JPH06340586A - Promoter for production of fc receptor - Google Patents
Promoter for production of fc receptorInfo
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- JPH06340586A JPH06340586A JP3198218A JP19821891A JPH06340586A JP H06340586 A JPH06340586 A JP H06340586A JP 3198218 A JP3198218 A JP 3198218A JP 19821891 A JP19821891 A JP 19821891A JP H06340586 A JPH06340586 A JP H06340586A
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Abstract
Description
【０００１】[0001]
【産業上の利用分野】本発明はＦｃレセプターの産生を
促進させる化合物に関するものである。FIELD OF THE INVENTION The present invention relates to compounds that promote the production of Fc receptors.
【０００２】[0002]
【従来の技術および課題】細胞性免疫の中心的な役割を
果たすマクロファージの、エフェクター細胞（ｅｆｆｅ
ｃｔｏｒ ｃｅｌｌ）としての重要な機能は、生体防御
機構としての微生物に対する抵抗、とくに細胞内増殖性
微生物に対する殺菌能であることは知られている。BACKGROUND OF THE INVENTION Macrophage effector cells (effe) play a central role in cell-mediated immunity.
It is known that an important function as a ctor cell) is resistance to microorganisms as a biological defense mechanism, particularly bactericidal ability against intracellular proliferating microorganisms.
【０００３】マクロファージの殺菌能の発現のために
は、マクロファージの活性化が必要である。なぜなら、
正常（不活性）マクロファージはエンドサイトーシスの
能力があるために微生物の捕食は可能であるが、細胞内
での微生物の無制限な増殖によってやがて破壊される。
一方、活性化したマクロファージでは細胞の増大、ライ
ゾームの増加、増大、ゴルジ体の増大、細胞膜のひだの
増加等の形態学的変化とともにエンドサイトーシス、消
化能力、殺菌能等の機能的変化およびそれらの機能メカ
ニズムに関連した種々の酵素、過酸化水素（Ｈ2Ｏ2）、
スーパーオキシド（Ｏ2 -）等の増加が認められ、殺菌能
のみならず、腫瘍細胞の増殖抑制および傷害という重要
な活性が認められている。Activation of macrophages is necessary for the expression of bactericidal activity of macrophages. Because
Normal (inactive) macrophages are capable of endocytosis and therefore capable of predating microorganisms, but are eventually destroyed by the unlimited growth of the microorganisms in the cells.
On the other hand, in activated macrophages, morphological changes such as increase of cells, increase of lysosome, increase of Golgi apparatus, increase of folds of cell membrane and functional changes such as endocytosis, digestive ability and bactericidal ability and Various enzymes related to the functional mechanism of hydrogen peroxide, hydrogen peroxide (H 2 O 2 ),
An increase in superoxide (O 2 − ) etc. was observed, and not only bactericidal activity but also important activities such as tumor cell growth suppression and injury were recognized.
【０００４】さらには、マクロファージの細胞性免疫に
おける大きな機能は、補助細胞（ａｃｃｅｓｓａｒｙ
ｃｅｌｌ）としての機能を発揮することであることも知
られている。[0004] Furthermore, a major function of macrophages in cell-mediated immunity is the accessory cell (accessory).
It is also known to exhibit the function as a cell).
【０００５】マクロファージの補助細胞としての機能
は、マクロファージ表面のレセプターによって、マクロ
ファージに取り込まれたモノマー、ポリマーまたは抗原
抗体複合体の形をとる抗原は、浮遊抗原より有効である
という事実およびマクロファージが産生するリンパ球活
性化物質により活性化されたリンパ球によって生産され
た物質（抗原抗体複合体等）がマクロファージを活性化
し、活性化マクロファージはより盛んなリンパ球活性因
子または抑制因子の産生を行うという相互作用が存在す
るという事実に基づくものである。また、このマクロフ
ァージの補助細胞としての機能もマクロファージの活性
化が必要である。The function of macrophages as accessory cells is the fact that antigens in the form of monomers, polymers or antigen-antibody complexes taken up by macrophages by receptors on the surface of macrophages are more effective than floating antigens and produced by macrophages. It is said that the substance (antigen-antibody complex etc.) produced by the lymphocyte activated by the lymphocyte activating substance that activates the macrophage, and the activated macrophage produces more active lymphocyte activating factor or inhibitory factor. It is based on the fact that interactions exist. Further, the function of the macrophage as an auxiliary cell also requires activation of the macrophage.
【０００６】このように、活性化とマクロファージの細
胞性免疫における機能は密接に関係していることが知ら
れ、また活性化に伴う機能の発現が解明されつつある現
在においても、活性化に伴う機能の発現に不可欠なマク
ロファージの生化学的あるいは形態学的変化が何である
かは不明である。[0006] As described above, it is known that activation is closely related to the function of macrophages in cell-mediated immunity, and the expression of the function associated with activation is being elucidated. It is unclear what biochemical or morphological changes in macrophages are essential for the expression of function.
【０００７】しかし、現在の技術では容易に活性化に伴
う機能の発現に不可欠なマクロファージの生化学的ある
いは形態学的変化が何であるかを解明するのは難しい。
なぜなら、マクロファージを活性化する種々の因子が解
明されつつある現在においても、刺激されたマクロファ
ージは決して均一な状態にはならないからである。[0007] However, it is difficult to easily elucidate what biochemical or morphological changes of macrophages are essential for the expression of functions associated with activation by the current technology.
This is because the stimulated macrophages are never in a uniform state even though various factors that activate macrophages are being elucidated.
【０００８】そこで、活性化に伴う機能の発現に不可欠
なマクロファージの生化学的あるいは形態学的変化が何
であるかを解明するのに有用な因子の開発が望まれてい
た。Therefore, it has been desired to develop a factor useful for elucidating what is the biochemical or morphological change of macrophages, which is essential for the expression of functions associated with activation.
【０００９】[0009]
【課題を解決するための手段】本発明者等は、マクロフ
ァージの活性化に伴う機能の発現に不可欠なマクロファ
ージの生化学的あるいは形態学的変化が何であるかを解
明するのに有用な因子について鋭意研究を重ねた結果、
３−Ｏ−［２Ｅ，４Ｚ−デカジエノイル（ｄｅｃａｄｉ
ｅｎｏｙｌ）］−インジェノール（ｉｎｇｅｎｏｌ）お
よびトウダイクサ科のナツトウダイの根茎である生薬、
すなわち甘遂に含有される下記式Ｉ で表される化合物がＦｃレセプターの産生を促進するこ
と見いだし、本発明を完成するに至った。[Means for Solving the Problems] The present inventors have investigated factors useful for elucidating what biochemical or morphological changes in macrophages are essential for the expression of functions associated with macrophage activation. As a result of earnest research,
3-O- [2E, 4Z-decadienoyl (decadi
enoyl)]-ingenol and a crude drug which is the rhizome of the sugar beet of the family Euphorbiaceae,
That is, the following formula I is contained sweetly It was found that the compound represented by the formula (1) promotes the production of Fc receptors, and completed the present invention.
【００１０】すなわち、本発明は以下に示すごとくであ
る。That is, the present invention is as follows.
【００１１】（１）下記式Ｉ で表される化合物。(1) The following formula I The compound represented by.
【００１２】（２）下記式Ｉ で表される化合物（以下、本発明の化合物という。）を
有効成分とするＦｃレセプター産生促進剤。(2) The following formula I An Fc receptor production promoter comprising a compound represented by (hereinafter, referred to as the compound of the present invention) as an active ingredient.
【００１３】（３）３−Ｏ−（２Ｅ，４Ｚ−デカジエノ
イル）−インジェノール（以下、化合物Ａいう。）を有
効成分とするＦｃレセプター産生促進剤。(3) An Fc receptor production promoter comprising 3-O- (2E, 4Z-decadienoyl) -ingenol (hereinafter referred to as compound A) as an active ingredient.
【００１４】化合物Ａおよび本発明の化合物がＦｃレセ
プターの産生を促進し、マクロファージの活性化に伴う
機能の発現に不可欠なマクロファージの生化学的あるい
は形態学的変化が何であるかを解明するのに有用な因子
であるとの知見は、本発明者らによって初めて明らかに
されたことである。To elucidate what are the biochemical or morphological changes of macrophages which are essential for the expression of functions associated with activation of macrophages, that is, compound A and the compounds of the present invention promote the production of Fc receptors. The finding that it is a useful factor was first revealed by the present inventors.
【００１５】本発明の化合物は、以下のようにして得る
ことができる。The compound of the present invention can be obtained as follows.
【００１６】甘遂をヘキサン、ジエチルエーテル、ジク
ロロメタン、石油エーテル、酢酸エチル、塩化メチレ
ン、クロロホルム、アセトン、メタノール、エタノー
ル、水より選ばれる少なくとも一つの溶媒で抽出し、得
られた抽出液から溶媒を除去して得た残渣をヘキサン、
ジエチルエーテル、石油エーテル、酢酸エチル、クロロ
ホルム、塩化メチレン、アセトン、メタノール、水、水
酸化アンモニウムより選ばれる少なくとも一つの溶媒を
溶出溶媒として、セファデックス、逆相系シリカゲル、
シリカゲル、ポリアミドまたはセルロース等を担体に用
いたカラムクロマトグラフィーまたは高速液体クロマト
グラフィーに一回もしくは数回付し、薄層クロマトグラ
フィーまたは高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）
で目的成分を確認しながら分画することにより、本発明
の化合物を得ることができる。The sweetener is extracted with at least one solvent selected from hexane, diethyl ether, dichloromethane, petroleum ether, ethyl acetate, methylene chloride, chloroform, acetone, methanol, ethanol and water, and the solvent is extracted from the resulting extract. The residue obtained by removal is hexane,
Sephadex, reversed-phase silica gel, using at least one solvent selected from diethyl ether, petroleum ether, ethyl acetate, chloroform, methylene chloride, acetone, methanol, water, and ammonium hydroxide as an elution solvent.
Column chromatography using silica gel, polyamide or cellulose as a carrier or high performance liquid chromatography once or several times, thin layer chromatography or high performance liquid chromatography (HPLC)
The compound of the present invention can be obtained by fractionating while confirming the desired component.
【００１７】また化合物Ａは、トウダイグサ（Ｅｕｐｈ
ｏｒｂｉａ ｈｅｌｉｏｓｃｏｐｉａ Ｌ．）またはハ
ギクソウ（Ｅｕｐｈｏｒｂｉａ ｅｓｕｌａ Ｌ．）か
ら本発明の化合物と同様にして得ることができる。
［Ｈ．Ｇｏｔｔａ，Ｄｉｓｓｅｒｔａｔｉｏｎ Ｕｎｉ
ｖｅｒｓｉｔ¨ａｔ Ｈｅｉｄｅｌｂｅｒｇ（１９７
８）、Ｅ．Ｈ．Ｓｅｉｐ ａｎｄ Ｅ．Ｈｅｃｋｅｒ，
Ｐｌａｎｔａ Ｍｅｄｉｃａ，４６，２１５（１９８
２）］Compound A is Euphragm (Euph)
orbia helioscopier L. ) Or Hagitsou (Euphorbia esula L.) in the same manner as the compound of the present invention.
[H. Gotta, Dissociation Uni
Versit ¨ at Heidelberg (197
8), E. H. Sepi p. E. Hecker,
Planta Medica, 46 , 215 (198)
2)]
【００１８】次に、本発明の化合物の製造の実施例を示
す。The following are examples of the preparation of compounds of the present invention.
【００１９】実施例 甘遂（５００ｇ）を細切し、ジクロロメタンで還流し、
油状の粗エキスを順相（クロロホルム／メタノール＝３
３：１）および逆相（ＯＤＳ、９０％メタノール）のシ
リカゲルカラムクロマトグラフィーにより分画し、得ら
れた活性分画を更にＨＰＬＣ（ＯＤＳ、９０％メタノー
ル）により精製を行うことにより、下記の理化学的性質
を有する化合物（０．０４９ｇ）を得た。この化合物は
３−Ｏ−（２，３−ジメチルブチリル）−１３−Ｏ−ｎ
−ドデカノイル−１３−ハイドロキシ−インジェノール
［３−Ｏ（２，３−ｄｉｍｅｔｈｙｌｂｕｔｙｒｙｌ）
−１３−Ｏ−ｎ−ｄｏｄｅｃａｎｏｙｌ−１３−ｈｙｄ
ｒｏｘｙ−ｉｎｇｅｎｏｌ］と決定された。EXAMPLE Sweetened (500 g) was finely chopped, refluxed with dichloromethane,
The crude oily extract was mixed with normal phase (chloroform / methanol = 3
3: 1) and reverse phase (ODS, 90% methanol) silica gel column chromatography, and the resulting active fraction was further purified by HPLC (ODS, 90% methanol) to give the following physicochemical properties: A compound (0.049 g) having specific properties was obtained. This compound is 3-O- (2,3-dimethylbutyryl) -13-O-n
-Dodecanoyl-13-hydroxy-ingenol [3-O (2,3-dimethylbutyryl)
-13-O-n-dodecanoyl-13-hyd
roxy-ingenol].
【００２０】高分解能質量スペクトル（ＦＡＢ）：Ｃ38
Ｈ60Ｏ8 計算値；６４５．４３６９１（Ｍ+＋Ｈ） 実測値；６４５．４３８１１（Ｍ+＋Ｈ） 低分解能質量分析（ＦＡＢ）：６４５（Ｍ+＋Ｈ），５
１１（６４５−Ｈ2Ｏ−１１６），４２７（６４５−Ｈ2
Ｏ−２００） 赤外線吸収スペクトル（ＩＲ，ν ｍａｘ ｃｍ-1，Ｋ
Ｂｒ）：３４５０（ＯＨ），２９３０（Ｃ＝Ｏ），１７
２５（Ｃ＝Ｏ） プロトン核磁気共鳴スペクトル（δ ｐｐｍ ｉｎ Ｃ
ＤＣｌ3）：６．０２（２Ｈ，１−Ｈ ａｎｄ ７−
Ｈ），５．４４（１Ｈ，ｓ，３−Ｈ），４．１５（２
Ｈ，ｓ，２０−Ｈ），４．０９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１２
ａｎｄ ４Ｈｚ，８−Ｈ），４．０５（１Ｈ，ｓ，５
−Ｈ），３．５５（１Ｈ，ｂｒｓ，ＯＨ），３．４７
（１Ｈ，ｓ，ＯＨ），２．７２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１６
ａｎｄ ３Ｈｚ，１２−Ｈａ），２．６１（１Ｈ，
ｍ，１１−Ｈ），２．３２（１Ｈ，ｍ，２”−Ｈ），
２．２０（２Ｈ，２’−Ｈ ａｎｄ １２−Ｈｂ），
１．９２（１Ｈ，ｍ，３”−Ｈ），１．７８（３Ｈ，
ｄ，Ｊ＝１．５Ｈｚ，１９−Ｈ3），１．５５（２Ｈ，
ｍ，３’−Ｈ），１．３０（２Ｈ，ｍ，１１’−Ｈ），
１．２５（１４Ｈ，ｓｕｐｅｒｉｍｐｏｓｅｄ，４’−
１０’−Ｈ），１．２２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１１Ｈｚ，１
４−Ｈ），１．１９（３Ｈ，ｓ，１７−Ｈ3），１．１
５（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ，２”−ＣＨ3），１．０６
（３Ｈ，ｓ，１６−Ｈ3），０．９７（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝
７Ｈｚ，１８−Ｈ3），０．９６（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７Ｈ
ｚ，４”−Ｈ3），０．９３（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ，
３”−ＣＨ3），０．８８（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ，１
２’−Ｈ3）High resolution mass spectrum (FAB): C 38
H 60 O 8 Calculated; 645.43691 (M + + H) Found; 645.43811 (M + + H) Low-resolution mass spectrometry (FAB): 645 (M + + H), 5
11 (645-H 2 O-116), 427 (645-H 2
O-200) infrared absorption spectrum (IR, ν max cm -1 , K
Br): 3450 (OH), 2930 (C = O), 17
25 (C = O) proton nuclear magnetic resonance spectrum (δ ppm in C
DCl 3): 6.02 (2H, 1-H and 7-
H), 5.44 (1H, s, 3-H), 4.15 (2
H, s, 20-H), 4.09 (1H, dd, J = 12)
and 4Hz, 8-H), 4.05 (1H, s, 5
-H), 3.55 (1H, brs, OH), 3.47
(1H, s, OH), 2.72 (1H, dd, J = 16)
and 3 Hz, 12-Ha), 2.61 (1H,
m, 11-H), 2.32 (1H, m, 2 "-H),
2.20 (2H, 2'-H and 12-Hb),
1.92 (1H, m, 3 "-H), 1.78 (3H,
d, J = 1.5Hz, 19- H 3), 1.55 (2H,
m, 3'-H), 1.30 (2H, m, 11'-H),
1.25 (14H, superimposed, 4'-
10′-H), 1.22 (1H, d, J = 11 Hz, 1
4-H), 1.19 (3H , s, 17-H 3), 1.1
5 (3H, d, J = 7Hz, 2 "-CH 3), 1.06
(3H, s, 16-H 3), 0.97 (3H, d, J =
7Hz, 18-H 3), 0.96 (3H, d, J = 7H
z, 4 "-H 3), 0.93 (3H, d, J = 7Hz,
3 "-CH 3), 0.88 ( 3H, t, J = 7Hz, 1
2'-H 3)
【００２１】次に、化合物Ａおよび本発明の化合物がＦ
ｃレセプターの産生を促進することについて実験例を示
して説明する。Next, the compound A and the compound of the present invention are F
The promotion of c receptor production will be described with reference to experimental examples.
【００２２】［実験例１］ マクロファージに対する免
疫複合体結合能促進活性 チオグリコレート培地で誘発したマウス腹腔マクロファ
ージを、実施例で得た本発明の化合物または化合物Ａを
１００ｎＭの濃度で添加し、１５時間培養した。培養
後、免疫複合体モデルであるグルコースオキシダーゼ
アンチ グルコースオキシダーゼコンプレックス（ｇｌ
ｃｏｓｅ ｏｘｄａｓｅ−ａｎｔｉ−ｇｌｕｃｏｓｅ
ｏｘｉｄａｓｅ ｃｏｍｐｌｅｘｅｓ）（以下、ＧＯＡ
ＧＯという。）を添加し、４°Ｃで４時間反応させた。[Experimental Example 1] Immune complex binding activity-promoting activity on macrophages The mouse peritoneal macrophages induced in thioglycollate medium were added with the compound of the present invention or the compound A obtained in the Example at a concentration of 100 nM. Incubated for hours. After culturing, glucose oxidase, an immune complex model
Anti-glucose oxidase complex (gl
cose oxdase-anti-glucose
oxidase complexes) (hereinafter, GOA
It is called GO. ) Was added and reacted at 4 ° C for 4 hours.
【００２３】次に未結合のＧＯＡＧＯを洗浄除去後、マ
クロファージに結合したＧＯＡＧＯ量を、そのグルコー
スオキシダーゼ（ｇｌｃｏｓｅ ｏｘｄａｓｅ）活性を
指標に測定し、免疫複合体結合量とした。Next, after removing unbound GOAGO by washing, the amount of GOAGO bound to the macrophages was measured using its glucose oxidase activity as an index to determine the amount of immune complex binding.
【００２４】結果を免疫複合体結合量増加率（％）とし
て表１に示した。The results are shown in Table 1 as the rate of increase in the amount of bound immune complex (%).
【００２５】表１ Table 1
【００２６】［実験例２］ Ｆｃレセプター機能調節 チオグリコレート培地で誘発したマウス腹腔マクロファ
ージを、実施例で得た本発明の化合物または化合物Ａを
１００ｎＭの濃度で添加し、１５時間培養した。培養
後、４．５μｇ／ｍｌ〜４５０．０μｇ／ｍｌの種々の
濃度のＧＯＡＧＯを添加し、４°Ｃで４時間反応させ
た。反応後、未結合のＧＯＡＧＯを洗浄除去後、マクロ
ファージに結合したＧＯＡＧＯ量を、そのグルコースオ
キシダーゼ（ｇｌｃｏｓｅ ｏｘｄａｓｅ）活性を指標
に測定し、免疫複合体結合量とした。また、本発明の化
合物および化合物Ａを添加しないものを対照群とした。[Experimental Example 2] Regulation of Fc receptor function The mouse peritoneal macrophages induced by thioglycollate medium were added with the compound of the present invention obtained in Example or Compound A at a concentration of 100 nM and cultured for 15 hours. After culturing, various concentrations of GOAGO of 4.5 μg / ml to 450.0 μg / ml were added and the reaction was carried out at 4 ° C. for 4 hours. After the reaction, unbound GOAGO was removed by washing, and the amount of GOAGO bound to the macrophages was measured using the glucose oxidase (glcose oxdase) activity as an index to determine the amount of bound immune complex. A control group was prepared without adding the compound of the present invention and compound A.
【００２７】次に反応後、マクロファージに結合したＧ
ＯＡＧＯ量と、未結合のＧＯＡＧＯ量との比をスカッツ
チャード（Ｓｃａｔｃｈａｒｄ）のグラフにプロット
し、解析した。Next, after the reaction, G bound to macrophages
The ratio between the amount of OAGO and the amount of unbound GOAGO was plotted on a Scatchard graph and analyzed.
【００２８】結果を図１に示した。The results are shown in FIG.
【００２９】図１ Ｂ：ＧＯＡＧＯ結合量（ｎｇ／１０5細胞） Ｆ：ＧＯＡＧＯ未結合量（ｎｇ／１０5細胞）FIG. 1 B: GOAGO bound amount (ng / 10 5 cells) F: GOAGO unbound amount (ng / 10 5 cells)
【００３０】［実験例３］ Ｆｃレセプター機能調節機
序 チオグリコレート培地で誘発したマウス腹腔マクロファ
ージを、実施例で得た本発明の化合物または化合物Ａを
１００ｎＭの濃度で添加し、メッセンジャーＲＮＡの生
合成阻害剤であるアクチノマイシン（Ａｃｔｉｎｏｍｙ
ｃｉｎ） Ｄと共に１５時間培養した。培養後、ＧＯＡ
ＧＯを添加し、４°Ｃで４時間反応させた。[Experimental Example 3] Mechanism of Fc receptor function regulation [0030] The mouse peritoneal macrophages induced with thioglycollate medium were added with the compound of the present invention obtained in Example or Compound A at a concentration of 100 nM to produce messenger RNA. A synthetic inhibitor, actinomycin (Actinomy)
Cin) D and incubated for 15 hours. After culturing, GOA
GO was added and reacted at 4 ° C for 4 hours.
【００３１】次に未結合のＧＯＡＧＯを洗浄除去後、マ
クロファージに結合したＧＯＡＧＯ量を、そのグルコー
スオキシダーゼ（ｇｌｃｏｓｅ ｏｘｄａｓｅ）活性を
指標に測定し、免疫複合体結合量とした。After washing and removing unbound GOAGO, the amount of GOAGO bound to the macrophages was measured using the glucose oxidase activity as an index to determine the amount of immune complex binding.
【００３２】結果を免疫複合体結合量増加率（％）とし
て表２に示した。The results are shown in Table 2 as an increase rate (%) in the amount of bound immune complex.
【００３４】表２ Table 2
【００３５】実験例１の結果より免疫複合体結合能は本
発明の化合物および化合物Ａが約０．１ｎＭから１０ｎ
Ｍまで用量依存的に増加することが明らかであり、実験
例２の結果より免疫複合体結合能の増加は免疫複合体を
結合するマクロファージ表面上のＦｃレセプターの数の
増加によるものであることが認められた。更には、実験
例３の結果よりＦｃレセプターの数の増加がｍＲＮＡの
新たな生合成を要するデノボ（ｄｅ ｎｏｖｏ）合成に
よることが確認された。From the results of Experimental Example 1, the compounds of the present invention and the compound A have an ability to bind to an immune complex of about 0.1 nM to 10 n.
It is clear that the concentration increases up to M in a dose-dependent manner, and from the results of Experimental Example 2, the increase in the immune complex binding ability is due to the increase in the number of Fc receptors on the surface of macrophages that bind the immune complex. Admitted. Furthermore, from the results of Experimental Example 3, it was confirmed that the increase in the number of Fc receptors was due to de novo synthesis which requires new biosynthesis of mRNA.
【００３６】［発明の効果］以上のように本発明の化合
物および化合物ＡはＦｃレセプターの産生を促進する化
合物であり、活性化に伴う機能の発現に不可欠なマクロ
ファージの生化学的あるいは形態学的変化が何であるか
を解明するのに有用な因子としての用途が期待できる。[Effect of the Invention] As described above, the compound of the present invention and Compound A are compounds that promote the production of Fc receptors, and are biochemically or morphologically macrophage essential for the expression of functions associated with activation. It can be expected to be used as a useful factor for elucidating what the change is.
【００３７】具体的には、Ｆｃレセプター産生促進剤を
用いて血中から抗原抗体複合体の除去またはマクロファ
ージの活性を促進させることにより、抗体依存性細胞障
害反応、アラキドン酸代謝産物の放出、活性酸素類の放
出、リソゾーム酵素の放出、インターロイキン１阻害因
子の放出および抗原提示細胞の抗原提示能の増強の活性
化に伴う機能の発現に不可欠なマクロファージの生化学
的あるいは形態学的変化が何であるかを解明するの用い
ることができる。Specifically, an Fc receptor production promoter is used to remove the antigen-antibody complex from the blood or promote the activity of macrophages, thereby producing an antibody-dependent cytotoxic reaction, release of arachidonic acid metabolites, and activity. What is the biochemical or morphological change of macrophages essential for the expression of functions associated with the release of oxygens, the release of lysosomal enzymes, the release of interleukin 1 inhibitor and the activation of the enhancement of the antigen-presenting ability of antigen-presenting cells It can be used to elucidate what is there.
【手続補正書】[Procedure amendment]
【提出日】平成５年８月１８日[Submission date] August 18, 1993
【手続補正１】[Procedure Amendment 1]
【補正対象書類名】明細書[Document name to be amended] Statement
【補正対象項目名】発明の詳細な説明[Name of item to be amended] Detailed explanation of the invention
【補正方法】変更[Correction method] Change
【補正内容】[Correction content]
【発明の詳細な説明】Detailed Description of the Invention
【０００１】[0001]
【産業上の利用分野】本発明はＦｃレセプターの産生を
促進させる化合物に関するものである。FIELD OF THE INVENTION The present invention relates to compounds that promote the production of Fc receptors.
【０００２】[0002]
【従来の技術および課題】細胞性免疫の中心的な役割を
果たすマクロファージの、エフェクター細胞（ｅｆｆｅ
ｃｔｏｒ ｃｅｌｌ）としての重要な機能は、生体防御
機構としての微生物に対する抵抗、とくに細胞内増殖性
微生物に対する殺菌能であることは知られている。BACKGROUND OF THE INVENTION Macrophage effector cells (effe) play a central role in cell-mediated immunity.
It is known that an important function as a ctor cell) is resistance to microorganisms as a biological defense mechanism, particularly bactericidal ability against intracellular proliferating microorganisms.
【０００３】マクロファージの殺菌能の発現のために
は、マクロファージの活性化が必要である。なぜなら、
正常（不活性）マクロファージはエンドサイトーシスの
能力があるために微生物の捕食は可能であるが、細胞内
での微生物の無制限な増殖によってやがて破壊される。
一方、活性化したマクロファージでは細胞の増大、ライ
ゾームの増加、増大、ゴルジ体の増大、細胞膜のひだの
増加等の形態学的変化とともにエンドサイトーシス、消
化能力、殺菌能等の機能的変化およびそれらの機能メカ
ニズムに関連した種々の酵素、過酸化水素（Ｈ2Ｏ2）、
スーパーオキシド（Ｏ2 -）等の増加が認められ、殺菌能
のみならず、腫瘍細胞の増殖抑制および傷害という重要
な活性が認められている。Activation of macrophages is necessary for the expression of bactericidal activity of macrophages. Because
Normal (inactive) macrophages are capable of endocytosis and therefore capable of predating microorganisms, but are eventually destroyed by the unlimited growth of the microorganisms in the cells.
On the other hand, in activated macrophages, morphological changes such as increase of cells, increase of lysosome, increase of Golgi apparatus, increase of folds of cell membrane and functional changes such as endocytosis, digestive ability and bactericidal ability and Various enzymes related to the functional mechanism of hydrogen peroxide, hydrogen peroxide (H 2 O 2 ),
An increase in superoxide (O 2 − ) etc. was observed, and not only bactericidal activity but also important activities such as tumor cell growth suppression and injury were recognized.
【０００４】さらには、マクロファージの細胞性免疫に
おける大きな機能は、補助細胞（ａｃｃｅｓｓａｒｙ
ｃｅｌｌ）としての機能を発揮することであることも知
られている。[0004] Furthermore, a major function of macrophages in cell-mediated immunity is the accessory cell (accessory).
It is also known to exhibit the function as a cell).
【０００５】マクロファージの補助細胞としての機能
は、マクロファージ表面のレセプターによって、マクロ
ファージに取り込まれたモノマー、ポリマーまたは抗原
抗体複合体の形をとる抗原は、浮遊抗原より有効である
という事実およびマクロファージが産生するリンパ球活
性化物質により活性化されたリンパ球によって生産され
た物質（抗原抗体複合体等）がマクロファージを活性化
し、活性化マクロファージはより盛んなリンパ球活性因
子または抑制因子の産生を行うという相互作用が存在す
るという事実に基づくものである。また、このマクロフ
ァージの補助細胞としての機能もマクロファージの活性
化が必要である。The function of macrophages as accessory cells is the fact that antigens in the form of monomers, polymers or antigen-antibody complexes taken up by macrophages by receptors on the surface of macrophages are more effective than floating antigens and macrophages produce. It is said that the substance (antigen-antibody complex etc.) produced by the lymphocyte activated by the lymphocyte activating substance that activates the macrophage, and the activated macrophage produces more active lymphocyte activating factor or inhibitory factor. It is based on the fact that interactions exist. Further, the function of the macrophage as an auxiliary cell also requires activation of the macrophage.
【０００６】このように、活性化とマクロファージの細
胞性免疫における機能は密接に関係していることが知ら
れ、また活性化に伴う機能の発現が解明されつつある現
在においても、活性化に伴う機能の発現に不可欠なマク
ロファージの生化学的あるいは形態学的変化が何である
かは不明である。[0006] As described above, it is known that activation is closely related to the function of macrophages in cell-mediated immunity, and the expression of the function associated with activation is being elucidated. It is unclear what biochemical or morphological changes in macrophages are essential for the expression of function.
【０００７】しかし、現在の技術では容易に活性化に伴
う機能の発現に不可欠なマクロファージの生化学的ある
いは形態学的変化が何であるかを解明するのは難しい。
なぜなら、マクロファージを活性化する種々の因子が解
明されつつある現在においても、刺激されたマクロファ
ージは決して均一な状態にはならないからである。[0007] However, it is difficult to easily elucidate what biochemical or morphological changes of macrophages are essential for the expression of functions associated with activation by the current technology.
This is because the stimulated macrophages are never in a uniform state even though various factors that activate macrophages are being elucidated.
【０００８】そこで、活性化に伴う機能の発現に不可欠
なマクロファージの生化学的あるいは形態学的変化が何
であるかを解明するのに有用な因子の開発が望まれてい
た。Therefore, it has been desired to develop a factor useful for elucidating what is the biochemical or morphological change of macrophages, which is essential for the expression of functions associated with activation.
【０００９】[0009]
【課題を解決するための手段】本発明者等は、マクロフ
ァージの活性化に伴う機能の発現に不可欠なマクロファ
ージの生化学的あるいは形態学的変化が何であるかを解
明するのに有用な因子について鋭意研究を重ねた結果、
３−Ｏ−［２Ｅ，４Ｚ−デカジエノイル（ｄｅｃａｄｉ
ｅｎｏｙｌ）］−インジェノール（ｉｎｇｅｎｏｌ）お
よびトウダイクサ科のナツトウダイの根茎である生薬、
すなわち甘遂に含有される下記式Ｉ で表される化合物がＦｃレセプターの産生を促進するこ
と見いだし、本発明を完成するに至った。[Means for Solving the Problems] The present inventors have investigated factors useful for elucidating what biochemical or morphological changes in macrophages are essential for the expression of functions associated with macrophage activation. As a result of earnest research,
3-O- [2E, 4Z-decadienoyl (decadi
enoyl)]-ingenol and a crude drug which is the rhizome of the sugar beet of the family Euphorbiaceae,
That is, the following formula I is contained sweetly It was found that the compound represented by the formula (1) promotes the production of Fc receptors, and completed the present invention.
【００１０】すなわち、本発明は以下に示すごとくであ
る。That is, the present invention is as follows.
【００１１】（１）下記式Ｉ で表される化合物。(1) The following formula I The compound represented by.
【００１２】（２）下記式Ｉ で表される化合物（以下、本発明の化合物という。）を
有効成分とするＦｃレセプター産生促進剤。(2) The following formula I An Fc receptor production promoter comprising a compound represented by (hereinafter, referred to as the compound of the present invention) as an active ingredient.
【００１３】（３）３−Ｏ−（２Ｅ，４Ｚ−デカジエノ
イル）−インジェノール（以下、化合物Ａいう。）を有
効成分とするＦｃレセプター産生促進剤。(3) An Fc receptor production promoter comprising 3-O- (2E, 4Z-decadienoyl) -ingenol (hereinafter referred to as compound A) as an active ingredient.
【００１４】化合物Ａおよび本発明の化合物がＦｃレセ
プターの産生を促進し、マクロファージの活性化に伴う
機能の発現に不可欠なマクロファージの生化学的あるい
は形態学的変化が何であるかを解明するのに有用な因子
であるとの知見は、本発明者らによって初めて明らかに
されたことである。To elucidate what are the biochemical or morphological changes of macrophages which are essential for the expression of functions associated with activation of macrophages, that is, compound A and the compounds of the present invention promote the production of Fc receptors. The finding that it is a useful factor was first revealed by the present inventors.
【００１５】本発明の化合物は、以下のようにして得る
ことができる。The compound of the present invention can be obtained as follows.
【００１６】甘遂をヘキサン、ジエチルエーテル、ジク
ロロメタン、石油エーテル、酢酸エチル、塩化メチレ
ン、クロロホルム、アセトン、メタノール、エタノー
ル、水より選ばれる少なくとも一つの溶媒で抽出し、得
られた抽出液から溶媒を除去して得た残渣をヘキサン、
ジエチルエーテル、石油エーテル、酢酸エチル、クロロ
ホルム、塩化メチレン、アセトン、メタノール、水、水
酸化アンモニウムより選ばれる少なくとも一つの溶媒を
溶出溶媒として、セファデックス、逆相系シリカゲル、
シリカゲル、ポリアミドまたはセルロース等を担体に用
いたカラムクロマトグラフィーまたは高速液体クロマト
グラフィーに一回もしくは数回付し、薄層クロマトグラ
フィーまたは高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）
で目的成分を確認しながら分画することにより、本発明
の化合物を得ることができる。The sweetener is extracted with at least one solvent selected from hexane, diethyl ether, dichloromethane, petroleum ether, ethyl acetate, methylene chloride, chloroform, acetone, methanol, ethanol and water, and the solvent is extracted from the resulting extract. The residue obtained by removal is hexane,
Sephadex, reversed-phase silica gel, using at least one solvent selected from diethyl ether, petroleum ether, ethyl acetate, chloroform, methylene chloride, acetone, methanol, water, and ammonium hydroxide as an elution solvent.
Column chromatography using silica gel, polyamide or cellulose as a carrier or high performance liquid chromatography once or several times, thin layer chromatography or high performance liquid chromatography (HPLC)
The compound of the present invention can be obtained by fractionating while confirming the desired component.
【００１７】また化合物Ａは、トウダイグサ（Ｅｕｐｈ
ｏｒｂｉａ ｈｅｌｉｏｓｃｏｐｉａ Ｌ．）またはハ
ギクソウ（Ｅｕｐｈｏｒｂｉａ ｅｓｕｌａ Ｌ．）か
ら本発明の化合物と同様にして得ることができる。
［Ｈ．Ｇｏｔｔａ，Ｄｉｓｓｅｒｔａｔｉｏｎ Ｕｎｉ
ｖｅｒｓｉｔ¨ａｔ Ｈｅｉｄｅｌｂｅｒｇ（１９７
８）、Ｅ．Ｈ．Ｓｅｉｐ ａｎｄ Ｅ．Ｈｅｃｋｅｒ，
Ｐｌａｎｔａ Ｍｅｄｉｃａ，４６，２１５（１９８
２）］Compound A is Euphragm (Euph)
orbia helioscopier L. ) Or Hagitsou (Euphorbia esula L.) in the same manner as the compound of the present invention.
[H. Gotta, Dissociation Uni
Versit ¨ at Heidelberg (197
8), E. H. Sepi p. E. Hecker,
Planta Medica, 46 , 215 (198)
2)]
【００１８】次に、本発明の化合物の製造の実施例を示
す。The following are examples of the preparation of compounds of the present invention.
【００１９】実施例 甘遂（５００ｇ）を細切し、ジクロロメタンで還流し、
油状の粗エキスを順相（クロロホルム／メタノール＝３
３：１）および逆相（ＯＤＳ、９０％メタノール）のシ
リカゲルカラムクロマトグラフィーにより分画し、得ら
れた活性分画を更にＨＰＬＣ（ＯＤＳ、９０％メタノー
ル）により精製を行うことにより、下記の理化学的性質
を有する化合物（０．０４９ｇ）を得た。この化合物は
３−Ｏ−（２，３−ジメチルブチリル）−１３−Ｏ−ｎ
−ドデカノイル−１３−ハイドロキシ−インジェノール
［３−Ｏ（２，３−ｄｉｍｅｔｈｙｌｂｕｔｙｒｙｌ）
−１３−Ｏ−ｎ−ｄｏｄｅｃａｎｏｙｌ−１３−ｈｙｄ
ｒｏｘｙ−ｉｎｇｅｎｏｌ］と決定された。EXAMPLE Sweetened (500 g) was finely chopped, refluxed with dichloromethane,
The crude oily extract was mixed with normal phase (chloroform / methanol = 3
3: 1) and reverse phase (ODS, 90% methanol) silica gel column chromatography, and the resulting active fraction was further purified by HPLC (ODS, 90% methanol) to give the following physicochemical properties: A compound (0.049 g) having specific properties was obtained. This compound is 3-O- (2,3-dimethylbutyryl) -13-O-n
-Dodecanoyl-13-hydroxy-ingenol [3-O (2,3-dimethylbutyryl)
-13-O-n-dodecanoyl-13-hyd
roxy-ingenol].
【００２０】高分解能質量スペクトル（ＦＡＢ）：Ｃ38
Ｈ60Ｏ8 計算値；６４５．４３６９１（Ｍ+＋Ｈ） 実測値；６４５．４３８１１（Ｍ+＋Ｈ） 低分解能質量分析（ＦＡＢ）：６４５（Ｍ+＋Ｈ），５
１１（６４５−Ｈ2Ｏ−１１６），４２７（６４５−Ｈ2
Ｏ−２００） 赤外線吸収スペクトル（ＩＲ，ν ｍａｘ ｃｍ-1，Ｋ
Ｂｒ）：３４５０（ＯＨ），２９３０（Ｃ＝Ｏ），１７
２５（Ｃ＝Ｏ） プロトン核磁気共鳴スペクトル（δ ｐｐｍ ｉｎ Ｃ
ＤＣｌ3）：６．０２（２Ｈ，１−Ｈ ａｎｄ ７−
Ｈ），５．４４（１Ｈ，ｓ，３−Ｈ），４．１５（２
Ｈ，ｓ，２０−Ｈ），４．０９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１２
ａｎｄ ４Ｈｚ，８−Ｈ），４．０５（１Ｈ，ｓ，５
−Ｈ），３．５５（１Ｈ，ｂｒｓ，ＯＨ），３．４７
（１Ｈ，ｓ，ＯＨ），２．７２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１６
ａｎｄ ３Ｈｚ，１２−Ｈａ），２．６１（１Ｈ，
ｍ，１１−Ｈ），２．３２（１Ｈ，ｍ，２”−Ｈ），
２．２０（２Ｈ，２’−Ｈ ａｎｄ １２−Ｈｂ），
１．９２（１Ｈ，ｍ，３”−Ｈ），１．７８（３Ｈ，
ｄ，Ｊ＝１．５Ｈｚ，１９−Ｈ3），１．５５（２Ｈ，
ｍ，３’−Ｈ），１．３０（２Ｈ，ｍ，１１’−Ｈ），
１．２５（１４Ｈ，ｓｕｐｅｒｉｍｐｏｓｅｄ，４’−
１０’−Ｈ），１．２２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１１Ｈｚ，１
４−Ｈ），１．１９（３Ｈ，ｓ，１７−Ｈ3），１．１
５（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ，２”−ＣＨ3），１．０６
（３Ｈ，ｓ，１６−Ｈ3），０．９７（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝
７Ｈｚ，１８−Ｈ3），０．９６（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７Ｈ
ｚ，４”−Ｈ3），０．９３（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ，
３”−ＣＨ3），０．８８（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ，１
２’−Ｈ3）High resolution mass spectrum (FAB): C 38
H 60 O 8 Calculated; 645.43691 (M + + H) Found; 645.43811 (M + + H) Low-resolution mass spectrometry (FAB): 645 (M + + H), 5
11 (645-H 2 O-116), 427 (645-H 2
O-200) infrared absorption spectrum (IR, ν max cm -1 , K
Br): 3450 (OH), 2930 (C = O), 17
25 (C = O) proton nuclear magnetic resonance spectrum (δ ppm in C
DCl 3): 6.02 (2H, 1-H and 7-
H), 5.44 (1H, s, 3-H), 4.15 (2
H, s, 20-H), 4.09 (1H, dd, J = 12)
and 4Hz, 8-H), 4.05 (1H, s, 5
-H), 3.55 (1H, brs, OH), 3.47
(1H, s, OH), 2.72 (1H, dd, J = 16)
and 3 Hz, 12-Ha), 2.61 (1H,
m, 11-H), 2.32 (1H, m, 2 "-H),
2.20 (2H, 2'-H and 12-Hb),
1.92 (1H, m, 3 "-H), 1.78 (3H,
d, J = 1.5Hz, 19- H 3), 1.55 (2H,
m, 3'-H), 1.30 (2H, m, 11'-H),
1.25 (14H, superimposed, 4'-
10′-H), 1.22 (1H, d, J = 11 Hz, 1
4-H), 1.19 (3H , s, 17-H 3), 1.1
5 (3H, d, J = 7Hz, 2 "-CH 3), 1.06
(3H, s, 16-H 3), 0.97 (3H, d, J =
7Hz, 18-H 3), 0.96 (3H, d, J = 7H
z, 4 "-H 3), 0.93 (3H, d, J = 7Hz,
3 "-CH 3), 0.88 ( 3H, t, J = 7Hz, 1
2'-H 3)
【００２１】次に、化合物Ａおよび本発明の化合物がＦ
ｃレセプターの産生を促進することについて実験例を示
して説明する。Next, the compound A and the compound of the present invention are F
The promotion of c receptor production will be described with reference to experimental examples.
【００２２】［実験例１］ マクロファージに対する免
疫複合体結合能促進活性 チオグリコレート培地で誘発したマウス腹腔マクロファ
ージを、実施例で得た本発明の化合物または化合物Ａを
１００ｎＭの濃度で添加し、１５時間培養した。培養
後、免疫複合体モデルであるグルコースオキシダーゼ
アンチ グルコースオキシダーゼコンプレックス（ｇｌ
ｃｏｓｅ ｏｘｄａｓｅ−ａｎｔｉ−ｇｌｕｃｏｓｅ
ｏｘｉｄａｓｅ ｃｏｍｐｌｅｘｅｓ）（以下、ＧＯＡ
ＧＯという。）を添加し、４°Ｃで４時間反応させた。[Experimental Example 1] Immune complex binding activity-promoting activity on macrophages The mouse peritoneal macrophages induced in thioglycollate medium were added with the compound of the present invention or the compound A obtained in the Example at a concentration of 100 nM. Incubated for hours. After culturing, glucose oxidase, an immune complex model
Anti-glucose oxidase complex (gl
cose oxdase-anti-glucose
oxidase complexes) (hereinafter, GOA
It is called GO. ) Was added and reacted at 4 ° C for 4 hours.
【００２３】次に未結合のＧＯＡＧＯを洗浄除去後、マ
クロファージに結合したＧＯＡＧＯ量を、そのグルコー
スオキシダーゼ（ｇｌｃｏｓｅ ｏｘｄａｓｅ）活性を
指標に測定し、免疫複合体結合量とした。Next, after removing unbound GOAGO by washing, the amount of GOAGO bound to the macrophages was measured using its glucose oxidase activity as an index to determine the amount of immune complex binding.
【００２４】結果を免疫複合体結合量増加率（％）とし
て表１に示した。The results are shown in Table 1 as the rate of increase in the amount of bound immune complex (%).
【００２５】表１ Table 1
【００２６】［実験例２］ Ｆｃレセプター機能調節 チオグリコレート培地で誘発したマウス腹腔マクロファ
ージを、実施例で得た本発明の化合物または化合物Ａを
１００ｎＭの濃度で添加し、１５時間培養した。培養
後、４．５μｇ／ｍｌ〜４５０．０μｇ／ｍｌの種々の
濃度のＧＯＡＧＯを添加し、４°Ｃで４時間反応させ
た。反応後、未結合のＧＯＡＧＯを洗浄除去後、マクロ
ファージに結合したＧＯＡＧＯ量を、そのグルコースオ
キシダーゼ（ｇｌｃｏｓｅ ｏｘｄａｓｅ）活性を指標
に測定し、免疫複合体結合量とした。また、本発明の化
合物および化合物Ａを添加しないものを対照群とした。[Experimental Example 2] Regulation of Fc receptor function The mouse peritoneal macrophages induced by thioglycollate medium were added with the compound of the present invention obtained in Example or Compound A at a concentration of 100 nM and cultured for 15 hours. After culturing, various concentrations of GOAGO of 4.5 μg / ml to 450.0 μg / ml were added and the reaction was carried out at 4 ° C. for 4 hours. After the reaction, unbound GOAGO was removed by washing, and the amount of GOAGO bound to the macrophages was measured using the glucose oxidase (glcose oxdase) activity as an index to determine the amount of bound immune complex. A control group was prepared without adding the compound of the present invention and compound A.
【００２７】次に反応後、マクロファージに結合したＧ
ＯＡＧＯ量と、未結合のＧＯＡＧＯ量との比をスカッツ
チャード（Ｓｃａｔｃｈａｒｄ）のグラフにプロット
し、解析した。Next, after the reaction, G bound to macrophages
The ratio between the amount of OAGO and the amount of unbound GOAGO was plotted on a Scatchard graph and analyzed.
【００２８】結果を図１に示した。The results are shown in FIG.
【００２９】［実験例３］ Ｆｃレセプター機能調節機
序 チオグリコレート培地で誘発したマウス腹腔マクロファ
ージを、実施例で得た本発明の化合物または化合物Ａを
１００ｎＭの濃度で添加し、メッセンジャーＲＮＡの生
合成阻害剤であるアクチノマイシン（Ａｃｔｉｎｏｍｙ
ｃｉｎ） Ｄと共に１５時間培養した。培養後、ＧＯＡ
ＧＯを添加し、４°Ｃで４時間反応させた。[Experimental Example 3] Mechanism of Fc receptor function regulation [0029] Mouse peritoneal macrophages induced by thioglycollate medium were added with the compound of the present invention or compound A obtained in the Example at a concentration of 100 nM to produce messenger RNA. A synthetic inhibitor, actinomycin (Actinomy)
Cin) D and incubated for 15 hours. After culturing, GOA
GO was added and reacted at 4 ° C for 4 hours.
【００３０】次に未結合のＧＯＡＧＯを洗浄除去後、マ
クロファージに結合したＧＯＡＧＯ量を、そのグルコー
スオキシダーゼ（ｇｌｃｏｓｅ ｏｘｄａｓｅ）活性を
指標に測定し、免疫複合体結合量とした。Next, after removing unbound GOAGO by washing, the amount of GOAGO bound to the macrophages was measured using its glucose oxidase activity as an index, and used as the amount of immune complex binding.
【００３１】結果を免疫複合体結合量増加率（％）とし
て表２に示した。The results are shown in Table 2 as an increase rate (%) in the amount of bound immune complex.
【００３２】表２ Table 2
【００３３】実験例１の結果より免疫複合体結合能は本
発明の化合物および化合物Ａが約０．１ｎＭから１０ｎ
Ｍまで用量依存的に増加することが明らかであり、実験
例２の結果より免疫複合体結合能の増加は免疫複合体を
結合するマクロファージ表面上のＦｃレセプターの数の
増加によるものであることが認められた。更には、実験
例３の結果よりＦｃレセプターの数の増加がｍＲＮＡの
新たな生合成を要するデノボ（ｄｅ ｎｏｖｏ）合成に
よることが確認された。From the results of Experimental Example 1, the compounds of the present invention and the compound A have an immunocomplex binding ability of about 0.1 nM to 10 n.
It is clear that the concentration increases up to M in a dose-dependent manner, and from the results of Experimental Example 2, the increase in the immune complex binding ability is due to the increase in the number of Fc receptors on the surface of macrophages that bind the immune complex. Admitted. Furthermore, from the results of Experimental Example 3, it was confirmed that the increase in the number of Fc receptors was due to de novo synthesis which requires new biosynthesis of mRNA.
【００３４】［発明の効果］以上のように本発明の化合
物および化合物ＡはＦｃレセプターの産生を促進する化
合物であり、活性化に伴う機能の発現に不可欠なマクロ
ファージの生化学的あるいは形態学的変化が何であるか
を解明するのに有用な因子としての用途が期待できる。[Effects of the Invention] As described above, the compound of the present invention and Compound A are compounds that promote the production of Fc receptors, and are biochemically or morphologically macrophage essential for the expression of functions associated with activation. It can be expected to be used as a useful factor for elucidating what the change is.
【００３５】具体的には、Ｆｃレセプター産生促進剤を
用いて血中から抗原抗体複合体の除去またはマクロファ
ージの活性を促進させることにより、抗体依存性細胞障
害反応、アラキドン酸代謝産物の放出、活性酸素類の放
出、リソゾーム酵素の放出、インターロイキン１阻害因
子の放出および抗原提示細胞の抗原提示能の増強の活性
化に伴う機能の発現に不可欠なマクロファージの生化学
的あるいは形態学的変化が何であるかを解明するの用い
ることができる。Specifically, the Fc receptor production promoter is used to remove the antigen-antibody complex from the blood or to accelerate the activity of macrophages, whereby antibody-dependent cellular cytotoxicity, release of arachidonic acid metabolites, and activity. What is the biochemical or morphological change of macrophages essential for the expression of functions associated with the release of oxygens, the release of lysosomal enzymes, the release of interleukin 1 inhibitor and the activation of the enhancement of the antigen-presenting ability of antigen-presenting cells It can be used to elucidate what is there.
【手続補正２】[Procedure Amendment 2]
【補正対象書類名】明細書[Document name to be amended] Statement
【補正対象項目名】図面の簡単な説明[Name of item to be corrected] Brief description of the drawing
【補正方法】追加[Correction method] Added
【補正内容】[Correction content]
【図面の簡単な説明】[Brief description of drawings]
【図１】本発明の組成物のマクロファージに対する効果
を示す図である。FIG. 1 shows the effect of the composition of the present invention on macrophages.
【符号の説明】 Ｂ：ＧＯＡＧＯ結合量 （ｎｇ／１０5細胞） Ｆ：ＧＯＡＧＯ未結合量（ｎｇ／１０5細胞） △：対照群 ○：本発明の化合物 □：化合物Ａ[Explanation of Codes] B: GOAGO binding amount (ng / 10 5 cells) F: GOAGO unbinding amount (ng / 10 5 cells) Δ: Control group ◯: Compound of the present invention □: Compound A
【手続補正３】[Procedure 3]
【補正対象書類名】図面[Document name to be corrected] Drawing
【補正対象項目名】全図[Correction target item name] All drawings
【補正方法】追加[Correction method] Added
【補正内容】[Correction content]
【図１】 [Figure 1]
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 丁 宗鉄 東京都港区白金５丁目９番１号 北里研究 所（社団法人） 附属東洋医学総合研究所 内 (72)発明者 山田陽城 東京都港区白金５丁目９番１号 北里研究 所（社団法人） 附属東洋医学総合研究所 内 ─────────────────────────────────────────────────── ─── Continuation of the front page (72) Inventor Sōtetsu 5-9-1 Shirokane, Minato-ku, Tokyo Kitasato Research Institute (Incorporated Association) Inside Institute of Oriental Medicine (72) Inventor Yoshiro Yamada Tokyo 5-9-1, Shirokane, Minato-ku Kitasato Research Institute (Incorporated Association) Institute of Oriental Medicine Research Institute
Claims (3)
促進剤。2. The following formula I An Fc receptor production promoter comprising a compound represented by as an active ingredient.
（ｄｅｃａｄｉｅｎｏｙｌ）］−インジェノール（ｉｎ
ｇｅｎｏｌ）を有効成分とするＦｃレセプター産生促進
剤。3. 3-O- [2E, 4Z-decadienoyl] -ingenol (in
genol) as an active ingredient, an Fc receptor production promoter.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP3198218A JPH06340586A (en) | 1991-07-15 | 1991-07-15 | Promoter for production of fc receptor |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP3198218A JPH06340586A (en) | 1991-07-15 | 1991-07-15 | Promoter for production of fc receptor |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH06340586A true JPH06340586A (en) | 1994-12-13 |
Family
ID=16387468
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP3198218A Pending JPH06340586A (en) | 1991-07-15 | 1991-07-15 | Promoter for production of fc receptor |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH06340586A (en) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| AU757663B2 (en) * | 1998-12-11 | 2003-02-27 | Telesystems Co., Ltd. | Bowling pin arrangement control device and its connecting unit |
| CN104024212A (en) * | 2011-10-19 | 2014-09-03 | 韩国生命工学研究院 | Ingenane-Type Diterpene Compound, And Pharmaceutical Composition For Treating Or Preventing Viral Infectious Diseases Containing Same |
-
1991
- 1991-07-15 JP JP3198218A patent/JPH06340586A/en active Pending
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| AU757663B2 (en) * | 1998-12-11 | 2003-02-27 | Telesystems Co., Ltd. | Bowling pin arrangement control device and its connecting unit |
| CN104024212A (en) * | 2011-10-19 | 2014-09-03 | 韩国生命工学研究院 | Ingenane-Type Diterpene Compound, And Pharmaceutical Composition For Treating Or Preventing Viral Infectious Diseases Containing Same |
| US9481630B2 (en) | 2011-10-19 | 2016-11-01 | Korea Research Institute Of Bioscience And Biotechnology | Ingenane-type diterpene compound, and pharmaceutical composition for treating or preventing viral infectious diseases containing same |
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