JPH06504061A - Use of calpain inhibitors in the treatment and prevention of neurodegeneration - Google Patents

Use of calpain inhibitors in the treatment and prevention of neurodegeneration

Info

Publication number
JPH06504061A
JPH06504061A JP4503767A JP50376792A JPH06504061A JP H06504061 A JPH06504061 A JP H06504061A JP 4503767 A JP4503767 A JP 4503767A JP 50376792 A JP50376792 A JP 50376792A JP H06504061 A JPH06504061 A JP H06504061A
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
leu
peptide
abu
keto
ala
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
JP4503767A
Other languages
Japanese (ja)
Inventor
バータス，レイモンド，ティー．
エベレス，デイビッド，ディー．，ジュニア
リンチ，ゲーリー，エス．
パワーズ，ジェームズ，シー．
Original Assignee
コーテックス　ファーマシューティカルズ　インコーポレイテッド
ジョージア テック リサーチ コーポレイション
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by コーテックス　ファーマシューティカルズ　インコーポレイテッド, ジョージア テック リサーチ コーポレイション filed Critical コーテックス　ファーマシューティカルズ　インコーポレイテッド
Publication of JPH06504061A publication Critical patent/JPH06504061A/en
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/365—Lactones
    • A61K31/366—Lactones having six-membered rings, e.g. delta-lactones
    • A61K31/37—Coumarins, e.g. psoralen
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/55—Protease inhibitors
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。 (57) [Summary] This bulletin contains application data before electronic filing, so abstract data is not recorded.

Description

【発明の詳細な説明】 神経変性の治療および予防におけるカルパイン阻害剤の使用発朋Ｑ茸景 本発明は、一般に、神経保護剤類の分野に関し、さらに詳細には、カルパインの ようなカルシウム刺激プロテアーゼ類の阻害剤類の神経変性（ｎｅｕｒｏ〜ｄｅ ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ）治療薬としての用途に関する。 神経細胞は脳も含めて、カルパイン■およびカルパイン■と称される少なくとも ２種のカルシウム刺激プロテアーゼ類を含む極めてさまざまのプロテアーゼ類を 有していることが公知であり、これらは、それぞれ、ミクロモルおよびミリモル のＣａ２＋濃度によって活性化される。カルパイン類は、多（の組織中に存在す るカルシウム活性化チオールプロテアーゼ類属である。カルパイン■が主要形態 であるが、カルパインＩもシナプスに認められ、長期賦活化およびシナプス可塑 性に関与する形態であると考えられている。 チオールプロテアーゼ類は、作用機作および基質攻撃に関与するアミノ酸残基（ システィン）によってセリンプロテアーゼ類、メタロプロテアーゼ類およびその 他のプロテアーゼ類と区別される。数種のチオールプロテアーゼ類が植物によっ て産生されるが、これらのプロテアーゼ類は哺乳類では一般的ではなく、カテプ シンＢ（リソソーム酵素）、その他のカナプシン類およびカルパイン類は、哺乳 類で挙げられている数少ないこの属の代表に属している。カルパインＩおよびカ ルパイン■はこれらのうちで最も説明されているが、カルパイン属のその他の数 種のものについても報告されている。 その他のＣａＺ＋活性化チオールプロテアーゼ類も、Ｙｏｓｈｉｈａｒａら、Ｊ 、Ｂｉｏｌ、Ｃｈｅｍ、２６５：５８０９−５８１５　（１９９０）が報告して いるもののように、存在している。用語″カルパイン”は、以下で、前記のＹｏ ｓｈｉｈａｒａ酵素およびカルパイン類および■を含む全てのＣａＺ＋活性化チ オールプロテアーゼ類を意味するものとして使用する。 カルパイン類は非常にさまざまなタンパク質基質類を分解するが、細胞骨格タン パク質類は特に攻撃されやすい。少な（ともいくつかの場合において、カルパイ ン類によるこれらのタンパク質類の蛋白分解消化の産物類は経時的に顕著となり かつ持続性である。細胞骨格タンパク質類はある種の細胞の主な成分類であり、 このことによって、細胞および組織中においてカルパイン活性を検出する簡便な 方法が提供される。特に、ひとつの細胞骨格タンパク質であるスペクトリンの分 解生成物（”ＢＤＰ類”）の集積は、カルパインの活性化と関連していた。中性 組織においては、カルパイン類の活性化はこれらのＢＤＰ類の集積によって証明 されるが、病巣の電気分解性傷害から生じる脱神経、遺伝的異常、興奮毒性、ア ルツハイマー病、および末梢性または中枢性に毒物カイニン酸およびコルヒチン をラットに投与した後のアレチネズミにおけるその後の虚血を含めて、多くの神 経変性状態で観察されてきた。 市販のインビトロカルパイン阻害剤には、ロイペプシン（Ａｅ−Ｌｅｕ　−Ｌ　 ｅ　ｕ　−Ａ　ｒ　ｇ−Ｈ）のようなペプチドアルデヒド類およびＥ−６４のよ うなエポキシコハク酸類が挙げられる。こオ］らの化合物類は、中枢神経系（” ＣＮＳ”）組織中におけるカルパインのインビボ阻害に有用ではなく、その理由 として、それらの膜透過性が不良で、従って、脳血液関門を極めて良好に通過す るというわけにはいかないことが挙げられる。また、これらの■書割類の多くは 特異性が悪く、しかも、カルパインに加えて極めて多くのプロテアーゼ類を阻害 するであろう。こねらの市販の化合物類は、カルパインの基質結合部位と相互作 用すると考えられているペプチド構造に基づいている。カルパイン阻害剤類に関 連する活性基類は、本酵素を阻害するため１こ、その後カルパインの触媒部分を ブロックするかまたは攻撃する。 さらに、インビトロでカルパイン阻害活性を有すると考えられているが市販され ていないその他の種類の化合物類も報告されている。このような化合物類の例と して、ペプチドジアゾメタン類が挙げられる。Ｒｉｃｈ、　Ｄ、　Ｈ，、システ ィンプロテアーゼ類阻害剤類、ＰｒｏｔｅＦｌｓｅ　Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ、＾ Ｊ　Ｂａｒｒｅｔｔ　ａｎｄ　Ｇ　５ａｌｖｅｒｓｅｎ編著、Ｅｌｓｅｖｉｅｒ 、Ｎｅｗ　Ｙｏｒｋ　１９８６．　ｐｐ１５３−１７８参照。この開示は、本文 で参考として引用。 これらのペプチドジアゾメタン類は、同様に、膜透過性不良で非特異的と考えら れている。 カルパインのある特定の阻害剤類は治療上ある有用性を有しているという知見が ある。たとえば、ロイペプシンは、霊長類において神経修復を促進できる。 Ｅ−６４１７）誘導体、ロキサスタチン（ＥＳＴ％Ｅｐ−４６０またはＥｐ−６ ４ｄとしても公知である）は、筋ジストロフィーの治療に有用性を有していると 考えられている。Ｅ−６４ｄは有意なプロテアーゼ阻害活性自体は有していない が、哺乳類体内においてＥ−６４ｃのようなより強力な形態に変換されると考え られている。 電気生理学的研究の知見から、細胞死をもたらす連鎖反応における最も早期の要 因のひとつは、Ｃａ２＋チャンネル開口および／またはエネルギー枯渇の結果と しての細胞内遊離カルシウムの増加であることが示唆されている。細胞内カルシ ウムは、カルパインのようなプロテアーゼ類、リパーゼ類およびキナーゼ類を含 めて多数の酵素類を活性化することを含めて、数多くの結果を生じるようである 。細胞内カルシウム増加は、また、遺伝子発現に変化を誘発すると考えられてい る。 虚血、頭部外傷および脳卒中は、全て、ＣＮＳニューロン」二である種のアミノ 酸類が作用することによる毒性としての興奮毒性を十分生じるような量でグルタ ミン酸が放出されることと関連していた。このグルタミン酸過剰と膜のフリーラ ジカル損傷およびエネルギー枯渇のようなその他の要因が、細胞内Ｃａ２＋増加 をもたらす。過剰の細胞内Ｃａ２＋が、ホスホリパーゼおよびカルパインの活性 化による細胞構造破壊、ならびに、ホスホリパーゼおよびキサンチンオキシダー ゼの活性化によるフリーラジカル産生を含めて、神経細胞傷害と関連すると考え られている数種の効果を及ぼすことが公知である。その他多くの要因が神経毒性 と関連している。たとえば、活動電位の低下および種々の化学マーカー類の変化 が、虚血状態に暴露された神経に関係していることが公知である。 上記に述べたように神経毒性のある面が理解されているにもかかわらず、ＣＮＳ のほとんどの神経変性疾患および状態の有効な治療法がまだ全く開発されていな い。何間万人という人たちがこうした疾患および状態に罹患している。したがっ て、これらの疾患と状態を治療しかつ予防する点で有効な治療法が必要とされて いる。 発■９要約 本発明は、神経変性に関連する神経病理症状を有するかまたは有する可能性のあ る哺乳類において、神経変性を阻害しまたは治療するための薬物の製造のために カルパイン阻害剤またはその薬剤学的に許容される塩またはその誘導体の用途を 提供する。この用途のある態様では、神経変性は、興奮毒性、ＨＩＶ誘発ニュー ロバチ−１脱神経または損傷後の虚血、くも膜下出血、脳卒中、多発性梗塞痴呆 症、アルツハイマー病、ハンチントン病、またはパーキンソン病により発生する 。前記薬物は薬剤学的に許容できる担体を含むことができ、経皮投与用、皮下注 射用、静注、筋注または胸骨内（ｉｎｔｒａｓｔｅｒｎａｌ）注射用、またはＣ ＮＳへの直接を椎腔内注大または点滴用のような非経口投与用である。前記薬物 は、また、経口用に適した剤形であることもできる。いくつかの態様において、 前記薬物は、神経手術、心血管手術または全身麻酔を要する手術を受ける患者の ためのように、手術時または手術後において、手術を受ける患者における神経変 性を実質的に予防するためである。このカルパイン阻害剤は、好適には、膜透過 性のカルパイン阻害剤を使用することなどによって哺乳類のＣＮＳ組織に侵入す る。 本発明は、また、変性のインビボ治療または予防におけるカルパイン阻害剤保護 剤としての用途のだめのカルパイン阻害剤類を選択するインビトロの方法を提供 する。この方法は、インビトロでカルパイン阻害活性を有する化合物類を識別す ること、および膜透過性のインビトロアッセイによってカルパイン阻害活性を有 しており膜透過性の化合物類を識別することを含んでいる。この膜透過性のイン ビトロアッセイは、哺乳類から複数組織部分を得ること；前記組織部分の全部と はいわないまでも少なくとも１部をカルパイン阻害剤で処理すること：未処理組 織中に変性を生じさせることができる事象にこの組織部分をさらすこと、この組 織部分に生じた変性量を測定すること、および処理組織部分に生じた変性量を未 処理組織部分に生じた変性量と比較することを含んでいる。処理組織部分の変性 量は、未処理組織部分に生じた変性量よりも少なく、このことは、カルパイン阻 害剤が膜透過性であることを示唆している。いくつかの態様における組織部分は 、脳切片、血小板または培養細胞である。いくつかの態様における測定段階では 、スペクトリン、ＭＡＰ２、アクチン結合タンパク質またはｔａｕのような細胞 骨格成分のＢＤＰ類の存在について、前記組織部分を分析することが行われる。 前記測定段階には、また、組織部分の電気的活性を測定することを入れることが できる。膜透過性の前記インビトロアッセイは、血小板膜を透過してこの血小板 の内因性カルパインを阻害するカルパイン阻害剤の能力を測定することによって 行うこともできる。 本発明は、また、神経変性に関連する神経病理症状を有するかまたは有する可能 性のある哺乳類において、神経変性を阻害しまたは治療するための薬物の製造の ために、置換複素環化合物またはその薬剤学的に許容される塩またはその誘導治 療用である。前記置換複素環化合物は、好適には、クラスＩ置換イソクマリン類 、クラス■置換イソクマリン類またはクラス■複素環化合物類の１員である。 さらに好適には、前記置換複素環化合物は、３−クロロイソクマリン、３．４− ジクロロイソクマリン：３−アルコキシ−７−アミノ−４−クロロイソクマリン ：または７−置換　３−アルコキシ−４−クロロイソクマリンである。前記置換 複素環化合物が、Ｃ１ＴＰｒ０１ＣＳＮＨ！−Ｃ４ＴＰｒＯＩＣ。 ＰｈＣＨｚＮＨＣＯＮＨＣ１ＴＰｒ０１Ｃ１ＣＨｓＣＯＮＨＣ１ＴＰｒＯｆＣ。 Ｌ−Ｐｈｅ−ＮＨ−ＣｉＴＰｒｏｌＣ，ＰｈＣＨｚＮＨＣＯＮＨ−ＣｉＴＥｔＯ 夏Ｃ５ＰｈＣＨ＝ＣＯＮＨ−ＣｉＴＥｔＯＩＣまたはＤ−Ｐｈｅ−ＮＨ−ＣｉＴ ＥｔｏｌＣである請求項１７の用途本発明のもうひとつの面は、神経変性に関連 する神経病理症状を有するかまたは有する可能性のある哺乳類において神経変性 を阻害しまたは治療するための薬物の製造のために、カルパイン阻害活性を有す るペプチドケト化合物またはその薬剤学的に許容される塩またはその誘導体の用 途を提供する。前記薬物は、好適には、ＣＮＳの神経変性の予防用または治療用 である。このペプチドケト化合物は、好適には、ペプチドα−ケトエステル、ペ プチドα−ケト酸またはペプチドα−ケトアミドである。さらに好適には、前記 ペプチドケト化合物は、下記のサブクラスのひとつのｌ員である；ジペプチドα −ケトエステル類（サブクラスＡ）、ジペプチドα−ケトエステル類（サブクラ スＢ）、トリペプチドα−ケトエステル類（サブクラスＡ）、トリペプチドα− ケトエステル類（サブクラスＢ）、テｉ・ラペプチドα−ケトエステル類、アミ ノ酸ペプチドα−ケトエステル類、ジペプチドα−ゲト酸類（サブクラスＡ）、 ジペプチドα−ケト酸類（サブクラスＢ）、トリペプチドα−ケト酸類、テトラ ペプチドα−ケト酸類、アミノ酸ペプヂドａ−ゲト酸類、ジペプチドα−ケトア ミド類（サブクラスＡ）Ｓジペプチドα−ケトアミド類（サブクラスＢ）、トリ ペプチドα−ケトアミド類、テトラペプチドα−ケトアミド類またはアミノ酸α −ケトアミド類である。 さらに本発明のもうひとつの面は、神経変性に関連する神経病理症状を有するか または有する可能性のある哺乳類において、神経変性を阻害しまたは治療するた めの薬物の製造のために、カルパイン阻害活性を有するりロケトンペプチド化合 物またはその薬剤学的に許容される塩またはその誘導体の用途を提供する。前記 薬物は、好適には、ＣＮＳの神経変性の予防用または治療用である。このハロケ トンペプチド化合物は、アミノハロケトンペプチドまたはジアゾケトンペプチド であることができる。 置換複素環化合物類、ペプチドケト化合物類またはハロケトンペプチド類の本発 明の用途は、興奮毒性、ＨＩｖ誘発ニューロバチ−１虚血、くも膜下出血、脳卒 中、脳発作、心臓大発作、多発性梗塞痴呆症、アルツハイマー病、ハンチントン 病、またはパーキンソン病に関連する神経変性と関連させて使用できる。これら の用途の前記薬物は薬剤学的に許容できる担体を含むことができ、経皮投与用、 皮下注射用、静注、筋注または胸骨内注射用、またはＣＮＳへの直接を椎腔内注 大または点滴用のような非経口投与用である。前記薬物は、また、経口用に適し た剤形であることもできる。前記用途は、また、虚血誘発事象、卒中、頭部外傷 、心臓大発作、脳発作、溺死寸前、−酸化炭素中毒、手術関連傷害または神経変 性の原因となるその他の事象から生じる神経変性と関連されて用いることができ る。 本発明のもうひとつの面は、ペプチド類またはタンパク質類を含有するインビト ロ試料中において試料類の処理時、生成時、調製時、単離時、精製時、保存時ま たは輸送時またはその後における蛋白分解を最小とする方法で、前記試料に対し て置換複素環化合物または下記サブクラスのひとつの１員であるペプチドケト化 合物を添加することからなるニジペプチドα−ケトエステル類（サブクラスＡ） 、ジペプチドα−ケトエステル類（サブクラスＢ）、トリペプチドα−ケトエス テル類（サブクラスＡ）、トリペプチドα−ケトエステル類（サブクラスＢ）、 テトラペプチドα−ケトエステル類、アミノ酸ペプチドα−ケトエステル類、ジ ペプチドα−ケト酸類（サブクラスＡ）、ジペプチドα−ケト酸類（サブクラス Ｂ）、トリペプチドα−ケト酸類、モトラペプチドα−ケト酸類、アミノ酸ペプ チドα−ケト酸類、ジペプチドα−ケトアミド類（サブクラスＡ）、ジペプチド α−ケトアミド類（サブクラスＢ）、トリペプチドα−ケトアミド類、テトラペ プチドα−ケトアミド類またはアミノ酸α−ケトアミド類である。本発明は、ま た、試料調製時またはその後において組織試料中のカルパイン活性による分解を 最小とする方法で、前記試料に対して置換複素環化合物、ペプチドケト化合物ま たはハロケトンペプチドを添加することからなる。前記試料は、臓器全体である こともでき、かつ、化合物の添加は、液体に溶解した前記化合物で臓器を潅流す ることからなる。好適には、前記添加段階の後に、組織試料を神経変性のための アッセイに使用し、前記アッセイは、組織試料中のカルパイン活性精製物を試験 することからなる。これらの方法のいずれかにおいて化合物の添加は、試料に対 してペプチドα−ケト酸を添加することを含むことができる。好適には、このペ プチドα−ケト酸は、下記のサブクラスのひとつのｌ員である；ジペプチドα− ケト酸類（サブクラスＡ）、ジペプチドα−ケト酸類（サブクラスＢ）、トリペ プチドα−ケト酸類、テトラペプチドα−ケト酸類またはアミノ酸ペプチドα− ケト酸類である。 本発明のさらにもうひとつの面は、神経変性の治療または阻害のための薬剤類を 提供することである。これらの薬剤類には、担体含有薬理学的に許容できる剤形 中の薬理学的に有効な神経保護量の置換複素環化合物、ペプチドケト化合物また はハロケトンペプチド、またはその薬剤学的に許容できる塩またはその誘導体が 含まれる。好適な１態様では、ペプチドケト化合物が前記薬剤中に含まれ、前記 ペプチドケト化合物は、下記のサブクラスのひとつの化合物である；ジペプチド α−ケトエステル類（サブクラスＡ）、ジペプチドα−ケトエステル類（サブク ラスＢ）、トリペプチドα−ケトエステル類（サブクラスＡ）、トリペプチドα −ケトエステル類（サブクラスＢ）、テトラペプチドα−ケトエステル類、また はアミノ酸ペプチドα−ケトエステル類である。このペプチドケト化合物は、好 適には、下記の化合物類のひとつである。 Ｂｚ−ＤＬ−Ａｌａ−ＣＯＯＥｔ。 Ｂｚ−ＤＬ−Ａｌａ−ＣＯＯＣＨ２°Ｃ６Ｈ４−ＣＨ５（ｐａｒａ）、　Ｂｚ− ＤＬ−Ｌｙｓ−ＣＯＯＥｔ、　ＰｈＣ０−Ａｂｕ−ＣＯＯＥ煤B （ＣＨ３）ｚＣＨ（ＣＨｚ）ｚｃｏ−Ａｂｕ−ＣＯＯＥｔ、　ＣＨｘＣＨｚＣＨ ）ｚｃＨｃｏ−Ａｂｕ−ＣσＯＥｔ。 Ｐｈ（ＣＨ２）６ＣＯ−Ａｂｕ−ＣＯＯＥｌまた、他の好適なペプチドケト化合 物は、下記の化合物から選ぶこともできる。 Ｚ−Ａｌａ−ＤＬ−Ａｌａ−ＣＯＯＥｔ、Ｚ−Ａｌａ−ＤＬ−Ａｌａ−ＣＯＯＢ ｚｌ。 Ｚ−Ａｌａ−ＤＬ−Ａｌａ−ＣＯＯｎＢｕ、　Ｚ−Ｌｅｕ−Ｎｖａ−ＣＯＯＥＬ 　Ｚ−Ｌｅｕ−Ｎｌｅ−ＣＯＯＥｔ、　Ｚ−Ｌａｕ−Ａｂｕ|ＣＯＯＥｔ。 Ｚ−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−ＣＯＯＥｔ、　Ｚ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−ＣＯＯＥｔ、　Ｚ− Ｌｅｕ−４−ＣＩ−Ｐｈｅ−ＣＯＯＥｔ。 好適な薬剤中で使用されるペプチドケト化合物は、下記の化合物類のひとつであ る。 Ｚ−Ａｌａ−Ａｌａ−ＤＬ−Ａｌａ−ＣＯＯＥｔ、Ｚ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−ＤＬ− Ａｌａ−ＣＯＯＥｔ。 Ｚ　−Ａ　ｌ　ａ　−Ａ　ｌ　ａ　−Ｄ　Ｌ　−Ａ　ｂ　ｕ　−ＣＯＯＥ　ｔ　 、Ｚ　−Ａ　ｌ　ａ　−Ａ　ｌ　ａ　−Ｄ　Ｌ　−Ａ　ｂ　普@−ＣＯＯＢ　ｚ 　１　。 ２−ＮａｐＳＯ２−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｂｕ−ＣＯＯＥｔ好適なペプチドケト化 合物は、また、Ｍｅｏ−８ｕｅ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｐｒ。 −ＤＬ−Ａｂｕ−ＣＯＯＭｅまたはＺ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ａｌａ−ＤＬ−Ａｌａ −ＣＯＯＥｔであることができる。さらに、他の好適なペプチドケト化合物は、 下記のサブクラスのひとつの化合物であろうニジペプチドα−ケト酸類（サブク ラスＡ）、ジペプチドα−ケト酸類（サブクラスＢ）、トリペプチドα−ケト酸 類、テトラペプチドα−ケト酸類またはアミノ酸ペプチドα−ケト酸類である。 したがって、好適なペプチドケト化合物類は、下記の化合物類のひとつであろう 。 Ｂｚ−ＤＬ−Ｌｙｓ−ＣＯＯＨ，Ｅｚ−ＤＬ−Ａｌａ−ＣＯＯＨ，Ｚシ、ｅｕ− Ｐｈｅ−ＣＯＯＨ，Ｚ−Ｌｅｕ−Ａｂｕ−ＣＯＯＨ下記のサブクラスの１つから 得られる化合物ニジペプチドα−ケトアミド類（サブクラスＡ）、ジペプチドα −ケトアミド類（サブクラスＢ）、トリペプチ、ドα−ケトアミド類、テトラペ プチドα−ケトアミド類またはアミノ酸α−ケトアミド類も、同様に前記好適な 態様で使用することができる。したがって、もうひとつの好適なペプチドケト化 合物は、下記の化合物類のひとつであろう。 前記薬剤は、また、クラスＩ置換イソクマリン類、クラス■置換イソクマリン類 またはクラス■複素環化合物類のひとつのような置換複素環化合物を含むことが できる。好適な置換複素環化合物は、３−クロロイソクマリン、３．４−ジクロ ロイソクマリン、３−アルコキシ−７−アミノ−４−クロロイソクマリン：また は７−置換３−アルコキシ−４−クロロイソクマリンである；Ｃ１ＴＰｒＯＩＣ 。 ＮＨ＝−ＣｉＴＰｒＯＩＣＳＰｈＣＨ７ＮＨＣＯＮＨ−ＣｉＴＰｒＯＩＣ。 ＣＨ＝ＣＯＮＨ−ＣｉＴＰｒＯＩＣ，Ｌ−Ｐｈｅ−ＮＨ−ＣｉＴＰｒＯＩＣ。 ＰｈＣＨｚＮＨＣＯＮＨＣｉ　ＴＥｔｏｌＣ。 ＰｈＣＨ２Ｃ０ＮＨＣｉ　ＴＥｔＯＩＣまたはＤ−Ｐｈｅ−ＮＨ−ＣｉＴＥｔＯ ＩＣ。 これらの組成物類において、組成物は、好適には、各投与量中７０μｇ〜７ｇの 活性成分類からなる投与剤形であり、前記担体は液体を含み、前記薬剤は投与剤 形であり、各投与量が前記担体０．５ｍ１−１リツトルからなる。前記組成物類 は、さらに、下記を少なくとも１種含むことができる。ＤＭＳＯまたはその他の 有機溶媒、脂質担体、洗浄剤、界面活性剤または乳化剤。これらの組成物類は、 非経口投与用に適しているかまたは局所適用に適した剤形であることができる。 前記薬剤類は、また、水溶液、ローション、ゼリー、油性溶液、または油性懸濁 液のよう−な種々の剤形とすることもできる。 本発明は、また、薬物としての置換複素環化合物の用途、ハロケトンペプチドの 薬物としての用途、およびペプチドケト化合物の薬物としての用途を提供し、前 記ペプチドケト化合物は、下記のサブクラスのひとつの化合物である。ジペプチ ドα−ケトエステル類（ザブクラスＡ）、ジペプチドα−ケトエステル類（サブ クラスＢ）、トリペプチドα−ケトエステル類（サブクラスＡ）、トリペプチド α−ケトエステル類（ザブクラスＢ）、テトラペプチドα−ケトエステル類また はアミノ酸ペプチドα−ケトエステル類。この用途における好適なペプチドケト 化合物類は、薬剤に関連して上記で記載したペプチドケト化合物類のいずれをも 含有することもできる。 図面９葵単を要約 第４図は、グルタミン酸を全く添加しない対照に対して、グルタミン酸および種 々のカルパイン阻害剤添加によるグルタミン酸誘発細胞死阻害の百分率を示して いる。 第２図は、雄性ラット中のＭＣＡ閉塞上に生成した梗塞径に及ぼすＺ−Ｌ　ｅ　 ｕ−Ｐｈｅ−ＣＯＮＮ−１−Ｅｔ　（ＣＸ２６９）およびＺ−Ｌｅｕ−Ａｂｕ− ＣＯＮＨ−Ｅｔ　（ＣＸ２７５）の効果をグラフで図示したものである。 第３図は、ＣＸ２１６　（Ｚ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−ＣＯ２Ｅｔ、ペプチドケト化合 物）およびＣＮ、（Ａｅ−Ｌｅｕ　−−Ｌｅｕ−Ｎｌｅ−Ｈ）の酸素欠乏雰囲気 に１０分間曝された海馬切片の生存に及ぼす効果を対照切片と比較して示したも のであり、二の雰囲気中で、これらの化合物の両者は、インキュベーション時間 １時間および２時間の両方でそれらの至適濃度で添加されていた。 第４図は、対照、ＣＩ　１処理およびＣＸ２１８処理海馬切片の惹起電位の大き さを経時的に示ｊ７たものであり、前記切片類は、この時間にわたり酸素欠乏雰 囲気に曝さｔｌでいる。 第５図は、Ｚ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−ＣＯＮＨ−Ｅｔ　（ＣＸ２６９）およびＺ−Ｌ ｅＩ」−Ｐｈｅ−Ｃ０２Ｅｔ（ＣＸ２１６）について、１時間のインキュンベー ション時間にわたり強度の低酸素によるＥＰＳＰの回復百分率を示している。 ｖ４６図は、線維斉射消失前の酸素欠乏持続時間（単位分）として示したＣ１１ またはＣＸ２１６存在の海馬切片生存に及ぼす効果を比較して示している。 第７図は、カイニン酸の挙動およびけいれん効果に及ぼすＣ１ｌの効果を、対照 と比較して示したものである。 第８図は、対照およびＣ１１処理ラツトについてカイニン酸に暴露されたラット 脳中におけるスペクトリンＢＤＰ類の量を示したものである。 光更の詳細与説■ Ａ−株長衿に 我々は、カルパイン活性化が脳萎縮および変性の多くの症例に中核的な事象であ ること、および、カルパインのみの阻害で細胞損傷および細胞死を阻害しまたは 予防するために十分であることを発見した。そこで、我々は、さらに、カルパイ ン阻害が多くの神経変性状態と疾患に関連した神経毒性を防御することを発見し た。 我々は、上述の発見により、神経細胞の神経病理状態に関連する細胞内カルシウ ム増加がカルパインを賦活し内部から神経細胞の消化を始動させると考えている 。我々は、こうした状態と関連してカルパインの賦活にはその他にも機作がある と考えている。したがって、本発明のひとつの面は、カルパイン活性の阻害によ ってこの消化に関連する神経変性およびその他の疾患を阻害しかつ治療すること に関している。したがって、本発明のこの面の一部は、カルパイン阻害剤類をイ ンビボ投与することによってこの消化が原因の神経変性とその他の病理症状を予 防することである。限定のためではなく例示として挙げると、本発明のこの面を 使用して治療可能な疾患および状態として、興奮毒性後の神経変性、ＨＩＶ誘発 ニューロバチ−１虚血、虚血または外傷後の脱神経、くも膜下出血、脳卒中、多 発性梗塞痴呆症、アルツハイマー病（ＡＤ）　、パーキンソン病、ハンチントン 病、手術関連脳傷害およびその他の神経病理状態が挙げられる。 スペクトリンＢＤＰ類は、上述のように、インビボカルパイン活性に関連してい ることが判明している。我々は、カルパイン活性化に特徴的なりＤＰ類が検出さ れる神経変性の各症例において、カルパイン活性化が特定の病原性処置に極めて 感受性の脳領域に限局されていることを発見した。さらに、組織学的方法によっ て判明したことであるが、カルパイン活性化が神経変性の明らかな証拠に先行し ている。したがって、カルパイン活性化が脳内で今にも起こりそうであるかまた は進行中の細胞死に空間的（二または４漉的に関連している。ゆえに、我々は、 カルパイン活性化は、神経病理状態を含めて多くの病理状態において細胞損傷と その死の重要な機作であると考えている。また、カルパインの活性化が神経細胞 逢合む細胞の死において初期事象であることの証拠がある。このことは、細胞死 の後期段階で活性化されるその他の公知のプロテアーゼ類と対照的である。我々 は、したがって、カルパイン活性阻害が、細胞系が有意に損傷される前に細胞死 の初期段階で侵襲を付与することは有益であるど考えている。 カルパインの神経変性における関与のもうひとつの面は、これらのタンパク質類 の再生系における関与である。発生軸索または再生軸索は、”停止経路”と呼ば れる安定化プロセスにさらに進行するに伴ってやや阻害されることが公知である 。この安定化は、軸索がそれらのターゲットに到達した時点で起こり得る。しか し、いくつかの系では、安定化が適切でない場所で起こることもある。ある研究 者は、この停止経路が少なくとも１部には細胞内カルパインの活性化によって作 動すること、および、カルパインの阻害が安定化を妨害することもありうるとい う知見を提唱した（Ｌｕｉｚｚｉ、１９９０）。我々は、カルパイン阻害剤類を 本発明に従って使用すると、神経変性阻害の他に外傷後の神経組織再生と修復を 有効に助けると考えている。 本発明のもうひとつの面は、少なくとも３種の化合物属類、前記置換イソクマリ ン類、ペプチドケト化合物類およびハロケトンペプチド類がカルパイン阻害活性 を有していることを発見したことである。我々は、さらに、下記にも述べるが、 これらの３ｆｌの化合物属類が神経変性状態と疾患の治療において治療上有効な 化合物類として特にそれらを有用とするその他の特性を示すことを発見した。 Ｂ、置換複素環化合物類 本発明に従って使用するとカルパイン阻害活性を示す化合物類のある特定の属は 、置換複素環化合物類である。これらの化合物類として、置換イソクマリン類が 挙げられる。前記置換複素環化合物類は、セリンプロテアーゼ類の優れた阻害剤 類であることが公知である。下記にも述べるように、我々は、ここで、これらの 化合物類が、また、カルパインＩおよびカルパイン■の阻害剤類であること、お よび、その他のカルパイン類の阻害剤でもあることを見いだした。さらに、我々 は、下記にも述べるが、カルパイン類のほとんどの公知の阻害剤類と異なりこれ らの置換複素環化合物類がパパインまたはカテプシンＢの阻害剤として有効でな いことを見いだした。したがって、我々は、この置換複素環化合物類がその他の チオールプロテアーゼ類に影響を及ぼすことなくカルパイン類を阻害する実質的 に特異的な手段を提供すると考えている。 カルパイン阻害活性を有する置換複素環化合物類のある特定の属は、カチオン置 換基類を有するイソクマリン類である。これらの置換複素環化合物類は、本文で ”クラスＩ置換イソクマリン類”と称する。クラスＩ置換イソクマリン類は、ウ シトロンビン、ヒトトロンビン、ヒト第Ｘａ因子、ヒト第Ｘｌａ因子、ヒト第Ｘ １ｌａ因子、ウシトリプシン、ヒト血漿プラスミン、ヒト組織プラスミノーゲン 活性化因子、ヒト肺トリプターゼ、ラット皮膚トリプターゼ、ヒト白血球エラス ターゼ、ブタ膵エラスターゼ、ウシキモトリプシンおよびヒト白血球カテプシン Ｇを含めていくつかのセリンプロテアーゼ類の優れた阻害剤類であることが公知 である。前記クラスＩ置換イソクマリン類は活性部位セリンとの反応によって前 記セリンプロテアーゼ類を阻害し、アシル酵素を形成し、いくつかの場合におい ては、もうひとつの核性活性部位と反応してさらに共有結合を形成する。我々は 、クラスＩイソクマリン類はまたカルパインとも反応することを発見した。 我々は、カルパイン阻害の機作がセリンプロテアーゼ類阻害のそれと類似してい ること、その理由として、カルパイン類の反応機構がセリンプロテアーゼ類のそ れと類似していると考えている。 カルパイン阻害活性を有するクラス■置換イソクマリン類は、下記の構造式：ま たは薬剤Ｔ的に許容できる塩を有１プＣいる。 式中、 Ｚは、アミン基が付着したＣ１−６アルコキシ、イソチウレイト基がｔ４’Ｈし たＣ１−６アルコキシ、グアニジノ基が０着したＣ１−６アルコキシ、アミジノ 基が付着したＣ１−６アルコキシ、アミノ基が付着したＣ１−６アルキル、イソ チウレイド基が付着したＣ１−６アルキル、グアニジノ基が付着したＣ１−６ア ルキル、アミジノ基が付着したＣ１−６アルキルからなる群から選択され、Ｒは 、０＝Ｃ＝Ｎ−１Ｓ＝Ｃ＝Ｎ−１ＡＡ−ＮＨ−１ＡＡ−ＡＡ−ＮＨ−１ＡＡ−０ −１ＡＡ−ＡＡ−０−１Ｍ−ＮＨ−１Ｍ−ＡＡ−ＮＨ−１Ｍ−ＡＡ−ＡＡ−ＮＨ −１Ｍ−０−１Ｍ−ＡＡ−０−１Ｍ−ＡＡ−ＡＡ−０−からなる群から選択され 、 式中、ＡＡは、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、メチオ ニン、フェニルアラニン、トリプトファン、グリシン、セリン、スレオニン、シ スティン、ベータ・アラニン、ノルロイシン、ノルバリン、アルファーアミノ酪 酸、イプシロン・アミノカプロン酸、シトルリン、ヒドロキシプロリン、オルニ チンまたはザルコシンを示し、 式中、Ｍは、ＮＨ，−ＣＯ−１ＮＨＩ−Ｃ８−１ＮＨ！　Ｓｏｗ−１Ｘ−ＮＨ− ＣＯ−１Ｘ−ＮＨ−Ｃ８−１Ｘ−ＮＨ−３Ｏ，−１Ｘ−ＣＯ−１Ｘ−ＣＳ−１Ｘ −ＳＯ，−１ｘ−ｏ−ｃｏ−またはｘ−ｏ−ｃｓ−を示し、前記中、Ｘは、Ｃ１ −６アルキル、Ｃｌ−６フルオロアルキル、Ｋ置換Ｃｌ−６アルキル、Ｋ置換Ｃ １−６フルオロアルキル、フェニル、ｊ置換フェニル、１２個置換フェニル、１ ３個置換フェニル、ナフチル、Ｊ置換ナフチル、１２個置換ナフチル、１３個置 換ナフチル、付着フェニル基を有するＣ１−６アルキル、付着フェニル基を２個 有するＣ１−６アルキル、Ｊ置換付着フェニル基を有するＣ１−６アルキル、ま たはＪ置換付着フェニル基を２個有するＣ１−６アルキルを示し、 前記において、Ｊは、ハロゲン、Ｃ０ＯＨ，ＯＨ，ＣＮ、ＮＯ２，Ｃ１−６アル キル、Ｃｌ−６アルコキシ、Ｃ１−６アルキルアミン、Ｃ１−６ジアルキルアミ ンまたはＣ１−６アルキルー０−ＣＯ−を示し、式中、Ｋは、ハロゲン、Ｃ０Ｏ Ｈ，ＯＨ，ＣＮ、ＮＯ２，ＮＨ２，Ｃ１−６アルキルアミン、Ｃ１−６ジアルキ ルアミンまたはＣ１−６アルキルーｏ−ｃｏ−を示し、 Ｙは、Ｈ５ハロゲン、トリ１ルオロメチル、メチル、０１−Ｉおよびメトキシか らなる群から選択される。 式（１）の化合物類は、また、下記の構造に示したように、Ｂ位において１俵以 上の置換基を含有することができる。 式中、ＮＯ２，ＣＮ、ＣＩ、Ｃ０ＯＲおよびＣ０ＯＨのような電気的陰性置換基 類は、イソクマリンの反応性を増強し、ＮＨ２，ＯＨ，アルコキシ、チオアルキ ル、アルキル、アルキルアミノ、およびジアルキルアミノのような電気的陽性の 置換基類はその安定性を増加させる。中性置換基類は、また、アシル酵素の安定 性を増強しかつ前記阻害剤類の有効性を向上させる。 下記の化合物類は本発明のクラス！イソクマリン類の代表である：４−クロロー ３−（３−イソチウレイドプロポキシ）イソクマリン（ＣｉＴＰｒＯＩＣ）７− （ベンジルカルバモイルアミノ）−４−クロロ−３−（３−イソチウレイドプロ ポキシ）イソクマリン（ＰｈＣ１（２ＮＩＩＣＯＮＨ−ＣｉＴＰｒｏｌＣ）７− （フェニルカルバモイルアミノ）−４−クロロ−３−（３−イソチウレイドプロ ポキシ）イソクマリン（ＰｈＮＨＣＯＮＨ−ＣｉＴＰｒＯＩＣ）７−（アセチル アミノ）−４−クロロ−３−（３−イソチウレイドプロボキシ）イソクマリン（ ＣＨ３ＣＯＮＨ−ＣｉＴＰｒＯＩＣ）７−（３−フェニルプロピオニルアミノ） −４−クロロ−３−（３−イソチウレイドプロポキシ）イソクマリン（ＰｈＣＨ ２ＣＨ２ＣＯＮＨ−ＣｉＴＰｒＯＩＣ）７−（フェニルアセチルアミノ）−４− クロロ−３−（３−イソチウレイドプロポキシ）イソクマリン（ＰｈＣＨ２ＣＯ ＮＨ−ＣｉＴＰｒｏｌＣ）７−（Ｌ−フェニルアラニルアミノ）−４−クロロ− ３−（３−イソチウレイドプロポキシ）イソクマリン（Ｌ−Ｐｈｅ−ＮＨ−Ｃｉ ＴＰｒＯＩＣ）７−（Ｎ−ｔ−ブチルオキシカルボニル−し−フェニルアラニル アミノ）−４−クロロ−３−（３−イソチウレイドプロポキシ）イソクマリン（ Ｂｏｃ−Ｌ−Ｐｈｅ−ＮＨ−ＣｉＴＰｒｏｌＣ） ７−（Ｄ−フェニルアラニルアミバー４−クロロ−３−（３−イソチウレイドプ ロボキシ）イソクマリン（Ｄ−Ｐｈｅ−ＮＨ−ＣｉＴＰｒｏｌＣ）７−（Ｎ−ｔ −ブチルオキシカルボニル−〇−フェニルアラニルアミノ）−４−クロロ−３− （３−イソチウレイドプロポキシ）イソクマリン（Ｂｏｃ−Ｄ−Ｐｈｅ−ＮＨ− ＣｉＴＰｒｏｌＣ） ７−（ベンジルカルバモイルアミノ）−４−クロロ−３−（２−イソチウレイド エトキシ）イソクマリン（ＰｈＣＨ２ＮＩＣＯＮ）ｌ−ＣｉＴＥｔＯＩＣ）７− （フェニルカルバモイルアミノ）−４−クロロ−３−（２−イソチウレイドエト キシ）イソクマリン（ＰｈＮＨＣＯＮＨ−ＣｉＴＥｔｏｌＣ）７−（イソプロピ ルカルバモイルアミノ）−４−クロロ−３−（２−イソチウレイドエトキシ）イ ソクマリン（（ＣＨ３）２ＣＩＩＮＨＣＯＮＨ−ＣｉＴＥｔｏｌＣ）７−（フェ ニルアセチルアミノ）−４−クロロ−３−（２−イソチウレイドエトキシ）イソ クマリン（ＰｈＣＨ２ＣＯＮＨ−ＣｉＴＥｔｏｌＣ）７−（Ｌ−フェニルアラニ ルアミノ）−４−クロロ−３−（２−イソチウレイドエトキシ）イソクマリン（ Ｌ−Ｐｈｅ−ＮＨ−ＣｉＴＥｔＯＩＣ）７−（Ｎ−ｔ−ブチルオキシカルボニル −Ｌ〜フェニルアラニルアミノ）−４−クロロ−３−（２−イソチウレイドエト キシ）イソクマリン（Ｂｏｃ−Ｌ−Ｐｈｅ−ＮＨ−ＣｉＴＥｔＯＩＣ） ７−（Ｄ−フェニルアラニルアミノ）−４−クロロ−３−（２−イソチウレイド エトキシ）イソクマリン（Ｄ−Ｐｈｅ−ＮＴＩ−ＣｉＴＥｔＯＩＣ）７−（Ｎ− ｔ−ブチルオキシカルボニル−Ｄ−フェニルアラニルアミノ）−４−りｏｏ−３ −（２−イソチウレイドエトキシ）イソクマリン（Ｂｏｃ−Ｄ−Ｐｈｅ−ＮＨ− ＣｉＴＥｔｏｌＣ） ７−（Ｎ−ｔ−ブチルオキシカルボニル−Ｌ−アラニル−Ｌ−アラニルアミノ） −４−クロロ−３−（２−イソチウレイドエトキシ）イソクマリン（Ｂｏｃ−Ａ 　１ａ　−Ａｌａ−？ＪＨ−ＣｉＴＥｔ０１Ｃ） ７−（Ｌ−アラニル−Ｌ−アラニルアミノ）−４−クロロ−３−（２−イソチウ レイドエトキシ）イソクマリン（ａｌａ−＾１ａ−冊−ＣｉＴＥｔＯＩＣ）７− （ｌ−ナフチルカルバモイルアミノ）−４−クロロ−３−（２−イソチウレイド エトキシ）イソクマリン（ＮａｐｈｔｈｙｌＮＨ−ＣｉＴＥｔｏｌＣ）７−　（ （Ｓ）−α−メチルベンジルカルバモイルアミン）−４−クロロ−３−（２−イ ソチウレイドエトキシ）イソクマリン（Ｓ−Ｃ６Ｈ５（ＣＨ３）ＣＨＮＨＣＯＮ Ｈ−ＣｉＴＥｔｏｌＣ）７−　（（Ｒ）−α−メチルベンジルカルバモイルアミ ノ）−４−クロロ−３−（２−イソチウレイドエトキシ）イソクマリン（Ｒ−Ｃ ６Ｈ５（ＣＨ３）Ｃ）Ｉ！慴ω冊−ＣｉＴＥｔＯＩＣ）７−ダンシルアミノ−４ −クロロ−３−（２−イソチウレイドエトキシ）イソクマリン（ＤａｎｓｙｌＮ Ｈ−ＣｉＴＥｔｏｌＣ）７−フェニルチオカルバモイルアミノ−４−クロロ−３ −（２−イソチウレイドエトキシ）イソクマリン（Ｐｈ洲（、ＳＮＨ−ＣｉＴＥ ｔｏｌＣ）７−（ｍ−カルボキシフェニルチオカルバモイル）アミノ−４−クロ ロ−３−（２−イソチウレイドエトキシ）イソクマリン（ｍ−α）ＯＨ−Ｐ瀦１ １Ｃ５ＮＨ−ＣｉＴＥｔｏｌＣ）７−（ｐ−カルボキシフェニルチオカルバモイ ル）アミノ−４−クロロ−３−（２−イソチウレイドエトキシ）イソクマリン（ ｐ−α）ＯＲ−ＰｈＮＨＣ８ＮＨ−ＣｉＴＥｔｏｌＣ）７−アミノ−４−クロロ −３−（３−イソチウレイドプロポキシ）イソクマリン（＾ＣＩＴＩＣ） 塩基性置換基類を有するイソクマリン類は、また、セリンプロテアーゼ類の有効 な阻害剤類であることが公知である。本文で参考として引用した米国特許第４゜ ８４５．２４２号、Ｐｏｗｅ　ｒｓらを参照。クラス■置換イソクマリン類と本 文で称するこの属の化合物類は、本発明の用途において有効であると考えられて いる。 クラス■置換イソクマリン類は下記の構造式・または薬剤学的に許容できる塩で あり、式中、Ｒは、−Ｎ−Ｈ−Ｃ（＝ＮＨ）−ＮＨ＊、−Ｃ（＝ＮＨ）−ＮＨ， 、付着アミノを有するＣ　Ｉ−ｓ、および式Ｓ　Ｃ（＋ＮＨ！＋）ＮＨ！の付着 イソチウレイドを有するＣ１−６アルキルからなる群から選択され、Ｚは、Ｈ、 ハロゲン、（１＋−ｓアルキル、付着フェニルを有するＣｌ−６アルキル、ＣＩ −信フッ化アルキル、付着水酸基を有するＣ目アルキル、付着Ｃ＋−ｓアルコキ シを有するＣ？＋ｓアルキル、Ｃ１６アルコキシ、Ｃ５−、フッ化アルコキシ、 付着フェニルを有するＣ１−６アルＪギシ、ベンジルオキシ、４−フルオロベン ジルオキシ、−ｏｃＨ２（二、Ｈ，Ｒ’　（２−置換基）、　、−ＯＣＨ２Ｃｓ 　Ｈ−Ｒ，’　（３−置換基）、−０ＣＨ２（：、、Ｈ，Ｒ’　（４−置換基） 、−０ＣＨＩＣ＠Ｈ３Ｒ２’　（２，３−置換基）、ＯＣ）１−　Ｃｓ　Ｈｓ　 Ｒ２’　（２、４−置換基）　、−０ＣＨ２ＣｓＨｓＲｔ°　（２，５−１を換 基）、−０ＣＩ−１２ｃＭＨＩＲ，”　（２，６＝置換基）、〜ＯＣＨ２Ｃｓ　 Ｈｓ　Ｒ＊　’　（３。 ４−一置換基）、および−０ＣＲ，Ｃ，Ｈ３Ｒ１’　（３゜５−置換基）からな る群から選択さね、 Ｒｏは、Ｈ、ハロゲン、トリフルオロメチル、Ｎｏ２．シアノ、メチル、メＩ・ ギシ、アセチル、カルボキシル、ＯＨおよびアミノからなる群から選択され、Ｙ は、Ｈ，ハロゲン、トリフルオロメチル、メチル、ＯＨおよびメトキシからなる 群から選択される。 、これとは別に、クラスａｌｌ換イソクマリン類は、構造（Ｔｌ　）によって示 され、式中、 Ｚは、付着チオウレイドを有するＣ１−、アルコキシ、付着グアニジノを有する Ｃ１−＠アルコキシ、付着アミジノを有するＣＩ−ｓアルコキシ、付着アミノを 有するＣ１−８アルキル、付着イソチウレイドを有する０１〜．アルキル、付着 グアニジノを有するＣ１−＠アルキル、付着アミジノを有するＣ１−＠アルキル からなる群から選択され、 Ｒは、Ｈ，ＯＨ，Ｈ，、ＮＯｔハロゲン、Ｃ３−、アルコキシ、ＣＩ−ｗフッ化 アルコキシ、Ｃ＋−ｓアルキル、付着アミノを有するＣ　＋−ｓアルキル、　Ｍ −ＡＡ−ＮＨ−。 Ｍ−ＡＡ−０−からなる群から選択され、式中、ＡＡは、アラニン、バリン、ロ イシン、イソロイシン、プロリン、メチオニン、フェニルアラニン、トリプトフ ァン、グリシン、セリン、スレオニン、システィン、チロシン、アスパラギン、 グルタミン、アスパラギン酸、リジン、アルギニン、ヒスチジン、ベーターアラ ニン、ノルロイシン、ノルバリン、アルファーアミノ酪酸、およびイプシロン・ アミノカプロン酸、シトルリン、ヒドロキシプロリン、オルニチンおよびザルコ シンからなる群から選択され、式中、Ｍは、Ｈ，１個〜６個の炭素原子を有する 低級アルカノイル、カルボキシアルカノイル、ヒドロキシアルカノイル、アミノ アルカノイル、ベンゼンスルホニル、トシル、ベンゾイル、および１個〜６個の 炭素原子を有する低級アルキルスルホニルからなる群から選択され、Ｙは、Ｈ， ハロゲン、トリフルオロメチル、メチル、ＯＨ，およびメトキシからなる群から 選択される。 さらに別のものとして、クラス■置換イソクマリン類は、構造（ＩＩ）によって 示され、式中、 Ｒは、−Ｎ−Ｈ−Ｃ（−ＮＨ）−ＮＨ，、−Ｃ（＝ＮＨ）ＮＨ，、付着アミノを 有するＣトロアルキル、付着イソチウレイドを有するＣ　ｌ−ｓアルキルからな る群から選択され、 Ｚは、付着アミノを有するＣ３−・アルコキシ、付着イソチウレイドを有するＣ １−・アルコキシ、付着グアニジノを有するＣ３−・アルコキシ、付着アミジノ を有するＣＩ−ｓアルコキシ、付着アミノを有するＣｌ・アルキル、付着グアニ ジノを有するＣＩ−＊アルキル、付着アミジノを有するＣ　＋−ｓアルキルから なる群から選択さＹは、Ｈ，ハロゲン、チオフルオロメチル、メチル、ＯＨ，お よびメトキシからなる群から選択される。 下記の化合物類は、クラス■置換イソクマリン類の代表である・３−（３−アミ ノプロポキシ）イソクマリン、３−（３−アミノプロポキシ）−４−クロロイソ クマリン、３−（２−イソチウ１ノイドエトキシ）−４−クロロイソクマリン、 ３−（３−イソチウレイドブロポキシ）−４−クロロイソクマリン、７−アミノ −３−（３−イソチウレイドプロボキシ）−４−クロロイソクマリン、７−グア ニンノー３−メトキシイソクマリン、７−グアニジノ−３−メトキシ−４−クロ ロイソクマリン、７−グアニジノ−３−エトキシイソクマリン、７−グアニジノ −３−エトキシ−４−クロロイソクマリン、７−ゲアニジノー３−（２−フェニ ルエトキシ）イソクマリン、７−ゲアニジノー３−（２−フェニルエトキシ）− ４−クロロイソクマリン。 本発明で有用な置換複素環化合物類のさらにもうひとつの属は、本文で”クラス ■複素環化合物類”と称され、下記の構造式を有する・式中、 Ｚは、ＣＯ，Ｓｏ、Ｓｏ２．ＣＣＩおよびＣＦからなる群から選択され、Ｙは、 ０．ＳおよびＮＨからなる群から選択され、Ｘは、ＮおよびＣＨからなる群から 選択され、およびＲは、（メチル、エチル、およびプロピルのような）Ｃ１−６ アルキル、（ベンジルのような）フェニル含有Ｃ１−４アルキル、および（トリ フルオロメチル、ペンタフルオロエチルおよびヘプタフルオロプロピルのような ）Ｃ１−６フルオロアルキルからなる群から選択される。 前記Ｚ基は、それがセリンプロテアーゼの活性部位セリンＯＨ基と相互作用する ので、電気的に陰性（ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｌｉｃ）でなければならない。前記Ｒ 基は荷電されておらずかつ疎水性でなければならない。Ｒ基中の炭素原子の１個 以上は、Ｒ基が疎水性を保持する限りにおいて、０．Ｓ、ＮＨおよびその他の上 記のような原子基類によって置換することもできる。 下記の化合物類は、クラス■複素環化合物類の代表である・２−トリフルオロメ チル−４Ｈ−３，１−ベンゾキサジン−４−オン２−ペンタフルオロメチル−４ Ｈ−３，１−ベンゾキサジン−４−オン２−へブタフルオロプロピル−４Ｈ−３ ，１−ベンゾキサジン−４−オン２−メチル−４Ｈ−３，１〜ベンゾキサジン− ４−オン２−プロピル−４Ｈ−３，１−ベンゾキサジン−４−オン２−ベンジル −４Ｈ−３，１−ベンゾキサジン−４−オン２−ヘプタフルオロプロピル−４− キナゾリノン２−プロピル−４−キナゾリノン ２−ベンジル−４−キナゾリノン ２−　（Ｃ，Ｈ６ＣＣ１，）−４−クロロキナゾリン、および２−プロピル−４ −クロロキナゾリン。 クラス■複素環化合物類は、本文で参考として引用した米国特許第４，８４７゜ ２０２号、ｐｏｗｅｒｓら、に開示されている。 その他の置換複素環化合物類は、３−クロロイソクマリン、Ｄａｖｉｅｓおよび Ｐｏｏｌｅ、　Ｊｒ、、　Ｊ、　Ｃｈｅａ、Ｓｏｃ、、　Ｉ）ｐ、　１６１６− １６２９　（１９２８）　；　３−クロロおよび３，４−ジクロロイソクマリン 、Ｍｉｌｅｖｓｋａｙａ、　Ｂｅｋｉｎｓｋａｙａ、およびＹａｇｕｐｏｌ’　 ５ｋｉｉ、　Ｚｈｕｒ。 ｏｒｇ、　ＫｈｉｌＩＬ、　９、ｐｐ、　２１４５−２１４９　（１９７３）　 ：　３−メチルおよび４−カルボキシ−３−メチルイソクマリン、Ｔｉｒｃｘｌ ｋａｒおよびＵｓｇａｎｏｎｋａｒ、　Ｉｎｄ、　Ｊ、　Ｃｈｅｗ、、　７、ｐ ｐ、　１１１４−１１１６　（１９６９）　；　７−：トロおよび７−アミノイ ソクマリン、ＣｈｏｋｓｅｙおよびＵｓｇａｏｎｋａｒ、　Ｉｎｄ−Ｊ、　Ｃｈ ｅｗ、、　１４Ｂ、　ｐｐ、５９６−５９８　（１９７６）のように、他の目的 のために先に調製されている。先の論文の開示は全゛ｃ１本文で参上とし゛Ｃ引 用しＣいる。 同様に、これらのその他の置換イソクマリン類は、本発明に従って使用した際に カルパイン阻害活性を示すと考えられている。 セリンプロテアーゼ類阻害のために最近調製されたさらにその他の置換イソクマ リン類は、３−クロロイソクマリン、Ｈａｒｐｅｒ、Ｈｅｍｍ１．およびＰｏｗ ｅｒｓ、　Ｊ、　Ａ、　Ｃｈｅｗ、　Ｓｏｃ、　１０５．　ｐｐ、　６５１８− ６５２０（１９８３）　；　３　、　４−ジクロロイ\クマリン、 Ｈａｒｐｅｒ、　Ｈｅｍｍ１．およびＰｏｗｅｒｓ、　Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒ ｙ　２４．　Ｉ）ｐ、　１８３１−１８４１（１９８５）　G　３−アルコ キシ−７−アミノ−４−クロロイソクマリン、ＨａｒｐｅｒおよびＰｏｗｅｒｓ 、　Ｊ、　ＡＩＬＣｈｅｌＩｌ。 Ｓｃｃ、　１０６．１）ｒ）、　７６１８−７６１９（１９８４）、Ｈａｒｐｅ ｒおよびＰｏｗｅｒｓ、　Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　２４D７２００−７２１ ３ （１９８３）　；塩基性基（アミノアルコキシ、グアニジノおよびイソチウレイ ドアルコキシ）を有するその他の置換イソクマリン類、Ｋａｍ、　Ｆｕ　ｊｉｋ ａｗａおよびＰｏｗｅｒｓ。 Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　２７、ｐｐ、　２５４７−２５５７（１９８８）　 ；　７−置換３−アルコキシ−４−クロロイソクマリン類、Ｐｏｗｅｒｓ、　Ｒ ａｍ、　Ｎａｒａｓｈｉｍｈａｎ、　０１ｅｋｓｙｓｚｙｎ、　Ｈｅｒｎａｎｄ ｅｚおよびＵｅｄａ、　i。 Ｃｅ１ｌ　Ｂｉｃｘ：ｈｅｍ、　、　３９．１）Ｉ）、　３３−４６（１９８９ ）およびＰｏｗｅｒｓ、０１ｅｋｓｙｓｚｙｎ、　Ｎａｒａ唐■奄高■≠氏A　 Ｋａｍ。 ｈｄｈａｋｒｉｓｈｎａｎおよびＭｙｅｒ、　Ｊｒ、　Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒ ｙ　２９．３１０８−３１１８（１９９０）である。先の論■■ 開示は全て、本文で参考として引用している。我々は、上述の化合物類がセリン プロテアーゼ阻害活性を示し、同様に、本発明に従って使用した際にカルパイン 阻害活性も示すと考えている。本発明の実施で有用なりラス■およびクラス■置 換イソクマリン類、クラス■置換複素環化合物類およびその他の置換複素環化合 物類を含めて上述のイソクマリン類は、以下でまとめて”置換複素環化合物類” と称することにする。用語”置換複素環化合物”は、これらの化合物類のいずれ かの特定種を意味するために使用するものとする。 種々の置換複素環化合物類の調製を、実施例５ＨＣＩ−３ＨＣ９によって例示す る。 実施例５ＨＣＩ ７−（フェニルカルバモイルアミノ）−４−クロロイソクマリンの調製は、先に 記載（Ｐｏｗｅｒｓら、ＢｉｏｃｈｅＩｌｌｉｓｔｒｙ　２９．３１０８−３１ １８（１９９０））のように合成した。この化合物（０，３２ｇ、１ミリモル） を、ＴＨＦＳｍｌＨＦ５ｍｌビフェニルイソシアナートｇ、１ミリモル）と混合 し、この反応混合物を室温で一晩撹拌した。 生成物７−（フェニルカルバモイルアミノ）−４−クロロ−３−（２−ブロモエ トキシ）イソクマリンを沈澱させて得、収率は４０％、融点２１５−２１７℃、 マススペクトルｍ／ｅ”４３７．９　（Ｍ＋）＞　Ｃ＋ｓＨ＋ａＮｔＯａＣＩＢ ｒの理論値：Ｃ，４９，４０：Ｈ，３，２２；Ｎ、６．４０；Ｃｉ、８．１０． ３、実験値：Ｃ，４９，４８，Ｈ，３，２５，Ｎ、６．　３４　、Ｃ１，８，１ ２’ｔ’あった。 フェニルカルバモイルアミノ化合物（０，１ｇ、０１２３ミリモル）をＴ　ＨＦ １０ｍｌ中で７０°Ｃで一晩、０．０２ｇのチオ尿素（０，２６ミリモル）とと もに加熱した。最終生成物を沈澱させ、収量０．０４ｇ、３６％、融点１６１− １６３’Ｃ（分解）、マススペクトル（ＦＡＢ＋）ｍ／ｅ＝４３３　（Ｍ−Ｂｒ ）。 Ｃ，ｅＨ＋５Ｎ４０−ＣＩ　ＢｒＳ　：　０．２５ＴＨＦの理論値：Ｃ，４５， １２：Ｈ。 ３．８６．Ｎ、１０．５３．ＣＩ、６．６７゜実験値：Ｃ，４４，８３；Ｈ。 ３．９２：Ｎ、１０．１２：Ｃ１，６，４１０７−（エチルカルバモイルアミノ ）−４−クロロ−３−（２−イソチウレイドエトキシ）イソクマリン、 ７−（ｔ−ブチルカルバモイルアミノ）−４−クロロ−３−（２−イソチウレイ ドエトキシ）イソクマリン、 ７−（ベンジルチオカルバモイルアミノ）−４−クロロ−３−（２−イソチウレ イドエトキシ）イソクマリン、 ７−（エチルチオカルバモイルアミノ）−４−クロロ−３−（２−イソチウレイ ドエトキシ）イソクマリン、 ７−（４−フルオロベンジルチオカルバモイルアミノ）−４−クロロ−３−（２ −イソチウレイドエトキシ）イソクマリン、および７−（２，５−ジメチルベン ジル）チオカルバモイルアミノ−４−クロロ−３−（２−イソチウレイドエトキ シ）イソクマリンは、同様の操作によって調製できる。 実施例５ＨＣ２ ７−（アセチルアミノ）−４−クロロ−３−（３−イソチウレイドエトキシ）イ ソクマリンの調製 ７−アミノ−３−（３−ブロモプロポキシ）−４−クロロイソクマリンは、先に 記載（Ｋａｍら、１９８８）のように合成した。この化合物（０，３３ｇ。 １ミリモル）を乾燥ＴＨＦ２０ｍｌ中で無水酢酸０．　１５ｇ　（１，５ミリモ ル）と加熱した。数分後、黄色固体が沈澱してきた。３時間後、この溶液を５ｍ ｌまで濃縮し、固体をろ過し、０．３７ｇの７−（アセチルアミノ）−４−クロ ロ−３−（３−ブロモプロポキシ）イソクマリン、融点１７０−１７２°Ｃ：マ ススペクトルｍ、’ｅ　＝　３７５　（Ｍ＋）を得た。アセチル化されたイソク マリン（０゜１５ｇ、０．４ミリモル）をチオ尿素（０，０３６ｇ、０．４７ミ リモル）で処理し、最終生成物０．９ｇを収率５０％で得、融点１８０−１８１ °Ｃ，マススペクトルｍ、、’ｅ＝３７０　（Ｍ＋−Ｂｒ）であった。元素分析 を行ったところＣ＋ｓＨ＋丁Ｎ５ＣＬＣＩ　Ｂ　ｒ　Ｓの理論値が、Ｃ，３９， ９７，Ｈ，３，８０；Ｎ。 ９．３２．Ｃ１，７，８７であるのに対し実験値は、Ｃ，３９，８６；Ｈ。 ３．８３．Ｎ、９．２９；Ｃ１，７，８５であった。 ７−ドリフルオロアセチルアミノー４−クロロ−３−（３−イソチウレイドプロ ポキシ）イソクマリン、 ７−へブタフルオロブチロイルアセチルアミノ−４−クロロ−３−（３−イソチ ウレイドプロポキシ）イソクマリン１．７−サクジニルアミノー４−クロロ−３ −（３−イソチウレイドプロボキシ）イソクマリン、および ７−（ｏ−フタリル）アミノ−４−クロロ−３−（３−イソチウレイドプロボキ シ）イソクマリンも同様の操作で調製できる。 実施例５ＨＣ３ ７−（ベンジルカルバモイルアミノ）−４−クロロ−３−（３−イソチウレイド プロボキシ）イソクマリンの調製 ７−（ベンジルカルバモイルアミノ）−４−クロロ−３−（３〜ブロモプロポキ シ）イソクマリンは、ベンジルイソシアナートと７−アミノ−４−クロロ−３− （３−ブロモプロポキシ）イソクマリンとの反応から上記に記載のように調製し た。融点、１８８−１８９’　Ｃ；マススペクトル：ｍ／ｅ＝３５９　（Ｍ＋− ベンジル）。最終生成物は、７−（ベンジルカルバモイルアミノ）−４−クロロ −３−（３−ブロモプロポキシ）イソクマリンとチオ尿素との反応がら、上記の ようにして得た（収率７４％）。融点、１６５−１６６’　Ｃ；マススペクトル （ＦＡＢ＋）；ｍ／ｅ＝４６１　（Ｍ＋−Ｂｒ）ｏ元素分析、Ｃｚ＋Ｈｔ２Ｎａ ＯａＣＩ　ＢｒＳ　Ｏ，７５ＴＨＦ（７）理論値：Ｃ，４８，３６；Ｈ，４，７ ０，Ｎ、９．４０゜ＣＩ、６．５６、実験値：Ｃ，４８，１３；Ｈ，４，８７； Ｎ、９．６５；Ｃ１゜６１５゜ 実施例５ＨＣ４ ７−（フェニルアセチルアミノ）−４−クロロ−３−（２−イソチウレイドエト キシ）イソクマリンの調製 ７−アミノ−４−クロロ−３−（２−ブロモエトキシ）イソクマリン（０，１５ ｇ、０．４７ミリモル）は、最初に、フェニルアセチルクロリド（０，０９ｇ。 ０．５５ミリモル）とＴＨＦ１０ｍｌ中で混合し、次にトリエチルアミン（０゜ ０５ｇ、０．４７ミリモル）を添加して、この反応混合物を室温で一晩撹拌した 。 ろ過によってＥｔ、Ｎ−ＨＣｌ塩を除去した後、生成物７−（フェニルアセチル アミノ）−４−クロロ−３−（２−イソチウレイドエトキシ）イソクマリンをＴ ＨＦおよびＰｅｔ、エーテルから結晶化した（収率、７３％）。融点、１６５− １６９’Ｃ；；マススペクトル；ｍ／ｅ＝４３６．７　（Ｍ＋）、このフェニル アセチルアミノ誘導体（０，１ｇ）をチオ尿素（０，０２ｇ）とともに加熱し、 生成物０．０５ｇ（収率、４０％）、融点、１１５−１２０°Ｃ，マススペクト ル（ＦＡＢ＋）；ｍ／ｅ＝４３２　（Ｍ＋−Ｂｒ）を得た。元素分析、Ｃ１ｏＨ ＋ｅＮ−０４ＣＩ　ＢｒＳ　Ｏ，５ＨｚＯの理論値：Ｃ，４５，９９；Ｈ，３， ８３、Ｎ、８．０５；Ｃ１，６，８０、実験値：Ｃ，４６，０９；Ｈ，４，１７ ；Ｎ、８．０２；Ｃ１，６，７９゜ 実施例５ＨＣ５ ７−（Ｒ−α−メチルベンジルカルバモイルアミン）−４−クロロ−３−（２− イソチウレイドエトキシ）イソクマリンの調製７−（Ｒ−α−メチルベンジルカ ルバモイルアミノ）−４−クロロ−３−（２−ブロモエトキシ）イソクマリンは 、上述と同様に合成した。融点１８３−１８５°Ｃ：マススペクトルｒｎ／　ｅ 　＝　４６４　（Ｍ　＋　）　ｏこの化合物（０，１ｇ）を上記と同一の条件下 でチオ尿素（０，０２ｇ）と反応させ、最終生成物７−（Ｒ−α−メチルベンジ ルカルバモイルアミノ）−４−クロロ−３−（２−イソチウレイドエトキシ）イ ソクマリン（０，０７８ｇ）、融点、１４３−１５０°Ｃ１。 マススペクトル（ＦＡＢ＋）；ｍ／ｅ＝４６１　（Ｍ＋−Ｂｒ）を得た。元素分 析、Ｃｚ＋ＩＬ２ＮａＯａＣＩ　ＢｒＳ　Ｏ，５Ｈ２０の理論値：Ｃ，４５，７ ５，Ｈ，４，３５：Ｎ、ｉｏ、１７：ｃｌ、６．４４、実験値　Ｃ，４４，９５ ：Ｈ，４，３１：Ｎ、ｔｏ、０２．Ｃ１，６，３６゜ 実施例５ＨＣ６ ７−（Ｄ−フェニルアラニルアミノ）−４−クロロ−３−（２−イソチウレイト エトキシ）イソクマリンの調製 Ｂｏｃ−Ｄ−Ｐｈｅ　（０，３３ｇ、１．２ミリモル）を１３−ンシクロへキノ ル力ルポジイミド（０，１３ｇ、０．６ミ’Ｊモル）とＴＨＦ　１０ｍ　ｌ中ｒ ｏ”Ｃで１時間反応させ、対称無水物を形成させ、次に７−アミノ−４−クロロ −３−（２−ブロモエトキシ）イソクマリン（０，２ｇ、０．　６ミリモル）を 添加した。この反応物を室温で一晩撹拌させ、沈澱物７−　（Ｂｏｅ−Ｄ−Ｐｈ ｅ−アミノ）−４−クロロ−３−（２−ブロモエトキン）イソクマリンが形成し た（０゜２９ｇ、７１％）、Ｔ１．−Ｃ１；！１スポット、融へ、１８０１８２ °ｃ、マススペクトルｍ、、’ｅ　＝　５６６　（Ｍ＋）　。元素分析、Ｃ２５ Ｈ２ＩＮ２０ａＣＩ　Ｂｒの理論値Ｃ，５３，０７，Ｈ，４，６３：Ｎ、４．９ ５．Ｃ１，６，２７、実験値　Ｃ１５３，２５；Ｈ，４，６６；Ｎ、４．８７； Ｃ１，６，２４゜Ｂｏｃ−Ｄ−Ｐｈｅ化合物（０２ｇ、ｏ、３５ミリモル）をチ オ尿素（０，０２７ｇ、。 ３５ミリモル）と同様に反応させ、７−（Ｂｏｃ−Ｄ−フェニルアラニルアミノ ）−４−クロロ−３−（２−イソヂウレイドエトキシ）イソクマリン（０，１４ ｇ）、収率６２％、マススペクトル（ＦＡＢ＋）ｍ、／ｅ＝５６１　（Ｍ’−Ｂ ｒ）を得た。 この化合物（０，１ｇ）を０°Ｃで３ｒｎ’ｌのＴＨＦに溶解し、次に溶媒を蒸 発させ乾燥させた。最終生成物をエーテル添加後沈澱させ、ＴＬＣ（ＣＨ，ＣＮ Ｈ２Ｏ：　Ａ　ｃ　ＯＨ＝　８　：　１　：　１　）で１スポット：マススペク トル（ＦＡＢ＋）ｍ／ｅ＝４６２　（Ｍ”−Ｂ　ｒ−ＣＦＳＣＯＯ）であった。 ７−Ｂｏｃ−アラニルアミノ−４−クロロ−３−（２−イソチウレイドエトキシ ）イソクマリン、 ７−ベンゾイルアミノ−Ａｌロー４−クロロ−３−（２−イソチウレイドエトキ シ）イソクマリン、 ７−ペンゾイルアミノーＰｈｅ−４−クロロ−３−（２−イソチウレイドエトキ シ）イソクマリン、および ７−Ｂｏｃ−バリルアミノ−４−クロロ−３−（２−イソチウレイドエトキシ） イソクマリンは、同一の操作で調製できる。 実施例５ＨＣ７ ７−（Ｂｏｃ−アラニルアラニルアミノ）−４−クロロ−３−（２−イソチウレ イドエトキシ）イソクマリンの調製 ７−（Ｂｏｃ−アラニルアラニルアミノ）−４−クロロ−３−（２−ブロモエト キシ）イソクマリンは、同様に合成した。融点、１４７−１５１°Ｃ，マススペ クトルｍ／ｅ　＝　５６１　（Ｍ＋）　ｏ元素分析、理論値　Ｃ，４７，１２： Ｈ，４８５、実験値　Ｃ，４７，１８：Ｈ，４，８７゜コノ化合物（０，２ｇ） を同一操作によってチオ尿素（０，０３ｇ）と反応させ、７−（Ｂｏｃ−アラニ ルアラニルアミノ）−４−クロロ−３−（２−イソチウレイドエトキシ）イソク マリン４’０．０４ｇ）、マススペクトルｍ／ｅ＝５５６　（Ｍ’−Ｂｒ）を生 成させた。 ７−（アラニルアラニルアミノ）−４−クロロ−３−（２−イソチウレイドエト キシ）イソクマリンは、Ｂｏｃ−Ａｌａ−Ａｌａ−ＮＨ−ＣｉＴＥｔｏｌＣのブ ロックをトリフルオロ酢酸によってはずすことによって調製した。マススペクト ル（ＦＡＢ’）ｍ／ｅ＝４５６　（Ｍ’−Ｂｒ−ＣＦ、Ｃｏｏ）。 実施例５ＨＣ８ ７−（フェニルチオカルバモイルアミノ）−４−クロロ−３−（２−イソチウレ イトエトキン）イソクマリンの調製 ７−（フェニルチオカルバモイルアミノ）−４−クロロ−３−（２−プロモエト キ、−）イソクマリンは、フェニルイソチオンアナートと７−アミノ−４−クロ ロ−３−（２−ブロモエトキシ）イソクマリンとの反応から調製し、収率、５９ ０６、融＃、１５７−１５８℃、マススペクトルｍ／ｅ＝３６１　（Ｍ’−Ｐｈ ＮＨ，ｌ）であった。元素分析、理論値　Ｃ，４８，３６；Ｈ，ａ、３９、実験 値：Ｃ，４８，２６，Ｈ，３，４０゜前記ブロモエトキシ化合物を次にチオ尿素 と同一操作によって反応させ、最終生成物を収率３２％、マススペクトル（ＦＡ Ｂ’）ｍ／ｅ４４９　ｅｉ’−Ｂ　ｒ）で得た。 実施例ＳＨＣ９ ７−（ｍ−カルボキシフェニルチオ力ルハモイルアミノ）−４−クロロ−３−（ ２−ブロモエトキン）イソクマリンの調製７−（ｍ−カルボキシフェニルチオカ ルバモイルアミノ）−４−クロロ−３−（２−）゛ロモエトキン）イソクマリン は、ｍ−力ルホキンフェニルイソチオシアナ−１・と７−アミノ−４−クロロ− ３−（２−ブロモエトキシ）イソクマリンとの反応から調製した。収率、６４％ 、融：、１５７−１５８’　Ｃ：マススペクトルｍ　’ｅ３６１　（Ｍ”−（Ｃ ＯＯＨ）ＰｈＮＨ”−Ｂｒ）。 ７−（３−フルオロヘンシル）アミノ−４−クロロ−３−（２−イソヂウレイト エトキン）イソクマリン、 ７−（３−ニトロベンゾイル）アミノ−４−クロロ−３−（２−イソチウレイド エトキシ）イソクマリン、 ７−シフエニルアセチルプロピルアミノー４−クロロ−３−（２−イソチウレイ トエトキシ）インクマリン、 ７−ジフエニルブロビルアミノー４−クロロ−３−（２−イソチウレイトエトキ シ）イソクマリン、 ７−（ｐ−トルエンスルホニル）アミノ−４−クロロ−３−（２−イソチウレイ トエトキシ）イソクマリン、および ７−（α−トルエンスルホニル）アミノ−４−クロロ−３−（２−イソチウレイ ドエトキシ）イソクマリンは、対応する７−置換−４−クロロ−３−（２−ブロ モエトキシ）イソクマリンとチオ尿素との反応から上記のようにして調製するこ とができる。７−置換−４−クロロ−３−（２−ブロモエトキシ）イソクマリン は、７−アミノ−４−クロロ−３−（２−ブロモエトキシ）イソクマリンと適当 な酸塩化物またはスルホニルクロリドとのＥｔ＋Ｎ存在下における反応によって 、合成できる。 ７−エトキシカルポニルアミノー４−クロロ−３−（２−イソチウレイドエトキ シ）イソクマリン、 ７−ベンジルオキジカルボニルアミノ−４−クロロ−３−（２−イソチウレイド エトキシ）イソクマリン、および ７−フニノキシカルポニルアミノー４−クロロ−３−（２−イソチウレイドエト キシ）イソクマリンは、７−置換−４−クロロ−３−（２−ブロモエトキシ）イ ソクマリンとチオ尿素との反応から調製できる。 ７−エトキシカルポニルアミノー４−クロロ−３−（２−ブロモエトキシ）イソ クマリン、 ７−ベンジルオキジカルボニルアミノ−４−クロロ−３−（２−ブロモエトキシ ）イソクマリン、および ７−フニノキシカルボニルアミノー４−クロロ−３−（２−ブロモエトキシ）イ ソクマリンは、７−アミノ−４−クロロ−３−（２−ブロモエトキシ）イソクマ リンを対応するクロロホルメートと反応させ合成できる。 Ｃ，ペプチド　トイム ペプチドα−ケトン類、ペプチドα−ケト酸類、およびペプチドα−ケトアミド 類は、セリンプロテアーゼ類およびシスティンプロテアーゼ類の遷移状態アナコ ク阻害剤類である。これらのサブクラス化合物類は化学的に識別できるが、簡便 とするために、これらの化合物類全てをまとめて”ペプチドケト化合物類”と以 下で総称する。 セリンおよびシスティンプロテアーゼ類とペプチド類との相互作用は、本文で５ ｃｈｅｅｈｔｅｒ、　１．　、およびＢｅｒｇｅｒ、＾、　、　１９６７、　Ｂ ｉｏｃｈｅｍ、　Ｂｉｏｐｈｙｓ、　Ｒｅｓ、　Ｃｏｍｍ浮氏A　２７　：１５ ７−１６２ （本文で参内として引用）の命名法を用いて説明する。基質または阻害剤の個々 のアミノ酸残基類は、Ｐｉ、Ｒ２等とし、酵巣の対応するサブサイトは、Ｓｌ。 ８２等と命名する。基質の切断結合は、Ｐｉ−ＰＬ“である。セリンプロテアー ゼの主要認識部位は、Ｓｌである。システィンプロテアーゼの最も重要な認識サ ブサイトは、ＳｌおよびＳ２である。 アミノ酸残基類およびブロック基類は、命名規則のための標準的略ｎ　（Ｊ、Ｂ ｉｏｌ。 Ｃｈｅｍ、　２６０．１４−４２（１９８５）参照１本文で参考として引用）を 用いて記載した。ペプチドまたは阻害剤構造中のアミノ酸残基（ＡＡ）は、部分 構造−ＮＨ−ＣＨＲ，−ＣＯ−＜式中、Ｒ３は、前記アミノ酸の側鎖である）を 意味する。ペプチドα−ケトエステル残基は、構造−ＮＨ−ＣＨＲ，−ＣＯ−Ｃ ｏ−ＯＲを示す−ＡＡ−ＣＣ）−ＯＲ−と記載する。したがって、ベンゾイルア ラニン由来前記エチルケトエステルは、Ｂ　ｚ　−Ａ　ｌ　ａ−Ｃｏ−ＯＥ　ｔ と記載され、これは、Ｃｓ　Ｈｓ　ＣＯ−ＮＨ−ＣＨＭｅ−Ｃｏ−Ｃｏ−ＯＥｔ を示す。同様に、ペプチドケト酸残基類は、−ＡＡ−ＣＯ−ＯＨと記載する。さ らに、ペプチドケトアミド残基類は、−ＡＡ−Ｃｏ−ＮＨ−Ｒと記載する。した がって、Ｚ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−ＯＨ由来エチルケトアミドは、Ｚ−Ｌｅｕ−Ｐｈ ｅ−ＮＨ−Ｅｔと記載され、これは、Ｃ５ＨｓＣＨｚＯＣＯＮＨＣＨ（ＣＨ２Ｃ ＨＭｅｚ）　Ｃｏ　ＮＨ−Ｃ）（（ＣＨ，Ｐｈ）−Ｃｏ−Ｃｏ−ＮＨ−Ｅｔを意 味する。 ２１位に疎水性側鎖を有するアミノ酸残基類を含有するペプチドα−ケトエステ ル類は、同様に、パパイン、カテプシンＢおよびカルパインを含む数種のシステ ィンプロテアーゼ類の優れた阻害剤であることが判明した。 カルパイン類は、数種の異なる活性基類を有するペプチド阻害剤類によって阻害 できる。ペプチドアルデヒド類のような市販のインビトロカルパイン阻害剤類の 構造活性相関は、カルパイン類が２２位のＬｅｕまたはＶａｔを極めて好むこと を明らかにしている。これらの酵素類は、２１位に広範囲のアミノ酸類を有する 阻害剤類によって阻害されるが、一般に、２１位に非極性または疎水性の側鎖を 有するアミノ酸を持つ阻害剤類によってより効果的に阻害される。したがって、 我々は、本発明に従って用いられる別の特定の属のカルパイン阻害活性を示す化 合物類がペプチドケト化合物類であることを見いだした。これらは、−殻構造Ｍ 　−（ａ　ａ）　、−Ｃ−Ｑ−Ｒ の化合物または薬剤学的に許容できる塩である式中、 Ｍは、ＮＨ２−ＣＯ−１ＮＨ２−Ｃ３−１ＮＨ２−８Ｏ，−１Ｘ−ＮＨ−ＣＯ− １Ｘ−ＮＨ−Ｃ３−１Ｘ−ＮＨ−８Ｏ，−１Ｘ−ＣＯ−１Ｘ−ＣＳ−１Ｘ−ＳＯ ，−１ｘ−ｏ−ｃｏ−またはｘ−ｏ−ｃｓ−１Ｈを、実際には、アセチル、カル ボベンゾキシ、サクシニル、メチルオキシサクシニル、ブチルオキシカルボニル を示し、Ｘは、Ｃ１−６アルキル、Ｃｌ−６フルオロアルキル、Ｊ置換Ｃ１−６ アルキル、Ｊ置換Ｃ１−６フルオロアルキル、１−アトマンチル、９−フルオレ ニル、フェニル、Ｋ置換フェニル、Ｋ２置換フェニル、Ｋ３置換フェニル、ナフ チル、Ｋ置換ナフチル、Ｋ２置換ナフチル、Ｋ３置換ナフチル、付着フェニル基 を有するＣ１−６アルキル、付着フェニル基を２個有するＣ１−６アルキル、Ｋ 置換付着フェニル基を有するＣ１−６アルキル、およびに置換付着フェニル基を ２個有するＣ１−６アルキルからなる群から選択され、Ｊは、ハロゲン、Ｃ０Ｏ Ｈ，ＯＨ，ＣＮ、ＮＯ２，ＮＨ２，Ｃｌ−６アルコキシ、Ｃ１−６アルキルアミ ン、Ｃｌ−６ジアルキルアミン、Ｃｌ−６アルキルー０−ＣＯ−１Ｃ１−６アル キルー０−ＣＯ−ＮＨおよびＣ１−６アルキルーＳ−からなる群から選択され、 Ｋは、ハロゲン、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６パーフルオロアルキル、Ｃ１−６ アルコキシ、ＮＯ，、ＣＮ、ＯＨ％ＣＯ２Ｈ、アミノ、Ｃ１−６アルキルアミノ 、Ｃ２−１２ジアルキルアミノ、Ｃ１−６アシル、およびＣ１６アルコキシー〇 〇−およびＣ１−６アルキルーＳ−からなる群から選択され、ａａは、Ｌまたは Ｄ構造のブロックまたは非ブロツクアミノ酸を示し、好適にはアラニン、バリン 、ロイシン、イソロイシン、プロリン、メチオニン、メチオニンスルホキシド、 フェニルアラニン、トリプトファン、グリシン、セリン、スレオニン、システィ ン、チロシン、アスパラギン、グルタミン、アスパラギン酸、グルタミン酸、リ シン、アルギニン、ヒスチジン、フェニルグリシン、ベータ・アラニン、ノルロ イシン（ｎ　ｌ　ｅ）　、ノルバリン（ｎｖａ）、アルファーアミノ酪酸（ａｂ ｕ）、イプシロン・アミノカプロン酸、シトルリン、ヒドロキシプロリン、ホモ アルギニン、オルニチンまたはザルコシンからなる群から選択され、ｎは、１〜 ２０の数であり、 Ｑは、０またはＮＨであり、 Ｒは、Ｈ，Ｃｌ−６アルキル、Ｃ１−６フルオロアルキル、Ｃ１６クロロアルキ ル、ペンシル、フェニル置換Ｃｌ−６アルキル、Ｋｌ置換付着フェニル基有する Ｃ１−６アルキルを示す。 したがって、前記ペプチドケト化合物類は、ペプチドケトエステル類、ペプチド ケト酸類、およびペプチドケト化合物類に分類できる。前記化合物類のそれぞれ は、また、化合物内部に含有されるアミノ酸類の個数によっても、アミノ酸ペプ チド、ジペプチド、トリペプチド、テトラペプチド、ペンタペプチドなどのよう に分類できる。 我々は、あるサブクラスのペプチドα−ケトエステル化合物類が本発明に従って 使用されると特に有用なカルパイン阻害剤であることを見いだした。これらのサ ブクラスは、本文で、ジペプチドα−ケトエステル類（サブクラスＡ）、ジペプ チドα−ケトエステル類（サブクラスＢ）、トリペプチドα−ケトエステル類（ サブクラスＡ）、トリペプチドα−ケトエステル類（サブクラスＢ）、テトラペ プチドα−ケトエステル類およびアミノ酸ペプチドα−ケトエステル類と称する 。これらのサブクラスの全てが、ペプチドケト化合物類属に属すると考えられて いる。 ジペプチドα−ケトエステル類（サブクラスＡ）は、式％式％ の化合物類または薬剤学的に許容できる塩である式中、 Ｍ、は、Ｈ，ＮＨｔ　Ｃｏ−５ＮＨｚ　Ｃ５−１ＮＨオーＳ　Ｏ，−１Ｘ−ＮＨ −ＣＯ−１Ｘ２Ｎ−ＣＯ−１Ｘ−ＮＨ−ＣＳ−１Ｘ２Ｎ−Ｃ８−１Ｘ　ＮＨ５Ｏ ２−１Ｘ＝Ｎ　５Ｏ２−１Ｘ−ＣＯ−１Ｘ−ＣＳ−１Ｘ　５Ｏ２−１ｘ−ｏ−ｃ ｏ−またはｘ−ｏ−ｃｓ−を示し、 Ｘは、Ｃｌ−＋ｏアルキル、Ｃｌ−＋。フルオロアルキル、Ｊ置換Ｃｌ−１゜ア ルキル、Ｊ置換Ｃ＋　−＋　ｏフルオロアルキル、ｌ−アトマンチル、９−フル オレニル、フェニル、Ｋ置換フェニル、Ｋ２置換フェニル、Ｋ３置換フェニル、 ナフチル、Ｋ置換ナフチル、Ｋ２置換ナフチル、Ｋ３置換ナフチル、付着フェニ ル基を有するＣ　＋　−＋　ｏアルキル、付着フェニル基を２個有するＣｌ−１ ｏアルキル、Ｋ置換付着フェニル基を有するＣ　＋−＋ａアルキル、およびに置 換付着フェニル基を２個有するＣｌ−＋ｏアルキル、付着フェノキシ基を有する Ｃ　Ｉ−１゜アルキル、およびフェノキシ基上でＫに置Ｊは、ハロゲン、Ｃ０Ｏ Ｈ，ＯＨ，ＣＮ、Ｎ（ｈ、ＮＨ，、Ｃ＋−＋ｏアルコキシ、ＣＩ−＋。アルキル アミン、Ｃ２−１２ジアルキルアミン、Ｃ１−１゜アルキル−０−ＣＯ−１ＣＩ −＋　ｏアルキル−０−ＣＯ−ＮＨ−１およびＣｌ−＋ｏアルキルー８−からな る群から選択され、 Ｋは、ハロゲン、Ｃ１−１ｏアルキル、Ｃｌ−＋ｏペパールオロアルキル、Ｃｌ −ｌ０アルコキシ、Ｎｏ、、ＣＮ、０ＨＳＣＯ２Ｈ，アミノ、Ｃ＋−＋ｏアルキ ルアミノ、Ｃｘ　−１２ジアルキルアミノ、Ｃ１−１゜アシルおよびＣ＋　−ｔ 　ｏアルコキシ−ＣｏおよびＣ＋−ｔｏアルキルー８−からなる群から選択され 、ＡＡ、は、Ｌ構造、Ｄ構造、またはα炭素においてキラリティのない側鎖ブロ ックまたは非ブロツクアミノ酸を示し、好適にはアラニン、バリン、ロイシン、 イソロイシン、プロリン、メチオニン、メチオニンスルホキシド、フェニルアラ ニン、トリプトファン、グリシン、セリン、スレオニン、システィン、チロシン 、アスパラギン、グルタミン、アスパラギン酸、グルタミン酸、リシン、アルギ ニン、ヒスチジン、フェニルグリシン、ベーターアラニン、ノルロイシン、ノル バリン、アルファーアミノ酪酸、イプシロン・アミノカプロン酸、シトルリン、 ヒドロキシプロリン、オルニチン、ホモアルギニン、ザルコシン、インドリン２ −カルホン酸、２−アゼチジンカルボン酸、ピペコリン酸（２−ピペリジン力ル ボン酸）、Ｏ−メチルセリン、０−エチルセリン、Ｓ−メチルシスティン、Ｓ− エチルシスティン、Ｓ−ペンチルシスティン、ＮＨｔ−ＣＨ（ＣＨｔＣＨＥ　Ｉ ２）−ＣＯＯＨ，アルファーアミノへブタン酸、ＮＨ２−ＣＨ（ＣＨ，−１−ナ フチル）−ＣＯＯＨ，ＮＨ２−ＣＨ（Ｃ１−（ｔ−２−ナフチル）−ＣＯＯＨ。 ＮＨ２ＣＨ（ＣＨｔ−シクロヘキシル）−ＣＯＯＨ，ＮＨ２−ＣＨ（ＣＨオーシ クロペンチル）−ＣＯＯＨ，ＮＨ，−ＣＨ（ＣＨ，−シクロブチル’）−ＣＯＯ Ｈ１ＮＨ２−ＣＨ（ＣＨＩ−シクロプロピル）−ＣＯＯＨｌ　トリフルオロロイ シン、およびヘキサフルオロロイシンからなる群から選択され、ＡＡ、は、Ｌ構 造、Ｄ構造、またはα炭素においてキラリティのない側鎖ブロックまたは非ブロ ツクアミノ酸を示し、好適にはロイシン、イソロイシン、プロリン、メチオニン 、メチオニンスルホキシド、フェニルアラニン、トリプトファン、グリシン、セ リン、スレオニン、システィン、チロシン、アスパラギン、グルタミン、アスパ ラギン酸、グルタミン酸、リジン、アルギニン、ヒスチジン、フェニルグリシン 、ベーターアラニン、ノルロイシン、ノルバリン、アルファーアミノ酪酸、イプ シロン・アミノカプロン酸、シトルリン、ヒドロキシプロリン、オルニチン、ホ モアルギニン、ザルコシン、インドリン２−カルボン酸、２−アゼチジンカルボ ン酸、ピペコリン酸（２−ピペリジンカルボン酸）、０−メチルセリン、０−エ チルセリン、Ｓ−メチルシスティン、Ｓ−エチルシスティン、Ｓ−ペンチルシス ティン、ＮＨｔ−ＣＨ（ＣＨｔＣＨＥｔ、）−ＣＯＯＨ，アルファーアミノヘプ タ〉酸、ＮＨ，−ＣＨＣＣＨ２−１−ナフチル）−ＣＯＯＨ，ＮＨ２−ＣＨ（Ｃ Ｈ２２−ナフチル）−ＣＯＯＨ１ＮＨ７−ＣＨ（ＣＨ２−シクロヘキシル）ＣＯ ＯＨ，、Ｎ　Ｈ２ＣＨ（ＣＨ２−シクロペンデル）−Ｃｏｏｌ（。 Ｎ　Ｈｙ　’　Ｃ）（（ＣＨ＋−ンクロブチル）−ＣＯＯＨＳＮＨ２−ＣＨ（Ｃ Ｈ，−シクロプロピル）−ＣＯＯＨ、トリフルオロロイシン、およびヘキサフル オロロイシンからなる群から選択され、 Ｒ２は、Ｉ］、Ｃ１−７゜アルキル、Ｃｌ−２゜アルキルに付着したフェニル基 を有するＣｌ１Ｏアルキル、およびＩ＜置換付着フ、ニル基を有するＣｌ−１ア ルキルからなる群から選択される。 ジペプチドα−ケトエステル類（サブクラスＢ）は、式。 Ｍｌ−ＡＡ−ＮＨ−ＣＨＲ，−Ｃｏ−Ｃｏ−０−Ｒの化合物類または薬剤学的に 許容できる塩である式中、 Ｍｌは、Ｈ，ＮＨ，−ＣＯ−１ＮＨ２−Ｃ３−１ＮＨ−Ｓｏｗ−１Ｘ−ＮＨ−Ｃ Ｏ−１Ｘ２ＮＣＯ−１Ｘ−ＮＨ−Ｃ８−１Ｘ、Ｎ−Ｃ８−１Ｘ　ＮＨ５Ｏｈ−１ Ｘ２Ｎ　Ｓｏｗ−１Ｘ−ＣＯ−１Ｘ−ＣＳ−１Ｘ　５Ｏ２−１ｘ−ｏ−ｃｏ−ま たはｘ−ｏ−ｃｓ−を示し、 Ｘは、Ｃ＋−＋ｏアルキル、Ｃ＋−＋ｏフルオロアルキル、Ｊ置換ＣＩ　−１０ アルキル、Ｊ置換Ｃｌ−１゜フルオロアルキル、■−アトマンチル、９−フルオ レニル、フェニル、Ｋ置換フェニル、Ｋ２置換フェニル、Ｋ３置換フェニル、ナ フチル、Ｋ置換ナフチル、Ｋ２置換ナフチル、Ｋ３置換ナフチル、付着フェニル 基を有するＣ　＋−＋ｏアルキル、付着フェニル基を２個有するＣ　＋−＋ｏア ルキル、Ｋ置換付着フェニル基を有するＣｌ−１゜アルキル、およびに置換付着 フェニル基を２個有するＣ　＋−＋ｏアルキル、付着フェノキシ基を有するＣＩ −＋ｏアルキル、およびフェノキシ基上でＫに置換された付着フェノキシ基を有 するＣ　＋−＋ｏアルキルからなる群から選択され、Ｊは、ハロゲン、Ｃ０ＯＨ ，ＯＨ，ＣＮ、Ｎｏ２．ＮＨ２、Ｃｌ−１５アルコキシ、ＣＩ−＋ｏアルキルア ミン、Ｃト１２ジアルキルアミン、Ｃ１−０゜アルキル−０−ＣＯ−１Ｃ４−２ ゜アルキル−０−ＣＯ−ＮＨ−１およびＣ１−１ｏアルキル−８−からなる群か ら選択され、 Ｉ（は、ハロゲン、ｃ＋−ｔｏアルキル、Ｃ＋　−＋◇ペパールオロアルキル、 ＣＩ−ＩＱアルコキシ、ＮＯ２、ＣＮ、０ＨＳＣＯ２Ｈ，アミノ、Ｃ１−３゜ア ルキルアミノ、Ｃ２−１２ジアルキルアミノ、ＣＩ−ＩＱアシルおよびＣ１−１ ゜アルコキシ−〇〇およびｃｌ−１゜アルキル−８−からなる群から選択され、 ＡＡは、Ｌ構造、Ｄ構造、またはα炭素においてキラリティのない側鎖ブロック または非ブロツクアミノ酸を示し、好適にはアラニン、バリン、ロイシン、イソ ロイシン、プロリン、メチオニン、メチオニンスルホキシド、フェニルアラニン ・、トリプトファン、グリシン、セリン、スレオニン、システィン、チロシン、 アスパラギン、グルタミン、アスパラギン酸、グルタミン酸、リジン、アルギニ ン、ヒスチジン、フェニルグリシン、ベーターアラニン、ノルロイシン、ノルバ リン、アルファーアミノ酪酸、イプシロン・アミノカプロン酸、シトルリン、ヒ ドロキシプロリン、オルニチン、ホモアルギニン、ザルコシン、インドリン２− カルポン酸、２−アゼデシンカルボン酸、ピペコリン酸（２−ピペリジンカルボ ン酸）、０−メチルセリン、０−エチルセリン、Ｓ−メチルシスティン、Ｓ−エ チルシスティン、Ｓ−ペンチルシスティン、ＮＨ２ＣＨ（ＣＨ２ＣＨＥｔ２）− ＣＯＯＩ−（、アルファーアミノへブタン酸、ＮＨ，−ＣＨ（ＣＨ２−１−ナフ チル）−ＣＯＯＨｌＮＨ，−ＣＨ（ＣＨ２−２−ナフチル）−ＣＯＯＨｌＮＨ， −ＣＨ（ｃｘ（、−シクロヘキシル）−ＣＯＯＨ，ＮＨ，−ＣＨ（ＣＨ，−シク ロペンチル）−ＣＯＯＨ１ＮＨ２−ＣＨ（ＣＨ２−シクロブチル）−ＣＯＯＨ。 ＮＨ，−ＣＨ（ＣＨ，−シクロプロピル）−ＣＯＯＨ，）リフルオロロイシン、 およびヘキサフルオロロイシンからなる群から選択され、Ｒ７は、ＣＩ−１分枝 および非分枝アルキル、Ｃ８−９分枝および非分枝環式アルキル、およびＣＩ− ｓ分枝および非分岐フルオロアルキルからなる群から選択され、Ｒは、Ｈ，Ｃ３ −２，アルキル、Ｃｌ−２゜アルキルに付着したフェニル基を有するＣ１−２゜ アルキル、およびに置換付着フェニル基を有するＣ３−２゜アルキルからなる群 から選択される。 トリペプチドα−ケトエステル類（サブクラスＡ）は、式％式％ の化合物類または薬剤学的に許容できる塩である式中、 Ｍ３は、Ｉ」、ＮＨｔ−ｃｏ−１ＮＨ２−Ｃ３−１ＮＨ２５Ｏ２−１Ｘ−ＮＨ− Ｃ０−１Ｘ２Ｎ−ＣＯ−１Ｘ−ＮＨ−Ｃ３−１Ｘ２Ｎ−ＣＳ−１Ｘ−ＮＨ−３Ｏ ２−１Ｘ、Ｎ−８Ｏ，−１Ｘ−ＣＯ−１Ｘ−ＣＳ−１Ｘ−ＳＯ，−１Ｔ−０−Ｃ Ｏ−またはＸ−ｏ−ｃｓ−を示し、 Ｘは、Ｃ１１０アルキル、Ｃｌ−１０フルオロアルキル、Ｊ置換ＣＩ−ｔｏアル キル、Ｊ置換Ｃ＋−１ｏフルオロアルキル、ｌ−アトマンチル、９−フルオレニ ル、フェニル、Ｋｔ！！換フェニル、Ｋ２置換フェニル、Ｋ３置換フェニル、ナ フチル、Ｋ置換ナフチル、Ｋ２置換ナフチル、Ｋ３置換ナフチル、付着フェニル 基を有するＣ　＋　−＋　ｏアルキル、付着フェニル基を２個有するＣ　＋−＋ ｏアルキル、Ｋ置換付着フェニル基を有するＣ１−１゜アルキル、およびに置換 付着フェニル基を２個有するＣ　Ｉ　−１０アルキル、付着フェノキシ基を有す るＣ１−１゜アルキル、およびフェノキシ基上でＫに置換された付着フェノキシ 基を有するＣ３−１゜アルキルからなる群から選択され、Ｔは、Ｃ１−１゜アル キル％Ｃｌ−１゜フルオロアルキル、Ｊ置換Ｃ＋−＋ｏアルキル、Ｊ置換Ｃ＋− ＋ｏフルオロアルキル、１−アトマンチル、９−フルオレニル、フェニル、Ｋ置 換フェニル、Ｋ２置換フェニル、Ｋ３置換フェニル、ナフチル、Ｋ置換ナフチル 、Ｋ２置換ナフチル、Ｋ３１換ナフチル、付着フェニル基を有するＣ２−＋ｏア ルキル、付着フェニル基を２個有するＣｌ−１０アルキル、Ｋ置換付着フェニル 基を有するＣ３−１゜アルキル、およびに置換付着フェニル基を２個有するＣＩ −ｔｏアルキルからなる群から選択され、 Ｊは、ハロゲン、Ｃ０ＯＨ，ＯＨ，ＣＮ、Ｎｏ、、ＮＨ，、Ｃ１−１゜アルコキ シ、Ｃ３−１゜アルキルアミン、Ｃ２−Ｉ２ジアルキルアミン、Ｃ＋　−ｌｏア ルキル−０−ＣＯ−１Ｃ１，，１゜アルキル−０−ＣＯ−ＮＨ−１およびＣＩ　 −１゜アルキル−３−からなる群から選択され、 Ｋは、ハロゲン、Ｃ＋−Ｉａアルキル、Ｃｌ−１０パーフルオロアルキル、Ｃ１ −１゜アルコキシ、Ｎ０２、ＣＮ　ＳＯＨ、ＣＯ２Ｈ、アミノ、Ｃ１−１゜アル キルアミノ、Ｃｔ　−＋　ｔジアルキルアミノ、Ｃ＋−＋ｏアシルおよびＣ＋− ＋。アルコキシ−ＣＯおよびＣ１−１゜アルキル−８−からなる群から選択され 、ＡＡは、Ｌ構造、Ｄ構造、またはα炭素においてキラリティのない側鎖ブロッ クまたは非ブロツクアミノ酸を示し、好適にはアラニン、バリン、ロイシン、イ ソロイシン、プロリン、メチオニン、メチオニンスルホキシド、フェニルアラニ ン、トリプトファン、グリシン、セリン、スレオニン、システィン、チロシン、 アスパラギン、グルタミン、アスパラギン酸、グルタミン酸、リシン、アルギニ ン、ヒスチジン、フェニルグリシン、ベーターアラニン、ノルロイシン、ノルバ リン、アルファーアミノ酪酸、イプシロン・アミノカプロン酸、シトルリン、ヒ ドロキシプロリン、オルニチン、ホモアルギニン、ザルコシン、インドリン２− カルボン酸、２−アゼチジンカルホン酸、ピペコリン酸（２−ピペリジン力ルポ ン酸）、０−メチルセリン、〇−エチルセリン、Ｓ−メチルシスティン、Ｓ−エ チルうスティン、Ｓ−ベンチルンステイン、ＮＨ２−ＣＨ（ＣＨ２ＣＨＦ　ｔ２ ）−ＣＯＯＨ、アルファーアミノへブタン酸、ＮＨ，−ＣＨ（ＣＨ，−１−ナフ チル）−ＣＯＯＨ％ＮＨ２−ＣＨ（ＣＨ，−２−ナフチル）−ＣＯＯＨｌＮＨ， −ＣＨ（ＣＨ２−シクロヘキシル）−ＣＯＯＨ，ＮＨ２−ＣＨ（ＣＨ，−シクロ ペンチル）−ＣＯＯＨ，ＮＨ２−ＣＨ（ＣＨ，−シクロブチル）−ＣＯＯＨ１Ｎ Ｈ２−ＣＨ（ＣＨ，−シクロプロピル）−ＣＯＯＨ、トリフルオロロイシン、お よびヘキサフルオロロイシンからなる群から選択され、Ｒは、Ｈ，Ｃ２，。アル キル、Ｃ１−２゜アルキルに付着したフェニル基を有するＣ１−２゜アルキル、 およびＫｌｌ！ｌｌ着換たフェニル基を有するＣ　Ｉ−２゜アルキルからなる群 から選択される。 トリペプチドα−ケトエステル類（サブクラスＢ）は、式％式％ の化合物類または薬剤学的に許容できる塩である：式中、 Ｍ、は、Ｈ，ＮＨ２−ＣＣＩ、ＮＨ，−Ｃ３−１ＮＨ２５Ｏ２−１Ｘ−ＮＨ−Ｃ ０−１Ｘ２Ｎ−ＣＯ−１Ｘ−ＮＨ−ＣＳ−１Ｘ、Ｎ−Ｃ３−１Ｘ　ＮＨ５ｏｔ− １Ｘ、Ｎ−３Ｏ，−１Ｘ−ＣＯ−１Ｘ−ＣＳ−１Ｘ−ＳＯ２−１Ｔ−Ｃ）−ＣＯ −またはｘ−ｏ−ｃｓ−を示し、 Ｘは、Ｃ＋−Ｉｏアルキル、Ｃ＋−Ｉｏフルオロアルキル、Ｊ置換Ｃｌ−ｔｏア ルキル、Ｊ置換Ｃ＋−＋ｏフルオロアルキル、１−アトマンチル、９−フルオレ ニル、フェニル、Ｋ置換フェニル、Ｋ２ｆｔ換フェニル、Ｋ３置換フェニル、ナ フチル、■（置換ナフチル、Ｋ２ｆｌ換ナフチル、Ｋ３置換ナフチル、付着フェ ニル基を有するＣ　＋−＋、ｏアルキル、付着フェニル基を２個有するＣ　＋− ｔｏアルキル、Ｋ置換付着フェニル基を有するＣ　Ｉ−＋ａアルキル、およびに 置換付着フェニル基を２個有するＣ１−１゜アルキル、付着フェノキシ基を有す るＣ３−１゜アルキル、およびフェノキシ基上でＫに置換された付着フェノキシ 基を有するＣ　＋−＋６アルキルからなる群から選択され、Ｔは、Ｃ＋−１ｏア ルキル、Ｃ＋−＋ｏフルオロアルキル、Ｊ置換ＣＩ　−１０アルキル、Ｊ言換Ｃ ＋−＋ｏフルオロアルキル、１−アトマンチル、９−フルオレニル、フェニル、 Ｋ置換フェニル、Ｋ２置換フェニル、Ｋ３置換フェニル、ナフチル、Ｋ置換ナフ チル、Ｋ２置換ナフチル、Ｋ３置換ナフチル、付着フェニル基を有するＣ２−＋ ｏアルキル、付着フェニル基を２個有するＣ　＋−＋ｏアルキル、Ｋ置換付着フ ェニル基を有するＣ　＋−ｔｏアルキル、およびに置換付着フェニル基を２個有 するＣ１．．１゜アルキルからなる群から選択され、 Ｊは、ハロゲン、Ｃ０ＯＨ，ＯＨ，ＣＮ、Ｎｏ、、ＮＨ２、Ｃ＋−＋ｏアルコキ シ、Ｃｌ−１ｏアルキルアミン、Ｃ２−１２ジアルキルアミン、Ｃ＋−＋ｏアル キルー０−ＣＯ−１ＣＩ−＋ｏアルキルー０−Ｃｏ−ＮＨ−およびＣＩ−＋。ア ルキル−８−からなる群から選択され、 Ｋは、ハロゲン、Ｃ＋−１ｏアルキル、Ｃｌ−１６パーフルオロアルキル、ＣＩ −＋。アルコキシ、Ｎ０２、ＣＮ　、　ＯＨＳＣＯ２Ｈ、アミノ、Ｃｌ−１ｏア ルキルアミノ、Ｃトコ２ジアルキルアミノ、Ｃ＋−＋ｏアシルおよびＣ＋　−ｌ ｏアルコキシ−〇〇およびＣｌ−１゜アルキル−８−からなる群から選択され、 ＡＡは、Ｌ構造、Ｄ構造、またはα炭素においてキラリティのない側鎖ブロック または非ブロツクアミノ酸を示し、好適にはアラニン、バリン、ロイシン、イソ ロイシン、プロリン、メチオニン、メチオニンスルホキシド、フェニルアラニン 、トリプトファン、グリシン、セリン、スレオニン、システィン、チロシン、ア スパラギン、グルタミン、アスパラギン酸、グルタミン酸、リシン、アルギニン 、ヒスチジン、フェニルグリシン、ベーターアラニン、ノルロイシン、ノルバリ ン、アルファーアミノ酪酸、イプシロン・アミノカプロン酸、シトルリン、ヒド ロキシプロリン、オルニチン、ホモアルギニン、ザルコシン、インドリン２−カ ルボン酸、２−アゼチジンカルボン酸、ピペコリン酸（２−ピペリジンカルボン 酸）、０−メチルセリン、〇−エチルセリン、Ｓ−メチルシスティン、Ｓ−エチ ルシスティン、Ｓ−ペンチルシスティン、ＮＨ２−ＣＨ（ＣＨ２ＣＨＦ　ｔ２） −ＣＯＯＨ，アルファーアミノへブタン酸、ＮＨ２−ＣＨ（ＣＨ２−１−ナフチ ル）ＣＯＯＨ，ＮＨ２ＣＨ（ＣＨ２２−ナフチル）−ＣＯＯＨ。 ＮＨ２−ＣＨ（ＣＨ２−シクロヘキシル）−ＣＯＯＨ，ＮＨ２−ＣＨ（ＣＨ２− シクロペンチル）−ＣＯＯＨ，ＮＨ２−ＣＨ（ＣＨ，−シクロブチル）−ＣＯＯ Ｈ。 ＮＨ２−ＣＨ（ＣＨ２−シクロプロピル）−ＣＯＯＨ、トリフルオロロイシン、 およびヘキサフルオロロイシンからなる群から選択され、Ｒ２は、Ｃ１−１分枝 および非分岐アルキル、ＣＩ−ｗ分枝および非分枝環式アルキル、およびＣＩ− １分枝および非分岐フルオロアルキルからなる群から選択され、Ｒは、Ｈ，Ｃ， 、。アルキル、Ｃ０−２゜アルキルに付着したフェニル基を有するＣ１−２゜ア ルキル、およびに置換付着フェニル基を有するＣ１−２゜アルキルからなる群か ら選択される。 テトラベプチトα−ケトエステル順は、式％式％ の化合物類または薬剤学的に許容できる塩である・式中、 Ｍ、は、）（、ＮＨ２−ＣＯ−１ＮＨ２Ｃ５−１ＮＨ２−８Ｏ，−１Ｘ−ＮＨ− ＣＯ−１Ｘ２Ｎ−ＣＯ−１Ｘ−ＮＨ−ＣＳ−１Ｘ２Ｎ−Ｃ３−１Ｘ−ＮＨ−３Ｏ ，−１Ｘ、Ｎ−８Ｏ，−１Ｘ−ＣＯ−１Ｘ−ＣＳ−１Ｘ−ＳＯ，−１Ｔ−０−Ｃ Ｏ−またはｘ−ｏ−ｃｓ−を示し、 Ｘは、Ｃ１−３゜アルキル、ＣＩ＝１゜フルオロアルキル、Ｊ置換Ｃｌ−１゜ア ルキル、Ｊ置換Ｃ＋−＋ｏフルオロアルキル、１−アトマンチル、９−フルオレ ニル、フェニル、ＫＷ換フェニル、Ｋ２置換フェニル、Ｋ３置換フェニル、ナフ チル、Ｋ置換ナフチル、Ｋ２置換ナフチル、Ｋ３置換ナフチル、付着フェニル基 を有するＣ　＋　−＋　ａアルキル、付着フェニル基を２個有するＣｌ−１゜ア ルキル、Ｋ置換付着フェニル基を有するＣ　Ｉ−ＩＱアルキル、およびに置換付 着フェニル基を２個有するＣ　＋　−＋。アルキル、付着フェノキシ基を有する Ｃ　＋−＋ｏアルキル、およびフェノキシ基上でＫに置換された付着フェノキシ 基を有するＣ　＋−＋。アルキルからなる群から選択され、Ｔは、ｃｉ−ｔｏア ルキル、Ｃｌ−１０フルオロアルキル、Ｊ置換Ｃ＋−＋ｏアルキル、Ｊ置換Ｃ＋ 　−＋。フルオロアルキル、１−アトマンチル、９−フルオレニル、フェニル、 Ｋ置換フェニル、Ｋ２置換フェニル、Ｋ３置換フェニル、ナフチル、Ｉく置換ナ フチル、Ｋ２ｆｌ！換ナフチル、Ｋ３置換ナフチル、付着フェニル基を有するＣ 　２−１０アルキル、付着フェニル基を２個有するＣ　ｌ−１０アルキル、Ｋ置 換付着フェニル基を有するＣ　＋−ｔｏアルキルおよびに置換付着フェニル基を ２個有するＣ　＋−１ｏアルキルからなる群から選択され、 Ｊは、ハロゲン、Ｃ０ＯＨ，ＯＨ，ＣＮ、Ｎｏ２．ＮＨ，、ＣＩ−＋。アルコキ シ、Ｃｌ−１０アルキルアミン、Ｃ２−１２ジアルキルアミン、ＣＩ−ＩＱアル キル−０−ＣＯ−１Ｃ＋−＋。アルキル−０−ＣＯ−ＮＨ−１およびＣ＋　−＋ 　ａアルキル−８−からなる群から選択され、 Ｋは、ハロゲン、Ｃ＋　−＋　ｏアルキル、ＣＩ−ＩＱパーフルオロアルキル、 Ｃ＋−＋ｏアルコキシ、Ｎ　Ｏ２、ＣＮ、ＯＨ，ＣＯ，Ｈ，アミノ、Ｃ１−１゜ アルキルアミノ、Ｃ２−１２ジアルキルアミノ、Ｃ＋　−＋　ｏアシルおよびＣ ＋−Ｉａアルコキシー〇〇およびＣ１−０゜アルキル−８−からなる群から選択 され、ＡＡは、Ｌ構造、Ｄ構造、またはα炭素においてキラリティのない側鎖ブ ロックまたは非ブロツクアミノ酸を示し、好適にはアラニン、バリン、ロイシン 、イソロイシン、プロリン、メチオニン、メチオニンスルホキシド、フェニルア ラニン、トリプトファン、グリシン、セリン、スレオニン、システィン、チロシ ン、アスパラギン、グルタミン、アスパラギン酸、グルタミン酸、リシン、アル ギニン、ヒスチジン、フェニルグリシン、ベーターアラニン、ノルロイシン、ノ ルバリン、アルファーアミノ酪酸、イプシロン・アミノカプロン酸、シトルリン 、ヒドロキシプロリン、オルニチン、ホモアルギニン、ザルコシン、インドリン ２−カルボン酸、２−アゼチジンカルボン酸、ピペコリン酸（２−ピペリジンカ ルボン酸）、０−メチルセリン、〇−エチルセリン、Ｓ−メチルシスティン、Ｓ −エチルシスティン、Ｓ−ペンチルシスティン、ＮＨ，−ＣＨ（ＣＨ，ＣＨＥ　 ｔ２）−ＣＯＯＨ、アルファーアミノへブタン酸、ＭＨＩ−ＣＨ（ＣＨ２−１− ナフチル）−ＣＯＯＨ，ＮＨ２−ＣＨ（ＣＨｚ−２−ナフチル）−ＣＯＯＨ。 ＮＨ２ＣＨ（ＣＨ２−シクロヘキシル）−ＣＯＯＨ，ＮＨ，−ＣＨ（ＣＨ２−シ クロペンチル）−ＣＯＯＨ，ＮＨ，−ＣＨ（ＣＨ２−シクロブチル）　−ＣＯＯ ＨｌＮＨ，−ＣＨ（ＣＨ２−シクロプロピル）−ＣＯＯＨ、トリフルオロロイシ ン、およびヘキサフルオロロイシンからなる群から選択され、ＡＡ、は、Ｌ構造 、Ｄ構造、またはα炭素においてキラリティのない側鎖プロソりまたは非ブロツ クアミノ酸を示し、好適にはロイシン、イソロイシン、プロリン、メチオニン、 メチオニンスルホキシド、フェニルアラニン、トリプトファン、クリシン、セリ ン、スレオニン、システィン、チロシン、アスパラギン、グルタミン、アスパラ ギン酸、グルタミン酸、リシン、アルギニン、ヒスチジン、フェニルグリシン、 ベーターアラニン、ノルロイシン、ノルバリン、アルファーアミノ酪酸、イプシ ロン・アミノカプロン酸、シトルリン、ヒドロキシプロリン、オルニチン、ホモ アルギニン、ザルコンン、インドリン２−カルホン酸、２−アゼチジンカルボン 酸、ピペコリン酸（２−ピペリジンカルホン酸）、ｏ−メチルセリン、〇−エチ ルセリン、Ｓ−メチルシスティン、Ｓ−エチルシスティン、Ｓ−へ〉ヂルンステ ィン、ＮＨ，−ＣＨ（ＣＨ２ＣＨＥｔ、）−ＣＯＯＨ、フル７ｙ−７ミノへブタ ン酸、ＮＨ，−ＣＨ（ＣＨ，−１−＋アシル）−ＣＯＯＨ。 ＮＨ２−ＣＨ（ＣＨ２−２−＋７チル）　−ＣＯＯＨ，ＮＨ＋−ＣＨ（ＣＨｚ− シクロブチル／し）　Ｃ０ＯＨ，ＮＨ２ＣＨ（ＣＨＩ　＞’）Ｏぺ＞チ／し）− ＣＯＯＨ。 ＮＨ２−ＣＨ（ＣＩ（、−ンクｏブチル）−ＣＯＯＨ，、ＮＨ２−ＣＨ（ＣＨ− −シクロプロピル）−ＣＯＯＨ、トリフルオロロイシン、およびヘキサフルオロ ロイシンからなる群から選択され、 Ｒは、Ｈ，ＣＩ−ｚ。アルキル、Ｃ＋−ｔｎアルキルに付着したフェニル基を有 するＣ１−２゜アルキル、およびに置換付着フェニル基を有するｃｌ−２゜アル キルからなる群から１！！１尺される。 アミ７ノ酸ペプチドα−ケトエステル類は、式％式％ ■化化合物干たは薬剤学的に許容できる塩である式中、 ｈ、１　、　ハ、■）、ＮＨ，Ｃ０−１ＮＨ，−Ｃ３−１ＮＨ２−８Ｏ，−１Ｘ −ＮＨ−ＣＯ−１Ｘ、Ｎ−Ｃ０−１Ｘ−ＮＨ−Ｃ３−１Ｘ２Ｎ　Ｃ８−１Ｘ−、 −ＮＨ−３Ｏ２−１Ｘ＋Ｎ　５Ｃ）ｈ−１Ｙ−ＣＯ−１Ｘ−Ｃ８−１Ｘ−ＳＯ， −１Ｘ−ｏ−ｃｏ−またはｘ　−Ｃ’ｌ　−ＣＳ−−を示し、 Ｘは、Ｃ２−１ｏアルキル、Ｃ１１Ｏフルオロアルキル、Ｊ置換ＣＩ−ＩＱアル キル、Ｊ置換Ｃ＋−＋ｏフルオロアルキル、ｌ−アトマンチル、９−フルオレニ ル、フェニル、Ｋ置換フェニル、Ｋ２置換フェニル、Ｋ３置換フェニル、ナフチ ル、Ｋ置換ナフチル、Ｋ２置換ナフチル、Ｋ３置換ナフチル、付着フェニル基を 有するＣ　＋　−Ｉｏアルキル、付着フェニル基を２個有するＣ１−１゜アルキ ル、Ｋ置換付着フェニル基を有するＣＩ−＋ｏアルキル、およびに置換付着フェ ニル基を２個有するＣ　＋　−＋　ｏアルキル、付着フェノキシ基を有するＣ　 トＩｏアルキル、およびフェノキシ基上でＫに置換された付着フェノキシ基を有 するＣ　＋−＋ｏアルキルからなる群から選択され、Ｙは、Ｃｓ　−Ｉｏアルキ ル、ＣＩ−＋ｏフルオロアルキル、Ｊ置換Ｃ＋−＋ｏアルキル、Ｊ置換Ｃ１−１ ０フルオロアルキル、１−アトマンチル、９−フルオレニル、Ｋ置換フェニル、 Ｋ２置換フェニル、Ｋ３置換フェニル、ナフチル、Ｋ置換ナフチル、Ｋ２置換ナ フチル、Ｋ３置換ナフチル、付着フェニル基を有するＣ　＋　−＋　ｏアルキル 、付着フェニル基を２個有するＣ１．□１Ｇアルキル、Ｋ置換付着フェニル基を 有するＣ１−１゜アルキル、およびに置換付着フェニル基を２個有するＣＩ−１ ｏアルキルからなる群から選択され、 Ｊは、ハロゲン、Ｃ０ＯＨ，ＯＨ，ＣＮ、Ｎｏ２．ＮＨ２、Ｃ０−１゜アルコキ シ、ＣＩ−＋ａアルキルアミン、Ｃ２−１２ジアルキルアミン、Ｃ３−１゜アル キル−０−ＣＯ−１ＣＩ　−１゜アルキル−０−ＣＯ−ＮＨ−１およびＣ１−１ ｏアルキル−３−からなる群がら選択され、 ■（は、ハロゲン、Ｃ７−１゜アルキル、Ｃ４−１゜パーフルオロアルキル、Ｃ Ｉ　−１゜アルコキシ、ＮＯ２、ＣＮ、ＯＨ，Ｃｏ２Ｈ、アミノ、ＣＩ−ＩＱア ルキルアミノ、Ｃ２−１２ジアルキルアミノ、Ｃ３−１゜アシルおよびＣ５−１ ゜アルコキシ−ＣＯおよびＣ１−１０アルキル−８−からなる群がら選択され、 ＡＡは、Ｌ構造、Ｄ構造、またはα炭素においてキラリティのない側鎖ブロック または非ブロツクアミノ酸を示し、好適にはアラニン、バリン、ロイシン、イソ ロイシン、プロリン、メチオニン、メチオニンスルホキシド、フェニルアラニン 、トリプトファン、クリシン、セリン、スレオニン、／スティン、チロシン、ア スパラギン、グルタミン、アスパラギン酸、グルタミン酸、リシン、アルギニン 、ヒスチジン、フェニルクリシン、ベーターアラニン、ノルロイシン、ノルバリ ン、アルファーアミノ酪酸、イプシロン・アミノカプロン酸、シトルリン、ヒド ロキシプロリン、オルニチン、ホモアルギニン、ザルコシン、インドリン２−カ ルボン酸、２−アゼチジンカルボン酸、ピペコリン酸（２−ピペリジンカルボン 酸）、０−メチルセリン、０−エチルセリン、Ｓ−メチルシスティン、Ｓ−エチ ルシスティン、Ｓ−ペンチルシスティン、ＮＨｙ−ＣＨ（ＣＨ，ＣＨＥ　ｔ−ｚ ）−ＣＯＯＨ、アルファーアミノへブタン酸、ＮＨ，−ＣＨ（ＣＨ２−１−ナフ チル）−ＣＯＯＨ，ＮＨ２−ＣＨ（ＣＨ，−２−ナフチル）−ＣＯＯＨ。 ＮＨ２−ＣＨ（ＣＨＩ−シクロヘキシル）−ＣＯＯＨ，ＮＨ２−ＣＨ（ＣＨｔ− シクロペンデル）−ＣＯＯＨ，ＮＨ２−ＣＨ（ＣＨ，−シクロブチル）−ＣＯＯ Ｈ。 ＮＨ２−ＣＨ（ＣＨｔ−シクロプロピル）−ＣＯＯＨ，トリフルオロロイシン、 およびヘキサフルオロロイシンからなる群から選択され、Ｒは、Ｈ，Ｃ，−２゜ アルキル、Ｃ，イ。アルキルに付着したフェニル基を有するＣ　Ｉ−ｔｏアルキ ル、およびＫｒＩｔ換付着フェニル基を有するＣ　＋　、−２゜アルキルからな る群から選択さ第１る。 Ｆ記のペプチドケトエステル化合物類は、本発明の内容でカルパイン阻害剤類と して有用であることが判明したペプチドケト化合物類の代表である：Ｂｚ−ＤＬ −Ａｌａ−ＣＯＯＥｔ Ｂｚ−ＤＩ、Ａｌａ−ＣＯＯＢｚｌ Ｂｚ−ＤＬ、Ａ１１−ＣＯｏｎＢｕ Ｂｚ−ＤＩ、−Ｐｈｅ−ＣＯＯＥｔ Ｂｚ−ＤＬ−Ａｌａ−ＣｏＯＣＨ２−Ｃ６Ｈａ−ＣＦ３　（ｐａｒａ）Ｂｚ−Ｄ Ｌ−Ａｒｇ−ＣＯＯＥｔ Ｂｚ−ＤＩ、Ｌｙｓ−ＣＯＯＥｔ Ｚ−Ａｌａ−ＤＬ−ＡＪａ−ＣＯＯＥｔＺ−Ａｌａ−ＤＬ−Ａｌａ−Ｃｏ○Ｂｍ ｌＺ−／１ｄａ−ＤＬ−にａ−ＣＯＯｎＢｕＭｅＯ−５ｕｃ−Ａｌａ−ＤＬ−Ａ ｌａ−ＣＯＯＭｅＺ−Ｌｅｕ−Ｎｖａ−ＣＯＯＥｔ Ｚ−Ｌｅｕ＝Ｎｌｅ−ＣＯＯＥｔ Ｚシｚｕ−Ｐｈｅ−ＣＯＯＥｔ Ｚ−Ｌｚｕ−Ａｂｕ−Ｃｏ□ＢｚＬ 我々は、あるり′ブクラスのペプチドケト酸合物類が本発明に従って使用した際 に特に有用であることを見いだした。これらは、ジペプチドα−ケト酸類（サブ クラスＡ）、ジペプチドα−ケト酸類（ザブクラスＢ）、トリペプチドα−ケト 酸類、テトラペプチドα−ケト酸類およびアミノ酸ペプチドα−ケト酸類のサブ クラスである。これらのサブクラスの全てが、ペプチドケト化合物類属に属する と考えられている。 ジペプチドα−ケト酸類（サブクラスＢ）は、式：％式％ の化合物類または薬剤学的に許容できる塩である式中、 Ｍ、は、Ｈ，ＮＨ，−ＣＯ−１ＮＨ２−Ｃ８−１ＮＨ−５ｏ２−１Ｘ−ＮＨ−Ｃ Ｏ−１Ｘ、Ｎ−Ｃ０−１Ｘ−ＮＨ−Ｃ８−１Ｘ！Ｎ−Ｃ５−１Ｘ−ＮＨ−３Ｏ， −１Ｘ２Ｎ−３Ｏ，−１Ｘ−ＣＯ−１Ｘ−ＣＳ−１Ｘ−ＳＯ，−１ｘ−ｏ−ｃｏ −またはｘ−ｏ−ｃｓ−を示し、 Ｘは、ＣＩ−＋ｏアルキル、Ｃ１−１゜フルオロアルキル、Ｊ置換Ｃ１−３゜ア ルキル、Ｊ置換Ｃ１−１゜フルオロアルキル、１−アトマンチル、９−フルオレ ニル、フェニル、Ｋ置換フェニル、Ｋ２置換フェニル、Ｋ３置換フェニル、ナフ チル、Ｋ置換ナフチル、Ｋ２置換ナフチル、Ｋ３置換ナフチル、付着フェニル基 を有するＣｌ−１゜アルキル、付着フェニル基を２個有するＣ１−１゜アルキル 、Ｋ置換付着フェニル基を有するＣ　ｌ−１０アルキル、およびに置換付着フェ ニル基を２個有するＣ　Ｉ−＋。アルキル、付着フェノキシ基を有するＣ３−１ ゜アルキル、およびフェノキシ基上でＫに置換された付着フェノキシ基を有する Ｃ　＋−＋ｏアルキルからなる群から選択され、Ｊは、ハロゲン、Ｃ０ＯＨ，Ｏ Ｈ，ＣＮ、Ｎｏｔ、ＮＨ２、Ｃ＋−＋ｏアルコキシ、Ｃ１−４゜アルキルアミン Ｃ，−１。アルキル−０−ＣＯ−ＮＨ−、およびＣ，−１。アルキル−Ｓ−から なる群から選択され、 Ｋは、ハロゲン、Ｃ　＋　−　＋　ｏアルキル、Ｃ　＋−＋ｏパーフルオロアル キル、Ｃ　＋　−　Ｉｏアルコキシ、ＮＯ，、ＣＮ、Ｏ　Ｈ，　Ｃ　Ｏ　ｔＨ， アミノ、ＣＩ−＋ｏアルキルアミノ、Ｃ　ｔ　−　＋　ｔジアルキルレアミノ、 Ｃ　＋ー＋ｏアシルおよびＣ　ト１　６アルコキシー〇〇およびＣ．−１。アル キル−Ｓ−からなる群から選択され、ＡＡは、Ｌ構造、Ｄ構造、またはα炭素に おいてキラリティのない側鎖ブロックまたは非ブロツクアミノ酸を示し、好適に はアラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、メチオニン、メチオ ニンスルホキシド、フェニルアラニン、トリプトファン、グリシン、セリン、ス レオニン、システィン、チロシン、アスパラギン、グルタミン、アスパラギン酸 、グルタミン酸、リシン、アルギニン、ヒスチジン、フェニルグリシン、ベータ ーアラニン、ノルロイシン、ノルバリン、アルファーアミノ醋酸、イプシロン・ アミノカプロン酸、シトルリン、ヒドロキシプロリン、オルニチン、ホモアルギ ニン、ザルコシン、インドリン２−カルボン酸、２−アゼチジンカルボン酸、ピ ペコリン酸（２−ピペリジンカルボン酸）、０−メチルセリン、０−エチルセリ ン、Ｓ−メチルシスティン、Ｓ−エチルシスティン、Ｓ−ペンチルシスティン、 ＮＨ叩−ＣＨ　（ＣＨＩＣＨＥｔｔ）−ＣＯＯＨ，アルファーアミノへブタン酸 、ＮＨｆ−ＣＨ　（ＣＨｚ−１−ナフチル）ＣＯＯＨＳＮＨｔ　ＣＨ　（ＣＨ− 　２−ナフチル）−ＣＯＯＨ。 ＮＨ，−ＣＨ　（ＣＨ．−シクロヘキシル）　ＣＯＯＨＳＮＨｔ　ＣＨ　（ＣＨ ｔ−シクロペンチル）−ＣＯＯＨ，ＮＨ２−ＣＨ　（ＣＨ，−シクロブチル）− ＣＯＯＨ。 ＮＨ２−ＣＨ　（ＣＨ．−シクロプロピル）−ＣＯＯＨ，ｌ−リフルオロロイシ ン、およびヘキサフルオロロイシンからなる群から選択され、Ｒ，は、ＣＩ−を 分枝および非分枝アルキル、Ｃ，−、分枝および非分枝環式アルキル、およびＣ Ｉ−ｓ分枝および非分枝フルオロアルキルを示す。 ジペプチドα−ケト酸類（サブクラスＢ）は、式・Ｍ，−ＡＡＩ−ＡＡＩ−ＣＯ −ＯＨ の化合物類または薬剤学的に許容できる塩である：式中、 Ｍ＋＋耘Ｈ，ＮＨ宜−ＣＯ−、ＮＨｆ−ＣＳ−、ＮＨ．−ＳＯ．−、Ｘ−ＮＨ− ＣＯ−、Ｘ２Ｎ−ＣＯ−、Ｘ−ＮＨ−ＣＳ−、Ｘ２Ｎ−ＣＳ−、Ｘ−ＮＨ　ＳＯ ｔ−、Ｘ＝Ｎ　Ｓｏｗ−、Ｘ−ＣＯ−、Ｘ−ＣＳ−、Ｘ−ＳＯ２−、Ｘ−０−Ｃ Ｏ−またはｘ−ｏ−ｃｓ−を示し、 Ｘは、Ｃ　＋−＋。アルキル、Ｃ，−、。フルオロアルキル、Ｊ置換Ｃ，−１。 アルキル、Ｊ置換Ｃ，−、。フルオロアルキル、１−アトマンチル、９−フルオ レニル、フェニル、Ｋｆｆｔ換フェニル、Ｋ２ｆｌｔ換フェニル、Ｋ３置換フェ ニル、ナフチル、Ｋ置換ナフチル、Ｋ２置換ナフチル、Ｋ３置換ナフチル、付着 フェニル基を有するＣＩ−＋ｏアルキル、付着フェニル基を２個有するＣ，−１ 。アルキル、Ｋ置換付着フェニル基を有するＣ１−、。アルキル、およびに置換 付着フェニル基を２個有するＣ１−１。アルキル、付着フェノキシ基を有するＣ ，−、。アルキル、およびフェノキシ基上でＫに置換された付着フェノキシ基を 有するＣ　＋−＋。アルキルからなる群から選択され、Ｊは、ハロゲン、ＣＯＯ Ｈ．ＯＨ．ＣＮ，Ｎｏ，、ＮＨ２、ＣＩ−＋ｏアルコキシ、Ｃ　＋−＋ｏアルキ ルアミン、Ｃ２−１□ジアルキルアミン、Ｃ　＋　−　＋　ａアルキル−Ｏ−Ｃ Ｏ−、Ｃ１−、。アルキル−０−ＣＯ−ＮＨ−、およびＣ１−１。アルキル−Ｓ −からなる群から選択され、 Ｋは、ハロゲン、Ｃ　＋−＋ｏアルキル、Ｃ　＋−＋ｏパーフルオロアルキル、 Ｃ　＋−＋ｏアルコキシ、ＮＯ２、Ｃ　Ｎ　、　Ｏ　Ｈ　ＳＣ　Ｏ　ｔ　Ｈ　、 アミノ、Ｃ　＋−＋ｏアルキルアミノ、ＣＩ．。 ジアルキルアミノ、ＣＩ−ｔＯアシルおよびＣ　Ｉ−＋ｏアルコキシーＣＯおよ びＣ１−１。アルキル−Ｓ−からなる群から選択され、ＡＡ，は、Ｌ構造、Ｄ構 造、またはα炭素においてキラリティのない側鎖ブロックまたは非ブロツクアミ ノ酸を示し、好適にはアラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、 メチオニン、メチオニンスルホキシド、フェニルアラニン、トリプトファン、グ リシン、セリン、スレオニン、システィン、チロシン、アスパラギン、グルタミ ン、アスパラギン酸、グルタミン酸、リシン、アルギニン、ヒスチジン、フェニ ルグリシン、ベーターアラニン、ノルロイシン、ノルバリン、アルファーアミノ 酪酸、イプシロン・アミノカプロン酸、シトルリン、ヒドロキシプロリン、オル ニチン、ホモアルギニン、ザルコシン、インドリン２−カルボン酸、２−アゼチ ジンカルボン酸、ピペコリン酸（２−ピペリジンカルボン酸）、、０−メチルセ リン、〇ーエチルセリン、Ｓ−メチルシスティン、Ｓ−エチルシスティン、Ｓ− ペンチルシスティン、ＮＨ＝　ＣＨ　（ＣＨＩＣＨＥ　ｔ２）−ＣＯＯＨ、アル ファーアミノへブタン酸、ＮＨ．−ＣＨ　（ＣＨｚ−ｉ−ナフチル）−ＣＯＯＨ ，ＮＨｔ−ＣＨ　（ＣＨ．−２−ナフチル）−ＣＯＯＨ。 ＮＨ２−ＣＨ　（ＣＨ２−シクロヘキシル）−ＣＯＯＨ，ＮＨｆ−ＣＨ　（ＣＨ ｔ−シクロペンチル）−ＣＯＯＨ，ＮＨ．−ＣＨ　（ＣＨｔ−シクロブチル）− ＣＯＯＨ。 ＮＨｔ　ＣＨ　（ＣＨｔ−シクロプロピル）−ＣＯＯＨ．　トリフルオロロイシ ン、およびヘキサフルオロロイシンからなる群から選択され、ＡＡ２は、Ｌ構造 、Ｄ構造、またはα炭素においてキラリティのない側鎖ブロックまたは非ブロツ クアミノ酸を示し、好適にはロイシン、イソロイシン、プロリン、メチオニン、 メチオニンスルホキシド、フェニルアラニン、トリプトファン、グリシン、セリ ン、スレオニン、システィン、チロシン、アスパラギン、グルタミン、アスパラ ギン酸、グルタミン酸、リシン、アルギニン、ヒスチジン、フェニルグリシン、 ベーターアラニン、ノルロイシン、ノルバリン、アルファーアミノ酪酸、イプシ ロン・アミノカプロン酸、シトルリン、ヒドロキシプロリン、オルニチン、ホモ アルギニン、ザルコシン、インドリン２−カルボン酸、２−アゼチジンカルボン 酸、ピペコリン酸（２−ピペリジンカルボン酸）、０−メチルセリン、０−エチ ルセリン、Ｓ−メチルシスティン、Ｓ−エチルシスティン、Ｓ−ペンチルシステ ィン、ＮＨｚ−ＣＨ　（ＣＨ２ＣＨＥｔ２）−ＣＯＯＨ１アルファーアミノへブ タン酸、ＮＨ２−ＣＨ　（ＣＨＩ−１−ナフチル）−ＣＯＯＨ。 ＮＨｘ　ＣＨ（ＣＨ２　２　＋７チル）　ＣＯＯＨ，ＮＨｔ　ＣＨ（ＣＨｔ−シ フ０ヘキシル）−ＣＯＯＨ１ＮＨ２−ＣＨ　（ＣＨ．−シクロペンチル）−ＣＯ ＯＨ。 ＮＨ．−ＣＨ　（ＣＨ．−シクロブチル）−ＣＯＯＨ，ＮＨ２−ＣＨ　（ＣＬ− シクロプロピル）−ＣＯＯＨｌ　トリフルオロロイシン、およびヘキサフルオロ ロイシンからなる群から選択される。 トリペプチドα−ケト酸類は、構造： Ｍ，ＡＡ　ＡＡ　ＡＡ　Ｃｏ　ＯＨ の化合物類または薬剤学的に許容できる塩である。 式中、。 Ｍ，は、Ｈ．ＮＨｔ−ＣＯ−、ＮＨ２　ＣＳ−、ＮＨｔ　Ｓｏｗ−、Ｘ−ＮＨ− Ｃ。 −、Ｘ２Ｎ−ＣＯ−、Ｘ−ＮＨ−ＣＳ−、ＸｔＮ−ＣＳ−、Ｘ　ＮＨ　ＳＯｘ− 、Ｘ、Ｎ−８Ｏ，−１Ｘ−ＣＯ−１Ｘ−ＣＳ−１Ｘ−３Ｏ２−１ｘ−ｏ−ｃｏ− またはｘ、−ｏ−ｃｓ−を示し、 Ｘは、ＣＩ−＋。アルキル、Ｃ１−１゜フルオロアルキル、Ｊ置換Ｃ＋−＋・ア ルキル、Ｊ置換Ｃｒ−＋ｏフルオロアルキル、１−アトマンチル、９−フルオレ ニル、フェニル、Ｋｌ置換フェニルＫ２置換フェニル、Ｋ３置換フェニル、ナフ チル、Ｋ置換ナフチル、Ｋ２置換ナフチル、Ｋ３置換ナフチル、付着フェニル基 を有するＣ　＋−＋ｏアルキル、付着フェニル基を２個有するＣＩ−＋ｏアルキ ル、Ｋ置換付着フェニル基を有するＣＩ−＋ｏアルキル、およびに置換付着フェ ニル基を２個有するＣ１−１゜アルキル、付着フェノキシ基を有するＣＩ−＋ｏ アルキル、およびフェノキシ基上でＫに置換された付着フェノキシ基を有するＣ ３−１゜アルキルからなる群から選択され、Ｊは、ハロゲン、Ｃ０ＯＨ，ＯＨ， ＣＮ、Ｎｏｔ、ＮＨ２、Ｃ＋−＋ｏアルコキシ、Ｃ３−１゜アルキルアミン、Ｃ ｔ−１２ジアルキルアミン、ＣＩ−＋ｏアルキルー０−ＣＯ−１Ｃ１−１゜アル キル−０−ＣＯ−ＮＨ−１およびＣ＋　−＋　ｏアルキル−８−からなる群から 選択され、 Ｋは、ハロゲン、Ｃ１−１゜アルキル、Ｃ１−１゜パーフルオロアルキル、Ｃ１ −１゜アルコキシ、Ｎｏｔ、ＣＮ、ＯＨ，Ｃ０＝Ｈ，アミノ、Ｃ１−１゜アルキ ルアミノ、Ｃ２−１２ジアルキルアミノ、０口。アシルおよびＣ＋　−＋　ｏア ルコキシ−ＣＯおよびＣＩ−＋。アルキル−８−からなる群から選択され、ＡＡ は、Ｌ構造、Ｄ構造、またはα炭素においてキラリティのない側鎖ブロックまた は非ブロツクアミノ酸を示し、好適にはアラニン、バリン、ロイシン、イソロイ シン、プロリン、メチオニン、メチオニンスルホキシド、フェニルアラニン、ト リプトファン、グリシン、セリン、スレオニン、システィン、チロシン、アスパ ラギン、グルタミン、アスパラギン酸、グルタミン酸、リシン、アルギニン、ヒ スチジン、フェニルグリシン、ベーターアラニン、ノルロイシン、ノルバリン、 アルファーアミノ酪酸、イプシロン・アミノカプロン酸、シトルリン、ヒドロキ シプロリン、オルニチン、ホモアルギニン、ザルコシン、インドリン２−カルボ ン酸、２−アゼチジンカルボン酸、ピペコリン酸（２−ピペリジンカルボン酸） 、０−メチルセリン、０−エチルセリン、Ｓ−メチルシスティン、Ｓ−エチルシ スティン、Ｓ−ペンチルシスティン、ＮＨナーＣＨ（ＣＨ，ＣＨＥ　ｔｔ）−Ｃ ＯＯＨ，アルファーアミノへブタン酸、ＮＨｔ−ＣＨ（ＣＨｚ−１−ナフチル） ＣＯＯＨ，ＮＨ２ＣＨ（ＣＨＩ　２−ナフチル）−ＣＯＯＨ。 ＮＨ，−ＣＨ（ＣＨＩ−シクロヘキシル）−ＣＯＯＨＳＮＨ！−ＣＨ（ＣＨｔ− シクロペンチル）　Ｃ０ＯＨ，ＮＨｔ　ＣＨ（ＣＨｔ−シクロブチル）−ＣＯＯ Ｈ。 ＮＨ２ＣＨ（ＣＨ−−シクロプロピル）−ＣＯＯＨ，トリフルオロロイシン、お よびヘキサフルオロロイシンからなる群から選択される。 テトラペプチドα−ケト酸類は、式。 Ｍｌ−ＡＡ−ＡＡ−ＡＡ−ＡＡ−ＣＯ−ＯＨの化合物類または薬剤学的に許容で きる塩である：式中、 Ｍｌは、Ｈ，ＮＨｔ　Ｃｏ−１ＮＨ！−Ｃ８−１ＮＨ２−８Ｏ２−１Ｘ−ＮＨ− ＣＯＸ＊Ｎ　５Ｃｈ−１ｙ、−ｃｏ−１Ｘ−ＣＳ−１Ｘ　Ｓｏｗ−１ｘ−ｏ−ｃ ｏ−またはｘ−ｏ−ｃｓ−を示し、 Ｘは、ＣＩ−＋。アルキル、ＣＩ−＋。フルオロアルキル、Ｊ置換Ｃ＋　−＋　 ｏアルキル、Ｊ置換Ｃｒ−＋ｏフルオロアルキル、１−アトマンチル、９−フル オレニル、フェニル、Ｋ置換フェニル、Ｋ２置換フェニル、Ｋ３置換フェニル、 ナフチル、Ｋ置換ナフチル、Ｋ２置換ナフチル、Ｋ３置換ナフチル、付着フェニ ル基を有するＣ１−１゜アルキル、付着フェニル基を２個有するＣ　＋−１ｏア ルキル、Ｋ置換付着フェニル基を有するＣＩ−ｔＯアルキル、およびに置換付着 フェニル基を２個有するＣＩ−＋ｏアルキル、付着フェノキシ基を有するＣ　Ｉ −＋。アルキル、およびフェノキシ基上でＫに置換された付着フェノキシ基を有 するＣ３−８゜アルキルからなる群から選択され、Ｙ＋は、Ｃｘ　−＋。アルキ ル、Ｃｒ　−＋　ｏフルオロアルキル、Ｊ置換ＣＩ−Ｉｏアルキル、Ｊ置換Ｃｒ −＋ａフルオロアルキル、フェニル、Ｋ置換フェニル、に２置換フエニル、Ｋ３ 置換フェニル、ナフチル、Ｋ置換ナフチル、Ｋ２置換ナフチル、Ｋ３置換ナフチ ル、付着フェニル基を有するＣＩ−Ｉｏアルキル、付着フェニル基を２個有する Ｃ１−３゜アルキル、Ｋ置換付着フェニル基を有するＣＩ−＋ｏアルキル、およ びに置換付着フェニル基を２個有するＣＩ−＋。アルキルからなる群から選択さ れ、Ｊは、ハロゲン、Ｃ０ＯＨ，ＯＨ，ＣＮ、Ｎｏ、、ＮＨ，、Ｃ＋−＋ｏアル コキシ、Ｃ＋　−＋　ｏアルキルアミン、Ｃ２−１２ジアルキルアミン、Ｃ３− １゜アルキル−０−ＣＯ−１Ｃ３−１゜アルキル−０−ＣＯ−ＮＨ−１およびＣ １−５゜アルキル−８−からなる群から選択され、 Ｋは、ハロゲン、Ｃ：＋−＋ｏアルキルコキシ、ＮＯ２、ＣＮ，ＯＨ、Ｃｏ，Ｈ ，アミノ、Ｃ　＋−Ｉｏアルキルアミノ、Ｃト１２シアルギルアミノ、Ｃ　＋　 −　ｌｏアシルおよびＣ．−、。アルコキシ−ＣＯおよびＣ　ｒ　−　ｌｏアル キル−Ｓ−からなる群から選択され、ＡＡは、Ｌ構造、Ｄ構造、またはα炭素に おいてキラリティのない側鎖ブロックまたは非ブロツクアミノ酸を示し、好適に はアラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、メチオニン、メチオ ニンスルホキシド、フェニルアラニン、トリプトファン、グリシン、セリン、ス レオニン、システィン、チロシン、アスパラギン、グルタミン、アスパラギン酸 、グルタミン酸、リシン、アルギニン、ヒスチジン、フェニルグリシン、ベータ ーアラニン、ノルロイシン、ノルバリン、アルファーアミノ酪酸、イプシロン・ アミノカプロン酸、シトルリン、ヒドロキシプロリン、オルニチン、ホモアルギ ニン、ザルコシン、インドリン２−カルボン酸、２−アゼチジンカルボン酸、ピ ペコリン酸（２−ピペリジンカルボン酸）、Ｏ−メチルセリン、０−１チルセリ ン、Ｓ−メチルシスティン、Ｓ−エチルシスティン、Ｓ−ペンデルシスティン、 ＮＨ＝−ＣＨ　（ＣＨ−ＣＨＥ　ｔｔ）−ＣＯＯＨ、アルファーアミノへブタン 酸、ＮＨオーＣＨ　（ＣＨ２−１−ナフチル）−ＣＯＯＨ，ＮＨ２−ＣＨ　（Ｃ Ｈ．−２−ナフチル’）−ＣＯＯＨ、ＮＨ２　ＣＨ　（ＣＨ−−シクロヘキシル ）−ＣＯＯＨ，ＮＨ，−ＣＨ　（ＣＨ．−シクロペンチル）　−ＣＯＯＨ，ＮＨ ｔ−ＣＨ　（ＣＨ，−シクロブチル）−ＣＯＯＨ。 ＮＨ２−ＣＨ　（ＣＨｔ−シクロプロピル）−ＣＯＯＨ，　トリフルオロロイシ ン、およびヘキサフルオロロイシンからなる群から選択される。 アミノ酸ペプチドα−ケト酸類は、構造：Ｍ，−ＡＡ−Ｃｏ−０１−１ の化合物類または薬剤学的に許容できる塩である。 式中、 Ｍ，は、Ｈ，ＮＨｚ−Ｃｏ−、ＮＨ２−ＣＳ−、ＮＨ２　Ｓｏｗ−、Ｘ−ＮＨ− ＣＯ−、Ｘ．Ｎ−ＣＯ−、Ｘ−ＮＨ−ＣＳ−、Ｘ２Ｎ−ＣＳ−、Ｘ−ＮＨ　ＳＯ ｔ−、Ｘ！Ｎ　ＳＯ２−、ＹＩＣＯ−、Ｘ−ＣＳ−、ｘ−ｓｏｔ−、ｘ−ｏ−ｃ ｏ−またはｘ−ｏ−ｃｓ−を示し、 Ｘは、Ｃ　＋　−　＋。アルキル、Ｃ　＋−＋。フルオロアルキル、Ｊ置換Ｃｒ −＋。アルキル、Ｊ置換Ｃｒ−＋ｏフルオロアルキル、■ーアトマンチル、９− フルオレニル、フェニル、Ｋ置換フェニル、Ｋ２置換フェニル、Ｋ３置換フェニ ル、ナフチル、Ｋ置換ナフチル、Ｋ２置換ナフチル、Ｋ３置換ナフチル、付着フ ェニル基を有するＣ　ｒ−＋ｏアルキル、付着フェニル基を２個有するＣＩ−＋ 。アルキル、Ｋ置換付着フェニル基を有するＣＩ−＋ｅアルキル、およびに置換 付着フェニル基を２個有するＣ　Ｉ−　＋　ｏアルキル、付着フェノキシ基を有 するＣ　＋　−　＋。アルキル、およびフェノキシ基上でＫに置換された付着フ ェノキシ基を有するＣｒ−＋ｏアルキルからなる群から選択され、Ｙ２は、Ｃ　 ＋−＋ｏアルキル、ＣＩ−＋ｏフルオロアルキル、Ｊ置換Ｃ　＋　−　ｌｏアル キル、Ｊ置換Ｃ　Ｉ−＋ａフルオロアルキル、１−アトマンチル、９−フルオレ ニル、フェニル、Ｋ置換フェニル、Ｋ２置換フェニル、Ｋ３置換フェニル、ナフ チル、Ｋ置換ナフチル、Ｋ２置換ナフチル、Ｋ３置換ナフチル、付着フェニル基 を有するＣＩ−１０アルキル、付着フェニル基を２個有するＣ１−１。アルキル 、Ｋ置換付着フェニル基を有するＣ　Ｉ−＋。アルキル、およびに置換付着フェ ニル基を２個有するＣ１−１。アルキルからなる群から選択され、 Ｊは、ハロゲン、ＣＯＯＨ．ＯＨ．ＣＮ．Ｎｏ．、ＮＨ２、Ｃ　＋　−　ｌｏア ルコキシ、ＣＩ−＋ｏアルキルアミン、ＣＩ−１！ジアルキルアミン、ＣＩ−１ 。アルキル−Ｏ−ＣＯ−、Ｃ１−１。アルキル−０−ＣＯ−ＮＨ−、およびＣ　 Ｉ−　＋　ｏアルキル−Ｓ−からなる群から選択され、 Ｋは、ハロゲン、Ｃ　Ｉ−１６アルキル、ＣＩ−ＩＯパーフルオロアルキル、Ｃ 　＋−＋ｏアルコキシ、ＮＯｘ、ＣＮ，ＯＨ，ＣＯｔＨ，アミノ、Ｃ　＋−＋ｏ アルキルアミノ、Ｃト１！ジアルキルアミノ、Ｃ１−、。アシルおよびＣ　＋　 −　＋　ｏアルコキシ−〇〇およびＣ１−、。アルキル−Ｓ−からなる群から選 択され、ＡＡは、Ｌ構造、Ｄ構造、またはα炭素においてキラリティのない側鎖 プロツりまたは非ブロツクアミノ酸を示し、好適にはアラニン、バリン、ロイシ ン、イソロイシン、プロリン、メチオニン、メチオニンスルホキシド、フェニル アラニン、トリプトファン、グリシン、セリン、スレオニン、システィン、チロ シン、アスパラギン、グルタミン、アスパラギン酸、グルタミン酸、リシン、ア ルギニン、ヒスチジン、フェニルグリシン、ベーターアラニン、ノルロイシン、 ノルバリン、アルファーアミノ醋酸、イプシロン・アミノカプロン酸、シトルリ ン、ヒドロキシプロリン、オルニチン、ホモアルギニン、ザルコシン、インドリ ン２−カルボン酸、２−アゼチジンカルボン酸、ピペコリン酸（２−ピペリジン カルボン酸）、０−メチルセリン、〇−エチルセリン、Ｓ−メチルシスティン、 Ｓ−エチルシスティン、Ｓ−ペンチルシスティン、ＮＨ２ＣＨ（ＣＨｔＣＨＥｔ ｚ）−ＣＯＯＨ，アルファーアミノヘプタン酸、ＮＨ，−ＣＨ（ＣＨ，−１−ナ フチル）−ＣＯＯＨ，ＮＨ，−ＣＨ（ＣＨ，−２−ナフチル）−ＣＯＯＨ。 ＮＨ，−Ｃ）（（ＣＨ，−シクロヘキシル）−ＣＯＯＨ，ＮＨ宜−ＣＨ（ＣＨＩ −シクロペンチル）−ＣＯＯＨ，ＮＨ，−ＣＨ（ＣＩ（、−シクロブチル）−Ｃ Ｏ，０Ｈ１ＮＨ，−ＣＨ（ＣＨ２−シクロプロピル）−ＣＯＯＨ，トリフルオロ ロイシン、およびヘキサフルオロロイシンからなる群から選択される。 下記のペプチドケト酸化合物類は、本発明の内容でカルパイン阻害剤類として有 用であることがわかったペプチドケト化合物類の代表である：Ｂｚ−ＤＬ−Ｌｙ ｓ−ＣＯＯＨ Ｂｚ−ＤＬ−Ａｔ　ａ−ＣＯＯＨ ２−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−ＣＯＯＨ ２−Ｌｅｕ−Ａｂｕ−ＣＯＯＨ ペプチドケトα−アミド類は、カルパインのようなシスティンプロテアーゼ類の 遷移状態アナログ阻害剤類である。我々は、２１位に疎水性側鎖を有するアミノ 酸残基含有ペプチドケトα−ケトアミド類がカルパインＩおよびカルパイン■を 含めていくつかのシスティンプロテアーゼ類の優れた阻害剤類であることを見い だした。 我々は、あるサブクラスのペプチドケトアミド類が本発明に従って使用した際に 特に有用であることを見いだした。これらは、ジペプチドα−ケトアミド類（サ ブクラスＡ）、ジペプチドα−ケトアミド類（サブクラスＢ）、トリペプチドα −ケトアミド類、テトラペプチドα−ケトアミド類およびアミノ酸σ−ケトアミ ド類のサブクラスである。これらのサブクラスの全てが、ペプチドケト化合物類 の属に属すると考えられている。 ジペプチドα−ケトアミド類（サブクラスＡ）は、下記の構造式：％式％ の化合物類または薬剤学的に許容できる塩である：式中、 Ｍ、は、ＨＳＮＨ２−ＣＯ−１ＮＨｔ　Ｃ３−１Ｎ　Ｈ！−３Ｏ２−１Ｘ−ＮＨ −Ｃ０−１Ｘ！Ｎ　Ｃｏ−１Ｘ−ＮＨ−Ｃ８−１Ｘ２Ｎ−Ｃ３−１Ｘ−ＮＨ−３ Ｏ，−１Ｘ２Ｎ　５Ｏｔ−１Ｘ−ＣＯ−１Ｘ−ＣＳ−１Ｘ　Ｓｏｗ−１ｘ−ｏ− ｃｏ−またはｘ−ｏ−ｃｓ−を示し、 Ｘは、Ｃｌ−＋。アルキル、ＣＩ−＋。フルオロアルキル、Ｊ置換Ｃ１−１゜ア ルキル、Ｊ置換Ｃｌ−＋◎フルオロアルキル、１−アトマンチル、９−フルオレ ニル、フェニル、Ｋ置換フェニル、Ｋ２置換フェニル、Ｋ３置換フェニル、ナフ チル、Ｋ置換ナフチル、Ｋ２置換ナフチル、Ｋ３置換ナフチル、付着フェニル基 を有するＣ　＋−＋ａアルキル、付着フェニル基を２個有するＣｌ−＋ａアルキ ル、Ｋ置換付着フェニル基を有するＣｌ−＋ｏアルキル、およびに置換付着フェ ニル基を２個有するＣ　＋　−＋　ｏアルキル、付着フェノキシ基を有するＣ　 ＋−＋ｏアルキル、およびフェノキシ基上でＫに置換された付着フェノキシ基を 有するＣ　＋−＋ａアルキルからなる群から選択され、Ｊは、ハロゲン、Ｃ０Ｏ Ｈ，ＯＨ，ＣＮ、Ｎｏ！、ＮＨ，、ＣＩ−＋。アルコキシ、Ｃｌ−＋ｏアルキル アミン、Ｃｔ　−ｒ　ｔジアルキルアミン、Ｃｌ−＋ｏアルキルー０−ＣＯ−１ Ｃ＋　−＋　ｏアルキル−０−ＣＯ−ＮＨ−１およびＣｌ−ｌ０アルキル−３− からなる群から選択され、 Ｋは１．ハロゲン、Ｃｌ−＋ｏアルキル、Ｃｌ−＋ａパーフルオロアルキル、Ｃ ｌ−＋ｏアルコキシ、Ｎｏ２、ＣＮ、ＯＨ，Ｃｏ、Ｈ，アミノ、Ｃｌ−＋。アル キルアミノ、ＣＩ−１！ジアルキルアミ人Ｃｌ−１ＯアシルおよびＣ１−１゜ア ルコキシ−ＣＯおよびＣ１−１゜アルキル−８−からなる群から選択され、ＡＡ は、Ｌ構造、Ｄ構造、またはα炭素においてキラリティのない側鎖ブロックまた は非ブロツクアミノ酸を示し、好適にはアラニン、バリン、ロイシン、イソロイ シン、プロリン、メチオニン、メチオニンスルホキシド、フェニルアラニン、ト リプトファン、グリシン、セリン、スレオニン、システィン、チロシン、アスパ ラギン、グルタミン、アスパラギン酸、グルタミン酸、リシン、アルギニン、ヒ スチジン、フェニルグリシン、ベーターアラニン、ノルロイシン、ノルバリン、 アルファーアミノ酪酸、イプシロン・アミノカプロン酸、シトルリン、ヒドロキ シプロリン、オルニチン、ホモアルギニン、ザルコシン、インドリン２−カルボ ン酸、２−アゼチジンカルボン酸、ピペコリン酸（２−ピペリジンカルボン酸） 、０−メチルセリン、〇−エチルセリン、Ｓ−メチルシスティン、Ｓ−エチルシ スティン、Ｓ−ペンチルシスティン、ＮＨｚ　ＣＭ　（ＣＨ２ＣＨ２ｔ２）　Ｃ ００Ｈ１アルフアーアミノへブタン酸、ＮＨ，−ＣＨ（ＣＨＩ−１−ナフチル） −ＣＯＯＨＳＮＨ，−ＣＨ（ＣＨ，−２−ナフチル）−ＣＯＯＨ。 ＮＨ＝−ＣＨ（ＣＨｔ−シクロヘキシル）−ＣＯＯＨ，ＮＨ２−ＣＨ（ＣＨ，− シクロペンチル）　Ｃ００Ｈ１ＮＨｘ　ＣＨ（ＣＨｔ−シクロブチル）−ＣＯＯ Ｈ。 ＮＨ！　ＣＨ（ＣＨＩ−シクロプロピル）−ＣＯＯＨ，ｌ−リフルオロロイシン 、およびヘキサフルオロロイシンからなる群から選択され、Ｒ２は、Ｃト１分技 村上び非分岐アルキル、Ｃｌ−ｓ分枝および非分枝環式アルキル、およびＣ１− ３分枝および非分枝フルオロアルキルからなる群から選択され、Ｒ８およびＲ４ は、それぞれ、Ｈ，Ｃｌ−ｔｏアルキル、Ｃ＋−ｔｏ環式アルキル、ＣＩ−ｔｏ アルキルに付着したフェニル基を有するＣ１−７゜アルキル、付着したフェニル 基を有するＣ　＋　−２゜環式アルキル、Ｋで置換された付着したフェニル基を 有するＣ３−７゜アルキル、Ｋで２置換された付着したフェニル基を有するＣｌ ４０アルキル、Ｋで３置換された付着したフェニル基を有するＣ１−２゜アルキ ル、Ｋで置換された付着したフェニル基を有するＣ１−２゜環式アルキル、窒素 を介してアルキルに付着したモルホリン（−Ｎ　（ＣＨ，ＣＨ，）Ｏ）環を有す るＣ８−０゜アルキル、窒素を介してアルキルに付着したピペリジン環を有する Ｃ　＋−＋ｏアルキル、窒素を介してアルキルに付着したピロリジン環を有する Ｃ　＋　−＋　ｅアルキル、窒素を介してアルキルに付着したＯＨ基を有するＣ 　＋−＋ｏアルキル、　ＣＨ−ＣＨｔＯＣＨｔＣＨ−ＣＨ１付着４−ピリジル基 を有するＣ３−１゜、付着３−ピリジル基を有するＣ１−０、付着２−ピリジル 基を有するＣ１−１０、付着シクロヘキシル基を有するＣｌ−＋ｏ、−ＮＨ，− ＣＨ，ＣＨ２−（４−ヒドロキシフェニル）、および−ＮＨ−ＣＨ２ＣＨ２−（ ３−インドリル）からなる群から選択される。 ジペプチドα−ケトアミド類（サブクラスＢ）は、下記の構造式：％式％ の化合物類または薬剤学的に許容できる塩である：式中、 Ｍ、は、Ｈ，ＮＨ２−ＣＯ−１ＮＨ！　Ｃ５−１ＮＨ２５ｏｔ−１Ｘ−ＮＨ−Ｃ ０−１Ｘ２Ｎ−ＣＯ−１Ｘ−ＮＨ−Ｃ５−１Ｘ２Ｎ−Ｃ３−１Ｘ　ＮＨＳｏｗ− １Ｘ！Ｎ−８Ｏ，−１Ｘ−ＣＯ−１Ｘ−ＣＳ−１Ｘ　Ｓｏｗ−１Ｘ−０−Ｃｏ− またはｘ−ｏ−ｃｓ−を示し、 Ｘは、Ｃ１−１゜アルキル、Ｃｌ−１゜フルオロアルキル、Ｊ置換ＣＩ−＋。ア ルキル、Ｊ置換Ｃ＋　−Ｉｏフルオロアルキル、ｌ−アトマンチル、９−フルオ レニル、フェニル、Ｋ置換フェニル、Ｋ２置換フェニル、に３置換フエニル、ナ フチル、Ｋ置換ナフチル、Ｋ２置換ナフチル、Ｋ３置換ナフチル、付着フェニル 基を有するＣ１−１゜アルキル、付着フェニル基を２個有するＣ１−１゜アルキ ル、Ｋ置換付着フェニル基を有するＣ１−１゜アルキル、およびに置換付着フェ ニル基を２個有するＣ　＋　−＋　ｏアルキル、付着フェノキシ基を有するＣｌ −＋ｏアルキル、およびフェノキシ基上でＫに置換された付着フェノキシ基を有 するＣ　＋−＋ｏアルキルからなる群から選択され、Ｊは、ハロゲン、Ｃ０ＯＨ ，ＯＨ，ＣＮ、Ｎｏ、、ＮＨ，、Ｃ３−８゜アルコキシ、Ｃｌ−１゜アルキルア ミン、Ｃ！　−１２ジアルキルアミン、Ｃｌ−＋ｏアルキルー０−ＣＯ−１Ｃ＋ 　−ｌｏアルキル−０−ＣＯ−ＮＨ−１およびＣｌ−＋。アルキル−８−からな る群から選択され、 Ｋは、ハロゲン、Ｃ＋　−Ｉｏアルキル、Ｃ１−８゜パーフルオロアルキル、Ｃ ＋−＋ｏアルコキシ、Ｎｏ！、ＣＮ、ＯＨ，ＣＯ，Ｈ、アミノ、Ｃｌ−＋。アル キルアミノ、Ｃ２−１２ジアルキルアミノ、Ｃ＋　−＋。アシルおよびＣ１−１ ゜アルコキシ−〇〇およびＣｌ−＋ｏアルキルーＳ−からなる群から選択され、 ＡＡ、は、Ｉ２構造、Ｄ構造、またはα炭素においてキラリティのない側鎖ブロ ックまたは非ブロツクアミノ酸を示し、好適にはアラニン、バリン、ロイシン、 イソロイシン、プロリン、メチオニン、メチオニンスルホキシド、フェニルアラ ニン、トリプトファン、グリシン、セリン、スレオニン、システィン、チロシン 、アスパラギン、グルタミン、アスパラギン酸、グルタミン酸、リシン、アルギ ニン、ヒスチジン、フェニルグリシン、ベーターアラニン、ノルロイシン、ノル バリン、アルファーアミノ酪酸、イプシロン・アミノカプロン酸、シトルリン、 ヒドロキシプロリン、オルニチン、ホモアルギニン、ザルコシン、インドリン２ −カルボン酸、２−アゼチジンカルボン酸、ピペコリン酸（２−ピペリジンカル ボン酸）、０−メチルセリン、０−エチルセリン、Ｓ−メチルシスティン、Ｓ− エチルシスティン、Ｓ−ペンチルシスティン、ＮＨ−−ＣＨ（ＣＨ２ＣＨ２ｔ− ）　Ｃ００Ｈ，アルファーアミノへブタン酸、ＮＨ２−ＣＨ（ＣＨｔ−１−ナフ チル）−ＣＯＯＨ，ＮＨ，−ＣＨ（ＣＨｔ−２−ナフチル）−ＣＯＯＨ。 ＮＨｔ−ＣＨ（ＣＨズーシクロヘキシル）−ＣＯＯＨ，ＮＨ，−ＣＨ（ＣＨＩ− シクロペンチル’）　−ＣＯＯＨ，ＮＨｚ−ＣＨ（ＣＨｔ−’、ｙクロブチル） −ＣｏｏＨｌＮＨ，−ＣＨ（ＣＨ２−−シクロプロピル）−ＣＯＯＨ，トリフル オロロイシン、およびヘキサフルオロロイシンからなる群から選択され、ＡＡ２ は、Ｌ構造、Ｄ構造、またはα炭素においてキラリティのない側鎖ブロックまた は非ブロツクアミノ酸を示し、好適にはアラニン、バリン、ロイシン、イソロイ シン、プロリン、メチオニン、メチオニンスルホキシド、フェニルアラニン、ト リプトファン、グリシン、セリン、スレオニン、システィン、チロシン、アスパ ラギン、グルタミン、アスパラギン酸、グルタミン酸、リシン、アルギニン、ヒ スチジン、フェニルグリシン、ベーターアラニン、ノルロイシン、ノルバリン、 アルファーアミノ酪酸、イプシロン・アミノカプロン酸、シトルリン、ヒドロキ シプロリン、オルニチン、ホモアルギニン、ザルコシン、インドリン２−カルボ ン酸、２−アゼチジンカルボン酸、ピペコリン酸（２−ピペリジンカルボン酸） 、０−メチルセリン、０−エチルセリン、Ｓ−メチルシスティン、Ｓ−エチルシ スティン、Ｓ−ペンチルシスティン、ＮＨ，−ＣＨ（ＣＨ，ＣＨＥｔｚ）−Ｃ０ ０Ｈ，アルファーアミノへブタン酸、ＮＨ，−ＣＨ（ＣＨ，−１−ナフチル）− ＣＯＯＨ，ＮＨｔ−ＣＨ（ＣＨｔ−２−す７チル）−ＣＯＯＨ。 ＮＨ２−ＣＨ（ＣＨＩ−シクロヘキシル’）　Ｃ０ＯＨ，ＮＨｚ　ＣＨ（ＣＨｔ 　＞りｏペンチル）　Ｃ０ＯＨ，ＮＨｔ　ＣＨ（ＣＨｔ　＞りｏブチル）−ＣＯ ＯＨ。 ＮＨ−ＣＨ（ＣＨ２＞クロプロピル）−ＣＯｏＨｌ　トリフルオロロイシン、お よびヘキサフルオロロイシンからなる群から選択され、Ｒ，およびＲ４は、それ ぞれ、ＨｌＣｌ−２゜アルキル、Ｃ１−２゜環式アルキル、Ｃｌ−２゜アルキル に付着したフェニル基を有するＣ１−８゜アルキル、付着したフェニル基を有す るＣｌ４０環式アルキル、Ｋで置換された付着したフェニル基を有するＣ　ｌ− ２６アルキル、Ｋで２置換された付着したフェニル基を有するＣ１４゜アルキル 、Ｋで３置換された付着したフェニル基を有するＣｌ−ｔｏアルキル、Ｋで置換 された付着したフェニル基を有するＣ、イ。環式アルキル、窒素を介してアルキ ルに付着したモルホリン（−Ｎ　（ＣＨＩＣＨ，）０）環を有するＣｌ−＋ｏア ルキル、窒素を介してアルキルに付着したピペリジン環を有するＣ　＋　−＋　 ｏアルキル、窒素を介してアルキルに付着したピロリジン環を有するＣ１−１゜ アルキル、窒素を介してアルキルに付着１．ｆ、−ＯＨ基を有スルＣ１−Ｉ０ア ルキル、　ＣＨｚ　ＣＨ２０ＣＨ２ＣＨ！　ＯＨ、付着４−ピリジル基を有する Ｃ　＋−＋ｏ、付着３−ピリジル基を有するＣ　＋−１ａｓ付着２−ピリジル基 を有するＣｌ−１０、付着シクロヘキシル基を有するＣ１−１゜、−ＮＨ−ＣＨ ，ＣＨ，−（４−ヒドロキシフェニル）、および−ＮＨＣＨｔＣＨｚ−（３−イ ンドリル）からなる群から選択される。 トリペプチドα−ケトアミド類は、下記の構造式：％式％ の化合物類または薬剤学的に許容できる塩である：式中、 Ｍ、は、ＨＳＮＨズーＣ０−１ＮＨ２−Ｃ８−１ＮＨ冨−８Ｏ！−１Ｘ−ＮＨ− ＣＯ−１ＸｔＮＣＯ−１Ｘ−ＮＨ−Ｃ３−１Ｘ、Ｎ−Ｃ８−１Ｘ−ＮＨＳＯ宜− １ＸＩＮ　ＳＯ−一、Ｘ−Ｃ０−１Ｘ−ＣＳ−１Ｘ−ＳＯ，−１ｘ−ｏ−ｃｏ− まタハｘ−ｏ−ｃｓ−を示し、 Ｘは、Ｃｌ−＋ｏフルキル、Ｃｌ−＋ｏフルオロアルキル、Ｊｒ１１換Ｃ，−、 、フルキル、Ｊ置換ＣＩ　−１６フルオロアルキル、１−アトマンチル、９−フ ルオレニル、フェニル、ＫｆＦ！換フェニル、Ｋ　２　Ｗｌ置換ェニル、Ｋ３１ ！！換フェニル、ナフチル、Ｋ置換ナフチル、Ｋ２ｉ１！換ナフチル、Ｋ３１１ ｉ換ナフチル、付着フェニル基を有するＣ　Ｎｏアルキル、付着フ５ニル基を２ 個有するＣ１−＋ｏアルキル、Ｋ置換付着フェニル基を有するＣ１．、、。アル キル、およびＩ（置換付着フェニル基を２個有するＣ　＋　−＋　ｏアルキル、 付着フェノキシ基をイｊするＣ　＋　−＋　ｏアルキル、およびフェノキシ基上 でＫに置換された付着フェノキシ基を有するＣ１−、。アルキルからなる群から 選択され、Ｊは、ハロゲン、Ｃ０ＯＨ，ＯＨ，ＣＮ、Ｎｏｔ、ＮＨ２、Ｃ＋−１ ｏアルコキシ、Ｃｌ−＋ｏアルキルアミン、Ｃ２−Ｈジアルキルアミン、Ｃ＋　 −ｌｏアルキル−０−ＣＯ−１Ｃ＋　−＋　ｏアルキル−０−ＣＣ）−ＮＨ−１ およびＣ＋−＋ｏアルキルー８−からなる群から選択され、 Ｋは、ハロゲン、Ｃｌ−１６アルキル、Ｃｌ−＋。パーフルオロアルキル、Ｃｌ −＋ｏアルコキシ、ＮＯ７、ＣＮ、ＯＨ、ＣＯｔ　Ｈ、アミノ、Ｃ＋　−ｌｏア ルキルアミノ、Ｃｌ−。 ジアルキルアミノ、ＣＩ　−＋　６アシルおよびＣ１，，１０アルコキシ−ＣＯ およびＣｌ−１゜アルキル−８−からなる群から選択され、ＡＡは、Ｌ構造、Ｄ 構造、またはα炭素においてキラリティのない側鎖ブロックまたは非ブロツクア ミノ酸を示し、好適にはアラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン 、メチオニン、メチオニンスルホキシド、フェニルアラニン、トリプトファン、 グリシン、セリン、スレオニン、システィン、チロシン、アスパラギン、グルタ ミン、アスパラギン酸、グルタミン酸、リシン、アルギニン、ヒスチジン、フェ ニルグリシン、ベーターアラニン、ノルロイシン、ノルバリン、アルファーアミ ノ酪酸、イプシロン・アミノカプロン酸、シトルリン、ヒドロキシプロリン、オ ルニチン、ホモアルギニン、ザルコシン、インドリン２−カルポン酸、２−アゼ チジンカルボン酸、ピペコリン酸（２−ピペリジンカルボン酸）、０−メチルセ リン、〇−エチルセリン、Ｓ−メチルシスティン、Ｓ−エチルシスティン、Ｓ− ペンチルシスティン、ＮＨｚ　ＣＨ（ＣＨｚＣＨＥ　ｔｚ）　Ｃ００Ｈ、アルフ ァーアミノへブタン酸、ＮＨｔ−ＣＨ（ＣＨ２−１−ナフチル）−ＣＯＯＨ，Ｎ Ｈ，−ＣＨ（ＣＨ２−２−ナフチル）−ＣＯＯＨ。 ＮＨ２−ＣＨ（ＣＨＩ−シクロヘキシル）−ＣＯＯＨ，ＮＨ，−ＣＨ（ＣＨｔ− シクロペンチル）−ＣＯＯＨ，ＮＨ，−ＣＨ（ＣＨ２−シクロブチル）−ＣＯＯ Ｈ。 ＮＨｔ　ＣＨ（ＣＨ２−シクロプロピル）−ＣＯＯＨ、トリフルオロロイシン、 およびヘキサフルオロロイシンからなる群から選択され、Ｒ３およびＲ４は、そ れぞれ、Ｈ１Ｃ３−２゜アルキル、Ｃｌ−ｔ。環式アルキル、Ｃｌ−２０アルキ ルに付着したフェニル基を有するＣ０−２゜アルキル、付着したフェニル基を有 するＣｌ−２゜環式アルキル、Ｋで置換された付着したフェニル基を有するＣｌ −２０アルキル、Ｋで２置換された付着したフェニル基を有するＣ８−２゜アル キル、Ｋで３置換された付着したフェニル基を有するＣ１−２゜アルキル、Ｋで 置換された付着したフェニル基を有するＣｌ−２ｏ環式アルキル、窒素を介して アルキルに付着したモルホリン（−Ｎ　（ＣＨ２ＣＨ２）Ｏ）環を有するＣ　Ｉ −＋。アルキル、窒素を介してアルキルに付着したピペリジン環を有するＣｌ− ＋ｏアルキル、窒素を介してアルキルに付着したピロリジン環を有するＣ　＋　 −ｒ　ｏアルキル、窒素を介してアルキルに付着したＯＨ基を有するＣ　Ｉ−＋ 。アルキル、−ＣＨ２ＣＨｔＯＣＨ，ＣＨ，ＯＨ，付着４−ピリジル基を有する Ｃ３−３゜、付着３−ピリジル基を有するＣ　＋　−Ｉｏ　ｚ付着２−ビリジル 基を有するＣ１−１０、付着シクロヘキシル基を有するＣ　ｒ　−Ｉｏ、−ＮＨ −ＣＨ２ＣＨ２−（４−ヒドロキシフェニル）、および−ＮＨ−ＣＨ，ＣＨ。 −（３−インドリル）からなる群から選択される。 テトラペプチドα−ケトアミド類は、下記の構造式：％式％ の化合物類または薬剤学的に許容できる塩である：式中、 Ｍ、は、Ｈ，ＮＨ２Ｃｏ−１ＮＨｔ　Ｃ８−１ＮＨｔ　Ｓｏｗ−１Ｘ−ＮＨ−Ｃ ０−１Ｘ２Ｎ−ＣＯ−１Ｘ−ＮＨ−Ｃ３−１Ｘ、Ｎ−Ｃ５−１Ｘ−ＮＨ−ＳＯ， −１Ｘ２Ｎ−８Ｏ，−１Ｘ−ＣＯ−１Ｘ−ＣＳ−１Ｘ　５Ｏ２−１ｘ−ｏ−ｃｏ −またはｘ−ｏ、−ｃｓ−を示し、 Ｘは、Ｃｌ−１゜アルキル、Ｃ１−１゜フルオロアルキル、Ｊ置換Ｃｌ−１０ア ルキル、Ｊ置換Ｃ＋−１ｏフルオロアルキル、１−アトマンチル、９−フルオレ ニル、フェニル、Ｋｆｔ換フェニル、Ｋ２置換フェニル、Ｋ３置換フェニル、ナ フチル、Ｋ置換ナフチル、Ｋ２置換ナフチル、Ｋ３１１ｉ換ナフチル、付着フェ ニル基を有するＣ８−１゜アルキル、付着フェニル基を２個有するＣＩ−＋ｏア ルキル、Ｋ置換付着フェニル基を有するＣ　ＩＩａアルキル、およびＫｌ置換着 フェニル基を２個有するＣＩ−＋ｏアルキル、付着フェノキシ基を有するＣ　ｌ −１０アルキル、およびフェノキシ基上でＫに置換された付着フェノキシ基を有 するＣ１−１゜アルキルからなる群から選択され、Ｊは、ハロゲン、Ｃ０ＯＨ， ＯＨ，ＣＮ、ＮＯｘ、ＮＨｔ、Ｃ＋−＋ｏアルコキシ、Ｃ＋　−Ｉａアルキルア ミン、Ｃｔ−１！ジアルキルアミン、Ｃ＋−＋ｏアルキルー０−ＣＯ−１Ｃ＋− １ｏアルキル−０−ＣＯ−ＮＨ−１およびＣＩ−＋ｏアルキルー８−からなる群 から選択され、 Ｋは、ハロゲン、Ｃ３−１゜アルキル、ＣＩ−＋。パーフルオロアルキル、Ｃ１ −１゜アルコキシ、Ｎｏ、、ＣＮ、ＯＨ，Ｃｏ！Ｈ，アミ八Ｃ＋−＋。アルキル アミノ、Ｃｘ−＋ｔジアルキルアミノ、ＣＩ−＋ｏアシルおよびＣＩ−＋ｅアル コキシーＣＯおよびＣ３−１゜アルキル−８−からなる群から選択され、ＡＡは 、Ｌ構造、Ｄ構造、またはα炭素においてキラリティのない側鎖プロ・ツクまた は非ブロツクアミノ酸を示し、好適にはアラニン、バリン、ロイシン、イソロイ シン、プロリン、メチオニン、メチオニンスルホキシド、フェニルアラニン、ト リプトファン、グリシン、セリン、スレオニン、システィン、チロシン、アスパ ラギン、グルタミン、アスパラギン酸、グルタミン酸、リシン、アルギニン、ヒ スチジン、フェニルグリシン、ベーターアラニン、ノルロイシン、ノルバリン、 アルファーアミノ酪酸、イプシロン・アミノカプロン酸、シトルリン、ヒドロキ シプロリン、オルニチン、ホモアルギニン、ザルコシン、インドリン２−カルボ ン酸、２−アゼチジンカルボン酸、ピペコリン酸（２−ピペリジンカルボン酸） 、０−メチルセリン、０−エチルセリン、Ｓ−メチルシスティン、Ｓ−エチルシ スティン、Ｓ−ペンチルシスティン、ＮＨｔ−ＣＨ（ＣＨｔＣＨＥｔｔ）−ｃｏ ｏＨ，アルファーアミノへブタン酸、ＮＨｔ−ＣＨ（ＣＨ，−１−ナフチル）− Ｃｏｏ）（、ＮＨ宜−ＣＨ（ＣＨ２２−ナフチル）−ＣＯＯＨ。 ＮＨフーＣＨ（ＣＨ，−シクロヘキシル）−ＣＯＯＨ，ＮＨ２−ＣＨ（ＣＨＩ− シクロペンチル）−ＣＯＯＨ，ＮＨ，−ＣＨ（ＣＨ，−シクロブチル）−ＣＯＯ ＨｌＮＨ，−ＣＨ（ＣＨＩ−シクロプロピル）−ＣＯＯＨ，トリフルオロロイシ ン、およびヘキサフルオロロイシンからなる群から選択され、Ｒ３およびＲ４は 、それぞれ、Ｈ，Ｃ１−２゜アルキル、ＣＩ−ｔ。環式アルキル、ＣＩ−ｚｏア ルキルに付着したフェニル基を有するＣ　＋−ｔｏアルキル、付着したフェニル 基を有するＣＩ−！Ｏ環式アルキル、Ｋで置換された付着したフェニル基を有す るＣ　Ｉ−！Ｏアルキル、Ｋで２置換された付着したフェニル基を有するＣ１− １゜アルキル、Ｋで３置換された付着したフェニル基を有するＣＩ−ｗｅアルキ ル、Ｋで置換された付着したフェニル基を有するＣｌ−２゜環式アルキル、窒素 を介してアルキルに付着したモルホリン（−Ｎ　（ＣＨｔＣＨｔ）Ｏ）環を有す るＣ８−１゜アルキル、窒素を介してアルキルに付着したピペリジン環を有する Ｃ　Ｉ−＋　ａアルキル、窒素を介してアルキルに付着したピロリジン環を有す るＣ　Ｉ−＋ｏアルキル、窒素を介してアルキルに付着したＯＨ基を有するＣ１ −１゜アルキル、　ＣＨｓ　ＣＨｔ　ＯＣＨ宜ＣＨ！ＯＨ，付着４−ピリジル基 を有するＣ　ｌ−１０ｑ付着３−ピリジル基を有するＣ３−３゜、付着２−ピリ ジル基を有するＣ１−１０．付着シクロヘキシル基を有するＣＩ−ｒＯｓ−ＮＨ −ＣＨ＝ＣＨｔ　（４−ヒドロキシフェニル）、および−ＮＨ−ＣＨＩＣＨ。 −（３−インドリル）からなる群から選択される。 アミノ酸α−ケトアミド類は、下記の構造式：％式％ の化合物類または薬剤学的に許容できる塩である：式中、 Ｍ、ｉ訳ＨＳＮＨｔ−ＣＯ−１ＮＨ２−ＣＳ−１ＮＨ２−ＳＯ，−１Ｘ−ＮＨ− ＣＯ−１Ｘ！Ｎ−Ｃ０−１Ｘ−ＮＨ−Ｃ３−１Ｘ、Ｎ−Ｃ３−１Ｘ　ＮＨ５ｏ２ −１Ｘ＝Ｎ−８Ｏｔ−１Ｘ−ＣＯ−１Ｘ−ＣＳ−１ｘ−ｓＯｔ−１ｘ−ｏ−ｃｏ −またはｘ−ｏ−ｃｓ−を示し、 Ｘは、Ｃ＋　−＋　ｏアルキル、Ｃｌ−１゜フルオロアルキル、Ｊ置換Ｃ８−３ ゜アルキル、Ｊ置換Ｃｒ−＋。フルオロアルキル、１−アトマンチル、９−フル オレニル、フェニル、Ｋ置換フェニル、Ｋ２置換フェニル、Ｋ３置換フェニル、 ナフチル、Ｋ置換ナフチル、Ｋ２置換ナフチル、Ｋ３置換ナフチル、付着フェニ ル基を有するＣ１−１゜アルキル、付着フェニル基を２個有するＣ１１０アルキ ル、Ｋ置換付着フェニル基を有するＣ１−１゜アルキル、およびに＠換付着フェ ニル基を２個有するＣ３−１゜アルキル、付着フェノキシ基を有するＣ　＋　− ＋。アルキル、およびフェノキシ基上でＫに置換された付着フェノキシ基を有す るＣ３−１゜アルキルからなる群から選択され、Ｊは、ハロゲン、Ｃ０ＯＨ，Ｏ Ｈ，ＣＮ、ＮＯ２，ＮＨ，、Ｃ１−１゜アルコキシ、Ｃ＋−＋ｏアルキルアミン 、Ｃ２−１２ジアルキルアミン、Ｃ＋−＋ｏアルキルー０−ＣＯ−１Ｃ１−Ｉｏ アルキル−０−ＣＣ）−ＮＨ−１およびＣ１＝、。アルキル−８−からなる群か ら選択され、 Ｋは、ハロゲン、Ｃ１−３゜アルキル、Ｃ１−、。パーフルオロアルキル、Ｃ１ −１゜アルコキシ、ＮＯ２、ＣＮ、０Ｈ１ＣＯ，Ｈ，アミ八Ｃ１−１゜アルキル アミノ、Ｃ２−１ｔジアルキルアミノ、ＣＩ−＋ｏアシルおよびＣ＋　−＋。ア ルコキシ−〇〇およびＣ３−１゜アルキル−８−からなる群から選択され、ＡＡ は、Ｌ構造、Ｄ構造、またはα炭素においてキラリティのない側鎖ブロックまた は非ブロツクアミノ酸を示し、好適にはアラニン、バリン、ロイシン、イソロイ シン、プロリン、メチオニン、メチオニンスルホキシド、フェニルアラニン、ト リプトファン、グリシン、セリン、スレオニン、システィン、チロシン、アスパ ラギン、グルタミン、アスパラギン酸、グルタミン酸、リシン、アルギニン、ヒ スチジン、フェニルグリシン、ベーターアラニン、ノルロイシン、ノルバリン、 アルファーアミノ酪酸、イプシロン・アミノカプロン酸、シトルリン、ヒドロキ シプロリン、オルニチン、ホモアルギニン、ザルコシン、インドリン２−カルボ ン酸、２−アゼチジンカルボン酸、ピペコリン酸（２−ピペリジンカルボン酸） 、０−メチルセリン、〇−エチルセリン、Ｓ−メチルシスティン、Ｓ−エチルシ スティン、Ｓ−ペンチルシスティン、ＮＨｔ　ＣＨ（ＣＨ２ＣＨＦ　ｔ２）　Ｃ ００１（、アルファーアミノへブタン酸、ＮＨ，−ＣＨ（ＣＨ２−１−ナフチル ）−ＣＯＯＨＳＮＨ！−ＣＨ（ＣＨ，−２−ナフチル）−ＣＯＯＨ。 ＮＨ，−ＣＨ（ＣＨ，−シクロヘキシル）−ＣＯＯＨ，ＮＨ，−ＣＨ（ＣＨ，− シクロペンチル）−ＣＯＯＨ，ＮＨ２−ＣＨ（ＣＨ２−シクロブチル）−ＣＯＯ ＨｌＮＨ，−ＣＨ（Ｃ）（、−シクロプロピル）−ＣＯＯＨ、トリフルオロロイ シン、およびヘキサフルオロロイシンからなる群から選択され、Ｒ３およびＲ４ は、それぞれ、Ｈ，ＣＩ−ｔ。アルキル、ＣＩ−！。環式アルキル、ＣＩ−２ｏ アルキルに付着したフェニル基を有するＣＩ−ｔｏアルキル、付着したフェニル 基を有するＣ１−２゜環式アルキル、Ｋで置換された付着したフェニル基を有す るＣ　ｌ−２０アルキル、Ｋで２置換された付着したフェニル基を有するＣ１− ２゜アルキル、Ｋで３置換された付着したフェニル基を有するＣ１−８゜アルキ ル、Ｋで置換された付着したフェニル基を有するＣ１−１゜環式アルキル、窒素 を介してアルキルに付着したモルホリン（−Ｎ　（ＣＨ，ＣＨ，）Ｏ）環を有す るＣｌ−１０アルキル、窒素を介してアルキルに付着したピペリジン環を有する Ｃ　＋　−＋　ｏアルキル、窒素を介してアルキルに付着したピロリジン環を有 するＣ　＋−＋。アルキル、窒素を介してアルキルに付着したＯＨ基を有するＣ １−３゜アルキル、−ＣＨ２ＣＨ！０ＣＨ１ＣＨ！ＯＨ，付着４−ピリジル基を 有するＣ３−１゜、付着３−ピリジル基を有するＣＩ−＋。、付着２−ピリジル 基を有するＣｌ−１０、付着シクロヘキシル基を有するＣ３−３゜、−ＮＨＣＨ ｔＣＨｔ　（４−ヒドロキシフェニル）、および−Ｎ　ＨＣＨｔ　ＣＨを−（３ −インドリル）からなる群から選択される。 本出願人らは、文献に報告されている唯一のペプチドケトアミド類を認識してい る。この化合物は、Ｚ　Ｐｈｅ　ＮＨＣＨ２Ｃ０Ｃｏ　ＮＨＥｔ　（Ｚ−Ｐｈｅ −Ｇｌ　ｙ−Ｃｏ−ＮＨ−Ｅｔ）である。本化合物は、ＨｕおよびＡｂｅｌｅｓ （Ａｒｃｈ、　Ｂｉｏｅｈｅｍ、　Ｂｉｏｐｈｙｓ、　２８１．２７１−２７４ （１９９０））においてパパインおよびカテプシンＢの阻害剤であると報告され ている。 下記のペプチドケトアミド化合物は、本発明の内容においてカルパイン阻害剤類 として有用であることが見いだされたペプチドケト化合物類の代表である。 Ｚ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−ＣＯＮＨ−Ｅｔ Ｚ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−ＣＯＮＨ−ｎＰｒＺ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−ＣＯＮＨ−ｎＢｕ Ｚシｚｕ−Ｐｈｅ−ＣＯＮＨ−ｆＢｕ Ｚ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−ＣＯＮＨ−ＢｚｌＺ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−■ＮＨ−（ＣＨ２ ）２ＰｈＺシｚｕ−Ａｂｕ−ＣＯＮＨ−Ｅｔ Ｚシｚｕ−Ａｂｕ−ＣＯＮＨ−ｍｌケ Ｚ−Ｌｅｕ−Ａｂｕ−ＣＯＮＨ−ｎＢｕＺシｚｕ−Ａｂｕ−ＣＯＮＨ−ｉＢｕ Ｚ−Ｌｅｕ−Ａｂｕ−ＣＯＮＨ−ＢｚｌＺ−Ｌｅｕ−Ａｂｕ−■ＮＨ−（Ｏ（、 ）７ＣＨ３Ｚ−Ｌｚｕ−Ａｂｕ−ＣｏＮＨ（ＣＨｆｉＯＨｚ−Ｌｃｕ−Ａｂｕ− ＣＯＮＨ（Ｏ（、）ρ（ＣＨ止ＯＨ２，Ｌｅｕ−Ａｂｕ−■ＮＨ（ＣＨ，）□、 ＣＨ３Ｚ−Ｌｅｕ−Ａｂｕ−ＣＯＮＨ−ＯＩ２−Ｃ，Ｈ３（ＯＣＨ３）２Ｚ−Ｌ ｅｕ−Ａｂｕ−■ＮＨ−ＣＨ，℃４Ｈ４Ｎ我々は、システィンおよびセリンプロ テアーゼ類の両者においてこのペプチドケト化合物類の阻害機作を研究した。セ リンプロテアーゼ、ブタ膵エラスターゼの活性部位中に結合した１個のα−ケト エステルの結晶構造が完成された。本酵素の活性部位５ｅｔ−１９５は、前記ケ トエステルのカルボニル基に付加されてテトラヘドラル中間体を形成し、これが オキシアニオンホールとの相互作用によって安定化される。、二の構造は、ペプ チド結合加水分解に関与するテトラヘドラル中間体に類似しており、α−ケトエ ステルが遷移状態アナログであることを証明している。Ｈｉｓ−５７は、前記エ ステル官能基のカルボニル基に水素結合（５゜ており、ポリペプチド骨格の水素 部分のペプチド骨格は前記阻害剤に結合して、βシートを形成し、前記ベンジル エステルは、Ｓサブサイトに向けられる。Ｐ１アミノ酸残基の側鎖は、前記酵素 のＳＬポケット中に存在する。ケトアミド類との相互作用は、ケトアミド官能基 のＮＨ基とさらに水素結合が形成されるという可能性を除いて、同様である。 ケト酸の場合、Ｓサブサイ］・と相互作用するＲ基は全くないであろう。したが って、これらの阻害剤類は、ケトエステル類およびケトアミド類よりもわずかに その力が劣ると予測される。しかし、あるケト酸化合物類は、本発明の内容に沿 って使用した際に驚くほど高活性であることが判明した。特に、Ｚ−Ｌｅｕ−Ｐ ｈｅ−ＣＯＯＨおよびＺ−Ｌｅｕ−Ａｂｕ−ＣＯＯＨは、カルパイン類の極めて 強力な阻害剤類であることがわかった。 システィンプロテアーゼ類の活性部位は、活性部位ヒスデシン残基を含めてセリ ンプロテアーゼ類と共通していくつかの特性を共有している。システィンプロテ アーゼ類は、５ｅｒ−１９５の代わりに活性部位システィン残基を有しており、 これは、ペプチドケト酸類、ケトエステル類、またはケトアミド類のケトン性カ ルボニル基に付加し、セリン−１９５残基に代わってシスティン残基があること を除いて上述の構造に極めて類似したアダクトを形成する。さらに相互作用がシ スティンプロテアーゼの伸長基質結合部位と阻害剤との間で起こり、前記阻害剤 類の結合親和性と特異性を増強するであろう。 前記ペプチドケト化合物類は、特定の各酵素とその基質類との複雑な相互作用の 多くを用いてそれによって阻害されたプロテアーゼに結合する。特定システィン プロテアーゼの阻害剤を設計するために、■）この酵素のための良好なペプチド 基質のアミノ酸配列類を見いだすこと、および２）ペプチドケト化合物中にそれ らまたは類似のアミノ酸配列類を入れることが必要である。こうした設計戦略は 、また、その他の属のペプチド阻害剤類をペプチド基質の代わりに使用してペプ チドケト化合物阻害剤中に組み込む適当な配列についての情報を入手する際に有 効であろう。したがって、我々は、それらの基質特異性に基づき、その他のプロ テアーゼ類のための新しい阻害剤類の構造を予測することができる。特定酵素の ための良好な阻害剤構造がいったんわかれば、ＭまたはＲ基に置換基を付加する ことによって溶解度または疎水性のようなその他の特性を変化させることも次に 可能となる。 カルパインの場合、公知の阻害剤配列は、ペプチドアルデヒド、Ａｃ−Ｌｅｕ− Ｌｅｕ−Ｎｌ　ｅ−Ｈ（カルパイン阻害剤■としても公知であり、下記で“Ｃ１ １”と記載する）である。この阻害剤は、関連ペプチドアルデヒド阻害剤ＡＣ− Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｎｍｅ−Ｈ（カルパイン阻害剤■としても公知である）に加え てＣａｌｂｉｏｃｈｅｍ　ｏｆ　Ｌａ　Ｊｏｌｌａ、Ｃａ１ｉｆｏｒｎｉａから 市販されている。我々は、Ｐｌに芳香族アミノ酸残基類を有するペプチドα−ケ トエステル類がチオールプロテアーゼ類、カナプシンＢ１パパインおよびカルパ インの良好な阻害剤類であることを見いだした。さらに、我々は、Ｐｌに芳香族 アミノ酸残基類または疎水性アルキルアミノ酸小残基類を有するペプチドα−ケ トエステルおよびペプチドα−ケトアミド類がカルパインの良好な阻害剤類であ ることを見いだした。 カルパイン阻害剤類として有効なペプチドケト化合物類を我々が見い出せたのは 、ペプチドケト化合物類を可逆性の阻害類としてアッセイしたことによる。ジメ チルスルホキシド（ＤＭＳＯ）中種々の濃度の阻害剤類を、緩衝液および基質を 含むアッセイ混合物に添加した。本反応は、酵素の添加によって開始させ、加水 分解速度を分光学的にまたは蛍光によって調べた。カテプシンＢ用緩衝液として 、８８ｍＭ　ＫＨ２ＰＯ，，１２ｍＭ　Ｎａ−ＨＰＣＬ、１．３３ｍＭ　ＥＤＴ Ａ。 ２．７ｍＭシスティン、ｐＨ６，０を使用した：カルパイン■およびカルパイン ■については、２０ｍＭ　Ｈｅｐｅｓ、１０ｍＭ　ＣａＣＬ、１０ｍＭ　β−メ ルカプトエタノール、ｐＨ７，２緩衝液を利用した。 全てのペプチドチオエステル加水分解速度は、４．４°　−ジチオジピリジン（ ｅ３２４＝１９８００Ｍ−’ｃｍ−’；Ｇｒａｓｅｔ　ｔ　ｉおよびＭｕｒｒａ ｙ、Ａｒｃｈ、Ｂｉｏｃｈｅｍ、Ｂｉｏｐｈｙｓ、１１９．ｐｐ４１−４９　（ １９６７））含有アッセイ混合物を用いて測定した。パパインは、Ｂ　ｚ　−Ａ 　ｒ　ｇ−ＡＭＣまたは）３ｚ　″′Ａｒｇ−ＮＡ　（Ｋａｎａｏｋａら、Ｃｈ ｅｍ、Ｐｈａ　ｒｍ、Ｂｕ　ｌ　ｌ。 ２５．３１２６−３１２８　（１９７７）））によってアッセイし、ＡＭＣ（７ −アミノ−４−メチルクマリン）放出は、蛍光（３８０ｎｍ励起、および４６０ ｎｍで発光）で調べた。カテプシンＢは、Ｚ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−ＡＦＣ（Ｂａｒ ｒｅｔｔおよびＫｉｒｓｅｈｋｅ、　Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｅｎｚｙｍｏｌ、　８０ ．５３５−５６１（１９８１））によってアッセイし、およびＡＦＣ（７−アミ ノ−４−トリフルオロメチルクマリン）放出は、蛍光（４００ｎｍ励起、および ５０５ｎｍで発光）で調べた。ヒト赤血球からのカルパインＩおよびウサギ由来 カルパイン■は、Ｓ　ＩＪ　Ｃ−Ｌ　ｅ　ＩＩ　−Ｔ　ｙ　ｒ　−ＡＭＣ（Ｓａ ｓａｋｉら、Ｊ、　Ｂｊｏｌ、　Ｃｈｅｌｌｌ、　２５９．１２４８９−１２４ ９４（１９８４）　：本文で参考として引用）を用いてアッセイし、およびＡＭ Ｃ（７−アミノ−４−メチルクマリン）放出は、蛍光（３８０ｎｍ励起、および ４６０ｎｍで発光）で調べた。酵素加水分解速度は、種々の基質および阻害剤濃 度で測定し、Ｋｉ値はＩ）ｉ　ｘｏｎプロットでめた。 第ＰＫＣ１表は、パパイン、カテプシンＢ、カルパイン１１およびカルパイン■ に対する阻害定数（Ｋｉ）を示している。 第ＰＫＣ１表に示したパパインの阻害定数は、Ｎ“−ベンゾイル−Ａｒｇ−ＡＭ Ｃを基質として用いて、２ｍＭ　ＥＤＴＡ、５ｍＭシスティン（新鮮調製）、１ ％ＤＭＳＯを含有する２５℃の０．０５Ｍ　Ｔｒｉｓ−ＨＣＩ緩衝液、ｐＨ７゜ ５中で測定した。ただし、第ＰＫＣ１表で”ｅ”を記したパパインの阻害定数の 値は、２０ｍＭ　ＥＤＴＡ、５ｍＭシスティン、９％ＤＭＳＯを含有する２５℃ の５０ｍＭ　Ｔｒｉｓ−ＨＣＩ緩衝液、ｐＨ７，５中で測定した。 第ＰＫＣ１表 ペプチドケトエステル類およびケト酸類によるシスティンプロテアーゼ類の阻害 ｚ、Ｌｅｕ−Ｎｌａ−Ｃｏｏεｔ　Ｏ，１２０，１８Ｚ−Ｌｅｕ−Ｎｖａ−ＣＯ ＯＥｔ　３０　１．２Ｂｚ−ＤＬ−Ｐｈｅ−ＣＯＯＥｔ　５００”　６４′ｚＰ Ｐｈｅ−ＤＬ−Ｐｈｅ−ＣＯＯＥｔ　１．８　０．１２．９ｅ ＭｅＯ−３ｕｃ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ａｂｕ−ＣＯＯＭｅ　Ｏ，７６，０ １００１Ｐ尊パパイン　ｃＣＩｆｆｉカルパインＩｂＣＢ　ｘカテプシンＢｄＣ ＩＩ−カルバイン■第ＰＫＣ１表のデータから、２１位にＡｂｕ、Ｐｈｅまたは Ｎｌｅおよび２２位中にＬ　ｅ　ｕを有するジペプチドケトエステル類がカルパ インＩおよびカルパイン■の強力な阻害剤であることがわかる。２１位にＡｂｕ またはＡｌａおよび２２位中にＡｌａを有するトリペプチドケトエステル類も、 同様に、カルパインの阻害剤であること、前記のジペプチド類よりもやや弱いこ とがわかる。したがって、ペプチドケト化合物阻害剤類の設計についての上述の 記載によれば、我々は、これらおよび類似の構造に基づくペプチドケト化合物類 がカルパイン阻害活性を示すであろうと考えている。 前記ペプチドα−ケトエステル類は、２段階Ｄａ　ｋ　ｉ　ｎ−Ｗｅ　ｓ　を法 によって調製される。この方法は、下記の図に示したようなアミノ酸誘導体、ジ ペプチド誘導体、トリペプチド誘導体、またはテトラペプチド誘導体のいずれに ついても利用できる。 Ｍ−（ＡＡ）、−ＯＨ→　エノールエステル　−４Ｍ−（ＡＡ）、−ＣＯ−Ｒ前 駆体ペプチド（（ＡＡ）ｎ）は、Ｔｈｅ　ＰｅｐｔｉｄｅｓＳＡｎａｌｙｓｉｓ 、　５ｙｎｔｈｅｓｉｓ。 Ｂｉｏｌｏｇｙ、　Ｖｏｌ、　ｌ−９，＾ｃａｄｅｍｉｃ　Ｐｒｅｓｓ出版、１ ９７９−１９８７（ゴｈｅ　Ｐｅｐｔｉｄｅｓ”）及びＨｏ浮ｂ■氏| Ｖｅｙｌ　Ｍｅｔｈｏｄｅｎ　ｄｅｒ　Ｏｒｇａｎｉｓｃｈｅｎ　Ｃｈｅｍｉｅ 、Ｖｏｌ、１５．Ｐａｒｔｓ　ｌ＆２，５ｙｎｔｈｅｓｅ　魔盾■ Ｐｅｐｔｉｄｅｎ、Ｇｅｏｒｇ　Ｔｈｉｅｍｅ　Ｖｅｒｌａｇ出版、１９７４年 、シュッツットガルト（’Ｈｏｕｂｅｎ４ｅｙｌ”）（両者とも参考として引用 ）によく記載されているようなものを含めて標準的ペプチド化学操作法を用いて 調製できる。 Ｍ基は、いくつかの異なる反応様式を用いて導入できる。たとえば、それは、下 記の図に示したようにアミノ酸上に直接導入できる。 Ｈ−（ＡＡ）、−ＯＨ−４Ｍ−（ＡＡ）、−ＯＨこれとは別に、Ｍ基は、アミノ 酸エステルとの反応とその後のエステル基の除去によって導入でき、同一生成物 を下記のスキームに示したようにして導入できる。 Ｈ−（ＡＡ）、−ＯＲ’　→　Ｍ、−（ＡＡ）、−ＯＲ’　→　Ｍ−（ＡＡ）、 −ＯＨこれらおよびその他のＭ基導入のための手法は、Ｔｈｅ　Ｐｅｐｔｉｄｅ ｓ。 Ｈｏｕｂｅｎ−Ｗｅｙ　ｌ、および多くのその他の有機合成に関する本によく記 載されている。たとえば、シアン酸またはｐ−ニトロフェニルシアン酸との反応 によって、カルバミル基（Ｍ　＝　Ｎ　Ｈｔ　ＣＯ）が導入できる。ｐ−ニトロ フェニルチオカルバメートとの反応によって、Ｎ　Ｈｔ　Ｓ　Ｏを−基が導入で きる。 ＮＨ！Ｓ、ＯＩＣＩとの反応によって、ＮＨｔＳＯｔが導入できる。置換アルキ ルまたはアリルイソシアナートとの反応によって、Ｘ−ＮＨ−Ｃｏ−基（式中、 Ｘは置換アルキルまたはアリル基である）が導入できる。置換アルキルまたはア リルイソシアナートとの反応によって、Ｘ−ＮＨ−ＣＳ−基（式中、Ｘは置換ア ルキルまたはアリル基である）が導入できる。Ｘ　Ｓｏｗ　Ｃ１との反応によっ て、Ｘ−８Ｏ７−基が導入できる。置換アルキルまたはアリル酸クロリドとの反 応によって、アシル基（Ｍ＝Ｙ−Ｃｏ−）が導入できる。たとえば、ＭｅＯＣＯ ＣＲｌＣＨ、−Ｃｏ−ＣＩとの反応によって、ｙ−ｃｏ−基（式中、Ｙは、Ｃ１ アルキル−ＯＣ〇−基によって置換されたＣ２アルキルである）が導入できる。 置換アルキルまたはアリルチオ酸クロリドとの反応によってチオアシル基（Ｍ＝ Ｙ−ＣＳ−）が導入できる。置換アルキルまたはアリルスルホニルクロリドとの 反応によって、Ｘ−８Ｏ２−基が導入できる。たとえば、ダンシルクロリドとの 反応によって、Ｘ−５Ｏ２−誘導体（式中、Ｘは、ジメチルアミノ基によって１ 置換されたナフチル基である）が生成する。置換アルキルまたはアリル酸クロロ ホルメートとの反応によって、ｘ−ｏ−ｃｏ−基が導入できる。置換アルキルま たはアリルクロロチオホルメートとの反応によって、ｘ−ｏ−ｃｓ−が導入でき る。上記Ｍ基類の全てを導入するために使用可能な多くの別の反応様式があり、 Ｍ−ＡＡ−ＯＨまたはＭ−ＡＡ−ＯＲ’のいずれかが生成する。このＭ−ＡＡ− ＯＨ誘導体類を次に直接Ｄａｋｉｎ−Ｗｅｓｔ反応に用いるかまたはジペプチド 、トリペプチド、テトラジペプチド、Ｍ−ＡＡ−ＡＡ−ＯＨ，Ｍ−ＡＡ−ＡＡ− ＡＡ−ＯＨ，またはＭ−ＡＡ−ＡＡ−ＡＡ−ＡＡ−ＯＨに変換してこれらを直接 Ｄａｋｉｎ−Ｗｅｓｔ反応に使用することもできる。置換ペプチド類Ｍ−ＡＡ− ＡＡ−ＯＨ１Ｍ−ＡＡ−ＡＡ−ＡＡ−ＯＨ，Ｍ−ＡＡ−ＡＡ−ＡＡ−ＡＡ−ＯＨ は、また、Ｈ−ＡＡ−ＡＡ−ＯＨ１Ｈ−ＡＡ−ＡＡ−ＡＡ−ＯＨ，Ｈ−ＡＡ−Ａ Ａ−ＡＡ−ＡＡ−ＯＨから直接、Ｍ基導入のために記載した反応を用いて調製す ることもできる。これとは別に、Ｍ基は、カルボキシがブロックされたペプチド 類Ｍ−ＡＡ−ＡＡ−ＯＲ’　、Ｍ−ＡＡ−ＡＡ−ＡＡ−ＯＲ’　、またはＭ−Ａ Ａ−ＡＡ−ＡＡ−ＡＡ−ＯＲ’　との反応とその後このブロック基Ｒ′を除去し て、導入することもできる。 ケトエステル構造中のＲ基は、オキザリルクロリドＣｌ−Ｃｏ−Ｃｏ−０−Ｒと の反応によって、Ｄａ　ｋ　ｉ　ｎ　−Ｗｅ　ｓ　を反応時に導入できる。たと えば、Ｍ−ＡＡ−ＡＡ−ＯＨとエチルオキザリルクロリドＣｒ−Ｃｏ−Ｃｏ−０ −Ｅｔとの反応によって、ケトエステルＭ−ＡＡ−ＡＡ−Ｃｏ−０−Ｅｔが生成 する。Ｍ−ＡＡ−ＡＡ−ＡＡ−ＡＡ−ＯＨとＣＩ　−Ｃｏ−Ｃｏ−０−Ｂ　ｚ　 ｌとの反応によって、ケトエステルＭ−ＡＡ−ＡＡ−ＡＡ−ＡＡ−Ｃｏ−０−Ｂ ｚ　ｌが生成する。 広範囲のＲ基類が、種々のアルキルまたはアリルアルキルオキサイルクロリド類 （Ｃｌ−Ｃｏ−Ｃｏ−０−Ｒ）との反応によってケトエステル構造中に導入され る。 前記オキザリルクロリド類は、アルキルまたはアリルアルキルアルコールとオキ ザリルクロリドＣＩ　−Ｃｏ−Ｃｏ−ＣＩとの反応によって容易に調製される。 たとえば、Ｂ　ｚ　ｌ　−０−ＣＩ　−ＣＯ−ＣＯ−ＣＩおよびｎ−Ｂｕ　−０ −ＣＯ−ＣＯ−ＣＩは、それぞれ、ベンジルアルコールおよびブタノールとオキ ザリルクロリドとの反応によって、収率５０％および８０％で調製される（ｌＦ ａｒｒｅｎ、　Ｃ，Ｂ、およびＭａｌｅｅ、　Ｅ、　Ｊ、　、　Ｊ、　Ｃｈｒｏ ｍａｔｏｇｒａｐｈｙ　６４．２１９−２２２（１９７２）　；本文で参考とし て引用j。 ケト酸類Ｍ−ＡＡ−Ｃｏ−ＯＨ，Ｍ−ＡＡ−ＡＡ−Ｃｏ−ＯＨ，Ｍ−ＡＡ−ＡＡ −ＡＡ−ＣＯ−ＯＨ，Ｍ−ＡＡ−ＡＡ−ＡＡ−ＡＡ−Ｃｏ−ＯＨは、対応するケ トエステル類Ｍ−ＡＡ−Ｃｏ−ＯＲ，Ｍ−ＡＡ−ＡＡ−Ｃｏ−ＯＲＳＭ−ＡＡ− ＡＡ−ＡＡ−ＣＯ−ＯＲ，Ｍ−ＡＡ−ＡＡ−ＡＡ−ＡＡ−Ｃｏ−ＯＲからアルカ リ加水分解によって一般に調製される。ある場合において、ベンジル基（Ｒ＝Ｂ ｚｌ）の水素分解または酸切断（Ｒ＝ｔ−ｂｕｔｙｌ）のようなその他の方法を 使用してケト酸を得ることも必要であろう。この別法は、Ｍ基がアルカリ加水分 解を受け易いときに使用されるであろう。 種々のペプチドケトアミドサブクラス類（Ｍ−ＡＡ−ＮＨ−ＣＨＲｌ−ＣＯ−Ｃ ＯＮＲ５Ｒａ　（ジペプチドケトアミド類（サブクラスＡ））　、Ｍ−ＡＡ−Ａ Ａ−ＣＯ−ＮＲｓＲ４（ジペプチドケトアミド類（サブクラスＢ））　、Ｍ−Ａ Ａ−ＡＡ−ＡＡ−ＣＯ−ＮＲ，Ｒ，（）ジペプチドケトアミド類）、Ｍ−ＡＡＡ ＡＡ−ＡＡ−ＡＡ−ＣＯ−ＮＲＩＲ，（テトラペプチドケトアミド類）およびＭ 、−ＡＡ−ＣＯ−ＮＲ，Ｒ，（アミノ酸ケトアミド類）は、対応するケトエステ ル類から間接的に調製した。このケトンカルボニル基を、最初に、下記のスキー ムに示したように保護し、次に、ケトアミドをアミンＨ−ＮＲ，Ｒ，との反応に よって調製した。 ここで示した操作は、その他の保護基類にも有効である。 上記に概略したスキームに加えて、ケト酸を前駆体として用いて対応するケトア ミドを調製できた。前記ケト酸のケトンカルボニル基をブロックしかつ標準的カ ップリング剤を用いてアミンＨ−ＮＲ３Ｒ４とカップリングさせて、中間体を得 、次にこのブロックをはずしてケトアミドを形成させた。 ペプチドケト化合物類の一般的合成方法他に断りがなければ、原料は、市販業者 から得たものでそれ以上精製しないで使用した。融点は、Ｂｊｃｈｉ毛細管装置 でめ、補正していない。’ＨＮＭＲは、Ｖａｒｉａｎ　Ｇｅｍ１ｎｉ３００で測 定した。化学シフトは、内部テトラメチルシランに対してＩ）ｐｍ（δ）で表し た。フラッシュ力ラムクロマトグラフィは、Ｕｎｉｖｅｒｓａｌ　５ｅｉｅｎｔ ｉｆｉｃ　Ｉｎｃ、　シリカゲルＯ−６”３で行った。新規化合物類の電子衝撃 マススペクトル（ＭＳ）は、ＶａｒｉａｎＭＡＴ　１１２ｓスペクトロメータで 測定した。全化合物類の純度は、薄層クロマトグラフィによってＢａｋｅｒ　５ ｉ２５０Ｆ　シリカゲルブレードで下記の溶媒系を用いて調べた。 ０（Ｃ１３：ＭｅＯＨ：ＡｃＯＨ−９５：５：３　ｖ／ｖ；　Ｋ、　Ａｃ０Ｅｔ ：ＡｃＯＨ＝　２００：１　ｖ／ｖ；　Ｌ、　０（Ｑ３；　l。 ＣＨＣｌ３：ＭｅＯＨ−５０：１　ｖ／ｖアミノ酸メチルエステル塩酸塩類は、 Ｍ、Ｂｒｅｎｎｅｒら（Ｈｅｌｖ、Ｃｈｅｍ、　Ａｃｔａ　３３．５６８　（１ ９５０）　；３６．１１０９　（１９５３））によって１０ｍｍｏ　Ｉのスケー ルで調製するか、または、Ｒａｃｈｅ　ｌ　ｅ　（Ｊ、Ｏｒｇ、Ｃｈｅｍ、２８ ．２８９８　（１９６３）））によって０．１−１．０ｍｍ０１のスケールで調 製した。 収率（％）　融点（’Ｃ）　融点（文献）ＤＬ−Ｎｖａ−００（３’ＨＱ　ｔｏ ｏ　１１３−１１６　１１６−１１７しｎｅ−ＯＣＨ３６５Ｑ　９８　９＋）− ９１９８−Ｚｏ。 ＬＰＰｈｅ−ＯＣ）（３’ＨＱ　９８　１５９−１６１　１５８−１６０ＤＩ／ Ａｂｕ−ＯＣＴ（３’ＨＱ　ｔｏｏ　１４８−１５０　１５０−１５１Ｎ−アシ ルアミノ酸類は、アシル基がフェニルスルホニル、２−ナフチルスルホニルまた はベンゾイルである場合に５ｃｈｏｔ　ｔｅｎ−Ｂａｕｍａｎｎ反応（Ｍ、Ｂｅ ｒｇｍａｎｎ、Ｊ、Ｚｅｒｖａｓ、Ｃｈｅｍ、Ｂｅｒ、６５．１１９２（１９３ ２））によって合成した。 収率（％）　融力、（’Ｃ）　ＴＬＣ（Ｒ＋、溶離液）２−ＮａｐＳＯ２−Ｌ− Ｌｅｕ−ＯＨ４９１１５−１１６０，５８１ＰｈＣＯ−ＤＬ−Ａｂｕ−ＯＨ６４ １４１−１４２０，６４に４−メチル吉草酸（ペンタノイック）基、２−（１− プロピル）ペンタノイック基および７−フェニルヘプタノイック基を有するＮ− アシルアミノ酸類は、２段階合成で合成した。このＮ−アシルアミノ酸メチルエ ステルが最初に得られ、次に加水分解して、遊離のＮ−アシルアミノ酸を得た。 Ｎ−アシルアミノ酸メチルエステル（一般的操作）適当なアミノ酸メチルエステ ル塩酸塩（２０ｍｍｏｌ）を１００ｍ１ベンゼン中で冷却した（１０℃）スラリ ーに対して、４０ｍｍｏｌのトリエチルアミンまたはＮ−メチルモルホリンをゆ っくりと添加しく温度１０−１５℃）、この温度で反応混合物を３０分間撹拌し た。次に、適当な酸クロリド（温度１０−１５℃）１８ｍｍｏｌをこの反応混合 物にゆっくりと添加し、反応混合物を室温で一晩撹拌した。沈澱した塩酸塩をろ 過し、漏斗上で２０ｍ１のベンゼンで２回洗浄し、集めたろ液をＩＭ　ＭＣＩ　 ５０ｍ１で２回、５％　ＮａＨＣＯ３５０ｍ１で２回、Ｈ２Ｏ１００ｍ１で１回 、飽和塩化ナトリウム　５０ｍ１で２回、連続的に洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥さ せた。真空で溶媒を蒸発させた後、残渣の純度を調べ（ＴＬＣ）次の段階（加水 分解）に使用した。 収率（％）融点（’Ｃ） 加水分解（一般的操作） １０ｍｍｏｌの適当なＮ−アシルアミノ酸メチルエステルのメタノール１００ｍ １溶液に対して１１．２５ｍ１のＬＭ　ＮａＯＨを一度に添加して、反応混合物 を室温で３時間撹拌した。次に、この反応混合物を０℃に冷却して（氷塩浴）、 ＩＭＨＣ＋水溶液によってｐＨ２まで酸性とした。この反応混合物に対して酢酸 エチル１００ｍ１を添加し、分離漏斗に移し、有機相を分離した。水相を固体塩 化ナトリウムまたは（ＮＨ，）、Ｓｏ、で飽和させ、５０ｍ１のＡｅＯ−Ｅ−ｔ で２回再抽出した。有機相をまとめ、５０ｍ１のＨ２Ｏで２回、洗浄し、炭素で 脱色し、Ｍｇ５Ｏａで乾燥させた。真空中で溶媒を蒸発させた（ロータエバポレ ータ）後、ＴＬＣで残渣の純度を調べ、不純物がある場合には適当な溶媒から結 晶化した。 収率（％）　融点（℃） （ＣＨ３）２ＣＨ（ＣＨ２）２Ｃｏ−ＤＬ−Ａｂｕ−ＯＨ９２１１０，５−１１ ２（ＣＨ３ＣＨ２ＣＨ，）２Ｇ（Ｃｏ−ＤＬ−Ａｂｕ−ＯＨ９９１２６−１２７ （ｎ−オクタン）Ｐｈ（ＣＴ（Ｚ）ｒ、Ｃｏ−ＤＬ、Ａｂｕ−ＯＨ８９１１０− １１２（ｎ−オクタン）Ｎ−アシルジペプチドメチルエステル類は、ＨＯＢｔ− ＤＣＣ法によってＤＭＦ溶液中で合成した（Ｋ２５ｎｉｇおよびＧｅｉｇｅｒ、 Ｃｈｅｍ、Ｂｅｒ、１０３．７８８　（１９７０））。 収率（％）　融点（’Ｃ）　ＴＬＣ（Ｒ，、溶離液）Ｚ−Ｌｅｕ−ＤＴ、−ＮＶ ａ−ＯＣＨ３８０１ｆ２−１１３　０３７ＢＺ−Ｌｅｕ−Ｌ−Ｐｈｅ−ＯＣＨ３ ８３８６−８７０，８５Ａ３９Ｂ Ｚ−Ｌｅｕ−Ｌ−ｎｅ−ＯＣＨ３９７オイル　０．７９　Ａｏ、４３　Ｂ Ｚ−Ｌｅｕ−ＤＬ−Ａｂｕ−００（３９９８６−８８０ｊ３　Ｂｏ、２６Ｈ ｚ−Ｌｅｕ−Ｌ−Ｌｅｕ−ＯＣＨ，８０９１−９２０，７９ＧＺ−Ｌｅｕ−ＤＬ 、ＮＬｅｕ−ＯＣＨ３９７１１！−１１１ｊＺ−Ｌｅｕ−４−Ｑ−Ｐｈｅ−ＯＣ Ｈ３６５１１２−Ｌ３２　０．７７Ｊ（液晶？　）　０．６８　Ｋ ２−ＮａｐＳＯ２−Ｌｅｕ−ＤＬ−Ａｂｕ−ＯＣＨ３９９オイル　０３９　Ａ ２−ＮａｐＳＯ２−Ｌｅｕ−Ｌ−Ｌｅｕ−ＯＣＨ３９０９７−９８，５０，６３ Ａ Ｎ−アシルジペプチド類は、適当なメチルエステル類の一般的加水分解操作によ って得た。Ｎ−スルホニルジペプチドメチルエステル類の場合、スルホンアミド ナトリウム塩を形成するために１当量のメチルエステルを２．２５当景の１モル ＮａＯＨで加水分解した。 収率（％）　融点（’Ｃ）　ＴＬＣ（Ｒ＋、溶離液）Ｚ−Ｌｅｕ−ＤＬ−ＮＶａ −ＯＨ１００１１７−１１８３０，１１Ａ７／Ｌｅｕ−Ｌ−Ｐｈｅ−ＯＨ９２１ ０５−１０６，，５０３Ｃ０，５５Ｇ Ｚ−Ｌｅｕ−Ｌ−Ｌｅ−ＯＨ７９７７−７９０，２２Ａ（１５２Ｃ Ｚ−Ｌｅｕ−ＤＩ、Ａｂｕ−ＯＨ９９ガラス　０．６１　ＧＬＬｅｕ−Ｌ−Ｌｅ ｕ−ＯＨ９）　ガラス０３６　ＩＺ−Ｌｅｕ−ＤＬ−ＮＬｅｕ−ＯＨ９８９５− ９６Ｚ−Ｌｅｕ−４−Ｑ−Ｐｈｅ−ＯＨ８７１０４−１１４０，４８Ｋ９７．４ 　１８０−１９５　（分解）　０．５８ＩＮ−アシルトリペプチドメチルエステ ル類は、ＤＭＦ溶液中におけるＨＯＢｔ−ＤＣＣ法によって合成した（Ｋｏｎｉ ｇおよびＧｅｉｇｅｒ、Ｃｈｅｍ、Ｂｅｒ、１０３．７８８　（１９７０））。 収率（％）　融点（’Ｃ）　ＴＬＣ（Ｒ，、溶離液）Ｚ、Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｂ ｕ−ＯＣＨ３８フ　１４０−１４１．５　０３ＯＡ９７　＞２００　０３２Ａ Ｎ−アシルトリペプチドは、適当なメチルエステル類の一般的な加水分解操作に よって得た。Ｎ−スルホニルトリペプチドメチルエステルの場合、スルホンアミ ドナトリウム塩を形成するために、１当量のメチルエステルを２．２５当量の１ モルＮａＯＨで加水分解した。 収率（％）　融点（’Ｃ）　ＴＬＣ（Ｒ，、溶離液）Ｚ−Ｌｚｕ−Ｌｅｕ−Ａｂ ｕ−ＯＨ９７ガラス０．６９　Ｉ７、Ｌｚｕ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−ＯＨ９８ガラス ０．４４　Ｋ２−ＮａｐＳＯ□−Ｌｅｕ−Ｉ、ｅｕ−Ａｂｕ−ＯＨ下記の実施例 、実施例ＰＫＣＩ−ＰＫＣ６５は、ペプチドケト化合物類合成を例示するために 示した。 実施例ＰＫＣＩ Ｚ−Ａｌａ−ＤＬ−Ａｌａ−ＣＯＯＥｔこの化合物は、改良Ｄａｋ　ｉ　ｎ　− Ｗｅ　ｓ　を法によって合成した（Ｃｈａｒｌｅｓら、Ｊ。 Ｃｈｅｍ、Ｓｏｃ、Ｐｅｒｋｉｎ　Ｌ１１３９−１１４６（１９８０））　。　 Ｚ−Ａ　ｌ　ａ　−Ａ　ｌ　ａ　−ＯＨ（８８０ｍ　ｇ。 ３ｍｍｏ　ｌ　ｅ）　、４−ジメチルアミノピリジン（１５ｍｇ、０．　３１ｍ ｍｏ　ｌ　ｅ）、およびピリジン（０，８ｍＬ、１０ｍｍｏｌ　ｅ）のテトラヒ ドロフラン（３ｍ　Ｌ　）溶液に対して、攪拌しながらエチルオキザリルクロリ ド（０，７ｍＬ。 ６ｍｍｏｌ）を還流を開始させるために１−分な速度で添加した。この混合物を 静かに３５時間還流させた。混合物を水（３ｍ　Ｌ　）で処理し、室温で３０分 間強（撹拌した。混合物を酢酸エチルで抽出した。有機抽出物を乾燥させ、蒸発 させ、残渣（１，４５ｇ）を得た。残渣をシリカゲルでクロマトグラフィーにか け、ＣＨ２Ｃｌ２で溶出させ、油状エノールエステル生成物（５００ｍｇ、３７ ％）、ｔｉｃで単一スポット、Ｒｆ’＝０．６７　（ＣＨＣｈ：ＭｅＯＨ＝９　 ：　１）；ＭＳ、ｍ／ｅ＝４５１　（Ｍ’＋１）を得た。このエノールエステル （２１０ｍｇ。 ０、　４７ｍｍｏ　ｌ　）の無水エタノール（１ｍＬ）撹拌懸濁液に対して、室 温ですｌ・リウムエトギサイ１−のエタノール溶液を、透明な黄色溶液が生成す るまで滴下した。エタノールをその後除去し、残渣をエーテルで処理した。エー テル溶液を水で洗浄後、乾燥させ、蒸発させて残渣を得た。残渣をシルカゲルク ロマトグラフィーにかけ、生成物を塩化メチレンで溶出した。溶媒を除去後、ペ プチドケトエステルＺ−Ａｔ　ａ−ＤＬ−Ａｌａ−ＣＯＪｔを半固体（１５０ｍ ｇ、９２％）；ｔｉｅで単一スポット、Ｒ１’　０．５８　（ＣＨＣｌ−：Ｍｅ ＯＨ＝５　＋　１）；ＭＳ、ｍ／ｅ＝３５１　（Ｍ”＋１）として得た。元素分 析、Ｃ１ｔＨ２ｔｏ＊Ｎｍ”　１／３Ｈ７０の理論値：ｃ、５７．　２９　：Ｈ ，６，２２：Ｎ、７．　８６、実験値：Ｃ１５７，２３，Ｈ，６，３６：Ｎ、８ ．１７゜実施例ＰＫＣ２ Ｚ−Ａｌａ−Ａｌａ−ＤＬ−Ａｌａ−ＣＯ２Ｅｔこの化合物は、実施例ＰＫＣ１ と同一の操作によって、Ｚ−Ａ　ｌ　ａ　−Ａ　ｌ　ａ　−Ａｌａ−ＯＨから調 製した。生成物をエチルエーテルから結晶化し、収率２３％であった。ｔｌｃで 単一スポット、Ｒｔ”＝０．３１　（ＣＨＣｉ−：ＭｅＯＨ＝９　：ｌ）；融点 、１４３−１４４℃；ＭＳ、ｍ／ｅ＝４２１　（Ｍつ。元素分析、Ｃ１゜Ｈ２？ Ｏ−Ｎ　、の理論値：Ｃ，５６，９９：Ｈ，６，４６；Ｎ、９．９７、実験値、 Ｃ，５６，９６，Ｈ，６，４９，Ｎ、　９．９２゜実施例ＰＫＣ３ Ｚ−Ａｌａ−Ａｌａ−ＤＬ−Ａｂｕ−ＣＯ２Ｅｔこの化合物は、実施例ＰＫＣＩ と同一の操作によって、Ｚ−Ａ　ｌ　ａ−Ａ　Ｉ　ａ　−ＤＬ−Ａｂｕ−ＯＨか ら収率１１％で調製した。ｔｉｃで単一スポット、Ｒ１′；０．６０　（ＣＨＣ Ｉ、：ＭｅＯＨ＝９＋１）；融点、１１１−１１３℃、ＭＳ１ｍ／ｅ＝４３６　 （Ｍ’＋１）、元素分析、Ｃ！、ＨｔｌＯ，Ｎ、−１／３ＨｔＯの理論値：Ｃ１ ５７，１３；Ｈ，６，７５；Ｎ、９．５１、実験値：Ｃ，５７，３８：Ｈ。 ６．８２；Ｎ、９．６２゜ 実施例ＰＫＣ４ Ｚ−Ａｌａ−Ａｌａ−ＤＬ−Ｎｖａ−ＣＯ２Ｅｔこの化合物は、実施例ＰＫＣ１ と同一の操作によって、Ｚ−Ａｌａ−ＮｙＢ−ＯＨから収率２０％で調製した。 ｔｌｃで単一スポット、Ｒ＋’＝（Ｌ　６４　（ＣＨＣＩ＝：ＭｅＯ）（＝５　 ：　１）：ＭＳ、ｍ／ｅ＝４５０　（Ｍ”＋１）、元素分析、Ｃ＝　２　Ｈｓ　 、０７Ｎ　、・Ｉ（２０の理論値；ｃ、５６．　５１　、Ｈ，７，１１、Ｎ、８ ．　９９、実験値：ｃ、５６．４２；Ｈ，７，０８：Ｎ、９．０６゜実施例ＰＫ Ｃ５ Ｚ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−ＤＬ−Ａｌａ−ＣＯＪｔこの化合物は、実施例ＰＫＣＩと 同一の操作によって、Ｚ−Ａ　ｌ　ａ−Ｐ　ｒ　ｏ　−Ａｌａ−ＯＨ４・ジシク ロヘキシルアミンから収率１９％で調製した。ｔｌｅで単一スポット、Ｒ，”＝ ０．５５　（ＣＨＣｌ、：ＭｅＯＨ＝９　：　１）；ＭＳ、ｍ／ｅ＝、４４７（ Ｍ”）。元素分析、Ｃ２２Ｈ２ｅ　Ｏ７Ｎ　ｓ・１／２Ｈ２０の理論値、Ｃ，５ ７゜８８：Ｈ，６゜６２；Ｎ、９．２Ｌ実験値：ｅ、ｓ７．６５．Ｈ，６，６８ ；Ｎ、９．　１７゜ 実施例ＰＫＣ６ Ｚ−Ａ　ｌ　ａ　−Ａ　ｌ　ａ　−Ａ　ｌ　ａ−ＤＬ−Ａ　ｌ　ａ−ＣＯＪ　ｔ この化合物は、実施例ＰＫＣ１と同一の操作によって、Ｚ−Ａ　ｌ　ａ　−Ａ　 ｌ　ａ　−Ａ　ｌ　ａ−Ａ　ｌ　ａ−ＯＨから収率７％で調製した。ｔｉｃで単 一スポット、Ｒｒ’＝０．４０　（ＣＨＣＩｓ　：ＭｅＯＨ＝９　：　ｌ）；融 点、１６３−１６５℃；ＭＳ。 ｍ’ｅ＝４９３　（Ｍ’＋１）。元素分析、Ｃ，、Ｈ３２０，Ｎ、−１／２Ｈ２ ０の理論値：ｃ、５５．０８；Ｈ，６，６３：Ｎ、１１．１７、実験値；Ｃ，５ ４，８５；Ｈ，６，５３：Ｎ、１１．１４゜ 実施例ＰＫＣ７ Ｂｚ−ＤＬ−Ｐｈｅ　Ｃ０２Ｅｔ この化合物は、実施例ＰＫＣ１と同一の操作によって、Ｂｚ−Ｐｈｅ−ＯＨから 収率３６％で調製した。油状、ｔｌｃで単一スポット、Ｒず’＝０．６１　（Ｃ ＨＣＬ：ＭｅＯＨ＝９　：　ｌ）：ＭＳ、ｍ／ｅ＝３２５　（Ｍ’）　。元素分 析、Ｃ，、Ｈ，，０４Ｎ・１／３Ｈ才０の理論値；ｃ、６８．　８６；Ｈ，５， ９８；Ｎ。 ４２２、実験値：ｃ、６９．１０＋Ｈ，６，０９，Ｎ、４．３８゜実施例ＰＫＣ ８ ＭｅＯ−Ｓｕｃ−Ａｌ　ａ−ＤＬ−Ａｌ　ａ−ＣＣｈＭｅこの化合物は、ナトリ ウムメトキサイドのメタノール溶液をエノールエステル加水分解に使用した以外 は実施例ＰＫＣ１と同一の操作によって、Ｍｅｏ−５ｕ　ｃ　−Ａ　Ｉ　ａ−Ａ 　Ｉ　ａ−ＯＨから収率２２％で調製した。ｔｉｃで単一スポット、Ｒｔ”＝０ ．　４３　（ＣＨＣｌｓ：ＭｅＯＨ＝９　：　１）　；ＭＳ、ｍ／ｅ＝３１７（ Ｍ”＋１）。元素分析、Ｃ＋ＳＨ＊。０７Ｎ４・１７３ＨｔＯの理論値＋　Ｃ， ４８，４４、Ｈ。 ６、　４６　：Ｎ、８．　６９、実験値：ｃ、４８．　５６．Ｈ，６，３９，Ｎ 、８．　６９゜ 実施例ＰＫＣ９ ＭｅＯ−Ｓ　ｕ　ｃ　−Ａ　ｌ　ａ−Ａ　ｌ　ａ−Ｐ　ｒ　ｏ−ＤＬ−Ａｂｕ− ＣＯｔＭｅこの化合物は、実施例ＰＫＣ１と同一の操作によって、ＭｅＯ−８ｕ ｃ−Ａｌ　ａ−Ａｌ　ａ−Ｐｒｏ−ＤＬ−Ａｂｕ−ＯＨから収率２５％で調製し た。泡状、ｔｉｃで単一スポット、Ｒ１’＝０．６６　（ＣＨＣｌｓ：ＭｅＯＨ ＝５　：　１）　。元素分析、Ｃｚ　ｔ　Ｈｓ　ａ　０９Ｎ４・Ｈ２Ｏの理論値 ：ｃ、５１．　５３．Ｈ，７，０２，Ｎ。 １０．８５、実験値＋Ｃ，５１，１１；Ｈ，７，０３，Ｎ、１０．　８８゜実施 例ＰＫＣ１０ ＭｅＯ−３ｕｃ−Ｖａ　ｌ−Ｐｒｏ−ＤＬ−Ｐｈｅ−ＣＯ２Ｍｅこの化合物は、 実施例ＰＫＣ１と同一の操作によって、ＭｅＯ−８ｕｅ−Ｖａ　ｌ　−Ｐ　ｒ　 ｏ−Ｐｈ　ｅ−ＯＨから収率４２％で調製した。泡状、ｔｌｃＴ単一スポット、 Ｒｔ”　０．５７　（ＣＨＣｌ−：ＭｅＯＨ＝９　：　１）：ＭＳ、ｍ／ｅ＝５ １７（Ｍ’）。元素分析、ＣｔｅＨ□０．Ｎ、・２／３ＨｔＯの理論値、Ｃ，５ ８゜９６、Ｈ，６，９０；Ｎ、７．９３、実験値；ｃ、５８．９２：Ｈ，６，９ ６：実施例ＰＫＣＩＩ この化合物は、ｎ−ブチルオキザリルクロリドをＤａｋｉｎ−Ｗｅｓｔ反応に使 用しかつｎ−ブタノール中す！・１功ムｎ−フ斗キサイドをエノールエステル加 水分解に使用した以外は実施例ＰＫＣ１と同一の操作によって、Ｂｚ−Ａｌａ− ＯＨから収率４５％で調製した。無色油状、ｔｌｃで単一スポット、Ｒ１’−〇 、７２　（ＣＨＣＩ、：ＭｅＯＨ＝９　：　１）；ＭＳ％ｍ／ｅ＝２７７　（Ｍ ’）。 実施例ＰＫＣｌ　２ Ｂｚ−ＤＬ−Ａｌ　ａ−ＣＯＪｚ　ｌ この化合物は、ベンジルオキザリルクロリドをエチルオキザリルクロリドの代わ りに使用しカリベンジルアルコール中ナトリウムベンチオルキサイドをエノール エステル加水分解に使用した以外は、実施例ＰＫＣ１と同一の操作によって、Ｂ ｚ−Ａｌａ−ＯＨから収率２６％で調製した。；ｔｌｃで単一スポット、Ｒ１” ＝０．　６９　（ＣＨＣＩ　ｓ　：　ＭｅＯＨ＝９　：　１）　：融点、９５− ９７℃；ＭＳ。 ｍ／　ｅ　＝　３１２　（Ｍ’　＋　１　）　ｏ元素分析、Ｃ，ｌＨ，，０４Ｎ −１／２Ｈ２０の理論値；Ｃ，６７，４８；Ｈ，５，６６；Ｎ、４．３７、実験 値；ｃ、６７、　７８：Ｈ。 ５．５５：Ｎ、４．６６゜ 実施例ＰＫＣ１３ Ｚ−Ａ　Ｉ　ａ−ＤＬ−Ａ　Ｉ　ａ−Ｃｏ２−ｎ−Ｂｕこの化合物は、ｎ−ブチ ルオキザリルクロリドをＤａ　ｋ　ｉ　ｎ　−Ｗｅ　ｓ　を反応に使用しかつナ トリウムｎ−ブトキサイドをエノールエステル加水分解に使用した以外は実施例 ＰＫＣＩと同一の操作によって、Ｚ−Ａｌａ−Ａｌａ−ＯＨから収率１４％で調 製した。油状、ｔｌｃで単一スポット、Ｒ，’＝０．４５　（ＣＨＣＩ＝：Ｍｅ ＯＨ＝９　：　１）；ＭＳ、ｍ／ｅ＝３７８　（Ｍ’）、元素分析、ＣＩｅＨｔ ＠ｏ＠Ｎｔ　・１　／　３　Ｈ２Ｏ０’）理論値；ｃ、５９．　３５．Ｈ，７， ００；Ｎ。 ７．２９、実験値；ｃ、５９．　４１　、Ｈ，７，０３、Ｎ、７．　１０゜実施 例ＰＫＣ１４ Ｚ　Ａｌａ　ＤＬ　Ａｌａ　Ｃ０２Ｂｚｌこの化合物は、ベンジルオキザリルク ロリドをＤａｋｉｎ−Ｗｅｓｔ反応に使用しかつベンジルアルコール中ナトリウ ムベンジルオキサイドをエノールエステル加水分解に使用した以外は実施例ＰＫ Ｃ１と同一の操作によって、Ｚ−Ａｌａ−Ａｌａ−ＯＨから収率３６％で調製し た。ｔｉｃで単一スポット、Ｒ＋”＝０．５５　（ＣＨＣＩ３：ＭｅＯＨ＝９　 ：　ｌ）；ＭＳ、ｍ／ｅ＝４１３　（Ｍ’＋１）。 元素分析、Ｃ２２Ｈｔ４０＠Ｎｔ（７）理論値；ｃ、６４．　０６；Ｈ，５，８ ７，Ｎ、６゜７９、実験値；ｃ、ｃｔａ、　７９．Ｈ，５，９５，Ｎ、６．７２ ゜実施例ＰＫＣ１５ Ｚ−Ａｌａ−Ａｌａ−ＤＬ−Ａｂｕ−ＣＯＪｚｌこの化合物は、ベンジルオキザ リルクロリドをＤａｋｉｎ−Ｗｅｓｔ反応に使用しかつベンジルアルコール中ナ トリウムベンジルオキサイドをエノールエステル加水分解に使用した以外は実施 例ＰＫＣＩと同一の操作によって、Ｚ−Ａｌａ−Ａｔ　ａ−Ａｂｕ−ＯＨから収 率３１％で調製した。ｔｉｃで単一スポット、Ｒｔ’＝０．４０　（ＣＨＣｌ− ：ＭｅＯＨ＝９　：　１）；融点、１２４−１２５℃；ＭＳ。 ｍ／ｅ＝４９８　（Ｍ’＋１）、元素分析、Ｃ！８Ｈｚ、Ｏ，Ｎ、・２／３Ｈ， Ｏの理論値；ｃ、６１．２８：Ｈ，６，３９；Ｎ、８．２４、実験値；ｃ、６１ ．　１４．Ｈ。 ６．６５．Ｎ、７．９４゜ 実施例ＰＫＣ１６ Ｂｚ−ＤＬ−Ａｌ　ａ−ＣＯＯＨ Ｔｓｈｕｓｈｉｍａら（Ｊ、Ｏｒｇ、Ｃｈｅｍ、４９．１１６３−１１６９（１ ９８４））の加水分解操作を使用した。Ｂｚ　ＤＬ　Ａｌａ　ＣＯＪ：ｔ　（５ ４０ｍｇ、２．２ｍｍｏ　ｌ）を重炭酸ナトリウム６５０ｍｇの２−プロパツー ル５０％水溶液（Ｈ！０および２−プロパツール７．５ｍＬ）中温液に添加し、 窒素中で４０℃で撹拌した。酢酸エチルおよび食塩水溶液をこの反応混合物に添 加後、水相を分離し、２Ｎ　ＨＣＩで酸性にし、酢酸エチルで抽出した。有機相 を硫酸マグネシウムで乾燥させ、溶媒を減圧下で留去した。粗加水分解生成物を シリカゲルクロマトグラフィにかけ、塩化メチレンおよびメタノールで溶出し、 油状物を得た（１５０ｍｇ、３１％）。ｔｌｅで単一スポット、Ｒ，’＝０．　 ６８（ｎ−ブタノール：酢酸・ピリジン：Ｈ２０＝４　：　１　：　ｌ・２）。 元素分析、Ｃ０Ｈ８０４Ｎ・３／４Ｈフ０の理論値：Ｃ，５６，２８，Ｈ，５， ３７，Ｎ。 ５．９７、実験値；Ｃ，５６，２１；Ｈ，５，４６；５．６６゜実施例ＰＫＣ１ ７ Ｚ−Ｌｅｕ−ＤＬ−Ｎｖａ−ＣＯＯＥｔこの化合物は、実施例ＰＫＣ１と同一の 操作によって、Ｚ−Ｌｅｕ−Ｎｖａ−ＯＨから収率６０％で調製した。油状物； ｔｌｃで単一スポット、ＲＩ＝０．４９（ＣＨＣｌ＝：ＭｅＯＨ＝２０　：　１ ）。 ＮＭＲ（ＣＤＱ３）６：　０．９１　（ｔ、９Ｈ）、ＣＨ３；　１．２５　（ｔ 、３Ｈ）、ＣＨ３；　１．３ｇ　（ｑ、２Ｈ）。 ０ＣＨ２ＣＨ３；　１．６４　（ｍ、　６Ｈ）、　ＣＨ２；　１．８５　（ｍ、 　ＩＨ）、　ＣＨ（ＣＨ３）２；　４３４　（ｍ、　ＩＨ’j ＣＨ２ＣＨ（ＮＨＣＯＯＣＨ２Ｐｈ）ＣＯＮＨ；　５．１２　（ｄ、　３Ｈ）　 ＮＨＣＨ（Ｃｏ）ＣＨ□、　０ＣＨ２Ｐｈ；　５３２　（ｄB ＩＨ）　ＮＨ；　６．７１　（ｄ、　ＩＨ）　ＮＨ；　７ｊ６　（４５Ｈ）　Ｐ ｈ。 Ｚ−Ｌｅｕ−ＤＬ−Ｎｖａ−ＣＯＯＥｔの前駆体であるＺ−Ｌｅｕ−ＤＬ−Ｎｖ ａ−エノールエステルは、実施例ＰＫＣＩと同一の操作によって合成し、カラム クロマトグラフィによって精製した。油状物、ｔｌｃで単一スポット。 実施例ＰＫＣ１８ Ｚ−Ｌｅｕ−ＤＬ−Ｐｈｅ−ＣＯＯＥｔこの化合物は、実施例ＰＫＣＩと同一の 操作によって、Ｚ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ　−ＣＨから収率３０％で調製した。油状物 ；ｔｌｃで単一スポット、Ｒ，＝０．　４７（ＣＨＣＩ−：ＭｅＯＨ＝５０：１ ）。 ＮＭＲ（ＣＤ（１，）　８：　０．８ｇ　（ｄ、　９Ｈ）、　０ＣＨ２ＣＨ３， 、（Ｑ（３）２ＣＨ；　１．３５（（１−２Ｈ）、　０ＣＨ２ＣＨ３；　１．５ ６　（ｑ、　２Ｈ）、　（ＣＨ３）２Ｑ（ＣＨ２咀３．０３　（ｍ、　ＩＨ）、 　（ＣＨ３）QＱ（；　４コ２（ｍ。 ２Ｈ）、　ＮＨＣＨ（Ｃｏ）ＣＨ２；　５．０８　（ｓ、　４Ｈ）　ＣＨ２Ｐｈ ；　５．４０　（ｍ、　ＩＨ）　ＮＨ；　６．６１（ｄ、　hＨ）　ＮＨ；　７ ｊ　１　（ｓ。 ５Ｈ）　ｐｈ；　７３５．（ち５Ｈ）　Ｐｈ。 Ｚ−Ｌｅｕ−ＤＬ−Ｐｈｅ−エノールエステルはＺ−Ｌｅｕ−ＤＬ−Ｐｈｅ　− ＣＯＯＥｔの前駆体であり、実施例ＰＫＣ１と同一の操作によって合成し、カラ ムクロマトグラフィによって精製した。油状物、ｔｌｃで単一スポット。−ＮＭ Ｒ（■Ｏ，）　６：　０．８６　（ｔ、　３Ｈ）；　０．９９　（ｔ、　３Ｈ） ；ｔ、２４　（ｔ、　３Ｈ）；　１．４０　（ｔ、　３Ｈ）；　１ｊ２　（ｍ、 　２Ｈ）；　１．８３　（ｍ、　２Ｈ）；　４．２３　（ｍ、@４Ｈ）；　４３ ９　（ｑ、　２Ｈ）； ５．１０　（ｔ、　２Ｈ）；　５．１８　（ｓ、　ＩＨ）；　７．２６　（ｍ、 　５Ｈ）；　１３４　（ｍ、　５Ｈ）；　８．８９　（ｓ、@ＩＨ） 実施例ＰＫＣ１９ Ｚ−Ｌｅｕ−ＤＬ−Ａｂｕ−ＣＯＯＥｔこの化合物は、実施例ＰＫＣＩと同一の 操作によって、Ｚ−Ｌｅｕ−Ａｂｕ−ＯＨから収率３３％で調製した。油状物； ｔｌｃで単一スポット、Ｒ，＝０．　６６（ＣＨＣ１，：ＭｅＯＨ＝２０　：　 １）。 ＮＭＲ（■ａ３）δ：　０．９６　（ｔ、　９Ｈ）、　ＯＣＨ□Ｏ（３，（ＣＨ ３）２ＣＨ；　１．２６（Ｌ　３Ｈ）、　ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３；　１．３７　（ ｑ、　２Ｈ）、　ＯＣＨ２ＣＭ３；　１．６６　（ｑ、　２Ｈ）、　（ＣＨ３） ２ＣgＣＨ２ＣＨ；　２．００ （ｒｎ、　１）（）、　ＣＴ（（ＣＩ（３）Ｚ；　４．１２　（ｑ、　２Ｈ）Ｃ Ｈ２Ｈ２ＣＨ３；４３４　（ｒｎ、　１）（）ＮＨＣＨ（ＣＯＮＨ）ＣＨ２ＣＨ （ＣＨ，）、；　５．１２　（ｑ、　３Ｈ）　ＣＨ２Ｐｈ　、Ｃ０ＮＨ（Ｅｔ） ＣＨＣＯＣＯＯ；　５．２X　（Ｌ ＩＨ）　ＮＨ；　６．７９　（ｄ、　ＩＨ）　ＮＩ（；　７コ５（ち５Ｈ）　ｐ ｈ。 Ｚ−Ｌｅｕ−ＤＬ−Ａｂｕ−ｘノールエステルはＺ−Ｌｅｕ−ＤＬ−Ａｂｕ−Ｃ ＯＯＥｔの前駆体であり、実施例ＰＫＣＩと同一の操作によって合成し、カラム クロマトグラフィによって精製した。油状物、ｔｉｅで単一スポット。 ＮＭＲ（■ｃｉ３）　Ａ：ｐｇυ６Ｈ）；　１．１２　（Ｕ　３Ｈ）；実施例Ｐ ＫＣ２０ Ａｔ　Ｐｋ−ＤＬ−Ｌｙｓ−ＣＯＯＥｔ−ＨＣＩＮ−カルボベンジルオキシアラ ニル−Ｎ１−カルボベンジルオキシリジン（１，８８ｇ、３．９ｍｍｏｌ）、４ −ジメチルアミノピリジン（２１ｍｇ。 ０．１７ｍｍｏ　ｌ）　、およびピリジン（１，０ｍＬ、１２．４ｍｍｏｌ）の テトラヒドロフラン（７ｍＬ）溶液に対して、エチルオキザリルクロリド（０， ９＋１１］１，３．　０ｍｍｏ　ｌ　）を還流を開始させるために十分な速度で 添加した。この混合物を静かに３時間還流させ、水（４ｍＬ）で処理し、さらに 室温で３０分間激しく撹拌した。混合物を酢酸エチルで抽出し、有機抽出物を水 で洗浄後、Ｍ　ｇ　Ｓ　Ｏａで乾燥させ、蒸発させ、油状残渣（１，５６ｇ）を 得た。このエノールエステル（１，５６ｇ、２．７ｍｍｏ　ｌ）の無水エタノー ル溶液に対して室温でナトリウムエトキサイドのエタノール溶液をこの溶液が透 明な黄色となるまで数十′した。エタノールを除去し、残渣を酢酸エチルに溶解 した。有機溶液を水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、蒸発させ、残渣を得た。 この残渣を次にカラムクロマトグラフィーにかけ、精製物をクロロホルム−メタ ノールで溶出させた。溶媒を除去し、Ｚ−Ａｌ　ａ−ＤＬ−Ｌｙｓ　（Ｚ）−Ｃ Ｏ２Ｅｔを吸湿性の粉末（３２８ｍｇ、１６％）として得た。ｔｌｃでｍ〜スポ ット、Ｒ，”＝０．　５３（ＣＨＣｌｓ：ＭｅＯＨ＝９　：　１）；ＭＳ、ｍ／ ｅ＝５４２　（Ｍ’＋１）。 Ｎ−カルボベンゾキシアラニル−ＤＬ−Ｎ”カルボベンゾキシリジンケトエチル エステル、Ｚ−Ａｌａ−ＤＬ−Ｌｙｓ　（Ｚ）−ＣＯ２Ｅｔ　（３２８ｍｇ、０ ．６１ｍｍｏｌ）は、アニソールを含有する液体ＨＦによって０℃で３０分間脱 保護した。ＨＦを減圧下で除去した。残渣の油状物を無水エタノールに溶解した 。 ＨＣｉ／エタノールをこの溶液に添加し、エタノールを真空で除去した。残渣を エーテルでデカンテーションにより洗浄し、半固体（２１６ｍｇ、１００％）を 得た。ｔｉｃで単一スポット（ｎ−ブタノール　酢酸・ピリジン・Ｈ，０＝４　 ：　１１２）。 実施例ＰＫＣ２１ Ｂ　ｚ　−ＤＬ−Ｌ　ｙ　ｓ　−ＣＯＯＥ　ｔ　−ＨＣｌ　この化合物は、実施 例ＰＫＣ２０と同一の操作によって、Ｂｚ−ＤＬ−Ｌｙｓ　（Ｚ）−ＣＯＯＥｔ から、収率６２％で調製した。ｔｌｃで単一スポット、Ｒ＋’＝０．５７　（ｎ −ブタノール・酢酸ピリジン：Ｈ２０＝４・１１２）。　前駆体Ｂｚ−ＤＬ−１ ｙｓ　（Ｚ）−ＣＯＯＥｔは、Ｂｚ−Ｌｙｓ　（Ｚ）−ＯＨから収率１００％で 実施例ＰＫＣ２０と同一の操作によって調製した。粉末、ｔｉｅで単一スポット 、Ｒ＋２＝０．７５（ＣＨＣｌｓ：ＭｅＯＨ＝９　：　１）：ＭＳＳｍ／ｅ＝４ ４０　（Ｍ’）、元素分析、Ｃ２４Ｈ２＊０−Ｎ−・２／３ＨｔＯの理論値：ｃ 、６３．　７０＋Ｈ，６，５３，Ｎ。 ６．１９、実験値：ｃ、６３．４９．Ｈ，６，５１、Ｎ、５．　９２゜実施例Ｐ ＫＣ２２ Ｂｚ−ＤＬ−Ａｒｇ−ＣＯＯＥｔ−ＨＣｌこの化合物は、実施例ＰＫＣ２０と同 一・の操作によって、Ｂｚ−ＤＬ−ＡｒｇＣＺ’）−ＣＯＯＥｔから収率９９％ で調製した。ｔｉｃで単一スポット、Ｒ１４−０，７１（ｎ−ブタノール：酢酸 ：ビリジン：ＨｔＯ＝４　：　１　：　１　：　２）、板目試薬陽性。 Ｂｚ−ＤＬ−Ａｒｇ　（Ｚ）−ＣＯＯＥｔは、実施例ＰＫＣ２０と同一の操作に よって、Ｂｚ−ＤＬ−Ａｒｇ　（Ｚ）−ＯＨから収率１９％で調製した。Ｒ１’ ＝０．３８　（ＣＨＣＩｓ：ＭｅＯＨ＝９　：　１）：融点、１４０−１４２℃ ：ＭＳ。 ｍ／ｅ＝４６８　（Ｍ”）、元素分析、Ｃ２４Ｈｔ　＊　Ｏｅ　Ｎ　４の理論値 ；ｃ、６１．５３゜Ｈ，６，０２：Ｎ、１１．９６、実験値：ｃ、６１．　９６ ．Ｈ，６，４８，Ｎ。 １２．３４゜ 実施例ＰＫＣ２３ Ｈ−Ｇｌｙ−ＤＬ−Ｌｙｓ−ＣＯＯＥｔ２ＨＣＩこの化合物は、実施例ＰＫＣ２ ０と同一の操作によって、Ｚ−Ｇｌ　ｙ−Ｄｔ、−Ｌｙｓ　（Ｚ）−ＣＯＯＥｔ から収率９２％で調製した。Ｒ＋’＝０．　２１　（ｎ−ブタノール：酢酸：ピ リジン・Ｈｔ　Ｏ＝　４・１：１：２）。Ｚ−Ｇｌ　ｙ−Ｄｔ−Ｌｙｓ　（Ｚ） −ＣＯＯＥｔは、実施例ＰＫＣ２０と同一の操作によって、Ｚ−Ｇｌ　ｙ−Ｌｙ ｓ　（Ｚ）−ＯＨから収率９％で調製した。ｔｌｅで単一スポット、Ｒ＋’＝０ ．６８　（ＣＨＣＩ−：ＭｅＯＨ＝５　＋　１）；ＭＳ、ｍ／ｅ＝５２８　（Ｍ ”＋１）ア 実施例ＰＫＣ２４ Ｈ−Ｐｒｏ−ＤＬ−Ｌｙｓ−ＣＯＯＥｔ　・２ＨＣ１この化合物は、実施例ＰＫ Ｃ２０と同一の操作によって、Ｚ−Ｐｒｏ−ＤＬ−Ｌｙｓ　（Ｚ）　−ＣＯＯＥ ｔから収率１００％で調製した。ｔｌｃで単一スポット（ｎ−ブタノール　酢酸 ・ピリジン：Ｈ２０＝４：１：１：２）、Ｚ−Ｐｒｏ−ＤＬ−Ｌｙｓ　（Ｚ）　 −ＣＯＯＥｔは、実施例ＰＫＣ２０と同一・の操作によって、Ｚ−Ｐ　ｒ　ｏ− Ｌｙ　ｓ　（Ｚ）　−ＯＨから収率１５％で調製した。Ｒ，”＝０．　７３（Ｃ ＨＣＩｓ：ＭｅＯＨ＝９　：　１）；ＭＳ、ｍ／ｅ＝５６８　（Ｍ’＋１）。 実施例ＰＫＣ２５ Ｈ−Ｐｈｅ−ＤＬ−Ｌｙｓ−ＣＯＯＥｔ　・２ＨＣｌこの化合物は、実施例ＰＫ Ｃ２０と同一の操作によって、Ｚ−Ｐｈｅ−ＤＬ−ＬＹＳ　（Ｚ）　−ＣＯＯＥ ｔから収率３９％で調製した。ｔｉｅで単一スポット１（ｎ−ブタノール・酢酸 　ピリジン　Ｈ＊Ｏ＝４　：　１　：　１　：　２）　。Ｚ　Ｐｈｅ−ＤＬ−Ｌ ｙｓ　（Ｚ）−ＣＯＯＥｔは、Ｚ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ　（Ｚ）−ＯＨから先に記載 のようにして収率９％で調製した。Ｒ＋”＝０．６８　（ＣＨＣｌ　３：ＭｅＯ Ｈ＝９　：　１）；ＭＳ、ｍ／ｅ＝４８２　（Ｍ’）。 実施例ＰＫＣ２６ Ｈ−Ｌｅ　ｕ　−Ａ　Ｉ　ａ−ＤＬ−Ｌｙ　ｓ　−ＣＯＯＥ　ｔ　−２ＨＣ１こ の化合物は、実施例ＰＫＣ２０に記載の操作によって、Ｚ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｄ Ｌ−Ｌｙｓ　（Ｚ）−ＣＯＯＥｔから収率５２％で調製した。ｔｌｃで単一スポ ット（ｎ−ブタノール・酢酸：ピリジン：Ｈ２０＝４　＋　１・１：２）。 Ｚ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−ＤＬ−Ｌｙｓ　（Ｚ）−ＣＯＯＥｔは、先に記載のＤａ　 ｋ　ｉ　ｎ　−Ｗｅ　ｓ　を反応によって収率５％でＺ−Ｌｅｕ−Ａｌ　ａ−Ｄ Ｌ　−Ｌｙｓ　（Ｚ）−ＯＨから調製した。Ｒ，’＝０．３４　（ＣＨＣＬ：Ｍ ｅＯＨ＝１９１）：ＭＳ、ｍ、／ｅ＝６０９　（Ｍ”　０ＣＨ２ＣＨ−）。 実施例ＰＫＣ２７ 単純アミノ酸、ジーおよびトリペプチドエノールエステル類（一般的操作）Ｄａ ｋｉｎ−Ｗｅｓｔ改良法を用いて（Ｃｈａｒｌｅｓら１．１．　Ｃｈｅｍ、ＳＱ Ｃ，Ｐｅｒｋｉｎ　１．１１３９　（１９８０））、これをＺ−Ｌｅｕ−ＤＬ− Ｐｈｅ−ＥＥの合成で例示した。Ｚ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−ＯＨ（６，１９ｇ、１． ５゜０ｍｍｏ　ｌ）　、４−ジメチルアミノピリジン（０，１８３ｇ、１．５ｍ ｍｏ　ｌ）、およびピリジン（４，７５ｇ、４．８５ｍＬ、６０ｍｍｏｌ）の５ ０℃に加温したテｉ・ラヒドロフラン（４５ｍＬ）溶液に対して、エチルオキザ リルクロリド（４，３０ｇ、３．５２ｍＬ、３１．５ｍｍｏｌ）を還流を開始さ せるために十分な速度で添加した。この混合物を静かに４時間還流させ加温した 。室温に冷却後、混合物を水（２５ｍＬ）で処理し、さらに室温で３０分間強く 撹拌した。混合物を酢酸エチル（１５０ｍＬ）で抽出し、有機相を分離後、水相 を固体（ＮＨａ）　２Ｓｏ、で飽和させ、酢酸エチル２５ｍ１で２回、再抽出し た。有機相をまとめ、水７５ｍＬで２回、飽和ＮａＣ１５０ｍ１で２回洗浄し、 炭素で脱色し、Ｍｇ５Ｏ６で乾燥させた。溶媒を留去後、粗エノールエステル（ ８，３６ｇ、９８％）をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィにかけ、精製物 をＡｃ０Ｅｔで溶出した。溶媒を真空で留去しくローフエバポレータ）、純粋な エノールエステルを油状物（７，２２ｇ、８５％）として得た。ＴＬＣで単一ス ポット、Ｒ＋＝　０．　８４；Ａ；０．６８．Ｃ。 Ｚ−Ｌｅｕ−Ｎｖａ−ＥＥｏ本化合物は、一般的操作を用いてＺ−Ｌｅｕ−Ｎｖ ａ−ＯＨから調製し、ＣＨＣｌ５：ＭｅＯＨ＝５０：１　ｖ／ｖを溶出液として 用いたシリカゲルフラッシュクロマトグラフィで精製した。収率９５％、ＴＬＣ で単一スポットＲ１＝０．９２．ｃｏｏ、２８．Ｌ。 Ｚ−Ｌｅｕ−Ａｂｕ−ＥＥｏ本化合物は、上述の一般的操作を用いてＺ−Ｌｅｕ −Ａｂｕ−ＯＨから、収率７８％で調製した。シリカゲルフラッシュクロマトグ ラフィによる精製。溶出液、ＣＨＣｌ５：ＭｅＯＨ＝５０：ｌｖ／ｖ、ＴＬＣで 単一スポット、Ｒ＋＝０．８６．Ａ。 ＰｈＣ０−Ａｂｕ−ＥＥ、本化合物は、上述の一般的操作を用いＰｈＣ０−Ａｂ ｕ−ＯＨから、収率２６％で調製した。シリカゲルフラッシュクロマトグラフィ による精製。溶出液、ＣＨＣｌ、、ＴＬＣで単一スポット、Ｒ，＝０．６０．Ｍ 。 （ＣＨｓ）＝ＣＨ（ＣＨｔ）−Ｃｏ　Ａｂｕ−ＥＥ、本化合物は、上述の一般的 操作を用いて（ＣＩ４ｊ）−ＣＨ（ＣＨｔ）　２Ｃｏ　Ａｂｕ　ＯＨから、収率 ８２％で調製した。シリカゲルフラッシュクロマトグラフィによる精製。溶出液 、Ａｃ０Ｅｔ、ＴＬＣで単一スポット、Ｒ１＝０．７２．Ｃ。 （ＣＨ，ＣＨ２ＣＨｔ）ｚｃＨｃｏ　Ａｂｕ　ＥＥ、本化合物は、上述の一般的 操作を用いて（ＣＨ，ＣＨｔＣＨ＊）ｔｃＨｃｏ−Ａｂｕ　ＯＨから、収率１０ ０％で調製した。シリカゲルフラッシュクロマトグラフィによる精製。溶出液、 Ａｃ０Ｅｔ、ＴＬＣで単一スポット、Ｒ＋＝０．７８、Ｃ；０．８１．に０Ｐｈ 　（ＣＨ２）　＠ｃｏ−Ａｂｕ−ＥＥ、本化合物は、上述の一般的操作を用いて Ｐｈ　（ＣＨ２）ｓｃｏ　Ａｂｕ　ＯＨから、収率８６％で調製した。シリカゲ ルフラッシュクロマトグラフィによる精製。溶出液、Ａｃ０Ｅｔ、ＴＬＣで単一 スポット　Ｒ，＝０．　７４．　Ｃ０ Ｚ−Ｌｅｕ−４−ＣＩ−Ｐｈｅ−ＥＥ、本化合物は、上述の一般的操作を用いて Ｚ−Ｌｅｕ−４−ＣＩ−Ｐｈｅ−ＯＨから、収率６９％で調製した。シリカゲル フラッシュクロマトグラフィによる精製。溶出液、Ａｃ０Ｅｔ、ＴＬＣで単一ス ポット、Ｒｔ　＝　０　、　７７、Ｃ，０，７８、ＫｏＺ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ａ ｂｕ−ＥＥｏ　本化合物は、上述の一般的操作を用いてＺ２−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ− Ａｂｕ−ＯＨから、収率６２％で調製した。シリカゲルフラッシュクロマトグラ フィによる精製。溶出液、ＣＨＣｌ＝：ＭｅＯＨ＝５０１ｖ／ｖ、ＴＬＣで単一 スポット、Ｒ，＝０．８９．Ａ、０．７５、ＭｏＺ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ− ＥＥｏ　本化合物は、上述の一般的操作を用いてＺ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ− ＯＨから、収率６０％で調製した。シリカゲルフラッシュクロマトグラフィによ る精製。溶出液、ＣＨＣｌ　ｓ　：　Ｍｅ　ＯＨ＝　５０　：ｌｖ／ｖ、ＴＬＣ で単一スポット、Ｒ，＝０．８０．に、０．７０．Ｍ０２−ＮａｐＳＯｔ−Ｌｅ ｕ−Ｌｅｕ−Ａｂｕ−ＥＥａ　本化合物は、上述の一般的操作を用いて２−Ｎａ ｐＳＯｉ−Ｌｅｕ−Ａｂｕ−ＯＨから、収率７３％で調製した。シリカゲルフラ ッシュクロマトグラフィによる精製。溶出液、Ａｃ０Ｅｔ。 ＴＬＣで単一スポット、Ｒ，＝０．７１．に；０．５４．Ｃ０２−ＮａｐＳＯｚ ｌ−ｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｂｕ−ＥＥｏ　本化合物は、上述の一般的操作を用いて２ −ＮａｐＳＯｔ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｂｕ−ＯＨから、収率７４％で調製した。 シリカゲルフラッシュクロマトグラフィによる精製。溶出液、Ａｃ０Ｅｔ　：Ａ ｃ０Ｈ＝２００　：　ｉｖ／ｖ、ＴＬＣで単一スポット、Ｒ＋＝０．６９．に０ Ｚ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−ＣＯＯＥｔｏ　単一アミノ酸、ジーおよびトリペプチドケ トエステル類（一般的操作）。 ８．５３ｇ　（１５，０ｍｍｏｌ）のＺ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−ＥＥの無水エタノー ル４０ｍ１中室温の撹拌溶液に対して、２０．０ｍｌの無水エタノール中ナトリ ウムニドキサイド（０，２０４ｇ、３．０ｍｍｏｌ）の溶液を滴下した。反応混 合物の色は、無色または淡黄色から濃い黄色または橙々色にエノールエステルに 応じて変化する。次に、この反応混合物を室温で４−５時間撹拌し、エタノール を真空で蒸発させ（ロータエバポレータ）、残渣をエチルエーテル２００ｍ１　 （またはトリペプチドの場合は酢酸エチル２００ｍ１）で処理した。このエーテ ル（または酢酸エチル）溶液を水７５ｍＬで２回、飽和ＮａＣ１７５ｍ１で２回 洗浄し、炭素で脱色し、Ｍｇ５（Ｌで乾燥させた。溶媒を留去した後、粗生成物 ６゜０９ｇ　（８９，７％）をＣＨＣｌ３：ＭｅＯＨ＝５０　：　ｌｖ／ｖを用 いてシリカゲルフラッシュクロマトグラフィにかけた。溶媒を蒸発させ、純粋な Ｚ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−ＣＯＯＥｔを粘性の油状物として得た（４．０８ｇ、５８ ．０％）。ＴＬＣで単一スポット、Ｒ，＝０．６０、Ａ、０．４７、Ｍ０マスス ペクトル、ＦＢ−ＭＳ　（（Ｍ＋１）／Ｚ）＝４６９゜実施例ＰＫＣ２８ ２−Ｌｅｕ−Ｎｖａ−ＣＯＯＥｔ 本化合物は、上述の一般的操作を用いて調製した。シリカゲルフラッシュクロマ トグラフィによる精製。溶出液、ＣＨＣｌ＝：ＭｅＯＨ＝１００　：　ｌｖ／ｖ 、収率８６．６％、粘性の無色油状物、ＴＬＣで単一スポット、Ｒ，＝０．４９ ．Ａ；Ｍ０マススペクトル、ＦＢ−ＭＳ　（（Ｍ＋１）／Ｚ）＝４２１゜実施例 ＰＫＣ２９ Ｚ−Ｌｅ　ｎ−Ａｂｕ−ＣＯＯＥ　を 本化合物は、上述の一般的操作を用いて調製した。シリカゲルフラッシュクロマ トグラフィによる精製。溶出液、ＣＨＣｌ３．収率８２９６、粘性の淡黄色油状 物、ＴＬＣで単一スポット、Ｒ，＝０．６６、Ａ；マススペクトル、ＣＩ−ＭＳ （（Ｍ＋１）／Ｚ）＝４０７゜ 実施例ＰＫＣ３０ ＰｈＣＯ−Ａｂｕ−ＣＯＯＥｔ 本化合物は、上述の一般的操作を用いて調製した。シリカゲルフラッシュクロマ トグラフィによる精製。溶出液、ＣＩ（Ｃ１−：ＭｅＯＨ＝５０　：　ｌｖ／ｖ 、収率８３％、油状物、ＴＬＣで単一スポット、ＲＩ＝０．４４．Ｍ；マススペ クトル、Ｍ、、／Ｚ　２６３　（Ｍ’）：］−ＭＳ、２６４　（（Ｍ＋１）／Ｚ ）。 実施例ＰＫＣ３１ （ＣＨｌ）＝ＣＨ（ＣＨ＝）　２ＣＯ−Ａｂｕ−ＣＯＯＥｔ本化合物は、上述の 一般的操作を用いて調製した。シリカゲルフラッシュクロマトグラフィによる精 製。溶出液、ＡｅＯＥｔ、収率４３％、油状物、ＴＬＣで川−スポット、Ｒ，＝ ０．５６．Ｃ；マススペクトル、Ｅｌ−ＭＳ　Ｍ／Ｚ　２５７　（Ｍ’）：ＦＢ −ＭＳ、（（Ｍ＋１）／Ｚ）＝２５８゜実施例ＰＫＣ３２ ＣＨ＝ＣＨ＝ＣＨ）ｚｃＨｃＯＡｂｕ　Ｃ００Ｅｔ本化合物は、上述の一般的操 作を用いて調製した。シリカゲルフラッシュクロマトグラフィによる精製。溶出 液、ＣＨＣ１＝：ＭｅＯＨ＝５０　：　ｌｖ／ｖ、収率６６％、粘性の黄色状油 状物、ＴＬＣで単一スポット、Ｒ，＝、０．８０．Ｃ；０．６６、Ｍ０マススペ クトル、Ｅｌ−ＭＳ　Ｍ／Ｚ＝２８５　（Ｍ’）；（ｊ−ＭＳ、（（Ｍ＋１）／ Ｚ）＝２８６゜ 実施例ＰＫＣ３３ Ｐｈ　（ＣＨ２）ｅｃｏ−Ａｂｕ−ＣＯＯＥｔ本化合物は、上述の一般的操作を 用いて調製した。シリカゲルフラッシュクロマトグラフィによる精製。溶出液、 ＣＨＣｌ、：ＭｅＯＨ＝５０　：　ｌｖ／ｖ、収率６４％、淡黄色油状物、ＴＬ Ｃで単一スポット、Ｒ＋＝０．２９．Ｍ、マススペクトル、Ｅ　Ｉ−ＭＳ　Ｍ／ Ｚ＝３４７　（Ｍ＋）　、ＦＢ−ＭＳ、　（（Ｍ＋１）／Ｚ）＝３４８゜ 実施例ＰＫＣ３４ Ｚ−Ｌｅｕ−４−ＣＩ−Ｐｈｅ−ＣＯＯＥｔ、本化合物は、上述の一般的操作を 用いて調製した。シリカゲルフラッシュクロマトグラフィによる精製。溶出液、 Ａｃ０Ｅｔ、収率１００％、無色油状物、ＴＬＣで単一スポット、Ｒ，＝０．　 ７１゜Ｃ；マススペクトル、ＦＢ−ＭＳ、Ｍ／Ｚ＝５０３　（Ｍ＋）。 実施例ＰＫＣ３５ Ｚ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｂｕ−ＣＯＯＥｔ本化合物は、上述の一般的操作を用い て調製した。シリカゲルフラッシュクロマトグラフィによる精製。溶出液、ＣＨ Ｃ１＝：ＭｅＯＨ＝５０　：　ｌｖ／ｖ、収率７９．２％、極めて粘性の無色油 状物、ＴＬＣで単一スポット、Ｒ，＝０．　２８゜Ｍ：マススペクトル、ＦＢ− ＭＳ、（（Ｍ＋１）／Ｚ）＝５２０゜実施例ＰＫＣ３６ Ｚ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−ＣＯＯＥｔ本化合物は、上述の一般的操作を用い て調製した。シリカゲルフラッシュクロマトグラフィによる精製。溶出液、ＣＨ ＣＩ＝：ＭｅＯＨ＝５０　：　ｌｖ／ｖ、収率３３％、油状物、ＴＬＣで単一ス ポット、Ｒｔ＝０．　５６．　Ｍ　；マススペクトル、ＦＢ−ＭＳ、（（Ｍ＋１ ）／Ｚ）＝５８２゜実施例ＰＫＣ３７ ２−ＮａｐＳＯｇ−Ｌｅｕ−Ａｂｕ−ＣＯＯＥｔ本化合物は、上述の一般的操作 を用いて調製した。シリカゲルフラッシュクロマドグラフィによる精製。溶出液 、ＣＨＣｌ５：ＭｅＯＨ＝５０：ｌｖ／ｖ、収率３８％、粘性油状物、ＴＬＣで 単一スポット、Ｒ，＝０．　７１．　Ｋ、０．　５４．　Ａ０マススペクトル、 ＦＢ−ＭＳ、（（Ｍ＋１）／Ｚ）＝４６３゜実施例ＰＫＣ３８ ２−ＮａｐｓＯｚ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｂｕ−ＣＯＯＥｔ本化合物は、−に連の 一般的操作を用いて調製した。シリカゲルフラツシュクロマトグラフィニよる精 製。溶出液、ＡｅＯＥｔ　：Ａｃ０Ｈ＝２００　：　ｌｖ／ｖ。 収率６１％、半固体、ＴＬＣで単一スポット、Ｒ，＝０．６７、に：マススペク トル、ＦＢ−ＭＳ、（（Ｍ＋１）／Ｚ）＝５７６゜実施例ＰＫＣ３９ Ｚ−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−ＣＯｚＥｔ 本化合物は、−Ｌ述の操作を用いて調製した。黄色油状物、ＴＬＣで単一スポ・ ケト、Ｒ，＝０．５２　（ＣＨＣｌ３：ＣＨ，０Ｈ＝５０　：　１）、収率４６ ％（ジペプチドから）＋　ＭＳ　（ＦＡＢ）４５４　（ｍ＋１）。 実施例ＰＫＣ４０ Ｚ−Ｌｅｕ−ＮＬｅｕ−ＣＯＪｔ 本化合物は、１一連の操作を用いて調製した。淡黄色油状物、ＴＬＣで単一スポ ット、Ｒ，＝０．５７　（ＣＨＣｌ　３　：ＣＨＳＯＨ＝５０　：　ｌ）、収率 ５３％（ジペプチドから）　、ＭＳ　（ＦＡＢ）４３４　（ｍ＋１）。 実施例ＰＫＣ４１ ｎ−ブチルオキザリルクロリドの合成 これは、参考文献の操作によって調製した（ＷａｒｒｅｎおよびＭａｌｅｃ。 Ｊ、Ｃｈｒｏｍａｔ、６４．２１−２２２　（１９７２））、Ｎ−ブタノール（ ０゜１ｍｏ１．７．４１ｇ）を−１０℃でオキザリルクロリドに滴下した。添加 完了後、反応混合物を室温で２０分撹拌し、蒸留し、生成物ｎ−ブチルオキザリ ルクロリド、沸点５８−６０℃（０，６ｍｍ　Ｈｇ）を１５．０ｇ　（９１，１ ８ｍ。 １．９１％）、得た。 Ｚ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−ＣＯＪｕａ本化合物は、Ｚ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−ＯＨおよび ブチルオキザリルクロリドからＺ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−ＣＯｚＥｔの合成について 記載した操作によって収率４３％で得た。ただし、ブチルオキザリルクロリドを エチルオキザリルクロリドの代わりに使用し、かつ、ブタノール中ナトリウムブ チロキサイドをエノールエステル加水分解に使用した。ＴＬＣで単一スポ・ケト 。 Ｒ＋＝０．５４　（ＣＨＣＩｓ：ＣＨｓＯＨ＝５０　：　ｌ）　、ＭＳ　（ＦＡ Ｂ）ｍ／ｅ＝４９７　（ｍ＋１）　、’ＨＮＭＲ（ＣＤＣＩ＝）ｏｋ０実施例Ｐ ＫＣ４２ Ｚ−Ｌｅｕ−Ａｂｕ−ＣＯｔＢｕ 本化合物は、上述の操作を用いて調製した。ＴＬＣで単一スボ・ノド、Ｒ，＝０ ．５３　（ＣＨＣＩ、・ＣＨ，０Ｈ＝５０　：　ｌ）、収率３６％、淡黄色油状 物、ＭＳ　（ＦＡＢ）ｍ／ｅ＝４３５　（ｍ＋１）　、’ＨＮＭＲ（ＣＤＣ１， ）ｏｋ。 実施例ＰＫＣ４３ ベンジルオキザリルクロリドの合成。ベンジルアルコール（０，１５ｍｏｌ。 １６ｇ）を５−１０℃でオキザリルクロリドに滴下した。添加完了後、反応混合 物を室温で２０分撹拌した。過剰のオキザリルクロリドを蒸留し、再使用した。 その後、混合物を真空中で蒸留し、ベンジルオキザリルクロリド、沸点１１０− １１２℃（０，６ｍｍ−Ｈｇ）を２６ｇ　（０，１，２ｍｏｌ、８６％）を得た 。Ｈ’　ＮＭＲ（ＣＤＣＩ＝）７．３９　（ｓ、５Ｈ）、５．３３　（ｓ、２Ｈ ）。 Ｚ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−Ｃｏ！ＢＺ　１６本化合物は、Ｚ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−ＯＨ およびブチルオキザリルクロリドからＺ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−ＣＯｚＥｔの合成に ついて記載した操作によって、収率１７％で得た。ただし、ブチルオキザリルク ロリドをエチルオキザリルクロリドの代わりに使用し、かつ、ベンジルアルコー ル中ナトリウムベンジルオキサイドをエノールエステル加水分解に使用した。Ｔ ＬＣで単一スポット、ＲＩ＝０．６３　（ＣＨＣＩｓ：ＣＨ，０Ｈ＝５０　：　 １）、淡黄色固体、融点１１７−１１９℃。ＭＳ　（ＦＡＢ）ｍ／ｅ＝５３２　 （ｍ＋１）　、Ｈ’　ＮＭＲｏｋ。 実施例ＰＫＣ４４ Ｚ−Ｌｅｕ−Ａｂｕ−ＣＯ２ＢＺ　１ 本化合物は、上述の操作を用いて調製した。ＴＬＣで単一スポ・ケト、Ｒ，＝０ ゜５１　（ＣＨＣ１，：　ＣＨ３０Ｈ−５０：　１）、淡黄色油状物、ＭＳ　（ ＦＡＢ）ｍ／ｅ＝４６９　（ｍ＋１）　、収率＝２６％。 実施例ＰＫＣ４５ Ｚ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−ＣＯＯＨ０ジペプチドケト酸類（一般的操作）Ｚ−Ｌｅｕ −Ｐｈｅ−ＣＯＯＥｔ　Ｏ，５３ｇ（１，１３ｍｍｏｌ）のメタノール６０ｍｌ 中撹拌溶液に対して、ＬＭ　ＮａＯＨ１，２７ｍ１　（１，２７ｍｍｏｌ）を添 加した。反応混合物の色が濃い黄色に変化し、少量の固体力（析出した。反応を 室温で行い加水分解の進行をＴＬＣで調べた。２４時間後、基質力くそれ以−Ｌ 検出されなくなった。反応混合物を５℃の水浴で冷却し、ＩＭＭＣＩでｐＨ＝３ まで酸性にし、Ａｃ０Ｅｔで抽出した（２×５０ｍｌ）。有機抽出物をＨｙＯ５ ０ｍ１で２回洗浄し、もし必要であれば炭素で脱色し、ＭｇＳＯ４で乾燥させた 。溶媒留去後（ロータエバポレータ）、残渣（粘性油状物）をｎ−ヘキサン２５ ｍ１で２回テイチュレート（ｔ　ｉ　ｔｕｒａｔｅ）Ｌ／、真空中で乾燥させた 。収率０．３９ｇ　（７８％）、無色極めて粘性の油状物。ＴＬＣ、メインスボ ントはＲ＋＝０．２４．Ｒ＋＝０．７８．１に微量の不純物。マススペクトル、 ＦＢ−ＭＳ　（（Ｍ＋１）、／Ｚ）＝４４１゜実施例ＰＫＣ４６ Ｚ−Ｌｅｕ−Ａｂｕ−ＣＯＯＨ 本化合物は、Ｚ−Ｌ−Ｌｅｕ−Ａｂｕ−ＣＯＯＥｔから上述の一般的操作を用い て収率８３％で調製した。ＴＬＣ、メインスポ・ケトはＲ１＝０．１４．　Ｒ， ＝０７３、■に微量の不純物。マススペクトル、ＦＢ−ＭＳ　（（Ｍ＋１）／Ｚ ）＝３７９゜ 実施例ＰＫＣ４７ Ｚ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−ＣＯＮＨ−Ｅｔ Ｚ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−ＯＨ（２０ｇ、４８．５ｍｍｏ　ｌｅ）　、４−ジメチル アミノピリジン（０，５８７ｇ、４．８ｍｍｏｌｅＬおよびピリジン（１５，７ ｇ、１９４ｍｍｏ　ｌ　ｅ）のＴＨＦ　（１００ｍＬ）溶液に対して、攪拌しな がらエチルオキザリルクロリド（１１，４ｍｌ、１０１．８ｍｍｏｌｅ）を還流 を開始させるために十分な速度で添加した。この混合物を静かに４時間還流させ 、室温に冷却後、水（８０ｍ　ｌ　）を添加した。反応混合物をさらに３０分間 激しく撹拌し、酢酸エチル（３ｘ　１００ｍＬ）で抽出した。有機相をまとめて 水（２×１００ｍｌ）、飽和塩化ナトリウム（２×１００ｍｌ）で洗浄後、脱色 用炭素で脱色し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、さらに濃縮し、濃い橙々色の油 状物を得た。 ＣＨＣ１，：　ＣＨ＝ＯＨ（５０：　ｌ　ｖ／ｖ）によるシリカゲルフラッシュ クロマトグラフィで、Ｚ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−エノールエステル１４．６３ｇ　（ ｙ＝５３％）を得た。生成物は、黄色油状物であった。ＴＬＣで単一スポットＲ ，＝０．７７　（ＣＨＣＬ／ＣＨ，ＯＨ５０：　１）。ＮＭＲ（ＣＤ　ＣＩ　ｓ ）　ｏ　ｋｏＺ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−エノールエステル（１４，６３ｇ、２５．７ ３ｍｍｏｌｅ）の無水エタノール（５０ｍ　ｌ　）中淡黄色溶液に対して、撹拌 しながらナトリウムエトキサイド（０，１７７ｇ、２．６ｍｍｏｌｅ）のエタノ ール（５ｍｌ）溶液を添加した。橙々色の溶液を室温で３時間撹拌し、次にエタ ノールを蒸発させ、残渣をエチルエーテル（３００ｍｌ）で処理した。エーテル 相を水（２×１００ｍ１）、飽和塩化ナトリウム（２×１００ｍｌ）で洗浄し、 硫酸マグネシウムで乾燥させ、さらに、濃縮し、橙々色の油状物を得た。ＣＨＣ ＩＳ：　ＣＨ，０Ｈ（５０：１　ｖ／ｖ）によるシリカゲルフラッシュクロマト グラフィで、α−ケトエステル、Ｚ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−ＣＯＯＥｔ７．７６ｇ　 （Ｙ＝６４％）を得た。 生成物は、黄色油状物であった。ＴＬＣで単一スポット、Ｒ，＝０．　４４（Ｃ ＨＣｌ　＝／　ＣＨ３ＯＨ５０：　ｌ　）　。ＮＭＲ（ＣＤ　ＣＩ　ｓ）　ｏ　 ｋ、　ＭＳ　（Ｆ　ＡＢ。 Ｃｔ　＠Ｈ＝　＝　Ｎ　２０−の理論値：　４６８．６）　、ｍ／ｅ＝４６９　 （Ｍ＋１）。 Ｚ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−ＣＯＯＥｔのα−カルボニル基は下記の操作によって介護 した。Ｚ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−ＣＯＯＥｔ　（Ｉｇ、２．１３ｍｍｏｌｅ）のＣ１ （ｔｃｌｉ　５ｍｌｍｌ液溶液、、２−Ｊタンジチオール（０，２１４ｒｎ１． 　２゜５５ｍｍｏ　ｌ　ｅ）に添加後、０．５ｍｌのポロントリフルオリドエー テルｌ／−トを添加した。この溶液を室温で一晩撹拌した。水（２０ｍｌ）およ びエチルエーテル（２０ｍｌ）を添加した。有機相を分離し、水（２Ｘ１０ｍｌ ）、飽和塩化ナトリウム（２Ｘ１０ｍｌ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥さ せ、蒸発さぜ、黄色半固体０．９８ｇ　（ｙ＝８４９６）を得た。 保護したα−ケトエステル（０，９８ｇ、１．８ｍｍｏ　ｌ　ｅ）をエタノール （５ｍｌ）に溶解し、水浴で０−５℃に冷却し、エチルアミン２．　４３ｇ　（ ５４ｍｍｏ　ｌ　ｅ）が添加されるまで本溶液に泡状に入れた。反応混合物を室 温までゆっくりと加温し、−晩撹拌した。混合物をろ過し、白色沈澱物を濾去し 、黄色半固体が得られた。ＣＨＣｌ５：ｃＨｓＯＨ（３０：　１　ｖ／ｖ）によ るシリカゲルフラッシュクロマトグラフィで、Ｚ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−ＣＯＮＨ− Ｅｔが　０゜６３ｇ　（ｙ＝７５％）得られた。生成物は、淡黄色固体であった 。ＴＬＣで単一スポット、Ｒｔ−０，６０（ＣＨＣＩｓ／ＣＨ−ＯＨ２０：　１ ）；融点、１４５−１４７℃。元素分析、Ｃ２５ＨｓｓＮｓＯ＊：　４６７．５ ６の理論値；ｃ、６６、　７９、Ｈ，７，１１、Ｎ、８．　９９、実験値；ｃ、 ６６、　５９．Ｈ，７，０９：Ｎ。 ８．９５゜ＮＭＲ（ＣＤＣＬ）ｏｋ、ＭＳ　（ＦＡＢ）ｍ／ｅ＝４６８　（Ｍ＋ １）。 実施例ＰＫＣ４８ Ｚ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−ＣＯＮＨ−ｎＰｒ本化合物は、保護α−ケトエステルおよ びプロピルアミンからから実施例ＰＫＣ４７に記載の操作によって収率９２％で 得られた。ＴＬＣで単一スポット、Ｒ，＝０．５０　（ＣＨＣＩｓ／ＣＨｓＯＨ ５０：ｌ）、淡黄色固体、融点１５２−１５３℃。元素分析、Ｃ２，Ｈ３ｓＮ、 Ｏｓ　：　４８１．　５７の理論値；ｃ、６７、　３３、Ｈ，７，３３，Ｎ、８ ．　７２、実験値；ｃ、６７、　２１：Ｈ，７，３８＋Ｎ。 ８．６４゜ＮＭＲ（ＣＤＣＩ＝）ｏｋＩ、ＭＳ　（ＦＡＢ）ｍ／ｅ＝４８２　（ Ｍ＋１）。 実施例ＰＫＣ４９ Ｚ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−ＣＯＮＨ−ｎＢｕ本化合物は、保護α−ケトエステルおよ びブチルアミンからから実施例Ｐ　Ｘ＜　Ｃ４７に記載の操作によって収率６７ ％で得られた。ＴＬＣで単一・スポットＲ，＝０．５０　（ＣＨＣＩ集／’ＣＨ ＊ＯＨ５０：　１）；融点１５２−１５３℃。元素分析、Ｃｚ＊ＨｓｔＮｓＯａ 　：　４９５．　５９の理論値；Ｃ，６７，８５；Ｈ，７，５２゜Ｎ、８．　４ ８、実験値：ｅ、６７．７０：Ｈ，７，５７；Ｎ、８．４３゜ＮＭＲ（ＣＤＣＩ ｓ）ｏｋ６ＭＳ　（ＦＡＢ）ｍ／ｅ＝４９６　（Ｍ＋１）。 実施例ＰＫＣ５０ Ｚ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−ＣＯＮＨ−ｉＢｕ本化合物は、保護α−ケトエステルおよ びイソブチルアミンからから実施例ＰＫＣ４７に記載の操作によって収率５３％ で得られた。ＴＬＣで単一スポット、Ｒ＋＝０．５４　（ＣＨＣｌ、／ＣＨ，Ｏ Ｈ５０：１）：融点１５２℃。元素分析、Ｃ−＊Ｈ−ＴＮ−Ｏｓ：　４９５．５ ９の理論値；ｃ、６７、　８５　、Ｈ，７，５２：Ｎ。 ８．４８、実験値；ｃ、６７．７７゜ Ｈ，７，５６，Ｎ、８．　４０゜ＮＭＲ（ＣＤＣＩ−）ｏｋ、ＭＳ　（ＦＡＢ） ｍ／ｅ＝４９６（Ｍ＋１）。 実施例ＰＫＣ５１ Ｚ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−ＣＯＮＨ−Ｂｚ　１本化合物は、保護α−ケトエステルお よびベンジルアミンからから実施例ＰＫＣ４７に記載の操作によって収率４０％ で得られた。−晩反応させた後、酢酸エチル（６０ｍｌ）を添加した。混合物を ろ過し白色沈澱物を濾去した。溶液を冷却したＩＮ　ＭＣＩ　（３Ｘ２５ｍｌＬ 水（１ｘ２０ｍｌ）　、飽和塩化ナトリウム（２Ｘ　２０ｍ　ｌ　）で洗浄し、 硫酸マグネシウムで乾燥させた。溶液を蒸発させ、黄色固体を得た。ＣＨＣｌ３ ：　ＣＨ，０Ｈ＝３０・１　ｖ／ｖによるシルカゲルカラムクロマトグラフィで 黄色固体を得た。ＴＬＣで単一スポット、Ｒ＋＝０．　４５（ＣＨＣｌ、／ＣＨ ，ＯＨ３０：１）；融点１６０−１６２℃。元素分析、Ｃ，、Ｈ，、Ｎ、０６　 ：　５２９．　６１の理論値；ｃ、７０．３０．Ｈ，６，６６；Ｎ。 ７９３、実験値：ｃ、７０．　１８；Ｈ，６，６７、Ｎ、　７．　９９゜ＮＭＲ （ＣＤＣＩ＋）ｏｋｏＭＳ　（ＦＡＢ）ｍ／ｅ＝５３０　（Ｍ＋１）。 実施例ＰＫＣ５２ Ｚ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−ＣＯＮＨ−（ＣＨ２）＝Ｐｈ本化合物は、保護α−ケトエ ステルおよびフェネチルアミンから実施例ＰＫＣ５１に記載の操作によって収率 ５０％で得られた。ＴＬＣで単一スポット、Ｒ＋＝０．５０　（ＣＨＣＩｓ／Ｃ ＨｓＯＨ３０：　ｌ）：融点１５１−１５３℃。元素分析、Ｃ３２Ｈｊ７ＮＳ０ ８：　５４３．６６の理論値、Ｃ１７０，７０；Ｈ，６，８６：Ｎ、７．　７３ 、実験値：ｃ、７０．５４；Ｈ，６，８８；Ｎ、７．７４゜ＮＭＲ（ＣＤＣ１ｓ ）ｏｋｏＭＳ　（ＦＡＢ）ｍ／ｅ＝５４４　（Ｍ＋１）。 実施例ＰＫＣ５３ Ｚ−Ｌｅｕ−Ａｂｕ−ＣＯＮＨ−Ｅｔ 本化合物は、Ｚ−Ｌｅｕ−Ａｂｕ−ＣＯｚＥｔ由来の保護α−ケトエステルおよ びエチルアミンから実施例ＰＫＣ４７に記載の操作によって収率６４％で得られ た。ＴＬＣで単一スポット、Ｒ，＝０．３６　（ＣＨＣｌ、／ＣＨ３０Ｈ５０： 　ｌ）、融点１３０−１３２℃。元素分析、Ｃ２１Ｈ−１Ｎ−０６：　４０５． 　４５の理論値。 Ｃ，６２，２０、Ｈ，７，７１：Ｎ、ｉｏ、３６、実験値：Ｃ，６１，９２；Ｈ 。 ７．６２．Ｎ、１０．３１゜ＮＭＲ（ＣＤＣＩｓ）ｏｋ、ＭＳ　（ＦＡＢ）ｍ／ ｅ＝１０６（Ｍ＋１）。 実施例ＰＫＣ５４ Ｚ−Ｌｅｕ−Ａｂｕ−ＣＯＮＨ−ｎＰｒ本化合物は、対応する保護α−ケトエス テルおよびプロピルアミンから実施例ＰＫＣ４７に記載の操作によって収率４７ ％で得られた。ＴＬＣで単一スポット、Ｒ，＝０．２８　（ＣＨＣＩ、、、／Ｃ Ｈ，ＯＨ５０：　１）；融点１３４−１３５℃。元素分析、Ｃ２，Ｈ，、Ｎ、０ ６　：　４１９．　５０の理論値：ｃ、６２．　９８．Ｈ。 ７．９３：Ｎ、１０．０２、実験値；ｃ、６２．　８４　：Ｈ，７，９７；Ｎ。 ９．９４．ＮＭＲ（ＣＤＣ１，）ｏｋｏＭＳ　（ＦＡＢ）ｍ／ｅ＝４２０　（Ｍ ＋１）。 実施例ＰＫＣ５５ Ｚ−Ｌｅｕ−Ａｂｕ−ＣＯＮＨ−ｎＢｕ本化合物は、対応する保護α−ケトエス テルおよびブチルアミンから実施例ＰＫＣ４７に記載の操作によって収率４２％ で得られた。ＴＬＣで単一スポット、Ｒｔ＝０．５４　（ＣＨＣｌ、／ＣＨｓＯ Ｈ５０：　１）；融点１３５−１３６℃。元素分析、Ｃ２５ＨｓｓＮ−Ｏｈ　： 　４３３．　５３の理論値；ｃ、６３．　７１．Ｈ，８，１３、Ｎ、９．６９、 実験値：ｃ、６３．４８：Ｈ，８，０７，Ｎ、９．６７゜ＮＭＲ（ＣＤＣ１，） ｏｋｏＭＳ　（ＦＡＢ）ｍ／ｅ＝４３４　（Ｍ＋１）。 実施例ＰＫＣ５６ Ｚ−Ｌｅｕ−Ａｂｕ−ＣＯＮＨ−ｉＢｕ本化合物は、対応する保護α−ケトエス テルおよびイソブチルアミンからから実施例ＰＫＣ４７に記載の操作によって収 率６５％で得られた。ＴＬＣで単一スポット、Ｒ，＝０．２５　（ＣＨＣＩｓ／ ＣＨｓＯＨ５０：　１）；融点１３３−１３５℃。元素分析、ＣｚｓＨ−ｓＮ＊ Ｏｓ：　４３３．５２の理論値：ｃ、６３．７２；）（。 ８．１４：Ｎ、９．６９、実験値：Ｃ，６３，４６；Ｈ，８，１０，Ｎ、９．　 ６０゜ＮＭＲ（ＣＤＣＩ＝）ｏｋ、ＭＳ　（ＦＡＢ）ｍ／ｅ＝４３４　（Ｍ＋１ ）。 実施例ＰＫＣ５７ Ｚ−Ｌｅｕ−Ａｂｕ−ＣＯＮＨ−Ｂｚ　Ｉ本化合物は、対応する保護α−ケトエ ステルおよびベンジルアミンから実施例ＰＫＣ５１に記載の操作によって収率２ ９％で得られた。ＴＬＣで単一スポット、ＲＩ＝０．５６　（ＣＨＣｌ、／ＣＨ ３０Ｈ３０：ｌ）；融点１４０−１４１℃。元素分析、−Ｃ，、Ｈ，、Ｎ、Ｏ８ ：　４６７．　５４の理論値；ｃ、６６、　７９．）（、７，１１、Ｎ、８．　 ９９、実験値；ｃ、６６．６５；Ｈ，７，０７，Ｎ、８．９３゜ＮＭＲ（ＣＤＣ Ｉ　、）ｏｋｏＭＳ　（ＦＡＢ）ｍ／ｅ＝４６８　（Ｍ＋１）。 実施例ＰＫＣ５８ Ｚ　Ｌ　ｅ　ｕ　Ａｂ　ｕ　Ｃ０ＮＨ（ＣＨ２）　ｚＰ　ｈ本化合物は、対応す る保護α−ケトエステルおよびフェネチルアミンから実施例ＰＫＣ５１に記載の 操作によって収率５１％で得られた。ＴＬＣで単一スポット、Ｒ１＝０．４４　 （ＣＨＣｌ、／ＣＨ，ＯＨ３０：１）：融点１５６−１５７℃。 元素分析、Ｃ２，Ｈ−ｓＮ−Ｏｓ　：　４８１．　５９の理論値；ｅ、６７、　 ３４　、Ｈ，７゜３３　、Ｎ、８．　７２、実験値；ｃ、６７．３８；Ｈ，７， ３３，Ｎ、８．７８゜ＮＭＲ（ＣＤＣＩ、）ｏｋ、ＭＳ　（ＦＡＢ）ｍ／ｅ＝４ ８２　（Ｍ＋１）。 実施例ＰＫＣ５９ Ｚ−Ｌｅｕ−Ａｂｕ−ＣＯＮＨ−（ＣＨＩ）ｓ−Ｎ　（ＣＨ２ＣＨり　２０本化 合物は、対応する保護α−ケトエステルおよび４−（３−アミノプロピル）モル ホリンから、実施例ＰＫＣ４７に記載の操作によって収率３３％で得られた。 −晩反応させた後、酢酸エチル（８０ｍｌ）を添加した。混合物をろ過し白色沈 澱物を濾去した。溶液を水（３Ｘ２０ｍｌ）、飽和塩化ナトリウム（２Ｘ２０ｍ ｊ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させた。溶液を蒸発させ、黄色油状物を 得た。ＣＨＣｌ＋：ＣＨｓＯＨ＝１０：１　ｖ／ｖによるシルカゲルカラムクロ マトグラフィで黄色半固体を得、これを酢酸エチル／ヘキサンから再結晶し、淡 黄色固体を得た。Ｔ　Ｌ　Ｃで単一スポット、Ｒ，＝０．４２　（ＣＨＣＩｓ／ ＣＨり０Ｈ１０：１）：融点１２５〜１２６℃。元素分析、Ｃｔ　ｓ　Ｈ４゜Ｎ ４０＠：５０４．６３の理論値：ｃ、６１．　８８：Ｈ０７，９９：Ｎ、１１． １０、実験値：ｃ、ａｉ。 ６９；Ｈ，７，９５；Ｎ、１１．０７゜ＮＭＲ（ＣＤ　Ｃｌ　ｓ）　ｏ　ｋ６Ｍ Ｓ　（Ｆ　ＡＢ）ｍ／ｅ＝５０５　（Ｍ＋１）。 実施例ＰＫＣ６０ Ｚ−Ｌｅｕ−Ａｂｕ−ＣＯＮＨ−（ＣＨｚ）ｔＣＨ。 本化合物は、対応する保護α−ケトエステルおよびオクチルアミンから実施例Ｐ ＫＣ５１に記載の操作によって収率６７％で得られた。ＴＬＣで単一スポット、 ＲＩ＝Ｑ、５５　（ＣＨＣｌ、／ＣＨｓＯＨ３０：１）；融点１３４−１３５℃ 。元素分析、Ｃ，、Ｈ，ＩＮ、０．：４８９．６６の理論値；ｃ、６６、　２３ ．Ｈ，８，８５、Ｎ、８．５８、実験値；ｃ、６ｓ、１９；Ｈ，ｓ、８１．Ｎ、 ８．６１゜ＮＭＲ（ＣＤＣＩｓ）ｏｋ、、ＭＳ　（ＦＡＢ）ｍ／ｅ＝４９０　（ Ｍ＋１）。 実施例ＰＫＣ６１ Ｚ−Ｌｅｕ−Ａｂｕ−ＣＯＮＨ−（ＣＨｚ）ｘＯＨ本化合物は、対応する保護α −ケトエステルおよびエタノールアミンからから、実施例ＰＫＣ５９に記載の操 作によって収率２９％で得られた。生成物は、白色粘着性の固体であった。ＴＬ Ｃで単一スポット、Ｒｔ＝０．４２　（ＣＨＣＩｓ／ＣＨ，ＯＨ１０：１）；融 点１５１−１５３℃。元素分析、Ｃ！　ｌ　Ｈｓ　ＩＮＮＯ３：４２１．４９の 理論値：Ｃ，５９，８４：Ｈ，’ｙ、４１　；Ｎ、９．　９７、実験値：Ｃ９５ ９、１１：Ｈ，７，４４：Ｎ、９．　８１゜ＮＭＲ（ＣＤＣ！ｓ）ｏｋｏＭＳ　 （ＦＡＢ）ｍ／ｅ＝４２２　（Ｍ＋１）。 実施例ＰＫＣ６２ Ｚ−Ｌｅｕ−Ａｂｕ−ＣＯＮＨ−（ＣＨ２）２０　（ＣＨ２）ｔＯＨ本化合物は 、対応する保護α−ケトエステルおよび２−（２−アミノエトキシ）エタノール から、実施例ＰＫＣ５９に記載の操作によって収率３４％で得られた。 生成物は、白色粘着性の固体であった。ＴＬＣで単一スポット、Ｒ＋＝０．　４ ２（ＣＨＣＩ、／ＣＨ，ＯＨ１０：１）；融点１０３−１０５℃。元素分析、Ｃ ｚ３Ｈ−ｓＮｓＯｌ：　４６５．５５の理論値：ｃ、５９．　３４　、Ｈ，７， ５８；Ｎ。 ９．０３、実験値：Ｃ，５９，２３、Ｈ，７，５８：Ｎ、９．　０１゜ＮＭＲ（ ＣＤＣＩｓ）ｏｋ、ＭＳ　（ＦＡＢ）ｍ／ｅ＝４６６　（Ｍ＋１）。 実施例ＰＫＣ６３ Ｚ−Ｌｅｕ−Ａｂｕ−ＣＯＮＨ−（ＣＨ−）＋−ＣＨ一本化合物は、対応する保 護α−ケトエステルおよびオクタデシルアミンから、実施例ＰＫＣ５１に記載の 操作によって収率１２％で得られた。生成物は、淡黄色固体であった。Ｔ　Ｌ　 Ｃで単一スポット、Ｒ，＝０．５４　（ＣＨＣＩ、／ＣＨＩＯＨ３０：１）；融 点１３４−１３６℃。元素分析、Ｃ−７８＠５Ｎ−Ｏｓ＋　６２９．９２の理論 値：Ｃ，７０，５５，１上　１０．０８；Ｎ、６．６７、実験値：Ｃ１７０，７ １；Ｈ，１０，１４，Ｎ、６．７５゜ＮＭＲ（ＣＤＣｌ　ｓ）　ｏ　ｋｏＭＳ　 （ＦＡＢ）ｍ、’ｅ＝６３０．２　（Ｍ＋１）。 実施例ＰＫＣ６４ Ｚ−Ｌｅｕ−Ａｂｕ−ＣＯＮＨ−ＣＨ＝−Ｃ＠Ｈｓ　（ＯＣＲ＝）２本化合物は 、対応する保護α−ケトエステルおよび３．５−ジメｉ・キシベンジルアミンか ら、実施例ＰＫＣ５１に記載の操作によって収率４５％で得られた。 生成物は、黄色粘着性の固体であった。ＴＬＣで単一スポット、Ｒ＋＝０．　４ ４（ＣＨＣＩｓ／”ＣＨ，ＯＨ３０：　１）；融点１５３−１５５℃。元素分析 、Ｃｘ５Ｈｓ−Ｎｓ（）ｙ　：　５２７．　６２の理論値；ｅ、６３．　７４． Ｈ，７，０７，Ｎ。 ７９６、実験値：ｅ、６３．６６；Ｈ，７，０９，Ｎ、７．９２゜ＮＭＲ（ＣＤ ＣＩ＋）ｏｋｏＭＳ　（ＦＡＢ）ｍ／ｅ＝５２８．８　（Ｍ＋１）。 実施例ＰＫＣ６５ Ｚ−Ｌｅｕ−Ａｂｕ−ＣＯＮＨ−ＣＨ２−Ｃ４１ＬＮ本化合物は、対応する保護 α−ケトエステルおよび４−（４−アミノメチル）ピリジンから、実施例ＰＫＣ ５９に記載の操作によって収率４５％で得られた。 生成物は、緑黄色固体であった。ＴＬＣで単一スポット、Ｒ１＝０．５５　（Ｃ ＨＣｌ、／ＣＨ，ＯＨ１０・１）、融点１２４（２６℃。元素分析、Ｃ２６Ｈ， 、Ｎ、０６　：　４６８．　５５の理論値；ｃ、６４．　０８．Ｈ，６，８８： Ｎ。 １１．９６、実験値；ｃ、６３．８８．Ｈ，６，８７，Ｎ、１１．９６゜ＮＭＲ （ＣＤＣＩ３）ｏｋ６ＭＳ　（ＦＡＢ）ｍ／ｅ＝４６９　（Ｍ＋１）。 Ｄ、二見ケ土ンベプ±下量 ハロメチルケトンペプチド類は、セリンプロテアーゼ類およびシスティンプロテ アーゼ類の不可逆性阻害剤類である。この属の化合物類として、Ｃ末端に種々の ハロメチル基類を有するペプチド類が挙げられる。これらのハロメチル基類とし て、−ＣＨ２Ｘ−１ＣＨＩ２−およびＣＬ　（式中、Ｘは、全てのハロゲンを示 す）が挙げられる。いくつかのアナログ化合物類が合成されており、アミノハロ ケトン類およびジアゾケトンペプチド類が挙げられる。これらのアナログ化合物 類は化学的に識別できるが、これらのハロケトン化合物類の全てが、類似の作用 機作を有していると考えられている。したがって、簡単にするため、上記の化合 物類全てを本文でまとめて“ハロケトンペプチド類”と称することにする。 ハロケトン類の反応性は、一般にＩ　＞Ｂ　ｒ　＞ＣＩ　＞Ｆであることがわか っている。しかし、このようにハロケトン類の反応性を高めることによって、競 合性副反応を加速することになる。したがって、ハロメチルケトンペプチド類の 反応性をペプチド構造を改変することによって増強することが好適である。 カルパインの適当な阻害剤を選択する際、ペプチドケト化合物類に使用したもの と同一の塩基性ペプチド構造選択法を使用することができる。いったんペプチド 構造が同定されれば、最も有効なＣ末端基類を、カルパインによるこれらの化合 物のそれぞれの阻害動態研究によって経験的にめることができる。 ハロケトンペプチド類の多くが市販されている。たとえば、は）全て、Ｅｎｚｙ ｍｅ　Ｓｙｓｔｅｍｓ　Ｐｒｏｄｕｃｔｓ　ｏｆ　Ｌｉｖｅｒｍｏｒｅ、Ｃａ１ ｉｆｏｒｎｉａのような業者から入手できる。同一業者から、下記のジアゾメチ ルケトンペプチド類が入手可能さらに、α−アミノフルオロケトンペプチド類の 製造は、Ｄａｖｉｄ　Ｗ、Ｒａ５ｎｉｃｋ、米国特許第４．５１８．５２８号に 記載されており、これは、本文で参考として引用した。 種々のハロケトンペプチド類の調製は、恥旦邸糊」川Ｅｎｇ＋ｏｃ＋−４−４６ ：　１９７−２０８（１９７７８）にレビ、−されており、これは本文で参考と して引用した。簡単に述べると、ブロックアミノ酸類のハロメチルケトン誘導体 類は鉱酸（ハロゲン化水素）と対応するジアゾメチルケトンとの反応によって容 易に調製される。ヨードメチルケトン類は、ハロケトンとＮａ［との反応によっ て調製され、その理由として、Ｈｌとジアゾメチルケトンとの反応によってメヂ ルゲトンが生成することが挙げられる。いくつかの異なるブロック基類が、ベン ジルオキシカルボニル（Ｚ）およびｔ−ブチルオキシカルボニル（Ｂｏｅ）を含 めて使用できる。前記ジアゾメチルケトンは、ジアゾメタンとジシクロへキシル カルボジイミド（ＤＣＣＩ）によって活性化された適当な酸との反応によって、 混合無水物方法で調製される。 非ブロツクアミノ酸クロロメチルケトン類は、ベンジルオキシカルボニルブロッ ク誘導体類とＨＢｒまたはＨＯＡｃ、　トリフルオロ酢酸との反応によって、ま たは水素化によって調製できる。 ペプチドクロロメチルケトン類の合成は、適当なペプチドまたはアミノ酸を非ブ ロツクアミノ酸クロロメチルケトンと単純にカップリングさせて達成可能である 。いくつかのジペプチドは、混合無水物およびＣＨ２Ｎ２および次にＨＣＩを用 いてクロロメチルケトンに直接変換できる。 種々の合成−Ｌの問題は、塩基性アミノ酸類のクロロメチルケトン誘導体類の調 製で生じる。この側鎖は、通常、合成時にブロックしなければならず、ブロック 基の除去時にしばしば困難が生じる。トリフルオロ酢酸またはＨＦの使用が、最 終的に生成物への変換を良好に行うことが見いだされた。 ハロケトンペプチド類の調製のいくつかの例が文献に報告されており、Ｊ、Ｃ。 Ｐｏｗｅｒｓ、　”Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　ａｎｄ　Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　 ｏｆ　Ａｍ１ｎｏ　Ａｃ１ｄｓ、ＰｅｐｔｉｄｅｓＳａｎｄ@Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ”、 Ｖｏｌ、　４．　Ｄｅｋｋｅｒ、Ｎｅｗ　Ｙｏｒｋ（１９７７）に１００個のア ミノ酸誘導体類および約６０個のペプチド誘導体類が包括的にレビューされ記載 されている。この開示は、本文で参考として引用した。当業者は、ハロケトンペ プチド類の製造側多数をどこで検索したらよいかがわかるであろう。したがって 、ここではこれ以上例を挙げない。 Ｅ　イー２十Ｊづツでの使里 我々は、カルパイン阻害活性を有することがここで見いだされた上述の属の化合 物類に加えて、多数のその他の化合物類が存在していると考えている。本文で我 々が開示したこの多数の異なる属のカルパイン阻害剤類について、カルパインの 公知、新規発見およびまだ未発見の阻害剤類を本文ではまとめて、用語”カルパ イン阻害剤”と称することにする。 カルパイン阻害剤類は、不要なカルパイン活性を阻害するための種々の目的でイ ンビトロで使用することもできる。たとえば、カルパイン阻害剤類は、ペプチド 類およびタンパク質類の製造、単離、精製、保存または輸送の過程において起こ る蛋白分解を防止するためにインビトロで使用できる。 本文で記載したカルパイン阻害剤類は、また、試料調製後に起こる組織試料がさ らに分解することを防止するためにインビトロで使用することもできる。この分 解のインビトロ防止は、スペクトリン、ＭＡＰ２、アクチン結合タンパク質およ びｔａｕのような細胞骨格成分の分解生成物（ＢＤＰ類）のアッセイのようなア ッセイが組織中カルパイン活性の生成物を試験することからなる場合、神経変性 のアッセイの作製に特に有用であることができる。本文で参考として引用したＰ 、５ｅｕｖｅｒｔら、Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ、３１：１９５　（１９８９） は、カルパイン活性の指標としてのスペクトリンＢＤＰ類の量の例示的定量方法 を開示している。 本発明のカルパイン阻害剤類は、また、カルパイン類による蛋白分解が重要な問 題である種々のその他の実験操作において有用である。たとえば、カルパイン阻 害剤類をラジオイムノアッセイに取り入れることによって、感度が高くなる。 カルパイン阻害剤類を血漿分画操作に使用すると、貴重な血漿タンパク質類の収 率が高くなり、かつこのタンパク質の精製がより容易になる。本文で開示したカ ルパイン阻害剤類は、精製組換え生成物の収率を増加させるため、組換え体また は形質転換菌または真核細胞培養物を用いてクローニング実験に使用することも できる。 カルパイン阻害剤類をインビトロで使用するため、カルパイン阻害剤類は、ジメ チルスルホキシド（ＤＭＳＯ）またはエタノールのような有機酸に溶解し、阻害 する予定のプロテアーゼを含有する水溶液に有機溶媒の最終濃度が２５％以下と なるように添加する。カルパイン阻害剤類は、また、固体としてまたは懸濁液と して添加することもできる。 Ｆ、神経変性Ｑ治療 我々は、カルパイン阻害剤類がカルパインによる過剰の蛋白分解が関与している 病理症状を治療するためにインビトロで有用であることを見いだした。このよう な病理症状は、興奮毒性、ＨＩＶ−誘発ニューロバチ−、虚血、脱神経、傷害、 くも膜下出血、卒中、多発性梗塞痴呆症、アルツハイマー病（ＡＤ）　、ハンチ ントン病、手術関連脳傷害、パーキンソン病およびその他の病理状態から結果と して起こる神経変性のような神経病理を含んでいる。 ｌ、阻害剤類の選定 神経変性状態および疾患の治療または予防のために本発明の実施において有用な カルパイン阻害剤類を選定するため、有意なカルパイン阻害活性を有する阻害剤 類を選定することが重要である。また、高度のカルパイン阻害特異性を有するカ ルパイン阻害剤類を選定することも、カルパイン阻害剤を神経変性の治療を必要 としている哺乳類に導入する際にその他の生体プロセスと相互作用することを避 けるために重要である。チオールプロテアーゼ類全てが類似の作用機作によって それらの効果を発揮すると考えられているので、我々は主に、カルパインに対し て実質的な阻害活性を有してはいるがその他のチオールプロテアーゼに対しては 弱いかまたは全く活性を有していないカルパイン阻害剤類を選定することに注目 した。したがって、このようなカルパイン阻害剤類を選定するため、我々は、カ ルパイン■およびカルパインＨのそれらの阻害力について、種々のカルパイン阻 害剤類を試験し、このデータをもうひとつのチオールプロテアーゼであるカテプ シンＢを阻害する同一のカルパイン阻害剤類の能力と比較した。カルパインに対 してインビトロカルパイン阻害活性が高くかつカテプシンＢに対して実質的に弱 い活性を有するそれらのカルパイン阻害剤類は、インビボ治療で極めて有用であ ると考えられている。実施例ＩＡからＩＣは、種々のカルパイン阻害剤類につい てのこうした研究の結果を示したものである。 実施例ＩＡ Δの 前記イソクマリン類は、カルパインの不可逆性阻害剤類である。我々は、種々の これらのカルパイン阻害剤類のＩＣｓ。値をこれらの化合物類の動態解析によっ て得た。我々は、前記イソクマリン類がカルパインによるカゼイン蛋白分解を阻 害することを見いだしたので、精製カルパイン類を、蛍光原基質サクシニル−ロ イシン−チロシン−メチルアミノクマリン（市販）を用いて、または酸溶解性ペ プチド類のカゼインからの放出を測定することによってアッセイできる。 カルパイン類Ｉおよび■は、（Ｙｏｓｈｉｍｕｒａら、１９８３）の方法によっ て精製した。（Ｋｉ　ｔａｈａｒａ　１９８４）は、別の精製様式を提唱してい る。カルパイン■は、これとは別に、Ｓｉｇｍａ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｃｏ、か ら”　Ｃａｌｃｉｕｍ　Ａｃｔｉｖａｔｅｄ　Ｎｅｕｔｒａｌ　Ｐｒｏｔｅａｓ ｅ”として購入できる。このアッセイにおいて、精製したカルパインを１４０− メチル化カゼインと種々の複素環化合物置存在下においてインキュベーションし 、カルパインの作用によって放出された酸溶解性放射能の量を測定した。ＩＣ６ ゜値は、カルパイン活性が５０％阻害される複素環化合物の濃度としてめた。第 １Ａ表は、種々のイソクマリン化合物類の第１Ａ表 置換イソクマリン類によるカルパイン類の阻害ＩＣｅ＠（μＭ） カルパインＩ　カルパイン■ Ｃ汀Ｐｒ０ＩＣ１（）０　７０ 以上より、種々の前記イソクマリン化合物類が低濃度で有意なカルパイン阻害活 性を有していることが第１Ａ表かられかる。 実施例ＩＢ（ｉ） ペズ天上グ上化合装置のプ亨テアニガ肌害ペプチドケト化合装置は、カルパイン 類およびその他のチオールプロテアーゼ類のｉ’ｌ逆性阻害剤類である。カルパ イン１１カルバイン■およびカテプシンＢの阻害のＫｉ値は、いくつかのペプチ ドケト化合物類についてめ、ヒト赤血球由来カルパインＩおよびウサギ筋肉由来 カルパイン■は、５ｕｅ−Ｌｅｕ−ｔｙｒ−アミドメチルクマリンを基質として ２０ｍＭ　ＨＥＰＥＳ、ｐＨ７，２，１０ｍＭ　ＣａＣＬ、１０ｍＭ　β−メル カプトエタノールのアッセイ緩衝液中で用いてアッセイした。ウシ膵由来カテプ シンＢは、Ｚ−Ｌｙｓ−４−ニトロフェニルリン酸を基質として用いてアッセイ した。 第１Ｂ　（ｉ）表は、実施例ＩＢ　（ｉ）の研究の結果を示している。いくつか のペプチドケト化合物類によるカルパイン類およびカテプシンＢの阻害のＫｉ値 は、μＭ（７４２０モル）で示しである。Ｃａｌｂｉｏｅｈｅｍ　ｏｆ　Ｌａ　 Ｊ。 １１ａ、Ｃａ１ｉｆｏｒｎｉａがら市販されているロイペプチンの値を比較のた めに示しである。 第１Ｂ　（ｉ）表 ペプチドケト化合物類のＫｉ値 阻害剤　カルパインＩ　カルパイン■　カテプシンＢＬｅｕｐｅｐｔｉｎ　０３ ２　０．４３　６７、Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−Ｃｏ２Ｅｔ　Ｏ，２３０，４＞５０Ｚ− Ｌｅｕ−Ｎｌｅ−Ｃｏ２Ｅｌ　Ｏ，１２０，１８１８第１Ｂ　（ｉ）表の結果が ら、ペプチドケト化合物類がロイペプシンと類似のまたはそれよりも優れたＫｉ 値でカルパインを阻害することがわかる。特に、Ｚ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−ＣＯｚＥ ｔ、Ｚ−Ｌｅｕ−Ｎｌｅ−ＣＯｔＥｔおよびＺ−ＬｅｕＡｂｕ　Ｃ０Ｊｔがロイ ペプシンよりも優れたカルパイン阻害活性を有することが見いだされた。さらに 、これらの特定の化合物類は、カルパインに極めて特異的であり、ロイペプシン よりもカテプシンＢに対して低い阻害活性を有している。 実施例ＩＢ　（ｉ　ｉ） ベプデ上ケ上化合吻類のプロテアニ暫阻害我々は、ペプチドケト化合物類のもう ひとつの群のいくつかのプロテアーゼ類を阻害する能力を、それらのカルパイン に対する特異性を評価するために試験し第１Ｂ　（ｉ　ｉ）表 カルパインＩ、カルパインｎ、カテプシンＢ、ＰＰエラスターゼおよびパパイン の阻害 第１Ｂ　（ｉ　ｉ）表は、カテプシンＢ。カルパイン１１およびカルパインＨの ペプチドケトアミド類による阻害定数（Ｋ、）を示している。２３位にＡｂｕお よびＰｈｅおよび２３位にＬｅｕを有するジペプチドケトアミド類は、カルパイ ン■およびカルパイン■の強力な阻害剤である。Ｚ−Ｌｅｕ−Ａｂｕ−ＣＯＮＨ −Ｅｔは、Ｚ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−ＣＯＮＨ−Ｅｔよりも１４倍、優れたカルパイ ン■の阻害剤である。Ｚ基（ＰｈＣＨｌｏＣＯ）をＰｈＣＨＩＣＨ，ＣＯ−、Ｐ ｈＣ１−１ｔＣＨ，ＳＯ，−、ＰｈＣＨ，ＮＨＣＯ−およびＰｈＣＨｚＮＨＣＳ −（７）ような類似基によって置換すると、同様に、良好な阻害剤構造となる。 カルパイン■の最適の阻害剤は、Ｚ　Ｌｅｕ　Ａｂｕ　Ｃ０ＮＨ（ＣＨｙ）ｚ　 Ｐｈである。Ｒ，およびＲ１基を変化させることによって、カルパインＨに対す る阻害力が有意に向上する。 最善のジペプチドケトアミド阻害剤類は、長いアルキル側鎖（例　Ｚ−Ｌｅｕ− Ａｂｕ−ＣＯＮＨ−（ＣＨ＝）　、ＣＨ−）　、アルキル基上でフェニル置換さ れたアルキル側鎖（例　Ｚ−Ｌｅｕ−Ａｂｕ−ＣＯＮＨ−（ＣＨｚ）ｔ−Ｐｈ） またはアルキル基上で置換されたモルホリン環を有するアルキル基（例　Ｚ−Ｌ ｅｕ−Ａｂｕ−ＣＯＮＨ（ＣＨｚ）ｓ　ＭｐＬＭｐｌ＝　Ｎ（ＣＨｘＣＨｔ）ｔ Ｏ）を有するものである。２１位に脂肪族アミノ酸小残基またはＰｈｅを有する ジペプチドα−ケトアミド類も同様、優れたカテプシンＢの阻害剤類である。最 善の阻害剤は、Ｚ−Ｌｅｕ−Ａｂｕ−ＣＯＮＨ−Ｅｔであり、Ｚ　（ＰｈＣＨｌ ｏＣＯ−）をＰｈＣＨ，Ｃ１（、ＣＯ−、ＰｈＣＨ２ＣＨ２８０ｗ−、ＰｈＣＨ ＋、ＮＨＣＯ−およびＰｈＣＨ２ＮＨＣ３−によって置換すると、同様に、良好 な阻害剤構造となる。 実施例ＩＢ　（ｉ　ｉ　ｉ） ベプ±下グ上化合吻類例安定性 我々は、い（つかのペプチドケト化合物類の血漿および肝ホモジネートの両者に おける半減期をめた。前記化合物類の血漿および肝ホモジネート中における安定 性をめた結果を第１Ｂ　（ｉ　ｉ　ｉ）表に示した。 第１Ｂ　（ｉ　ｉ　ｉ）表 血漿および肝中におけるペプチドケト化合物類の安定性第１Ｂ　（ｉ　目）表の データから、ペプチドケト化合物類が通常、血漿および肝ホモジネート中で極め て安定であることがわかる。しかし、また、ペプチドα−ケトアミド類が実質的 に血漿および肝中で対応するペプチドαケトエステル類よりも安定であることが わかる。 実施例１Ｃ 公９ヶ上ンさプ±下　のプロテ　−ゼ ハロケトンペプチト類は前記置換イソクマリン類と同様、カルパインの不可逆性 阻害剤類である。我々は、この属の種々の化合物類のカルパインＩおよび■に対 するＫａｐｐ／　［Ｉ　］値を調べた。我々は、比較のため、同様に少なくとも １個のハロケトンペプチドについて他のチオールプロテアーゼ類パパインおよび カテプシンＢに対するこれらの値を調べた。これらのＫａｐ４は、その他の属の 阻害剤類について上記でめたに１またはＩＣ−５゜値と直接比較できない。 我々は、５ｕｃ−ｌ　ｅｕ−ｔｙｒ−アミドメチルクマリンを用いてカルパイン Ｉおよび口をアッセイした。パパインは、ベンゾイル−ａｒｇ−４−ニトロアニ リドを用いてアッセイし、カテプシンＢ（ウシ）は、ＣＢＺ−１ｙｓ−４−二ト ロフェニルエステルを用いてアッセイした。我々は、ＴｉａｎおよびＴｓｏｕ。 −トＪ夏Ｊ猥坦！−辷ｔ」工２１・１０２８−１０３２　（１９８２）（本文で 参考として引用）の進行曲線法に従い、動態データを得た。簡単に述べると、本 方法は、次式を用いることができる。 式中、［Ｐ−］は、無限に近似する時点で形成された生成物の濃度であり、Ａは 、基質（Ｓ）存在下におけるＫａｐｐであり、Ｋは、ミヵエレス定数であり、お よび［Ｙ］は、阻害剤の濃度である。［Ｓ］および［Ｙ］は公知であり、がっ、 ■およびＫはめることができるので、Ｋａｐｐは、容易にめることができる。 種々のハロケトンペプチド類のＫａｐｐを［１］第１Ｃ表に示している。 第１Ｃ表 ハロケトンペプチド類の動態パラメータ阻害剤　ＣＩ　ＣＩＩ’　Ｐ　ＣＥ ＣＩ　露　カルへ°インＩ　１−　ラッ　トＣＩＩ　雲カルバイン■　２・ヒ　 ト Ｐ−へ°へ°イン　３−　ウサギ ＣＢ　−カテ７°ノンＢ 第１Ｃ表の結果から、前記ハロケトンペプチド類が比較的高いＫａｐｐ／　［Ｉ 　］値によってカルパインを阻害することがわかる。特に、Ｚ−ｇｌｙ−１ｅｕ −ｐｈｅ　ＣＨｇＣ１およびＢｏｃ−ｇｌｙ−１ｅｕ−ｐｈｅ−ＣＨｔＣｌが、 有意なカルパイン阻害活性を有していることがわかった。さらに、Ｂｏｃ−ｇｌ ｙ−１ｅｕ＝ｐｈｅ−ＣＨｘＣＩが、カルパインに対してやや特異的であること が示され、カテプシンＢまたはパパインに対してカルパインに対するよりも阻害 活性が低いことがわかった。表に示した結果は、Ｚ−ｇ　Ｉ　ｙ　−１ｅｕ−ｐ ｈｅ−ＣＨｚＣ１およびＢｏｃ−ｇ　ｌ　ｙ−１ｅｕ−ｐｈｅ−ＣＨ２Ｃｌが同 様の阻害効果をもたらすことを示している。したがって、前記のブロック基が、 カルパイン阻害活性に大した効果を有していないことがわかる。 その他の不可逆性カルパイン阻害剤類の動態定数として下記が挙げられ、かソコ にＫａｐｐ／　［Ｉ　］を示した。Ｅ−６４（７５００）、Ｅ６４−ｄ　（２３ ０００）およびＺ−１ｅｕ−１ｅｕ−ｔｙｒ−ＣＨＮｔ　（２３００００）、Ｅ −６４は、Ｓｉｇ＆ｌＣｈｅｍｉω１い、から市販されており、ここではカルパ インの阻害剤として劣っていることが示されている。Ｚ−１ｅｕ−１ｅｕ−ｔｙ ｒ−ＣＨＮｔはジアゾメチルペプチド化合物であり、有意なカルパイン阻害活性 を有していることがここでわかる。 ２　神経組織中におけるカルパインの阻害神経組織中における種々のカルパイン 阻害剤類によるカルパイン阻害を評価するために、我々は、神経およびその他の 組織のタンパク質成分であるスペクトリンをＢＤＰ類に切断するカルパインの公 知の能力を利用して、カル、（イン阻害剤類をアッセイした。このアッセイにお いて、より効果的なカルパイン阻害剤類は、スペクトリンのＢＤＰ類への変換を 防止するであろう。実施例２は、このようなアッセイの１例である。 実施例２ カーノにぴイ」濱剤殖四よ々脳粗辿占物沖々男グーミインＱ阻害脳粗抽出物中カ ルパインの活性は、Ｃａ”刺激内因性基質スペクトリンの蛋白分解を調べること によって測定した。脳組織は、１０ｍＭ　Ｔｒｉｓ　ｐＨ＝７４．０．３２Ｍシ ョ糖、１ｍＭ　ＥＧＴＡ、１ｍＭジチオスレイトール中でホモジナイズし、低速 遠心分離によって核および砕片を除いた。種々のカルパイン阻害剤類をＤＭＳＯ 担体（ベヒクル）中で−Ｌ清に添加し、カルシウム塩（最終有効濃度約１．２ｍ Ｍ）を添加して反応を開始さゼた。スペクトリンの蛋白分解は、５ｅｕｂｅ　ｒ 　ｔら、（Ｂｒａｉｎ　Ｒｅ５ｅｒａｃｈ、４５９：２２６−２３２゜１９８８ ）によって記載されているウェスタンプロットによって調べた。これは、本文で 参考として引用しである。簡単に述べると、カルパイン処理した公知量のスペク トリン含有試料を５ＤＳ−ＰＡＧＥによって分離して、抗スペクトリン抗体によ ってイムノプロットした。特徴的ＢＤＰ類に対応すると見なされるスペクトリン 免疫反応性の量は、本試料中に存在するスペクトリン活性の量を示唆している。 ＢＤＰ類定量法の例は、脳部分を２０ｍＭ　Ｔｒｉｓ　ｐＨ７，２゜３２Ｍ　シ ョ糖、５０ＭＭ　Ａｃ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−ｎＬｅｕ−Ｈ中に氷上でホモジナイズ することによってＢＤＰ類をアッセイすることである。ホモジネートを次に１０ ％ＳＤＳ、５％β−メルカプトエタノール、１０％グリセロール、１０ｍＭ　Ｔ ｒｉｓ　ｐＨ＝８．０，０．５％　ブロモフェノールブルーと１＝１で混合し、 ９５℃に加温し、４−１／２％ポリアクリルアミドゲル電気泳動にかけた。ゲル 中のタンパク質類は、ニトロセルロースに移し、スペクトリンおよびＢＤＰ類を ウサギポリクローナル抗スペクトリン抗体を用いて検出し、免疫検出法を確立し た。各試料中のスペクトリンとＢＤＰの量は、展開したニトロセルロースをデン シトメータでスキャンして定量できる。 カルパインはＣａ！′を必要とするので、Ｃａ２＋がない場合、阻害剤の存在に もかかわらずほとんどまたは全くスペクトリン蛋白分解が起こらず、一方、Ｃａ ”が存在する場合、スペクトリンは、もしカルパイン阻害剤類を全く添加しない ならば４０分以内に９５％を超える量がＢＤＰ類に切断された。 ロイペプチンおよびＣ１ｌの両者が実施例２の系で阻害を示した。さらに、置換 複素環化合物類の下記の化合物類が１００μＭで有意な阻害をもたらす、二とが わかった。 ３−クロロイソクマリン ３．４−ジクロロイソクマリン ３−ベンジルオキシ−４−クロロイソクマリン７−（アセチルアミノ）−４−ク ロロ−３−（プロポキシ）イソクマリン４−クロロ−３−（３−イソチウレイド ブロポキシ）イソクマリン７−ア迅ノー４−クロロ−３−（３−イソチウレイド プロポキシ）イソクマリン７−（ベンジルカルバモイルアミノ）−４−クロロ− ３−（３−イソチウレイドプロポキシ）イソクマリン ７−　（フェールカルバモイルアミノ）−４−クロロ−３−（３−イソチウレイ ドプロポキン）イソクマリン ７−（アセチルアミノ）−４−クロロ−３−（３−イソチウレイドプロポキシ） イソクマリン ７−（３−フェニルプロピオニルアミノ）−４−クロロ−３−（３−イソチウレ イドブロボキシ）イソクマリン ７−（フェニルアセチルアミノ）−４−クロロ−３−（３−イソチウレイドプロ ポキシ）イソクマリン ７−（Ｌ−フェニルアラニルアミノ）−４−クロロ−３−（３−イソチウレイド ブロポキシ）イソクマリン ７−（ヘンシルカルバモイルアミノ）−４−クロロ−３−（３−イソチウレイド エトキシ）イソクマリン ７−（フェニルカルバモイルアミノ）−４−クロロ−３−（３−イソチウレイド エトキシ）イソクマリン ７−（Ｄ−フェニルアラニルアミノ）−４−クロロ−３−（３−イソチウレイド エトキシ）イソクマリン ハロケトンペプチド類の下記の化合物類が、同様に、１００μＭで有意な阻害を もたらすことがわかった。 Ｚ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−０（２０ Ａｃ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−ＣＩ（２０ Ｚ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−Ｑ（２０Ｂｏｃ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−０（ ２ＣＩＡｃ−Ｖａｌ−Ｐｈｅ−０（２０ Ｚ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｑ（２０さらに、ペプチドケト化合物類の下記の 化合物類が、同様に、１００μＭで有意な阻害をもたらすことがわかった。 Ｂｚ−ＤＬ−Ｐｈｅ−ＣＯＯＥｔ Ｚ−Ｌｅｕ−Ｎｖａ−ＣＯＯＥｔ Ｚ−Ｌｅｕ−Ｎｌｅ−ＣＯＯＥｔ Ｚシｚｕ−Ｐｈｅ−ＣＯＯＥｔ Ｚ−Ｌｅｕ−ＡｂｕＣＯＯＥｔ Ｚ　Ｌａｕ−Ｍｅｔ−ＣＯＯＥｔ Ｚ−Ａｌａ−Ａｌａ−ＤＬ−Ａｂｕ−ＣＯＯＥｔＭｅＯ−５ｕｅ−Ｖａｌ−Ｐｒ ｏ−ＤＬ−Ｐｈｅ−ＣＯＯＭｅＺ−ＡＩａ−Ａｌａ−Ａｌａ−ＤＬ−Ａｌａ−Ｃ ＯＯＥｔＭｅＯ−５ｕｅ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−ＤＬ−Ａｂｕ−ＣＯＯＭｅ 。 Ｚシｚｕ−Ｐｈｅ−ＣＯＯＥｔ したがって、置換複素環化合物類、ペプチドケト化合物類および７１０ケトンペ プチド類が、ロイペプチンおよびＣ１ｌに加えて脳ホモジネート中において阻害 をもたらす。 ３、注入法による神経変性のインビボ阻害カルパイン活性の阻害のみで十分にイ ンビボで神経変性を阻害できることを証明するために、我々は、一過性虚血とさ れたアレチネズミにおける神経変性を阻害するカルパイン阻害剤、ロイペプチン の能力を試験した。 上記にも述べたように、ロイペプチンは、膜透過性が不良である。したがって、 ロイペプチンは、あまり良好に脳血液関門（”ＢＢＢ”）を通過するとは考えら れない。ゆえに、カルパイン活性化作用を適度に阻害するために十分なロイペプ チンを脳に供給するため、我々は、脳注入法を使用した。これらの方法を使用す ることによって、我々は、持続的にある期間にわたって脳組織をロイペプチンと 密に接触させることができた。実施例３Ａは、こうした研究のひとつで明らかと なった神経変性のインビボ保護を示している。 実施例３Ａ 神経変性り、灯ｔゑイ２旦ポ保蔑 小カニユーレを成熟アレチネズミの右側側脳室に埋め込み、歯科用セメントで頭 蓋骨に固定した。Ａｌｚｅｔマイクロ浸透ポンプをこのカニユーレに付属させ、 脳室内を潅流した。ポンプに生理食塩水のみ（対照）またはロイペプチン（生理 食塩水中２０ｍｇ／ｍｌ）のいずれかを満たした。対照液またはロイペプチン溶 液のいずれかを３日間潅流させた後、一過性の虚血を両側性に１ｏ分間頚動脈を クランプではさむことによって誘発した。中心温度を虚血時またはその後に計測 し、対照とロイペプチン処理動物で全く差異が認められなかった。１４日後、動 物を過量のネンブタールとパラホルムアルデヒドのＰＢＳ１０％溶液を心臓に潅 流し屠殺（２，た。脳の冠状部分をクレシルバイオレットで染色し、神経消失の 程度を調べた。対照アレ千ネズミは、虚血後ＣＡＬ領域において典型的傷害を示 し、神経の７２％が消失していた。しかし、ロイペプチン処理アレチネズミの神 経変性がはるかに小さく、神経の１５％のみが消失していた。 実施例３Ａの結果は、熱制御の変化によっては説明できない。その理由として、 中心温度が前記群間で異なっていなかったからである。したがって、我々は、ロ イペプチンのカルパイン阻害活性力榊経細胞消失における観察された差異に関与 していると考えている。さらにこの差異を量的に示すために、および、脳の観察 された領域内部でロイペプチンがカルパイン阻害活性効果をもたらすことを確認 するために、我々は、関連するｌ連の実験を行った。この１連の実験では、スペ クトリンＢＤＰ類をロイペプチン処理および対照動物で測定した。上記でも述べ たように、これらのＢＤＰ類は、組織内部で起こるカルパイン活性の量を示唆し ている。実施例３Ｂは、これらの実験結果を示すために記載しである。 実施例３Ｂ カルパイン尚性例イ２にボ母吉 埋め込み術および頚動脈のクランピングは、上記に述べたように対照虚血群（ｎ ＝４）とロイペプチン虚血群（ｎ＝５）について行った。第３群の動物（ｎ＝４ ）については、生理食塩水をポンプでいれながら埋め込み術を行い、但し虚血と はしなかった。動物は、動脈クランピング３０分後断頭によって屠殺した。 脳を迅速に取り出し、冷却ホモジナイズ用緩衝液（０，３２Ｍショ糖、１０ｍＭ Ｔｒ　ｉ　５−ＨＣｌ、２ｍＭ　ＥＤＴＡ、１ｍＭ　ＥＧＴＡ、１００μＭ　ロ イペプチンおよび１μＭ／ｍｌのハ０ケトン化合物、ｔｏｓ−ｐｈｅ−ＣＨＩＣ Ｉ（Ｔ　Ｐ　ＣＫ）中に入れた。海馬ＣＡＩ領域をその後摘出した。対照および ロイペプチン処理動物の試料を次に５ＤＳ−ＰＡＧＥおよび標識抗スペクトリン 抗体によるイムノブロッティングのために、カルパイン阻害剤類のインビトロ使 用と関連させて上記で述べたように調製した。対照動物は、虚血に曝されながっ たアレチネズミに比べてＢＤＰ類の濃度が顕著に増加していた。これらのＢＤＰ 類は、カルパインによるスペクトリンのインビトロ蛋自分解後に観察されたＢＤ Ｐと共に泳動した。ロイペプチン処理アレチネズミの脳組織は、対照虚血処理ア レチネズミで観察されたＢＤＰ類のおよそ２５％を示した。 もうひとつのアレチネズミ群（ｎ＝３）は、再酸素化なしての虚血の影響を観察 するために、ロイペプチンで処理せずに虚血直後に屠殺した。これらのアレチネ ズミは、３０分の再潅流期間後に観察された対照虚血アレチネズミと同様のＢＤ Ｐ類増加量を示した。 したがって、実施例３Ｂの結果は、ロイペプチンがカルパイン活性化阻害によっ てその神経保護作用を示すことを示唆している。また、この結果は、観察された スペクトリンの蛋白分解が虚血の影響であり、再酸素化の二次的効果でないこと を示唆している。ゆえに、この結果は、カルパイン活性の阻害がインビボで神経 保護効果をもたらすことを示唆している。 上記の研究はロイペプチンがインビボで神経変性を阻害できることを明らかにし ているが、ロイペプチンを直接脳中に長期間にわたり注入して神経保護効果を発 揮させることが必要であることから本薬剤が第一選択の治療薬ではない。このこ とは、本化合物がＢＢＢ通過能が実質的に不良であることによる。したがって、 より治療上実用的な神経変性阻害方法は、膜透過性のより高いカルパイン阻害剤 を使用することであろう。 ４、血小板透過性 実施例３および３Ａで明らかにした我々の発見によれば、我々は、化合物をＢＢ Ｂを横断させかつＣＮＳ組織中に入れることは、ＣＮＳ内部の神経変性を治療ま たは抑制するための治療上有用な手法の重要な特徴であると考えている。膜透過 性を高めたカルパイン阻害剤類を使用することは、このような手法のひとつであ る。したがって、我々は、血小板膜を透過しかつ通常血小板中に含まれるカルパ インを阻害するための種々のカルパイン阻害剤類の能力を測定した。下記の実施 例に示したように、我々の結果は、複素環化合物類、ペプチドケト化合物類およ びハロケトンペプチド類の特定の化合物類がペプチドアルデヒドＣ１ｌに加えて 良好な膜透過性を示すことを示唆している。 種々のカルパイン阻害剤類の膜透過性を示すものとして、我々は、種々のカルパ イン阻害剤類の血小板膜を透過して通常血小板内部に見られるカルパインを抑制 する能力を測定した。血小板膜は、ＢＢＢと多くの類似点を有していると考えら れており、従って、このような実験がＢＢＢを通過する種々のカルパイン阻害剤 類の能力を良好に示すと考えられている。実施例４は、本発明のカルパイン阻害 剤類を用いたこれらの血小板実験のい（つかの結果を示している。 実施例４Ａ 力男グ達＜＞　Ｉ朽 血小板は、改良Ｆｅｒｒｅ　ｌ　ｌ＆Ｍａｒｔ　１ｎＳＪ、Ｂｉｏ　１．Ｃｈｅ ｍ、２６４　：　２０７２３−２０７２９　（１９８９）法によって単離した。 この開示は本文で参考として引用している。血液（１５−２０ｍｌ）をＳｐｒａ ｇｕｅ−ｐａｗｌｅｙ雄性ラットから１００ｍＭ　ＥＤＴＡクエン酸含有〜ぐリ ンｌＯ単位中に採取し、１６００ｒｐｍで室温で３０分間、遠心分離した。血漿 を緩衝液１　（１３６ｍＭ　ＮａＣｌ、２．７ｍＭ　ＫＣＩ、０．４２ｍＭ　Ｎ ａＨ，ＰＯ，。 １２ｍＭ　ＮａＨＣＯｓ、２ｍＭ　ＭｇＣｌ２．２ｍｇ／ｍｌ　ＢＳＡ（Ｓｉｇ ｍａ）。 ５．６ｍＭ　グルコース、２２ｍＭ　クエン酸３Ｎａ　ｐＨ６，５）１５ｍｌ中 に再懸濁し、血小板を室温で２５分間、２２００ｒｐｍで単離した。血小板を緩 衝液２　（１３６ｍＭ　ＮａＣｌ、２．７ｍＭ　ＫＣＩ、０．４２ｍＭＮａＨｔ ＰＯ４，１２ｍＭ　ＮａＨＣＯｓ、２ｍＭ　ＭｇＣＬ、１ｍｇ／ｍ１ＢＳＡ　（ Ｓ　ｉ　ｇｍａ）、５．６ｍＭグルコース、２０ｍＭ　ＨＥＰＥＳ　ｐＨ７，４ ）中に１０７細胞／ｍｌとなるように再懸濁し、室温で少なくとも１０分間静置 させた後、使用した。 血小板を阻害剤存在下で５分間インキュベーションした。カルパイン活性化に十 分な細胞内カルシウムを供与するため、カルシウムイオノホアＡ２３１８７を最 終濃度１μＭとなるように添加した。さらに５分間インキュベーションした後、 血小板を遠心分離（１分、１０．ＯＯＯｘｇ）によって採取し、１０％ドデシル 硫酸ナトリウム、１０ｍＭ　Ｔｒｉｓ　ｐＨ＝８．０．５％β−メルカプトエタ ノール、０．０２％ブロモフェノールブルーに再懸濁し、９５℃で５分間加温し た。試料を６％ミニゲル上で５ＤＳ−ＰＡＧＥにかけ、ＬＫＢ　Ｎｏｖａｌｏｔ 中でニトロセルロース（Ｓｃｈｌｅｉｃ１１ｅｒ＆５ｃｈｕｅｌ　ｌ　ＢＡ８３ ）に２時間１００ｍＡ／ゲルで移した。フィルターを０．２５％ゼラチン、１％ ＢＳＡ、０．　２５％トリトンＸｌ００．０．９％ＮａＣｌ、１０ｍＭＴｒｉｓ −ＨＣＩ　ｐＨ７，５中で１０分間ブロックし、ラットスペクトリンに対する抗 体を含有する同一溶液中で一晩撹拌し、１０ｍＭ　Ｔｒｉｓ−ＨＣＩ　ｐＨ７， ５゜０．５％トリトンＸ１００で１０分間３回洗浄を行い、アルカリホスファタ ーゼ結合ヤギ抗ウサギ抗体（Ｂｉｏｒａｄ）を含む洗浄緩衝液中で４時間インキ ュベーションし、上記のように洗浄した。フィルター類をＢｉｏｒａｄ　ＡＰ結 合基質キットを用いて発色させた。フィルター上のスペクトリン免疫反応性を、 デンシトメータによって定量した。 血小板内部のカルパインの阻害を、阻害剤存在下において内因性カルパイン基質 スペクトリンの蛋白分解によって測定し、種々のカルパイン阻害剤類についてア ッセイした。透過性不良のロイペプチンおよびＥ−６４は、細胞内カルパインに ほとんど影響を有していなかった。対照的に、膜透過性が優れた複素環化合物類 、ペプチドケト化合物類およびハロケトンペプチド類が、血小板カルパインを有 効に阻害した。 下記の複素環化合物類が１００μＭで実施例４の系で有意な阻害をもたらすこと がわかった。 ３−クロロイソクマリン ４−クロロ−３−（３−イソチウレイドプロボキシ）イソクマリン７−アミノ− ４−クロロ−３−（３−イソチウレイドプロポキシ）イソクマリン７−（ベンジ ルカルバモイルアミノ）−４−クロロ−３−（３−イソチウレイドプロポキシ） イソクマリン ７−（フェニルカルバモイルアミノ）−４−クロロ−３−（３−イソチウレイド プロポキシ）イソクマリン ７−　（アセチルアミノ）−４−クロロ−３−（３−イソチウレイドブロポキシ ）イソクマリン ７−（３，−−フェニルプロピオニルアミノ）−４−クロロ−３−（３−イソチ ウレイドプロポキシ）イソクマリン ７−（フェニルアセチルアミノ）−４−クロロ−３−（３−イソチウレイドプロ ボキシ）イソクマリン ７−（Ｌ−フェニルアラニルアミノ）−４−クロロ−３−（３−イソチウレイド ブロポキン）イソクマリン ７−（ベンジルカルバモイルアミノ）−４−クロロ−３−（３−イソチウレイド エトキシ）イソクマリン ７−（フェニルカルバモイルアミノ）−４−クロロ−３−（３−イソチウレイド エトキシ）イソクマリン ７−（Ｄ−）五ニルアラニルアミノ）−４−クロロ−３−（３−イソチウレイド エトキシ）イソクマリン 上記のハロケ斗ンペブチ［・類が、１００μＭで実施例４の系で有意な阻害をも たらずことがわかった。 ＤＬｅｕ−Ｐｈｅ−ＣＨ２Ｃｌ Ａｃ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−ＣＨ２０ Ｌ記のベプヂトケ（・化合物類が、実施例４の系中で１００μＭで有意な阻害を もたらすことがわかっｌ：。 Ｚ−Ａｂｉ−Ａｌａ−ＤＪ、−Ａｂｕ−ＣＯＯＥｔＺ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ａｈ− Ｄ、Ｌ−Ａｌａ−ＣＯＯＥｔＭｅＯ−５ｕｅ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−ＤＪ、 ｌＡｈｕ−ＣＯＯＭｅ７、し：ｕ−Ｐｈｅ−α）ＯＥｔ ′ＺＡ−ｅｕ−Ｎｌｅ−ＣＯＯＥｔ Ｚ−Ｌｚｕ−Ｎｖａ−ＣＯＯＥｔ Ｚ−Ｌｅｕ−Ａｂｕ−０）ＯＥｔ Ｚシｚｕ−Ａｂｕ Ｚ−Ｌｅｕ−４−Ｇ−Ｐｈｅ−ＣＯＯＥｔＺ−Ｌｅｕ−Ｌｚｕ−Ａｂｕ−ＣＯＯ ＥｔＺ−Ｌｅｕ−Ｉｊｕ−Ｐｈｅ−ＣＯＯＥｔ２−ＮａｐＳＯ□−Ｌｅｕ−Ａｂ ｕ−ＣＯＯＥｔ２−ＮＩＩＰｓＯ２−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｂｕ−ＣＯＯＥｔ：Ｚ −Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−Ｃｏ２Ｅｔ Ｚ−Ｌｊｕ−ＮＬｅｕ−Ｃｏ２Ｅｔ Ｚ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−ＣＯ２Ｂｕ Ｚ−Ｌｅｕ−Ａｂｕ−ＣＯ２Ｂｕ Ｚ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−ＣＯ２Ｂｚｌ Ｚ−Ｌｅｕ−Ａｂｕ−Ｃｏ２Ｂｚｌ ｚｐＡｌａ−Ａｌａ−ＤシＡｂｕ−Ｃυ０ＢｚｌＺ−ＩＪｕ−Ｐｈｅ−ＣｏＯＨ ｚ−Ｌｅｕ−Ａｂｕ−ＣＯＯＲ 我々は、実施例２のホモジネート系でカルパイン阻害活性を示すことがわかった 化合物のうち、実施例４の系でカルパイン阻害活性を示さなかった化合物が少な くとも３種あることに気がついた。これらの化合物類は、ロイペプチン、ＭｅＯ −８ｕ　ｅ−Ｖａ　ｌ　−Ｐ　ｒ　ｏ−Ｄ、　Ｌ−Ｐｈ　ｅ−ＣＯＯＭｅおよび Ｂｚ−Ｄ。 Ｌ−Ｐｈｅ−ＣＯＯＥｔである。ロイペプチンは、膜透過性が不良であることが 公知であり、しｔ−がって、この血小板アッセイが公知の膜透過性不良化合物類 を除外していることを確認した。したがって、血小板内部でカルパイン阻害活性 を示さないと判明した前記２種のペプチドケト化合物類は、また、膜透過性が不 良であると考えられ、ＢＢＢを通過しないと予測される。 血小板膜透過性Φ淀１的研兜 我々は、ＩＣｓ。値を対照中に存在するカルパイン活性化作用の５０％が起こる 濃度としてめたことを除き、実施例４Ａのアッセイを用いて、いくつかのペプチ ドケト化合物類についてさらに定量的または半定量的研究を実施した。結果を第 ４Ｂ表に示した。半定量的アッセイについて、第４Ｂ表の”＋”で示したちのは 、１００μＭで阻害が検出可能であったことを示し、”＋＋”は、”＋”よりも 有意な阻害を、さらに、”（−→−十”は、検出可能なカルパイン活性化が検出 されなかったことを示している。 第４Ｂ表 ペプチドケトアミド類、ケトエステル類およびケト酸類の血小板アッセイ第４Ｂ 表は、α−ペプチドケトアミド類およびケト酸類が、この血小板ア・ソセイにお いて対応するケトエステル類よりもはるかに効果的であることを示してしする。 Ｒ３基をアルキル基またはフェニル基置換アルキル基まで伸長させることによっ て、血小板アッセイにおける能力亢進によって示唆されるように前記阻害剤類の 膜透過性を増加させた。これらの結果から、本出願人は、Ｒ基を伸長させて長い アルキル基またはフェニル基置換アルキル基を含めるようにすると、阻害剤の膜 透過性を増強するであろうと考えている。 先に述べたことを考慮すると、実施例４Ａ、および４Ｂの結果は、Ｃ１ｌおよび 置換複素環化合物類、ペプチドケト化合物類およびノーロケトンペプチド類が膜 透過性であること、したがって、本化合物類をインビボ投与した後ＢＢＢ通過に おいて有効であると予測されるという我々の確信を裏付けるものである。 ５、グルタミン酸毒性 薬理学的に活性の神経保護能を有するらしいカルパイン阻害剤類をさらに調べる ために、我々は、カルパイン阻害剤類のグルタミン酸興奮毒性に対する保護能を 試験した。過剰の細胞外グルタミン酸は、虚血において神経病理症状の誘発番二 重大な役割を果たすと考えられており、これには、カル、＜イン活性化を伴う。 この過量のグルタミン酸の役割を棗ｔ−ｉりるものとして、培養Ｎｕ８−ＲＥ− １０５（神経芽細胞積−網膜ハイブリット）細胞類グルタミン酸を培地に添加す ることによって死滅させることができる。このグルタミン酸媒介細胞毒社１．ｔ カルンヮム依仔性であり、フリーラジカルスキャベンジャ−１Ｎ型電圧感受性カ ルシウムナヤンネル、およびキスギアレートサブタイプグルタミン酸拮抗剤類を 含むいくつかの機作によって低下させることができる。したがって、グルタミン 酸媒介Ｎ１８−ＲＥ−１０５細胞の死滅は、神経病理のインビトロモデルである 。 ゆえに、我々は、カルパイン阻害剤類がＮ１８−ＲＥ−１，０５細胞のグルタミ ン酸誘発細胞死を低下させるかまたは防止することを確立するために、これらの 細胞中においてグルタミン酸誘発細胞死を阻害するカルパイン阻害剤類の能力を 試験した。これらの試験の一部を実施例５に示した。 実施例５ グルタミン酸誘発細胞死朗害 Ｎ１８−ＲＥ−１０５細胞の培養ストックを、１０％ウシ胎児血清（ＦＢＳ）を 含有しかつヒポキサンチン、アミノプテリンおよびチミジン（ＨＡＴ）添加Ｄｕ ｌｂｅｃｃｏ改良Ｅａｇｌｅ培地（ＤＭＥＭ）で継代した。サブコンフルエント （集密には達していない）培養物を分割し９６ウエルプレートに入れた。細胞移 植２４時間後、細胞をグルタミン酸および種々の濃度のカルパイン阻害剤類を含 有する新鮮培地に曝した。対照細胞はグルタミン酸で処理しなかった。前記処理 細胞に、５ｍＭ　グルタミン酸およびロイペプチン（５μｇ／ｍｌ）または第１ 図に示したその他のカルパイン阻害剤類を３μｇ　／　ｍ　ｌ　、添加した。Ｍ ＴＴの変換を、記載したように１９時間後測定した。暴露開始１９時間後、細胞 が３（４，５−ジメチルチアゾール−２−イル）−２，５−ジフェニルテトラゾ リウムプロミド（ＭＴＴ）をブルーホルマザン生成物に変換する度合いを測定す ることによって、細胞生存を定量した。この変換は、死細胞ではなく生細胞のミ トコンドリア中で起こる（Ｐａｕｗｅ　Ｉ　ｓら、１９８８）。高吸光度は、細 胞生存性が高いことを示唆している。 第１図は、グルタミン酸を全く添加しなかった対照に対するグルタミン酸処理後 残存するブルーホルマザン生成物の百分率を示しでいる。したがって、担体（ベ ヒクル）プラスグルタミン酸でただし吋１害剤を全く含まないと、７０％未満の ミトコンドリア活性が残存することがわかる。しかし、第１図は、ロイペプチン 、Ｃ１ｌおよび複素環化合物類、ペプチドケト化合物類およびハロケトンペプチ ド類の代表を含めていくつかのカルパイン阻害剤類がＮ１８−ＲＥ−１０５細胞 をグルタミン酸毒性から保護することを示している。前記ペプチドケト化合物カ ルパイン阻害剤類はＺ−Ａ　Ｉ　ａ　−Ａ　ｌ　ａ−Ａｂｕ−ＣＯＪ　ｔ、置換 複素環化合物類ＣＩＴＰｒＯＩＣおよびＡＣＩＴＩＣ，およびハロケトンペプチ ドＴＰＣＫが完全にグルタミン酸の毒性効果をブロックし、その結果、グルタミ ン酸で処理していない細胞で見られたようにホルマザン生成物が１００％以上生 成した。したがって、実施例５は、これらのカルパイン阻害剤類が神経病理のイ ンビトロモデルにおいて細胞死を有効にブロックすることを示している。以上よ り、このデータは、さらに、カルパイン阻害剤類がインビボで神経保護性である という我々の発見を裏付けている。 ６、ＭＣＡ閉塞による梗塞縮小 卒中は、ヒト集団において重大な健康上の問題である。卒中は、脳動脈の閉塞で あり、脳領域への血流低下をおこし、酸素および栄養物の枯渇により細胞死の原 因となる。この種の病巣は、中太脳動脈（ＭＣＡ）の閉塞を外科的に起こしてラ ットでモデル化することができる。ＭＣＡ閉塞の数種のモデルが作製されており 、全てが実質的に類似した結果を示している。 ＭＣＡ閉塞は、閉塞２４時間後に大量の梗塞脳組織を生じる。これまでの研究か ら、ＴＴＣ染色によって判定した梗塞径が閉塞直後の２４時間には増加しないこ とが示されている。したがって、我々は、カルパイン阻害剤類の神経変性保護能 を試験するためにＭＣＡ閉塞モデルを用いた。このモデルは、実施例６に記載さ れている。 実施例６ のＭＣＡ　モデル 体重２５０−３００ｇのＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙ雄性アルピノラットをフ ェノバルビタールで麻酔した（７０ｍｇ／ｋｇ、ｉ、ｐ、）。首領域の毛を剃り 、２ｃｍの切開を施した。展開法（ｓｐｒｅａｄ　ｍｅｔｈｏｄ）を用いて組織 かんしおよび先端の丸い組織はさみで表層の筋膜をひきはがした。右側縁頚動脈 を迷走神経から単離し、−回縫合で（３，０シルク）で結索し離した。外側頚動 脈を縫合によって永久的に閉塞した。内側頚動脈の分枝および翼突管動脈を露出 させ、この翼突管動脈上に一個の微細動脈瘤クリップを置いた。外側／内側の分 枝に直接近接した総頚動脈上にもうひとつの微細動脈瘤クリップを置いた。この 総頚動脈の周りに縫合を緩く行い、２５ｇ針の先端で管腔を血管中に作製した。 ４０ｍｍナイロン縫合を、この先端を溶融して尖った末端を丸くすることによっ て作製し、この溶融改からちょうど１７５ｍｍ離れたところにドツトで印を付け た。縫い目を動脈管腔中に血管クリップのところまで挿入し、クリップを除去し 、目印が内側および外側頚動脈の分枝に至るまで縫い目を侵入させた。これによ って、中太脳動脈の源をちょうど超えたところのＷｉｌｌｉｓ環中に縫い目の先 端を入れ、動脈を閉塞する。頚動脈の周辺の緩い縫い目を軽くしめ、ナイロン縫 合の位置を固定する。冥突管動脈上の微細動脈瘤クリップをはずし、切開部を閉 じ、動物を加温したりカバリ−ケージ中で回復させる。 閉塞２４時間後、これらの動物の脳を除去し、２ｍｍ切片にスライスした。切片 を２．　３．　５−１−リフニー１−ルテトラゾリウムクロリド（Ｌｕｎｄｙ、 　ＥＦ、　Ｓｏｌ　ｉｋ、　ＢＳ。 Ｆｒａｎｋ、　Ｒ３，Ｌａｃｙ、　ＰＳ、　Ｃｏｍｂｓ、　ＤＪ　、Ｚｃｌｅｎ ｏｃｋ、　ＧＢ、およびＤ’　Ａｌｅｃｙ、　ＬＧ、　ラッgおよびアレ チネズミの脳梗塞のモルホメトリック評価、Ｊ、Ｐｈａｒｍａｃｏｌ、Ｍｅｔｈ 、、。 １５．２１０−２１４．１９８６参照）を用いて、染色した。赤色発色が見られ ないことは、組織損傷または死が起こっていないことを示していた。梗塞組織領 域（赤色染色の領域）および不全領域（赤色発色が部分的な領域）の大きさは、 定量的モルホメトリを用いて評価した。 薬物類または担体類は、大腿静脈中に注入によって投与した。全動物に対して同 一量の薬物または担体（２０％デメチルスルホキシド／８０％プロピレングリコ ール）を、Ａｚｌｅｔ浸透ポンプ（２４時間ポンプ、８．ｃｚｌ／ｈｒ、総量９ ０μｍ）にｔ１属させたカテーテルによって投与した。 実施例６のモデルを用いて、対照（担体、１■、）と２種のカルパイン阻害剤類 ：Ｚ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−ＣＯＮＨ−Ｅｔ　（ＣＸ２６９）とＺ−Ｌｅｕ−Ａｂｕ −ＣＯＮＨ−Ｅｔ　（ＣＸ２７５）のそれぞれを投与したときの梗塞領域の径を めた。これらの結果は、第２図にグラフで示しである。カルパイン阻害剤類Ｚ− Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−ＣＯＮＨ−Ｅｔ　（ＣＸ２６９）またはＺ−Ｌｅｕ−Ａｂｕ− ＣＯＮＨ−Ｅｔ　（ＣＸ２７５）のいずれかの投与が梗塞径の減少をもたらすこ とがわかる。 ７、酸素欠乏および低酸素損傷の阻害 海馬のＣＡＩ領域は、虚血傷害およびその他の興奮性アミノ酸類が関連した傷害 に特に感受性の脳領域である。海馬は、また、アルツハイマー病の細胞変性の主 な病巣である。切片中神経細胞は、虚血時およびその後にインビボで観察された （再潅流効果を含む）同一事象のシーフェンスによって、低酸素となった後に変 性する。我々は、神経切片の種々のカルパイン阻害剤類の存在下における変性を 研究することが、カルパイン阻害剤類の膜透過性の有効なインディケータである と考えている。したがって、我々は、これらの研究で、インビボ神経変性の治療 と阻害のモデルを提供すると考えている。本発明による神経変性の治療において 有用な化合物類の有効性を調べるための同様の研究は、血小板または培養細胞に おける変性の保護のような他のモデル類を用いても実施することができる。 酸素欠乏が、卒中および頭部外傷のような種々の神経変性疾患および状態におい て神経毒性の主要原因であると考えられている。したがって、我々は、種々のカ ルパイン阻害剤類が低酸素または酸素欠乏状態に曝された時の海馬神経細胞の生 存率を増加させることができ有益であることを示すために、海馬切片を用いてさ らに研究を実施した。最初のスクリーニング操作を用いて、種々のカルパイン阻 害剤類が海馬切片中における酸素欠乏から神経を保護できるかどうかを定性的に 検討した。これらの最初のスクリーニング操作の例を実施例７Ａで示した。 実施例７Ａ 酸素欠乏傷害凪豊Φ最初ｐスクｌ−只２グ海鳥切片（４００μｍ）をＳｐｒａｇ ｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラット（６〜７週齢）から調製し、従来法を用いてインタフ ェースチェンバー中に保持した。すなわち、切Ｈの下部表面にＡＣ３Ｆの一定潅 流（０，５ｍｌ／′ｍｉ　ｎ）を施し、一方、上部表面は、２Ｌ／ｍｉｎの速度 で交換されているＯ！・ＣＯ，（９５％＝５％）の高湿度の雰囲気に暴露した。 ＡＣＳＦ媒体は、ｍＭで、ＮａＣ１（１２４）。 ＫＣｌ　（３）、ＫＨＰＯ，（２，５）　、ＣａＣＬ　（３，４）、ＮａＨＣＯ ｓ　（２６）およびＤ−グルコース（１０）を含有している。場興奮性シナプス 後応答を、ＣＡｌａまたはＣＡｌｃの５ｃｈａｆｆｅｒ−文運線維の刺激に応答 するＣａ１ｂの放線状層から記録した。記録電極の深さを最適として、惹起応答 を３０秒毎に１惹起応答の割合で把握した。 最初のスクリーニング操作のために、ラット１匹の海鳥から１４個〜１６個の切 片を得、通常のＡＣＳＦ浴に入れる。各切片は、その酸素欠乏前惹起応答の大き さを調べるために連続して試験する。５個の刺激パルス（それぞれ、０．１ｍ５ （Ｅり秒）持続）を１５分間隔で付％、した。各切片について最大の惹起応答を 調べ記録した。 この後、切片を薬物または担体のみを前記Ａ　ＣＳ　Ｆに添加して１時間インキ ュベーションした。インキ、ベーション１時間後、酸素含量の高いチェンバー雰 囲気を、酸素を窒素と置換する（Ｎｔ＝９５％；Ｃ０ｚ＝５％）ことによって酸 素欠乏状態とした。切片をこの酸素欠乏環境に１０分間保持し、その後酸素高含 量の雰囲気（０２＝９５％；Ｃ０ｔ＝５％）を再作製した。 切片に対して再酸素化後３０分間、回復する機会を与え、その後、それぞれに刺 激をりえ、最大惹起電位を先に酸素欠乏前期間について記載したようにしてめた 。酸素欠乏前に見られた電位の５０％を超える最大惹起電位を酸素欠乏後もたら した切片を生存切片と定義した。 実施例７Ａの研究の結果を第３図に示した。第３図は、酸素欠乏雰囲気に１０分 間暴露さぜた海鳴切片生存に及ぼすＣＸ２１８　（Ｚ−Ｌｅｕ−Ａｂｕ−ＣＯｘ Ｅｔ、ペプチドケト化合物）およびＣ１ｌの効果を、対照切片と比較して示した 。 本図かられかるように、対照切片から薬物の存在していない状態で１０分間酸素 を枯渇させると、それらの酸素欠乏前惹起応答の５０％を惹起する能力によって 測定した時、実質的に全てが生存できない。この知見によれば、再酸素化によっ てもしあったにしてもほとんどが回復できない。第３図は、同様に、ＣＩＩまた はＣＸ２１８が前記ＡＣ８Ｆに添加されたときに切片が酸素欠乏の影響から保護 されることを示しており、これは、惹起電位を誘発する切片の実質的割合によっ て証明される。 最後になるが、ＣＸ２１８が酸素欠乏からの保護および最小１時間のインキュベ ーション時間でおよびＣ１１よりも低濃度で切片の分解を防止する点において、 Ｃ１ｌよりも有意に有効であることがわかる。この効果は、ペプチドケト化合物 類の膜透過性が優れていることによると考えられている。 第７Ａ表は、実施例７Ａからの研究からのデータをさらに示している。 第７Ａ表 １０分間の酸素欠乏後も生存した切片の百分率−化−−介ＪＬ−−−−＝容ＪＩ Ｊ、μ１Ｍつ一−−インー午ヶづト≦４１ン時間−−生存率対照　１時間　く１ ％ ロイペプチン　１０００　３時間　５０％Ｃ１１２００２時間　５３％ ＣＸ１３　（ＳＨＣ）　２０　１時間　５０％ＣＸ８９　（ＣＫＰ）　５０　１ 時間　５０％ＣＸ２１８　（ＰＫＣ）　１００　１時間　７０％第２表のデータ から、試験した全カルバイン阻害剤類が生存率を高めたことがわかる。ＣＸ１３ 　（ＡＣＩＴＩＣ，＠換複素環化合物（ＳＨＣ）　）、ＣＸ８９（Ｂｏ　ｅ　− Ｇ　ｌ　ｘ−Ｌｅ　ｕ−Ｐｈｅ　−ＣＨｙＣｌ、　ハＯケトンペプチド（ＨＫＰ ））およびＣＸ２１８　（Ｚ−Ｌｅｕ−Ａｂｕ−ＣＯ−Ｅｔ、ペプチドケト化合 物（ＰＫＣ））はそれぞれ、生存時間に影響を及ぼす点で極めて影響が大きいこ とが示されている。ロイペプチンは、最も効果が小さい神経保護剤であることが わかる。 したがって、我々は、ＣＸ１３．ＣＸ８９およびＣＸ２１８　（Ｚ−Ｌｅｕ−Ａ ｂｕ−ＣＯ２Ｅｔ）が、それらの膜透過性により生存率に影響を及ぼす点でより 効果的であると考えている。したがって、第７Ａ表に示した結果は、膜透過性を 有するカルパイン阻害剤類が有効な神経保護剤類であるとの我々の考えを裏付け るものである。 海馬切１１に対して神経保護作用を付与するカルパイン阻害剤類の能力をさらに 調べるために、および、これらのカルパイン阻害剤類の膜透過性のより定量的指 標を付与するために、我々は、種々のカルパイン阻害剤類が海馬切片中における 酸素欠乏時およびその後において神経１切片上における惹起応答に及ぼす種々の カルパイン阻害剤類の効果を測定した。これらの研究を実施例７Ｂに示した。 実施例７Ｂ 酸素欠乏怪害ｔｙｖＢ害 実施例７Ａと同様、海馬切片（４００μｍ）をＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラ ント（６〜７週齢）から調製し、従来法を用いてインタフェースチェンバー中に 保持した。すなわち、切片の下部表面に人工脳液（ＡＣ３Ｆ）の一定潅流（０゜ ５ｍｌ　’ｍｉ　ｎ）を施し、一方、−上部表面は、２Ｌ／ｍｉｎの速度で交換 されているＯ２・Ｃｏ、（９５％、５％）の高湿度の雰囲気に暴露した。ＡＣ３ ＦＣ３Ｆ７ｍＭで、ＮａＣｌ　（１２４）、ＫＣＩ　（３）、ＫＨＰＯ４（１， ２５）、Ｍｇ５Ｏ＝　（２，５）　、ＣａＣ１−（３，４）、ＮａＨＣＯ−（２ ６）およびＤ−グルコース（１０）を含有している。場興奮性シナプス後応答を 、ＣＡｌａまたはＣＡｌｃの５ｃｈａｆｆｅｒ−文運線維の刺激に応答するＣａ １ｂの放線状層から記録した。記録電極の深さを最適として、惹起応答を３０秒 毎に１惹起応答の割合で把握した。 菅起応答の安定基準値（約１０分）を確立した後、カルパイン阻害剤含有ＡＣ３ Ｆをチェンバー中に洗い入れ、切片を１時間インキュベーションした。インキュ ベーション後、惹起応答を再度記録し、応答の大きさの基準レベルからの変化を 記載した。基準惹起応答に及ぼす被験阻害剤類の効果は全く観察されなかった。 酸素欠乏実験のため、薬物含有媒体中におけるインキュベーションをＯ！：Ｃｏ 、（９５％、５％）雰囲気のＮｓ：　Ｃｏｗ　（９５％：５％）置換によって追 跡した。切片は、シナプス前線維斉射が消失するまでおよびそれから２分間（重 度の酸素欠乏）長く（酸素欠乏環境中の総計時間は対照症例の場合的７−８分） 、この酸素欠乏環境に暴露した。酸素欠乏エピソード後の切片の機能的回復に及 ぼすカルパイン阻害剤類の効果を次に測定した。薬物処理切片による惹起電位（ ＥＰＳＰ）の傾きど大きさの回復を対照切片ど比較して、種々のカルパイン阻害 剤類の相対的効果をめた。 第４図は、実施例７Ｂにおける対照、Ｃｌｌ処理およびＣＸ２１８（ペプチドケ ト化合物）処理海馬切片のＥＰＳＰの大きさをミリポルトで示している。第４図 から、薬剤非存在下において酸素を欠乏した対照切片がＥＰＳＰの漸次低下を示 し、酸素欠乏開始的５−６分後に突然線維斉射活性を消失することがわかる。 ；Ｑ爵やぷ」匹Ｓ−ｕ可をさス薄に再酸素化をすると、再酸素化を約２０分間し た後に機能的回復が完全となるが、しかし、この時点ｍの再酸素化ではそうはな らない。後者の場合、回復したＥＰＳＰ傾きと大きさは、酸素欠乏斉射消失後（ ｐ　ｏ　ｓ　ｔ−ＦＶＤ）の持続時間が長くなるに従って漸次低下する。重篤な 酸素欠乏の後（ｐｏｓｔ−ＦＶＤＺ分間）、傾きは、前記ＥＰＳＰ傾きの約１５ ％しか回復しない。 対照切片に比べて、処理切片の回復は酸素欠乏終了後まもなく起こり始める。 第４図は、全く阻害剤がない場合、ペプチドケト化合物、ＣＸ２１８　（Ｚ−Ｌ ｅｕ−Ａｂｕ−ＣＯＪｔ）およびＣ１ｌ存在下において、産生されたＥＰＳＰの 大きさに及ぼす効果を比較して示したものである。ＣＸ２１８は、ＣＩｌで見ら れたよりも優れた重篤な酸素欠乏からの回復をもたらす。 第５図は、ペプチドケトエステルＣＸ２１６　（Ｚ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−ＣＯ＝Ｅ ｔ）およびその対応するペプチドケトアミドＣＸ２６９　（Ｚ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ −ＣＯＮＨ−Ｅｔ）を用いて、重篤な酸素欠乏からのＥＰＳＰ回復百分率を示し ている。 これらの研究は、実施例７Ｂと同様の方法で行われたが、ただし、実施例７Ｂの 酸素欠乏の代わりに低酸素環境を使用した。前記ペプチドケトアミドの使用によ って低酸素から本質的に完全な（１００％に近き）回復が得られ、一方、前記ペ プチドケトエステルは、部分的回復をもたらした。対照切片は、はとんどまたは 全く回復を示さなかった。 我々があるカルパイン阻害剤類について見いだした興味ある特徴は、線維斉射消 失（ＦＶＤ）を出現させるために必要な酸素欠乏に暴露させる期間を長くするそ れらの能力である。典型的には、対照酸素欠乏条件下で、６分未満で線維斉射消 失が起こる（第６図）。前記ペプチドケｉ・化合物ＣＸ２１６は、実質的にＦＶ ｔ）を出現さゼるために必要な酸素欠乏に暴露させる期間を長くする。これは、 このベプチトゲト化合物を神経保護に使用する際の重要な利点であよ八÷の理由 １１：。 して、も１．、線維斉射消失前に再酸素化されれば、切片が完全に回復すること が予測できるからである。したがって、このペプチドケト化合物による治療は、 初期の神経変性状態から細胞を回復させる百分率が高くなることを予測させる。 その他の代表的ペプチドケト化合物類およびその他の属のカルパイン阻害剤類も 同様にこの効果をもたらすと考えられている。 第７Ｂ表は、種々のカルパイン阻害剤類で処理した切片のまたは対照切片の酸素 欠乏前シナプス伝導（惹起電位高さ）の回復の百分率を示している。これらの切 片の全てが実施例７Ｂのプロトコールに従って、酸素欠乏に１０分間暴露された 。 第７Ｂ表 酸素欠乏後シナプス伝導の回復百分率 −−イし一イ１−−物−−−−−−−−−□−１１−１友−一−−−−−−−□ −％巨■に一□一対照　１５ Ｃ１１２００３５ ＣＸ１３　（ＳＨＣ）　２０　６０ ＣＸ８９　（ＣＫＰ）　５０　３０ ＣＸ２１６　（ＰＫＣ）　１００　３８ＣＸ２１８　（ＰＫＣ）　１００　５５ 第７Ｂ表に示した結果から、前記ペプチドアルデヒドＣ１ｌおよび前記置換複素 環化合物類、ペプチドケト化合物類およびハロケトンペプチド類が、実質的に膜 透過性でカルパイン阻害によって神経保護を供与することの証明がさらに得られ る。 Ｃ１ｌは少なくとも部分的には膜透過性であり何らかの効果を及ぼすが、しかし 、電気的活性を抑制するために必要な酸素欠乏期間を有意に長（することはない 。したがって、対照に比較して、または、ロイペプチンおよびＣ１ｌと比較して さえも、前記置換複素環化合物類、ペプチドケト化合物類および７１０ケトンペ プチド類が、切片が酸素欠乏に堪えられる時間を延長（しそれによって、完全書 −回復）するというもうひとつの利点を供する一方で、酸素欠乏エピソード後の 回復度を高められる。 ペプチドケト化合物類およびその他の膜透過性カルパイン阻害剤類の重要な影響 として、それらが、ＣＩＩのような膜透過性が劣るカルパイン阻害剤類よりも低 容量でより効果的であることが挙げられる。ＣＩＩは切片生存率に影響を及ぼす というそれらの能力によって少なくともいくらかは膜透過性であることが示され ているが、前記のより膜透過性の高い阻害剤類は、有意に亢進した保護作用を供 する。したがって、前記の膜透過性がより高いカルパイン阻害剤類は、神経変性 治療および抑制において特に効果的であると考えられる。 実施例７Ａおよび７Ｂの研究結果は、置換複素環化合物類、ペプチドケト化合物 類およびハロケトンペプチド類が、神経変性治療および抑制において特に効果的 であると考えられる膜透過性のカルパイン阻害剤類であることを示している。 この結果は、また、ペプチドケト化合物類、およびおそらくその他の属の代表が 、海馬切片の電気的活性を抑制するために必要な酸素欠乏持続時間を延長できる ことを示している。上記にも述べたように、こうした効果は、これらの化合物類 の重要な利点である。 ８、カルパイン阻害剤類によるインビボ神経保護上記にも述べたように、ＣＮＳ 内部の細胞機能に影響を及ぼすために有用な治療薬類は、ＢＢＢを通過してＣＮ Ｓ内部のターゲットに到達しなければならない。 ＢＢＢ非Ｂ非通過性化合物類上記に記載した脳注入法に加えて、脳室内投与によ って投与されるであろうが、このことは、また、実際のそれらの有用性に深刻な 制限を課すことになる。カルパイン阻害剤類がＢＢＢを通過して治療上有用とな るインビボにおける有効性を試験するために、我々は、腹膜内注射による興奮毒 性傷害をインビボで保護するカルパイン阻害剤類の能力を試験した。保護は、カ イニン酸注射後のラット挙動の変化を評価して測定した。 実施例８Ａ ｍ牲傷宵匿よ（掌軌刻艙彰引■ＬＷ四パＬΔ助ｌｕ牝ユｊ茸護ラット（Ｓｐｒａ ｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙ雄性、２００±５グラム）に対して、生理食塩水担体とエ ーテル中１２ｍｇ／ｋｇカイニン酸、２００μｌ　ＤＭＳＯ（ジメチルスルホキ シド）または同一容量のＤＭＳＯに溶解したカルパイン阻害剤４．６ｍｇを腹膜 内に注射した。このラットを注射後６時間観察し、カイニン酸誘発症状とけいれ んをＯ−６の点数で評価した（０＝ゼロ；１＝イヌの濡れによる震え：２＝唾液 分泌およびかむ動作：３＝少なくとも１回のけいれん性エピソード：４＝けいれ んの繰り返しまたは持続；５＝後足で立ったり倒れたりを含むけいれん、６＝注 射後６時間以内にけいれん後死亡）。 第７図は、カイニン酸の挙動およびけいれん効果に及ぼすＣＩｌの効果を示して いる。対照群において、半分以」−の動物が軽度以上の挙動症状を示し、多くは 、顕性のけいれんを示し、おそらく、脳内の発作活動を示しているのであろう。 阻害剤処理群において、けいれんの頻度および重篤度が予想外にも低下していた 。 したがって、このデータは、カルパイン阻害剤類が抗けいれん効果を有している ことを示している。この効果は、てんかん関連神経変性および卒中におけるカル パイン阻害剤の使用の顕著な利点である。 カルパイン阻害剤類で見られた挙動および抗けいれん効果がカルパイン阻害によ るものであることをより明確に示すために、我々は、実施例８Ａのラットの脳組 織についてスペクトリンＢＤＰ類の集積を試験した。上記にも述べたように、こ れらのＢＤＰ類は、カルパイン活性とそれに関連した神経変性に関係を有してい た。 実施例８Ｂ 興奮毒性傷害に丈玉ス不タ上臥之分解に対　る　カルパイン且　によ々保護 実施例８Ａのラットに対してカイニン酸を注射４日後、ラット脳を摘出し、スペ クトリンＢＤＰ類をアッセイした。スペクトリンＢＤＰ類は、層部分を、２０ｍ Ｍ　Ｔｒｉｓ　ｐＨ＝７．２．．３２Ｍショ糖、５０μＭ　Ａｃ−Ｌｅｕ−Ｌｅ ｕ−ｎＬｅｕ−Ｈ中に氷でホモジナイズすることによってアッセイした。ホモジ ネートは、１０％ＳＤＳ、５％β−メルカプトエタノール、１０％グリセロール 、１０ｍＭ　Ｔｒｉｓ　ｐＨ＝８．０，０．５％ブロモフェノールブルーと１： １で混合し、９５°Ｃに加温し、４−１／２％ポリアクリルアミドゲルによる電 気泳動に供した。ゲル中タンパク質類をニトロセルロースに移し、ウサギポリク ローナル抗スペクトリン抗体を用いてスペクトリンとＢＤＰを検出し、免疫検出 法を確立した。各試料中のスペクトリンとＢＤＰの量を、発色させたニトロセル ロースのデンシトメータによるスキャンで定量した。 第８図は、実施例８Ｂの結果を示している。カイニン酸がカルパイン阻害剤処理 ラットおよび対照ラットの両者においてスペクトリンの分解を刺激したことがわ かる。しかし、処理ラットは、有意に少ないＢＤＰ類を示した。これらの結果か ら、処理ラットの脳中におけるカルパイン活性が低下したことが確認される。 予測外に観察されたこととして、重篤な発作を示した処理動物さえも、カイニン 酸に供された未処理動物よりも有意に少ないスペクトリン分解を示したことであ る。したがって、カルパイン阻害剤処理は、最も重篤な影響を受けた動物におい てカイニン酸の挙動／けいれん効果とカルパインの活性化の両者を低下させた。 ９、結論 上記の研究は全て、カルパイン阻害剤類が酸素欠乏、興奮毒性およびその他の原 因に関連した神経変性をインビボで保護するという我々の発見を裏付ける。した がって、これらのカルパイン阻害剤類は、興奮毒性、ＨＩＶ誘発ニューロバチ− １脱神経または外傷後の虚血、くも膜下出血、卒中、多発性梗塞痴呆症、アルツ ハイマー病（ＡＤ）　、ハンチントン病、パーキンソン病、手術関連脳傷害およ びその他の病理状態を含めて種々のインビボ神経変性疾患および状態に対して、 神経保護作用を供する。 有意なカルパイン阻害活性をインビトロで有しかつ膜透過性についての上記のま たは異なる試験の少なくとも１種に適合するカルパイン阻害剤類は、神経変性治 療のための優れた候補である。 Ｇ、上芝ヱグデ駄び及 種々のカルパイン阻害剤類の血漿膜を通過する能力は、薬剤的観点からしてこれ らの化合物類の重要な利点である。我々は、この能力によってカルパイン阻害剤 類が脳血液関門を良好に通過することができるのは有益であると確信している。 このことは、脳血液関門通過性が不良であることが多い多数の薬剤類、特にペプ チド類と対照的である。したがって、我々は、カルパイン阻害剤類が神経保護薬 剤として良好な結果をもたらすであろうと確信している。 神経変性治療のため、カルパイン阻害剤類は、経口、局所または非経口的に投与 できる。本文で使用した用語”非経口”は、経皮投与、皮下注射、静注、筋注ま たは胸骨内（ｉｎｔｒａｓｔｅｒｎａｌ）注射、を椎腔内注射（ＣＮＳ中へ直接 ）、または点滴法を含めて全ての非経口デリバリシステムを含んでいる。 用量は、主に特異的剤形と治療または予防の目的に応じている。各用量と投与法 は、特定の症例を個別に検討することによって決定するのが最善である。しかし 、好適な組成物において、カルパイン阻害剤類の１日当たりの投与量は、好適に は１μｇ／ｋｇ・体重（ｔｏｔａｌ　ｂｏｄｙ　ｍａｓｓ’）　−１００ｍｇ／ ｋ　ｇ　一体重の範囲にあり、さらに好適には、１０μｇ、’ｋｇ・体重〜１０ ｍｇ／ｋｇ・体重の範囲にある。 前記活性成分を含有する薬剤組成物類は、経口用途に適したたとえば錠剤、トロ ーチ、ロゼンジ、水性または油性懸濁液、分散剤またはエレキシル剤のような剤 形とすることができる。担体原料と混合され単回投与剤形を形成する活性成分の 量は、治療される者と特定投与法に応じて変化するであろう。しかし、一般には 、単回投与量は、経口で許容される単回剤形において１日の完全な用量を付与す るために十分なカルパイン阻害剤を含有するであろう。 注射用として、治療量のカルパイン阻害剤類またはそれらの薬剤学的に許容でき る塩は、通常、皮下注射、静注、筋注または胸骨内注射によって、またはを椎腔 内注射（脳中へ直接）によって調製されるであろう。単回１日投与量を単回注射 によって提供するため、非経口投与用製剤組成物類は、約０．５ｍｌから約１リ ツトルの担体溶液投与量当たり、単回投与剤形中に約７０μｇ〜約７ｇのカルパ イン阻害剤を含有する。前記の活性成分に加えて、これらの製剤組成物類は、通 常、たとえば、ｐＨを約３５から７までの範囲に維持するリン酸緩衝液のような 緩衝液とまた塩化ナトリウムを含有し、また、等張圧を調製するためにマンニト ールまたはソルビトールを含有することができる。これらの組成物類の好適な剤 形において、ＤＭＳＯまたはその他の有機溶媒が、カルパイン阻害剤が膜を横断 して導入されることを補助するために添加される。 さらに、脂質類もカルパイン阻害剤がＣＮＳ組織中に入ることを促進するために 薬剤組成物中に導入できる。これらの組成物類は、当業者に公知の方法で調製さ れる。簡単に述べると、ホスファチジルコリン、コレステロール、その他公知の 脂質担体またはその混合物のような脂質類を溶媒とともに前記活性化合物と混合 し、溶媒を乾燥して除去し、前記薬剤を生理食塩水で再構成する。前記組成物類 は、また、洗浄剤類、界面活性剤類または乳化剤類のような当業者に公知のその 他の成分類を含有することができる。 局所投与または注入のための組成物は、水溶液、ローション、ゼリーまたは油性 溶液または懸濁液として処方できる。水溶液の剤形の組成物は、カルパイン阻害 剤をｐＨ４〜６．５の水性緩衝液に溶解して、もし所望であれば高分子結合剤類 を添加することによって得られる。局所投与用の油性処方は、カルパイン阻害剤 を適宜ステアリン酸アルミニウムのような膨潤剤および／または界面活性剤を適 宜添加１７た油に懸濁することによって得られる。ＤＭＳＯをこれらの局所組成 物に添加することは、皮下投与のために患者皮膚へ組成物を適用した後活性カル パイン阻害剤の血流中への少なくども部分的な通過を可能とすると考えられてい る。 興奮毒性、ＨＩＶ誘発誘発−ロバチー、脱神経または外傷後の虚血、くも膜下出 血、卒中、多発性梗塞痴呆症、アルツハイマー病（ＡＤ）　、ハンチントン病、 パーキンソン病、手術関連脳傷害およびその他の病理状態の結果生じた神経変性 を治療するため、カルパイン阻害剤類またはその薬剤学的に許容できる塩を経口 または非経口で投与できる。個人の投与量と投与法は、特定の症例を個別に検討 して決めるのが最善である。 卒中および頭部外傷のような多くの急性神経変性状態および事象において、傷害 発生後実際に可能な限り迅速にカルパイン阻害剤を運搬することが重要である。 したがって、卒中、頭部外傷または神経変性が関連しているかまたは発生する可 能性があるその他の傷害を受けたものを識別し、事象１分〜２時間以内にカルパ イン阻害剤の投与を開始することが、神経変性を可能な限り最大限に防止するた めに好適である。 本発明の範囲内のカルパイン阻害剤類の特定の適用として、手術時においてこれ に関連した神経変性を防止するために適用することがある。たとえば、全身麻酔 下で行う手術では、麻酔下でＣＮＳの潅流力坏適切であると低酸素状態が起こり 得る。さらに、心血管系の多くの大手術では、患者の心臓を停止させ潅流を入玉 的手段で維持することが必要になる。このような手術においては、ＣＮＳ内部で 低酸素が起こる危険が高くなり、このこともまた神経変性をおこし得る。さらに 、神経手術時においては、炎症、出血、うっ血等による神経変性の固有リスクが ある。このような神経変性は、カルパイン阻害剤含有溶液を注入することによっ て抑制できる。しかし、神経手術によって起こる神経変性も、上記の投与法のい ずれかによってカルパイン阻害剤を投与することによって、予防的に低下させる ことができる。このような投与は、また、大手術時における麻酔剤の使用または 人工的潅流手段に関連した神経変性を抑制または防止すると考えられている。 外科患者は、また、点滴によって手術中ずっとカルパイン阻害剤を投与してもら うことができる。 下記の実施例は、本発明の範囲内のカルパイン阻害剤類のある神経保護用途を例 示するために示した。このようなものとして、それらは、本発明をいかなる方法 でも限定することを意味していない。 実施例９ 静注用神経保護組成物 ５００μｇ　実施例５ＨＣ２のＣＨ＝ＣＯＮＨ−Ｃｉ　ＴＰ　ｒ　ＯＩ　Ｃ４ｍ １　プロピレングリコール １ｍｌ　ＤＭＳＯ 実施例１Ｏ 点滴用神経保護組成物 ２５０ｍｇ　実施例ＰＫＣ４７のＺ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−ＣＯＮＨ−Ｅｔｌｏｏｏ ｍｌ　リン酸緩衝生理食塩水（ｐＨ６，０）１０ｍｌ　ＤＭＳＯ 実施例１１ 経皮適用のための神経保護組成物 ２５ｍｇ　実施例ＰＫＣ１９のＺ−Ｌｅｕ−ＤＬ−Ａｂｕ−ＣＯＯＥｔ３ｍｌ　 リン酸緩衝生理食塩水（ｐＨ６，０）２ｍｌ　ＤＭＳＯ 実施例１２ 頭部外傷後の神経保護 頭部外傷を受けた第１群の患者に対して、傷害時点から１０分以内に実施例９の 注射用組成物を静注で投与する。同様の適合させた患者第２群に対しては、この 組成物を投与しない。第１群の患者は、痴呆、記憶喪失および麻痺などの顕性神 経変性症状を示すものがはるかに少なく、しかも、その程度も極めて軽い。 実施例１３ 手術時の神経保護 トリプルバイパス手術を受けることになっている患者に対して、点滴器を用いて 実施例１０の組成物を１時間当たり５００ｍ１投与する。手術時において、患者 の心臓は停止し、人工的手段によって潅流を継続する。心臓を再始動させかつ患 者の人工潅流手段をはずす際に合併症が起こるが、手術数時間以内に患者は意識 を回復するようになる。数日以内に患者の精神状態は正常となり、神経変性の兆 候は全くない。 当業者には改変が自然と示唆されるであろうということがわかるであろう。上記 の詳細な説明は、例示のために示したことを明確に理解すべきであり、本発明の 意図と範囲は、添付のクレームを参照として理解されるであろう。 ＦＩＧ、２ １号 ｑ 特表平６−５０４０６１　（４２） ＦＶＤ（ｍｉｎ） ｌｈｒ、ＩＮＣＵＢ、　２ｈｒ、１ＮｃＬｉＢ。 ＦＩＧ、　８ 国際調査報告 フロントベージの続き （８１）指定国　ＥＰ（ＡＴ、ＢＥ、ＣＨ，ＤＥ。 ＤＫ、ＥＳ、ＦＲ，ＧＢ、ＧＲ，ＩＴ、ＬＵ、ＭＣ，ＮＬ、ＳＥ）、０Ａ（ＢＦ 、ＢＪ、ＣＦ、ＣＧ、ＣＩ、ＣＭ、ＧＡ、ＧＮ、ＭＬ、ＭＲ，ＳＮ、ＴＤ、ＴＧ ）、ＡＵ、　ＢＢ、　ＢＧ、　ＢＲ，ＣＡ、　Ｃ３，ＦＩ、　ＨＵ、ＪＰ。 ＫＰ、ＫＲ，ＬＫ、ＭＧ、ＭＮ、ＭＷ、Ｎｏ、ＰＬ、ＲＯ，ＲＵ、５Ｄ （７２）発明者　バータス、レイモンド、ティー。 アメリカ合衆国、　９２６５３．カリフォルニア。 ラグナ　ヒルズ、グレン　キャニオン　ドライブ　２６１０２番地 （７２）発明者　エベレス、ディピッド、ディー６．ジュニア アメリカ合衆国、　９２７１５．カリフォルニア。 アーバイン、ロックビュー　ドライブ　２７番地 （７２）発明者　リンチ、ゲーリー、ニス。 アメリカ合衆国、　９２７１５．カリフォルニア。 アーバイン、ギブス　コート　４番地 （７２）発明者　パワーズ、ジェームズ、シー。 アメリカ合衆国、　３０３１８．ジョーシア、アトランタ、ノース　ウェスト、 アップトンロード　６９８番地[Detailed description of the invention] The use of calpain inhibitors in the treatment and prevention of neurodegeneration The present invention relates generally to the field of neuroprotective agents, and more particularly to the field of neuroprotective agents, and more particularly to the field of neuroprotective agents. Inhibitors of calcium-stimulated proteases such as generation) and its use as a therapeutic agent. Nerve cells, including those in the brain, have at least two types of cells called calpain■ and calpain■. A large variety of proteases, including two calcium-stimulated proteases. These are micromolar and millimolar, respectively. It is activated by the Ca2+ concentration of . Calpains exist in many tissues. It is a genus of calcium-activated thiol proteases. Calpain■ is the main form However, calpain I is also found in synapses and is involved in long-term activation and synaptic plasticity. It is thought to be a form of sexual involvement. Thiol proteases are characterized by amino acid residues ( serine proteases, metalloproteases and their Distinguished from other proteases. Several thiol proteases are produced by plants. However, these proteases are not common in mammals and are produced by cathep SynB (a lysosomal enzyme), other canapsins and calpains are It belongs to one of the few representatives of this genus listed in the class. Calpain I and Ka Lupine is the best described of these, but a number of other members of the genus Calpain Seeds have also been reported. Other CaZ+ activated thiol proteases have also been described by Yoshihara et al., J. , Biol, Chem, 265:5809-5815 (1990) reported. It exists, like something that exists. The term "calpain" hereinafter refers to the above-mentioned Yo shihara enzyme and all CaZ+ activated enzymes including calpains and Used to mean all proteases. Calpains degrade a wide variety of protein substrates, but cytoskeletal proteins Paraphytes are particularly vulnerable. Small (and in some cases, Kalpai The products of proteolytic digestion of these proteins by proteins become more pronounced over time. And it is sustainable. Cytoskeletal proteins are the main components of certain cells, This makes it easy to detect calpain activity in cells and tissues. A method is provided. In particular, one cytoskeletal protein, spectrin, Accumulation of decomposition products ("BDPs") was associated with activation of calpain. neutral In tissues, activation of calpains is evidenced by the accumulation of these BDPs. denervation resulting from focal electrolytic injury, genetic abnormalities, excitotoxicity, Ruthheimer's disease, and peripherally or centrally toxic kainic acid and colchicine A number of complications, including subsequent ischemia in gerbils after administration of It has been observed in a degenerative state. Commercially available in vitro calpain inhibitors include leupepsin (Ae-Leu-L Peptide aldehydes such as e　u　-A　r　g-H) and E-64. Examples include epoxysuccinic acids. These compounds have been shown to affect the central nervous system (" Not useful for in vivo inhibition of calpain in CNS”) tissues and why As such, their membrane permeability is poor and therefore they cross the blood-brain barrier very well. There are some things that cannot be said to be true. Also, many of these ■showari Poor specificity, and inhibits many proteases in addition to calpain will. Konera's commercially available compounds interact with the substrate binding site of calpain. It is based on the peptide structure that is thought to be used. Regarding calpain inhibitors The associated active groups are used to inhibit this enzyme, and then to activate the catalytic part of calpain. Block or attack. Furthermore, although it is thought to have calpain inhibitory activity in vitro, it is not commercially available. Other types of compounds that have not been reported have also been reported. Examples of such compounds and Examples include peptide diazomethanes. Rich, D., H., System. Protease inhibitors, ProteFlse Inhibitors, ^ Edited by J. Barrett and G. Alversen, Elsevier , New York 1986. See pp153-178. This disclosure is Quoted as a reference. These peptide diazomethanes are also thought to be nonspecific due to poor membrane permeability. It is. There is evidence that certain inhibitors of calpain have some therapeutic utility. be. For example, leupepsin can promote neural repair in primates. E-6417) derivative, loxastatin (EST% Ep-460 or Ep-6 4d) has been shown to have utility in the treatment of muscular dystrophy. It is considered. E-64d does not have significant protease inhibitory activity itself is thought to be converted into a more potent form such as E-64c in the mammalian body. It is being Findings from electrophysiological studies identify the earliest link in the chain reaction that leads to cell death. One of the reasons may be as a result of Ca2+ channel opening and/or energy depletion. It has been suggested that this is due to an increase in intracellular free calcium. intracellular calci contains proteases such as calpain, lipases and kinases. appears to have a number of consequences, including activating numerous enzymes at once. . Increased intracellular calcium is also thought to induce changes in gene expression. Ru. Ischemia, head trauma, and stroke are all linked to the release of certain amino acids in CNS neurons. Gluta in an amount sufficient to cause excitotoxicity due to the action of acids. It was associated with the release of mic acid. This excessive glutamate and membrane freera Other factors such as radical damage and energy depletion can lead to increased intracellular Ca2+. bring about. Excess intracellular Ca2+ reduces the activity of phospholipase and calpain. Destruction of cell structure by oxidation, phospholipase and xanthine oxidation thought to be related to neuronal cell damage, including free radical production due to activation of It is known to have several effects. Many other factors are neurotoxic It is related to For example, decreased action potentials and changes in various chemical markers is known to be associated with nerves exposed to ischemic conditions. Despite the well-understood neurotoxic aspects mentioned above, CNS No effective treatments have yet been developed for most neurodegenerative diseases and conditions. stomach. Millions of people are affected by these diseases and conditions. Therefore Therefore, there is a need for effective treatments in treating and preventing these diseases and conditions. There is. Issue ■9 Summary The present invention is directed to patients who have or are likely to have neuropathological symptoms associated with neurodegeneration. For the production of drugs to inhibit or treat neurodegeneration in mammals Uses of calpain inhibitors or their pharmaceutically acceptable salts or derivatives thereof provide. In certain aspects of this use, neurodegeneration is caused by excitotoxicity, HIV-induced neurodegeneration, Robaci-1 denervation or post-injury ischemia, subarachnoid hemorrhage, stroke, multi-infarct dementia disease, Alzheimer's disease, Huntington's disease, or Parkinson's disease . The drug may include a pharmaceutically acceptable carrier, and may be used for transdermal administration, subcutaneous injection, etc. for injection, intravenous, intramuscular or intrasternal injection, or C It is intended for parenteral administration such as intravertebral injection or infusion directly into the NS. the drug may also be in a dosage form suitable for oral use. In some embodiments, The drug is used in patients undergoing neurological surgery, cardiovascular surgery or surgery requiring general anesthesia. Neurological changes in patients undergoing surgery may occur during or after surgery, such as for This is to substantially prevent sexual assault. The calpain inhibitor preferably has membrane permeability. Invading mammalian CNS tissues, such as through the use of sexual calpain inhibitors, Ru. The present invention also provides calpain inhibitor protection in the in vivo treatment or prevention of degeneration. Provides an in vitro method to select suitable calpain inhibitors for use as agents do. This method identifies compounds with calpain inhibitory activity in vitro. and calpain inhibitory activity by in vitro membrane permeability assays. This includes identifying membrane-permeable compounds. This membrane permeable in In vitro assays involve obtaining multiple tissue sections from a mammal; At least a portion, if not all, should be treated with a calpain inhibitor: untreated group exposing this tissue portion to events that can cause degeneration in the tissue; Measuring the amount of degeneration that has occurred in the woven tissue portion, and measuring the amount of degeneration that has occurred in the treated tissue portion. This includes comparing the amount of degeneration that occurs in the treated tissue section. Degeneration of treated tissue area The amount of degeneration that occurred in the untreated tissue section was lower than that of the calpain inhibitor. This suggests that the harmful agent is membrane permeable. In some embodiments, the tissue portion is , brain sections, platelets or cultured cells. In some embodiments, the measurement step cells such as , spectrin, MAP2, actin binding protein or tau The tissue section is analyzed for the presence of skeletal component BDPs. The measuring step may also include measuring electrical activity of the tissue portion. can. The in vitro assay of membrane permeability allows the platelet to permeate through the platelet membrane. By measuring the ability of calpain inhibitors to inhibit endogenous calpain in You can also do this. The present invention also relates to neurodegenerative diseases that have or are capable of having neuropathological symptoms associated with neurodegeneration. production of drugs for inhibiting or treating neurodegeneration in sexually active mammals. Substituted heterocyclic compounds or their pharmaceutically acceptable salts or derivatives thereof It is used for medical purposes. The substituted heterocyclic compound is preferably a class I substituted isocoumarin. , a member of the class ■substituted isocoumarins or the class ■heterocyclic compounds. More preferably, the substituted heterocyclic compound is 3-chloroisocoumarin, 3. 4- Dichloroisocoumarin: 3-alkoxy-7-amino-4-chloroisocoumarin : or 7-substituted 3-alkoxy-4-chloroisocoumarin. said replacement The heterocyclic compound is C1TPr01CSNH! -C4TPrOIC. PhCHzNHCONHC1TPr01C1CHsCONHC1TPrOfC. L-Phe-NH-CiTProlC, PhCHzNHCONH-CiTEtO Summer C5PhCH=CONH-CiTEtOIC or D-Phe-NH-CiT Another aspect of the present invention is the use of claim 17 in which EtolC is associated with neurodegeneration. Neurodegeneration in mammals that have or may have neuropathological symptoms of have calpain inhibitory activity, for the manufacture of drugs for inhibiting or treating Use of peptide keto compounds or pharmaceutically acceptable salts thereof or derivatives thereof provide a way. The drug is preferably used for the prevention or treatment of CNS neurodegeneration. It is. The peptide keto compound is preferably a peptide α-keto ester, a peptide a peptide α-keto acid or a peptide α-keto amide. More preferably, the above Peptide keto compounds are members of one of the following subclasses; dipeptide α -ketoesters (subclass A), dipeptide α-ketoesters (subclass class B), tripeptide α-ketoesters (subclass A), tripeptide α- Keto esters (subclass B), therapeptide α-keto esters, amino peptide α-keto esters, dipeptide α-geto acids (subclass A), Dipeptide α-keto acids (subclass B), tripeptide α-keto acids, tetra Peptide α-keto acids, amino acid peptide α-ketoacids, dipeptide α-keto acids amides (subclass A), S dipeptide α-ketoamides (subclass B), Peptide α-ketoamides, tetrapeptide α-ketoamides or amino acid α - Ketoamides. Furthermore, another aspect of the present invention is to provide neuropathological symptoms related to neurodegeneration. to inhibit or treat neurodegeneration in mammals that have or may have Lyroketone peptide compounds with calpain inhibitory activity for the production of drugs for or a pharmaceutically acceptable salt thereof or a derivative thereof. Said The drug is preferably for the prevention or treatment of neurodegeneration of the CNS. This Haroke Peptide compounds are aminohaloketone peptides or diazoketone peptides can be. The invention of substituted heterocyclic compounds, peptide keto compounds or haloketone peptides The use of light is excitotoxicity, HIV-induced neurobat-1 ischemia, subarachnoid hemorrhage, cerebral stroke. Intermediate, brain attack, massive heart attack, multiple infarct dementia, Alzheimer's disease, Huntington disease, or neurodegeneration associated with Parkinson's disease. these The drug for use in can include a pharmaceutically acceptable carrier, for transdermal administration, For subcutaneous injection, intravenous, intramuscular or intrasternal injection, or intravertebral injection directly into the CNS. It is for parenteral administration, such as large or intravenous injections. The drug is also suitable for oral use. It can also be in other dosage forms. Said uses also include ischemia induced events, stroke, head trauma , major heart attack, brain attack, near-drowning, carbon oxide poisoning, surgery-related injury or neurological degeneration. Can be used in conjunction with neurodegeneration resulting from other events that cause Ru. Another aspect of the invention is an in vitro method containing peptides or proteins. (b) During sample processing, generation, preparation, isolation, purification, storage, or or to the sample in a manner that minimizes proteolytic degradation during or after transportation. Keto-substituted heterocyclic compounds or peptides that are a member of one of the following subclasses: dipeptide α-ketoesters (subclass A) , dipeptide α-ketoesters (subclass B), tripeptide α-ketoesters esters (subclass A), tripeptide α-ketoesters (subclass B), Tetrapeptide α-ketoesters, amino acid peptide α-ketoesters, di- Peptide α-keto acids (subclass A), dipeptide α-keto acids (subclass B), Tripeptide α-keto acids, Motrapeptide α-keto acids, Amino acid peptide Tide α-keto acids, dipeptide α-ketoamides (subclass A), dipeptides α-ketoamides (subclass B), tripeptide α-ketoamides, tetrape peptide α-ketoamides or amino acid α-ketoamides. The present invention In addition, the degradation caused by calpain activity in tissue samples can be prevented during sample preparation or afterwards. Substituted heterocyclic compounds, peptide keto compounds, or or by adding a haloketone peptide. the sample is a whole organ and the addition of the compound perfuses the organ with said compound dissolved in the liquid. It consists of things. Preferably, after said addition step, the tissue sample is prepared for neurodegeneration. used in the assay, which tests purified calpain activity in tissue samples. consists of doing. In either of these methods, the addition of the compound to the sample and adding a peptide alpha-keto acid. Preferably, this page Ptide α-keto acids are members of one of the following subclasses; dipeptide α- Keto acids (subclass A), dipeptide α-keto acids (subclass B), tripe peptide α-keto acids, tetrapeptide α-keto acids or amino acid peptide α- They are keto acids. Yet another aspect of the invention provides drugs for treating or inhibiting neurodegeneration. It is to provide. These drugs include carrier-containing pharmacologically acceptable dosage forms. Pharmacologically effective neuroprotective amounts of substituted heterocyclic compounds, peptide keto compounds or is a haloketone peptide, or a pharmaceutically acceptable salt thereof or a derivative thereof. included. In one preferred embodiment, a peptide keto compound is included in said medicament, and said Peptide keto compounds are one of the subclasses of compounds; dipeptides. α-ketoesters (subclass A), dipeptide α-ketoesters (subclass ras B), tripeptide α-ketoesters (subclass A), tripeptide α -ketoesters (subclass B), tetrapeptide α-ketoesters, and are amino acid peptide α-ketoesters. This peptide keto compound is a Suitably it is one of the following compounds. Bz-DL-Ala-COOEt. Bz-DL-Ala-COOCH2°C6H4-CH5 (para), Bz- DL-Lys-COOEt, PhC0-Abu-COOE soot B (CH3)zCH(CHz)zco-Abu-COOEt, CHxCHzCH )zcHco-Abu-CσOEt. Ph(CH2)6CO-Abu-COOEl also other suitable peptide keto compounds The compound can also be selected from the compounds listed below. Z-Ala-DL-Ala-COOEt, Z-Ala-DL-Ala-COOB zl. Z-Ala-DL-Ala-COOnBu, Z-Leu-Nva-COOEL Z-Leu-Nle-COOEt, Z-Lau-Abu|COOEt. Z-Leu-Met-COOEt, Z-Leu-Phe-COOEt, Z- Leu-4-CI-Phe-COOEt. The peptide keto compound used in the preferred drug is one of the following classes of compounds: Ru. Z-Ala-Ala-DL-Ala-COOEt, Z-Ala-Pro-DL- Ala-COOEt. Z　-A　l　a　-A　l　a　-D　L　-A　b　u　-COOE　t , Z - A l a - A l a - D L - A b @ - COOB z 1. 2-NapSO2-Leu-Leu-Abu-COOEt Preferred peptide ketolation The compound is also Meo-8ue-Ala-Ala-Pr. -DL-Abu-COOMe or Z-Ala-Ala-Ala-DL-Ala -COOEt. Additionally, other suitable peptide keto compounds are: Nidipeptide α-keto acids (subclass class A), dipeptide α-keto acids (subclass B), tripeptide α-keto acids , tetrapeptide α-keto acids, or amino acid peptide α-keto acids. Therefore, suitable peptide keto compounds would be one of the following compounds: . Bz-DL-Lys-COOH, Ez-DL-Ala-COOH, Zshi, eu- Phe-COOH, Z-Leu-Abu-COOH from one of the following subclasses The resulting compounds dipeptide α-ketoamides (subclass A), dipeptide α - Ketoamides (subclass B), tripeptide, alpha-ketoamides, tetrapeptide Ptide α-ketoamides or amino acid α-ketoamides are likewise suitable It can be used in any manner. Therefore, another suitable peptide ketolation The compound may be one of the following compounds. The drug may also include Class I substituted isocoumarins, Class II substituted isocoumarins. or may contain a substituted heterocyclic compound such as one of the class ■heterocyclic compounds. can. Suitable substituted heterocyclic compounds include 3-chloroisocoumarin, 3. 4-Diclo Leuisocoumarin, 3-alkoxy-7-amino-4-chloroisocoumarin: also is a 7-substituted 3-alkoxy-4-chloroisocoumarin; C1TPrOIC . NH=-CiTPrOICSPhCH7NHCONH-CiTPrOIC. CH=CONH-CiTPrOIC, L-Phe-NH-CiTPrOIC. PhCHzNHCONHCi TEtolC. PhCH2C0NHCi TEtOIC or D-Phe-NH-CiTEtO I.C. In these compositions, the composition preferably contains between 70 μg and 7 g in each dose. A dosage form comprising an active ingredient, said carrier comprising a liquid, and said drug comprising a dosage form. form, each dose containing 0.0 ml of said carrier. It consists of 5m1-1 liter. The compositions may further include at least one of the following. DMSO or other organic solvents, lipid carriers, detergents, surfactants or emulsifiers. These compositions can be in dosage forms suitable for parenteral administration or for topical application. The drugs may also be in various dosage forms such as aqueous solutions, lotions, jellies, oily solutions, or oily suspensions. The present invention also provides the use of substituted heterocyclic compounds as drugs, the use of haloketone peptides as drugs, and the use of peptide keto compounds as drugs; The peptide keto compounds are one of the following subclasses of compounds. Dipepti α-ketoesters (subclass A), dipeptide α-ketoesters (subclass A), class B), tripeptide α-ketoesters (subclass A), tripeptide α-ketoesters (subclass B), tetrapeptide α-ketoesters or is an amino acid peptide α-ketoester. Suitable peptide keto compounds for this use may also include any of the peptide keto compounds described above in connection with drugs. Figure 9 Summary of Aoidan Figure 4 shows glutamic acid and seed The percentage of inhibition of glutamate-induced cell death by the addition of various calpain inhibitors is shown. Figure 2 shows the effects of Z-Leu-Phe-CONN-1-Et (CX269) and Z-Leu-Abu-CONH-Et (CX275) on infarct diameter generated on MCA occlusion in male rats. is illustrated in a graph. Figure 3 shows CX216 (Z-Leu-Phe-CO2Et, peptide keto compound This figure also shows the effects of CN, (Ae-Leu --Leu-Nle-H) on the survival of hippocampal slices exposed to an oxygen-deficient atmosphere for 10 minutes in comparison with control slices. Both of these compounds were added at their optimal concentrations at both 1 and 2 hour incubation times in two atmospheres. Figure 4 shows the magnitude of evoked potentials of control, CI1-treated, and CX218-treated hippocampal sections over time, and the sections were exposed to an oxygen-deficient atmosphere over this period. It is exposed to the surrounding environment. Figure 5 shows the 1 hour incubation results for Z-Leu-Phe-CONH-Et (CX269) and Z-L eI''-Phe-C02Et (CX216). Figure 2 shows the percentage recovery of EPSP due to severe hypoxia over the time period. Figure v46 shows a comparative effect of the presence of C11 or CX216 on hippocampal slice survival, expressed as the duration of oxygen deprivation (in minutes) before fiber salvo disappearance. Figure 7 shows the effect of C11 on the behavior and convulsive effects of kainic acid compared to controls. Figure 8 shows the amount of spectrin BDPs in the brains of rats exposed to kainic acid for control and C11 treated rats. Mitsufara's detailed explanation■ A-Stock length We believe that calpain activation is a core event in many cases of brain atrophy and degeneration. and that inhibition of calpain alone is sufficient to inhibit or prevent cell damage and death. Therefore, we further discovered that inhibition of neurotransmitters protects against neurotoxicity associated with many neurodegenerative conditions and diseases. Ta. Based on the above-mentioned findings, we have demonstrated that intracellular calcium is associated with the neuropathological state of neurons. It is believed that the increase in lumen activates calpain and starts the digestion of nerve cells from within. We believe that there are other mechanisms for calpain activation related to these conditions. Therefore, one aspect of the invention is that by inhibiting calpain activity, It is concerned with inhibiting and treating neurodegeneration and other diseases related to this digestion. Accordingly, part of this aspect of the invention provides that calpain inhibitors can be In vivo administration may predict neurodegeneration and other pathological symptoms caused by this digestion. It is to prevent. By way of example and not by way of limitation, diseases and conditions that can be treated using this aspect of the invention include post-excitotoxic neurodegeneration, HIV-induced neurobachi-1 ischemia, denervation after ischemia or trauma. , subarachnoid hemorrhage, stroke, multiple These include infarct dementia, Alzheimer's disease (AD), Parkinson's disease, Huntington's disease, surgery-related brain injury, and other neuropathological conditions. Spectrin BDPs are associated with in vivo calpain activity, as mentioned above. It has been found that We detected DPs characteristic of calpain activation. found that in each case of neurodegeneration, calpain activation is localized to brain regions that are highly susceptible to specific pathogenic treatments. Additionally, histological methods As it turns out, calpain activation precedes clear evidence of neurodegeneration. Therefore, it is likely that calpain activation is about to occur in the brain. are spatially associated with ongoing cell death. Therefore, we believe that calpain activation is an important mechanism of cell damage and death in many pathological conditions, including neuropathological conditions. There is also evidence that activation of calpain is an early event in the death of cells associated with neurons. In contrast to known proteases, we therefore believe that inhibition of calpain activity may be beneficial in conferring invasion at an early stage of cell death before the cell line is significantly damaged. Another aspect of calpain's involvement in neurodegeneration is its involvement in the regenerative system of these proteins.The developing or regenerating axon is It is known that as the stabilization process progresses further, it is somewhat inhibited. This stabilization can occur once the axons reach their targets. deer However, in some systems, stabilization may occur in inappropriate locations. Some researchers suggest that this arrest pathway is generated, at least in part, by activation of intracellular calpain. It is also possible that inhibition of calpain may interfere with stabilization. (Luizzi, 1990). We believe that the use of calpain inhibitors in accordance with the present invention, in addition to inhibiting neurodegeneration, will effectively aid in neural tissue regeneration and repair following trauma. Another aspect of the invention provides at least three genera of compounds, wherein said substituted isocoumar The discovery was made that peptide ketone compounds, peptide ketone compounds, and haloketone peptides have calpain inhibitory activity. We have further discovered, as discussed below, that these 3fl compound genera exhibit other properties that make them particularly useful as therapeutically effective compounds in the treatment of neurodegenerative conditions and diseases. B. Substituted Heterocyclic Compounds One particular genus of compounds that exhibit calpain inhibitory activity when used in accordance with the present invention are substituted heterocyclic compounds. These compounds include substituted isocoumarins. The substituted heterocyclic compounds are known to be excellent inhibitors of serine proteases. As also discussed below, we hereby acknowledge that these compounds are also inhibitors of calpain I and calpain. It was also found to be an inhibitor of other calpains. Additionally, we note below that unlike most known inhibitors of calpains, this These substituted heterocyclic compounds are not effective as inhibitors of papain or cathepsin B. I found something interesting. We therefore believe that this substituted heterocyclic class provides a substantially specific means of inhibiting calpains without affecting other thiol proteases. One particular genus of substituted heterocyclic compounds with calpain inhibitory activity has a cationic position. These are isocoumarins with substituents. These substituted heterocyclic compounds are referred to herein as "Class I substituted isocoumarins." Class I substituted isocoumarins are Cithrombin, human thrombin, human factor Xa, human factor Xla, human factor X1la, bovine trypsin, human plasma plasmin, human tissue plasminogen activator, human lung tryptase, rat skin tryptase, human leukocyte elastase It is known to be an excellent inhibitor of a number of serine proteases, including Gase, porcine pancreatic elastase, bovine chymotrypsin, and human leukocyte cathepsin G. The class I substituted isocoumarins are Inhibits serine proteases, forms acyl enzymes, and in some cases reacts with another nuclear active site to form further covalent bonds. We discovered that class I isocoumarins also react with calpain. We found that the mechanism of calpain inhibition is similar to that of serine protease inhibition. The reason for this is that the reaction mechanism of calpains is similar to that of serine proteases. I think it is similar to that. Class-substituted isocoumarins with calpain inhibitory activity have the following structural formula: It also contains pharmaceutically acceptable salts. In the formula, Z is C1-6 alkoxy to which an amine group is attached, and isothiureate group is t4'H. C1-6 alkoxy with zero guanidino groups, C1-6 alkoxy with an amidino group attached, C1-6 alkyl with an amino group attached, iso C1-6 alkyl to which a thiureido group is attached, C1-6 alkyl to which a guanidino group is attached 0=C=N-1S=C=N-1AA-NH-1AA-AA-NH-1AA-0-1AA-AA -0-1M-NH-1M-AA-NH-1M-AA-AA-NH -1M-0-1M-AA-0-1M-AA-AA-0-, where AA are alanine, valine, leucine, isoleucine, proline, methio Nin, phenylalanine, tryptophan, glycine, serine, threonine, Stine, beta-alanine, norleucine, norvaline, alpha-aminobutyric acid, epsilon aminocaproic acid, citrulline, hydroxyproline, orni represents chin or sarcosine, where M is NH,-CO-1NHI-C8-1NH! Sow-1X-NH- CO-1X-NH-C8-1X-NH-3O, -1X-CO-1X-CS-1X -SO, -1x-o-co- or x-o-cs-, In the above, X is C1-6 alkyl, Cl-6 fluoroalkyl, K-substituted Cl-6 alkyl, K-substituted C1-6 fluoroalkyl, phenyl, j-substituted phenyl, 12-substituted phenyl, 1-3 substituted phenyl, Naphthyl, J-substituted naphthyl, 12-substituted naphthyl, 13-substituted naphthyl substituted naphthyl, C1-6 alkyl with an attached phenyl group, C1-6 alkyl with two attached phenyl groups, C1-6 alkyl with a J-substituted attached phenyl group, or or C1-6 alkyl having two J-substituted attached phenyl groups, and in the above, J is halogen, C0OH, OH, CN, NO2, C1-6 alkyl. Cyl, Cl-6 alkoxy, C1-6 alkylamine, C1-6 dialkylamine or C1-6 alkyl-0-CO-, where K is halogen, C0O H, OH, CN, NO2, NH2, C1-6 alkylamine, C1-6 dialkyl Y is H5 halogen, tri1-fluoromethyl, methyl, 01-I and methoxy selected from the group consisting of: Compounds of formula (1) may also contain more than one bale at the B position, as shown in the structure below. may contain the above substituents. In the formula, electronegative substituents such as NO2, CN, CI, C0OR and C0OH enhance the reactivity of isocoumarin, and NH2, OH, alkoxy, thioalkyl Electropositive substituents such as alkyl, alkyl, alkylamino, and dialkylamino increase its stability. Neutral substituents also enhance the stability of acyl enzymes and improve the effectiveness of the inhibitors. The following compounds are in the class of the present invention! Representative of isocoumarins: 4-chloro 3-(3-isothiureidopropoxy)isocoumarin (CiTPrOIC) 7-(benzylcarbamoylamino)-4-chloro-3-(3-isothiureidopropoxy) poxy) isocoumarin (PhC1(2NIICONH-CiTProlC)7-(phenylcarbamoylamino)-4-chloro-3-(3-isothiureidopro poxy)isocoumarin (PhNHCONH-CiTPrOIC) 7-(acetylamino)-4-chloro-3-(3-isothiureidoproboxy)isocoumarin (CH3CONH-CiTPrOIC) 7-(3-phenylpropionylamino)-4-chloro-3 -(3-isothiureidopropoxy)isocoumarin (PhCH2CH2CONH-CiTPrOIC)7-(phenylacetylamino)-4-chloro-3-(3-isothiureidopropoxy)isocoumarin (PhCH2CO NH-CiTPrOIC)7-(L-phenylacetylamino) nylamino)-4-chloro-3-(3-isothiureidopropoxy)isocoumarin (L-Phe-NH-CiTPrOIC)7-(N-t-butyloxycarbonyl-s-phenylalanyl amino)-4-chloro -3-(3-isothiureidopropoxy)isocoumarin (Boc-L-Phe-NH-CiTProlC) 7-(D-phenylalanylamivar 4-chloro-3-(3-isothiureidopropoxy) Roboxy) isocoumarin (D-Phe-NH-CiTProlC) 7-(Nt -butyloxycarbonyl-〇-phenylalanylamino)-4-chloro-3- (3-isothiureidopropoxy) isocoumarin (Boc-D- Phe-NH- CiTProlC) 7-(benzylcarbamoylamino)-4-chloro-3-(2-isothiureido ethoxy)isocoumarin (PhCHNICON)l-CiTEtOIC) 7-(phenylcarbamoylamino)-4-chloro-3-(2 -Isothiureido etho xy) Isocoumarin (PhNHCONH-CiTEtolC) 7-(Isopropylene) carbamoylamino)-4-chloro-3-(2-isothiureidoethoxy)i Socoumarin ((CH3)2CIINHCONH-CiTEtolC)7-(Fe nylacetylamino)-4-chloro-3-(2-isothiureidoethoxy)iso Coumarin (PhCH2CONH-CiTEtolC)7-(L-Phenylalani (L-Phe-NH-CiTEtOIC)7-(N-t-butyloxycarbonyl-L~phenylalanylamino)-4-chloro-3 -(2-isothiureidoeth xy) isocoumarin (Boc-L-Phe-NH-CiTEtOIC) 7-(D-phenylalanylamino)-4-chloro-3-(2-isothiureido ethoxy)isocoumarin (D-Phe-NTI-CiTEtOIC) 7-( N-t-butyloxycarbonyl-D-phenylalanylamino)-4-rioo-3-(2-isothiureidoethoxy)isocoumarin (Boc-D-Phe-NH-CiTEtolC) 7-(Nt-butyl 7-(L-alanyl-L-alanylamino) -4-chloro-3-(2-isothiu Reidethoxy) Isocoumarin (ala-^1a-Book-CiTEtOIC) 7- (l-Naphthylcarbamoylamino)-4-chloro-3-(2-isothiureido ethoxy) Isocoumarin (NaphthylNH-CiTEtolC) 7- ((S)-α -methylbenzylcarbamoylamine)-4-chloro-3-(2-y Sotiureidoethoxy) Isocoumarin (S-C6H5(CH3)CHNHCON H-CiTEtolC)7- ((R)-α-Methylbenzylcarbamoylamide -4-Chloro-3-(2-isothiureidoethoxy)isocoumarin (R-C 6H5(CH3)C)I!慴ω書-CiTEtOIC) 7-Dansylamino-4-chloro-3-(2-isothiureidoethoxy)isocoumarin (DansylN H-CiTEtolC) 7-phenylthiocarbamoylamino-4-chloro-3-(2-isothiureidoethoxy ) isocoumarin (PhS(,SNH-CiTE tolC)7-(m-carboxyphenylthiocarbamoyl)amino-4-chloro rho-3-(2-isothiureidoethoxy)isocoumarin (m-α)OH-P〦1 1C5NH-CiTEtolC)7-(p-carboxyphenylthiocarbamoy ) Amino-4-chloro-3-(2-isothiureidoethoxy)isocoumarin (p-α)OR-PhNHC8NH-CiTEtolC)7-amino-4-chloro-3-(3-isothiureidopropoxy)isocoumarin (＾CITIC ) Isocoumarins with basic substituents are also known to be effective inhibitors of serine proteases. U.S. Patent No. 4°845, cited herein by reference. No. 242, Powers et al. Class ■Substituted isocoumarins and books The compounds of this genus referred to in the text are considered to be effective in the use of the present invention. There is. Class ■Substituted isocoumarins have the following structural formula or pharmaceutically acceptable salts. Yes, in the formula, R is -NH-C(=NH)-NH*, -C(=NH)-NH, , C I-s with attached amino, and the formula S C(+NH!+)NH! adhesion selected from the group consisting of C1-6 alkyl with isothiureido, Z is H, Halogen, (1+-s alkyl, Cl-6 alkyl with attached phenyl, CI -Fluorinated alkyl, C-group alkyl with attached hydroxyl group, attached C+-s alkoxy C with C? +s alkyl, C16 alkoxy, C5-, fluorinated alkoxy, C1-6 aljyloxy, benzyloxy, 4-fluoroben with attached phenyl Zyloxy, -ocH2(di, H, R' (2-substituent), -OCH2Cs H-R,' (3-substituent), -0CH2(:,, H, R' (4-substituent) , -0CHIC@H3R2' (2,3-substituent), OC)1-Cs Hs R2' (2,4-substituent), -0CH2CsHsRt° (2,5-1 replaced group), -0CI-12cMHIR," (2,6=substituent), ~OCH2Cs Hs　R＊　’　(3. 4-monosubstituent), and -0CR,C,H3R1' (3゜5-substituent) Choose from the group. Ro is H, halogen, trifluoromethyl, No2. Cyano, methyl, MeI・ selected from the group consisting of cypress, acetyl, carboxyl, OH and amino, Y consists of H, halogen, trifluoromethyl, methyl, OH and methoxy selected from the group. , apart from this, the class all-altered isocoumarins are denoted by the structure (Tl). In the formula, Z has C1-, alkoxy, attached guanidino with attached thioureido C1-@alkoxy, CI-s alkoxy with attached amidino, attached amino C1-8 alkyl having an attached isothiureido, 01~. alkyl, attachment C1-@alkyl with guanidino, C1-@alkyl with attached amidino selected from the group consisting of R is H, OH, H,, NOt halogen, C3-, alkoxy, CI-w fluoride Alkoxy, C+-s alkyl, C+-s alkyl with attached amino, M -AA-NH-. selected from the group consisting of M-AA-0-, where AA is alanine, valine, lo Isine, isoleucine, proline, methionine, phenylalanine, tryptophyl fan, glycine, serine, threonine, cysteine, tyrosine, asparagine, Glutamine, aspartic acid, lysine, arginine, histidine, beta-ara Nin, norleucine, norvaline, alpha-aminobutyric acid, and epsilon. Aminocaproic acid, citrulline, hydroxyproline, ornithine and sarco selected from the group consisting of syn, where M is H, having 1 to 6 carbon atoms. Lower alkanoyl, carboxyalkanoyl, hydroxyalkanoyl, amino Alkanoyl, benzenesulfonyl, tosyl, benzoyl, and 1 to 6 selected from the group consisting of lower alkylsulfonyl having a carbon atom, Y is H, From the group consisting of halogen, trifluoromethyl, methyl, OH, and methoxy selected. As a further alternative, class ■ substituted isocoumarins are represented by structure (II) In the formula, R is -NH-C(-NH)-NH,, -C(=NH)NH,, attached amino C troalkyl having an attached isothiureido; selected from the group Z is C3-.alkoxy with attached amino, C with attached isothiureido 1-.alkoxy, C3-.alkoxy with attached guanidino, attached amidino CI-s alkoxy with attached, Cl-alkyl with attached amino, attached guani From CI-*alkyl with dino, C+-s alkyl with attached amidino Y is selected from the group consisting of H, halogen, thiofluoromethyl, methyl, OH, or and methoxy. The following compounds are representative of the class ■substituted isocoumarins. nopropoxy)isocoumarin, 3-(3-aminopropoxy)-4-chloroiso Coumarin, 3-(2-isothiurinoidethoxy)-4-chloroisocoumarin, 3-(3-isothiureidobropoxy)-4-chloroisocoumarin, 7-amino -3-(3-isothiureidoproboxy)-4-chloroisocoumarin, 7-gua Nino-3-methoxyisocoumarin, 7-guanidino-3-methoxy-4-chloro Leuisocoumarin, 7-guanidino-3-ethoxyisocoumarin, 7-guanidino -3-ethoxy-4-chloroisocoumarin, 7-geanidino 3-(2-phenylon) 3-ethoxy)isocoumarin, 7-geanidino 3-(2-phenylethoxy)- 4-chloroisocoumarin. Yet another genus of substituted heterocyclic compounds useful in the present invention is defined herein as "class" ■Heterocyclic compounds, which have the following structural formula: Z is CO, So, So2. selected from the group consisting of CCI and CF, and Y is 0. selected from the group consisting of S and NH, and X is selected from the group consisting of N and CH selected, and R is C1-6 (such as methyl, ethyl, and propyl) alkyl, phenyl-containing C1-4 alkyl (such as benzyl), and such as fluoromethyl, pentafluoroethyl and heptafluoropropyl ) C1-6 fluoroalkyl. The Z group is such that it interacts with the active site serine OH group of the serine protease. Therefore, it must be electrophlic. Said R The group must be uncharged and hydrophobic. one carbon atom in the R group Above, as long as the R group maintains hydrophobicity, 0. Above S, NH and others It can also be substituted with atomic groups such as those described below. The following compounds are representatives of class ■heterocyclic compounds.・2-trifluoromethane Chil-4H-3,1-benzoxazin-4-one 2-pentafluoromethyl-4 H-3,1-benzoxazin-4-one 2-hebutafluoropropyl-4H-3 ,1-benzoxazin-4-one 2-methyl-4H-3,1-benzoxazine- 4-one 2-propyl-4H-3,1-benzoxazin-4-one 2-benzyl -4H-3,1-benzoxazin-4-one 2-heptafluoropropyl-4- Quinazolinone 2-propyl-4-quinazolinone 2-benzyl-4-quinazolinone 2-(C,H6CC1,)-4-chloroquinazoline, and 2-propyl-4 -Chloroquinazoline. Class ■Heterocyclic compounds are described in U.S. Patent No. 4,847, which is cited by reference in the text. No. 202, Powers et al. Other substituted heterocycles include 3-chloroisocoumarin, Davies and Poole, Jr., J. Chea, Soc., I)p, 1616- 1629 (1928); 3-chloro and 3,4-dichloroisocoumarin , Milevskaya, Bekinskaya, and Yagupol' 5kii, Zhur. org, HilIL, 9, pp, 2145-2149 (1973) : 3-methyl and 4-carboxy-3-methylisocoumarin, Tircxl kar and Usganonkar, Ind. J. Chew, 7, p. p, 1114-1116 (1969); 7-: Toro and 7-aminoyl Sokmalin, Choksey and Usgaonkar, Ind-J, Ch. For other purposes, such as ew, 14B, pp. 596-598 (1976). It has been prepared in advance for. All disclosures of the previous paper must be presented in the main text of C1. I use C. Similarly, these other substituted isocoumarins when used in accordance with the present invention It is thought to exhibit calpain inhibitory activity. Still other substituted isocoumars recently prepared for the inhibition of serine proteases. Phosphorus is 3-chloroisocoumarin, Harper, Hemm1. and Pow ers, J, A, Chew, Soc, 105. pp, 6518- 6520 (1983); 3, 4-dichloro\coumarin, Harper, Hemm1. and Powers, Biochemist. y　24. I) p, 1831-1841 (1985) G 3-alco xy-7-amino-4-chloroisocoumarin, Harper and Powers , J, AILCelIl. Scc, 106. 1) r), 7618-7619 (1984), Harpe r and Powers, Biochemistry 24D7200-721 3 (1983); basic groups (aminoalkoxy, guanidino and isothiurei); Other substituted isocoumarins with (doalkoxy), Kam, Fujik awa and Powers. Biochemistry 27, pp, 2547-2557 (1988) ; 7-substituted 3-alkoxy-4-chloroisocoumarins, Powers, R am, Narashimhan, 01eksyszyn, Hernand ez and Ueda, i. Ce1l Bicx:hem, , 39. 1) I), 33-46 (1989 ) and Powers, 01eksyszyn, Nara Tang ■ Amataka ■ ≠ Mr. A Kam. hdhakrishnan and Myer, Jr., Biochemist. y　29. 3108-3118 (1990). Previous theory ■■ All disclosures are cited herein by reference. We found that the above-mentioned compounds are serine It exhibits protease inhibitory activity and likewise calpain when used according to the invention. We believe that it also exhibits inhibitory activity. Classes and classes useful in practicing the invention Substituted isocoumarins, class ■Substituted heterocyclic compounds and other substituted heterocyclic compounds The above-mentioned isocoumarins, including compounds, are collectively referred to as "substituted heterocyclic compounds" below. I will call it . The term "substituted heterocyclic compound" refers to any of these classes of compounds. shall be used to refer to a specific species. Preparation of various substituted heterocyclic compounds is illustrated by Example 5HCI-3HC9 Ru. Example 5 HCI 7-(Phenylcarbamoylamino)-4-chloroisocoumarin was prepared by As described (Powers et al., Bioche Illustry 29. 3108-31 18 (1990)). This compound (0.32 g, 1 mmol) mixed with THFSmlHF5ml biphenylisocyanate g, 1 mmol) and the reaction mixture was stirred at room temperature overnight. Product 7-(phenylcarbamoylamino)-4-chloro-3-(2-bromoe Toxy) isocoumarin was precipitated, the yield was 40%, the melting point was 215-217°C, Mass spectrum m/e”437. 9 (M+)>C+sH+aNtOaCIB Theoretical value of r: C, 49,40: H, 3,22; N, 6. 40; Ci, 8. 10. 3. Experimental values: C, 49, 48, H, 3, 25, N, 6. 34, C1, 8, 1 There was 2’t’. Phenylcarbamoylamino compound (0.1 g, 0123 mmol) in THF At 70°C in 10 ml overnight, 0. 02 g of thiourea (0,26 mmol) and I heated it up. The final product was precipitated with a yield of 0. 04g, 36%, melting point 161- 163'C (decomposition), mass spectrum (FAB+) m/e=433 (M-Br ). C, eH+5N40-CI BrS: 0. Theoretical value of 25THF: C, 45, 12:H. 3. 86. N, 10. 53. CI, 6. 67° Experimental value: C, 44, 83; H. 3. 92:N, 10. 12:C1,6,4107-(ethylcarbamoylamino )-4-chloro-3-(2-isothiureidoethoxy)isocoumarin, 7-(t-butylcarbamoylamino)-4-chloro-3-(2-isothiurei (doethoxy) isocoumarin, 7-(benzylthiocarbamoylamino)-4-chloro-3-(2-isothiure Idoethoxy) isocoumarin, 7-(Ethylthiocarbamoylamino)-4-chloro-3-(2-isothiurei (doethoxy) isocoumarin, 7-(4-fluorobenzylthiocarbamoylamino)-4-chloro-3-(2 -isothiureidoethoxy)isocoumarin, and 7-(2,5-dimethylben ethyl)thiocarbamoylamino-4-chloro-3-(2-isothiureidoethyl) c) Isocoumarin can be prepared by similar operations. Example 5HC2 7-(acetylamino)-4-chloro-3-(3-isothiureidoethoxy)i Preparation of Socoumarin 7-Amino-3-(3-bromopropoxy)-4-chloroisocoumarin was previously Synthesized as described (Kam et al., 1988). This compound (0.33g. 1 mmol) in 20 ml of dry THF with 0.1 mmol of acetic anhydride. 15g (1.5 mm) ) and heated. After a few minutes, a yellow solid precipitated out. After 3 hours, add 5 m Concentrate to 0.1 and filter the solid. 37 g of 7-(acetylamino)-4-chloro Rho-3-(3-bromopropoxy)isocoumarin, melting point 170-172°C: Ma A spectrum m,'e = 375 (M+) was obtained. Acetylated isoc Marine (0°15g, 0. 4 mmol) was added to thiourea (0,036 g, 0.4 mmol). 47mi limole) to produce a final product of 0. Obtained 9 g in 50% yield, melting point 180-181 °C, mass spectrum m,,'e = 370 (M+-Br). elemental analysis As a result, the theoretical value of C+sH+D N5 CLCI B r S was C, 39, 97,H,3,80;N. 9. 32. The experimental value was C, 39, 86; H. 3. 83. N, 9. 29; C1,7,85. 7-Dolifluoroacetylamino-4-chloro-3-(3-isothiureidopro poxy) isocoumarin, 7-hebutafluorobutyloyl acetylamino-4-chloro-3-(3-isothi ureidopropoxy) isocoumarin 1. 7-sacudinylamino-4-chloro-3 -(3-isothiureidoproboxy)isocoumarin, and 7-(o-phthalyl)amino-4-chloro-3-(3-isothiureidoproboxylate) c) Isocoumarin can also be prepared in a similar manner. Example 5HC3 7-(Benzylcarbamoylamino)-4-chloro-3-(3-isothiureido Preparation of proboxy) isocoumarin 7-(Benzylcarbamoylamino)-4-chloro-3-(3-bromopropoxy) c) Isocoumarin is benzyl isocyanate and 7-amino-4-chloro-3- (3-bromopropoxy) prepared as described above from reaction with isocoumarin. Ta. Melting point, 188-189'C; Mass spectrum: m/e=359 (M+- benzyl). The final product is 7-(benzylcarbamoylamino)-4-chloro -3-(3-bromopropoxy)isocoumarin and thiourea (yield 74%). Melting point, 165-166'C; mass spectrum (FAB+); m/e=461 (M+-Br)o elemental analysis, Cz+Ht2Na OaCI BrS O,75THF (7) Theoretical value: C, 48,36; H, 4,7 0, N, 9. 40°CI, 6. 56, experimental value: C, 48,13; H, 4,87; N, 9. 65; C1゜615゜ Example 5HC4 7-(phenylacetylamino)-4-chloro-3-(2-isothiureidoeth xy) Preparation of isocoumarin 7-amino-4-chloro-3-(2-bromoethoxy)isocoumarin (0,15 g, 0. 47 mmol) was initially added to phenylacetyl chloride (0.09 g. 0. 55 mmol) in 10 ml of THF, then triethylamine (0° 05g, 0. 47 mmol) was added and the reaction mixture was stirred at room temperature overnight. . After removing the Et,N-HCl salt by filtration, the product 7-(phenylacetyl Amino)-4-chloro-3-(2-isothiureidoethoxy)isocoumarin Crystallized from HF and Pet, ether (yield, 73%). Melting point, 165- 169'C; Mass spectrum; m/e=436. 7 (M+), this phenyl Heating the acetylamino derivative (0.1 g) with thiourea (0.02 g), Product 0. 05g (yield, 40%), melting point, 115-120°C, mass spectrum (FAB+); m/e=432 (M+-Br) was obtained. Elemental analysis, C1oH +eN-04CI　BrS　O, 5HzO theoretical value: C, 45,99; H, 3, 83, N, 8. 05; C1, 6, 80, experimental value: C, 46, 09; H, 4, 17 ;N, 8. 02; C1, 6, 79° Example 5HC5 7-(R-α-methylbenzylcarbamoylamine)-4-chloro-3-(2- Preparation of isothiureidoethoxy)isocoumarin 7-(R-α-methylbenzylcarboxylic acid) Rubamoylamino)-4-chloro-3-(2-bromoethoxy)isocoumarin is , synthesized as described above. Melting point 183-185°C: Mass spectrum rn/e = 464 (M +) o This compound (0.1 g) was treated under the same conditions as above. with thiourea (0.02 g) to give the final product 7-(R-α-methylbenzi carbamoylamino)-4-chloro-3-(2-isothiureidoethoxy)i Socoumarin (0,078 g), melting point, 143-150°C1. Mass spectrum (FAB+); m/e=461 (M+-Br) was obtained. elemental content Analysis, Cz+IL2NaOaCI　BrS　O,5H20 theoretical value: C,45,7 5, H, 4, 35: N, io, 17: cl, 6. 44, Experimental value C, 44, 95 :H, 4, 31:N, to, 02. C1, 6, 36° Example 5HC6 7-(D-phenylalanylamino)-4-chloro-3-(2-isothiurato Preparation of ethoxy) isocoumarin Boc-D-Phe (0.33g, 1. 2 mmol) to 13-cyclohequino Lupodiimide (0.13g, 0. 6 mmol) and THF in 10ml o”C for 1 hour to form a symmetrical anhydride, then 7-amino-4-chloro -3-(2-bromoethoxy)isocoumarin (0.2 g, 0. 6 mmol) Added. The reaction was allowed to stir at room temperature overnight and the precipitate 7-(Boe-D-Ph e-amino)-4-chloro-3-(2-bromoethquin)isocoumarin is formed. (0°29g, 71%), T1. -C1;! 1 spot, Toruhe, 180182 °c, mass spectrum m,,'e = 566 (M+). Elemental analysis, C25 H2IN20aCI　Theoretical value of Br C, 53, 07, H, 4, 63:N, 4. 9 5. C1,6,27, experimental value C153,25; H, 4,66; N, 4. 87; C1,6,24° Boc-D-Phe compound (02 g, o, 35 mmol) was Ourea (0,027g,. 7-(Boc-D-phenylalanylamino) )-4-chloro-3-(2-isodiureidoethoxy)isocoumarin (0,14 g), yield 62%, mass spectrum (FAB+) m, /e = 561 (M'-B r) was obtained. This compound (0.1 g) was dissolved in 3rn'l THF at 0 °C, then the solvent was evaporated. Let it air and dry. The final product was precipitated after addition of ether and TLC (CH,CN H2O: A c OH = 8: 1: 1) and 1 spot: mass spec (FAB+) m/e=462 (M”-Br-CFSCOO). 7-Boc-alanylamino-4-chloro-3-(2-isothiureidoethoxy ) isocoumarin, 7-benzoylamino-Al rho 4-chloro-3-(2-isothiureidoethoxy c) Isocoumarin, 7-Penzoylamino-Phe-4-chloro-3-(2-isothiureidoethoxy c) isocoumarin, and 7-Boc-valylamino-4-chloro-3-(2-isothiureidoethoxy) Isocoumarin can be prepared using the same procedure. Example 5HC7 7-(Boc-alanylalanylamino)-4-chloro-3-(2-isothiure Preparation of isocoumarin (idoethoxy) 7-(Boc-alanylalanylamino)-4-chloro-3-(2-bromoeth xy)isocoumarin was synthesized similarly. Melting point, 147-151°C, mass spec. vector m/e = 561 (M+) o elemental analysis, theoretical value C, 47, 12: H,485, experimental value C,47,18:H,4,87゜cono compound (0.2g) was reacted with thiourea (0.03 g) by the same procedure to obtain 7-(Boc-alani rualanylamino)-4-chloro-3-(2-isothiureidoethoxy)isochloride Marine 4'0. 04g), mass spectrum m/e = 556 (M'-Br) was produced. Made it happen. 7-(Alanylalanylamino)-4-chloro-3-(2-isothiureidoeth xy) isocoumarin is a block of Boc-Ala-Ala-NH-CiTEtolC. The lock was prepared by removing the lock with trifluoroacetic acid. mass spectrum (FAB') m/e=456 (M'-Br-CF, Coo). Example 5HC8 7-(phenylthiocarbamoylamino)-4-chloro-3-(2-isothiure Preparation of isocoumarin 7-(phenylthiocarbamoylamino)-4-chloro-3-(2-promoeth -) Isocoumarin is a combination of phenylisothionate and 7-amino-4-chloro Prepared from reaction with rho-3-(2-bromoethoxy)isocoumarin, yield, 59 06, melt #, 157-158℃, mass spectrum m/e = 361 (M'-Ph NH, l). Elemental analysis, theoretical value C, 48, 36; H, a, 39, experiment Value: C, 48, 26, H, 3, 40° The above bromoethoxy compound is then added to thiourea. The final product was obtained with a yield of 32% and a mass spectrum (FA B')m/e449ei'-Br). Example SHC9 7-(m-carboxyphenylthiolhamoylamino)-4-chloro-3-( Preparation of 2-bromoethquine)isocoumarin 7-(m-carboxyphenylthioca Rubamoylamino)-4-chloro-3-(2-)'romoetquin)isocoumarin is m-ruphoquinphenylisothiocyan-1 and 7-amino-4-chloro- Prepared from reaction with 3-(2-bromoethoxy)isocoumarin. Yield, 64% , melt:, 157-158' C: mass spectrum m'e361 (M"-(C OOH)PhNH''-Br). 7-(3-fluorohensyl)amino-4-chloro-3-(2-isodiureate Etkin) isocoumarin, 7-(3-nitrobenzoyl)amino-4-chloro-3-(2-isothiureido ethoxy) isocoumarin, 7-cyphenylacetylpropylamino-4-chloro-3-(2-isothiurei toethoxy) ink marine, 7-diphenylbrobylamino-4-chloro-3-(2-isothiuretoethoxy) c) Isocoumarin, 7-(p-Toluenesulfonyl)amino-4-chloro-3-(2-isothiurei toethoxy) isocoumarin, and 7-(α-Toluenesulfonyl)amino-4-chloro-3-(2-isothiurei (doethoxy)isocoumarin is the corresponding 7-substituted-4-chloro-3-(2-bro can be prepared as described above from the reaction of isocoumarin and thiourea. I can do it. 7-substituted-4-chloro-3-(2-bromoethoxy)isocoumarin is 7-amino-4-chloro-3-(2-bromoethoxy)isocoumarin and appropriate by reaction with acid chloride or sulfonyl chloride in the presence of Et+N. , can be synthesized. 7-ethoxycarponylamino-4-chloro-3-(2-isothiureidoethoxy c) Isocoumarin, 7-Benzyloxycarbonylamino-4-chloro-3-(2-isothiureido ethoxy) isocoumarin, and 7-Fninoxycarponylamino-4-chloro-3-(2-isothiureidoethane) xy)isocoumarin is a 7-substituted-4-chloro-3-(2-bromoethoxy)isocoumarin. It can be prepared from the reaction of socoumarin and thiourea. 7-ethoxycarponylamino-4-chloro-3-(2-bromoethoxy)iso coumarin, 7-Benzyloxydicarbonylamino-4-chloro-3-(2-bromoethoxy ) isocoumarin, and 7-Funinoxycarbonylamino-4-chloro-3-(2-bromoethoxy)i Socoumarin is 7-amino-4-chloro-3-(2-bromoethoxy)isocoumarin. It can be synthesized by reacting phosphorus with the corresponding chloroformate. C, peptide toyme Peptide α-ketones, peptide α-keto acids, and peptide α-ketoamides The transition state of serine proteases and cysteine proteases is These are inhibitors. Although these subclasses of compounds can be chemically identified, In order to Collectively referred to below. Interactions between serine and cysteine proteases and peptides are discussed in the main text. cheerter, 1. , and Berger, ^, , 1967, B iochem, Biophys, Res, Comm Uki A 27:15 7-162 This is explained using the nomenclature of (quoted as Sannai in the text). Individual substrate or inhibitor The amino acid residues of are Pi, R2, etc., and the corresponding subsite of yeast is Sl. It will be named 82 mag. The cleavage bond of the substrate is Pi-PL”. Serine protease The main recognition site of ZE is Sl. The most important recognition system for cysteine proteases The sites are Sl and S2. Amino acid residues and blocking groups are designated by the standard abbreviation n (J, B iol. Chem, 260. 14-42 (1985) Reference 1 (cited as a reference in the text) It was described using Amino acid residues (AA) in the peptide or inhibitor structure are moieties Structure -NH-CHR, -CO- (wherein R3 is the side chain of the amino acid) means. Peptide α-ketoester residues have the structure -NH-CHR, -CO-C It is written as -AA-CC)-OR- indicating o-OR. Therefore, benzoylua The ethyl ketoester derived from ranin is Bz-Al a-Co-OEt , which is Cs　Hs　CO-NH-CHMe-Co-Co-OEt shows. Similarly, peptide keto acid residues are written as -AA-CO-OH. difference Furthermore, peptide ketoamide residues are described as -AA-Co-NH-R. did Therefore, Z-Leu-Phe-OH derived ethyl ketoamide is Z-Leu-Ph It is written as e-NH-Et, which is C5HsCHzOCONHCH(CH2C HMez)　Co　NH-C)((CH,Ph)-Co-Co-NH-Et Taste. Peptide α-ketoester containing amino acid residues having a hydrophobic side chain at position 21 The family also includes several system proteins, including papain, cathepsin B, and calpain. It was found to be an excellent inhibitor of proteinases. Calpains can be inhibited by peptide inhibitors with several different active groups. can. of commercially available in vitro calpain inhibitors such as peptide aldehydes. The structure-activity relationship shows that calpains strongly prefer Leu or Vat at position 22. is made clear. These enzymes have a wide range of amino acids at position 21. Although it is inhibited by inhibitors, it generally has a nonpolar or hydrophobic side chain at position 21. It is more effectively inhibited by inhibitors with amino acids that have therefore, We have identified another specific genus of compounds exhibiting calpain inhibitory activity that can be used in accordance with the present invention. The compounds were found to be peptide keto compounds. These are - shell structure M -(a a), -C-QR or a pharmaceutically acceptable salt thereof, M is NH2-CO-1NH2-C3-1NH2-8O, -1X-NH-CO- 1X-NH-C3-1X-NH-8O, -1X-CO-1X-CS-1X-SO , -1x-o-co- or x-o-cs-1H in practice bobenzoxy, succinyl, methyloxysuccinyl, butyloxycarbonyl and X is C1-6 alkyl, Cl-6 fluoroalkyl, J-substituted C1-6 Alkyl, J-substituted C1-6 fluoroalkyl, 1-atomantyl, 9-fluorene Nyl, phenyl, K-substituted phenyl, K2-substituted phenyl, K3-substituted phenyl, naph Chyl, K-substituted naphthyl, K2-substituted naphthyl, K3-substituted naphthyl, attached phenyl group C1-6 alkyl having two attached phenyl groups, K C1-6 alkyl having a substituted attached phenyl group, and a substituted attached phenyl group to selected from the group consisting of 2 C1-6 alkyl, J is halogen, C0O H, OH, CN, NO2, NH2, Cl-6 alkoxy, C1-6 alkylami Cl-6 dialkylamine, Cl-6 alkyl-0-CO-1C1-6 alkyl selected from the group consisting of Ky-0-CO-NH and C1-6 alkyl-S-, K is halogen, C1-6 alkyl, C1-6 perfluoroalkyl, C1-6 Alkoxy, NO, CN, OH%CO2H, amino, C1-6 alkylamino , C2-12 dialkylamino, C1-6 acyl, and C16 alkoxy〇 selected from the group consisting of 〇- and C1-6 alkyl-S-, and aa is L or Indicates a block or non-block amino acid of the D structure, preferably alanine, valine. , leucine, isoleucine, proline, methionine, methionine sulfoxide, Phenylalanine, tryptophan, glycine, serine, threonine, cysteine tyrosine, asparagine, glutamine, aspartic acid, glutamic acid, Syn, arginine, histidine, phenylglycine, beta-alanine, noruro Isin (nl e), norvaline (nva), alpha-aminobutyric acid (ab u), epsilon aminocaproic acid, citrulline, hydroxyproline, homo selected from the group consisting of arginine, ornithine or sarcosine, and n is 1 to is the number 20, Q is 0 or NH, R is H, Cl-6 alkyl, C1-6 fluoroalkyl, C16 chloroalkyl Pencil, phenyl-substituted Cl-6 alkyl, Kl-substituted attached phenyl group Indicates C1-6 alkyl. Therefore, the peptide keto compounds include peptide keto esters, peptide keto esters, peptide keto esters, peptide keto esters, peptide keto esters, It can be classified into keto acids and peptide keto compounds. Each of the above compounds The amino acid peptide also depends on the number of amino acids contained inside the compound. such as tripeptides, dipeptides, tripeptides, tetrapeptides, pentapeptides, etc. It can be classified into We have demonstrated that a subclass of peptide α-ketoester compounds according to the present invention It has been found to be a particularly useful calpain inhibitor when used. These services In the text, dipeptide α-ketoesters (subclass A), dipepeptin Tide α-ketoesters (subclass B), tripeptide α-ketoesters ( subclass A), tripeptide α-ketoesters (subclass B), tetrape referred to as peptide α-ketoesters and amino acid peptide α-ketoesters. . All of these subclasses are considered to belong to the peptide keto compound genus. There is. Dipeptide α-ketoesters (subclass A) have the formula % formula % compounds or pharmaceutically acceptable salts of the formula, M, is H, NHt Co-5NHz C5-1NH OS O, -1X-NH -CO-1X2N-CO-1X-NH-CS-1X2N-C8-1X NH5O 2-1X=N 5O2-1X-CO-1X-CS-1X 5O2-1x-o-c o- or x-o-cs-, X is Cl-+o alkyl, Cl-+. Fluoroalkyl, J-substituted Cl-1゜a rukyl, J-substituted C+ -+ ofluoroalkyl, l-atomantyl, 9-fluor Olenyl, phenyl, K-substituted phenyl, K2-substituted phenyl, K3-substituted phenyl, naphthyl, K-substituted naphthyl, K2-substituted naphthyl, K3-substituted naphthyl, attached phenyl C + - + o alkyl having a ru group, Cl-1 having two attached phenyl groups o alkyl, C+-+a alkyl with K-substituted attached phenyl group, and Cl-+o alkyl with two attached phenyl groups, with attached phenoxy group C I-1゜alkyl, and J placed at K on the phenoxy group is halogen, C0O H, OH, CN, N(h, NH,, C+-+o alkoxy, CI-+. alkyl Amine, C2-12 dialkylamine, C1-1゜alkyl-0-CO-1CI -+oalkyl-0-CO-NH-1 and Cl-+oalkyl-8- selected from the group K is halogen, C1-1o alkyl, Cl-+opepaloloalkyl, Cl -10 alkoxy, No, CN, 0HSCO2H, amino, C+-+o alkyl Ruamino, Cx-12 dialkylamino, C1-1゜acyl and C+-t selected from the group consisting of o alkoxy-Co and C+-to alkyl-8- , AA, is an L structure, a D structure, or a side chain block with no chirality at the α carbon. block or non-block amino acids, preferably alanine, valine, leucine, Isoleucine, proline, methionine, methionine sulfoxide, phenylara Nin, tryptophan, glycine, serine, threonine, cysteine, tyrosine , asparagine, glutamine, aspartic acid, glutamic acid, lysine, algium nin, histidine, phenylglycine, beta-alanine, norleucine, nor Valine, alpha-aminobutyric acid, epsilon aminocaproic acid, citrulline, Hydroxyproline, ornithine, homoarginine, sarcosine, indoline 2 -Carphonic acid, 2-azetidine carboxylic acid, pipecolic acid (2-piperidine carboxylic acid) acid), O-methylserine, O-ethylserine, S-methylcysteine, S- Ethylcysteine, S-pentylcysteine, NHt-CH (CHtCHE I 2) -COOH, alpha aminohebutanoic acid, NH2-CH(CH, -1-na phthyl)-COOH, NH2-CH(C1-(t-2-naphthyl)-COOH. NH2CH(CHt-cyclohexyl)-COOH, NH2-CH(CHt-cyclohexyl)-COOH clopentyl)-COOH,NH,-CH(CH,-cyclobutyl')-COO H1NH2-CH(CHI-cyclopropyl)-COOHl trifluoroloy AA is selected from the group consisting of cine, and hexafluoroleucine, and AA is the L structure structure, D structure, or non-chirality side chain block or non-block at the α carbon. Indicates an amino acid, preferably leucine, isoleucine, proline, methionine , methionine sulfoxide, phenylalanine, tryptophan, glycine, Phosphorus, threonine, cysteine, tyrosine, asparagine, glutamine, aspa Laginic acid, glutamic acid, lysine, arginine, histidine, phenylglycine , beta-alanine, norleucine, norvaline, alpha-aminobutyric acid, ip Cilon aminocaproic acid, citrulline, hydroxyproline, ornithine, moarginine, sarcosine, indoline 2-carboxylic acid, 2-azetidine carbo acid, pipecolic acid (2-piperidinecarboxylic acid), 0-methylserine, 0-ethylserine Tyrserine, S-methylcysteine, S-ethylcysteine, S-pentylcis Ting, NHt-CH(CHtCHEt,)-COOH, alpha aminohep acid, NH, -CHCCH2-1-naphthyl)-COOH, NH2-CH(C H22-naphthyl)-COOH1NH7-CH(CH2-cyclohexyl)CO OH,,N　H2CH(CH2-cyclopendel)-Cool(. N　Hy　　　C)((CH+-ncrobutyl)-COOHSNH2-CH(C H,-cyclopropyl)-COOH, trifluoroleucine, and hexaflu selected from the group consisting of ololeucine; R2 is I], C1-7゜alkyl, phenyl group attached to Cl-2゜alkyl Cl1O alkyl with I selected from the group consisting of Lukiru. Dipeptide α-ketoesters (subclass B) have the formula. Ml-AA-NH-CHR, -Co-Co-0-R compounds or pharmaceutically Wherein the formula is an acceptable salt, Ml is H, NH, -CO-1NH2-C3-1NH-Sow-1X-NH-C O-1X2NCO-1X-NH-C8-1X, N-C8-1X NH5Oh-1 X2N Sow-1X-CO-1X-CS-1X 5O2-1x-o-co-ma or x-o-cs-, X is C+-+o alkyl, C+-+o fluoroalkyl, J-substituted CI-10 Alkyl, J-substituted Cl-1゜fluoroalkyl, ■-atomantyl, 9-fluoro Renyl, phenyl, K-substituted phenyl, K2-substituted phenyl, K3-substituted phenyl, Na Phthyl, K-substituted naphthyl, K2-substituted naphthyl, K3-substituted naphthyl, attached phenyl C+-+o alkyl having a group, C+-+o alkyl having two attached phenyl groups Alkyl, Cl-1゜alkyl with K-substituted attached phenyl group, and substituted attached to C+-+o alkyl having two phenyl groups, CI having an attached phenoxy group −+o alkyl, and has an attached phenoxy group substituted with K on the phenoxy group. selected from the group consisting of C+-+o alkyl, J is halogen, C0OH ,OH,CN,No2. NH2, Cl-15 alkoxy, CI-+o alkyl amine, C-12 dialkylamine, C1-0゜alkyl-0-CO-1C4-2 ゜A group consisting of alkyl-0-CO-NH-1 and C1-1o alkyl-8- selected from I (is halogen, c+-to alkyl, C+-+◇pepaloloalkyl, CI-IQ alkoxy, NO2, CN, 0HSCO2H, amino, C1-3゜A alkylamino, C2-12 dialkylamino, CI-IQ acyl and C1-1 selected from the group consisting of ゜alkoxy-〇〇 and cl-1゜alkyl-8-, AA is a side chain block with no chirality in L structure, D structure, or α carbon or non-blocking amino acids, preferably alanine, valine, leucine, iso Leucine, proline, methionine, methionine sulfoxide, phenylalanine ・Tryptophan, glycine, serine, threonine, cysteine, tyrosine, Asparagine, glutamine, aspartic acid, glutamic acid, lysine, arginine histidine, phenylglycine, beta-alanine, norleucine, norva Phosphorus, alpha-aminobutyric acid, epsilon aminocaproic acid, citrulline, human Droxyproline, ornithine, homoarginine, sarcosine, indoline 2- Carboxylic acid, 2-azedecinecarboxylic acid, pipecolic acid (2-piperidinecarboxylic acid) acid), 0-methylserine, 0-ethylserine, S-methylcysteine, S-ethylcysteine, Tylcystine, S-pentylcystine, NH2CH(CH2CHEt2)- COOI-(, alpha aminohebutanoic acid, NH, -CH(CH2-1-naph CH)-COOHlNH, -CH(CH2-2-naphthyl)-COOHlNH, -CH(cx(,-cyclohexyl)-COOH,NH,-CH(CH,-cyclohexyl) Lopentyl)-COOH1NH2-CH(CH2-cyclobutyl)-COOH. NH,-CH(CH,-cyclopropyl)-COOH,)lifluoroleucine, and hexafluoroleucine, and R7 is a CI-1 branch. and unbranched alkyl, C8-9 branched and unbranched cyclic alkyl, and CI- s selected from the group consisting of branched and unbranched fluoroalkyl, R is H, C3 -2, alkyl, Cl-2゜ C1-2゜ with phenyl group attached to alkyl A group consisting of alkyl and C3-2゜alkyl having a phenyl group substituted thereon. selected from. Tripeptide α-ketoesters (subclass A) have the formula %formula% compounds or pharmaceutically acceptable salts of the formula, M3 is I'', NHt-co-1NH2-C3-1NH25O2-1X-NH- C0-1X2N-CO-1X-NH-C3-1X2N-CS-1X-NH-3O 2-1X, N-8O, -1X-CO-1X-CS-1X-SO, -1T-0-C O- or X-o-cs-, X is C110 alkyl, Cl-10 fluoroalkyl, J-substituted CI-to alkyl Kyl, J-substituted C+-1o fluoroalkyl, l-atomantyl, 9-fluorenyl Le, phenyl, Kt! ! substituted phenyl, K2 substituted phenyl, K3 substituted phenyl, Na Phthyl, K-substituted naphthyl, K2-substituted naphthyl, K3-substituted naphthyl, attached phenyl C + - + o alkyl having a group, C + - + having two attached phenyl groups o alkyl, K-substituted C1-1゜alkyl with an attached phenyl group, and substituted with C I-10 alkyl with two attached phenyl groups, with attached phenoxy group C1-1°alkyl, and attached phenoxy substituted with K on the phenoxy group selected from the group consisting of C3-1°alkyl having a group, and T is C1-1°alkyl. Kyl%Cl-1゜fluoroalkyl, J-substituted C+-+o alkyl, J-substituted C+- +o fluoroalkyl, 1-atomantyl, 9-fluorenyl, phenyl, K position substituted phenyl, K2 substituted phenyl, K3 substituted phenyl, naphthyl, K substituted naphthyl , K2-substituted naphthyl, K31-substituted naphthyl, C2-+o atom with attached phenyl group Alkyl, Cl-10 alkyl with two attached phenyl groups, K-substituted attached phenyl C3-1゜alkyl having a group, and CI having two phenyl groups substituted on -to alkyl; J is halogen, C0OH, OH, CN, No, NH,, C1-1゜alkoxy C, C3-1゜alkylamine, C2-I2 dialkylamine, C+ -loa Alkyl-0-CO-1C1,,1゜Alkyl-0-CO-NH-1 and CI -1°alkyl-3-, K is halogen, C+-Ia alkyl, Cl-10 perfluoroalkyl, C1 -1゜Alkoxy, N02, CN SOH, CO2H, Amino, C1-1゜Al Kylamino, Ct-+tdialkylamino, C+-+oacyl and C+- +. selected from the group consisting of alkoxy-CO and C1-1°alkyl-8- , AA is an L structure, a D structure, or a side chain block with no chirality at the α carbon. block or non-block amino acids, preferably alanine, valine, leucine, Soleucine, Proline, Methionine, Methionine Sulfoxide, Phenylalani tryptophan, glycine, serine, threonine, cysteine, tyrosine, Asparagine, glutamine, aspartic acid, glutamic acid, lysine, arginine histidine, phenylglycine, beta-alanine, norleucine, norva Phosphorus, alpha-aminobutyric acid, epsilon aminocaproic acid, citrulline, human Droxyproline, ornithine, homoarginine, sarcosine, indoline 2- Carboxylic acid, 2-azetidinecarphonic acid, pipecolic acid (2-piperidine power report) acid), 0-methylserine, 〇-ethylserine, S-methylcysteine, S-ethylserine Chirustein, S-benturenstein, NH2-CH (CH2CHF t2 )-COOH, alpha aminohebutanoic acid, NH, -CH(CH, -1-naph CH)-COOH%NH2-CH(CH,-2-naphthyl)-COOHlNH, -CH(CH2-cyclohexyl)-COOH,NH2-CH(CH,-cyclo pentyl)-COOH,NH2-CH(CH,-cyclobutyl)-COOH1N H2-CH(CH,-cyclopropyl)-COOH, trifluoroleucine, and hexafluoroleucine, and R is H, C2,. Al C1-2° alkyl having a phenyl group attached to C1-2° alkyl, and Kll! A group consisting of C I-2゜alkyl having an ll-substituted phenyl group selected from. Tripeptide α-ketoesters (subclass B) have the formula %formula% are compounds or pharmaceutically acceptable salts of the formula: M is H, NH2-CCI, NH, -C3-1NH25O2-1X-NH-C 0-1X2N-CO-1X-NH-CS-1X, N-C3-1X NH5ot- 1X, N-3O, -1X-CO-1X-CS-1X-SO2-1T-C)-CO - or x-o-cs-, X is C+-Io alkyl, C+-Io fluoroalkyl, J-substituted Cl-to alkyl; fluoroalkyl, J-substituted C+-+ofluoroalkyl, 1-atomantyl, 9-fluorene Nyl, phenyl, K-substituted phenyl, K2ft-substituted phenyl, K3-substituted phenyl, Na Phthyl, ■ (substituted naphthyl, K2fl-substituted naphthyl, K3-substituted naphthyl, attached fe C +-+ having a nyl group, o alkyl, C +- having two attached phenyl groups to alkyl, C I-+a alkyl with K-substituted attached phenyl group, and to C1-1゜alkyl having two substituted attached phenyl groups, having attached phenoxy groups C3-1゜alkyl, and attached phenoxy substituted with K on the phenoxy group selected from the group consisting of C+-+6 alkyl having a group, T is C+-1o alkyl; C+-+ofluoroalkyl, J substituted CI-10 alkyl, J substituted C +-+o fluoroalkyl, 1-atomantyl, 9-fluorenyl, phenyl, K-substituted phenyl, K2-substituted phenyl, K3-substituted phenyl, naphthyl, K-substituted naphthyl Chyl, K2-substituted naphthyl, K3-substituted naphthyl, C2-+ with attached phenyl group o alkyl, C+-+o alkyl having two attached phenyl groups, K substituted attached phenyl group C+-to alkyl having a phenyl group, and two phenyl groups substituted on the C1. ．． selected from the group consisting of 1° alkyl, J is halogen, C0OH, OH, CN, No, NH2, C+-+o alkoxy C, Cl-1o alkylamine, C2-12 dialkylamine, C+-+oalkylamine Kiru 0-CO-1CI-+ o Alkyl-0-Co-NH- and CI-+. a selected from the group consisting of Lukil-8-, K is halogen, C+-1o alkyl, Cl-16 perfluoroalkyl, CI -+. Alkoxy, N02, CN, OHSCO2H, amino, Cl-1o Lucylamino, Ctoco2dialkylamino, C+-+oacyl and C+-l selected from the group consisting of o alkoxy-〇〇 and Cl-1゜alkyl-8-, AA is a side chain block with no chirality in L structure, D structure, or α carbon or non-blocking amino acids, preferably alanine, valine, leucine, iso Leucine, proline, methionine, methionine sulfoxide, phenylalanine , tryptophan, glycine, serine, threonine, cysteine, tyrosine, a Sparagine, glutamine, aspartic acid, glutamic acid, lysine, arginine , histidine, phenylglycine, beta-alanine, norleucine, norvari alpha-aminobutyric acid, epsilon-aminocaproic acid, citrulline, hydride Roxyproline, ornithine, homoarginine, sarcosine, indoline 2-ka carboxylic acid, 2-azetidinecarboxylic acid, pipecolic acid (2-piperidinecarboxylic acid) acid), 0-methylserine, 〇-ethylserine, S-methylcysteine, S-ethyl Lucistine, S-pentylcysteine, NH2-CH (CH2CHF t2) -COOH, alpha aminohebutanoic acid, NH2-CH (CH2-1-naphthi ) COOH, NH2CH (CH22-naphthyl)-COOH. NH2-CH(CH2-cyclohexyl)-COOH, NH2-CH(CH2- cyclopentyl)-COOH,NH2-CH(CH,-cyclobutyl)-COO H. NH2-CH(CH2-cyclopropyl)-COOH, trifluoroleucine, and hexafluoroleucine, and R2 is a C1-1 branch. and unbranched alkyl, CI-w branched and unbranched cyclic alkyl, and CI- selected from the group consisting of mono-branched and unbranched fluoroalkyl, R is H, C, ,. Alkyl, C1-2゜a with phenyl group attached to C0-2゜alkyl alkyl, and C1-2゜alkyl having a phenyl group substituted on it. selected from. Tetrabeptite α-keto ester order is formula % formula % is a compound or a pharmaceutically acceptable salt of the formula: M, )(, NH2-CO-1NH2C5-1NH2-8O, -1X-NH- CO-1X2N-CO-1X-NH-CS-1X2N-C3-1X-NH-3O , -1X, N-8O, -1X-CO-1X-CS-1X-SO, -1T-0-C O- or x-o-cs-, X is C1-3゜alkyl, CI=1゜fluoroalkyl, J-substituted Cl-1゜a fluoroalkyl, J-substituted C+-+ofluoroalkyl, 1-atomantyl, 9-fluorene Nyl, phenyl, KW-substituted phenyl, K2-substituted phenyl, K3-substituted phenyl, naphyl Chyl, K-substituted naphthyl, K2-substituted naphthyl, K3-substituted naphthyl, attached phenyl group C+-+a alkyl having , Cl-1゜a having two attached phenyl groups Alkyl, C I-IQ alkyl with K-substituted attached phenyl group, and substituted with C+-+ having two attached phenyl groups. Alkyl, with attached phenoxy group C+-+o alkyl, and attached phenoxy substituted with K on the phenoxy group C +−+ having a group. selected from the group consisting of alkyl, T is ci-to alkyl; alkyl, Cl-10 fluoroalkyl, J-substituted C+-+o alkyl, J-substituted C+ -+. Fluoroalkyl, 1-atomantyl, 9-fluorenyl, phenyl, K-substituted phenyl, K2-substituted phenyl, K3-substituted phenyl, naphthyl, I-substituted na Futil, K2fl! substituted naphthyl, K3 substituted naphthyl, C with attached phenyl group 2-10 alkyl, C l-10 alkyl with two attached phenyl groups, K position C+-to alkyl having a phenyl group substituted and a phenyl group substituted to selected from the group consisting of C + -1o alkyl having 2, J is halogen, C0OH, OH, CN, No2. NH,, CI-+. Alcoki Ci, Cl-10 alkylamine, C2-12 dialkylamine, CI-IQ alkylamine Kill-0-CO-1C+-+. Alkyl-0-CO-NH-1 and C+ −+ selected from the group consisting of aalkyl-8-, K is halogen, C+ -+ o alkyl, CI-IQ perfluoroalkyl, C+-+o alkoxy, N　O2, CN, OH, CO, H, amino, C1-1゜ Alkylamino, C2-12 dialkylamino, C+ -+ o acyl and C Selected from the group consisting of +-Ia alkoxy〇〇 and C1-0゜alkyl-8- and AA is an L structure, a D structure, or a side chain block with no chirality at the α carbon. Indicates a locking or non-blocking amino acid, preferably alanine, valine, leucine , isoleucine, proline, methionine, methionine sulfoxide, phenyla Ranine, tryptophan, glycine, serine, threonine, cysteine, tyrosine Asparagine, Glutamine, Aspartic acid, Glutamic acid, Lysine, Al Ginine, histidine, phenylglycine, beta-alanine, norleucine, Luvaline, alpha-aminobutyric acid, epsilon aminocaproic acid, citrulline , hydroxyproline, ornithine, homoarginine, sarcosine, indoline 2-carboxylic acid, 2-azetidinecarboxylic acid, pipecolic acid (2-piperidinecarboxylic acid) rubonic acid), 0-methylserine, 〇-ethylserine, S-methylcysteine, S -Ethylcysteine, S-pentylcysteine, NH, -CH (CH, CHE) t2) -COOH, alpha aminohebutanoic acid, MHI-CH (CH2-1- naphthyl)-COOH, NH2-CH(CHz-2-naphthyl)-COOH. NH2CH(CH2-cyclohexyl)-COOH,NH,-CH(CH2-cyclohexyl) clopentyl)-COOH,NH,-CH(CH2-cyclobutyl)-COO HlNH, -CH(CH2-cyclopropyl)-COOH, trifluoroleuci and hexafluoroleucine, and AA is an L structure. , D structure, or side chain proso or non-chirality at the α carbon. leucine, isoleucine, proline, methionine, Methionine sulfoxide, phenylalanine, tryptophan, chrysin, seri Threonine, Cystine, Tyrosine, Asparagine, Glutamine, Asparagus Gic acid, glutamic acid, lysine, arginine, histidine, phenylglycine, beta-alanine, norleucine, norvaline, alpha-aminobutyric acid, ipsi Ron-aminocaproic acid, citrulline, hydroxyproline, ornithine, homo Arginine, Zarconone, Indoline 2-Carphonic Acid, 2-Azetidine Carvone acid, pipecolic acid (2-piperidinecarphonic acid), o-methylserine, 〇-ethyl Lucerine, S-methylcysteine, S-ethylcysteine, S-he〉Dirnste In, NH, -CH(CH2CHEt,)-COOH, full 7y-7 minohbuta acid, NH, -CH(CH, -1-+acyl)-COOH. NH2-CH (CH2-2-+7 chill) -COOH, NH+-CH (CHz- cyclobutyl/shi) C0OH,NH2CH(CHI>’)Ope>chi/shi)- COOH. NH2-CH(CI(,-butyl)-COOH,,NH2-CH(CH- -cyclopropyl)-COOH, trifluoroleucine, and hexafluoro selected from the group consisting of leucine; R is H, CI-z. Alkyl, having a phenyl group attached to C+-tn alkyl C1-2゜alkyl, and cl-2゜alkyl having a phenyl group substituted on 1 out of a group of kills! ! 1 shaku. Amino acid peptide α-keto esters have the formula % formula % ■The chemical compound is a pharmaceutically acceptable salt; h, 1, c, ■), NH, C0-1NH, -C3-1NH2-8O, -1X -NH-CO-1X, N-C0-1X-NH-C3-1X2N C8-1X-, -NH-3O2-1X+N 5C)h-1Y-CO-1X-C8-1X-SO, -1X-o-co- or x-C'l-CS--, X is C2-1o alkyl, C11O fluoroalkyl, J-substituted CI-IQ alkyl Kyl, J-substituted C+-+ofluoroalkyl, l-atomantyl, 9-fluorenyl phenyl, K-substituted phenyl, K2-substituted phenyl, K3-substituted phenyl, naphthi K-substituted naphthyl, K2-substituted naphthyl, K3-substituted naphthyl, attached phenyl group C+-Io alkyl having two attached phenyl groups, C1-1゜alkyl having two attached phenyl groups CI−+o alkyl with K-substituted attached phenyl group, and C + - + o alkyl having two nyl groups, C having an attached phenoxy group Io alkyl, and has an attached phenoxy group substituted with K on the phenoxy group. is selected from the group consisting of C + - + o alkyl, and Y is Cs -Io alkyl CI-+o fluoroalkyl, J-substituted C+-+o alkyl, J-substituted C1-1 0-fluoroalkyl, 1-atomantyl, 9-fluorenyl, K-substituted phenyl, K2-substituted phenyl, K3-substituted phenyl, naphthyl, K-substituted naphthyl, K2-substituted naphthyl Phthyl, K3-substituted naphthyl, C+-+o alkyl with attached phenyl group , C1. having two attached phenyl groups. □1G alkyl, K substituted attached phenyl group and CI-1 having two phenyl groups substituted on selected from the group consisting of o alkyl; J is halogen, C0OH, OH, CN, No2. NH2, C0-1゜Alkoxy C, CI-+a alkylamine, C2-12 dialkylamine, C3-1゜alkylamine Kyl-0-CO-1CI-1〜Alkyl-0-CO-NH-1 and C1-1 selected from the group consisting of oalkyl-3-, ■(represents halogen, C7-1゜alkyl, C4-1゜perfluoroalkyl, C I-1゜alkoxy, NO2, CN, OH, Co2H, amino, CI-IQa alkylamino, C2-12 dialkylamino, C3-1°acyl and C5-1 ° selected from the group consisting of alkoxy-CO and C1-10 alkyl-8-, AA is a side chain block with no chirality in L structure, D structure, or α carbon or non-blocking amino acids, preferably alanine, valine, leucine, iso Leucine, proline, methionine, methionine sulfoxide, phenylalanine , tryptophan, chrysin, serine, threonine, /stin, tyrosine, a Sparagine, glutamine, aspartic acid, glutamic acid, lysine, arginine , histidine, phenylchrysine, beta-alanine, norleucine, norvari alpha-aminobutyric acid, epsilon-aminocaproic acid, citrulline, hydride Roxyproline, ornithine, homoarginine, sarcosine, indoline 2-ka carboxylic acid, 2-azetidinecarboxylic acid, pipecolic acid (2-piperidinecarboxylic acid) acid), 0-methylserine, 0-ethylserine, S-methylcysteine, S-ethyl Lucistine, S-pentylcysteine, NHy-CH (CH, CHE t-z )-COOH, alpha aminohebutanoic acid, NH, -CH(CH2-1-naph NH2-CH(CH,-2-naphthyl)-COOH. NH2-CH(CHI-cyclohexyl)-COOH, NH2-CH(CHt- cyclopendel)-COOH,NH2-CH(CH,-cyclobutyl)-COO H. NH2-CH(CHt-cyclopropyl)-COOH, trifluoroleucine, and hexafluoroleucine, R is H, C, -2° Alkyl, C, I. C I-to alkyl with phenyl group attached to alkyl and C+, -2° alkyl having KrIt-substituted phenyl group. The first one is selected from the group. The peptide ketoester compounds described in F are not classified as calpain inhibitors in the context of the present invention. Representative of the peptide keto compounds found to be useful as: Bz-DL -Ala-COOEt Bz-DI,Ala-COOBzl Bz-DL, A11-COonBu Bz-DI, -Phe-COOEt Bz-DL-Ala-CoOCH2-C6Ha-CF3 (para)Bz-D L-Arg-COOEt Bz-DI, Lys-COOEt Z-Ala-DL-AJa-COOEtZ-Ala-DL-Ala-Co○Bm lZ-/1da-DL- to a-COOnBuMeO-5uc-Ala-DL-A la-COOMeZ-Leu-Nva-COOEt Z-Leu=Nle-COOEt Zshizu-Phe-COOEt Z-Lzu-Abu-Co□BzL We have found that certain peptide keto acid compounds when used in accordance with the present invention found it to be particularly useful. These are dipeptide α-keto acids (sub- class A), dipeptide α-keto acids (Zab class B), tripeptide α-keto acids acids, tetrapeptide α-keto acids and amino acid peptide α-keto acids sub- It's a class. All of these subclasses belong to the peptide keto compound genus. It is believed that. Dipeptide α-keto acids (subclass B) have the formula:% formula% compounds or pharmaceutically acceptable salts of the formula, M, is H, NH, -CO-1NH2-C8-1NH-5o2-1X-NH-C O-1X, N-C0-1X-NH-C8-1X! N-C5-1X-NH-3O, -1X2N-3O, -1X-CO-1X-CS-1X-SO, -1x-o-co - or x-o-cs-, X is CI-+o alkyl, C1-1゜fluoroalkyl, J-substituted C1-3゜a fluoroalkyl, J-substituted C1-1゜fluoroalkyl, 1-atomantyl, 9-fluorene Nyl, phenyl, K-substituted phenyl, K2-substituted phenyl, K3-substituted phenyl, naph Chyl, K-substituted naphthyl, K2-substituted naphthyl, K3-substituted naphthyl, attached phenyl group Cl-1゜alkyl having , C1-1゜alkyl having two attached phenyl groups , C l-10 alkyl with a K substituted attached phenyl group, and a substituted attached phenyl group C I−+ having two nyl groups. Alkyl, C3-1 with attached phenoxy group ゜alkyl, and has an attached phenoxy group substituted with K on the phenoxy group selected from the group consisting of C+-+o alkyl, J is halogen, C0OH, O H, CN, Not, NH2, C+-+o alkoxy, C1-4゜alkylamine C, -1. Alkyl-0-CO-NH-, and C,-1. From alkyl-S- selected from the group of K is halogen, C + - + o alkyl, C + - + o perfluoroalkyl Kill, C + - Io alkoxy, NO, CN, OH, C O tH, Amino, CI-+o alkylamino, Ct-+t-dialkylreamino, C + - + o acyl and C 1 6 alkoxy 〇〇 and C. -1. Al selected from the group consisting of kill-S-, where AA is the L structure, the D structure, or the alpha carbon represents a side-chain blocked or non-blocked amino acid with no chirality, preferably are alanine, valine, leucine, isoleucine, proline, methionine, methio Nin sulfoxide, phenylalanine, tryptophan, glycine, serine, sulphate leonine, cysteine, tyrosine, asparagine, glutamine, aspartic acid , glutamic acid, lysine, arginine, histidine, phenylglycine, beta -Alanine, norleucine, norvaline, alpha aminoacetic acid, epsilon. Aminocaproic acid, citrulline, hydroxyproline, ornithine, homoalgium Nin, sarcosine, indoline 2-carboxylic acid, 2-azetidine carboxylic acid, pi Pecolic acid (2-piperidinecarboxylic acid), 0-methylserine, 0-ethylserine S-methylcysteine, S-ethylcysteine, S-pentylcysteine, NH-CH (CHICHEtt)-COOH, alpha aminohebutanoic acid ,NHf-CH　(CHz-1-naphthyl)COOHSNHt　CH　(CH- 2-naphthyl)-COOH. NH, -CH (CH. -cyclohexyl) COOHSNHt CH (CH t-cyclopentyl)-COOH,NH2-CH　(CH,-cyclobutyl)- COOH. NH2-CH (CH. -cyclopropyl)-COOH, l-lifluorolouce and hexafluoroleucine, R, is CI-; Branched and unbranched alkyl, C,-, branched and unbranched cyclic alkyl, and C I-s shows branched and unbranched fluoroalkyl. Dipeptide α-keto acids (subclass B) have the formula M, -AAI-AAI-CO -OH are compounds or pharmaceutically acceptable salts of the formula: M++Yu H, NH Yi-CO-, NHf-CS-, NH. -S.O. -, X-NH- CO-, X2N-CO-, X-NH-CS-, X2N-CS-, X-NH SO t-, X=N Sow-, X-CO-, X-CS-, X-SO2-, X-0-C O- or x-o-cs-, X is C +-+. Alkyl, C,-. Fluoroalkyl, J-substituted C,-1. Alkyl, J-substituted C,-. Fluoroalkyl, 1-atomantyl, 9-fluoro Renyl, phenyl, Kfft-substituted phenyl, K2flt-substituted phenyl, K3-substituted phenyl Nyl, naphthyl, K-substituted naphthyl, K2-substituted naphthyl, K3-substituted naphthyl, attachment CI-+o alkyl having a phenyl group, C,-1 having two attached phenyl groups . Alkyl, C1-, with a K-substituted attached phenyl group. alkyl, and substituted with C1-1 having two attached phenyl groups. Alkyl, C with attached phenoxy group ,−,. alkyl, and an attached phenoxy group substituted with K on the phenoxy group. Has C +-+. selected from the group consisting of alkyl, J is halogen, COO H. OH. CN, No,, NH2, CI-+o alkoxy, C +-+o alkyl C2-1□ dialkylamine, C + - + a alkyl-O-C O-, C1-,. Alkyl-0-CO-NH-, and C1-1. Alkyl-S - selected from the group consisting of; K is halogen, C +-+o alkyl, C +-+o perfluoroalkyl, C +-+o alkoxy, NO2, CN, OH SC OtH, amino, C +-+o alkylamino, CI. . dialkylamino, CI-tO acyl and CI-+o alkoxy CO and and C1-1. selected from the group consisting of alkyl-S-, AA, is L structure, D structure side chain block or non-chirality at the alpha carbon. preferred are alanine, valine, leucine, isoleucine, proline, Methionine, methionine sulfoxide, phenylalanine, tryptophan, glycan Lysine, serine, threonine, cysteine, tyrosine, asparagine, glutami Aspartic acid, Glutamic acid, Lysine, Arginine, Histidine, Phenyl Luglycine, beta-alanine, norleucine, norvaline, alpha amino Butyric acid, epsilon aminocaproic acid, citrulline, hydroxyproline, or Nitin, homoarginine, sarcosine, indoline 2-carboxylic acid, 2-azethi Zinecarboxylic acid, pipecolic acid (2-piperidinecarboxylic acid), 0-methylcetate Phosphorus, 〇-ethylserine, S-methylcysteine, S-ethylcysteine, S- Pentylcysteine, NH=CH　(CHICHE t2)-COOH, Al Faraminohebutanoic acid, NH. -CH　(CHz-i-naphthyl)-COOH , NHt-CH (CH. -2-naphthyl)-COOH. NH2-CH (CH2-cyclohexyl)-COOH, NHf-CH (CH t-cyclopentyl)-COOH, NH. -CH (CHt-cyclobutyl)- COOH. NHtCH (CHt-cyclopropyl)-COOH. 　Trifluorolouce AA2 is selected from the group consisting of , D structure, or side chain block or non-chirality at the α carbon. leucine, isoleucine, proline, methionine, Methionine sulfoxide, phenylalanine, tryptophan, glycine, seri Threonine, Cystine, Tyrosine, Asparagine, Glutamine, Asparagus Gic acid, glutamic acid, lysine, arginine, histidine, phenylglycine, beta-alanine, norleucine, norvaline, alpha-aminobutyric acid, ipsi Ron-aminocaproic acid, citrulline, hydroxyproline, ornithine, homo Arginine, sarcosine, indoline 2-carboxylic acid, 2-azetidine carbonate acid, pipecolic acid (2-piperidinecarboxylic acid), 0-methylserine, 0-ethyl Lucerin, S-methylcysteine, S-ethylcysteine, S-pentylcysteine NHZ-CH (CH2CHEt2)-COOH1 alpha aminoheb Tananoic acid, NH2-CH (CHI-1-naphthyl)-COOH. NHx CH (CH2 2 + 7 chill) COOH, NHt CH (CHt-shi (Hexyl)-COOH1NH2-CH (CH. -cyclopentyl)-CO Oh. N.H. -CH (CH. -cyclobutyl)-COOH,NH2-CH (CL- cyclopropyl)-COOHl trifluoroleucine, and hexafluoro selected from the group consisting of leucine. Tripeptide alpha-keto acids have the structure: M, AA AA AA Co OH or pharmaceutically acceptable salts. During the ceremony. M, is H. NHt-CO-, NH2 CS-, NHt Sow-, X-NH- C. -, X2N-CO-, X-NH-CS-, XtN-CS-, X　NH　SOx- , X, N-8O, -1X-CO-1X-CS-1X-3O2-1x-o-co- or x, -o-cs-, X is CI-+. Alkyl, C1-1゜fluoroalkyl, J-substituted C+-+・a fluoroalkyl, J-substituted Cr-+ofluoroalkyl, 1-atomantyl, 9-fluorene Nyl, phenyl, Kl-substituted phenyl, K2-substituted phenyl, K3-substituted phenyl, naphyl Chyl, K-substituted naphthyl, K2-substituted naphthyl, K3-substituted naphthyl, attached phenyl group C+-+o alkyl having , CI-+o alkyl having two attached phenyl groups CI−+o alkyl with K-substituted attached phenyl group, and C1-1° alkyl having two nyl groups, CI-+o having an attached phenoxy group alkyl, and C with an attached phenoxy group substituted with K on the phenoxy group selected from the group consisting of 3-1° alkyl, J is halogen, COOH, OH, CN, Not, NH2, C+-+o alkoxy, C3-1゜alkylamine, C t-12 dialkylamine, CI-+o alkyl-0-CO-1C1-1゜al From the group consisting of Kyl-0-CO-NH-1 and C+-+ oalkyl-8- selected, K is halogen, C1-1゜alkyl, C1-1゜perfluoroalkyl, C1 -1゜alkoxy, Not, CN, OH, C0=H, amino, C1-1゜alkyl Ruamino, C2-12 dialkylamino, 0 mouths. Acyl and C+ -+ o a Lukoxy-CO and CI-+. selected from the group consisting of alkyl-8-, AA is an L structure, a D structure, or a side chain block with no chirality at the α carbon or indicates a non-blocking amino acid, preferably alanine, valine, leucine, isoleucine. syn, proline, methionine, methionine sulfoxide, phenylalanine, Liptophan, glycine, serine, threonine, cysteine, tyrosine, aspa Ragin, glutamine, aspartic acid, glutamic acid, lysine, arginine, Stidine, phenylglycine, beta-alanine, norleucine, norvaline, Alpha-aminobutyric acid, epsilon aminocaproic acid, citrulline, hydroxy Cyproline, ornithine, homoarginine, sarcosine, indoline 2-carbo acid, 2-azetidinecarboxylic acid, pipecolic acid (2-piperidinecarboxylic acid) , 0-methylserine, 0-ethylserine, S-methylcysteine, S-ethylcysteine Stine, S-pentylcysteine, NHner CH (CH, CHE tt) -C OOH, alpha aminohebutanoic acid, NHt-CH (CHz-1-naphthyl) COOH, NH2CH (CHI 2-naphthyl)-COOH. NH, -CH(CHI-cyclohexyl)-COOHSNH! -CH(CHt- cyclopentyl)C0OH,NHtCH(CHt-cyclobutyl)-COO H. NH2CH(CH--cyclopropyl)-COOH, trifluoroleucine, and hexafluoroleucine. Tetrapeptide alpha-keto acids have the formula. Compounds of Ml-AA-AA-AA-AA-CO-OH or pharmaceutically acceptable It is a salt that can be used: in the formula, Ml is H, NHt Co-1NH! -C8-1NH2-8O2-1X-NH- COX*N 5Ch-1y, -co-1X-CS-1X Sow-1x-o-c o- or x-o-cs-, X is CI-+. Alkyl, CI-+. Fluoroalkyl, J-substituted C+ -+ o alkyl, J-substituted Cr-+o fluoroalkyl, 1-atomantyl, 9-fluor Olenyl, phenyl, K-substituted phenyl, K2-substituted phenyl, K3-substituted phenyl, naphthyl, K-substituted naphthyl, K2-substituted naphthyl, K3-substituted naphthyl, attached phenyl C1-1　alkyl having a phenyl group, C+-1o alkyl having two attached phenyl groups alkyl, CI-tO alkyl with K substituted attached phenyl group, and substituted attached to CI-+o alkyl having two phenyl groups, CI having an attached phenoxy group -+. alkyl, and has an attached phenoxy group substituted with K on the phenoxy group. and Y+ is Cx-+. Archi Cr-+ofluoroalkyl, J-substituted CI-Io alkyl, J-substituted Cr -+a fluoroalkyl, phenyl, K-substituted phenyl, 2-substituted phenyl, K3 Substituted phenyl, naphthyl, K-substituted naphthyl, K2-substituted naphthyl, K3-substituted naphthyl CI-Io alkyl with attached phenyl groups, with two attached phenyl groups C1-3゜alkyl, CI-+o alkyl having a K-substituted attached phenyl group, and and CI-+ having two substituted phenyl groups. selected from the group consisting of alkyl , J is halogen, C0OH, OH, CN, No, NH, C+-+o Al Coxy, C+ -+ o alkylamine, C2-12 dialkylamine, C3- 1°alkyl-0-CO-1C3-1°alkyl-0-CO-NH-1 and C selected from the group consisting of 1-5°alkyl-8-, K is halogen, C: +-+o alkylkoxy, NO2, CN, OH, Co, H , amino, C+-Io alkylamino, C-12 sialgylamino, C+ - lo acyl and C. -,. Alkoxy-CO and Cr-lo Al selected from the group consisting of kill-S-, where AA is the L structure, the D structure, or the alpha carbon represents a side-chain blocked or non-blocked amino acid with no chirality, preferably are alanine, valine, leucine, isoleucine, proline, methionine, methio Nin sulfoxide, phenylalanine, tryptophan, glycine, serine, sulphate leonine, cysteine, tyrosine, asparagine, glutamine, aspartic acid , glutamic acid, lysine, arginine, histidine, phenylglycine, beta -Alanine, norleucine, norvaline, alpha-aminobutyric acid, epsilon. Aminocaproic acid, citrulline, hydroxyproline, ornithine, homoalgium Nin, sarcosine, indoline 2-carboxylic acid, 2-azetidine carboxylic acid, pi Pecolic acid (2-piperidinecarboxylic acid), O-methylserine, 0-1 methylserine S-methylcystine, S-ethylcystine, S-pendelcystine, NH=-CH　(CH-CHE　tt)-COOH, alpha aminohebutane Acid, NH-CH (CH2-1-naphthyl)-COOH, NH2-CH (C H. -2-naphthyl')-COOH, NH2CH (CH--cyclohexyl ) -COOH, NH, -CH (CH. -cyclopentyl) -COOH,NH t-CH (CH, -cyclobutyl)-COOH. NH2-CH　(CHt-cyclopropyl)-COOH, trifluorolouci and hexafluoroleucine. Amino acid peptide α-keto acids have the structure: M,-AA-Co-01-1 or pharmaceutically acceptable salts. During the ceremony, M, is H, NHz-Co-, NH2-CS-, NH2 Sow-, X-NH- CO-, X. N-CO-, X-NH-CS-, X2N-CS-, X-NH SO t-,X! N SO2-, YICO-, X-CS-, x-sot-, x-o-c o- or x-o-cs-, X is C + - +. Alkyl, C +-+. Fluoroalkyl, J-substituted Cr -+. Alkyl, J-substituted Cr-+ofluoroalkyl, ■-atomantyl, 9- Fluorenyl, phenyl, K-substituted phenyl, K2-substituted phenyl, K3-substituted phenyl Naphthyl, K-substituted naphthyl, K2-substituted naphthyl, K3-substituted naphthyl, attached naphthyl C r-+o alkyl having a phenyl group, CI-+ having two attached phenyl groups . Alkyl, K-substituted CI-+e alkyl with attached phenyl group, and substituted with C I- + o alkyl with two attached phenyl groups, with attached phenoxy group C + - +. alkyl, and an attached phthalate substituted with K on the phenoxy group. selected from the group consisting of Cr-+o alkyl having a phenoxy group, Y2 is C +-+o alkyl, CI-+o fluoroalkyl, J-substituted C +-lo alkyl Kyl, J-substituted C I-+a fluoroalkyl, 1-atomantyl, 9-fluorene Nyl, phenyl, K-substituted phenyl, K2-substituted phenyl, K3-substituted phenyl, naph Chyl, K-substituted naphthyl, K2-substituted naphthyl, K3-substituted naphthyl, attached phenyl group CI-10 alkyl having , C1-1 having two attached phenyl groups. alkyl , C I-+ with a K-substituted attached phenyl group. alkyl, and substituted phenylene C1-1 having two nyl groups. selected from the group consisting of alkyl, J is halogen, COOH. OH. CN. No. , NH2, C + - loa Rukoxy, CI-+o alkylamine, CI-1! Dialkylamine, CI-1 . Alkyl-O-CO-, C1-1. Alkyl-0-CO-NH-, and C selected from the group consisting of I- + oalkyl-S-, K is halogen, C I-16 alkyl, CI-IO perfluoroalkyl, C +-+o alkoxy, NOx, CN, OH, COtH, amino, C +-+o Alkylamino, C1! dialkylamino, C1-. Acyl and C + - + o alkoxy-〇〇 and C1-,. selected from the group consisting of alkyl-S- selected, AA is in the L configuration, D configuration, or a side chain with no chirality at the α carbon. Indicates a blocked or unblocked amino acid, preferably alanine, valine, leucine, ion, isoleucine, proline, methionine, methionine sulfoxide, phenyl Alanine, tryptophan, glycine, serine, threonine, cysteine, tyro Syn, asparagine, glutamine, aspartic acid, glutamic acid, lysine, a Luginine, histidine, phenylglycine, beta-alanine, norleucine, norvaline, alpha aminoacetic acid, epsilon aminocaproic acid, citrulli hydroxyproline, ornithine, homoarginine, sarcosine, indoli 2-carboxylic acid, 2-azetidinecarboxylic acid, pipecolic acid (2-piperidine) carboxylic acid), 0-methylserine, 〇-ethylserine, S-methylcysteine, S-ethylcysteine, S-pentylcysteine, NH2CH (CHtCHEt z) -COOH, alpha-aminoheptanoic acid, NH, -CH(CH, -1-na (phthyl)-COOH, NH, -CH(CH,-2-naphthyl)-COOH. NH,-C)((CH,-cyclohexyl)-COOH,NH-CH(CHI -cyclopentyl)-COOH,NH,-CH(CI(,-cyclobutyl)-C O, 0H1NH, -CH(CH2-cyclopropyl)-COOH, trifluoro selected from the group consisting of leucine, and hexafluoroleucine. The following peptide keto acid compounds are useful as calpain inhibitors in the context of the present invention. Representative of the peptide keto compounds found to be useful for: Bz-DL-Ly s-COOH Bz-DL-At　a-COOH 2-Leu-Phe-COOH 2-Leu-Abu-COOH Peptide keto α-amides are effective for cysteine proteases such as calpain. Transition state analog inhibitors. We used an amino acid with a hydrophobic side chain at position 21. Acid residue-containing peptide keto α-ketoamides inhibit calpain I and calpain ■ It was found to be an excellent inhibitor of several cysteine proteases, including It started. We have demonstrated that certain subclasses of peptide ketoamides when used in accordance with the present invention We have found this to be particularly useful. These are dipeptide α-ketoamides (sa subclass A), dipeptide α-ketoamides (subclass B), tripeptide α -ketoamides, tetrapeptide α-ketoamides and amino acid σ-ketoamides It is a subclass of class D. All of these subclasses are peptide keto compounds. It is thought to belong to the genus. Dipeptide α-ketoamides (subclass A) have the following structural formula: % formula % are compounds or pharmaceutically acceptable salts of the formula: M, is HSNH2-CO-1NHt C3-1N H! -3O2-1X-NH -C0-1X! N Co-1X-NH-C8-1X2N-C3-1X-NH-3 O, -1X2N 5Ot-1X-CO-1X-CS-1X Sow-1x-o- co- or x-o-cs-, X is Cl-+. Alkyl, CI-+. Fluoroalkyl, J-substituted C1-1゜a Rukyl, J-substituted Cl-+◎fluoroalkyl, 1-atomantyl, 9-fluorene Nyl, phenyl, K-substituted phenyl, K2-substituted phenyl, K3-substituted phenyl, naph Chyl, K-substituted naphthyl, K2-substituted naphthyl, K3-substituted naphthyl, attached phenyl group C+-+a alkyl having , Cl-+a alkyl having two attached phenyl groups Cl−+o alkyl with a K substituted attached phenyl group, and a substituted attached phenyl group. C + - + o alkyl having two nyl groups, C having an attached phenoxy group +−+o alkyl, and the attached phenoxy group substituted with K on the phenoxy group selected from the group consisting of C+-+a alkyl, where J is halogen, C0O H, OH, CN, No! ,NH,,CI-+. alkoxy, Cl-+o alkyl Amine, Ct-rt-dialkylamine, Cl-+oalkyl-0-CO-1 C+ -+ o alkyl-0-CO-NH-1 and Cl-10 alkyl-3- selected from the group consisting of K is 1. Halogen, Cl-+o alkyl, Cl-+a perfluoroalkyl, C l-+o alkoxy, No2, CN, OH, Co, H, amino, Cl-+. Al Kylamino, CI-1! Dialkylamine Cl-1O acyl and C1-1゜a selected from the group consisting of alkoxy-CO and C1-1°alkyl-8-, is an L structure, a D structure, or a side chain block with no chirality at the α carbon or indicates a non-blocking amino acid, preferably alanine, valine, leucine, isoleucine. syn, proline, methionine, methionine sulfoxide, phenylalanine, Liptophan, glycine, serine, threonine, cysteine, tyrosine, aspa Ragin, glutamine, aspartic acid, glutamic acid, lysine, arginine, Stidine, phenylglycine, beta-alanine, norleucine, norvaline, Alpha-aminobutyric acid, epsilon aminocaproic acid, citrulline, hydroxy Cyproline, ornithine, homoarginine, sarcosine, indoline 2-carbo acid, 2-azetidinecarboxylic acid, pipecolic acid (2-piperidinecarboxylic acid) , 0-methylserine, 〇-ethylserine, S-methylcysteine, S-ethylcysteine Stine, S-pentylcysteine, NHz CM (CH2CH2t2) C 00H1 alpha aminohebutanoic acid, NH, -CH (CHI-1-naphthyl) -COOHSNH, -CH(CH,-2-naphthyl)-COOH. NH=-CH(CHt-cyclohexyl)-COOH, NH2-CH(CH,- cyclopentyl) C00H1NHx CH(CHt-cyclobutyl)-COO H. NH! CH(CHI-cyclopropyl)-COOH, l-lifluoroleucine , and hexafluoroleucine, and R2 is selected from the group consisting of Murakami and unbranched alkyl, Cl-s branched and unbranched cyclic alkyl, and C1- selected from the group consisting of tri-branched and unbranched fluoroalkyl, R8 and R4 are respectively H, Cl-to alkyl, C+-to cyclic alkyl, CI-to C1-7゜alkyl with phenyl group attached to alkyl, attached phenyl C+-2゜cyclic alkyl having a group, an attached phenyl group substituted with K C3-7゜alkyl with, Cl with attached phenyl group di-substituted with K 40 alkyl, C1-2゜alkyl with attached phenyl group 3 substituted with K C1-2° cyclic alkyl with attached phenyl group substituted with K, nitrogen has a morpholine (-N　(CH,CH,)O) ring attached to the alkyl via C8-0° alkyl, with a piperidine ring attached to the alkyl via a nitrogen C +-+o alkyl, with a pyrrolidine ring attached to the alkyl via nitrogen C + -+ e alkyl, C with an OH group attached to the alkyl via nitrogen +-+o alkyl, CH-CHtOCHtCH-CH1 attached 4-pyridyl group C3-1° with an attached 3-pyridyl group, C1-0 with an attached 2-pyridyl group C1-10 with group, Cl-+o with attached cyclohexyl group, -NH,- CH, CH2-(4-hydroxyphenyl), and -NH-CH2CH2-( 3-indolyl). Dipeptide α-ketoamides (subclass B) have the following structural formula: % formula % are compounds or pharmaceutically acceptable salts of the formula: M, is H, NH2-CO-1NH! C5-1NH25ot-1X-NH-C 0-1X2N-CO-1X-NH-C5-1X2N-C3-1X NHSow- 1X! N-8O, -1X-CO-1X-CS-1X Sow-1X-0-Co- or x-o-cs-, X is C1-1°alkyl, Cl-1°fluoroalkyl, J-substituted CI-+. a rukyl, J-substituted C+ -Io fluoroalkyl, l-atomantyl, 9-fluoro Rhenyl, phenyl, K-substituted phenyl, K2-substituted phenyl, tri-substituted phenyl, Na Phthyl, K-substituted naphthyl, K2-substituted naphthyl, K3-substituted naphthyl, attached phenyl C1-1゜alkyl having a group, C1-1゜alkyl having two attached phenyl groups C1-1゜alkyl having a K substituted attached phenyl group, and a substituted attached phenyl group. C + - + o alkyl having two nyl groups, Cl having an attached phenoxy group −+o alkyl, and has an attached phenoxy group substituted with K on the phenoxy group. selected from the group consisting of C+-+o alkyl, J is halogen, C0OH ,OH,CN,No,,NH,,C3-8゜alkoxy,Cl-1゜alkyl Min, C! -12 dialkylamine, Cl-+o alkyl-0-CO-1C+ -lo alkyl-0-CO-NH-1 and Cl-+. Alkyl-8- selected from the group K is halogen, C+ -Io alkyl, C1-8゜perfluoroalkyl, C +-+o alkoxy, No! , CN, OH, CO, H, amino, Cl-+. Al Kylamino, C2-12 dialkylamino, C+ -+. Acyl and C1-1 selected from the group consisting of ゜alkoxy-〇〇 and Cl-+oalkyl-S-, AA is an I2 structure, a D structure, or a side chain block with no chirality at the α carbon. block or non-block amino acids, preferably alanine, valine, leucine, Isoleucine, proline, methionine, methionine sulfoxide, phenylara Nin, tryptophan, glycine, serine, threonine, cysteine, tyrosine , asparagine, glutamine, aspartic acid, glutamic acid, lysine, algium nin, histidine, phenylglycine, beta-alanine, norleucine, nor Valine, alpha-aminobutyric acid, epsilon aminocaproic acid, citrulline, Hydroxyproline, ornithine, homoarginine, sarcosine, indoline 2 -carboxylic acid, 2-azetidinecarboxylic acid, pipecolic acid (2-piperidinecarboxylic acid) acid), 0-methylserine, 0-ethylserine, S-methylcysteine, S- Ethylcysteine, S-pentylcysteine, NH--CH(CH2CH2t- ) C00H, alpha aminohebutanoic acid, NH2-CH (CHt-1-naph CHt-2-naphthyl)-COOH, NH, -CH(CHt-2-naphthyl)-COOH. NHt-CH(CHzocyclohexyl)-COOH,NH,-CH(CHI- cyclopentyl') -COOH,NHz-CH(CHt-',yclobutyl) -CooHlNH, -CH(CH2--cyclopropyl)-COOH, triflu AA2 selected from the group consisting of ololeucine, and hexafluoroleucine; is an L structure, a D structure, or a side chain block with no chirality at the α carbon or indicates a non-blocking amino acid, preferably alanine, valine, leucine, isoleucine. syn, proline, methionine, methionine sulfoxide, phenylalanine, Liptophan, glycine, serine, threonine, cysteine, tyrosine, aspa Ragin, glutamine, aspartic acid, glutamic acid, lysine, arginine, Stidine, phenylglycine, beta-alanine, norleucine, norvaline, Alpha-aminobutyric acid, epsilon aminocaproic acid, citrulline, hydroxy Cyproline, ornithine, homoarginine, sarcosine, indoline 2-carbo acid, 2-azetidinecarboxylic acid, pipecolic acid (2-piperidinecarboxylic acid) , 0-methylserine, 0-ethylserine, S-methylcysteine, S-ethylcysteine Stine, S-pentylcysteine, NH, -CH(CH,CHEtz)-C0 0H, alpha aminohebutanoic acid, NH, -CH(CH, -1-naphthyl)- COOH, NHt-CH(CHt-2-7thyl)-COOH. NH2-CH (CHI-cyclohexyl') C0OH, NHz CH (CHt > Riri O Penil) C0OH, NHT CH (CHT> Riri Obuchil) -CO Oh. NH-CH(CH2>Clopropyl)-COoHl Trifluoroleucine, and hexafluoroleucine, and R and R4 are selected from the group consisting of HlCl-2゜alkyl, C1-2゜cyclic alkyl, Cl-2゜alkyl, respectively. C1-8゜alkyl having a phenyl group attached to, Cl40 cyclic alkyl, Cl- with attached phenyl group substituted with K 26 alkyl, C14° alkyl with attached phenyl group 2-substituted with K , Cl-to alkyl with attached phenyl group 3 substituted with K, substituted with K C, a with an attached phenyl group. Cyclic alkyl, alkyl via nitrogen Cl−+o atom with a morpholine (-N (CHICH,)0) ring attached to the alkyl, C + -+ with piperidine ring attached to alkyl via nitrogen o alkyl, C1-1° with a pyrrolidine ring attached to the alkyl via nitrogen Alkyl, attached to alkyl via nitrogen 1. f, -OH group-containing sul C1-I0 a Lukiru, CHz CH20CH2CH! OH, has an attached 4-pyridyl group C+-+o, C+-1as attached 2-pyridyl group with attached 3-pyridyl group Cl-10 with an attached cyclohexyl group, C1-1° with an attached cyclohexyl group, -NH-CH , CH, -(4-hydroxyphenyl), and -NHCHtCHz-(3-i selected from the group consisting of Tripeptide α-ketoamides have the following structural formula:% formula% are compounds or pharmaceutically acceptable salts of the formula: M, is HSNH Zoo C0-1NH2-C8-1NH Fuji-8O! -1X-NH- CO-1XtNCO-1X-NH-C3-1X, N-C8-1X-NHSO- 1XIN SO-1, X-C0-1X-CS-1X-SO, -1x-o-co- Mataha shows x-o-cs-, X is Cl-+o-furkyl, Cl-+o-fluoroalkyl, Jr11-substituted C,-, , furkyl, J-substituted CI-16 fluoroalkyl, 1-atomantyl, 9-ph Luorenyl, phenyl, KfF! substituted phenyl, K2 Wl substituted phenyl, K31 ! ! substituted phenyl, naphthyl, K-substituted naphthyl, K2i1! converted naphthyl, K311 i-substituted naphthyl, C No alkyl with an attached phenyl group, 2 with an attached phenyl group C1-+o alkyl, C1. having a K-substituted attached phenyl group. ,,. Al Kyl, and I (C + -+ o alkyl having two substituted attached phenyl groups, C + - + o alkyl with attached phenoxy group, and on phenoxy group C1-, with an attached phenoxy group substituted with K. from the group consisting of alkyl selected, J is halogen, C0OH, OH, CN, Not, NH2, C+-1 o alkoxy, Cl-+o alkylamine, C2-H dialkylamine, C+ -lo alkyl-0-CO-1C+ -+ o alkyl-0-CC)-NH-1 and C+-+oalkyl-8-, K is halogen, Cl-16 alkyl, Cl-+. Perfluoroalkyl, Cl -+o alkoxy, NO7, CN, OH, COtH, amino, C+ -loa Rukylamino, Cl-. dialkylamino, CI-+6acyl and C1,,10alkoxy-CO and Cl-1°alkyl-8-, AA is L structure, D structure, or side chain block or non-chirality at the alpha carbon. Indicates a amino acid, preferably alanine, valine, leucine, isoleucine, proline , methionine, methionine sulfoxide, phenylalanine, tryptophan, Glycine, serine, threonine, cysteine, tyrosine, asparagine, gluta min, aspartic acid, glutamic acid, lysine, arginine, histidine, fe Nilglycine, beta-alanine, norleucine, norvaline, alpha-ami Nobutyric acid, epsilon aminocaproic acid, citrulline, hydroxyproline, lunithin, homoarginine, sarcosine, indoline 2-carboxylic acid, 2-aze Tidinecarboxylic acid, pipecolic acid (2-piperidinecarboxylic acid), 0-methylcetate Phosphorus, 〇-ethylserine, S-methylcysteine, S-ethylcysteine, S- Pentylcystine, NHz CH (CHzCHE tz) C00H, Alf -aminohebutanoic acid, NHt-CH(CH2-1-naphthyl)-COOH,N H, -CH(CH2-2-naphthyl)-COOH. NH2-CH(CHI-cyclohexyl)-COOH,NH,-CH(CHt- cyclopentyl)-COOH,NH,-CH(CH2-cyclobutyl)-COO H. NHtCH(CH2-cyclopropyl)-COOH, trifluoroleucine, and hexafluoroleucine, and R3 and R4 are selected from the group consisting of H1C3-2°alkyl, Cl-t, respectively. Cyclic alkyl, Cl-20alkyl C0-2゜alkyl having a phenyl group attached to the Cl-2゜cyclic alkyl, Cl with attached phenyl group substituted with K -20 alkyl, C8-2゜alkyl with attached phenyl group di-substituted with K C1-2° alkyl with an attached phenyl group trisubstituted with K, Cl-2o cyclic alkyl with attached phenyl group substituted, via nitrogen C I with morpholine (-N (CH2CH2)O) ring attached to alkyl -+. alkyl, Cl- with a piperidine ring attached to the alkyl via nitrogen +o alkyl, C + with a pyrrolidine ring attached to the alkyl via nitrogen -r　alkyl, C　I−+ with OH group attached to the alkyl via nitrogen . Alkyl, -CH2CHtOCH, CH,OH, with attached 4-pyridyl group C3-3°, C+-Ioz attached 2-pyridyl with attached 3-pyridyl group C1-10 with a group, C r -Io with an attached cyclohexyl group, -NH -CH2CH2-(4-hydroxyphenyl), and -NH-CH,CH. -(3-indolyl). Tetrapeptide α-ketoamides have the following structural formula: %Formula% are compounds or pharmaceutically acceptable salts of the formula: M, is H, NH2Co-1NHt C8-1NHt Sow-1X-NH-C 0-1X2N-CO-1X-NH-C3-1X, N-C5-1X-NH-SO, -1X2N-8O, -1X-CO-1X-CS-1X 5O2-1x-o-co - or x-o, -cs-, X is Cl-1゜alkyl, C1-1゜fluoroalkyl, J-substituted Cl-10a fluoroalkyl, J-substituted C+-1o fluoroalkyl, 1-atomantyl, 9-fluorene Nyl, phenyl, Kft-substituted phenyl, K2-substituted phenyl, K3-substituted phenyl, Na Phthyl, K-substituted naphthyl, K2-substituted naphthyl, K311i-substituted naphthyl, attached phenylene C8-1゜alkyl having a nyl group, CI-+o alkyl having two attached phenyl groups Alkyl, C IIa alkyl with K-substituted attached phenyl group, and Kl-substituted attached phenyl group CI-+o alkyl having two phenyl groups, C l having an attached phenoxy group -10 alkyl, and has an attached phenoxy group substituted with K on the phenoxy group. is selected from the group consisting of C1-1°alkyl, J is halogen, C0OH, OH, CN, NOx, NHt, C+-+o alkoxy, C+-Ia alkyl Min, Ct-1! Dialkylamine, C+-+oalkyl-0-CO-1C+- A group consisting of 1o alkyl-0-CO-NH-1 and CI-+oalkyl-8- selected from K is halogen, C3-1° alkyl, CI-+. Perfluoroalkyl, C1 -1°Alkoxy, No, CN, OH, Co! H, Ami 8C+-+. alkyl amino, Cx-+t dialkylamino, CI-+o acyl and CI-+e al selected from the group consisting of Coxy-CO and C3-1°alkyl-8-, and AA is , L structure, D structure, or a side chain without chirality at the α carbon or indicates a non-blocking amino acid, preferably alanine, valine, leucine, isoleucine. syn, proline, methionine, methionine sulfoxide, phenylalanine, Liptophan, glycine, serine, threonine, cysteine, tyrosine, aspa Ragin, glutamine, aspartic acid, glutamic acid, lysine, arginine, Stidine, phenylglycine, beta-alanine, norleucine, norvaline, Alpha-aminobutyric acid, epsilon aminocaproic acid, citrulline, hydroxy Cyproline, ornithine, homoarginine, sarcosine, indoline 2-carbo acid, 2-azetidinecarboxylic acid, pipecolic acid (2-piperidinecarboxylic acid) , 0-methylserine, 0-ethylserine, S-methylcysteine, S-ethylcysteine Stine, S-pentylcysteine, NHt-CH(CHtCHEtt)-co oH, alpha aminohebutanoic acid, NHt-CH(CH, -1-naphthyl)- Coo) (, NH-CH(CH22-naphthyl)-COOH. NH2-CH(CH,-cyclohexyl)-COOH,NH2-CH(CHI- cyclopentyl)-COOH,NH,-CH(CH,-cyclobutyl)-COO HlNH, -CH(CHI-cyclopropyl)-COOH, trifluoroleuci and hexafluoroleucine, and R3 and R4 are , respectively, H, C1-2°alkyl, CI-t. Cyclic alkyl, CI-zoa C+-to alkyl with phenyl group attached to alkyl, phenyl attached CI-! O cyclic alkyl, with an attached phenyl group substituted with K Ru CI-! O alkyl, C1- with attached phenyl group di-substituted with K CI-we alkyl with attached phenyl group 3-substituted with 1° alkyl, K Cl-2° cyclic alkyl with attached phenyl group substituted with K, nitrogen has a morpholine (-N (CHtCHt)O) ring attached to the alkyl via C8-1° alkyl, with a piperidine ring attached to the alkyl via a nitrogen C I-+ a alkyl, with a pyrrolidine ring attached to the alkyl via nitrogen C I−+o alkyl, C1 with an OH group attached to the alkyl via nitrogen -1゜Alkyl, CHs CHt OCH CH! OH, attached 4-pyridyl group Cl-10q with C3-3゜ with 3-pyridyl group attached, 2-pyridyl group attached C1-10. having a zyl group. CI-rOs-NH with attached cyclohexyl group -CH=CHt (4-hydroxyphenyl), and -NH-CHICH. -(3-indolyl). Amino acid α-ketoamides have the following structural formula:% formula% are compounds or pharmaceutically acceptable salts of the formula: M, i translation HSNHt-CO-1NH2-CS-1NH2-SO, -1X-NH- CO-1X! N-C0-1X-NH-C3-1X, N-C3-1X NH5o2 -1X=N-8Ot-1X-CO-1X-CS-1x-sOt-1x-o-co - or x-o-cs-, X is C+-+o alkyl, Cl-1゜fluoroalkyl, J-substituted C8-3 ゜Alkyl, J-substituted Cr-+. Fluoroalkyl, 1-atomantyl, 9-fluor Olenyl, phenyl, K-substituted phenyl, K2-substituted phenyl, K3-substituted phenyl, naphthyl, K-substituted naphthyl, K2-substituted naphthyl, K3-substituted naphthyl, attached phenyl C1-1゜alkyl having a phenyl group, C110 alkyl having two attached phenyl groups C1-1゜alkyl having a K-substituted attached phenyl group, and a @-substituted attached phenyl group. C3-1゜alkyl having two nyl groups, C+- having an attached phenoxy group +. alkyl, and has an attached phenoxy group substituted with K on the phenoxy group selected from the group consisting of C3-1°alkyl, J is halogen, COOH, O H, CN, NO2, NH,, C1-1゜alkoxy, C+-+o alkylamine , C2-12 dialkylamine, C+-+o alkyl-0-CO-1C1-Io Alkyl-0-CC)-NH-1 and C1=,. Is it a group consisting of alkyl-8-? selected from K is halogen, C1-3° alkyl, C1-. Perfluoroalkyl, C1 -1゜Alkoxy, NO2, CN, 0H1CO,H, Ami8C1-1゜Alkyl Amino, C2-1t dialkylamino, CI-+oacyl and C+-+. a selected from the group consisting of alkoxy-○○ and C3-1゜alkyl-8-, and AA is an L structure, a D structure, or a side chain block with no chirality at the α carbon or indicates a non-blocking amino acid, preferably alanine, valine, leucine, isoleucine. syn, proline, methionine, methionine sulfoxide, phenylalanine, Liptophan, glycine, serine, threonine, cysteine, tyrosine, aspa Ragin, glutamine, aspartic acid, glutamic acid, lysine, arginine, Stidine, phenylglycine, beta-alanine, norleucine, norvaline, Alpha-aminobutyric acid, epsilon aminocaproic acid, citrulline, hydroxy Cyproline, ornithine, homoarginine, sarcosine, indoline 2-carbo acid, 2-azetidinecarboxylic acid, pipecolic acid (2-piperidinecarboxylic acid) , 0-methylserine, 〇-ethylserine, S-methylcysteine, S-ethylcysteine Stine, S-pentylcysteine, NHt CH (CH2CHF t2) C 001(, alpha aminohebutanoic acid, NH, -CH(CH2-1-naphthyl )-COOHSNH! -CH(CH,-2-naphthyl)-COOH. NH,-CH(CH,-cyclohexyl)-COOH,NH,-CH(CH,- cyclopentyl)-COOH, NH2-CH(CH2-cyclobutyl)-COO HlNH, -CH(C)(,-cyclopropyl)-COOH, trifluoroloy selected from the group consisting of cine, and hexafluoroleucine, R3 and R4 are H, CI-t, respectively. Alkyl, CI-! . Cyclic alkyl, CI-2o CI-to alkyl with phenyl group attached to alkyl, attached phenyl C1-2゜cyclic alkyl having a group, having an attached phenyl group substituted with K C1-20 alkyl, C1- with attached phenyl group di-substituted with K 2゜alkyl, C1-8゜alkyl with attached phenyl group 3-substituted with K C1-1° cyclic alkyl with attached phenyl group substituted with K, nitrogen has a morpholine (-N　(CH,CH,)O) ring attached to the alkyl via Cl-10 alkyl, with piperidine ring attached to the alkyl via nitrogen C + - + o alkyl, with a pyrrolidine ring attached to the alkyl via nitrogen C +-+. alkyl, C with an OH group attached to the alkyl via nitrogen 1-3°alkyl, -CH2CH! 0CH1CH! OH, attached 4-pyridyl group C3-1° with an attached 3-pyridyl group, CI-+. , attached 2-pyridyl Cl-10 with a group, C3-3° with an attached cyclohexyl group, -NHCH tCHt (4-hydroxyphenyl), and -N HCHtCH -(3 -indolyl). Applicants are aware of only peptide ketoamides reported in the literature. Ru. This compound is Z　Phe　NHCH2C0Co　NHEt　(Z-Phe -Gly-Co-NH-Et). This compound contains Hu and Abeles (Arch, Bioehem, Biophys, 281. 271-274 (1990)) reported that it is an inhibitor of papain and cathepsin B. ing. The following peptide ketoamide compounds are classified as calpain inhibitors in the context of the present invention. are representative of the class of peptide keto compounds found to be useful as peptides. Z-Leu-Phe-CONH-Et Z-Leu-Phe-CONH-nPrZ-Leu-Phe-CONH-nBu Zshizu-Phe-CONH-fBu Z-Leu-Phe-CONH-BzlZ-Leu-Phe-■NH-(CH2 )2PhZshizu-Abu-CONH-Et Z Shizu-Abu-CONH-mlke Z-Leu-Abu-CONH-nBuZshizu-Abu-CONH-iBu Z-Leu-Abu-CONH-BzlZ-Leu-Abu-■NH-(O(, )7CH3Z-Lzu-Abu-CoNH(CHfiOHz-Lcu-Abu- CONH(O(,)ρ(CHstopOH2,Leu-Abu-■NH(CH,)□, CH3Z-Leu-Abu-CONH-OI2-C,H3(OCH3)2Z-L eu-Abu-■NH-CH, ℃4H4N We The inhibitory mechanism of these peptide-keto compounds on both theases was investigated. Se Phosphoprotease, one α-keto bound in the active site of porcine pancreatic elastase The crystal structure of the ester has been completed. The active site 5et-195 of this enzyme is to the carbonyl group of the ester to form a tetrahedral intermediate, which Stabilized by interaction with oxyanion holes. , the second structure is pep Similar to the tetrahedral intermediate involved in tide bond hydrolysis, α-ketoe It proves that Stell is a transition state analog. His-57 is There is a hydrogen bond (5°) to the carbonyl group of the ster functional group, and the hydrogen bond of the polypeptide backbone The peptide backbone of the moiety binds to the inhibitor to form a β-sheet, and the benzyl Esters are directed to the S subsite. The side chain of the P1 amino acid residue is It exists in the SL pocket of. The interaction with ketoamides is due to the ketoamide functional group. The same is true except for the possibility that a further hydrogen bond is formed with the NH group of . In the case of a keto acid, there will be no R group to interact with S subsi]. However, Therefore, these inhibitors are slightly more active than ketoesters and ketoamides. It is predicted that its power will be inferior. However, certain keto acid compounds are suitable for the purpose of this invention. When used, it was found to be surprisingly highly active. In particular, Z-Leu-P he-COOH and Z-Leu-Abu-COOH are extremely rare calpains. It was found to be a powerful inhibitor. The active site of cysteine proteases is composed of serine including the active site hisdecine residue. It shares several properties with other proteases. cysteine prote The enzymes have an active site cysteine residue in place of 5er-195, This is the ketogenic component of peptide ketoacids, ketoesters, or ketoamides. It is added to the carbonyl group, and there is a cysteine residue in place of the serine-195 residue. It forms an adduct very similar in structure to that described above, with the exception of . Furthermore, the interaction occurs between the elongated substrate binding site of the stain protease and the inhibitor; would enhance the binding affinity and specificity of the species. The peptide-keto compounds described above are based on complex interactions between specific enzymes and their substrates. Many are used to bind proteases thereby inhibited. specific cysteine ■) Good peptides for this enzyme to design inhibitors of proteases 2) finding the amino acid sequences of the substrate, and 2) incorporating it into the peptide keto compound. or similar amino acid sequences. These design strategies , and other genera of peptide inhibitors can also be used in place of the peptide substrate. Useful in obtaining information on suitable sequences to incorporate into tido-keto compound inhibitors. It would be effective. Therefore, based on their substrate specificity, we The structures of new inhibitors for theases can be predicted. specific enzymes Once a good inhibitor structure is known, add substituents to the M or R groups. It is also possible to change other properties such as solubility or hydrophobicity by It becomes possible. In the case of calpain, known inhibitor sequences include the peptide aldehyde, Ac-Leu- Leu-Nl　e-H (also known as calpain inhibitor ■, hereinafter referred to as “C1 This inhibitor is similar to the related peptide aldehyde inhibitor AC- In addition to Leu-Leu-Nme-H (also known as calpain inhibitor ■) Calbiochem of La Jolla, California It is commercially available. We investigated the α-chain peptide with aromatic amino acid residues in Pl. esters are thiol proteases, canapsin B1 papain and carpa was found to be a good class of inhibitors of in. Furthermore, we have aromaticity in Pl Peptides with amino acid residues or small hydrophobic alkyl amino acid residues toesters and peptide α-ketoamides are good inhibitors of calpain. I found out that. We discovered peptide-keto compounds that are effective as calpain inhibitors. , by assaying peptide keto compounds as reversible inhibitors. Jime Inhibitors at various concentrations in tylsulfoxide (DMSO) were added to the buffer and substrate. was added to the assay mixture containing This reaction is initiated by the addition of enzyme and hydrated. Degradation rates were investigated spectroscopically or by fluorescence. As a buffer for cathepsin B , 88mM KH2PO, 12mM Na-HPCL, 1. 33mM EDT A. 2. 7mM cysteine, pH 6.0 was used: calpain ■ and calpain For ■, 20mM Hepes, 10mM CaCL, 10mM β-methane Captoethanol, pH 7.2 buffer was utilized. All peptide thioester hydrolysis rates are 4. 4°-dithiodipyridine ( e324=19800M-'cm-'; Graset ti and Murra y, Arch, Biochem, Biophys, 119. pp41-49 ( (1967)) was measured using an assay mixture containing Papain is Bz-A rg-AMC or)3z'''Arg-NA (Kanaoka et al., Ch em, Pharm, Bu l l. 25. 3126-3128 (1977)) and AMC (7 -amino-4-methylcoumarin) emission was induced by fluorescence (380 nm excitation, and 460 nm excitation). (emission at nm). Cathepsin B is Z-Arg-Arg-AFC (Bar ret and Kirsehke, Methods Enzymol, 80 ．． 535-561 (1981)) and AFC (7-amino The fluorescence (400 nm excitation and (emission at 505 nm). Calpain I from human red blood cells and from rabbit Calpain ■ is S IJ CL e II - T y r - AMC (Sa Saki et al., J. Bjol, Chell, 259. 12489-124 94 (1984): cited as reference in the text), and AM C(7-amino-4-methylcoumarin) emission was induced by fluorescence (380 nm excitation and (emission at 460 nm). The rate of enzymatic hydrolysis varies with various substrate and inhibitor concentrations. The Ki value was determined by I) ixon plot. Table PKC1 includes papain, cathepsin B, calpain 11 and calpain ■ The inhibition constant (Ki) for The inhibition constant of papain shown in Table PKC1 is N"-benzoyl-Arg-AM Using C as a substrate, 2mM EDTA, 5mM cysteine (freshly prepared), 1 0.0% at 25°C containing DMSO. 05M Tris-HCI buffer, pH 7° Measured in 5. However, the inhibition constant of papain marked with “e” in Table PKC1 is Values are 25°C containing 20mM EDTA, 5mM cysteine, 9% DMSO Measurements were made in 50mM Tris-HCI buffer, pH 7.5. PKC Table 1 Inhibition of cysteine proteases by peptide ketoesters and ketoacids z, Leu-Nla-Cooεt O, 120, 18Z-Leu-Nva-CO OEt　30　1. 2Bz-DL-Phe-COOEt 500" 64'zP Phe-DL-Phe-COOEt 1. 8 0. 12. 9e MeO-3uc-Ala-Ala-Pro-Abu-COOMe O,76,0 1001P Papain cCIffi Calpain IbCB x Cathepsin BdC II-Carbine■ From the data in Table PKC1, Abu, Phe or Dipeptide ketoesters having Nle and L eu in the 22nd position are carpa It is found to be a potent inhibitor of InI and Calpain ■. Abu in 21st place Or Ala and tripeptide ketoesters having Ala in the 22nd position, Similarly, it is a calpain inhibitor and is slightly weaker than the dipeptides mentioned above. I understand. Therefore, the above discussion on the design of peptide keto compound inhibitors According to the description, we have developed peptide keto compounds based on these and similar structures. is expected to exhibit calpain inhibitory activity. The peptide α-ketoesters can be obtained by a two-step Da k i n-Wes process. Prepared by. This method uses amino acid derivatives, di- Whether a peptide derivative, tripeptide derivative, or tetrapeptide derivative It can be used even if it is attached. M-(AA), -OH→ Enol ester -4M-(AA), before -CO-R The precursor peptide ((AA)n) is the PeptidesSAnalysis , 5 synthesis. Biology, Vol, l-9, ^ academic Press Publishing, 1 979-1987 (Gohe Peptides”) and Mr. Houkib■ Veyl Methoden der Organischen Chemie , Vol. 15. Parts l&2,5ynthese Magic Shield■ Peptiden, Georg Thieme Verlag Publishing, 1974 , Stuttgart (’Houben4eyl’) (both cited for reference) ) using standard peptide chemistry procedures, including those well described in Can be prepared. The M group can be introduced using several different reaction modes. For example, it is It can be introduced directly onto the amino acid as shown in the figure below. H-(AA), -OH-4M-(AA), -OHAlternatively, the M group can be can be introduced by reaction with an acid ester and subsequent removal of the ester group, producing the same product can be introduced as shown in the scheme below. H-(AA), -OR' → M, -(AA), -OR' → M-(AA), -OH These and other techniques for introducing M groups are described in The Peptide s. Houben-Wey, and many other books on organic synthesis. It is listed. For example, reaction with cyanic acid or p-nitrophenylcyanic acid A carbamyl group (M=NHtCO) can be introduced by p-nitro By reaction with phenylthiocarbamate, - group can be introduced into N　Ht　SO　O. Wear. NH! NHtSOt can be introduced by reaction with S,OICI. Substituted alkyl X-NH-Co- group (wherein X is a substituted alkyl or allyl group) can be introduced. Substituted alkyl or alkyl By reaction with lylisocyanate, the X-NH-CS- group (wherein X is a substituted atom) alkyl or allyl groups) can be introduced. By reaction with X Sow C1 Thus, an X-8O7- group can be introduced. Reaction with substituted alkyl or allylic acid chloride Depending on the reaction, an acyl group (M=Y-Co-) can be introduced. For example, MeOCO By reaction with CRlCH, -Co-CI, the y-co- group (wherein Y is C1 C2 alkyl substituted by an alkyl-OC〇- group) can be introduced. A thioacyl group (M= Y-CS-) can be introduced. with substituted alkyl or allylsulfonyl chloride The reaction can introduce an X-8O2- group. For example, with dansyl chloride By reaction, X-5O2- derivative (wherein X is 1 by dimethylamino group) (substituted naphthyl group) is formed. Substituted alkyl or chloro allylate An x-o-co- group can be introduced by reaction with formate. Substituted alkyl or by reaction with allylchlorothioformate, x-o-cs- can be introduced. Ru. There are many alternative reaction modes that can be used to introduce all of the above M groups, Either M-AA-OH or M-AA-OR' is produced. This M-AA- The OH derivatives can then be used directly in Dakin-West reactions or dipeptides. , tripeptide, tetradipeptide, M-AA-AA-OH, M-AA-AA- AA-OH, or M-AA-AA-AA-AA-OH and convert these directly. It can also be used in Dakin-West reactions. Substituted peptides M-AA- AA-OH1M-AA-AA-AA-OH, M-AA-AA-AA-AA-OH is also H-AA-AA-OH1H-AA-AA-AA-OH, H-AA-A Prepared directly from A-AA-AA-OH using the reaction described for the introduction of the M group. You can also Separately, the M group is a carboxy-blocked peptide type M-AA-AA-OR', M-AA-AA-AA-OR', or M-A Reaction with A-AA-AA-AA-OR' and subsequent removal of this blocking group R' It can also be introduced. The R group in the ketoester structure is oxalyl chloride Cl-Co-Co-0-R. Through the reaction, Da k i n -Wes can be introduced during the reaction. and For example, M-AA-AA-OH and ethyloxalyl chloride Cr-Co-Co-0 -Reaction with Et produces ketoester M-AA-AA-Co-0-Et do. M-AA-AA-AA-AA-OH and CI-Co-Co-0-Bz The ketoester M-AA-AA-AA-AA-Co-0-B zl is generated. A wide range of R groups can be selected from various alkyl or allylalkyl oxyl chlorides. introduced into the ketoester structure by reaction with (Cl-Co-Co-0-R) Ru. The oxalyl chloride is a combination of alkyl or allyl alkyl alcohol and oxalyl chloride. Zaryl chloride CI is easily prepared by reaction with -Co-Co-CI. For example, Bzl-0-CI-CO-CO-CI and n-Bu-0 -CO-CO-CI are benzyl alcohol and butanol and oxychloride, respectively. Prepared in 50% and 80% yield by reaction with zaryl chloride (lF arren, C.B., and Malee, E.J., J.Chro. matography 64. 219-222 (1972); Used as a reference in the main text. Quoted by j. Keto acids M-AA-Co-OH, M-AA-AA-Co-OH, M-AA-AA -AA-CO-OH, M-AA-AA-AA-AA-Co-OH is the corresponding case. esters M-AA-Co-OR, M-AA-AA-Co-ORSM-AA- AA-AA-CO-OR, M-AA-AA-AA-AA-Co-OR to alkali Generally prepared by rehydrolysis. In some cases, a benzyl group (R=B zl) or other methods such as acid cleavage (R=t-butyl). It may also be necessary to obtain keto acids using In this alternative method, the M group is alkaline hydrolyzed. It will be used when the solution is easy to receive. Various peptide ketoamide subclasses (M-AA-NH-CHRl-CO-C ONR5Ra (dipeptide ketoamides (subclass A)), M-AA-A A-CO-NRsR4 (dipeptide ketoamides (subclass B)), M-A A-AA-AA-CO-NR,R, (dipeptide ketoamides), M-AAA AA-AA-AA-CO-NRIR, (tetrapeptide ketoamides) and M , -AA-CO-NR,R, (amino acid ketoamides) represents the corresponding ketoester It was prepared indirectly from This ketone carbonyl group is first converted to protection as shown in Figure 1 and then reacting the ketoamide with the amine H-NR,R, Therefore, it was prepared. The procedures shown here are also valid for other protecting groups. In addition to the scheme outlined above, the corresponding ketoacids can be prepared using ketoacids as precursors. I was able to prepare mido. Block the ketone carbonyl group of the keto acid and Coupling with amine H-NR3R4 using a coupling agent yields the intermediate. , this block was then removed to form the ketoamide. General Synthesis Method for Peptide Keto Compounds Unless otherwise specified, raw materials are available from commercial suppliers. It was used without further purification. Melting points are measured using a Bjchi capillary apparatus. Damn, I haven't corrected it. 'HNMR was measured with Varian Gem1ni300. Established. Chemical shifts are expressed in I) pm (δ) relative to internal tetramethylsilane. Ta. Flash power ram chromatography Universal 5eient Ific Inc., carried out on silica gel O-6”3.Electron impact of new compounds Mass spectra (MS) were performed using a VarianMAT 112s spectrometer. It was measured. The purity of all compounds was determined by thin layer chromatography using Baker 5 The test was conducted using an i250F silica gel blade using the following solvent system. 0(C13:MeOH:AcOH-95:5:3 v/v; K, Ac0Et :AcOH=200:1 v/v; L, 0(Q3; l. CHCl3:MeOH-50:1 v/v amino acid methyl ester hydrochloride is M. Brenner et al. (Helv, Chem, Acta 33. 568 (1 950) ;36. 1109 (1953)), the scale of 10 mmo I was or as prepared by Rachel (J, Org, Chem, 28 ．． 2898 (1963))). 1-1. Adjust with a scale of 0mm01. Manufactured. Yield (%) Melting point ('C) Melting point (literature) DL-Nva-00 (3'HQ to o 113-116 116-117 ne-OCH365Q 98 9+)- 9198-Zo. LPPhe-OC) (3'HQ 98 159-161 158-160DI/ Abu-OCT (3'HQ too 148-150 150-151N-Ashi) The acyl group of amino acids is phenylsulfonyl, 2-naphthylsulfonyl or is benzoyl, 5chot ten-Baumann reaction (M, Be rgmann, J., Zervas, Chem. Ber, 65. 1192 (193 2)). Yield (%) Melting power, ('C) TLC (R+, eluent) 2-NapSO2-L- Leu-OH49115-1160,581PhCO-DL-Abu-OH64 141-1420,64 has a 4-methylvaleric acid (pentanoic) group, 2-(1- N- with propyl)pentanoic group and 7-phenylheptanoic group Acylamino acids were synthesized in a two-step synthesis. This N-acyl amino acid methyl ester The stellate was first obtained and then hydrolyzed to yield the free N-acyl amino acid. N-Acyl amino acid methyl ester (general procedures) Suitable amino acid methyl ester A cooled (10°C) slurry of chloride hydrochloride (20 mmol) in 100 ml benzene 40 mmol of triethylamine or N-methylmorpholine was added to Add slowly (temperature 10-15°C) and stir the reaction mixture at this temperature for 30 min. Ta. Next, 18 mmol of the appropriate acid chloride (temperature 10-15°C) was added to this reaction mixture. and the reaction mixture was stirred at room temperature overnight. Filter out the precipitated hydrochloride. filtered, washed twice with 20 ml of benzene on the funnel, and the collected filtrate was transferred to IM MCI. 2 times with 50 ml, 2 times with 5% NaHCO350 ml, 1 time with 100 ml of H2O , washed successively twice with 50 ml of saturated sodium chloride and dried with MgSO4. I set it. After evaporation of the solvent in vacuo, the purity of the residue is checked (TLC) and the next step (hydration used for decomposition). Yield (%) Melting point ('C) Hydrolysis (general operations) 10 mmol of the appropriate N-acylamino acid methyl ester in methanol 100 m 11 per solution. Add 25 ml of LM NaOH at once to the reaction mixture. was stirred at room temperature for 3 hours. The reaction mixture was then cooled to 0°C (ice-salt bath) and Acidified to pH 2 with IMHC+aqueous solution. acetic acid to this reaction mixture. 100 ml of ethyl was added, transferred to a separating funnel and the organic phase was separated. aqueous phase with solid salt saturated with sodium or (NH,), So, and 50 ml of AeO-E-t It was re-extracted twice. The organic phases were combined, washed twice with 50 ml of H2O, and washed with carbon. It was decolorized and dried with Mg5Oa. The solvent was evaporated in vacuo (rotor evaporation). After that, check the purity of the residue by TLC, and if there are any impurities, remove the residue from an appropriate solvent. Crystallized. Yield (%) Melting point (℃) (CH3)2CH(CH2)2Co-DL-Abu-OH92110,5-11 2(CH3CH2CH,)2G(Co-DL-Abu-OH99126-127 (n-octane)Ph(CT(Z)r, Co-DL, Abu-OH89110- 112(n-octane)N-acyldipeptide methyl esters are HOBt- Synthesized in DMF solution by DCC method (K25nig and Geiger, Chem, Ber, 103. 788 (1970)). Yield (%) Melting point ('C) TLC (R,, eluent) Z-Leu-DT, -NV a-OCH3801f2-113 037BZ-Leu-L-Phe-OCH3 8386-870, 85A39B Z-Leu-L-ne-OCH397 oil 0. 79 Ao, 43 B Z-Leu-DL-Abu-00 (39986-880j3 Bo, 26H z-Leu-L-Leu-OCH, 8091-920, 79GZ-Leu-DL , NLeu-OCH39711! -111jZ-Leu-4-Q-Phe-OC H365112-L32 0. 77J (liquid crystal?) 0. 68K 2-NapSO2-Leu-DL-Abu-OCH399 oil 039 A 2-NapSO2-Leu-L-Leu-OCH39097-98,50,63 A N-acyl dipeptides can be prepared by a general hydrolysis procedure of appropriate methyl esters. That's what I got. In the case of N-sulfonyl dipeptide methyl esters, sulfonamide 2. 1 equivalent of methyl ester to form the sodium salt. 25 1 mole of current view Hydrolyzed with NaOH. Yield (%) Melting point ('C) TLC (R+, eluent) Z-Leu-DL-NVa -OH100117-11830, 11A7/Leu-L-Phe-OH921 05-106,,503C0,55G Z-Leu-L-Le-OH7977-790, 22A (152C Z-Leu-DI, Abu-OH99 glass 0. 61 GLLeu-L-Le u-OH9) Glass 036 IZ-Leu-DL-NLeu-OH9895- 96Z-Leu-4-Q-Phe-OH87104-1140,48K97. 4 180-195 (decomposition) 0. 58IN-Acyltripeptide methyl ester The compounds were synthesized by HOBt-DCC method in DMF solution (Koni g and Geiger, Chem, Ber, 103. 788 (1970)). Yield (%) Melting point ('C) TLC (R, eluent) Z, Leu-Leu-Ab u-OCH38fu 140-141. 5　03OA97　＞200　032A N-acyl tripeptides can be used in common hydrolysis operations of appropriate methyl esters. So I got it. In the case of N-sulfonyl tripeptide methyl ester, sulfonamide To form the sodium salt, 1 equivalent of methyl ester is combined with 2. 25 equivalents of 1 Hydrolyzed with molar NaOH. Yield (%) Melting point ('C) TLC (R,, eluent) Z-Lzu-Leu-Ab u-OH97 glass 0. 69 I7, Lzu-Leu-Phe-OH98 glass 0. 44 K2-NapSO□-Leu-I, eu-Abu-OH Examples below , Example PKCI-PKC65 is used to illustrate the synthesis of peptide keto compounds. Indicated. Example PKCI Z-Ala-DL-Ala-COOEt This compound is modified Dak i n - Wes was synthesized by the method (Charles et al., J. Chem, Soc, Perkin L1139-1146 (1980)).　 Z-A l a - A l a -OH (880 mg. 3 mmol e), 4-dimethylaminopyridine (15 mg, 0. 　31m mol e), and pyridine (0.8 mL, 10 mmol e) in tetrahydrogen Ethyloxalyl chloride was added to the Dorofuran (3 mL) solution while stirring. (0.7 mL. 6 mmol) was added at a rate of 1 min to initiate reflux. this mixture The mixture was gently refluxed for 35 hours. The mixture was treated with water (3 mL) and kept at room temperature for 30 minutes. The mixture was extracted with ethyl acetate. The organic extracts were dried and evaporated. A residue (1.45 g) was obtained. Chromatograph the residue on silica gel. and eluted with CH2Cl2 to give the oily enol ester product (500 mg, 37 %), single spot at tic, Rf'=0. 67 (CHCh:MeOH=9 : 1); MS, m/e=451 (M'+1) was obtained. This enol ester (210 mg. 0,47 mmol) in absolute ethanol (1 mL), A clear yellow solution is formed when the ethanolic solution of l. I dripped it until it dripped. The ethanol was then removed and the residue was treated with ether. A The solution was washed with water, dried and evaporated to give a residue. Silk the residue The product was chromatographed and eluted with methylene chloride. After removing the solvent, remove the Putidoketoester Z-At a-DL-Ala-COJt was prepared as a semi-solid (150 m g, 92%); single spot in tie, R1' 0. 58 (CHCl-:Me Obtained as OH=5+1); MS, m/e=351 (M"+1). Elemental content Analysis, C1tH2to*Nm” Theoretical value of 1/3H70: c, 57. 29:H ,6,22:N,7. 86, experimental value: C157, 23, H, 6, 36: N, 8 ．． 17゜Example PKC2 Z-Ala-Ala-DL-Ala-CO2EtThis compound is Example PKC1 Prepared from Z-A l a - A l a -Ala-OH by the same operation as Manufactured. The product was crystallized from ethyl ether with a yield of 23%. with tlc Single spot, Rt”=0. 31 (CHCi-:MeOH=9:l); Melting point , 143-144°C; MS, m/e=421 (M pieces. Elemental analysis, C1°H2? Theoretical value of O-N: C, 56,99: H, 6,46; N, 9. 97, experimental value, C, 56, 96, H, 6, 49, N, 9. 92° Example PKC3 Z-Ala-Ala-DL-Abu-CO2EtThis compound is described in Example PKCI By the same operation as Z-A l a-A I a -DL-Abu-OH It was prepared with a yield of 11%. Single spot at tic, R1'; 0. 60 (CHC I, :MeOH=9+1); Melting point, 111-113°C, MS1m/e=436 (M’+1), elemental analysis, C! , HtlO,N, -1/3HtO theoretical value: C1 57,13;H,6,75;N,9. 51, experimental value: C, 57, 38: H. 6. 82; N, 9. 62° Example PKC4 Z-Ala-Ala-DL-Nva-CO2EtThis compound is Example PKC1 It was prepared from Z-Ala-NyB-OH in a yield of 20% by the same procedure as above. Single spot with tlc, R+’=(L 64 (CHCI=:MeO)(=5 : 1): MS, m/e=450 (M''+1), elemental analysis, C=2Hs , 07N, ・I (theoretical value of 20; c, 56. 51, H, 7, 11, N, 8 ．． 99, experimental value: c, 56. 42; H, 7, 08: N, 9. 06゜Example PK C5 Z-Ala-Pro-DL-Ala-COJtThis compound is similar to Example PKCI. By the same operation, Z-A　a　a-P　r　　-Ala-OH4. Prepared from lohexylamine in 19% yield. Single spot in tle, R,”= 0. 55 (CHCl, :MeOH=9:1); MS, m/e=,447( M”). Elemental analysis, theoretical value of C22H2e O7N s・1/2H20, C,5 7°88:H, 6°62;N, 9. 2L experimental value: e, s7. 65. H, 6, 68 ;N, 9. 　17゜ Example PKC6 Z-A l a-A l a-A l a-DL-A l a-COJ t This compound was prepared as Z-A l a-A by the same procedure as in Example PKC1. Prepared from 1a-A1a-A1a-OH in a yield of 7%. Single with tic One spot, Rr'=0. 40 (CHCIs:MeOH=9:l); point, 163-165°C; MS. m'e=493 (M'+1). Elemental analysis, C,, H320, N, -1/2H2 Theoretical value of 0: c, 55. 08; H, 6, 63: N, 11. 17. Experimental value; C, 5 4,85;H,6,53:N,11. 14° Example PKC7 Bz-DL-Phe C02Et This compound was obtained from Bz-Phe-OH by the same procedure as in Example PKC1. It was prepared with a yield of 36%. Oily, single spot on tlc, R'=0. 61 (C HCL: MeOH = 9: l): MS, m/e = 325 (M'). elemental content Analysis, C,,H,,04N・1/3H year 0 theoretical value; c, 68. 86; H, 5, 98;N. 422, experimental value: c, 69. 10+H, 6, 09, N, 4. 38゜Example PKC 8 MeO-Suc-Al　a-DL-Al　a-CChMeThis compound is Except that a methanol solution of ummethoxide was used for enol ester hydrolysis. was prepared by the same operation as in Example PKC1, Meo-5u c-A I a-A I Prepared from a-OH in a yield of 22%. Single spot at tic, Rt''=0 ．． 43 (CHCls:MeOH=9:1); MS, m/e=317 ( M"+1). Elemental analysis, C+SH*. Theoretical value of 07N4・173HtO + C, 48, 44, H. 6, 46:N, 8. 69, Experimental value: c, 48. 56. H, 6, 39, N , 8. 　69゜ Example PKC9 MeO-S　u　c　-A　a-A　a-P　r　o-DL-Abu- COtMe This compound was prepared from MeO-8u by the same procedure as Example PKC1. c-Al　a-Al　prepared from a-Pro-DL-Abu-OH in 25% yield Ta. Foamy, single spot on tic, R1'=0. 66 (CHCls:MeOH =5:1). Elemental analysis, Cz t Hs a 09N4・H2O theoretical value :c, 51. 53. H,7,02,N. 10. 85, experimental value +C, 51, 11; H, 7, 03, N, 10. 88゜implementation Example PKC10 MeO-3uc-Va l-Pro-DL-Phe-CO2Me This compound is By the same operation as in Example PKC1, MeO-8ue-Va l -P r Prepared from o-Ph e-OH in 42% yield. foamy, tlcT single spot, Rt”　0. 57 (CHCl-:MeOH=9:1):MS, m/e=5 17 (M'). Elemental analysis, CteH□0. Theoretical value of N, 2/3HtO, C,5 8°96, H, 6,90; N, 7. 93, experimental value; c, 58. 92:H, 6, 9 6: Example PKCII This compound uses n-butyloxalyl chloride in the Dakin-West reaction. Use and n-butanol!・Addition of enol ester to 1-component n-fluoride Bz-Ala- Prepared from OH in 45% yield. Colorless oil, single spot on TLC, R1'-〇 , 72 (CHCI,:MeOH=9:1); MS%m/e=277 (M ’). Example PKCl 2 Bz-DL-Al　a-COJz　l This compound replaces benzyloxalyl chloride with ethyloxalyl chloride. Sodium bench oxide in caribenzyl alcohol is used to dilute the enol. B was prepared by the same procedure as in Example PKC1 except that it was used for ester hydrolysis. Prepared from z-Ala-OH in 26% yield. ; single spot with tlc, R1” =0. 69 (CHCIs: MeOH=9:1): Melting point, 95- 97°C; MS. m/e = 312 (M' + 1) o elemental analysis, C, lH,,04N Theoretical value of -1/2H20; C, 67,48; H, 5,66; N, 4. 37. Experiment Value; c, 67, 78:H. 5. 55:N, 4. 66° Example PKC13 Z-A　I　a-DL-A　I　a-Co2-n-BuThis compound is Luoxalyl chloride was used in the reaction and Na Example except that thorium n-butoxide was used for enol ester hydrolysis. Prepared from Z-Ala-Ala-OH in 14% yield by the same procedure as PKCI. Manufactured. Oily, single spot on tlc, R,'=0. 45 (CHCI=:Me OH=9:1); MS, m/e=378 (M'), elemental analysis, CIeHt @o@Nt・1/3H2O0') Theoretical value; c, 59. 35. H, 7, 00;N. 7. 29. Experimental value; c, 59. 41, H, 7, 03, N, 7. 　10゜implementation Example PKC14 Z Ala DL Ala C02Bzl This compound is benzyloxalyl loride in the Dakin-West reaction and sodium chloride in benzyl alcohol. Example PK except that mubenzyl oxide was used for enol ester hydrolysis. Prepared from Z-Ala-Ala-OH in 36% yield by the same procedure as C1. Ta. Single spot at tic, R+”=0. 55 (CHCI3:MeOH=9 : l); MS, m/e=413 (M'+1). Elemental analysis, C22Ht40@Nt (7) theoretical value; c, 64. 06; H, 5, 8 7, N, 6°79, experimental value; c, cta, 79. H, 5, 95, N, 6. 72 ゜Example PKC15 Z-Ala-Ala-DL-Abu-COJzlThis compound is benzyloxa Lyle chloride was used in the Dakin-West reaction and dissolved in benzyl alcohol. Implemented except that thorium benzyl oxide was used for enol ester hydrolysis. Extracted from Z-Ala-At a-Abu-OH by the same operation as Example PKCI. It was prepared at a rate of 31%. Single spot at tic, Rt'=0. 40 (CHCl- :MeOH=9:1); Melting point, 124-125°C; MS. m/e=498 (M'+1), elemental analysis, C! 8Hz, O, N, 2/3H, Theoretical value of O; c, 61. 28:H, 6, 39; N, 8. 24, experimental value; c, 61 ．． 14. H. 6. 65. N.7. 94° Example PKC16 Bz-DL-Al　a-COOH Tshushima et al. (J, Org, Chem, 49. 1163-1169 (1 984)) was used. Bz DL Ala COJ:t (5 40mg, 2. 2 mmol) to 650 mg of 2-propate sodium bicarbonate. 50% aqueous solution (H!0 and 2-propatool7. 5 mL) to the medium temperature solution, Stir at 40°C under nitrogen. Add ethyl acetate and brine solution to this reaction mixture. After addition, the aqueous phase was separated, acidified with 2N HCI and extracted with ethyl acetate. organic phase was dried over magnesium sulfate and the solvent was distilled off under reduced pressure. crude hydrolysis product Chromatography on silica gel, eluting with methylene chloride and methanol, An oil was obtained (150 mg, 31%). single spot in tle, R,′=0. 　 68 (n-butanol: acetic acid/pyridine: H20 = 4: 1: 1/2). Elemental analysis, theoretical value of C0H804N・3/4Hfu0: C, 56, 28, H, 5, 37,N. 5. 97, experimental value; C, 56, 21; H, 5, 46; 5. 66° Example PKC1 7 Z-Leu-DL-Nva-COOEtThis compound is the same as Example PKC1. By manipulation, it was prepared from Z-Leu-Nva-OH in 60% yield. oil; Single spot by tlc, RI=0. 49 (CHCl=:MeOH=20:1 ). NMR (CDQ3) 6:0. 91 (t, 9H), CH3; 1. 25 (t , 3H), CH3; 1. 3g (q, 2H). 0CH2CH3; 1. 64 (m, 6H), CH2; 1. 85 (m, IH), CH(CH3)2; 434 (m, IH’j CH2CH(NHCOOCH2Ph)CONH; 5. 12 (d, 3H) NHCH(Co)CH□, 0CH2Ph; 532 (dB IH) NH; 6. 71 (d, IH) NH; 7j6 (45H) P h. Z-Leu-DL-Nv, a precursor of Z-Leu-DL-Nva-COOEt The a-enol ester was synthesized by the same procedure as in Example PKCI, and the column Purified by chromatography. Oily, single spot on tlc. Example PKC18 Z-Leu-DL-Phe-COOEtThis compound is the same as Example PKCI. By manipulation, it was prepared from Z-Leu-Phe-CH in 30% yield. oily substance ; single spot by tlc, R,=0. 47 (CHCI-:MeOH=50:1 ). NMR (CD(1,) 8:0. 8g (d, 9H), 0CH2CH3, , (Q(3)2CH; 1. 35 ((1-2H), 0CH2CH3; 1. 5 6 (q, 2H), (CH3) 2Q (CH2 Tsui 3. 03 (m, IH), (CH3)QQ(; 4ko2(m. 2H), NHCH(Co)CH2; 5. 08 (s, 4H) CH2Ph ; 5. 40 (m, IH) NH; 6. 61 (d, hH) NH; 7 j　1　(s. 5H) ph; 735. (5H) Ph. Z-Leu-DL-Phe-enol ester is Z-Leu-DL-Phe- It is a precursor of COOEt, and was synthesized by the same procedure as in Example PKC1. Purified by mucochromatography. Oily, single spot on tlc. -NM R(■O,) 6: 0. 86 (t, 3H); 0. 99 (t, 3H) ;t, 24 (t, 3H); 1. 40 (t, 3H); 1j2 (m, 2H); 1. 83 (m, 2H); 4. 23 (m, @4H); 43 9 (q, 2H); 5. 10 (t, 2H); 5. 18 (s, IH); 7. 26 (m, 5H); 134 (m, 5H); 8. 89 (s, @IH) Example PKC19 Z-Leu-DL-Abu-COOEtThis compound is the same as Example PKCI. By manipulation, it was prepared from Z-Leu-Abu-OH in 33% yield. oil; Single spot with tlc, R,=0. 66 (CHC1,:MeOH=20: 1). NMR (■a3) δ: 0. 96 (t, 9H), OCH□O(3, (CH 3) 2CH; 1. 26 (L 3H), CH2CH2CH3; 1. 37 ( q, 2H), OCH2CM3; 1. 66 (q, 2H), (CH3) 2CgCH2CH; 2. 00 (rn, 1)(), CT((CI(3)Z; 4. 12 (q, 2H)C H2H2CH3; 434 (rn, 1) ()NHCH(CONH)CH2CH (CH,); 5. 12 (q, 3H) CH2Ph, C0NH (Et) CHCOCOO; 5. 2X (L IH) NH; 6. 79 (d, IH) NI (; 7ko5 (chi5H) p h. Z-Leu-DL-Abu-x norester is Z-Leu-DL-Abu-C It is a precursor of OOEt, synthesized by the same procedure as Example PKCI, and Purified by chromatography. Oily, single spot on tie. NMR (■ci3) A: pgυ6H); 1. 12 (U 3H); Example P KC20 At　Pk-DL-Lys-COOEt-HCIN-carbobenzyloxyara Nyl-N1-carbobenzyloxylysine (1.88 g, 3. 9 mmol), 4 -dimethylaminopyridine (21 mg. 0. 17 mmol), and pyridine (1.0 mL, 12. 4 mmol) To a solution of tetrahydrofuran (7 mL) was added ethyl oxalyl chloride (0, 9+11] 1, 3. 0 mmol) at a rate sufficient to initiate reflux. Added. The mixture was gently refluxed for 3 hours, treated with water (4 mL), and further Stir vigorously for 30 minutes at room temperature. The mixture was extracted with ethyl acetate and the organic extract was dissolved in water. After washing with Obtained. This enol ester (1.56 g, 2. 7 mmol) of anhydrous ethanol This solution permeates a solution of sodium ethoxide in ethanol at room temperature. It took several tens of minutes until it turned bright yellow. Remove ethanol and dissolve residue in ethyl acetate did. The organic solution was washed with water, dried over MgSO4 and evaporated to give a residue. This residue was then subjected to column chromatography, and the purified product was purified using chloroform-methane. It was eluted with nol. Remove the solvent and Z-Al a-DL-Lys (Z)-C O2Et was obtained as a hygroscopic powder (328 mg, 16%). m~spo on tlc cut, R,”=0. 53 (CHCls:MeOH=9:1); MS, m/ e=542 (M'+1). N-carbobenzoxyalanyl-DL-N”carbobenzoxylidine ketoethyl Ester, Z-Ala-DL-Lys (Z)-CO2Et (328 mg, 0 ．． 61 mmol) was desorbed with liquid HF containing anisole for 30 minutes at 0°C. Protected. HF was removed under reduced pressure. The residual oil was dissolved in absolute ethanol. . HCi/ethanol was added to this solution and the ethanol was removed in vacuo. residue The semi-solid (216 mg, 100%) was washed with ether by decantation. Obtained. Single spot with tic (n-butanol acetic acid/pyridine/H, 0=4 : 112). Example PKC21 Bz-DL-Lys-COOEt-HCl This compound is By the same operation as Example PKC20, Bz-DL-Lys (Z)-COOEt It was prepared from 62% yield. Single spot with tlc, R+'=0. 57 (n -Butanol/pyridine acetate: H20=4.112). Precursor Bz-DL-1 ys(Z)-COOEt is produced from Bz-Lys(Z)-OH in 100% yield. It was prepared by the same procedure as Example PKC20. Single spot with powder, tie , R+2=0. 75 (CHCls:MeOH=9:1):MSSm/e=4 40 (M'), elemental analysis, theoretical value of C24H2*0-N-・2/3HtO: c , 63. 70+H, 6, 53, N. 6. 19. Experimental value: c, 63. 49. H, 6, 51, N, 5. 92° Example P KC22 Bz-DL-Arg-COOEt-HCl This compound is the same as Example PKC20. A yield of 99% was obtained from Bz-DL-ArgCZ')-COOEt by the operation in step 1. Prepared with Single spot with tic, R14-0,71 (n-butanol:acetic acid :Viridine:HtO=4:1:1:2), plate reagent positive. Bz-DL-Arg (Z)-COOEt was subjected to the same operation as Example PKC20. Therefore, it was prepared from Bz-DL-Arg(Z)-OH in a yield of 19%. R1' =0. 38 (CHCIs:MeOH=9:1): Melting point, 140-142°C :MS. m/e=468 (M”), elemental analysis, theoretical value of C24Ht * Oe N4 ;c, 61. 53°H, 6, 02:N, 11. 96, Experimental value: c, 61. 96 ．． H, 6, 48, N. 12. 34° Example PKC23 H-Gly-DL-Lys-COOEt2HCI This compound is Example PKC2 By the same operation as 0, Z-Gl y-Dt, -Lys (Z)-COOEt It was prepared from with a yield of 92%. R+'=0. 21 (n-butanol:acetic acid:pi Lysine Ht O=4.1:1:2). Z-Gl y-Dt-Lys (Z) -COOEt was produced by Z-Gl y-Ly by the same operation as Example PKC20. Prepared from s(Z)-OH in 9% yield. Single spot in tle, R+’=0 ．． 68 (CHCI-:MeOH=5+1); MS, m/e=528 (M ”+1) a Example PKC24 H-Pro-DL-Lys-COOEt ・2HC1 This compound is Example PK By the same operation as C20, Z-Pro-DL-Lys (Z)-COOE It was prepared from t in 100% yield. Single spot (n-butanol acetic acid) with TLC ・Pyridine:H20=4:1:1:2), Z-Pro-DL-Lys (Z) -COOEt was produced by Z-Pr o- by the same operation as in Example PKC20. Prepared from Lys(Z)-OH in 15% yield. R,”=0. 73 (C HCIs: MeOH = 9: 1); MS, m/e = 568 (M'+1). Example PKC25 H-Phe-DL-Lys-COOEt .2HCl This compound is used in Example PK By the same operation as C20, Z-Phe-DL-LYS (Z)-COOE It was prepared from t in a yield of 39%. single spot 1 (n-butanol/acetic acid) Pyridine H*O=4: 1: 1: 2). Z　Phe-DL-L ys (Z)-COOEt is written first from Z-Phe-Lys (Z)-OH It was prepared in a yield of 9% as follows. R+”=0. 68 (CHCl 3:MeO H=9:1); MS, m/e=482 (M'). Example PKC26 H-Le u -A I a-DL-Ly s -COOE t -2HC1 The compound of Z-Leu-Ala-D was prepared by the procedure described in Example PKC20. Prepared from L-Lys(Z)-COOEt in 52% yield. single spot with tlc (n-butanol/acetic acid:pyridine:H20=4+1.1:2). Z-Leu-Ala-DL-Lys (Z)-COOEt is the previously described Da Z-Leu-Al a-D with a yield of 5% by reaction of k-in-Wes Prepared from L-Lys(Z)-OH. R,'=0. 34 (CHCL:M eOH=191): MS, m, /e=609 (M"0CH2CH-). Example PKC27 Simple amino acid, di- and tripeptide enol esters (general operations) Da Using the kin-West modified method (Charles et al. 1. 1. Chem, SQ C, Perkin 1. 1139 (1980)), and this was Z-Leu-DL- This was exemplified by the synthesis of Phe-EE. Z-Leu-Phe-OH (6.19g, 1. 5゜0mmol), 4-dimethylaminopyridine (0,183g, 1. 5m mol), and pyridine (4.75 g, 4. 85 mL, 60 mmol) of 5 Ethyl oxa Lyl chloride (4.30g, 3. 52mL, 31. 5 mmol) and start refluxing. was added at a rate sufficient to achieve The mixture was gently refluxed and warmed for 4 hours. . After cooling to room temperature, the mixture was treated with water (25 mL) and vigorously stirred for an additional 30 min at room temperature. Stirred. The mixture was extracted with ethyl acetate (150 mL), the organic phase was separated, and the aqueous phase was saturated with solid (NHa)2So, and re-extracted twice with 25 ml of ethyl acetate. Ta. The organic phases were combined, washed twice with 75 ml of water and twice with 150 ml of saturated NaC, Decolorized with carbon and dried with Mg5O6. After distilling off the solvent, the crude enol ester ( 8.36g, 98%) was subjected to silica gel flash chromatography to obtain the purified product. was eluted with Ac0Et. Remove the solvent in vacuo (loaf evaporator) to obtain pure The enol ester was obtained as an oil (7.22 g, 85%). Single stroke with TLC Pot, R+=0. 84;A;0. 68. C. Z-Leu-Nva-EEoThis compound can be synthesized by Z-Leu-Nv using general procedures. Prepared from a-OH, using CHCl5:MeOH=50:1 v/v as eluent. Purification was performed using silica gel flash chromatography. Yield 95%, TLC and single spot R1=0. 92. coo, 28. L. Z-Leu-Abu-EEoThis compound can be synthesized from Z-Leu using the general procedure described above. Prepared from -Abu-OH in 78% yield. silica gel flash chromatog Purification by Raffi. Eluate, CHCl5:MeOH=50:lv/v, by TLC Single spot, R+=0. 86. A. PhC0-Abu-EE, this compound was prepared using the general procedure described above for PhC0-Ab Prepared from u-OH in 26% yield. silica gel flash chromatography Purification by. Eluate, CHCl, single spot on TLC, R, = 0. 60. M . (CHs)=CH(CHt)-Co Abu-EE, this compound is the general From (CI4j)-CH(CHt)2CoAbuOH using the procedure, the yield Prepared at 82%. Purification by silica gel flash chromatography. Eluate , Ac0Et, single spot on TLC, R1=0. 72. C. (CH, CH2CHt)zcHco Abu EE, this compound is the general From (CH,CHtCH*)tcHco-AbuOH using the procedure, yield 10 Prepared at 0%. Purification by silica gel flash chromatography. eluate, Ac0Et, single spot on TLC, R+=0. 78, C; 0. 81. 0Ph to (CH2)@co-Abu-EE, this compound was prepared using the general procedure described above. Prepared from Ph (CH2) sco Abu OH in 86% yield. Shirikage Purification by flash chromatography. Eluate, Ac0Et, single by TLC Spot R,=0. 74. C0 Z-Leu-4-CI-Phe-EE, this compound was prepared using the general procedure described above. Prepared from Z-Leu-4-CI-Phe-OH in 69% yield. silica gel Purification by flash chromatography. Eluate, Ac0Et, single run on TLC. Pot, Rt = 0, 77, C, 0, 78, KoZ-Leu-Leu-A bu-EEo This compound can be converted to Z2-Leu-Leu- using the general procedure described above. Prepared from Abu-OH in 62% yield. silica gel flash chromatography Refined by fi. Eluate, CHCl=:MeOH=501 v/v, single by TLC Spot, R,=0. 89. A, 0. 75, MoZ-Leu-Leu-Phe- EEo This compound can be synthesized by Z-Leu-Leu-Phe- using the general procedure described above. Prepared from OH in 60% yield. By silica gel flash chromatography Purification. Eluate, CHCls:MeOH=50:lv/v, TLC For a single spot, R,=0. 80. To, 0. 70. M02-NapSOt-Le u-Leu-Abu-EEa This compound was prepared using the general procedure described above. Prepared from pSOi-Leu-Abu-OH in 73% yield. silica gel fur Purification by flash chromatography. Eluate, Ac0Et. Single spot on TLC, R,=0. 71. To; 0. 54. C02-NapSOz l-eu-Leu-Abu-EEo This compound was prepared using the general procedure described above. -NapSOt-Leu-Leu-Abu-OH in 74% yield. Purification by silica gel flash chromatography. Eluate, Ac0Et:A c0H=200: iv/v, single spot on TLC, R+=0. 69. to 0 Z-Leu-Phe-COOEto single amino acid, di and tripeptide chain esters (general operations). 8. 53 g (15,0 mmol) of Z-Leu-Phe-EE anhydrous ethanol For a stirred solution at room temperature in a 40 ml bottle, add 20. Sodium in 0ml absolute ethanol Umnidoxide (0,204g, 3. A solution of 0 mmol) was added dropwise. reaction mixture The color of the compound varies from colorless or pale yellow to deep yellow or orange to enol ester. It changes accordingly. The reaction mixture was then stirred at room temperature for 4-5 hours and ethanol was added. was evaporated in vacuum (rotor evaporator), and the residue was dissolved in 200 ml of ethyl ether. (or 200 ml of ethyl acetate in the case of tripeptides). This aete (or ethyl acetate) solution twice with 75 mL of water and twice with 175 mL of saturated NaC. Washed, decolorized with carbon and dried with Mg5(L). After evaporation of the solvent, the crude product 6゜09g (89.7%) using CHCl3:MeOH=50:lv/v and subjected to silica gel flash chromatography. Evaporate the solvent and make pure Z-Leu-Phe-COOEt was obtained as a viscous oil (4. 08g, 58 ．． 0%). Single spot on TLC, R,=0. 60, A, 0. 47, M0 mass Spectrum, FB-MS ((M+1)/Z) = 469° Example PKC28 2-Leu-Nva-COOEt This compound was prepared using the general procedure described above. silica gel flash chroma Purification by topography. Eluate, CHCl=:MeOH=100: lv/v , yield 86. 6%, viscous colorless oil, single spot on TLC, R,=0. 49 ．． A: M0 mass spectrum, FB-MS ((M+1)/Z) = 421° Example PKC29 Z-Le n-Abu-COOE This compound was prepared using the general procedure described above. silica gel flash chroma Purification by topography. Eluent, CHCl3. Yield 8296, viscous pale yellow oil object, single spot on TLC, R,=0. 66, A; Mass spectrum, CI-MS ((M+1)/Z)=407° Example PKC30 PhCO-Abu-COOEt This compound was prepared using the general procedure described above. silica gel flash chroma Purification by topography. Eluate, CI (C1-:MeOH=50: lv/v , yield 83%, oil, single spot on TLC, RI=0. 44. M; Masupe Kutle, M, , /Z 263 (M'):] - MS, 264 ((M+1)/Z ). Example PKC31 (CHl)=CH(CH=)　2CO-Abu-COOEtThis compound is the above-mentioned Prepared using the general procedure. Preparation by silica gel flash chromatography Made. Eluate, AeOEt, 43% yield, oil, river-spot on TLC, R,= 0. 56. C; Mass spectrum, El-MS M/Z 257 (M'): FB -MS, ((M+1)/Z)=258° Example PKC32 CH=CH=CH)zcHcOAbuC00EtThis compound can be prepared using the general procedure described above. It was prepared using the following method. Purification by silica gel flash chromatography. Elution Liquid, CHC1=:MeOH=50: lv/v, yield 66%, viscous yellow oil single spot on TLC, R,=,0. 80. C:0. 66, M0 mass spec Kutle, El-MS M/Z=285 (M'); (j-MS, ((M+1)/ Z) = 286° Example PKC33 Ph　(CH2)eco-Abu-COOEtThis compound was prepared by the general procedure described above. It was prepared using Purification by silica gel flash chromatography. eluate, CHCl,:MeOH=50: lv/v, yield 64%, pale yellow oil, TL Single spot at C, R+=0. 29. M, mass spectrum, E I-MS M/ Z=347 (M+), FB-MS, ((M+1)/Z)=348° Example PKC34 Z-Leu-4-CI-Phe-COOEt, this compound was prepared using the general procedure described above. It was prepared using Purification by silica gel flash chromatography. eluate, Ac0Et, 100% yield, colorless oil, single spot on TLC, R,=0. 　 71°C; mass spectrum, FB-MS, M/Z=503 (M+). Example PKC35 Z-Leu-Leu-Abu-COOEtThis compound was prepared using the general procedure described above. It was prepared using Purification by silica gel flash chromatography. Eluent, CH C1=:MeOH=50: lv/v, yield 79. 2%, very viscous colorless oil single spot on TLC, R,=0. 28°M: Mass spectrum, FB- MS, ((M+1)/Z)=520° Example PKC36 Z-Leu-Leu-Phe-COOEtThis compound was prepared using the general procedure described above. It was prepared using Purification by silica gel flash chromatography. Eluent, CH CI=:MeOH=50: lv/v, yield 33%, oil, single run by TLC Pot, Rt=0. 56. M; Mass spectrum, FB-MS, ((M+1 )/Z)=582°Example PKC37 2-NapSOg-Leu-Abu-COOEtThis compound was prepared using the general procedure described above. Prepared using Purification by silica gel flash chromatography. Eluate , CHCl5:MeOH=50:lv/v, yield 38%, viscous oil, TLC Single spot, R,=0. 71. K, 0. 54. A0 mass spectrum, FB-MS, ((M+1)/Z)=463° Example PKC38 2-NapsOz-Leu-Leu-Abu-COOEtThis compound has - Prepared using the general procedure. Preparation by silica gel flat chromatography Made. Eluate, AeOEt: Ac0H = 200: lv/v. Yield 61%, semi-solid, single spot on TLC, R,=0. 67, to: mass spec Tor, FB-MS, ((M+1)/Z) = 576° Example PKC39 Z-Leu-Met-COzEt This compound was prepared using the procedure described in -L. Yellow oil, single spot on TLC Keto, R, = 0. 52 (CHCl3:CH,0H=50:1), yield 46 % (from dipeptide) + MS (FAB) 454 (m+1). Example PKC40 Z-Leu-NLeu-COJt This compound was prepared using one series of operations. Pale yellow oil, single spot on TLC Cut, R,=0. 57 (CHCl 3:CHSOH=50:l), yield 53% (from dipeptide), MS (FAB) 434 (m+1). Example PKC41 Synthesis of n-butyloxalyl chloride It was prepared by the procedure of reference (Warren and Malec. J, Chromat, 64. 21-222 (1972)), N-butanol ( 0゜1mo1. 7. 41 g) was added dropwise to oxalyl chloride at -10°C. addition After completion, the reaction mixture was stirred at room temperature for 20 minutes and distilled to give the product n-butyloxalyl. 15. 0g (91,1 8m. 1. 91%). Z-Leu-Phe-COJua This compound consists of Z-Leu-Phe-OH and About the synthesis of Z-Leu-Phe-COzEt from butyl oxalyl chloride Obtained in 43% yield by the procedure described. However, butyl oxalyl chloride Used in place of ethyl oxalyl chloride and sodium chloride in butanol. Tyroxide was used for enol ester hydrolysis. Single Spoke Keto with TLC . R+=0. 54 (CHCIs: CHsOH=50: l), MS (FA B) m/e=497 (m+1),'HNMR(CDCI=)ok0 Example P KC42 Z-Leu-Abu-COtBu This compound was prepared using the procedure described above. Single Subo Nodo in TLC, R, = 0 ．． 53 (CHCI, .CH,0H=50:l), yield 36%, pale yellow oil MS (FAB) m/e=435 (m+1), 'HNMR (CDC1, ) ok. Example PKC43 Synthesis of benzyl oxalyl chloride. Benzyl alcohol (0.15 mol. 16g) was added dropwise to oxalyl chloride at 5-10°C. After the addition is complete, mix the reaction The mixture was stirred at room temperature for 20 minutes. Excess oxalyl chloride was distilled off and reused. The mixture is then distilled in vacuo to produce benzyloxalyl chloride, boiling point 110- Obtained 26g (0.1.2mol, 86%) of 112℃ (0.6mm-Hg) . H' NMR (CDCI=)7. 39 (s, 5H), 5. 33 (s, 2H ). Z-Leu-Phe-Co! BZ 16 This compound is Z-Leu-Phe-OH and for the synthesis of Z-Leu-Phe-COzEt from butyl oxalyl chloride. It was obtained in a yield of 17% by the procedure described above. However, butyl oxalyl loride in place of ethyloxalyl chloride, and benzyl alcohol Sodium benzyl oxide in the solution was used for enol ester hydrolysis. T Single spot on LC, RI=0. 63 (CHCIs:CH,0H=50: 1), pale yellow solid, melting point 117-119°C. MS (FAB) m/e=532 (m+1), H’ NMRok. Example PKC44 Z-Leu-Abu-CO2BZ 1 This compound was prepared using the procedure described above. Single spoketo by TLC, R, = 0 ゜51 (CHC1,: CH30H-50: 1), pale yellow oil, MS ( FAB) m/e = 469 (m+1), yield = 26%. Example PKC45 Z-Leu-Phe-COOH0 dipeptide keto acids (general operations) Z-Leu -Phe-COOEt O, 53 g (1.13 mmol) in methanol 60 ml LM NaOH1.27ml (1.27mmol) was added to the medium stirring solution. added. The color of the reaction mixture changed to deep yellow and a small amount of solid matter (precipitated) stopped the reaction. The reaction was carried out at room temperature and the progress of hydrolysis was examined by TLC. After 24 hours, the substrate strength is further reduced. No longer detected. The reaction mixture was cooled in a 5°C water bath and adjusted to pH=3 with IMMCI. and extracted with AcOEt (2 x 50 ml). Organic extract with HyO5 Washed twice with 0ml, decolorized with carbon if necessary, and dried with MgSO4. . After removing the solvent (rotor evaporator), the residue (viscous oil) was dissolved in n-hexane 25 titrate twice in m1 L/, dried in vacuo . Yield 0. 39 g (78%), colorless, very viscous oil. TLC, mainsubo The count is R+=0. 24. R+=0. 78. 1 contains a trace amount of impurity. mass spectrum, FB-MS ((M+1), /Z) = 441° Example PKC46 Z-Leu-Abu-COOH This compound was prepared from Z-L-Leu-Abu-COOEt using the general procedure described above. It was prepared with a yield of 83%. TLC, main sport keto is R1=0. 14. R, =073, trace amount of impurity in ■. Mass spectrum, FB-MS ((M+1)/Z )=379° Example PKC47 Z-Leu-Phe-CONH-Et Z-Leu-Phe-OH (20g, 48. 5 mmole), 4-dimethyl Aminopyridine (0,587g, 4. 8 mmoleL and pyridine (15,7 g, 194 mmol e) in THF (100 mL) without stirring. Ethyl oxalyl chloride (11.4 ml, 101. Reflux 8 mmole) was added at a rate sufficient to initiate. The mixture was gently refluxed for 4 hours. After cooling to room temperature, water (80ml) was added. The reaction mixture was heated for an additional 30 minutes. Stir vigorously and extract with ethyl acetate (3x 100 mL). Combine the organic phase After washing with water (2 x 100 ml) and saturated sodium chloride (2 x 100 ml), decolorization Decolorize with carbon chloride, dry over magnesium sulfate, and concentrate to a dark orange oil. I got something like that. CHC1,: Silica gel flush with CH=OH (50: l v/v) By chromatography, Z-Leu-Phe-enol ester 14. 63g ( y=53%) was obtained. The product was a yellow oil. Single spot R with TLC ,=0. 77 (CHCL/CH, OH50: 1). NMR (CD CIs) ) o koZ-Leu-Phe-enol ester (14.63g, 25. 7 Stir a pale yellow solution of 3 mmole) in absolute ethanol (50 ml). while sodium ethoxide (0,177 g, 2. 6mmole) of ethano solution (5 ml) was added. The orange solution was stirred at room temperature for 3 hours, then poured into ether. The nol was evaporated and the residue was treated with ethyl ether (300ml). ether The phase was washed with water (2 x 100 ml), saturated sodium chloride (2 x 100 ml) and Dry over magnesium sulfate and concentrate to give an orange oil. C.H.C. Silica gel flash chromatography with IS: CH, 0H (50:1 v/v) Graphically, α-ketoester, Z-Leu-Phe-COOEt7. 76g (Y=64%) was obtained. The product was a yellow oil. Single spot on TLC, R,=0. 44 (C HCl = / CH3OH50: l). NMR (CD CIs) o k, MS (F AB. Theoretical value of Ct @H = = N 20-: 468. 6), m/e=469 (M+1). The α-carbonyl group of Z-Leu-Phe-COOEt is modified by the following procedure. did. Z-Leu-Phe-COOEt (Ig, 2. 13mmole) of C1 (tcli 5mlml liquid solution, 2-J tandithiol (0,214rn1. After adding to 2゜55 mmol e), 0. 5ml poron trifluoride acetate 1/-t was added. This solution was stirred at room temperature overnight. Water (20ml) and and ethyl ether (20ml) were added. Separate the organic phase and add water (2X10ml ), washed with saturated sodium chloride (2X10ml) and dried with magnesium sulfate. Let it evaporate and turn into a yellow semi-solid. 98g (y=8496) was obtained. Protected α-ketoester (0.98 g, 1. 8 mmol e) in ethanol (5 ml) and cooled to 0-5°C in a water bath. 43g ( 54 mmol e) was bubbled into the solution until added. Bring the reaction mixture to the chamber Warm slowly to warm and stir overnight. Filter the mixture and remove the white precipitate. , a yellow semi-solid was obtained. with CHCl5:cHsOH (30:1 v/v) Z-Leu-Phe-CONH- 0.63 g (y=75%) of Et was obtained. The product was a pale yellow solid . Single spot by TLC, Rt-0,60 (CHCIs/CH-OH20: 1 ); melting point, 145-147°C. Elemental analysis, C25HssNsO*: 467. 5 Theoretical value of 6; c, 66, 79, H, 7, 11, N, 8. 99, experimental value; c, 66, 59. H, 7, 09:N. 8. 95°NMR (CDCL) ok, MS (FAB) m/e=468 (M+ 1). Example PKC48 Z-Leu-Phe-CONH-nPrThis compound is a protected α-keto ester and and propylamine in a yield of 92% by the procedure described in Example PKC47. Obtained. Single spot on TLC, R,=0. 50 (CHCIs/CHsOH 50:l), pale yellow solid, melting point 152-153°C. Elemental analysis, C2, H3sN, Os: 481. Theoretical value of 57; c, 67, 33, H, 7, 33, N, 8 ．． 72, experimental value; c, 67, 21:H, 7,38+N. 8. 64°NMR (CDCI=)okI, MS (FAB) m/e=482 ( M+1). Example PKC49 Z-Leu-Phe-CONH-nBuThis compound is a protected α-keto ester and From butylamine and by the procedure described in Example P Obtained in %. Single spot R,=0. 50 (CHCI collection/'CH *OH50: 1); Melting point 152-153°C. Elemental analysis, Cz*HstNsOa : 495. Theoretical value of 59; C, 67, 85; H, 7, 52°N, 8. 4 8. Experimental value: e, 67. 70:H, 7, 57; N, 8. 43°NMR (CDCI s) ok6MS (FAB) m/e=496 (M+1). Example PKC50 Z-Leu-Phe-CONH-iBuThis compound is a protected α-keto ester and and isobutylamine in a yield of 53% by the operation described in Example PKC47. Obtained with. Single spot on TLC, R+=0. 54 (CHCl, /CH,O H50:1): Melting point 152°C. Elemental analysis, C-*H-TN-Os: 495. 5 Theoretical value of 9; c, 67, 85, H, 7, 52:N. 8. 48, experimental value; c, 67. 77° H, 7, 56, N, 8. 40°NMR (CDCI-) OK, MS (FAB) m/e=496(M+1). Example PKC51 Z-Leu-Phe-CONH-Bz 1 compound is a protected α-ketoester or and benzylamine in a yield of 40% by the operation described in Example PKC47. Obtained with. -After overnight reaction, ethyl acetate (60 ml) was added. mixture It was filtered and a white precipitate was removed by filtration. Cooled solution IN MCI (3X25mlL Wash with water (1 x 20 ml), saturated sodium chloride (2 x 20 ml), Dry with magnesium sulfate. The solution was evaporated to give a yellow solid. CHCl3 : By silica gel column chromatography using CH,0H=30・1 v/v A yellow solid was obtained. Single spot on TLC, R+=0. 45 (CHCl, /CH , OH30:1); melting point 160-162°C. Elemental analysis, C,, H,, N, 06 : 529. Theoretical value of 61; c, 70. 30. H, 6, 66; N. 793, experimental value: c, 70. 18; H, 6, 67, N, 7. 99°NMR (CDCI+)okoMS (FAB) m/e=530 (M+1). Example PKC52 Z-Leu-Phe-CONH-(CH2)=Ph This compound is a protected α-ketoe Yield from ster and phenethylamine by the procedure described in Example PKC51. Obtained at 50%. Single spot on TLC, R+=0. 50 (CHCIs/C HsOH30: l): Melting point 151-153°C. Elemental analysis, C32Hj7NS0 8: 543. Theoretical value of 66, C170,70;H,6,86:N,7. 73 , Experimental value: c, 70. 54; H, 6, 88; N, 7. 74°NMR (CDC1s )okoMS (FAB) m/e=544 (M+1). Example PKC53 Z-Leu-Abu-CONH-Et This compound is a protected α-ketoester derived from Z-Leu-Abu-COzEt and and ethylamine in a yield of 64% by the operation described in Example PKC47. Ta. Single spot on TLC, R,=0. 36 (CHCl, /CH30H50: l), melting point 130-132°C. Elemental analysis, C21H-1N-06: 405. Theoretical value of 45. C, 62, 20, H, 7, 71: N, io, 36, experimental value: C, 61, 92; H . 7. 62. N, 10. 31°NMR (CDCIs) ok, MS (FAB) m/ e=106(M+1). Example PKC54 Z-Leu-Abu-CONH-nPrThis compound has the corresponding protected α-ketoes Yield 47 by the procedure described in Example PKC47 from PKC47 and propylamine. Obtained in %. Single spot on TLC, R,=0. 28 (CHCI,,,/C H,OH50: 1); Melting point 134-135°C. Elemental analysis, C2, H,, N, 0 6: 419. Theoretical value of 50: c, 62. 98. H. 7. 93:N, 10. 02, experimental value; c, 62. 84:H, 7,97;N. 9. 94. NMR (CDC1,) okoMS (FAB) m/e=420 (M +1). Example PKC55 Z-Leu-Abu-CONH-nBuThis compound has the corresponding protected α-ketoes The yield was 42% by the procedure described in Example PKC47 from ester and butylamine. Obtained with. Single spot on TLC, Rt=0. 54 (CHCl, /CHsO H50: 1); Melting point 135-136°C. Elemental analysis, C25HssN-Oh: 433. Theoretical value of 53; c, 63. 71. H, 8, 13, N, 9. 69, Experimental value: c, 63. 48:H, 8, 07, N, 9. 67°NMR (CDC1,) okoMS (FAB) m/e=434 (M+1). Example PKC56 Z-Leu-Abu-CONH-iBuThis compound has the corresponding protected α-ketoes was obtained from ester and isobutylamine by the procedure described in Example PKC47. A yield of 65% was obtained. Single spot on TLC, R,=0. 25 (CHCIs/ CHsOH50: 1); melting point 133-135°C. Elemental analysis, CzsH-sN* Os: 433. Theoretical value of 52: c, 63. 72;)(. 8. 14:N, 9. 69, experimental value: C, 63, 46; H, 8, 10, N, 9. 　 60°NMR (CDCI=)ok, MS (FAB) m/e=434 (M+1 ). Example PKC57 Z-Leu-Abu-CONH-Bz　I This compound has the corresponding protected α-ketoe Yield 2 from ster and benzylamine by the procedure described in Example PKC51. It was obtained at 9%. Single spot on TLC, RI=0. 56 (CHCl, /CH 30H30:l); melting point 140-141°C. Elemental analysis, -C,,H,,N,O8 : 467. Theoretical value of 54; c, 66, 79. )(,7,11,N,8. 　 99, experimental value; c, 66. 65;H,7,07,N,8. 93°NMR (CDC I,)okoMS (FAB) m/e=468 (M+1). Example PKC58 Z　e　u　Ab　u　C0NH(CH2)　zP　hThis compound from the protected α-keto ester and phenethylamine described in Example PKC51. It was obtained in a yield of 51% by operation. Single spot on TLC, R1=0. 44 (CHCl,/CH,OH 30:1): melting point 156-157°C. Elemental analysis, C2, H-sN-Os: 481. Theoretical value of 59; e, 67, 34, H, 7°33, N, 8. 72, experimental value; c, 67. 38; H, 7, 33, N, 8. 78°NMR (CDCI,) ok, MS (FAB) m/e=4 82 (M+1). Example PKC59 Z-Leu-Abu-CONH-(CHI)s-N (CH2CH 20 pieces The compound contains the corresponding protected α-ketoester and 4-(3-aminopropyl) mol Obtained from Hollin in a yield of 33% by the procedure described in Example PKC47. - After overnight reaction, ethyl acetate (80 ml) was added. Filter the mixture to remove the white precipitate. The precipitate was filtered off. The solution was mixed with water (3 x 20 ml), saturated sodium chloride (2 x 20 ml) j) and dried over magnesium sulfate. Evaporate the solution to give a yellow oil. Obtained. Silica gel column chromatography with CHCl+:CHsOH=10:1 v/v Matography gave a yellow semi-solid which was recrystallized from ethyl acetate/hexane and a pale yellow semi-solid was obtained. A yellow solid was obtained. Single spot at TLC, R,=0. 42 (CHCIs/ CH 0H10:1): Melting point 125-126°C. Elemental analysis, Cts H4゜N 40@:504. Theoretical value of 63: c, 61. 88:H07, 99:N, 11. 10. Experimental values: c, ai. 69; H, 7, 95; N, 11. 07°NMR (CD Cl s) ok6M S (F AB) m/e=505 (M+1). Example PKC60 Z-Leu-Abu-CONH-(CHz)tCH. The compound was prepared from the corresponding protected α-keto ester and octylamine in Example P It was obtained in a yield of 67% by the operation described in KC51. Single spot with TLC, RI=Q, 55 (CHCl,/CHsOH30:1); melting point 134-135°C . Elemental analysis, C,, H, IN, 0. :489. Theoretical value of 66; c, 66, 23 ．． H, 8, 85, N, 8. 58, experimental value; c, 6s, 19; H, s, 81. N, 8. 61°NMR (CDCIs) ok, MS (FAB) m/e=490 ( M+1). Example PKC61 Z-Leu-Abu-CONH-(CHz)xOH This compound has the corresponding protected α - from ketoester and ethanolamine, the procedure described in Example PKC59. The yield was 29%. The product was a white sticky solid. T.L. Single spot at C, Rt=0. 42 (CHCIs/CH,OH10:1); Point 151-153°C. Elemental analysis, C! l　Hs　INNO3:421. 49 of Theoretical value: C, 59, 84: H, 'y, 41; N, 9. 97, experimental value: C95 9, 11:H, 7,44:N, 9. 81°NMR (CDC!s) okoMS (FAB) m/e=422 (M+1). Example PKC62 Z-Leu-Abu-CONH-(CH2)20(CH2)tOHThis compound is , the corresponding protected α-ketoester and 2-(2-aminoethoxy)ethanol was obtained in a yield of 34% by the operation described in Example PKC59. The product was a white sticky solid. Single spot on TLC, R+=0. 4 2 (CHCI, /CH,OH 10:1); melting point 103-105°C. Elemental analysis, C z3H-sNsOl: 465. Theoretical value of 55: c, 59. 34, H, 7, 58;N. 9. 03, Experimental value: C, 59, 23, H, 7, 58: N, 9. 　01゜NMR( CDCIs) ok, MS (FAB) m/e=466 (M+1). Example PKC63 Z-Leu-Abu-CONH-(CH-)+-CH single compound has the corresponding protection from a protective α-ketoester and octadecylamine as described in Example PKC51. A yield of 12% was obtained by operation. The product was a pale yellow solid. TL Single spot at C, R,=0. 54 (CHCI, /CHIOH30:1); Point 134-136°C. Elemental analysis, C-78@5N-Os+ 629. 92 theories Value: C, 70, 55, 1 above 10. 08; N, 6. 67, Experimental value: C170,7 1; H, 10, 14, N, 6. 75゜NMR (CDCl　s) o　koMS　 (FAB)m,'e=630. 2 (M+1). Example PKC64 Z-Leu-Abu-CONH-CH=-C@Hs (OCR=) The two compounds are , the corresponding protected α-ketoester and 3. 5-dimethyl-xybenzylamine? It was obtained in a yield of 45% by the operation described in Example PKC51. The product was a yellow sticky solid. Single spot on TLC, R+=0. 4 4 (CHCIs/"CH,OH30: 1); melting point 153-155°C. Elemental analysis , Cx5Hs-Ns()y: 527. Theoretical value of 62; e, 63. 74. H,7,07,N. 796, experimental value: e, 63. 66;H,7,09,N,7. 92°NMR (CD CI+)okoMS (FAB) m/e=528. 8 (M+1). Example PKC65 Z-Leu-Abu-CONH-CH2-C41LN This compound has the corresponding protection From α-ketoester and 4-(4-aminomethyl)pyridine, Example PKC It was obtained in a yield of 45% by the operation described in No. 59. The product was a green-yellow solid. Single spot on TLC, R1=0. 55 (C HCl, /CH, OH10・1), melting point 124 (26°C. Elemental analysis, C26H, , N, 06: 468. Theoretical value of 55; c, 64. 08. H, 6, 88: N. 11. 96, experimental value; c, 63. 88. H, 6, 87, N, 11. 96°NMR (CDCI3) ok6MS (FAB) m/e=469 (M+1). D, Futamigatonbep ± lower amount Halomethylketone peptides are useful for serine proteases and cysteine proteases. They are irreversible inhibitors of enzymes. Compounds of this genus have various types at the C-terminus. Examples include peptides having halomethyl groups. These halomethyl groups -CH2X-1CHI2- and CL (wherein X represents all halogens) ) can be mentioned. Several analogue compounds have been synthesized, including aminohalo Included are ketones and diazoketone peptides. These analogue compounds Although the different classes of haloketone compounds can be chemically distinguished, all of these classes of haloketone compounds have similar effects. It is believed that it has a mechanism. Therefore, for simplicity, the above compound All of these substances will be collectively referred to as "haloketone peptides" in this text. It is known that the reactivity of haloketones is generally I>Br>CI>F. ing. However, by increasing the reactivity of haloketones, This will accelerate synthetic side reactions. Therefore, halomethylketone peptides Preferably, the reactivity is enhanced by modifying the peptide structure. When selecting suitable inhibitors of calpain, we used peptide keto compounds. The same basic peptide structure selection method can be used. Once the peptide Once the structure is identified, the most effective C-terminal groups can be determined by calpain in these compounds. This can be determined empirically by studying the inhibition kinetics of each substance. Many haloketone peptides are commercially available. For example, all, Enzy me Systems Products of Livermore, Ca1 Available from vendors like ifornia. From the same supplier, the following diazomethi In addition, alpha-aminofluoroketone peptides are available. Manufactured by David W. Ranick, U.S. Patent No. 4. 518. In issue 528 This is cited as a reference in the text. Preparation of various haloketone peptides is described in Shaitan Teigori' River Eng+oc+-4-46. : 197-208 (19778), which is referred to in the main text. Quoted. Briefly, halomethylketone derivatives of block amino acids are oxidized by the reaction of mineral acids (hydrogen halides) with the corresponding diazomethyl ketones. Easy to prepare. Iodomethylketones are produced by the reaction between haloketone and Na[ The reason for this is that it is prepared by the reaction of Hl with diazomethyl ketone. One example is the production of rugetone. Several different blocking groups Contains zyloxycarbonyl (Z) and t-butyloxycarbonyl (Boe). Can be used once. The diazomethyl ketone is diazomethane and dicyclohexyl By reaction with a suitable acid activated by carbodiimide (DCCI), Prepared by mixed anhydride method. Non-blocking amino acid chloromethyl ketones are benzyloxycarbonyl blocked By reacting derivatives with HBr, HOAc, or trifluoroacetic acid, or by hydrogenation. Synthesis of peptide chloromethyl ketones can be achieved by converting a suitable peptide or amino acid into a non-butylene This can be achieved by simple coupling with the locking amino acid chloromethyl ketone. . Some dipeptides were prepared using mixed anhydrides and CH2N2 and then HCI. can be directly converted to chloromethyl ketone. Various synthesis-L problems include the preparation of chloromethyl ketone derivatives of basic amino acids. Occurs due to manufacturing. This side chain usually has to be blocked during synthesis and is Difficulties often arise during removal of the group. The use of trifluoroacetic acid or HF is the It was found that good conversion to the final product was achieved. Several examples of the preparation of haloketone peptides have been reported in the literature, J.C. Powers, “Chemistry and Biochemistry” of Am1no Ac1ds, Peptides Sand@Proteins ”, Vol, 4. Dekker, New York (1977). Comprehensive review and description of amino acid derivatives and approximately 60 peptide derivatives has been done. This disclosure is incorporated herein by reference. Those skilled in the art will understand that Haroketonpe You will know where to search for a large number of manufacturers of petidos. therefore , I won't give any more examples here. E Mission at E20J We hereby present compounds of the above-mentioned genus to have calpain inhibitory activity. In addition to these compounds, many other classes of compounds are believed to exist. In the main text Regarding the calpain inhibitors of this large number of different genera, which have been disclosed by Known, newly discovered, and as yet undiscovered inhibitors are collectively referred to in this text using the term "Calpa". Inhibitor. Calpain inhibitors are used for various purposes to inhibit unwanted calpain activity. It can also be used in vitro. For example, calpain inhibitors are Occurs during the production, isolation, purification, storage, or transportation of proteins and proteins. Can be used in vitro to prevent proteolysis. The calpain inhibitors described in this text may also be used to treat tissue samples that occur after sample preparation. It can also be used in vitro to prevent further degradation. this minute In vitro prevention of spectrin, MAP2, actin-binding proteins and assays for degradation products of cytoskeletal components (BDPs) such as neurodegeneration when the assay consists of testing the products of calpain activity in tissues. can be particularly useful in the production of assays for P cited for reference in the main text , 5euvert et al., Neuroscience, 31:195 (1989) is an exemplary method for quantifying the amount of spectrin BDPs as an indicator of calpain activity. is disclosed. The calpain inhibitors of the present invention can also be used to treat problems in which proteolysis by calpains is an important problem. It is useful in a variety of other experimental procedures on the subject. For example, calpain inhibitor Incorporating harmful agents into radioimmunoassays increases sensitivity. When calpain inhibitors are used in plasma fractionation procedures, valuable plasma proteins can be harvested. efficiency and purification of the protein becomes easier. The information disclosed in the text Lupine inhibitors are used to increase the yield of purified recombinant product. can also be used in cloning experiments using transformed bacteria or eukaryotic cell cultures. can. Because calpain inhibitors are used in vitro, calpain inhibitors are Soluble in organic acids such as tylsulfoxide (DMSO) or ethanol to inhibit Make sure that the final concentration of organic solvent in the aqueous solution containing the protease you plan to use is 25% or less. Add as much as possible. Calpain inhibitors can also be used as solids or as suspensions. It can also be added. F. Neurodegeneration Q treatment We believe that calpain inhibitors are involved in excessive proteolysis by calpain. It has been found useful in vitro for treating pathological conditions. like this Pathological symptoms include excitotoxicity, HIV-induced neuropathy, ischemia, denervation, injury, Subarachnoid hemorrhage, stroke, multiple infarct dementia, Alzheimer's disease (AD), haunch results from Tomton's disease, surgery-related brain injury, Parkinson's disease and other pathological conditions. including neuropathology such as neurodegeneration that occurs due to l. Selection of inhibitors Useful in the practice of the invention for the treatment or prevention of neurodegenerative conditions and diseases To select calpain inhibitors, select inhibitors with significant calpain inhibitory activity. It is important to select the type. In addition, a drug with a high degree of calpain inhibitory specificity Selecting lupain inhibitors also requires calpain inhibitors for the treatment of neurodegeneration. Avoid interacting with other biological processes when introduced into the intended mammal. It is important to All thiol proteases have a similar mechanism of action. Since it is believed that these effects are exerted, we mainly use Although it has substantial inhibitory activity against other thiol proteases, Focus on selecting calpain inhibitors with weak or no activity. did. Therefore, in order to select such calpain inhibitors, we Regarding the inhibitory power of lupain ■ and calpain H, various calpain inhibitors have been investigated. We tested harmful agents and used this data to test other thiol proteases, cathep. The ability of the same calpain inhibitors to inhibit SynB was compared. against calpine has high in vitro calpain inhibitory activity and is substantially weak against cathepsin B. Those calpain inhibitors with high activity are extremely useful in in vivo therapy. It is believed that Examples IA to IC are for various calpain inhibitors. This paper presents the results of these studies. Example IA Δ The isocoumarins are irreversible inhibitors of calpain. We have various ICs of these calpain inhibitors. The values were determined by kinetic analysis of these compounds. I got it. We have shown that the isocoumarins inhibit casein proteolysis by calpain. Therefore, purified calpains were combined with the fluorogenic substrate succinyl locomotor. using ysine-tyrosine-methylaminocoumarin (commercially available) or acid-soluble pigment. It can be assayed by measuring the release of peptides from casein. Calpains I and ■ were determined by the method of (Yoshimura et al., 1983). and purified. (Kitahara 1984) proposed another purification mode. Ru. Apart from this, Calpine ■ is also available from Sigma Chemical Co. "Calcium Activated Neutral Proteas In this assay, purified calpain was purified at 140- Incubation with methylated casein in the presence of various heterocyclic compounds , the amount of acid-soluble radioactivity released by the action of calpain was measured. IC6 The value was determined as the concentration of the heterocyclic compound at which calpain activity was inhibited by 50%. No. Table 1A is Table 1A of various isocoumarin compounds. Inhibition of calpains by substituted isocoumarins ICe@(μM) Calpine I Calpine ■ C汀Pr0IC1()0　70 From the above, various isocoumarin compounds have significant calpain inhibitory activity at low concentrations. It can be seen from Table 1A that the Example IB(i) Pez Tenjo Gujo Compound Device's Peptide Keto Compound Device for Skin Harmful Calpain and other thiol proteases. Kalpa The Ki values for inhibition of in-11 carbine and cathepsin B were determined by several peptides. Regarding doketo compounds, calpain I derived from human red blood cells and derived from rabbit muscle. Calpain ■ uses 5ue-Leu-tyr-amidomethylcoumarin as a substrate. 20mM HEPES, pH 7, 2, 10mM CaCL, 10mM β-mel The assay was performed using captoethanol in assay buffer. Catheps derived from bovine pancreas SynB was assayed using Z-Lys-4-nitrophenyl phosphate as a substrate. did. Table 1B(i) shows the results of the study of Example IB(i). some Ki value of inhibition of calpains and cathepsin B by peptide keto compounds of is expressed in μM (7420 mol). Calbioehem of La J. 11a, the values of commercially available leupeptin from California were compared. This is an example. Table 1B (i) Ki value of peptide keto compounds Inhibitor Calpain I Calpain ■ Cathepsin BLeupeptin 03 2 0. 43　67,Leu-Phe-Co2Et　O,230,4>50Z- Leu-Nle-Co2El　O,120,1818 1st B　(i) Table results are et al., peptide keto compounds have a Ki similar to or better than leupepsin. The value shows that it inhibits calpain. In particular, Z-Leu-Phe-COzE t, Z-Leu-Nle-COtEt and Z-LeuAbu C0Jt are Roy It was found to have superior calpain inhibitory activity than pepsin. moreover , these particular compounds are highly specific for calpain and leupepsin. It has lower inhibitory activity against cathepsin B. Example IB (ii) Protease temporary inhibition of peptide-keto compounds Their ability to inhibit several proteases of a group Table 1B (i) tested to assess specificity for calpain I, calpain n, cathepsin B, PP elastase and papain inhibition of Table 1B (i) shows cathepsin B. Calpain 11 and Calpain H Inhibition constants (K,) by peptide ketoamides are shown. Abu in 23rd place and dipeptide ketoamides having Phe and Leu at the 23rd position are calpai It is a strong inhibitor of Calpain ■ and Calpain ■. Z-Leu-Abu-CONH -Et is 14 times better than Z-Leu-Phe-CONH-Et. It is an inhibitor of Z group (PhCHloCO) to PhCHICH,CO-,P hC1-1tCH,SO,-, PhCH,NHCO- and PhCHzNHCS Substitution with analogous groups such as -(7) results in good inhibitor structures as well. The optimal inhibitor of calpain ■ is Z　Leu　Abu　C0NH(CHy)z　 It is Ph. Calpain H by changing R and R1 groups. The inhibition power is significantly improved. The best dipeptide ketoamide inhibitors have long alkyl side chains (e.g. Z-Leu- Abu-CONH-(CH=), CH-), phenyl substituted on the alkyl group alkyl side chain (e.g. Z-Leu-Abu-CONH-(CHz)t-Ph) or an alkyl group having a morpholine ring substituted on the alkyl group (e.g. Z-L eu-Abu-CONH(CHz)s MpLMpl=N(CHxCHt)t O). Has a small aliphatic amino acid residue or Phe at position 21 Dipeptide α-ketoamides are also excellent cathepsin B inhibitors. most The best inhibitor is Z-Leu-Abu-CONH-Et and Z(PhCHl oCO-) to PhCH, C1(, CO-, PhCH2CH280w-, PhCH +, NHCO- and PhCH2NHC3- are similarly good This results in a unique inhibitor structure. Example IB (i i i) Vep±inferior supracomposite anastomosis example stability We tested both plasma and liver homogenates of some peptide keto compounds. The half-life of Stability of the above compounds in plasma and liver homogenates The results are shown in Table 1B(iii). Table 1B (i i i) Stability of peptide keto compounds in plasma and liver Table 1B (I) Data show that peptide keto compounds are typically found in plasma and liver homogenates. It can be seen that it is stable. However, it also appears that peptide α-ketoamides are substantially is more stable than the corresponding peptide α-ketoesters in plasma and liver. Recognize. Example 1C Protease of 9 years old and younger Haloketone peptides, like the above-mentioned substituted isocoumarins, have irreversible effects on calpain. They are inhibitors. We investigated the effects of various compounds of this genus on calpain I and ■. The Kapp/[I] value was investigated. We have at least as well for comparison For one haloketone peptide other thiol proteases papain and These values for cathepsin B were examined. These Kap4s of other genera The above for inhibitors rarely allows direct comparison with 1 or IC-5° values. We used 5uc-l eu-tyr-amidomethylcoumarin to detect calpain. I and mouth were assayed. Papain is benzoyl-arg-4-nitroani Cathepsin B (bovine) was assayed using Assayed using lophenyl ester. We are Tian and Tsou. -To J Summer J Obscene! - 辷t” Engineering 21, 1028-1032 (1982) (in the text Kinetic data were obtained according to the progression curve method of (cited as reference). Simply put, the book As a method, the following formula can be used. where [P-] is the concentration of the product formed at a point approaching infinity, and A is , Kapp in the presence of the substrate (S), K is the Michaeles constant, and and [Y] is the concentration of inhibitor. [S] and [Y] are known, and Since it can be fitted with ■ and K, Kapp can be easily fitted. The Kapp of various haloketone peptides are shown in [1] Table 1C. Table 1C Kinetic parameter inhibitor of haloketone peptides CI CII' P CE CI Dew Calhein I 1-Rat CII Cloud Calvine ■ 2 Hi to P-to°to°in 3- Rabbit CB - Cat 7° Non-B From the results in Table 1C, it can be seen that the haloketone peptides have a relatively high Kapp/[I ] value shows that it inhibits calpain. In particular, Z-gly-1eu -phe CHgC1 and Boc-gly-1eu-phe-CHtCl are It was found to have significant calpain inhibitory activity. Furthermore, Boc-gl y-1eu=phe-CHxCI is somewhat specific for calpain was shown to inhibit cathepsin B or papain more than calpain. It was found that the activity was low. The results shown in the table are Z-g Iy-1eu-p he-CHzC1 and Boc-gl y-1eu-phe-CH2Cl are the same It has been shown that it has a similar inhibitory effect. Therefore, the aforementioned blocking group is It can be seen that it has no significant effect on calpain inhibitory activity. The following are the kinetic constants of other irreversible calpain inhibitors, and Kapp/[I] is shown. E-64 (7500), E64-d (23 000) and Z-1eu-1eu-tyr-CHNt (230000), E -64 is commercially available from Sig & l Chemi ω1, and here it is It has been shown to be a poor inhibitor of In. Z-1eu-1eu-ty r-CHNt is a diazomethyl peptide compound and has significant calpain inhibitory activity. It can be seen here that it has 2 Inhibition of calpain in nervous tissue Various calpains in nervous tissue To evaluate calpain inhibition by inhibitors, we tested neural and other Calpain, which cleaves spectrin, a protein component of tissues, into BDPs We used our knowledge to assay Cal, (inhibitors). The more effective calpain inhibitors inhibit the conversion of spectrin to BDPs. will prevent it. Example 2 is an example of such an assay. Example 2 Kano Nipii” Hamazake Shiyo Yoyo Brain Crude Tracing Divination Offshore Man Gumiin Q Inhibition Brain Crude Extract Medium Ka The activity of lupine was investigated by proteolysis of the Ca”-stimulated endogenous substrate spectrin. Measured by. Brain tissue was treated with 10mM Tris pH=74. 0. 32M Homogenize in sucrose, 1mM EGTA, 1mM dithiothreitol, and Nuclei and debris were removed by centrifugation. Various calpain inhibitors in DMSO -L supernatant in a carrier (vehicle) and a calcium salt (final effective concentration of about 1. 2m M) was added to start the reaction. Proteolysis of spectrin is 5eube r t et al. (Brain Re5erach, 459:226-232゜1988 ) as described by Western plot. This is in the main text It is quoted for reference only. Briefly, the specifications of known amounts of calpain-treated Thorin-containing samples were separated by 5DS-PAGE and analyzed with anti-spectrin antibodies. I did an immunoplot. Spectrins considered to correspond to characteristic BDPs The amount of immunoreactivity is indicative of the amount of spectrin activity present in the sample. An example of the method for quantifying BDPs is to incubate the brain with 20mM Tris pH 7, 2°32M. Sucrose, homogenized on ice in 50 MM Ac-Leu-Leu-nLeu-H BDPs are assayed by Homogenate then 10 %SDS, 5% β-mercaptoethanol, 10% glycerol, 10mM T ris pH=8. 0,0. Mix with 5% bromophenol blue in a ratio of 1=1, The mixture was heated to 95°C and subjected to 4-1/2% polyacrylamide gel electrophoresis. gel The proteins inside were transferred to nitrocellulose, and spectrin and BDPs were removed. An immunodetection method was established using a rabbit polyclonal anti-spectrin antibody. Ta. The amount of spectrin and BDP in each sample was determined by densifying the developed nitrocellulose. It can be quantified by scanning with a cytometer. Calpine is Ca! ', so in the absence of Ca2+, the presence of the inhibitor Despite this, little or no spectrin proteolysis occurs, whereas Ca ” If present, spectrin should be added if no calpain inhibitors are added. If so, more than 95% of the amount was cleaved into BDPs within 40 minutes. Both leupeptin and C11 showed inhibition in the system of Example 2. Additionally, replace The following compounds of the heterocyclic class produce significant inhibition at 100 μM. Understood. 3-chloroisocoumarin 3. 4-dichloroisocoumarin 3-benzyloxy-4-chloroisocoumarin 7-(acetylamino)-4-k Lolo-3-(propoxy)isocoumarin 4-chloro-3-(3-isothiureido Bropoxy) isocoumarin 7-axin-4-chloro-3-(3-isothiureido propoxy)isocoumarin 7-(benzylcarbamoylamino)-4-chloro- 3-(3-isothiureidopropoxy)isocoumarin 7-(fercarbamoylamino)-4-chloro-3-(3-isothiurei dopropoquine) isocoumarin 7-(acetylamino)-4-chloro-3-(3-isothiureidopropoxy) isocoumarin 7-(3-phenylpropionylamino)-4-chloro-3-(3-isothiure Idobroboxy) isocoumarin 7-(phenylacetylamino)-4-chloro-3-(3-isothiureidopro poxy) isocoumarin 7-(L-phenylalanylamino)-4-chloro-3-(3-isothiureido Bropoxy) Isocoumarin 7-(hensylcarbamoylamino)-4-chloro-3-(3-isothiureido ethoxy) isocoumarin 7-(phenylcarbamoylamino)-4-chloro-3-(3-isothiureido ethoxy) isocoumarin 7-(D-phenylalanylamino)-4-chloro-3-(3-isothiureido ethoxy) isocoumarin Similarly, the following compounds of haloketone peptides showed significant inhibition at 100 μM. I found out that it brings. Z-Leu-Phe-0 (20 Ac-Leu-Phe-CI (20 Z-Gly-Leu-Phe-Q(20Boc-Gly-Leu-Phe-0( 2CIAc-Val-Phe-0 (20 Z-Gly-Leu-Ala-Q (20) Furthermore, the following peptide keto compounds Compounds were similarly found to provide significant inhibition at 100 μM. Bz-DL-Phe-COOEt Z-Leu-Nva-COOEt Z-Leu-Nle-COOEt Zshizu-Phe-COOEt Z-Leu-AbuCOOEt Z Lau-Met-COOEt Z-Ala-Ala-DL-Abu-COOEtMeO-5ue-Val-Pr o-DL-Phe-COOMeZ-AIa-Ala-Ala-DL-Ala-C OOEtMeO-5ue-Ala-Ala-Pro-DL-Abu-COOMe . Zshizu-Phe-COOEt Therefore, substituted heterocyclic compounds, peptide keto compounds and 710 ketone peptides peptides inhibited in addition to leupeptin and C1l in brain homogenates. bring about. 3. Inhibition of neurodegeneration in vivo by injection method Inhibition of calpain activity alone is sufficient to inhibit neurodegeneration. To demonstrate that neurodegeneration can be inhibited in vivo, we Leupeptin, a calpain inhibitor that inhibits neurodegeneration in gerbils ability was tested. As mentioned above, leupeptin has poor membrane permeability. therefore, Leupeptin is not thought to cross the blood-brain barrier (“BBB”) very well. Not possible. Therefore, sufficient leupeptin to moderately inhibit calpain activating effects. To deliver Chin to the brain, we used a brain injection method. Using these methods By continuously treating brain tissue with leupeptin over a period of time, we I was able to make close contact. Example 3A shows that one of these studies showed in vivo protection against neurodegeneration. Example 3A Neurodegeneration, light t, second port protection A small cannula was implanted into the right lateral ventricle of an adult gerbil and the head was placed with dental cement. It was fixed to the operculum. Attach the Alzet micro osmotic pump to this cannula, The intracerebroventricular region was perfused. Pump with saline only (control) or leupeptin (saline) 20 mg/ml) in saline. Control solution or leupeptin solution After perfusing either of these fluids for 3 days, transient ischemia was induced bilaterally by injecting the carotid arteries for 10 minutes. It was induced by clamping. Measure core temperature during or after ischemia However, no difference was observed between control and leupeptin-treated animals. After 14 days, movement The heart was injected with an excessive amount of Nembutal and paraformaldehyde in 10% PBS. Sink slaughter (2). The coronal part of the brain was stained with cresyl violet to determine the loss of nerves. I checked the extent. Control mice showed typical damage in the post-ischemic CAL region. However, 72% of the nerves had disappeared. However, the god of leupeptin-treated gerbils There was much less degeneration, with only 15% of the nerves lost. The results of Example 3A cannot be explained by changes in thermal control. The reason is that This is because the core temperature was not different between the groups. Therefore, we The calpain inhibitory activity of ipeptin is involved in the observed differences in Sakaki mesenchymal cell loss. I think that I am doing it. Furthermore, in order to quantitatively demonstrate this difference, and to observe the brain. Confirmed that leupeptin exerts a calpain inhibitory effect within the To do so, we performed a series of related experiments. In this series of experiments, the space Cutrin BDPs were measured in leupeptin-treated and control animals. As mentioned above As mentioned above, these BDPs indicate the amount of calpain activity occurring within tissues. ing. Example 3B is included to demonstrate the results of these experiments. Example 3B Calpine Naoshi Example I 2 Bo Momokichi Implantation and carotid artery clamping were performed in the control ischemic group (n = 4) and the leupeptin ischemia group (n = 5). Group 3 of animals (n=4 ), implantation is performed while pumping physiological saline, but if there is no ischemia I didn't. Animals were sacrificed by decapitation 30 minutes after artery clamping. The brains were quickly removed and placed in cold homogenization buffer (0.32M sucrose, 10mM Tr 5-HCl, 2mM EDTA, 1mM EGTA, 100μM Ipeptin and 1 μM/ml ha0ketone compound, tos-phe-CHIC I (TPCK). The hippocampal CAI region was then excised. control and Samples from leupeptin-treated animals were then subjected to 5DS-PAGE and labeled anti-spectrin. In vitro use of calpain inhibitors for immunoblotting with antibodies It was prepared as described above in connection with the application. Control animals were not exposed to ischemia. The concentration of BDPs was significantly increased compared to the gerbils. These BDPs BD observed after in vitro protein lysis of spectrin by calpain It migrated with P. Brain tissues of leupeptin-treated gerbils were compared with control ischemia-treated gerbils. It represented approximately 25% of the BDPs observed in gerbils. Another group of gerbils (n=3) observed the effects of ischemia without reoxygenation. For this purpose, mice were sacrificed immediately after ischemia without treatment with leupeptin. These aretines BD similar to control ischemic gerbils observed after a 30 min reperfusion period The amount of P species increased. Therefore, the results of Example 3B indicate that leupeptin inhibits calpain activation. These results suggest that it exhibits neuroprotective effects. Additionally, this result was observed Spectrin proteolysis is an effect of ischemia and not a secondary effect of reoxygenation. It suggests. Therefore, this result indicates that inhibition of calpain activity is neurogenic in vivo. This suggests that it may have a protective effect. The above studies revealed that leupeptin can inhibit neurodegeneration in vivo. However, leupeptin can be injected directly into the brain over a long period of time to produce neuroprotective effects. This drug is not the first-choice treatment because it needs to be evaporated. this child This is because the compound has a substantially poor ability to pass through the BBB. therefore, A more therapeutically practical way to inhibit neurodegeneration is to use calpain inhibitors, which have higher membrane permeability. would be to use. 4. Platelet permeability According to our findings revealed in Examples 3 and 3A, we found that the compound Traversing B and into CNS tissue may treat neurodegeneration within the CNS. We believe that this is an important feature of a therapeutically useful approach to inhibiting or controlling membrane permeation The use of calpain inhibitors with enhanced potency is one such approach. Ru. Therefore, we investigated the effects of carpa, which permeates the platelet membrane and is normally contained in platelets. The ability of various calpain inhibitors to inhibit ino was determined. Implementation of the following As shown in the examples, our results demonstrate that heterocyclic compounds, peptide-keto compounds and In addition to peptide aldehyde C11, certain compounds of haloketone peptides and This suggests that it exhibits good membrane permeability. As an indication of the membrane permeability of various calpain inhibitors, we Inhibitors penetrate the platelet membrane and suppress calpain, which is normally found inside platelets. The ability to do this was measured. The platelet membrane is thought to have many similarities with the BBB. Therefore, such experiments have shown that various calpain inhibitors cross the BBB. It is considered to be a good indicator of similar abilities. Example 4 shows the calpain inhibition of the present invention. Some results of these platelet experiments using these agents are shown. Example 4A Power men <> I-Ku Platelets were obtained from a modified Ferre & Mart 1nSJ, Bio 1. Che M, 264: 20723-20729 (1989) method. This disclosure is incorporated herein by reference. Blood (15-20ml) Guri containing 100mM EDTA citric acid from gue-pawley male rats The samples were collected in a 1000 ml bottle and centrifuged at 1600 rpm for 30 minutes at room temperature. plasma Buffer 1 (136mM NaCl, 2. 7mM KCI, 0. 42mM N aH, PO,. 12mM NaHCOs, 2mM MgCl2. 2mg/ml BSA (Sig ma). 5. 6mM glucose, 22mM triNa citrate pH 6.5) in 15ml and platelets were isolated at 2200 rpm for 25 minutes at room temperature. slow down platelets Solution 2 (136mM NaCl, 2. 7mM KCI, 0. 42mM NaHt PO4, 12mM NaHCOs, 2mM MgCL, 1mg/mlBSA ( S i gma), 5. 6mM glucose, 20mM HEPES pH 7.4 ) and leave at room temperature for at least 10 minutes. After that, I used it. Platelets were incubated in the presence of inhibitor for 5 minutes. Enough for calpain activation To provide sufficient intracellular calcium, calcium ionophore A23187 is It was added to a final concentration of 1 μM. After further incubation for 5 minutes, Centrifuge the platelets (1 minute, 10. OOOxg) and 10% dodecyl Sodium sulfate, 10mM Tris pH=8. 0. 5% β-mercaptoeta Nord, 0. Resuspend in 02% bromophenol blue and warm at 95°C for 5 minutes. Ta. Samples were run on 5DS-PAGE on a 6% minigel and LKB Novalot Nitrocellulose (Schleic11er & 5chuel BA83) ) for 2 hours at 100 mA/gel. Set the filter to 0. 25% gelatin, 1% BSA, 0. 25% Triton Xl00. 0. 9% NaCl, 10mM Tris - Blocked in HCI pH 7.5 for 10 minutes, anti-rat spectrin Stir overnight in the same solution containing 10 mM Tris-HCI pH 7, 5゜0. Wash 3 times for 10 minutes with 5% Triton Ink was incubated for 4 hours in wash buffer containing enzyme-conjugated goat anti-rabbit antibody (Biorad). and washed as above. Connect filters to Biorad AP Color was developed using a synthetic substrate kit. Spectrin immunoreactivity on the filter Quantitated by densitometer. Inhibition of calpain inside platelets is inhibited by endogenous calpain substrates in the presence of inhibitors. It is measured by proteolysis of spectrin and has been shown to be effective for various calpain inhibitors. I said yes. Leupeptin and E-64, which have poor permeability, are absorbed into intracellular calpain. It had almost no effect. In contrast, heterocyclic compounds with excellent membrane permeability , peptide-keto compounds and haloketone peptides have been shown to induce platelet calpain-containing The effect was inhibited. The following heterocyclic compounds provide significant inhibition in the system of Example 4 at 100 μM I understand. 3-chloroisocoumarin 4-chloro-3-(3-isothiureidoproboxy)isocoumarin 7-amino- 4-chloro-3-(3-isothiureidopropoxy)isocoumarin 7-(benzi carbamoylamino)-4-chloro-3-(3-isothiureidopropoxy) isocoumarin 7-(phenylcarbamoylamino)-4-chloro-3-(3-isothiureido Propoxy) Isocoumarin 7-(acetylamino)-4-chloro-3-(3-isothiureidobropoxy ) isocoumarin 7-(3,--phenylpropionylamino)-4-chloro-3-(3-isothi ureidopropoxy) isocoumarin 7-(phenylacetylamino)-4-chloro-3-(3-isothiureidopro boxy) isocoumarin 7-(L-phenylalanylamino)-4-chloro-3-(3-isothiureido bropoquine) isocoumarin 7-(Benzylcarbamoylamino)-4-chloro-3-(3-isothiureido ethoxy) isocoumarin 7-(phenylcarbamoylamino)-4-chloro-3-(3-isothiureido ethoxy) isocoumarin 7-(D-)pentylalanylamino)-4-chloro-3-(3-isothiureido ethoxy) isocoumarin The above-mentioned haloketopebuti [.] showed significant inhibition in the system of Example 4 at 100 μM. It turned out to be a mistake. DLeu-Phe-CH2Cl Ac-Leu-Phe-CH20 Compounds of L. showed significant inhibition at 100 μM in the system of Example 4. I found that it brings:. Z-Abi-Ala-DJ, -Abu-COOEtZ-Ala-Ala-Ah- D, L-Ala-COOEtMeO-5ue-Ala-Ala-Pro-DJ, lAhu-COOMe7,shi:u-Phe-α)OEt 'ZA-eu-Nle-COOEt Z-Lzu-Nva-COOEt Z-Leu-Abu-0)OEt Z Shizu-Abu Z-Leu-4-G-Phe-COOEtZ-Leu-Lzu-Abu-COO EtZ-Leu-Iju-Phe-COOEt2-NapSO□-Leu-Ab u-COOEt2-NIIPsO2-Leu-Leu-Abu-COOEt:Z -Leu-Met-Co2Et Z-Lju-NLeu-Co2Et Z-Leu-Phe-CO2Bu Z-Leu-Abu-CO2Bu Z-Leu-Phe-CO2Bzl Z-Leu-Abu-Co2Bzl zpAla-Ala-DshiAbu-Cυ0BzlZ-IJu-Phe-CoOH z-Leu-Abu-COOR We found that the homogenate system of Example 2 showed calpain inhibitory activity. Among the compounds, few showed no calpain inhibitory activity in the system of Example 4. I noticed that there are at least three types of spiders. These compounds include leupeptin, MeO -8u e-Va l -P r o-D, L-Ph e-COOMe and Bz-D. It is L-Phe-COOEt. Leupeptin may have poor membrane permeability. This platelet assay is known to be effective against compounds with known poor membrane permeability. I confirmed that it was excluded. Therefore, calpain inhibitory activity within platelets The two types of peptide keto compounds that were found to have no membrane permeability also showed no membrane permeability. It is considered good and is predicted not to cross the BBB. Platelet membrane permeability We are ICs. 50% of the calpain activation effect present in the control value occurs. Several peptides were tested using the assay of Example 4A, except as determined by concentration. Further quantitative or semi-quantitative studies were conducted on doketo compounds. Results first It is shown in Table 4B. For semi-quantitative assays, those marked with a “+” in Table 4B are: , indicates that inhibition was detectable at 100 μM; “++” indicates that inhibition was detectable at 100 μM; In addition, significant inhibition “(−→−10”) detected no detectable calpain activation. It shows that it was not done. Table 4B Platelet assay for peptide ketoamides, ketoesters and ketoacids Part 4B The table shows that α-peptide ketoamides and keto acids are effective in this platelet assembly. It has been shown that these compounds are much more effective than the corresponding ketoesters. By extending the R3 group to an alkyl group or a phenyl-substituted alkyl group, of these inhibitors, as suggested by enhanced performance in platelet assays. Increased membrane permeability. Based on these results, the applicant extended the R group to create a long The inclusion of an alkyl group or a phenyl-substituted alkyl group allows the inhibitor to form a membrane. We believe that this will enhance permeability. Considering the foregoing, the results of Examples 4A and 4B show that C1l and Substituted heterocyclic compounds, peptide-keto compounds, and noroketone peptides are be permeable, thus allowing the compounds to cross the BBB after in vivo administration. This confirms our confidence that the results are predicted to be effective. 5. Glutamate toxicity Further investigation of calpain inhibitors that appear to have pharmacologically active neuroprotective properties Therefore, we investigated the protective ability of calpain inhibitors against glutamate excitotoxicity. Tested. Excess extracellular glutamate is the primary inducer of neuropathological symptoms in ischemia. It is thought to play a critical role, and this involves activation of Cal<in>. Considering the role of this excessive amount of glutamic acid as a factor in the cultivation of Nu8-RE- 105 (Neuroblast cell product-retinal hybrid) cells Adding glutamate to the medium It can be killed by This glutamate-mediated cytotoxin company 1. t Free radical scavenger 1N type voltage sensitive species. lucium nayannel, and kisgiarate subtype glutamate antagonists. It can be reduced by several mechanisms including: Therefore, glutamine Acid-mediated N18-RE-105 cell killing is an in vitro model of neuropathology . Therefore, we demonstrated that calpain inhibitors inhibit glutamate activation in N18-RE-1,05 cells. To establish that these compounds reduce or prevent acid-induced cell death The ability of calpain inhibitors to inhibit glutamate-induced cell death in cells Tested. Some of these tests are shown in Example 5. Example 5 Glutamate-induced cell death Culture stock of N18-RE-105 cells was added with 10% fetal bovine serum (FBS). Du containing and adding hypoxanthine, aminopterin and thymidine (HAT) The cells were passaged in lbecco's modified Eagle medium (DMEM). subconfluent Cultures (not confluent) were split into 96-well plates. cell transfer Twenty-four hours after explantation, cells were treated with glutamate and various concentrations of calpain inhibitors. Exposure to fresh medium with Control cells were not treated with glutamate. Said processing Cells were treated with 5mM glutamate and leupeptin (5μg/ml) or Other calpain inhibitors shown in the figure were added at 3 μg/ml. M Conversion of TT was measured after 19 hours as described. 19 hours after the start of exposure, cells is 3(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazo To measure the degree of conversion of lipromide (MTT) to blue formazan product. Cell survival was quantified by. This conversion occurs in live cells rather than dead cells. It occurs in tochondria (Pauwe Is et al., 1988). High absorbance This suggests that the cells have high survivability. Figure 1 shows the results after glutamate treatment versus the control in which no glutamate was added. The percentage of blue formazan product remaining is shown. Therefore, the carrier Hykru) plus glutamic acid, however, if it does not contain any harmful agents, less than 70% It can be seen that mitochondrial activity remains. However, Figure 1 shows that leupeptin , C1l and heterocyclic compounds, peptide keto compounds and haloketone peptides Several calpain inhibitors, including representatives of the 5-family group, have been shown to be effective against N18-RE-105 cells. has been shown to protect against glutamate toxicity. The peptide keto compound Lupine inhibitors are Z-A　I　a　-A　a-Abu-COJt, substitution Heterocyclic compounds CITPrOIC and ACITIC, and haloketone peptides de-TPCK completely blocks the toxic effects of glutamate, and as a result, glutamate More than 100% of the formazan product was produced as seen in cells not treated with acid. accomplished. Therefore, Example 5 shows that these calpain inhibitors are effective in causing neuropathology. has been shown to effectively block cell death in vitro models. That's it This data further demonstrates that calpain inhibitors are neuroprotective in vivo. This supports our findings. 6. Infarct reduction due to MCA occlusion Stroke is a significant health problem in the human population. Stroke is caused by blockage of a cerebral artery. It causes decreased blood flow to brain areas and causes cell death due to oxygen and nutrient depletion. cause This type of lesion can be diagnosed by surgically occluding the middle cerebral artery (MCA). can be modeled with a cut. Several models of MCA occlusion have been created. , all showing substantially similar results. MCA occlusion results in a large amount of infarcted brain tissue 24 hours after occlusion. Previous research? Furthermore, the infarct diameter determined by TTC staining did not increase in the 24 hours immediately after occlusion. is shown. Therefore, we demonstrate the neurodegenerative protective potential of calpain inhibitors. The MCA occlusion model was used to test. This model is described in Example 6. It is. Example 6 MCA model of Sprague-Dawley male alpino rats weighing 250-300 g were Anesthetized with enobarbital (70 mg/kg, i, p). shave the neck area , a 2 cm incision was made. Tissue using the spread method The superficial fascia was peeled off with a forceps and round-tipped tissue scissors. right side marginal carotid artery was isolated from the vagus nerve and tied off with (3,0 silk) with a -circle suture. lateral cervical motion The pulse was permanently occluded with sutures. Exposing the branches of the medial carotid artery and the pterygoid canal artery A microaneurysm clip was placed over the pterygoid artery. outer/inner part Another microaneurysm clip was placed on the common carotid artery directly adjacent to the branch. this A suture was placed loosely around the common carotid artery and a lumen was created in the vessel with the tip of a 25g needle. A 40 mm nylon suture was prepared by melting the tip and rounding the sharp end. and mark it with a dot exactly 175mm away from this melting point. Ta. Insert the stitch into the artery lumen up to the vascular clip and remove the clip. , the stitches were penetrated until the landmarks reached the branches of the medial and lateral carotid arteries. This is it The end of the seam in the circle of Willis just beyond the source of the middle cerebral artery. Insert the end and occlude the artery. Gently tighten the loose stitches around the carotid artery and apply nylon stitches. fix the position. Remove the microaneurysm clip on the medullary canal artery and close the incision. The animal should then be warmed or allowed to recover in a cover cage. After 24 hours of occlusion, the brains of these animals were removed and sliced into 2 mm sections. section 2. 3. 5-1-Lundy 1-lutetrazolium chloride (Lundy, EF, Sol ik, BS. Frank, R3, Lacy, PS, Combs, DJ, Zclen ock, GB, and D' Alecy, LG, rug and are Morphometric evaluation of cerebral infarction in the Japanese mouse, J. Pharmacol, Meth. ,,. 15. 210-214. 1986). Red coloration is seen Absence indicated that no tissue damage or death occurred. infarct tissue area The size of the area (area with red staining) and the defective area (area with partial red staining) is as follows: Evaluated using quantitative morphometry. Drugs or carriers were administered by injection into the femoral vein. Same for all animals Amount of drug or carrier (20% demethyl sulfoxide/80% propylene glyco Azlet osmotic pump (24-hour pump, 8. czl/hr, total amount 9 It was administered through a catheter attached to t1 (0 μm). Using the model of Example 6, a control (carrier, 1) and two calpain inhibitors were tested. :Z-Leu-Phe-CONH-Et (CX269) and Z-Leu-Abu -CONH-Et　(CX275) I met. These results are shown graphically in FIG. Calpain inhibitors Z- Leu-Phe-CONH-Et (CX269) or Z-Leu-Abu- Administration of either CONH-Et (CX275) results in a decrease in infarct diameter. I understand. 7. Inhibition of oxygen deprivation and hypoxic damage The CAI region of the hippocampus is affected by ischemic injury and other excitatory amino acid-related injuries. This is a particularly sensitive brain area. The hippocampus is also responsible for cell degeneration in Alzheimer's disease. It is a foci. Neurons in sections were observed in vivo during and after ischemia changes after hypoxia due to sea fencing of the same event (including reperfusion effects). Have sex. We investigated the degeneration of nerve sections in the presence of various calpain inhibitors. study is a valid indicator of membrane permeability of calpain inhibitors. I believe. Therefore, in these studies we aim to treat in vivo neurodegeneration. We believe that this provides a model for inhibition. In the treatment of neurodegeneration according to the present invention Similar studies to test the effectiveness of useful compounds have been conducted on platelets or cultured cells. Other models can also be used, such as protection against degeneration. Oxygen deprivation is linked to various neurodegenerative diseases and conditions such as stroke and head trauma. is thought to be a major cause of neurotoxicity. Therefore, we The growth of hippocampal neurons when lupine inhibitors are exposed to hypoxia or anoxia conditions Using hippocampal sections to demonstrate that it is beneficial to increase survival rates. We conducted further research. Using an initial screening procedure, we tested various calpain inhibitors. Qualitatively determine whether harmful agents can protect nerves from oxygen deprivation in hippocampal slices. investigated. An example of these initial screening operations is shown in Example 7A. Example 7A Oxygen deprivation injury Nagito Φ first psc l-only 2g seabird section (400μm) Sprag prepared from ue-Dawley rats (6-7 weeks old) and interfaced using conventional methods. was held in the ace chamber. That is, constant irrigation of AC3F is applied to the lower surface of the cut H. flow (0,5 ml/min), while the upper surface was subjected to a rate of 2 L/min. O! is being exchanged with - Exposure to a high humidity atmosphere of CO, (95% = 5%). ACSF medium was NaCl (124) in mM. KCl (3), KHPO, (2,5), CaCL (3,4), NaHCO s (26) and D-glucose (10). field excitatory synapse The post-response was expressed in response to stimulation of the 5chaffer-bunun fibers of CAla or CAlc. Recorded from the stratum radiatum of Ca1b. Evoked responses by optimizing the depth of the recording electrode was determined at the rate of one evoked response every 30 seconds. For the initial screening procedure, 14 to 16 pieces were cut from each seabird per rat. Obtain the pieces and place them in a regular ACSF bath. Each section indicates the magnitude of the response evoked before oxygen deprivation. Continuously test to find out. 5 stimulation pulses (each 0. 1m5 (duration) was applied at 15 minute intervals. Maximum evoked response for each section I researched and recorded it. After this, the sections were inked for 1 hour by adding only the drug or carrier to the above ACSF. was developed. Ink, after 1 hour of vation, in a chamber atmosphere with high oxygen content. The surrounding atmosphere was acidified by replacing oxygen with nitrogen (Nt = 95%; C0z = 5%). It was assumed to be in a state of elemental deficiency. The sections were kept in this oxygen-deficient environment for 10 minutes and then placed in an oxygen-enriched environment. The quantity atmosphere (02=95%; C0t=5%) was recreated. The sections were given a chance to recover for 30 minutes after reoxygenation, and then each The maximum evoked potential was determined as previously described for the pre-anoxia period. . After oxygen deprivation, the maximum evoked potential is greater than 50% of that seen before oxygen deprivation. The cut section was defined as the viable section. The results of the study of Example 7A are shown in FIG. Figure 3 shows 10 minutes in an oxygen-deficient atmosphere. Effect of CX218 (Z-Leu-Abu-COx The effects of Et, peptide keto compound) and C1l were shown compared to control sections. . As shown in this figure, control sections were exposed to oxygen for 10 minutes in the absence of drug. by their ability to elicit 50% of their pre-oxygen-induced responses when depleted. Virtually all are not viable when measured. This finding suggests that reoxygenation Most cases, if any, cannot be recovered. Figure 3 similarly shows CII or The sections were protected from the effects of oxygen deprivation when CX218 was added to the AC8F. This is due to the substantial proportion of sections that evoke evoked potentials. It is proven that Last but not least, CX218 provides protection against oxygen deprivation and incubation for a minimum of 1 hour. in that it prevents degradation of the sections at a lower concentration than C11. It can be seen that it is significantly more effective than C1l. This effect is associated with peptide keto compounds It is thought that this is due to the superior membrane permeability of the species. Table 7A further shows data from the study from Example 7A. Table 7A Percentage of sections that survived after 10 minutes of oxygen deprivation J,μ1M one--In-Ugazuto≦41 hours--Survival rate control 1 hour % Leupeptin 1000 3 hours 50% C11200 2 hours 53% CX13 (SHC) 20 1 hour 50% CX89 (CKP) 50 1 Time 50% CX218 (PKC) 100 1 hour 70% Data in Table 2 It can be seen that all carbine inhibitors tested increased the survival rate. CX13 (ACITIC, @substituted heterocyclic compound (SHC)), CX89 (Bo e - G　x-Leu-Phe　-CHyCl,　HaO ketone peptide (HKP )) and CX218 (Z-Leu-Abu-CO-Et, peptide keto compound (PKC)) each have an extremely large influence on survival time. is shown. Leupeptin appears to be the least effective neuroprotective agent. Recognize. Therefore, we have CX13. CX89 and CX218 (Z-Leu-A bu-CO2Et) are more effective in influencing survival rates due to their membrane permeability. We believe that it is effective. Therefore, the results shown in Table 7A indicate that the membrane permeability This study supports our belief that calpain inhibitors are effective neuroprotective agents. It is something that Further enhancing the ability of calpain inhibitors to confer neuroprotective effects on hippocampal ablation In order to investigate and obtain a more quantitative indication of the membrane permeability of these calpain inhibitors. To provide a label, we tested the effects of various calpain inhibitors in hippocampal slices. Effects of various effects on evoked responses on nerve slices during and after oxygen deprivation The effects of calpain inhibitors were measured. These studies are presented in Example 7B. Example 7B Oxygen deficiency injury tyvB injury Similar to Example 7A, hippocampal sections (400 μm) were placed in the Sprague-Dawley laboratory. (6-7 weeks old) and placed in an interface chamber using conventional methods. held. That is, a constant perfusion (0°) of artificial brain fluid (AC3F) was applied to the lower surface of the section. 5 ml 'min), while - the upper surface was replaced at a rate of 2 L/min. exposed to a high humidity atmosphere of O2.Co (95%, 5%). AC3 FC3F 7mM, NaCl (124), KCI (3), KHPO4 (1, 25), Mg5O=(2,5), CaC1-(3,4), NaHCO-(2 6) and D-glucose (10). Field excitatory postsynaptic responses , Ca in response to stimulation of 5chaffer-bunun fibers of CAla or CAlc Recorded from stratum radiatum of 1b. Optimize the depth of the recording electrode and elicit a response for 30 seconds. The ratio of 1 evoked response for each response was determined. After establishing a stable reference value (approximately 10 minutes) for the Suga response, AC3 containing a calpain inhibitor was added. F was washed into the chamber and the sections were incubated for 1 hour. incu After the stimulation, the evoked response was recorded again and the change in response magnitude from the baseline level was measured. Described. No effect of the tested inhibitors on the baseline evoked response was observed. For oxygen deprivation experiments, incubation in drug-containing medium was reduced to O! :Co , (95%, 5%) atmosphere Ns: Cow (95%:5%) added by substitution. I traced it. Sections were cut until the presynaptic fiber salvo disappeared and then for 2 min (heavy). degree of oxygen deprivation) for a long time (total time in an oxygen-deficient environment was 7-8 minutes in control cases) , exposed to this oxygen-deficient environment. Functional recovery of sections after anoxic episode The effects of bosu calpain inhibitors were then determined. Evoked potential by drug-treated sections ( Comparing the recovery of the slope and magnitude of EPSP with the control section, The relative effects of drugs were evaluated. FIG. 4 shows control, Cll-treated and CX218 (peptide chemistries) in Example 7B. The size of EPSP in the hippocampal sections treated with compound) is shown in milliports. Figure 4 From the results, oxygen-deprived control sections showed a gradual decrease in EPSP in the absence of drugs. However, 5-6 minutes after the onset of oxygen deprivation, the fiber salvo activity suddenly disappeared. ;If you lightly re-oxygenate a "Q-Kuyapu" fish, the re-oxygenation will last for about 20 minutes. Functional recovery is complete after treatment, but not with reoxygenation at this point. No. In the latter case, the restored EPSP slope and magnitude will change after the anoxic salvo disappears ( It gradually decreases as the duration of p　os　t-FVD) becomes longer. serious After oxygen depletion (post-FVDZ minutes), the slope is approximately 15% of the EPSP slope. Only % recovers. Compared to control sections, recovery of treated sections begins to occur shortly after the end of oxygen deprivation. Figure 4 shows that in the absence of any inhibitor, the peptide keto compound, CX218 (Z-L of EPSP produced in the presence of eu-Abu-COJt) and C1l. This is a comparison of the effects on size. CX218 was found in CIl. Provides better recovery from severe oxygen deprivation than Figure 5 shows peptide ketoester CX216 (Z-Leu-Phe-CO=E t) and its corresponding peptide ketoamide CX269 (Z-Leu-Phe -CONH-Et) to show the percentage of EPSP recovery from severe oxygen deprivation. ing. These studies were conducted in a manner similar to Example 7B, except that A hypoxic environment was used instead of oxygen deprivation. The use of the peptide ketoamide essentially complete (close to 100%) recovery from hypoxia was obtained, whereas the Ptidoketoester resulted in partial recovery. Control sections were There was no sign of recovery. An interesting feature we found with certain classes of calpain inhibitors is their ability to inhibit fibrillar firing. Extending the period of exposure to oxygen deprivation necessary for FVD to occur This is their ability. Typically, under control anoxic conditions, fiber firing disappears in less than 6 minutes. loss occurs (Figure 6). The peptide compound CX216 is substantially FV t) increase the period of exposure to oxygen deprivation necessary for the appearance of t). this is, The key benefits of using this Veptitogeto compound for neuroprotection and why it's so important 11:. Then, 1. , sections can fully recover if reoxygenated before fiber salvo disappearance. This is because it can be predicted. Therefore, treatment with this peptide-keto compound It predicts a higher percentage of cells recovering from early neurodegenerative conditions. Other representative peptide keto compounds and other genera of calpain inhibitors are also available. It is believed that this effect is also produced. Table 7B shows the oxygen levels of sections treated with various calpain inhibitors or of control sections. The percentage of recovery of deficient presynaptic conduction (evoked potential height) is shown. These cuts All of the pieces were exposed to oxygen deprivation for 10 minutes according to the protocol of Example 7B. . Table 7B Percentage recovery of synaptic conduction after oxygen deprivation --Ishiichii1--Things------------□-11-1Friend-1--------□ -% large ■ one □ one contrast 15 C1120035 CX13 (SHC) 20 60 CX89 (CKP) 50 30 CX216 (PKC) 100 38CX218 (PKC) 100 55 From the results shown in Table 7B, it can be seen that the peptide aldehyde C1l and the substituted hetero Cyclic compounds, peptide keto compounds and haloketone peptides are substantially Further evidence is obtained that permeability confers neuroprotection through calpain inhibition. Ru. C1l is at least partially membrane permeable and exerts some effect, but , does not significantly lengthen the period of oxygen deprivation required to suppress electrical activity. . Therefore, compared to the control or compared to leupeptin and C1l. Even the substituted heterocyclic compounds, peptide keto compounds and 710 ketone peptides putidos extend the time that sections can withstand oxygen deprivation (and thereby prevent complete documentation). − recovery) while providing the additional benefit of Increases recovery rate. Important effects of peptide-keto compounds and other membrane-permeable calpain inhibitors As a result, they have lower membrane permeability than calpain inhibitors such as CII, which have poor membrane permeability. One example is that it is more effective in terms of capacity. CII affects section survival rate are shown to be at least somewhat membrane permeable by their ability to However, the more membrane-permeable inhibitors mentioned above provide significantly enhanced protection. do. Therefore, the above-mentioned calpain inhibitors with higher membrane permeability may be used to prevent neurodegeneration. It is believed to be particularly effective in treatment and suppression. The study results of Examples 7A and 7B show that substituted heterocyclic compounds, peptide keto compounds and haloketone peptides are particularly effective in treating and inhibiting neurodegeneration. This indicates that it is a membrane-permeable calpain inhibitor, which is thought to be a membrane-permeable calpain inhibitor. This result also suggests that representatives of the peptide-keto class, and perhaps other genera, , can extend the duration of oxygen deprivation required to suppress electrical activity in hippocampal slices. It is shown that. As mentioned above, these effects are due to the effects of these compounds. This is an important advantage. 8. In vivo neuroprotection by calpain inhibitors As mentioned above, CNS Therapeutic drugs useful for affecting internal cellular functions cross the BBB and enter the CN. The target inside S must be reached. BBB non-B non-passing compounds In addition to the cerebral injection methods described above, intracerebroventricular administration This also seriously compromises their usefulness in practice. It will impose restrictions. Calpain inhibitors cross the BBB and are therapeutically useful. To test the in vivo efficacy of excitotoxins by intraperitoneal injection, we The ability of calpain inhibitors to protect against sexual injury in vivo was tested. Protection is Changes in rat behavior after inic acid injection were evaluated and measured. Example 8A Hide the casualties (Spra) gue-Dawley male, 200 ± 5 grams), saline carrier and 12 mg/kg kainic acid in ether, 200 μl DMSO (dimethylsulfochloride) 4) or calpain inhibitor dissolved in the same volume of DMSO. 6 mg peritoneally Injected inside. The rats were observed for 6 hours after injection, and kainic acid-induced symptoms and convulsions were observed. The dogs were evaluated with a score of O-6 (0 = zero; 1 = shivering due to wetness of the dog; 2 = saliva). Secretion and chewing: 3 = At least 1 convulsive episode: 4 = Convulsions repeated or persistent; 5 = convulsions including standing on hind legs and falling down; 6 = note (He died after convulsing within 6 hours after being shot). Figure 7 shows the effect of CII on the behavior and convulsive effects of kainic acid. There is. In the control group, more than half of the animals showed mild or more severe behavioral symptoms, and many , exhibiting overt convulsions, possibly indicating seizure activity in the brain. The frequency and severity of seizures were unexpectedly reduced in the inhibitor-treated group. . Therefore, this data suggests that calpain inhibitors have anticonvulsant effects. It is shown that. This effect may be associated with epilepsy-related neurodegeneration and stroke. This is a significant advantage of the use of pine inhibitors. The behavior and anticonvulsant effects observed with calpain inhibitors may be due to calpain inhibition. In order to more clearly show that the The fabric was tested for the accumulation of spectrin BDPs. As mentioned above, this These BDPs have been implicated in calpain activity and related neurodegeneration. Ta. Example 8B Calpain provides good protection against excitotoxic injury and decomposition of long balls while lying on the ground. Four days after injecting kainic acid into the rats of Example 8A, the rat brains were removed and spaced. Cutrin BDPs were assayed. For spectrin BDPs, the layer part is 20m M Tris pH=7. 2. ．． 32M sucrose, 50μM Ac-Leu-Le Assayed by homogenization on ice in unLeu-H. Homoji 10% SDS, 5% β-mercaptoethanol, 10% glycerol , 10mM Tris pH=8. 0,0. 5% bromophenol blue and 1: 1, warmed to 95°C, and electrolyzed with a 4-1/2% polyacrylamide gel. It was subjected to pneumophoresis. Transfer the proteins in the gel to nitrocellulose, and Immunodetection using local anti-spectrin antibodies to detect spectrin and BDP established the law. The amount of spectrin and BDP in each sample was determined using a colored nitro cell. It was quantified by scanning the loin with a densitometer. FIG. 8 shows the results of Example 8B. Kainic acid treated with calpain inhibitor was found to stimulate spectrin degradation in both rats and control rats. Karu. However, treated rats showed significantly less BDPs. Are these results? It was confirmed that calpain activity in the brains of treated rats was reduced. Unexpectedly, it was observed that even treated animals that exhibited severe seizures showed significantly less spectrin degradation than untreated animals subjected to acid. Ru. Therefore, calpain inhibitor treatment is effective in the most severely affected animals. This decreased both the behavioral/convulsive effects of kainic acid and the activation of calpain. 9. Conclusion All of the above studies have shown that calpain inhibitors are associated with oxygen deprivation, excitotoxicity, and other causes. corroborating our findings that this protein protects against disease-related neurodegeneration in vivo. did Therefore, these calpain inhibitors are excitotoxic, HIV-induced neuropathic 1 Denervation or post-traumatic ischemia, subarachnoid hemorrhage, stroke, multiple infarction dementia, ARZ Heimer's disease (AD), Huntington's disease, Parkinson's disease, surgery-related brain injury and for a variety of in vivo neurodegenerative diseases and conditions, including and other pathological conditions. Provides neuroprotective effects. It has significant calpain inhibitory activity in vitro and has the above-mentioned properties regarding membrane permeability. or calpain inhibitors that pass at least one different test. It is an excellent candidate for therapy. G, Ueshiba Egudeda and The ability of various calpain inhibitors to cross plasma membranes is important from a pharmaceutical point of view. This is an important advantage of these compounds. By this ability we have shown that calpain inhibitors It is believed that it is beneficial that the blood-brain barrier can be successfully passed through the blood-brain barrier. This means that many drugs, especially peptides, often have poor penetration through the blood-brain barrier. In contrast to the ploids. Therefore, we believe that calpain inhibitors are neuroprotective agents. I am confident that it will give good results as a drug. Calpain inhibitors can be administered orally, topically, or parenterally to treat neurodegeneration. can. The term “parenteral” used in this text refers to transdermal administration, subcutaneous injection, intravenous injection, intramuscular injection, or intrasternal injection, or intravertebral injection (directly into the CNS). ), or all parenteral delivery systems, including infusions. Dosage depends primarily on the specific dosage form and the therapeutic or prophylactic purpose. Each dose and administration method is best determined by individual consideration of specific cases. but , in preferred compositions, the daily dosage of calpain inhibitors is preferably is 1μg/kg・total body mass' -100mg/ Kg is in the range of 1 body weight, more preferably 10μg, 'kg body weight ~ 10 It is in the range of mg/kg/body weight. Pharmaceutical compositions containing the active ingredient are suitable for oral use, such as tablets, tablets, etc. agents such as coaches, lozenges, aqueous or oily suspensions, dispersants or elixirs; It can be a shape. of the active ingredient mixed with the carrier ingredients to form a single dosage form. The amount will vary depending on the person being treated and the particular mode of administration. However, in general , a single dose provides the complete daily dose in a single orally acceptable dosage form. It will contain enough calpain inhibitor to For injection, therapeutic amounts of calpain inhibitors or their pharmaceutically acceptable Salts are usually administered subcutaneously, intravenously, intramuscularly, or intrasternally, or into the vertebral cavity. It will be prepared by intravenous injection (directly into the brain). Single injection of single daily dose Pharmaceutical compositions for parenteral administration are provided by about 0. Approximately 1 liter from 5ml From about 70 μg to about 7 g of carpa in a single dosage form per dose of Tutor's carrier solution. Contains in-inhibitor. In addition to the active ingredients mentioned above, these pharmaceutical compositions commonly contain Usually, for example, a phosphate buffer solution that maintains the pH in the range of about 35 to 7. Buffer and also contain sodium chloride and also mannitol to prepare isotonic pressure. may contain alcohol or sorbitol. Preferred agents for these compositions DMSO or other organic solvent allows the calpain inhibitor to cross the membrane. It is added to assist in the introduction of Furthermore, lipids also promote the entry of calpain inhibitors into CNS tissues. Can be incorporated into pharmaceutical compositions. These compositions are prepared by methods known to those skilled in the art. It will be done. Briefly, phosphatidylcholine, cholesterol, and other known Mixing lipids, such as lipid carriers or mixtures thereof, with the active compound together with a solvent. The solvent is removed by drying and the drug is reconstituted in saline. The above compositions may also include those known to those skilled in the art such as detergents, surfactants or emulsifiers. Other ingredients may be included. Compositions for topical administration or injection may be aqueous solutions, lotions, jellies or oil-based It can be formulated as a solution or suspension. The composition in the form of an aqueous solution is a calpain inhibitor. pH 4-6. 5 in an aqueous buffer, and polymeric binders if desired. Obtained by adding. Oil-based formulations for topical administration are calpain inhibitors with appropriate swelling agents and/or surfactants such as aluminum stearate. It is obtained by suspending it in oil with the addition of 17 g. These local compositions of DMSO Adding an active calcium to the patient's skin after applying the composition to the patient's skin for subcutaneous administration It is thought that it allows at least partial passage of pine inhibitors into the bloodstream. Ru. Excitotoxicity, HIV-induced induction-lovati, denervation or post-traumatic ischemia, subarachnoid eruption Blood, stroke, multiple infarct dementia, Alzheimer's disease (AD), Huntington's disease, Neurodegeneration as a result of Parkinson's disease, surgery-related brain injury, and other pathological conditions Oral administration of calpain inhibitors or their pharmaceutically acceptable salts to treat Or it can be administered parenterally. Personal dosage and administration should be considered individually for specific cases It is best to decide by doing so. In many acute neurodegenerative conditions and events, such as stroke and head trauma, injury It is important to deliver calpain inhibitors as quickly as practicable after onset. Therefore, stroke, head trauma or neurodegeneration are associated or likely to occur. Identify any other injuries that may be possible and treat carpals within 1 minute to 2 hours of the event. Initiating treatment with an inhibitor is recommended to prevent neurodegeneration to the maximum extent possible. It is suitable for A particular application of the calpain inhibitors within the scope of the present invention is to use them during surgery. may be applied to prevent neurodegeneration associated with For example, general anesthesia In surgery performed under anesthesia, hypoxia may occur if the perfusion of the CNS is inadequate under anesthesia. obtain. Furthermore, in many major cardiovascular surgeries, the patient's heart is stopped and perfusion is turned on. It will be necessary to maintain it by appropriate means. In this type of surgery, inside the CNS, There is an increased risk of hypoxia occurring, which can also lead to neurodegeneration. moreover During neurosurgery, there is an inherent risk of neurodegeneration due to inflammation, bleeding, congestion, etc. be. Such neurodegeneration can be prevented by injecting a solution containing calpain inhibitors. can be suppressed. However, neurodegeneration caused by neurosurgery can also be caused by the above administration methods. Prophylactically lowered by administering calpain inhibitors by either be able to. Such administration may also be associated with the use of anesthetics during major surgery or It is believed to inhibit or prevent neurodegeneration associated with artificial perfusion measures. Surgical patients may also receive calpain inhibitors throughout the surgery by IV. I can. The examples below illustrate certain neuroprotective uses of calpain inhibitors within the scope of the present invention. Shown to show. As such, they do not disclose the invention in any way. However, this is not meant to be limiting. Example 9 Neuroprotective composition for intravenous injection 500 μg Example 5 HC2 CH=CONH-Ci TP r OI C4m 1. Propylene glycol 1ml DMSO Example 1O Neuroprotective composition for intravenous drip 250mg Example PKC47 Z-Leu-Phe-CONH-Etrooo ml Phosphate buffered saline (pH 6,0) 10ml DMSO Example 11 Neuroprotective composition for transdermal application 25mg Example PKC19 Z-Leu-DL-Abu-COOEt3ml Phosphate buffered saline (pH 6,0) 2ml DMSO Example 12 Neuroprotection after head trauma For patients in Group 1 who sustained head trauma, the administration of Example 9 was administered within 10 minutes from the time of injury. Injectable compositions are administered intravenously. For a second group of similarly matched patients, this Do not administer the composition. Group 1 patients have overt symptoms such as dementia, memory loss, and paralysis. There are far fewer degenerative symptoms, and their severity is also extremely mild. Example 13 Neuroprotection during surgery For patients scheduled to undergo triple bypass surgery, using a dropper The composition of Example 10 is administered at 500 ml per hour. At the time of surgery, the patient The patient's heart stops and perfusion is continued by artificial means. restart the heart and treat the disease Complications occur when the patient's artificial perfusion methods are removed, but the patient becomes conscious within a few hours of surgery. will begin to recover. Within a few days, the patient's mental status returned to normal and there were no signs of neurodegeneration. There is no problem at all. It will be appreciated that modifications will naturally suggest themselves to those skilled in the art. the above It should be clearly understood that the detailed description of the The intent and scope may be understood with reference to the appended claims. FIG.2 No. 1 q Special table Hei 6-504061 (42) FVD (min) lhr, INCUB, 2hr, 1NcLiB. FIG.8 international search report Continuation of front page (81) Designated countries EP (AT, BE, CH, DE. DK, ES, FR, GB, GR, IT, LU, MC, NL, SE), 0A (BF , BJ, CF, CG, CI, CM, GA, GN, ML, MR, SN, TD, TG. ), AU, BB, BG, BR, CA, C3, FI, HU, JP. KP, KR, LK, MG, MN, MW, No, PL, RO, RU, 5D (72) Inventor: Bertus, Raymond, Tee. United States of America, 92653. California. 26102 Glen Canyon Drive, Laguna Hills (72) Inventor Evereth, Dipid, Dee 6. junior United States of America, 92715. California. 27 Rockview Drive, Irvine (72) Inventor: Lynch, Gary, Niss. United States of America, 92715. California. Irvine, Gibbs Court, 4th (72) Inventor: Powers, James, C. United States of America, 30318. josia, atlanta, northwest, Upton Road 698

Claims (1)

【特許請求の範囲】 １．神経変性に関連した神経病理症状を有するかまたは有する可能性のある哺乳 類において神経変性を抑制するかまたは治療するための薬物の製造のためのカル パイン阻害剤またはその薬剤学的に許容できる塩またはその誘導体の用途。 ２．神経変性が興奮毒性、ＨＩＶ誘発ニューロパチー、脱神経または外傷後の虚 血、くも膜下出血、卒中、多梗塞痴呆症、アルツハイマー病、ハンテントン病、 またはパーキンソン病により起こることを特徴とする請求の範囲第１項記載の用 途。 ３．前記薬物が薬剤学的に許容できる担体を含みかつ非経口投与用であることを 特徴とする請求の範囲第１項記載の用途。 ４．前記薬物が経口用途に適した剤形であることを特徴とする請求の範囲第１項 記載の用途。 ５．前記薬物が、経皮投与、皮下注射、静注、筋注または胸骨内注射、ＣＮＳ中 への直接脊椎腔内注射、または点滴用であることを特徴とする請求の範囲第３項 記載の用途。 ６．前記薬物が、手術時および手術後において手術を受ける患者における神経変 性を実質的に予防するためであることを特徴とする請求の範囲第１項記載の用途 。 ７．前記薬物が、神経手術、心血管手術または全身麻酔を用いる手術を受ける患 者における神経変性を予防するためであることを特徴とする請求の範囲第６項記 載の用途。 ８．前記カルパイン阻害剤化合物が哺乳類のＣＮＳ組織中に入ることを特徴とす る請求の範囲第１項記載の用途。 ９．前記カルパイン阻害剤化合物が膜透過性であることを特徴とする請求の範囲 第８項記載の用途。 １０．神経変性のインビボ治療または阻害におけるカルパイン阻害剤保護剤類と しての用途のためのカルパイン阻害剤類を選択するためのインビボ方法で、イン ビトロでカルパイン阻害活性を有する化合物を識別すること；およびインビトロ 膜透過性アッセイによって膜透過性であるカルパイン阻害活性を有する化合物を 識別することを含む方法。 １１．前記膜透過性のインビトロアッセイが、哺乳類から複数組織部分を得るこ と、 前記組織部分の全部とはいわないまでも少なくとも１部をカルパイン阻害剤で処 理すること、 前記組織部分を未処理組織中において変性の原因となり得る事象に供すること、 前記組織部分に起こっている変性の量を測定すること、および前記処理組織部分 で起こっている変性の量を未処理組織部分で起こっている変性の量と比較するこ とからなり、 前記処理組織部分で起こっている変性の量が未処理組織部分で起こっている変性 の量未満であることが前記カルパイン阻害剤が膜透過性であることを示唆するこ とを特徴とする請求の範囲第１０項記載の方法。 １２．前記組織部分が、脳切片、血小板または培養細胞からなることを特徴とす る請求の範囲第１１項記載の方法。 １３．前記測定段階が、細胞骨格成分のＢＤＰ類の存在について前記組織部分を 分析することからなることを特徴とする請求の範囲第１１項記載の方法。 １４．前記細胞骨格成分が、スペクトリン、ＭＡＰ２、アクチン結合タンパク質 またはｔａｕであることを特徴とする請求の範囲第１３項記載の方法。 １５，前記測定段階が、前記組織部分の電気的活性を測定することからなること を特徴とする請求の範囲第１１項記載の方法。 １６．前記膜透過性のインビトロアッセイが、血小板膜を通過して血小板の内因 性カルパインを阻害するカルパイン阻害剤の能力を測定することからなることを 特徴とする請求の範囲第１１項記載の方法。 １７．神経変性に関連した神経病理症状を有するかまたは有する可能性のある哺 乳類において神経変性を抑制するかまたは治療するための薬物の製造のための置 換複素環化合物またはその薬剤学的に許容できる塩またはその誘導体の用途。 １８．前記薬物が、ＣＮＳの神経変性を抑制するかまたは治療するためであるこ とを特徴とする請求の範囲第１７項記載の用途。 １９．前記置換複素環化合物がクラス１置換イソクマリン類の１員であることを 特徴とする請求の範囲第１７項記載の用途。 ２０．前記置換複素環化合物がクラスＩＩ置換イソクマリン類の１員であること を特徴とする請求の範囲第１７項記載の用途。 ２１．前記置換複素環化合物がクラスＩＩＩ複素環化合物類の１員であることを 特徴とする請求の範囲第１７項記載の用途。 ２２．前記置換複素環化合物が、３−クロロイソクマリン、３．４−ジクロロイ ソクマリン、３−アルコキシ−７−アミノ−４−クロロイソクマリン、または７ −置換３−アルコキシ−４−クロロイソクマリンであることを特徴とする請求の 範囲第１７項記載の用途。 ２３．前記置換複素環化合物が、 ＣｉＴＰｒＯＩＣ，ＮＨ２−ＣｉＴＰｒＯＩＣ，ＰｈＣＨ２ＮＨＣＯＮＨ−Ｃｉ ＴＰｒＯＩＣ，ＣＨ３ＣＯＮＨ−ＣｉＴＰｒＯＩＣ，Ｌ−Ｐｈｅ−ＮＨ−ＣｉＴ ＰｒＯＩＣ，ＰｈＣＨ２ＮＨＣＯＮＨ−ＣｉＴＥｔＯＩＣ，ＰｈＣＨ２ＣＯＮＨ −ＣｉＴＥｔＯＩＣ又はＤ−Ｐｈｅ−ＮＨ−ＣｉＴＥｔＯＩＣであることを特徴 とする請求の範囲第１７項記載の用途。 ２４．神経変性に関連した神経病理症状を有するかまたは有する可能性のある哺 乳類において神経変性を抑制するかまたは治療するための薬物の製造のためのカ ルパイン阻害活性を有するペプチドケト化合物またはその薬剤学的に許容できる 塩またはその誘導体の用途。 ２５．前記薬物が、ＣＮＳの神経変性を抑制するかまたは治療するためであるこ とを特徴とする請求の範囲第２４項記載の用途。 ２６．前記ペプチドケト化合物がペプチドケトα−ケトエステルからなることを 特徴とする請求の範囲第２４項記載の用途。 ２７．前記ペプチドケト化合物がペプチドケトα−ケト酸からなることを特徴と する請求の範囲第２４項記載の用途。 ２８．前記ペプチドケト化合物がペプチドケトα−ケトアミドからなることを特 徴とする請求の範囲第２４項記載の用途。 ２９．前記ペプチドケト化合物が下記のサブクラスのひとつの１員である化合物 からなることを特徴とする請求の範囲第２４項記載の用途；ジペプチドα−ケト エステル類（サブクラスＡ）、ジペプチドα−ケトエステル類（サブクラスＢ） 、トリペプチドα−ケトエステル類（サブクラスＡ）、トリペプチドα−ケトエ ステル類（サブクラスＢ）、テトラペプチドα−ケトエステル類、アミノ酸ペプ チドα−ケトエステル類、ジペプチドα−ケト酸類（サブクラスＡ）、ジペプチ ドα−ケト酸類（サブクラスＢ）、トリペプチドα−ケト酸類、テトラペプチド α−ケト酸類およびアミノ酸ペプチドα−ケト酸類、ジペプチドα−ケトアミド 類（サブクラスＡ）、ジペプチドα−ケトアミド類（サブクラスＢ）、トリペプ チドα−ケトアミド類、テトラペプチドα−ケトアミド類またはアミノ酸α−ケ トアミド類。 ３０．神経変性に関連した神経病理症状を有するかまたは有する可能性のある哺 乳類において神経変性を抑制するかまたは治療するための薬物の製造のためのカ ルパイン阻害活性を有するハロケトンペプチドまたはその薬剤学的に許容できる 塩またはその誘導体の用途。 ３１．前記薬物が、ＣＮＳの神経変性を抑制するかまたは治療するためのである ことを特徴とする請求の範囲第３０項記載の用途。 ３２．前記ハロケトンペプチドがアミノハロケトンペプチドからなることを特徴 とする請求の範囲第３０項記載の用途。 ３３．前記ハロケトンペプチドがジアゾケトンペプチドからなることを特徴とす る請求の範囲第３０項記載の用途。 ３４．前記神経変性が、興奮毒性、ＨＩＶ誘発ニューロパチー、虚血、くも膜下 出血、卒中、脳発作、心臓大発作、多発性梗塞痴呆征、アルツハイマー病、ハン テントン病またはパーキンソン病と関連していることを特徴とする請求の範囲第 １７項から第３３項のいずれか−項に記載の用途。 ３５．前記薬物が薬剤学的に許容できる担体を含みかつ非経口投与用であること を特徴とする請求の範囲第１７項から第３３項のいずれか一項に記載の用途。 ３６．前記薬物が経口用に適した剤形であることを特徴とする請求の範囲第１７ 項から第３３項のいずれかに記載の用途。 ３７．前記薬物が、経皮投与、皮下注射、静注、筋注または胸骨内注射、ＣＮＳ 中への直接脊椎腔内注射、または点滴用であることを特徴とする請求の範囲第３ ５項記載の用途。 ３８．前記神経変性が、虚血誘発事象、卒中、頭部外傷、心臓大発作、脳発作、 溺死寸前、−酸化炭素中毒、手術関連脳傷害または神経変性の原因となることが 公知のその他の事象によって起こることを特徴とする請求の範囲第１項から第９ 項までまたは第１７項から第３７項までのいずれか１項に記載の用途。 ３９．試料の処理、作製、調製、単離、精製、保存または輸送時またはその後の ペプチド類またはタンパク質類含有インビトロ試料における蛋白分解を最小とす る方法で、この試料に対して、下記のサブクラスのひとつの１員である置換複素 環化合物またはペプチドケト化合物を添加することからなる方法、ジペプチドα −ケトエステル類（サブクラスＡ）、ジペプチドα−ケトエステル類（サブクラ スＢ）、トリペプチドα−ケトエステル類（サブクラスＡ）、トリペプチドα− ケトエステル類（サブクラスＢ）、テトラペプチドα−ケトエステル類、アミノ 酸ペプチドα−ケトエステル類、ジペプチドα−ケト酸類（サブクラスＡ）、ジ ペプチドα−ケト酸類（サブクラスＢ）、トリペプチドα−ケト酸類、テトラペ プチドα−ケト酸類、およびアミノ酸ペプチドα−ケト酸類、ジペプチドα−ケ トアミド類（サブクラスＡ）、ジペプチドα−ケトアミド類（サブクラスＢ）、 トリペプチドα−ケトアミド類、テトラペプチドα−ケトアミド類、またはアミ ノ酸α−ケトアミド類。 ４０．試料調製時またはその後に組織試料中におけるカルパイン活性による分解 を最小とする方法で、前記試料に対して、置換複素環化合物、ペプチドケト化合 物またはハロケトンペプチドを添加することからなることを特徴とする方法。 ４１．前記試料が臓器全体であり、かつ、前記化合物の添加が液体に溶解した化 合物を前記臓器に灌流させることからなることを特徴とする請求の範囲第４０項 に記載の方法。 ４２．前記組織試料を添加段階後神経変性アッセイに使用し、前記アッセイが前 記組織試料中のカルパイン活性生成物を試験することからなることを特徴とする 請求の範囲第４０項に記載の方法。 ４３．前記化合物の添加が、ペプチドα−ケト酸を試料に添加することからなる ことを特徴とする請求の範囲第３９項または第４０項のいずれかに記載の方法。 ４４．前記ペプチドα−ケト酸が下記のサブクラスのひとつの１員である化合物 を添加することからなる請求の範囲第４３項に記載の方法；ジペプチドα−ケト 酸類（サブクラスＡ）、ジペプチドα−ケト酸類（サブクラスＢ）、トリペプチ ドα−ケト酸類、テトラペプチドα−ケト酸類またはアミノ酸ペプチドα−ケト 酸類。 ４５．神経変性治療または阻害のための薬剤組成物であり、担体物質含有薬剤学 的に許容できる処方中の薬理学的に有効な神経保護量の置換複素環化合物または その薬剤学的に許容できる塩またはその誘導体を含む薬剤組成物。 ４６．神経変性治療または阻害のための薬剤組成物であり、担体物質含有薬剤学 的に許容できる処方中の薬理学的に有効な神経保護量のハロケトンペプチドまた はその薬剤学的に許容できる塩またはその誘導体を含む薬剤組成物。 ４７．神経変性治療または阻害のための薬剤組成物であり、担体物質含有薬剤学 的に許容できる処方中の薬理学的に有効な神経保護量のペプチドケト化合物から なり、前記ペプチドケト化合物が、下記のサブクラスのひとつの１員である化合 物であることを特徴とする組成物、ジペプチドα−ケトエステル類（サブクラス Ａ）、ジペプチドα−ケトエステル類（サブクラスＢ）、トリペプチドα−ケト エステル類（サブクラスＡ）、トリペプチドα−ケトエステル類（サブクラスＢ ）、テトラペプチドα−ケトエステル類またはアミノ酸ペプチドα−ケトエステ ル類。 ４８．前記ペプチドケト化合物が下記の化合物のひとつからなることを特徴とす る請求の範囲第４７項記載の組成物； Ｂｚ−ＤＬ−Ａｌａ−ＣＯＯＣＨ２−Ｃ６Ｈ４−ＣＦ３（ｐａｒａ），ＢＺ−Ｄ Ｌ−Ｌｙｓ−ＣＯＯＥｔ，ＰｈＣＯ−Ａｂｕ−ＣＯＯＥｔ，（ＣＨ３）２ＣＨ（ ＣＨ２）２ＣＯ−Ａｂｕ−ＣＯＯＥｔ，ＣＨ３ＣＨ２ＣＨ）２ＣＨＣＯ−Ａｂｕ −ＣＯＯＥｔ，Ｐｈ（ＣＨ２）６ＣＯ−Ａｂｕ−ＣＯＯＥｔ．４９．前記ペプチ ドケト化合物が下記の化合物のひとつからなることを特徴とする請求の範囲第４ ７項記載の組成物： Ｚ−Ａｌａ−ＤＬ−Ａｌａ−ＣＯＯＥｔ，Ｚ−Ａｌａ−ＤＬ−Ａｌａ−ＣＯＯＢ ｚｌ，　Ｚ−Ａｌａ−ＤＬ−Ａｌａ−ＣＯＯｎＢｕ，Ｚ−Ｌｅｕ−Ｎｖａ−ＣＯ ＯＥｔ，Ｚ−Ｌｅｕ−Ｎｌｅ−ＣＯＯＥｔ，Ｚ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−ＣＯＯＥｔ， Ｚ−Ｌｅｕ−Ａｂｕ−ＣＯＯＥｔ，Ｚ−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−ＣＯＯＥｔ，Ｚ−Ｌｅ ｕ−Ｐｈｅ−ＣＯＯＥｔ，Ｚ−Ｌｅｕ−４−Ｃｌ−Ｐｈｅ−ＣＯＯＥｔ，２−Ｎ ａｐＳＯ２−Ｌｅｕ−Ａｂｕ−ＣＯＯＥｔ，Ｚ−Ｌｅｕ−ＮＬｅｕ−ＣＯ２Ｅｔ ，Ｚ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−ＣＯ２Ｂｕ，Ｚ−Ｌｅｕ−Ａｂｕ−ＣＯ２Ｂｕ，Ｚ−Ｌ ｅｕ−Ｐｈｅ−ＣＯ２Ｂｚｌ，ＭｅＯ−Ｓｕｃ−Ａｌａ−ＤＬ−Ａｌａ−ＣＯＯ Ｍｅ，Ｚ−Ｌｅｕ−Ａｂｕ−ＣＯ２Ｂｚｌ．５０．前記ペプチドケト化合物が下 記の化合物のひとつからなることを特徴とする請求の範囲第４７項記載の組成物 ； Ｚ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｄｌ−Ａｌａ−ＣＯＯＥｔ，Ｚ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−ＤＬ− Ａｌａ−ＣＯＯＥｔ，Ｚ−Ａｌａ−Ａｌａ−ＤＬ−Ａｂｕ−ＣＯＯＥｔ，Ｚ−Ａ ｌａ−Ａｌａ−Ｄｌ−Ａｂｕ−ＣＯＯＢｚｌ，Ｚ−Ａｌａ−Ａｌａ−ＤＬ−Ａｂ ｕ−ＣＯＯＣＨ２−Ｃ６Ｈ４−ＣＦ３（ｐａｒａ），Ｈ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−ＤＬ −Ｌｙｓ−ＣＯＯＥｔ，Ｚ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｂｕ−ＣＯＯＥｔ，Ｚ−Ｌｅｕ −Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−ＣＯＯＥｔ，ＭｅＯ−Ｓｕｃ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ−ＤＬ−Ｐｈ ｅ−ＣＯＯＭｅ．２−ＮａｐＳＯ２−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｂｕ−ＣＯＯＥｔ．５ １．前記ペプチドケト化合物が、 ＭｅＯ−Ｓｕｃ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−ＤＬ−Ａｂｕ−ＣＯＯＭｅ又はＺ− Ａｌａ−Ａｌａ−Ａｌａ−ＤＬ−Ａｌａ−ＣＯＯＥｔからなることを特徴とする 請求の範囲第４７項記載の組成物。 ５２．神経変性治療または阻害のための薬剤組成物であり、薬理学的に有効な神 経保護量のペプチドケト化合物からなり、前記ペプチドケト化合物が、下記のサ ブクラスのひとつの１員である化合物からなることを特徴とする組成物；ジペプ チドα−ケト酸類（サブクラスＡ）、ジペプチドα−ケト酸類（サブクラスＢ） 、トリペプチドα−ケト酸類、テトラペプチドα−ケト酸類またはアミノ酸ペプ チドα−ケト酸類。 ５３．前記ペプチドケト化合物が下記の化合物のひとつからなることを特徴とす る請求の範囲第５２項記載の組成物；Ｂｚ−ＤＬ−Ｌｙｓ−ＣＯＯＨ，Ｂｚ−Ｄ Ｌ−Ａｌａ−ＣＯＯＨ，Ｚ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−ＣＯＯＨ，Ｚ−Ｌｅｕ−Ａｂｕ− ＣＯＯＨ．５４．神経変性治療または阻害のための薬剤組成物であり、薬理学的 に有効な神経保護重のペプチドケト化合物からなり、前記ペプチドケト化合物が 、下記のサブクラスのひとつの化合物からなることを特徴とする組成物；ジペプ チドα−ケトアミド類（サブクラスＡ）、ジペプチドα−ケトアミド類（サブク ラスＢ）；トリペプチドα−ケトアミド類、テトラペプチドα−ケトアミド類ま たはアミノ酸α−ケトアミド類。 ５５．前記ペプチドケト化合物が下記の化合物のひとつからなることを特徴とす る請求の範囲第５４項記載の組成物：Ｚ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−ＣＯＮＨ−Ｅｔ，Ｚ −Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−ＣＯＮＨ−ｎＰｒ，Ｚ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−ＣＯＮＨ−ｎＢｕ ，Ｚ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−ＣＯＮＨ−ｉＢｕ，Ｚ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−ＣＯＮＨ−Ｂ ｚｌ，Ｚ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−ＣＯＮＨ−（ＣＨ２）２ＰＨ，Ｚ−Ｌｅｕ−Ａｂｕ −ＣＯＮＨ−Ｅｔ，Ｚ−Ｌｅｕ−Ａｂｕ−ＣＯＮＨ−ｎＰｒ，Ｚ−Ｌｅｕ−Ａｂ ｕ−ＣＯＮＨ−ｎＢｕ，Ｚ−Ｌｅｕ−Ａｂｕ−ＣＯＮＨ−ｉＢｕ，Ｚ−Ｌｅｕ− Ａｂｕ−ＣＯＮＨ−Ｂｚｌ，Ｚ−Ｌｅｕ−Ａｂｕ−ＣＯＮＨ−（ＣＨ２）２Ｐｈ ，Ｚ−Ｌｅｕ−Ａｂｕ−ＣＯＮＨ−（ＣＨ２）３−Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２）２Ｏ，Ｚ −Ｌｅｕ−Ａｂｕ−ＣＯＮＨ−（ＣＨ２）７ＣＨ３，Ｚ−Ｌｅｕ−Ａｂｕ−ＣＯ ＮＨ−（ＣＨ２）２ＯＨ，Ｚ−Ｌｅｕ−Ａｂｕ−ＣＯＮＨ−（ＣＨ２）Ｏ（ＣＨ ２）２ＯＨ，Ｚ−Ｌｅｕ−Ａｂｕ−ＣＯＮＨ−（ＣＨ２）１７ＣＨ３，Ｚ−Ｌｅ ｕ−Ａｂｕ−ＣＯＮＨ−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ３（ＯＣＨ３）２，Ｚ−Ｌｅｕ−Ａｂｕ −ＣＯＮＨ−ＣＨ２−Ｃ４Ｈ４Ｎ． ５６．前記置換複素環化合物がクラスＩ置換イソクマリン類、クラスＩＩ置換イ ソクマリン類およびクラスＩＩＩ複素環化合物類の１員からなることを特徴とす る請求の範囲第４５項記載の組成物。 ５７．前記置換複素環化合物が、３−クロロイソクマリン、３，４−ジクロロイ ソクマリン、３−アルコキシ−７−アミノ−４−クロロイソクマリン、または７ −置換３−アルコキシ−４−クロロイソクマリン、ＣｉＴＰｒＯＩＣ，ＮＨ２− ＣｉＴＰｒＯＩＣ，ＰｈＣＨ２ＮＨＣＯＮＨ−ＣｉＴＰｒＯＩＣ，ＣＨ３ＣＯＮ Ｈ−ＣｉＴＰｒＯＩＣ，Ｌ−Ｐｈｅ−ＮＨ−ＣｉＴＰｒＯＩＣ，ＰｈＣＨ２ＮＨ ＣＯＮＨ−ＣｉＴＥｔＯＩＣ，ＰｈＣＨ２ＣＯＮＨ−ＣｉＴＥｔＯＩＣ又はＤ− Ｐｈｅ−ＮＨ−ＣｉＴＥｔＯＩＣであることを特徴とする請求の範囲第５６項記 載の組成物。 ５８．前記組成物が、各投与量において７０μｇから７ｇの活性成分を含む投与 剤形であることを特徴とする請求の範囲第４５項乃至第５７項のいずれか１項に 記載の組成物。 ５９．前記担体物質が液体からなり、前記組成物が投与剤形となっており、各投 与量が０．５ｍｌから１リットルの前記担体を含むことを特徴とする請求の範囲 第４５項乃至第５７項のいずれか１項に記載の組成物。 ６０．さらに、下記の少なくともひとつを含むことを特徴とする請求の範囲第４ ５項乃至第５７項のいずれか１項に記載の組成物：ＤＭＳＯまたはその他の有機 溶媒、脂質担体、洗浄剤、界面活性剤または乳化剤。 ６１．前記組成物が非経口投与に適していることを特徴とする請求の範囲第４５ 項乃至第５７項のいずれか１項に記載の組成物。 ６２．前記組成物が局所適用に適していることを特徴とする請求の範囲第４５項 乃至第５７項のいずれか１項に記載の組成物。 ６３．前記組成物が、水溶液、ローション、ゼリー、油性溶液、または油性懸濁 液からなることを特徴とする請求の範囲第４５項乃至第５７項のいずれか１項に 記載の組成物。 ６４．置換複素環化合物の薬物としての用途。 ６５．ハロケトンペプチドの薬物としての用途。 ６６．ペプチドケト化合物の薬物としての用途で、前記ペプチドケト化合物が下 記のサブクラスのひとつの化合物であることを特徴とする用途；ジペプチドα− ケトエステル類（サブクラスＡ）、ジペプチドα−ケトエステル類（サブクラス Ｂ）、トリペプチドα−ケトエステル類（サブクラスＡ）、トリペプチドα−ケ トエステル類（サブクラスＢ）、テトラペプチドα−ケトエステル類またはアミ ノ酸ペプチドα−ケトエステル類。 ６７．前記ペプチドケト化合物が下記の化合物のひとつからなることを特徴とす る請求の範囲第６６項記載の用途： Ｂｚ−ＤＬ−Ａｌａ−ＣＯＯＥｔ，Ｂｚ−ＤＬ−Ａｌａ−ＣＯＯＣＨ２−Ｃ６Ｈ ４−ＣＦ３（ｐａｒａ），Ｂｚ−ＤＬ−Ｌｙｓ−ＣＯＯＥｔ，ＰｈＣＯ−Ａｂｕ −ＣＯＯＥｔ，（ＣＨ３）２ＣＨ（ＣＨ２）２ＣＯ−Ａｂｕ−ＣＯＯＥｔ，ＣＨ ３ＣＨ２ＣＨ）２ＣＨＣＯ−Ａｂｕ−ＣＯＯＥｔ，Ｐｈ（ＣＨ２）６ＣＯ−Ａｂ ｕ−ＣＯＯＥｔ．６８．前記ペプチドケト化合物が下記の化合物のひとつからな ることを特徴とする請求の範囲第６６項記載の用途： Ｚ−Ａｌａ−ＤＬ−Ａｌａ−ＣＯＯＥｔ，Ｚ−Ａｌａ−ＤＬ−Ａｌａ−ＣＯＯＢ ｚｌ，Ｚ−Ａｌａ−ＤＬ−Ａｌａ−ＣＯＯｎＢｕ，Ｚ−Ｌｅｕ−Ｎｖａ−ＣＯＯ Ｅｔ，Ｚ−Ｌｅｕ−Ｎｌｅ−ＣＯＯＥｔ，Ｚ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−ＣＯＯＥｔ，Ｚ −Ｌｅｕ−Ａｂｕ−ＣＯＯＥｔ，Ｚ−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−ＣＯＯＥｔ，Ｚ−Ｌｅｕ −Ｐｈｅ−ＣＯＯＥｔ，Ｚ−Ｌｅｕ４−Ｃｌ−Ｐｈｅ−ＣＯＯＥｔ，２−Ｎａｐ ＳＯ２−Ｌｅｕ−Ａｂｕ−ＣＯＯＥｔ，Ｚ−Ｌｅｕ−ＮＬｅｕ−ＣＯ２Ｅｔ，Ｚ −Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−ＣＯ２Ｂｕ，Ｚ−Ｌｅｕ−Ａｂｕ−ＣＯ２Ｂｕ，Ｚ−Ｌｅｕ −Ｐｈｅ−ＣＯ２Ｂｚｌ，ＭｅＯ−Ｓｕｃ−Ａｌａ−ＤＬ−Ａｌａ−ＣＯＯＭｅ Ｚ−Ｌｅｕ−Ａｂｕ−ＣＯ２Ｂｚｌ． ６９．前記ペプチドケト化合物が下記の化合物のひとつからなることを特徴とす る請求の範囲第６６項記載の用途： Ｚ−Ａｌａ−Ａｌａ−ＤＬ−Ａｌａ−ＣＯＯＥｔ，Ｚ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−ＤＬ− Ａｌａ−ＣＯＯＥｔ，Ｚ−Ａｌａ−Ａｌａ−ＤＬ−Ａｂｕ−ＣＯＯＥｔ，Ｚ−Ａ ｌａ−Ａｌａ−ＤＬ−Ａｂｕ−ＣＯＯＢｚｌ，Ｚ−Ａｌａ−Ａｌａ−ＤＬ−Ａｂ ｕ−ＣＯＯＣＨ２−Ｃ６Ｈ４−ＣＦ３（ｐａｒａ），Ｈ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−ＤＬ −Ｌｙｓ−ＣＯＯＥｔ，Ｚ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｂｕ−ＣＯＯＥｔ，Ｚ−Ｌｅｕ −Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−ＣＯＯＥｔ，ＭｅＯ−Ｓｕｃ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ−ＤＬ−Ｐｈ ｅ−ＣＯＯＭｅ，２−ＮａｐＳＯ２−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｂｕ−ＣＯＯＥｔ．７ ０．前記ペプチドケト化合物が、テトラペプチドα−ケトエステルからなること を特徴とする請求の範囲第６６項記載の用途。 ７１．前記ペプチドケト化合物が ＭｅＯ−Ｓｕｃ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−ＤＬ−Ａｂｕ−ＣＯＯＭｅ又はＺ− Ａｌａ−Ａｌａ−Ａｌａ−ＤＬ−Ａｌａ−ＣＯＯＥｔからなることを特徴とする 請求の範囲第６６項記載の用途。 ７２．前記ペプチドケト化合物が下記のサブクラスのひとつの化合物であること を特徴とするペプチドケト化合物の薬物としての用途：ジペプチドα−ケト酸類 （サブクラスＡ）、ジペプチドα−ケト酸類（サブクラスＢ）、トリペプチドα −ケト酸類、テトラペプチドα−ケト酸類またはアミノ酸ペプチドα−ケト酸類 。 ７３．前記ペプチドケト化合物が下記の化合物類のひとつからなることを特徴と する請求の範囲第７２項記載の用途： Ｂｚ−ＤＬ−Ｌｙｓ−ＣＯＯＨ，Ｂｚ−ＤＬ−Ａｌａ−ＣＯＯＨ，Ｚ−Ｌｅｕ− Ｐｈｅ−ＣＯＯＨ，Ｚ−Ｌｅｕ−Ａｂｕ−ＣＯＯＨ．７４．前記ペプチドケト化 合物が下記のサブクラスのひとつであることを特徴とするペプチドケト化合物の 薬物としての用途；ジペプチドα−ケトアミド類（サブクラスＡ）、ジペプチド α−ケトアミド類（サブクラスＢ）、トリペプチドα−ケトアミド類、テトラペ プチドα−ケトアミド類またはアミノ酸α−ケトアミド類。 ７５．前記ペプチドケト化合物が下記の化合物のひとつからなることを特徴とす る請求の範囲第７４項記載の用途： Ｚ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−ＣＯＮＨ−Ｅｔ，Ｚ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−ＣＯＮＨ−ｎＰｒ ，２−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−ＣＯＮＨ−ｎＢｕ，Ｚ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−ＣＯＮＨ−ｉ Ｂｕ，Ｚ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−ＣＯＮＨ−Ｂｚｌ，Ｚ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−ＣＯＮＨ −（ＣＨ２）２Ｐｈ，Ｚ−Ｌｅｕ−Ａｂｕ−ＣＯＮＨ−Ｅｔ，Ｚ−Ｌｅｕ−Ａｂ ｕ−ＣＯＮＨ−ｎＰｒ，Ｚ−Ｌｅｕ−Ａｂｕ−ＣＯＮＨ−ｎＢｕ，Ｚ−Ｌｅｕ− Ａｂｕ−ＣＯＮＨ−ｉＢｕ，Ｚ−Ｌｅｕ−Ａｂｕ−ＣＯＮＨ−ＢｚＬ，Ｚ−Ｌｅ ｕ−Ａｂｕ−ＣＯＮＨ−（ＣＨ２）２Ｐｈ，Ｚ−Ｌｅｕ−Ａｂｕ−ＣＯＮＨ−（ ＣＨ２）３−Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２）２０，Ｚ−Ｌｅｕ−Ａｂｕ−ＣＯＮＨ−（ＣＨ ２）７ＣＨ３，Ｚ−Ｌｅｕ−Ａｂｕ−ＣＯＮＨ−（ＣＨ２）２ＯＨ，Ｚ−Ｌｅｕ −Ａｂｕ−ＣＯＮＨ−（ＣＨ２）２Ｏ（ＣＨ２）２ＯＨ，Ｚ−Ｌｅｕ−Ａｂｕ− ＣＯＮＨ−（ＣＨ２）１７ＣＨ３，Ｚ−Ｌｅｕ−Ａｂｕ−ＣＯＮＨ−ＣＨ２−Ｃ ６Ｈ３（ＯＣＨ３）２，Ｚ−Ｌｅｕ−Ａｂｕ−ＣＯＮＨ−ＣＨ２−Ｃ４Ｈ４Ｎ． 発明の詳細な説明 [Claims] 1. Breastfeeding that has or may have neuropathological symptoms associated with neurodegeneration Calcium for the manufacture of drugs to inhibit or treat neurodegeneration in Uses of pine inhibitors or pharmaceutically acceptable salts thereof or derivatives thereof. 2. Claims characterized in that the neurodegeneration is caused by excitotoxicity, HIV-induced neuropathy, denervation or post-traumatic ischemia, subarachnoid hemorrhage, stroke, multi-infarct dementia, Alzheimer's disease, Huntington's disease, or Parkinson's disease. For use as described in paragraph 1. On the way. 3. The use according to claim 1, characterized in that the drug comprises a pharmaceutically acceptable carrier and is for parenteral administration. 4. Use according to claim 1, characterized in that the drug is in a dosage form suitable for oral use. 5. The use according to claim 3, wherein the drug is for transdermal administration, subcutaneous injection, intravenous injection, intramuscular or intrasternal injection, direct intraspinal injection into the CNS, or infusion. . 6. The drug may reduce neurodegeneration in patients undergoing surgery during and after surgery. 2. The use according to claim 1, wherein the use is for substantially preventing sex. 7. The drug may be used in patients undergoing neurological surgery, cardiovascular surgery, or surgery using general anesthesia. Claim 6, characterized in that the invention is for preventing neurodegeneration in people. Uses listed. 8. characterized in that the calpain inhibitor compound enters the mammalian CNS tissue. The use according to claim 1. 9. 9. Use according to claim 8, characterized in that the calpain inhibitor compound is membrane permeable. 10. Calpain inhibitors and protective agents in the in vivo treatment or inhibition of neurodegeneration. An in vivo method for selecting calpain inhibitors for use as A method comprising: identifying a compound having calpain inhibitory activity in vitro; and identifying a compound having calpain inhibitory activity that is membrane permeable by an in vitro membrane permeability assay. 11. The in vitro assay for membrane permeability allows multiple tissue sections to be obtained from mammals. and treating at least a portion, if not all, of said tissue portion with a calpain inhibitor. subjecting said tissue portion to an event that may cause degeneration in untreated tissue; determining the amount of degeneration occurring in said tissue portion; and determining the amount of degeneration occurring in said treated tissue portion. compared to the amount of degeneration occurring in the untreated tissue section. and the fact that the amount of degeneration occurring in the treated tissue portion is less than the amount of degeneration occurring in the untreated tissue portion suggests that the calpain inhibitor is membrane permeable. 11. The method according to claim 10, characterized in that: 12. The tissue portion is characterized by comprising a brain section, platelets, or cultured cells. 12. The method according to claim 11. 13. 12. The method of claim 11, wherein said step of measuring comprises analyzing said tissue portion for the presence of cytoskeletal component BDPs. 14. 14. The method according to claim 13, wherein the cytoskeletal component is spectrin, MAP2, actin binding protein, or tau. 15. The method of claim 11, wherein said step of measuring comprises measuring electrical activity of said tissue portion. 16. 12. The method of claim 11, wherein the in vitro membrane permeability assay comprises measuring the ability of a calpain inhibitor to cross the platelet membrane and inhibit endogenous calpain of platelets. 17. Mammals that have or may have neuropathological symptoms associated with neurodegeneration. Placement for the manufacture of drugs for inhibiting or treating neurodegeneration in mammals Uses of substituted heterocyclic compounds or pharmaceutically acceptable salts thereof or derivatives thereof. 18. The drug is for inhibiting or treating neurodegeneration of the CNS. The use according to claim 17, characterized in that: 19. 18. The use according to claim 17, wherein the substituted heterocyclic compound is a member of class 1 substituted isocoumarins. 20. 18. The use according to claim 17, wherein the substituted heterocyclic compound is a member of class II substituted isocoumarins. 21. 18. The use according to claim 17, wherein the substituted heterocyclic compound is a member of class III heterocyclic compounds. 22. The substituted heterocyclic compound is 3-chloroisocoumarin, 3,4-dichloroisocoumarin, The use according to claim 17, characterized in that it is socoumarin, 3-alkoxy-7-amino-4-chloroisocoumarin, or 7-substituted 3-alkoxy-4-chloroisocoumarin. 23. The substituted heterocyclic compound is CiTPrOIC, NH2-CiTPrOIC, PhCH2NHCONH-CiTPrOIC, CH3CONH-CiTPrOIC, L-Phe-NH-CiT PrOIC, PhCH2NHCONH-CiTEtOIC, PhCH2CONH - CiTEtOIC or D-Phe-NH-CiTEtOIC The use according to claim 17, characterized in that: 24. Mammals that have or may have neuropathological symptoms associated with neurodegeneration. Capacity for the production of drugs to inhibit or treat neurodegeneration in mammals A use of a peptide keto compound or a pharmaceutically acceptable salt thereof or a derivative thereof having lupine inhibitory activity. 25. The drug is for inhibiting or treating neurodegeneration of the CNS. The use according to claim 24, characterized in that: 26. 25. The use according to claim 24, wherein the peptide keto compound consists of a peptide keto α-keto ester. 27. The use according to claim 24, characterized in that the peptide-keto compound consists of a peptide-keto α-keto acid. 28. Particularly, the peptide keto compound consists of a peptide keto α-keto amide. The use according to claim 24 as a characteristic. 29. The use according to claim 24, characterized in that the peptide keto compound consists of a compound that is a member of one of the following subclasses; Esters (subclass A), dipeptide α-ketoesters (subclass B), tripeptide α-ketoesters (subclass A), tripeptide α-ketoesters Steles (subclass B), tetrapeptide α-ketoesters, amino acid peptides Tide α-keto esters, dipeptide α-keto acids (subclass A), dipepti α-keto acids (subclass B), tripeptide α-keto acids, tetrapeptide α-keto acids and amino acid peptide α-keto acids, dipeptide α-ketoamides (subclass A), dipeptide α-ketoamides (subclass B) , tripep tide α-ketoamides, tetrapeptide α-ketoamides or amino acid α-ketoamides Toamides. 30. Mammals that have or may have neuropathological symptoms associated with neurodegeneration. Capacity for the production of drugs to inhibit or treat neurodegeneration in mammals A use of a haloketone peptide or a pharmaceutically acceptable salt thereof or a derivative thereof having lupine inhibitory activity. 31. 31. Use according to claim 30, characterized in that the drug is for inhibiting or treating neurodegeneration of the CNS. 32. 31. The use according to claim 30, wherein the haloketone peptide consists of an aminohaloketone peptide. 33. The haloketone peptide is characterized in that it consists of a diazoketone peptide. The use according to claim 30. 34. The neurodegeneration is associated with excitotoxicity, HIV-induced neuropathy, ischemia, subarachnoid hemorrhage, stroke, brain attack, major heart attack, multiple infarct dementia, Alzheimer's disease, and Use according to any one of claims 17 to 33, characterized in that it is associated with Tenton's disease or Parkinson's disease. 35. 34. Use according to any one of claims 17 to 33, characterized in that the drug comprises a pharmaceutically acceptable carrier and is for parenteral administration. 36. 34. Use according to any one of claims 17 to 33, characterized in that the drug is in a dosage form suitable for oral administration. 37. Claims 3 to 5, wherein the drug is for transdermal administration, subcutaneous injection, intravenous injection, intramuscular or intrasternal injection, direct intraspinal injection into the CNS, or infusion. Purpose. 38. The neurodegeneration is caused by ischemia-induced events, stroke, head trauma, major heart attack, brain attack, near-drowning, carbon oxide poisoning, surgery-related brain injury, or other events known to cause neurodegeneration. Use according to any one of claims 1 to 9 or 17 to 37, characterized in that the process occurs. 39. Minimize proteolysis in in vitro samples containing peptides or proteins during or after sample processing, production, preparation, isolation, purification, storage, or transportation. A method comprising adding to this sample a substituted heterocyclic compound or a peptide keto compound that is a member of one of the following subclasses, dipeptide α-ketoesters (subclass A), dipeptide α-ketoesters (Subclass B), tripeptide α-ketoesters (subclass A), tripeptide α-ketoesters (subclass B), tetrapeptide α-ketoesters, amino Acid peptide α-keto esters, dipeptide α-keto acids (subclass A), dipeptide α-keto esters, dipeptide α-keto acids (subclass A), Peptide α-keto acids (subclass B), tripeptide α-keto acids, tetrape Peptide α-keto acids, amino acid peptide α-keto acids, dipeptide α-keto acids toamides (subclass A), dipeptide α-ketoamides (subclass B), tripeptide α-ketoamides, tetrapeptide α-ketoamides, or amino alpha-ketoamides. 40. Substituted heterocyclic compounds, peptide keto compounds, etc. are added to tissue samples during or after sample preparation in a manner that minimizes degradation due to calpain activity in tissue samples. A method characterized in that it consists of adding a compound or a haloketone peptide. 41. The sample is a whole organ, and the compound is dissolved in a liquid. 41. The method of claim 40, comprising perfusing the organ with a compound. 42. The tissue sample is used for a neurodegeneration assay after the addition step, and the assay is 41. A method according to claim 40, characterized in that it consists of testing for calpain activity products in the tissue sample. 43. 41. A method according to any of claims 39 or 40, characterized in that adding the compound consists of adding a peptide α-keto acid to the sample. 44. The method according to claim 43, comprising adding a compound in which the peptide α-keto acid is a member of one of the following subclasses: dipeptide α-keto acids (subclass A), dipeptide α-keto acids (subclass B), tripepeti α-keto acids, tetrapeptide α-keto acids or amino acid peptide α-keto acids. 45. A pharmaceutical composition for the treatment or inhibition of neurodegeneration, comprising a pharmacologically effective neuroprotective amount of a substituted heterocyclic compound, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, in a pharmaceutically acceptable formulation containing a carrier material. Pharmaceutical compositions containing derivatives thereof. 46. A pharmaceutical composition for the treatment or inhibition of neurodegeneration, comprising a pharmacologically effective neuroprotective amount of a haloketone peptide or a haloketone peptide in a pharmaceutically acceptable formulation containing a carrier material. A pharmaceutical composition comprising a pharmaceutically acceptable salt thereof or a derivative thereof. 47. A pharmaceutical composition for the treatment or inhibition of neurodegeneration, comprising a pharmacologically effective neuroprotective amount of a peptide-keto compound in a pharmaceutically acceptable formulation containing a carrier material, wherein said peptide-keto compound is of the following subclasses: A compound that is one member A composition characterized in that it is a dipeptide α-keto ester (subclass A), a dipeptide α-keto ester (subclass B), a tripeptide α-keto ester, Esters (subclass A), tripeptide α-ketoesters (subclass B), tetrapeptide α-ketoesters or amino acid peptide α-ketoesters Class. 48. characterized in that the peptide keto compound consists of one of the following compounds: The composition according to claim 47; -Abu-COOEt, CH3CH2CH)2CHCO-Abu -COOEt, Ph(CH2)6CO-Abu-COOEt. 49. Said Pepti The composition according to claim 47, characterized in that the doketo compound consists of one of the following compounds: Z-Ala-DL-Ala-COOEt, Z-Ala-DL-Ala-COOB zl, Z- Ala-DL-Ala-COOnBu, Z-Leu-Nva-CO OEt, Z-Leu-Nle-COOEt, Z-Leu-Phe-COOEt, Z-Leu-Abu-COOEt, Z-Leu-Met-COOEt, Z -Leu-Phe-COOEt, Z-Leu-4-Cl-Phe-COOEt, 2-NapSO2-Leu-Abu-COOEt, Z-Leu-NLeu-CO2Et, Z-Leu-Phe-CO2Bu, Z-Leu -Abu-CO2Bu, Z-Leu-Phe-CO2Bzl, MeO-Suc-Ala-DL-Ala-COO Me, Z-Leu-Abu-CO2Bzl. 50. The peptide keto compound is The composition according to claim 47, characterized in that it consists of one of the following compounds: Z-Ala-Ala-Dl-Ala-COOEt, Z-Ala-Pro-DL-Ala-COOEt, Z-Ala -Ala-DL-Abu-COOEt, Z-Ala-Ala-Dl-Abu-COOBzl, Z-Ala-Ala-DL-Abu-COOCH2-C6H4-CF3 (para), H-Leu-Ala-DL - Lys-COOEt, Z-Leu-Leu-Abu-COOEt, Z-Leu-Leu-Phe-COOEt, MeO-Suc-Val-Pro-DL-Ph e-COOMe. 2-NapSO2-Leu-Leu-Abu-COOEt. 5 1. The composition according to claim 47, characterized in that the peptide keto compound consists of MeO-Suc-Ala-Ala-Pro-DL-Abu-COOMe or Z-Ala-Ala-Ala-DL-Ala-COOEt. thing. 52. A pharmaceutical composition for the treatment or inhibition of neurodegeneration and a pharmacologically effective compound. The peptide keto compound comprises a protective dose of a peptide keto compound, and the peptide keto compound is A composition characterized by comprising a compound that is one of the members of Dipep. Tide α-keto acids (subclass A), dipeptide α-keto acids (subclass B), tripeptide α-keto acids, tetrapeptide α-keto acids or amino acid peptides Thido alpha-keto acids. 53. characterized in that the peptide keto compound consists of one of the following compounds: The composition according to claim 52; Bz-DL-Lys-COOH, Bz-DL-Ala-COOH, Z-Leu-Phe-COOH, Z-Leu-Abu-COOH. 54. A pharmaceutical composition for the treatment or inhibition of neurodegeneration, comprising a pharmacologically effective neuroprotective peptide-keto compound, said peptide-keto compound comprising one of the following subclasses: ; Zypep tide α-ketoamides (subclass A), dipeptide α-ketoamides (subclass A), dipeptide α-ketoamides (subclass A), Class B); tripeptide α-ketoamides, tetrapeptide α-ketoamides or or amino acid α-ketoamides. 55. characterized in that the peptide keto compound consists of one of the following compounds: The composition according to claim 54: Z-Leu-Phe-CONH-Et, Z-Leu-Phe-CONH-nPr, Z-Leu-Phe-CONH-nBu, Z-Leu-Phe-CONH- iBu, Z-Leu-Phe-CONH-B zl, Z-Leu-Phe-CONH-(CH2)2PH, Z-Leu-Abu-CONH-Et, Z-Leu-Abu-CONH-nPr, Z-Leu- Abu-CONH-nBu, Z-Leu-Abu-CONH-iBu, Z-Leu-Abu-CONH-Bzl, Z-Leu-Abu-CONH-(CH2)2Ph, Z-Leu-Abu-CONH-(CH2 )3-N(CH2CH2)2O,Z-Leu-Abu-CONH-(CH2)7CH3,Z-Leu-Abu-CO NH-(CH2)2OH,Z-Leu-Abu-CONH-(CH2)O(CH 2) 2OH, Z-Leu-Abu-CONH-(CH2)17CH3, Z-Leu-Abu-CONH-CH2-C6H3(OCH3)2, Z-Leu-Abu-CONH-CH2-C4H4N. 56. The substituted heterocyclic compound is a class I substituted isocoumarin, a class II substituted isocoumarin, or a class II substituted isocoumarin. It is characterized by consisting of a member of the socoumarins and class III heterocyclic compounds. 46. The composition according to claim 45. 57. The substituted heterocyclic compound is 3-chloroisocoumarin, 3,4-dichloroisocoumarin, Socoumarin, 3-alkoxy-7-amino-4-chloroisocoumarin, or 7-substituted 3-alkoxy-4-chloroisocoumarin, CiTPrOIC, NH2-CiTPrOIC, PhCH2NHCONH-CiTPrOIC, CH3CON H-CiTPrOIC, L-Phe-NH -CiTPrOIC, PhCH2NH CONH-CiTEtOIC, PhCH2CONH-CiTEtOIC or D-Phe-NH-CiTEtOIC, according to claim 56. composition. 58. 58. A composition according to any one of claims 45 to 57, characterized in that the composition is in a dosage form containing from 70 μg to 7 g of active ingredient in each dose. 59. The carrier material comprises a liquid, the composition is in a dosage form, and each dose is 58. Composition according to any one of claims 45 to 57, characterized in that the dosage comprises from 0.5 ml to 1 liter of said carrier. 60. The composition according to any one of claims 45 to 57, further comprising at least one of the following: DMSO or other organic solvent, lipid carrier, detergent, surfactant. agent or emulsifier. 61. 58. A composition according to any one of claims 45 to 57, characterized in that the composition is suitable for parenteral administration. 62. 58. A composition according to any one of claims 45 to 57, characterized in that the composition is suitable for topical application. 63. 58. A composition according to any one of claims 45 to 57, characterized in that the composition comprises an aqueous solution, lotion, jelly, oily solution, or oily suspension. 64. Use of substituted heterocyclic compounds as drugs. 65. Uses of haloketone peptides as drugs. 66. In the use of peptide-keto compounds as drugs, the peptide-keto compounds are used as drugs. Uses characterized by being a compound of one of the following subclasses; dipeptide α-ketoesters (subclass A), dipeptide α-ketoesters (subclass B), tripeptide α-ketoesters (subclass A), tripeptide α −ke toesters (subclass B), tetrapeptide α-ketoesters or amino amino acid peptide α-ketoesters. 67. characterized in that the peptide keto compound consists of one of the following compounds: Use as described in claim 66: CH3)2CH(CH2)2CO-Abu-COOEt, CH3CH2CH)2CHCO-Abu-COOEt, Ph(CH2)6CO-Abu-COOEt. 68. The peptide keto compound is one of the following compounds: The use according to claim 66, characterized in that: Z-Ala-DL-Ala-COOEt, Z-Ala-DL-Ala-COOB zl, Z-Ala-DL-Ala-COOnBu, Z-Leu -Nva-COO Et, Z-Leu-Nle-COOEt, Z-Leu-Phe-COOEt, Z -Leu-Abu-COOEt, Z-Leu-Met-COOEt, Z-Leu -Phe-COOEt, Z-Leu4- Cl-Phe-COOEt, 2-Nap SO2-Leu-Abu-COOEt, Z-Leu-NLeu-CO2Et, Z -Leu-Phe-CO2Bu, Z-Leu-Abu-CO2Bu, Z-Leu -Phe-CO2Bzl, MeO -Suc-Ala-DL-Ala-COOMe Z-Leu-Abu-CO2Bzl. 69. characterized in that the peptide keto compound consists of one of the following compounds: Use according to claim 66: Z-Ala-Ala-DL-Ala-COOEt, Z-Ala-Pro-DL-Ala-COOEt, Z-Ala-Ala-DL-Abu-COOEt, Z-A la-Ala-DL-Abu-COOBzl, Z-Ala-Ala-DL-Ab u-COOCH2-C6H4-CF3 (para), H-Leu-Ala-DL -Lys-COOEt, Z-Leu-Leu-Abu- COOEt, Z-Leu -Leu-Phe-COOEt, MeO-Suc-Val-Pro-DL-Ph e-COOMe, 2-NapSO2-Leu-Leu-Abu-COOEt. 7 0. 67. The use according to claim 66, wherein the peptide keto compound consists of a tetrapeptide α-keto ester. 71. 67. The use according to claim 66, characterized in that the peptide keto compound consists of MeO-Suc-Ala-Ala-Pro-DL-Abu-COOMe or Z-Ala-Ala-Ala-DL-Ala-COOEt. 72. Use of the peptide keto compound as a drug, characterized in that the peptide keto compound is a compound of one of the following subclasses: dipeptide α-keto acids (subclass A), dipeptide α-keto acids (subclass B), tripeptide α- Keto acids, tetrapeptide α-keto acids or amino acid peptide α-keto acids. 73. The use according to claim 72, characterized in that the peptide keto compound consists of one of the following compounds: Bz-DL-Lys-COOH, Bz-DL-Ala-COOH, Z-Leu-Phe-COOH , Z-Leu-Abu-COOH. 74. Ketization of the peptide Use of peptide-keto compounds as drugs, characterized in that the compound is one of the following subclasses; dipeptide α-ketoamides (subclass A), dipeptide α-ketoamides (subclass B), tripeptide α-ketoamides, tetrape Petide α-ketoamides or amino acid α-ketoamides. 75. characterized in that the peptide keto compound consists of one of the following compounds: Use according to claim 74: Z-Leu-Phe-CONH-Et, Z-Leu-Phe-CONH-nPr, 2-Leu-Phe-CONH-nBu, Z-Leu-Phe-CONH-i Bu, Z-Leu-Phe-CONH-Bzl, Z-Leu-Phe-CONH -(CH2)2Ph, Z-Leu-Abu-CONH-Et, Z-Leu-Abu-CONH-nPr, Z-Leu- Abu-CONH-nBu, Z-Leu-Abu-CONH-iBu, Z-Leu-Abu-CONH-BzL, Z-Leu-Abu-CONH-(CH2)2Ph, Z-Leu-Abu-CONH-( CH2 )3-N(CH2CH2)20,Z-Leu-Abu-CONH-(CH2)7CH3,Z-Leu-Abu-CONH-(CH2)2OH,Z-Leu-Abu-CONH-(CH2)2O(CH2 )2OH, Z-Leu-Abu-CONH-CONH-(CH2)17CH3, Z-Leu-Abu-CONH-CH2-C 6H3 (OCH3)2, Z-Leu-Abu-CONH-CH2-C4H4N. Detailed description of the invention
JP4503767A 1990-12-28 1991-12-27 Use of calpain inhibitors in the treatment and prevention of neurodegeneration Pending JPH06504061A (en)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US635,952 1984-07-30
US63595290A 1990-12-28 1990-12-28
PCT/US1991/009786 WO1992011850A2 (en) 1990-12-28 1991-12-27 Use of calpain inhibitors in the inhibition and treatment of neurodegeneration

Publications (1)

Publication Number Publication Date
JPH06504061A true JPH06504061A (en) 1994-05-12

Family

ID=24549781

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP4503767A Pending JPH06504061A (en) 1990-12-28 1991-12-27 Use of calpain inhibitors in the treatment and prevention of neurodegeneration

Country Status (5)

Country Link
EP (1) EP0564552A1 (en)
JP (1) JPH06504061A (en)
AU (2) AU667463B2 (en)
CA (1) CA2098609A1 (en)
WO (1) WO1992011850A2 (en)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2004526704A (en) * 2001-02-05 2004-09-02 ノイロテル・アーゲー Tripeptides and tripeptide derivatives for the treatment of neurodegenerative diseases

Families Citing this family (41)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5736520A (en) * 1988-10-07 1998-04-07 Merrell Pharmaceuticals Inc. Peptidase inhibitors
EP0580161A1 (en) * 1992-07-22 1994-01-26 THE McLEAN HOSPITAL CORPORATION Prophylactic and therapeutic treatment of Alzheimer's disease
US5371072A (en) * 1992-10-16 1994-12-06 Corvas International, Inc. Asp-Pro-Arg α-keto-amide enzyme inhibitors
US5541290A (en) * 1993-06-24 1996-07-30 Harbeson; Scott L. Optically pure calpain inhibitor compounds
US5977074A (en) * 1993-10-01 1999-11-02 Merrell Pharmaceuticals, Inc. Inhibitors of β-amyloid protein production
US5637589A (en) * 1993-10-29 1997-06-10 University Of North Carolina At Chapel Hill Suksdorfin, analogs, compositions thereof, and methods for making and using thereof
US5693617A (en) * 1994-03-15 1997-12-02 Proscript, Inc. Inhibitors of the 26s proteolytic complex and the 20s proteasome contained therein
US6660268B1 (en) 1994-03-18 2003-12-09 The President And Fellows Of Harvard College Proteasome regulation of NF-KB activity
US5536639A (en) * 1994-03-25 1996-07-16 Cephalon, Inc. Methods for detecting calpain activation by detection of calpain activated spectrin breakdown products
US6319929B1 (en) 1994-04-29 2001-11-20 The University Of North Carolina At Chapel Hill Suksdorfin analogs, compositions thereof, and methods for making and using thereof
US6083903A (en) * 1994-10-28 2000-07-04 Leukosite, Inc. Boronic ester and acid compounds, synthesis and uses
AU3935895A (en) * 1994-11-24 1996-06-17 Takeda Chemical Industries Ltd. Alpha-ketoamide derivatives as cathepsin l inhibitor
US5691368A (en) * 1995-01-11 1997-11-25 Hoechst Marion Roussel, Inc. Substituted oxazolidine calpain and/or cathepsin B inhibitors
US5827877A (en) 1995-09-14 1998-10-27 Cephalon, Inc. Ketomethylene group-containing cysteine and serine protease inhibitors
US5723580A (en) * 1995-09-14 1998-03-03 Cephalon, Inc. Ketomethylene group-containing aldehyde cysteine and serine protease inhibitors
EP0910564B1 (en) * 1995-11-28 2007-10-31 Cephalon, Inc. D-amino acid derived inhibitors of cysteine and serine proteases
DE19642591A1 (en) 1996-10-15 1998-04-16 Basf Ag New piperidine-ketocarboxylic acid derivatives, their production and use
US6303579B1 (en) 1996-10-31 2001-10-16 Alcon Laboratories, Inc. Use of calpain inhibitors to treat ocular neural pathology
DE19650975A1 (en) 1996-12-09 1998-06-10 Basf Ag New heterocyclically substituted benzamides and their application
ATE244216T1 (en) * 1996-12-11 2003-07-15 Abbott Gmbh & Co Kg KETOBENZAMIDE AS CALPAIN INHIBITORS
KR20010041967A (en) * 1998-03-20 2001-05-25 요시다 쇼지 Pharmaceutical composition containing a cysteine protease inhibitor for prophylaxis and therapy of brain tissue impairment
SK14512000A3 (en) 1998-04-20 2001-04-09 Basf Aktiengesellschaft New substituted amides, their production and their use
HUP0101599A3 (en) 1998-04-20 2002-12-28 Basf Ag Heterocyclically substituted amides, process for producing them, use of them and pharmaceutical compositions containing them
DE19817459A1 (en) 1998-04-20 1999-10-21 Basf Ag New heterocyclic amide derivatives useful as cysteine protease inhibitors for treating neurodegenerative diseases, neuronal damage, stroke, cranial trauma, Alzheimer's disease, etc.
DE19818614A1 (en) 1998-04-20 1999-10-21 Basf Ag New benzamide derivatives useful as cysteine protease inhibitors for treating neurodegenerative diseases, neuronal damage, stroke, cranial trauma, Alzheimer's disease, etc.
WO1999061423A1 (en) * 1998-05-25 1999-12-02 Basf Aktiengesellschaft New heterocyclically substituted amides, their production and their use
HUP0102935A3 (en) 1998-06-03 2002-01-28 Gpi Nil Holdings Inc Wilmingto N-linked sulfonamides of n-heterocyclic carboxylic acids or carboxylic acid isosteres and pharmaceutical compositions containing them
WO2000021550A2 (en) * 1998-10-13 2000-04-20 President And Fellows Of Harvard College Methods and compositions for treating neurodegenerative diseases
US6417189B1 (en) 1999-11-12 2002-07-09 Gpi Nil Holdings, Inc. AZA compounds, pharmaceutical compositions and methods of use
US7253169B2 (en) 1999-11-12 2007-08-07 Gliamed, Inc. Aza compounds, pharmaceutical compositions and methods of use
WO2001046195A1 (en) 1999-12-21 2001-06-28 Gpi Nil Holdings, Inc. Hydantoin derivative compounds, pharmaceutical compositions, and methods of using same
JP4452441B2 (en) 2000-07-21 2010-04-21 シェーリング コーポレイション Novel peptides as NS3-serine protease inhibitors of hepatitis C virus
US7244721B2 (en) 2000-07-21 2007-07-17 Schering Corporation Peptides as NS3-serine protease inhibitors of hepatitis C virus
IL153670A0 (en) 2000-07-21 2003-07-06 Schering Corp Novel peptides as ns3-serine protease inhibitors of hepatitis c virus
FR2817867B1 (en) * 2000-12-11 2006-06-30 Trophos ISOCOUMARINS INHIBITORS OF AMYLOID PEPTIDE PRODUCTION, PREPARATION, COMPOSITIONS CONTAINING SAME AND USES THEREOF
DE10105038B4 (en) 2001-02-05 2005-07-07 Neurotell Ag Tripeptide derivatives for the treatment of postläsional diseases of the nervous system
DE10105040A1 (en) 2001-02-05 2002-08-14 Tell Pharm Ag Hergiswil Tripeptide derivatives for the treatment of post-lesion diseases of the nervous system
US7282512B2 (en) 2002-01-17 2007-10-16 Smithkline Beecham Corporation Cycloalkyl ketoamides derivatives useful as cathepsin K inhibitors
WO2013082458A1 (en) 2011-12-02 2013-06-06 The Regents Of The University Of California Reperfusion protection solution and uses thereof
US10076384B2 (en) 2013-03-08 2018-09-18 Symple Surgical, Inc. Balloon catheter apparatus with microwave emitter
AU2015346371A1 (en) * 2014-11-11 2017-04-27 Western University Of Health Sciences Isoform-specific calpain inhibitors, methods of identification, and uses thereof

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2004526704A (en) * 2001-02-05 2004-09-02 ノイロテル・アーゲー Tripeptides and tripeptide derivatives for the treatment of neurodegenerative diseases

Also Published As

Publication number Publication date
EP0564552A1 (en) 1993-10-13
AU5590596A (en) 1996-08-22
WO1992011850A2 (en) 1992-07-23
CA2098609A1 (en) 1992-06-29
WO1992011850A3 (en) 1992-09-03
AU667463B2 (en) 1996-03-28
AU9152791A (en) 1992-08-17

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JPH06504061A (en) Use of calpain inhibitors in the treatment and prevention of neurodegeneration
US5444042A (en) Method of treatment of neurodegeneration with calpain inhibitors
JPH09500087A (en) Use of calpain inhibitors in the control and treatment of health disorders associated with increased calpain activity.
AU670381B2 (en) Thrombin inhibitors
KR100339456B1 (en) Novel peptide derivatives
DE69532754T2 (en) FACTOR XA INHIBITORS
US6683055B1 (en) Low molecular weight inhibitors of complement proteases
US5610297A (en) Peptides ketoamides
SK63194A3 (en) Peptide derivatives
DE10143840A1 (en) New acylated hydroxamates useful for the treatment of e.g. wound healing
JPH04330094A (en) Improvement in organic chemistry
JPH06504547A (en) Peptide ketoamides, keto acids and ketoesters
SK23394A3 (en) New isosteric peptides
JPH10506094A (en) Arginine mimetic derivatives as enzyme inhibitors
DE69633623T2 (en) Cysteine protease inhibitors for the treatment of allergic diseases caused by IgE
CZ277998A3 (en) Serine protease inhibitors and pharmaceutical preparation
CZ277898A3 (en) Serine proteinase inhibitors and pharmaceutical composition containing thereof
US6057297A (en) Inhibitor compounds of zinc-dependent metalloproteinases associated with pathological conditions, and therapeutic use thereof
US6235929B1 (en) Tripeptide α-ketoamides
US5232928A (en) Tetrahydroisoquinoline amides
US5846755A (en) Method for determining the therapeutic activity of metalloproteinase inhibitor compounds
KR20000016700A (en) Depsipeptides and drugs containing the same as the active ingredient
EP0313969A2 (en) Tripeptide derivatives and antiplasmin agents containing the same
EP1188765B1 (en) Medical Use of Mechanism-oriented inhibitors of dipeptidyl peptidase I
EP0956293B1 (en) Thrombin inhibitors