JPH06501107A - 化学的に抑圧された検出による電気泳動 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 化学的に抑圧された検出による電気泳動技術分野 本発明はアニオンまたはカチオンの検出のために毛管電気泳動およびイオン抑圧 を使用する方法および装置に関する。

背景技術 毛管電気泳動は小孔毛管中の電気泳動を含む周知技術である。この試みは巨大分 子を含むイオン種の有効な分析的分離法を与える。代表的な毛管電気泳動装置は 図１に示される。これから理解されるように、毛管は電解質を含む２つの溶媒貯 槽の間に配置される。貯槽のそれぞれに存在し１００ａｎの毛管当り３０ｋＶま で上方に送達しうる電力供給に結合された電極は、毛管の孔を通して荷電イオン 種を駆動する電圧勾配を与える。２つの高電圧電極の間の点に検出器が配置され て毛管中で移動する種々のイオン種の検出を可能にする。このように配置された 検出器は時としてオン・カラム検出器と呼ばれる。

検出された溶質の性質に部分的に依存して毛管電気泳動によって分離された溶質 を検出するために多数の試みが開発された。ＵＶ吸収および蛍光は最もふつうに 使用される検出方法であった。マススペクトル、放射線計量および電気化学法の 検出も使用された。電気化学的検出に関しては、電流計量法および伝導度法も使 用された。

毛管中の亀裂をカバーするために多孔質ガラス毛管を使用するオフ・カラム電流 計量検出も報告された。

３０３Ａ、エンド・カラム電流計量および伝導度検出も行なわれた。Ｈｕａｎｇ 、らのＡｎａｌ、　Ｃｈｅｍ、　（１９９１）６３．１８９−１９２゜電気化学 的技術を使用するオン・カラムおよびエンド・カラムの検出に伴なう顕著な問題 は毛管を横切って電気勾配を発生させるために電極に加える高電圧の効果である 。この高電圧勾配（代表的に２０〜３０ｋＶの範囲にある）の小さな変動は、電 流計量検出および伝導度検出に使用する電圧（一般にこのような検出装置におい て１ボルト未満が使用される）に顕著な衝撃をもつ。

オフ・カラム電気化学検出についてさえ、毛管の孔の長さを横切って電圧勾配を 発生させるために流出物中に必要とされる電解質の比較的高濃度の存在により、 ノイズ問題への顕著な信号が存在する。これは伝導度を利用する検出にとって特 に問題である。このような測定は、検出電極におけるレドックス反応に主として 基づく電流計量検出よりもより顕著に電解質濃度によって悪影響を受けるからで ある。

電解質抑圧は伝導度検出と組合せてイオン交換クロマトグラフにおいて主として 使用されたけれども（たとえば米国特許第３．８９７．２１３号、同第３．９２ ０．３９７号、同第３、９２５．０１９号、同第３．９５６．５５９号、同第４ ．４７４．６６４号、同第４．７５１．００４号、同第４．４５９．３５７号、 および同第４、、９９９．０９８号参照）、このような抑圧は毛管電気泳動につ いて使用するには適さなかった。

上記の引用特許は本願出願臼より前の開示を示すためにのみ提供するものであり 、本発明で述べることが従来の発明によって本発明がそのような開示を予見する に値しないことを認めるものと解すべきではない。

次のことは異なった観点からの背景技術の議論である。

電気泳動はよく開発された化学分析技術である。この課題の回顧文献はＣｈｒｏ ｍａｔｏｇｒａｐｈｙ−Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌｓ　ａｎｄＡｐｐｌｉｃａｔｉ ｏｎｓ　ｏｆ　Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ　ａｎｄ　Ｅｌｅｃｔｒ’ｏｐ ｈｏｒｅｔｉｃＭｅｔｈｏｄ、　Ｐａｒｔ　Ａ　；の第９章のＦｕｎｄａｍｅｎ ｔａｌｓ　ａｎｄ　Ｔｅｃｈｎｉ−ｑｕｅｓ、　（Ｅ、　Ｈｅｆｔｍａ、ｎｎ著 、　Ｅｌｓｅｖｉｅｒ　５ｃｉｅｎｔｉｆｉｃ　Ｐｕｂｌｉｓｈ−ｉｎｇ　Ｃｏ ｍｐａｎｙ　１９８３年刊行）である。該文献を引用によってここにくみ入れる 。毛管電気泳動（ＣＥ）は電気泳動における重要な進歩であり、Ａｎａｌｙｔｉ ｃａｌ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　１２９８（１９８１）に及び２２２５ｃｉｅｎｃ ｅ　２６６（１９８３）に報告されているようにＪｏｒｇｅｎｒｏｎおよびＬｕ ｋａｃｓによって水先案内された。

これらの文献のそれぞれを引用によってここに十分にくみ入れる。比較的小さい 直径の毛管がＣＥにおいて使用されるので、毛管中に問題となる熱勾配を発生す ることなしに比較的高い印加電圧を使用することができる。ＣＥ中の分離効力は 、とりわけて印加電圧の関数である。

ＣＥの効率は比較的高く、たとえば４００．０００理論段数以上である。

代表的なＣＥ実験の記述は次のとおりである。５０〜１００μｍの内径のシリカ 毛管に好適な伝導バッファーを充てんする。毛管の出口端部を、バッファーおよ び電極を含む貯槽中に浸漬する。関心のある蛍光イオンを含　・む試料を毛管の 入口端部に導入し、次いで毛管の入口端部を、バッファーおよび別の電極を含む 別の貯槽に入れる。３０．０００ボルトの電圧をこれらの電極間に加える。蛍光 検出器を毛管の出口端部近くに配置して関心のあるイオンを検出する。

関心のある試料イオンの移動を２つの因子すなわち（１）電気泳動的移動および （２）電気浸透流によって制御する。

電気泳動的移動は電場の影響下での反対の荷電の電極に向っての関心のあるイオ ンの移動である。電気浸透流はバッファーに接触する毛管内面が固定した電荷の 場を含みそしてこの場かまた対応する可動性のカウンターイオンをバッファー中 にもつときの毛管中のバッファーのバルクの流れである。非変性のシリカ毛管表 面はシラノール（Ｓｉ−ＯＨ）基を含み、これらの基はバッファーのｐＨが約２ より大きいときに負に荷電され（Ｓｉ−０−）　、バッファーのｐｔｌが約２よ り小さいときに正に荷電される（Ｓｌ−ＯＨ２つ。

表面が負に荷電されるとき、負に荷電された表面の対応する可動性カウンターイ オンたとえばナトリウムイオン（Ｎａつは電場の影響下に移動し、プロセス中に それらと共にバルク溶媒をけん引する。従って浸透流の方向は、表面が負に荷電 されているとき、正電極から負電極への方向である。

表面が正に荷電されているときは、正の荷電された表面の対応する可動性カウン ターイオンたとえばビホスフ工−トイオン（ＨＰＯ４″□２）は電場の影響下に 移動し、このプロセスにおいてそれらと共にバルク溶媒をけん引する。

従って浸透流の方向は、表面が正に荷電されているとき、負電極から正電極への 方向である。正に荷電された表面はまた、たとえば疎水性カチオンを毛管内面に 吸着させることによってもえられる。

表面か荷電されていないときは、電気浸透流は存在しない。従って、関心のある イオンの電荷（正または負）毛管表面の荷電の性質と程度、および印加電圧の極 性に依存して、電気浸透は電気泳動移動を増大させ、妨害し、または無視さえす ることができる。

決定されるべき試料成分は毛管の入口端部から、毛管の出口端部近くに配置の検 出器に走行しなければならないので、それらが所望方向で移動することが必須で ある。

カリホルニア州すニイベールのＭｉ　Ｉｆｏｒｄ、　Ｍａｓｓａｃｈｕｓｅｔｔ ｓａｎｄ　Ｄｉｏｎｅｘ　ＣｏｒｐｏｒａｔｉｏｎのＷａｔｅｒｓ　Ｃｈｒｏｍ ａｔｏｇｒａｐｈｙＤｉｖｉｓｉｏｎは共通イオン分析用ＣＥ機器の先導的な国 内製造業者である。ＷａｔｅｒＳ機器は間接の光計量検出を使用する。たとえば １９９１年９月号のＬＣＧＣマガジンの第６３４頁に始まるＪａｎｄｉｋらの雑 文を参照されたい。該雑文を引用によってここに十分にくみ入れる。Ｄｉｏｎｅ ｘシステムは光計量検出器または蛍光検出器を使用する。たとえば１９９１年９ 月発行のしＣＧＣマガジンの第６３９頁゛　のＤｉｏｎｅｘ広告を参照されたい 。ここにこれを引用によって十分にくみ入れる。現在の時点において、共通イオ ンの決定についてのＣＥにおける好ましい検出法は間接の光計量検出である。

たとえＣＥが多くの利点をもっているとしても、それは改良を必要とするいくつ かの特性を有する。たとえばＣＥの濃度検出限界は改良されうることである。

発明の開示 本発明によれば、毛管電気泳動によって分離されたイオン種の検出感度を増大さ せるための装置と方法から構される装置は毛管電気泳動分離手段、抑圧手段およ び検出手段を含む。毛管電気泳動分離手段は代表的に、第１電極手段をも含む第 １電解質貯槽に連通ずる第１端部をもつ小孔毛管を含む。毛管はまた第２に極手 段を含む第２電解質貯槽に連通ずるイオン伝導手段をもつ第２端部を備える。毛 管の第１端部は毛管の全体の孔中にくまなく存在する第１貯槽から電解質を受取 ることができる。

毛管の第２端部のイオン伝導手段は、毛管および第１および第２の貯槽中に電解 質が存在し、電圧が電極に印加されるときに第１電極と第２に極との間に発生す る電流を伝導することができる。この構造は両電極の間に発生する電流と高電圧 勾配とから抑圧手段および検出手段を実質的に隔離する。

抑圧手段は入口および出口の端部をもつ少なくとも１つの毛管流出室を備える。

この人口端部は毛管電気泳動分離手段における毛管の第２端部に連通している。

抑圧手段はまた毛管流出室手段と再生室手段を分離する少なくとも１つの再生室 手段および少なくとも１つのイオン交換膜を含む。このイオン交換膜は分離され るべきイオン種のカウンターイオンと同じ電荷の（すなわち正または負の）イオ ンに対して浸透性であり、分離されるべきイオン種と同じ電荷のイオンに対して 非浸透法である。

装置の検出手段は抑圧手段の出力端部に連通しており、そこから流出する解像イ オン種を検出するのに好適である。

操作において、試料のイオン種は電極を横切って電圧を加えることによって発生 する電圧勾配により電気泳動分離手段の毛管の孔中で分離される。この分離手段 からの流出物は抑圧手段に特に毛管流出室手段に流れる。再生室手段はカチオン とアニオンに解離する再生剤を含む。

毛管流出室と再生室とを分離するイオン交換膜は検出されるべきイオン種のカウ ンターイオンと同じ電荷のイオンに対して好ましくは浸透性であるので、このよ うなカウンターイオンは膜を横切って再生室に入ることができる。同じ電荷の再 生剤イオンは膜を横切って再生室から毛管流出室中の流出液中に入ることができ る。正味の効果は関心のあるイオン種のカウンターイオンを交換することができ る。

たとえば、アニオンを検出しようとし且つ電解質が水酸化ナトリウムであるなら ば、代表的な再生剤は硫酸である。電解質のそれぞれ１モルについて、１個のナ トリウムイオンが再生剤としての硫酸からの１つのヒドロニウムイオンて置換さ れて水を形成する。同様に、関心のあるアニオン種と組合せられたナトリウムイ オンは再生剤溶液からのヒドロニウムイオンで置換される。その結果として、流 出液の全体の伝導度は減少し、イオン種およびカウンターイオンの全体の伝導度 は増大する。このように処理された流出液は次いで検出器に流れる。電解質の全 濃度は減少したので、伝導度を検出する感度は増大する。

次のことは異なった観点からの本発明の記述である。

本発明はＣＥ用の抑圧された検出を提供する。本発明の主なる利点は改良された 検出限界である。本発明の１つの装置の態様は毛管を一般に含む種類の改良され た毛管電気泳動装置である。この毛管は試料の入口部分と出口部分、毛管入口部 分に電気的に連通ずる第１に極、毛管の出口部分に電気的に連通ずる第２に極、 および第１と第２の電極に電気的に連通ずる電力供給源を備える。その改良はイ オン交換の手段を含み、このイオン交換手段は毛管に液体連通しており、且つこ のイオン交換手段は静止状態にある。本発明の別の装置態様は一般に毛管を含む 種類の改良された毛管電気泳動装置である。この毛管は試料の入口部分と出口部 分、多孔質導管部材、毛管に液体連通する多孔質導管部材の溝、毛管の入口部分 に電気的に連通ずる第１Ｋ極、多孔質導管部材に電気的に連通ずる第２電極、第 １と第２の電極に電気的に連通ずる電力供給源を備える。その改良はイオン交換 の手段を含み、そのイオン交換手段は多孔質導管部材の溝に液体連通しており、 そのイオン交換手段は静止状態にある。

本発明の１つの方法の態様は次の諸工程を含むことを特徴とする電気泳動アニオ ン分析法である；（ａ）関心のあるアニオンをバッファー溶液中の電気泳動によ って分離し、（′ｂ）カチオン交換用の静止手段を使用してバッファーのカチオ ンを再生剤カチオンと交換し、それによってバッファーの電気伝導度を減少させ て抑圧されたバッファーを製造し、そして（Ｃ）抑圧されたバッファーの電気伝 導度を測定して分離されたアニオンを決定する。

本発明の別の方法の態様は次の諸工程を含むことを特　・徴とする電気泳動カチ オン分析法である＝（ａ）関心のあるカチオンをバッファー溶液中の電気泳動に よって分離し、（１））アニオン交換用の静止手段を使用してバッファーのアニ オンを再生剤アニオンと交換し、それによってバッファーの電気伝導度を減少さ せて抑圧されたバッファーを製造し、そして（Ｃ）抑圧されたバッファーの電気 伝導度を測定して分離されたカチオンを決定する。

図面の簡単な記述 図工はＥｗｉｎｇらのＡｎａｌ、　Ｃｈｅｍ、　（１９８９）６１．２９２Ａ− ３０３Ａの図１から誘導される毛管電気泳動を行なうための従来技術の装置の図 式ダイヤグラムである。

図２は本発明の態様の１つの図式ダイヤグラムである。

図３は実施例１で使用したイオン伝導手段と抑圧手段の図式ダイヤグラムである 。

図４は本発明の１つの態様を使用して伝導度を測定することによって種々のアニ オン種の分離と検出を実証する電気泳動図である。

図ＩＡは本発明の１つの装置剤の概要図である。

図２Ａは本発明の１つの抑圧前の態様の横断面図である。

図３Ａは本発明の１つの電気伝導度セルの態様の横断面図である。

図４Ａは本発明の別の電気伝導度セルの態様の横断面図である。

図５Ａは本発明の別の装置態様の概要図である。

図６Ａは本発明の１つのバッファー・ブリッジの態様の横断面図である。

発明の実施態様 本発明の装置は非常に多数の溶質を、そのような溶質でアニオンまたはカチオン である限り、決定するのに有用である。好適な例として表面の水または他の液体 たとえば工業用化学廃水、体液、飲料たとえば果汁およびワインおよび飲料水が あげられる。「イオン種」なる用語をここに使用するとき、それはイオン削除の 種、および本発明の系の条件下でイオン化しうる分子の成分を包含する。

ここに開示の装置と方法によって特に検出されつるイオン種は可視光または紫外 光を弱くのみ吸収する種であり、それ故に光計量吸収検出によって貧弱に検出さ れる。

弱い吸収性の種の例は通常の無機イオンたとえばクロライド、サルフェート、ナ トリウムおよびカリウムならびに多くの有機種たとえばアセテート、スクシネー ト、およびトリエチルアミンである。

ここに使用する「毛管電気泳動分離手段」とは電解質が通過しうる細長く狭い孔 を含み第１および第２の電解質貯槽に接触して配置しつる端部をもつイオン種方 離用のすべての手段のことをいう。好ましい態様によって、従来技術の装置にお いて一般に使用される代表的な狭い孔の毛管が使用されるけれども、「毛管」な る用語はこのような毛管に限定されない。むしろ、ここに使用する毛管は従来技 術の毛管装置の内部寸法程度の寸法をもつ固体支持体中のすべての細長い孔のこ とをいう。このような毛管は１〜１０００μｍ１更に好ましくは２５〜１００μ ｍの範囲の許容しうる孔径をもつ。一般に、このような毛管の長さは約１ｃｍ〜 １０ａｎ、更に好ましくは２０ａｏ−１００ａｎである。これらのパラメータを もとにして、本発明を実施するのに使用する毛管はシリカのような固体支持体中 に形成させた不規則な又は規則的な形状の毛管または溝を含むことができる。い くつかの場合、固体支持体材料の２つの別々のブロック中に毛管の一面を作りこ れらをその後に合体させて完全な毛管を作ることが望ましいことがある。一般に 、このような非標準毛管の断面積は通常の毛管の断面積に実質的に類似である。

図２を参照して、本発明を行なうための単純化した装置がそこに示しである。こ の系は毛管１０を含み、これは電解質貯槽１４に浸漬した第１端部１２を含む。

またこの貯槽内に含まれて第１電極１６および電解質１８がある。第」電極１６ は高電圧供給ユニット２０に接続される。毛管ＩＯの第２端部はこれに取付けた イオン伝導手段２２をもつ。このイオン伝導手段は毛管１０中の電極１６と２４ との間に発生する高電圧電流からえられる電流の伝導を可能にするいずれかの伝 導装置でありうる。

このような伝導手段は、イオン伝導手段から下流に抑圧手段および検出器を使用 するために、この伝導手段が抑圧管３４に向かうイオン伝導手段２２によって実 質量の物質の流れが通るようにえらばれることを必要とする。

伝導手段の１つの態様は毛管（複数）の間の間隙に１個以上の絶縁孔をもつ絶縁 スリーブを含んで成る。あるいはまた、絶縁スリーブは弛く嵌合して毛管との間 に流出物の間隙を形成していてもよい。イオン伝導手段の更なる態様は、内部に 含まれる孔を通してイオンを伝導しつる多孔質スリーブを含む毛管間隙を含む。

このような間隙、孔または穴は毛管１０の第２端部の溶離液と第２を極２４との 間にイオン電流用の溝を与えるために使用され、物質の流れの少なくとも約５０ ％がこのような伝導手段を通過し、下流の物質の流れの溝２６中にとどまるよう にえらばれるべきである。一般に、このような間隙、孔または穴は高電圧回路を 完成するに十分なイオン電流を与えるに十分に大きくあるべきであるが、溶離液 を貯槽３０にそらすほど大きくはない。

好ましい態様において、イオン伝導度部材２２は両性の膜、好ましくは毛管ｌＯ の第２端部を下流の導管２８の端部に係合させつるスリーブである。このような 両性膜のスリーブを生成させる特異的な方法は実施例１に記載されている。他の 方法は当業者にとって容易に明らかであろう。そして基本的にアニオン性官能基 とカチオン性官能基の双方をもつ膜を誘導することを含む。

第２の貯槽３０はまた電解質３２を含み、これは第２の電極２４およびイオン伝 導部材３２と接触して高電圧回路を完成する。その結果として、検出器までの残 存流路にそう電圧降下は無視しうる程度である。

一般に、少なくとも第１貯槽および毛管の孔に存在する電解質は検出されるべき イオン種に応じて変わる。イオン種がアニオンである場合、電解質は好ましくは 弱酸の塩の形体である。例としてホウ酸ナトリウム、重炭酸ナトリウムおよび水 酸化ナトリウムである。検出されるべきイオン種かカチオンである場合、電解質 は好ましくは弱塩基の塩の形体である。このような電解質の例は塩化水素である 。

然しながら、本発明を実施する重要な面は、電気泳動電極１６と２４を横切って 印加されるべき電圧の適切な選択を含む。高電圧回路はイオン伝導部材２２およ び電解質溶液３２を介して電極１６と電極２４との間に生成されるので、イオン 種および電解質を抑圧部材に駆動するための電圧電位はイオン伝導部材から下流 には存在しない。この問題を克服するために、電圧はそれが第１貯槽から検出器 への方向に電気泳動の流れを誘起するようにえらばれる。電気内浸透流は毛管の 内面と電解質溶液との間の界面に存在する局部電圧のために主として発生特表千 ６−５０１１０７　（７） される。この電位差、ときとしてゼータ電位差と呼ばれる、は毛管の内面を形成 する物質およびこの内面に接触する溶液に応じて変わる。

シリカ毛管において、毛管の内壁の電荷は色であり、電気内浸透流の方向は負電 極に向かうか又は正電極から遠ざかる。シリカ毛管の壁をコーティングまたは誘 導化することによって電気内浸透流の方向を逆にすることができる。それによっ て壁の荷電は負ではなくて正になる。

検出器への電気内浸透流を確保するためのこのような環境下で、第工貯槽中の電 極の極性は逆転されるべきである。表面電荷をもたないポリエチレンまたはポリ スチレンのような物質から作った毛管を使用することもできる。

これらの物質は次いで正または負の電荷を発生するように官能化することができ る。このような官能化はたとえば周知の化学を使用してそれぞれたとえば第４級 化またはスルホン化することによって行なわれる。電気内浸透流を制御する主要 な理由は分離されるイオン種の分離解像を制御することにある。電気内浸透流が イオン種の電気泳動方向と同じ方向であるならば、分離解像は電気内浸透流が電 気泳動方向と反対の方向にある場合よりも小さい。

下流の接続器２８は再生剤室３６に含まれる抑圧管３４に接続される。再生剤室 ３６は検出されるべきイオン種におよび毛管電気泳動に使用する電解質に好適な 再生剤３８を含んでいる。

抑圧管３４は毛管ｌＯからの流出液を含むために室を形成する内部孔を備える。

この毛管流出液室の入口部分は下流の導管部材２８に接続される。この毛管流出 液と再生剤室との間にイオン交換膜が配置される。一般に、抑圧管３４はイオン 交換膜を含んでいて毛管流出液室と再生剤室との間のイオン輸送を促進する。イ オン交換膜はイオン種のカウンターイオンに対して好ましくは浸透性であるよう にえらばれる。すなわち、イオン種がアニオンであるならば、そのカウンターイ オンはカチオンである。イオン交換膜はカチオンに対して浸透性であるようにえ らばれる。その逆もまた真である。このような管状膜は商業的に購入することが でき、たとえば米国ニューシャーシー州のトリム・リバーのＰｅｒｍａ　Ｐｕｒ ｅ　Ｐｒｏｄｕｃｔｓから入手しつるカチオン交換膜管Ｎａｆｉｏｎである。然 しなから、抑圧手段はイオン交換膜の管状形体である必要はないということを理 解すべきである。別の態様として米国特許第４．９９９．０９８号に記載されて いるような平らな膜をあげることかできる。該米国特許を引用によってここにく み入れる。

下流の導管２８の横断面積は毛管１０の孔の横断面積と同じであるのか好ましく 、そして更に毛管流出液室３４の横断面積は実質的に同じ横断面積をもつことか 好ましいけれども、このような横断面積か同じであることは必ずしも必要ではな い。有用な結果は、円形孔の毛管１０の内径が７５ミクロンであり、Ｎａｆｉｏ ｎカチオン膜の管の内径が４００ミクロンであるときにえられた。然しなから、 これらの結果は、３５０μｍの直径のプラグをＮａｆｉｏｎ管の内側に挿入して イオン抑圧器の有効横断面積を減少させるときに更に改良されつる（実施例１参 照）。

抑圧器の長さは流出液中のカチオンまたはアニオンを交換するに十分な長さであ るべきであるが、実質的な帯拡大をもたらすほど長くあるべきではない。このよ うな抑圧器の長さは１００μｍ〜１０ｃｍ、好ましくは１ｍｍ〜ｆａｎでありう る。

以上は電解質濃度を減少させるための受動拡散抑圧部材を述べたものである。然 しなから、すべての抑圧器系を本発明の実施に使用することがこれらの抑圧器と して、イオン交換膜を横切って電場を加えて、他の場合には拡散限定交換機構に よってえられるもの、よりも上のイオン交換速度を増大させるものがあげられる 。たとえば米国特許第４．９９９．０９８号を参照。該米国特許を引用によって ここにくみ入れる。

イオン交換膜を通過した後に、このように処理された流出液は電解質、および関 心のあるイオン種に対するカウンターイオン、に実質的に乏しい。このように処 理した流出液は存在するイオン種を枯渇させるために伝導度セル中の流れに指向 させることができる。あるいはまた、検出電極４２および４４の一方または双方 を抑圧器から出る処理流出液の流れに挿入することもできる。このように使用す るとき、抑圧器の出口は再生剤溶液３８中に保持することができる。ただし電極 はこの端部区域内に十分に配置されていて伝導度は流出液の流れへの再生剤イオ ンの拡散によって悪影響を受けないことか必要である。一般に、１個以上の電極 が抑圧器出口に挿入されるとき、流出液の線状流量は、そうでない場合に抑圧器 の目的を無効にする、流出液流中への再生剤イオンの電位拡散を相殺するに十分 であるべきである。

以上は本発明を開放管の毛管帯域の電気泳動の文脈内で主として記述したけれど も、その他の態様の毛管電気泳動も本発明を使用して実施しうると信ぜられる。

このような他の態様として等風速泳動、ミセル電気動力学毛管クロマトグラフ、 毛管ゲル電気泳動、および等電気集光があげられる。

以上は本発明の特定の態様を示すものであり、添付の請求の範囲の限定として解 釈されるべきではない。

実施例１ 図３を参照して、分離毛管１ｏは７５μｍの内径、３７５μｍの外径、および７ ５０の長さの寸法をもつ溶融シリカ毛管であった。それは同じ内径と外径および ６巾の長さの第２の溶融シリカ毛管２８に向って突き出ていた。

約４００μｍの内径、８００μｍの外径および約１０の長さの寸法をもつ両性イ オン交換膜も毛管１ｏおよび２８の２本を一緒に保持するためのスリーブとして 作用した。両性膜スリーブをそのスリーブのまわりにナイロン・モノフィラメン ト（７５μｍの直径）をしっかりと巻きつけることによって毛管にとり付けた。

両性膜スリーブはポリエチレン／ポリビニルアセテート製の基材管から製造した ものであった。この管（商標名Ｍｉｃｒｏｌｉｎｅ）は米国ニューシャーシー州 つォーレンのＴｈｅｒｍａｌ　ＰｌａｓｔｉｃＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃから入手し たものであった。これを約５０重量％ＶＢＣまでビニルベンジルクロライド（Ｖ ＢＣ）で放射線グラフトした。グラフト化した管をメタノール中ジメチルアミノ アセトニトリルの１Ｍ溶液中で１４時間還流し６時間冷却した。メタノールおよ び水の中での洗浄後に、管をＩＭの水酸化ナトリウム溶液中で約６０”Ｃに９０ 分間加熱した。この反応は−ＣＮを−ｃｏ！（：加水分解する。えられる管は膜 中のＶＢＣ分子に共有結合した次の官能基を含む：　−Ｎ”（ＣＨ３）２ｃＨｔ ｃＯ２゜毛管２８の他端を４００μｍの内径、８０ｏｔＬｍ（７）外径およびｌ ａｏの長さの近似寸法をもつＮａｆｉｏｎカチオン交換チュービング（米国ニュ ージャージ州トイス・リバーのＰｅｒｍａ　Ｐｕｒｅ　Ｐｒｏｄｕｃｔｓ）に挿 入し、抑圧器として働がせた。ナイロン・モノフィラメントによる締めっけによ って抑圧器を毛管２８に保持した。抑圧器の内部容積の多くを、端部をエポキシ 樹脂でシールした毛管から作った３５０μｍの内径Ｘ５ｍｍの長さのプラグによ り拾い上げた。管２８の出口から検出器電極４４までの抑圧器の近似長さは６ｍ ｉ＋であった。

１５０μｍの内径、３５０μｍの外径Ｘ２ａｎの長さの°毛管に１２７μｍのプ ラチナ線を挿入し、残りの容積をエポキシ樹脂で充てんすることによって検出器 電極の１つを製造した。毛管の面を磨いてプラチナ線の端部を露出させた。この 電極を抑圧器の内側的１ｍに挿入し、プラチナ線の他端を伝導度検出器ケーブル に接続した。第２検出器４２を再生剤溶液３８中に入れた。

第１電解質貯槽中の及び第２電解質貯槽中の双方の電解質は１０ｍＭのホウ砂溶 液（ｐＨ９，１）であった。再生剤３８は０．１５　ｍＭの硫酸溶液であった。

印加した高電圧は２０ｋＶであり、これは２０．５μＡの電流をもたらした。５ 秒の電気泳動射出を使用して次のアニオン類のそれぞれの２０μＭの試料を射出 した：キネート、ベンゾエート、ベンゼンスルホネート、フタレート、ホスフェ ート、ホーメート、およびフルオライド。

これらの結果を図４に示す。

本発明の次の実施態様は異なった観点からのものである。図ＩＡを参照して、そ こには溶融シリカ毛管１０ａを含む本発明の装置の態様の概要図が示しである。

毛管１０ａの入口端部は第１バツフアー貯槽１２ａに含まれるバッファー１１ａ 中に浸漬された状態で示されている。

このバッファーは通常は水を基材とするものであるが、その他の溶媒たとえばア ルコール、アセトニトリル、テトラヒドロフランおよびグリコールを基材とする ものであってもよい。電力供給源１３ａはえらばれた電圧（または電流）を線１ ５ａを介して第１電極１４ａに供給する。分析されるべき試料１６は試料貯槽１ ７ａ中に含まれている。分析されるべき試料１６ａは関心のあるイオンを含む。

毛管１０ａの出口部分は抑圧器１８ａに接続される。高電圧の電力供給源１３ａ は線１９ａを介して抑圧器１８ａに接続される。再生剤２０ａは再生剤貯槽２１ ａ中に含まれる。管２２ａは貯槽２１ａを抑圧器１８ａに接続する。再生剤２１ ａは抑圧器１８ａを通り、管２３ａを通って流れて廃棄される。以下に詳細に論 するように、抑圧器１８ａはイオン交換物質もしくは手段を含み、再生剤はこの イオン交換物質または手段を再生するために使用される。管２４ａは抑圧器１８ ａを電気伝導度検出器２５ａに接続する。管２６ａは伝導度検出器２５ａを任意 の追加検出器２７ａたとえば光学的もしくは電気化学的検出器に接続する。管２ ８ａは第２バツフアー貯槽２９ａに含まれるバッファー）１ａに浸漬され、検出 器２７ａに接続された状態で示しである。この管２８ａは好ましくは下記に論す る理由により比較的大きい内径をもつ。毛管１０ａの入力部分を貯槽１２ａから もち上げて一時的にこれを試料貯槽１７ａ中に入れその後にこれを貯槽１２ａに 戻すことによって、試料１６ａの少量（小分は分別量）を毛管１０ａの入口部分 に導入することができる。これは手動で行なうこともできるが、当業技術に周知 の自動装置によって行なうのが好ましい。毛管１０ａの入口部分にこのようにし て導入する試料１６ａの容量はもちろん、毛管１０ａの入口部分を試料１６ａ中 に浸漬する時間に応じて変わる。試料１６ａの水準は第２バツフアー貯槽２９ａ 中のバッファー１１ａの水準よりも高いからである。あるいはまた試料１６ａは 、電気泳動移動および／または電気浸透流によって、毛管１１ａの入口部分に導 入することかでき、試料注入弁を使用することもできるべきである。溶融シリカ 毛管１．０　ａが本発明において好ましい。当業技術において周知のようにその すぐれた熱伝導度特性のためである。然しなから、このような毛管は本発明にお いて臨界的ではな（、毛管はほとんどすべての材料で作ることができる。更にま た、毛管１０ａは横断面が円形であるのが好ましいが、これも必須ではない。単 一毛管１０ａが本発明において好ましいが、これも必須ではない。すなわち本発 明の毛管はその最も広い範囲において下記に定義するような導管である。本発明 の毛管の入口部分は分析されるべき試料を導入する部分である。本発明の毛管の 出口部分は電気泳動帯域が毛管を去り、たとえば抑圧器に入る、部分である。通 常は、毛管の入口部分および毛管の出口部分は毛管のそれぞれ反対側の端部であ る。

然しこれは本発明において臨界的ではない。すなわち、たとえば、試料を毛管の 中央に導入することができ、関心のあるカチオンが毛管の一端に向って移動し、 関心のあるアニオンが毛管の他端に向って移動することができるということが本 発明において意図されている。

図２Ａを参照して、そこには抑圧器１８ａの詳細な横断面図が示しである。たと えばシリコーンゴムまたは可塑化ポリ塩化ビニルで作った管状ジャケット３０ａ がＮＡＦＩＯＮスルホン化フルオロポリマーイオン交換物質で作った長いチュー ビング３１ａを包囲している。毛管１０ａの出口部分はチュービング３１ａの一 端に挿入された状態で示しである。チュービング２４ａはチュービング３１ａの 他端に挿入された状態で示しである。ミニ特表千６−５０１１０７　（９） された状態で示しである。別のミニチュア・ティー３３ａはジャケット３３ａの 他端に挿入された状態で示しである。毛管１０ａは室温加硫シリコーンゴムのよ うな密封剤３４ａによってティー３３ａ中に密封される。毛管２４ａは室温加硫 シリコーンゴムのような密封剤によってティー３２ａ中に密封される。プラチナ 線１９ａはジャケット３０ａに挿入された状態で示してあり、ジャケット３０ａ 内の線１９ａは第２電極である。あるいはまた、電極３６ａはチュービング３１ ａに埋め込むこともできるが、好ましくはそれはチュービング３１ａの外部に配 置される。いくつかの場合には、電極３６ａは管３１ａの端部近くに配置されそ この場所で毛管１０ａに接続されるのがよい。いうまでもなく、電極は貯槽２１ ａ中に配置されつる。

チュービング３１ａの内径は毛管１０ａの内径とほぼ同じであるのが好ましい。

このような小孔のイオン交換材料は商業的に入手することはできない。最小の内 径のＮＡＦＩＯＮチュービングは約４００ミクロンの内径をもつ。然しなから、 このような材料の内径は次のような多数の技術によってより小さくすることがで きる：（ａ）ＮＡＦＩＯＮチュービングをアルコール中で膨潤させ次いでこれを 延伸する、（ｂ）ＮＡＰＩＯＮチュービングを加熱し次いでこれを延伸する、（ Ｃ１上記の（ａ）と（ｂ）を組合せる、（ｄ）直径の小さい線たとえば７５ミク ロンのタングステン線をＮＡＦ　ＩＯＮのコロイド分散液に浸漬し、この線に析 出したＮＡＦＩＯＮを硬化し、次いでこのようにして形成したＮＡＦ　ＩＯＮ管 からの線を延伸する（ｇｒｏｔの米国特許第４．７３１．２６３号はＭａｒｔｉ ｎがＡｎａｌｙｔｉｃａｌ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ１６３９（１９８２）において 述べているようなＮＡＦ　ＩＯＮのコロイド分散液の製造を開示している：該米 国特許および該文献を引用によってここに十分にくみ入れる）することによって 小さい内径のＮＡＦＩＯＮ管を製造し、そして好ましくはｔｅｌ膨潤したイオン 交換材料の固体片に小さい孔をドリリングまたはピアシングによって孔あけし、 次いでこれを乾燥して収縮させ毛管１０ａおよびチュービング２４ａにする。

ここに導管とは少なくとも１つの溝を貫通させたすべての構造体として定義され る。チュービング３１ａはイオン交換材料を含む導管の一例である。然しなから 、本発明は管の形状の導管に限定されない。たとえば導管はイオン交換材料の孔 のあいた物体の形状であることができ、例として通常のイオン交換樹脂の孔あき ビードたとえばＤＯＷＥＸ５０またはＤｏＷＥＸ２イオン交換樹脂の孔あきビー ドがあげられる（ＤＯＷＥＸはザ　ダウケミカル　カンパニーの商標である）。

イオン交換材料のシートを本発明の導管に使用することもできる。たとえば好適 な溝および開けをもつプレート間にそれをクランプすることによって使用するこ とができる。本発明の導管は好ましくは、溝から導管の外部にのびるイオン交換 材料から成る。然しなから、本発明は導管がイオンを導く材料又はイオンを導く ために製造しつる材料たとえばセルロースアセテート膜または多孔質ガラスから 成るときでさえよく操作することができる。多孔質導管は以下に論じるように液 体イオン交換器を受け入れることもできる。

図３Ａを参照して、そこには電気伝導度検出器２５ａのセルの１つの態様の詳細 を横断面図が示しである。このセルは好適に小さい直径たとえば１２５ミクロン の内径をもつ柔軟性チュービング３６ｂの短片を含む。微細なプラチナ線３７ａ がチュービング３６ｂを貫く状態で示しである。別の微細プラチナ線もチュービ ング３６ａを貫く状態で示しである。線３７ａおよび３８ａは、チュービング３ ６ｂを微小皮下注射針たとえば３０ゲージ皮下注射針でまず孔あけし、プラチナ 線を皮下注射針に挿入し、次いでプラチナ線を所定の場所に保持しながら注射針 を抜くことによって、上記のように配置される。

線３７ａおよび３８ａは接触なしにできるだけ密に一緒に、たとえば１００〜３ ００ミクロンの間隔で配置される。線３７ａと３８ａは電気伝導度検出器の電極 であり、そしてもちろん、好適な電気伝導度検出器たとえばイオンクロマトグラ フ電気伝導度検出器のエレクトロエックス部分に接続される。

図４Ａを参照して、そこには電気伝導度検出器２５ａのセルの別の態様の詳細横 断面図が示しである。このセルは好適に小さい内径のたとえば１２５ミクロンの 内径の柔軟性短片を含む。ステンレス銅線４０ａがチュービング３９ａを貫く状 態で示しである。別のステンレス鋼線かチュービング３９ａの反対側の面を貫く 状態で示しである。線４０ａと４１ｂの各端部は接触なしに管中に密に一緒に、 たとえば１００ミクロンの間隔で配置される。これらの線４０ａと４Ｌａは伝導 度検出器の電極であり、そしてもちろん、好適な電気伝導度検出器たとえばイオ ンクロマトグラフ電気伝導度検出器のエレクトロニクス部分に接続される。

好ましくは、毛管１０ａの出口より後のライン中の諸要素の流れに対する抵抗は 、毛管１０ａ中に平らな前向きの流れの輪郭を保つように著しく低い。この理想 は好ましくは達成されないので、貯槽１２ａ中のバッファーの水準を貯槽２９ａ 中のバッファーの水準に対して僅かに上昇させるのが有利である。

図５八を参照して、そこには図ＩＡに示す態様に類似の本発明の別の装置態様の 概要図が示しである。図ＩＡに示す諸要素と同じである図５Ａ中に示す諸要素は 同じ参照番号をもつ。然しなから、図５八においては線１９ａはもはや抑圧器１ ８ａに向けられていない。その代り、線１９ａはバッファー・ブリッジ４２ａに 向けられている。バッファー１１ａはまた第３のバッファー貯槽４３ａに含まれ ている。管４４ａは貯蔵４３ａをバッファー・ブリッジ４２ａに接続する。貯槽 ４３ａ中のバッファー１１ａはバッファー・ブリッジを通り、管４５ａを通って から廃棄の方向に流れる。以下に詳細に論じるように、バッファー・ブリッジ４ ２ａは多孔質材料またはその他の手段たとえば単に破砕した毛管（ａｌａ　Ｌｉ ｎｈａｒｃｓ　ａｎｄＫｉｓｓｉｎｇｅｒ、　Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ　Ｃｈｅｍ ｉｓｔｒｙ　２０７６（１９９１）、引用によってこれを十分にここに（み入れ る）を含む。これはバッファー・ブリッジ内のバッファーと毛管１０ａの出口の 中にある又はそこを出るバッファーとの間に電気的連通を提供する。バッファー ・ブリッジはチュービング４６ａによって抑圧器１８ａに接続される。

図６Ａを参照して、そこにはバッファー・ブリッジ４２ａの詳細横断面図が示し である。図６Ａを図２Ａと比較することによって理解されるように、バッファー ・ブリッジ４２ａはほとんどの点で抑圧器１８ａに類似している。たとえばシリ コーンゴムまたは可塑化ポリ塩化ビニルで作った管状ジャケット４７ａが多孔質 ガラスのような多孔質材料で作った長い管を包囲している。毛管１０ａの出口部 分は管４８ａの一端に挿入された状態で示しである。チュービング４６ａは管４ ８ａの他端に挿入された状態で示しである。ミニチュア・ティー４９ａはジャケ ット４７ａの一端に挿入された状態で示しである。別のミニチュア・ティー５０ ａはジャケット４７ａの他端に挿入された状態で示しである。毛管１０ａは室温 加硫のシリコーン・ゴムのような密封剤５１ａによってティー５０ａ中に密封さ れる。毛管４６ａは室温加硫のシリコーン・ゴムのような密封剤によってティー ４９ａ中に密封される。プラチナ線１９ａはジャケット４７ａに挿入した状態で 示してあり、ジャケット４７ａ内の線１９ａの端部は第２電極３６である。ある いはまた、電極３６ａはチュービング４８ａに埋め込むこともできるが、それは 好ましくはチュービング４８ａの外部に配置される。いうまでもなく、電極３６ ａは貯槽４３ａ中に配置することができる。バッファー・ブリッジはＷｉｌｌｉ ｎｇｆｏｒｄ　ａｎｄ　Ｅｗｉｎｇの塩ブリッジに類似している。

ただし塩溶液がたとえば好適な濃度のバッファーまたは多孔質バリヤーを横切る ことのできない大きなイオンの溶液に置き換っているという点を除いて、という ことが理解されるであろう。図５Ａの管４６ａ、２４ａおよび２６ａならびに図 ＩＡの管２４ａおよび２６ａはできるだけ短いのが好ましい。これらの管中の流 れの輪郭は一般に毛管１０ａの平らな前向きの流れ輪郭とは対照的に放物線形状 だからである。

イオン交換の手段は、カチオンを受取りそして代りにカチオンを放棄するすべて の手段、アニオンを受取りそしてアニオンを放棄するすべての手段、および固体 イオン交換材料および液体イオン交換材料を含めて塩を吸収するすべての手段（ たとえば溶液からたとえば硝酸銅を吸収するＤＯＷＥＸ４イオン交換樹脂の遊離 塩基形体、またはたとえば溶液から塩を吸収するクラウン・エーテル）としてこ こに定義される。イオンを交換するための静止手段は抑圧器１８ａを含むがまた バッファー・ブリッジ４２ａのような装置も含む。この場合、液体イオン交換器 は、たとえ液体イオン交換器がバッファーの代りに装置中に流されつるとしても 、すなわちたとえ液体イオン交換器が移動性であって装置ではないとしても、ジ ャケット４７ａ内に配置される。同様に、多孔質管４８ａは液体イオン交換器で 同化されることができ、再生剤はバッファーの代りに装置中に流されつる。イオ ン交換樹脂を含む管はイオン交換のための静止手段である。他方、バッファーが 伝導度検出器中を流れる前にＣＥ系の毛管からの流出液バッファーにイオン交換 粒子の懸濁液を導入すること（ａｌａ　Ｇｊｅｒｄｅ　ａｎｄ　５ｅｎｒｏｎ、 ヨーロッパ特許出願Ｎａ８９１１０３９４．７．刊行Ｐ！１０３４５７８２Ａ２ ．これを引用によってここに十分にくみ入れる）はイオン交換の可動手段である 。すなわち、イオン交換粒子はバッファー中を及びバッファーと共に移動する。

従って、本発明のイオン交換の手段を見分ける別の方法は、本発明のイオン交換 手段が「非侵入性」であるということである。イオン交換の非・侵入性手段とは バッファー中に導入されない手段、すなわちバッファーの流れによって完全には 包囲されない手段である。これは好ましくはバッファーの流れを再生カチオンま たはアニオンの別の資源から分離する。

アニオン分析に関して、本発明の方法の態様は図５Ａを参照することによって理 解することができる。毛管１０ａを一時的に試料１６ａに浸漬して毛管１０ａに 試料１６ａを導入する。試料は関心のあるアニオンを含む。

バッファー１１ａはポレート・バッファーのような弱酸の塩を含む。抑圧器１８ ．ａのイオン交換材料はデュポンからのＮＡＦＩＯＮなる商品名のイオン交換材 料のようなカチオン交換器である。再生剤２０ａは水素イオン源たとえば希薄硫 酸または水素イオン形体のイオン交換粒子の懸濁液である。電力供給源Ｌ３ａは 電場がバッファー・ブリッジ４２ａから及び毛管１０ａの孔にそってのびるよう に配置される。毛管が上記のように負に荷電されると、電極１４ａは正になり電 極３６ａは負になって、電気浸透流は抑圧器１８ａのカチオン交換材料に向けら れる。また、毛管１０ａが負に荷電されると、図示のあるアニオンは毛管１０ａ の内部から貯槽１２ａに移動する傾向がある。この傾向は関心のある多（のアニ オンについて、抑圧器１８ａに向うより迅速な電気浸透流によって克服される。

毛管１０ａが上記のように正に荷電されると、電極１４ａは負になり電極３６ａ は正になって、電気浸透流は抑圧器１８ａのカチオン交換材料に向けられる。ま た、毛管１０ａが正に荷電されると、関心のあるアニオンは電気浸透流と同じ方 向に、すなわち抑圧器ｆ８ａに向って移動する。従って、この態様によって正に 荷電の毛管１０ａを使用することには明白な利点がある。然しなから、これは臨 界的なことではなく、この態様において負に荷電の毛管１０ａを使用することか らも利点かえられる。図２八を参照して、抑圧器１８ａにおいて、バッファーの カチオンはイオン交換チューブ３１ａの内面において水素イオンと交換され、そ れによってバッファー１１ａは弱酸溶液に転化されて抑圧されたバッファー溶液 を形成する。この抑圧されたバッファー溶液は次いで電気伝導度検出器２５ａ中 に流れる。検出器２５ａによって決定される抑圧されたバッファーの伝導度はバ ッファー１１ａの伝導度に比べて比較的に低い。

関心のあるイオンの流れが検出器２５ａ中に流れるとき、それらは抑圧されたバ ッファーの背景で敏感に検出される。この点において、本発明はイオン・クロマ トグラフィーにおける抑圧された検出に似ている。もちろん望ましくは、関心の あるイオンは毛管１０ａにおいて従来の電気泳動によって検出された別の帯域に 解像される。抑圧器１８ａのイオン交換材料は、管３１ａの外部のまわりを流れ る希薄硫酸再生剤２０ａの流れによって再生される。上記において、バッファー は弱酸の塩を含むものであった。然しなから本発明は弱酸の塩を含むバッファー に限定されるものではなく、強塩基たとえば水酸化ナトリウムを使用することが でき、これは抑圧器によって水に転化される。伝導度検出器を使用するときの、 及びそのカチオンが再生剤カチオンに交換されるときの、バッファーは減少した 電気伝導度をもつ溶液に転化されなければならない。この点において、抑圧され た検出のイオンクロマトグラフィー技術への参照が本発明に使用しつる他のバッ ファーおよび再生剤カチオンを指示するであろう。伝導度検出器以外の別の検出 器を使用するときの、及びそのカチオンが再生剤カチオンに交換されるときのバ ッファーは、減少した検出器応答をもつ溶液に転化されなければならない。最も 好ましくは、バッファーのアニオンは関心のあるアニオンとほぼ同じ電気泳動の 可動性をもつ。

アニオン分析に関して、本発明の別の方法の態様は図ＩＡおよび図２Ａを参照す ることによって理解されつる。

毛管１０ａを一時的に試料ｌｅａに浸漬して毛管１“Ｏａに試料１６ａを導入す る。この試料は関心のあるアニオンを含む。バッファー１１ａはボレート・バッ ファーのような弱酸の塩を含む。抑圧器１８ａのイオン交換材料はデュポンから のＮＡＰＩＯＮイオン交換材料のようなイオン交換器である。再生剤２０ａは水 素イオン源たとえば希硫酸または水素イオン形体のイオン交換粒子の懸濁液であ る。電力供給源１３ａは、電場がイオン交換チューブ３１ａを横切って且つ毛管 １０ａの孔にそってのびるように配置される。毛管１０’ａが上記のように負に 荷電されると、電極１４ａは正になり電極３６ａは負になって、電気浸透流は抑 圧器１８ａのイオン交換材料に向けられる。また毛管１０ａが負に荷電されると 、関心のあるアニオンは毛管１０ａの入力部分から貯槽１２ａに移動する傾向が ある。関心のある多くのアニオンについてのこの傾向は抑圧器１８ａに向かうよ り迅速な電気浸透流によって克服される。毛管１０ａが上記のように正に荷電さ れると、電極１４ａは負になり電極３６ａは正になって、電気浸透流は抑圧器１ ８ａのカチオン交換材料に向けられる。また、毛管１０ａが正に荷電されると、 関心のあるアニオンは電気浸透流と同じ方向に、すなわち抑圧器１８ａに向けて 移動する傾向がある。従って、この態様において正に荷電の毛管１０ａを使用す ることには明白な利点がある。然しなから、これは臨界的なことであり、この態 様において負に荷電の毛管１０ａを使用することからも利点かえられる。抑圧器 １８ａにおいて、バッファーのカチオンはイオン交換チューブ３１ａの内面にお いて水素イオンに交換され、バッファー１１ａは弱酸溶液に軟化されて抑圧され たバッファーを形成する。電極３６ａが負に荷電されると、抑圧器の有効性は増 大される。抑圧されたバッファー溶液は次いで電気伝導度検出器２５ａ中に流れ る。検出器２５ａによって決定される抑圧されたバッファーの伝導度は、バッフ ァー１１ａの電導度に比べて比較的に低い。関心のあるイオンが検出器２５ａ中 を流れるとき、それらは抑圧されたバッファーの背景で敏感に検出される。この 点で、本発明はイオンクロマトグラフィーにおける抑圧された検出に類似してい る。もちろん望ましくは、関心のあるイオンは毛管１０ａにおいて従来の電気泳 動によって検出された別の帯域に解像される。抑圧器１８ａのイオン交換材料は 、管３１ａの外部のまわりを流れる希硫酸再生剤２０ａの流れによって再生され る。図ＩＡを参照して先に述べたアニオン分析についての方法の態様は、図５Ａ を参照して述べたアニオン分析についての方法の態様よりもすぐれている。それ はより簡単であり且つ恐らくはより有効であるからである。然しなから、本発明 は弱酸の塩を含むバッファーに限定されるものではなく、抑圧器によって水に転 化される水酸化ナトリウムのような強塩基を使用することもできる。伝導度検出 器を使用するときの且つそのカチオンが再生剤カチオンに交換されるときのバッ ファーは、減少された電気伝導度をもつ溶液に転化されなければならない。この 点で、抑圧された検出のイオンクロマトグラフィー技術への参照は、本発明に使 用しうる他のバッファーおよび再生剤カチオンを指示するであろう。伝導度検出 器以外の別の検出器を使用するときの且つそのカチオンが再生剤カチオンに交換 されるときのバッファーは、減少した検出器応答をもつ溶液に転化されなければ ならない。最も好ましくは、バッファーのアニオンは関心のあるアニオンとほぼ 同じ電気泳動の可動性をもつ。

カチオン分析に関して、本発明の方法の態様は図５Ａを参照することによって理 解されうる。毛管１０ａを一時的に試料１６ａに浸漬して毛管１０ａに試料１６ ａを導入する。試料は関心のあるカチオンを含む。バッファー、１１ａは弱塩基 の塩たとえばアニリン塩酸塩またはグリジニウム塩酸塩のような双性イオン化合 物を含む。抑圧器１８ａのイオン交換材料はダウからのＤＯＷＥＸ２なる商品名 のイオン交換材料のようなアニオン交換器である。再生剤２０ａは水酸化イオン 源たとえば希薄水酸化ナトリウムまたは水酸化イオン形体のイオン交換粒子の懸 濁液である。電力供給源１３は、電場がバッファー・ブリッジから且つ毛管１０ ａの孔にそってのびるように、配置される。毛管１０ａが上記のように正に荷電 されると、電極１４ａは負になり、電極３６ａは正になって、電気浸透流は抑圧 器１８ａのアニオン交換材料に向けられる。また、毛管１０ａか正に荷電される と、関心のあるカチオンは毛管ｔｅａの入口部分から貯槽１２ａに移動する傾向 がある。関心のある多くのカチオンについて、この傾向は抑圧器１８ａに向けて のより迅速な電気浸透流によって克服される。毛管１０ａが上記のように負に荷 電されると、電極１４ａは正になり電極３６ａは負になって、電気浸透流は抑圧 器１８ａのアニオン交換材料に向けられる。また、毛管１０ａが負に荷電される と、関心のあるアニオンは電気浸透流と同じ方向に、すなわち抑圧器１８ａに向 って移動する傾向がある。従って、この態様において負に荷電された毛管１０ａ を使用することに明白な利点がある。然しなから、これは臨界的なことではなく 、この態様において正に荷電の毛管１０ａを使用することからも利点かえられる 。図２Ａを参照して、抑圧器１８ａにおいて、バッファーのアニオンはイオン交 換チューブ３１ａの内面において水酸化イオンと交換されて、バッファー１１ａ は弱塩基溶液に転化されて抑圧されたバッファー溶液を形成する。この抑圧され たバッファー溶液は次いで電気伝導度検出器２５ａ中に流れる。検出器２５ａに よって決定される抑圧されたバッファーの伝導度はバッファー１１ａの伝導度に 比べて比較的に低い。関心のあるカチオンが検出器２５ａに流れるとき、それら は抑圧されたバッファーの背景で敏感に検出される。この点で本発明はイオンク ロマトグラフィーにおける抑圧された検出器に類似である。もちろん望ましくは 、関心のあるカチオンは毛管１０ａ中の従来の電気泳動によって検出された分離 帯域に解像される。抑圧器１８ａのイオン交換材料は、管３１ａの外部のまわり を流れる希薄水酸化ナトリウム再生剤２０ａの流れによって再生される。上記に おいて、バッファーは弱塩基の塩を含むものであった。然しなから、本発明は弱 塩基の塩を含むバッファーに限定されるものではなく、たとえば抑圧器によって 水に転化される硫酸のような強酸を使用することもできる。伝導度検出器が使用 されるときの且つそのアニオンが再生剤アニオンに交換されるときのバッファー は、減少した電気伝導度をもつ溶液に転化されなければならない。この点で、抑 圧された検出のイオンクロマトグラフィーへの参照が本発明に使用しつる他のバ ッファーおよび再生剤カチオンを指示するであろう。伝導度検出器以外の別の検 出器を使用するときの且つそのアニオンが再生剤アニオンで交換されるときのバ ッファーは、減少した検出器応答をもつ溶液に転化されなければならない。最も 好ましくは、バッファーのカチオンは関心のあるカチオンとほぼ同じ電気泳動の 可動性をもつ。

カチオン分析に関して、本発明の別の方法の態様は図ＩＡおよび図２Ａを参照す ることによって理解されつる。

毛管１０ａを一時的に試料１６ａに浸漬して毛管１０ａに試料１６ａを導入する 。試料は関心のあるカチオンを含む。バッファー１１ａは弱塩基の塩たとえばア ニリン塩酸塩溶液またはグリシニウム塩酸塩のような双生イオン化合物の塩を含 む。抑圧器１８ａのイオン交換材料はダウからのＤＯＷＥＸ２なる商品名のイオ ン交換材料のようなイオン交換材料である。再生剤２０ａは水酸化イオン源たと えば希薄水酸化ナトリウムまたは水酸化イオン形体のイオン交換粒子の懸濁液で ある。電力供給源は電場がイオン交換チューブ３１ａを横切って且つ毛管１０ａ の孔にそってのびるように配置される。毛管が上記のように正に荷電されると、 電極１４ａは負になり電極３６ａは正になって、電気浸透流は抑圧器１８ａのア ニオン交換材料に向って流れる。また、毛管１０ａが正に荷電されると、関心の あるカチオンは毛管ＬＯａの入力部分から貯槽１２ａに移動する傾向がある。こ の傾向は、関心のある多くのアニオンについて、抑圧器１８ａに向けてのより迅 速な電気浸透法によって克服される。

毛管１０ａが上記のように負に荷電されると、電極１４ｃは正になり、電極３６ ａは負になって、電気浸透流は抑圧器１８ａのアニオン交換材料に向かう。また 、毛管１０ａが負に荷電されると、関心のあるアニオンは電気浸透流と同じ方向 に、すなわち抑圧器１８ａに向かって移動する傾向がある。従って、この態様に おいて負に荷電された毛管１０ａを使用することには明白な利点がある。然しな から、これは臨界的なことではなく、この態様において正に荷電された毛管１０ ａを使用することからも利点かえられる。抑圧器１８ａにおいて、バッファーの アニオンはイオン交換チューブ３１ａの内面において水酸化イオンと交換され、 それによってバッファーは弱塩基溶液に転化されて抑圧されたバッファー溶液を 形成する。電極３６ａが正に荷電されると、抑圧器の有効性は増強される。抑圧 されたバッファー溶液は次いて電気伝導度検出器２５ａ中に流れる。検出器２５ ａによって決定される抑圧されたバッファーの伝導度はバッファーｌｌａの伝導 度に比べて比較的に低い。関心のあるカチオンが検出器２５ａ中に流れると、そ れらは抑圧されたバッファーの背景で敏感に検出される。この点で本発明はイオ ンクロマトグラフィーにおける抑圧された検出に似ている。もちろん望ましくは 、関心のあるカチオンは毛管１０ａにおける従来の電気泳動によって検出さされ た分離帯域に解像される。抑圧器１８ａのイオン交換材料は、管３１ａの外部の まわりを流れる希薄水酸化ナトリウムの流れによって再生される。図ＩＡを参照 して上述したカチオン分析の方法の態様は図５を参照して上述したカチオン分析 の方法の態様よりも好ましい。簡単であり且つ恐らくはより有効であるからであ る。

上記において、バッファーは弱塩基の塩を含むものであった。然しなから、本発 明は弱塩基の塩を含むバッファーに限定されるものではなく、たとえば抑圧器に よって水に転化される硫酸のような強酸を使用することもできる。伝導度検出器 を使用するときの、且つそのアニオンが再生剤アニオンに交換されるときのバッ ファーは、減少した電気伝導度をもつ溶液に転化されなければならない。この点 で、抑圧された検出のイオンクロマトグラフィーへの参照は、本発明に使用しつ る他のバッファーおよび再生剤カチオンを指示するであろう。伝導度検出器以外 の別の検出器を使用するときの且つそのアニオンが再生剤アニオンに交換される ときのバッファーは、減少した検出器応答をもつ溶液に転化されなければならな い。最も好ましくは、バッファーのカチオンは関心のあるカチオンとほぼ同じ電 気泳動の可動性をもつ。

中性毛管を使用すれば、毛管中に電気浸透流は存在しない。毛管中に電気浸透流 が存在しなければ、検出器に分離イオンを送る手段も存在しない。この問題は本 発明において、たとえばバッファー、水または溶媒の流れを毛管の出口部分に導 入することによって克服される。図５Ａを参照して、毛管１０ａの出口部分とバ ッファー・ブリッジ４２ａとの間にティーが配置される。［ＩＡを参照して、毛 管ＬＯａの出口部分と抑圧器Ｌ８ａとの間にティーが配置される。このバッファ ーの流れの毛管入口部分に向うバックフローは、たとえば貯槽１２ａにバッファ ー１１ａを完全にみたし、次いで貯槽１２ａを密封することによって阻止するこ とができる。

電気伝導度検出器が本発明において好ましい。然しなから、電気伝導度検出器は 本発明において臨界的ではない。たとえば光計量検出器を使用することもできる 。使用しつるその他の検出器として質量分光計、屈折率検出器、および誘電常数 検出器があげられる。すなわち、バッファーが抑圧されるときにイオンをより良 く検出するすべての検出器を使用することができる。

本発明の毛管は上記のように負に荷電され又は正に荷電されることができ、ある いは中性でありうる。毛管が正に荷電され且つ関心のあるイオンがアニオンを含 むならば、あるいは毛管が負に荷電され且つ関心のあるイオンがカチオンを含む ならば、関心のあるイオンのイオン交換クロマトグラフィーならびに関心のある イオンの電気泳動が存在しつる。通常、本発明の分離のほとんどは電気泳動によ るものと信ぜられる。然しな力（ら、本発明の毛管がイオン交換材料（たとえば 毛管にイオン交換樹脂を被覆するか又は毛管にイオン交換樹脂ビードを充てんし たもの、特に薄膜イオン交換器または巨大分子イオン交換器）を含むならば、イ オン交換クロマトグラフィーは本発明の重要な分離態様になりうる。

実施例ＩＡ 装置は図ＩＡに一般に示されるように組立てられる。

毛管１０ａは内径７５ミクロン、長さ６０ａｎの溶融シ１ツカ毛管である。図２ への管３１ａは長さ５Ｍであり、加熱および溶媒膨潤のＮＡＦ　１ＯＮ管を内径 １２５ミクロンに延伸することによって製造される。電極３６ａ（よ図２Ａに示 すように配置される。その極性力（抑圧器１８ａの有効性を助けるからである。

再生剤２０ａは１００μｌ／分の流量で抑圧器ｔｅａを通って流れる５　０　ミ ！Ｊモルの硫酸である。バッファー１１ａはｐＨ８，４の１００ミリモルのボラ ックスである。従って、毛管１０ａの内面は負に荷電される。試料１６ａはそれ ぞれ１０ｍｇ／ｊ’のモノクロロアセテート、ジクロロアセテートおよびトリク ロロアセテートを含む。試料は、毛管端部を試料１６ａに浸漬し、貯槽１７ａを ３０秒間貯槽２９ａより１０α上にもちあげ、次いで毛管１０ａを貯槽に戻すよ う（こ再配置することによって、毛管１０ａ（＝導入される。

２０、０００ボルトの正電圧を電極１４ａに印加する。線１９ａをアースする。

ストリップチャート・リコーダ−を伝導度検出器２５ａに接続し、フェログラム を記録する。

フェログラムは同じ３点で９分間のトリクロロアセテートのピーク、同じ４点で １分間のジクロロアセテートのピーク、および同じ４点で３分間のモノクロロア セテートのピークを示す。

実施例２Ａ 実施例ＩＡをくりかえすが、ただし再生剤は単なる脱イオン水である。フェログ ラムは同じ３点で９分間のモノクロロアセテートのピーク、同じ４点で１分間の ジクロロアセテートのピーク、および同じ３点で３分間のトリクロロアセテート のピークを示す。この試料は水が本発明において再生剤水素イオン源でありうる ことを示している。

実施例３Ａ 図ＩＡに一般に示されるような装置を組立てる。毛管１０ａは内径１５０ミクロ ン長さ４０ａｎの溶融シリカ毛管である。毛管１０ａの図面は次の試工程によっ て正に荷電されるようにした；（ａ）毛管に次のものから成る溶液を充てんする ：１００％加水分解されるポリビニルアルコール１％ニリン酸２％；ポリジアリ ルジメチルアンモニウムクロライド１％：および水９６％＝（ｂ）この毛管を９ ０°Ｃのオーブンに入れる；そして（Ｃ１この毛管を冷却し、バッファーで１時 間洗浄する。毛管中にえられる変性ポリビニルアルコールのコーティングの厚さ は約１ミクロンである。図２への管３１ａは長さ５ｒｍであり、溶媒膨潤ＮＡＦ ＩＯＮのブロックを孔あけし、次いでこれを乾燥収縮させて毛管１０ａおよび管 ２４にする。ＮＡＦＩＯＮ中に生成する溝の内径は約７０ミクロンである。毛管 １０ａに接続するＮＡＦＩＯＮブロックの端部近くに電極３６を配置して、抑圧 器の有効性に及ぼすその影響を最小にする。再生剤２０ａは１００μｌ／分の流 量で抑圧器１８ａ中に流れる５ミリモル硫酸である。バッファー１１ａはｐＨ８ ，４の１７２ミリモルのボラックスである。試料１６ａはそれぞれ１０ｍｇ／ｉ のナイトライド、ナイトレート、サルフェートおよびアセテートを含む。

毛管１０ａの端部を試料１６ａに浸漬し、貯槽１７ａを３０秒間貯槽２９ａより 上に１０ａｎもちあげ、それから毛管１０ａを貯槽１２ａに戻すように再配置す ることによって試料を毛管１０ａに導入する。２０．０００ボルトの負電圧を電 極１４ａに印加する。線１９ａをアースする。

ストリップチャート・レコーダーを伝導度検出器２５ａに接続してフェログラム を記録する。フェログラムは約３分で５分間のサルフェートのピーク、約５分間 のナイトレートのピーク、および約６分間でアセテートのピークを示す。ナイト ライドとナイトライドの分離はこれら２つのイオンの電気泳動の可動性から予期 されるよりも大きく、それは毛管１０ａ中のイオン交換クロマトグラフィーに恐 らくよるものとここでは説明される。

好ましい態様を述べたけれども、これらの態様に種々の変形を行なうことができ ること、およびこのような変形は本発明の範囲内にあることが意図されているこ と、は当業者にとって明らかであろう。

ＦＩＧ、プ△ ＦＩＣ，２Ａ ｅｂ ＦＩＧ、４Ａ Ｆｌに−５Ａ ＦＩＧ、６Ａ 補正書の翻訳文提出書（特許法第１８４条の７第１項）平成５年５月２４日

Claims (30)

【特許請求の範囲】
1. １．次の構成要素すなわち （ａ）第１電極手段を含む第１電解質貯槽に連通する第１端部と、第２電極手段 を含む第２電解質貯槽に連通するイオン伝導手段をもつ第２端部とを備える手管 を含み、毛管の第１端部が第１貯槽からの電解質を受け入れることができ、そし て毛管の第２端部におけるイオン伝導手段が、電解質が毛管および第１と第２の 貯槽に存在し電圧がこれらの電極に印加されるときに発生する電流を伝導するこ とができることを特徴とするイオン種を分離するための毛管電気泳動分離手段、 （ｂ）毛管電気分離手段から溶離した溶離液を処理するための抑圧器手段であっ て、 （１）入口端部と出口端部を備える少なくとも１つの毛管流出液室、ただし該入 口端部は毛管の第２端部に連通している、
2. （２）少なくとも１つの再生剤室手段、および（３）毛管流出液室手段と再生剤 室手段とを分割する少なくとも１つのイオン交換膜、ただし該イオン交換膜はイ オン種のカウンターイオンに対して優先的に浸透性である、 を含むことを特徴とする抑圧器手段、および（ｃ）そこから溶離する解像イオン 種を検出するのに好適な、抑圧器手段の出口端部に連通する検出器手段、を含ん で成ることを特徴とするイオン分析用の装置。 ２．検出器手段が第１および第２の間隔をおいた検出電極手段を含み、検出電極 手段の少なくとも１つが抑圧器手段の出口端部からの流出液に電気的に連通して いる請求項１の装置。
3. ３．解像イオン種の検出が抑圧器手段の出口端部からの流出液の伝導度を測定す ることを含む請求項２の装置。
4. ４．毛管流出液室および抑圧器手段中のイオン交換膜が実質的に同じ横断面積を もつ請求項１の装置。
5. ５．毛管および選択イオン交換膜チューブが実質的に同じ直径の円形横断面をも つ請求項４の装置。
6. ６．イオン伝導手段が両性イオン交換膜を含む請求項１の装置。
7. ７．次の諸工程すなわち、 （ａ）イオン種と反対の電荷の膜横断の電解質イオンを含めて、電解質溶液中に イオン種を含む試料を毛管電気泳動分離手段に通してイオン種を分離させる、た だし該毛管電気泳動手段は第１および第２端部をもつ毛管を含み、該第１端部は 電解質および第１電極手段を含む第１電解質貯槽に接触しており、そして該第２ 端部は電解質および第２電極手段を含む第２電解質貯槽に連通するイオン伝導手 段を含み、第１および第２の電極手段は電圧をこれに加えて該イオン種の分離を 生ぜしめる、（ｂ）少なくとも１つの毛管流出液室手段、再生剤を含む少なくと も１つの再生剤室手段、および毛管流出液と再生剤室手段とを分離する少なくと も１つのイオン交換膜、を備える抑圧器手段に毛管電気泳動分離手段からの流出 液を流す、ただし該イオン交換膜はイオン種のカウンターイオンに対して優先的 に浸透性であって、該カウンターイオンを該膜を横切って該再生前室手段に浸透 させ、そして同じ電荷の再生剤イオンを該膜を通過させて該流出液に送る、 （ｃ）抑圧器手段中の毛管流出液室の出口からの処理した流出液を検出手段に流 し、そこで分離イオン種を処理流出液の伝導度を測定することによって検出する 、諸工程を含んで成ることを特徴とするイオン分析方法。
8. ８．第１および第２の電極手段に加える電圧が毛管中に電気内浸透流を誘発する に十分である請求項７の方法。
9. ９．電気内浸透流が毛管の第１端部から第２端部に流れ、毛管の内面が負の荷電 をもち、そして第１電極が第２電極にくらべて正の極性をもつ請求項８の方法。
10. １０．電気内浸透流が毛管の第１端部から第２端部に流れ、毛管の内面が正の荷 電をもち、そして第１電極が第２電極にくらべて負の極性をもつ請求項８の方法 。
11. １１．試料の入口部分と出口部分をもつ導管、毛管の入口部分に電気的に連通す る第１電極、毛管の出口部分に電気的に連通する第２電極、第１および第２の電 極に電気的に連通する電力供給源を備える改良された毛管電気泳動装置において 、その改良がイオン交換の手段を含み、そのイオン交換手段が毛管に液体連通し ており、そのイオン交換手段が静止していることを特徴とする改良された毛管電 気泳動装置。
12. １２．イオン交換の手段が導管であり、この導管がイオン交換材料を含み、この 導管の溝が毛管に液体連通している請求項１１の装置。
13. １３．第２電極が導管の外部近くに配置される請求項１２の装置。
14. １４．イオン検出手段を更に含み、このイオン検出手段がイオン交換手段と液体 連通している請求項１１の装置。
15. １５．イオン検出の手段が、導管の溝に液体連通していることを更に含む請求項 １２の装置。
16. １６．イオン検出手段が導管の溝と液体連通していることを更に含む請求項１３ の装置。
17. １７．試料の入口と出口部分をもつ毛管、多孔質導管の溝が毛管に液体連通して いる多孔質導管手段、毛管の入口部分に電気的に連通している第１電極、多孔質 導管手段に電気的に連通している第２電極、第１および第２電極に電気的に連通 している電力供給源を含んで成る改良された毛管電気泳動装置において、その改 良がイオン交換手段を含み、このイオン交換手段が多孔質導管手段の溝に液体連 通しており、このイオン交換手段が静止していることを特徴とする改良された毛 管電気泳動装置。
18. １８．イオン交換手段がイオン交換導管であり、このイオン交換導管がイオン交 換材料を含み、このイオン導管の溝が多孔質導管の溝に液体連通している請求項 １７の装置。
19. １９．イオン検出手段を更に含み、このイオン検出手段がイオン交換手段と液体 連通している請求項１７の装置。
20. ２０．イオン検出手段がイオン交換導管の溝に液体連通している請求項１８の装 置。
21. ２１．次の諸工程すなわち （ａ）バッファー溶液中の電気泳動によって関心のあるアニオンを分離し、 （ｂ）このバッファーのカチオンをカチオン交換用静止手段を使用して再生剤カ チオンに交換し、それによってバッファーの電気伝導度を減少させて抑圧された バッファーを生成させ、 （ｃ）この抑圧されたバッファーの電気伝導度を測定して分離アニオンを決定す る、諸工程を含むことを特徴とするアニオン分析方法。
22. ２２．バッファーが弱酸の塩を含み、再生剤カチオンが水素イオンを含む請求項 ２１の方法。
23. ２３．バッファーが強塩基を含み、再生剤カチオンが水素イオンを含む請求項２ １の方法。
24. ２４．次の諸工程すなわち （ａ）バッファー溶液中での電気泳動によって関心のあるカチオンを分離し、 （ｂ）アニオン交換用の静止手段を使用してバッファーのアニオンを再生剤アニ オンに交換し、それによってバッファーの電気伝導度を減少させて抑圧されたバ ッファーを生成させ、 （ｃ）この抑圧されたバッファーの電気伝導度を測定して分離カチオンを決定す る、諸工程を含むことを特徴とするカチオン分析方法。
25. ２５．バッファーが弱塩基の塩を含み、再生剤アニオンが水酸化イオンを含む請 求項２４の方法。
26. ２６．バッファーが強酸を含み、再生剤アニオンが水酸化イオンを含む請求項２ ４の方法。
27. ２７．次の諸工程すなわち （ａ）電気泳動バッファーを含む毛管に、関心のあるアニオンを含む試料を導入 する、ただし該電気泳動バッファーはカチオン交換材料にも接触しており、この カチオン交換材料は電気泳動バッファーを再生剤カチオン源から分割している、 （ｂ）毛管の溝にそって電場を加えて電気泳動バッファーが電気浸透流によって カチオン交換材料に向って流れるようにし、 （ｃ）カチオン交換材料により電気泳動バッファーのカチオンを再生剤カチオン に交換し、それによって電気泳動バッファーの電気伝導度を減少させて抑圧され た電気泳動バッファーを生成させ、 （ｄ）この抑圧されたバッファーの電気伝導度を測定して分離アニオンを決定す る、 諸工程を含むことを特徴とするアニオン分析方法。
28. ２８．工程（ｄ）において、毛管の溝にそって且つカチオン交換材料を横切って 電場を加える請求項２７の方法。
29. ２９．次の諸工程すなわち （ａ）電気泳動バッファーを含む毛管に、関心のあるアニオンを含む試料を導入 する、ただし該電気泳動バッファーはアニオン交換材料にも接触しており、この アニオン交換材料は電気泳動バッファーを再生剤アニオン源から分割している、 （ｂ）毛管の溝にそって電場を加えて電気泳動バッファーが電気浸透流によって アニオン交換材料に向って流れるようにし、 （ｃ）アニオン交換材料により電気泳動バッファーのアニオンを再生剤アニオン に交換し、それによって電気泳動バッファーの電気伝導度を減少させて抑圧され た電気泳動バッファーを生成させ、 （ｄ）この抑圧されたバッファーの電気伝導度を測定して分離カチオンを決定す る、 諸工程を含むことを特徴とするカチオン分析方法。
30. ３０．工程（ｂ）において、毛管の溝にそって且つアニオン交換材料を横切って 電場を加える請求項２９の方法。