JPH04299972A - 細胞融合チャンバ - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、電気刺激により異種の
細胞を融合させるチャンバに関する。

【０００２】

【従来技術】従来より行われている電気刺激による細胞
融合は、一対の対向電極を収容したチャンバに異種の細
胞（Ａ細胞とＢ細胞とする）をマニプレ−タなどで入れ
、まず交流電界をかけてＡ，Ｂ細胞をペアリングさせた
後、直流電圧を印加することにより、Ａ，Ｂ細胞を融合
させるものである。

【０００３】この場合、チャンバに入れるＡ，Ｂ細胞は
混在した状態になっているため、電界をかけたときＡと
Ａ，ＢとＢのように同種細胞がペアリングを起こす確率
は５０％存在していた。

【０００４】

【発明が解決しようとする課題】同種細胞のペアリング
が５０％の確率で起こったとしても、処理細胞数が非常
に多いときは、そんなに問題とはならないが、処理細胞
数が非常に少ない、例えば卵と精子の融合などでは、目
的物が所定数得られず、問題となった。

【０００５】そのため、かかる問題を解決するため、機
械的に（手動で）異種細胞をペアリングさせた後、直流
電圧を印加して細胞を融合させる方法も考えられている
が、この方法だと、個別に細胞を融合しなければならず
、大量処理ができなかった。そこで、本発明は、同種細
胞同士のペアリングを阻止して、しかも大量処理が可能
な細胞融合装置を提供することを目的とする。

【０００６】

【課題を解決するための手段】本発明は、上記課題を解
決するため、一対の対向電極を備えてなる細胞融合チャ
ンバにおいて、電極間に電極と平行に磁性シャッタ−を
設けてなることを特徴とする。

【０００７】ここで、使用する磁性シャッタ−は、例え
ば螺旋状の走磁性細菌を使用することができる。走磁性
細菌は、菌体内にマグネタイトの磁気微粒子を合成する
もので、深さ数十メ−トルから数メ−トルの海や池・沼
の泥の表層に存在していることが知られており、この泥
の表層から細菌は、磁石により集められる。

【０００８】本発明で使用する走磁性細菌は、例えば、
Ａｑｕａｓｐｉｒｉｌｌｕｍ　ｍａｇｎｅｔｏｔａｃｔ
ｉｃｕｍ　ＭＳ−１を挙げることができ、使用するとき
は、予め洗浄しておく。

【０００９】また、走磁性細菌を洗浄してそのまま使用
するのではなく、細菌の菌体をリゾチ−ム処理で細胞壁
を溶かし、分離した磁性細菌粒子を用いても良い。

【００１０】なお、本発明で使用する磁性シャッタ−は
、上記のものに限らず、細胞融合時に細胞に悪影響を与
えないものないならば何でも良い。

【００１１】磁性シャッタ−の高さは、特に限定されな
いが、電極の高さよりも短いものが好ましい。また磁性
シャッタ−の幅は、特に限定されず、移動容易な幅なら
ばいくらのものでも良い。

【００１２】対向電極は、平行平板電極が好ましいが、
細胞懸濁液を入れる空間に均一電界がかけられるものな
らば、円形電極のようなものでも良い。

【００１３】チャンバ−の形状は、収容する電極の種類
により異なるが、平行平板電極を用いるときは、それに
応じた四角柱の形状のものを用い、また、材質は、透明
樹脂が好ましい。

【００１４】本発明では、上記磁性シャッタ−は、チャ
ンバ−内の電極とほぼ平行になるように収容するが、細
胞収容時は、チャンバ−底板に磁石を配置しておいて、
磁性シャッタ−をチャンバ−底板に固定しておくのが好
ましいが、自重によりそのまま底板に沈んでいるときは
不要である。そして、細胞融合時には、磁性シャッタ−
は、細胞の移動を妨げない位置に移動させるが、その移
動は、磁石で行うのが好ましいが、これに限定されず、
ピンセットなどを使って、手動で移動させても良い。。

【００１５】磁石の種類は、どのような物でも良いが、
電磁石をもちいれば、融合用電極の電源と共用でき便利
となる。

【００１６】

【作用】本発明では、磁性シャッタ−で区切られた別個
の区域にそれぞれＡ細胞、Ｂ細胞を入れるので、融合前
に両細胞が混在することはなく、電界をかけたとき異種
細胞のペアリングが選択的にできる。

【００１７】

【実施例】本発明の構成を図面に基づいて説明する。図
１は、本発明の装置を上から見た図で、装置本体は、中
空の透明樹脂製の四角柱からなる。

【００１８】四角柱の対向する２面には例えばアルミ箔
からなる電極３が貼り付けてあり、また、四角柱は透明
ガラス（図１では省略、後述する図２の１を参照）の上
に置かれる。透明ガラスで構成するのは、融合状態を倒
立顕微鏡を使用して観察するためである。

【００１９】電極３間の空間には、細胞懸濁液が入れら
れるが、本発明では、Ａ細胞，Ｂ細胞が混在して入らな
いように走磁性細菌からなる磁性シャッタ−２を二箇所
に収容する。磁性シャッタ−の高さは、電極３の高さよ
り、幾分（細胞Ａ，Ｂが通過できる程度）低くしておく
。

【００２０】走磁性細菌をいれると、自重により底部に
沈むが、強制的に沈めるため磁石（図２中の４に示す）
を用意しておく。そうすれば、走磁性細菌からなる磁性
シャッタ−２は透明ガラスに固定された状態になる。

【００２１】上記構成の下、細胞の導入、融合は次のよ
うに行う。

【００２２】細胞導入時は、図２（ａ）に示す通り、磁
石４にて磁性シャッタ−２を透明ガラス１からなる底板
にくっつけておく。それにより、電極３間の空間は、３
つの部屋に仕切られたようになり、この部屋に細胞懸濁
液をマニプレ−タを利用して入れる。図２に示す様に、
細胞Ａは、図中左側に、細胞Ｂは、図中右側に入れて、
両者が混在しない様にしておく。細胞懸濁液を入れると
、細胞自体は重いので、透明ガラス１の方に沈んで行き
、細胞Ａ，Ｂが混ざることはない。

【００２３】細胞の導入が終了すると、融合時に熱によ
り細胞懸濁液が蒸発しないように蓋６を装置本体に被せ
る。そして、透明ガラス１に配置した磁石４を取り除き
、蓋６の上に磁石５を配置して、磁性シャッタ−２を上
部に引き上げる（図２（ｂ））。磁性シャッタ−２を上
部に引き上げると、装置本体の下部は、障害物がなくな
り、細胞が図中、左右に自在に動ける様になる。

【００２４】この状態で、電極３に交流電界を印加する
と、細胞Ａ，Ｂは電気泳動を起こし、Ａ細胞とＢ細胞の
ペアリングができる。なお、交流電界を印加したとき、
電界は図２（ｂ）中左右の方向にかかるので、Ａ細胞同
士又はＢ細胞同士がペアリングを起こす確率は低い。

【００２５】Ａ細胞とＢ細胞のペアリングができれば、
直流電圧を印加して、細胞を融合させる。

【００２６】以上の説明では、磁性シャッタ−２を装置
本体に２箇所設置したが、もちろんこれに限らず、１箇
所でも良い。

【００２７】さらに、磁石４、５として電磁石を用い、
磁石４が作動しているとき（電流を流しているとき）、
磁石５に電流を流さないように、またその逆の作動をさ
せるように、電流回路を組んでも良い。電流回路の電源
は、融合用の電源と共用できる。

【００２８】

【発明の効果】以上、説明した通り、本発明によれば、
異種細胞を選択的に融合できるので、卵と精子の融合な
どには有利である。

【００２９】また、同時に大量処理が可能となるので、
融合後の臨床実験をスム−ズに振興させることができる
。

【図面の簡単な説明】

【図１】本発明の装置を上からみた図である。

【図２】（ａ）は、細胞導入時の状態を示す図で、（ｂ
）は、細胞融合時の状態を示す図である。

【符号の説明】

２：磁性シャッタ− ３：電極 ４、５：磁石

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】　　一対の対向電極を備えてなる細胞融合
   チャンバにおいて、電極間に電極と平行に磁性シャッタ
   −を設けてなる細胞融合チャンバ。