JPH03195485A - エレクトロポレーション装置 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ［産業上の利用分野］ この発明は細胞懸濁液に高圧直流パルスを印加放電させ
て細胞を局所的に破砕し細胞内に遺伝子を導入する等に
使用されるエレクトロポレーション装置に関するもので
ある。

［従来の技術］ 細胞およびＤＮＡの懸濁液に高電圧放電を行い動物や植
物の細胞等にクーロン化ＤＮＡを導入する方法が知られ
ており、高電圧パルスを利用して細胞融合や遺伝子導入
をするエレクトロポレーション装置が市販されてきた。

このような装置では多くの場合燐酸塩緩衝食塩（ＰＢＳ
）水に細胞を懸濁させ、これにクーロンＤＮＡを添加す
るものであるが、遺伝子導入に必要な電圧、電流の大き
さは細胞およびＤＮＡの種類によって条件が異なり、高
い導入効率を得るためには高電圧の印加を適確に制御し
なければならない。

このような高電圧パルスを細胞懸濁液に印加する技術の
一つとして特開昭６３−３５１７７号公報にコンデンサ
に充電された高電圧をスイッチング素子である半導体制
御整流器ＳＣＲを介して前記細胞懸濁液に放電させる技
術が開示されている。

このような技術のエレクトロポレーション装置には、第
１１図に示すように５ＣＲ１〜３を縦続接続してこれら
ＳＣＨのゲートにトランスＴＧを介してトリガー電圧Ｖ
ｇを加えて導通状態にし、放電用コンデンサＣに蓄えら
れた電荷を電極Ｐより細胞懸濁液に印加放電させて電極
１間に介在する懸濁液内の細胞にＤＮＡを導入する方式
するものがある。

また高電圧をコンデンサＣに充電する方法として第１２
図に示すように交流電源をスライダックＶＴ、電源トラ
ンスＴを通して昇圧し、さらに整流器ＲＣ１，２とコン
デンサＣ１，２とで直流化して得られる直流高電圧Ｅを
抵抗Ｒ３および開閉器ＳＷを介して放電用コンデンサＣ
に所定の電圧Ｅを充電しするものが知られており、電圧
がＩＫ■程度、電流は５０Ａ程度供給できる装置が製作
されている。

所定の電圧Ｅを得る方法としては、第１２図に示すよう
な交流電圧をスライダックＶＴにより可変して行う方法
のほか高圧直流電源の電圧設定用の可変抵抗による方法
も知られている。

［発明が解決しようとする課題］ 上記した従来の装置の問題点の第一は放電用のスイッチ
ング素子として立ち上がり時間が１０μｓ程度と比較的
遅いＳＣＲを使用しているのでＯＮ動作の遅れにより第
７図の破線曲線に示すように懸濁液に印加される実際の
放を電圧のピーク値Ｖがコンデンサに充電した設定電圧
Ｅより低くなってしまう問題がある。

第二点としては細胞懸濁液に印加される放電波形の内で
細胞内へのＤＮＡ導入に寄与する部分は放電初期の高電
圧部分であるが、従来の装置はスイッチング素子として
ＳＣＲを用いていたので放電途中で出力をＯＦＦするこ
とができず、したがって時間幅の短い高電圧波形の繰り
返し時間を短縮して導入効率を高めることができなかっ
た。

第三点としてはコンデンサの充電電圧が所定の電圧Ｅ、
つまり第６図のｂ充電曲線に示すように所定の飽和電圧
Ｅに達するまでに長い時間ｔ２を必要としていたことで
、このため繰り返し放電を出力する場合にその放電出力
間隔が充電時間で制約され、高圧放電の出力間隔を短縮
することができないという問題もあった。

第四点としては懸濁液に印加される放電波形の時定数も
ピーク電圧値と共にＤＮＡ導入のための重要なファクタ
ーであるが、この時定数が予測値と実際の実効値とで大
幅にずれてしまうことである。このことは細胞を含む懸
濁液の抵抗値が細胞濃度や印加電圧値で変動するためで
、実効的な時定数を求めるにはオシロスコープ等を用い
て波形観測しながら行う必要があるが、このような操作
は傾雑であり一般的に行なうに適した方法ではない。

このように従来の装置は多くの問題を含んでいるが、こ
の発明はこれらの問題を解決するためになされたもので
、印加放電に対するスイッチング特性を大幅に向上させ
ると共に放電波形のピーク値と時定数を正確に把握して
、ＤＮＡ導入効率を向上させたエレクトロポレーション
装置を提供することを目的としている。

［課題を解決するための手段］ この発明は、高圧直流電源と、この高圧直流電源の出力
を放電用コンデンサに充電すための開閉手段と、この開
閉手段のＯＮ、ＯＦＦを制御する充電電圧制御手段と、
前記放電用コンデンサに充電された電荷を電極を介して
細胞懸濁液に印加放電するスイッチング制御手段と、こ
のスイッチング制御手段のＯＮ、ＯＦＦを制御する手段
とを備えたエレクトロポレーション装置において、前記
スイッチング制御手段のＯＮ、ＯＦＦ用のスイッチング
素子にＭＯＳＦＥＴを使用することを特徴としている。

また上記と同様な構成のエレクトロポレーション装置に
おいて、上記高圧直流電源の出力電圧は上記放電用コン
デンサに充電すべき設定電圧より所定値高く設定すると
共に上記充電電圧制御手段は電圧値検知手段を備え前記
放電用コンデンサに対する充電電圧が前記設定電圧に達
したことを検知して上記開閉手段をＯＦＦに制御するこ
とも特徴としている。

さらに上記と同様な構成のエレクトロポレーション装置
において、細胞懸濁液に印加する放電波形のピーク電圧
値および同波形の時定数を測定し表示する回路を具備し
たことも特徴としている。

［作用］ このように構成することにより、スイッチング素子に立
ち上がり時間が短いＭ　ＯＳ　Ｆ　Ｅ　Ｔを使用してい
るのでスイッチング特性を向上させることができる。

またスイッチング素子にＭ　ＯＳ　Ｆ　Ｅ　’Ｉ’を使
用することによりＯＮ、ＯＦＦの制御が容易になり実効
的な時定数を短く設定でき、放電繰り返し時間を短くす
ることもできる。

また放電用コンデンサに対する充電時間を早くすること
ができるので放電繰り返し時間を短くすることができる
。

さらに懸濁液に印加される放電波形のピーク値と時定数
が適確に把握され、遺伝子導入条件を正確に設定できる
。

［実施例］ 以下図面にしたがってこの発明の一実施例を説明する。

第１図はこの実施例の構成を示すブロック回路であり、
放電用の高圧直流電圧を発生する高圧直流電源１の直流
出力は、水銀リレーやＳＣＲで構成されそのＯＮ、ＯＦ
Ｆは高圧直流電源１の出力電圧値にもとすいて充電電圧
制御回路２により制御される開閉器３を介して放電用コ
ンデンサＣを充電するように構成されており、さらにこ
のコンデンサＣはＭｏ５ｔ”ＥＴをスイッチング素子と
しそのＯＮ、ＯＦＦは制御回路４により制御されるスイ
ッチング制御回路５の入力Ｉに、またスイッチング制御
回＃Ｉ５の出力■は装置の出力端子を通してコンデンサ
Ｃに充電された高圧直流電圧を細胞懸濁液を収容するチ
ャンバー６内に設けられ懸濁液に電圧を印加するための
電極Ｐに接続されている。さらにスイッチング制御回路
５の出力■は懸濁液に印加する電圧のピーク値と放電パ
ルスの時定数を測定するピーク電圧＆時定数測定回路７
に接続されており、この測定回路７で測定されたピーク
値や時定数などの測定データはデータ表示回路８により
表示されるようになっている。

またこれら高圧直流電源１．充電電圧制御回路２、スイ
ッチング制御回路５．ピーク電圧＆時定数測定回路７の
それぞれを制御回路４を介して操作制御するための操作
パネル９が設けられて装置が構成されている。

第２図は同実施例の高圧直流電源１と充電電圧制御回路
２の概略構成を示す回路図である。高圧直流電源１は交
流１００Ｖ電源を電源トランスＴで昇圧し整流器ＲＣ１
，ＲＣ２平滑用のコンデンサＣ１，Ｃ２により倍電圧整
流し、出力直流電圧値としては放電用のコンデンサＣに
設定充電する電圧Ｅより所定値高い電圧値ＶＴに設定さ
れている。

なお、Ｒ１，Ｒ２は電圧安定用でＲ３は出力電流制限用
の抵抗である。

充電電圧制御回路２は高圧直流電源１の出力電圧を分圧
するための抵抗Ｒ４および調整用抵抗Ｒｖ１と、この調
整抵抗ＲＶ１からの電圧値を基準電圧発生器２ａの基準
電圧と比較し高圧直流電源１の出力電圧がコンデンサＣ
に設定充電すべき電圧Ｅに達したか否かを判定するため
の電圧比較器２ｂと、この電圧比較器２ｂの出力と制御
回路４からの制御信号とにより開閉器３をＯＮまたはＯ
ＦＦするスイッチ駆動回路２Ｃとで構成されている。

スイッチング制御回路５の単位ユニットＭＯ３は第３図
に示すような回路構成になっている。同図において二点
鎖線に中はホトカプラＰＣを示しており、ホトカプラＰ
Ｃの発光ダイオード側は制御回路４から送られる開信号
を受けこの発光ダイオードを駆動するトランジスタＴ　
ｒ　１．抵抗Ｒ５，６゜７でなる起動増幅器の出力に接
続されている。ホトカプラＰＣの出力側は抵抗Ｒ８を負
荷としその出力は抵抗Ｒ９と調整抵抗ＲＶ２を通して、
抵抗Ｒ１０を負荷とする次段の電圧増幅器のトランジス
タＴ　ｒ　２のベースに接続され、そのコレクタはトラ
ンジスタＴｒ３　、Ｔｒ４で構成する駆動増幅器の入力
側に接続されている。この駆動増幅器はパワーＭＯ８Ｆ
ＥＴで構成されるスイッチング素子ＦＢＴ１を高速でス
イッチングさせるため高速のＮＰＮトランジスタＴｒ３
とＰＮＰトランジスタＴｒ４とを縦続接続したもので、
ぞれぞれのベースとエミッタを共通に接続し、この共通
に接続されたエミッタを低インピーダンスの出力部とし
その出力は抵抗Ｒ１１，１２を介してスイッチング素子
ＦＥ７１のゲートに接続されており、この駆動増幅器で
ＦＥＴ１のゲート入力容量に十分な充電電流を供給する
ようにしている。このような回路で制御されるスイッチ
ング素子ＦＥＴ１のドレインＤとソースＳはそれぞれこ
のスイッチング制御回路５の入カニと出力■となってい
る。

ＦＥＴ１のドレインとゲート間に挿入されている定電圧
ダイオードＲＤはゲートの耐圧保護用でありダイオード
ＲＣ３は逆流防止用のもので、またトレイン、ソース間
に挿入されている抵抗Ｒ１３゜１４およびコンデンサＣ
３はドレイン、ソース間の耐圧保護用である。ＦＥＴ１
駆動用のこれらの回路はこのユニットＭＯ３内に設けら
れた１５Ｖｔ源５ａより電源が供給される。

スイッチング素子ＦＥＴ１のＯＮ、ＯＦＦは開信号によ
るものであるので、開信号の信号幅を変えることにより
ＯＮＬ、ている時間を制御できる。

第４図はスイッチング制御回路５が一般に高電圧の直流
を制御する必要があるのでパワースイッチング素子ＦＥ
Ｔの耐圧の関係から同図に示すように複数の単位ユニッ
トＭｏ５ｔ〜ｎを縦続接続し、かつそれぞれの単位ユニ
ットＭＯ３Ｉ〜ｎは抵抗Ｒ７１〜Ｒ７ｎを介して前記起
動増幅器に並列に接続されて開信号により同時にスイッ
チング制御がなされるように構成された実施例である。

なお、第３図に示す調整抵抗ＲＶ２は第４図に示すよう
な縦続接続した場合における各段のＦＥＴ１〜ｎの立ち
上がり、立ち下がりの動作点を揃える機能をもっている
。

第５図はピーク電圧＆時定数測定回路７の概略構成を示
すブロック回路図であり、スイッチング制御回路５の出
力■に表れる電圧は、抵抗Ｒ１５と調整用抵抗ＲＶ３で
構成される分圧器を介してピークホールド回路７ａと電
圧比較器７ｂの一方の入力に送られ、ピークホールド回
路７ａでは放電電圧のピーク値が記憶される。ピーク値
を記憶する手段としてはコンデンサにダイオードを介し
て充電し記憶する等のアナログ方式とピーク値をデジタ
ル量に変換して記憶する方式があるが、同図に示す実施
例は前者のアナログ方式を実施したものである。ピーク
ホールド回路７ａのピーク値出力はＡ／Ｄ変換回路７Ｃ
に送られと共に分圧用の調整抵抗ＲＶ４によりピーク電
圧の０．３７の値にされて電圧比較器７ｂの他方の入力
に送られ、前記した調整用抵抗ＲＶ３より送られるスイ
ッチング制御回路５の出力電圧と比較され、この電圧比
較器７ｂは両入力電圧が一致したときタイマー回路７ｄ
にタイマー停止の出力を送出する。

クロック回路７ｅはＡ／Ｄ変換回路７ｃやタイマー回路
７ｄに必要なタイミングをつくるためのもので、Ａ／Ｄ
変換回路７Ｃには変換タイミング制御回路７ｆで変換タ
イミングに変形されて送られる。

ピークホールド回路７ａ、タイマー回路７ｄ。

変換タイミング制御回路７ｆには制御回路４からの開信
号が送られるようになっており、この信号でピーク値と
放電の時定数τの測定が開始される。

測定されたピーク値と放電の時定数τはそれぞれデータ
表示回路８の数字表示器に表示されるようになっている
。

このように構成されたエレクトロポレーション装置にお
いて、高圧直流電源１は制御回路４よりの起動信号によ
り起動されその出力電圧は開閉器３に送られると共に充
電電圧制御回路２にも送られ、抵抗Ｒ４と調整抵抗Ｒｖ
１で構成する分圧器を介して電圧比較器２ｂ一方の比較
入力に送られて他方の比較入力に送られる基準電圧発生
器２ａの基準電圧と比較される。比較開始のタイミング
は制御回路４からの制御信号ＯＮの時点であり、またこ
の制御信号によりスイッチ駆動回路２ｃを介して開閉器
３をＯＮにするようにしている。

したがってこの時点より放電用のコンデンサＣへの充電
が開始され、この時点における高圧直流電源１の出力電
圧は初期充電電流による抵抗Ｒ３の電圧降下で低い値と
なっているがコンデンサＣへの充電が進むと出力電圧は
第６図の８曲線に示すように次第に高くなり、ｔ１時間
後に設定電圧Ｅに達したと電圧比較器２ｂが判断するそ
の出力をスイッチ駆動回路２ｃに送り、このスイッチ駆
動回路２Ｃを介して開閉器３をＯＦＦにしコンデンサＣ
への充電を停止し、コンデンサＣはスイッチング制御回
路５がＯＮになり細胞懸濁液に対する放電が開始される
まで設定電圧Ｅを保持する。

制御回路４よりスイッチング制御回路５に対する開信号
が送られると、第３図に示すようにこの開信号はトラン
ジスタＴｒ１を主体とする起動増幅器を介して単位ユニ
ットＭＯ３内のホトカプラＰＣの発光ダイオード側に電
流を流し、その出力は前記した電圧増幅器、駆動増幅器
などによりパワーＭＯ３ＦＥＴで構成されるスイッチン
グ素子ＦＢＴＩを導通状態にし、コンデンサＣに蓄えら
れた電荷をチャンバー６内の懸濁液に電極Ｐを通して放
電する。

スイッチング制御回路５が第４図に示すように単位ユニ
ットＭＯＳ１〜ｎの縦続接続で構成されている場合でも
スイッチング動作は同じである。

このときスイッチング素子がＭＯＳＦＥＴであるのでＯ
Ｎの導通状態になるまでの立ち上がり時間が１μｓ以下
と短く、このためその放電曲線は第７図の実線に示す理
想曲線に近い形になり、ピーク電圧値もコンデンサＣに
設定された設定電圧Ｅに近い安定した値にすることがで
きる。

またスイッチング素子がＭＯＳＦＥＴであるのでＳＣＲ
と違いＯＦＦすることも容易であり、したがって実効的
な時定数を比較的自由に設定することができる０例えば
放電用コンデンサＣと懸濁液できまる時定数で放電した
い場合は開信号の幅を十分に長くすればよく、時定数を
実効的に短くしたい場合は開信号の幅を狭くすることに
より可能となる。このように自由にＯＦＦすることがで
きるのでパルス幅の狭い放電パルスを発生させることが
でき、またこのことにより放電の繰り返し時間を短くす
ることも可能である。

放電ピーク値と放電時定数τの測定はピーク電圧＆時定
数測定回路７により行われるが、ピーク値は抵抗Ｒ１５
および調整抵抗ＲＶ３で構成する分圧器を介してピーク
ホールド回路７ａに制御回路４よりの開信号のタイミン
グで保持されると共にその電圧値はＡ／Ｄ変換回路７　
ｃ’でディジタル値に変換され所定の倍率が掛けられて
データ表示回路８に表示される。

一方時定数τは前記開信号でタイマー回路７ｄをスター
トさせると共に調整抵抗ＲＶ３よりの電圧とピークホー
ルド回路７ａが保持しているピーク値を調整抵抗ＲＶ４
で１／ｅ（約３６．８％）に分圧した電圧とを電圧比較
器７ｂで比較し、両者の電圧が等しくなった時点でタイ
マー回路７ｄをストップしてその間の時間を時定数τと
してデータ表示回路８に表示するものである。

ピーク値に影響されない時定数τの測定方法として第８
図に説明する方法も実施できる。つまりこの方法は開信
号が送られた時点よりｔ１時間後の電圧値をピークホー
ルド回路７ａに保持しすると共にこの時点でタイマー回
路７ｄを起動し、調整抵抗ＲＶ３よりの電圧が保持され
た電圧値の１／ｅになった時点でタイマー回路７ｄを停
止させてその間の時間をもって時定数τとする方法であ
る。

この測定方法によればスイッチング素子の導通状態が不
安定でピーク値を正確に把握できないような場合でも安
定した測定が可能になる。

このようなピーク電圧＆時定数測定回１１７を設けるこ
とにより印加放電ごとにピーク値と放電時定数が把握で
き、適切なエレクトロポレーション処理を行うことがで
きる。

第９図はスイッチング制御回路５の単位ユニッ）ＭＯＳ
内のスイッチング素子ＦＥＴ１ａ〜１Ｃを複数個並列接
続した実施例の部分回路図であり、並列接続されたＦＥ
７１ａ〜１Ｃ付近の接続を示したもので、同図において
り、Ｓ、Ｇは第３図における同符号部分を表している。

このような複数並列接続により大電流のスイッチング制
御が可能になる。

また第１０図は他の実施例のブロック回路図であり、こ
の実施例ではマイクロプロセッサを使用してハード構成
を簡略化している。

同図に示す実施例は各部を制御するためのマイクロＣＰ
Ｕ回路１０と、このマイクロＣＰＵ回路１０にデータバ
スを介して接続される周辺回路として各回路にタイミン
グの信号を送出するタイミング制御回路１１と、アナロ
グ信号をディジタル信号に変換しディジタル処理を可能
にするアナログ処理回路１２およびタイミング制御回路
１１からの制御信号により高圧直流電源１および開閉器
３を制御する駆動図Ｒ１３とが設けられ、これらの回路
で第１図に示した実施例の充電電圧制御回路２とピーク
電圧＆時定数測定回路７とで処理していた部分を処理す
るように構成している。

同図おいて高圧直流電源１は駆動回路１３で起動されそ
の出力は開閉器３に送られると共に分圧器Ｄ１を介して
アナログ処理回路１２にも送られてディジタル値に変換
され、さらにこの値はマイクロＣＰＵ回路１０において
演算処理されるようになっている。またスイッチング制
御回路５の出力■に出力される電圧も分圧器Ｄ１を介し
てアナログ処理回路１２に送られて同様に演算処理され
るようになっており、演算処理されたデータはマイクロ
ＣＰＵ回路１０よりデータ表示回路８に表示される。

第２図、第５図おいて説明した電圧比較やピーク値保持
および時定数算出などの演算処理はマイクロＣＰＵ回路
１０を中心にタイミング制御回路１１およびアナログ処
理回路１２で行われ、開閉器３の開閉刺部はタイミング
制御回路１１の指示にもとすき駆動回路により制御され
る。また各種の制Ｗ信号やタイミング関係は前記実施例
と同様である。

この実施例のような構成をとることによりハード構成が
簡易化され装置の小形化やコストの低下が期待できる。

なおこの発明は上記実施例に限定されるものでなく要旨
を変更しない範囲で種々変形して実施できる。

［発明の効果］ この発明によれば、スイッチング素子に立ち上がり時間
が短いＭＯＳＦＥＴを使用しているのでスイッチング特
性が向上し、細胞懸濁液に対して設定値に近い安定した
電圧を印加できる。

またスイッチング素子にＭＯＳＦＥＴを使用することに
よりＯＮ、ＯＦＦの制御が容易であり実効的な時定数を
短く設定でき、パルス幅の狭い放電パルスを発生させる
ことや放電繰り返し時間を短くすることもできる。

また放電用コンデンサに対する充電時間を早くすること
ができるので放電繰り返し時間を短くすることができる
。

さらに懸濁液に印加される放電波形のピーク値と時定数
が放電の都度適確に把握され、遺伝子導入条件を正確に
設定できるので常に安定した効率の高い遺伝子導入が装
置や操作者に影響されずに可能になる。

【図面の簡単な説明】

第１図はこの発明の一実施例のブロック回路図、第２図
は同実施例の高圧直流電源と充電電圧制御回路の概略構
成回路図、第３図は同実施例のスイッチング制御回路の
単位ユニットの回路図、第４図は第３図の単位ユニット
を縦続接続したスイッチング制御回路の１０ツク回路図
、第５図は同実施例のピーク電圧＆時定数測定回路のブ
ロック回路図、第６図は高圧直流電源より充電用コンデ
ンサに充電する場合におけるこの発明と従来の方法の違
いを説明する充電曲線図、第７図はこの発明と従来の装
置の放電波形の違いを説明する放電波形図、第８図は時
定数測定の一方法を説明する放電波形図、第９図はスイ
ッチング制御回路のスイッチング素子であるＭＯＳＦＥ
Ｔを並列接続した実施例の部分回路図、第１０図はマイ
クロプロ七を使用した他の実施例のブロック回路図、第
１１図は従来のＳＣＲを使用したスイッチング制御回路
の部分回路図、第１２図は従来の高圧直流電源回路と充
電用コンデンサとの関係を説明する回路図である。 １・・・・・・高圧直流電源　　２・・・・・・充電電
圧制御回路２ａ・・・基準電圧発生器　２ｂ・・・電圧
比較器２Ｃ・・・スイッチ駆動回路３・・・・・・開閉
器４・・・・・・制御回路 ５・・・・・・スイッチング制御回路 ５ａ・・・１５Ｖｔ源　　　６・旧・・チャンバー７・
・・・・・ピーク電圧＆時定数測定回路７ａ・・・ピー
クホールド回路 ７ｂ・・・電圧比較器　　　７ｃ・・・Ａ／Ｄ変換器７
ｄ・・・タイマー回路　　７ｅ・・・クロック回路７ｆ
・・・変換タイミング制御回路 ８・・・・・・データ表示回路　９・・・・・・操作パ
ネル１０・・・マイクロＣＰＵ回路 １１・・・タイミング制御回路 １２・・・アナログ処理回路

Claims (4)

【特許請求の範囲】
1. （１）高圧直流電源と、この高圧直流電源の出力を放電
   用コンデンサに充電すための開閉手段と、この開閉手段
   のＯＮ、ＯＦＦを制御する充電電圧制御手段と、前記放
   電用コンデンサに充電された電荷を電極を介して細胞懸
   濁液に印加放電するスイッチング制御手段と、このスイ
   ッチング制御手段のＯＮ、ＯＦＦを制御する手段とを備
   えたエレクトロポレーション装置において、前記スイッ
   チング制御手段のＯＮ、ＯＦＦ用のスイッチング素子に
   ＭＯＳＦＥＴを使用することを特徴としたエレクトロポ
   レーション装置。
2. （２）上記スイッチング制御手段のＯＮ、ＯＦＦ用スイ
   ッチング素子は複数のＭＯＳＦＥＴを並列接続した構成
   であることを特徴とする請求項（１）記載のエレクトロ
   ポレーション装置。
3. （３）高圧直流電源と、この高圧直流電源の出力を放電
   用コンデンサに充電すための開閉手段と、この開閉手段
   のＯＮ、ＯＦＦを制御する充電電圧制御手段と、前記放
   電用コンデンサに充電された電荷を電極を介して細胞懸
   濁液に印加放電するスイッチング制御手段と、このスイ
   ッチング制御手段のＯＮ、ＯＦＦを制御する手段とを備
   えたエレクトロポレーション装置において、前記高圧直
   流電源の出力電圧は前記放電用コンデンサに充電すべき
   設定電圧より所定値高く設定すると共に前記充電電圧制
   御手段は電圧値検知手段を備え前記放電用コンデンサに
   対する充電電圧が前記設定電圧に達したことを検知して
   前記開閉手段をＯＦＦに制御することを特徴としたエレ
   クトロポレーション装置。
4. （４）高圧直流電源と、この高圧直流電源の出力を放電
   用コンデンサに充電すための開閉手段と、この開閉手段
   のＯＮ、ＯＦＦを制御する充電電圧制御手段と、前記放
   電用コンデンサに充電された電荷を電極を介して細胞懸
   濁液に印加放電するスイッチング制御手段と、このスイ
   ッチング制御手段のＯＮ、ＯＦＦを制御する手段とを備
   えたエレクトロポレーション装置において、前記印加放
   電波形のピーク電圧値および同波形の時定数を測定し表
   示する回路を具備したことを特徴とするエレクトロポレ
   ーション装置。