JPH04269656A - 液体クロマトグラフィー用充填剤 - Google Patents
液体クロマトグラフィー用充填剤Info
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- JPH04269656A JPH04269656A JP3053977A JP5397791A JPH04269656A JP H04269656 A JPH04269656 A JP H04269656A JP 3053977 A JP3053977 A JP 3053977A JP 5397791 A JP5397791 A JP 5397791A JP H04269656 A JPH04269656 A JP H04269656A
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Landscapes
- Silicon Polymers (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は液体クロマトグラフィー
用充填剤に関する。詳しくは、各種有機化合物に対して
優れた分離特性を示す新規な液体クロマトグラフィー用
充填剤に関するものである。
用充填剤に関する。詳しくは、各種有機化合物に対して
優れた分離特性を示す新規な液体クロマトグラフィー用
充填剤に関するものである。
【０００２】
【従来の技術 】シリカゲルなどの多孔性担体に炭素数
１〜１８のアルキル基を化学結合させて得られた化合物
は逆相クロマトグラフィーの固定相として広く用いられ
ており、たいていの有機化合物の分離分析、分取に有効
である。しかしながら、これらのアルキル基結合型固定
相はある種の有機化合物、例えば低分子量蛋白質の分離
には不十分という問題点があった。
１〜１８のアルキル基を化学結合させて得られた化合物
は逆相クロマトグラフィーの固定相として広く用いられ
ており、たいていの有機化合物の分離分析、分取に有効
である。しかしながら、これらのアルキル基結合型固定
相はある種の有機化合物、例えば低分子量蛋白質の分離
には不十分という問題点があった。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】本発明者らは上記問題
点を解消するため鋭意研究を重ねた結果、特定のポリア
ルキルシルセスキオキサンよりなるレジン組成物を焼成
することにより得られた多孔性真球状粉末を液体クロマ
トグラフィー用の固定相に使用すれば、従来のアルキル
基結合型シリカ固定相では分離し難い有機化合物も分離
可能になることを見出し本発明に到達した。即ち、本発
明の目的は各種有機化合物に対して優れた分離能を有す
る新規な液体クロマトグラフィー用充填剤を提供するこ
とにある。
点を解消するため鋭意研究を重ねた結果、特定のポリア
ルキルシルセスキオキサンよりなるレジン組成物を焼成
することにより得られた多孔性真球状粉末を液体クロマ
トグラフィー用の固定相に使用すれば、従来のアルキル
基結合型シリカ固定相では分離し難い有機化合物も分離
可能になることを見出し本発明に到達した。即ち、本発
明の目的は各種有機化合物に対して優れた分離能を有す
る新規な液体クロマトグラフィー用充填剤を提供するこ
とにある。
【０００４】
【課題を解決するための手段とその作用】上記目的は、
平均粒径が１〜５０μｍである球状ポリアルキルシルセ
スキオキサン粉体を２００℃以上の温度で焼成して得ら
れた多孔質粉体からなる、液体クロマトグラフィー用充
填剤により達成される。
平均粒径が１〜５０μｍである球状ポリアルキルシルセ
スキオキサン粉体を２００℃以上の温度で焼成して得ら
れた多孔質粉体からなる、液体クロマトグラフィー用充
填剤により達成される。
【０００５】これを詳細に説明すると本発明に使用され
るポリアルキルシルセスキオキサンはメチル基，エチル
基，プロピル基等のアルキル基を有するポリシロキサン
が架橋した化学構造を有するポリシロキサンであり、こ
れらの中でもアルキル基がメチル基であるメチルシルセ
スキオキサンが好ましい。また、その平均粒径が１〜５
０μｍの範囲内に有ることが必要である。そしてその形
状は真球状が好ましい。かかるポリアルキルシルセスキ
オキサンはアルキルトリクロロシランないしはアルキル
トリアルコキシシランを有機溶媒中で加水分解する方法
、即ち通常「ゾルゲル法」として知られる方法により得
ることができる。本発明の液体クロマトグラフィー用充
填剤は上記のポリアルキルシルセスキオキサン粉体を２
００℃以上で加熱焼成してなるものであり、加熱焼成に
よりポリアルキルシルセスキオキサン粉体表面上部に存
在するアルキル単位が加熱分解され多孔質粉体を形成す
る。焼成温度は２００℃以上であるが２５０〜５００℃
の範囲が好ましい。得られたこの多孔質粉体はそのもの
自体で各種有機化合物の分離に有用であり、特に低分子
量蛋白質の高速分離に有用である。また更にその表面を
アルキルシランとして知られる表面修飾剤、例えばオク
タデシルジメチルクロロシランで処理することも可能で
ある。
るポリアルキルシルセスキオキサンはメチル基，エチル
基，プロピル基等のアルキル基を有するポリシロキサン
が架橋した化学構造を有するポリシロキサンであり、こ
れらの中でもアルキル基がメチル基であるメチルシルセ
スキオキサンが好ましい。また、その平均粒径が１〜５
０μｍの範囲内に有ることが必要である。そしてその形
状は真球状が好ましい。かかるポリアルキルシルセスキ
オキサンはアルキルトリクロロシランないしはアルキル
トリアルコキシシランを有機溶媒中で加水分解する方法
、即ち通常「ゾルゲル法」として知られる方法により得
ることができる。本発明の液体クロマトグラフィー用充
填剤は上記のポリアルキルシルセスキオキサン粉体を２
００℃以上で加熱焼成してなるものであり、加熱焼成に
よりポリアルキルシルセスキオキサン粉体表面上部に存
在するアルキル単位が加熱分解され多孔質粉体を形成す
る。焼成温度は２００℃以上であるが２５０〜５００℃
の範囲が好ましい。得られたこの多孔質粉体はそのもの
自体で各種有機化合物の分離に有用であり、特に低分子
量蛋白質の高速分離に有用である。また更にその表面を
アルキルシランとして知られる表面修飾剤、例えばオク
タデシルジメチルクロロシランで処理することも可能で
ある。
【０００６】本発明の液体クロマトグラフィー用充填剤
の固定相としての効果を判定するためには、通常の逆相
クロマトグラフィーにおける公知の諸条件が適用できる
。即ち、前述の方法で得られた多孔質粉体を適当なクロ
マトグラフィー用のカラムに充填し、適当な有機溶媒の
水溶液を用いて分離を行う。有機溶媒としては、水溶性
で不活性な広い範囲の有機溶媒が使用可能であり、通常
、メタノール，エタノール，ｎ−プロパノール，イソプ
ロパノール等の低級アルコール；アセトニトリル；テト
ラヒドロフラン等が用いられる。
の固定相としての効果を判定するためには、通常の逆相
クロマトグラフィーにおける公知の諸条件が適用できる
。即ち、前述の方法で得られた多孔質粉体を適当なクロ
マトグラフィー用のカラムに充填し、適当な有機溶媒の
水溶液を用いて分離を行う。有機溶媒としては、水溶性
で不活性な広い範囲の有機溶媒が使用可能であり、通常
、メタノール，エタノール，ｎ−プロパノール，イソプ
ロパノール等の低級アルコール；アセトニトリル；テト
ラヒドロフラン等が用いられる。
【０００７】以上のような本発明の液体クロマトグラフ
ィー用充填剤は各種有機化合物の分離特性に優れ、特に
、従来困難とされていた低分子量蛋白質、例えばインシ
ュリン，リゾチーム，ボビンアルブミン，ミオグロビン
，エッグアルブミン等を分離することができる。
ィー用充填剤は各種有機化合物の分離特性に優れ、特に
、従来困難とされていた低分子量蛋白質、例えばインシ
ュリン，リゾチーム，ボビンアルブミン，ミオグロビン
，エッグアルブミン等を分離することができる。
【０００８】
【実施例】以下、本発明を実施例により具体的に示す。
【０００９】
【実施例１】平均粒径が５μｍの球状のメチルシルセス
キオキサン粉体（東レ・ダウコーニング・シリコーン株
式会社製、商品名トレフィルＲ−９３５）を３００℃の
オーブン内で１２時間静置し焼成した。焼成後のシルセ
スキオキサン粉体は、細孔分布の測定によりその平均細
孔容積が０．６１４０ｃｍ３／ｇであり、その細孔直径
が７．５Ｘ１０４オングストロームであることが判明し
た。次いで、この多孔質粉体を高速液体クロマトグラフ
ィーの充填剤として使用し、インシュリン（Ｉｎｓｕｌ
ｉｎ），リゾチーム（Ｌｙｓｏｚｙｍｅ），ボビンアル
ブミン（Ｂｏｖｉｎ Ａｌｂｕｍｉｎ），ミオグロビン
（Ｍｙｏｇｌｏｂｉｎ），エッグアルブミン（ＥｇｇＡ
ｌｂｕｍｉｎ）からなる低分子量蛋白質の混合物を分離
した。ここで、この多孔質粉体は、内径４ｍｍ，長さ１
５０ｍｍのステンレスカラムに充填した。また、展開溶
媒は、水（０．１％ＴＦＡ）とアセトニトリル（０．１
％ＴＦＡ）を使用し、溶離条件は１ｍｍ／ｍｉｎであっ
た。検出器は紫外線吸収分光光度計を使用した。得られ
たクロマトグラムを第１図に示した。
キオキサン粉体（東レ・ダウコーニング・シリコーン株
式会社製、商品名トレフィルＲ−９３５）を３００℃の
オーブン内で１２時間静置し焼成した。焼成後のシルセ
スキオキサン粉体は、細孔分布の測定によりその平均細
孔容積が０．６１４０ｃｍ３／ｇであり、その細孔直径
が７．５Ｘ１０４オングストロームであることが判明し
た。次いで、この多孔質粉体を高速液体クロマトグラフ
ィーの充填剤として使用し、インシュリン（Ｉｎｓｕｌ
ｉｎ），リゾチーム（Ｌｙｓｏｚｙｍｅ），ボビンアル
ブミン（Ｂｏｖｉｎ Ａｌｂｕｍｉｎ），ミオグロビン
（Ｍｙｏｇｌｏｂｉｎ），エッグアルブミン（ＥｇｇＡ
ｌｂｕｍｉｎ）からなる低分子量蛋白質の混合物を分離
した。ここで、この多孔質粉体は、内径４ｍｍ，長さ１
５０ｍｍのステンレスカラムに充填した。また、展開溶
媒は、水（０．１％ＴＦＡ）とアセトニトリル（０．１
％ＴＦＡ）を使用し、溶離条件は１ｍｍ／ｍｉｎであっ
た。検出器は紫外線吸収分光光度計を使用した。得られ
たクロマトグラムを第１図に示した。
【００１０】
【発明の効果】本発明の液体クロマトグラフィー用充填
剤は平均粒径が１〜５０μｍの球状ポリアルキルシルセ
スキオキサン粉体を２００℃以上の温度で焼成して得ら
れた多孔質粉体からなる液体クロマトグラフィー用充填
剤であるので、従来の液体クロマトグラフィー用充填剤
では分離し難い有機化合物に対して優れた分離能を有す
るという特徴を有する。従って、かかる有機化合物の分
析や分離精製に利用することが出来る。
剤は平均粒径が１〜５０μｍの球状ポリアルキルシルセ
スキオキサン粉体を２００℃以上の温度で焼成して得ら
れた多孔質粉体からなる液体クロマトグラフィー用充填
剤であるので、従来の液体クロマトグラフィー用充填剤
では分離し難い有機化合物に対して優れた分離能を有す
るという特徴を有する。従って、かかる有機化合物の分
析や分離精製に利用することが出来る。
【００１１】
第１図は、実施例１において分離した低分子量蛋白質質
の混合物のクロマトグラムを示す。 第１図中、ピー
クの番号は次の蛋白質を示す。 １：インシュリン、 ２：リゾチーム、 ３：ボビ
ンアミン、 ４：ミオグロビン、 ５：エッグアルブミンまた、溶
離条件はグラジエント法における水（０．１％ＴＦＡ）
に対するアセトニトリル（０．１％ＴＦＡ）の濃度（ｖ
／ｖ％）を示す。
の混合物のクロマトグラムを示す。 第１図中、ピー
クの番号は次の蛋白質を示す。 １：インシュリン、 ２：リゾチーム、 ３：ボビ
ンアミン、 ４：ミオグロビン、 ５：エッグアルブミンまた、溶
離条件はグラジエント法における水（０．１％ＴＦＡ）
に対するアセトニトリル（０．１％ＴＦＡ）の濃度（ｖ
／ｖ％）を示す。
Claims (2)
- 【請求項１】 平均粒径が１〜５０μｍである球状ポ
リアルキルシルセスキオキサン粉体を２００℃以上の温
度で焼成して得られた多孔質粉体からなる、液体クロマ
トグラフィー用充填剤。 - 【請求項２】 ポリアルキルシルセキオキサン粉体が
ポリメチルシルセキオキサン粉体である請求項１の液体
クロマトグラフィー用充填剤。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP3053977A JPH04269656A (ja) | 1991-02-26 | 1991-02-26 | 液体クロマトグラフィー用充填剤 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP3053977A JPH04269656A (ja) | 1991-02-26 | 1991-02-26 | 液体クロマトグラフィー用充填剤 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH04269656A true JPH04269656A (ja) | 1992-09-25 |
Family
ID=12957701
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP3053977A Pending JPH04269656A (ja) | 1991-02-26 | 1991-02-26 | 液体クロマトグラフィー用充填剤 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH04269656A (ja) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2014506796A (ja) * | 2011-02-16 | 2014-03-20 | ウオーターズ・テクノロジーズ・コーポレイシヨン | 固定化酵素反応器 |
| JP2017512132A (ja) * | 2014-02-07 | 2017-05-18 | サーモ エレクトロン マニュファクチュアリング リミテッド | クロマトグラフィー材料及びその合成方法 |
| US11740163B2 (en) | 2011-02-14 | 2023-08-29 | Dionex Corporation | Nanometer size chemical modified materials and uses |
-
1991
- 1991-02-26 JP JP3053977A patent/JPH04269656A/ja active Pending
Cited By (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US11740163B2 (en) | 2011-02-14 | 2023-08-29 | Dionex Corporation | Nanometer size chemical modified materials and uses |
| JP2014506796A (ja) * | 2011-02-16 | 2014-03-20 | ウオーターズ・テクノロジーズ・コーポレイシヨン | 固定化酵素反応器 |
| US9890411B2 (en) | 2011-02-16 | 2018-02-13 | Waters Technologies Corporation | Immobilized enzymatic reactor |
| US10533209B2 (en) | 2011-02-16 | 2020-01-14 | Waters Technologies Corporation | Immobilized enzymatic reactor |
| US11434517B2 (en) | 2011-02-16 | 2022-09-06 | Waters Technologies Corporation | Immobilized enzymatic reactor |
| US11905548B2 (en) | 2011-02-16 | 2024-02-20 | Waters Technologies Corporation | Immobilized enzymatic reactor |
| JP2017512132A (ja) * | 2014-02-07 | 2017-05-18 | サーモ エレクトロン マニュファクチュアリング リミテッド | クロマトグラフィー材料及びその合成方法 |
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