JPH06503800A - 昆虫を生物学的に防除する方法及び器具 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 を〕　８・に　７、　る　゛　び０ Ｊ肛」盪 本願は、Ｈａｉｍ　Ｂ、　Ｇｒｕｎｎｅｒ、　Ｆｅｒｎａｎｄｏ　Ａｇｕｄｅｌ ｏ−ＳｉｌｖａおよびＣａｒｏｌ　Ａ、　Ｊｏｈｎｓｏｎが１９８９年３月１５ 日に出願した“ゴキブリを生物学的に防除する方法及び器具”という名称の米国 特許願第０７／３２４．４６１号の一部継続出願である、Ｆｅｒｎａｎｄｏ　Ａ ｇｕｄｅｌｏ−３ｉｌｖａらが１９９０年８月２３０に出願した“飛行性昆虫を 生物学的に防除する方法及び器具”という名称の米国特許願第０７７５７２．４ ８６号の一部継続出願である。

本発明は、害虫の生物学的防除の分野、特に、昆虫を防除するため感染チャンバ ー内で昆虫病原性の真菌を使用する分野の発明である。

農業に大きな経済的損失を起こし、かつヒトなどの動物の集団に疾病を広げる多 種類の昆虫がある。これらの昆虫を防除する方法の大部分は殺虫剤を使用する。

あいにく殺虫剤は、高価であり、特にごく短い期間を越えて長期間有効な場合、 環境に対して一般に危険がある。さらに、処理された昆虫に耐性種が発生する傾 向があり、この耐性種は処理するのに大量の異なる化学薬剤を使用する必要があ る。また、化学殺虫剤を使用すると標的外の生物学的調節因子の破壊をもたらす 。

害虫を防除するのに、通常使用している著しく有毒な化学殺虫剤を代替できるも のに昆虫の病原体がある。真菌は、昆虫の防除用の生物学的因子として用いるの に適切な昆虫病原体の有望な群の１つである。

真菌は、単細胞生物または多細胞のコロニーとして見いだされる。真菌は真核生 物であるので細菌よりはるかに高度に分化するが、高等植物より分化の程度は低 い。真菌はエネルギー源として光を利用できないので、馬主的または寄生的な生 存に制限される。

真菌の成長と生殖の最も普通の方式は、栄養生殖または胞子形成とこれに続く胞 子の発芽を伴う無性生殖である。無性胞子または分生子（ｃｏｎｉｄｊａ）は菌 糸の先端と側部に多細胞コロニーの分枝フィラメント構造を形成する。適正な環 境内で分生子は発芽し大きくなり発芽管を生成する。この発芽管はやがて菌糸に 成長し、次いで菌糸はコロニーを形成する。

真菌のメタルヒジウム・アニソブリエ（Ｍｅｔａｒｈｉｚｉｕ＋ｗ　ａｎｔｓｏ ｐｌ　１ａｅ）は特定種の昆虫に感染する真菌の一例である。この真菌は、直接 噴霧法、注射法を含むいくつかの方法、および昆虫が常食としている植物体に真 菌を塗布することによって害虫に対して投与されている。ある昆虫の種では、真 菌が感染すると死をもたらすことが分かっている。１つの種では、感染した個体 が、真菌に感染していない集団のメンバーに真菌を伝播することができた。メタ ルヒジウム・アニソブリエは、昆虫を生物学的に防除するのに用いる真菌として 最も広く研究されているものである。

昆虫の真菌病原体を用いる従来の研究の大部分の限界は、研究が実験室の条件下 で行われているということであり、この条件は、昆虫が実際に見られる条件とは 全く異なっている。

報告されているほとんどの場合、処理された昆虫の死は、非常に多量の胞子、本 来それだけで有毒かもしれないが、の接種もしくは注射によってもたらされてい る。他の場合には、感染は、多量の真菌胞子が入っている試験管中で昆虫を回転 させて行われた。このような方法を商業上用いることは明らかに非現実的である 。さらに、昆虫が蔓延している領域、特にヒトまたは食料が汚染される可能性が ある領域に、胞子をランダムに放出する必要が生じるような大量の真菌殺虫剤を 登録することは政府の規制によって難しくなっている。昆虫に感染し、その真菌 の接種物を確実に広く散布する首尾一貫した商業的に実行可能な方法はまだ全く 開発されていない。

ブラテラ中ジャーマニ力（Ｂｌａｔｔｅｌａ　ｇｅｒｍａｎｉｃａ）　（ドイツ ゴキブリ）とベリブラネタ・アメリカーナ（Ｐｅｒｉｐｌａｎｅｔａ　ａｍｅｒ ｉｃａｎａ）　（アメリカゴキブリ）は世界中に広く存在している。

これらはいくつものヒトの病原体の媒介体として関連している。Ｍ、アニソブリ エ′のゴキブリに感染する能力を取り上げたいくつかの報告がある。例えばＧｕ ｎｎａｒｓｓｏｎ　Ｓ、Ｇ、Ｓ、、　ム」１■ｒｔｅｂｒ、Ｐａｔｈｏｌ、　（ ４６）　３巻、３１２〜３１９頁、　（１９１１５）は、ペリブラネタ・アメリ カーナは、Ｍ、アニソブリエの分生子の注射に対して自衛反応（小結節の生成） を示すことを報告している。さらに、昆虫病原性の真菌との接触によって感染し ないいくつもの昆虫種がある。

イエバエの防除は、公衆衛生に関連があるので、世界中で経済的に非常に重要で ある。このハエは、広範囲の種類のヒトの病原体を機械的に伝播する性質をもっ ている。このことはＢｉｄａ　Ｗｉｄ、　Ｓ、Ｐ、、　Ｊ、１．　Ｂｒａｉｕ＋ およびＲ，Ｍ、　Ｍａｔｏｓｓｉａｎ、　Ａｎｎ。

Ｔ　ｏ　、　Ｍｅｄ、ａｒａｓｉｔｏｌ、７２　（２）巻、　１１７−１２１頁 、　（１９７８）に概説されている。またイエバエは、動物が食料を食べるのに 使う時間が短くなり、そのため飼料効率を低下するほどまで、ヒト、家畜および 家禽を悩ますことがある。

Ｍ、ドメスチカ（Ｍ、ｄｏｍｅｓｔｉｃａ）を防除する可能性がありそうな病原 体が少ないことは文献をみると記載されている。病原体とイエバエとの関連につ いての多数の科学的文献は、死んだハエの診断、または実用的な短期間の適用が ない実験室での研究の別個の報告を引用している。ハエの真菌感染は大部分無害 のようであり、このことは、Ｍ、トメステイカのさなぎもしくは成虫から、真菌 のアスペルギルス・ニガー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ　ｎｉｇｅｒ）、Ａ、フラ バス（Ａ、　ｆｌａｖｕｓ）、Ａ、ウスラス（Ａ、ｕｓｔｕｓ）およびムコール ・ラセモサス（Ｍｕｃｏｒ　ｒａｃｅｍｏｓｕｓ）が単離されたこと（Ｚｕｂｅ ｒｉら、Ｐａｋ’５ｔａｎ　Ｊ、　Ｓｃｉ、ｎｄ、　Ｒｅｓ、　１２巻、７７〜 ８２頁、１９６９年による）によって実証されている。イエバエ集団に対して有 為な作用があるという証拠は全くなかった。

ある種の実験室の条件下で、成虫のイエバエを真菌を感染させ、感染したイエバ エを死に至らせることは可能である。

例えば、アスベルギル・フラバスは、その真菌胞子を、高濃度（Ｉ　Ｘ　１０９ まで）で、Ｍ、ドメスチ力に給餌したところ、おそらく胞子の毒素が原因かと思 われるがこのハエに対し病原性であった。暴露してから７日後の死亡率は５７％ であり、暴露後２１日後の死亡率は１００％であった。ハエに麻酔をかけてから 真菌胞子に接触させて７日後に死亡率が１００％になったと、Ａｍｏｎｋｅｒと Ｎａ１ｒ、　Ｊ、Ｉｎｖｅｒｔｅｂｒ、Ｐａｔｈｏｌ、　７巻、５１３〜５１４ 頁、（１９６５）に報告されている。また、Ｄｒｅｓｎｅｒ、　Ｊ、　Ｎ、Ｙ、 　Ｅｎｔｏｍｏｌ。

づ立虹５８巻、２６９〜２７９頁、（１９５０）には、Ｍ、トメステイカの成虫 が栄養培地に付着させた発芽中の分生子のダストに暴露されたとき、真菌のボー ベリア・バシアーナ（Ｂｅａｕｖｅｒｉａ　ｂａｓｓｉａｎａ）の分離株が該成 虫に感染したことを報告した。またこの真菌はハエを真菌の分生子を含有するミ ルクに更に暴露した場合、ハエに対し伝染性であった。

Ｄ、　Ｃ，Ｒｉｚｚｏは、メタルヒジウム・アニソブリエまたはボーベリア・バ シアーナに感染したハエの死亡率について研究し、感染後死亡するまでの時間は 主船に無関係であったということをＪ、Ｉｎｖｅｒｔ、　Ｐａｔｈｏｌ、　３０ 巻、　１２７〜１３０頁、（１９７７）に報告した。ハエを、４週間たった真菌 の培養スラントを１０分間回転させて、完全に胞子に暴露し、次ぎに湿潤チャン バー内に保持することによって感染させていた。著者は報告の１２７頁に、感染 する真菌について、“これらの病原体が天然のハエ集団に真菌症を起こしたとい う報告はまだなされていない”と述べている。

しかし、１９９０年に、Ｄ、Ｃ，５ｔｅｉｎＫｒａｕｓらは、ボーベリア・バシ アーナに感染したムスカ・ドメスチ力・エル（Ｍｕｓｃａ　ｄｏｍｅｓｔｉｃａ 　Ｌ）が１％より低い罹患率（３１，１６５中２８）であるが、ニューヨーク州 の酪農場で発見されたとＪ、　Ｍｅｄ、　Ｅｎｔｏｍｏｌ。

２７　（３）巻、３０９〜３１２頁に報告した。この真菌の分離株は実験室で生 育させたハエに対して感染性であったが、天然産のものに対しては発生率が低か ったので、著者は、！Ｅ文藍の３１０頁に、′これらの感染はイエバエ集団内で 天然に起こる動物間流行病を示すものではないようである”と結論している。

°　これらの研究によって、昆虫の真菌による防除に可能性があるということが 認職された。しかし、昆虫に感染させ、および家屋もしくは建造物にはびこる昆 虫の処理と生物学的防除を行うため、育種集団全体に真菌を確実に分散させる、 首尾一貫した商業的に実施可能な方法はまだ開発されていない。

それ故に本発明の目的は、昆虫病原性の真菌を用いて昆虫を生物学的に防除する ことである。

本発明の他の目的は、昆虫の生物学的防除を行う際の、簡便で信頼性があり、か つ経済的に適切な真菌散布を実施するための器具を提供することである。

本発明のさらに他の目的は、昆虫に対して病原性の真菌を播種することによって 、育種コロニー中の全ての昆虫に感染させる方法と手段を提供することである。

本発明の他の目的は、耐性種の発生を避けるために、種々の真菌を昆虫に感染さ せて殺す方法と手段を提供することである。

発」ＷＱＪｌｊ内 十分に高い濃度で昆虫に投与したときに病原性である真菌を、感染チャンバーを 用いて昆虫に感染させることによって、ゴキブリ類、イエバエのような飛行性昆 虫およびとうもろこし根食い虫（ｃｏｒｎ　ｒｏｏｔｖｏｒｍ）の成虫のごとき 他の昆虫を含む昆虫類を防除および根絶する方法である。上記の感染チャンバー には、昆虫に対して病原性の真菌の胞子が発芽可能な影線および風を含む）環境 から防護し、昆虫の誘引剤として働（かまたはこれを収納し、かつ多数の胞子を 昆虫に接種する働きをする。真菌の培養物は、長期間にわたって胞子を連続的に 供給する。胞子は昆虫に付着し、発芽管を生成し、この発芽管が昆虫内に貫入し 、その結果昆虫は３〜４日以内に死ぬ。感染チャンバーのデザインすなわち形態 と色がその昆虫に対して単独で働く誘引物である場合がある。あるいは該チャン バーに対する昆虫の誘引をさらに促進するため飼料または臭気を用いてもよい。

主な感染法は外部接触による方法であるが、昆虫はお互いの接触および胞子の接 種によっても感染させることができる。場合によっては、接種された真菌の分生 子が毒性の場合がある。

２つの最も好ましい昆虫病原性真菌は、メタルヒジウム、アニソブリエとボーベ リア・バシアーナであるが、感染チャンバーを用いて昆虫に接触したときに病原 性である他の真菌も使用できる。ブラテラ・ジャーマニカ（ドイツゴキブリ）、 ペリプラ不夕・アメリカーナ（アメリカゴキブリ）、ファニア・カニキュラリス （Ｆａｎｎｉａ　ｃａｎｉｃｕｌａｒｉｓ）　（小イエバエ）、ムスカ・ドメス チカ（Ｍｕｓｅａ　ｄｏｍｅｓｔｉｃａ）　（イエバエ）、およびディアブロチ 力・ウンデセムブンクタータ（Ｄｉａｂｒｏｔｉｃａ　ｕｎｄｅｃｅｍｐｕｎｃ ｔａｔａ）を、メタルヒジウム・アニソプリエとボーベリア・ベシアーナが入っ ているチャンバーを使って除去する方法を実施例によって実証する。

ｌｉ囚１星星説Ｍ 図１は、昆虫病原性真菌をゴキブリ類に感染させる感染チャンバーの断面図であ り、そのチャンバーは、栄養分を含有する寒天の天井部の下側にマットとして堆 積させた真菌の培養物と、該チャンバー内に湿分を保持するための滅菌ポリスチ レンのパッドの床で構成されている。この２つの対向する面は２〜３ｍｍの間隔 をおいて隔てられ、その間隔をゴキブリが通行する。

図２は、図１のチャンバーの拡大断面図であり、５０ｍ＋　１の真菌培養培地を 含有し、昆虫病原性真菌が接種されて、菌糸と分生子（胞子）からなるマットを 生成している。

図３は、図１のチャンバーの頂の断面図で周囲に等間隔を置いて設けられた開口 を示す。

図４は、２８°Ｃの温度と７５％の湿度のもとに、Ｍ、アニソブリエの感染チャ ンバー（複数）に暴露した後のブラテラ・ジャーマニカのゴキブリの成虫の死亡 率（生存率％）を時間（日）の関数として示すグラフである（対照−〇−１暴露 −・−）。

図５は、２８°Ｃの温度と７５％の湿度のもとに、Ｍ、アニソブリエの単一の感 染チャンバーに、ブラテラ・ジャーマニ力のゴキブリの成虫の５つの集団を３週 間づつ暴露したときの死亡率（生存率％）を時間（日）の関数として示すグラフ である。

図６は、暴露後の時間（日）の関数としてゴキブリ類の死亡率（生存率％）を示 すグラフである。ゴキブリ類死亡率の試験は、病原性真菌なしく一〇−〇−）、 昆虫病原性真菌のＭ、アニソプリエありで誘引剤なしく△印）、Ｍ、アニソプリ エおよび誘引剤（１）バナナエキス（口印）、ならびにＭ、アニソプリエおよび （２）　Ｐｕｒｉｎａ　（登録商標）（ラボ　チョフ）（ｌａｂ　ｃｈｏｗ）　 （◇印）について行った。

図７Ａと７Ｂは、２８℃および７５％の湿度のもとに暴露した時間（真菌に暴露 した日数）の関数としてのゴキブリ類の死亡率（生存率％）を示したグラフであ り、図７Ａは、Ｍ、アニソブリエに感染し胞子を形成している死体に暴露した場 合を示し、対照（−ロー）、死骸が１つの場合（−（黒の６角形）−）、死骸が ５つの場合（−ム一）、および死骸が１０の場合（−１−）である。図７Ｂは、 汚染された個体に暴露した場合を示し、非感染（−■−）、感染（−ロー）、対 照（−■−）および対照（−ロー）である。

図８は、ハエ類を昆虫病原性真菌に感染させるチャンバーの斜視図であり、ハウ ジング、培地、胞子を形成している真菌培養物および誘引剤で構成されている。

図８Ａはチャンバーの外側から見た図であり、図８Ｂはチャンバーの底の部分の 図である。

図９は、Ｍ、ドメスチ力の死亡率（生存率％）を暴露時間の関数として示すグラ フであり、メタルヒジウム・アニソブリエを含有するチャンバー（−口−）；ホ ルムアルデヒドで処理した真菌（−◇−）；または真菌なしのチャンバー（−ロ ー）である。

図１０は、ボーベリア・バシアーナを含有するチャンバー（−◆−）または真菌 なしのチャンバー（−口−）に暴露した後、Ｍ、ドメスチ力の死亡率（生存率％ ）を時間（日）の関数として示したグラフである。

図１１は、メタルヒジウム・アニソブリエの菌株ＡＴＣＣＭＡ　３８２４９（− ◆−）、あるいはＡＴＣＣＭＡ　６２１７５を含有するチャンバー（−口−）、 または真菌なしのチャンバー（−Ｅｌ−）に暴露した後のファニカ・カニキュラ リスの死亡率（生存率％）を時間（日）の関数として示したグラフである。

図１２は、ボーベリア・バシアーナの菌株（ＡＴＣＣ２４３１８）を含有するチ ャンバー（−◆−）またはボーベリア・バシアーナの菌株（ＡＴＣＣ４８５８５ ）を含有するチャンバー（−口−）、または真菌なしのチャンバー（−［Ｅｌ− ）に暴露した後、ファニカ・カニキュラリスの死亡率（生存率％）を時間（日） の関数として示したグラフである。

図１３は、ニワトリの小屋の中に置いた、メタルヒジウム　アニソプリエを含有 する感染チャンバーに暴露した後、ムスカ・ドメスチ力（１０，０００のハエ／ とり小屋）の死亡率累積％を時間（日）の関数として示したグラフであり、４白 目に採取したハエ（−〇−）、８白目に採取したハエ（−ロー）、１１日日目採 取したハエ（−へ−）および１５日日目採取したハエ（−一一）について示す。

図１４Ａは、ニワトリの小屋の中に置いた、Ｍ、アニソプリエ含有の感染チャン バーに暴露した後の時間（日）の関数として示したＭ、ドメスチ力（１０，００ ０のハエ／とり小屋）の休止しているハエの減少百分率のグラフである。

図１４Ｂは、ニワトリの小屋の中に置いた、Ｍ、アニソブリエ含有の感染チャン バーに暴露した後のＭ、ドメスチ力（１０，０００ハエ／とり小屋）のふん／吐 物反転の減少百分率を時間（日）の関数として示したグラフである。

図１５は、ボーベリア・バシアーナ４８５８５を含有するチャンバーに暴露され たディアブロチ力・ウンデセムブンクタータの成虫の暴露後の時間（日）に対す る生存百分率（−◆−）を、真菌を含有していない感染チャンバーに暴露した対 照の場合（−ロー）と比較して示すグラフである。

ｌ肚旦１柵パ説亙 以下に述べる方法と器具は、昆虫以外の動物に対しては比較的無毒の昆虫病原性 の真菌を、経済的で費用効果の高い方式で投与する簡便で信頼性の高い方法を提 供するものである。

小形で軽量の感染チャンバーは人目につかず、昆虫がひどくはびこっている場所 に容易に置くことができるのでその器具の効力が増大する。本発明の器具は、真 菌が長期間にわたってよく増殖できる環境を提供するので、単一の器具が、短期 間で薬剤の効力が消失する噴霧器のような他の方法の場合よりも長い期間にわた って有効である。本発明の器具の接種物は寿命が長いので、有効な処理を行うの に必要な使用の頻度および全回数が少なくなる。本発明の器具の他の利点は、容 易に入手可能でかつ比較的安価な材料で作ることができ、価格効果の高い器具の 大量供給を保証することである。

ｉ東禿ヱヱ三二 本発明の感染チャンバーの主な利点は、（１）極めて多数の真菌接種物を、感染 チャンバー内の非常に小さな空間に濃縮し、入ってくる昆虫に、その昆虫に感染 して殺す胞子と強制的に接触させること、および（２）真菌の胞子を含有してい るので、環境が病原性の真菌に暴露されることが極めて少なくなりかつ真菌が環 境から保護され、その結果培養物の生存度が増大し、真菌培養物の汚染が最少に なることである。本発明の器具は、真菌が長期間にわたってよく増殖できる環境 を提供するので、単一の器具が、短期間に薬剤の効力が消失してしまう噴霧器の ような他の方法の場合より長期間にわたって有効である。本発明の器具は寿命が 長いので、有効な処理を行うのに必要な使用の回数および保全に要する時間が減 少する。本発明の器具の他の利点は、容易に入手可能でかつ比較的安価であって 、価格効果の高い器具の大量供給を保証する材料で製造できることである。

好ましい実施態様において、昆虫は、昆虫が出入する通孔を有する小さなチャン バー内で真菌に暴露されて感染する。

昆虫は、一般的な探査を行った結果、または誘引剤（例えば食餌源もしくはフェ ロモン）の作用によって器具の中に誘い込まれた結果、チャンバーに入る。チャ ンバーの中で昆虫が昆虫病原性真菌と接触すると、真菌の分性子が昆虫の体に付 着する。付着してから、分性子が外皮上で発芽し、次いで発芽した分性子の発芽 管が昆虫の魚皮に貫入する。この発芽管は、昆虫の魚皮に貫入して侵入を続けて 昆虫の体内（血管嚢）に到達して昆虫を殺す。昆虫が死んだ後、相対湿度と温度 の適切な条件が与えられると、真菌の菌糸が昆虫の死該上で胞子を形成し、他の 昆虫が、死んだ昆虫に生成した分性子に暴露されて感染する。感染した昆虫の表 面の胞子、または感染した昆虫の死体に真菌が胞子を形成した後の感染昆虫の死 体の表面の胞子に、他の昆虫が暴露されると、感染した昆虫を通じて他の未感染 の昆虫に病原体が伝播される。ある種の昆虫はこの胞子を摂取することがあり、 昆虫の死の原因になったり、死なせることがある。

ｌｌ立慮訳 昆虫病原性真菌の２つの種であるメタルヒジウム・アニソブリエとボーベリア・ バシアーナの各々の少なくとも２つの菌株が、ゴキブリ、ハエおよびとうもろこ し根食い虫の成虫の防除に有効であることが分かった。有用な他の真菌は、人工 培地で容易に増殖し、しかも迅速に増殖して大量の分性子を生成する真菌である 。その例としてはベルティシリウム（Ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍ）とベシロマイ セス（Ｐａｅｃｉｌｏｍｙｃｅｓ）属の亜種がある。有用な真菌は、感染した昆 虫から、または米国、メリーランド州２０８５２、ロックビル、パークローン・ ドライブ１２３０１のアメリカン　タイプ　カルチャー　コレクション（ｔｈｅ 　Ａｍｅｒｉｃａｎ　Ｔｙｐｅ　Ｃｕ１ｔｕｒｅ　Ｃｏ１１ｅｃｔｉｏｎ）から 分離株として得ることができる。後者からは真菌を制限なしで入手することがで きる。

（こ　いる立 感染チャンバーに用いることができる適切な培地は公知である。当業者にとって 公知であって市販されている培地の例としてはジャガイモ、デキストロース、寒 天またはライス寒天がある。

メタルヒジウム属とボーベリア属の真菌の有用な培地の一例は、１％のデキスト ロース、１％の酵母エキス、５％の米粉、１．５％の寒天および０．５％の５Ｘ 　Ｄｕｂｏｉｓ胞子形成塩で構成されている。５Ｘ　Ｄｕｂｏｉｓ胞子形成塩は 、１５ｇ　（ＮＨ４）　２ｓＯａ／１０１００Ｏ＋０゜３０ｇ　Ｍｇ５０４７Ｈ ２０／１０１００Ｏ；０．１５ｇ　Ｍｎ５ＯＪ２０／１０１００Ｏ；０．０３７ ５ｇ　ＣｕＳｏ４５Ｈ２０／１０１００Ｏ；０．０３７５ｇ　ＺｎＳ０４７Ｈ２ ０／１０００＋１＋１：および０．０３８ｇＦｅ５Ｏａ　７Ｈ２０／１０１００ Ｏで構成されている。各基が完全に溶解してから次の塩が添加され、得られた溶 液はオートクレーブで処理される。他の有用な培地は、当業者に知られているか 、または当業者は公知の培地を最適化して得ることができる。

に・　る　の 図１に示すように、ゴキブリに感染させるのに適切な感染チャンバー１０は、皿 １６例えば１００Ｘ１５ａ＋ｍのプラスチック製ペトリ皿に、５０ｍ１の真菌１ ４用培地１２を注入することによって作ることができる。適切な真菌病原体の胞 子を培地に接種する（接種は、培地の表面を真菌胞子を保持する接種用ループで ストリークするか、または胞子を液体培地と混合することによって行う）。図２ に示すように、２８℃、７５％相対湿度のもとに７日間増殖させると、真菌１４ は菌糸１８と分生子２０からなる厚い層を生成して培地１２の表面を覆うように なる。次にその皿１６を上下逆転させて、真菌増殖物１４を有する培地１２をチ ャン１＜−１０の天井にする。

至上２２辷＝λ反肚 チャンバーは、ガラスもしくは金属を含む通常の材料で作ることができるが、押 出成形もしくは型成形を行うことができるプラスチックで作って経費を最小にす ることが好ましい。

チャンバーは昆虫が自由に通行できるように充分に大きな開口を備えていなけれ ばならない。チャンバーの頂部は底部の上にしっかりと取り付けるのが好ましく 、またはチャンノイーは一体物として製造される。食餌誘引剤と昆虫の着地プラ ・ノドホームを配置する場合には、その位置は、昆虫を胞子にしっかり接触させ る位置でなければならない。チャン／＜−は、感染性を最大にするために、真菌 がチャンノイーの底部、頂部および／または側部で増殖するように設計すること ができる。

昆虫は、チャンバー内で真菌に接触したときか、またはブルーミング中に脚に付 着した胞子から感染する。

図１に示すように、滅菌ポリスチレンバッド２２を、チャンバー１０の底部２４ に配置する。上下逆転させたチャンバー１０には、チャンバーの天井の胞子を形 成した真菌２６の表面とチャンバーのポリスチレンの床部２２との間に２〜３ｍ ｍの間隔を設けである。図１に示すように、ゴキブリがチャンバー１０を通過す るとき真菌に強制的に接触させる。

チャンバー１０の横断面図を図３に示す。開口２８ａ〜２８ｆがチャンバー１０ の外周部３０に設けられ、各開口は９ａ＋ａの正方形であり、感染チャンバーの 外周に等間隔で接地されている。開口の大きさは昆虫の大きさに比例している。

例えばより大きな開口は、コバネゴキブリ（Ｏｒｉｅｎｔａｌ　ｃｏｃｋｒｏａ ｃｈ）のような大形の種のゴキブリの防除に用いられる。チャンバーをゴキブリ がはびこっている生息領域に置くと、ゴキブリは開口を通ってチャンバーに入り 、真菌の胞子に強制的に接触させられる。

威　チャンバーを　いて　させることがで　る病原体になる真菌が入っている感 染チャンバーは、有効量の真菌が昆虫に投与される場合、チャンバーを通過する ように、誘引されるか、または刺激される各種の昆虫に対して有用である。後記 の実施例は、２つの種のゴキブリ、２つの種のハエ、およびとうもろこし根食い 虫の成虫すなわち甲虫の一種に対する効力を実証している。ハエについて特に普 通のイエバエであるＭ、ドメスチカが記載されているけれども、“ハエ”という 用語は、本願で用いる場合、本発明の器具に入って昆虫病原性真菌に感染するあ らゆる種類の飛行性昆虫を意味する。飛行性昆虫の例としては、小イエバイ（Ｆ ａｎｎｉａ　Ｃａｎ１ｃｕｌａｒｉｓ）、ツェツェバエ（ｔｅｓｔｓｅ　ｆｌｙ ）、チチュウ力イミバエおよびオリエンタル　ミバエ（Ｏｒｉｅｎｔａｌ　ｆｒ ｕｉｔ　ｆｌｙ）のような他のハエ類、スズメバチ（ｖａｓｔ）Ｓ）、コナジラ ミ、ならびに例えばとうもろこし根食い虫のディアブロチ力・ウンデセムブンク タータのようないくつかの昆虫の成虫形が含まれる。

誘」Ｌ創 有用な誘引剤は、防除する昆虫の種類によって決まる。例えばハエ類に対する誘 引剤には、干しぶどうのような果物、ＣａｒｌｓｏｎおよびＢｅｎｚａ、　Ｅｎ ｖｉｒｏｎ、　Ｅｎｔｏｍｏｌ、　、　２巻、５５５〜５６０頁、（１９７３） に記載されている性フェロモンのノ＼工誘引剤のようなフェロモン類、および米 国、ミネソタ州、ミネアポリスのＭｃＣｌａｎｇｈｌｉｎ、Ｇｏｒｍｌｅｙ　ａ ｎｄ　Ｋｉｎｇ　Ｃｏ、社のＬｕｒｓｅｃｔＴｌ″という食餌誘引剤のような合 成化合物が含まれる。また、チャンバーの位置のみならずチャンバーの形および ／または色も飛行性昆虫を誘引するのに利用できる。誘引性餌に対するノに類の 空間的および時間的な応答、ならびに各種の餌の誘引性と処方について行われた ３つの研究が報告されている。すなわちムスカ・ドメスチ力についてのＷｉｌｌ ｓｏｎとＭｕｌｌａの報告Ｅｎｖｉｒｏｎ。

Ｆｎｔｏｍｏｌ、　４　（３）巻、３９５〜３９９頁、　（１９７５）および同 ２（５）巻、８１５〜８２２頁、　（１９７３）、ならびにＭｕｌｌａら、Ｅｎ ｖｉｒｏｎ、　Ｅｎｔｏｍｏｌ、６６（５）巻、１０８９〜１０９４年、　（１ ９７３）である。

下記の実施例は、本発明を限定するものではないが、３種の別の種類の昆虫を防 除する感染チャンバーの効力を実証するものである。すべての場合、感染チャン バー内に存在する真菌類によって、昆虫集団は有意に減少した。

実施例１：メタルヒジウム・アニソプリエ菌株ＰＡ−２による、ブラテラ・ジャ ーマニカの異なる発育期における感染と死亡 試験は、ゴキブリを保持するのに箱型のプラスチック製容器（６Ｘ１２Ｘ４イン チ）を利用した。ふたには１０簡の円形通気孔（直径３７８インチ）をつけた。

この通気孔には昆虫かにげるのと湿分がたまるのを防止するため虫網でおおった 。ブラテラ・ジャーマニカ（ドイツゴキブリ）の次のような３つの異なる発育期 について試験した。すなわち第３虫齢期の未成熟ゴキブ１ハ第６虫齢期の未成熟 ゴキブリ、および成虫ゴキブリである。１箱当り、各発育期の１０匹づつの雄と 雌合計２０匹の昆虫を試験した。各発育期毎に２回づつ試験した。真菌なしの感 染チャンバーに暴露させた対照昆虫を、各発育期における正常ゴキブリの死亡率 を決定するために利用した。

１つの感染チャンバーを容箱の中の一端に置いた。チャンバーは、真菌がチャン バーの天井についている方式で置いた。

チャンバーの側部の通孔は、ゴキブリがこの器具に入ることができるように開放 されていた。ゴキブリの餌のＰｕｒｉｎａＲｊａｂ　ｃｈｏｖと水は前記箱の他 方の端部に置いた。

ゴキブリが感染チャンバーに入ると、真菌の分生子がゴキブリに付着し、その分 生子が発芽してゴキブリの体に侵入し、ゴキブリは死んだ。

ゴキブリの死亡率は、６週間にわたって、１週間毎に計算した。上記の試験およ び他の類似の試験の結果を図４と５および表１に示すが、全ての発育期のドイツ ゴキブリに対する本発明の器具の効力を明確に実証している。

表１：Ｍ、アニソブリエの菌株ＰＡ−２に感染したゴキブリのゴキブリの感染チ ャンバーに　生存しているゴキブリの暴露後の週　パーセント 発育期 ゴキブリの対照集団の生存率は９０％より大きかった。この真菌菌株、メタルヒ ジウム・アニソブリエ菌株ＰＡ−２は、最初に、ゴキブリをメタルヒジウム・ア ニソプリエに暴露し、死んだゴキブリから真菌を分離し、ついでその真菌を人工 培地で培養することによって選択した。

実施例２：　、　チ　ンバーによるゴキブリの　日にわたるこの試験は、本発明 の器具が長期間にわたって活性の昆虫病原性真菌培養物を保持するのに有効であ り、かつ感染チャンバー内の真菌胞子が、多週間にわたってゴキブリに対しての 感染性を保持していることを実証している。実用的な観点から、この試験の重要 性は、本発明のチャンバーが商業上容認できる期間にわたって有用であり得るこ とを実証していることである。

先の試験の場合と同様に、感染チャンバーは発育期が異なるゴキブリが入ってい るプラスチック箱の中に置いた。３個目と６透口に、感染チャンバーを、対応す る発育期の別の（未感染の）ドイツゴキブリ２０匹が入っている新しい箱の中に 移動させた。チャンバーを置いた容箱のゴキブリの死亡率を、−週間間隔で６週 間にわたって計算した。この試験の結果を表２に示す。

表２：感染チャンバーの有効寿命 チャンバーの　チャンバーに　暴露されたコ゛キブリ使用期間　暴露後の週　各 主船の生存％週　１１１ＶＩ　成虫 ０２　９５　９０　９Ｂ ３　Ｂｏ　、２：ｌ　１３ ５　５Ｂ　１０　３ ：ｌ　８８　４５　４５ この試験から結論できるよう（こ、ゴキフ゛ＩＪの数を減らす感染チャンバーの 効力は、チャン、ｚ＋−を新しく作ったとき（チャンバーの使用期間ゼロ）とチ ャン／　（−を３週間〜６週間使用したときと同じであった。例え（ｆ第６虫齢 のゴキブ１〕（ヨ、すでに６週間使用したチャンバーに暴露された場合、新しい チャンバー（使用期間ゼロ）に暴露されたゴキブリとほとんど同じ生存率を示し た。これらの試験結果はチャンバーが６週間を越える期間にわたって殺虫効力を 保持していることを証明し、チャンバーが少なくとも６週間はゴキブリの数を有 意に減少させるのに使用し得ることを示している。この試験を変化させて行った が、同じ結果を示した。ドイツゴキブリの５つの集団を、Ｍ、アニソブリエＡＴ ＣＣ６２１７６を含有する単一の感染チャンバーに連続的に３週間づつ暴露した 。その結果を図５に示すが、感染チャンバーは、１５週間に至ってさえも高度に 有効であることを証明している。

対照のゴキブリの生存率はすべての場合、９０％より大でこの試験は、感染にゴ キブリ誘引剤を導入することによって感染チャンバーの殺ゴキブリ効力を改善で きるか否かを確かめる試験であった。２種の誘引剤すなわち／　ｚｊナナエキス とＰｕｒｉｎａＲ１ａｂｏｒａｔｏｒｙ　ｃｈａＷを試験した。誘引剤は感染チ ャンノイーの床の上に置いた。

この試験で実施した方法は実施例１と２に記載されているのと同様であり、ドイ ツゴキブリの成虫についての結果を図６に示す。その結果は、ゴキブリ誘引剤を 感染チャンＭ−に添加すると、誘引剤を添加しなかったチャンバーに比べて、ゴ キブリの死亡率が増大するようであることを示している。

実施例４：メ　ルヒジウム・アニソプリエ　ＰＡ−２によるペリブラネ　・アメ リカーナの爪　と この試験の方法は、ペリプラ不夕・アメリカーナ（アメリカゴキブリ）を試験昆 虫として使用し、濡れたスポンジを箱の中にいれて相対湿度を高くし、ゴキブリ に対しての真菌の活性を増大させたことを除いて、実施例１．２及び３の試験方 法を利用した。

結果を表３に示した。

アニソブリエ　ＰＡ−２の煕　の≦ ゴキブリを感染チャンバー　ゴキブリの生存率に暴露した後の週　（％） 対照ゴキブリの生存率は９０％より大であった。

上記の試験は、適切な器具を使用した場合、ゴキブリにＭ。

アニソブリエの選択された菌株を感染させることができることを実証した。以下 の試験では、他の昆虫病原性真菌を、感染チャンバーに用いてゴキブリを殺すこ とができることを実−すとによるブラテラ・ジ　−マニカ　ドイッゴキブリ　の 感　と この試験では、異なる有効な病原性真菌のボーベリア・バシアーナとベシロマイ セス・ファリノスス（Ｐａｅｃｉｌｏｍｙｃｅｓ　ｒａｒｉｎｏｓｕｓ）菌株３ ８　Ｆ−６、およびＭ、アニソブリエの第２の菌株を感染チャンバーに利用した 。この試験のその外の詳細は、ドイツゴキブリを使用している実施例１について 先に述べたのと同じである。

表４と表５に示す結果から分かるように、ボーベリア・バンアーナとＭ、アニソ ブリエの他の菌株の少なくとも１つは、第６虫齢と成虫のドイツゴキブリとアメ リカゴキブリの両方に感染して殺すのに有効である。しかし、真菌の少なくとも １つの他の菌株であるベシロメイセス・ファリノスス菌株３８Ｆ−６は、上記の 条件下ではゴキブリに対して病原性でながった。

表４：Ｍ、アニソブリエ菌株ＰＡ−２、Ｍ、アニソブリエ菌株１９５８、ポーベ リア・バシアーナ菌株２５２　Ｆ−９、およびペシロマイセス・ファリノスス菌 株３８　Ｆ−６による、ブラテラ・ジャーマニカ（ドイツゴキブリ）の感染と死 亡ゴキブ１の　パーセント　■ １　１００　１００　１００　１００　１００　工００１コ　９５　９０　７５ 　７５　８０　９０Ｍａ　ＰＡ−２：　Ｍ、アニソプリエ菌株ＰＡ−２Ｍａ　Ｒ ３−７０３：　Ｍ、　７−１−　ソブリエ菌株ＲＳＲ５−７Ｏ３１９５８：　Ｍ 、アニソブリエ菌株１９５８Ｂｂ　２５２　Ｆ−９：ボベリア・バシアーナ菌株 ２５２　Ｆ−９Ｐｆ　３８　Ｆ−６：ペシロマイセス・ファリノススｇ株３８　 Ｆ−にの試験から、Ｍａ　Ｐａ−２，Ｍａ　Ｒ５−７０３，Ｍａ　１９５ｇおよ びＢｂ　２５２Ｆ−９は、ゴキブソが第６虫齢期に感染した場合、ゴキブリの生 存率を有意に減少させる事が明らがである。また、他の昆虫病原性真菌のＰ、フ ァリノススは、有意な数の未成熟ゴキブリを殺すのに有効ではながったことも同 様に明らがである。

第６虫齢のゴキブリに有効であることが見いだされた分離菌株のいくつかは、表 ５に示すように、成虫のゴキブリに対しても有効であった。

表５二Ｍ、アニソブリエ菌株ＰＡ−２，Ｍ、アニソブリエ菌株１９５８、ボベリ ア・バシアーナ菌株２５２　Ｆ−９およびベシロマイセス・ファリノスス菌株３ ８　Ｆ−６によるブラテラジャーマニ力（ドイツゴキブリ）の感染と死亡 ゴキブリ（成虫）の生存百分率 ゴキブリをチャンバー真菌　真菌菌株 ２６　１００　４５　１００　コ５　６５　１００　９０Ｍａ　ＰＡ−２，Ｍａ 　１９５ｇおよびＢｂ　２５２　Ｆ−９は成虫ゴキブリの生存率を低下させると 結論し得る。

他の毒性の真菌の他の菌株は、付着と分生子の発芽を促進する可溶性物質のよう なゴキブリの角質上の種々の成分に対する、真菌の応答について真菌をスクリー ニングすることによって単離することができる。この選択スクリーニング法によ って、有用な病原体／宿主系を開発する方法が提供され、その結果、感染チャン バーでゴキブリを防除するのに使用し得る真菌の種類が増大する。

実！！４１：胞子を形成している死骸との接触および感染した個体への暴露によ るブラテラ・ジャーマニカの感染 ２０匹の未感染のゴキブリを、１．５または１０匹の胞子を形成しているゴキブ リの死骸の入っている箱の中に入れ、次いでＭ、アニソブリエ含有の感染チャン ノイーを箱の中に付は加えて入れ、死体の感染性を評価した。死亡率を一週間毎 に計算した。感染チャンバーに入っていた１０匹のゴキブリを、２０匹の未感染 のゴキブリとともに箱の中に入れ、−週間毎に２回死亡率を計算しく四重）、暴 露されたが生きているゴキブリの感染性を評価した。胞子を形成している死骸と の接触による死亡率、および感染した固体に暴露したことによる死亡率それぞれ の結果を図７Ａと図７Ｂに示す。

この試験は、結論として、暴露されたが生きているゴキブリと、胞子を形成して いるゴキブリの死骸は健康なゴキブリに対して高度に感染性であることを実証し ている。

実施例７：感染チャンバー内でのムスカ・ドメスチカの真菌による感染 図８Ａと図８Ｂに示すように、感染チャンバー４０は、真菌培地４４用容器４２ 、および昆虫がチャンバーの中に自由に近づける開口４８を有するチャンバー用 ふた４６を作る標準的な技術で製造し得る。真菌は培地４４で増殖し、菌糸５０ と胞子５２を生成する。食餌誘引剤５４を、チャンバー４０の内部の胞子５２の すぐ近くに置く。誘引剤は、真菌と直接接触するのを避けるために、容器４２ま たはふた４６に取り付けられたプラットホーム上に任意に配置される。また、こ のプラットホームはハエ類の着地用プラットホームとしての働きをし得る。含水 量は、チャンバーの構造、例えば開口の大きさと数によって調節できる。好まし い実施態様では、チャンバーは飛行性昆虫を最も誘引しそうな位置にフック５８ でつるされる。

これらの感染チャンバーは下記の試験に使用した。イエバイのさなぎを、胞子を 形成している真菌の入うている感染チャンバー（処理チャンバー）または真菌な しの対照チャンバーが入っている閉じたがこの中に配置した。さなぎから羽化し て成虫が生成した、成虫のハエがエネルギー源と水を確実に得られるよう、各小 屋に、蔗糖、粉末牛乳、水および綿花が入ったバイアルを入れた。

羽化して成虫のハエが生成した後、死亡率を毎日記録しプロットした。処理チャ ンバーから選択した死亡ハエの表面を滅菌し、顕微鏡で検査し、感染しているこ とを確認し、次に、処理培養物中にあった昆虫病原性真菌が死んだハエから増殖 するか否かを確かめるため湿潤チャンバー内でインキュベートした。

真菌のメタルヒジウム・アニソブリエまたはボーベリア・バシアーナを含有する チャンバーに成虫のハエを暴露したところ、真菌なしのチャンバーに暴露したハ エと比べて、イエバエ成虫の生存率は有意に減少していた。結果をそれぞれの真 菌について図９と１０に示すと図９はハエが、Ｍ、アニソブリエに暴露された場 合の試験結果を要約している。真菌に暴露されてわずか５日後に８０％のハエが 死に、また７日後にはほとんど１００％が死んだ。ホルムアルデヒドで殺菌した 真菌では、真菌なしのチャンバーに暴露された対照より大きい死亡率は得られな かった。

図１０は、ハエをＢ、バシアーナに暴露した試験の結果を要約している。真菌に 暴露されて４日間までにほとんど１００％のノ＼工が死んだ。

処理チャンバーから得た、Ｂ、バシアーナに暴露されて死んだハエの表面を滅菌 し、検査し、死骸の内部に真菌が入っているのを確認した。真菌がハエに感染し 、ハエの内部に侵入しハエが死んだことを実証している。

実施例８：感染チャンバー内におけるファニア力ニ牛ニラリスの真菌感染 ハエのさなぎを閉じた小屋の中に入れた。羽化してから一週間後、胞子を形成し ている真菌をもっているハエのチャンバー（処理チャンバー）または真菌なしの 対照チャンバーを小屋の中にいれた。さなぎから羽化して成虫が生成したとき、 成虫のハエがエネルギー源と水を確実に得られるように、蔗糖、粉末牛乳、水お よび綿花が入ったバイアルを各小屋の中に入れた。真菌は、米国、メリーランド 州２０８５２、ロックビル、パークローン・ドライブ１２３０１所在のＡｍｅｒ ｉｃａｎ　Ｔｙｐｅ　Ｃａ１ｔｕｒｅＣｏｌｌｅｃｔｉｏｎから入手した。ここ では真菌を制限なしで入手できる。

成虫のハエが羽化して生成した後、死亡率を毎日記録しプロットした。真菌のメ タルヒジウム・アニソプリエまたはボーベリア・バシアーナの２つの菌株のいず れかの入っているチャンバーに成虫のハエを暴露したところ、真菌ないのチャン バーに暴露されたハエに比べて成虫イエバエの生は存有意に減少していた。それ ぞれの真菌について結果を図１１と１２に示す。図１１はハエをＭ、アニソブリ エの菌株６２１７６と３８２４９に暴露した試験の結果を要約している。真菌に 暴露してかられずか６日後に８０％のハエが死に、また８日後までにほとんど１ ００％が死んだ。図１２は、ハエをＢ、バシアーナ２４３１８菌株と同４８５８ ５に暴露した試験の結果を要約している。これら真菌に暴露してから４日間まで にほとんど１００％のハエが死んだ。

実施例９：メタルヒジウム・アニソプリエが入っているチャンバーを用いて行う ニワトリ小屋内でのムスカ・ドメスチ力の防除 実験室条件ではなく実地条件下でハエを防除する、真菌含有チャンバーの効力を 、２つのニワトリ小屋１２°Ｘ１２°ｘ６’を使用して測定した。この小屋には 、１つの小屋ごとに２０チヤンバー、新しいニワトリとウシのきゅう肥、および ｔｏ、　ｏｏｏ匹のＭ、ドメスチ力のハエを入れた。チャンバーに暴露してから ４日、８日、１１日および１５日たってから１つの小屋当り１００匹のハエを取 出し、実験室で飼育して死亡率を測定した。

休止中のハエを計数するために１５枚の紙シー）（８，５°°×１１゜°）を各 小屋内に置いた。チャンバーに暴露した後に残っているハエの数の指標としてふ んと吐物の斑点を計数するため各小屋に１５枚の３”Ｘ５°°のカードを置いた 。

結果は、グラフにして図１３に示したが、真菌含有チャンバーを有する小屋から 集めたすべてのハエについては死亡率が１００％であったことを示している。休 止中のハエの数について図１４Ａに示す結果は、１５日間までにハエの７８％が 減少したことを示している。ふんと吐物の斑点の数について図１４Ｂに示す結果 は、１５日間までにハエが８０％減少したことを示す。

実施例１Ｏ：ボーベリア・バジアーナ４８５８５の入っているチャンバーを用い るディアブロチ力の防除 直径が約１３°゛で高さが７°の丸いブラッスチック製の箱から容器を作った。

直径が約３．３／４°°の２つの通孔を６箱の側面にドリルで設けた。足部のな いストッキングをこれらの通孔に接着して“スリーブとし、箱内に接近できるよ うにした。

各スリーブは、使用しないときは結んで甲虫が逃げないようにした。これらの箱 は、ふたを備えてあり、このふたは実験中はしっかりと固定されその後、取外す ことができる。刃箱の底部には濡れた濾紙を並べた。

ディアブロチ力・ウンラセムプンクチータのさなぎを２８℃に保持して羽化させ て成虫を得た。得られた成虫を集めて上記のプラスチック箱内に入れた。４０匹 の甲虫を６箱に入れた。

感染チャンバーは、真菌のボーベリア・バシアーナＡＴＣＣ４１１５８５が入っ た６０Ｘ１５＋ａ＋＊ペトリ皿（対照用には空のベトリ皿）および５オンスの紙 コツプで作製した。ワックスを塗った紙コツプを、前記ペトリ皿上にとりつける ように加工した。長さが約１．１７２”で幅が約１７２’　”の長方形の開口を ５つ、各カップの側面に切り取って作った。コツプを上下逆転させてペトリ皿の 上にのせてベトリ更にテープで固定した。干しぶどうを銹引剤としてチャンバー 内に入れた。

チャンバーはボックス内につり下げた。１回の処理当り３つの箱を使った。箱を ２７°Ｃで７６％の相対湿度のインキュベーター内にいれた。このインキュベー ター内に光源はなかった。

市販餌料（養蜂家が使用する花粉代用餌料に類似のもの）を入れた小皿、生のヅ ッキー二もしくはセイヨウカボチャの数個のスライス、および水の入った１オン スのコツプを６箱の中に置いた。水の入ったコツプには甲虫が水を飲むことがで きる綿花の芯（Ｗｉｃｋ）を設置した。

箱は一週間に３回整備した。古い試料を除き、ピペットを使って濾紙に水を補給 し、新しい試料を添加した。死んだ甲虫を取出して計数した。この試験は２箇月 間（６１日間）で終了した。

結果を図１５に示す。真菌に暴露された成虫の甲虫の生存百分率は、真菌に暴露 されなかった対照の甲虫の約１７２であった。

感染チャンバーと組合わせて昆虫病原性真菌を用いて昆虫を生物学的に防除する 本発明の方法及び器具を変えることは、上記の詳細な説明から、当業者にとって 自明のことであろう。

このような変型は本願の特許請求の範囲の通用範囲内に入るものとする。

ＦＩＧＵＲＥ　７ ＦＩＧＵＲＥ　２ ＦＩＧＵＲＥ　４ ＦＩＧ（ＪＲＥ　５ Ｆ／ＧＩＪＲＥ　６ ＦＩＧ（ＪＲＥ　７Ａ ＦＩＧＵＲＥθσ ＦＩＧＵＲＥ　Ｂ ８８丈 日（欠 ν裟 ＦＩＧＵＲＥ　７３ ＦＩＧＵＲＥ　１４σ ＦＩＧＵＲＥ　１４ｂ ＦＩＧＵＲＥ　１５ 補正書の写しく翻訳文）提出書（特許法第１８４条の７第１項）

Claims (15)

【特許請求の範囲】
1. １．昆虫が中に入る少なくとも１つの入口を具備し、昆虫に対して病原性である 真菌の栄養培地上の生きた培養物の、昆虫に致命的に感染するのに有効な量を含 有する、昆虫に対し誘引性のチャンバーを有する、昆虫防除器具。
2. ２．飛行性昆虫が、ゴキブリ、ハエ、スズメバチ、コナジラミ、および飛行形甲 虫からなる群から選択される請求項１記載の器具。
3. ３．病原性真菌が、メタルビジウム属、ボーベリア属、ベルチシリウム属、ペシ ロマイセス属の種およびその組合わせからなる群から選択される請求項２記載の 器具。
4. ４．さらに、チャンバーの含水量を調節する手段を具備している請求項１記載の 器具。
5. ５．チャンバーの形態が、昆虫を真菌に強制的に接触させる形態である請求項１ 記載の器具。
6. ６．チャンバーが、飛行性昆虫に対して誘引性の色、形、位置およびその組合わ せからなる群から選択されるチャンバーの特徴のために誘引性である請求項１記 載の器具。
7. ７．チャンバーが、化学的誘引剤、フェロモンおよび飼料からなる群から選択さ れる組成物のために誘引性である請求項１記載の器具。
8. ８．昆虫が中に入る少なくとも１つの入口を具備し、昆虫に対して病原性である 真菌の栄養培地上の生きた培養物の、昆虫に致命的に感染するのに有効な量を含 有する、昆虫に対して誘引剤のチャンバーを提供することからなる昆虫の死亡率 を増大させる方法。
9. ９．昆虫が、ゴキブリ、ハエ、スズメバチ、コナジラミ、および飛行形甲虫から なる群から選択される請求項８記載の方法。
10. １０．病原性真菌が、メタルビジウム属、ボーベリア属、ベルチシリウム属、ベ シロマイセス属の種およびその組合わせからなる群から選択される請求項８記載 の方法。
11. １１．さらに、チャンバーの含水量を調節することを含む請求項８記載の方法。
12. １２．さらに、チャンバー内に、真菌培養物のすぐ近くにプラットホームを提供 する請求項８記載の方法。
13. １３．さらに、飛行性昆虫に対して誘引性の色、形、位置およびその組合わせか らなる群から選択される特徴を有するチャンバーを作ることによってチャンバー を誘引性にすることを含む請求項８記載の方法。
14. １４．さらに、化学的誘引剤、フェロモンおよび飼料からなる群から選択される 組成物を添加することによってチャンバーを誘引性にすることを含む請求項８記 載の方法。
15. １５．さらに、防除すべき昆虫が常に出入する場所にチャンバーを置くことを含 む請求項８記載の方法。