JPH0377853A - Device for hydrolyzing protein or peptide - Google Patents

Device for hydrolyzing protein or peptide

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Publication number
JPH0377853A
JPH0377853A JP21318489A JP21318489A JPH0377853A JP H0377853 A JPH0377853 A JP H0377853A JP 21318489 A JP21318489 A JP 21318489A JP 21318489 A JP21318489 A JP 21318489A JP H0377853 A JPH0377853 A JP H0377853A
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JP
Japan
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sample
hydrolyzed
sample carrier
action
carrying
Prior art date
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Pending
Application number
JP21318489A
Other languages
Japanese (ja)
Inventor
Toyoaki Uchida
豊明 内田
Toshihiko Sakuhara
寿彦 作原
Shotaro Takahashi
正太郎 高橋
Hitoshi Yoshida
吉田 仁士
Kiyoshi Kobayashi
清 小林
Shigeki Yagi
茂樹 八木
Yasuhiro Nomoto
野本 康弘
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Seiko Instruments Inc
Original Assignee
Seiko Instruments Inc
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Publication date
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Abstract

PURPOSE:To provide a device capable of performing an accurate analysis of an amino acid composition by enabling to continuously treat processes comprising the solid phase-gas phase hydrolysis of a sample with a mixed acid vapor, the cooling of the hydrolyzed sample, the extraction of the hydrolyzed sample, the transfer of the extract solution and the transportation of the sample between the processes without a manual operation. CONSTITUTION:Sample carriers carrying the dry samples of protein or peptide are received in a feeding tray 9, individually supported with a gripper 17 by the action of an air cylinder 15 and subsequently transferred to a heating box 20 by the action of a motor through a ball bearing 12. The sample carrier is received in the heating box 20 by the action of an air cylinder 18 and hydrolyzed with a mixed acid vapor under a heated and pressed condition. The treated sample carrier is cooled in a cooling box 26, carried to the position of an extracting and carrying unit and fixed with a nozzle 32 by the action of an air cylinder 29. The hydrolyzed sample is extracted and the extract solution is injected into an amino acid analyzer, followed by carrying the remained sample carrier to a recovery tray 39.

Description

【発明の詳細な説明】 (産業上の利用分野) 本発明は、タンパク質あるいはペプチドのアミノ酸組成
分析の第1段階であるタンパク質あるいはペプチドの加
水分解を行う装置に関する。
DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION (Field of Industrial Application) The present invention relates to an apparatus for hydrolyzing proteins or peptides, which is the first step in analyzing the amino acid composition of proteins or peptides.

〔従来の技術〕[Conventional technology]

従来、アミノ酸組成分析は例えば次の様に行われている
Conventionally, amino acid composition analysis has been carried out, for example, as follows.

(S。ムーア、H,スタイン メンツズ インエンザイ
干ロジー13.P、コロビック、N、O、カブラり19
63年 6を 819〜831ページ、アカデミツクプ
レス、ニューヨーク)まず試験管底の乾燥試料に蒸留し
た共沸点塩酸を加え、この試験管を水冷しながら減圧下
で封管する。次いで、このアンプルを105℃〜110
℃で24時間〜144時間加熱する。次にこの゛アンプ
ルを開管し、塩酸を蒸発除去する。最後に加水分解され
た試料を溶解しアミノ酸分析針に注入する。ところが、
最近成田らによって開発された高速気相加水分解法(成
田晧ら、ジャーナル オブ バイオケミストリー、19
87年、102巻 1593〜1597ページ)は、組
成分析の第1段階である加水分解を次のように改良して
いる。■加水分解速度を上げるため反応温度を158℃
とし、22゜5分間〜45分間で迅速に加水分解を完了
できるようにした。■揮発性かつ強酸性の有機酸である
トリフルオロ酢酸を加えて、疎水性タンパク質の加水分
解率を向上させた。■酸混合蒸気をタンパク質試料に作
用させることを利用した気相法により、酸自身に含まれ
るアミノ酸の混入を防いで正確なアミノ酸組成分析を可
能とし、あわゼ”で加水分解後に残存する酸の除去を簡
便にした。この方法は特開昭61 151157にも開
示されている。
(S. Moore, H. Steinmenz Inenzai Hoshilogy 13. P. Corobic, N. O. Kabulari 19.
(1963, pp. 819-831, Academic Press, New York) First, distilled azeotropic hydrochloric acid is added to the dry sample at the bottom of the test tube, and the test tube is sealed under reduced pressure while cooling with water. This ampoule was then heated to 105°C to 110°C.
Heat at <0>C for 24 to 144 hours. Next, the ampoule is opened and the hydrochloric acid is removed by evaporation. Finally, the hydrolyzed sample is dissolved and injected into the amino acid analysis needle. However,
A fast gas phase hydrolysis method recently developed by Narita et al. (Aki Narita et al., Journal of Biochemistry, 19
(1987, Vol. 102, pp. 1593-1597) improves the hydrolysis, which is the first step of compositional analysis, as follows. ■Reaction temperature was set at 158℃ to increase the hydrolysis rate.
The hydrolysis can be completed quickly in 5 to 45 minutes at 22°. (2) The hydrolysis rate of hydrophobic proteins was improved by adding trifluoroacetic acid, a volatile and strongly acidic organic acid. ■By using a gas phase method that utilizes acid mixed vapor to act on a protein sample, it is possible to prevent the contamination of amino acids contained in the acid itself, enabling accurate amino acid composition analysis. This method is also disclosed in Japanese Patent Application Laid-Open No. 151157/1983.

〔発明が解決しよ・5とする課題〕 従来の蒸留した共沸点塩酸を用いる加水分解法は24時
間〜・144時間という長時間を必要とし、かつ加水分
解後の煩雑な蒸発操作による酸の除去が必要であった。
[Problem 5 to be solved by the invention] The conventional hydrolysis method using distilled azeotropic hydrochloric acid requires a long time of 24 to 144 hours, and it is difficult to remove the acid due to the complicated evaporation operation after hydrolysis. Removal was necessary.

また、液相法であるため酸からの汚染があり、正確な組
成分析は困秤であった。特に試料の微量化が要求される
場合にこの影響は顕著である。また、成田らの開発した
気相法においても、熟練した技術を要するガラス紐玉が
必要であり、個人差が避けられず、更に人が試料の取り
扱いの各操作に従事するための汚染が存在することが欠
点として残されているやそこでこの発明は、従来のこの
ような欠点を解決するため、乾燥されたタンパク質試料
の加水分解から、加水分解物のアミノ酸分析計への注入
までの各操作を一切の手操作を用いることな(連続的に
行うこと、および多数の試料を連続的に処理することを
目的としている。
Furthermore, since it is a liquid phase method, there is contamination from acids, making accurate compositional analysis difficult. This effect is particularly noticeable when miniaturization of the sample is required. In addition, the gas phase method developed by Narita et al. requires glass string beads that require skilled technique, and individual differences are inevitable, and furthermore, there is contamination due to human being engaged in each operation of sample handling. In order to solve these conventional drawbacks, the present invention aims to improve the efficiency of each operation from hydrolysis of a dried protein sample to injection of the hydrolyzate into an amino acid analyzer. The purpose is to perform the process continuously (without using any manual operations) and to process a large number of samples continuously.

〔課題を解決するための手段〕[Means to solve the problem]

本発明は前記の欠点を除去するためになされたものであ
り、タンパク質あるいはペプチドの乾燥された試料を担
持し、た試料担体を供給する試料供給機構と、前記試料
担体の搬送機構と、乾燥された試料へ加圧、加熱下で酸
混合蒸気を供給して固相−気相反応により加水分解反応
を行わせる反応ユニットと、加水分解を受けた試料を担
持した試料担体の搬送機構と、前記加水分解を受けた試
料を担持した試料担体の冷却ユニットと、冷却された試
料担体の搬送機構と、前記試料担体からの加水分解され
た試料を抽出し、抽出された試料溶液のアミノ酸分析装
置の試料溶液注入装置への送液を行う抽出送液ユニット
と、前記加水分解、抽出。
The present invention has been made in order to eliminate the above-mentioned drawbacks, and includes a sample supply mechanism that supports a dried sample of protein or peptide and supplies the sample carrier, a transport mechanism for the sample carrier, and a sample carrier that carries a dried sample of protein or peptide. a reaction unit for supplying acid mixed vapor under pressure and heat to a sample subjected to hydrolysis to perform a hydrolysis reaction by a solid phase-gas phase reaction; a transport mechanism for a sample carrier carrying a sample subjected to hydrolysis; A cooling unit for a sample carrier carrying a hydrolyzed sample, a transport mechanism for the cooled sample carrier, and an apparatus for extracting the hydrolyzed sample from the sample carrier and analyzing the extracted sample solution for amino acids. an extraction liquid feeding unit that feeds the liquid to the sample solution injection device; and the hydrolysis and extraction.

送液に用いる流体の供給機構とを備えている構成とした
The structure includes a fluid supply mechanism used for liquid feeding.

〔作用〕[Effect]

上記のように構成された加水分解装置は試料担体に担持
されたタンパク質あるいはペプチドのアミノ酸組成分析
における、搬送、固相−気相反応による加水分解、抽出
およびアミノ酸分析計への注入までをオンライン化して
、各操作を一切の手操作を用いることなく、本質的な汚
染の低下と個人差の排除により正確なアミノ酸組成分析
を可能とし、あわせて省力化を図ったものである。
The hydrolysis device configured as described above enables online processing of transportation, hydrolysis by solid phase-gas phase reaction, extraction, and injection into the amino acid analyzer for amino acid composition analysis of proteins or peptides supported on sample carriers. This makes it possible to perform accurate amino acid composition analysis by reducing essential contamination and eliminating individual differences without using any manual operations for each operation, and also saves labor.

また、一連の繰作の連続処理のみならず、多数試料の連
続処理をも行うことができる。
Furthermore, it is possible to perform not only continuous processing of a series of operations but also continuous processing of a large number of samples.

〔実施例〕〔Example〕

以下にこの発明の実施例を図面に基づいて説明する。 Embodiments of the present invention will be described below based on the drawings.

ここでは本発明による装置の構成と動作を示す。Here, the configuration and operation of the device according to the present invention will be shown.

第1図本発明による装置の構成を示すブロック図である
。本発明のタンパク質あるいはペプチドを加水分解する
装置は、乾燥されたタンパク質あるいはペプチドの試料
を担持した試料担体を供給する試料供給機構1と、前記
試料担体の搬送機構2と、乾燥された試料と酸混合蒸気
との加水分解を行わせる反応ユニット3と、加水分解さ
れた試料を担持した試料担体の搬送機構2と、前記加水
分解を受けた試料を担持した試料担体の冷却ユニット4
と、冷却された試料担体の搬送機構2と・加水分解され
た試料を試料担体から抽出し、抽出された試料をアミノ
酸分析計に送液する抽出送液ユニット5と、反応ユニッ
ト3と抽出送液ユニット5への流体供給機構6とから構
成されている。
FIG. 1 is a block diagram showing the configuration of an apparatus according to the present invention. The apparatus for hydrolyzing proteins or peptides of the present invention comprises a sample supply mechanism 1 for supplying a sample carrier carrying a dried protein or peptide sample, a transport mechanism 2 for the sample carrier, and a dry sample and acid A reaction unit 3 for performing hydrolysis with mixed vapor, a transport mechanism 2 for a sample carrier carrying a hydrolyzed sample, and a cooling unit 4 for the sample carrier carrying the hydrolyzed sample.
, a transport mechanism 2 for the cooled sample carrier; an extraction liquid feeding unit 5 that extracts the hydrolyzed sample from the sample carrier and sends the extracted sample to the amino acid analyzer; and a reaction unit 3 and the extraction feeding unit 5. The fluid supply mechanism 6 includes a fluid supply mechanism 6 to the fluid unit 5.

タンパク質あるいはペプチドの試料は、lから5までの
各機構を経てアミノ酸へ加水分解され、直接アミノ酸分
析計80へ注入される。
A protein or peptide sample is hydrolyzed into amino acids through mechanisms 1 to 5, and directly injected into the amino acid analyzer 80.

次に、本発明のタンパク質あるいはペプチドを加水分解
する装置の構成について詳しく述べる。
Next, the configuration of the apparatus for hydrolyzing proteins or peptides of the present invention will be described in detail.

第2図(alは本発明による加水分解装置の前面図であ
り、第2図山)は前記加水分解装置の前部側面図である
FIG. 2 (Al is a front view of the hydrolysis apparatus according to the present invention, and FIG. 2 is a side view of the hydrolysis apparatus).

前記試料供給114111は、パネル7に固定されたト
レーリテーナ8と前記トレーリテーナ8に固定され、前
記パネル7側を下とする傾斜を持つ供給トレー9とから
構成される。前記搬送機構2は、モーターリテーナ10
を介してパネル7に固定されたモーター11と千−クー
11により駆動されるボールネジ12と軸リテーナ13
とボールネジ12の回転により」二下するシリンダリテ
ーナ14とシリンダリテーナ14に固定されたエアシリ
ンダー15とエアシリンダ15の一対のアーム16にそ
れぞれ固定されたグリッパ17とから構成される。反応
ユニット3は、一対のエアシリンダ18とエアシリンダ
18とシャツ目9を介して連結している加熱ボックス2
0と加熱ボックス20を架設するガイドレール21とチ
ェーブとのコネクタ22とコネクタ22を一定温度に保
つための冷媒を出し入れするサーキュレータチエ・−ブ
23とから構成される。冷却ユニット4は、一対のエア
シリンダ24とエアシリンダ24とシャフト25を介し
て連結している除熱ボックス26ど除熱ボックス26を
架設するガイドレール27と冷媒を出し入れするザーキ
エレータチェーブ28とから構成される。
The sample supply 114111 is composed of a tray retainer 8 fixed to the panel 7 and a supply tray 9 fixed to the tray retainer 8 and having an inclination with the panel 7 side facing downward. The transport mechanism 2 includes a motor retainer 10
A ball screw 12 and a shaft retainer 13 driven by a motor 11 and a screwdriver 11 fixed to the panel 7 through
It is composed of a cylinder retainer 14 that is lowered by the rotation of a ball screw 12, an air cylinder 15 fixed to the cylinder retainer 14, and grippers 17 fixed to a pair of arms 16 of the air cylinder 15, respectively. The reaction unit 3 includes a pair of air cylinders 18 and a heating box 2 connected to the air cylinders 18 via a shirt opening 9.
0 and a guide rail 21 for constructing the heating box 20, a connector 22 for the tube, and a circulator tube 23 for supplying and extracting a refrigerant to maintain the connector 22 at a constant temperature. The cooling unit 4 includes a pair of air cylinders 24, a heat removal box 26 connected to the air cylinders 24 via a shaft 25, a guide rail 27 for constructing the heat removal box 26, and a zerkieerator valve 28 for taking in and taking out the refrigerant. It consists of

抽出送液機構5は、一対のエアシリンダ29とエアシリ
ンダ29とシャフト30を介して連結しているプレート
31とプレート31に穿設されたノズル32とプレート
31を架設したガイドレ−ル33と、ベース34に固定
されたシリンダリテーナ35とシリンダリテーナ35に
固定されアーム36を介してダミーホルダ37を支持す
るエアシリンダ38とから構成されている。更に本発明
による装置は、回収トレー39とカバー40と操作パネ
ル41とを有している。
The extraction liquid feeding mechanism 5 includes a pair of air cylinders 29, a plate 31 connected to the air cylinder 29 via a shaft 30, a nozzle 32 drilled in the plate 31, and a guide rail 33 that spans the plate 31. It is composed of a cylinder retainer 35 fixed to a base 34 and an air cylinder 38 fixed to the cylinder retainer 35 and supporting a dummy holder 37 via an arm 36. Furthermore, the device according to the invention has a collection tray 39, a cover 40 and an operating panel 41.

次に、本発明のタンパク質あるいはベチチドを加水分解
する装置の動作について述べる。
Next, the operation of the apparatus for hydrolyzing proteins or vetitides of the present invention will be described.

第3図は、本発明に用いる試料ホルダーの一実施例を示
す断面図である。試料担体としての試料ホルダー42は
、支持部としてのガラス外筒43内に試料の保持部とし
ての多孔質ガラスからなるガラスフィルタ44を挿入し
た構造をとっている。
FIG. 3 is a sectional view showing one embodiment of a sample holder used in the present invention. The sample holder 42 as a sample carrier has a structure in which a glass filter 44 made of porous glass as a sample holding portion is inserted into a glass outer tube 43 as a support portion.

始めに、1個あるいは複数の試料ホルダー42が供給ト
レー9に格納されている。次に、1個ずつエアシリンダ
15の作用によりグリッパ17に支持された試料ホルダ
ー42をボールネジ12を介したモーター11の作用に
より加熱ボックス20の位置に移動させる1次に、エア
シリンダ18の作用により試料ホルダー42を加熱ボッ
クス20に格納する。ここで、加熱加圧下で酸の混合蒸
気をタンパク質あるいはペプチドの試料に作用ざぜ加水
分解を行う。加水分解反応を受けた試料を担持した試料
ホルダーは更に搬送機構2の作用により除熱ボックス2
6の位置にまで運ばれる。そしてエアシリンダ24の作
用により除熱ボックス26に格納され冷却される。冷却
された試料ホルダー□42u;!更に搬送機構2の作用
により、抽出送液ユニット5の位iへ運ばれる。
Initially, one or more sample holders 42 are stored in the supply tray 9. Next, the sample holders 42 supported by the gripper 17 are moved one by one by the action of the air cylinder 15 to the position of the heating box 20 by the action of the motor 11 via the ball screw 12. The sample holder 42 is stored in the heating box 20. Here, a mixed acid vapor is applied to the protein or peptide sample under heat and pressure to perform hydrolysis. The sample holder carrying the sample that has undergone the hydrolysis reaction is further transferred to the heat removal box 2 by the action of the transport mechanism 2.
It is carried to the 6th position. Then, by the action of the air cylinder 24, it is stored in a heat removal box 26 and cooled. Cooled sample holder □42u;! Further, by the action of the transport mechanism 2, it is transported to the extraction liquid transport unit 5 at position i.

ここで試料ホルダー42はエアシリンダ29の作用によ
りノズル32によ、て固定される。ここで加水分解され
た試料は抽出される。抽出操作を経た試料ホルダーは搬
送機構2の作用により回収トレー39へと運ばれる。こ
こでエアシリンダ38の作用とエアシリンダ29の作用
とによりダミーホルダー37がノズル32によって固定
される。
Here, the sample holder 42 is fixed by the nozzle 32 by the action of the air cylinder 29. Here, the hydrolyzed sample is extracted. The sample holder that has undergone the extraction operation is transported to the collection tray 39 by the action of the transport mechanism 2. Here, the dummy holder 37 is fixed by the nozzle 32 by the action of the air cylinder 38 and the action of the air cylinder 29.

ここで抽出送液ユニット5内の洗浄が行われる。Here, the inside of the extraction liquid feeding unit 5 is cleaned.

以上で試料を処理する一連の操作が完了するが、試料が
複数である場合にはこの一連の操作が繰り返され、連続
した処理が行われる。
The series of operations for processing the sample is completed above, but if there are multiple samples, this series of operations is repeated to perform continuous processing.

次に、流体供給機構6の構成と作用とを述べる。Next, the configuration and operation of the fluid supply mechanism 6 will be described.

第4図は本発明による加水分解装置の配管系の一例を示
す流路図である。該溶液供給機+116は、チ2素ボン
ベ45およびそのレギュレータ46と、三方弁47.4
8.49と、逆止弁50= 5L 52と溶液槽53゜
54、5!L 56.57と、安全弁58.59と、二
方弁60゜61、62.63.64.65.66と、エ
アトラップ67.68゜69と、二個の逆止弁の組み合
わせによる三方弁70゜71.72と、シリンジ7L 
74.75と、それらのコンポーネンツを連結するテフ
ロンチェーブとから構成されている。
FIG. 4 is a flow path diagram showing an example of the piping system of the hydrolysis apparatus according to the present invention. The solution supply machine +116 includes a nitrogen cylinder 45, its regulator 46, and a three-way valve 47.4.
8.49, check valve 50 = 5L 52 and solution tank 53° 54, 5! A three-way valve consisting of a combination of L 56.57, safety valve 58.59, two-way valve 60°61, 62.63.64.65.66, air trap 67.68°69, and two check valves. 70°71.72 and syringe 7L
74, 75 and a Teflon tube connecting these components.

まず溶液槽55に貯蔵されている酸混合溶液の除酸素を
行う。この時チッ素ガスはチッ素ボンベ45、レギエ1
/−夕46、三方弁47、逆止弁50、溶液槽55と同
一の酸混合溶液を貯蔵している溶液槽54、溶液槽55
、二方弁60、逆止弁51を通りアルカリ溶液を貯祷し
た溶液槽53へと流れる。次に、シリンジ73.74.
75へ溶液槽55に貯蔵されている酸混合溶液、溶液槽
56に貯蔵されている水、溶液l957に貯蔵されてい
る希塩酸を、それぞれ吸引させる。シリンジ73へは溶
液槽55、二方弁61、エアトラップ67、三方弁70
を経て、シリンジ74へは溶液槽56、エアトラップ6
8、二方弁65、三方弁71を経て、そしてシリンジ7
5へは溶液槽57、エアトラップ69、二方弁66、三
方弁72を経てそれぞれの溶液が供給される。以上で試
料を処理する以前の準備を終わり、試料の処理操作をス
タートする。
First, the acid mixed solution stored in the solution tank 55 is deoxidized. At this time, nitrogen gas is nitrogen cylinder 45, Regier 1
/- Solution tank 54 and solution tank 55 storing the same acid mixed solution as E 46, three-way valve 47, check valve 50, and solution tank 55
, a two-way valve 60, and a check valve 51 to flow into a solution tank 53 in which alkaline solution is stored. Next, syringe 73.74.
The acid mixed solution stored in the solution tank 55, the water stored in the solution tank 56, and the dilute hydrochloric acid stored in the solution 1957 are sucked into the solution tank 75, respectively. A solution tank 55, a two-way valve 61, an air trap 67, and a three-way valve 70 are connected to the syringe 73.
The solution tank 56 and the air trap 6 are connected to the syringe 74 through
8, through the two-way valve 65, the three-way valve 71, and the syringe 7
5 are supplied with respective solutions through a solution tank 57, an air trap 69, a two-way valve 66, and a three-way valve 72. With the above steps, the preparations prior to processing the sample are completed, and the sample processing operation is started.

まず、反応ユニット3における加熱ボックス20に格納
された試料ホルダー42にチッ素ガスを通じ、試料ホル
ダー42および加熱ボックス20内から酸素を除去する
。この時、チッ素ガスはチッ素ボンベ45.1/ギニ1
ノータ46、三方弁47、二方弁64、三方弁48、二
方弁63、加熱ボックス20、試料ホルダ42、二方弁
62、三方弁49、逆止弁52を通り溶液槽53にまで
流れる。次に二方弁63を止め三方弁49を切換えシリ
ンジ73から加熱ボックス20へ酸混合溶液を供給する
。そして、二方弁62を閉し加水分解を行う。この時、
供給された酸混合溶液の一部または全部が気化し、加熱
加圧下で試料に作用する。加水分解終了後、三方弁49
を切換え、二方弁62を開け、更に二方弁63を開け、
三方弁48を切換え、シリンジ74から水を供給さセて
加熱ボックス20内に水蒸気を発生させることにより、
加熱ボックス20および試料ホルダー42から酸を除去
する。除かれた酸は溶液槽53へ回収される。この後、
試料ホルダー42は冷却ユニッ)4で除酸され、更に抽
出送液ユニット5へと搬送される。ここでは一対のノズ
ル32により固定された試料ホルダー42へシリンジ7
5の作用により希塩酸を送液し、試料ホルダー42の多
孔質ガラスフィルタ44に担持されている試料の加水分
解物であるアミノ酸を抽出する。この抽出液はそのまま
オンラインでアミノ酸自動分析装置、80の試料注入装
置76へ送られサンプルループ77に貯えられる。この
後のアミノ酸自動分析装置およびアミノ酸自勧分析につ
いては公知であるのでここでは述べない。以上の操作に
よって、タンパク質あるいはペプチド試料の加水分解が
行われ、処理された試料はそのままアミノ酸分析計80
へ送られ、アミノ酸組成分析が完了する。また、加水分
解された試料を抽出送液ユニット5からアミノ酸自動分
析装置の試料注入装置76へ送らず、フラクシタンコレ
クター等の溶液回収装置によって回゛ 収することも可
能である。
First, nitrogen gas is passed through the sample holder 42 housed in the heating box 20 in the reaction unit 3 to remove oxygen from the sample holder 42 and the heating box 20 . At this time, nitrogen gas is nitrogen cylinder 45.1/guinea 1
It flows to the solution tank 53 through the notebook 46, three-way valve 47, two-way valve 64, three-way valve 48, two-way valve 63, heating box 20, sample holder 42, two-way valve 62, three-way valve 49, and check valve 52. . Next, the two-way valve 63 is stopped and the three-way valve 49 is switched to supply the acid mixed solution from the syringe 73 to the heating box 20. Then, the two-way valve 62 is closed to perform hydrolysis. At this time,
Part or all of the supplied acid mixture solution is vaporized and acts on the sample under heat and pressure. After hydrolysis is complete, open the three-way valve 49.
, open the two-way valve 62, then open the two-way valve 63,
By switching the three-way valve 48 and supplying water from the syringe 74 to generate steam in the heating box 20,
Remove acid from heating box 20 and sample holder 42. The removed acid is collected into the solution tank 53. After this,
The sample holder 42 is deoxidized by the cooling unit 4 and further transported to the extraction liquid feeding unit 5. Here, the syringe 7 is inserted into the sample holder 42 fixed by a pair of nozzles 32.
5, dilute hydrochloric acid is fed to extract the amino acid, which is a hydrolyzate of the sample supported on the porous glass filter 44 of the sample holder 42. This extract is directly sent online to the automatic amino acid analyzer and the sample injection device 76 of 80, and is stored in the sample loop 77. The subsequent automatic amino acid analyzer and self-recommended amino acid analysis are well known and will not be described here. Through the above operations, the protein or peptide sample is hydrolyzed, and the treated sample is directly transferred to the amino acid analyzer 80.
The amino acid composition analysis is completed. Furthermore, the hydrolyzed sample may not be sent from the extraction liquid feeding unit 5 to the sample injection device 76 of the automatic amino acid analyzer, but may be recovered by a solution recovery device such as a fruccitane collector.

以上記した装置における各ユニットの動作、弁の切換え
、開閉等は全て装置前面のパネル操作によってコントロ
ールされる。
The operation of each unit, valve switching, opening/closing, etc. in the apparatus described above are all controlled by panel operations on the front of the apparatus.

〔発明の効果〕〔Effect of the invention〕

この発明は以上説明したように、気相加水分解法を採用
し、タンパク質あるいはペプチドのアミノ酸組成分析に
おける、試料の加水分解とアミノ酸分析針への注入まで
の一切の操作を手操作を用いることなく連続処理可能と
し、また多数試料の連続処理を可能としたことによって
、熟練を要する手操作および個人差の排除により正確な
アミノ酸組成分析を可能とし省力化を図ったものである
As explained above, this invention employs the gas phase hydrolysis method, and all operations from sample hydrolysis to injection into an amino acid analysis needle in protein or peptide amino acid composition analysis can be performed without manual operations. By enabling continuous processing and continuous processing of a large number of samples, it is possible to perform accurate amino acid composition analysis by eliminating manual operations that require skill and individual differences, thereby saving labor.

なお、ここで使用した用語及び説明は本発明の特徴が絵
持される限り類似のものを除去するものでないことは言
うまでもない。
It goes without saying that the terms and explanations used herein do not exclude similar terms as long as the features of the present invention are preserved.

【図面の簡単な説明】[Brief explanation of drawings]

第1図は本発明による装置の構成を示すプロノり図、第
2図(9)は本発明による装置の構成を示す正面図、第
2図tb+は本発明による装置の構成を示す装置前部の
側断面図、第3図は本発明による装置に用いる試料ボル
ダ−の−例を示す断面図、第4図は本発明による装置の
配管系の一例を示す清。 路図である。 ・・試料供給機構 ・・搬送機構 ・・反応ユニット ・・冷却ユニット ・・抽出送液ユニット ・・流体供給機構 以 上
FIG. 1 is a professional view showing the configuration of the device according to the present invention, FIG. 2 (9) is a front view showing the configuration of the device according to the present invention, and FIG. 2 tb+ is a front view of the device showing the configuration of the device according to the present invention. 3 is a sectional view showing an example of a sample boulder used in the apparatus according to the present invention, and FIG. 4 is a side sectional view showing an example of the piping system of the apparatus according to the present invention. It is a road map.・・Sample supply mechanism・・Transportation mechanism・・Reaction unit・・Cooling unit・・Extraction liquid feeding unit・・Fluid supply mechanism and above

Claims (3)

【特許請求の範囲】[Claims] (1)タンパク質あるいはペプチドの乾燥された試料を
担持した試料担体を供給する試料供給機構と、前記試料
担体の搬送機構と、乾燥された試料へ加圧、加熱下で酸
混合蒸気を供給して固相−気相反応により加水分解反応
を行わせる反応ユニットと、加水分解を受けた試料を担
持した試料担体の搬送機構と、前記加水分解を受けた試
料を担持した試料担体の冷却ユニットと、冷却された試
料担体の搬送機構と、前記試料担体からの加水分解され
た試料を抽出し、抽出された試料溶液のアミノ酸分析装
置の試料溶液注入装置への送液を行う抽出送液ユニット
と、前記加水分解、抽出、送液に用いる流体の供給機構
とを備えていることを特徴とするタンパク質あるいはペ
プチドを加水分解する装置。
(1) A sample supply mechanism that supplies a sample carrier carrying a dried protein or peptide sample; a transport mechanism for the sample carrier; and a sample carrier that supplies an acid mixed vapor under pressure and heat to the dried sample. a reaction unit for carrying out a hydrolysis reaction by a solid phase-gas phase reaction, a transport mechanism for a sample carrier carrying a hydrolyzed sample, a cooling unit for the sample carrier carrying the hydrolyzed sample; a transport mechanism for a cooled sample carrier; an extraction liquid feeding unit that extracts a hydrolyzed sample from the sample carrier and sends the extracted sample solution to a sample solution injection device of an amino acid analyzer; An apparatus for hydrolyzing proteins or peptides, comprising a fluid supply mechanism used for the hydrolysis, extraction, and liquid feeding.
(2)前記試料担体はガラス外筒と、前記タンパク質あ
るいはペプチド試料の保持部としてのガラスを多孔質に
加工したもの、あるいはガラスのビーズを固めたものと
からなることを特徴とする請求項1記載のタンパク質あ
るいはペプチドを加水分解する装置。
(2) Claim 1 characterized in that the sample carrier consists of a glass outer cylinder and a porous glass material or solidified glass beads serving as a holding portion for the protein or peptide sample. An apparatus for hydrolyzing the mentioned proteins or peptides.
(3)前記試料担体の搬送機構は、1個あるいはそれ以
上の試料担体の連続的な搬送を行うことを特徴とする請
求項1記載のタンパク質あるいはペプチドを加水分解す
る装置。
(3) The apparatus for hydrolyzing proteins or peptides according to claim 1, wherein the sample carrier transport mechanism continuously transports one or more sample carriers.
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Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
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JPS61151157A (en) * 1984-12-25 1986-07-09 Seiko Instr & Electronics Ltd Hydrolysis of protein
JPS62220867A (en) * 1986-03-24 1987-09-29 Seiko Instr & Electronics Ltd Polypeptide hydrolyzing device
JPH01180457A (en) * 1988-01-13 1989-07-18 Seiko Instr & Electron Ltd Hydrolyzing device for protein or peptide

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