JPH03163097A - タンパク質又はポリペプチドをテクネチウム―９９ｍで標識する方法、生成複合体、画像処理剤としての用途、および複合体の再調製用キット - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明はテクネチウム−９９ｍでタンパク質又はポリペ
プチドを標識するための方法、この方法によるタンパク
質又はポリペプチドへのテクネチウム−９９ｍの結合か
ら生成する複合体並びに医療用画像処理剤としてのこれ
ら複合体の用途に関する。最後に、本発明は上記複合体
の再調製用キットにも関する。

コーラ−（Ｋｏｈｌｅｒ）及びミルシュタイン（Ｍｉ　
ＩｓＬｅｉｎ）により１９７５年に開発された技術では
多数のモノクローナル抗体を産生ずることができた。後
者の使用はインビトロ診断及び医療用画像処理の双方に
おける医療分野で用いられる診断方広を改革した。

後者の技術の場合、画像処理で通常用いられるアイソト
ープを抗体と結合させることができる新規方法を開発す
ることが必要とわかった。様々な方広がタンパク質をヨ
ウ素−１３１、ヨウ素１２３、インジウムー１１１、テ
クネチウム９９ｍ及びわずかな程度のガリウム−６７で
標識しうるように開発された。これらのアイソトープの
中では、テクネチウム−９９ｍが様々な理由から選択さ
れる。一方、それは医療用画像処理での使用に理想的な
物理的性質を有しており、即ちそのγ線エネルギー（　
１　４　０　ｋｃＶ）は優れた画像鯉析能を発揮し、そ
の短い半減期（Ｔ−６．０２ｈ）は患者にとって最少照
射量で済む。他方、発生剤の存在はこのアイソトープを
非常に人手し易くかつ非常に安価にした。これはテクネ
チウムー９９ｍでタンパク質を標識する方法に向いた顕
著な関心について説明している。

最も簡単な方法は、標識されるタンパク質の存在下で還
元剤、通常スズ■塩を加えることにより発生剤から抽出
した放射性パーテクネテート（　Ｔ　ｃ　Ｏ　４　−　
）を還元することであり、次いでタンパク質に還元テク
ネチウムが結合することができる。しかしながらテクネ
チウムがタンパク質上に存在している天然結合部位に結
合される強度は非常に低く、インビト口及びインビボで
標識安定性に関して大きな問題を起こす。このため、一
方ではタンパク質の生物学的性質を損なうことなくテク
ネチウムに対して高アフィニテイを有する構造体或いは
官能基をタンパク質上に導入し、他方ではＯＨ又はＮ　
Ｈ　２のようなタンパク質上に存在する天然の低アフィ
ニテイ部位へのテクネチウムの結合を回避することが必
要であるとわかった。

２つのアプローチでテクネチウムに対して高アフィニチ
イの部位をタンパク質上に形成させることができる。こ
れらアプローチのうち第一は、テクネチウムを多価キレ
ート化させうる構造体をタンパク質に結合させることで
ある。テクネチウムに関するアフィニティが不十分と判
明したＤＴＰＡ　（Ｄ．Ｊ．　ナトウィック，Ｗ，Ｗ．
　　レイン及びＲ．Ｊ，チルズ，インターナショナル・
ジャーナル・オブ・アプライド・ラジェーション・アン
ド・アイソトープス，１９８１年，第３３巻，Ｍ３２７
−３３２頁（Ｄ．Ｊ．Ｈｎａｔｏｖｉｃｈ．Ｗ．Ｗ．Ｌ
ａｙｎｅａｎｄ　Ｒ．Ｊ．　Ｃｈｌｌｄｓ，ＩｎＬｅｒ
ｎａＬｉｏｎａｌ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｌ’＾ｐｐｌｉ
ｅｄ　Ｒａｄｉａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ＩｓｏＬｏｐｅｓ
，１９ｇ１．３３．３２７−３３２））以外にも、様々
な構造体、特にＮ　２Ｓ　２タイプのリガンドが試みら
れた（Ａ．　　Ｒ，　　フリッッパーグ，ジャーナル・
オブ・ヌクレアー・メディシン（スタットガード），１
９８７年，第２６巻．第７−１２頁（Ａ．Ｒ．Ｆｒｌｔ
ｚｂｅｒｇ．ＪｏｕｒｎａＩ　ｏｒＮｕｃｌｅａｒ　Ｍ
ｅｄｉｃ１ｎｅ（Ｓｔｕｔｔｇａｒｔ），１９ｇ７．２
［ｉ，７−１２）　］。

これらのキレートは、テクネチウムのキレート化前でも
又は後であってもタンパク質に結合させることができる
。

第二のアプローチではタンパク質上に遊離チオール基を
形成する。これらは還元テクネチウムに対して事実上高
いアフィニティを有する。これらのチオール基を形成す
るために通常用いられる方法は、タンパク質上に最初存
在するジスルフィド架橋を遊離チオール基に還元するこ
とである（Ａ．　　シュワルツ（Ａ．Ｓｃｈｖａｒｔｚ
）及びＡ．シュタインシュトレッサー（Ａ．ＳＬｅｉｎ
ｓｔｒａｓｓｅｒ）　，　　ジャーナル・オブ●ヌクレ
アー・メディシン，１９８７年，第２６巻，第７−１２
頁〕。長時間のインキュベート下高濃度でスズ■、β−
メルカプトエタノール、メルカブトエチルアミン及びジ
チオトレイトールを含めた様々な還元剤がこの目的に用
いられてきた。このアプローチの主な欠点は、ジスルフ
ィド架橋の破壊がタンパク質の三次及び／又は四次構造
に悪影響を与えてその生物学的性質を変えてしまうとい
う事実に起因する。特に抗体のＦ　（ａ　ｂ’　）　２
断片の還元処理に際して部分的還元がＦａｂに起き、そ
の場合に後者が優先的に標識されるが、これはＦａｂ断
片の免疫学的活性がＦ　（ａ　ｂ’　）　２の場合より
も通常かなり低いという事実から一層不都合である。

ＳＰＤＰのような試薬が上記ジスルフィド架橋の還元ス
テップ後にチオール基を形成しうる新規ジスルフィド架
橋の導入用に提案された（１．　　Ｆ．Ｃ．７ッケンジ
ー（ＬＰ．ｃ．ＭｃＫｅｎｚｌｅ），　　Ｇ．　Ａ．　
　ピーターズ（Ｇ．Ａ．ＰＩｅＬｅｒｓｚ）及びＪ，カ
ネロス（Ｊ．Ｋａｎｅｌ　Ｉｏｓ），国際特許出願第８
７／０４，１６４号明細書〕。したがってこのタイプの
方法は同様の主な欠点、即ちタンパク質構造の障害リス
クを存する。

したがって本発明の目的は、十分に安定であってかつタ
ンパク質又はポリペプチドの構造及び生物学的性質に悪
影響を与えないテクネチウム９９ｍでタンパク質又はポ
リペプチドを標識するための方法を提供することである
。

このため、本発明の主題はタンパク質又はポリペプチド
をテクネチウム−９９ｍで漂識するための方法であって
、 ａ）チオール基が、タンパク質又はポリペプチドのジス
ルフィド架橋の還元ステップなしに直接チオール基を導
入しうる試薬によって上記タンパク質上に導入される；
及び ｂ）こうして修正されたタンパク質又はポリペプチドが
テクネチウム−９９ｍと接触せしめられる： ことを特徴とする。

本発明による方法の具体例において、上記チオール基は
上記試薬とタンパク質の一級アミノ基、特にタンパク質
又はポリペプチドのリジンの，ーアミノ基との反応によ
って導入される。

チオール基を上記タンパク質又は上記ポリペプチド上に
導入しうる試薬としては、活性基を有するイオウ含有試
蘂、特に２−イミノチオランがあげられる。

例えばクロリド塩の形で利用しうる２−イミノチオラン
は、下記反応経路に従いタンパク質の一級アミノ基と主
に反応する； タンパク買上への高アフィニティ官能基の導ノ以外にも
、タンパク質上に天然で存在する低ア；イニティ部位へ
のテクネチウムの非特異的結合４回避することも重要で
ある。この目的のため本ｊ明によれば、テクネチウムは
、テクネチウムをａアフィニチイ部位とではなくタンパ
ク質上に導ノされた高アフィニティ部位と交換し会える
中アフィニティのテクネチウム錯体の形でタンパク質１
：供与される。加えて、このような錯体は体内かζ徐々
に排出される欠点を有しているべきでない。

かかるときタンパク質と交換しあえないテクネチウム分
画は、テクネチウム標識タンパク質に関して得られるｍ
Ｒを妨げることがある。このためオ発明によれば、尿排
出で痕跡量であっても急速に排出されるテクネチウムグ
ルコへブトネ−トカＣｔ：間錯体として有利に用いられ
る。

テクネチウムとグルコヘプトネートとの錯体のような中
アフィニティのテクネチウム錯体が製造されて、２−イ
ミノチオランのような試薬でのチオール基の導入により
修正されたタンパク質又はポリペプチドに加えられる。

本発明の方法によれば、テクネチウム−９９ｍは特にパ
ーテクネテートＴ　ｃ　Ｏ　４　　のクロリドのような
スズ塩による還元から慣用的に生じる。

本発明の方法は抗体又はＦ　（ａｂ’　）２抗体断片が
標識される場合に特に有利である。

本発明の主題は、チオール基が本発明の方法に従い導入
されたタンパク質又はポリペプチドへのテクネチウム−
９９ｍの結合から生じる複合体にも関する。このタイプ
の複合体は医療用画像処理剤として特に有用である。

最後に、本発明の主題は本発明による複合体の再調製用
キットにも関するが、それは ａ）チオール基がジスルフィド架橋の還元ステップなし
に直接チオール基を導入しうる試薬によって導入された
タンパク質又はポリペプチド；ｂ）パーテクネテートを
還元する物質；及び場合により Ｃ）テクネチウムを、タンパク質上に導入された高アフ
ィニチイＳＨ部位とは交換し合うが但し天然低アフィニ
ティ部位とは交換し合わないような中アフィニティを有
したテクネチウム−９９ｍを錯体化しうる化合物；及び
最後に ｄ）放射性テクネチウムパーテクネテート；を含むこと
を特徴とする。

本発明の他の特徴及び利点は、下記のような後者の！！
様の詳細な説明から明らかになるであろう，以下で詳細
に記載される、タンパク質をテクネチウム−９９ｍで標
識する方法では、これらタンパク質のリジンと２−イミ
ノチオランとの反応によって上記タンパク質上に遊離チ
オール基を導入する。次いでテクネチウムはテクネチウ
ムダルコへプトネート及びこれらチオール基で交換され
る。

２−イミノチオランは下記反応経路に従いタンパク質の
一級アミノ基と反応する： このタイプの反応は牛アルブミン、マウスモノクローナ
ル抗体（１５Ｃ５、ＩｇＧ１）及びこの抗体のＦ　（ａ
　ｂ’　）　２断片のために用いた。

ａ）牛アルブミン ２−イミノチオランの溶液を使用直前にｐＨ７．４の０
．１Ｍリン酸緩衝液中で調製する。イミノチオラン濃度
は４０ａ＋Ｍである。２−イミノチオラン溶液０．２５
ｍｌをｐＨ７．４のＯ．ＩＭリン酸緩衝液１ｍｌに溶解
された牛アルブミン５■（ＢＳＡグレードＶ，シグマ（
Ｓｉｇｍａ）　）に滴下し、その際混合物を穏やかに攪
拌する。それによって３３３　：　１のイミノチオラン
／ＢＳＡモル比が得られる。反応を室温で１２時間続け
、その際反応剤を酸素から保護する。次いで修正された
タンパク質をｐＨ７．４の０．１Ｍリン酸緩衝液で平衡
化されたセファデックスＧ−５０カラム（２０×１．５
ｃｍ）に通すことで過剰のイミノチオランから分離する
。この同一緩衝液を溶出に用いる。

分ｉ１ｉｉ（ＨＰＬＣ分析：連続的に配置された２カラ
ムでの分子濾過二デュポンゾルバックス（Ｄｕ　Ｐｏｎ
ｔ　Ｚｏｒｂａｘ）及びＦＧ２５０）後に得られた特性
は第１図で示されている。

ｂ）マウスモノクローナル抗体 抗体１５Ｃ５　（ＩｇＧ１）はヒトフィプリンのＤダイ
マー断片を認識する。それはプロテインＡーセファロー
ス精製により腹水から得られる。

２−イミノチオランの４０ｍＭ溶液を使用直前にｐＨ７
．４の０６　１Ｍリン酸緩衝液中で調製する。

２−イミノチオラン溶液０．５ｍｌをリン酸緩衝液ｌｍ
ｌに溶解された抗体５ｍｇに滴下し、その際混合物を穏
やかに攪拌して、６００：１のイミノチオラン／抗体モ
ル比を得る。

反応を室温で１２時間続け、その際反応剤を酸素から保
護する。次いで修正されたタンパク質をｐＨ５．６の０
．１Ｍクエン酸緩衝液で平衡化されたセファデックスＧ
−５０カラム（２０×１．５０ｌｍ）に通すことで過剰
のイミノチオランから分離する。この同一緩衝液を溶出
に用いる。

次いで抗体を０．５＋ａｇずつバイアルに分配して凍結
乾燥する。凍結乾燥品への水の添加による再溶解は迅速
でかつ完全である。溶解後に得られる特性は第２図で示
されている（ＨＰＬＣ分折：連続的に配置された２カラ
ムでの分子濾過：デュポンゾルボックス及びＧＦ２５０
）。

生成物を凍結乾燥し、４℃で貯蔵する。

抗体１５Ｃ５のＦ（ａｂ′）２断片をシステイン非存在
下ババインによるこの抗体の消化で調製し、しかる後分
子濾過（ＡｃＡ４／４）及びイオン交換（ＤＥＡＥ）で
精製する。

２−イミノチオランの４０１ＩＭ溶液を使用直前にｐＨ
７．４の０．１Ｍリン酸緩衝液中で調製する。

２−イミノチオラン溶液０．２５ｍｌをリン酸緩衝液１
ｍｌに溶解されたＦ　（ａ　ｂ’　）　２断片５ｍｇに
滴下し、その際混合物を穏やかに攪拌して、２００：１
のイミノチオラン／Ｆ　（ａｂ’　）２モル比を得る。

反応を４℃で３時間続け、その際反応剤を酸素から保護
する。次いで修正されたタンパク質を全抗体と類似の方
法、即ち精製及び凍結乾燥により処理する。凍結乾燥品
の溶解後に得られた特性は第３図で示されている（ＨＰ
ＬＣ分折：ＴＳＫ３０００ＳＷ力ラムでの分子濾過）。

凍結乾燥品を４℃で貯蔵する。

２．キレート交換剤の製造 濃度２５■／ｍｌのナトリウムグルコヘプトネート溶液
１００ｍｌ及び濃度０．０５ａ＋ｇ／ｍｌのＳ　ｎ　Ｃ
　１　２溶液１００ｍｌを使用直前に脱気水で調製し、
混合する。得られた溶液を０．４ｍｌずつバイアルに分
配して凍結乾燥する。

このため各バイアルはナトリウムグルコヘプトネート５
■及びＳ　ｎ　Ｃ　１　２　０．　　０　１　ｍｇを含
有している。０．９％ＮａＣｌ　　ｌｍｌの添加後、ｐ
Ｈ６．５の透明溶液が速やかに得られる。

３．２−イミノチオランで修正されたタンパク質ａ）第
一の段階において、キレート交換試薬の標識は凍結乾燥
されたグルコヘプトネートのバイアルに０．　　９％Ｎ
ａＣ１中９９’ＴｃＯ　　−１０　〜４ １００ｍＣｉ含有溶液１ｍｌを加えることにより行う。

このＴｃＯ４一溶液はテクネチウム発生剤を０．　　９
％ＮａＣ１で溶出させ、しかる後望ましい活性／単位容
ｆｆｌ　（Ｉｌｃｉ／ｍｌ数）を得るように適切であれ
ば０．　９％ＮａＣ１でこの溶液を希釈することにより
得られる。

室温で０．　　５時間のインキュベート後、放射能はも
っぱらテクネチウムグルコへプトネートの形で存在する
（ＴＬＣ分析：溶液５μＤがＩＴＬＣ−ＳＧ支持体（ゲ
ルマン（Ｇｅｌ■ａｎｎ）　）上にスポットされる〕。

移動はコロイドの検出の場合０．９％ＮａＣ　１中（Ｒ
　ｆ−０）及びパーテクネテートの検出の場合メチルエ
チルケトン中（Ｒｆ−１）で行う。

ｂ）タンパク質を凍結乾燥されたタンパク質のバイアル
に水０．５ｍｌを加えることで再溶解さ１る。これによ
りｐＨ５．６の０，ＩＭクエン酸ｔ衝液中濃度１ｍｇ／
ｍｌの溶液が得られる。凍結乾欠されていない牛アルブ
ミンの場合には、濃度１ｆｆＩ／ｍｌを得るようにタン
パク質溶液をｐＨ７．４σリン酸緩衝液で希釈する。

Ｃ）次いで望ましい量の放射能（１０〜ＩＯＣｍｃＩ／
■）を様々な容量のテクネチウムグルコへフトネート溶
液の形でタンパク質に加える。混合０を室温で１時間３
０分間にわたり酸素から保護しておく。

ｄ）次いで異なる分肝を行う： −コロイドの検出：０．２２μｍフィルター〔ミレック
ス（Ｍｉｌｌｃｘ））で溶液の濾過前後に活賀／単位容
量の測定による。

−ＴＬＣによるパーテクネテートの検出：溶滋５μρを
ＩＴＬＣ−ＳＧ支持体上にスポットする移動はメチルエ
チルケトンで行わせる。これらの条件下においてパーテ
クネテートのみが溶媒フロントで移動するが、一方コロ
イド、タンパク質及びテクネチウムダルコへブトネート
はスポット箇所に留まる。

−ＴＬＣによる残留テクネチウムグルコへブトネートの
検出；溶液５μｐをＩＴＬＣ−ＳＧ支持体上にスポット
する。移動は０．　９％ＮａＣ１で行わせる。これらの
条件下においてパーテクネテート及びテクネチウムグル
コへブトネートは溶媒フロントで移動するが、一方コロ
イド及びタンパク質はスポット箇所に留まる。残留グル
コヘプトネート率は上記分析でパーテクネテートに関し
て得られた結果の引き算から得られる。

得られた結果は下記表で詳細に記載されている。

要約すれば、導入された放射能の４０〜９５％の範囲内
でタンパク質の標識が得られ、残りの放射能はパーテク
ネテート又はテクネチウムグルコへブトネートの形で存
在している。

ｅ）次いでタンパク質と結合しない放射能はセファデッ
クスＧ−５０による分子濾過でタンパク質から分離して
もよい。

この精製後に行われるＨＰＬＣ分析（ＴＳＫ３０００Ｓ
Ｗカラムでの分子濾過）によれば、放射能ピークはタン
パク質ピークと関連していることを示すことができる。

テクネチウム標識１５Ｃ５　　Ｆ　（ａｂ’　）２断片
の場合におけルコのタイプの分析に関して得られた結果
は第４図で示されている。

前記の場合と同様のＩＴＬＣ分析を標識後２４時間にわ
たり標識生或物について規則的間隔で行ったが、その際
生威物は室温かつ酸素存在下で貯蔵された。いずれの場
合にも、パーテクネテートの放出又はコロイドの出現は
全放射能の５％以上の割合で検出できなかった。濃度０
．２ＭのＥＤＴＡ添加ではこの結果を変えることがない
。

この時間間隔で行われたＨＰＬＣ分析では、標識後に直
接行われた分析と比較していかなる変化も検出できない
。

ｂ）インビボ安定性 上記方法によりテクネチウム−９９ｍで漂識された比活
性１０ｉＣＩ／＋ｇのアルプミン０．　　５ｍＣＩをラ
ットに大腿部の血管から注入する。動物を注入１時間後
に殺し、生体内分布分析を行う。血中放射能（注入用量
の５０％以上）及び小肝臓蓄積（注入用量の１０％以下
）の持続で、注入後においてテクネチウム標識コロイド
の形成がないことを確認することができる。

反応性の分析 前記方法によりテクネチウム−９９ｍで又は常法〔ヨー
ドーゲン（　ｆｏｄｏ−Ｇｅｎ））によりヨウ素１２３
　（Ｊ．Ｃ．スペック，バイオケミカル・アンド・バイ
オフィジカル・リサーチ・コミュニケーションズ，１９
７８年，第８０巻，第８４９頁（Ｊ．Ｃ．Ｓｐｅｃｋ，
Ｂｉｏｃｈｅｍｌｃａｌ　ａｎｄ　１３１ｏｐｈｙｓｌ
ｃａｌＲｅｓｅｒｃｈ　Ｃｏｉｍｕｎｉｃａｔ１ｏｎｓ
．ｌ９７８．８０，８４９）　）で標識された抗体１５
Ｃ５及びそのＦ　（ａ　ｂ’　）　２断片の結合性に関
する試験を下記方法で行う：一抗体１５Ｃ５で認識され
る抗原はヒトフィプリンのＤダイマー断片である。ｐＨ
７．２の０．０１Ｍリン酸緩衝液、０．１５Ｍ　　Ｎａ
Ｃｌ中濃度１０μｇ／ｍｌのＤダイマー断片の溶液１５
μｇを可分性マイクロプレート〔コースター（Ｃｏｓｔ
ａｒ））の各ウエルに入れる。

一室温で３ｎ！７間のインキュベート後、マイクロプレ
ートを洗浄し、しかる後リン酸緩衝戚中１％Ｗ／Ｖ牛ア
ルブミン溶液２００μｇ／ウエルと共に１　ｎ．７間の
インキュベートにより飽和させる。

−アルブミン溶液の除去後、ｌ農度３７〜０，３ｎ｝Ｉ
に変えた標識抗体又は断片の溶液５０μｐを導入する。

実験は３回行う。

一室温で１時間のインキュベート後、プレートを０．０
０５％ツイーン（Ｔｗｅｅｎ）　２　０含有ｐＨ７．２
の０，ＯＩＭリン酸緩衝液、０．１５ＭＮａＣｌで５回
洗浄する。次いで各ウエルに関連した放射能をガンマ計
測で調べる。

−こうして測定された結合パラメーターのスカッチャー
ド（Ｓｃａｔｃｈａｒｄ’ｓ）法による分析によれば、
抗体及びその断片の解離定数を計算することができる。

テクネチウム標識生成物に関して得られた値は各々全１
ｇＧ１抗体の場合１．７５Ｘ１０−９−９ Ｍ，Ｆ　（ａｂ’　）２断片の場合２．２５Ｘ１０Ｍで
ある。これらの値は、放射性ヨウ素で標識された土成物
に関して得られる場合と匹敵する。

【図面の簡単な説明】

前記記載は下記図面を参考に示されている：第１図は２
−イミノチオラン試薬で修正されたＢＳＡのＨＰＬＣ分
折について示している。 第２図は２−イミノチオラン試薬で修正された１５Ｃ５
　　１ｇＧ１のＩ｛ＰＬ．Ｃ分析について示している。 第３図は２−イミノチオラン試薬で修正された１５Ｃ５
　　１　ｇＧＩ　　Ｆ　（ａｂ’　）　２のＨＰＬＣ分
折について示している。 第４図はテクネチウムで標識された１５Ｃ５Ｆ（ａｂ’
）っのＨＰＬＣ分折について示している。 −　：　２　６　０　ｎＩＩ１におけるＵＶ特性・一一
−・：放射能

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、タンパク質又はポリペプチドをテクネチウム−９９
   ｍで標識するための方法であって、ａ）チオール基が、
   タンパク質又はポリペプチドのジスルフィド架橋の還元
   ステップなしに直接チオール基を導入しうる試薬によっ
   て上記タンパク質上に導入される；及び ｂ）こうして修正されたタンパク質又はポリペプチドが
   テクネチウム−９９ｍと接触せしめられる； ことを特徴とする方法。 ２、チオール基が、試薬とタンパク質又はポリペプチド
   の一級ε−アミノ基との反応によって導入される、請求
   項１に記載の方法。 ３、チオール基が、活性基を有するイオウ含有試薬によ
   ってタンパク質又はポリペプチド上に導入される、請求
   項１又は２に記載の方法。 ４、チオール基が、２−イミノチオラン試薬とタンパク
   質又はポリペプチドとの反応によって導入される、請求
   項１〜３のいずれか一項に記載の方法。 ５、ステップｂ）において、テクネチウム−９９ｍが、
   テクネチウムを、ステップａ）に従いタンパク質上に導
   入された高アフィニティＳＨ部位とは交換し合うが、タ
   ンパク質又はポリペプチド上に存在する天然低アフィニ
   ティ部位とは交換し合わないような、中アフィニティを
   有するテクネチウム−９９ｍ錯体の形で供与され、錯体
   が体内から急速に排出される、請求項１〜４のいずれか
   一項に記載の方法。 ６、テクネチウム錯体がテクネチウム−９９ｍグルコヘ
   プトネートである、請求項５に記載の方法。 ７、テクネチウム−９９ｍが特にスズ（II）塩によるパ
   ーテクネテートの還元から生じる、請求項１〜６のいず
   れか一項に記載の方法。 ８、タンパク質が抗体又はＦ（ａｂ′）＿２抗体断片か
   らなる、請求項１〜７のいずれか一項に記載の方法。 ９、請求項１〜８のいずれか一項に記載の方法で得られ
   るタンパク質又はポリペプチドへのテクネチウム−９９
   ｍの結合から生じる複合体。 １０、医療用画像処理剤としての請求項９に記載の複合
   体の用法。 １１、請求項９に記載の複合体の再調製用キットであっ
   て、 ａ）チオール基が、ジスルフィド架橋の還元ステップな
   しに直接チオール基を導入しうる試薬によって導入され
   たタンパク質又はポリペプチド： ｂ）パーテクネテートを還元する物質：及び場合により ｃ）テクネチウムを、タンパク質上に導入された高アフ
   ィニティＳＨ部位とは交換し合うが天然低アフィニティ
   部位とは交換し合わないような中アフィニティを有する
   、テクネチウム−９９ｍを錯体化しうる化合物：及び最
   後に ｄ）放射性テクネチウムパーテクネテート：を含むこと
   を特徴とするキット。