JPH03133373A - Electric cell treatment unit - Google Patents
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Abstract
Description
【発明の詳細な説明】
〔産業上の利用分野]
本発明は、細胞電気処理装置、特に、細胞電気処理チャ
ンバーに電圧を印加するための細胞電気処理装置に関す
る。DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION [Industrial Application Field] The present invention relates to a cell electroprocessing device, and particularly to a cell electroprocessing device for applying a voltage to a cell electroprocessing chamber.
水産増殖部門、農業・園芸分野の育種、及び医療、食品
分野等において細胞を電気的に融合する電気融合法が採
用されている。一方、細胞にDNAを導入する遺伝子導
入においても、電気的手法が確立されている。Electrofusion methods, which electrically fuse cells, are used in the aquaculture sector, breeding in the agricultural and horticultural fields, and in the medical and food fields. On the other hand, electrical methods have also been established for gene transfer to introduce DNA into cells.
たとえば植物細胞を用いた電気融合法では、酵素液を含
む溶液内に植物細胞を入れ、植物細胞の細胞壁を除去し
てプロトプラストを得る。次に、プロトプラストを含む
溶液を細胞電気処理チャンバーに入れる。そして、細胞
融合を実行するために、細胞電気処理チャンバーに電圧
を印加する。For example, in the electrofusion method using plant cells, the plant cells are placed in a solution containing an enzyme solution, and the cell walls of the plant cells are removed to obtain protoplasts. Next, the solution containing the protoplasts is placed into the cell electroprocessing chamber. Then, apply voltage to the cell electroprocessing chamber to perform cell fusion.
このような電気融合法や遺伝子導入では、1対の対向電
極を有する細胞電気処理チャンバーが用いられる。従来
、この種の処理チャンバーは、各々個別に扱われ、電圧
印加装置に接続されて細胞電気処理に供される。In such electrofusion methods and gene transfer, a cell electroprocessing chamber having a pair of opposing electrodes is used. Conventionally, processing chambers of this type are each treated individually and connected to a voltage application device for cell electroprocessing.
ところが、このように個別に処理チャンバーを吸ったの
では作業効率が悪い。そこで、細胞電気処理チャンバー
を支持するための部材を直線状に複数個配置する細胞電
気処理装置を利用することを本発明者は考えた。この細
胞電気処理装置では、種類の異なる細胞懸濁液を収納し
た複数個の細胞電気処理チャンバーを支持することがで
き、またこれらに同一条件下で電圧を印加することがで
きる。However, if the processing chambers are individually vacuumed in this way, the work efficiency is poor. Therefore, the present inventor considered using a cell electroprocessing device in which a plurality of members for supporting a cell electroprocessing chamber are arranged in a linear manner. This cell electroprocessing device can support a plurality of cell electroprocessing chambers containing different types of cell suspensions, and can apply voltage to these chambers under the same conditions.
ところが、この細胞電気処理装置は、直線状に構成され
ているため、多数個の細胞電気処理チャンバーを処理す
るためには、大型にならざるを得ない。また、直線状の
細胞電気処理装置は、製作が容易でないため、高価とな
ってしまう。However, since this cell electroprocessing device has a linear configuration, it has to be large in size in order to process a large number of cell electroprocessing chambers. Furthermore, a linear cell electroprocessing device is not easy to manufacture and is therefore expensive.
本発明の目的は、複数個の細胞電気処理チャンバーに対
しく同一条件下で電圧を印加することができる、コンパ
クトに構成されかつ安価な細胞電気処理装置を提供する
ことにある。An object of the present invention is to provide a compact and inexpensive cell electroprocessing device that can apply voltage to a plurality of cell electroprocessing chambers under the same conditions.
本発明の細胞電気処理装置は、細胞電気処理チャンバー
に電圧を印加するためのものである。この細胞電気処理
装置は、複数個の細胞電気処理チャンバーを環状に配置
して支持し得るチャンバー支持部材と、細胞電気処理チ
ャンバーに電圧を印加するための電圧印加部材とを備え
ている。そして、電圧印加部材は、チャンバー支持部材
に設けられている。The cell electroprocessing device of the present invention is for applying voltage to a cell electroprocessing chamber. This cell electroprocessing device includes a chamber support member capable of supporting a plurality of cell electroprocessing chambers arranged in an annular shape, and a voltage application member for applying voltage to the cell electroprocessing chambers. The voltage application member is provided on the chamber support member.
本発明では、チャンバー支持部材は、複数個の細胞電気
処理チャンバーを環状に配置して支持することができる
。このため、本発明の細胞電気処理装置は、コンパクト
に形成することができ、またこれにより安価に提供する
ことができる。In the present invention, the chamber support member can support a plurality of cell electroprocessing chambers arranged in a ring shape. Therefore, the cell electroprocessing device of the present invention can be formed compactly and can therefore be provided at low cost.
また、本発明では、電圧印加部材により、チャンバー支
持部材に支持された複数個の細胞電気処理チャンバーに
対して、同一条件で電圧を印加することが可能である。Further, in the present invention, it is possible to apply voltage under the same conditions to a plurality of cell electroprocessing chambers supported by the chamber support member using the voltage application member.
本発明の一実施例を第1図から第3図に示す。 An embodiment of the present invention is shown in FIGS. 1 to 3.
第1図は本発明の一実施例の縦断面図、第2図はその一
部省略平面図、第3図は第1図の一部分の詳細を示す部
分概略図である。FIG. 1 is a longitudinal sectional view of one embodiment of the present invention, FIG. 2 is a partially omitted plan view thereof, and FIG. 3 is a partial schematic diagram showing details of a portion of FIG. 1.
細胞電気処理装置1は、主に、チャンバー支持部材2と
蓋3とを備えている。The cell electroprocessing device 1 mainly includes a chamber support member 2 and a lid 3.
チャンバー支持部材2は、樹脂製の部材であり、その下
部が円板状に形成されている。チャンバ支持部材2は、
その円板状の部分において、同心の円環状に形成された
溝4を有している。この溝4には、対向する支持電極5
46が配置されている。一方の支持電極5は、溝4の外
側の立壁部の全周に連続的に取り付けられている。他方
の支持電極6は、溝4の内側の立壁部の全周に連続的に
取り付けられている。支持電極5.6は、第3図に示す
ように、その上部がそれぞれ互いに対面する側に湾曲し
た形状に折り曲げられている。そして、その折曲げ部に
は、等間隔を隔ててスリット5a、6aが設けられてい
る。これにより、支持電極5,6は、当該折曲げ部がそ
れぞれ相手側の支持電極方向の付勢力を有するばね状に
構成されている。なお、支持電極5の一部は、チャンバ
ー支持部材の底面まで延びている(第1図)。The chamber support member 2 is a member made of resin, and its lower part is formed into a disk shape. The chamber support member 2 is
The disk-shaped portion has a groove 4 formed in a concentric ring shape. This groove 4 has an opposing supporting electrode 5.
46 are arranged. One of the supporting electrodes 5 is continuously attached to the entire circumference of the standing wall outside the groove 4 . The other supporting electrode 6 is continuously attached to the entire circumference of the vertical wall inside the groove 4 . As shown in FIG. 3, the supporting electrodes 5.6 are bent in such a manner that their upper portions are curved toward sides facing each other. Slits 5a and 6a are provided at equal intervals in the bent portion. Thereby, the support electrodes 5 and 6 are configured in a spring shape, each of which has a biasing force in the direction of the other support electrode. Note that a part of the support electrode 5 extends to the bottom surface of the chamber support member (FIG. 1).
チャンバー支持部材2は、溝4の内側において上方に起
立する円柱状の起立部7を有している。The chamber support member 2 has a cylindrical upright portion 7 that stands up upward inside the groove 4 .
起立部7は、その内部に1組の空洞8a、13bを有し
ている。空洞8a、8bは、縦方向に平行に形成されて
いる。第1図左側の)洞8aは、チャンバー支持部材2
の底面で開口している。一方、第1図右側の空洞8bの
底面には、支持電極6に連続する端子12が起立して設
けられている。起立部7の上面には、1組の孔9,9が
設けられている。孔9.9は、それぞれ空洞8a、8b
と連通している。孔9,9の内面には、その全体に導体
10が形成されている。そして、導体10の下端には、
リード線11の一端が接続されている。The upright portion 7 has a pair of cavities 8a and 13b therein. The cavities 8a and 8b are formed in parallel to the vertical direction. The cavity 8a (on the left side in FIG. 1) is the chamber support member 2.
It is open at the bottom. On the other hand, a terminal 12 continuous to the support electrode 6 is provided upright on the bottom surface of the cavity 8b on the right side of FIG. A pair of holes 9, 9 are provided on the upper surface of the upright portion 7. Holes 9.9 are cavities 8a and 8b, respectively.
It communicates with A conductor 10 is formed on the entire inner surface of the holes 9, 9. And, at the lower end of the conductor 10,
One end of the lead wire 11 is connected.
空洞8b内のリード線11の他端は、端子12に接続さ
れている。The other end of the lead wire 11 inside the cavity 8b is connected to the terminal 12.
チャンバー支持部材2の底面には、チャンバー支持部材
の底面形状に適合する底板13がねし止めにより固定さ
れている。底板13の上面には、その第2図左側におい
て導体14が形成されている。この導体14の一端(回
春側)には、空洞8a内において端子15が起立して設
けられている。A bottom plate 13 that conforms to the bottom shape of the chamber support member 2 is fixed to the bottom surface of the chamber support member 2 with screws. A conductor 14 is formed on the upper surface of the bottom plate 13 on the left side in FIG. A terminal 15 is provided at one end (rejuvenation side) of the conductor 14 so as to stand up within the cavity 8a.
端子15には、リード線11の他端が接続されている。The other end of the lead wire 11 is connected to the terminal 15 .
一方、導体I4の他端は、チャンバー支持部材2の底面
まで延びる支持電極5に接続されている。On the other hand, the other end of the conductor I4 is connected to a support electrode 5 extending to the bottom surface of the chamber support member 2.
M3は、チャンバー支持部材2の満4と起立部7とを被
覆できるカップ状に形成された部材である。M3は、た
とえばポリカーボネート等の透明の樹脂から構成されて
いる。蓋3の上面には、起立部7の孔9,9にそれぞれ
対応する位置にり一ドピン16.16が取り付けられて
いる。リードビン16.16は、M3の上面を貫通して
取り付けられており、M3の上面及び下面から突出して
いる。そして、リードビン16.16は、蓋3がチャン
バー支持部材2に装着された状態で孔99に嵌太し、導
体10.10に接続されるようになっている。M3 is a member formed in a cup shape that can cover the chamber support member 2 and the upright portion 7. M3 is made of transparent resin such as polycarbonate. Dowel pins 16 and 16 are attached to the upper surface of the lid 3 at positions corresponding to the holes 9, 9 of the upright portion 7, respectively. The lead bin 16.16 is attached through the top surface of M3 and protrudes from the top and bottom surfaces of M3. The lead bin 16.16 is fitted into the hole 99 with the lid 3 attached to the chamber support member 2, and is connected to the conductor 10.10.
次に、前記細胞電気処理装置1の使用方向について説明
する。Next, the direction of use of the cell electroprocessing device 1 will be explained.
まず、チャンバー支持部材2からM3を取り外し、チャ
ンバー支持部材2に細胞電気処理チャンバー20を装着
する。細胞電気処理チャンバー20としては、たとえば
第4図に示すようなものが用いられる。この細胞電気処
理チャンバー20は、細胞!Q濁液を収容するための開
口を有する角柱状のチャンバー21と、チャンバー21
の開口を封止するためのキャップ22とから主として構
成されている。チャンバー21は、1対の電極23゜2
3を有している。電極23は、チャンバー21の開口部
分で折り返されており、チャンバー21の外周面から内
周面にかけて連続的に形成されている。このような細胞
電気処理チャンバー20は、チャンバー支持部材2の溝
4内に環状に多数個配置することができる(第2図)。First, M3 is removed from the chamber support member 2, and the cell electroprocessing chamber 20 is attached to the chamber support member 2. As the cell electroprocessing chamber 20, for example, one shown in FIG. 4 is used. This cell electroprocessing chamber 20 is a cell! Q A prismatic chamber 21 having an opening for accommodating a suspension, and a chamber 21
It is mainly composed of a cap 22 for sealing the opening of. The chamber 21 has a pair of electrodes 23°2
It has 3. The electrode 23 is folded back at the opening of the chamber 21 and is formed continuously from the outer peripheral surface to the inner peripheral surface of the chamber 21 . A large number of such cell electroprocessing chambers 20 can be arranged in a ring shape within the groove 4 of the chamber support member 2 (FIG. 2).
このとき、細胞電気処理チャンバー20は、電極23.
23がそれぞれ支持電極5.6と対面するように装着さ
れる。そして、溝4に装着された細胞電気処理チャンバ
ー20は、電極23.23がそれぞれ支持電極5.6と
圧接した状態で、支持電極5,6の付勢力により安定に
支持される。At this time, the cell electroprocessing chamber 20 has electrodes 23.
23 are mounted so as to face the support electrodes 5.6, respectively. The cell electroprocessing chamber 20 mounted in the groove 4 is stably supported by the urging force of the support electrodes 5 and 6, with the electrodes 23 and 23 being in pressure contact with the support electrodes 5 and 6, respectively.
細胞電気処理チャンバー20が多数個装着されたチャン
バー支持部材2には、蓋3が装着される。A lid 3 is attached to the chamber support member 2 to which a large number of cell electroprocessing chambers 20 are attached.
このとき、上述t7たように、リードビン16とチャン
バー支持部材2の起立部7に設けられた導体10とが接
続されるごとになる。これにより、リードビン16,1
6は、それぞれ支持電極5,6に電圧を印加するための
端子となる。At this time, as described above at t7, each time the lead bin 16 and the conductor 10 provided on the upright portion 7 of the chamber support member 2 are connected. As a result, the lead bins 16,1
6 is a terminal for applying a voltage to the supporting electrodes 5 and 6, respectively.
次に、細胞電気処理チャンバー20内で細胞融合や遺伝
子導入を行うために、細胞電気処理チャンバー20に電
圧を印加する。このとき、図示しないパルス電圧発生装
置からの電極をリードビン16.16に装着する。そし
て、リードビン16゜16にパルス電圧を印加する。第
1図左側のり一ドビン16からの電流は、導体10、リ
ード線11、端子15、導体14、及び支持電極5を介
して細胞電気処理チャンバー20の電極23へと流れる
。一方、第1図右側のリードビン16からの電が1は、
導体IO、リード線11、端子12、及び支持電極6を
介して細胞電気処理チャンバー20の他方の電極23へ
と流れる。これにより、細胞電気処理チャンバー20内
で°は、細胞懸濁液に電圧が印加され、細胞融合や遺伝
子導入が実行される。なお、本実施例では、チャンバー
支持部材に装着された多数個の細胞電気処理チャンバー
20に対して、同一の条件で電圧を印加することができ
る。このため、それぞれの細胞電気処理チャンバー20
内に収納された種類の異なる細胞懸濁液に対して同一条
件下で電気処理を施すことが可能である。Next, a voltage is applied to the cell electroprocessing chamber 20 in order to perform cell fusion and gene transfer within the cell electroprocessing chamber 20 . At this time, an electrode from a pulse voltage generator (not shown) is attached to the lead bin 16.16. Then, a pulse voltage is applied to the lead bin 16°16. Current from the glue dobbin 16 on the left side of FIG. 1 flows through the conductor 10, the lead wire 11, the terminal 15, the conductor 14, and the support electrode 5 to the electrode 23 of the cell electroprocessing chamber 20. On the other hand, the voltage 1 from the lead bin 16 on the right side of Figure 1 is
It flows via the conductor IO, the lead wire 11, the terminal 12, and the support electrode 6 to the other electrode 23 of the cell electroprocessing chamber 20. As a result, a voltage is applied to the cell suspension within the cell electroprocessing chamber 20, and cell fusion and gene transfer are performed. In this example, voltage can be applied under the same conditions to a large number of cell electroprocessing chambers 20 attached to the chamber support member. For this reason, each cell electroprocessing chamber 20
It is possible to perform electrical treatment on different types of cell suspensions housed within the same conditions.
このような本実施例は、チャンバー支持部材2が旋盤加
工の容易な円形状に形成されているため、安価に提供す
ることができる。また、細胞電気処理チャンバー20を
環状に配置することができるため、多数個の細胞電気処
理チャンバー20を装着できる細胞電気処理装置であっ
てもコンパクトに構成することができる。This embodiment can be provided at low cost because the chamber support member 2 is formed into a circular shape that can be easily lathed. Moreover, since the cell electroprocessing chambers 20 can be arranged in a ring shape, even a cell electroprocessing apparatus that can accommodate a large number of cell electroprocessing chambers 20 can be configured compactly.
上述の実施例では、チャンバー支持部材2の溝4に多数
の細胞処理チャンバー20を装着したが、)筒4には、
溝4に適合する1個の円環状の細胞電気処理チャンバー
が装着されてもよい。In the above-mentioned embodiment, a large number of cell processing chambers 20 were installed in the groove 4 of the chamber support member 2;
One circular cell electroprocessing chamber that fits into the groove 4 may be installed.
このような細胞電気処理チャンバーの一例を第5図に示
す。この細胞電気処理チャンバー30は、円環状のガラ
ス底31と、このガラス底31上面の外周部と内周部と
にそれぞれ取り付けられた1対の円環状の電極32a、
32bとを有し−ζいる。An example of such a cell electroprocessing chamber is shown in FIG. This cell electroprocessing chamber 30 includes an annular glass bottom 31, a pair of annular electrodes 32a attached to the outer and inner peripheries of the upper surface of the glass bottom 31, respectively.
32b and −ζ.
電極32a、32bは、それぞれ対向する面の上部に互
いに離れていくような傾斜面32a、33aを有してい
る。1対の電極32.33の間には、溝34が形成され
ている。溝34には、所定の細胞懸濁液を注入すること
ができる。The electrodes 32a and 32b each have sloped surfaces 32a and 33a that move away from each other at the top of opposing surfaces. A groove 34 is formed between the pair of electrodes 32,33. A predetermined cell suspension can be injected into the groove 34 .
このような細胞電気処理チャンバー30は、第5図に示
すように、チャンバー支持部材2の溝4に装着される。Such a cell electroprocessing chamber 30 is installed in the groove 4 of the chamber support member 2, as shown in FIG.
このとき、支持電極5,6は、それぞれ電極32.33
に圧接し、またこれにより細胞電気処理ナヤンバー30
は溝4に安定に支持される。At this time, the supporting electrodes 5 and 6 are electrodes 32 and 33, respectively.
, and this also allows the cell electrolysis treatment Nayanbar 30
is stably supported in the groove 4.
なお、チャンバー支持部材2の底面において溝4と対応
する位置に観察孔40が設けられてい°ζもよい(第2
図1第5図参照)。この場合には、観察孔40の下方と
上方とにそれぞれ顕微鏡の対物レンズと光源とを配置す
るこ゛とにより、細胞融合等の状態を顕微鏡観察するこ
とが可能となる。Note that an observation hole 40 may be provided at a position corresponding to the groove 4 on the bottom surface of the chamber support member 2 (°ζ).
(See Figure 1 and Figure 5). In this case, by arranging a microscope objective lens and a light source below and above the observation hole 40, respectively, it becomes possible to observe the state of cell fusion, etc. with a microscope.
この細胞電気処理装置1は、コンパクトに構成されてい
るため、顕微鏡のステージ上に載置するのが容易である
。Since this cell electroprocessing device 1 has a compact structure, it is easy to place it on the stage of a microscope.
本発明による細胞電気処理装置では、上述のようなチャ
ンバー支持部材と電圧印加部材とを備えている。このた
め、本発明の細胞電気処理装置は、コンパクトに構成で
き、また安価に提供することができる。また、チャンバ
ー支持部材に装着された複数個の細胞電気処理チャンバ
ーに対して同一条件下で電圧を印加することができる。The cell electroprocessing device according to the present invention includes a chamber support member and a voltage application member as described above. Therefore, the cell electroprocessing device of the present invention can be configured compactly and can be provided at low cost. Further, voltage can be applied under the same conditions to a plurality of cell electroprocessing chambers attached to the chamber support member.
第1図及び第2図はそれぞれ本発明の一実施例の縦断面
図及び一部省略平面図、第3図はその支持電極の縦断面
斜視部分図、第4図は細胞電気処理チャンバーの一例の
正面図、第5図は本発明の一実施例に他の細胞電気処理
チャンバーを取り付けた状態を示す縦断面部分図である
。1 and 2 are a vertical cross-sectional view and a partially omitted plan view of an embodiment of the present invention, respectively, FIG. 3 is a vertical cross-sectional perspective partial view of the supporting electrode, and FIG. 4 is an example of a cell electroprocessing chamber. FIG. 5 is a vertical cross-sectional partial view showing a state in which another cell electroprocessing chamber is attached to an embodiment of the present invention.
Claims (1)
細胞電気処理装置であって、 複数個の前記細胞電気処理チャンバーを環状に配置して
支持し得るチャンバー支持部材と、前記チャンバー支持
部材に設けられた、前記細胞電気処理チャンバーに電圧
を印加するための電圧印加部材と、 を備えた細胞電気処理装置。(1) A cell electroprocessing device for applying voltage to a cell electroprocessing chamber, comprising: a chamber support member capable of supporting a plurality of cell electroprocessing chambers arranged in a ring; and a chamber support member provided on the chamber support member. A voltage application member for applying a voltage to the cell electroprocessing chamber, wherein the cell electroprocessing device is provided with:
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JP1273556A JPH03133373A (en) | 1989-10-19 | 1989-10-19 | Electric cell treatment unit |
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JP1273556A JPH03133373A (en) | 1989-10-19 | 1989-10-19 | Electric cell treatment unit |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
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JPH03133373A true JPH03133373A (en) | 1991-06-06 |
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Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
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-
1989
- 1989-10-19 JP JP1273556A patent/JPH03133373A/en active Pending
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