JPH049765A - キャピラリー電気泳動装置の試料注入装置 - Google Patents
キャピラリー電気泳動装置の試料注入装置Info
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- JPH049765A JPH049765A JP2113160A JP11316090A JPH049765A JP H049765 A JPH049765 A JP H049765A JP 2113160 A JP2113160 A JP 2113160A JP 11316090 A JP11316090 A JP 11316090A JP H049765 A JPH049765 A JP H049765A
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
（産業上の利用分野）
本発明はアミノ酸、タンパク質、核酸など電荷をもつ物
質を分離分析するキャピラリー電気泳動装置において、
キャピラリーに試料を注入する試料注入装置に関するも
のである。
質を分離分析するキャピラリー電気泳動装置において、
キャピラリーに試料を注入する試料注入装置に関するも
のである。
（従来の技術）
キャピラリー電気泳動装置は高性能な電気泳動装置であ
り、高分離性能と高速定量という特色に加えて、試料消
費量が極微量ですむといった利点を有している。
り、高分離性能と高速定量という特色に加えて、試料消
費量が極微量ですむといった利点を有している。
試料注入方法としては、電気泳動式の他に、サイフオン
式や圧力式がよく利用されている。
式や圧力式がよく利用されている。
（発明が解決しようとする課題）
キャピラリーへの試料注入はオートサンプラーを用いて
インジェクタで自動的に注入されているが、試料注入に
際しては変数として注入時間の他にサイフオン式では昇
降高さなどもあり、定量分析のためには試料注入量の目
安を別に求める必要があり、操作が面倒である。具体的
には、特定の時間間隔で注入操作をしたときに、染料か
気泡の移動距離を顕微鏡で観察して注入体積の測定を行
なっている。しかし、キャピラリーを電気泳動装置に装
填したままで体積をＩ！察するのは現実的に困難である
うえ、この煩雑な測定操作を粘性の異なる試料や、泳動
バッファ、内径及び製造ロットの異なるキャピラリー毎
にし直す必要がある。このようなことから、キャピラリ
ー電気泳動装置では、依然として分析条件として注入量
の代わりに注入方法と注入時間を明示することが多く、
客観性のある表現とは言えなかった。
インジェクタで自動的に注入されているが、試料注入に
際しては変数として注入時間の他にサイフオン式では昇
降高さなどもあり、定量分析のためには試料注入量の目
安を別に求める必要があり、操作が面倒である。具体的
には、特定の時間間隔で注入操作をしたときに、染料か
気泡の移動距離を顕微鏡で観察して注入体積の測定を行
なっている。しかし、キャピラリーを電気泳動装置に装
填したままで体積をＩ！察するのは現実的に困難である
うえ、この煩雑な測定操作を粘性の異なる試料や、泳動
バッファ、内径及び製造ロットの異なるキャピラリー毎
にし直す必要がある。このようなことから、キャピラリ
ー電気泳動装置では、依然として分析条件として注入量
の代わりに注入方法と注入時間を明示することが多く、
客観性のある表現とは言えなかった。
本発明はキャピラリー電気泳動装置において、試料注入
量を設定すれば自動的にその設定量の試料を注入するこ
とのできる試料注入装置を提供することを目的とするも
のである。
量を設定すれば自動的にその設定量の試料を注入するこ
とのできる試料注入装置を提供することを目的とするも
のである。
（課題を解決するための手段）
第１図により本発明を説明する。
２はキャピラリー４に試料を注入するオートサンプラー
、６はキャピラリー４中を泳動又は移動してきた試料成
分やマーカを検出する検出部である。８は試料注入と同
じ条件でキャピラリー４にマーカを注入しキャピラリー
４中を検出部６まで移動させたときのその移動に要する
時間ｔｍの測定値、試料注入端から検出器までのキャピ
ラリー４の寸法設定値、例えば長さと内径の設定値から
単位時間当りの注入量を算出する較正部、１０は設定さ
れた注入量と較正部８の算出結果とから注入時間を決定
し、オートサンプラー２による試料注入時間を制御する
注入制御部である。
、６はキャピラリー４中を泳動又は移動してきた試料成
分やマーカを検出する検出部である。８は試料注入と同
じ条件でキャピラリー４にマーカを注入しキャピラリー
４中を検出部６まで移動させたときのその移動に要する
時間ｔｍの測定値、試料注入端から検出器までのキャピ
ラリー４の寸法設定値、例えば長さと内径の設定値から
単位時間当りの注入量を算出する較正部、１０は設定さ
れた注入量と較正部８の算出結果とから注入時間を決定
し、オートサンプラー２による試料注入時間を制御する
注入制御部である。
（作用）
圧力式やサイフオン式でキャピラリー４にマーカを注入
すれば、マーカがキャピラリ−４内部を流体力学的流れ
となって移動する。注入動作を継続させることにより、
キャピラリー４内の泳動バッファをマーカで置換するか
、マーカゾーンを泳動バッファで押し流せば、検出部６
の信号からマーカがキャピラリー注入端から検出部６ま
で（有効長さ）移動するための所要時間ｔｍを求めるこ
とができる。キャピラリー４の内部体積は（有効長さ×
断面積）であるが、これは既知であるので較正部８に予
め設定しておくことができる。較正部８ではある注入方
法を用いたときの単位時間当りの注入体積が算出される
。注入制御部１０で任意の注入量が設定されると、較正
部８では算出された単位時間当りの注入体積を元にして
その注入量に必要な注入時間が決定され、オートサンプ
ラー２によりその時間だけキャピラリー４に試料が注入
される。
すれば、マーカがキャピラリ−４内部を流体力学的流れ
となって移動する。注入動作を継続させることにより、
キャピラリー４内の泳動バッファをマーカで置換するか
、マーカゾーンを泳動バッファで押し流せば、検出部６
の信号からマーカがキャピラリー注入端から検出部６ま
で（有効長さ）移動するための所要時間ｔｍを求めるこ
とができる。キャピラリー４の内部体積は（有効長さ×
断面積）であるが、これは既知であるので較正部８に予
め設定しておくことができる。較正部８ではある注入方
法を用いたときの単位時間当りの注入体積が算出される
。注入制御部１０で任意の注入量が設定されると、較正
部８では算出された単位時間当りの注入体積を元にして
その注入量に必要な注入時間が決定され、オートサンプ
ラー２によりその時間だけキャピラリー４に試料が注入
される。
（実施例）
第２図は一実施例の概略図である。
キャピラリー電気泳動装置はキャピラリー４、キャピラ
リー４の一部を保持する検出部６、泳動バッファを収容
し、試料が注入されたキャピラリー４の試料注入端が挿
入されるリザーノ＜１６、キャピラリー４の他端が挿入
され、泳動Ａソファを収容している他方のりザーバ１８
、試料注入側のりザーバ１６に泳動電圧を印加する高圧
電源部１２、キャピラリー４に試料を注入するオートサ
ンプラー２などを備えている。他方のリザーノ＜１８は
例えばグランド電位に保たれる。オートサンプラー２は
インジェクタ１４しこよりキャピラリー４に試料を自動
的に注入したり、注入量を較正するためのマーカを注入
したり、マーカや泳動／＜ソファの入っている容器間で
キャピラリー４を移動させたり、測定試料の入ってしす
る試料容器力翫ら１ノザーバ１６へキャピラリー４を移
動させる。インジェクタ２は注入側キャピラリ一端を試
料容器に入れ、試料容器ごと検出側のキャピラリ一端よ
り規定の高さだ（づ持ち上げ、規定時間静止させて試料
注入を行なうサイフオン式か、密閉状態の試料容器を窒
素ガスなどで加圧する圧力式であるが、実施例としては
圧力式のインジェクタであるとして説明する。
リー４の一部を保持する検出部６、泳動バッファを収容
し、試料が注入されたキャピラリー４の試料注入端が挿
入されるリザーノ＜１６、キャピラリー４の他端が挿入
され、泳動Ａソファを収容している他方のりザーバ１８
、試料注入側のりザーバ１６に泳動電圧を印加する高圧
電源部１２、キャピラリー４に試料を注入するオートサ
ンプラー２などを備えている。他方のリザーノ＜１８は
例えばグランド電位に保たれる。オートサンプラー２は
インジェクタ１４しこよりキャピラリー４に試料を自動
的に注入したり、注入量を較正するためのマーカを注入
したり、マーカや泳動／＜ソファの入っている容器間で
キャピラリー４を移動させたり、測定試料の入ってしす
る試料容器力翫ら１ノザーバ１６へキャピラリー４を移
動させる。インジェクタ２は注入側キャピラリ一端を試
料容器に入れ、試料容器ごと検出側のキャピラリ一端よ
り規定の高さだ（づ持ち上げ、規定時間静止させて試料
注入を行なうサイフオン式か、密閉状態の試料容器を窒
素ガスなどで加圧する圧力式であるが、実施例としては
圧力式のインジェクタであるとして説明する。
キャピラリー電気泳動装置は温度を一定に保つために恒
温槽に入れられて温度制御されている。
温槽に入れられて温度制御されている。
−点鎖線は温度制御される範囲を表わしている。
２０は検出部６からの検出信号を入力し、波形処理を行
なってピーク位置検出を行ない、マーカが検出部６に到
達するまでの時間ｔｍや、分析にあたっては分離された
各成分が検出部６に到達するまでの保持時間を検出する
データ処理部である。
なってピーク位置検出を行ない、マーカが検出部６に到
達するまでの時間ｔｍや、分析にあたっては分離された
各成分が検出部６に到達するまでの保持時間を検出する
データ処理部である。
２２はデータ処理部２０からの信号を入力し、キャピラ
リー４への試料注入動作を制御したり１分析動作を制御
したり、データ処理を行なったりするコントローラであ
り、例えばマイクロコンピュータである。第１図におけ
る較正部８と注入制御部１ｏはデータ処理部２０とコン
トローラ２２により実現される。
リー４への試料注入動作を制御したり１分析動作を制御
したり、データ処理を行なったりするコントローラであ
り、例えばマイクロコンピュータである。第１図におけ
る較正部８と注入制御部１ｏはデータ処理部２０とコン
トローラ２２により実現される。
第３図は検出部６の一例を表わしている。
キャピラリー４の一方の側から測定光２４が照射され、
他方の側にはスリット２６を介してフォトセル２８が配
置され、キャピラリー４の透過光がフォトセル２８で検
出される。
他方の側にはスリット２６を介してフォトセル２８が配
置され、キャピラリー４の透過光がフォトセル２８で検
出される。
第４図、第５図及び第６図により本実施例の動作を説明
する。
する。
第５図は較正の手順を表わしている。
コントローラ２２にはキャピラリー４の有効長さと内径
を入力しておく。
を入力しておく。
第４図（Ａ）のようにマーカ３２の入った試料容器３０
にキャピラリー４の注入端を入れ、密閉されたその試料
容器３ｏに一定圧の窒素ガスを一定時間供給して加圧し
、マーカをキャピラリー４に注入する。マーカは検出部
６に応答し、キャピラリー４への吸着などが起こらない
ものであれば何でもよい。例えば、メタノール、アセト
ンなどを利用することができる。粘度が試料と同程度の
マーカを用いると、さらに正確な注入量を再現すること
かできる。次いで、第４図（Ｂ）に示されるように、マ
ーカが注入されたキャピラリ一端を泳動バッファ３６の
入った容器３４に移し、注入時と同一圧力で加圧し、マ
ーカを押し流す。３２ａはキャピラリー４を移動中のマ
ーカゾーンである。マーカゾーン３２ａがキャピラリー
４を移動し、やがて検出部６により検出される。検出部
６の検出信号からマーカが注入端から検出部６までの有
効長さを移動するに要する時間ｔｍがデータ処理部２０
で解析され、コントローラ２２に取り込まれる。コン１
〜ローラ２２にはキャピラリー４の有効長さと内径が入
力されているので、時間ｔｍだけ注入したときの注入量
がわかり、それから単位時間（単位は例えば秒）当りの
注入量（単位は例えばｒ＋Ｑ）が算出される。
にキャピラリー４の注入端を入れ、密閉されたその試料
容器３ｏに一定圧の窒素ガスを一定時間供給して加圧し
、マーカをキャピラリー４に注入する。マーカは検出部
６に応答し、キャピラリー４への吸着などが起こらない
ものであれば何でもよい。例えば、メタノール、アセト
ンなどを利用することができる。粘度が試料と同程度の
マーカを用いると、さらに正確な注入量を再現すること
かできる。次いで、第４図（Ｂ）に示されるように、マ
ーカが注入されたキャピラリ一端を泳動バッファ３６の
入った容器３４に移し、注入時と同一圧力で加圧し、マ
ーカを押し流す。３２ａはキャピラリー４を移動中のマ
ーカゾーンである。マーカゾーン３２ａがキャピラリー
４を移動し、やがて検出部６により検出される。検出部
６の検出信号からマーカが注入端から検出部６までの有
効長さを移動するに要する時間ｔｍがデータ処理部２０
で解析され、コントローラ２２に取り込まれる。コン１
〜ローラ２２にはキャピラリー４の有効長さと内径が入
力されているので、時間ｔｍだけ注入したときの注入量
がわかり、それから単位時間（単位は例えば秒）当りの
注入量（単位は例えばｒ＋Ｑ）が算出される。
第６図はキャピラリー４に試料を注入するときの手順を
表わしている。
表わしている。
ユーザが任意の注入量をコントローラ２２に設定すれば
、コントローラ２２では上記の較正処理で求めた単位時
間当りの注入体積から注入時間が算出される。注入量が
多すぎると分析に悪影響を与える（サンプルオーバーロ
ーディング）ため、コントローラ２２では注入量が適当
であるか否かが判定され、もし、注入量が適当でなけれ
ば注入量を再設定するようにメツセージが表示される。
、コントローラ２２では上記の較正処理で求めた単位時
間当りの注入体積から注入時間が算出される。注入量が
多すぎると分析に悪影響を与える（サンプルオーバーロ
ーディング）ため、コントローラ２２では注入量が適当
であるか否かが判定され、もし、注入量が適当でなけれ
ば注入量を再設定するようにメツセージが表示される。
注入量が適当であれば、オートサンプラ２によってキャ
ピラリー４の注入端が測定試料の試料容器に挿入・され
、決定された注入時間だけ試料注入が実行される。
ピラリー４の注入端が測定試料の試料容器に挿入・され
、決定された注入時間だけ試料注入が実行される。
試料注入後、キャピラリ一端はオートサンプラ２によっ
て第４図（Ｃ）のようにリザーバ１６に移された後、コ
ントローラ２２の指示により泳動電圧が印加されて分析
が開始される。
て第４図（Ｃ）のようにリザーバ１６に移された後、コ
ントローラ２２の指示により泳動電圧が印加されて分析
が開始される。
上記の一連の較正動作及び試料注入、分析動作はオート
サンプラ２により全自動で行なわれる。
サンプラ２により全自動で行なわれる。
（発明の効果）
本発明の試料注入装置を用いると、任意の長さや内径を
もつキャピラリーを用い、任意の粘度の試料を分析する
際に、任意の温度及び注入方法（サイフオン式又は圧力
式）において、注入時間に対する注入絶対量が較正され
、設定した任意の注入量だけの試料が注入されるように
なる。これにより、定量分析において常に必要量だけが
注入され、操作性が高くなる。
もつキャピラリーを用い、任意の粘度の試料を分析する
際に、任意の温度及び注入方法（サイフオン式又は圧力
式）において、注入時間に対する注入絶対量が較正され
、設定した任意の注入量だけの試料が注入されるように
なる。これにより、定量分析において常に必要量だけが
注入され、操作性が高くなる。
また、単位時間当りの試料注入量が自動的に較正される
ことによって、キャピラリーごとに、また、試料ごとに
正確な注入が容易に実現される。
ことによって、キャピラリーごとに、また、試料ごとに
正確な注入が容易に実現される。
第１図は本発明を示すブロック図、第２図は本発明が適
用されるキャピラリー電気泳動装置の一例を示す概略図
、第３図は第２図における検出部の具体例を示す構成図
、第４図は一実施例におけるオートサンプラの動作を示
す断面図、第５図は一実施例による較正手順を示すフロ
ーチャート図、第６図は一実施例による試料注入手順を
示すフローチャート図である。 ２・・・・・・オートサンプラー、４・・・・・・キャ
ピラリー６・・・・・・検出部、８・・・・・・較正部
、１０・・・・・注入制御部、１４・・・・・・インジ
ェクタ、２０・・・・・・データ処理部、２２・・・・
・・コントローラ。 特許出願人 株式会社島津製作所 第２図 第５図 第３図 第４図 （Ａ） 第６図
用されるキャピラリー電気泳動装置の一例を示す概略図
、第３図は第２図における検出部の具体例を示す構成図
、第４図は一実施例におけるオートサンプラの動作を示
す断面図、第５図は一実施例による較正手順を示すフロ
ーチャート図、第６図は一実施例による試料注入手順を
示すフローチャート図である。 ２・・・・・・オートサンプラー、４・・・・・・キャ
ピラリー６・・・・・・検出部、８・・・・・・較正部
、１０・・・・・注入制御部、１４・・・・・・インジ
ェクタ、２０・・・・・・データ処理部、２２・・・・
・・コントローラ。 特許出願人 株式会社島津製作所 第２図 第５図 第３図 第４図 （Ａ） 第６図
Claims (1)
- （１）試料注入と同じ条件でキャピラリーにマーカを注
入しキャピラリー中を検出器まで移動させたときのその
移動に要する時間の測定値、試料注入端から検出部まで
のキャピラリー寸法設定値から単位時間当りの注入量を
算出する較正部と、設定された注入量と前記較正部の算
出結果とから注入時間を決定し、オートサンプラーによ
る試料注入時間を制御する注入制御部とを備えたキャピ
ラリー電気泳動装置の試料注入装置。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2113160A JPH0711507B2 (ja) | 1990-04-27 | 1990-04-27 | キャピラリー電気泳動装置の試料注入装置 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2113160A JPH0711507B2 (ja) | 1990-04-27 | 1990-04-27 | キャピラリー電気泳動装置の試料注入装置 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH049765A true JPH049765A (ja) | 1992-01-14 |
| JPH0711507B2 JPH0711507B2 (ja) | 1995-02-08 |
Family
ID=14605075
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2113160A Expired - Lifetime JPH0711507B2 (ja) | 1990-04-27 | 1990-04-27 | キャピラリー電気泳動装置の試料注入装置 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH0711507B2 (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2006343271A (ja) * | 2005-06-10 | 2006-12-21 | Shimadzu Corp | オートサンプラ |
| JP2021166982A (ja) * | 2020-04-13 | 2021-10-21 | 株式会社日立ハイテク | 液滴搬送デバイス、分析システム及び分析方法 |
-
1990
- 1990-04-27 JP JP2113160A patent/JPH0711507B2/ja not_active Expired - Lifetime
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2006343271A (ja) * | 2005-06-10 | 2006-12-21 | Shimadzu Corp | オートサンプラ |
| JP4720305B2 (ja) * | 2005-06-10 | 2011-07-13 | 株式会社島津製作所 | オートサンプラ |
| JP2021166982A (ja) * | 2020-04-13 | 2021-10-21 | 株式会社日立ハイテク | 液滴搬送デバイス、分析システム及び分析方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0711507B2 (ja) | 1995-02-08 |
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