JPH02129121A - 未梢変性疾患治療剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 発明の産業分野 本発明は、酸素ＴＩ頗塁を環境から除くことによって酸
素遊離基の有害作用遮断剤としての３−インドールピル
ビン酸の使用にｌ３０ｙる。従って、この化合物は、耐
素遊履基由来の多数の変性疾患の治療にＪ３いて有利に
投与できる。

友且且■ 用語末梢病理状１状とは中枢神経系に見いだされる症状
を意味する。

３−インドールピルビン酸はそれ自体公知の化合物であ
る。

その製造に多くの方法が提案されている。

欧州特許節０１０６８１３号明ＩＩ書において、アスパ
ラギン酸アミノトランスフエラーＵを酵素として用いる
３−インドールピルビン酸の酵素合成方法が記載されて
いる。

国際特許出願力ＷＯ８７１００１６９号明細術には、１
−トリプトファンから出発してカップリング反応を用い
る３−インドールピルビン酸の化学合成方法が記載され
ている。

国際特許出願第ＷＯ３８１０９７８９号明細力には、３
−インドールビルごン酸Ｊ３　Ｊ、びそのｍ１体は過剰
の興帛性アミノ酸により、中枢神経系の疾患の治療用薬
剤として記載されている。

数年来、生体に備わった無毒化能よりも高度に生物に生
成した場合の酸素遊１旧よ核酸、蛋白質および膜のよう
な基礎細胞構造を攻撃し、遂には１ＩＩＩＩ１１を死に
至らせ、従ってＭ患組織のあらゆる型の変性疾患に導く
と考えられる。アクタ・フイジオロジカースカンジナビ
力（＾ｃｔａ　Ｐｈｙｓｉｏｌ、５ｃａｎｄ、）Ｓｕｂ
、　／＋　９２に発表された、１９７９年にウプサラ（
スウェーデン）において開催された国際シンポジウムの
論文に−３いて、酸木、ＴＩＩＩ！１塁番よ、中枢（脳
虚血症、低血糖症、低１ｌｉｌＩＩＦｉ血症）および末
梢１ｍ鳴、急性および慢性炎症、免疫障害）の両者の多
くの疾患の原因として示された。

１９８４年にＲａｖｃｎｐｒｃｓｓによって出版された
巻（「フリー・ラジカルズ・イン・モレ１ニラ−・パイ
ＡＯジー・エイジング・アンド・デイズイーズ（Ｆｒｅ
ｅ　ｒａｄｉｃａｌｓ　ｉｎ　Ｍｏ１ｅｃｕｌａｒ　Ｂ
ｉｏｌｏｇｙ、Ａｇｉｎｇａｎｄ　Ｄｉｓｅａｓｅ）　
Ｊにおいてｌ’！索、ＢＨの過剰の存在は前記の障害の
みでなく、また人聞がすべて関与する正常の老化の原因
と考えられる。

モレキュラー・７スベクツ・Ａ−トメデイシン（Ｈｏｌ
ｅｃ、＾５ｐ（ＩＣｔＳ　Ｈａｄ、　）　８巻第８９　
ｅＪ〜１９３　ｒｓに、Ｂ、１ｌａｌ　Ｉ　ｉｗｃｌ　
ＩおよびＨ，Ｃ，Ｇｕｔｔｃｒｉｄｏｃにより発表され
た、１９８５年の広汎な立証された総説において、、ｉ
＊ｍは、炎症および自己免疫障害から多数の神経障害、
マラリアＪ３よび腫瘍を初め呼吸不全、老化、腸および
心虚血、脳虚血からの症畝群までの範囲にある疾患の原
因として記載されている。

前記の国際特許出願ＷＯ３Ｂ１０９７Ｂ９明細山におい
て、多分酸素遊離基の介入ににっでインドール環のＩ７
ｊ環により、３−インドールピルビン酸の１ニヌレン酸
への変換の可能な機構が記載されている。

発明によって解決される問題 ３−インドールピルビン 有害作用の強力な阻害剤であり、従って、３−インドー
ルピルビン酸は、生物における過剰量の遊ｍ　ＥＧの存
在によるあらゆる病理状態において有利に使用できるこ
とが、驚くべきことに今や見いだされた。

発明の解決の手段 前記のことを考えて、本発明の目的は、患者、−層一般
的には吐乳動物の末梢組織にＪｊける過剰の酸素遊離基
によるかまたはそれにより増進した末梢変性病ｊｌ症状
の治療用医桑剤としての３−インドールピルビン酸の使
用である。

これらの病理症状の中で、その原因がｌ！ｌ索：ｉ離間
の作用による、心虚血、心筋障害、動脈硬化、循環系シ
ョックおよび炎「さらに呼吸疾患のような筋肉レベルで
介入するこれらの心循環系障害が特に示されている。

実膿例 性の評価 組織または生体液中の酸素遊ｌＩ１１基の産生聞評価の
最も普通に使用される方法は、［メソツズ・イン−１ン
ヂイモ０ジー（Ｍｅｔｈｏｄｓ　ｉｎ　Ｅｎｚｙｍｏｌ
ａｙ）Ｊ、１０５巻（１９８４）に例として記載された
マロンジアルデヒド（〜ｌ　ｌ）　Ａ　）のＲ１吊の試
験である。

簡１１ｊには、この方法は一Ｆ体膜の基礎成分である不
飽和脂肪酸が、ＭＤＡを最終生成物として生成するよう
に数個所にＪｊいて炭素鎖を破壊するＭ素遊離球によっ
て攻撃されることに基づいている。

次いで、アルデヒドは、チＡパルごツール酸を含有Ｊる
反応体を用いる単純な比色法によって検出される。

ＩＰへの存在および不存在下にＪｊける生成物ＭＤＡの
評ｆ＋Ｉｌｉ方法は、３種の異なった実験試験に，１３
いて用いられる。

ａ）「生体外１系にお番ブるラジカルの活性の評価 この試験は、溶液中に存在する１１，１の捕捉において
、ＩＰＡによる直接作用を立証し、その結果生体液にお
けるＩＰＡによって形成できる他の代−（物質による作
用を除く目的に役立つ。

ラジカルの産生は、生体膜の最も普通の成分のアスコル
ビン酸鉄およびホスファチジル」リンを合む系によって
活性化された。

稈茎 ＩＰＩＤ損　　　ＭＤＡ川害用％ ５Ｘ１０’Ｍ　　　　　１０ １Ｘ１０’Ｍ　　　　　３５ ２Ｘ１０’Ｍ　　　　　６５ この結果から、ＩＩ）Ａは、生体膜に存在する不飽和脂
肪酸にＪ３よぼｒＪ酎耐の分解作用を１生体外１で遮断
できる。さらに、また作用は用ｆ依存性であることが５
）かる。

ｂ）肺小七シネ−１−のラジカル活性の評価この試験は
、［Ｐ△がｉｌｉ組織、またその中に膜燐脂質を分解す
る０濃度の酵素が存在する肺組織内の遊離４ｔによる生
体膜の分解を遮断できるか否かを試験する目的に役立つ
。

級呈 ＩＰΔ用蟻 ５×１０６Ｍ １ｘ１０’Ｍ ２Ｘ１０’Ｍ ＭＤ八へ１害率％ ＩＰＡは遊Ｉ１１塁による この状態において再び、 膜燐脂質の分解を用量依存的にｔ２１抗Ｃきることら分
かった。

Ｃ）脳小モジネートにお【ノるラジカル活性の廼 ニューロン細胞は生体膜に−３いて最も豊富であり、従
ってこれら細胞は遊離基による分解攻撃にさらされるこ
とが最もおこりそうであるが故に、１１　ＦＪの産生用
７スコルビン酸鉄イオンの従来の系によって刺激された
脳小モジネートについてＩＰＡをまた試験した。。

結果は下記の通りである。

結末 ＩＰＡ用間　　　ＭＤＡｌｉｌｌ害率％１ｘ１０’Ｍ　
　　　　　１１ ０５ｘｌＯ−６１Ｂ １ｘ１０’Ｍ　　　　　　４２ ２Ｘ１０’Ｍ　　　　　　７８ １Ｘ１０’Ｍ　　　　　１００ この結末は前試験において得られたものと一致し、しか
もこの結果はＩＰＡが（１体膜について遊離１；！によ
って生じた１１をＮｌ害づる講堂に良好な薬剤であるこ
とを示している。

結論において、ＩＰＡはＭ索Ｔ１１１１基によって活性
化されたラジカルの生体膜に対り°る連鎖反応を強力に
拮抗できることを示した。効率に閏する限り、ＩＰＡは
前記試験において最も良く知られた酸化防止剤に比して
劣らない。

Ｍ＠基の捕捉の試験は、作用が一般的な程度の６のであ
るかまたは生体膜に対する作用に限られているか否かを
評ＩＪｉ　１Ｊる目的に拡張された。

２）ＤＰＰト１試験によるＩＰＡの　ラジカル性の評価 化合物Ｄ　Ｐ　Ｉ）　）−１（ジフェニルーピクリルー
ヒドラジル）は、比較的長時間丁タノール中ぐ変化しな
い安定化された１ト１である。［ラジカルスカベンジＡ
７−ｊとして働く化合物は、Ｉ）　Ｐ　Ｐ　Ｉ−１を含
有する溶液に添加後分光光度計（５１７ｒｖ）において
光学濃度の減少を追跡することによって試験できる。

ＩＰＡは、光学濃度の署しい減少が、化合物を用量１０
Ｍ〜６Ｍにおいて添加した場合に認め（！ｌる（３０分
で４０％）点で優れたフリーラジカルスカベンジャーで
あること示した。

３）　　学発光法によるＩＰＡの抗うジカル活刊の評価 化学ルミネセンスは、近年類２ｒ誠期の秤々の化合物の
定Ｍに型式性が増大している検出方法である。この方法
は、これらがルミノールによって増進できる部分化学ル
ミネセンスを生じる点で、醇木遊ｌ１１１基の定量に特
に有利と思われる［バイオケミカル・アンド・バイオフ
ィジカル・リリ“−ブー・コミュニクーションズ（Ｂｉ
ｏｃｈｃｍ、　Ｂｉｏｐｂｙｓ、　！ｌｅｓＣｏｍｍｕ
ｎｉｃ、）’Ｉ　５０．３０〜／１４．１９８８を参照
されたい］。この方法により、適切なｎ１測（ルミノブ
ラフ）によって記録された光の減少した放射によって、
化合物の抗ラジカル作用がはるかに容易に試験される。

Ｍ離間の源としてＦ　ｅ　”’　／過酸化水素系を用い
ることによって、ＩＰＡはルミノールから発光した化学
ルミネッセンスを下記百分率で阻害することを示した。

ＩＰＡ濃度　　　　　　％■古率 ２．５ｘ１０’Ｍ　　　　　　　Ｏ ｌ、０Ｘ１０’Ｍ　　　　　　７０ ２、５Ｘ　１０’Ｍ　　　　　１００ これらの結果から、ＩＰＡの族ラジカル作用は、燐脂質
が溶液に存在しない場合にさらに増進することが分かる
。さらに、この化合物は現在までに知られた歳も重要な
抗酸化剤と同等の力を右することが確認される［前記の
バイオケミカル・アンド−バイオフィジカル・・・・（
Ｂｉｏｃｈ、　Ｂｉｏｐｈｙｓ、・・・）を参照された
い］。

４）ＩＰＡの心臓作用 ＩＰＡの族ラジカル作用が心臓レベルで薬理的結果を得
ることができるか否かを評価するために、計画されるカ
テコールアミンによる刺激に対する筋肉の感受性を可能
にするパターンを用いた。事実、心臓に対する主な損傷
が慾性虚血作用摂の再潅流の相において起こることが確
認され、しかもこの損傷が酸素遊１１駐の放出による［
例えば［オキシジ］−ン・ラジカルズ・イン・ザ・パソ
フイジオロジー・オブ・ザ・ハート・デイズイーズ（Ｏ
ｘｙｏｅｎ　Ｒａｄｉｃａｌｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｐａｔ
ｈｏｐｈｙｓｉｏｌｏｏｙ　ｏｒｈｅａｒｔ　ｄｉｓｅ
ａｓｅ）、にｌｕｗｃｒ　Ａｃａｄ、　Ｐｕｂｌ、、　
１９８８．１１１頁〜１２２頁を参照されたい１ことが
知られているので、本処理はカテコールアミンによる心
臓刺激を減少して（例えばβ−遮断剤により）、虚自組
織が代謝ストレスにさらされた場合に起こる一層強い損
傷を避けることを目的としている。

実験パターンには、脳カテコールアミンにＪ、る代償作
用を避ける初物の予防的神経支配除去および対照動物お
よびＩＰＡで処理された動物の両者において心筋に存在
するαおよびβアドレノ−リン作動性受容体に選択的に
作用Ｊる化合物の作用の測定が含まれる。

試験は、１２週齢のＣＤ系ラット（２２５び〜２５（１
）について行われた。動物を２群に分け、第１群（対照
）はＮ−メチルグルカミン、すなわち溶媒で用ＦＡ５ｄ
／Ｋｇ／日において７日間処理し、第２群は、ＩＰＡで
用量１００ｘｙ／Ｈ／日において７日間処理した。試験
日に、動物を麻酔し、次いで山口およびＫｏｐ　ｉ　ｎ
ｈ法によりを椎穿刺した［ジＡ７−ナル・オブ・ファー
マコロジー・アンド・エクスベリメンタル・セラビュー
ティクス（ＪＰｔ＋ａｒｉａｃｏ１．　ｒｘｐＬｌ、　
ｒｈｅｒ、）　、２１４．２７５〜８１．１９８０１．
カテコールアミンのアゴニスト動脈に挿入したカテーテ
ルを介して注入した。

次いで毎分心拍数を測定した。

得られた結果を下記の表にまとめる。

第１表　　椎穿刺前後の基礎値（泊／分）館後 対照　　３４０±２０　　　２４２±１７処理　　３３
５±１５　　　２３５±１２各点は５回の試験の平均を
示′！Ｊ、。

第２表　チラミン　一般刺激剤）に対する反応性 チラミン１２５　ｎ（１／ｌＬ７ チラミン２５０　ｎｏ／　Ｋ９ ％拍／分増加 対　　照　　　　　処　　理 １１．１±１．８　　２．７±０．９＊１４．８±２．
３　３．１±０．７＊ チラミン５００　ｎＱ／　Ｋ９　１７．’）±１．４　
１１．４＋±１．６：ｌ：各点は５回の試験の平均を示
Ｖ０ ＊対象に対するｐ＜ｏ、ｏｏｉ ノルアドレナリン ６０ｎｏ／８ｇ ％拍／分増加 対　　照　　　　　処　　即 ６．１±１．３　　　１．１±０．９　＊ノルアトレフ
リン １２０口Ｑ／に９ １０．４±１．４ １．３±０．２　＊ ノルアドレナリン ２５０ｎｇ／４ｇ ２２．３±１．１ １．６：、ｆ：１．１　　＊ 各点は５回の試験の平均を示ず。

＊対策に対するｐ＜０．００１ ％拍／分増加 対　　照　　　　　処　　理 フェニルエフリン １２．３±１．５　　　１．５±０．２　＊２．５１１
Ｃす／　Ｋｙ フェニルエフリン ５ｆｆｉＣＩＪ／１ｌｉ１９ １７．６上１．２ １．２±０，４　＊ フェニル］ニフリン １０１ｃＯ／［ｇ ２５３±１．１ １．１＋０．９ 各点は５回の試験のｊｌＺ均を示す、。

＊対照に苅りるρ＜０．００１ ％拍／分増加 対　　照　　　　　処　　理 イソプロテレノール　２４．４±３．９　１０．５±２
．８＊２、　！ｌｌＩｃ！Ｊ／　Ｋｇ イソプロテレノール　４５．３二１．６．２　２１．３
±４．６＊５　ｍｃｇ／　ＫＷ 各点は５回の試験の平均を示す。

＊対照に対するρ＜０．００１ 全試験の結果から、ＩＰＡの曲急性処理によって、使用
した１べてのアドレナリン作動性アゴニス１−について
を椎穿刺された動物にお（〕る頻脈化応答を著しく減少
づることが分かる。このことは１１）Ａがカデニ］−ル
アミンの作用にさらした心筋に保護作用を生じることを
意味する。

５）ＩＰへの実験ショックにお覧プる活性さらに非常に
重大な病理学は循環系ショックである。これは出血（出
面ショック）、細菌応素（菌体内ｉｎ索ショック）、心
筋梗塞（心臓発生ショック）による減少した収縮１１面
Ｆ１、また【よ体表面上の拡大した火傷部分の存在（焼
灼ショック）のような種々の病理状態によって排出でき
る。

若干の教科書［例えば、Ｉ゛カルデイオバス１コラ・）
７−マコロジー（ＣａｒｄｉＯＶａＳＣ（ｌｉａｒＰｈ
ａｒｍａｃｏｌｏｇｙ）　、Ｒａｖｅｎ　Ｐｒｅｓｓ　
、　１９８４．５３５頁〜５７８頁］に記載されたよう
に、ショックは常に血液動力学レベルにおいて血圧低ト
を生じ、従って血流は末梢組織に再分布する。従って、
若干の本官には、正確な好気性代謝を維持できないよう
な白液供給不足がみられる。この状態によって、重大な
ショックにざらされた細胞の顕微鏡検査によって分かる
ように酸素遊離基の生成が一層容易になり、この細胞は
膜がラジカルの作用にＪ、って破壊された模に膨潤づる
ことによって死ぬ。

試験方法として、内臓動脈（ＳΔ０）の吸蔵からのショ
ックを用いた。この古典的方法において、内臓動脈の吸
蔵は、腹腔および腸間膜動脈の結合後ラットに生成し、
従って初層血圧の漸減を含む。

４５分俊、動脈が急激に内聞し、次いでこれは血圧の垂
直降１・を生じ５時間後に死Ｃする。

ＩＰＡの作用は、急竹投！：ｉ（１００１！９／ＫＵ／
ｎ口）および繰返し投与（１００η／幻／経ロア１１問
）後の両者を評価した１１反対に対照動物は、Ｎメチル
グルカミン、すなわちＩＰＡに用いる溶媒のみを受りた
。

結果を一ド記の表に示ツ（６値は６四の動物の平均を示
す）。

処　　　　　　　理　　　　　　　　　　　　ｔ１存　
（分）急ＭＮ−メチルグルカミン 慢ｆｆｉＮーメチルグルカミン 急性ＩＰΔ　　　　　　　　　　　１６９辷４．２慢竹
　１１”Ａ　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　２７９±　３．５萌配は中に予備的デー
ターであり、ｔ１存のＪ、うな粗パラメーターを試験し
たが、ｒｆ前記の結果から、１　１−）Δは循環系ショ
ックによる損傷を減少する用途を６見いだし得ることが
分かる。

６）抗炎症活性 ＩＰＡの抗炎症活性は、例えば［スクリーニング・メソ
ツズ・イン・ファーマコロジ （ＳＣｒｅＱｎｌｌｌ＋Ｊ　ＨＣ！ＬｈＯｄＳ　Ｉｎ　
ＰｌｌａｒｌａＣＯＩＯＱｙ）、＾ｃａｔｌｅｍｉｃ　
Ｐｒｅｓｓｌｌ　９　６　５に記載されたカラギーナン
浮腫による予備スクリーニングの従来の系に従って試験
した。

命中には、刺激剤のカラギーナンをジットの足に注）１
した。これによって、遊離Ｊメに常に仲介されしか〜ｂ
特別の！ｉｆ器、いわゆる水銀ブレチス七グラフによっ
て測定される局部４肝によって立証される炎綻反応を生
じる。

Ｃ　Ｉ）ラット（１市当たり１０匹の動物）の３８Ｔを
Ｎ−メチルグルカミン（対照）またはＩＰＡ（５０１１
１９／Ｋｇおよび２００ＩＩｔｇ／Ｋｇ）をもって、カ
ラギーナンの注１３４１時間前に処理した。浮腫の人き
さは、注射後４１１５間ｍ時測定した。

結！Ｊ！は下記の通りである。

対照に対する４胛の減少 １時間　２時間　３時間　４時間 ＩＰＡ　５０ＩＦＦ／Ｋｇ　　　ｏ　　　　　１４．４
　　％　　３２．６％　＊３７．７％　傘＊１１）＾２
００１１９／に９　　　０　　　　２３．９　　％　　
　２８．７％　　＊　　３６．８Ｘ　　＊１対照に対す
るｐ＜ｏ、０５ 本本対照に対するｐ＜０．０１ この結果から、ＩＰＡはカラギーナンによって誘発され
た４紳におよぼす保護作用をも示し、酸素Ｔ１帥基の生
成をも含む。

発明の効果 このように得られたずべての結果を要約して、ＩＰＡは
、Ｍ素山来のものおよび膜燐脂質または仙の化学神山来
のものの両者の１１１１２４に強力な拮抗作用を示した
。

結果として、ＩＰＡは、遊１１１基によって生じるかま
たは促進されたすべての病理状態に耐える治療手段とし
て使用できる。

これらの状態の中で、下記を示すことができる。

すなわら心虚血、動脈硬化、循環系ショック、アドリア
マイシンおよびその誘導体からの心筋障害、炎症、呼吸
疾患、細胞老化。

投与は、活性物″１１を、［経］］」またはｒｌ腸投与
にＪ３いて用ｆｉｉ　２１１１９／　ＫＳ体φ〜２０■
／にり体重および非経口投９において１ｑ１Ｋｇ体Φ〜
１０１１９／に９体重の範囲にある川石ｒ含有する医薬
組成物によって行うことができる。

経［１、非経口またはＩｉ腸投与において、丸剤、カブ
ヒル剤、液剤、懸濁剤、注射剤、坐剤のような従来の医
桑形を、医薬的に１容し１ｑる担体または希釈剤Ｊｊよ
び付形剤と組み合ｌ！て使用でさる。

代理人　　浅　　村　　　　　皓 −１２；

Claims (4)

【特許請求の範囲】
1. （１）患者の末梢組織における酸素遊離基の過剰に原因
   するまたはその過剰により増進された末梢変性病理状態
   の治療用に、３−インドールピルビン酸を含むことを特
   徴とする医薬剤。
2. （２）前記病理状態が心循環系障害である、特許請求の
   範囲第１項の医薬剤。
3. （３）前記障害が心虚血、動脈硬化症、循環系ショック
   または心筋障害である、特許請求の範囲第２項の医薬剤
   。
4. （４）前記病理状態が筋肉レベルにおける炎症障害であ
   る、特許請求の範囲第１項の医薬剤。