JPH02100676A - ストレプトミセテスから得られる真菌溶解酵素生成物およびその製造 - Google Patents
ストレプトミセテスから得られる真菌溶解酵素生成物およびその製造Info
- Publication number
- JPH02100676A JPH02100676A JP1207059A JP20705989A JPH02100676A JP H02100676 A JPH02100676 A JP H02100676A JP 1207059 A JP1207059 A JP 1207059A JP 20705989 A JP20705989 A JP 20705989A JP H02100676 A JPH02100676 A JP H02100676A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- lytic enzyme
- streptomyces
- chitin
- fungal
- dsm
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 101000925662 Enterobacteria phage PRD1 Endolysin Proteins 0.000 title claims description 10
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims description 4
- 241000233866 Fungi Species 0.000 title description 5
- 241001655322 Streptomycetales Species 0.000 title 1
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 claims abstract description 18
- 229920002101 Chitin Polymers 0.000 claims abstract description 16
- 239000000758 substrate Substances 0.000 claims abstract description 6
- 229960002442 glucosamine Drugs 0.000 claims abstract 2
- 241000187180 Streptomyces sp. Species 0.000 claims description 8
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 6
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 4
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 claims 1
- 241000187747 Streptomyces Species 0.000 abstract description 6
- 244000005700 microbiome Species 0.000 abstract description 5
- 239000000463 material Substances 0.000 abstract description 2
- 230000009545 invasion Effects 0.000 abstract 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 15
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 13
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 13
- 239000000047 product Substances 0.000 description 10
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 8
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 8
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 8
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 8
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 6
- 241000228143 Penicillium Species 0.000 description 6
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 6
- 235000021317 phosphate Nutrition 0.000 description 6
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 5
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 5
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 5
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 5
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 4
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 4
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 4
- 230000002101 lytic effect Effects 0.000 description 4
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 4
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 4
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 4
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 4
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- UHPMCKVQTMMPCG-UHFFFAOYSA-N 5,8-dihydroxy-2-methoxy-6-methyl-7-(2-oxopropyl)naphthalene-1,4-dione Chemical compound CC1=C(CC(C)=O)C(O)=C2C(=O)C(OC)=CC(=O)C2=C1O UHPMCKVQTMMPCG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000123650 Botrytis cinerea Species 0.000 description 3
- 108010022172 Chitinases Proteins 0.000 description 3
- 241000223218 Fusarium Species 0.000 description 3
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 3
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 3
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 3
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 3
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 3
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 3
- 102000012286 Chitinases Human genes 0.000 description 2
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- PLUBXMRUUVWRLT-UHFFFAOYSA-N Ethyl methanesulfonate Chemical compound CCOS(C)(=O)=O PLUBXMRUUVWRLT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 244000168141 Geotrichum candidum Species 0.000 description 2
- 235000017388 Geotrichum candidum Nutrition 0.000 description 2
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 241000244206 Nematoda Species 0.000 description 2
- 241001134446 Niveas Species 0.000 description 2
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 2
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 2
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 2
- YPHMISFOHDHNIV-FSZOTQKASA-N cycloheximide Chemical compound C1[C@@H](C)C[C@H](C)C(=O)[C@@H]1[C@H](O)CC1CC(=O)NC(=O)C1 YPHMISFOHDHNIV-FSZOTQKASA-N 0.000 description 2
- 229950006780 n-acetylglucosamine Drugs 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 239000011573 trace mineral Substances 0.000 description 2
- 235000013619 trace mineral Nutrition 0.000 description 2
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 2
- MLONYBFKXHEPCD-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol Chemical compound OCC(N)(CO)CO.OCC(N)(CO)CO MLONYBFKXHEPCD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WDMUXYQIMRDWRC-UHFFFAOYSA-N 2-hydroxy-3,4-dinitrobenzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=C([N+]([O-])=O)C([N+]([O-])=O)=C1O WDMUXYQIMRDWRC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WTLKTXIHIHFSGU-UHFFFAOYSA-N 2-nitrosoguanidine Chemical compound NC(N)=NN=O WTLKTXIHIHFSGU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000238421 Arthropoda Species 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- GTWJEGZBBUNTPJ-UHFFFAOYSA-L C(C)(=O)[O-].[Na+].[Na+].C(CC(O)(C(=O)O)CC(=O)O)(=O)O.C(C)(=O)[O-] Chemical compound C(C)(=O)[O-].[Na+].[Na+].C(CC(O)(C(=O)O)CC(=O)O)(=O)O.C(C)(=O)[O-] GTWJEGZBBUNTPJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VTLYFUHAOXGGBS-UHFFFAOYSA-N Fe3+ Chemical compound [Fe+3] VTLYFUHAOXGGBS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000005526 G1 to G0 transition Effects 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 1
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 1
- 108010031186 Glycoside Hydrolases Proteins 0.000 description 1
- 102000005744 Glycoside Hydrolases Human genes 0.000 description 1
- 240000002024 Gossypium herbaceum Species 0.000 description 1
- 235000004341 Gossypium herbaceum Nutrition 0.000 description 1
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 1
- 206010061217 Infestation Diseases 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GXCLVBGFBYZDAG-UHFFFAOYSA-N N-[2-(1H-indol-3-yl)ethyl]-N-methylprop-2-en-1-amine Chemical compound CN(CCC1=CNC2=C1C=CC=C2)CC=C GXCLVBGFBYZDAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OVRNDRQMDRJTHS-UHFFFAOYSA-N N-acelyl-D-glucosamine Natural products CC(=O)NC1C(O)OC(CO)C(O)C1O OVRNDRQMDRJTHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OVRNDRQMDRJTHS-FMDGEEDCSA-N N-acetyl-beta-D-glucosamine Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O OVRNDRQMDRJTHS-FMDGEEDCSA-N 0.000 description 1
- MBLBDJOUHNCFQT-LXGUWJNJSA-N N-acetylglucosamine Natural products CC(=O)N[C@@H](C=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO MBLBDJOUHNCFQT-LXGUWJNJSA-N 0.000 description 1
- 244000061661 Orchis Species 0.000 description 1
- 241000228127 Penicillium griseofulvum Species 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 1
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 1
- 244000046052 Phaseolus vulgaris Species 0.000 description 1
- 235000010627 Phaseolus vulgaris Nutrition 0.000 description 1
- 241001300028 Pomatias Species 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 241000589516 Pseudomonas Species 0.000 description 1
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 241000187392 Streptomyces griseus Species 0.000 description 1
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 description 1
- 244000098338 Triticum aestivum Species 0.000 description 1
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 1
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 1
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012445 acidic reagent Substances 0.000 description 1
- 238000005273 aeration Methods 0.000 description 1
- 238000010564 aerobic fermentation Methods 0.000 description 1
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001340 alkali metals Chemical class 0.000 description 1
- 229910052784 alkaline earth metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001342 alkaline earth metals Chemical class 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 description 1
- 150000001450 anions Chemical class 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000004649 carbonic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 229920001429 chelating resin Polymers 0.000 description 1
- 239000002962 chemical mutagen Substances 0.000 description 1
- 150000003841 chloride salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000007979 citrate buffer Substances 0.000 description 1
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 1
- 238000004821 distillation Methods 0.000 description 1
- 239000012154 double-distilled water Substances 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 244000000004 fungal plant pathogen Species 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 230000009422 growth inhibiting effect Effects 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 230000002147 killing effect Effects 0.000 description 1
- 229940040511 liver extract Drugs 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 235000012054 meals Nutrition 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 238000000691 measurement method Methods 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 1
- 238000009629 microbiological culture Methods 0.000 description 1
- 150000002823 nitrates Chemical class 0.000 description 1
- QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N nitrogen group Chemical group [N] QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011474 orchiectomy Methods 0.000 description 1
- DXGLGDHPHMLXJC-UHFFFAOYSA-N oxybenzone Chemical compound OC1=CC(OC)=CC=C1C(=O)C1=CC=CC=C1 DXGLGDHPHMLXJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 1
- 150000003013 phosphoric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- LJCNRYVRMXRIQR-OLXYHTOASA-L potassium sodium L-tartrate Chemical compound [Na+].[K+].[O-]C(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C([O-])=O LJCNRYVRMXRIQR-OLXYHTOASA-L 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 239000013587 production medium Substances 0.000 description 1
- 108010009004 proteose-peptone Proteins 0.000 description 1
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 1
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 239000001476 sodium potassium tartrate Substances 0.000 description 1
- 235000011006 sodium potassium tartrate Nutrition 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 150000003467 sulfuric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000012137 tryptone Substances 0.000 description 1
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 1
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L3/00—Preservation of foods or foodstuffs, in general, e.g. pasteurising, sterilising, specially adapted for foods or foodstuffs
- A23L3/34—Preservation of foods or foodstuffs, in general, e.g. pasteurising, sterilising, specially adapted for foods or foodstuffs by treatment with chemicals
- A23L3/3454—Preservation of foods or foodstuffs, in general, e.g. pasteurising, sterilising, specially adapted for foods or foodstuffs by treatment with chemicals in the form of liquids or solids
- A23L3/3463—Organic compounds; Microorganisms; Enzymes
- A23L3/3571—Microorganisms; Enzymes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/14—Hydrolases (3)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/14—Hydrolases (3)
- C12N9/24—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2)
- C12N9/2402—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2) hydrolysing O- and S- glycosyl compounds (3.2.1)
- C12N9/2405—Glucanases
- C12N9/2434—Glucanases acting on beta-1,4-glucosidic bonds
- C12N9/2442—Chitinase (3.2.1.14)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Y—ENZYMES
- C12Y302/00—Hydrolases acting on glycosyl compounds, i.e. glycosylases (3.2)
- C12Y302/01—Glycosidases, i.e. enzymes hydrolysing O- and S-glycosyl compounds (3.2.1)
- C12Y302/01014—Chitinase (3.2.1.14)
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Food Preservation Except Freezing, Refrigeration, And Drying (AREA)
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
真菌生長を抑制し得る代謝物を微生物が産生することは
いろいろな著者により報告されている。米国特許第４，
５３４，９６５号は植物病原性真菌を死滅し得る剤を開
示している。この剤は、キチン含有基質を用いてストレ
プトミセス（Ｓｔｒｅ−ｐｔｏｍｙｃｅｓ）株ＡＴＣＣ
３９４３４を培養することにより得られる。この剤はシ
クロへキシミドと同様の機序で真菌に作用するものと想
定される。
いろいろな著者により報告されている。米国特許第４，
５３４，９６５号は植物病原性真菌を死滅し得る剤を開
示している。この剤は、キチン含有基質を用いてストレ
プトミセス（Ｓｔｒｅ−ｐｔｏｍｙｃｅｓ）株ＡＴＣＣ
３９４３４を培養することにより得られる。この剤はシ
クロへキシミドと同様の機序で真菌に作用するものと想
定される。
欧州特許出願第０．１７１，３８１号は、線虫の生長を
抑制し得る微生物を記載している。シュードモナス類（
Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｄｓ）はキチナーゼおよびグリコ
シダーゼをコードする外米遺伝子で形質転換し、酵素放
出を高めることによって線虫に対する生長抑制作用を強
化することができる。
抑制し得る微生物を記載している。シュードモナス類（
Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｄｓ）はキチナーゼおよびグリコ
シダーゼをコードする外米遺伝子で形質転換し、酵素放
出を高めることによって線虫に対する生長抑制作用を強
化することができる。
同様に、キチナーゼ遺伝子で形質転換された細菌が欧州
特許出願第０．１５７，３５１号に記載されている。
特許出願第０．１５７，３５１号に記載されている。
今般、驚くべきことに、ストレプトミセス（Ｓｔｒｅｐ
ｔｏｍｙｃｅｔｅｓ）の培養ブロス中に新しい真菌溶解
酵素生成物が見出された。
ｔｏｍｙｃｅｔｅｓ）の培養ブロス中に新しい真菌溶解
酵素生成物が見出された。
すなわち、本発明は、以下に関する。
１、 ストレプトミセス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ
５ｐｅｃ、）ＤＳＭ ４６６６の培養により得られる
真菌溶解酵素生成物。
５ｐｅｃ、）ＤＳＭ ４６６６の培養により得られる
真菌溶解酵素生成物。
２、 キチンを含有するかまたはβ−１，４−Ｎ−アセ
チル−グルコサミンのオリゴマーを含有する基質を用い
てストレプトミセス種ＤＳＭ４６６６を培養することよ
り成る１、で特定された真菌溶解酵素生成物の製造方法
。
チル−グルコサミンのオリゴマーを含有する基質を用い
てストレプトミセス種ＤＳＭ４６６６を培養することよ
り成る１、で特定された真菌溶解酵素生成物の製造方法
。
３、微生物によるいたみをうけやすい物を保存するため
の１．で特定された真菌溶解酵素生成物の使用。
の１．で特定された真菌溶解酵素生成物の使用。
以下、本発明を特に好ましい態様について詳述する。本
発明は更に特許請求の範囲において規定される。
発明は更に特許請求の範囲において規定される。
真菌溶解酵素生成物のブダペスト条約の規定の下にＤｅ
ｕｔｓｃｈｅ Ｓａｍｍｌｕｎｇ ｖａｎ Ｍｉｋｒｏ
ｏｒｇａｎｔｓ−ｍｅｎ（ドイツ微生物収集）に当該番
号をもって寄託されたストレプトミセス種ＤＳＭ ４６
６６の培養により製造できる。
ｕｔｓｃｈｅ Ｓａｍｍｌｕｎｇ ｖａｎ Ｍｉｋｒｏ
ｏｒｇａｎｔｓ−ｍｅｎ（ドイツ微生物収集）に当該番
号をもって寄託されたストレプトミセス種ＤＳＭ ４６
６６の培養により製造できる。
本発明に従って用いられるストレプトミセス株の特徴は
、次の如く言うことができる：胞子の色 灰色 胞子鎖 直鎖状または波状 胞子表面 滑面 メラニン 色素形成 気中菌子の色 白色 前記菌株に代えて、各場合にその突然変異株および変異
株をそれらが真菌溶解酵素生成物を合成する限り用いる
こともできる。このタイプの突然変異株は自体知られた
方法により、物理的な剤、例えば放射線照射、例えば紫
外線またはＸ線照射、または化学的突然変異誘発物質例
えばエチルメタンスルホネート（ＥＭＳ）、Ｎ−メチル
−Ｎ′−二トローＮ−ニトロソグアニジン（ＭＮＮＧ）
または２−ヒドロキシ−４−メトキシベンゾフェノン（
１，ｌ０Ｂ）によって生成させることができる。
、次の如く言うことができる：胞子の色 灰色 胞子鎖 直鎖状または波状 胞子表面 滑面 メラニン 色素形成 気中菌子の色 白色 前記菌株に代えて、各場合にその突然変異株および変異
株をそれらが真菌溶解酵素生成物を合成する限り用いる
こともできる。このタイプの突然変異株は自体知られた
方法により、物理的な剤、例えば放射線照射、例えば紫
外線またはＸ線照射、または化学的突然変異誘発物質例
えばエチルメタンスルホネート（ＥＭＳ）、Ｎ−メチル
−Ｎ′−二トローＮ−ニトロソグアニジン（ＭＮＮＧ）
または２−ヒドロキシ−４−メトキシベンゾフェノン（
１，ｌ０Ｂ）によって生成させることができる。
好気性発酵用炭素源として適しかつ好ましいのは例えば
昆虫、節足動物または真菌細胞壁からのキチンである。
昆虫、節足動物または真菌細胞壁からのキチンである。
Ｎ−アセチル−グルコサミンのオリゴマーを用いること
もできる。窒素含有栄養素として適しかつ好ましいのは
、アミノ酸、ペプチドおよびタンパク質のほかそれらの
分解生成物、例えばペプトンまたはトリプトン、更には
、肉エキス、粉砕種子（ｍｉｌｌｅｄ ５ｅｅｄｓ）、
例えばコーン、小麦、豆（ｂｅａｎｓ）、大豆または綿
植物、アルコール生産よりの蒸留残渣、肉粉、または酵
母エキス、およびアンモニウム塩および硝酸塩である。
もできる。窒素含有栄養素として適しかつ好ましいのは
、アミノ酸、ペプチドおよびタンパク質のほかそれらの
分解生成物、例えばペプトンまたはトリプトン、更には
、肉エキス、粉砕種子（ｍｉｌｌｅｄ ５ｅｅｄｓ）、
例えばコーン、小麦、豆（ｂｅａｎｓ）、大豆または綿
植物、アルコール生産よりの蒸留残渣、肉粉、または酵
母エキス、およびアンモニウム塩および硝酸塩である。
栄養液は更に付加的無機塩として例えば、アルカリ金属
またはアルカリ土類金属、鉄、亜鉛およびマグネシウム
の塩化物、炭酸塩、硫酸塩または燐酸塩などを含んでい
てもよい。
またはアルカリ土類金属、鉄、亜鉛およびマグネシウム
の塩化物、炭酸塩、硫酸塩または燐酸塩などを含んでい
てもよい。
本発明による酵素生成物の形成は、０．１〜５０ｇ／Ｑ
好ましくはｌ−４０ｇ／Ｑのカニキチンを含む栄養液中
で特に良く行われる。
好ましくはｌ−４０ｇ／Ｑのカニキチンを含む栄養液中
で特に良く行われる。
発酵は好気的に行われる。すなわち、例えば、振盪フラ
スコまたは発酵槽中で振盪または撹拌しながら液中で行
われ、適切な場合には空気または酸素を導入する。発酵
は１８〜４０℃の温度範囲、好ましくは約２５〜３０℃
１特に２８〜３０℃で、また５〜９、好ましくは６．５
〜８のｐｌ範囲で行うことができる。
スコまたは発酵槽中で振盪または撹拌しながら液中で行
われ、適切な場合には空気または酸素を導入する。発酵
は１８〜４０℃の温度範囲、好ましくは約２５〜３０℃
１特に２８〜３０℃で、また５〜９、好ましくは６．５
〜８のｐｌ範囲で行うことができる。
微生物の培養は前述の条件の下に静止期に達するまで、
約６０〜１２０時間、好ましくは６０〜７５時間行われ
る。
約６０〜１２０時間、好ましくは６０〜７５時間行われ
る。
培養は数段階で行うのが有利である。すなわち、−以上
の前培養をまず液状培地中で作り、次いで主培養である
実際の生産培地に例えば１：１０の容量比で接種するの
に用いる。前培養は例えば胞子形成した菌糸体を用いて
栄養液に接種しそして約４８〜７２時間生長させる。そ
の胞子形成した菌糸体は、菌株を約７日開面体または液
体栄養培地、例えば酵母／麦芽寒天で生長させることに
より得ることができる。
の前培養をまず液状培地中で作り、次いで主培養である
実際の生産培地に例えば１：１０の容量比で接種するの
に用いる。前培養は例えば胞子形成した菌糸体を用いて
栄養液に接種しそして約４８〜７２時間生長させる。そ
の胞子形成した菌糸体は、菌株を約７日開面体または液
体栄養培地、例えば酵母／麦芽寒天で生長させることに
より得ることができる。
発酵の進行は、培養液のｐＨまたは菌糸体容量により、
生物活性を試験することによりモニターすることができ
る。
生物活性を試験することによりモニターすることができ
る。
真菌溶解酵素生成物は、強塩基性陰イオン交換体、例え
ばアンバーライト樹脂でのイオン交換クロマトグラフィ
により単離することができる。
ばアンバーライト樹脂でのイオン交換クロマトグラフィ
により単離することができる。
本発明による酵素生成物の特徴は次のとおりである。
７０℃までの温度において安定している。
至適温度は４０〜６０℃１特に４５〜５５℃である。
ｐＨ４，０〜１０．０．特にｐＨ５〜７において安定し
ている。
ている。
至適ｐＨは４．５〜６、特に５〜５．５の範囲である。
この酵素生成物はいたみやすく、モして真菌の侵襲によ
る損傷を受は得る物の保存に用いることができる。
る損傷を受は得る物の保存に用いることができる。
本発明を以下の実施例で詳細に説明する。特に断らない
限り、％データは重量によるものである。
限り、％データは重量によるものである。
実施例 １
ストレプトミセス種ＤＳＭ ４６６６の培養ストレプト
ミセス種Ｏ３＋１１４６６６を以下のものを含む斜面寒
天チューブで３０℃でｌＯ日間培養しｌこ 。
ミセス種Ｏ３＋１１４６６６を以下のものを含む斜面寒
天チューブで３０℃でｌＯ日間培養しｌこ 。
グルコース ｌＯｇ／Ｑ
カゼインペプトン
４ｇ／ Ｑ
肉エキス ４０ｇ／Ｑ
酵母エキス ０．５ｇ／（２
肝エキス ０．５ｙ／Ｑ
ＮａＣ（２２，！５ｇ／ Ｑ
寒天 １８ｇ／ Ｑ ｐＨ７，２胞子を３
ｍＱの０．９％Ｎａ（ｌ溶液ですすぎ出した。
ｍＱの０．９％Ｎａ（ｌ溶液ですすぎ出した。
その胞子懸濁液を振盪フラスコ（３００ｍＱ容量。寒天
を除いた前記栄養液１００ｍＱを含有）に接種するだめ
の材料として用いた。培養液を３０℃および１８０回転
／分（ｒｐｍ）で振盪した。４８時間後、主培養液に３
ｍＱを接種した。主培養液は次の組成を有した： カニキチン ＫＨ２ＰＯ。
を除いた前記栄養液１００ｍＱを含有）に接種するだめ
の材料として用いた。培養液を３０℃および１８０回転
／分（ｒｐｍ）で振盪した。４８時間後、主培養液に３
ｍＱを接種した。主培養液は次の組成を有した： カニキチン ＫＨ２ＰＯ。
Ｍｇ５Ｏ＋ ・７ｕ２０
に２ＨＰＯ。
微量元素溶液
ｐＨ７，３
微量元素溶液：
３ｙ／Ｑ
１ｙ／Ｑ
０．２ｙ／Ｑ
Ｏ，１ｇ／１２
０．０２５ｇ／（２
０，０２ｇ／１２
０．００４ｇ／Ｑ
１０ｇ／１２
０．３９／Ｑ
Ｏ，５ｙ／Ｑ
０．７ｙ／Ｑ
ｍＱ
ＣａＣＩ２２ ＋ ２Ｈ２０
Ｆｅ（ＩＩＩ）クエン酸塩
Ｍｎ５Ｏ。
ｎＣＬ
ＣｕＳＯ＋ ・５Ｈ２Ｏ
ＮａＪ４０ｓ ” １０Ｈ２０
ｏＣＱ ｘ
０．０１９／ ＱＮａ２ｕｏｏ４ ・２ｕ２゜培養は前
記と同じ条件下に行った。３日後に菌体を遠心分離によ
り除去し、そして上清り酵素活性を測定した。それは１
２３Ｕ／Ｑであった。
記と同じ条件下に行った。３日後に菌体を遠心分離によ
り除去し、そして上清り酵素活性を測定した。それは１
２３Ｕ／Ｑであった。
実施例 ２
活性測定
活性測定方法は次のとおりとした：
０．３８ｍＱの培養上清を１．５ｍ＋２のキチン溶液（
シグマキチンＮｏ、 Ｃ３６４１；二重蒸留水１ ｒｘ
Ｑあたりに４ｍｇのキチン）に添加した。そのキチンが
微細懸濁液中に維持されるように混合物全体を４５℃で
１時間振盪した。次にそれを遠心分離し、そして上清の
Ｏ−５ｍＱを１ｍ（２のジニトロサリチル酸試薬と混合
した。その試薬は、３，５−ジニトロサリチル酸、３０
０ｇの酒石酸ナトリウムカリウムおよび１６ｇのＮａＯ
Ｈを水ＩＱ中に含む組成である。
シグマキチンＮｏ、 Ｃ３６４１；二重蒸留水１ ｒｘ
Ｑあたりに４ｍｇのキチン）に添加した。そのキチンが
微細懸濁液中に維持されるように混合物全体を４５℃で
１時間振盪した。次にそれを遠心分離し、そして上清の
Ｏ−５ｍＱを１ｍ（２のジニトロサリチル酸試薬と混合
した。その試薬は、３，５−ジニトロサリチル酸、３０
０ｇの酒石酸ナトリウムカリウムおよび１６ｇのＮａＯ
Ｈを水ＩＱ中に含む組成である。
その溶液は光に敏感である。
その混合物を沸騰水中で５分間加熱し、冷却し、水でｌ
： １０に希釈し、そしてブランクを標準として用い
て５３０ｎｍにおいて光度計で測定した。そのブランク
は、０．３８ｍＱの熱により失活させた培養液上清（沸
騰水中で５分間）を１．５ｍＱのキチン溶液と混合後通
常の検体と同様に処理したものから構成した。１単位（
Ｕ）は、前述の検定法において１分間あたり１μｍｏｌ
の還元性糖残基をキチンから放出する酵素活性として定
義された 実施例 ３ ストレプトミセス種ＤＳＭ ４６６６の発酵槽培養実施
例１と同様にしてストレプトミセス種ＤＳＭ ４６６６
を培養した。１０Ｑ容発酵槽に１％前培養液を接種した
。
： １０に希釈し、そしてブランクを標準として用い
て５３０ｎｍにおいて光度計で測定した。そのブランク
は、０．３８ｍＱの熱により失活させた培養液上清（沸
騰水中で５分間）を１．５ｍＱのキチン溶液と混合後通
常の検体と同様に処理したものから構成した。１単位（
Ｕ）は、前述の検定法において１分間あたり１μｍｏｌ
の還元性糖残基をキチンから放出する酵素活性として定
義された 実施例 ３ ストレプトミセス種ＤＳＭ ４６６６の発酵槽培養実施
例１と同様にしてストレプトミセス種ＤＳＭ ４６６６
を培養した。１０Ｑ容発酵槽に１％前培養液を接種した
。
発酵槽栄養液は次のものを含有した：
カニキチン
（シグマＣ３３８７） ５ｇ／ Ｑ乾燥（７サ
リウム） ２ｙ／Ｑ 実施例４菌糸体（ＤＳＭ
２０１８） を参照乾燥（ペニシリウ
ム） ２ｙ／Ｑ 実施例４菌糸体（ＤＳＭ １０
７９） を参照酵素エキス
Ｏ，Ｌｙ／Ｑ コーンスチープ ７ｇ／ Ｑ Ｎａ、ＨＰＯ，・２Ｈ２０Ｌ、８ｙ／Ｑ（Ｎ）１４）２
５０４ １９／ ＱＫＨ２ＰＯ４０，５ｇ
／ Ｑ Ｋ２ＨＰＯ，１９／ Ｑ ＭｇＳＯ４・７ｎｚｏ ０．５９／ ＱＦｅ
ＳＯ＊ −７Ｈ２００，２ｇ／ ＱｐＨ７，７ ０，５ＶＶＭで通気しながら３０℃の温度でインキュベ
ートした。３日後、培養液か液中に測定可能な溶解活性
は２０６Ｕ／Ｑであった。菌体を遠心分離し、モして上
清を凍結乾燥しそして酵素調製物（ＥＰ）として用いた
。
リウム） ２ｙ／Ｑ 実施例４菌糸体（ＤＳＭ
２０１８） を参照乾燥（ペニシリウ
ム） ２ｙ／Ｑ 実施例４菌糸体（ＤＳＭ １０
７９） を参照酵素エキス
Ｏ，Ｌｙ／Ｑ コーンスチープ ７ｇ／ Ｑ Ｎａ、ＨＰＯ，・２Ｈ２０Ｌ、８ｙ／Ｑ（Ｎ）１４）２
５０４ １９／ ＱＫＨ２ＰＯ４０，５ｇ
／ Ｑ Ｋ２ＨＰＯ，１９／ Ｑ ＭｇＳＯ４・７ｎｚｏ ０．５９／ ＱＦｅ
ＳＯ＊ −７Ｈ２００，２ｇ／ ＱｐＨ７，７ ０，５ＶＶＭで通気しながら３０℃の温度でインキュベ
ートした。３日後、培養液か液中に測定可能な溶解活性
は２０６Ｕ／Ｑであった。菌体を遠心分離し、モして上
清を凍結乾燥しそして酵素調製物（ＥＰ）として用いた
。
実施例 ４
真菌細胞壁の単離
次の菌種の真菌を真菌用に知られた液状栄養液で培養し
た： フサリウム・オキシスポリウム ＤＳＭ ２０１８
（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｏｘｙｓｐｏｒｉｕｍ）ペニシリ
ウム・ロケフオルチ ＤＳＩＪ １１０７９（Ｐ
ｅｎｉｃｉｌｌｉｕ ｒｏｑｕｅｆｏｒｔｉ）ボトリチ
ス・シネレア ＤＳＩＪ ８７７（Ｂｏｔ
ｒｙｔｉｓ ｃｉｎｅｒｅａ）ゲオトリカム・カンジダ
ム ＣＢＳ １８７６７（Ｇｅｏｔｒｉｃｈｕ
ｍ ｃａｎｄｉｄｕｍ）ビソクラムス・ニベア
ＣＢＳ ６０８７１（Ｂｙｓｓｏｃｈｌａｍｕｓ
ｎ１ｖｅａ）ペニシリウム・パララム Ｄ
ＳＭ ６２８６２（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ ｐａｔｕ
ｌｕｍ）菌糸体を集め、洗浄し、粉砕し、Ｎｏｖ。
た： フサリウム・オキシスポリウム ＤＳＭ ２０１８
（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｏｘｙｓｐｏｒｉｕｍ）ペニシリ
ウム・ロケフオルチ ＤＳＩＪ １１０７９（Ｐ
ｅｎｉｃｉｌｌｉｕ ｒｏｑｕｅｆｏｒｔｉ）ボトリチ
ス・シネレア ＤＳＩＪ ８７７（Ｂｏｔ
ｒｙｔｉｓ ｃｉｎｅｒｅａ）ゲオトリカム・カンジダ
ム ＣＢＳ １８７６７（Ｇｅｏｔｒｉｃｈｕ
ｍ ｃａｎｄｉｄｕｍ）ビソクラムス・ニベア
ＣＢＳ ６０８７１（Ｂｙｓｓｏｃｈｌａｍｕｓ
ｎ１ｖｅａ）ペニシリウム・パララム Ｄ
ＳＭ ６２８６２（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ ｐａｔｕ
ｌｕｍ）菌糸体を集め、洗浄し、粉砕し、Ｎｏｖ。
Ｉｎｄｕｓｔｒｉから入手したプロテアーゼＡｌｃａｌ
ａｓｅで２４時間処理した。その菌糸体を次に再び洗浄
しそして乾燥した。
ａｓｅで２４時間処理した。その菌糸体を次に再び洗浄
しそして乾燥した。
実施例 ５
真菌細胞壁に対する溶解作用
実施例１の記載と同様にして、真菌から細胞壁を単離し
た。細胞壁寒天を調製するために、０．４ｙ／Ｑの真菌
細胞壁および２０ｇ／Ｑの寒天を１１２の５０ｍｍｏｆ
２／（２クエン酸／ホスフエート緩衝液（ｐＨ５，０）
に懸濁まＩ；は溶解する。それら成分を混合しそしてオ
ートクレーブ処理した。０ 、６９ ／ ＱＮａＮ３を
滅菌条件下に添加してからシャーレに分注する。その寒
天に８ｍｍの丸穴を穿ち、そして以下の酵素溶液を各１
００ｍ（２ずつ、それらの穴にピペットで入れて比較す
るニ 一実施例３の酵素調製物。１．４３ｍＵ／ ｍｇ（タン
パク質）、 ｍＱ。
た。細胞壁寒天を調製するために、０．４ｙ／Ｑの真菌
細胞壁および２０ｇ／Ｑの寒天を１１２の５０ｍｍｏｆ
２／（２クエン酸／ホスフエート緩衝液（ｐＨ５，０）
に懸濁まＩ；は溶解する。それら成分を混合しそしてオ
ートクレーブ処理した。０ 、６９ ／ ＱＮａＮ３を
滅菌条件下に添加してからシャーレに分注する。その寒
天に８ｍｍの丸穴を穿ち、そして以下の酵素溶液を各１
００ｍ（２ずつ、それらの穴にピペットで入れて比較す
るニ 一実施例３の酵素調製物。１．４３ｍＵ／ ｍｇ（タン
パク質）、 ｍＱ。
キチナーゼストレプトミセス・グリゼウス（Ｓｔｒ、ｇ
ｒ １ｓｅｕｓ）（シダ？Ｎｏ、Ｃ６１３７）。１．９
ＴｎＵ／ｍｇ（タンパク質）、 ｍＱ。
ｒ １ｓｅｕｓ）（シダ？Ｎｏ、Ｃ６１３７）。１．９
ＴｎＵ／ｍｇ（タンパク質）、 ｍＱ。
Ｈｅ１ｉｘ ｐｏｍａｔｉａ、Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ
Ｍａｎｎｈｅｉｍ Ｎｏ。
Ｍａｎｎｈｅｉｍ Ｎｏ。
１０１００８５から入手したプロトプラスト形成酵素。
０．５ｍＵ／ ｍｇ（タンパク質）、 ｍＱ０上記酵素
単位は、実施例２に用いた溶解検定法に基づくものであ
る。
単位は、実施例２に用いた溶解検定法に基づくものであ
る。
プレートを４℃で２時間保存後３０℃で２４時間インキ
ュベートした。この後に測定された溶解ゾーン（ｍｍ）
は次のとおりであった。
ュベートした。この後に測定された溶解ゾーン（ｍｍ）
は次のとおりであった。
細胞壁ポリマー
キチン
シダ？ＮＯ，Ｃ３６４１
フサリウム・オキシスポリウム
ＤＳＭ ２０１８
ペニシリウム・ロケ７オルチ
ＤＳＭ １０７９
ボトリチス・シネレア
ＤＳＭ ８７７
ゲオトリカム・カンジダム
ＣＢＳ １８７６７
ビソクラムス・ニベア
ＣＢＳ ６０８７１
ペニシリウム・パララム
ＤＳＭ ６２８６２
＝溶解なし
酵素調製物 プロトプラス（実施例３）キ
チナーゼ ト形成酵素 実施例 ６ ａ）＠度抵抗性 実施例３で得られた酵素調製物を５０ｍｍｏＱ／Ｑクエ
ン酸／ホスフェート緩衝液（ｐ）＋ ５．０） 中で５
０．６０および７０℃でインキュベートした。様々な経
過時間後に５０μａずつの検体を採取しモして真菌細胞
壁／寒天プレートに穿った穴（直径８ｒｒｒｍ）の中に
導入した。それらプレートは次の組成を有した： ３ｇの真菌細胞壁 １８ｇの寒天 それらプレートを３０℃で２４時間インキュベートした
。次に溶解ゾーンの直径を測定した。結果は次のとおり
であった。
チナーゼ ト形成酵素 実施例 ６ ａ）＠度抵抗性 実施例３で得られた酵素調製物を５０ｍｍｏＱ／Ｑクエ
ン酸／ホスフェート緩衝液（ｐ）＋ ５．０） 中で５
０．６０および７０℃でインキュベートした。様々な経
過時間後に５０μａずつの検体を採取しモして真菌細胞
壁／寒天プレートに穿った穴（直径８ｒｒｒｍ）の中に
導入した。それらプレートは次の組成を有した： ３ｇの真菌細胞壁 １８ｇの寒天 それらプレートを３０℃で２４時間インキュベートした
。次に溶解ゾーンの直径を測定した。結果は次のとおり
であった。
／′
ペニシリウム・ロケ７オルチＤＳＭ
−ンの直径、ｍ１１単位）
ＮＬ＝溶解なし
１０７９ （溶解ゾ
ペニシリウム・オキシスポリウムＤＳＭ解ゾーンの直径
、ｒＲＴｎ単位） ＮＬ＝溶解なし ２０１８ （溶 ｂ）至適ｐＨ 様々なｐＨ値および緩衝液を用いて実施例５の記載と同
様にして溶解活性検定を行った。以下の表は５３０ｎｍ
で測定された吸光度を示す。緩衝液濃度は各場合につき
５０ｍｍｏＱ／Ｑとした。
、ｒＲＴｎ単位） ＮＬ＝溶解なし ２０１８ （溶 ｂ）至適ｐＨ 様々なｐＨ値および緩衝液を用いて実施例５の記載と同
様にして溶解活性検定を行った。以下の表は５３０ｎｍ
で測定された吸光度を示す。緩衝液濃度は各場合につき
５０ｍｍｏＱ／Ｑとした。
緩 衝 液 ｐＨ吸光度
酢酸ナトリウム ４．０ ０．７８８酢酸
ナトリウム ５．０ ０．７９９クエン酸
／ホスフエート ５．０ ０．８０１酢酸ナトリウ
ム ６．０ ０．７８６ホスフエート
７．０ ０．７５８ホスフエート
８．０ ０．７５０トリス／ＨＣＱ
８．０ ０．７５３トリス／ＨＣＱ９．０
０．７３９ トリス／ＨＣｌ２ １０．０ ０．７４
０トリス−トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタンｃ
） ｐＨ安定性 凍結乾燥抽出物を各種緩衝液に溶解し、そして様々な時
間にわたって３０℃でインキュベートした。次いで検体
を採取しそして実施例５と同様にして溶解活性をクエン
酸／ホスフェート緩衝液（ｐＨ５，０）中で測定した。
ナトリウム ５．０ ０．７９９クエン酸
／ホスフエート ５．０ ０．８０１酢酸ナトリウ
ム ６．０ ０．７８６ホスフエート
７．０ ０．７５８ホスフエート
８．０ ０．７５０トリス／ＨＣＱ
８．０ ０．７５３トリス／ＨＣＱ９．０
０．７３９ トリス／ＨＣｌ２ １０．０ ０．７４
０トリス−トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタンｃ
） ｐＨ安定性 凍結乾燥抽出物を各種緩衝液に溶解し、そして様々な時
間にわたって３０℃でインキュベートした。次いで検体
を採取しそして実施例５と同様にして溶解活性をクエン
酸／ホスフェート緩衝液（ｐＨ５，０）中で測定した。
以下の数値が測定された：
酢酸ナトリウム
酢酸ナトリウム
クエン酸／ホスフェート
酢酸ナトリウム
ホス７エート
ホスフェート
トリス／ＨＣＱ
トリス／ＨＣＱ
トリス／ＨＣＱ
４．０ ０．８ ０．７ｇ８
５．０ ０．８ ０．７９５
５．０ ０．８ ０．７８８
６．０ ０．８ ０．７８２
７．０ ０．８ ０．７５５
８．０ ０．８ ０．７４８
８．０ ０．８ ０．７４９
９．０ ０．８ ０．７４２
１０．０ ０．８ ０．７３８
０．７６５ ０．７５８
０．７８１ ０．７６４
０．７７９ ０．７５８
０．７６５ ０．７６５
０．７３８ ０．７１６
０．７０８ ０．７０１
０．６９８ ０．６５４
０．６９４ ０．６５８
０．６３８ ０．６２９
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １）７０℃までの温度において安定であり、４０〜６０
℃の至適温度を有し、 ４．０〜１０．０のｐＨ範囲において安定であり、そし
て ４．５〜６の範囲に至適ｐＨを有するストレプトミセス
種ＤＳＭ４６６６の培養により得られる真菌溶解酵素生
成物。 ２）ストレプトミセス種ＤＳＭ４６６６をキチンおよび
／またはＮ−アセチル−１，４−グルコサミンのオリゴ
マーを含有する基質を用いて培養することより成る請求
項１に記載の真菌溶解酵素生成物の製造方法。 ３）ストレプトミセス種ＤＳＭ４６６６を０．０１〜５
％カニキチンを含有する基質を用いて培養する請求項２
記載の方法。 ４）培養が１８〜４０℃で行われる請求項２または３に
記載の方法。 ５）培養が５〜９のｐＨ範囲で行われる請求項２〜４の
いずれかに記載の方法。 ６）微生物によるいたみを受けやすい物を保存するため
の請求項１に記載の真菌溶解酵素生成物の使用。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE3827392.6 | 1988-08-12 | ||
| DE3827392 | 1988-08-12 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH02100676A true JPH02100676A (ja) | 1990-04-12 |
Family
ID=6360714
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP1207059A Pending JPH02100676A (ja) | 1988-08-12 | 1989-08-11 | ストレプトミセテスから得られる真菌溶解酵素生成物およびその製造 |
Country Status (2)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0358939A3 (ja) |
| JP (1) | JPH02100676A (ja) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP1773363A4 (en) * | 2004-07-19 | 2010-01-27 | Life Science Nutrition As | NGNA COMPOSITIONS AND METHODS OF USE THEREOF |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4032663A (en) * | 1971-12-14 | 1977-06-28 | Kumiai Chemical Industry Co., Ltd. | Process for using cell wall-lysing enzymes |
-
1989
- 1989-08-08 EP EP19890114627 patent/EP0358939A3/de not_active Withdrawn
- 1989-08-11 JP JP1207059A patent/JPH02100676A/ja active Pending
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP0358939A3 (de) | 1991-07-24 |
| EP0358939A2 (de) | 1990-03-21 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US4032663A (en) | Process for using cell wall-lysing enzymes | |
| Murao et al. | Isolation of amylase inhibitor-producing microorganism | |
| US6319497B1 (en) | Non-obligate predatory bacterium burkholderia casidaeand uses thereof | |
| Thakaew et al. | Inhibitory activity of Bacillus subtilis BCC 6327 metabolites against growth of aflatoxigenic fungi isolated from bird chili powder | |
| JP3461856B2 (ja) | 納豆菌株と、この納豆菌株を用いて製造した納豆 | |
| US6165775A (en) | Bacillus decomposing turf pseudo thatch and thatch, and a microbial material containing the Bacillus | |
| Hashimoto et al. | Thermostable acid protease produced by Penicillium duponti K1014, a true thermophilic fungus newly isolated from compost | |
| US3969189A (en) | Cell wall-lysing complex enzymes and a process for the production thereof | |
| JP4618033B2 (ja) | γ−アミノ酪酸豊富な食品の製造法及びγ−アミノ酪酸産生菌ラクトバシルス・カルバタスＫＭ１４株 | |
| Strzelczyk et al. | Cellulolytic and pectolytic activity of streptomycetes isolated from root-free soil, rhizosphere and mycorrhizosphere of pine (Pinus sylvestris L.) | |
| HU181488B (en) | Process for the hydrolysis of racemic hydantoins into optically active n-carbamoyl-aminoacid derivatives and for preparing the hydrolyzing enzymatic complex | |
| Delucca II et al. | Isolation and identification of lipolytic microorganisms found on rough rice from two growing areas | |
| JPH02100676A (ja) | ストレプトミセテスから得られる真菌溶解酵素生成物およびその製造 | |
| US3890198A (en) | Cell wall-lysing complex enzymes and a process for the production thereof | |
| JP2763551B2 (ja) | ピラノースオキシダーゼおよびその製造法 | |
| Gräfe et al. | Biochemical characteristics of non‐streptomycin‐producing mutants of Streptomyces griseus I. Role of NAD (P)‐glycohydrolase in cell differentiation | |
| Shumi et al. | Production of protease from Listeria monocytogenes | |
| Strzelczyk et al. | Chitinolytic and proteolytic activity of streptomycetes isolated from root-free soil, rhizosphere and mycorrhizosphere of pine (Pinus sylvestris L.) | |
| US3740318A (en) | Composition of matter and process | |
| KR0136299B1 (ko) | 미생물세포벽 용해효소와 그의 생산 미생물 | |
| Thigiel et al. | Selection of strains and extraction procedures for optimum production of galactosidase from Kluyveromyces strains | |
| JPH07274944A (ja) | 新規変異株及び蛋白加水分解物の製造法 | |
| WO1997019166A1 (fr) | Nouvelle souche de l'espece des exserohilum monoceras et ses utilisations | |
| JPS6119483A (ja) | アルカリ性セルラ−ゼの製造法 | |
| Shukla et al. | Study of some parameters for the production of dextranase by Penicillium aculeatum |