JPH03115228A - 免疫抑制剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 発明の背景 プロスタグランジン類は、生物学的に効能のある脂質酸
類の一群である。それらは、文字により命名すれ、シク
ロペンタン環上の置換基により区別される数種の主分類
に分類されている。更に主分類は、側鎖中の二重結合の
数に従って細分化される。この更なる細分類は、特定の
プロスタグランジンの類字略語の下付文字により示され
る。

ある場合において、プロスタグランジン類自体が免疫抑
制活性を示すことが知られている。プロスタグランジン
類自体の免疫抑制活性は認められているが、免疫抑制活
性を示すために要求される比較的高いプロスタグランジ
ン濃度は、グロスタグランジンの免疫抑制剤としての長
期的使用が不可能となるのに充分な高さである。プロス
タグランジン類が高い投与濃度で投与された場合に１下
痢、腹痛、月経異常および発熱等の有害な副作用を示す
ことけ、よく知られている。

ある種のプロスタグランジン類と公知の免疫抑制剤との
組合せＫついても評価されて（ｂる。プロスタサイクリ
ンは、Ｌｅｉｔｈｎｑｒらにより、腎臓移植受容者に関
する免疫抑制活性を測定するためにプレドニソロン（ｐ
ｒｅｄｎｉｓｏｌｏｎｑ　）およびアゾチオプリン（ａ
ｚａｔｈｉｏｐｒｉｎｑ　）との組合せにおいて８人の
患者のヒトにおける研究で評価されている（　Ｐｒｏｓ
ｔａｇｌａｎｄｉｎｓ　、　Ｖｏｌ、　２２．４５．１
９８１年１）月）。プロスタサイクリンは、ＰＧＩ２プ
ロスタグランジンである。これは、患者が移植について
拒絶反応を示した後に１中心静脈内に急性的に投与され
た。

プロスタサイクリンまたはＰＧＩ、類似体であるアイロ
ブロスト（ｌ１ｏｐｒＯｓｔ　）は、ラットの心臓同種
移植片の研究において免疫抑制剤としての活性が評価さ
れている。Ｒｏｗｌｅｓらは、アイロブロストおよびシ
クロスポリン（ＣｓＡ　）の組合せなちびにシクロスポ
リンおよびプレドニソロンの組合せの免疫抑制活性につ
いて比較した（Ｔｒａｎｓｎｌａｎ−ｔａｔｉｏｎ、　
Ｖｏｌ、　４２、ｊＫｌ、　　１９８６年７月）。

プロスタグランジンおよびＣｓ’Ａの投薬は、非経口的
に投与された。シクロスポリンのプレドニソロンとの組
合せが、シクロスポリンとアイロブロストとの組合せよ
り優れた免疫抑制活性を示すが、１’ｔＯｗｌｅ、ｃら
は、アイロブロストがプレドニソロンを置換する為に有
用であり得ることを示唆した。

アイロブロストの投与は、ｋｇあたり０．７２ｍＱを浸
透ポンプにより毎日行なった。

［ｏｒｔらの米国特許第４．４５２，７９４号は、移植
拒絶用薬剤としてのプロスタグランジン類の使用につい
て記述している。これにおける研究は、ＰＧＥ、類似体
に関し、心臓整値を受けたラットにおいて評価された。

ラットは、最初にアゾチオプリンまたはプレドニソロン
を投与を受け、次いで移植後５白目に、ＰＧＥ１プロス
タグランジン類似体を諭あたり１ａ２含むアザチオプリ
ンまたはプレドニソロンと、ＰＣ）Ｅ、類似体との混合
物を、経口的に投与された。ＫＯｒｔらは、主免疫抑制
剤として使用されるコルチコステロイげ（プレドニソロ
ン）またはメルカプトプリン（アゾチオゾリン）の免疫
抑制活性を増強するＰＧＥ１類似体の使用をクレームし
ている。

同様に行なわれた研究において、Ｒｙｆｆｅｌらは、腎
臓同種移植を受けたラットにおける免疫抑制剤シクロス
ポリンとの組合せＫよるＰＧＥ　２類似体の免疫抑制活
性の測定の研究を行なった（　Ｔｒａｎｓ−ｐｌａｏｔ
ａｔｉｏｎ　Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ　、　Ｖｏｌ、　
ＸＷ　、　Ａ　４．１９８６年８月）。Ｒｙｆｆｅｌら
は、ＰＧＦ２類似体が、ｋｇあたり１０μＩ投与量のミ
ニポンプによる皮下的投与においてシクロスポリンの腎
毒性を無くすることを見出したが、シクロスポリンの腸
内吸収を阻害することから、ＰＧＥ２の使用を勧めなか
った。彼らは、免疫抑制の低減を伴うシクロスポリンの
生物学的利用能の減少が、ＰＧＥ２のシクロスポリン腎
毒性防止のための臨床的使用を妨げること金運べている
。

上述したように１ゾロスタグランジン類の免疫抑制性に
ついての教示はなされていたが、Ｅおよび工系ゾロスタ
グランジン類は、免疫抑制剤として臨床的に成功裏に使
用されたことはなかった。

今日オでの教示は、有意な免疫抑制をヒトにおいて得る
ために必要な投与量が、耐え難いほどに多いことを示し
ている。

シクロスポリンは、１）個のアミノ酸からなる環状＆　
ＩＪペゾチドであり、真菌の種であるトリボフラジラム
・インフラツム・ガムス（Ｔｏｌｙｐｏｃｌａ　−ｄｉ
ｕｍ　ｉｎｆｌａｔｕｍ　Ｇａｍ５　）　Ｋよる代謝物
として産生きれる。シクロスポリンは、免疫抑制剤とし
て広く使用されており、特に移植受容者を移植器官の拒
絶から助けるために有用である。シクロスポリンの使用
のあいにくな副作用は、それが急性の腎毒性を示すこと
である。シクロスポリンの使用は、処置が腎臓整値であ
る場合には移植された腎臓自体を含めて、器官移植を受
けた患者に明らかな腎臓障害を引き起こし得る。ここで
使用されるシクロスポリンなる用語は、シクロスポリン
およびその類似体、特にシクロスポリンＡ　（Ｃ８Ａ）
を包含している。シクロスポリンＡは、５ａｎｄｏｚ社
から商業的に入手可能である。

本発明の要約 本発明は、シクロスポリン含有免疫抑制剤の投与、およ
び免疫抑制剤増強に有効な投与量のＥ−型プロスタグラ
ンジンの投与による免疫抑制を要する患者に対する免疫
抑制付与方法に関する。特に本発明け、シクロスポリン
を含有する免疫抑制剤の免疫抑制に有効な投与量におけ
る投与、および免疫抑制剤増強に有効な投与量のＥ−型
プロスタグランジンの投与による免疫抑制を要する患者
に対する免疫抑制付与方法に関する。更に特には、この
発明は、シクロスポリン含有免疫抑制剤が単独で投与さ
れた場合の免疫抑制有効量以下の量による該シクロスポ
リン含有免疫抑制剤の投与、および免疫抑制剤増強に有
効な投与量のＰＧＥ１、ＰＣ＋Ｅ２またはＰｉ’）Ｅ３
等のＥ−系のプロスタグランジンの投与による免疫抑制
を要する患者に対する免疫抑制付与方法に関するもので
ある。

従って、本発明は、シクロスポリン含有免疫抑制剤の腎
機能抑制効果低減のための、該シクロスポリン含有免疫
抑制剤との組合せにおける使用のためのＥ−型ゾロスタ
ブランジン忙関し、特に次式 （式中、Ｒは水素または１ないり、　６個の炭素原子を
有する低級アルキルを表わし；Ｒｏは水素、ビニルまた
は１ないし４個の炭素原子を有する低級アルキルを表わ
し、波線はＲまたけＳ立体化学を表わし；Ｒ２、Ｒ−＋
およびＲ４は水素もしくは１な（八し４個の炭素原子を
有する低級アルキルであるか、またはＲ２およびＲ３は
炭素Ｙと共に４ないし６個の炭素原子を有するシクロア
ルケニルを形成するか、またはＲ３およびＲ４は炭素Ｘ
およびＹと共に４ないし６個の炭素原子を有するシクロ
アルケニルを形成し、Ｘ−Ｙ結合は飽和もしくは不飽和
であり得る） から選択される構造式を有するＥ−型プロスタグランジ
ンに関するものである。

更ＩＣ特定的には、該Ｅ−型型口ロスタグランジン、２
．５智／ゆ７日ないし約４０〜／ｋｙ／日の投与量にお
いて投与される。捷た、本発明において該プロスタグラ
ンシンは、該シクロスポリン含有免疫抑制剤が単独で投
与される場合の免疫抑制有効量より少ない量をもって該
シクロスポリン含有免疫抑制剤の投与を可能とするもの
である。更にまた本発明のＥ−型プロスタグランジンは
、シクロスポリンとの組合せおよび第２の免疫抑制剤と
の組合せにおいて使用され、前言１シクロスポリン含有
免疫抑制剤は、約３雫／ｋｌ？／日ないし約１８■／に
９／日の投与量において投与されることが好オしい。本
発明のＥ−型プロスタゲランジンとしては、例えばミゾ
ゾロストール（ｍ１ｓＯｐｒＯｓｔｏ１　）およびエニ
ソゾロスト（ｅｎｉｓｏｐｒｏｓｔ　）が好ましい。本
発明のＥ−型プロスタグランジンは、例えば約１２０〜
／ｋｇ７日までの投与量で投与される。

更に別の面において、本発明は、シクロスポリン含有免
疫抑制剤との併用投与プロスタグランジン。（９）該Ｅ
−型プロスタグランジンを含有する改良された免疫抑制
剤に関するものである。

図面の簡単説明 に１ってよシ良く理解されるであろう。

第１図は、血清クレアチニン対時間金示す臨木的研死の
紹来のグラフである。血清クレアチニノの変化が、６ケ
月の治僚ｐよび６ケ月の停止について示されている。腎
臓移植は、時間ＯＫＤいて行なわれた。ＰＧｇ１プロス
タグランゾン：塗りつぶした四角。プラシーボ：白ぬき
の丸。

第２図は、クレアチニン浄化値対時間分示す同様なヒト
の臨床的研究の結果のグラフである。クレアチニン浄化
値の変化が、６ケ月の治療および１ケ月の停止について
示されている。腎臓移植は、時間０において行なわれた
。ＰＣ）Ｅ】プロスタグランゾン：塗シつぶした四角。

グラシーボ：白ぬきの丸。

第６図は、平均シクロスポリン投与蓋対時間を示す同様
なヒトの臨床的ωＦ究の結果のグラフである。平均投与
蓋は、４過分ＩＩ６について示されている。ＰＧＥＩ　
７’ロスタグランゾン：広い斜線。グラシーボ：狭い斜
線。

第４図は，　ＨＰＬＣ　（高速液体クロマトグラフィ）
によるトロフシクロスポリン血中磯度を示す同様なヒト
の臨床的研究の結果のグラフである。時間に対するトロ
フ濃度の変化が６週間について示されている。腎臓移植
は、ナ１の週の最初に行なわれた。ＰＣ）Ｅｌｆロスタ
グランジン：塗夛つぶした丸。ゾラシーボ：白ぬきの丸
。

第５図は、急性シクロスポリン腎毒性を示す同様なヒト
の臨床的研究の結果のグラフである。最初のエピソード
の発生率が１６週間について示されている。腎臓移植は
、ナ１の週の最初に行なわれた。ＰＧＥ　１ゾロスタグ
ランゾン：広い斜線。プラシーボ：狭い斜線。

第６図は、ヒトの臨床的研究からの急性拒絶データを示
すグラフである。最初のエピソードの発生率が１６週間
について示されている。腎臓移植は、ナ１の週の最初に
行なわれた。ＰＧＥ　１プロスタグランゾンによる治療
は、ナ１２の週に停止した。ＰＯＥ１プロスタグランゾ
ン：広い斜線。プラシーポ：狭い斜線。

第７図は、ある橿のプロスタグランシンについての混合
リンパ球応答（ＭＬＲ）を示すグラフである。

混合リンパ球応答の阻害百分率が、薬剤濃度の７０ｇ変
化で５について示されている。ＰＣ）Ｅ１ノロスタグラ
ンジン：途りつぶした四角。ｐＧｇ２７’ロスタグラン
ジン：白ぬきの四角。ＰＣ）Ｅ１ｆロスタグランジン遊
離酸：塗シつぶした丸。

第８図は、ある種のプロスタグランジンおよびエタノー
ルの混合リンパ球応答を示すグラフである。混合リンパ
球応答の阻害百分率が、６種のプロスタグランシンにつ
いて希釈剤として存在するエタノールの濃度と共にそれ
ぞれ６種の濃度について示されている。ＰＣ）Ｅ１ｆロ
スタグランジン：塗シつぶした四角。ＰＧＥ１ｆロスタ
グランシン遊離酸：塗りつぶした丸。ｐＧｇ２プロスタ
グランシン：白ぬきの丸。エタノール：白ぬきの四角。

第９図は、免疫抑制剤濃度の倍増に対するＭＬＲ応答の
グラフである。該混合リンパ球応答の阻害百分率が、Ｐ
ＧＥ、プロスタグランジン遊離酸（塗シつぶした三角）
、シクロスポリン（白ぬきの丸）およびメチルプレドニ
ソロン（白ぬきの四角）の濃度の１Ｘおよび２ｘについ
て示されている。

第１０図は、ｐＧＥ、プロスタグランジン遊離酸の免疫
抑制効果を示すグラフである。該遊離酸が、シクロスポ
リン（塗夛つぶした四角（シクロスポリン単独は白ぬき
の丸で示しである））およびメチルプレドニソロン（塗
りクぶした丸（メチルプレドニソロン単独は白ぬきの四
角で示しである））のいずれに添加された場合にも相加
効果以上であることが示されている。

本発明の詳細な説明 本発明は、シクロスポリンを含有する免疫抑制剤の投与
および免疫抑制剤増強に有効な投与量におけるＥ−系プ
ロスタグランジン（ＰＧＥ）の投与による免疫抑制を要
する患者に免疫抑制を付与する方法である。ここにおい
て示す方法から導かれる一つの利点は、ＰＧＥの投与が
シクロスポリン含有免疫抑制剤の免疫抑制活性を増強し
、これによってシクロスポリン含有免疫抑制剤をプロス
タグランシン無しで使用した場合の濃度よシ低濃度で該
シクロスポリン含有免疫抑制剤を使用し得ることである
。該方法から導かれる第２の利点は、ＰＣ）ｇの投与が
シクロスポリンの免疫抑制活性を増強し、これによって
シクロスポリン含有免疫抑制剤を、これがプロスタグラ
ンジン無しで投与された場合の投与蓋と同等量投与した
場合によシ大きい免疫抑制効果が達成され、このことは
、患者の自己免疫系による拒絶のために腎１減に与える
損傷を低減するであろう点にある。シクロスポリンの使
用の公知の有害な副作用の点においては、この方法は、
シクロスポリンの有害な副作用の恐れおよび／または出
現を減少し得る。

「プロスタグランシン１および／またはその認められた
類字略語”　ＰＧ　＠、あるいはこζにお込てＥ−系プ
ロスタグランジンについてよう適切に使用される”　Ｐ
ＧＥ　”なる用語は、ここでは天然に生成するか、また
は人工的なＥ−系プロスタグランジンならびにそれらの
類似物および訪導体を示すために使用される。

ここにおいて、 下記式 によシ示され乙Ｅ１ プ ロスタグランジン類、 下記式■によシ示されるＥ２ｆロスタグランソン類、 および下記式■によう示されるＥ３ゾロスタグランジン
類、 （式中、 Ｒは水素または１ ないし６１）ｉ！ｉｔの炭素原子 を有する低級アルキルを表わし、Ｒ１は水素、ビニルま
たは１ないし６個の炭素原子を有する低５級アルキルを
表わし、かつ波線はＲまたはＳ立体化学を表わし、Ｒ２
、Ｒ３およびＲ６は、水素もしくは１ないし４個の炭素
原子を有する低級アルキルであるか、またはＲ２および
Ｒ３は炭素Ｙと共に４ないし６個の炭素原子を有するシ
クロアルケニルを形成するか、またはＲ３およびＲ３は
、炭素ＸおよびＹと共に４ないし６個の炭素原子を有す
るシクロアルケニルを形成する）、 が見出された。

低級アルキルは、示された炭素原子数の限定によって、
メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、エチル、第
二エチルもしくは第三エチル、ペンチル、またはヘキシ
ル等の直鎖または分枝アルキルを意味する。炭素Ｘと炭
素Ｙとの間の結合は、飽和または不飽和であり得る。

示した構造式について、破線は該構造が描かれた紙面の
後方にある基を、また塗シつぶされた黒い三角形は、基
がこの紙面の前方にあることを示している。

この発明の方法において使用されるプロスタグランシン
類は、公知の反応工程、例えば米国特許第６．９６５，
１４６号、４，２７１，６１４号、および４．６８５．
６２８号に示されている方法によシ調製することができ
る。個々の異性体は、クロマトグラフ的分離法によシ得
ることができる。

選択される投与経路とは関係なく、この方法において使
用されるプロスタグランジンは、製薬技術において公知
の慣用的方法によって製薬学的に許容される投与形態に
製剤することができる。

該グロスタグランシン化合物は、錠剤、カプセル、ピル
、粉末、顆粒等の経口単位投与形態にて投与することが
できる。それらは、腹嘆内的、皮下的または筋肉内的に
製薬学的に公知の形態に訃いて投与することもできる。

−船釣には、好ましい投与形態は経口である。有効かつ
非毒性量のプロスタグランシンが、治療に用いられる。

本発明の方法についての投与摂生は、患者の体型、年令
、体重、性、および医学的症状、患者が受けた特定の器
官移植、投与経路ならびに使用された特定のプロスタグ
ランジンを含む種々の因子に応じて選択される。この方
法に２いて有用なプロスタグランシンの投与量は、１日
あたシ１２０μｇ　／　ｋｇまでの範囲であジ、好まし
い範囲は、１日あたシ２．５μｇ　／　ｋｇから４０μ
ｇ１ｋｇである。上記因子に依存して、より多いか、ま
たは少ない投薬も行なうことができる。

ここにおいて使用される１免疫抑制剤警なる用語は、単
一化合物、組成物、組合せおよび／またはこのような化
合物、組成物および組合せの同時投与摂生であろうが、
免疫抑制療法を必要とする患者の自己免疫を抑制するた
めの治療的摂生において投与されるいかなる薬剤をも意
味する。例えば、“免疫抑制剤１なる用語は、コルチコ
ステロイド（例えば、！レドニソン、メチルプレドニン
ロン等）またはメルカプトプリン（例えばアゾチオプリ
ン）等の補助的ステロイド治療と共に投与されるシクロ
スポリンを含有する。

ここにおいて使用される“免疫抑制有効投与量１なる用
語は、免疫抑制剤に関して、そのような治療全必要とす
る患者において、自己免疫の必要な抑制を付与するため
に充分な投与量を意味する。

特定の投与量は、先にプロスタグランジンの投薬に関し
て示したものと同様な因子に依存している。

該特定の投薬は、処方医の技術範囲内にある。

Ｐｈｙａｉｃｉａｎ’ｌｉ　ＤｅＢｋ　Ｒｅｆｅｒｅｎ
Ｃｅ　、第４２版（１９８８）は、手術後に１ないし２
週間継続されるシクロスポリンの１日あたシの単独投与
′Ｍを１４−１８ｍ９／ｋ１７日として示している。こ
の投薬は、１週あたシに５％づつ、維持水準５−１０　
ｍ９７ｋｇ１日まで減少される。この投薬は、特定の血
清水準または全血水準が達成されるように、上方または
下方に調節されてもよい。６η／に９７日程度の低量の
投薬もまだ、使用されている。

この方法は、治療を必要とする患者へのシクロスポリン
含有免疫抑制の投与、および該患者へのＥ−系プロスタ
グランジンの投与によ９行なわれる。これらの２檎類の
投与工程は、上述した日投薬′ｆｃ達成するために、ど
のような順序および投与工程間の時間経過をもって行な
うこともできる。

この方法の工程を実行する順序および時間は、免疫抑制
摂生を処方する医師の技術範囲内に充分に含まれる。

この方法の有効性は、インビトロならびにインビボ臨床
試験を通して示さｎている。無作為の、二重盲検、プラ
シーボ調節した研究が、（１）腎臓移植受容者における
シクロスポリン誘導腎毒性についてのＰＧＥニブロスタ
グランシンの安全性および有効性の測定：ならびに（２
）急性移植拒絶等の臨床的に重要な事項の発生率に対す
るＰＣ）Ｅ１プロスタグランジンの効果の試験のために
設計された。

評価されたプロスタグランジンＰＧＥは、ミゾプロスト
ール（ωメチル１）α、１６−シヒドロキシー１６−メ
チル−９−オキツブロスト−１６Ｅ−エン−１−オエー
ト）であった。７７人の被験者の研究母集団を評価した
。有効性は、ＰＧＥ　、プロスタグランジンおよびゾラ
シーボ群において、腎機能の連続的比較、ならびに移植
拒絶の持続と機能的な激しさ、シクロスポリン腎毒性お
よび急性腎疾患の他のエビソーげの測定によって評価し
た。血清クレアチニンおよびクレアチニン浄化の連続的
測定を、治療群間の腎機能の進展および差異の測定に使
用した。

臨入研究における被験者を、最初に同種移植片の供給者
としての死または生存−関連供給者によって２つの群に
層形成した。各群の構成員は、研究開始に先立って調製
されたコンピュータ作成側あて計画に従って、　ＰＧＥ
１ゾロスタグランジンまたはプラシーポを受ける登録順
序を無作為に割あてられた。この手続の目的は、同種移
植片供給者の関数および起こシ得る移植後関数としての
被、験者の適切な無作為化を保証するためであった。

プロスタグランジン９投与をシクロスポリンの最初の投
与と共に開始した。被験者は、プロスタグランシンＱ、
１．Ｄ、をｐ−ｃ−（食後）６０分およびり、ｓ、（夜
中）に受けた。該グロスタグランシンは、最初は経鼻的
両用チューブを通して投与され得た。患者の退院に続い
て、該患者は、プラシーポまたはプロスタグランジンの
服用を開始し、また１日の投与量を記録した。該試験品
投与は、ｐ、ｃ、５０分およびり、ｓ、計画全継続して
１錠Ｑ、ｒ−Ｄ。

を維持した。

血液学的および化学的プロフィールを、移植後第１日２
よび第７日ならびに４週間後に再度得た。

化学的プロフィールを、８週および１２週に得た。

尿分析を、術後第１日と４週間後に再度得た。

２４時間のクレアチニン浄化測定を、術後、１．６およ
び７日、次いで週毎に６週間、その後は試験終了まで４
週間隔で得た。

血清クレアチニン測定を、術後、１．６および７日、次
いで４．８．１２および１６週に得た。

（注＝１および６日目については図中に示されていない
） トラフシクロスポリン水準は、１．５．５および７日月
；２．６および５週目には各週２回；ならびに８．１２
および１６週目には少なくとも週１回を必要とした。

急性腎不全は、次の存在として定義された：１）主要な
研究者に診断的行動（例えば、血清クレアチニン濃度ま
たは尿ナトリウム濃度の測定）または治療釣行ＩＩ！Ｊ
（例えば、静脈内液の供給）を促して評価または変化の
治療を行なわせる腎機能の変化。

２）血清クレアチニン濃度の安定した基線からの２日間
にわたる少なくとも０．２　ｍ９　／　ｃｉｌ／日また
は１日間ＧＯ０，５１！！９／　ｄ７？　Ｏ上昇。

６）２４時間以上におよぶ平均して１時間あたシ２５−
を越える尿産生の低下。

１２週間の治療および付加的な週の観察の後、被験者は
身体検査？受け、完全な医学的経歴を再調査された。次
の実験室における試験もまた行なわれた：血液学、ＦＴ
／ＰＴＴ　、化学、尿分析、クレアチニン浄化、シクロ
スポリン濃度および血清ベータＨＣＧ　（適切な場合）
。これに加え、治療後の期１ｂ」に得られたクレアチニ
ン濃度または浄化値のすべての測定は記録された。

ヒトの臨床的研究の結果は、グロスタグランシンが＝（
１）第１図および第２図に示されるように、腎機能の改
善；（２）第６図および第４図に示されるようにシクロ
スポリン吸収と非干渉；（３］第５図に示されるように
シクロスポリン腎毒性を増大しないこと、および８１６
図に示されるように急性腎不全の発生率を顕著に低減し
て免疫抑制を増強することを示している。

臨床的試験の結果は、下記第１表に示されている。

第　　１　　表 試験　　　薬剤　　　　１月目　　２月目　　６刃口り
レアチニ７　プラシーボ　　　２．２±０．２　　Ｌ９
±０．２１．８±０．１（ｗａｚ）　　ＰＧｇｍ　　　
　　　１．６±０．２　１．４±０．１　１．４±［］
、１クレアチニン　プラシーボ 沖化値　　ｐＧｇｌ （Ｗ分／１．７２　ｍ”） ６０±５６６±５６４±５ ７６±５７７±６８１　±５ 第１表に示されるように、急性拒絶は、ＰＧＥ。

プロスタグランジンによる治療の６ケ月間、顕著に減少
している（　ｐ＝０．０１５　）。この研究から、ＰＧ
Ｅｌｆロスタグランジンは、シクロスポリン治療腎臓移
植受容者において腎機能を改善し、かつ急性移植拒絶を
低減することが結論され得る。

インビトロにおけるプロスタグランシン類およびシクロ
スポリンに対するそれらの効果の研究も行なわれた。こ
の研究においては、通常ミゾゾロストールと称され、一
般式ＩＫＤいてＲおよびＲ１がメチル、Ｒ２、Ｒ３およ
びＲ４がすべて水素である構造式を有するＰＧＥ１プロ
スタグランジン、その遊離酸（ミゾグロストール遊離酸
）ならひに通常エニングロストと称され、一般式Ｈにお
いてＲおよびＲ１が共にメチル、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４
がすべて水素でありＸ−Ｙ結合が飽和された構造式を有
するＰＧＥ２プロスタグランシンを評価した。これら６
種のプロスタグランジンは、混合リンパ球応答（ＭＬＲ
）の１且害に対するそれらの効果を測定するために研究
された。

混合リンパ球応答は、薬剤の免疫抑制活性について臨床
的に有用な予言者である。以下の、および第７図−第１
０図に示される混合リンパ球応答アッセイデータは、次
の方法により得られた。

Ｅｐ８　Ｌｅｌｎ−Ｂａｒｒウィルス（ｇ、ｓｖ）形質
転換連続リンパ珠芽細胞株の刺激パネルを、応答全増大
するために用いた。８種類の異なったＨＬＡ−朋抗原（
−細胞株毎に２精類）を有する４補類の細胞株を同数と
し友。刺激細胞は、修飾ＲＰＭＩ培地中に懸濁する前に
照射（ｉ　６，０００　ｒａｄ　）　ｆ：受けた。応答
リンパ球は、ヘパリン化受容者血から、１０％の自己血
ｍを含む抗生物質添加ＲＰＭＩ培地を有するグルタミン
中に懸濁する前に、密度勾配分離により調製した。同数
の応答および刺激細胞Ｃ０，１ｄ中Ｉ　Ｘ　１０５）を
、０．０５ｒｎ／の培地（対照）マタハ６種のプロスタ
グランジン類似体（ミゾゾロストール、アニソールおよ
びミゾグロストール遊離酸）の変化させた濃度、あるい
はメチルプレドニソロンもしくはシクロスポリンまたは
これらの薬剤の組合せによシ培養した。

６７℃および５％ＣＯ２における５日間の培養に続いて
、１マイクロキユリーのトリチウム化チミジンを添加し
、細胞培養物を６時間培養した。次いで細胞を採取した
。次いで６種の異なったプロスタグランジン類似体につ
いてのＭＬＲ応答を、数棟の異なった濃度について比較
した（第７図）。

プロスタグランシン類の効果を、それらの対照エタノー
ル希釈に対しても比較した（第８１）。

混合リンパ球応答（ＭＬＲ）の阻害の瑠犬は、免疫抑制
活性を反映している。第７図に示されるように、６揮類
すべてのｆロスタグランシン類似体について明らかな阻
害の投与量応答現示がある。エタノール希釈剤の効果は
、無視可能であった（第８図）。プロスタグランジンと
シクロスポリンまたはメチルプレドニソロンとの結合ま
たは組合せ投与のＭＬＲへの効果は、第９図および第１
０図に示されている。示されているように、第９図およ
び第１０図のデータの比較によシいずれの薬剤の場合も
グロスタグランシンの存在によシ阻害が増強される。

これらの研究は、ミゾプロストール遊離ｃＲ（プロスタ
グランジン類似体）とメチルプレドニソロンおよびシク
ロスポリンの両者との間の免疫抑制活性の増強について
明らかな証拠があることを示している。これらのインビ
トロのデータは、先に示したインビボのデータに確証を
与え、かつ拡張する。

ここに示した方法の使用は、シクロスポリンの投与を含
む免疫抑制的治療の摂生の免疫抑制効果を増強し得る。

従ってこの方法は、シクロスポリン含有免疫抑制剤のよ
り低い投与量を採用することにより所望の程度の免疫抑
制を与え得る。従って、この方法は、急性拒絶の発生を
低減し、かつシクロスポリンの急性腎毒性を低減するこ
とができる。ここに記述した方法の予期されないが有益
な面は、移植器官についての増強された免疫抑制にもか
かわらず、プロスタグランジンの添加が、研究期間中、
患者に感染に対する感受性を増大しなかったことである
。

【図面の簡単な説明】

第１図は、血清クレアチニン対時間を示す臨床的研究結
果のグラフ、 第２図は、クレアチニン浄化値対時間を示すグラフ、 第６図は、平均シクロスポリン投与量対時間を示すグラ
フ、 第４図は、シクロスポリン血中製置を示すグラフ、 第５図は、急性シクロスポリン腎毒性を示すグラフ、 第６図は、急性拒絶データを示すグラフ、第７図は、グ
ロスタグランジン類についての混合リンパ球応答を示す
グラフ、 第８図は、エタノール希釈剤に関する混合リンパ球応答
を示すグラフ、 第９図は、免役抑制剤縮度に関するＭＬＲ応答のグラフ
、および 第１０図は、　ｐＧｇ】プロスタグランシン遊ｉ４ｍ酸
の免疫抑制効果を示すグラフである。

Claims (10)

【特許請求の範囲】
1. （１）シクロスポリン含有免疫抑制剤の腎機能抑制効果
   低減のための、該シクロスポリン含有免疫抑制剤との組
   合せにおける使用のためのＥ−型プロスタグランジン。
2. （２）次式： ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、Ｒは水素または１ないし６個の炭素原子を有す
   る低級アルキルを表わし；Ｒ＿１は水素、ビニルまたは
   １ないし４個の炭素原子を有する低級アルキルを表わし
   、波線はＲまたはＳ立体化学を表わし；Ｒ＿２、Ｒ＿３
   およびＲ＿４は水素もしくは１ないし４個の炭素原子を
   有する低級アルキルであるか、またはＲ＿２およびＲ＿
   ３は炭素Ｙと共に４ないし６個の炭素原子を有するシク
   ロアルケニルを形成するか、またはＲ＿３およびＲ＿４
   は炭素ＸおよびＹと共に４ないし６個の炭素原子を有す
   るシクロアルケニルを形成し、Ｘ−Ｙ結合は飽和もしく
   は不飽和であり得る）から選択される構造式を有する請
   求項第１項に記載のＥ−型プロスタグランジン。
3. （３）該Ｅ−型プロスタグランジンが、２．５ｍｇ／ｋ
   ｇ／日ないし約４０ｍｇ／ｋｇ／日の投与量において投
   与される請求項第１項に記載のＥ−型プロスタグランジ
   ン。
4. （４）該シクロスポリン含有免疫抑制剤が単独で投与さ
   れる場合の免疫抑制有効量より少ない量をもつて該シク
   ロスポリン含有免疫抑制剤の投与を許容する請求項第１
   項に記載のＥ−型プロスタグランジン。
5. （５）シクロスポリンとの組合せおよび第２の免疫抑制
   剤との組合せにおける使用のための請求項第１項に記載
   のＥ−型プロスタグランジン。
6. （６）該シクロスポリン含有免疫抑制剤が、約３ｍｇ／
   ｋｇ／日ないし約１８ｍｇ／ｋｇ／日の投与量において
   投与される請求項第１項に記載のＥ−型プロスタグラン
   ジン。
7. （７）該Ｅ−型プロスタグランジンがミゾプロストール
   （ｍｉｓｏｐｒｏｓｔｏｌ）を含有する請求項第１項に
   記載のＥ−型プロスタグランジン。
8. （８）該Ｅ−型プロスタグランジンがエニゾプロスト（
   ｅｎｉｓｏｐｒｏｓｔ）を含有する請求項第１項に記載
   のＥ−型プロスタグランジン。
9. （９）該Ｅ−型プロスタグランジンが、約１２０ｍｇ／
   ｋｇ／日までの投与量において投与される請求項第１項
   に記載のＥ−型プロスタグランジン。
10. （１０）シクロスポリン含有免疫抑制剤との併用投与に
    おいて使用するためのＥ−型プロスタグランジンを含有
    する改良された免疫抑制剤。