JPH06292477A - ラン科植物の組織培養法 - Google Patents
ラン科植物の組織培養法Info
- Publication number
- JPH06292477A JPH06292477A JP8490493A JP8490493A JPH06292477A JP H06292477 A JPH06292477 A JP H06292477A JP 8490493 A JP8490493 A JP 8490493A JP 8490493 A JP8490493 A JP 8490493A JP H06292477 A JPH06292477 A JP H06292477A
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- JP
- Japan
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- plb
- tissue
- plant
- tissue culture
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- Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【目的】 組織培養によるラン科植物の生産における幼
苗の生産効率を向上させる。 【構成】 ラン科植物の生長点の組織片を液体培地にて
培養して得たＰＬＢ１を肥大生長させた後、茎葉が未形
成な状態で液体培地より取り出し、メス等を用いて複数
個に切断する。この際、切断は、切断の結果得られた組
織片を構成する細胞のうち少なくとも１個が無傷のまま
残存するよう行い、かつＰＬＢ１の切片の個数は可能な
限り多くする。分割して得た組織片１ａ〜１ｈを液体培
地に浸漬して培養を行うと、やがて新たなＰＬＢが形成
され、これらのＰＬＢがある程度肥大生長したところで
ＰＬＢを再分化用の個体培地に移植すると、ＰＬＢが萌
芽を開始し、複数個の植物体が形成される。
苗の生産効率を向上させる。 【構成】 ラン科植物の生長点の組織片を液体培地にて
培養して得たＰＬＢ１を肥大生長させた後、茎葉が未形
成な状態で液体培地より取り出し、メス等を用いて複数
個に切断する。この際、切断は、切断の結果得られた組
織片を構成する細胞のうち少なくとも１個が無傷のまま
残存するよう行い、かつＰＬＢ１の切片の個数は可能な
限り多くする。分割して得た組織片１ａ〜１ｈを液体培
地に浸漬して培養を行うと、やがて新たなＰＬＢが形成
され、これらのＰＬＢがある程度肥大生長したところで
ＰＬＢを再分化用の個体培地に移植すると、ＰＬＢが萌
芽を開始し、複数個の植物体が形成される。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、ラン科植物の生長点を
無菌的に摘出して培養し、形成されたプロトコーム状球
体から植物体を再分化させるラン科植物の組織培養方法
に関する。
無菌的に摘出して培養し、形成されたプロトコーム状球
体から植物体を再分化させるラン科植物の組織培養方法
に関する。
【０００２】
【従来の技術】ラン科植物は、接き木や挿し木のような
栄養繁殖が困難で、かつ開花まで長期間を要するため増
殖率が低く、しかも遺伝的分離が多いため、目的とする
品質の個体を大量に得るには不適当な植物とされ、ま
た、ウィルス汚染株が多いことも問題となっていた。し
かし、組織培養法の確立により、現在では、多くのラン
科植物において、安定した品質で、かつウィルスフリー
な個体を大量に生産することが可能となっている。
栄養繁殖が困難で、かつ開花まで長期間を要するため増
殖率が低く、しかも遺伝的分離が多いため、目的とする
品質の個体を大量に得るには不適当な植物とされ、ま
た、ウィルス汚染株が多いことも問題となっていた。し
かし、組織培養法の確立により、現在では、多くのラン
科植物において、安定した品質で、かつウィルスフリー
な個体を大量に生産することが可能となっている。
【０００３】これらラン科植物の組織培養法について、
デンドロビウム属の組織培養を例として説明する。ま
ず、生長しつつある新芽を消毒、水洗した後、生長点を
含む茎頂または側芽を切り取る。次いで、切り取った茎
頂または側芽から生長点を包む葉を取り除いて生長点を
露出させ、０．２〜３．０ｍｍ程度の組織片として摘出
する。
デンドロビウム属の組織培養を例として説明する。ま
ず、生長しつつある新芽を消毒、水洗した後、生長点を
含む茎頂または側芽を切り取る。次いで、切り取った茎
頂または側芽から生長点を包む葉を取り除いて生長点を
露出させ、０．２〜３．０ｍｍ程度の組織片として摘出
する。
【０００４】摘出した組織片を液体培地に浸漬し、振蘯
培養を行うと、約１カ月程度でプロトコーム状球体（以
下、ＰＬＢと略す。）と呼ばれる組織塊が形成され、更
に培養を続けることにより、ＰＬＢが自然に分割して増
殖する。これらのＰＬＢがある程度肥大生長したところ
で、ＰＬＢを再分化用の個体培地に移植すると、ＰＬＢ
はやがて萌芽を開始し、複数個の植物体が形成される。
そして、これらの植物体がある程度伸長生長したところ
で最終培地に移植して発根を促すことにより、圃場栽培
可能な幼苗が得られる。なお、上記操作のうち、生長点
の摘出以降の操作は、全て無菌的環境下で行う。
培養を行うと、約１カ月程度でプロトコーム状球体（以
下、ＰＬＢと略す。）と呼ばれる組織塊が形成され、更
に培養を続けることにより、ＰＬＢが自然に分割して増
殖する。これらのＰＬＢがある程度肥大生長したところ
で、ＰＬＢを再分化用の個体培地に移植すると、ＰＬＢ
はやがて萌芽を開始し、複数個の植物体が形成される。
そして、これらの植物体がある程度伸長生長したところ
で最終培地に移植して発根を促すことにより、圃場栽培
可能な幼苗が得られる。なお、上記操作のうち、生長点
の摘出以降の操作は、全て無菌的環境下で行う。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】ところで、デンドロビ
ウム属を始め複茎性の生長様式を採るラン科植物の組織
培養においては、形成されたＰＬＢを増殖させる場合、
ＰＬＢが自然に分割、増殖するのを待つ方法が採られて
いた。しかしながら、ＰＬＢの自然増殖には長時間を要
し、しかも、増殖中のＰＬＢは茎葉形成率が高く、変異
を生じやすいため、幼苗の生産効率が低いという問題が
あった。
ウム属を始め複茎性の生長様式を採るラン科植物の組織
培養においては、形成されたＰＬＢを増殖させる場合、
ＰＬＢが自然に分割、増殖するのを待つ方法が採られて
いた。しかしながら、ＰＬＢの自然増殖には長時間を要
し、しかも、増殖中のＰＬＢは茎葉形成率が高く、変異
を生じやすいため、幼苗の生産効率が低いという問題が
あった。
【０００６】本発明は、上記事情に鑑みてなされたもの
で、その目的とするところは、ＰＬＢ増殖率の向上と、
増殖中のＰＬＢにおける茎葉形成率の低下による、幼苗
の生産効率向上である。
で、その目的とするところは、ＰＬＢ増殖率の向上と、
増殖中のＰＬＢにおける茎葉形成率の低下による、幼苗
の生産効率向上である。
【０００７】
【課題を解決するための手段】本発明は、ラン科植物の
生長点を無菌的に摘出して培養し、形成されたＰＬＢか
ら植物体を再分化させるラン科植物の組織培養法におい
て、前記ＰＬＢの形成後、前記ＰＬＢに茎葉が形成され
るまでの間に前記ＰＬＢを複数の組織片に切断し、この
組織片を更に培養して得られたＰＬＢから前記植物体を
再分化させることをその特徴とするものである。
生長点を無菌的に摘出して培養し、形成されたＰＬＢか
ら植物体を再分化させるラン科植物の組織培養法におい
て、前記ＰＬＢの形成後、前記ＰＬＢに茎葉が形成され
るまでの間に前記ＰＬＢを複数の組織片に切断し、この
組織片を更に培養して得られたＰＬＢから前記植物体を
再分化させることをその特徴とするものである。
【０００８】
【作用】本発明のラン科植物の組織培養法においては、
ＰＬＢの形成後、前記ＰＬＢに茎葉が形成されるまでの
間に前記ＰＬＢを複数の組織片に切断して培養すること
により、ＰＬＢの数が増加し、かつ前記組織片を更に培
養して得られたＰＬＢにおける茎葉形成率が低下する。
ＰＬＢの形成後、前記ＰＬＢに茎葉が形成されるまでの
間に前記ＰＬＢを複数の組織片に切断して培養すること
により、ＰＬＢの数が増加し、かつ前記組織片を更に培
養して得られたＰＬＢにおける茎葉形成率が低下する。
【０００９】
【実施例】以下、図面に基づき、本発明の実施例につい
て、デンドロビウム属の組織培養を例として更に詳しく
説明する。なお、本発明は、上記従来の組織培養法のう
ち、特にＰＬＢの増殖行程に関する改良であるため、組
織培養法の他の行程についてはその説明を省略する。
て、デンドロビウム属の組織培養を例として更に詳しく
説明する。なお、本発明は、上記従来の組織培養法のう
ち、特にＰＬＢの増殖行程に関する改良であるため、組
織培養法の他の行程についてはその説明を省略する。
【００１０】図１は、生長点の組織片を液体培地にて振
蘯もしくは回転培養して得たＰＬＢ１を、直径が約５〜
１０ｍｍ程度となるまで肥大生長させたものである。本
発明の組織培養法では、このＰＬＢ１を液体培地より取
り出し、メス等を用いて複数個に切断するが、切断され
るＰＬＢ１は茎葉が未形成である必要がある。これは、
切断されるＰＬＢ１に茎葉が形成されていると、切断に
より得られた組織片を液体培地中にて培養中、前記組織
片から形成されたＰＬＢに茎葉が形成される可能性があ
るためである。
蘯もしくは回転培養して得たＰＬＢ１を、直径が約５〜
１０ｍｍ程度となるまで肥大生長させたものである。本
発明の組織培養法では、このＰＬＢ１を液体培地より取
り出し、メス等を用いて複数個に切断するが、切断され
るＰＬＢ１は茎葉が未形成である必要がある。これは、
切断されるＰＬＢ１に茎葉が形成されていると、切断に
より得られた組織片を液体培地中にて培養中、前記組織
片から形成されたＰＬＢに茎葉が形成される可能性があ
るためである。
【００１１】また、切断は、切断により得られた組織片
を構成する細胞のうち少なくとも１個が無傷のまま残存
するよう行うことが望ましく、かつＰＬＢ１の分割個数
は可能な限り多くする。
を構成する細胞のうち少なくとも１個が無傷のまま残存
するよう行うことが望ましく、かつＰＬＢ１の分割個数
は可能な限り多くする。
【００１２】ここで、前記組織片中に、少なくとも１個
の細胞を無傷のまま残存させる理由は、前記組織片中に
おける全ての細胞に傷が付くと、前記組織片が枯死する
ためである。また、ＰＬＢ１の切断回数を可能な限り多
くする理由は、ＰＬＢ１の切断回数が少ない程、前記組
織片から形成されたＰＬＢに茎葉が形成される可能性が
増大し、かつＰＬＢ１の切断回数が多い程、個々の前記
組織片から形成されたＰＬＢの生長率が向上するためで
ある。図１の場合、ＰＬＢ１は符号１ａ〜１ｈで示す８
個の組織片に切断される。
の細胞を無傷のまま残存させる理由は、前記組織片中に
おける全ての細胞に傷が付くと、前記組織片が枯死する
ためである。また、ＰＬＢ１の切断回数を可能な限り多
くする理由は、ＰＬＢ１の切断回数が少ない程、前記組
織片から形成されたＰＬＢに茎葉が形成される可能性が
増大し、かつＰＬＢ１の切断回数が多い程、個々の前記
組織片から形成されたＰＬＢの生長率が向上するためで
ある。図１の場合、ＰＬＢ１は符号１ａ〜１ｈで示す８
個の組織片に切断される。
【００１３】この組織片１ａ〜１ｈを液体培地に浸漬
し、振蘯もしくは回転培養を行うと、約一ヶ月程度で新
たなＰＬＢが形成される。そして、更に培養を続け、こ
れらのＰＬＢがある程度肥大生長したところでＰＬＢを
再分化用の個体培地に移植すると、ＰＬＢはやがて萌芽
を開始し、複数個の植物体が形成される。なお、上記操
作は全て無菌的環境下で行う。
し、振蘯もしくは回転培養を行うと、約一ヶ月程度で新
たなＰＬＢが形成される。そして、更に培養を続け、こ
れらのＰＬＢがある程度肥大生長したところでＰＬＢを
再分化用の個体培地に移植すると、ＰＬＢはやがて萌芽
を開始し、複数個の植物体が形成される。なお、上記操
作は全て無菌的環境下で行う。
【００１４】ここで、本発明の組織培養法においては、
ＰＬＢ１を複数個に切断することによりＰＬＢの個数を
増加させたため、短時間で多くのＰＬＢが得られる。更
に、切断により得られたＰＬＢにおける茎葉の形成率も
低下する。従って、幼苗の生産効率を大幅に向上させる
ことができる。しかも、切断により得られたＰＬＢは生
長が速いので、幼苗の生産効率が更に向上する。
ＰＬＢ１を複数個に切断することによりＰＬＢの個数を
増加させたため、短時間で多くのＰＬＢが得られる。更
に、切断により得られたＰＬＢにおける茎葉の形成率も
低下する。従って、幼苗の生産効率を大幅に向上させる
ことができる。しかも、切断により得られたＰＬＢは生
長が速いので、幼苗の生産効率が更に向上する。
【００１５】なお、本実施例ではデンドロビウム属の組
織培養法について説明したが、本発明の組織培養法は、
デンドロビウム属のみならず、ファノプレシス等他のラ
ン科植物に対して広く適用可能な方法である。
織培養法について説明したが、本発明の組織培養法は、
デンドロビウム属のみならず、ファノプレシス等他のラ
ン科植物に対して広く適用可能な方法である。
【００１６】
【実験例】以下に実験例を示し、本発明の効果について
説明する。表１は、デンドロビウム属に属するラン科植
物の茎頂に形成された生長点から組織片を摘出し、この
組織片から形成された重量約５００mgのＰＬＢを所定回
数切断して得た組織片をそれぞれ液体培地にて６０日間
培養し、形成されたＰＬＢの個数およびその生体重、６
０日後の生長率、および生体重の平均倍加時間を調査し
たものである。
説明する。表１は、デンドロビウム属に属するラン科植
物の茎頂に形成された生長点から組織片を摘出し、この
組織片から形成された重量約５００mgのＰＬＢを所定回
数切断して得た組織片をそれぞれ液体培地にて６０日間
培養し、形成されたＰＬＢの個数およびその生体重、６
０日後の生長率、および生体重の平均倍加時間を調査し
たものである。
【００１７】ここで、液体培地にはムラシゲ＝スクーグ
培地を用い、培養条件としては、温度を２５℃定温、照
明を蛍光灯で２４時間／日とし、組織片各５個ずつを１
実験区として、それぞれ静置培養および振蘯培養を行っ
た。また、実験は全て無菌的環境下で行った。
培地を用い、培養条件としては、温度を２５℃定温、照
明を蛍光灯で２４時間／日とし、組織片各５個ずつを１
実験区として、それぞれ静置培養および振蘯培養を行っ
た。また、実験は全て無菌的環境下で行った。
【００１８】
【表１】
【００１９】注：表１中の区は、 ａ，ｆ（比較例１，３）：茎葉（shoot）が分化中のＰ
ＬＢで切断しないもの ｂ，ｇ（比較例２，４）：茎葉が未形成のＰＬＢで切断
しないもの ｃ，ｈ（実施例１，４）：茎葉が未形成のＰＬＢを１回
切断（２分割）したもの ｄ，ｉ（実施例２，５）：ｃ，ｈを更に１回切断（２分
割）したもの ｅ，ｊ（実施例３，６）：ｄ，ｉを更に１回切断（２分
割）したものをそれぞれ示す。
ＬＢで切断しないもの ｂ，ｇ（比較例２，４）：茎葉が未形成のＰＬＢで切断
しないもの ｃ，ｈ（実施例１，４）：茎葉が未形成のＰＬＢを１回
切断（２分割）したもの ｄ，ｉ（実施例２，５）：ｃ，ｈを更に１回切断（２分
割）したもの ｅ，ｊ（実施例３，６）：ｄ，ｉを更に１回切断（２分
割）したものをそれぞれ示す。
【００２０】また、表１中、「PLB(S)」は茎葉（Shoo
t）が形成されたＰＬＢを示し、（）内の数値は、平均
生体重（g）を示す。更に、表１中、「切片の個数」
（＊を付したもの）は、切断の結果、１つのＰＬＢ塊か
ら得られた切片の個数を、「培養後の状態」（＊＊を付
したもの）は、供試試験管数をそれぞれ示す。
t）が形成されたＰＬＢを示し、（）内の数値は、平均
生体重（g）を示す。更に、表１中、「切片の個数」
（＊を付したもの）は、切断の結果、１つのＰＬＢ塊か
ら得られた切片の個数を、「培養後の状態」（＊＊を付
したもの）は、供試試験管数をそれぞれ示す。
【００２１】表１の結果からわかる通り、ＰＬＢ切片の
個数が多い（切断回数が多い）程、前記組織片から形成
されたＰＬＢに茎葉が形成される可能性が低下する傾向
がある。また、ＰＬＢ切片の個数が多い程、個々の前記
組織片から形成されたＰＬＢの生長率が向上し、それに
伴い生体重の平均倍加時間が短縮する。
個数が多い（切断回数が多い）程、前記組織片から形成
されたＰＬＢに茎葉が形成される可能性が低下する傾向
がある。また、ＰＬＢ切片の個数が多い程、個々の前記
組織片から形成されたＰＬＢの生長率が向上し、それに
伴い生体重の平均倍加時間が短縮する。
【００２２】
【発明の効果】以上説明した通り、本発明の組織培養法
によれば、短時間で多くのＰＬＢを得ることが可能であ
る。従って、幼苗の生産効率を大幅に向上させることが
できる。
によれば、短時間で多くのＰＬＢを得ることが可能であ
る。従って、幼苗の生産効率を大幅に向上させることが
できる。
【図１】本発明に係るＰＬＢ切断の例を示すものであ
る。
る。
１ プロトコーム状球体（ＰＬＢ） １ａ，１ｂ，１ｃ，１ｄ，１ｅ，１ｆ，１ｇ，１ｈ 組
織片
織片
Claims (2)
- 【請求項１】 ラン科植物の生長点を無菌的に摘出して
培養し、形成されたプロトコーム状球体から植物体を再
分化させるラン科植物の組織培養法において、 前記プロトコーム状球体の形成後、前記プロトコーム状
球体が茎葉を形成するまでの間に前記プロトコーム状球
体を複数の組織片に切断し、この組織片を更に培養して
得られた新たなプロトコーム状球体から前記植物体を再
分化させることを特徴とするラン科植物の組織培養法。 - 【請求項２】 切断の結果得られた前記組織片中に、少
なくとも１個の細胞が無傷のまま残存していることを特
徴とする請求項１記載のラン科植物の組織培養法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP8490493A JPH06292477A (ja) | 1993-04-12 | 1993-04-12 | ラン科植物の組織培養法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP8490493A JPH06292477A (ja) | 1993-04-12 | 1993-04-12 | ラン科植物の組織培養法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH06292477A true JPH06292477A (ja) | 1994-10-21 |
Family
ID=13843730
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP8490493A Withdrawn JPH06292477A (ja) | 1993-04-12 | 1993-04-12 | ラン科植物の組織培養法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH06292477A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0800762A1 (en) * | 1996-04-03 | 1997-10-15 | Sapporo Breweries Ltd. | Method for producing phalaenopsis clone plants through root tip culture |
-
1993
- 1993-04-12 JP JP8490493A patent/JPH06292477A/ja not_active Withdrawn
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0800762A1 (en) * | 1996-04-03 | 1997-10-15 | Sapporo Breweries Ltd. | Method for producing phalaenopsis clone plants through root tip culture |
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A300 | Withdrawal of application because of no request for examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A300 Effective date: 20000704 |