JPH0358733A - Bread making - Google Patents

Bread making

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JPH0358733A
JPH0358733A JP19223489A JP19223489A JPH0358733A JP H0358733 A JPH0358733 A JP H0358733A JP 19223489 A JP19223489 A JP 19223489A JP 19223489 A JP19223489 A JP 19223489A JP H0358733 A JPH0358733 A JP H0358733A
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yst
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誠 渡辺
Kazuo Fukuda
和郎 福田
Kozo Asano
行蔵 浅野
Hiroyuki Ueda
植田 浩行
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KH Neochem Co Ltd
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Abstract

PURPOSE:To make bread having a high flavor by employing a specific yeast belonging to the genus Saccharomyces. CONSTITUTION:A yeast [e.g. Saccharomyces.cerevisiae AEC 30 (FERM BP-2481)] belonging to the genus Saccharomyces, having S-(2-aminoethyl)cysteine resistance and having the producing ability of isoamyl alcohol and isobutyl alcohol is employed to make bread.

Description

【発明の詳細な説明】 産業上の利用分野 本発明は香りの高いパンの製造法に関する。[Detailed description of the invention] Industrial applications The present invention relates to a method for producing aromatic bread.

従来の技術 アルコール類特にイソアミアルコール及びイソブチルア
ルコールはパンの香気特性を決定する重要な或分である
ことが知られている(新版・醸造戊分一覧 日本醸造協
会 昭和52年)。これらアルコール類は、パンの製造
に用いられる酵母によって主に生或されることも知られ
ている(改訂「清酒酵母の研究」清酒酵母研究会 昭和
55年)酵母による高級アルコールの生或には2つの経
路が提唱されている〔ザ・イース} (The Yea
sts)Vol.3, p.179〜195,  アカ
デミック・プレス(Academic Press) 
(1970)] .即ち、■菌体外アミノ酸を酵母が取
り込み脱アミノ及び炭酸後、炭素数の1つ少ないアルコ
ールに還元されるEhrlich経路、■酵母のアミノ
酸生合或経路の中間体であるオキソ酸が、脱炭酸後、還
元される系である。
BACKGROUND OF THE INVENTION It is known that alcohols, especially isoamyl alcohol and isobutyl alcohol, are important factors in determining the aroma characteristics of bread (New Edition: List of Brewing Agents, Japan Brewing Association, 1978). It is also known that these alcohols are mainly produced by the yeast used in the production of bread (revised ``Research on Sake Yeast'', Sake Yeast Study Group, 1981). Two routes have been proposed.
sts) Vol. 3, p. 179-195, Academic Press
(1970)]. Namely, (1) the Ehrlich pathway in which yeast takes in extracellular amino acids, deaminates and carbonates them, and then reduces them to alcohols with one less carbon number; (2) oxoacids, which are intermediates in the yeast amino acid biosynthesis pathway, undergo decarboxylation. The system is then reduced.

■を利用した高級アルコールの生戊量の増加をアミノ酸
の添加によって図る試みは、パン酵母においても既に報
告されている〔イースト工業会技術報告、第51号、3
5〜46,昭和56年11月〕。
An attempt to increase the yield of higher alcohols by adding amino acids using (1) has already been reported for baker's yeast [Yeast Industry Association Technical Report, No. 51, 3
5-46, November 1982].

■を利用した高級アルコールの生或量の増加をアミノ酸
生合或系の活性増強によって図る試みは、イソアミルア
ルコール、酢酸イソアミル等の香気或分を多量に生戊す
る変異酵母を用いるアルコル飲料の製法として、ノルバ
リン耐性株を用いる方法〔ジャーナル・オブ・ザ・イン
スティテユート・オブ・ブリューインク(Journa
l of thelnstutite of Brew
ing)Vol.72, p.50〜56(1966)
:l、ノルハリン、ノルロインン耐性株を用いる方法〔
ジャーナル・オブ・ザ・ブリューインク・ソザエティ一
〇オブ0ジャパン(Journal of theBr
ewing Society of Japan) 、
Vol.76, No.12、p. 843〜847 
(1981) :l 、5’ − 5’−5’−}リフ
ルオ口−0.1..−ロイシン耐性株を用いろ方法(特
開昭62−Fi669号公報)等が知られている。
An attempt to increase the production amount of higher alcohol using (2) by enhancing the activity of amino acid bioassociation system is a method for producing alcoholic beverages using mutant yeast that produces a large amount of aromas such as isoamyl alcohol and isoamyl acetate. A method using a norvaline-resistant strain [Journal of the Institute of Brewing Inc.
l of thelnstuite of brew
ing) Vol. 72, p. 50-56 (1966)
: Method using a strain resistant to l, norhaline, and norloin [
Journal of the Brewing Society 10 of 0 Japan (Journal of theBr
ewing Society of Japan),
Vol. 76, No. 12, p. 843-847
(1981) :l, 5'-5'-5'-}Refluo-0.1. .. - A method using a leucine-resistant strain (Japanese Unexamined Patent Publication No. 62-Fi669) is known.

又、サッカロマイセス属に属し、S−(2 −−rミノ
エチル)システィン耐性を有する酵母を用い閑体内及び
閑体外にリジンの蓄積量を増加せしめた例が知られてい
る〔シャーナル・オブ・ファメンデイション・テクノロ
ジー(.1, Ferment Techno11o1
.55.  189 〜192(1977) 、及び同
誌Vol 56189〜1.92(1.978) 、特
開昭61−274676号公報]。
Furthermore, there is a known example in which yeast belonging to the genus Saccharomyces and having resistance to S-(2--rminoethyl)cysteine was used to increase the amount of lysine accumulated inside and outside the saccharomyces [Charnal of Famende et al. Technology (.1, Ferment Techno11o1
.. 55. 189-192 (1977), and the same magazine Vol. 56189-1.92 (1.978), Japanese Patent Application Laid-open No. 61-274676].

発明が解決しようとする課題 香り高いパンを得る方法が求められている。Problems that the invention aims to solve There is a need for a method to obtain aromatic bread.

課題を解決するための手段 本発明はサツ力口マイセス属に属し、s−(2アミノエ
チル)システィン耐性を有し、かつイソrミルアルコー
ル及びイソプチルアルコール生戊能を有する酵母を用い
ることを特徴とするパンの製造法に関する。
Means for Solving the Problems The present invention involves the use of a yeast that belongs to the genus Saccharomyces, has resistance to s-(2-aminoethyl) cysteine, and has the ability to produce iso-r-myl alcohol and isobutyl alcohol. Concerning the characteristic bread manufacturing method.

本発明に用いる酵母としては、ザッカ口マイセス属に属
し、S− (2−アミンエチル)シスデイン耐・1テ1
:を有し、かつイソアミルアルニフール及びイソブヂル
アルコール生成能を有するものであればいずれも用いら
れる。
The yeast used in the present invention belongs to the genus Zacchatomyces and is resistant to S-(2-amineethyl)cysdeine.
: Any compound having the following and the ability to produce isoamyl alnifur and isobutyl alcohol can be used.

真体例としてはヅソカロマイセス・セレビシェ(Sac
charomyceS   cCrevi Siae 
 ) A E C  3  0  (FliRl.IB
P−2481) (以F, AIE[:30と称ず)等
があげられる。
A true example is Dusocalomyces cerevisiae (Sac
charomyceS cCrevi Siae
) A E C 3 0 (FliRl.IB
P-2481) (hereinafter referred to as F, AIE[:30), etc.

かかる酵母は、例えは市販の酢1迂(例えば、バン酵母
、ビール酵母、ワイン酵母、?n清酵母、焼酎酵母等)
に公知の変異誘導法、例えば紫外線、放射線等の照射ま
たはN−メチル−N′−ニトロN−ニトロソクアニシン
、エチルメタンスルボネト等の薬剤4接触さ11−る方
法を適宜適用して得ることができる。
Such yeast is, for example, commercially available vinegar (e.g., ban yeast, beer yeast, wine yeast, ?n sei yeast, shochu yeast, etc.)
can be obtained by appropriately applying known mutagenesis methods such as irradiation with ultraviolet rays, radiation, etc., or contact with drugs such as N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoquanisine, ethylmethanesulfonate, etc. be able to.

次に変異株(八E[:30)の取得例を示す。Next, an example of obtaining a mutant strain (8E [:30)] will be shown.

Y P I)培地(酵母エキスl%、ペプトン2%、ぶ
どう糖2%、p H 6. 0 )で、30℃、16時
間培養したザッカ口マイセス・セレビジェ ダイヤ・イ
ーストYST(パン酵母・協和発酵工業社製以下y s
 ′rと称す)を0.2M  リン酸緩衝液(p1{8
.0)に菌体濃度106細胞/mlになるように懸濁し
た。
YST (baker's yeast, Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd.) cultured at 30°C for 16 hours in YPI) medium (yeast extract 1%, peptone 2%, glucose 2%, pH 6.0) Manufactured by Ys
'r) in 0.2M phosphate buffer (p1{8
.. 0) to a bacterial cell concentration of 106 cells/ml.

ついで該懸濁液に、エヂルメタンスルフォ不トを最#濃
度が30μρ/mlとなる様に添加し、30℃で60分
官放置した後、遠心分離で菌体を集めた。該菌体を5%
のチオ硫酸ナ} IJウl、水溶液で洗浄した後、さら
に、リン酸緩衝液( 1) H60)で洗浄した。該菌
体をs−(2−アミンエチル)システィン塩酸塩10m
g/mlを含有する平板培地(ディフコ社製バクト・イ
ースト・ナイトロシェン・ベース0.67%、グルコー
ス2%、寒天15%)で30℃、4日間培養した。
Next, edylmethane sulfonate was added to the suspension to give a maximum concentration of 30 μρ/ml, and after standing at 30° C. for 60 minutes, the bacterial cells were collected by centrifugation. 5% of the bacterial cells
After washing with an aqueous solution of sodium thiosulfate (IJ), it was further washed with a phosphate buffer (1) H60). The bacterial cells were treated with 10 m of s-(2-amineethyl)cystine hydrochloride.
The cells were cultured at 30°C for 4 days in a plate medium (Bacto Yeast Nitroshen Base 0.67%, glucose 2%, agar 15%, manufactured by Difco) containing g/ml.

寒天平板上に出現したコロニーから優良変異株としてA
EC30を選択した。AEC30は工業技術院微生物工
業技術研究所に平成元年6月15+1 イ’;lで国際
寄託され、前記FEIIII BP番号が与えられ−C
いる。
From the colonies that appeared on the agar plate, A was selected as an excellent mutant strain.
EC30 was selected. AEC30 was internationally deposited with the Institute of Microbial Technology, Agency of Industrial Science and Technology on June 15, 1989, and was given the FEIII BP number -C.
There is.

各酵母の培養液の香気或分は、次の方法で測定した。Y
STおよびAEC30をY P D培地に30℃で2日
間静置培養した。得られた培養液の香気威分をヘッド・
スペース・ガス・クロマトクラフィー〔ジャーナル・オ
ブ・サ・ブリューインク・ソサエディー・」ブ・シャパ
ン(Journal ofthe Brewing S
ociety of Japan) 、Vol.68,
 11.59〜61(1973)]により定量した。
The aroma of each yeast culture solution was measured by the following method. Y
ST and AEC30 were statically cultured in YPD medium at 30°C for 2 days. The aroma and content of the obtained culture solution is transferred to the head.
Space Gas Chromatography [Journal of the Brewing Society] Bou Chapin (Journal of the Brewing S.
society of Japan), Vol. 68,
11.59-61 (1973)].

その結果を第1表に示す。The results are shown in Table 1.

第    1    表 イソブチルアルコール   22   34イソ了ミル
アルコール   38   47つぎに、AEC30お
よびYSTの薬剤に対する感受性について調べた。
Table 1 Isobutyl alcohol 22 34 Isobutyl alcohol 38 47 Next, the sensitivity of AEC30 and YST to drugs was investigated.

ハクト・イースト・ナイ}・ロジェン・ベース(ディフ
コ社製)にS−(2  アミンエチル)システインを第
2表に示す各濃度に混和し寒天平板培地とした。この培
地にΔEC30及びYSTを接種し、28℃で2日後の
生育を観察した。その結果を第2表に示す。
S-(2 amine ethyl) cysteine was mixed with Hakuto Yeast Nai} Rogen Base (manufactured by Difco) at various concentrations shown in Table 2 to prepare an agar plate medium. ΔEC30 and YST were inoculated into this medium, and growth was observed after 2 days at 28°C. The results are shown in Table 2.

第    2    表 0     5.0.    10.OYST    
   +       +AEC30    +   
    −1−       +(注)+.生育、  
−:非生育 つぎに、AEC30及びYSTのリジン生戊能について
調べた。
Table 2 0 5.0. 10. OYST
+ +AEC30 +
-1- + (Note) +. growth,
-: Non-growth Next, the ability of AEC30 and YST to produce lysine was investigated.

両株をバクト・イースト・ナイトロジエン・ベス培地で
香気的に培養し、各々の菌体内外のアミノ酸をアミノ酸
アナライザーで分析した。その結果を第3表に示す。尚
、表示は、菌体外アミノ酸については、mg%0菌体内
アミノ酸については、菌体から熱水抽出したものを閑体
乾燥重量当りで表したものである(mg/g)。
Both strains were cultured aromatically in Bacto Yeast Nitrogen Bess medium, and amino acids inside and outside each bacterial cell were analyzed using an amino acid analyzer. The results are shown in Table 3. In addition, the expression is mg% for extracellular amino acids, and the expression for intracellular amino acids is expressed per dry weight of empty cells (mg/g), which is obtained by hot water extraction from bacterial cells.

第 3 表 アスパラギン酸 トレオニン セ   リ   ン クルタミン酸 グ  リ  シ  ン アフニン リ   ジ   ン アルギニン 菌体外      菌体内 A[!C30   YST   A[lC30   Y
STNO    ND    206   13111
[]    ND    131   1.08ND 
   NO    O.81   0.77ND   
 ND    9,00   4.690.50   
0.49   2,19   1.550,62   
0.70   6.25   2.77ND    N
D    1.56   1.63NO    NO 
   6,25   4.15第3表から明らかな様に
、AEC30においては、菌体内及び菌体外ともにリジ
ンの増加はみられない。
Table 3 Aspartate Threonine Serine Cultamic Acid Glycine Afnin Lysine Arginine Extracellular Intracellular A[! C30 YST A[lC30 Y
STNOND 206 13111
[]ND 131 1.08ND
NO O. 81 0.77ND
ND 9,00 4.690.50
0.49 2,19 1.550,62
0.70 6.25 2.77ND N
D 1.56 1.63 NO NO
6,25 4.15 As is clear from Table 3, in AEC30, no increase in lysine was observed both inside and outside the bacterial cells.

つぎに、パンの製造法について説明する。Next, the bread manufacturing method will be explained.

〔パン酵母の培養〕[Culture of baker's yeast]

酵母を炭素源、窒素源、無機物、アミノ酸、ビタミン等
を含有する通常の培地中、好気的条件下、pHを調整し
つつ培養を行い、菌体を回収、洗浄を行えばパン製造に
適した酵母菌体を得ることが出来る。
If yeast is cultured in a normal medium containing carbon sources, nitrogen sources, inorganic substances, amino acids, vitamins, etc. under aerobic conditions while adjusting the pH, and the cells are collected and washed, they are suitable for bread production. It is possible to obtain yeast cells.

培地中の炭素源としてはグルコース、シュクロス、澱粉
加水分解物、糖蜜等が使用できるが、特に廃糖蜜が好適
に用いられる。
As the carbon source in the medium, glucose, sucrose, starch hydrolyzate, molasses, etc. can be used, and blackstrap molasses is particularly preferably used.

窒素源としては、アンモニア、塩化アンモニウム、硫酸
アンモニウム、炭酸アンモニウム、酢酸アンモニウム、
尿素、酵母エキス、コーン・スチプ・リカー等が使用で
きる。無機物としてはリン酸マグ不シウム、リン酸カリ
ウム等が、ビタミンとしては、パントテンサン、チアミ
ン等が使用できる。培養は、硫加培養が適当である。
Nitrogen sources include ammonia, ammonium chloride, ammonium sulfate, ammonium carbonate, ammonium acetate,
Urea, yeast extract, corn steep liquor, etc. can be used. As the inorganic substance, magnonium phosphate, potassium phosphate, etc. can be used, and as the vitamin, pantothesan, thiamine, etc. can be used. Sulfurization culture is suitable for culturing.

〔製パン法〕[Bread making method]

パンの材料は、小麦粉を主原料とし、食塩、油脂、水及
び前記で得られた酵母を加えてパン生地どする。さらに
、必要によって、該パン生地に砂糖、脱脂肪乳、製パン
改良剤(イースト・フード)卵等を加えても良い。代表
者な製パン法には、直捏法と中種法があり、前者は、全
原料を最初からq 混ぜる方法であり、後者は,まず小麦粉の一部に酵母と
水を加えて中種をつくり、発酵後に残りの原料を合わせ
る方法である。
The main ingredient for bread is wheat flour, and the dough is made by adding salt, oil, water, and the yeast obtained above. Furthermore, if necessary, sugar, skim milk, bread improving agents (yeast food), eggs, etc. may be added to the bread dough. Typical bread-making methods include the direct kneading method and the dough method.The former involves mixing all the raw materials from the beginning, while the latter involves first adding yeast and water to a portion of the flour to make dough. This is a method where the remaining ingredients are combined after fermentation.

例えば、直捏法では、全原料を混捏した後、25〜30
℃で発酵し、分割、ねかしくベンチ〉を行い、整形、型
詰めする。ホイロ(35〜40℃)を経た後、焼或(2
00〜240℃)する。
For example, in the direct kneading method, after kneading all the raw materials,
Fermented at ℃, divided, benched, shaped, and molded. After passing through proofing (35-40℃), baking (2
00-240℃).

以下に実施例を示す。Examples are shown below.

実施例1 酵母として、AEC30およびYSTを用い、次の方法
により30j2ジャー・ファーメンターを使用して培養
を行った。
Example 1 AEC30 and YST were used as yeast and cultured using a 30j2 jar fermenter according to the following method.

〔種培養] YPD培地、30℃、振盪 24時間〔本
培養〕糖蜜     3.i(糖分30%〉尿素   
  20g KH2P04   5g 指数硫加培養 10時間 pHgllm、pfl4. 5、アンモニアで調節培養
温度 30℃、通気量 30l/分攪拌   3 6 
0 rpm 10 酵母は、培養後、水洗、脱水して、圧搾酵母どした。
[Seed culture] YPD medium, 30°C, shaking for 24 hours [Main culture] Molasses 3. i (30% sugar) urea
20g KH2P04 5g Exponential sulfurization culture 10 hours pH gllm, pfl4. 5. Adjustment with ammonia Culture temperature: 30℃, aeration volume: 30l/min Stirring 3 6
0 rpm 10 After culturing, the yeast was washed with water, dehydrated, and pressed into yeast.

上記培養酵母を用いて、後記配合及び工程にしたがって
食パンを製造した。
Using the above cultured yeast, bread was manufactured according to the formulation and process described below.

(配  合) 強力小麦粉     100 (重量部)酵    母
           3イースト・フード   01 砂    糖          6 食    塩         18 脱脂粉乳     2 ショートニンク      4 水              62 (工  程) 生地温捏 低速3分、中速6分、中高速5分(S[:1
51型、関東混合機工業■製)捏上げ温度:27℃ フロアタイム゜28℃、40分 ベンチタイム.室温15分 ボ   イ   ロ  4 0℃、湿度8 5%、 5
 0分11 焼     或  2 1 5℃、 30分得られたパ
ンの奸気成分は次のようにして測定した。20gの粉砕
したパンを100ml容パイアル瓶に入れ、密栓後50
℃、30分加温した後ヘッド・スペース・ガス・クロマ
トクラフィーによって定量した。
(Composition) Strong wheat flour 100 (parts by weight) Yeast 3 Yeast food 01 Sugar 6 Salt 18 Skimmed milk powder 2 Short garlic 4 Water 62 (Process) Dough warm kneading 3 minutes on low speed, 6 minutes on medium speed, 6 minutes on medium speed 5 minutes (S[:1
Type 51, manufactured by Kanto Mixing Machine Industry ■) Rolling temperature: 27℃ Floor time: 28℃, 40 minutes bench time. Boil for 15 minutes at room temperature 40℃, humidity 85%, 5
Baking for 0 minutes 11 or 21 5°C for 30 minutes The harmful components of the obtained bread were measured as follows. Put 20g of crushed bread into a 100ml vial, and after sealing,
After heating at ℃ for 30 minutes, the amount was determined by head space gas chromatography.

結果を第4表に示す。The results are shown in Table 4.

第4表 YST    AEC 3 0 p H             5. ].    
   5. 1イソブチルアルコール(ppm)   
    1  ]..  ].        1  
7.3イソアミルアルII−IL(ppm)     
  l  5.  0        2  3.  
(]西1酸 イソアミル(ppm)      f敦 
 量      {¥ifilカブロン酸 Jチル(ρ
pm)      r¥i.   量      if
i   量表から明らかなごとく、酵母としてAEC3
0を用いるこどにより,YSTを用いる場合に比べて香
りの高いパンが得られた。
Table 4 YST AEC 30 pH 5. ].
5. 1 isobutyl alcohol (ppm)
1]. .. ]. 1
7.3 Isoamylal II-IL (ppm)
l 5. 0 2 3.
(] Isoamyl Nishi 1 acid (ppm) f Atsushi
Amount {¥ifil J-chill cabroate (ρ
pm) r¥i. amount if
i As is clear from the quantity table, AEC3 as yeast
The use of YST yielded bread with a higher aroma than the use of YST.

発明の効果 本発明により香りの高いパンを得ることができ12Effect of the invention According to the present invention, bread with a high aroma can be obtained12

Claims (1)

【特許請求の範囲】[Claims] サッカロマイセス属に属し、S−(2−アミノエチル)
システイン耐性を有し、かつイソアミルアルコール及び
イソブチルアルコール生成能を有する酵母を用いること
を特徴とするパンの製造法。
Belongs to the genus Saccharomyces, S-(2-aminoethyl)
1. A method for producing bread, characterized by using yeast having cysteine resistance and the ability to produce isoamyl alcohol and isobutyl alcohol.
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