JPH03291240A - 残留水晶体物質除去補助剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 「産業上の利用分野」 本発明は、白内障手術の際残留する水晶体物質を除去す
るのに有用な製剤を提供するものである。

「従来技術」 白内障は、高齢者に多く見られる難治性眼疾患で、治療
剤の研究も種々行われているが、最終的には外科手術に
委ねられているのが現状である。白内障手術は古くから
行われており、手術法についても様々工夫されている。

方法は種々あるが、混濁した水晶体をいかに容易に、か
つ完全に摘出するか、合併症をいかに防ぐか、また術後
治癒をいかに速く、良好にするかが課題である。混濁し
た水晶体を除去する方法として、最近超音波乳化吸引法
が汎用される様になってきている。

この方法は水晶体嚢内の白内障に超音波を当て乳化し吸
引するものであり、小さな切開創ですむ為、創治癒に関
連した合併症を少なくし、術後の治癒も速いというメリ
ットがある。水晶体を摘出した後、眼鏡やコンタクトレ
ンズにより視力を持たせる方法がとられていたが、最近
では眼内レンズにより視力を回復させる方法が汎用され
ている。

「発明が解決しようとする課題」 超音波乳化吸引法は非常に有用な方法であるが、周辺の
組織に影響を及ぼすことなく、混濁した水晶体を水晶体
嚢内から完全に除去するには高度な技術が要求される。

特に、水晶体上皮細胞の除去は難しく、又、水晶体上皮
細胞が残存すると、それが増殖し後発白内障、残留前嚢
混濁、眼内レンズ偏位、フィブリン反応、水晶体過敏性
眼内炎といった術後合併症の原因となる。そこで、水晶
体上皮細胞のような残留水晶体物質の簡単な除去方法の
開発が望まれていた。

「課題を解決するための手段」 本発明者等は、残留水晶体物質の簡単な除去方法を鋭意
研究した結果、蛋白質分解酵素を水晶体嚢内に注入して
、水晶体上皮の細胞間結合及び嚢との結合を弛緩せしめ
れば、超音波乳化吸引法を用いても完全な除去が困難で
あった水晶体上皮細胞を、非常に弱い吸引で除去できる
ことを見い出した。さらに、蛋白質分解酵素が水晶体嚢
外に出て、周辺組織に影響を与えることを防ぐため、粘
弾性物質に溶解して用いると、より良好な手段となり得
ることを見い出した。

「発明の構成」 本発明は、白内障の手術において混濁した水晶体を摘出
する際、蛋白質分解酵素を用い水晶体上皮等の残留水晶
体物質を容易にかつ安全に除去する技術に関するもので
ある。

混濁した水晶体を摘出するのに、超音波乳化吸引法は非
常に有用な方法であるが、残留水晶体物質の一種である
水晶体上皮を周辺の組織に影響を及ぼすことなく除去す
るのには高度な技術が必要とされている。水晶体上皮細
胞は増殖能を有し、術後に残存すると後発白内障、残留
前嚢混濁、眼内レンズ偏位、フィブリン反応、水晶体過
敏性眼内炎といった術後合併症の恐れがあるので、その
除去には注意を払わねばならない。しかし、水晶体上皮
細胞は水晶体嚢と密着しており、嚢を破壊せずに細胞の
みを除去するのは容易ではない。

そこで、本発明者等は水晶体上皮の細胞間結合及び嚢と
の結合を弛緩せしめれば、容易に除去できるのではない
かとの発想を基に鋭意研究した結果、蛋白質分解酵素を
用いると容易に除去できることを見い出した。

一方、蛋白質分解酵素は周辺眼内組織に対しても影響を
与えることに配慮する必要がある。特に毛様重帯に影響
を与え、それを融解するような事態になると、後戻眼内
レンズの嚢内固定ができなくなるし、完全に融解すれば
水晶体嚢という支持組織がなくなる結果、眼内レンズ挿
入そのものができなくなる。さらに、挿入できたとして
ち術後脱臼する危険性が高くなる。

そこで、蛋白質分解酵素の選択及びその濃度の設定、並
びに酵素を水晶体嚢内に留める工夫が必要となる。

蛋白質分解酵素としては、バチルス・ポリミキサ（Ｂａ
ｃｉｌｌｕｓ　ｐｏｌｙｍｙｘａ　　以下同じ）由来の
蛋白分解酵素（例えばディスバーゼ：商品名）、ａ−キ
モトリプシン、トリプシン、エラスターゼ、ウロキナー
ゼ等が挙げられるが、バチルス・ポリミキサ由来の蛋白
分解酵素、α−キモトリプシンが好ましく、より好まし
くはバチルス・ポリミキサ由来の蛋白分解酵素である。

濃度は水晶体上皮細胞の状態等により異なるが、バチル
ス・ポリミキサ由来の蛋白分解酵素（例えばデイスパー
ゼ：商品名）の場合は通常１００　（００００ｕｎｉｔ
／ｍ１（ｐＨ７，５，３０℃にてカゼインより１分間に
１０ｇのチロシンを遊離する酵素量を１　ｕｎｉｔとす
る）、好ましくは１０００−５０００　ｕｎｉｔ／ｍｌ
、　ａ−キモトリプシンの場合は通常１／１０００〜１
１５００００希釈液、好ましくは１１５０００〜ｌ／１
００００希釈液を用いることができ、他の蛋白質分解酵
素の場合、上記の酵素の活性に準じた濃度で用いること
ができる。

一方、水晶体嚢の透過性は物質の分子量と関係がある。

例えば、分子量２５００のデキストランは嚢を通過でき
るが、分子量が１００００のデキストランの透過率は１
／３に減少するとされている。従って、分子量３５００
０のディスバーゼ（商品名）や、分子量２５０００のａ
−キモトリプシンの透過率は相当低いものと考えられ、
注入後除去するまで２〜５分位であればそれらの酵素は
水晶体嚢を透過して嚢外へ漏出し毛様重帯に影響を与え
ることは考えられない。重要なのは白内障を除去するた
めに開けた水晶体嚢の開口部からの漏出を防ぐことであ
る。このため、蛋白質分解酵素を高分子量の粘弾性物質
に溶解して用いると、開口部を通しての嚢外への漏出を
効果的におさえることができる。

粘弾性物質としては臨床に用いられている物質を用いる
ことができ、ヒアルロン酸またはその塩類、メチルセル
ロース、ヒドロキシメチルセルロース、カルボキシビニ
ルポリマー、ポリビニルピロリドン、ポリビニルアルコ
ール、ポリアクリルアミド、キチン、コラーゲン等が挙
げられ、それらを０．１〜５％程度の生理食塩水溶液に
して用いることができるが、銀組織の保護の点から、ヒ
アルロン酸ナトリウムを用いるとより好適である。

蛋白質分解酵素を製剤化するのに特別な技術は必要では
なく、所望の量の蛋白質分解酵素を生理食塩水又は粘弾
性物質の生理食塩水溶液に溶解すればよい。

「実験例」 実験例１ 蛋白質分解酵素の代表例として、α−キモトリプシン又
はディスパーザ（商品名）を用い、ヒト水晶体上皮細胞
に対する効果を検討した。

（実験方法） 白内障患者（２４名、２４［１りに円形前嚢切開切除術
を施した際に摘出した水晶体前嚢切片（直径的６ｍｍ）
をＭＥＭ溶液中に入れる。１〜３時間後、上皮細胞が充
分付着していることを倒立位相差顕微鏡で確認する。次
いで、ＭＥＭを吸引除去し、生理食塩水で１：１０００
０及び１　：　５０００に希釈したα−キモトリプシン
１ｍｌ又はディスパーザ１０００．２５００及び５００
０　ｕｎｉｔ／　ｍｌを含む生理食塩水１ｍｌを各々加
え、倒立位相差顕微鏡で経時的に観察する。２分後、ビ
ンセットではさみ６〜７回動かして洗った後、再び位相
差顕微鏡で観察した。コントロールとして、生理食塩水
１ｍｌ中に漬けた前嚢片を同様の操作をして比較した。

（結果） 静置中の観察： α−キモトリプシン又はディスパーザを加えると、細胞
境界が２分間の観察中徐々に明確になり、細胞輪郭が鮮
明となった。これは、蛋白質分解酵素により接合部が融
解し弛くなるためと思われる。コントロール群ではこの
ような変化は認められなかった。

数回洗った後の観察： １７１００００倍希釈のα−キモトリプシンでは個々の
細胞は前嚢上にほとんど認められず、数ケ所で集合して
いた。１　：　５０００倍希釈のα−キモトリプシンで
は細胞はほぼ完全に前嚢上から脱落していた。

ディスパーザでは５０００　ｕｎｉｔ／　ｍｌの場合、
細胞は全く前嚢上に認められず完全に除去されていた。

２５００　ｕｎｉｔ／　ｍｌでは個々に散在して付着し
ているものもあるがほぼ細胞はすべて脱落していた。ｉ
ｏｏ。

ｕｎｉｔ／ｍｌでは高濃度のものに比べて残存細胞は多
く認められたが、コントロール群とは明らかに差異があ
った。

一方、コントロール群では静置中の場合と変わらず細胞
は前嚢に付着したままであった。

実験例２ 蛋白質分解酵素の代表例としてディスパーザを用い、家
兎Ｉ引こおける効果を検討した。

（実験方法） ２〜３ｋｇの家兎２羽を用い麻酔下で実験を行った。

Ｉ　ＩＩＮは嚢内超音波乳化後Ｉ／Ａｍ１ｎ（潅流吸弓
チップ）で前嚢下の上皮を除去した（コントロール群と
する）。

地固は、ディスパーザ２５００ｕｎｉｔ／ｍｌを含む生
理食塩水１ｍｌを嚢内に注入し、２分径Ｉ／Ａｍ１ｎで
上皮を吸引除去した。

術後直ちに層殺し、水晶体嚢を毛様体及び毛様重帯より
切除し、倒立位相差顕微鏡で観察した。

（結果） ディスパーザを加えた眼では、上皮細胞は良好に除去さ
れており、残存細胞も殆ど見られなかった。

一方、コントロール群では軸部前嚢下ではかなり除去さ
れていたものの、多くの細胞が赤道部に残存していた。

尚、ディスパーザを使用した眼では毛様重帯の融解、水
晶体嚢の遊離が見られた。これはディスパーザが前嚢開
口部から漏出したために起こったものと考えられる。

実験例３ 蛋白質分解酵素の代表例としてディスパーザを用い、粘
弾性物質（ヒアルロン酸ナトリウムを例にとる）に溶解
して、ヒト水晶体上皮細胞に対する効果を検討した。

（実験方法） 白内障患者に円形前嚢切開切除術を施した際に摘出した
水晶体前嚢切片（直径５〜６ｍｍ）をＭＥＭ培地に保存
する。この切片をディスパーゼ約３５００　ｕｎｉｔ／
ｍｌを含む１．５％ヒアルロン酸ナトリウム（分子量約
２００万）生理食塩水溶液中に３分間又は５分間浸した
後、ビンセットではさみＭＥＭ培地中で軽く振って洗浄
する。洗浄後に倒立位相差顕微鏡で水晶体上皮細胞の残
留度合を観察した。

（結果） 浸した時間が３分間及び５分間のいずれの場合でもほと
んどの上皮細胞が除去されていた。

尚、顕微鏡観察において、水晶体嚢自体の変性は認めら
れなかった。

「発明の効果」 蛋白質分解酵素を水晶体嚢内に注入すると、上皮の細胞
間結合及び嚢との結合が弛緩し、非常に弱い吸引で水晶
体上皮細胞が除去できることとなる。

また、蛋白質分解酵素を粘弾性物質に溶解して用いると
、水晶体嚢の開口部からの漏出をより効果的に防ぐこと
ができる。

本発明は、白内障手術において水晶体上皮細胞等の残留
水晶体物質を容易にかつ完全に吸引除去するのに効果的
な医薬品を提供するものである。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １）蛋白質分解酵素を有効成分とする残留水晶体物質除
   去補助剤。 ２）蛋白質分解酵素がバチルス・ポリミキサ（Ｂａｃｉ
   ｌｌｕｓｐｏｌｙｍｙｘａ）由来の蛋白分解酵素である
   特許請求の範囲第１）項記載の残留水晶体物質除去補助
   剤。 ３）蛋白質分解酵素を粘弾性物質に溶解して用いること
   を特徴とする残留水晶体物質除去補助剤。 ４）蛋白質分解酵素がバチルス・ポリミキサ（Ｂａｃｉ
   ｌｌｕｓｐｏｌｙｍｙｘａ）由来の蛋白分解酵素である
   特許請求の範囲第３）項記載の残留水晶体物質除去補助
   剤。 ５）粘弾性物質がヒアルロン酸ナトリウム水溶液である
   特許請求の範囲第３）項記載の残留水晶体物質除去補助
   剤。