JPH05506452A - 化学療法剤としてのビストリアゼン類 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 発明の名称 化学療法剤としてのビストリアゼン類 技術分野 本発明は、ビストリアゼン（ｂｉｓｔｒｉａｚｅｎｅ）化合物を各種癌の治療に 有用な化学療法、剤として使用することに関する０本化合物は、この適応により 医学及び獣医学双方の広範囲の領域において有用となる。また本発明は、各種研 究領域、化学領域において重合高分子を合成し、およびこれを取扱う際の有用な 架＃Ｉ荊としてこの化合物を使用することに関する。

背景技術 従来の化学療法剤の多くはアルキル化剤として作用し、ＤＮＡのホスフェート基 を始めとする各種物質と共有結合を形成する。　ＤＮＡの塩基がアルキル化され ると遺伝子に誤った遺伝符号がつけられ、ＤＮＡ分子が重篤な障害を受けたり、 およびｌまたは核酸の機能が大きく破壊され、さらに他の細胞機能を広範囲にわ たって抑止する結果となることが多い、これらの化学療法剤は核酸分子に対して 致死的な架橋を形成する作用を持ち、多くの場合静脈注射後数日で腸瘍を縮小さ せる。これら化学療法剤のうち、ビス（２−クロロエチル）ニトロソウレア（ｂ ｉｓ（２−ｃｈｌｏｒｏｅｔｈｙｌ）ｎｉｔｒｏｓｏｕｒｅａ；　ＢＣＮＵ）、 　ｖイトマイシン（ｍｉｔｏａｙｃｉｎ）、シクロホスホアミド（ｃｙｃｌｏ− ｐｈｏｓｐｈａｍｉｄｅ；シトキサン（Ｃｙｔｏｘａｎ））、イホス７７ミド（ ｉｆｏｓｐｈａｍｉｄｅ）のような２−クロロエチル−ニトロソウレア類（２− ｃｈｌｏｒｏｅｔｈｙｌ−ｎｉｔｒｏｓｏｕｒｅａｓ）がある、これらの薬剤そ れ自体は、強力な変異誘発性、催奇性、発癌性を持っているけれども、毒性には 細胞周期依存性がなく、細胞周期を通して抗腫瘍作用を発現することが出来る。

ボーガン（Ｖａｕｇｈａｎ）ら（Ｊｏｕｒ、　Ｍｅｄ、　Ｃｈｅｗ、）　１９８ ４．２７：３５７−６３））は、他のトリアゼン類製造の副産物として、ある種 のビストリアゼンが形成されることを報告したが、これについては化学的にも、 構造的にも本発明のビストリアゼンとは異なっていて、抗腫瘍作用の試験も行わ れていない、これら２種顕ののビストリアゼンの相違点は、ボーガンらのビスト リアゼンが同じアルキル化部分を放出するためには代謝を２回活性化しなければ ならないし、また加水分解してモノトリアゼンを放出し易い点にある。

本発明のビストリアゼンを化学療法剤および架橋副として使用出来るとの報告は 未だなされていない。

発明の開示 本発明のビストリアゼン化合物は、スペルミン（ｓｐｅｒｉｉｎｅ）、スペルミ ジン（ｓｐｅｒｍｉｄｉｎｅ）等のポリアミンに類似する構造を持ち、［ｌＮＡ と相互作用をする新規のアルキル化剤である。従来から化学療法に用いられてい るアルキル化肘のほとんどでは、共有結合により、あるいは共有結合によらない で、標的のＤＮＡと相互作用した後に架橋反応を発現する。しかしながら、本発 明のビストリアゼン化合物はこれら化学療法剤のいずれとも化学構造が異なり、 完全な化合物のままでＤＮＡと相互作用する。この相互作用が水素によるＤＮＡ との多重結合の形成に依存している点、天然ポリアミン類とＤＮＡとの相互作用 の非常によく似ている。事実、ビストリアゼン類とポリアミン類のあるものとが 構造の上で相似しているところから、ビストリアゼン類がＤＮＡ中でポリアミン 類そのものと同じ位置を占める可能性もある。

結合の後、ビストリアゼン類はＤＮＡの表面で分解し、ビスジアゾニウムイオン の形のｒリンカ−」を放出する。

これは非常に反応性の高い物質で、共有結合によるＤＮＡとの相互作用により、 ＤＮＡ二重頗を数カ所で切断し、鎖間に架橋を形成する。ビストリアゼン分子の リンカ−を構造的に変える二とによりビスジアゾニウムイオンの特性を変えるこ とが可能であり、適当な化学修飾を行うことにより分子全体の反応性を贋節する ことが出来る。つまり、ビストリアゼン類は、ポリアミンと同様にしてＤＮＡと 相互作用した後１分解して架橋剤となり、このために細胞に致死的な架橋が形成 されると考えられる。従って５本発明のビストリアゼン化合物を化学療法剤とし て使用する場合、ＤＮＡと薬剤との相互作用は特異性が高く、さらにＤＮＡ表面 に反応性ジアゾニウムイオンも形成されるため、化合物分子当りにして非常に大 きな有効量の最終細胞毒性成分を薬物輸送することが可能である。二の量の点で は、単純単座配位子系薬剤は遥かにこれに及ばない、この特色のためビストリア ゼン系薬剤は、従来から化学療法に用いられているのアルカリ化荊と比較して低 い投与量ですむ利点がある。このようにビストリアゼン系抗癌剤には、特異性が あり、かつ、有効投与量が少量ですむため、現在使用されているものよりも全身 毒性がはるかに低いと予想される。

本発明のビストリアゼン化合物は、現在の療法よりも特異性が高く、毒性が低い 、全く新規な化学療法用二座配位子系アルキル化荊である。

従って、本発明の目的は、ビス（メチルトリアモノ）−ｐ−キシレン（ｂｉｇ（ ｍｅｔｈｙｌｔｒｉａｚｅｎｏ）−ｐ−ｘｙｌｅｎｅ）、ビス（メチルトリアモ ノ）−２−ブテン（ｂｉｓ（ｍｅｔｈｙｌｔｒｉａｚｅｎｏ）−２−ｂｕｔｅｎ ｅ）、ビス（メチルトリアモノ）エタン（ｂｉｓ（＋５ｅｔｈｙｌｔｒｉａｚｅ ｎｏ）ｅｔｈａｎｅ）などのビストリアゼン化合物及び他のビストリアゼン誘導 体の抗癌有効量を生体に投与することによりヒトおよび噴孔動物の癌を治療する 方法を提供することにある。

本発明の他の目的は、ビストリアゼン化合物の抗癌有効量と、クロラムブシル（ ｃｈｌｏｒａｍｂｕｃｉ　Ｉ）、メルフアラン（ｍｅｌｐｈａｌａｎ）、ウラシ ルマスタードＮＦ　（ｕｒａｃｉｌａ＋ｕｓｔａｒｄ　ＮＦ）、シクロホスファ ミド（ｃｙｃｌｏｐｈｏｓｐｈａａ＋１ｄｅ）、メクロレタミン塩酸塩（Ｉｌｅ ｃｈｌｏｒｅｔｈａｍｉｎｅ　ｈｙｄｒｏ−ｃｈｌｏｒｉｄｅ）、カルムスチン （ｃａｒｍｕｓｔｉｎｅ　（ＢＣＮＵ））、ロムスチン（ｌｏａ＋ｕｓｔｉｎｅ ）、デカーバジン（ｄａｃａｒｂａｚｉｎｅ（ＤＴＩＣ）　））、チオテバ　Ｎ Ｆ　（ｔｈｉｏｔｅｐａ　ＮＦ）、ブスル７７　ン（ｂｕｓｕｌｆａｎ）等のア ルキル化剤、または、これらのアルキル化剤の合剤の抗癌有効量とを生体に投与 する二とによりヒトおよび哺乳動物の癌を治療する方法を提供することにある。

本発明のさらに他の目的は、ビストリアゼン化合物の抗癌有効量を含有する医薬 組成物を提供することにある。

本発明のさらに他の目的は、ビストリアゼン化合物の抗癌有効量もしくはビスト リアゼン化合物の抗癌有効量と、クロラムブシル、メルフアラン、ウラシルマス タードＮＦ、シクロホスファミド、メクロレタミン塩酸塩、カルムスチン（ＢＣ ＮＵ）、ロムスチン、デカーバジン（ＤＴＩＣ）、チオテバＮＦ、ブスルファン などのアルキル化剤、または、これらのアルキル化剤の合剤の抗癌有効量とを含 有する医薬組成物を提供することにある。

本発明に従って、ビストリアゼン化合物またはその生理的に許容し得る塩を含有 する医薬組成物の抗癌有効量を投与することにより、上記その他の目的を達成す ることが出来る。癌の治療に有用なビストチアゼン化合物には、ビス（メチルト リアモノ）−ｐ−キシレン、ビス（メチルトリアモノ）−２−ブテン、ビス（メ チルトリアモノ）エタンおよび抗癌効果を持つその他のビストリアゼン誘導体が あるが、これらは次の通りである。

エタノ　ｌニーＢ頃−ｙｌ−ｏ嵐山雛 】、２−とス（メチルトリ７セリ）エタンフタ、　１．４−Ｂｉｘ−Ｂ１５（＋ ｙｌｔｒｉｕ仰ｏ）ｂｕｕｎｃトランス−１，４−ヒ゛ス（１，３−シ゛メチル トリアセ゛ハシクロへキサンα、α′−ヒ゛ス（メチ訃す７セ°バー０−キシレ ン本発明の化合物は、ヒトおよび動物の癌の治療に使用することが出来る。

ビストリアゼン化合物は腫瘍疾患の治療に月いるほか、本発明のさらに他の目的 はこの化合物を研究試薬として使用することにある。研究上、ＤＮＡ、　蛋白な どの高分子を操作する際、対象分子と相互作用する試薬を用いて、この対象分子 を： ｌ）特定領域で切断する、 ２）特定債域で酵素によって切断されるのを阻止する、３）結び付きが緩やかな 他の分子と結合させる。

４）ニトロセルロースまたはナイロンなどのマトリックスと結合させて、取扱い および試験を容易にする。

５）アフィニテイクロマトグラフィの配位子としてクロマトグラフィ支持体等の マトリックスと結合させる、あるいは ６）無関係な高分子と共有結合させる（例えば、　トキシンを抗体に、抗体を酵 素に、小分子をオリゴヌクレチオドＤＮＡプローブに１等）。

ビストリアゼン類は、上記その他の高分子の実験的操作に使用出来る。

ビストリアゼンを改変して置換基が高度の配列順を！！識出来るようにして、不 安定な部位でアルキル化を行うと、ＤＮＡあるいはＤＮＡ支持蛋白が切断される （上記１））１反対に、安定な部位でアルキル化を行うと、制限酵素によるＤＮ Ａの消化あるいはプロテアーゼによる蛋白の消化等、酵素による消化を阻止する ことが出来る（上記２））。

上記３）、５）および６）の用途では、現在のところ多機能の化学架橋試薬が広 く用いられている６本発明の他の目的は、ビストリアゼン化合物をこれらの用途 に使用することにある。

本発明のさらに他の目的は、ビストリアゼン化合物を活性の高い化学架橋剤とし て使用し、ＲＮＡ、ＤＮＡあるいは蛋白等の分子をニトロセルロース、ナイロン その他の同様の膜に固定しく上記４）の用途）、膜支持体上の生体高分子として の取り扱いおよび試験を可能にすることにある。

本発明のさらに他の目的は、ビストリアゼン類をモノマー成分から化学ポリマー を形成する際の架橋剤として使用することにある。

本発明のビストリアゼン化合物は、既知の架橋剤と類似する使用方法に従う架橋 剤としても用いることが出来る。

以下に示す詳細な説明と図面により１本発明の適用範囲がさらに明白となるはず である。しかしながら、。

この詳細な説明により当業者が本発明の趣旨、範囲内の変更及び改良を読み取る ことが出来ることに鑑み、本発明の詳細な説明、特定の実施例、最良の実施形態 は例示のためにのみ開示されたものであること了解されたい。

図面の簡単な説明 図１は、ビス（メチルトリアモノ）−ｐ−キシレン（ｂｉｓ（ａ＋ｅｔｈｙｌｔ ｒｉａｚｅａｏ）−ｐ−ｘｙｌｅｎｅ）の各種濃度に暴露されたのヒト腫瘍細胞 系の試験管内（ｉｎ　ｖｉｔｒｏ）生存率を示す図面である。

図２は、ビス（メチルトリアモノ）−２−ブテン（ｂｉｓ（ａ＋ｅＬｈｙｌｔｒ ｉａｚｅｎｏ）−２−ｂｕＬｅｎｅ）の各種濃度に暴露されたヒト腫瘍細胞系の 試験管内生存率を示す図面である。

図３は、　ビス（メチルトリアモノ）エタン（ｂｉｓ（ａ＋ｅｔｈｙｌｔｒｉａ ｚｅｎｏ）ｅｔｈａｎｅ）の各種濃度に暴露されたヒト腫瘍細胞系の試験管内生 存率を示す図面である。

図４は、５−（３，３−ジメチルトリアモノ）イミダゾール−４−カルボキサイ ド（５−（３，３−ｄｉ＊ｅｔｈｙｌｔｒｉａｚｅｎｏ）ｉｍｉｄａｚｏｌｅ− ４−ｃａｒｂｏｘａｍｉｄａ；　ＤＴＴＣ）の各種濃度に暴露されたヒト腫瘍細 胞系の試験管内生存率を示す図面である。

図１〜４の細胞系の略語の由来は次の通り。

ＣＸＦ　（Ｃｏｌｏｎ　Ｃａｎｃｅｒ　Ｘｅｎｏｇｒａｆｔ）結腸癌異種移植： ＧＸＦ　（Ｇａｓｔｒｉｃ）胃癌：　ＬＸＦ　（Ｌｕｎｇ）肺癌二＾（ａｄｅｎ ｏ）腺、Ｌ　（ｌａｒｇｅ　ｃｅｌｌ）大細胞、Ｅ　（ｅｐｉｄｅｒｍｏｉｄ） 　＠上皮層細胞、Ｓ　（ｓｍａｌｌ　ｃｅｌｌ）小細胞；關へＸＦ　（Ｍａｎｎ ａｒｙＣａｎｃｅｒ　Ｘｅｎｏｇｒａｆｔ）乳癌異種移植；　ＭＥＸＦ　（Ｍｅ ｌａｎｏｍａ）黒色腫：　ＰＸＦ　（ＰＩｅｕｒａｍｅｓｏＣｈｅｌｉｏ＋＋ａ ）胸膜中皮層、　ＳＸＦ（Ｓａｒｃｏｍａ）肉ＩＩ　；　ＴＸＦ　（Ｔｅｓｔｉ ｃｕｌａｒ）こう丸癌；ＸＦ　（ｍｉｓｃｅｌｌａｎｅｏｕｓ　ｃａｎｃｅｒ　 ｇｒａｆｔ）雑多の癌異種移植。

図５は、オリゴヌクレオチド架橋の検定の結果を示す図面である。

図６は、超らせんブラダミドＤＮＡ検定の結果を示す図面である。

発明の詳細な説明 当業者の知る通り、ビストリアゼンの基本構造には、化合物の所望の用途に合わ せて調整が出来る数多くの元素が含有されている０次の構造によりこれら元素を ＥＧ−Ｎ−Ｎ−Ｎ−（リンカ−）−Ｎ−Ｎ−Ｎ−ＥＧ「リンカ−１部分は、分子 構造の限定と架橋の形成に関連する。　リンカ−は、鎖長ｌ〜２０個、好ましく は２〜８個のアルキル基、置換アルキル基（アルキルアミン類、アルキルエーテ ル類およびチオエーテル類、ハロアルキル基、シラン類、ホスフィン類、アルコ オール類、アミン類等を含む、但しこれらにのみに限定されない）の何れかであ る。また、　リンカ−には、　トリアジン（ｔｒｉａｚｉｎｅ）部分が１〜３０ 個の炭素原子、好ましくは４〜１２個の炭素原子で分離されるような、アラルキ ル基または置換アラルキル基（置換アルキル基類の場合と同様の変更を含む）、 多環式アラルキル基、複素環式アラルキル基、およびこれらの置換誘導体を含め ることが出来る。　ｒ末端基（Ｅｎｄ　Ｇｒｏｕｐ）Ｊ　（ＥＧ）に関して言え ば、この部分はビストリアゼン類の反応性の調整に重要である。　ＥＧは、鎖長 １〜２０個、好ましくは１〜６個のアルキル基、置換アルキル基（アルキルアミ ン類、アルキルエーテル類およびチオエーテル類、ハロアルキル基、シラン類、 ホスフィン類、アルコール類、アミン類等を含む、但しこれらのみに限定されな い）からなる群から別個に、または、同一に選ばれるものであってもよい６また ＥＧには、核酸塩基およびオリゴヌクレチドを始めとする、２〜４０個の非水素 原子からなり、かつ、１〜６個のリングを含有するアラルキル基または置換アラ ルキル基（置換アルキル類の場合と同様の変更を含む）、多環式アラルキル、ア リール基および複素環基を含めることが出来る。

トリアゼン部分に対する最終置換基であるＲまたはＲ′は、おそらく最も代替性 があるもので、トリアゼンの基本部分の組立後、下記文献で開示されているジア ルキルトリアゼンの方法により添加する（Ｒ，＋（、スミス。

Ｊｒ、ら、　「有機化字詰Ｊ　、１９８６．５１．３７５１　（Ｒ，Ｈ，５ａ１ ｉｔｈ、　Ｊｒ、、　ｅｔ　ａｌ、、　Ｊ、　Ｏｒｇ、　Ｃｈｅｗ、、　１９８ ６．５１’、　３７５１）　；Ｒ，Ｈ，スミス、　Ｊｒ、ら、　「有機化字詰」 、＋９８８．５３．１４６７　（Ｒ，Ｈ，Ｓｍ１ｔｈ、　Ｊｒ、、　ｅｔ　ａｌ 、、　Ｊ、　Ｏｒｇ、　Ｃｈｅｗ、、１９８８゜５３、１４６７）；Ｄ、Ｈ，シ ーラ、「米ｆｆｌ化学協会誌Ｊ、１９８０゜１０２、３８８３　（Ｄ、Ｈ，５ｉ ｅｈ、　ｅｔ　ａｌ、、　Ｊ、　Ａｍ、　Ｃｈｅｗ、　Ｓｏｃ、。

１９８０、１０２．３８８３）　；　Ｒ，Ｈ，スミス、Ｊｒ、、Ｃ，Ｊ、ミヶジ ャ、「合成」誌、１９８３．４７６（Ｒ，Ｈ，Ｓｍ１ｔｈ、　Ｊｒ、　ａｎｄ　 Ｃ，Ｊ、　Ｍｉｃｈｅｊｄａ、　５ｙｎｔｈｅｓｉｓ、　１９８３．４７６）） 。

ＲとＲ′とはＥＧと同一であるか、あるいは、水素、鎖長１〜２０個、好ましく は１〜６個のアルキル基、置換アルキル基（アルキルアミン類、アルキルエーテ ル類およびチオエーテル類、ハロアルキル基、シラン類、ホスフィン類、アルコ ール類、アミン類等を含む、但しこれらのみに限定されない）よりなる群から別 個または互いに同一に選ばれるものであるか、いずれでもよい、またＲとＲ′に は、２〜４０個の非水素原子からなり、かつ、１〜６個のリングを含有するアラ ルキル基または置換アラルキル基（置換アルキル類の場合と同様の変更を含む） 、多環式アラルキル基、アリール基および複素環式基を含めることが出来る。さ らに、Ｒは、ちとの酸がカルボン酸、硫酸、スルホン酸、　リン酸、ホスフィン 酸、ヒ素酸またはセレン酸（但し、これらにのみに限定されない）である酸睡導 体であってもよい。

さらに、Ｒは上記の例のうちＲがＲ′と同一であったり、ＲがＲ′と結合して環 状ビストリアゼン化合物が形成されている化合物であってもよい、ＲとＲ′が同 一である場合。

これを発展させてゆきパラジウム、プラチナ、チタン、ジルコニウム、シリコン 、セレニウム、マグネシウムおよび銅を含めることが出来る。但し、これらの金 属のみに限定されることはない、シスプラチン、チタノセンジクロリド等の数種 の金属は抗腫瘍剤として臨床活性があり、ビストリアゼン部分がこれらの化合物 の二座配位子として機能し、細胞毒性作用をもつ数種の化合物を生成する。　Ｒ とＲ′が結合している場合、環状ビストリアゼン類の他に重合化合物が生成され ることもある。この場合の重合化合物は、トリアゼン類の加水分解が不安定であ るため特異な物性を有している。

この物性を利用して１組織に植設でき、加水分解により分解する徐放的に活性細 胞毒性剤となるポリマーを製造することが考えられている。同様に、二のポリマ ーを緩徐に溶解するマトリックスに作り、このマトリックスを構造用に用いたり 、あるいは包埋物質の放出用に利用することもできる。

さらにまた、簡略に説明するため上記した変更例はすべて、対称のビストリアゼ ンとして述べてきたが、二九が全てを１１１ｍしたのではなく、非対称のビスト リアゼン分子も本発明の化合物の範囲内とする。

ビストリアン着の合成 ビストリアゼン類は、下記の反応により容易Ｃゴ合成することが出来る。

ビストリアゼン類は、普通ｌ、ω−ジアジドアルカン類（１，ω−ｄｔａｚｉｄ ｏａｌｋａｎｅｓ）を２当量のアルキルリチウムと反応させて調製する。ジアジ ドアルカン類は、ジメチルホルムアミド溶液中で対応するジハロアルカンとアジ 化ナトリウムとから調製する１例えば、最も単純なビストリアゼンである１、２ −ビス（メチルリチウム）エタン（１，２−ｂｉｓ（ｍｅｔｈｙｌｔｒｉａｚｅ ｎｏ）ｅＬｈａｎｅ（ＢＭＴＥ））は、　１．２−ジアジドエタン（１，２−ｄ 　１ａｚｉｄｏｅｔｈａｎｅ）を２当量のメチルリチウムと反応させて調製する 。

単純トリアゼン類と対照的に、ビストリアゼン類は結晶状の固体である。Ｘ線に よりＢＭＴＥ分子の結晶構造を測定すると、固体状態で、近接部分との水素結合 による相互作用が最大となるような立体配座を形成していることとが分かる。こ の点、ＢＭＴＥは、ＤＮＡとの結び付きが強いことで知られているスペルミン、 スペルミジンおよびそのホスファチジル誘導体等のポリアミン類と非常に類似し ている。

ビストリアゼン類の合成と結晶構造のｘ、ａｍ定については、ブルーメンスタイ ンらの「テトラヘドロン通信１誌への発表用原稿（ＢＩｕｔｒｅｎｎｓＬｅｉｎ 　ｅｔ、　ａｔ、、丁ｅｔｒａ−ｈｅｄｒｏｎ　Ｌｅｔｔｅｒｓ、　ｓｕｂｍｉ ｔｔｅｄ　ｆｏｒ　ｐｕｂｌｅｉｃａｔｉｏｎ）　：およびブ・ルーメンスタイ ンらの「化学通信１誌への発表用原稿（Ｂｌｕ＋＋＋ｅｎｓｔｅｉｎ　ｅｔ　ａ ｌ、、　Ｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｌｅｔｔｅｒｓ。

５ｕｂａ＋１ｔｔｅｄ　ｆｏｒ　ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ）において、それぞれ 報告されている。特定のビストリアゼン類の合成は１次の通りである。

塞」Ｌ豊ユ Σ」ニー五ニムエ≦Ｌ五」二り立上」二ＩＪ　７　ｆ　／　）　！−と１」二色 ｐフラスコに、　トランス１．４−ジ（メチル　４−トルエンスルフォネート） シクロヘキサン（ｔｒａｎｓ−１，４−ｄｉ（ｍｅＬｈｙ１４−ｔｏｌｕｅｎｅ ｓｕｌｒｏｎａｔｅ）ｃｙｃｌｏｈｅｘａｎｅ）　３．０ｇ　（６，６ミリモル ）アジ化ナトリウム１．０８ｇ’　（１６，６ミリモル）およびジメチルホルム アミド（ｄｉｍｅｔｈｙｌｆｏｒｍａｍｉｄｅ　；　ＤＭＦ）５０ｍｌをとり、 アルゴンの雰囲気下で撹拌しながら２日間５０℃で加熱した後、水１５０１で希 釈し５石油エーテル４０−１で４回抽出した。有機層を集めてＮａ２ＳＯ４で乾 燥し、さらに濾過、蒸発させて淡黄色の油を得た。残余の油を無水エーテル１０ ０１に溶解し、アルゴン雰囲気下で２０℃にまで冷却した。メチルリチウム（Ｍ ｅＬ　ｉ　）をエチルエーテルに溶解し、その１．５Ｍ溶液（Ｉｌｍｌ、　１６ ．５ミリモル）を０．５時間かけて上記の溶液に添加したところ、小量のＭｅＬ ｉを加えた頃から、白色の沈澱が生成されるようになった。冷却浴を取り外し、 混液を１晩中撹伴しながら放置した。

その後、溶液を冷やしつつ、注意しながら半飽和のＮＨ４Ｃｌ　３０ｍ１を加え て、過剰のＭｅＬｉを急冷したところ、ＮＨ４Ｃｌ数１を添加し始めた時点で、 激しくガスが発生したため、手早く添加を行った。その後、水層を急速に分離し 、水４０１で洗い、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥、さらに濾過、蒸発して、淡褐色の固体 を得た。エーテル／石油エーテルによりこの固体を再結晶させて、融点７２〜３ ℃の白色の固体４３０ｍｇ（収率２９ｚ）を得た。質量スペクトル（高速原子衝 撃分析法（ＦＡＢ））では、計算値（Ｍ＋Ｈ）２２７．１９８４、測定値２２７ ．２０＋７±０．００２３であった。

罠［１１１２ Ｌ辷乙エユ１ヱ上上ユヱヱヱ１ヱ上工三上」上（１４−ｂｉｓ（ｍｅｔｈ　１ｔ ｒｉａｚｅｎｏＩｌｌｅｔｈｙｌ）ｂｅｎｚｅｎｅ）フラスコに、１，４−ジ（ クロロメチル）ベンゼン（１，４−ｄｉ（ｃｈｌｏｒｏｍｅｔｈｙｌ）ｂｅｎｚ ｅｎｅ）　２．０ｇ　（１１，４ミリモル）、アジ化ナトリウム　１．８６ｇ　 （２８，６ミリモル）とＤＭＦ　５０ｍ１をとり、混合物を１晩中アルゴン雰囲 気下で撹拌しながら５０℃で加熱した。この混合物を上記と同様にして調製した １、４Ｍ　ＭｅＬｉ溶液２０ｍ１　（２８ミリモル）で仕上げ処理を行い、黄色 の固体を得た。この固体をエーテル／石油エーテルにより再結晶して、融点９０ 〜２℃の淡黄色の固体１゜２６ｇ（収率５０％）を得た。質量スペクトル（ＦＡ Ｒ）では、計算値（Ｍ＋Ｈ）　２２１．１５１４．測定４ｆｉ　２２１．１５５ ８±０．００２２テアツた。

実施例３ １．２−ビス（メチルトリアゼツメチル）ベンゼン」−肚ｌ」シ阻υ■具二」と 郵」！助しμ加りとユ１フラスコに、１，２−ジ（クロロメチル）ベンゼン　（ １，２−ｄｉ（ｃｈｌｏｒｏｍｅｔｈｙｌ）ｂｅｎｚｅｎｅ）　７．９６ｇ　（ ４５ミリモル）、アジ化ナトリウム７．３９ｇ　（１１４ミリモル）とＤＭＦ　 １５０ｍ１をとり。

混合物を１晩中アルゴンの雰囲気下で撹拌しながら５０℃で加熱した。この混合 物を、無水エーテル３００１中で上記と同様にして調製した１、３Ｍ　ＭｅＬｉ 溶液９０＋ａｌ　（１１７ミリモル）で仕上げ処理を行い、黄色−赤黄色の固体 を得た、この固体をクーゲルロアー（Ｋｕｇｅｌｒｏｈｒ）法により蒸留しテ（ １１０〜ｂ を得た。この油は放置すると黒ずみ、半固体となった。

質量スペクトル（ＦＡＢ）では、計算値（Ｍ＋Ｆｌ）　２２１．１５＋４．　測 定値２２１．１５１３±０．００２２であった。

フラスコに、１．４−ジブロモブタン　（１，４−ｄｉｂｒｏａ＋。

ｂｕｔａｎｅ）　４．０ｇ　（１８，５ミリモル）、アジ化ナトリウム３．６ｇ （５５ミリモル）とＤＭＦ　５０ｍ１をとり、混合物を１晩中アルゴン雰囲気下 で撹拌しながら５０℃で加熱した。この混合物を上記と同様にして調製したり、 ３Ｍ　ＭｅＬｉ溶液４５１（５８ミリモル）で仕上げ処理を行い、３時間後反応 が完了して黄色の固体を得た。エーテル／石油エーテルによりこ°の固体を再結 晶して、融点４０〜２℃の白色の固体　１゜８６ｇ（収率５８ｚ）を得た。質量 スペクトル（ＦＡＢ）では、計算値（Ｍ＋Ｈ）　１７３．１５１４、測定値１７ ３．１５１０±０．００１７であった。

実施例５ し」二漿３−立ヱノニと１二と二」ニム虹ｘ９’、を−（１，２−Ｂｉｇ（ｍｅ ｔｈｙｌｔｒｉａｚｅｎｏ）ｅｔｈａｎｅ）フラスコに、１．２−ジブロモエタ ン　（１，２−ｄｉｂｒｏａ＋ｏｅｔｈａｎｅ）　５．０ｇ　（２７ミリモル） 、アジ化ナトリウム３．８ｇ　（５８ミリモル）とＤＭＦ　５０ｍ１をとり、混 合物を１晩中アルゴン雰囲気下で撹拌しながら５０℃で加熱した。この混合物を 、アジ化物溶液を完全には蒸発させなかった点を除いては、上記と同様にして仕 上げを行い、溶液の残量が約３０１になった時点で、上記の１．３Ｍ　ＭｅＬｉ 溶液４５ｏ１（５８ミリモル）で処理を行った。３時間後反応が完了して黄色の 固体を得た。エーテル／石油エーテルによりこの固体を再結晶して、融点６４〜 ６℃の灰色の固体　１．２３ｇ（収率３２ｚ）を得た。質量スペクトル（ＦＡＢ ）では、計算値（Ｍ＋Ｈ）　１４５．１２０１．　’ＩＩ定値１４５．１２２０ ±０．００１５であった。

ム１ヨＬム」二仁立上」二去ｌ」Ｌとと２士Ｌ１２−（１６−Ｈｉｓ（ｍｅｔｈ ｙｌｔｒｉａｚｅｎｏ　ｈｅｘａｎｅ）フラスコに、ｌ、６−ジブロモヘキサン 　（１，６−ｄｉｂｒｏｍｏｈｅｘａｎｅ）　１０．０ｇ　（４１ミリモル）、 アジ化ナトリウム６．６６ｇ（１０２ミリモル）とＤＭＦ　ｌｏｏｍｌをとり、 混合物を１晩中アルゴン雰囲気下で撹拌しながら５０℃で加熱した。この混合物 を、無水エーテル４００１中で上記と同様にして調製した１、３１　ＭｅＬｉ溶 液７７ｉ１　（１００ミリモル）で仕上げ処理を行った。３時間後上記の反応が 完了して黄色の固体を得た。エーテル／石油エーテルによりこの固体を再結晶し て、融点５４〜５℃の白色の固体５．９６ｇ　（収率７３％）を得た。

逃」Ｌ豊１ １４−ビス　メチルトリアモノ）トランス−２−ブーン１４−Ｂｉｓ（ａ＋ｅｔ ｈｙｌｔｒｉａｚｅｎｏ）　ｔａｎｓ−２−ｂｕｔｅｎｅ）フラスコに、ｌ、４ −ジクロロ−トランス−２−ブテン　（１゜４−ｄｉｃｈｌｏｒｏ−ｔｒａｎｓ −２−ｂｕｔｅｎｅ）　１２．５ｇ　（１００ミリモル）、アジ化ナトリウム１ ４．３ｇ　（２２０ミリモル）とＤＭＦ　２００ｍ１をとり、混合物を１晩中ア ルゴン雰囲気下で撹拌し、無水エーテル４００１中で上記と同様にして調製した １、４Ｍ賛ｅＬｉ溶液１３０＋＋＋ｌ　（１８３ミリモル）で仕上げ処理を行っ た。

３時間後反応が完了して黄色の固体を得た。エーテル／石油エーテルによりこの 固体を再結晶して、融点７１〜４℃の淡黄色の固体３．３４ｇ　（収率２ｏｚ） を得た。質量スペクトル（ＦＡＢ）では、計算値（Ｍ＋Ｈ）　１７１．１３５８ 、測定値１７１゜フラスコに、ｌ、３−ジブロモプロパン　（１，３−ｄｉｂｒ ｏｍ。

ｐｒｏｐａｎｅ）　１０．０ｇ　（４９，５ミリモル）、アジ化ナトリウム７゜ ０８ｇ　（１０９ミリモル）とＤＭＦ　１００ｍ１をとり、混合物を１晩中アル ゴン雰囲気下で撹拌し、無水エーテル４００１中で上記と同様にして調製した１ 、４１　ＭｅＬｉ溶液８０ｍ１　（１１２ミリモル）で仕上げ処理を行った。３ 時間後上記の反応が完了して黄色の固体を得た。エーテル／石油エーテルにより この固体を再結晶して、融点５５〜７℃の白色の固体３．６１ｇ　（収率４６％ ）　ヲ得７’−＋　質量スペクトル（ＦＡＢ）テハ、計算値（Ｍ＋Ｈ）　１５９ ．１３５ｇ、測定値１５９．１３６０±０．００１６であった。

生物学的活性 下記のデータが示すように、本発明のビストリアゼン化合物は、各種の癌治療に 有用である。

クローン原生　各種のヒト腫瘍細胞系のビストリアゼン類に対する反応を、フィ ービヒらのクローン原生検定法（フィービヒら、（＋９８７）　ｒ欧州癌臨床腫 瘍字詰Ｊ　２３：９３７−９４８　（Ｆｉｅｂｉｇ　ｅｔ　ａｔ、、　（１９８ ７）　ＥｕｒｏｐｅａｎＪｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｃａｎｃｅｒ　ａｎｄ　Ｃｌ１ ｎｉｃａｌ　Ｏｎｃｏｌｏｇｙ　２３：９３７−９４８））によって測定した。

簡単に説明すると、検定系は改良型軟寒天培養系２暦からなり、下層はＬ−グル タミン（Ｌ−ｇｌｕｔａｍｉｎｅ）を入れた改良型ダルベツコ培地　１１を３５ ｍｍベトリ皿にいれたもので、これにウシ胎児血清１０％と寒天５ｚを含有させ た。

上層は寒天０．３ｚ、ウシ胎児血清３０％と培地からなり。

この１１容積に２〜５ｘ１０５個のヒト腫瘍細胞を懸濁させた。

試験薬剤はウシ胎児血清３０％を含有する培地１１中に入れて、上層に置く、コ ントロールプレートは、薬剤が除かれている以外は同一とする０種々の期間（７ 〜２１日）二酸化炭素７ｚを含有させた加湿大気下、３７℃でプレートをインキ ュベートした。コントロールプレートのコロニー形成率で培養の時間を決定する 。培養期間終了後、生存コロニーをテトラゾリウムクロリドで染色して眼で見え るようにしてから、薬剤で処理した培地上のコロニー数とコントロールプレート のコロニー数とを比較する。

相異なる３種のビストリアゼンを上記の検定法により測定した。末端基（Ｅｎｄ 　Ｇｒｏｕｐ：　ＥＧ）は、全て同一のメチル基であったが、　リンカ−は、次 のように異なるものとした。

ＥＧ−ＮＨ−Ｎ−Ｎ−リンカー−Ｎ館Ｎ−Ｎ１（−ＥＧリンカ− ｐ−キシルレノ（ｐ−ｘｙｌｅｌｅｎｏ）、　−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ４−ＣＨ２−ト ランス−２−ブテノ（ｔｒａｎｓ−２−ｂｕｔｅｎｏ）、　−ＣＨ２ＣＨｍＣＨ ＣＨ２エタノ（ｅｔｈａｎｏ）、　−ＣＨ２ＣＨ２−化合物各々は１図１〜４に 示す１群のヒト腫瘍細胞により評価を行った。これら細胞の由来は、結腸癌、肺 癌３種、乳癌、卵巣癌、腎臓癌２種、中皮腫、胃癌および肉腫であった。これら の腫瘍は、現在のところ適切な治療を行うことが出来ない最も直要な癌の１部と して選んだものである。これらビストリアゼンの検定結果は。

現在臨床上多用されているＤＴＩＣの同一の腫瘍に対する効果と比較した。

図１は、ビス（メチルトリアモノ）−ｐ−キシレンを用いて数種のヒト腫瘍細胞 系に対する試験管内クローン原生細胞毒性検定を行った際の用量−反応曲線であ る。この化合物は１００μｇ／ｍｌで全ての腫瘍細胞系に高い毒性があり、１０ ｐｇ／ｍｌでは対象細胞系の約半分に毒性を示し。

ｌμｇ／ｍｌにおいいてさえも、約半分の細胞系に若干の活性を示すことが明か に認められた。

図２のデータは、１，４〜ビス（メチルトリアモノ）−トランス−２−ブテンの 検定結果を示している。二の薬削は、１００μｇ／ｍ　ｌで対象腫瘍全てに強力 な細胞毒性を示し、ｌＯμｇ／ｍｌの場合においいても、特に大細胞肺癌ＬＸＦ Ｌ５２９および腎臓癌ＲＸＦ４２３／１７に対して活性を認めた。ｌμｇ／■ｌ でも肺癌に対して顕著な活性を示した。このように。

１．４−ビス（メチルトリアモノ）−トランス−２−ブテンは。

ある種の癌に非常に特異的な細胞毒性による強力な活性を持つ化合物である。

図３は、ビス（メチルトリアモノ）エタンのクローン原生検定結果である。この 化合物は、１００μｇ／ｍ　Ｉでほどんとの腫瘍細胞系に高い細胞毒性を示した が、しかしながら黒色腫、胃癌あるいは腎臓癌ＲＸＦ４２３／１７に対しては活 性が皆無であったか、皆無に近がった。１０ｐｇ／ｍｌでは、大細胞肺癌および 乳癌に対して、小さくはあるが。

顕著な活性を示した。

比較のために、同一の細胞系を用いてＤＴＩＣ（５−（３，３−メチルトリアモ ノ）イミダゾール−４−カーボキサマイド（５−（３、３−ｄ　１ｔｒｒｅ　ｔ ｈｙ　Ｉ　ｔｒ　１ａｚｅｎｏ　）　ｆｍ　ｆｄａｚｏ　Ｉｅ−４−ｃａｒｂｏ ｘａｍ　ｊｄｅ）　）の試験を行ったが、その結果をＦＩ１４に示す、現在のと ころ臨床的には、ＤＴＩＣは転移性の黒色層、非ホジキンスリンパ腫、および軟 部肉層に用いられている。どの癌についても、ＤＴＩＣの用量はビストリアゼン の雄であって、従って３００μｇ／ａ　ｌでは全ての細胞系に対して強力な細胞 毒性を示し、３０ｐｇ／■１で胃癌ＧＸＦ２５１／１６および卵巣癌０ＶＸＦ８ ９９／９に対して活性を示し、さらには３μｇ／ｍｌでは胃癌に対して僅かな活 性があった。

従って、この検定の対象となったビストリアゼンの効果は全て少なくともＤＴＩ Ｃと同等であり、１．４−ビス（メチルトリアモノ）−トランス−２−ブテンは 数種の腫瘍、特に大細胞肺癌に対して極めて強力である。

これらのデータから、ビストリアゼン類は、ある種の腫瘍に対してかなりの選択 性を有する細胞毒性剤であると結論づけることが出来る。さらに、リンカ−の特 性がこれら化合物の活性や、細胞毒性作用の選択性を調節するために極めて重要 であることも、このデータから読み取ることが出来る。クローン原生検定システ ムによって、末端基やリンカ−を系統的に変化させて合成した新ビストリアゼン 類の抗腫瘍作用を速やかに試験し、その化学、生物特性を測定して、有用な新薬 剤であることを立証することが出来た。

化学作用 オリゴヌクレオチドの架橋　トリアゼンがリンカ−の鎖の各末端で分解し、アル キルジアゾニウムイオンが生成されると、ビストリアゼン類が反応して鎖間に架 橋が形成される。

ビストリアゼン類の反応効率は、オリゴヌクレオチドの種類によって異なる。ｐ −キシリルやトランス−ブテニル等の不飽和ビストリアゼン類は、オリゴヌクレ オチド類に安定した架橋を生成する。架橋の量は、オリゴヌクレオチド配列によ って異なる。架橋の高さは。

ナイトロジェンマスタード（ｎｉｔｒｏｇｅｎ　ａ＋ｕｓｔａｒｄ、ＮＭＵＳＴ ）による架橋に匹敵し、１−（２−クロロエチル）−３−シフａへキシル−１− ＝トロソウレア　（１−（２−ｃｈｌｏｒｏｅｔｈｙｌ）−３−ｃｙｃｌｏｈｅ ｘｙｌ−１−ｎｉｔｒｏｓｏｕｒｅａ、ＣＣＮＵ）のそれよりも高い。

ビストリアゼン類によるオリゴヌクレオチドの架橋を下記の検定系によって証明 することが出来た。

３２ｐ−オリゴヌクレオチド６．２ｎｇを０．１Ｍカコジル酸緩衝液（０，ＩＭ 　ＮａＣ１，ｐＨ７，４）ニ溶かＬ４溶液ヲ、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ ）にｌ／１０容積の比率で溶解した所望の化合物と反応さ、せた、オリゴヌクレ オチド溶液中の各化合物の最終濃度は、ＮＭＵＳＴ　０．１ｍＭ、　ＣＣＮＵ　 １．Ｏａ＋Ｍ、またはビストリアゼン　１０ｍＭであった０反応生成物を３７℃ で４２時間インキュベートし、先ず変性ポリアクリルアミドゲル電気泳動（ゲル ２０χ）で、続いてオートラジオグラフィによって分析した。ゲル分析は意図的 に過度に露出して鎖間の架橋に対応するバンドが容易に観察できるようにしたが 、こうする二とにより大量の未反応オリゴヌクレオチドも観察することが出来た 。

＠５で示しているように、ナイトロジェンマスタードとビストリアゼンのｐ−キ シリル誘導体による試験結果では、既知の架橋剖であるナイトロジエンマスター ドによっても、本発明のｐ−キシリルビストリアゼンによっても、どちらの場合 も、オリゴヌクレオチドは安定した共有結合による架橋を形成していた０図５は さらに、臨床に用いられているＤＮＡ頗間架間架橋剤るＣＣＮＵは、架橋形成の 点では、ｐ−キシリルビストリアゼンはど効果がなかったことを示している。

対象化合物は全て広範囲に亘ってＤＭＡ鎖を切断したが。

この切断による不安定な付加物は認められなかった。

ブラズミドＤＮＡ　の切断　ＤＭＡ鎖は、不安定なアルカリ化部位を加水分解す ることによって切断することが出ＤＮＡ鎖上で互いに近接している２箇所の不安 定なアルカリ化部位を加水分解することにより、切断されて直線型ブラズミドＤ ＮＡを生成する。二のようにアルキル化されると、鎖間架橋が形成されるか、あ るいは離れてはいるが接近した部位でモノアルキル化が起こる。

ジアルキルトリアゼン類の頭切断効果は、アルキルスルフェート類やスルホネー ト票よりも強いが、ビストリアゼン類は、ジアルキルトリアゼン類の１０〜２０ ０倍の頭切断効果を有する。ビストリアゼン類は、相当な量の直線型ＤＮＡを生 成するが、単純ジアルキルトリアゼン類は、小量の直線型ＤＮＡｔ、か生成しな いし、またアルキルスルホネート類ではプラズミドＤＮＡと反応させても微量が 認められるに過ぎない、ビストリアゼン修飾ＤＮＡによって制限エンドヌクレア ーゼを処理した結果では、直線性とプラズミドの配列との間には高い特異性がな いことが示唆されている。

ｐＢＲ３２２ＤＮＡ　０．１５μｇをＴＥ緩衝液（Ｔｒｉｓ、　Ｏ，Ｉｓ＋Ｍ　 ｘチレンジアミン四酢駿（ＥＤ丁Ａ、ｐＨ７，４））　９．５μＩ　（１０ｍＭ ）に室温下で溶解し、この溶液中で超らせんブラズミド鎖切断の検定を行った。

　ＤＭＳＯにより化合物のアリコートを造り、その０．５μｍを添加し、溶液を 軽く撹拌した後、サンプルを３７℃で４８時間インキュベートした。各サンプル に、ローディング緩衝液（２μ１．ＴＡＥ緩衝液中にグリセロール４０％、ブロ ムフェノールブルー１％）に添加した後、アリコート３μ′Ｉをアガロースゲル 電気泳動（ゲル０．９Ｘ、エチジウムブロマイド１．５μｇ／ｒａｔゲル）によ り分析を行い、蛍光により眼で見えるようにした。

上記の結果を図６に示す、対象となったビストリアゼン類によりジメチルトリア ゼン等の単純ジアルキルトリアゼン類よりも高度のＤＮＡ修飾を行うことが出来 、またはるかに多量の直線型ＤＮＡを生成した。また、ＤＮＡＩＩ反対側の互い に近接した部位が不安定にアルキル化されていた。このようなアルキル化の場合 には、鎖間に不安定な架橋が形成されるか、あるいは反対側の離れてはいるが互 いに接近する位置でアルキル化が起こる。

このことは、単なるアルキルジアゾニウムイオンの加水分解ではなく寧ろ、活性 を持つアルキル化削の形成前に、ビストリアゼンがＤＮＡと相互作用することを 示または点滴等の局所投与があげられる。前記の非経口唆している。

製剖の調製 本発明のビストリアゼン化合物または生理的に許容し得るその塩・は、この化合 物の抗癌有効量および製薬的に許容し得る担体を含有する製薬組成物に処方する ことが出来る。二の製薬組成物は、癌細胞の成長や自己複製を阻止する方法によ り抗癌有効量をヒト、動物あるいは噌乳動物等の生体に投与する。この化合物と 製薬的に許容し得る特定の担体の用量は、宿主と宿主の状態、投与方法および治 療しようとする癌の種類によって異なる。

具体的に言うと、製薬組成物は抗癌剤としてのビストリアゼンの「有効単位投与 量を含有する製１１Ｊｊである０本明細書で言うｒ有効単位投与量１とは、生体 内（ｉｎ　ｖｉｖｏ）で癌に対して十分有効であると予め定める抗癌量を意味す る。製薬的に許容し得る担体は、好ましくは毒性がな東　また液体材料でもよく 、それ自体では活性がなく、医学的に許容し得るものであり、且つ主成分と混和 性を持つ、医薬を投与する目的に有用な材料を言う、製薬組成物には、抗＊ｌ！ ｑのような他の主成分や、保存剤のような薬剤を含有させることが出来る。

製薬組成物の荊形としては、溶液、乳液、懸濁液。

軟膏あるいはクリームがある。投与経路としては、非経口投与、経口投与、ある いはエアーゾル、　スプレー鉾ゴｌ−句ス、ア錫口給五１、ｆ−ＩＩ　島ふいは ビストリアゼ投与経路では、用途が体内癌であるか１体外癌であるかによって、 腹腔内投与、筋肉内投与、皮下投与、静脈内投与、関節内投与、動脈内投与また は経皮投与がある。

ンを安定剤および／または分散副と共に混和性がある乳液に分散させて経口投与 してもよい。

局所投与用としてビストリアゼンの油薊、あるいはクリーム剤を作り、基底細胞 癌や偏平上皮細胞癌また５５’　ＣＧＡＴＣＡＴＡＴＧＧＡＴＡＴＣＡＴＧＣＡ ＴＧＡＧＣＴ　３’　２７１Ｆ３’　ＴＡＧＴＡＴＡＣＣＴＡＴＡＧＴＡＣＧＴ ＡＣ５’　２１　ｍｐｌ　２３　４　５　６　７８　９１０１１１２１３１４１ ５１８レーン　牝合青　渫度 要約書 この発明は、ビストリアゼン化合物、この化合物の抗癌有効量を含有する薬荊組 成物、この化合物の抗癌有効量を生体に投与することにより癌を治療する方法。

さらには重合高分子を合成したり取り扱う際にビストリアゼン化合物を架橋荊と して使用する方法に関するものである。

補正書の翻訳文提出書 （特許法第１８４条の８） 平成４年１１月２４日（２）

Claims (18)

【特許請求の範囲】
1. １．次の一般式で表される化合物及び生理的に許容され得るその塩において、 ▲数式、化学式、表等があります▼ リンカーが鎖長１〜２０個のアルキル基、置換アルキル基（アルキルアミン類、 アルキルエーテル類およびチオエーテル類、ハロアルキル基、シラン類、ホスフ ィン類、アルコール類、アミン類等を含む、但しこれらのみに限定されない）、 アラルキル基またば置換アラルキル基（置換アルキル類の場合と同様の変更を含 む）、多環式アラルキル、複素環式アラルキル基およびその置換誘導体からなる 群より選ばれるものであって、トリアジン部分が１〜３０個の炭素原子によって 分離されており、 ＥＧが同一であるか、あるいは鎖長１〜２０個のアルキル基、置換アルキル（ア ルキルアミン類、アルキルエーテル類およびチオエーテル類、ハロアルキル基、 シラン類、ホスフィン類、アルコール類、アミン類を含む、但しこれらのみに限 定されない）、２〜４０個の非水素原子からなり、かつ１〜６個のリングを持つ アラルキル基または置換アラルキル基（置換アルキル類の場合と同様の変更を含 む）、多環式アラルキル、アリール基および複素環基からなる群より個別に選ば れるものであり、かつ、 ＲまたはＲ′がＥＧと同一であるか、または、水素および鎖長１〜２０個のアル キル基、置換アルキル基（アルキルアミン類、アルキルエーテル類およびチオエ ーテル類、ハロアルキル、シラン類、ホスフィン類、アルコール類、アミン類を 含む、但しこれらのみに限定されない）、または、２〜４０個の非水素原子から なり、かつ１〜６個のリングを含有するアラルキル基または置換アラルキル基（ 置換アルキル類の場合と同様の変更を含む）、多環式アラルキル基、アリール基 、および複素環基からなる群より個別または互いに同一に選ばれるものである、 化合物および生理的に許容し得るその塩。
2. ２．ビス（メヂルトリアゼノ）−ｐ−キシレン、ビス（メチルトリアゼノ）−２ −プテン、またはビス（メチルトリアゼノ）エタンからなる群より選ばれる請求 項１に記載の化合物。
3. ３．ビストリアゼン化合物の抗癌有効量と薬剤的に許容し得る担体とを含有する 薬剤組成物。
4. ４．上記ビストリアゼン化合物がビス（メチルトリアゼノ）−Ｐ−キシレン、ビ ス（メチルトリアゼノ）−２−ブタンまたはビス（メチルトリアゼノ）エタンで ある請求項３に記載の薬剤組成物。
5. ５．ビストリアゼン化合物の抗癌有効量と、ビス（２ークロロエチル）ニトロソ ウレア、マイトマイシン、シクロホスフアミド、イホスフアミド、または化学療 法に用いられる従来からのアルキル化剤からなる群より選ばれる化合物の抗癌有 効量とを含有する請求項３に記載の薬剤組成物。
6. ６．上記ビストリアゼン化合物がビス（メチルトリアゼノ）−ｐ−キシレン、ビ ス（メチルトリアゼノ）−２−プテン、またはビス（メチルトリアゼノ）エタン である請求項５に記載の薬剤組成物。
7. ７．請求項１のビストリアゼン化合物または生理的に許容し得るその塩の抗癌有 効量を哺乳動物に投与することにより哺乳動物の癌を治療する方法。
8. ８．上記ビストリアゼン化合物がビス（メチルトリアゼノ）−ｐ−キシレン、ビ ス（メチルトリアゼノ）−２−プテン、またはビス（メチルトリアゼノ）エタン である請求項７に記載の方法。
9. ９．上記ビストリアゼン化合物の投与剤形が溶液、乳液、懸濁液、軟膏またはク リームである請求項７に記載の方法。
10. １０．上記ビストリアゼン化合物の投与経路が非経口投与、経口投与、エアーゾ ル、スプレー、または点滴などの局所投与であり、該非経口投与が腹腔内投与、 筋肉内投与、皮下投与、静脈内投与、動脈内投与、関節内投与、または経皮投与 である請求項７に記載の方法。
11. １１．上記ビストリアゼン化合物を油または薬剤的に許容し得る他の担体に溶解 した非経口剤を、１日当り体重１キロにつき約０．１ｍｇないし約１０００ｍｇ を投与する請求項１０に記載の方法。
12. １２．上記ビストリアゼン化合物を薬剤的に許容し得る担体に溶解した腹腔内注 射剤を、１日当り体重１キロにつき約１ｍｇないし約５００ｍｇを投与する請求 項１０に記載の方法。
13. １３．上記のビストリアゼン化合物を油または混和性を持つ他のビヒクルに溶解 した筋肉内注射剤を、１日当り体重１キロにつき約０．１ｍｇないし約１０００ ｍｇを投与する請求項１０に記載の方法。
14. １４．上記ビストリアゼン化合物をリボゾームまたは徐放剤に包んで、あるいは 安定剤および／または分散剤と共に混和性を有する乳液に分散させて、経口投与 する請求項１０に記載の方法。
15. １５．上記ビストリアゼン化合物を油またはクリームにより製剤化して、局所投 与する請求項１０に記載の方法。
16. １６．上記のビストリアゼン化合物を、５日を１コースとして、１日当り１回な いし数回投与する請求項１１、１２、１３、１４または１５に記載の方法。
17. １７．ビストリアゼン化合物でＤＮＡまたは蛋白を処理することからなるＤＮＡ または蛋白の切断または消化を阻止する方法。
18. １８．ビストリアゼン化合物でモノマー成分を処理することにより化学ポリマー を製造する方法。