のペプチドは、そのペプチドをフード する核酸を発現ベクターに挿入し、そのＤＮＡを発現させ、次いで必要なアミノ 酸の存在下で該ＤＮＡをペプチドに翻訳させることによって酵素的に製造し得る 。生成したペプチドはクロマトグラフィー法または電気泳動法を用いて精製する か、またはキャリアータンパク質を用いて精製される。キャリアータンパク質を 用いる方法は、キャリアータンパク質をコードする核酸配列と、ペプチドをコー ドする配列とをインフェイスで発現ベクターに挿入することによってペプチドに 融合し、次いでペプチドから開裂し得る。この融合タンパク質−ペプチドは、ク ロマトグラフィー法、電気泳動法または免疫学的方法を用いて単離し得る（例え ば担体タンパク質に対する抗体を通じて樹脂に結合させる）。得られたペプチド は、化学的方法または酵素による方法、例えば加水分解酵素を用いて開裂させ得 る。

薬剤組成物の調製方法 これらのペプチドを含有する薬剤組成物を調製するために、式■もしくは１１の ペプチドまたはその塩基もしくは酸の付加塩を、活性成分として、通常の薬剤配 合法にしたがって、薬剤担体と組み合わせる。この担体は、例えば舌下、直腸、 鼻、経口、もしくは非経口の投与を行うのに要求される製剤の形態によって、広 範囲の種類の形態を取り得る。経口投与剤形の組成物を調製する際には、通常の 薬剤媒体のいずれでも用いられ得る。例えば経口液体製剤（たとえば懸濁液剤、 エリキンル剤または水剤）をｇ製するのには、水、油、アルコール、香味剤、保 存剤、および着色剤が用いられ、または経口固形製剤（例えば散剤、カプセル剤 または錠剤）を調製するには、デンプン、糖、希釈剤、顆粒化剤、滑沢剤、結合 剤および崩壊剤のような担体が用いられ得る。

生物学的利用率を増大する放出制御形態もしくは強化制御形態も使用し得る。投 与が容易なため、錠剤とカプセル剤は、固形薬剤担体を用いる場合、最も有利な 経口単位投与形態である。所望の場合、錠剤は、標準的方法で糖衣錠にするかま たは腸溶性被膜とし得る。

非経口製品については、担体は通常滅菌水であるが、溶解性を補助するためまた は保存剤として、担体の成分を含有させ得る。注射用懸濁液剤も調製し得るが、 この場合適当な液体担体および懸濁剤を使用し得る。

また本発明のペプチドは、水剤もしくはクリーム剤を局所に里布することによっ て、創傷もしくは炎症の部位に局部的に投与し得る。

あるいは、本発明のペプチドは、リポソームまたは微小球体（ｍｉｃｒｏｓｐｈ ｅｒｅｓ）　（もしくは微小粒子）で投与し得る。患者に投与するリポソームお よび微小球体の調製方法は当該技術分野の当業者に周知である。米国特許第４． ７８９．７３４号には、生物学的物質をリポソーム中に包みこむ方法が記載され ている。特に、その物質は溶解して水溶液とし、適切なリン脂質および脂質が必 要に応じて界面活性剤とともに添加され、および必要な場合その物質は透析もし くは音波処理に付される。

周知の方法の優れた総説として、Ｇ、Ｇｒｅｇｏｒｉａｄｉｓ、　１４章　−Ｌ ｉｐｏｓｏｗｉｅｓ−、Ｄｒｕ　Ｃａｒｒｉｅｒｓ　ｉｎ　Ｂｉｏ　ｏ　ａｎｄ 　Ｍ　ｄｉｅｉｎｅ　２８７′３４１頁（Ａｃａｄｅｇ＋ｉｃ　Ｐｒｅｓｓ、　 １９７９）に記載されている。ポリマーまたタンパク質で形成された微小球体は 当該技術分野の当業者には周知であるので、胃腸器官を通して直接血液流に入る ように調製し得る。あるいは、本発明のペプチドは体内に組み込んでもよ（、数 日間〜数箇月間の範囲の期間にわたってゆっくり放出するためのに移植する微小 球体もしくは微小球体の複合体でもよい。例えば米国特許第４．９０６．４７４ 号、同第４、９２５．６７３号および同第３．６２５．２１４号を参照のこと。

結合を実証する方法 生物学的に活性なペプチドは、好中球、単球、リンパ球のサブセットあるいは他 の細胞がＧＭＰ−１４０に結合するのを阻害するペプチドか、またはＥＬＡＭ− １および／またはその指向性受容体によって仲介される白血球が内皮に粘着する のを阻害するペプチドである。

ペプチドは、細胞に対する粘着、例えば好中球がプラスチＩり製ウェルに固定化 された精製ＧＭＰ−１４０に粘着するのを阻害する能力を、Ｇｅｎｇら、Ｎａｔ ｕｒｅ、３４３．７５７〜７６０　（１９９０）に記載のアッセイを用いてスク リーニングし得る。

ヒト好中球は、Ｆｌｏｗ　ＬａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓのＭｏｎｏ−Ｐｏｌｙ分離 媒体を用い密度勾配遠心分離にかけて、ヘパリン化した全血から単離される。好 中球す濁液は９８％以上の純度であり、トリノくンブルー排除法によって９５％ 以上が生存している。粘着性ア。

セイのために、好中球を、１．２６ｍＭ　Ｃａ”および、０．８１ｍＭ　Ｍｇ” （ＨＢＳＳ、　Ｇｉｂｅｏ）を５ｓｇ／ｍｌヒト血清アルブミン（）ＩＩＩＩｓ ｓ／）ＩｓＡ）とともに含有する／％ンクスの均衡塩類溶液中に、２Ｘ１０６細 胞／＋ｎｌの濃度で懸濁させる。粘着性アッセイは、９６ウエルマイクロタイタ ープレート、Ｃｏｒｎｉｎｇ、で３個ずつ、各種のタン、ｆり質溶液５０μｍと ともに、４°Ｃにて一晩インキユベートして行われる。

ＧＭＰ−１４０は、下記のように、抗体５１２−セファロース１″による免疫ア フイニテイクロマトグラフイーおよびＭｏｎｏ−Ｑ”カラム（ＦＬＰＣ，Ｐｈａ ｒｍａｃｉａ　Ｆｉｎｅ　Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ）によるイオン交換クロマトグラ フィーによって、ヒト血小板溶解物から単離する。

血液銀行から入手して４°Ｃで貯蔵した古いヒト血小板ノでツク（１００単位） をプールし、ｐＨ７，５，５ｄ　ＥＤＴＡに調節し、ｌリットルボトルで３０分 間、４．０００ｒｐ＋＋で遠心分離し、１リツトルの０．ＩＭ　ＮａＣ１，２０ ｆｆ１Ｍ　）リスｐＨ７，５（ＴＢＳ）、５ｍＭ　ＥＤＴＡ、　５ｍＭベンズア ミジノで３回洗浄する。

得られたベレットを、最少量の洗浄緩衝液中に再懸濁してＤＩＦＰ中でｌ＋ｎＭ にし、次に５０ｍ１のねしふた付試験管中で一８０’Ｃで凍結した。凍結した血 小板を解凍し、５０ｍ１　ＴＢＳ、　５謁Ｍベンズアミン、５諷Ｍ　ＥＤＴＡ　 ｐｌ＋７．５．１００Ｍロイペプチン中に再懸濁させる。得られた懸濁液を、６ ００■ｌ凍結乾燥フラスコを用いてドライアイス−アセトン浴中で、凍結と解凍 を２回行い、次にガラス／テフロン乳鉢と乳棒でホモジナイズして、　ＤＩＦＰ 中で１■Ｍにする。ＮａＣ１の濃度は４Ｍ　ＮａＣ１の貯蔵溶液を用いて０．５ Ｍに調節する。得られた懸濁液を４℃で攪拌した後、ポリカーボネート試験管中 で、３３．０ＯＯｒｐｆｆｉにて６０分間、４°Ｃにて遠心分離する。上演（０ ，５Ｍ　ＮａＣ１洗浄液）を取り出して保管する。この上清は可溶性のＧＭＰ− １４０を含有する。この上清とともに、ベレットの頂部を取り出さないように注 意する。そのペレットを抽出緩衝液（ＴＢＳ、　５ｍＭベンズアミジン、Ｓ＋ａ Ｍ　ＥＤＴＡ　ｐＨ？、５．１００μＭＯイペブチン、２％Ｔ「已０口ｘ−ｔｏ ｏ）中でホモジナイズする。１９．５００ｒｐｍにて２５分間、４°Ｃにて遠心 分離した後、上清を取り出す。

この抽出操作をペレットについて繰り返し、生じた上清は最初の上清と混合する 。混合した抽出液はメンプラン状のＧＭＰ−１４０を含有し、これを０．５Ｍ　 ＮａＣ１に調節する。

可溶性の画分（０，５Ｍ　ＮａＣ１洗浄水）およびメンプラン抽出物（これも０ ．５Ｍ　ＮａＣｌに調節する）は、５ｍｇ／＋＊ｌの濃度で２時間４℃にてＡｆ ｆｉｇｅｌ　（Ｂｉｏｒａｄ）に予めカップリングさせたモノクローナル抗体５ １２（ヒトＧＭＰ−１４０に対する抗体）の別々のプールに吸収させる。樹力旨 を静置させた後、上清を除去する。結合されたＧＭＰ−１４０を含有するＳ１２ 　Ａｆｆｉｇｅｌを、カラムに注入し、−晩、４°Ｃにて、４００ｍ１の０．５ Ｍ　ＮａＣｌ、２０ｍＭ　）リス　ｐＨ１，５，０，０１％Ｌｕｂｒｏｌ　ＰＸ で洗浄する。

結合されたＧＮＰ−１４０を、ＩＧＯｍｌの８０％エチレングリコール、１ｗＭ 　ＭＥＳｐＨ６，Ｏｌｏ、Ｏ１％Ｌｕｂｒｏｌ　ＰＸを用いて、ＳＩＺ　Ａｆｆ ｉｇｅｌから溶出する。２８０ｎ閣の吸光度によるピーク画分をプールする。溶 出液を０．０５％Ｌｕｂｒｏｌを含有するＴＢＳに対して透析し、次に、Ｍｏｎ ｏ　Ｑカラム（Ｐｈａｒｓａｃｉａから入手できるＦＰＬＣ）にかける。得られ た濃縮タンパク質を、ＺＭ　ＮａＣｌ、　２０讃ＭトリスｐＨ７，５（メンプラ ン画分に対しては０．０５％Ｌｕｂｒｏｌ　ＰＸをプラスする）で段階的に溶出 する。ピーク画分はＴＢＳ　ｐＨ７，５（メンプラン画分に対しては０．０５％ Ｌｕｂｒｏｌ　Ｉ’Ｘをプラスする）中で透析する。

ＧＭＰ−１４０を５μｇ／ｍｌでプレートし、対照のタンパク質類：　ヒト血清 アルブミン（Ａｌｂ）、血小板糖タンパク質１１ｂ／ｍａ（ＩＩｂ）、フォノ・ ビルプラント因子（ｖＷＦ）、フィブリ／−ゲン（ＦＩＢ）、トロンボモジュリ ン（ＴＭ）、ゼラチン（ＧＥＬ）またはヒト血清（Ｈ３）を５０μｇ／ｍｌの濃 度で添加する。全ウェルを、１０ｍｇ／ｍｌのＩＳＡを含をする３００μｍのＨ ＢＳＳで２２℃にて２時間かけてブロックし、次いで０．１％Ｔｗｅｅｎ−２０ 含有のＨＢＳＳで３回洗浄し、次にＨＢＳＳで１回洗浄する。細胞（２ｘｌＯ５ ／ウエル）をウェルに添加し、２２°Ｃで２０分間インキュベートする。次いで ウェルをＨＢＳＳ／ｌｌ５Ａで満たし、アセテートテープ（Ｄｙｎａｔｅｃｈ） でシール腰１５０　ｇにて５分間、逆転させて遠心分離する。粘着していない細 胞と上清を廃棄した後、各ウェルの内容物を、２００μｍの０．５％ヘキサデシ ルトリメチルアンモニウムプロミド、Ｓｉｇｍａ、を含有する５０ｍＭリン酸カ リウム溶液（ｐＨ６，０）で可溶化してミエロベルオ牛／ダーゼ活性についてア ッセイする（　Ｌｅｙら、Ｂｌｏｏｄ、　７３．１３２４〜１３３０　（１９８ ９）　）。結合された細胞の数を、ミエロペルキンダーゼ活性対細胞の数の標準 曲線からめる。

すべての７ノセイ条件下で、細胞はミエロペルオキシダーゼと乳酸デヒドロゲナ ーゼの合計の５％より少ない量を放出する。

阻害はより低い粘着の％とじて読まれるので、５％という値は９５％の特異的粘 着が阻害されていることを意味する。

臨床用途 本発明のペプチドは、一般に約ｌμｇペプチド／体重１ｋｇを超える量で非経口 投与すると活性である。再潅流（ｒｅｐａｒｆｕｓｉｏｎ）を伴う場合、器官が 損傷するのを防止する処置のために、本発明のペプチドは、約０．０１〜約１０ ｍｇペプチド／１ｋｇ体重を非経口で投与され得る。一般に、炎症を減らさなけ ればならない池の疾患または症状の治療に、同じ範囲の投与量が使用され得る。

この投与量は、１種以上のペプチドが投与されるか否かによって一部左右される 。レクチンドメインの異なっているかもしくは重複した領域由来のペプチドを組 み合わせた場合、またはＧＭＰ−１４０のＥＧＦドメイン由来のペプチドを組み 合わせた場合には、相乗作用がみられ得る。

セレクチン類は、白血球の粘着、炎症および凝固に関連するいくつもの機能をも っているので、ＧＭＰ−１４０％ＥＬＡＭ−１またはＬＥＩ＋−８の結合を阻害 する化合物は、これらの応答を調節するため臨床に用い得る。

例えば、これらのペプチドは、白血球の表面にあるＧＮＰ−１４０受容体に競合 して結合することによって白血球の粘着を競合して阻害するのに使用し得る。こ の種の治療は、白血球が仲介する炎症の、効果的であるが一時的な阻害が望まれ る急性の状態に特に有用である。ペプチドの点滴による長期間の治療もいくつか の状況で実施し得る。

炎症応答は抑制しないと宿主に損傷を引き起こし得る。なぜなら白血球は正常な 組織を損傷し得る多くの毒性分子を放出するからである。これらの分子としては タン７＜り質分解酵−素と遊離のラジカルがある。白血球が組織の損傷を起こし 得る病的な状態の例には、虚血と再潅流、細菌による敗血症と凡発性血管内凝固 症候群、成人呼吸困難症候群、腫瘍の転移、慢性関節リウマチおよびアテローム 性動脈硬化症に由来する損傷がある。

再潅流による損傷は臨床心臓学の大きな問題である。虚血心筋症における血球の 粘着を減らす治療剤は面栓溶解剤の治療効力を顕著に増強し得る。組織プラスミ ノーゲン活性イヒ剤またはストレプトキナーゼのような薬剤を用（する血栓を溶 解させる治療を行うと、重篤な心筋虚血にかかって（肩る多くの叡者の冠状動脈 閉塞を、回復不能な心筋細胞死（こなる前１こ軽減し得る。しかし多くのこのよ うな患者は、血流を回復したにもかかわらず、依然として心筋神経症にかかって ０る。この“再潅流損傷”は、白血球が、虚血領域の血管内皮１こ粘着すること に関連があることが知られてしＸる。なぜなら、恐らく、血小板と内皮がトロン ビ／とサイトカイン類１こよって活性化されて、白血球に対して粘着性になるか らであろう（Ｒ。

ｍ５ｏｎら、　Ｃ１ｒｃｕｌａｔｉｏｎ、　６７：　１０１６〜１０２３．　１ ９８３）。これらの粘着性白血球は、内皮を通過して移行し得、虚血心筋が血流 の回復によって救助されている丁度そのときに虚血心筋を破壊する。

虚血と再潅流が、白血球が血管表面に粘着することによって仲介される器官損傷 をもたらす他の共通の臨床上の障害がいくつかある。すなわち、発作；腸間膜と 末梢血管の疾患；器官の移植；および循環系のショック（この場合は多（の器官 が、血流の回復に続いて損傷を受け得る）である。

細菌による敗血症と汎発性血管向凝固症候群は、危篤状態の患者には同時に存在 している場合が多い。これらは、トロンビン、サイトカイン類および他の炎症メ ディエータの発生、血小板と内皮の活性化、および白血球の粘着および血小板の 直管系全体での凝集と関連がある。白血球依存性の器官の損傷はこれらの症状の 重要な特徴である。

成人呼吸困難症候群は、敗血症またはそれに続く外傷のある患者に起こる破壊的 な肺の障害であり、肺循環系内での白血球の広範囲にわたる粘着と凝集に関連が ある。この障害によって、多量の血漿が肺の中に浸潤して肺の組織を破壊するに 至り、この両現象はともに大部分が白血球生成物によって仲介される。

致命的なことが多い２つの類縁の肺の障害が、同種異系の骨髄移植を受けている 免疫を抑制された患者、およびインク−ロイキン２で処理されたＬＡＫ細胞（リ ンフ才力インで活性化されたリンパ球）による治療が原因の全身性血管漏洩から 生じる合併症にかかっている癌患者にみられる。ＬＡＫ細胞は、血管壁に粘着し 、恐らく内皮に対して毒性と思われる産物を放出することが知られている。ＬＡ Ｋ細胞が内皮に粘着する機構（ま知られていないが、このような細胞は、内皮を 活性化する分子を放出し、好中球の場合に作動するのと類似の機序によって内皮 に結合する可能性がある。

多くの悪性膿瘍（癌腫、リンパ腫および肉腫を含む）由来の腫瘍細胞は、血管系 を通じて離れた部位に転移し得る。腫瘍細胞が内皮に粘着する機構、および引続 き起こる転移の機構は、充分理解されていないが、少なくともいくつかの場合に おける白血球の場合と類似し得る。血小板が転移する腫瘍細胞と会合することは よ（報告されており、ある種の癌を広げる場合の血小板の役割を示唆している。

血小板−白血球相互作用はアテローム性動脈硬化症では重要であると考えられて いる。血小板は、単球が集まってアテローム性動脈硬化症の斑を形成する役割を もち得る。単球の蓄積は、アテローム発生中、最も初期に検出可能な事象の一つ であることは知られている。充分に発達した斑が破裂すると、血小板の沈着と活 性化および血栓形成の促進のみならず、好中球が虚血領域へ早期に集まるように なり得る。

潜在的用途がある他の領域は、慢性関節リウマチの治療の領域である。

これらのペプチドを用いる治療方式に対する応答を評価する基準は、特定の症状 によって指定され一般に標準の医学的慣行にしたがっている。例えば、心筋梗塞 の拡張を防止するために有効な投与量の基準は、血漿中の心筋壊死のマーカー酵 素を調べ、心電図、生命徴候および臨床応答をモニターすることによって、当該 技術分野の当業者が決定される。急性の呼吸困難症候群を治療する場合は、動脈 酸素の改善、肺湿潤の消散および軽減された呼吸困難と頻呼吸で測定される臨床 上の改善が調べられる。ショックの患者（低血圧）を治療する場合には、有効な 投与量は、臨床応答と、血圧が回復した後の肝臓と腎臓のような生命器官の機能 の特定の測定とに基づいている。発作を起こす患者については神経学的機能がモ ニターされるであろう。移植された器官の機能をモニターするのに特定の試験が 用いられる。例えば腎臓の移植を受けている患者の血清クレアチニン、尿の流量 、および血清電解質の試験である。

診断薬 本発明のペプチドは、セレクチンに対するリガンドが不完全であるヒトの障害を 検出するのにも使用し得る。このような障害は、白血球が活性化された血小板ま たは内皮に結合し得ず、感染症にかかり易くなっている患者に最もよくみられる ようである。試験すべき細胞は通常白血球であるが、標準的な医学上承認された 方法によって集められて、スクリーニングされる。検出法としては、ＥＬＩＳＡ 法、放射能ラベルした抗体の、固定化した活性化細胞への結合、流動細胞計測法 およびその他の当該技術分野の当業者にとって公知の方法がある。

レクチンドメインペプチドの存在下および非存在下での結合の阻害は、セレクチ ンの結合性の欠如または変化を検出するのに用い得る。セレクチン類については 、このような障害は、ＧＭＰ−１４０に対する白血球リガンドが不完全なために 、白血球の血小板および内皮に対する結合が不完全であるような感染症にかかり 易くなった患者に最もよく見られるようである。ペプチドには、放射能ラベル、 蛍光標識、酵素、または電子顕微鏡用の金のような電子密度の高い物質でラベル し得る。被検出細胞は通常白血球であるが、標識されたペプチドとともにインキ ュベートされ、ＧＮＰ−１４０に対する抗体を用いて上記の方法によるか、また は当該技術分野の当業者に公知の他の方法によって結合性が評価される。ＧＭＰ −１４０に対するリガンドが、血漿中にも見出された場合、検出試薬として抗体 の代わりに、標識されたＧＭＰ−１４０由来のペプチドを用いて標準のＥＬＩＳ Ａ法またはラジオイムノアッセイでも測定し得る。

以下の実施例は本発明を例示するために提供するものであって本発明を特に限定 するものではない。実施例中、および明細書全体を通じて、置部はとくにことわ りがない限り重量部である。

（以下余白） 実施例１：チロシルートレオニルーヒスチジルーロイシルーバリルーアラニルー インロイシルーグルタミンアミドの調製上記のペプチドを、標準スケールＢｏｅ ソフトウェアのバージぢン１．１２を用い、ＡＢＩ　ｍｏｄｅｌ　４３１Ａ　ｐ ｅｐｔｉｄｅ　５ｙｎｔｈｅｓｉｚｅｒで調製した。以下のアミノ酸を用いた： 　ＢｏＣ−（ＢｒＣＢＺ）Ｔｙｒ、　Ｂｏａ−（Ｂｚｌ）Ｔｈｒ、　Ｂｏｃ−（ Ｔｏｓ）旧ｓ％Ｂｏａ−Ｌｅｕ、　Ｂｏａ−Ｖａｔ、　Ｂｏａ−Ａｌａ％ＢｏＣ −ＩＩｅおよびＢｏｅ−Ｇｌｎｏ　４−メチルベンズヒドリルアミン樹脂（０， ６２５ｇ、　０．５ｓｍｏｌ）を合成に使用した。その樹脂の最終重量は、１． １３ｇであった。１１議りのＨＦおよび１．１ｍＬのアニソールを用い、０°Ｃ で６０分間かけて、ペプチドを樹脂（１，０３ｇ）から開裂させた。フッ化水素 を窒素気流によって蒸発させ、得た混合物をエーテルでトリチュレーシゴンした 。固体を濾過して取り出し、５０％のＴＦＡの塩化メチレン溶液２５糺で抽出し た。濾過による樹脂の除去、溶媒の蒸発およびエーテルで残渣をトリチュレーシ ヲンして粗製ペプチド０．５２ｇを得た。

粗製ペプチド（５５１Ｉｇ）をＶｙｄａｃ　Ｃ−１１１カラム（１０μ　２．２ Ｘ２５ｃｍ）で、０．１％水性ＴＦＡ中アセトニトリルの１０から２０％の勾配 液で２０分間かけて、流速８　ｍＬ／分で溶出して精製した。画分を集め、ＨＰ ＬＣで分析し、そして純品の画分をプールし凍結乾燥して３゜９ｍｇの精製ペプ チドを得た。アミノ酸分析の結果：Ａｌａ　０．９８ （１，０）、　Ｇｌｘ　１．．０２　（１，０）、　Ｈｉｓ　１．０６　（１， ０）、　Ｉｌａ　１．０７　（１，０）。

Ｌａｕ　１．０７　（１，０）、　Ｔｈｒ　Ｏ，８５（１，０）、　Ｔｙｒ　Ｏ ，８５（１，０）、　ＶａｌＯ，９４（１，０）、ＦＡＢ／ＭＳ：　Ｍ）（”　 ９４４　（計Ｘｆｉ　９４４）。

実施ｆＦ’１２：チロシルートレオニルーグルタミルーロイシルーバリルーアラ ニルーイソロイシルーグルタミンアミドの調製上記のペプチドを、標準スケール Ｂｏａソフトウェアのバージ１ン１．１２を用い、ＡＢＩ　ｗ＋ｏｄｅｌ　４３ １＾ｐｅｐｔｉｄｅｓ　５ｙｎｔｈｓｓｉｚｅｒで調製した。以下のアミノ酸を 用いた：　Ｂｏｃ−（ＢｒＣＢＺ）Ｔｙｒ、　Ｂｏｅ−（Ｂｚｌ）Ｔｈｒ、　Ｂ ＯＣ−（ＢＺＩ）ＧＩＬ１％　Ｂｏａ−Ｌｅｕｓ　Ｂｏｅ−Ｖａｌ、Ｂｏａ−＾ １ａｓ　Ｂｏｃ−ＩＩｅ、　Ｂｏｃ−Ｇｌｎａ　４−メチルベンズヒドリルアミ ン樹脂（０，６２５ｇ、０．５ｗ＋ｉ＋ｏｌ）を合成に使用した。樹脂の最終重 量は、ｉ、　２０ｇであった。１ｌｓＬのＨＦおよび１．ｌｓＬのアニソールを 用い、０℃で６０分間かけて、ペプチドを樹脂（１，１０ｇ）から開裂させた。

フッ化水素を乾燥窒素気流によって蒸発させ、残渣をエーテルでトリチュレー７ Ｍノし、エーテルを濾過して取り出した。

残りの固体を、５０％のＴＦＡの塩化メチレン溶液２５Ｉしてトリチュレーンッ ンした。樹脂を濾過して取り出し、溶液を減圧下蒸発させ、残渣をエーテルでト リチュレーンヨンし、０．４０ｇの粗製ペプチドが得られ、濾過して単離した。

粗製ペプチド（０，３１ｇ）をＶｙｄａｅ　Ｃ−１８カラム（１０μ、２．２Ｘ 　２５ｃｍ）を用いたＨＰＬＣ（多回注入）で、９０分間、流速８　ｖａＬ／分 で０．１ｚの水性ＴＦＡ中３０％アセトニトリルで溶出して精製した。画分を集 め、ＨＰＬＣで分析し、純品の両分をプールし凍結乾燥させて４７ｍｇの純ペプ チドを得（１，０）、　Ｇｌｘ　２．００　（２，０）、工１ｅ　１．０２　（ １，０）、　Ｌ＠ｕ　１．０６　（１，０）。

Ｔｈｒ　Ｏ，７８（１，０）、Ｔｙｒ　０．９８　（Ｌ、Ｏ）、Ｖａｌ　Ｏ，９ コ　（１，０）。

ＦＡＢ／ＭＳ：　にＨ”　９コロ　（ｔｔｌ清　９］６）。

ｉｎ例３：アセチルーチロンルートレオニルーアスバルチルーロイシルーバリル ーアラニルーイソロイシルーグルタミンアミドの調製 上記のペプチドを、ＡＢＩ　ｍｏｄｅｌ　４３１Ａ　ｐｅｐｔｉｄｅ　５ｙｎｔ ｈｅｓｉｚｅｒで、器具操作マニュアルに従ってＮ末端アセチル化のために改変 した標準スケールＢｏｃソフトウェアのバージョン１．１２を用いて、調製した 。４−メチルベンズヒドリルアミン４１１１１（ｏ。

６２５ｇ、Ｏ，Ｓｍ＠ｏｌ）を合成に使用した。樹脂の最終重量は１．２３ｇで あった。１０ｍＬのＩＰおよびｌｓＬのアニソールを用い、０℃で６０分間かけ て、ペプチドを樹脂（１，ｌ１ｇ）がら開裂させた。ＨＦを窒素気流によって除 去した。得た固体をエーテルでトリチュレーンヨンし、濾過して集め、エーテル で洗浄した。ペプチドを５０％のＴＦＡおよび塩化メチレン溶液（５Ｘ２０■Ｌ ）で樹脂から抽出した。樹脂を濾過して除去し、溶媒を減圧上除去し、残渣をエ ーテルでトリチニレーシ言ンすることにより、Ｏ，ＳＯｇの粗製ペプチドが得ら れた。粗製ペプチドをＶｙｄａｅ　Ｃ−１８カラム（１０μ、２．２Ｘ２Ｓｃｍ ）で調製用ＨＰＬＣにより、アセトニトリルの２０から３０％の勾配液および０ １％の水性ＴＰＡで、１４０分間かけて、流速３　ｍＬ／分で溶出して精製した 。両分を集め、ＨＰＬＣで分析し、モして純品の画分をプールし、凍結乾燥して 、６ｏｌＩｇの精製ペプチドの白色固体を得た。アミノ酸分析の結果：　Ｔｙｒ ｏ、９９　（１，０）、Ｔｈｒ　Ｏ，９１（１，０）、Ａｓｘ　Ｏ，９１３（１ ，０）、Ｌａｕ　１．０３（１，０）、　Ｖａｌ　１．０５　（１，０）、　Ａ ｌａ　１．０３　（１，０）、　工１＠１．００　（１，０１゜Ｇｌｘ　Ｏ，０ １（１，０）。

実に例４：ｆ口シルートレオニルーアスバルチルーロイシルーバリルーアラニル ーイン口イシルーグルタミンアミドの調製 上記のペプチドを、マニュアル固相合成によりＢｏｃ化学作用を用いて、調製し た。以下のアミノ酸を用いた：　Ｂｏｅ−（ＢｒＣＢＺ）Ｔｙｒ、　Ｂｏｅ−（ Ｂｚｌ）ＴｈｒＳＢｏａ−（Ｂｚｌ）ＡｓｐＳＨｏｅ−ＬｅｕＳＢｏａ−Ｖａｌ 、　Ｂ。

ｅ−１１ｅ、およびＢｏｃ−Ｇｌｎａ　４−メチルベンズヒドリルアミン樹脂（ ６，２５ｇ、５．０ｍｍｏｌ）を合成に使用した。各Ｂｏａ−ＡＡの２０Ｍｍｏ ＋をンシクロへキシルカルボジイミドおよびヒドロキシベンゾトリアゾール（各 ２０ｍｍｏｌ　）により活性化させ、樹脂とカップリングさせた。用いた配列は 以下の通りである：Ｌ正液　」１丞■皿上　時澗」］わ− ２５駕　丁ＦＡ／ＣＨ２Ｃｌ２　１　３５０％ＴＦＡ／ＣＨ２Ｃｌ２　１　１６ ＣＨ２Ｃ１２１１３ ５％Ｎ−メチルモルホリン／ＣＩ＋２ＣＩ２１　４ＣＨ２ＣＩ２１　３ カップリング工程（樹脂サンプルのニンヒドリン試験をモニターする）。

ペプチド−樹脂の最終重量は１１．９７ｇであった。樹脂−ペプチド（１１，８ ｇ）を１２ｍＬのアニソールおよび１２０ｖＡＬのＨＦを用いて１時開Ｏ″Ｃか ら４°Ｃで処理した。ＨＦを窒素気流、次いで吸引によって除去した。得た固体 をエーテル（ＩＸ１００■Ｌ次いで１×８０１Ｌ）でトリチュレーンブンし、濾 過して集め、エーテル（３Ｘ　１００＋ｍＬ）で洗浄した。次に残渣を５０％の トリフルオロ酢酸／塩化メチレン（４ｘ　５０ｍＬ）で抽出し、溶媒を真空で除 去した。

残渣を、５０（ｌｓＬのジエチルエーテルでトリチュレーシコンした。

固体を濾過して集め、−晩、周囲温度で空気乾燥させ、続けて減圧下室温で１時 間乾燥させた。粗製ペプチドの収量は４゜０８ｇであった。粗製ペプチド（１０ ６＋ｇｇ）を逆相１（Ｐ［、Ｃで、Ｖｙｄａｃ２２Ｘ　２５０ｗｕ＋　Ｃ−１８ ，１０μの３００オングストローム孔充填カラムを用いて、２回５３Ｂを処理し 精製した。２５％から４０％のＢの勾配液で７２分間かけて、流速６　ｍＬ／分 で溶出した（溶媒Ａ＝０．１％のＴＦＡ　、溶媒Ｂ−５０％アセトニトリル／水 中の０．１％ＴＦＡ）。画分を集め、適切な両分をプールし、白色固体を５６８ ｇ得た。アミノ酸分析の結果’　ＡＳＸ　１．０２　（１，００）、　Ｔｈｒｏ 、８９　（１，００）、　Ｇｌｘ　Ｏ，９９（１，００，Ａｌａ　１．０２　（ １，００）、　Ｖａｌ　Ｏ，９６（１，００）　、工１ｇ　１．０３　（１，０ ０）、　Ｌｅｕ　１．０６　（１，００）、　Ｔｙｒ　Ｏ，９１（１，００）、 ＦＡＢ／ＭＳ：　ＭＨ＋＝９２２　（ｉｊ’ｉｌｉ　９２２）。

実施例５：アルギニルーチロシルートレオニルーアスパルチルーロイシルーバリ ルーアラニルーインロイシルーグルタミンアミドの調製 上記のペプチドを、ＦＭＯＣ法を用いてＤｕＰｏｎｔ　ＲＡＭＰＳシステムで調 製した。以下のアミノ酸を合成に用いた：　ＦＭＯＣ−（Ｍｔｒ）Ａｒｇ、　Ｆ ＭＯＣ−（ｔ−Ｂｕ）Ｔｙｒ、　ＦＭＯＣ−（ｔ−Ｂｕ）Ｔｈｒ％ＦＭＯＣ−（ ｔ−Ｂｕ）Ａｓｐ、　ＦＭＯＣ−Ｌｅｕ％ＦＭＯＣ−Ｖａｌ、　ＦＭＯＣ−Ａｌ ａ、　ＦＭＯＣ−＋１ｅおよびＦＭＯＣ−Ｇｉｎ、　ＤｕＰｏｎｔラピ、ドアミ ド樹脂（０，１ｍｍｏｌ）を合成に使用した。フェノール（０，２５ｇ）、エタ ンジチオール（０，０８３１し）、チオアニソール（０，６６ｍＬ）　、水（０ ，１６６＋＋Ｌ）およびトリフルオロ酢酸（３Ｊ３ｍＬ）の混合物を用いて、２ ０°Ｃで６時間かけてペプチドを樹脂から開裂させた。樹脂を濾過して取り出し 、エーテルを加えて濾液からペプチドを沈澱させた。固体を濾過して取り出し、 ２０％の酢酸で抽出し、凍結乾燥させて、０．１４７ｇの粗製ペプチドを得た。

ペプチドを調製用逆相（Ｃ−１８）　）ＩＰＬｃにより、０．１％のＴＦＡ中ア 七トニトリルー水の勾配液を用いて精製した。

画分を集め、純ペプチドを含有する画分をプールし、凍結乾燥させた。

実施例６：アスパラギニル−アルギニル−チロシル−トレオニルーアスバルチル ーロイシルーバリルーアラニルーインロインルーグルタミンアミドのｒＡ製 ＪＪａ（７）ペプチドを、ＤｕＰｏｎｔ　ＲＡＭＰＳシステムおよびＦＭＯＣ法 を用いて調製した。以下のアミノ酸を使用した：　ＦＭＯＣ−＾ｓｎｓ　ＦＭＱ Ｃ−（ＭＬｒ）Ａｒｇ、　ＦＭＯＣ−（ｔ−Ｂｕ）ＴｙｒＳＦＭＯＣ−（Ｌ−Ｂ ｕ）Ｔｈｒ、　ＦＭＯＣ−（ｔ−Ｂｕ）Ａｓｐ、　ＦＭＯＣ−Ｌｅｕ、　ＦＭＯ Ｃ−Ｖａｔ、ＦＭＯＣ−Ａｌａ、　ＦＭＯＣ−１１ｅおよびＦＭＯＣ−Ｇｌｎｏ 　ＤｕＰｏｎｔラピッドアミド樹脂（０，２ｍｍｏｌ）を合成に使用した。ＴＦ Ａ　（２，８５＋ａＬ）、チオアニソール（０，１３５ｍＬ）およびエタンジチ オール（０，ＯＩＳ＋ｎＬ）の混合物を用いて、周囲温度で１６時間かけてペプ チドを樹脂から開裂させた。樹脂を濾過して除去し、エーテルを加えて濾液から ペプチドを沈澱させた。

ペプチドを濾過して取り出し、２０％の酢酸で抽出し、凍結乾燥させて、Ｓｏｎ ｇの粗製ペプチドを得た。粗製ペプチドを調製用逆相（Ｃ−１８）　ＨＰＬＣに より、０．１％のＴＦＡ中アモアセトニトリルの勾配液を用いて精製した。画分 を集め、純ペプチドを含有する画分をプールし、凍結乾燥させた。

実施例７：システイニルーグルタミニルーアスパラギニルーアルギニルーチロン ルートレオニルーアスパルチルーロイシルーバリルーアラニルーイソロイシルー グルタミニルーアスパラギニルーリジルーアスパラギニルーグルタミンの調製上 記のペプチドを、標準スケールＢｏｅソフトウェアを用い、ＡＢＩ　ｍｏｄｅｌ 　４３０Ａ　ｐｅｐｔｉｄｅｓ　５ｙｎｔｈｅｓｉｚｅｒで、調製した。以下の アミノ酸を使用した：　Ｂｏｃ−（４−Ｍｅ−Ｂｚｌ）Ｃｙｓ、　Ｂｏｃ−Ｇｌ ｎｑ　Ｂｏｃ−ＡｓｎＳＢｏａ−（Ｔｏｓ）Ａｒｇ、　Ｂｏｃ−（ＢｒＣＢＺ） Ｔｙｒ、　Ｂｏａ−（Ｂｚｌ）ＴｈｒｌＢｏｅ−（Ｂｚｌ）ＡｓｐＳＢｏｃ−Ｌ ｅｕｂ　Ｂｏｅ−Ｖａｌｓ　Ｂｏａ−Ａｌａ、　Ｂｏａ−１ｉｅ、　ＢｏＣ−（ ＣＩ−ＣＢｚ）Ｌｙｓｏ　Ｂｏｃ−（Ｂｚｌ）Ｇｌｕ−Ｐａｗ樹脂（Ｑ、５ｓ＋ １ｏｌ）を合成に使用した。

１０札のＩＰ、　１．０冒りのアニソール、１．０＋ｉＬの硫化ジメチルおよび ０．２ｍＬのｐ−チオクレゾールを用い、−１０℃で３０分間かけて、続けて０ ℃で３０分間かけてペプチドを樹脂から開裂させた。フッ化水素を減圧下除去し 、残渣をエーテルでトリチニレーシ言ンした。固体を濾過して取り出し、ペプチ ドを２０％の酢酸を用いて樹脂から抽出した。濾過による樹脂の除去、および濾 液の凍結乾燥により、２５ｍｇの粗製ペプチドを得た。粗製ペプチドを、２．２ Ｘ　２５ｃ＋＊のＳｙｎｃｈｒｏｍ　Ｃ−１８カラム（６，５μ）を用いる調製 用ＨＰＬＣにより、０１％ＴＦＡ中アセトニトリルの５％から２５％の勾配液で ２０分間かけて流速６　ｍＬ／分で溶出して精製した。画分を集め、純ペプチド を含有する画分をプールし、凍結乾燥させた。

Ｘ６例８：　チロンルートレオニルー〇−アスパルチル−ロイシル−バリル−ア ラニル−イソロイシル−グルタミンアミドの上記のペプチドを、標ＩＢｏｃソフ トウェアのバージョン１．１２を用い、ＡＢＩ　Ｍｏｄｅｌ　４３１Ａ　ｐｅｐ ｔｉｄｅ　５ｙｎｔｈｅｓｉｚｅｒで調製した。

以下のアミノ酸を使用した：　Ｂｏａ−（ＢｒＣＢＺ）Ｔｙｒ、　Ｂｏｃ−（Ｂ ｚｌ）Ｔｈｒ。

ＢＯＣ−Ｄ−（ＢＺＩ）ＡＳｐＳＢｏａ−Ｌｅｕ、　Ｂｏｅ−Ｖａｌ、Ｂｏａ− Ａｌａｓ　Ｂｏｃ−１１ｅ、およびＢｏａ−Ｇｌｎａ　４−メチルベンズヒドリ ルアミン樹脂（０，６３ｇ。

０、５ｍｍｏｌ）を合成に使用した。そのペプチド樹脂の最終重量は１．４３ｇ であった。１５ｍＬのＨＦおよび１．５畦のアニソールを用い、０°Ｃで６０分 間かけてペプチドを樹脂（１，４３ｇ）から開裂させた。

フッ化水素を減圧下除去し、残渣をエーテルでトリチニレーンヨンした。固体を 濾過して取り出し、塩化メチレン中トリフルオロ酢酸の５０％溶液を用いてペプ チドを樹脂から抽出した。

濾過による樹脂の除去、およびエーテルでの沈澱により、１゜０９ｇの粗製ペプ チドが得られた。粗製ペプチド（０，５ｇ）を、ｖｙｄａｃ　Ｃ−１８カラム（ １５μ、５．Ｏｘ　２５ｃｍ）を用いる調製用＋１Ｐ［、Ｃで流速１５＋ａＬ／ 分で１２０分間かけて０．１％ＴＦＡ中、５０％アセトニトリルのＯから１００ ％の勾配液で溶出して精製した。画分を集め、ＨＰＬＣで分析し、純品の画分を プールし、凍結乾燥させて２００＋ａｇの所望の製品を得た。アミノ酸分析の結 果： Ａｌａ　Ｏ，９９（１，００）、Ａｓｘ　１．０１（１，００）、Ｇｌｘ　１． ０２　（１，００）、工１ｅ　Ｏ，９７（１，００）、Ｌａｕ　１．０２（１， ００）、　Ｔｈｒ　Ｏ，９１（１，００）、　Ｔｙｒ　Ｏ，９６（１，００）、 　Ｖａｌ　１．０４（１，００）、ＦＡＢ／ＭＳ：　ＭＷ”−９２１実施Ｎ９： フェニルアラニルートレオニルーアスバルチルーロイシルーバリルーアラニルー インロインルーグルタミンアミ　ドの調製 ペプチドを、標準Ｂｏａソフトウェアのバージョン１．１２を用い、ＡＢＩ　Ｍ ｏｄｅｌ　４３１Ａ　ｐｅｐｔｉｄｅ　５ｙｎｔｈｅｓｉｚｅｒで調製した。以 下のアミノ酸を使用した：　Ｂｏｃ−Ｐｈｅ、　Ｂｏｅ−（Ｂｚｌ）Ｔｈｒ、　 Ｂｏｃ−（Ｂｚｌ）Ａｓｐ。

Ｂｏａ−Ｌｅｕ、　ＢｏＣ−Ｖａｌ、　Ｂｏｅ−Ａｌａ、、　Ｂｏｃ−１１ｅお よびＢｏａ−Ｇｌｎａ　４−メチルベンズヒドリルアミン樹脂（０，６２５ｇ、 　０．５＋ａ＋ａｏｌ）を合成に使用した。その樹脂の最終重量は１．１８ｇで あった。１１ｍＬのＩＩＦおよび１．１ｍＬのアニソールを用い、０℃で６０分 間かけて、ペプチドを樹脂（１，１０ｇ）から開裂させた。フ・ノ化水素を窒素 気流によって蒸発させ、得た混合物をエーテルでトリチュレーションした。固体 を濾過して取り出し、塩化メチレン中２５ｓＬのトリフルオロ酢酸の５０％溶液 で抽出した。濾過による樹脂の除去、溶媒の蒸発、およびエーテルでの残渣のト リチュレーションにより、ｏ、　５２ｇの粗製ペプチドが得られた。粗製ペプチ ド（８２＋ｉｇ）をＶｙｄａｃ　Ｃ−１８カラム（１０μ、２．２　ｘ　２５ｅ ｉ）で、６０分間かけて、流速８■Ｌ／分で、アセトニトリルの０から６０％の 勾配液および１％ＴＦＡで溶出して精製した。画分を集め、ＨＰＬＣで分析し、 純品の画分をプールし凍結乾燥して２７Ｂを得た。アミノ酸分析の結果： 実ｍＮ１０：Ｄ−チロンルートレオニルーアスバルチルーロインルーバリルーア ラニルーイソ口イシルーグルタミンアミドの：ｇ１％２ 上記のペプチドを、標準スケールＢｏｃソフトウェアのバージ曹ン１．１２を用 い、ＡＢＩ　Ｍｏｄｅｌ　４３１Ａ　ｐｅｐｔｉｄｅ　５ｙｎｔｈｅｓｉｚｅｒ で調製した。以下のアミノ酸を使用した：　Ｂｏｅ−Ｄ−（ＢｒＣＢＺ）Ｔｙｒ 、Ｂ。

ｃ−（Ｂｚｌ）Ｔｈｒ％Ｂｏａ−（Ｂｚｌ）Ａｓｐ％Ｂｏｅ−Ｌｅｕ、　Ｂｏｃ −Ｖａｌ、Ｂｏｅ−Ａｌａ、　Ｂｏｅ−１１ｅ、　Ｂｏｃ−Ｇｌｎｏ　４−メチ ルベンズヒドリルアミン樹脂（０，６６５ｇ、　０．５ｍｍｏｌ）を合成に使用 した。その樹脂の最終重量は２、　ＩＯｇであった。２０ｔのフッ化水素および ２■Ｌのアニソールを用い、０°Ｃで６０分間かけてペプチドを樹脂（２，Ｌｏ ｇ）から開裂させた。フッ化水素を窒素気流によって蒸発させ、得た混合物をエ ーテルでトリチュレーションした。固体を濾過して取り出し、塩化メチレン中ト リフルオロ酢酸の５０％溶液で抽出した。濾過による樹脂の除去、溶媒の蒸発、 およびエーテルでの残渣のトリチュレーションにより、残渣溶媒を含有する１゜ ９６ｇの粗製ペプチドが得られた。粗製ペプチド（２００＋＊Ｌ）をｖｙｄａｅ 　Ｃ−１８カラム（１０μ、２．２ｘ　２５ｃｍ）で、５０％アセトニトリルの ０から１００％の勾配液および０．１％のＴＦＡで、１２０分間かけて、流速Ｉ ＳｍＬ／分で溶出して精製した。両分を集め、ＨＰＬＣで分析し、純品の画分を プールし、凍結乾燥して５２ｍｇの純製品を得た。アミノ酸分析の結果： 実施例１１：チロシル−Ｄ−）レオニル−アスパルチル−ロイシル−バリル−ア ラニル−インロイシル−グルタミンアミドの調製 上記のペプチドを、標準Ｂｏａソフトウェアのバージラン１．１２を用い、ＡＢ Ｉ　Ｍｏｄｅｌ　４３１＾ｐｅｐｔｉｄｅ　５ｙｎｔｈｅｓｉｚｅｒで調製した 。

以下のアミノ酸を使用した：　Ｂｏｅ−（ＢｒＣＢＺ）Ｔｙｒ、　Ｂｏｃ−Ｄ− （Ｂｚｌ）Ｔｈｒ％Ｂｏｃ−（Ｂｚｌ）Ａｓｐ、　Ｂｏｅ−ＬｅｕｌＢｏｃ−Ｖ ａｔ、Ｂｏｃ−Ａｌａ、　Ｂｏｅ−１１ｅおよびＢｏｃ−Ｇｌｎｏ　４−メチル ベンズヒドリルアミン樹脂（０，６８５ｇ、　０．５ｍｍｏｌ）を合成に使用し た。その樹脂の最終重量は１．６３ｇであった。２０ｍＬのフッ化水素および２ ■Ｌのアニソールを用い、０℃で６０分間かけてペプチドを樹脂（１，６３ｇ） から開裂させた。

フッ化水素を減圧下除去し、残渣をエーテルでトリチ５レーンヨンした。固体を 濾過して取り出し、塩化メチレン中トリフルオロ酢酸の５０％溶液を用いてペプ チドを樹脂から抽出した。

濾過による樹脂の除去、およびエーテルでの沈澱により、０゜５２ｇの粗製ペプ チドが得られた。粗製ペプチド（０，５０ｇ）をｖｙｄａｅ　Ｃ−１８カラム（ １５μ、Ｓ、　ＯＸ　２５ｃｍ）で、４回の注入において、０．１％のＴＦＡ中 ５０％アセトニトリルの０から１００％の勾配液で、１２０分間かけて、流速１ ５ｍＬ／分で溶出して精製した。両分を集め、ＨＰＬＣで分析し、純品の画分を プールし凍結乾燥して２５４１１ｇの純ペプチドを得た。アミノ酸分析の結果： Ａｌａ　１．０１　（１，０）、　Ａｓｘ　１．０Ｂ　（１，０）、　ＧｌｘＯ ，９８（１，０）、１１ｅ　０．９８　（１，０）、　Ｌｅｕ　Ｏ，９７（１， ０）、　Ｔｈｒ　Ｏ，９５（１，０）、　Ｔｙｒ　Ｏ，９Ｂ　（１，０）、　Ｖ ａｌ　１．０１　（１，０）、ＦＡＢ／ＭＳ：　ＫＨ”９２２゜ 実施例１２　：　ＧＭＰ１４０でコートしたウェルに対する好中球の結合の阻害 上記のように、ＧＭＰ−１４０でコートしたウェルに対する種々のペプチドの結 合を比較した。結果を図１に示す。

０から１．５ｍＭの範囲で種々の濃度のペプチドの結合を比較した。試験したペ プチドは以下の通りである：ＣｙＳ−Ｇｉｎ−Ａ！１ｎ−Ａｒｑ” Ｔｙｒ−Ｔｈｒ−Ａｓｐ−Ｌａｕ−Ｖａ　１−Ａｌａ−工１ａ−Ｇｌｎ−７ｉ　 ト”　；　Ａｓｎ−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−Ｔｈｒ−Ａｓｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ａｌａ −Ｚｌｅ−Ｇｌｎ−アミド　；　Ａｒｇ−Ｔｙｒ−Ｔｈｒ−人５ｐ−Ｌａｕ−Ｖ ａｌ−Ａｌａ−工１ａ−Ｇｌｎ−了ミド°’　；　Ｔｙｒ−Ｔｈｒ−Ａｓｐ−Ｌ ａｕ−Ｖａｌ−Ａｌａ−工１ａ−Ｇｌｎ−ｒｅド　；　１廿し−Ｔｙｒ−Ｔｈｒ −Ａｓｐ−Ｌａｕ−Ｖａｌ−Ａｌａ−工１ａ−Ｇｌｎ−了ＩＦ’　；　Ｔｙｒ− Ｔｈｒ−Ｇｌｕ−Ｌａｕ−Ｖａｌ−Ａｌａ−１１ａ−Ｇｌｎ−７ミド’　；　Ｔ ｙｒ−Ｔｈｒ−Ｈｉｓ−Ｌａｕ−Ｖａｌ−Ａｌａ−工１ｅ−Ｇｌｎ−７＝　ド　 ｌ　τｙｒ−Ｔｈｒ−Ａｓｐ−Ｌａｕ−Ｖａｌ−Ａｌａ−１１ｅ−Ｇｌｎ−Ａｓ ｎ−Ｌｙｓ−Ａｓｎ−Ｇｌｕ−７ｚ１−！’　；　Ｌｅｕ−Ｇｉｎ−Ｔｈｒ−Ａ ｌａ−Ｔｙｒ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−工１ｅ−７４Ｆ　（賃Ｃ−ト０−１′　）り次 の研究において、別のペプチドの、固定化されたＰ−セレクチンへの好中球の付 加を阻害する活性について試験した。

ＩｃｓθのデータをｍＭｉ１１度で示す。結果を以下の表１に示す。

灸　ｉｆ　ｑｏ−ｔ″ｗ＋＝ｘｈｖ＋＃ｌｘｇｒｕ会ｐｐｎ會ＣＧＤＬＶｋＸＱ −ＫＨ２，３０４ ＹＴＤＬＶａ工Ｑ−ＮＨ，，４２０ ＹＴｄＬＶＡＩＱ−Ｎｌ（、，３ａ５ ＹＴＤＬＶＡＩｑ−ＮＯ，、１４６ ＹＴＤＬＶＡｉＱ−ＮＨ，、１６２ ＹＴＤＩＶＡＩＱ−Ｎ’Ｈ２，８６９ ＹｔＤＬＶＡ工Ｑ−ＫＨ２，２７１ ｙＴｄＬＶＡ工Ｑ−Ｎ１（２，２Ｌ６ ＹＴＤＬＶＡ工Ｑ−Ｎ’Ｈ，、コ１６ ＹＴＤＬＶＩＱ−ＮＭ、　、４６コ ＹＴＤＬＶＡニー　１１（＊ｎＪキン　−Ｇｉｎ−ＮＨ，、コ９１ＹＴＱＬＶＡ ＩＱ−ＮＨ，、０９７ 表　１　繕ξ 掻ａＬ　ＺＣ：、。（關） ＹτＤＬＶＡ工Ｑ−ＮＨ−ｎ−Ｂｕ　、１５１ＥＴＤＬＶＡＩＱ−ＮＨ，、７０ ４ ＹＥＤＬＶＡ工Ｑ−ＮＨ，、２１ｉ７ Ｙ置ＶＡＩＱ−Ｎ８２．３８９ ＹＴＤＥＶＡＩＱ−ＮＨ２，６６８ ＹＧＤＬＶＡｒＱ−ＮＯ２，９７７ ＹＫＤＬＶＡＩＱ−ＮＨ２，２１０ ＹＴＫＬＶＡＩＱ−８８，、０６Ｏ Ｎ−Ｍｅ−Ｔｙｒ−ＴＤＬＶＡＩＱ−ＮＨ，、ココ６Ｍａｌ−ＴＤＬＶＡＩＱ− ＮＨ，、１９２０−Ｍｅ−Ｔｙｒ−ＴＤＬＶＡＩＱ−ＮＨ２，１０３ＦＴＤＬＶ ＡＩＱ−ＮＨ２，３８４ ＹＴＦＬＶＡＩＱ−ＮＨ，、２３４ Ｐｙａ−ＴＤＬＶＡＩＱ−Ｎ’Ｈ，、コ４６ＹＳＤＬＶＡＩＱ−Ｎｌ（、、２０ ２ ＹＴＯＬＴＡ工Ｑ−ＮＨ，，３５９ Ｔｉｅ−ＴＤＬＶＡＩＱ−ＮＨ，，０６２ＹＴＤＶＡＡＺＱ−ＮＯ，、８９３ ＹＴＧＬＶＡ工Ｑ−Ｎ’Ｈ２，１３４ Ａｅ−ＹｔＫＬＶＡ工ｑ−ＮＨ−ｎ−Ｂｕ　、３６６Ａｃ−ＹｔＤＬＶＡＴＤＬ ＶＡＩＱｎ−Ｂｕ　、６〕６ＹＴＤＬＶＡ工ＱＮ−ＮＨ２，１５３ 結果は、負のコントロールを除いて、全てのペプチドが固定化されたＧＭＰ−１ ４０に対する好中球の結合を阻害することを示している。

実施例１３：血清中のペプチドの安定性の改変図２は、ヒト血清中に見い出され る酵素に対する安定性が著しく高まっていることを示しているが、それは式！お よび１１に示す改変を行って得られ得たものであり、以下の２つのペプチドに対 して、残存ペプチドの百分率と時間の関係をグラフで示している。

ＡＣ−Ｙ−Ｔ−Ｄ−Ｌ−Ｖ−Ａ−１−Ｑ−ＮＨ２およびＹ−Ｔ−Ｄ−Ｌ−Ｖ−Ａ −１−Ｑ−ＮＨ２゜血清中の半減期は、改変していないペプチドで２０分であっ たのが、改変ペプチドで４時間３７分に増加した。

本発明の、セレクチン類を含む結合反応を調節する合成ペプチドおよび方法の改 変および変形は、上記の詳細な説明から当該技術分野の当業者に自明である。こ のような改変および変形は、添付の請求の範囲の適用範囲内にある。

（い人′Ｅ宗も） 配列表 （１）一般的情報： （＋）出１１人：へブナ−、ジコージ　エイ。

（ｉｔ）発明の名称：炎症のペプチド阻害剤ｍｉ）配列数＝４５ （Ｂ）番地：１００　ピーチツリー　ストリート（Ｃ）市　＝　アトランタ （Ｄ）州　：　ゾ゛１−ノ゛ア （Ｅ）国：Ｔメリ方合衆国 （Ｆ）郵便番号：　３０３０３ （Ｖ）コンピューター読み出し形態： （Ａ）媒体型：フロッピーディスク （Ｂ）コンピューター：　ＩＢＮ　ＰＣ互換用（ｖｉ）現在の出願データ： （＾）出願番号：　ＵＳ　０７／６９９６９３ＣＢ）出願日：　１９９１年５月 １４日（Ｃ）分類： （ｖｉｉｉ）代理人／事務所情報： （Ａ）氏名：ハフスト、バトレア　エル。

（Ｂ）登録番号：３１．２８４ （Ｃ）照会／記録番号：　ＯＭＲＦ−ＣＴＣｌｏｏ（ｉｘ）電話回線情報： （２）ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ＋１の情報：（Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ｉｔ）配列の種類：ペプチド （ｉｉｉ）ハイポセテイ力ル：Ｎ０ （ｉｖ）アンチセンス：Ｎｏ （ｖ）フラグメント型：Ｎ末端 （ｘｉ）配列：　ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１　：（２）ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２の 情報：（ｉ）配列の特色： （Ａ）長さ：８アミノ酸 （Ｂ）型二アミノ酸 （Ｃ）鎖の数ニ一本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ｉｔ）配列の種類：ペプチド （ｉｉｉ）ハイポセティ力ル：Ｎ０ （ｉｖ）アンチセンス二Ｎ０ （Ｖ）フラグメント型：Ｎ末端 （ｘｌ）配列：　ＳＥＱ　ＩＤＮ０：２　：（ｚ＞ｓＥｑ　ｔｏ　ＮＯ：３の情 報：（１）配列の特色： （Ａ）長さ：８アミノ酸 （Ｂ）型二アミノ酸 （Ｃ）鎖の数ニ一本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ｉｔ）配列の種類：ペプチド （ｉ　Ｉ　ｉ）ハイポセテイカル：Ｎ０（ｉｖ）アンチセンス＝ＮＯ （ｖ）フラグメント型：Ｎ末端 （ｘｌ）配列：　ＳＥｏ　１０　ＮＯ：３　：（２）ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：４の 情報：（ｉ）配列の特色： （＾）長さ：１２アミノ酸 （Ｂ）型二アミノ酸 （Ｃ）鎖の数ニ一本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （１１）配列の種類；ペプチド （ｉｌｉ）ハイボセティカル：Ｎ０ （ｉｖ）アンチセンス：Ｎｏ （Ｖ）フラグメント型：Ｎ末端 （ｘｉ）配列：　ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：４　：Ｃｙｓ　Ｇｉｎ　Ａｓｎ　Ａｒｇ 　Ｔｙｒ　Ｔｈｒ　Ａｓｐ　Ｌａｕ　Ｖａｌ　Ａｌａ工Ｌａ　Ｇｉｎ（２）ＳＥ Ｑ　ＩＤ　Ｍｏ５ｓの情報：（１）配列の特色： （Ａ）長さ：ｌＯアミノ酸 （Ｂ）型二アミノ酸 （Ｃ）鎖の数ニ一本鎖 （Ｄ）トポロジー；直鎖状 （ｉ　Ｉ）配列の種類：ペプチド （１口）ハイポセティカ、し、Ｎｏ （ｉｖ）アンチセンス：Ｎｏ （ｖ）フラグメント型：Ｎ末端 （ｘｌ）配列：　ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：５　：（２）ＳＥＱ　ＩＤ　Ｎ０＝６の 情報：（＋）配列の特色： （＾）長さ＝９アミノ酸 （Ｂ）型二アミノ酸 （Ｃ）鎖の数ニ一本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ｉ＋）配列の種類：ペプチド （ｉｉｉ）ハイポセティカル二Ｎ。

（ｉｖ）アンチセンス＝Ｎ。

（ｖ）７ラグメント型：Ｎ末端 （ｘｉ）配列：　ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：６　：（２）ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯニアの 情報：（ｉ）配列の特色： （Ａ）長さ：８アミノ酸 （Ｂ）型二アミノ酸 （Ｃ）鎖の数ニ一本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ｉｆ）配列の種類：ペプチド （ｉｉｉ）ハイポセティカル：Ｎ。

（Ｉｖ）アンチセンス二Ｎ。

（ｖ）フラグメント型：Ｎ末端 （ｘ　ｉ）配列：　ＳＥＱ　１０　ＮＯニア　：（２）ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：８ の情報：（＋）配列の特色： （＾）長さ：１２アミノ酸 （Ｂ）型二アミノ酸 （Ｃ）鎖の数ニ一本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ｉ　＋）配列の種類：ペプチド （ｉｉｉ）ハイポセテイカル二Ｎ０ （ｉｖ）アンチセンス二Ｎ０ （ｖ）フラグメント型：Ｎ末端 （買１）配列：　ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：８　：Ｔｙｒ　Ｔｈｒ　Ａｓｐ　Ｌａｕ 　Ｖａｌ　Ａｌａ　ＩＩｓ　Ｇｉｎ　Ａｓｎ　Ｌｙｓ　Ａｓｎ　Ｇｌｕ１５１゜ （２）ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：９の情報：（ｉ）配列の特色： （Ａ）長さ二８アミノ酸 （Ｂ）型二アミノ酸 （Ｃ）鎖の数ニ一本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ｉ　ｉ）配列の種類：ペプチド （ｉｉｉ）ハイポセテイカル＝ＮＯ （ｉｖ）アンチセンス：Ｎｏ （Ｖ）フラグメント型：Ｎ末端 （Ｘ１１配列：　ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ＋９　：（２）ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ＋１０ の情報：（＋）配列の特色： （Ａ）長さ：８アミノ酸 （Ｂ）型二アミノ酸 （Ｃ）鎖の数ニ一本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ｉ　ｉ）配列の種類：ペプチド （ｉｉｉ）ハイボセテイカル二Ｎ０ （ｉｖ）アンチセンス二Ｎ０ （Ｖ）フラグメント型：Ｎ末端 （ｘｉ）配列：　ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：ｌＯ：（２）ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１１ の情報：（ｉ）配列の特色： （Ａ）長さ＝８アミノ酸 （Ｂ）型二アミノ酸 （Ｃ）鎖の数ニ一本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ｉｌ）配列の種類：ペプチド （ｉｉｉ）ハイボセティカル：Ｎ。

（１ｖ）アンチセンス＝Ｎ。

（ｖ）フラグメント型：Ｎ末端 （ｘｉ）配列：　ＳＥｏ　１０　ＮＯ：１１　：（２）ＳＥｏ　１０　ＮＯ＋１ ２の情報：（＋）配列の特色： （Ａ）長さ：８アミノ酸 （Ｂ）盟二アミノ酸 （Ｃ）鎖の数ニ一本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ｉ　＋）配列の種類：ペプチド （ｉｉｉ）ハイボセティカル：Ｎ。

（ｉｖ）アンチセンス＝Ｎ。

（ｖ）フラグメント型：Ｎ末端 （ｘｉ）配列：　ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ＋１２　：（２）ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１ ３の情報：（１）配列の特色： （Ａ）長さ：８アミノ酸 （ＢＪ型型子アミノ 酸Ｃ）鎖の数ニー木調 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ＩＩ）配列の種ａ：ペプチド （ｉｉｉ）ハイポセティカル＝Ｎ。

（Ｉｖ）アンチセンス二Ｎ。

（ｖ）フラグメント型：Ｎ末端 （ＸＩ）配列：　ＳＥｏ　１０　ＮＯ：１３　：（２）ＳＥＱ　ＩＤＮ０：１４ の情報：（１）配列の特色： （Ａ）長さ＝８アミノ酸 （Ｂ）型二アミノ酸 （Ｃ）鎖の数ニー木調 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ＩＩ）配列の種類：ペプチド （ｉｌｌ）ハイポセティカル＝Ｎ。

（Ｉｖ）アンチセンス：Ｎ。

（Ｖ）フラグメント型：Ｎ末端 （ｘｉ）配列：　ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１４　：（２）ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１ ５の情報：（＋＞配列の特色： （Ａ）長さ：８アミノ酸 （Ｂ）盟二アミノ酸 （Ｃ）鎖の数ニー木調 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ｉ＋１配列の種類：ペプチド （ｉｉｉ）ハイボセティカル、Ｎ０ （ｉｖ）アンチセンス＝Ｎ。

（Ｖ）フラグメント型二Ｎ末端 （ｘｌ）配列：　ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：ＩＳ　：（２）ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１ ６の情報：（１）配列の特色： （Ａ）長さ＝８アミノ酸 （Ｂ）型二アミノ酸 （Ｃ）鎖の数ニー木調 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ｔｉ）配列の種類：ペプチド （ｉｉｉ）ハイポセティカル：Ｎ０ （ｉｖ）アンチセンス＝ＮＯ （ｖ）フラグメント型：Ｎ末端 （ｘｉ＞配列：　ＳＥｏ　１０　ＮＯ：１６　：（２）ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１ ７の情報：（ｉ）配列の特色： （Ａ）長さ二８アミノ酸 （Ｂ）型二アミノ酸 （Ｃ）鎖の数ニー木調 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ＩＩ）配列の種類：ペプチド （Ｉ［ｉ）ハイポセティカル、Ｎ０ （ｉｖ）アンチセンス二Ｎ０ （Ｖ）フラグメント型：Ｎ末端 ｈ）フラグメント型：Ｎ末端 （ｘｉ）配列：　ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２２　：（２）ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２ ３の情報：（＋）配列の特色： （＾）長さ：９アミノ酸 （Ｂ）型二アミノ酸 （Ｃ）鎖の数−一本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ｉ＋）配列の橿煩：ベブチド （ｉｉｉ）ハイポセティカル、Ｎ０ （Ｉｖ）アンチセンス；Ｎ。

（ｖ）フラグメント型：Ｎ末端 （ＸＩ）配列：　ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２３　：（２）ＳＥＱ　１０　ＮＯ：２ ４の情報：（１）配列の特色： （＾）長さ：δアミノ酸 （Ｂ）型二アミノ酸 （Ｃ）鎖の数ニー重鎖 （Ｄ）トボロンー：直鎖状 （ｌｉ）配列の種類：ペプチド （ｌｉｔ）ハイポセティカル：Ｎ。

（Ｉｖ）アンチセンス：Ｎｏ （ｖ）フラグメント型：Ｎ末端 （ｘｉ）配列：　ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２４　：Ａｒｇ　Ｇｌｙ　Ｈｉｓ　Ｌａ ｕ　Ｖａｌ　Ａｌａ　ｒｌｅ　Ｇｌｙ（２）ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２５の情報： （１）配列の特色： （Ａ）長さ二８アミノ酸 （Ｂ）型二アミノ酸 （Ｃ）鎖の数ニー重鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ｉｆ）配列の種類：ペプチド （ｌｉｔ）ハイポセティカル：Ｎ。

（ｉｖ）アンチセンス二Ｎ。

（Ｖ）フラグメント型：Ｎ末端 （ｘｉ）配列：　ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ＋２Ｓ　：（２）ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２ ６の情報：（＋）配列の特色： （Ａ）長さ＝８アミノ酸 （Ｂ）型二アミノ酸 （Ｃ）鎖の数ニー重鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （１＋）配列の種類：ペプチド （ｉｉｉ）ハイポセティカル＝Ｎ。

（ｉｖ）アンチセンス二Ｎ。

（ｖ）フラグメント型：Ｎ末端 （ｘｉ）配列：　ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２６　：（２）ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２ ７の情報：（１）配列の特色： （Ａ）長さ：８アミノ酸 （２）ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３２の情報：（＋）配列の特色： （Ａ）長さ＝８アミノ酸 （Ｂ）型二アミノ酸 （Ｃ）鎖の数ニー木調 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （１１＞配列の種類：ペプチド （ｉ　ｉ　１）ハイポセティカル：Ｎ。

（ｌｖ）アンチセンス：Ｎ。

（ｖ）フラグメント型：Ｎ末端 （ｘｉ）配列：　ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３２　：（２）ＳＥｏ　１０　ＮＯ：Ｉ ３の情報：（１）配列の特色： （Ａ）長さ：８アミノ酸 （Ｂ）型二アミノ酸 （Ｃ）鎖の数ニー木調 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ｉり配列の種類：ペプチド （ｉｉ）ハイポセティカル：Ｎ。

（１ｖ）アンチセンス＝Ｎ。

（ｖ）フラグメント型：Ｎ末端 （ｘｉ）配列：　ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ＋３３　：（２）Ｓｌ）Ｑ　ＩＤ　ＮＯ： ３４の情報：（１）配列の特色： （＾）長さ＝８アミノ酸 （Ｂ）型二アミノ酸 （Ｃ）ｆａの数ニー木調 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ｉ　＋）配列の種類：ペプチド （Ｉｉｌ）ハイポセティカル＝ＮＯ （ｉｖ）アンチセンス二Ｎ０ （ｖ）フラグメント型：Ｎ末端 （ｘｉ）配列：　ＳＥｏ　１０　ＮＯ：３４　：（２）ＳＥｏ　１０　ＮＯ：３ ５の情報：（＋＞配列の特色： （Ａ）長さ：８アミノ酸 （Ｂ）型二アミノ酸 （Ｃ）鎖の数ニー木調 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ｉｉ）配列の種類：ペプチド （ｉｉｉ）ハイボセティカル：Ｎ０ （ｉｖ）アンチセンス：Ｎｏ （ｖ）フラグメント型：Ｎ末端 （ｘｉ）配列：　ＳＥｏ　１０　ＮＯ：３５　：（２）ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３ ６の情報：（＋）配列の特色： （Ａ）長さ二８アミノ酸 ＜８）型二アミノ酸 （Ｃ）鎖の数ニー木調 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ｉｆ）配列の種類：ペプチド （ｉ　ｉ　ｉ）ハイボセティカル：Ｎ０（１ｖ）アンチセンス二Ｎ０ （Ｖ）フラグメント型：Ｎ末端 （ｌｖ）アンチセンス：Ｎｏ （Ｖ）フラグメント型：Ｎ末端 （ＫＯ配列：　ＳＥＱ　ＩＤ　Ｎ０＝４１　：（２）ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：４２ の情報：（＋）配列の特色： （＾）長さ；已アミノ酸 （Ｂ）型二アミノ酸 （Ｃ）鎖の数ニー木端 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （１１）配列の種類：ペプチド （ｉｉｌ）ハイポセテイカル二Ｎ０ （Ｉｖ）アンチセンス二Ｎ０ （ｖ）フラグメント型；Ｎ末端 （！Ｉ）配列：　ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：４２　：（２）ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：４ ３の情報：（１）配列の特色： （＾）長さ二８アミノ酸 （Ｂ）型二アミノ酸 （Ｃ）鎖の数ニー木端 （ｐ）トポロジー：直鎖状 （ｉ　＋）配列の種類：ペプチド （ｉｉｌ）ハイポセテイカル＝ＮＯ （Ｉｖ）アンチセンス＝ＮＯ （Ｖ）フラグメント型：Ｎ末端 （ｘｉ＞配列：　ＳＥｏ　１０　ＮＯ：４３　：（２）ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：４ ４の情報：（ｉ）配列の特色： （Ａ）長さ：９アミノ酸 （Ｂ）型二アミノ酸 （Ｃ）鎖の数ニー木端 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ｉｔ）配列の種類；ペプチド （ｉｉｉ）ハイポセティカル＝Ｎ。

（ｉｖ）アンチセンス＝Ｎ。

（ｖ）フラグメント型：Ｎ末端 （ｘｉ）配列：　ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：４４　：（２）ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：４ Ｓの情報：（ｉ）配列の特色： （Ａ）長さ；ｌＯアミノ酸 （Ｂ）型二アミノ酸 （Ｃ）鎖の数ニー木端 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ｉｆ）配列の種類：ペプチド （ｌｉｉ）ハイポセティカル：Ｎ。

（ｎ）アンチセンス：Ｎ。

（ｖ）フラグメント型：Ｎ末端 （ｘｉ＞配列：　ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：４５　：国際調査報告 国際調査報告 フロントページの続き （５１）　Ｉｎｔ、　Ｃ１，５識別記号　庁内整理番号／／　Ｃ０７Ｋ　９９： ３８ （７２）発明者　へブナ−、ジョージ　エイ。

アメリカ合衆国　ニューシャーシー ０８８２２　フレミントン、サマー　ロード。

ボックス　７３ビー、　（番地なし） Ｉ （７２）発明者　マクエバー、ロジャー　ピー。

アメリカ合衆国　オクラホマ　７３１２０　オクラホマ　シティ、ギルフォード 　レーン（７２）発明者　グン、ジエンーグオ アメリカ合衆国　オクラホマ　７３１１２　オクラホマ　シティ、アパートメン ト　１０３゜ノース　ポートランド　３１５７

Claims (20)

【特許請求の範囲】
1. １．以下の構造からなる群より選択されるセレクチン類：Ｒ１−Ｘ−ｐ−Ｑ−Ｓ −Ｔ−Ｕ−Ｖ−Ｗ−Ｚ−Ｙ−Ｒ２（Ｉ）Ｒ１−Ｐ−Ｑ−Ｓ−Ｔ−Ｕ−Ｖ−Ｗ−Ｚ −Ｒ２（ＩＩ）またはその薬学的に許容され得る塩、由来のペプチド：ここで、 式（Ｉ）のＸおよび式（ＩＩ）のＰは、Ｎ末端アミノ酸であり、そしてＲ１はア ミン官能基に結合した部分（ＮＨＲ１）であり、 式（Ｉ）のＹおよび式（ＩＩ）のＺは、Ｃ末端アミノ酸であり、そしてＲ２はカ ルボキシ官能基における単結合した酸素に結合した部分（Ｃ（Ｏ）ＯＲ２）であ り、 ＰはＤ−またはＬ−チロシン、Ｄ−またはＬ−フェニルアラニン、Ｄ−またはＬ −リジン、Ｄ−またはＬ−グルタミン酸、Ｄ−またはＬ−アルギニン、Ｄ−また はＬ−システイン、Ｄ−またはＬ−Ｏ−Ｒ３−チロシン、Ｄ−またはＬ−Ｎα− Ｒ３−チロシン、Ｄ−またはＬ−４−アミノフェニルアラニン、Ｄ−またはＬ− Ｒ４−フェニルアラニン、Ｄ−またはＬ−ピリジルアラニン、Ｄ−またはＬ−ナ フチルアラニン、またはＤ−またはＬ−テトラヒドロイソキノリンカルボン酸、 ここでＲ３は低級アルキルまたはアリールであり、そしてＲ４はハロゲン（フッ 素、塩素、臭素またはヨウ素）であり、 ＱはＤ−またはＬ−トレオニン、Ｄ−またはＬ−リジン、Ｄ−またはＬ−グルタ ミン酸、Ｄ−またはＬ−システイン、またはグリシンであり、 ＳはＤ−またはＬ−アスパラギン酸、Ｄ−またはＬ−ヒスチジン、Ｄ−またはＬ −グルタミン酸、Ｄ−またはＬ−アスパラギン、ＤまたはＬ−グルタミン、Ｄ− またはＬ−アラニン、Ｄ−またはＬ−フェニルアラニン、Ｄ−またはＬ−リジン 、またはグリシンであり、 Ｔ、Ｕ、ＶおよびＷは、独立して、Ｄ−またはＬ−ロイシン、Ｄ−またはＬ−イ ソロイシン、Ｄ−またはＬ−アラニン、Ｄ−またはＬ−バリン、Ｄ−またはＬ− アロイソロイシン、グリシン、Ｄ−またはＬ−グルタミン酸、Ｄ−またはＬ−ア スパラギン酸、Ｄ−またはＬ−アスパラギン、Ｄ−またはＬ−グルタミン、Ｄ− またはＬ−トレオニン、または脱アミノ酸であり、ここで脱アミノ酸とは残基Ｔ 、Ｕ、Ｖ、またはＷのいずれかがペプチド式ＩまたはＩＩから欠如しているもの を意味し、Ｚは、Ｄ−またはＬ−グルタミン、Ｄ−またはＬ−グルタミン酸およ びＤ−またはＬ−アスパラギンであり、Ｒ１はＨ（遊離のＮ末端基を意味する） 、ホルミル、低級アルカノイル、アロイルまたは脱アミノ（Ｒ１基に隣接し、式 ＩのＸまたは式２のＰいずれかが、アミノ酸のαアミノ基を欠如しており、Ｈで 置き換えられるアミノ酸を意味する）であり、 Ｒ２はＨ（遊離のＣ末端カルボン酸にあるものを意味する）、０（低級アルキル ）、Ｏ（アリール）、ＮＲ３Ｒ４であり、ここでＲ３およびＲ４は独立して、Ｈ または低級アルキル、または脱力ルボキシ（Ｒ１が式Ｉまたは２においてそれに 隣接しており、ＹまたはＺがそれぞれＨに置き換えられる、アミノ酸のαカルボ ン酸基を意味する）であり、そしてＸおよびＹは１から１０個の直鎖のアミノ酸 である。
2. ２．前記ペプチドが、構造 Ｒ１−Ｘ−Ｐ−Ｑ−Ｓ−Ｔ−Ｕ−Ｖ−Ｗ−Ｚ−Ｙ−Ｒ２、を有する、請求項１に 記載のペプチド：ここで、Ｒ１はＨであり、ＸはＣｙｓ−Ｘｘｘ−Ｘｘｘ−Ｘｘ ｘであり、ＰはＴｙｒであり、ＴはＬｅｕであり、ＵはＶａｌであり、ＶはＡｌ ａであり、Ｗはｌｌｅであり、そしてＹはＡｓｎ−Ｌｙｓ−Ｘｘｘ−Ｇｌｕであ り、ここで、Ｘｘｘはどのようなアミノ酸であってもよく、そしてＲ２はＯＨで はない。
3. ３．前記ペプチドが、構造 Ｒ１−Ｘ−Ｐ−Ｑ−Ｓ−Ｔ−Ｕ−Ｖ−Ｗ−Ｚ−Ｙ−Ｒ２、を有する請求項１に記 載のペプチドであって、以下からなる群より選択されるペプチド： ＸがＣｙｓ−Ｇｌｎ−Ａｓｎ−Ａｒｇであり、ＳがＡｓＰ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ａ ｓｎ、Ｇｌｎ、またはＡｌａであるペプチド；ＸがＧｌｎ−Ａｓｎ−Ａｒｇであ り、ＳがＡｓＰ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、またはＡｌａであるペプチ ド：ＸがｐＧｌｕ−Ａｓｎ−Ａｒｇであり、ＳがＡｓｐ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ａｓ ｎ、Ｇｌｎ、またはＡｌａであるペプチド；ＸがＡｓｎ−Ａｒｇであり、ＳがＡ ｓｐ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、またはＡｌａであるペプチド；ＸがＡ ｒｇであり、ＳがＡｓｐ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、またはＡｌａであ るペプチド；ＳがＡｓＰ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ａｓｎ、Ｇ１ｎ、またはＡｌａであ り、ＹがＡｓｎであるペプチド；ＳがＡｓｐ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ 、またはＡｌａであり、ＹがＡｓｎ−Ｌｙｓであるペプチド；ＳがＡｓｐ、Ｌｙ ｓ、Ｈｉｓ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、またはＡｌａであり、ＹがＡｓｎ−Ｌｙｓ−Ａｓ ｎであるペプチド；ＳがＡｓｐ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、またはＡｌ ａであり、ＹがＡｓｎ−Ｌｙｓ−Ａｓｎ−Ｇｌｕであるペプチド；ＸがＣｙｓ− Ｇｌｎ−Ａｓｐ−Ａｒｇであり、ＳがＡｓｐ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ 、またはＡｌａであり、ＹがＡｓｎ−Ｌｙｓ−Ａｓｎ−Ｇｌｕであるペプチド； ＸがＧｌｕ−Ａｓｎ−Ａｒｇであり、ＰがＡｒｇまたはＴｙｒであり、ＳがＡｓ ｐ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、またはＡｌａであるペプチド；およびＸ がＡｓｎ−Ａｒｇであり、ＰがＴｙｒまたはＡｒｇであり、ＱがＧｌｙであり、 ＳがＡｓｐ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、またはＡｌａであるペプチド。
4. ４．構造Ｒ１−Ｐ−Ｑ−Ｓ−Ｔ−Ｕ−Ｖ−Ｗ−Ｚ−Ｒ２を有する請求項１に記載 のペプチドであって、ここでＳがＡｓｐまたはＨｉｓであるペプチド。
5. ５．前記ペプチドが、下式を有するペプチドからなる群より選択されるペプチド 、およびその薬学的に許容され得る酸付加塩または塩基付加塩である、請求項１ に記載のペプチド：【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】；
6. ６．非経口投与、経口投与、局所投与、および放出制御処方に適切な担体からな る群より選択される薬学的担体と組み合わせた、請求項１に記載のペプチド。
7. ７．以下の構造のペプチド： Ｒ１−Ｘ−Ｐ−Ｑ−Ｓ−Ｔ−Ｕ−Ｖ−Ｗ−Ｚ−Ｙ−Ｒ２（Ｉ）Ｒ１−Ｐ−Ｑ−Ｓ −Ｔ−Ｕ−Ｖ−Ｗ−Ｚ−Ｒ２（ＩＩ）またはその薬学的に許容され得る塩の調製 方法であって、アミノ酸が、単独で、または前もってブロックされた形態のアミ ノ酸のいずれかで、適切に機能的にされだ固相支持体に付加されることによる、 方法： ここで、式（Ｉ）のＸおよび式（ＩＩ）のＰは、Ｎ末端アミノ酸であり、そして Ｒ１はアミン官能基に結合した部分（ＮＨＲ１）であり、 式（Ｉ）のＹおよび式（ＩＩ）のＺは、Ｃ末端アミノ酸であり、そしてＲ２はカ ルボキシ官能基における単結合した酸素に結合した部分（Ｃ（Ｏ）ＯＲ２）であ り、ＰはＤ−またはＬ−チロシン、Ｄ−またはＬ−フェニルアラニン、Ｄ−また はＬ−リジン、Ｄ−またはＬ−グルタミン酸、Ｄ−またはＬ−アルギニン、Ｄ− またはＬ−システイン、Ｄ−またはＬ−Ｏ−Ｒ３−チロシン、Ｄ−またはＬ−Ｎ −Ｒ３−チロシン、Ｄ−またはＬ−４−アミノフェニルアラニン、Ｄ−またはＬ −Ｒ４−フェニルアラニン、Ｄ−またはＬ−ピリジルアラニン、Ｄ−またはＬ− ナフチルアラニン、またはＤ−またはＬ−テトラヒドロイソキノリンカルボン酸 であり、ここでＲ３は低級アルキルまたはアリールであり、そしてＲ４はハロゲ ン（フッ素、塩素、臭素、またはヨウ素）であり、 ＱはＤ−またはＬ−トレオニン、Ｄ−またはＬ−リジン、Ｄ−またはＬ−グルタ ミン酸、Ｄ−またはＬ−システイン、またはグリシンであり、 ＳはＤ−またはＬ−アスパラギン酸、Ｄ−またはＬ−ヒスチジン、Ｄ−またはＬ −グルタミン酸、Ｄ−またはＬ−アスパラギン、ＤまたはＬ−グルタミン、Ｄ− またはＬ−アラニン、Ｄ−またはＬ−フェニルアラニン、Ｄ−またはＬ−リジン 、またはグリシンであり、 Ｔ、Ｕ、ＶおよびＷは、独立して、Ｄ−またはＬ−ロイシン、Ｄ−またはＬ−イ ソロイシン、Ｄ−またはＬ−アラニン、Ｄ−またはＬ−バリン、Ｄ−またはＬ− アロイソロイシン、グリシン、Ｄ−またはＬ−グルタミン酸、Ｄ−またはＬ−ア スパラギン酸、Ｄ−またはＬ−アスパラギン、Ｄ−またはＬ−グルタミン、Ｄ− またはＬ−トレオニン、または脱アミノ酸であり、ここで脱アミノ酸とは残基Ｔ 、Ｕ、Ｖ、またはＷのいずれかがペプチド式ＩまたはＩＩから欠如しているもの を意味し、Ｚは、Ｄ−またはＬ−グルタミン、Ｄ−またはＬ−グルタミン酸およ びＤ−またはＬ−アスパラギンであり、Ｒ１はＨ（遊離のＮ末端基を意味する） 、ホルミル、低級アルカノイル、アロイルまたは脱アミノ（Ｒ１基に隣接し、式 ＩのＸまたは式２のＰいずれかが、アミノ酸のαアミノ基を欠如しており、Ｈで 置き換えられるアミノ酸を意味する）であり、 Ｒ２はＨ（遊離のＣ末端カルボン酸にあるものを意味する）、０（低級アルキル ）、０（アリール）、ＮＲ３Ｒ４であり、ここでＲ３およびＲ４は独立して、Ｈ または低級アルキル、または脱カルボキシ（Ｒ１が式Ｉまたは２においてそれに 隣接しており、ＹまたはＺがそれぞれＨに置き換えられる、アミノ酸のαカルボ ン酸基を意味する）であり、そしてＸおよびＹは１から１０個の直鎖のアミノ酸 である。
8. ８．前記ペプチドが、構造Ｒ１−Ｘ−Ｐ−Ｑ−Ｓ−Ｔ−Ｕ−Ｖ−Ｗ−Ｚ−Ｙ−Ｒ ２を有する、請求項７に記載の方法：ここで、Ｒ１はＨであり、ＸはＣｙｓ−Ｘ ｘｘ−Ｘｘｘ−Ｘｘｘであり、ＰはＴｙｒであり、ＴはＬｅｕであり、ＵはＶａ ｌであり、ＶはＡｌａであり、Ｗはｌｌｅであり、そしてＹはＡｓｎ−Ｌｙｓ− Ｘｘｘ−Ｇｌｕであり、ここでＸｘｘはどのようなアミノ酸であってもよく、そ してＲ２はＯＨではない。
9. ９．前記ペプチドが構造Ｒ１−Ｘ−Ｐ−Ｑ−Ｓ−Ｔ−Ｕ−Ｖ−Ｗ−Ｚ−Ｙ−Ｒ２ を有するペプチドであって、以下からなる群より選択されるペプチドである、請 求項７に記載の方法：ＸがＣｙｓ−Ｇｌｎ−Ａｓｎ−Ａｒｇであり、ＳがＡｓｐ 、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、またはＡｌａであるペプチド；ＸがＧｌｎ −Ａｓｎ−Ａｒｇであり、ＳがＡｓｐ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、また はＡｌａであるペプチド；ＸがｐＧｌｕ−Ａｓｎ−Ａｒｇであり、ＳがＡＳＰ、 Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、またはＡｌａであるペプチド；ＸがＡｓｎ− Ａｒｇであり、ＳがＡｓｐ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、またはＡｌａで あるペプチド；ＸがＡｒｇであり、ＳがＡｓｐ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ａｓｎ、Ｇｌ ｎ、またはＡｌａであるペプチド；ＳがＡｓｐ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ａｓｎ、Ｇｌ ｎ、またはＡｌａであり、ＹがＡｓｎであるペプチド；ＳがＡｓｐ、Ｌｙｓ、Ｈ ｉｓ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、またはＡｌａであり、ＹがＡｓ−Ｌｙｓであるペプチド ；ＳがＡｓｐ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、またはＡｌａであり、ＹがＡ ｓｎ−Ｌｙｓ−Ａｓｎであるペプチド；ＳがＡｓｐ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ａｓｎ、 Ｇｌｎ、またはＡｌａであり、ＹがＡｓｎ−Ｌｙｓ−Ａｓｎ−Ｇｌｕであるペプ チド；ＸがＣｙｓ−Ｇｌｎ−Ａｓｐ−Ａｒｇであり、ＳがＡｓｐ、Ｌｙｓ、Ｈｉ ｓ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、またはＡｌａであり、ＹがＡｓｎ−Ｌｙｓ−Ａｓｎ−Ｇｌ ｕであるペプチド；ＸがＧｌｕ−Ａｓｎ−Ａｒｇであり、ＰがＡｒｇまたはＴｙ ｒであり、ＳがＡｓｐ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、またはＡｌａである ペプチド；およびＸがＡｓｎ−Ａｒｇであり、ＰがＴｙｒまたはＡｒｇであり、 ＱがＧｌｙであり、ＳがＡｓｐ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、またはＡ１ ａであるペプチド。
10. １０．前記ペプチドが構造Ｒ１−Ｐ−Ｑ−Ｓ−Ｔ−Ｕ−Ｖ−Ｗ−Ｚ−Ｒ２を有す るペプチドであって、ここで、ＳはＡｓｐまたはＨｉｓである、請求項７に記載 の方法。
11. １１．前記ペプチドが、下式を有するペプチドからなる群より選択されるペプチ ド、およびその薬学的に許容され得る酸付加塩または塩基付加塩である、請求項 ７に記載の方法：【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】；
12. １２．前記アミノ酸が、化学的な連結方法によって、溶液または懸濁液中に、単 独でまたは前もってブロックされた形態でのいずれかで組み立てられることによ る、請求項７に記載のペプチドの調製方法。
13. １３．前記アミノ酸が酵素的な連結方法によって、溶液または懸濁液中に、単独 でまたは前もってブロックされた形態でのいずれかで組み立てられることによる 、請求項７に記載のペプチドの調製方法。
14. １４．前記ペプチドが、該ペプチドをコードする核酸を発現ベクターに挿入する こと、ＤＮＡを発現すること、および該ＤＮＡを該ペプチドに翻訳すること、に よって、酵素的に生産されることによる、請求項１３に記載のペプチドの調製方 法。
15. １５．以下の構造からなる群より選択されるペプチド：Ｒ１−Ｘ−Ｐ−Ｑ−Ｓ− Ｔ−Ｕ−Ｖ−Ｗ−Ｚ−Ｙ−Ｒ２（Ｉ）Ｒ１−Ｐ−Ｑ−Ｓ−Ｔ−Ｏ−Ｖ−Ｗ−Ｚ− Ｒ２（ＩＩ）またはその薬学的に許容され得る塩を、薬学的に許容され得る担体 と組み合わせて提供することを包含する、セレクチンの結合を改変する方法： ここで、式（Ｉ）のＸおよび式（ＩＩ）のＰは、Ｎ末端アミノ酸であり、そして Ｒ１はアミン官能基に結合した部分（ＮＨＲ１）であり、 式（Ｉ）のＹおよび式（ＩＩ）のＺは、Ｃ末端アミノ酸であり、そしてＲ２はカ ルボキシ官能基における単結合した酸素に結合した部分（Ｃ（Ｏ）ＯＲ２）であ り、ＰはＤ−またはＬ−チロシン、Ｄ−またはＬ−フェニルアラニン、Ｄ−また はＬ−リジン、Ｄ−またはＬ−グルタミン酸、Ｄ−またはＬ−アルギニン、Ｄ− またはＬ−システイン、Ｄ−またはＬ−Ｏ−Ｒ３−チロシン、Ｄ−またはし−Ｎ α−Ｒ３−チロシン、Ｄ−またはＬ−４−アミノフェニルアラニン、Ｄ−または Ｌ−Ｒ４−フェニルアラニン、Ｄ−またはＬ−ピリジルアラニン、Ｄ−またはＬ −ナフチルアラニン、またはＤ−またはＬ−テトラヒドロイソキノリンカルボン 酸、ここでＲ３は低級アルキルまたはアリール、そしてＲ４はハロゲン（フッ素 、塩素、臭素またはヨウ素）であり、 ＱはＤ−またはＬ−トレオニン、Ｄ−またはＬ−リジン、Ｄ−またはＬ−グルタ ミン酸、Ｄ−またはＬ−システイン、またはグリシンであり、 ＳはＤ−またはＬ−アスパラギン酸、Ｄ−またはＬ−ヒスチジン、Ｄ−またはＬ −グルタミン酸、Ｄ−またはＬ−アスパラギン、ＤまたはＬ−グルタミン、Ｄ− またはＬ−アラニン、Ｄ−またはＬ−フェニルアラニン、Ｄ−またはＬ−リジン 、またはグリシンであり、 Ｔ、Ｕ、ＶおよびＷは、独立して、Ｄ−またはＬ−ロイシン、Ｄ−またはＬ−イ ソロイシン、Ｄ−またはＬ−アラニン、Ｄ−またはＬ−バリン、Ｄ−またはＬ− アロイソロイシン、グリシン、Ｄ−またはＬ−グルタミン酸、Ｄ−またはＬ−ア スパラギン酸、Ｄ−またはＬ−アスパラギン、Ｄ−またはＬ−グルタミン、Ｄ− またはＬ−トレオニン、または脱アミノ酸であり、ここで脱アミノ酸とは残基Ｔ 、Ｕ、Ｖ、またはＷのいずれかがペプチド式ＩまたはＩＩから欠如しているもの を意味し、Ｚは、Ｄ−またはＬ−グルタミン、Ｄ−またはＬ−グルタミン酸およ びＤ−またはＬ−アスパラギンであり、Ｒ１はＨ（遊離のＮ末端基を意味する） 、ホルミル、低級アルカノイル、アロイルまたは脱アミノ（Ｒ１基に隣接し、式 ＩのＸまたは式２のＰいずれかが、アミノ酸のαアミノ基を欠如しており、Ｈで 置き換えられるアミノ酸を意味する）であり、 Ｒ２はＨ（遊離のＣ末端カルボン酸にあるものを意味する）、Ｏ（低級アルキル ）、Ｏ（アリール）、ＮＲ３Ｒ４であり、ここでＲ３およびＲ４は独立してＨま たは低級アルキル、または脱力ルボキシ（Ｒ１が式Ｉまたは２においてそれに隣 接しており、ＹまたはＺがそれぞれＨに置き換えられる、アミノ酸のαカルボン 酸基を意味する）であり、そしてＸおよびＹは１から１０個の直鎖のアミノ酸で ある。
16. １６．前記ペプチドが、構造Ｒ１−Ｘ−Ｐ−Ｑ−Ｓ−Ｔ−Ｕ−Ｖ−Ｗ−Ｚ−Ｙ− Ｒ２を有する、請求項１５に記載の方法：ここで、Ｒ１はＨであり、ＸはＣｙｓ −Ｘｘｘ−Ｘｘｘ−Ｘｘｘであり、ＰはＴｙｒであり、ＴはＬｅｕであり、Ｕは Ｖａｌであり、ＶはＡｌａであり、Ｗはｌｌｅであり、そしてＹはＡｓｎ−Ｌｙ ｓ−Ｘｘｘ−Ｇｌｕであり、ここでＸｘｘはどのようなアミノ酸であってもよく 、そしてＲ２はＯＨではない。
17. １７．前記ペプチドが、構造Ｒ１−Ｘ−Ｐ−Ｑ−Ｓ−Ｔ−Ｕ−Ｖ−Ｗ−Ｚ−Ｙ− Ｒ２を有するペプチドであって、以下からなる群より選択されるペプチドである 、請求項１５に記載の方法：ＸがＣｙｓ−Ｇｌｎ−Ａｓｎ−Ａｒｇであり、Ｓが Ａｓｐ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、またはＡｌａであるペプチド；Ｘが Ｃｌｎ−Ａｓｎ−Ａｒｇであり、ＳがＡｓｐ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ 、またはＡｌａであるペプチド；ＸがｐＧｌｕ−Ａｓｎ−Ａｒｇであり、ＳがＡ ｓｐ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ａｓｎ、ＧＩｎ、またはＡｌａであるペプチド；ＸがＡ ｓｒ−Ａｒｇであり、ＳがＡｓｐ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、またはＡ ｌａであるペプチド；ＸがＡｒｇであり、ＳがＡｓｐ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ａｓｎ 、Ｇｌｎ、またはＡｌａであるペプチド；ＳがＡｓｐ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ａｓｎ 、Ｇｌｎ、またはＡｌａであり、ＹがＡｓｎであるペプチド；ＳがＡｓｐ、Ｌｙ ｓ、Ｈｉｓ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、またはＡｌａであり、ＹがＡｓｎ−Ｌｙｓである ペプチド；ＳがＡｓｐ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、またはＡｌａであり 、ＹがＡｓｎ−Ｌｙｓ−Ａｓｎであるペプチド；ＳがＡｓｐ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、 Ａｓｎ、Ｇｌｎ、またはＡｌａであり、ＹがＡｓｎ−Ｌｙｓ−Ａｓｎ−Ｇｌｕで あるペプチド；ＸがＣｙｓ−Ｇｌｎ−Ａｓｐ−Ａｒｇであり、ＳがＡｓｐ、Ｌｙ ｓ、Ｈｉｓ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、またはＡｌａであり、ＹがＡｓｎ−Ｌｙｓ−Ａｓ ｎ−Ｇｌｕであるペプチド；ＸがＣｌｕ−Ａｓｎ−Ａｒｇであり、ＰがＡｒｇま たはＴｙｒであり、ＳがＡｓｐ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、またはＡｌ ａであるペプチド；およびＸがＡｓｎ−Ａｒｇであり、ＰがＴｙｒまたはＡｒｇ であり、ＱがＧｌｙであり、ＳがＡｓＰ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、ま たはＡｌａであるペプチド。
18. １８．前記ペプチドが、構造Ｒ１−Ｐ−Ｑ−Ｓ−Ｔ−Ｕ−Ｖ−Ｗ−Ｚ−Ｒ２を有 するペプチドであって、ここで、Ｓが、ＡｓｐまたはＨｉｓである、請求項１５ に記載の方法。
19. １９．前記ペプチドが、下式を有するペプチドからなる群より選択されるペプチ ド、およびその薬学的に許容され得る酸付加塩または塩基付加塩である、請求項 １５に記載の方法：【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】； 【配列があります】；
20. ２０．前記薬学的担体が、非経口投与、経口投与、局所投与、および放出制御処 方に適切な担体からなる群より選択される、請求項１５に記載の方法。