【発明の詳細な説明】[Detailed description of the invention]
［産業上の利用分野］
本発明は制癌剤に関するものである。
［従来の技術］
従来用いられている制癌剤すなわちアルキル化
剤、代謝拮抗剤及び制癌抗生物質は動物実験での
癌細胞に対する殺細胞作用は著明であるものの、
正常細胞に対する毒性が大であることより、臨床
では副作用が大きな問題となつている。従つて副
作用の少ない制癌剤の開発が望まれている。
［発明が解決しようとする問題点］
本発明は副作用が少なく、著明な制癌作用を有
する制癌剤を提供するものである。
［問題点を解決するための手段］
本発明者は種々の生薬の制癌作用に関する研究
を行つた結果、柴胡（Bupleuri Radix）に制癌
作用のあることを見い出した。更に、柴胡に含ま
れる制癌作用を有する成分を追求し、サイコサポ
ニンａと、サイコサポニンｄに著明な制癌作用を
見い出した。本発明はこの知見に基づくもので、
本発明はサイコサポニンａまたはサイコサポニン
ｄを主成分として含有する制癌剤である。
本発明の制癌剤の主成分であるサイコサポニン
ａは下記の式（）で表わされる化合物であり、
またサイコサポニンｄは下記の式（）で表わさ
れる化合物である。
[Industrial Field of Application] The present invention relates to an anticancer agent. [Prior Art] Conventionally used anticancer drugs, such as alkylating agents, antimetabolites, and anticancer antibiotics, have a remarkable cytocidal effect on cancer cells in animal experiments;
Side effects have become a major problem in clinical practice due to their high toxicity to normal cells. Therefore, the development of anticancer drugs with fewer side effects is desired. [Problems to be Solved by the Invention] The present invention provides an anticancer agent that has few side effects and has a significant anticancer effect. [Means for Solving the Problems] As a result of research on the anticancer effects of various herbal medicines, the present inventor discovered that Bupleuri Radix has anticancer effects. Furthermore, we searched for components contained in saiko that have anticancer effects, and found that saikosaponin a and saikosaponin d have significant anticancer effects. The present invention is based on this knowledge,
The present invention is an anticancer agent containing saikosaponin a or saikosaponin d as a main component. Saikosaponin a, which is the main component of the anticancer agent of the present invention, is a compound represented by the following formula (),
Moreover, saikosaponin d is a compound represented by the following formula ().
【化】[ka]
【化】
サイコサポニンａまたはサイコサポニンｄは、
次のようにしてミシマサイコ（Bupleurum
falcatum L.）の根から得ることができる。
ミシマサイコの根をアルコール等の水性溶媒
（例えばメタノール、エタノール等）で抽出し、
抽出液から溶媒に留去した後、このエキスにエー
テルを加え加熱してから、エーテル層を除去した
残渣を水不溶性有機溶媒（例えばｎ−ブタノー
ル、酢酸エチル等）と水で分配し、水不溶性有機
溶媒層をシリカゲルを用いたカラムクロマトグラ
フイーに付し、クロロホルム−メタノール−水
（65：30：10）の下層で溶出させ、2000ml溶出し
た時点から溶出液を900ml分取し、この分画を更
に高速液体クロマトグラフイ−［カラム
μBONDAPAKTM／C18（ウオーターズ社製）、溶
媒 アセトニトリル：水＝32：68、流速 ４ml／
min］に付し、14分後に溶出してくるサイコサポ
ニンａと、36分後に溶出してくるサイコサポニン
ｄを得る。
また、サイコサポニンａまたはサイコサポニン
ｄは、和光純薬工業株式会社より生薬有効成分標
準品として販売されているので、これを用いるこ
とができる。
［発明の効果］
次に本発明の制癌剤の主成分であるサイコサポ
ニンａ及びサイコサポニンｄが制癌作用を有する
ことについて実験例を挙げて説明する。
実験例
(1) 使用動物：ddY系雄性マウス
体重（20〜22ｇ）
(2) 腫瘍細胞：ddY系マウスにて腫瘍の継代を行
つているエーリツヒ（Ehrlich）腹水癌細胞
を用いた。
(3) 実験方法：１群６匹としたマウスに、サイコ
サポニンa5mg／Kg及び、サイコサポニンd10
mg／Kgをそれぞれ生理食塩水に懸濁し、１日
１回３日間腹腔内投与した。被験薬投与７日
後に上記マウスに、一匹当りエーリツヒ腹水
癌細胞を１×105細胞／0.2mlになるように生
理食塩水で希釈して、腹腔内に移植した。生
存日数より制癌作用を判定した。コントロー
ルには、生理食塩水のみを腹腔内投与した。
(4) 実験結果：コントロール群の平均生存日数は
20日であるのに対し、サイコサポニンa5
mg／Kg投与群、サイコサポニンd10mg／Kg投
与群の平均生存日数はそれぞれ60日以上であ
り、制癌作用が認められた。更に、サイコサ
ポニンａ及びサイコサポニンｄの投与による
脱毛、体重減少、飼料摂取量減少等の副作用
は発現しなかつた。 また、サイコサポニン
ａ及びサイコサポニンｄをそれぞれ同系のマウス
に対して3.0mg／Kg静脈内投与、4.8mg／Kg腹腔内
投与、50mg／Kg経口投与した場合においても死亡
例は発現しなかつた。本発明の実験データの結果
から考えて、サイコサポニンａ及びサイコサポニ
ンｄの有効投与量は、患者の年令、体重、症状の
程度によつても異なるが、通常の成人量で、１回
量200〜300mgを、症状に合わせて１日３回までの
経口投与が適当と認められる。
本発明の制癌剤の主成分であるサイコサポニン
ａまたはサイコサポニンｄは単独で用いることが
でき、また製剤に用いられる適当な溶剤、賦形
剤、補助剤などを使用して、製剤製造の常法に従
つて液剤、散剤、顆粒剤、錠剤、坐剤、腸溶剤お
よびカプセル剤などの製剤を作ることができる。
また、サイコサポニンａまたはサイコサポニンｄ
は他の医薬活性成分との配合剤として用いること
もできる。
経口投与のために少なくとも一種の賦形剤、例
えば、デンプン、乳糖、白糖、マンニツト、カル
ボキシメチルセルロース等を用いて錠剤、丸剤、
カプセル剤、散剤、顆粒剤等に処方できる。
この種の製剤には、適宜前記賦形剤の他に、例
えばステアリン酸マグネシウム、ラウリル硫酸ナ
トリウム、タルク等の滑沢剤、デキストリン、結
晶セルロース、ポリビニルピロリドン、アラビア
ゴム、トウモロコシデンプン、ゼラチン等の結合
剤、バレイシヨデンプン、カルボキシメチルセル
ロース等の崩壊剤を使用することができる。また
懸濁液、エマルジヨン剤、シロツプ剤、エリキシ
ル剤として投与することができ、これらの剤型に
は、矯味矯臭剤、着色剤を含有してもよい。
非経口用製剤として、適当な基剤と混和してク
リーム、軟膏剤、パツプ剤、または坐剤とするこ
とができる。
次に実施例を示して本発明をさらに具体的に説
明するが、本発明はこれにより制限されるもので
はない。
実施例 １
サイコサポニンa7.5ｇを細末とし、これを乳糖
130ｇおよびステアリン酸マグネシウム12.5ｇと
混合し、この混合物を単発式スラツグ打錠機にて
打錠して直径20mm、重量約2.3ｇのスラツグ錠を
作り、これをオシレーターにて破砕し、整粒し、
篩別して20〜50メツシユの粒子の良好な顆粒剤を
得た。
本顆粒剤は１ｇ中にサイコサポニンａを50mg含
有し、症状に合わせて１回４〜６ｇを１日３回服
用する。
実施例 ２
サイコサポニンd50ｇを微結晶セルロース140
ｇおよびステアリン酸マグネシウム10ｇを加えて
混合し、この混合物を単発式打錠機にて打錠して
直径９mm、重量200mgの錠剤を製造した。
本錠剤は１錠中にサイコサポニンｄを50mg含有
し、症状に合わせて１日４〜６錠を数回に分けて
服用する。
実施例 ３
サイコサポニンa50ｇを細末として乳糖150ｇ
と混合し、200mgずつ硬カプセルに充填してカプ
セル剤を得た。
本カプセル剤は１カプセル中にサイコサポニン
ａを50mg含有し、症状に合わせて１回４〜６カプ
セル１日３回服用する。
実施例 ４
サイコサポニンd2.5ｇを研磨して微末とし、こ
れに精製カカオ脂197.5ｇを加えて60℃の水浴上
で練合し、整形して１個２ｇの坐剤とした。
本坐剤は１個中にサイコサポニンｄを25mg含有
し、症状に合わせて使用する。[C] Saikosaponin a or saikosaponin d is
Mishima Saiko (Bupleurum) as follows.
It can be obtained from the roots of falcatatum L.). Extract the Mishimasaiko root with an aqueous solvent such as alcohol (e.g. methanol, ethanol, etc.),
After distilling the extract into a solvent, add ether to this extract and heat it, then remove the ether layer and partition the residue between a water-insoluble organic solvent (e.g. n-butanol, ethyl acetate, etc.) and water. The organic solvent layer was subjected to column chromatography using silica gel, eluted with the lower layer of chloroform-methanol-water (65:30:10), and from the point at which 2000 ml had been eluted, 900 ml of the eluate was collected. Further, high performance liquid chromatography [column μBONDAPAK TM /C 18 (manufactured by Waters), solvent acetonitrile:water = 32:68, flow rate 4ml/
min] to obtain saikosaponin a, which is eluted after 14 minutes, and saikosaponin d, which is eluted after 36 minutes. Furthermore, saikosaponin a or saikosaponin d is sold by Wako Pure Chemical Industries, Ltd. as a standard product of herbal medicine active ingredients, so it can be used. [Effects of the Invention] Next, the anticancer effect of saikosaponin a and saikosaponin d, which are the main components of the anticancer agent of the present invention, will be explained with reference to experimental examples. Experimental Examples (1) Animals used: ddY male mice Body weight (20 to 22 g) (2) Tumor cells: Ehrlich ascites cancer cells whose tumors are passaged in ddY mice were used. (3) Experimental method: 6 mice per group were given 5 mg/Kg of saikosaponin a and 10 mg/kg of saikosaponin d.
mg/Kg of each was suspended in physiological saline and administered intraperitoneally once a day for 3 days. Seven days after administration of the test drug, Ehritzch ascites cancer cells were diluted with physiological saline to 1×10 5 cells/0.2 ml and implanted intraperitoneally into each mouse. The anticancer effect was determined based on the number of days of survival. For controls, only physiological saline was administered intraperitoneally. (4) Experimental results: The average survival time of the control group was
20 days, whereas psychosaponin a5
The average survival days of the mg/Kg administration group and the saikosaponin d 10 mg/Kg administration group were each 60 days or more, indicating anticancer effects. Furthermore, side effects such as hair loss, weight loss, and decrease in feed intake did not occur due to the administration of saikosaponin a and saikosaponin d. Furthermore, no deaths occurred when saikosaponin a and saikosaponin d were administered to syngeneic mice at 3.0 mg/Kg intravenously, 4.8 mg/Kg intraperitoneally, and 50 mg/Kg orally. Considering the results of the experimental data of the present invention, the effective dosage of saikosaponin a and saikosaponin d varies depending on the age, weight, and severity of symptoms of the patient, but it is a normal adult dose and a single dose. Oral administration of 200 to 300 mg up to three times a day is considered appropriate depending on the symptoms. Saikosaponin a or saikosaponin d, which is the main component of the anticancer agent of the present invention, can be used alone, or it can be prepared using a conventional method for manufacturing a preparation using an appropriate solvent, excipient, adjuvant, etc. used in the preparation. Accordingly, preparations such as solutions, powders, granules, tablets, suppositories, enteric-coated preparations, and capsules can be prepared.
Also, saikosaponin a or saikosaponin d
can also be used as a combination agent with other pharmaceutically active ingredients. For oral administration, tablets, pills,
It can be formulated into capsules, powders, granules, etc. In addition to the above-mentioned excipients, this type of preparation may contain, for example, lubricants such as magnesium stearate, sodium lauryl sulfate, and talc, binders such as dextrin, crystalline cellulose, polyvinylpyrrolidone, gum arabic, corn starch, and gelatin. A disintegrating agent such as an agent, potato starch, carboxymethyl cellulose, etc. can be used. It can also be administered as a suspension, emulsion, syrup, or elixir, and these dosage forms may contain flavoring agents and coloring agents. As a parenteral preparation, it can be mixed with a suitable base to form a cream, ointment, poultice, or suppository. EXAMPLES Next, the present invention will be explained in more detail with reference to Examples, but the present invention is not limited thereto. Example 1 7.5g of Saikosaponin A was made into fine powder, and this was mixed with lactose.
130 g of magnesium stearate and 12.5 g of magnesium stearate, and this mixture was compressed using a single-shot slug tablet machine to make slug tablets with a diameter of 20 mm and a weight of approximately 2.3 g. This was crushed using an oscillator and sized. ,
Good granules of 20 to 50 mesh particles were obtained by sieving. This granule contains 50 mg of Saikosaponin A per gram, and is administered at a dose of 4 to 6 g three times a day, depending on the symptoms. Example 2 50g of saikosaponin d and 140g of microcrystalline cellulose
g and 10 g of magnesium stearate were added and mixed, and this mixture was compressed using a single-shot tablet machine to produce tablets with a diameter of 9 mm and a weight of 200 mg. Each tablet contains 50 mg of Saikosaponin D, and is taken in 4 to 6 tablets a day in several divided doses depending on the symptoms. Example 3 150g of lactose using 50g of Saikosaponin A as fine powder
200 mg each was filled into hard capsules to obtain capsules. Each capsule contains 50 mg of Saikosaponin A, and is taken 4 to 6 capsules at a time, three times a day, depending on the symptoms. Example 4 2.5 g of Saikosaponin d was ground into a fine powder, and 197.5 g of purified cacao butter was added thereto, kneaded on a 60°C water bath, and shaped into suppositories weighing 2 g each. Each suppository contains 25mg of Saikosaponin D, and is used according to the symptoms.