JPH06157589A - ファルネシル−蛋白トランスフェラーゼの非基質性阻害剤 - Google Patents
ファルネシル−蛋白トランスフェラーゼの非基質性阻害剤Info
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- JPH06157589A JPH06157589A JP4170918A JP17091892A JPH06157589A JP H06157589 A JPH06157589 A JP H06157589A JP 4170918 A JP4170918 A JP 4170918A JP 17091892 A JP17091892 A JP 17091892A JP H06157589 A JPH06157589 A JP H06157589A
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- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
- C07K5/10—Tetrapeptides
- C07K5/1002—Tetrapeptides with the first amino acid being neutral
- C07K5/1005—Tetrapeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
- C07K5/1013—Tetrapeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing O or S as heteroatoms, e.g. Cys, Ser
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- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
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- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
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Abstract
(57)【要約】 （修正有）
【構成】 アミノ酸配列
Cys - Xaa1 - Xaa2 - Xaa3
〔式中Cysはシステインアミノ酸、Xaa1はどのアミノ酸
でもよく、Xaa2はフェニルアラニンまたはｐ−フルオロ
フェニルアラニンであり、Xaa3はどのアミノ酸でもよ
い〕を有し、非基質性阻害剤として作用することによっ
て、ファルネシル−蛋白トランスフェラーゼを阻害しそ
して正常な細胞の癌細胞へのトランスフォーメーション
を阻止する化合物。 【効果】 この化合物は、ファルネシル−蛋白トランス
フェラーゼ（FTase)及びオンコジーンのファルネシル化
を阻害し、癌の治療に有効である。
でもよく、Xaa2はフェニルアラニンまたはｐ−フルオロ
フェニルアラニンであり、Xaa3はどのアミノ酸でもよ
い〕を有し、非基質性阻害剤として作用することによっ
て、ファルネシル−蛋白トランスフェラーゼを阻害しそ
して正常な細胞の癌細胞へのトランスフォーメーション
を阻止する化合物。 【効果】 この化合物は、ファルネシル−蛋白トランス
フェラーゼ（FTase)及びオンコジーンのファルネシル化
を阻害し、癌の治療に有効である。
Description
【０００１】Ｒａｓ遺伝子は大腸癌外分泌膵癌及び骨髄
性白血病を含む多くのヒト癌において活性化が見られ
る。Ｒａｓ作用の生物学的及び生化学的研究によりＲａ
ｓが血漿膜に局在し細胞をトランスフォームするために
ＧＴＰと結合するのでＲａｓがＧ調節タンパク質のよう
に作用することは示されている（Gibbs,Ｊ．等、Microb
iol.Rev.５３：１７１−２８６（１９８９））。癌細胞
におけるＲａｓの形態は変異しておりそのタンパク質は
正常細胞におけるＲａｓと区別される。
性白血病を含む多くのヒト癌において活性化が見られ
る。Ｒａｓ作用の生物学的及び生化学的研究によりＲａ
ｓが血漿膜に局在し細胞をトランスフォームするために
ＧＴＰと結合するのでＲａｓがＧ調節タンパク質のよう
に作用することは示されている（Gibbs,Ｊ．等、Microb
iol.Rev.５３：１７１−２８６（１９８９））。癌細胞
におけるＲａｓの形態は変異しておりそのタンパク質は
正常細胞におけるＲａｓと区別される。
【０００２】少なくとも３つの翻訳後修飾はＲａｓ膜の
この局在化と関係があり、３つの修飾は全てＲａｓのＣ
末端で起こる。ＲａｓＣ末端は“ＣＡＡＸ”又は“Cys-
Aaa1-Aaa2-Xaa ”ポックス（Aaa は脂肪族アミノ酸であ
り、Xaa はあらゆるアミノ酸である）と呼ばれる配列モ
チーフを含む（Willumsen 等 Nature ３１０：５８３−
５８６（１９８４）。このモチーフを有する他のタンパ
ク質にはＲｈｏ、真菌配偶因子、核ラミン及びトランス
デューシンのγサブユニットのようなＲａｓ関連ＧＴＰ
結合タンパク質がある。
この局在化と関係があり、３つの修飾は全てＲａｓのＣ
末端で起こる。ＲａｓＣ末端は“ＣＡＡＸ”又は“Cys-
Aaa1-Aaa2-Xaa ”ポックス（Aaa は脂肪族アミノ酸であ
り、Xaa はあらゆるアミノ酸である）と呼ばれる配列モ
チーフを含む（Willumsen 等 Nature ３１０：５８３−
５８６（１９８４）。このモチーフを有する他のタンパ
ク質にはＲｈｏ、真菌配偶因子、核ラミン及びトランス
デューシンのγサブユニットのようなＲａｓ関連ＧＴＰ
結合タンパク質がある。
【０００３】イソプレノイドファルネシルジホスフェー
ト（ＦＰＰ）によるＲａｓのファルネシル化はチオエー
テル結合を生成するために生体内でＣｙｓに生じる(Han
cock等、Cell５７：１１６７（１９８９））；Casey
等、Proc. Natl. Acad. Sci. USA８６：８３２３（１９
８９））。更にＨａ−Ｒａｓ及びＮ−ＲａｓはＣ末端Ｃ
ｙｓファルネシル受容体近傍のＣｙｓ残基でチオエステ
ルの生成を経てパルミトイル化される（Gutierrez 等、
EMBO J. ８：１０９３−１０９８（１９８９）；Hancoc
k 等 Cell ５７：１１６７−１１７７（１９８９））。
Ｋｉ−Ｒａｓはパルミテート受容体Ｃｙｓがない。Ｒａ
ｓのＣ末端基の最後の３アミノ酸はタンパク質分解的に
除去されメチルエステル化は新しいＣ末端で生じる(Han
cock等、同文献）。真菌配偶因子及び哺乳動物核ラミン
は同じ修飾段階を受ける（Anderegg等、J. Biol. Chem.
２６３：１８２３６（１９８８）；Farnsworth等、J. B
iol.Chem.２６４：２０４２２（１９８９））。
ト（ＦＰＰ）によるＲａｓのファルネシル化はチオエー
テル結合を生成するために生体内でＣｙｓに生じる(Han
cock等、Cell５７：１１６７（１９８９））；Casey
等、Proc. Natl. Acad. Sci. USA８６：８３２３（１９
８９））。更にＨａ−Ｒａｓ及びＮ−ＲａｓはＣ末端Ｃ
ｙｓファルネシル受容体近傍のＣｙｓ残基でチオエステ
ルの生成を経てパルミトイル化される（Gutierrez 等、
EMBO J. ８：１０９３−１０９８（１９８９）；Hancoc
k 等 Cell ５７：１１６７−１１７７（１９８９））。
Ｋｉ−Ｒａｓはパルミテート受容体Ｃｙｓがない。Ｒａ
ｓのＣ末端基の最後の３アミノ酸はタンパク質分解的に
除去されメチルエステル化は新しいＣ末端で生じる(Han
cock等、同文献）。真菌配偶因子及び哺乳動物核ラミン
は同じ修飾段階を受ける（Anderegg等、J. Biol. Chem.
２６３：１８２３６（１９８８）；Farnsworth等、J. B
iol.Chem.２６４：２０４２２（１９８９））。
【０００４】Ｒａｓファルネシル化の生体内阻害はロバ
スタチン（Merck & Co. ラーウェイ、ＮＪ）及びコンパ
クチンで示されている（Hancock 等、同文献；Casey
等、同文献；Schafer 等Science ２４５: ３７９（１９
８９）。これらの薬剤はＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素、ポリ
イソプレノイドを生産するための律速酵素及びファルネ
シルジホスフェート前駆体を阻害する。前駆体としてフ
ァルネシルジホスフェートを用いるファルネシルタンパ
ク質トランスフェラーゼがＲａｓファルネシル化に関与
していることは知られている（Reiss 等、Cell. ６２：
８１−８８（１９９０）；Schaber 等、J. Biol. Chem.
２６５：１４７０１−１４７０４（１９９０）；Schafe
r 等Science ２４９: １１３３−１１３９（１９９
０）；Manne 等、Proc. Natl. Acad. Sci. USA. ８７：
７５４１−７５４５（１９９０) ）。
スタチン（Merck & Co. ラーウェイ、ＮＪ）及びコンパ
クチンで示されている（Hancock 等、同文献；Casey
等、同文献；Schafer 等Science ２４５: ３７９（１９
８９）。これらの薬剤はＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素、ポリ
イソプレノイドを生産するための律速酵素及びファルネ
シルジホスフェート前駆体を阻害する。前駆体としてフ
ァルネシルジホスフェートを用いるファルネシルタンパ
ク質トランスフェラーゼがＲａｓファルネシル化に関与
していることは知られている（Reiss 等、Cell. ６２：
８１−８８（１９９０）；Schaber 等、J. Biol. Chem.
２６５：１４７０１−１４７０４（１９９０）；Schafe
r 等Science ２４９: １１３３−１１３９（１９９
０）；Manne 等、Proc. Natl. Acad. Sci. USA. ８７：
７５４１−７５４５（１９９０) ）。
【０００５】ファルネシルタンパク質トランスフェラー
ゼ及びＲａｓタンパク質のファルネシル化の阻害はＲａ
ｓが正常細胞を癌細胞にトランスフォームする能力を遮
断する。本発明の化合物は血漿膜にＲａｓが局在するこ
とを阻害し可溶性Ｒａｓを生成させ下記で示すようにＲ
ａｓ機能の負の優性阻害剤として作用することができ
る。癌細胞における可溶性Ｒａｓは負の優性阻害剤にな
ることができるが正常細胞における可溶性Ｒａｓは阻害
剤とはならない。
ゼ及びＲａｓタンパク質のファルネシル化の阻害はＲａ
ｓが正常細胞を癌細胞にトランスフォームする能力を遮
断する。本発明の化合物は血漿膜にＲａｓが局在するこ
とを阻害し可溶性Ｒａｓを生成させ下記で示すようにＲ
ａｓ機能の負の優性阻害剤として作用することができ
る。癌細胞における可溶性Ｒａｓは負の優性阻害剤にな
ることができるが正常細胞における可溶性Ｒａｓは阻害
剤とはならない。
【０００６】Ｒａｓのシトソル局在化（Cys-Aaa1-Aaa2-
Xaa ボックス膜ドメインは存在しない) 及び活性化( Ｇ
ＴＰase 低下、ＧＴＰに結合したまま）形態は膜結合Ｒ
ａｓ機能の負の優性Ｒａｓ阻害剤として作用する（Gibb
s 等、Proc. Natl. Acad. Sci.USA ８６：６６３０−６
６３４（１９８９））。正常なＧＴＰase によるＲａｓ
のシトソル局在化形態は阻害剤として作用しない。Gibb
s 等同文献にはアフリカツメガエル卵母細胞及び哺乳動
物細胞でこの効果が示されている。Ｒａｓファルネシル
化を遮断するために本発明の化合物を投与すると膜中の
Ｒａｓ量を減少させるばかりでなくＲａｓのシトソルプ
ールを生じる。活性化Ｒａｓを有する腫瘍細胞ではシト
ソルプールは膜結合Ｒａｓ機能のもう１つの拮抗薬とし
て作用する。正常なＲａｓを有する正常な細胞ではＲａ
ｓのシトソルプールは拮抗薬として作用しない。ファル
ネシル化を完全に阻害しないときはファルネシル化タン
パク質は引き続きそれらの機能を有することができる。
Xaa ボックス膜ドメインは存在しない) 及び活性化( Ｇ
ＴＰase 低下、ＧＴＰに結合したまま）形態は膜結合Ｒ
ａｓ機能の負の優性Ｒａｓ阻害剤として作用する（Gibb
s 等、Proc. Natl. Acad. Sci.USA ８６：６６３０−６
６３４（１９８９））。正常なＧＴＰase によるＲａｓ
のシトソル局在化形態は阻害剤として作用しない。Gibb
s 等同文献にはアフリカツメガエル卵母細胞及び哺乳動
物細胞でこの効果が示されている。Ｒａｓファルネシル
化を遮断するために本発明の化合物を投与すると膜中の
Ｒａｓ量を減少させるばかりでなくＲａｓのシトソルプ
ールを生じる。活性化Ｒａｓを有する腫瘍細胞ではシト
ソルプールは膜結合Ｒａｓ機能のもう１つの拮抗薬とし
て作用する。正常なＲａｓを有する正常な細胞ではＲａ
ｓのシトソルプールは拮抗薬として作用しない。ファル
ネシル化を完全に阻害しないときはファルネシル化タン
パク質は引き続きそれらの機能を有することができる。
【０００７】ファルネシルタンパク質トランスフェラー
ゼ活性は化合物用量を調節することによって低下又は完
全に阻害される。化合物用量を調節することによってフ
ァルネシルタンパク質トランスフェラーゼ酵素活性を低
下させることは酵素を利用する他の代謝過程を妨害する
ような起こりうる望ましくない副作用を避けるのに有効
である。
ゼ活性は化合物用量を調節することによって低下又は完
全に阻害される。化合物用量を調節することによってフ
ァルネシルタンパク質トランスフェラーゼ酵素活性を低
下させることは酵素を利用する他の代謝過程を妨害する
ような起こりうる望ましくない副作用を避けるのに有効
である。
【０００８】これらの化合物及びそれらの類縁体はファ
ルネシルタンパク質トランスフェラーゼの阻害剤であ
る。ファルネシルタンパク質トランスフェラーゼはＲａ
ｓＣＡＡＸボックスのＣｙｓチオール基をファルネシル
基と共有結合で修飾するためにファルネシルジホスフェ
ートを利用する。ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素の阻害による
ファルネシルジホスフェート生合成の阻害はＲａｓ膜局
在化を生体内で遮断し、Ｒａｓ機能を阻害する。ファル
ネシルタンパク質トランスフェラーゼの阻害は更に特異
的であり、イソプレン生合成の一般的阻害剤の場合より
も副作用を伴わない。
ルネシルタンパク質トランスフェラーゼの阻害剤であ
る。ファルネシルタンパク質トランスフェラーゼはＲａ
ｓＣＡＡＸボックスのＣｙｓチオール基をファルネシル
基と共有結合で修飾するためにファルネシルジホスフェ
ートを利用する。ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素の阻害による
ファルネシルジホスフェート生合成の阻害はＲａｓ膜局
在化を生体内で遮断し、Ｒａｓ機能を阻害する。ファル
ネシルタンパク質トランスフェラーゼの阻害は更に特異
的であり、イソプレン生合成の一般的阻害剤の場合より
も副作用を伴わない。
【０００９】以前にＣＡＡＸボックスのテトラペプチド
模擬薬がＲａｓファルネシル化を阻害することは実証さ
れている（Schaber 等、同文献；Ｒeiss等、同文献）；
Reiss 等、ＰＮＡＳ、８８：７３２−７３６（１９９
１）。このペプチドは基質として作用すると思われる。
ファルネシル化テトラペプチドは約１５倍効力を失うの
で（Schaber 等、同文献）、非基質化合物として作用し
て真の阻害剤として作用するテトラペプチドを開発する
ことは望ましいことである。本発明の新規な特徴は、基
質でなくあるいは不十分な基質であって非基質阻害剤と
して作用する一種のテトラペプチドの発見にある。
模擬薬がＲａｓファルネシル化を阻害することは実証さ
れている（Schaber 等、同文献；Ｒeiss等、同文献）；
Reiss 等、ＰＮＡＳ、８８：７３２−７３６（１９９
１）。このペプチドは基質として作用すると思われる。
ファルネシル化テトラペプチドは約１５倍効力を失うの
で（Schaber 等、同文献）、非基質化合物として作用し
て真の阻害剤として作用するテトラペプチドを開発する
ことは望ましいことである。本発明の新規な特徴は、基
質でなくあるいは不十分な基質であって非基質阻害剤と
して作用する一種のテトラペプチドの発見にある。
【００１０】従って本発明の目的はファルネシルタンパ
ク質トランスフェラーゼ及び癌遺伝子タンパク質Ｒａｓ
のファルネシル化を阻害する化合物を開発することであ
る。更に、本発明の目的は、本発明の化合物を含有する
化学療法組成物及び本発明の化合物の製造方法を開発す
ることである。
ク質トランスフェラーゼ及び癌遺伝子タンパク質Ｒａｓ
のファルネシル化を阻害する化合物を開発することであ
る。更に、本発明の目的は、本発明の化合物を含有する
化学療法組成物及び本発明の化合物の製造方法を開発す
ることである。
【００１１】本発明は非基質阻害剤として働くことによ
りファルネシルタンパク質トランスフェラーゼ及び癌遺
伝子（オンコジーン）タンパク質Ｒａｓのファルネシル
化を阻害する化合物、本発明の化合物を含有する化学療
法組成物及び本発明の化合物の製造方法を含む。
りファルネシルタンパク質トランスフェラーゼ及び癌遺
伝子（オンコジーン）タンパク質Ｒａｓのファルネシル
化を阻害する化合物、本発明の化合物を含有する化学療
法組成物及び本発明の化合物の製造方法を含む。
【００１２】本発明の化合物は式： Cys-Xaa1-Xaa2-Xaa3 〔式中Cys はシステインアミノ酸であり；Xaa1はあらゆ
るアミノ酸であり；Xaa2はアミノ酸フェニルアラニン又
はｐ−フルオロフェニルアラニンであり、Xaa3はあらゆ
るアミノ酸である〕又はその薬学的に許容しうる塩によ
って示される。
るアミノ酸であり；Xaa2はアミノ酸フェニルアラニン又
はｐ−フルオロフェニルアラニンであり、Xaa3はあらゆ
るアミノ酸である〕又はその薬学的に許容しうる塩によ
って示される。
【００１３】本発明の化合物は非基質阻害剤として働く
ことによりファルネシルタンパク質トランスフェラーゼ
及び癌遺伝子タンパク質Ｒａｓのファルネシル化の阻害
に有効である。本発明の化合物は式： Cys-Xaa1-Xaa2-Xaa3 〔式中Cys はシステインアミノ酸であり；Xaa1はあらゆ
るアミノ酸であり；Xaa2はアミノ酸フェニルアラニン又
はｐ−フルオロフェニルアラニンであり；Xaa3はあらゆ
るアミノ酸である〕又はその薬学的に許容しうる塩によ
って示される。本発明の好ましい化合物としてはＣＶＦ
Ｍ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１）、ＣＩＦＭ（ＳＥＱ Ｉ
Ｄ ＮＯ：２）、ＣＩ（ｐ−フルオロ−Ｆ）Ｍ及びＣＩ
ＦＱ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３）がある。
ことによりファルネシルタンパク質トランスフェラーゼ
及び癌遺伝子タンパク質Ｒａｓのファルネシル化の阻害
に有効である。本発明の化合物は式： Cys-Xaa1-Xaa2-Xaa3 〔式中Cys はシステインアミノ酸であり；Xaa1はあらゆ
るアミノ酸であり；Xaa2はアミノ酸フェニルアラニン又
はｐ−フルオロフェニルアラニンであり；Xaa3はあらゆ
るアミノ酸である〕又はその薬学的に許容しうる塩によ
って示される。本発明の好ましい化合物としてはＣＶＦ
Ｍ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１）、ＣＩＦＭ（ＳＥＱ Ｉ
Ｄ ＮＯ：２）、ＣＩ（ｐ−フルオロ−Ｆ）Ｍ及びＣＩ
ＦＱ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３）がある。
【００１４】本発明において下記アミノ酸は下記のよう
に従来の３文字及び１文字略語で示される。 ─────────────────────────────────── システイン Ｃｙｓ Ｃ グルタミン Ｇｌｎ Ｑ グリシン ＧＬｙ Ｇ イソロイシン Ｉｌｅ Ｉ ロイシン Ｌｅｕ Ｌ リシン Ｌｙｓ Ｋ メチオニン Ｍｅｔ Ｍ フェニルアラニン Ｐｈｅ Ｆ セリン Ｓｅｒ Ｓ トレオニン Ｔｈｒ Ｔ バリン Ｖａｌ Ｖ ───────────────────────────────────
に従来の３文字及び１文字略語で示される。 ─────────────────────────────────── システイン Ｃｙｓ Ｃ グルタミン Ｇｌｎ Ｑ グリシン ＧＬｙ Ｇ イソロイシン Ｉｌｅ Ｉ ロイシン Ｌｅｕ Ｌ リシン Ｌｙｓ Ｋ メチオニン Ｍｅｔ Ｍ フェニルアラニン Ｐｈｅ Ｆ セリン Ｓｅｒ Ｓ トレオニン Ｔｈｒ Ｔ バリン Ｖａｌ Ｖ ───────────────────────────────────
【００１５】本発明の化合物の薬学的に許容しうる塩と
しては例えば非毒性又は無機酸から形成された本発明の
化合物の従来の非毒性塩又は第四アンモニウム塩を包含
する。そういった従来の非毒性塩としては塩酸、臭化水
素酸、硫酸、スルファミン酸、リン酸、硝酸のような無
機酸からの誘導体及び酢酸、プロピオン酸、コハク酸、
グリコール酸、ステアリン酸、乳酸、リンゴ酸、酒石
酸、クエン酸、アスコルビン酸、パモン酸、マレイン
酸、ヒドロキシマレイン酸、フェニル酢酸、グルタミン
酸、安息香酸、サリチル酸、スルファニル酸、２−アセ
トキシ安息香酸、フマル酸、トルエンスルホン酸、メタ
ンスルホン酸、エタンジスルホン酸、シュウ酸、イセチ
オン酸等の有機酸から調製された塩が挙げられる。
しては例えば非毒性又は無機酸から形成された本発明の
化合物の従来の非毒性塩又は第四アンモニウム塩を包含
する。そういった従来の非毒性塩としては塩酸、臭化水
素酸、硫酸、スルファミン酸、リン酸、硝酸のような無
機酸からの誘導体及び酢酸、プロピオン酸、コハク酸、
グリコール酸、ステアリン酸、乳酸、リンゴ酸、酒石
酸、クエン酸、アスコルビン酸、パモン酸、マレイン
酸、ヒドロキシマレイン酸、フェニル酢酸、グルタミン
酸、安息香酸、サリチル酸、スルファニル酸、２−アセ
トキシ安息香酸、フマル酸、トルエンスルホン酸、メタ
ンスルホン酸、エタンジスルホン酸、シュウ酸、イセチ
オン酸等の有機酸から調製された塩が挙げられる。
【００１６】本発明の薬学的に許容しうる塩は塩基性又
は酸性部位を含む本発明の化合物から従来の化学的方法
により合成することができる。一般的に塩は適切な溶媒
又は溶媒の種々の組合わせ中において化学量論量又は過
剰量の所望の塩形成無機又は有機酸又は塩基と遊離塩基
又は酸を反応させることにより製造される。
は酸性部位を含む本発明の化合物から従来の化学的方法
により合成することができる。一般的に塩は適切な溶媒
又は溶媒の種々の組合わせ中において化学量論量又は過
剰量の所望の塩形成無機又は有機酸又は塩基と遊離塩基
又は酸を反応させることにより製造される。
【００１７】本発明の酸の薬学的に許容しうる塩はまた
適量のアルカリ又はアルカリ土類金属水酸化物例えばナ
トリウム、カリウム、リチウム、カルシウムまたはマグ
ネシウムのような塩基又はアミン例えばジベンジルエチ
レンジアミン、トリメチルアミン、ピペリジン、ピロリ
ジン、ベンジルアミンのような有機塩基又はテトラメチ
ルアンモニウム水酸化物のような四級アンモニウム水酸
化物で本発明の化合物の酸を処理することよりなる従来
の方法により容易に製造される。
適量のアルカリ又はアルカリ土類金属水酸化物例えばナ
トリウム、カリウム、リチウム、カルシウムまたはマグ
ネシウムのような塩基又はアミン例えばジベンジルエチ
レンジアミン、トリメチルアミン、ピペリジン、ピロリ
ジン、ベンジルアミンのような有機塩基又はテトラメチ
ルアンモニウム水酸化物のような四級アンモニウム水酸
化物で本発明の化合物の酸を処理することよりなる従来
の方法により容易に製造される。
【００１８】Ｒａｓ−〔 3Ｈ〕ファルネシルジホスフェ
ート（ＦＰＰ）（２０Ci／ミリモル）のポリイソプレニ
ル化は New England Nucler から購入した。ファルネシ
ルタンパク質トランスフェラーゼ活性アッセイは特にこ
とわらない限り３０℃として行なった。代表的な反応に
は（最終容量５０μｌ中）：〔 3Ｈ〕ファルネシルジホ
スフェート、Ｒａｓタンパク質（３．５μＭ）、５０mM
ＨＥＰＥＳ、pH７．５、５mM MgCl2、５mMジチオトレイ
トール及びファルネシルタンパク質トランスフェラーゼ
を含有させた。酵素を含まないアッセイ混合液を熱的に
前平衡化した後、ファルネシルタンパク質トランスフェ
ラーゼを加えて反応を開始させ、一定の時間をおいてエ
タノール中１Ｍ HCl（１ml）を加えて停止させた。反応
を止めた反応物を１５分間放置した（沈降過程を完了す
る）。１００％エタノール２mlを加えた後、反応物をホ
ワットマンＧＦ／Ｃフィルターで真空濾過した。フィル
ターを１００％エタノール２mlずつで４回洗浄し、シン
チレーション液（１０ml）と混合し、次いで、ベックマ
ンＬＳ３８０１シンチレーションカウンターで計数し
た。
ート（ＦＰＰ）（２０Ci／ミリモル）のポリイソプレニ
ル化は New England Nucler から購入した。ファルネシ
ルタンパク質トランスフェラーゼ活性アッセイは特にこ
とわらない限り３０℃として行なった。代表的な反応に
は（最終容量５０μｌ中）：〔 3Ｈ〕ファルネシルジホ
スフェート、Ｒａｓタンパク質（３．５μＭ）、５０mM
ＨＥＰＥＳ、pH７．５、５mM MgCl2、５mMジチオトレイ
トール及びファルネシルタンパク質トランスフェラーゼ
を含有させた。酵素を含まないアッセイ混合液を熱的に
前平衡化した後、ファルネシルタンパク質トランスフェ
ラーゼを加えて反応を開始させ、一定の時間をおいてエ
タノール中１Ｍ HCl（１ml）を加えて停止させた。反応
を止めた反応物を１５分間放置した（沈降過程を完了す
る）。１００％エタノール２mlを加えた後、反応物をホ
ワットマンＧＦ／Ｃフィルターで真空濾過した。フィル
ターを１００％エタノール２mlずつで４回洗浄し、シン
チレーション液（１０ml）と混合し、次いで、ベックマ
ンＬＳ３８０１シンチレーションカウンターで計数し
た。
【００１９】阻害研究の場合、推定上の阻害剤を指示濃
度で加えた以外は上記のようにアッセイを行なった。Ｉ
Ｃ50値はファルネシルタンパク質トランスフェラーゼ両
基質のＫM 濃度で求めた。ＣＡＡＸ配列、ＣＶＬＳを有
するＲａｓタンパク質基質のＫM は３．５μＭであり、
ＦＰＰのＫM は０．２５μＭである。
度で加えた以外は上記のようにアッセイを行なった。Ｉ
Ｃ50値はファルネシルタンパク質トランスフェラーゼ両
基質のＫM 濃度で求めた。ＣＡＡＸ配列、ＣＶＬＳを有
するＲａｓタンパク質基質のＫM は３．５μＭであり、
ＦＰＰのＫM は０．２５μＭである。
【００２０】受容体基質としてペプチドを用いた場合、
アッセイに対して２つの変更をした：（１）Ｒａｓタン
パク質を除外し、（２）０．５ＭＥＤＴＡの１／１０量
を加えて反応を停止させた。反応混合液の一部をＴＬＣ
プレート（シリカゲル６０薄層クロマトグラフィープレ
ート（２０cm×２０cm、層の厚さ０．２５mm）はE.Merc
k(Darrnstadt）から入手）にスポットし、酢酸エチル：
ピリジン：酢酸：水：（１０：５：１：３）又はｎ−プ
ロパノール：水（７：３）溶離系で溶離した。真空下で
乾燥した後プレートにEn3Hanclをスプレーし−７０℃で
Ｘ線フィルムにさらした。
アッセイに対して２つの変更をした：（１）Ｒａｓタン
パク質を除外し、（２）０．５ＭＥＤＴＡの１／１０量
を加えて反応を停止させた。反応混合液の一部をＴＬＣ
プレート（シリカゲル６０薄層クロマトグラフィープレ
ート（２０cm×２０cm、層の厚さ０．２５mm）はE.Merc
k(Darrnstadt）から入手）にスポットし、酢酸エチル：
ピリジン：酢酸：水：（１０：５：１：３）又はｎ−プ
ロパノール：水（７：３）溶離系で溶離した。真空下で
乾燥した後プレートにEn3Hanclをスプレーし−７０℃で
Ｘ線フィルムにさらした。
【００２１】基質として用いたＲａｓタンパク質はＥ．
コリで発現させ精製した（Gibbs 等、Proc. Natl. Aca
d. Sci. USA８５：５０２６−５０３０（１９８
８））。ファルネシルタンパク質トランスフェラーゼは
ウシ脳から調製した。精製工程は全て４℃で行なった。
ウシ脳の大脳葉は５０mMトリス−Cl pH ８．０、１mMＥ
ＧＴＡ、１mM MgCl2、５mMジチオトレイトール、１０μ
ｇ／mlアプロチニン、０．５mMフェニルメチルスルホニ
ルフルオリド（ＰＭＳＦ）、２μｇ／ml、anitpain及び
２μｇ／mlロイペプチンを含有する溶解バッファー中で
ホモジナイズした。細胞デブリと膜を遠心分離（１０，
０００ｇ２０分次いで１００，０００ｇ３０分）で取り
除いた。上清を溶解バッファーで平衡化したＤＥＡＥ−
セファセルカラム（３０cm×２０cm2 ）に直接装填し
た。カラムを同バッファーで洗浄しタンパク質を同バッ
ファー中NaCl（０−５００mM、１リットル＋１リット
ル）の直線勾配で溶離した。画分（２０ml）を集めファ
ルネシルタンパク質トランスフェラーゼ活性を含む画分
をプールした。次いで各プールをＷ−アミノオクチルア
ガロースカラム（３０cm×４．９cm2 ）に加え溶解バッ
ファ中NaCl（０−５００mM、５００ml＋５００ml）の直
線勾配で溶離した。ファルネシルタンパク質トランスフ
ェラーゼを含む画分をプールした。ほとんどのアッセイ
の場合更にMonoＱＨ．Ｒ．１０／１０カラムを用い、フ
ァルネシルタンパク質トランスフェラーゼ活性を０−
０．３Ｍ NaCl 勾配で２ml／分において８５分かけて溶
離するＨＰＬＣによって部分精製が行なわれた。
コリで発現させ精製した（Gibbs 等、Proc. Natl. Aca
d. Sci. USA８５：５０２６−５０３０（１９８
８））。ファルネシルタンパク質トランスフェラーゼは
ウシ脳から調製した。精製工程は全て４℃で行なった。
ウシ脳の大脳葉は５０mMトリス−Cl pH ８．０、１mMＥ
ＧＴＡ、１mM MgCl2、５mMジチオトレイトール、１０μ
ｇ／mlアプロチニン、０．５mMフェニルメチルスルホニ
ルフルオリド（ＰＭＳＦ）、２μｇ／ml、anitpain及び
２μｇ／mlロイペプチンを含有する溶解バッファー中で
ホモジナイズした。細胞デブリと膜を遠心分離（１０，
０００ｇ２０分次いで１００，０００ｇ３０分）で取り
除いた。上清を溶解バッファーで平衡化したＤＥＡＥ−
セファセルカラム（３０cm×２０cm2 ）に直接装填し
た。カラムを同バッファーで洗浄しタンパク質を同バッ
ファー中NaCl（０−５００mM、１リットル＋１リット
ル）の直線勾配で溶離した。画分（２０ml）を集めファ
ルネシルタンパク質トランスフェラーゼ活性を含む画分
をプールした。次いで各プールをＷ−アミノオクチルア
ガロースカラム（３０cm×４．９cm2 ）に加え溶解バッ
ファ中NaCl（０−５００mM、５００ml＋５００ml）の直
線勾配で溶離した。ファルネシルタンパク質トランスフ
ェラーゼを含む画分をプールした。ほとんどのアッセイ
の場合更にMonoＱＨ．Ｒ．１０／１０カラムを用い、フ
ァルネシルタンパク質トランスフェラーゼ活性を０−
０．３Ｍ NaCl 勾配で２ml／分において８５分かけて溶
離するＨＰＬＣによって部分精製が行なわれた。
【００２２】純粋な酵素を調製するためにノナペプチド
KSLTGCVIM をAffigel −１０に無水条件下で製造業者の
説明に従って（Affigel −１０１ml当たり１５μモルペ
プチド）共有結合で結合した。未反応樹脂をエタノール
アミンで処理した。Ｗ−アミノオクチル−アガロース−
カラム精製タンパク質をペプチドカラムに多回通過させ
た後カラムをReiss 等（１９９０）に同文献に記載され
るように洗浄及び溶離してファルネシルタンパク質トラ
ンスフェラーゼ活性を回収した。本発明の化合物はそれ
らの成分アミノ酸から従来のペプチド合成手法好ましく
は固相法によって合成することができる。次いでペプチ
ドは逆相高性能液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）に
よって精製される。
KSLTGCVIM をAffigel −１０に無水条件下で製造業者の
説明に従って（Affigel −１０１ml当たり１５μモルペ
プチド）共有結合で結合した。未反応樹脂をエタノール
アミンで処理した。Ｗ−アミノオクチル−アガロース−
カラム精製タンパク質をペプチドカラムに多回通過させ
た後カラムをReiss 等（１９９０）に同文献に記載され
るように洗浄及び溶離してファルネシルタンパク質トラ
ンスフェラーゼ活性を回収した。本発明の化合物はそれ
らの成分アミノ酸から従来のペプチド合成手法好ましく
は固相法によって合成することができる。次いでペプチ
ドは逆相高性能液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）に
よって精製される。
【００２３】ペプチド合成の標準方法は例えば下記の研
究に開示される：Schroeder 等、"The Peptides(ペプチ
ド）"Vol. I. Academic Press １９６５又はBodanszky
等"Peptide Synthesis（ペプチド合成）”Interscience
Publishers.１９６６又はMcOmie( 編集)" Protective
Groups in Organic Chemistry （有機化学における保護
基）”Plenum Press. １９７３又はBarany等、"The Pep
tides:Analysis．Synthesis.Biology （ペプチド：分
析、合成、生物学）”２、Chapterl.Academic Press.１
９８０。これらの研究の教示は引用してここに組込まれ
る。
究に開示される：Schroeder 等、"The Peptides(ペプチ
ド）"Vol. I. Academic Press １９６５又はBodanszky
等"Peptide Synthesis（ペプチド合成）”Interscience
Publishers.１９６６又はMcOmie( 編集)" Protective
Groups in Organic Chemistry （有機化学における保護
基）”Plenum Press. １９７３又はBarany等、"The Pep
tides:Analysis．Synthesis.Biology （ペプチド：分
析、合成、生物学）”２、Chapterl.Academic Press.１
９８０。これらの研究の教示は引用してここに組込まれ
る。
【００２４】ペプチドはApplied Biosystems４３０Ａ型
ペプチドシンセサイザーで製造し、逆相ＨＰＬＣで精製
し、アミノ酸分析及び高速原子衝撃質量分析によって確
認した。化学的ファルネシル化はトランス、トランス−
ファルネシルブロミド（Aldrich)を非保護ペプチドと反
応させて行なった。
ペプチドシンセサイザーで製造し、逆相ＨＰＬＣで精製
し、アミノ酸分析及び高速原子衝撃質量分析によって確
認した。化学的ファルネシル化はトランス、トランス−
ファルネシルブロミド（Aldrich)を非保護ペプチドと反
応させて行なった。
【００２５】試験管内Ｒａｓファルネシル化−Ｒａｓの
試験管内ポリイソプレニル化を評価するために、２種の
遺伝子操作Ｓ．セレビシエ（cerevisiae) ＲＡＳ遺伝子
産物を用いGibbs 等、Proc. Natl. Acad. Sci. USA８
６：６６３０−６６３４に記載される〔Ｌｅｕ68〕ＲＡ
Ｓ１（末端）及び〔Ｌｅｕ68〕ＲＡＳ（末端）ＣＶＬＳ
を用いた。タンパク質は共にＣｙｓ残基を有しない酵母
ＲＡＳ１の最初の１８４アミノ酸を含有する。〔Ｌｅｕ
68〕ＲＡＳ１（末端）はＬｅｕ−１８５のＰｒｏ置換で
終わっている。〔Ｌｅｕ68〕ＲＡＳ１（末端）ＣＶＬＳ
は、最後のＰｒｏ残基が別の配列−Ser-Leu-Lys-Cys-Va
l-Leu-Ser を有する７つのＣ末端残基で置換されてお
り、ここで、このタンパク質は−ＣＶＬＳと呼ばれる。
精製Ｒａｓタンパク質（３．５μＭ）を部分的に純粋な
酵素と０．２５μＭ〔 3Ｈ〕ＥＰＰの存在下でインキュ
ベートした。放射性前駆体はＲａｓ−ＣＶＬＳに取り込
まれた。Ｒａｓが存在しなかったり、〔Ｌｅｕ68〕ＲＡ
Ｓ１−（末端）を有する反応では検出可能な標識は見出
されず修飾がＲａｓ−ＣＶＬＳのユニークＣ末端領域で
生じたことを示した。Ｒａｓ−ＣＶＬＳはＲａｓ特異的
モノクローナル抗体Ｙ１３−２５９と免疫沈降すること
により受容体タンパク質として正同定された。正常及び
発癌性両哺乳動物ＨａＲａｓタンパク質もまた基質とし
て作用した。
試験管内ポリイソプレニル化を評価するために、２種の
遺伝子操作Ｓ．セレビシエ（cerevisiae) ＲＡＳ遺伝子
産物を用いGibbs 等、Proc. Natl. Acad. Sci. USA８
６：６６３０−６６３４に記載される〔Ｌｅｕ68〕ＲＡ
Ｓ１（末端）及び〔Ｌｅｕ68〕ＲＡＳ（末端）ＣＶＬＳ
を用いた。タンパク質は共にＣｙｓ残基を有しない酵母
ＲＡＳ１の最初の１８４アミノ酸を含有する。〔Ｌｅｕ
68〕ＲＡＳ１（末端）はＬｅｕ−１８５のＰｒｏ置換で
終わっている。〔Ｌｅｕ68〕ＲＡＳ１（末端）ＣＶＬＳ
は、最後のＰｒｏ残基が別の配列−Ser-Leu-Lys-Cys-Va
l-Leu-Ser を有する７つのＣ末端残基で置換されてお
り、ここで、このタンパク質は−ＣＶＬＳと呼ばれる。
精製Ｒａｓタンパク質（３．５μＭ）を部分的に純粋な
酵素と０．２５μＭ〔 3Ｈ〕ＥＰＰの存在下でインキュ
ベートした。放射性前駆体はＲａｓ−ＣＶＬＳに取り込
まれた。Ｒａｓが存在しなかったり、〔Ｌｅｕ68〕ＲＡ
Ｓ１−（末端）を有する反応では検出可能な標識は見出
されず修飾がＲａｓ−ＣＶＬＳのユニークＣ末端領域で
生じたことを示した。Ｒａｓ−ＣＶＬＳはＲａｓ特異的
モノクローナル抗体Ｙ１３−２５９と免疫沈降すること
により受容体タンパク質として正同定された。正常及び
発癌性両哺乳動物ＨａＲａｓタンパク質もまた基質とし
て作用した。
【００２６】Cys-Xaa1-Xaa2-Xaa3を含めたＣＡＡＸテト
ラペプチド及び他のペプチドをファルネシル化基質とし
て〔 3Ｈ〕ＦＰＰ及び部分的に純粋なウシ脳ファルネシ
ルタンパク質トランスフェラーゼを用いて試験した。ヘ
プタペプチドＳＳＧＣＶＬＳによる我々の初期の知見で
はそれがイソプレニル化の基質として働くことを示した
（Schaber 等、同文献）。薄層クロマトグラフィー（Ｔ
ＬＣ）条件を開発し、基質ファルネシルジホスフェート
（Ｒｆ＝０．０６）及びＣＶＬＳ（Ｒｆ＝０．２８）及
び生成物Ｓ−ファルネシル−ＣＶＬＳ（Ｒｆ＝０．５
８）を分割した。これらのＲｆ値は溶離剤として酢酸エ
チル：ピリジン：酢酸：水（１０：５：１：３）を用い
るＴＬＣ条件によるものである。もう１つの溶離系ｎ−
プロパノール：水（７：３）ではファルネシルジホスフ
ェート（Ｒｆ＝０．１８）がファルネシル化テトラペプ
チド（例：ＣＡＩＳ（Ｒｆ＝０．８４）及びＣＡＩＭ
（Ｒｆ＝０．８３））から容易に分離された。ペプチ
ド、ファルネシルジホスフェート及びファルネシルタン
パク質トランスフェラーゼを含む反応を止めた反応混合
液をＴＬＣによって分離し次いで放射性化合物をオート
ラジオグラフィーによって可視化した。対照反応（ペプ
チドを含まない）では未反応出発物質としてファルネシ
ルジホスフェートのみが見られ、部分的精製酵素標品が
ほとんどホスファターゼ活性を有しないことを示した。
ペプチドＣＶＬＳの存在下では、Ｓ−ファルネシル−Ｃ
ＶＳＬ標準と同時移動した放射性スポットが見られた。
ＣｙｓをＳｅｒに置換した対照ペプチドは基質ではなか
った。
ラペプチド及び他のペプチドをファルネシル化基質とし
て〔 3Ｈ〕ＦＰＰ及び部分的に純粋なウシ脳ファルネシ
ルタンパク質トランスフェラーゼを用いて試験した。ヘ
プタペプチドＳＳＧＣＶＬＳによる我々の初期の知見で
はそれがイソプレニル化の基質として働くことを示した
（Schaber 等、同文献）。薄層クロマトグラフィー（Ｔ
ＬＣ）条件を開発し、基質ファルネシルジホスフェート
（Ｒｆ＝０．０６）及びＣＶＬＳ（Ｒｆ＝０．２８）及
び生成物Ｓ−ファルネシル−ＣＶＬＳ（Ｒｆ＝０．５
８）を分割した。これらのＲｆ値は溶離剤として酢酸エ
チル：ピリジン：酢酸：水（１０：５：１：３）を用い
るＴＬＣ条件によるものである。もう１つの溶離系ｎ−
プロパノール：水（７：３）ではファルネシルジホスフ
ェート（Ｒｆ＝０．１８）がファルネシル化テトラペプ
チド（例：ＣＡＩＳ（Ｒｆ＝０．８４）及びＣＡＩＭ
（Ｒｆ＝０．８３））から容易に分離された。ペプチ
ド、ファルネシルジホスフェート及びファルネシルタン
パク質トランスフェラーゼを含む反応を止めた反応混合
液をＴＬＣによって分離し次いで放射性化合物をオート
ラジオグラフィーによって可視化した。対照反応（ペプ
チドを含まない）では未反応出発物質としてファルネシ
ルジホスフェートのみが見られ、部分的精製酵素標品が
ほとんどホスファターゼ活性を有しないことを示した。
ペプチドＣＶＬＳの存在下では、Ｓ−ファルネシル−Ｃ
ＶＳＬ標準と同時移動した放射性スポットが見られた。
ＣｙｓをＳｅｒに置換した対照ペプチドは基質ではなか
った。
【００２７】活性を示すこれらの実験の結果を表１に示
す。本明細書で定義したCys-Xaa1-Xaa2-Xaa3の臨界性が
示される。 表 １ ペプチド（２００μＭ） ファルネシル化基質 ＣＶＬＳ ＋ ＳＶＬＳ − ＣＡＩＳ ＋ ＣＡＩＭ ＋ ＣＹＩＭ ＋ ＣＶＩＭ ＋ ＣＶＦＭ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１） − ＣＩＦＭ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２） − ＣＩＦＱ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３） − ＣＩ（ｐ−フルオロ−Ｆ）Ｍ − ＋ ＞９０％〔３Ｈ〕ファルネシルテトラペプチドに変
換した〔３Ｈ〕ファルネシルジホスフェート − ＜１％変換 表示したペプチド２００μＭを部分的に純粋なウシファ
ルネシルタンパク質トランスフェラーゼ及び０．５μＭ
〔 3Ｈ〕−ＦＰＰと３０℃で３０分間インキュベートし
た。オートラジオグラフィー露出時間は一晩（１５−２
０時間）とした。
す。本明細書で定義したCys-Xaa1-Xaa2-Xaa3の臨界性が
示される。 表 １ ペプチド（２００μＭ） ファルネシル化基質 ＣＶＬＳ ＋ ＳＶＬＳ − ＣＡＩＳ ＋ ＣＡＩＭ ＋ ＣＹＩＭ ＋ ＣＶＩＭ ＋ ＣＶＦＭ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１） − ＣＩＦＭ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２） − ＣＩＦＱ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３） − ＣＩ（ｐ−フルオロ−Ｆ）Ｍ − ＋ ＞９０％〔３Ｈ〕ファルネシルテトラペプチドに変
換した〔３Ｈ〕ファルネシルジホスフェート − ＜１％変換 表示したペプチド２００μＭを部分的に純粋なウシファ
ルネシルタンパク質トランスフェラーゼ及び０．５μＭ
〔 3Ｈ〕−ＦＰＰと３０℃で３０分間インキュベートし
た。オートラジオグラフィー露出時間は一晩（１５−２
０時間）とした。
【００２８】基質ではないテトラペプチドがファルネシ
ルタンパク質トランスフェラーゼに結合することができ
るかを求めるために試験管内でＲａｓファルネシル化の
阻害能を試験した（表２）。 表２ テトラペプチドによるＲａｓファルネシル化の阻害 化合物 ＩＣ50（ｎＭ） ＣＶＬＳ ２０００ ＣＡＩＳ １０００ ＣＡＩＭ ２００ ＣＹＩＭ １００ ＣＶＩＭ １００ ＣＶＦＭ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１） ２０ ＣＩＦＭ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２） １０ ＣＩＦＱ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３） ２３ ＣＩ（ｐ−フルオロ−Ｆ）Ｍ １０ ウシ脳由来ファルネシルタンパク質トランスフェラーゼ
をＤＥＡＥ−セファセル（Pharmacia,０−０．８Ｍ NaC
l 勾配溶離）、Ｎ−オクチルアガロース（Sigma,０−
０．６Ｍ NaCl 勾配溶離）及びMonoＱＨＰＬＣカラム
（Pharmacia,０−０．３Ｍ NaCl 勾配）でクロマトグラ
フィー処理した。３．５μＭＲａｓ−ＣＶＬＳ、０．２
５μＭ〔 3Ｈ〕ＦＰＰ及び表示した化合物をこの部分的
精製酵素標品とインキュベートした。表２で示したデー
タは２−５測定値の平均である。上記では大文字の１文
字アミノ酸略語が用いられる。
ルタンパク質トランスフェラーゼに結合することができ
るかを求めるために試験管内でＲａｓファルネシル化の
阻害能を試験した（表２）。 表２ テトラペプチドによるＲａｓファルネシル化の阻害 化合物 ＩＣ50（ｎＭ） ＣＶＬＳ ２０００ ＣＡＩＳ １０００ ＣＡＩＭ ２００ ＣＹＩＭ １００ ＣＶＩＭ １００ ＣＶＦＭ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１） ２０ ＣＩＦＭ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２） １０ ＣＩＦＱ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３） ２３ ＣＩ（ｐ−フルオロ−Ｆ）Ｍ １０ ウシ脳由来ファルネシルタンパク質トランスフェラーゼ
をＤＥＡＥ−セファセル（Pharmacia,０−０．８Ｍ NaC
l 勾配溶離）、Ｎ−オクチルアガロース（Sigma,０−
０．６Ｍ NaCl 勾配溶離）及びMonoＱＨＰＬＣカラム
（Pharmacia,０−０．３Ｍ NaCl 勾配）でクロマトグラ
フィー処理した。３．５μＭＲａｓ−ＣＶＬＳ、０．２
５μＭ〔 3Ｈ〕ＦＰＰ及び表示した化合物をこの部分的
精製酵素標品とインキュベートした。表２で示したデー
タは２−５測定値の平均である。上記では大文字の１文
字アミノ酸略語が用いられる。
【００２９】阻害データは本発明のCys-Xaa1-Xaa2-Xaa3
テトラペプチドがファルネシルタンパク質トランスフェ
ラーゼに結合することを示す。Cys-Xaa1-Xaa2-Xaa3がフ
ァルネシルタンパク質トランスファの活性部位と相互作
用することを実証するために純粋な均一ファルネシルタ
ンパク質トランスフェラーゼを用いてＣＩＦＭ（ＳＥＱ
ＩＤ ＮＯ：２）の阻害機序を評価した。ＣＩＦＭ
（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２）はＲａｓタンパク質基質に
関して競合的阻害剤として作用することが見られた。Ｃ
ＩＦＭ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２）はファルネシルジホ
スフェートに関して競合的阻害剤ではなかった。このよ
うにＣＩＦＭ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２）はファルネシ
ルタンパク質トランスフェラーゼのタンパク質基質結合
部位に結合し、ＣＩＦＭ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２）及
び本発明のテトラペプチドCys-Xaa1-Xaa2-Xaa3は反応中
有効な基質としては働かない。
テトラペプチドがファルネシルタンパク質トランスフェ
ラーゼに結合することを示す。Cys-Xaa1-Xaa2-Xaa3がフ
ァルネシルタンパク質トランスファの活性部位と相互作
用することを実証するために純粋な均一ファルネシルタ
ンパク質トランスフェラーゼを用いてＣＩＦＭ（ＳＥＱ
ＩＤ ＮＯ：２）の阻害機序を評価した。ＣＩＦＭ
（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２）はＲａｓタンパク質基質に
関して競合的阻害剤として作用することが見られた。Ｃ
ＩＦＭ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２）はファルネシルジホ
スフェートに関して競合的阻害剤ではなかった。このよ
うにＣＩＦＭ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２）はファルネシ
ルタンパク質トランスフェラーゼのタンパク質基質結合
部位に結合し、ＣＩＦＭ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２）及
び本発明のテトラペプチドCys-Xaa1-Xaa2-Xaa3は反応中
有効な基質としては働かない。
【００３０】本発明の化合物はファルネシルタンパク質
トランスフェラーゼ及び癌遺伝子タンパク質Ｒａｓのフ
ァルネシル化を阻害する。これらの化合物は哺乳動物、
特にヒトの薬剤として有効である。これらの化合物は癌
の治療に使用するために患者に投与される。本発明の化
合物で治療される癌の種類の例としては、大腸癌、外分
泌膵癌及び骨髄性白血病があるがこれらに限定されな
い。
トランスフェラーゼ及び癌遺伝子タンパク質Ｒａｓのフ
ァルネシル化を阻害する。これらの化合物は哺乳動物、
特にヒトの薬剤として有効である。これらの化合物は癌
の治療に使用するために患者に投与される。本発明の化
合物で治療される癌の種類の例としては、大腸癌、外分
泌膵癌及び骨髄性白血病があるがこれらに限定されな
い。
【００３１】本発明の化合物は単独で又は好ましくは標
準的な医薬実施に従って医薬組成物として薬学的に許容
しうるキャリアもしくは希釈剤、場合によってはミョウ
バンのような既知のアジュバントと組合わせて哺乳動
物、好ましくはヒトに投与することができる。化合物は
経口又は非経口投与することができ、静脈内、筋肉内、
腹腔内、皮下及び局所投与を含む。
準的な医薬実施に従って医薬組成物として薬学的に許容
しうるキャリアもしくは希釈剤、場合によってはミョウ
バンのような既知のアジュバントと組合わせて哺乳動
物、好ましくはヒトに投与することができる。化合物は
経口又は非経口投与することができ、静脈内、筋肉内、
腹腔内、皮下及び局所投与を含む。
【００３２】本発明による化学療法化合物を経口で使用
するには選択された化合物は例えば錠剤あるいはカプセ
ルの形態で又は水溶液あるいは懸濁液として投与するこ
とができる。経口使用の場合、錠剤に通常使用されるキ
ャリアとしてはラクトース及びコーンスターチが挙げら
れステアリン酸マグネシウムのような滑沢剤が通常加え
られる。カプセルの形で経口投与する場合には、有用な
希釈剤としてラクトース及び乾燥コーンスターチが挙げ
られる。経口で使用するために水性懸濁液が必要な場合
には活性成分は乳化剤及び懸濁化剤と組合わせて用いら
れる。所望であれば、一定の甘味剤及び／又は香味剤も
加えることができる。筋肉内、腹腔内、皮下及び静脈内
使用については活性成分の滅菌溶液が通常使用され、液
のpHは適切に調整され且つ緩衝化されなければならな
い。静脈内で使用するには、溶質の全濃度は溶液が等張
になるように調節されなければならない。本発明はまた
癌の治療に有用な医薬組成物を包含し、治療的に有効な
量の本発明の化合物を薬学的に許容しうるキャリア例え
ば食塩水を例えばpH７．４のレベルにしたものとともに
あるいは単独で投与することにより行なわれる。溶液は
ボラス局所注入によって患者の筋肉内血流に導入され
る。
するには選択された化合物は例えば錠剤あるいはカプセ
ルの形態で又は水溶液あるいは懸濁液として投与するこ
とができる。経口使用の場合、錠剤に通常使用されるキ
ャリアとしてはラクトース及びコーンスターチが挙げら
れステアリン酸マグネシウムのような滑沢剤が通常加え
られる。カプセルの形で経口投与する場合には、有用な
希釈剤としてラクトース及び乾燥コーンスターチが挙げ
られる。経口で使用するために水性懸濁液が必要な場合
には活性成分は乳化剤及び懸濁化剤と組合わせて用いら
れる。所望であれば、一定の甘味剤及び／又は香味剤も
加えることができる。筋肉内、腹腔内、皮下及び静脈内
使用については活性成分の滅菌溶液が通常使用され、液
のpHは適切に調整され且つ緩衝化されなければならな
い。静脈内で使用するには、溶質の全濃度は溶液が等張
になるように調節されなければならない。本発明はまた
癌の治療に有用な医薬組成物を包含し、治療的に有効な
量の本発明の化合物を薬学的に許容しうるキャリア例え
ば食塩水を例えばpH７．４のレベルにしたものとともに
あるいは単独で投与することにより行なわれる。溶液は
ボラス局所注入によって患者の筋肉内血流に導入され
る。
【００３３】本発明による化合物をヒトに投与する場
合、日用量は通常患者の年令、体重によって変更される
のが普通でありまた患者の症状の重さの程度に加えて患
者個人の応答性を考慮して処方する医師により決定され
る。１つの典型的な応用例としては化合物の適切な量が
癌の治療を受ける患者へ投与される。投与は１日約０．
１〜２０mg／kg哺乳動物体重、好ましくは１日約０．５
〜１０mg／kg哺乳動物体重のあいだとなる量である。
合、日用量は通常患者の年令、体重によって変更される
のが普通でありまた患者の症状の重さの程度に加えて患
者個人の応答性を考慮して処方する医師により決定され
る。１つの典型的な応用例としては化合物の適切な量が
癌の治療を受ける患者へ投与される。投与は１日約０．
１〜２０mg／kg哺乳動物体重、好ましくは１日約０．５
〜１０mg／kg哺乳動物体重のあいだとなる量である。
【実施例】ここに記載する実施例は本発明の理解をさら
に助けるものである。用いた材料、種、条件は本発明を
さらに説明するものであって、その妥当な範囲を限定す
るものではない。
に助けるものである。用いた材料、種、条件は本発明を
さらに説明するものであって、その妥当な範囲を限定す
るものではない。
【００３４】実施例１ ＣＶＦＭ（配列番号１）の調製 全自動アプライドバイオシステムズペプチドシンセサイ
ザーを用い、０．５ミリモルのｔ−Ｂｏｃ−Ｌ−メチオ
ニン（フェニルアセトアミドメチル樹脂）（市販品あ
り）から出発して、以下のアミノ酸、ｔ−Ｂｏｃ−Ｌ−
フェニルアラニン、ｔ−Ｂｏｃ−Ｌ−バリン、ｔ−Ｂｏ
ｃ−Ｓ−４−メチルベンジル−Ｌ−システインを導入し
た。カップリングはジシクロヘキシルカルボジイミドを
介し、各アミノ酸をその左右対称無水物型で導入した。
ｔ−Ｂｏｃ基（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル）の
脱離はＴＦＡ（トリフルオロ酢酸）により行なった。保
護されたペプチド中間体、ｔ−Ｂｏｃ−Ｓ−４−メチル
ベンジル−Ｌ−システイニル−Ｌ−バリル−Ｌ−フェニ
ルアラニル−Ｌ−メチオニルフェニルアセトアミドメチ
ル樹脂の組み立てが完了した時点で、ｔ−Ｂｏｃ保護基
をＴＦＡで除去し、樹脂に結合したペプチドを乾燥させ
た。ＨＦ（ふっ化水素）液を用い、スカベンジャーとし
てのアニソール存在下で、０℃、１時間処理することに
より、ペプチドを樹脂から開裂させた。溶媒を留去した
後、残留混合物をエーテルで洗浄し、濾過して、樹脂か
らペプチドをＨ2 Ｏにより抽出した。粗生成物の水溶液
を凍結乾燥した。ペプチドCys-Val-Phe-Met （ＣＶＦ
Ｍ）（配列番号１）の精製はＣ−１８シリカベースの担
体を用いた逆相液体クロマトグラフィにより行なった。
所期生成物は０．１％水性ＴＦＡとアセトニトリル中
０．１％ＴＦＡの濃度勾配溶出により溶出させた。精製
生成物の画分は合して凍結乾燥した。生成物の同定と純
度検定はアミノ酸組成、分析用ＨＰＬＣおよび質量分析
により行なった。
ザーを用い、０．５ミリモルのｔ−Ｂｏｃ−Ｌ−メチオ
ニン（フェニルアセトアミドメチル樹脂）（市販品あ
り）から出発して、以下のアミノ酸、ｔ−Ｂｏｃ−Ｌ−
フェニルアラニン、ｔ−Ｂｏｃ−Ｌ−バリン、ｔ−Ｂｏ
ｃ−Ｓ−４−メチルベンジル−Ｌ−システインを導入し
た。カップリングはジシクロヘキシルカルボジイミドを
介し、各アミノ酸をその左右対称無水物型で導入した。
ｔ−Ｂｏｃ基（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル）の
脱離はＴＦＡ（トリフルオロ酢酸）により行なった。保
護されたペプチド中間体、ｔ−Ｂｏｃ−Ｓ−４−メチル
ベンジル−Ｌ−システイニル−Ｌ−バリル−Ｌ−フェニ
ルアラニル−Ｌ−メチオニルフェニルアセトアミドメチ
ル樹脂の組み立てが完了した時点で、ｔ−Ｂｏｃ保護基
をＴＦＡで除去し、樹脂に結合したペプチドを乾燥させ
た。ＨＦ（ふっ化水素）液を用い、スカベンジャーとし
てのアニソール存在下で、０℃、１時間処理することに
より、ペプチドを樹脂から開裂させた。溶媒を留去した
後、残留混合物をエーテルで洗浄し、濾過して、樹脂か
らペプチドをＨ2 Ｏにより抽出した。粗生成物の水溶液
を凍結乾燥した。ペプチドCys-Val-Phe-Met （ＣＶＦ
Ｍ）（配列番号１）の精製はＣ−１８シリカベースの担
体を用いた逆相液体クロマトグラフィにより行なった。
所期生成物は０．１％水性ＴＦＡとアセトニトリル中
０．１％ＴＦＡの濃度勾配溶出により溶出させた。精製
生成物の画分は合して凍結乾燥した。生成物の同定と純
度検定はアミノ酸組成、分析用ＨＰＬＣおよび質量分析
により行なった。
【００３５】実施例２ ＣＩＦＭ（配列番号２）の調製 全自動アプライドバイオシステムズペプチドシンセサイ
ザーを用い、０．５ミリモルのｔ−Ｂｏｃ−Ｌ−メチオ
ニン（フェニルアセトアミドメチル樹脂）（市販品あ
り）から出発して、以下のアミノ酸、ｔ−Ｂｏｃ−Ｌ−
フェニルアラニン、ｔ−Ｂｏｃ−Ｌ−イソロイシン、ｔ
−Ｂｏｃ−Ｓ−４−メチルベンジル−Ｌ−システインを
導入した。カップリングはジシクロヘキシルカルボジイ
ミドを介し、各アミノ酸をその左右対称無水物型で導入
した。ｔ−Ｂｏｃ基（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニ
ル）の脱離はＴＦＡ（トリフルオロ酢酸）により行なっ
た。保護されたペプチド中間体、ｔ−Ｂｏｃ−Ｓ−４−
メチルベンジル−Ｌ−システイニル−Ｌ−イソロイシル
−Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ−メチオニルフェニルアセ
トアミドメチル樹脂の組み立てが完了した時点で、ｔ−
Ｂｏｃ保護基をＴＦＡで除去し、樹脂に結合したペプチ
ドを乾燥させた。ＨＦ（ふっ化水素）液を用い、スカベ
ンジャーとしてのアニソール存在下で、０℃、１時間処
理することにより、ペプチドを樹脂から開裂させた。溶
媒を留去した後、残留混合物をエーテルで洗浄し、濾過
して、樹脂からペプチドをＨ2 Ｏにより抽出した。粗生
成物の水溶液を凍結乾燥した。ペプチドCys-Ile-Phe-Me
t （ＣＩＦＭ）（配列番号２）の精製はＣ−１８シリカ
ベースの担体を用いた逆相液体クロマトグラフィにより
行なった。所期生成物は０．１％水性ＴＦＡとアセトニ
トリル中０．１％ＴＦＡの濃度勾配溶出により溶出させ
た。精製生成物の画分は合して凍結乾燥した。生成物の
同定と純度検定はアミノ酸組成、分析用ＨＰＬＣおよび
質量分析により行なった。
ザーを用い、０．５ミリモルのｔ−Ｂｏｃ−Ｌ−メチオ
ニン（フェニルアセトアミドメチル樹脂）（市販品あ
り）から出発して、以下のアミノ酸、ｔ−Ｂｏｃ−Ｌ−
フェニルアラニン、ｔ−Ｂｏｃ−Ｌ−イソロイシン、ｔ
−Ｂｏｃ−Ｓ−４−メチルベンジル−Ｌ−システインを
導入した。カップリングはジシクロヘキシルカルボジイ
ミドを介し、各アミノ酸をその左右対称無水物型で導入
した。ｔ−Ｂｏｃ基（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニ
ル）の脱離はＴＦＡ（トリフルオロ酢酸）により行なっ
た。保護されたペプチド中間体、ｔ−Ｂｏｃ−Ｓ−４−
メチルベンジル−Ｌ−システイニル−Ｌ−イソロイシル
−Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ−メチオニルフェニルアセ
トアミドメチル樹脂の組み立てが完了した時点で、ｔ−
Ｂｏｃ保護基をＴＦＡで除去し、樹脂に結合したペプチ
ドを乾燥させた。ＨＦ（ふっ化水素）液を用い、スカベ
ンジャーとしてのアニソール存在下で、０℃、１時間処
理することにより、ペプチドを樹脂から開裂させた。溶
媒を留去した後、残留混合物をエーテルで洗浄し、濾過
して、樹脂からペプチドをＨ2 Ｏにより抽出した。粗生
成物の水溶液を凍結乾燥した。ペプチドCys-Ile-Phe-Me
t （ＣＩＦＭ）（配列番号２）の精製はＣ−１８シリカ
ベースの担体を用いた逆相液体クロマトグラフィにより
行なった。所期生成物は０．１％水性ＴＦＡとアセトニ
トリル中０．１％ＴＦＡの濃度勾配溶出により溶出させ
た。精製生成物の画分は合して凍結乾燥した。生成物の
同定と純度検定はアミノ酸組成、分析用ＨＰＬＣおよび
質量分析により行なった。
【００３６】実施例３ ＣＩＦＱ（配列番号３）の調製 全自動アプライドバイオシステムズペプチドシンセサイ
ザーを用い、０．５ミリモルのｔ−Ｂｏｃ−Ｌ−グルタ
ミン（フェニルアセトアミドメチル樹脂）（市販品あ
り）から出発して、以下のアミノ酸、ｔ−Ｂｏｃ−Ｌ−
フェニルアラニン、ｔ−Ｂｏｃ−Ｌ−イソロイシン、ｔ
−Ｂｏｃ−Ｓ−４−メチルベンジル−Ｌ−システインを
導入した。カップリングはジシクロヘキシルカルボジイ
ミドを介し、各アミノ酸をその左右対称無水物型で導入
した。ｔ−Ｂｏｃ基（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニ
ル）の脱離はＴＦＡ（トリフルオロ酢酸）により行なっ
た。保護されたペプチド中間体、ｔ−Ｂｏｃ−Ｓ−４−
メチルベンジル−Ｌ−システイニル−Ｌ−イソロイシル
−Ｌ−フェニルアラニル−グルタミニルフェニルアセト
アミドメチル樹脂の組み立てが完了した時点で、ｔ−Ｂ
ｏｃ保護基をＴＦＡで除去し、樹脂に結合したペプチド
を乾燥させた。ＨＦ（ふっ化水素）液を用い、スカベン
ジャーとしてのアニソール存在下で、０℃、１時間処理
することにより、ペプチドを樹脂から開裂させた。溶媒
を留去した後、残留混合物をエーテルで洗浄し、濾過し
て、樹脂からペプチドをＨ2 Ｏにより抽出した。粗生成
物の水溶液を凍結乾燥した。ペプチドCys-Ile-Phe-Gln
（ＣＩＦＱ）（配列番号３）の精製はＣ−１８シリカベ
ースの担体を用いた逆相液体クロマトグラフィにより行
なった。所期生成物は０．１％水性ＴＦＡとアセトニト
リル中０．１％ＴＦＡの濃度勾配溶出により溶出させ
た。精製生成物の画分は合して凍結乾燥した。生成物の
同定と純度検定はアミノ酸組成分析、分析用ＨＰＬＣお
よび質量分析により行なった。
ザーを用い、０．５ミリモルのｔ−Ｂｏｃ−Ｌ−グルタ
ミン（フェニルアセトアミドメチル樹脂）（市販品あ
り）から出発して、以下のアミノ酸、ｔ−Ｂｏｃ−Ｌ−
フェニルアラニン、ｔ−Ｂｏｃ−Ｌ−イソロイシン、ｔ
−Ｂｏｃ−Ｓ−４−メチルベンジル−Ｌ−システインを
導入した。カップリングはジシクロヘキシルカルボジイ
ミドを介し、各アミノ酸をその左右対称無水物型で導入
した。ｔ−Ｂｏｃ基（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニ
ル）の脱離はＴＦＡ（トリフルオロ酢酸）により行なっ
た。保護されたペプチド中間体、ｔ−Ｂｏｃ−Ｓ−４−
メチルベンジル−Ｌ−システイニル−Ｌ−イソロイシル
−Ｌ−フェニルアラニル−グルタミニルフェニルアセト
アミドメチル樹脂の組み立てが完了した時点で、ｔ−Ｂ
ｏｃ保護基をＴＦＡで除去し、樹脂に結合したペプチド
を乾燥させた。ＨＦ（ふっ化水素）液を用い、スカベン
ジャーとしてのアニソール存在下で、０℃、１時間処理
することにより、ペプチドを樹脂から開裂させた。溶媒
を留去した後、残留混合物をエーテルで洗浄し、濾過し
て、樹脂からペプチドをＨ2 Ｏにより抽出した。粗生成
物の水溶液を凍結乾燥した。ペプチドCys-Ile-Phe-Gln
（ＣＩＦＱ）（配列番号３）の精製はＣ−１８シリカベ
ースの担体を用いた逆相液体クロマトグラフィにより行
なった。所期生成物は０．１％水性ＴＦＡとアセトニト
リル中０．１％ＴＦＡの濃度勾配溶出により溶出させ
た。精製生成物の画分は合して凍結乾燥した。生成物の
同定と純度検定はアミノ酸組成分析、分析用ＨＰＬＣお
よび質量分析により行なった。
【００３７】
【００３８】
【００３９】
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 エレイン ランズ アメリカ合衆国，19002 ペンシルヴァニ ア，アンブラー，スチュアート レーン 403 (72)発明者 ディヴィッド エル．ポンプリアーノ アメリカ合衆国，19446 ペンシルヴァニ ア，ランスデール，ギュイネデイル ウェ イ 1159 (72)発明者 ヴィクター エム．ガースキー アメリカ合衆国，19422 ペンシルヴァニ ア，ブルー ベル，パーマー プレイス 754
Claims (9)
- 【請求項１】 アミノ酸配列 Cys-Xaa1-Xaa2-Xaa3 を有し、非基質性阻害剤としてファルネシル−蛋白トラ
ンスフェラーゼを阻害し、正常細胞が癌細胞にトランス
フォームするのを阻害する化合物；〔式中Cys はシステ
インアミノ酸、 Xaa1はどのアミノ酸でもよく、 Xaa2はフェニルアラニンまたはｐ−フルオロフェニルア
ラニンであり、 Xaa3はどのアミノ酸でもよい〕およびその医薬的に許容
される塩。 - 【請求項２】 ＣＶＦＭ（配列番号１）である請求項１
記載の化合物。 - 【請求項３】 ＣＩＦＭ（配列番号２）である請求項１
記載の化合物。 - 【請求項４】 ＣＩＦＱ（配列番号３）である請求項１
記載の化合物。 - 【請求項５】 ＣＩ（ｐ−フルオロ−Ｆ）Ｍである請求
項１記載の化合物。 - 【請求項６】 医薬用担体と、治療的有効量を医薬用担
体中に分散させた請求項１ないし５のいずれかに記載の
化合物からなる、化学療法組成物。 - 【請求項７】 治療の必要のあるほ乳動物に請求項６記
載の組成物の治療的有効量を投与することからなる、非
基質性阻害剤としてファルネシル−蛋白トランスフェラ
ーゼを阻害し、ｒａｓ蛋白の膜への局在化を阻害し、正
常細胞が癌細胞にトランスフォームするのを阻止する方
法。 - 【請求項８】 治療の必要のあるほ乳動物に請求項６記
載の組成物の治療的有効量を投与することからなる、癌
の治療方法。 - 【請求項９】 ほ乳動物がヒトである、請求項７または
８に記載の方法。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US72312891A | 1991-06-28 | 1991-06-28 | |
| US723128 | 1991-06-28 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH06157589A true JPH06157589A (ja) | 1994-06-03 |
Family
ID=24904979
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP4170918A Pending JPH06157589A (ja) | 1991-06-28 | 1992-06-29 | ファルネシル−蛋白トランスフェラーゼの非基質性阻害剤 |
Country Status (3)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0523873A1 (ja) |
| JP (1) | JPH06157589A (ja) |
| CA (1) | CA2072033A1 (ja) |
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| US5962243A (en) * | 1990-04-18 | 1999-10-05 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Methods for the identification of farnesyltransferase inhibitors |
| US5420245A (en) * | 1990-04-18 | 1995-05-30 | Board Of Regents, The University Of Texas | Tetrapeptide-based inhibitors of farnesyl transferase |
| US5976851A (en) * | 1990-04-18 | 1999-11-02 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Methods and compositions for the identification, characterization, and inhibition of farnesyl protein transferase |
| US6083917A (en) * | 1990-04-18 | 2000-07-04 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Methods and compositions for the identification, characterization and inhibition of farnesyltransferase |
| US6632626B1 (en) | 1990-04-18 | 2003-10-14 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Methods of assaying farnesyl transferase |
| CA2118985A1 (en) * | 1993-04-02 | 1994-10-03 | Dinesh V. Patel | Heterocyclic inhibitors of farnesyl protein transferase |
| EP0763537A3 (en) | 1993-05-14 | 1997-10-22 | Genentech Inc | Non-peptides farnesyl transfer inhibitors |
| US5965539A (en) * | 1993-05-18 | 1999-10-12 | Univeristy Of Pittsburgh | Inhibitors of prenyl transferases |
| US5602098A (en) * | 1993-05-18 | 1997-02-11 | University Of Pittsburgh | Inhibition of farnesyltransferase |
| US5834434A (en) * | 1993-05-18 | 1998-11-10 | University Of Pittsburgh | Inhibitors of farnesyltransferase |
| US5705686A (en) * | 1993-05-18 | 1998-01-06 | University Of Pittsburgh | Inhibition of farnesyl transferase |
| US6011175A (en) * | 1993-05-18 | 2000-01-04 | University Of Pittsburgh | Inhibition of farnesyltransferase |
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| US5439918A (en) * | 1994-03-14 | 1995-08-08 | Merck & Co., Inc. | Inhibitors of farnesyl-protein transferase |
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| FR2730491B1 (fr) * | 1995-02-09 | 1997-03-14 | Rhone Poulenc Rorer Sa | Nouveaux inhibiteurs de farnesyl transferase, leur preparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent |
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| US6221865B1 (en) | 1995-11-06 | 2001-04-24 | University Of Pittsburgh | Inhibitors of protein isoprenyl transferases |
| US6204293B1 (en) | 1995-11-06 | 2001-03-20 | University Of Pittsburgh | Inhibitors of protein isoprenyl transferases |
| US6693123B2 (en) | 1995-11-06 | 2004-02-17 | University Of Pittsburgh | Inhibitors of protein isoprenyl transferases |
Citations (1)
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|---|---|---|---|---|
| JPH05506779A (ja) * | 1990-04-18 | 1993-10-07 | ボード オブ リージェンツ，ザ ユニバーシティ オブ テキサス システム | ファルネシルタンパク質トランスフェラーゼの同定、特性化及び阻害の方法及び組成物 |
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- 1992-06-23 CA CA002072033A patent/CA2072033A1/en not_active Abandoned
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- 1992-06-29 JP JP4170918A patent/JPH06157589A/ja active Pending
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Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
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| CA2072033A1 (en) | 1992-12-29 |
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