JPH01115499A - Method for removing dimethyl amines - Google Patents
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Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Purification Treatments By Anaerobic Or Anaerobic And Aerobic Bacteria Or Animals (AREA)
Abstract
Description
【発明の詳細な説明】
C産業上の利用分野〕
本発明は、ジメチルアミンおよび/またはジメチルアミ
ン塩(以下、両者を総称して ジメチルアミン類 と記
すこともある)を含有する液中のジメチルアミン類を除
去する方法に関し、さらに詳細には、ジメチルアミン類
を含有する液中のジメチルアミン類を、細菌を使用して
除去する方法に係わる。[Detailed Description of the Invention] C. Industrial Application Field] The present invention is directed to the use of dimethyl The present invention relates to a method for removing amines, and more particularly to a method for removing dimethylamines from a liquid containing dimethylamines using bacteria.
〔従来の技術、発明が解決しようとする問題点〕ジメチ
ルアミンは、ジメチルアミン製造工場からの排液の中に
含有されており、また、テトラメチルアンモニウムヒド
ロキシド、ジメチルホルムアミドおよびトリメチルアミ
ンなどのそれぞれの分解産物として、化学工場などから
の排液に含有されている。しかして、ジメチルアミンを
含有するこれらの排液は、有害であり、環境衛生上、無
害化処理を施してから放流しなければならないが、従来
の活性汚泥処理によってはこのような排液を無害化でき
なかった。[Prior Art and Problems to be Solved by the Invention] Dimethylamine is contained in wastewater from dimethylamine manufacturing plants, and is also used in various products such as tetramethylammonium hydroxide, dimethylformamide, and trimethylamine. As a decomposition product, it is contained in wastewater from chemical factories. However, these effluents containing dimethylamine are harmful and must be treated to render them harmless before being discharged from the viewpoint of environmental hygiene.However, conventional activated sludge treatment makes such effluents harmless. could not be converted into
ジメチルアミン類は、安定で、分解され難い物質である
が、この物質を効率よく資化乃至分解し得る微生物を見
出すことができれば、この微生物を用いてジメチルアミ
ン類を含有する排液を効率よく無害化することが可能と
なる。Dimethylamines are stable and difficult to decompose substances, but if we can find microorganisms that can efficiently assimilate or decompose these substances, we can use these microorganisms to efficiently remove wastewater containing dimethylamines. It becomes possible to make it harmless.
〔問題点を解決するための手段、作用〕本発明者らは、
自然界を広く探索した結果、ジメチルアミン類を旺盛に
資化し得るか、乃至は、強力に分解し得る微生物を見出
し、この微生物を使用する本発明を完成した。[Means and effects for solving the problem] The present inventors,
As a result of extensive exploration of the natural world, we discovered microorganisms that can actively assimilate or strongly decompose dimethylamines, and completed the present invention using this microorganism.
すなわち、本発明は、ジメチルアミンおよび/またはジ
メチルアミン塩を含有する液と、メチロバチルス属、プ
ロトモナス属、メチロファーガ5、シュードモナス属、
アースロハクター属およびミコバクテリウム属のいずれ
かの属に属し、ジメチルアミンおよび/またはジメチル
アミン塩を資化。That is, the present invention provides a liquid containing dimethylamine and/or a dimethylamine salt, and Methylobacillus, Protomonas, Methylophaga 5, Pseudomonas,
Belongs to either the genus Arthrohactor or Mycobacterium and assimilates dimethylamine and/or dimethylamine salts.
分解し得る細菌の菌体および/または該細菌の菌体処理
物とを接触させて、該液中のジメチルアミンおよび/ま
たはジメチルアミン塩を分解、除去することを特徴とす
るジメチルアミン類の除去方法である。Removal of dimethylamines, characterized by decomposing and removing dimethylamine and/or dimethylamine salts in the liquid by contacting with decomposable bacterial cells and/or a bacterial cell-treated product of the bacteria. It's a method.
本発明に用いられる細菌は、メチロバチルス属、プロト
モナス属、メチロファーガ属、シュードモナス属、アー
スロバクター屈およびミコバクテリウム属のいずれかの
灰に属し、ジメチルアミン類を資化1分解し得る能力を
有する菌株であればよく、特に制限はない。The bacteria used in the present invention belong to any of the genera Methylobacillus, Protomonas, Methylophaga, Pseudomonas, Arthrobacter and Mycobacterium, and have the ability to assimilate and decompose dimethylamines. There are no particular restrictions as long as it is a bacterial strain.
メチロバチルス属に属する細菌の代表的な菌種としては
、たとえば、メチロバチルス グリコゲネスがある。こ
の属およびこの菌種は、ヨーデイ(Yordy)とライ
−バー(Weaver)とにより1977年、八TCC
29475(・JCM 2850・NCIB 1137
5)の1菌株について設立された(J、R,Yordy
& T、L、Weaver:“Int、J、5yst
、Bacteriol、” 27.247〜2.55
(1977))ものであるが、1986年、油上と駒形
とにより、メチロバチルス属およびメチロバチルス グ
リコゲネスについて訂正が行なわれ(Teizi Ur
akami &Kazuo Komagata:“In
t、J、5yst、Bacteriol、 36+ 5
02〜511 (1986)) 、アクロモバクタ−属
、メタノモナス属、メチロモナス属、プロタミノバクタ
−属およびシュードモナス属のそれぞれに属するいくつ
かの菌種が、このメチロバチルス グリコゲネスに含ま
れることになった。A representative species of bacteria belonging to the genus Methylobacillus is, for example, Methylobacillus glycogenes. This genus and species were identified in the 8TCC by Yordy and Weaver in 1977.
29475 (・JCM 2850・NCIB 1137
5) was established for one strain (J, R, Yordy
& T, L, Weaver: “Int, J, 5yst
, Bacteriol,” 27.247-2.55
(1977)), but in 1986, Aburakami and Komagata corrected the genus Methylobacillus and Methylobacillus glycogenes (Teizi Ur.
akami & Kazuo Komagata: “In
t, J, 5yst, Bacteriol, 36+ 5
02-511 (1986)), several bacterial species belonging to the genera Achromobacter, Methyromonas, Methylomonas, Protaminobacter, and Pseudomonas are now included in Methylobacillus glycogenes.
また、さらに、油上および駒形の分類〔“J、Gen。Furthermore, the classification of oil and Komagata ["J, Gen.
八pp1.Microbio1.”32.317〜34
1 (1986)およびJ。8pp1. Microbio1. ”32.317-34
1 (1986) and J.
Gen、八pp I 、 M 1crob io I
、 ”3ヨa’ 135〜165 (1986))
によれば、アエロモナス属、コリネバクテリウム属
、メチロモナス属およびシュードモナス属のそれぞれに
属するいくつかがメチロバチルス グリコゲネスとして
同定されている。Gen, 8pp I, M 1crob io I
, "3yoa' 135-165 (1986))
According to , several members of each of the genera Aeromonas, Corynebacterium, Methylomonas, and Pseudomonas have been identified as Methylobacillus glycogenes.
ジメチルアミンを資化1分解する菌株の代表例としては
、アクロモバクタ−メタノモナスATCC21452、
同へTCC21591,メタノモナス メタノリカNR
RL B−5458,プロタミノバクタ−カンディダス
ΔTCC21372,プロタミノバクタ−チアミノファ
ーガスATCC21371,同ATCC21957゜シ
ュードモナス メチロトロファNCTB 10508゜
同NCIB 10514. 同NCIB 10515
. メチロモナスメタツカタラレスリカ 微工研菌寄
第4037号。Representative examples of strains that assimilate and decompose dimethylamine include Achromobacter methanomonas ATCC21452,
Same as TCC21591, Methanomonas methanolica NR
RL B-5458, Protaminobacter candidus ΔTCC 21372, Protaminobacter thiaminophagus ATCC 21371, ATCC 21957゜Pseudomonas methylotropha NCTB 10508゜Same NCIB 10514. Same NCIB 10515
.. Methylomonas metatsukataralesrica, Microtechnical Research Institute No. 4037.
メチロモナス メタノフラクトリカ 微工研菌寄第40
42号、メチロモナス エスペクシー 微工研菌寄第2
661号、同 微工研菌寄第2662号、アエロモナス
メタノコラ 微工研菌寄第2809号、アエロモナス
メタノフィラム 微工研菌寄第2808号。Methylomonas Methanofractolica
No. 42, Methylomonas sp.
No. 661, FEIKER No. 2662, Aeromonas methanocola FEI No. 2809, and Aeromonas methanophilum FEI No. 2808.
シュードモナス インアウディタ 微工研菌寄第169
2号、同 微工研菌寄第1693号、同 微工研菌寄第
1694号などがある。Pseudomonas inaudita Microtechnical Research Institute No. 169
2, Fiber Technology Research Institute No. 1693, and Fiber Technology Research Institute No. 1694.
現在では、これらの菌株は、いずれも、前記の油上およ
び駒形の分類によりメチロバチルス属に属する細菌であ
るとされている。Currently, all of these strains are considered to belong to the genus Methylobacillus according to the above-mentioned classification of oil and Komagata.
プロトモナス属に属する細菌の代表例として、プロトモ
ナス エクストロクエンスがある。この属およびこの菌
種は、油上および駒形により、1984年に設立され(
Teizi Urakami & Kazuo Kom
agata。Protomonas extroquens is a representative example of bacteria belonging to the genus Protomonas. This genus and species were established in 1984 by Aburagami and Komagata (
Teizi Urakami & Kazuo Kom
agata.
“Int、J、5yst、Bacteriol、” 3
4.188〜20!、 (1984) )、ミコプラナ
属、プロタミノバクター属、シュードモナス属およびチ
オバチルス属のいくつかの菌種が、このプロトモナス
エクストロクエンスに属することとされている。“Int, J, 5yst, Bacteriol,” 3
4.188~20! (1984)), several species of the genera Mycoplana, Protaminobacter, Pseudomonas and Thiobacillus are associated with this Protomonas.
It is considered to belong to Extroquence.
ジメチルアミン類を資化1分解する代表的な菌株として
は、たとえば、プロトモナス エクストロクエンスNC
IB 10598. 同NCIB 10599.
同NClB10600、同NCIB 10601.同N
Cl310602.同NCIB10605および同NC
r310611などがある。Representative strains that assimilate and decompose dimethylamines include, for example, Protomonas extroquens NC.
IB 10598. Same NCIB 10599.
Same NCIB10600, Same NCIB 10601. Same N
Cl310602. NCIB10605 and NC
There are r310611, etc.
また、本発明者らが土壌から分離したプロトモナス エ
クストロクエンスTH−15(微工研菌寄第9466号
)がある。In addition, there is Protomonas extroquens TH-15 (Feikoken Bibori No. 9466), which the present inventors isolated from soil.
プロトモナス エクストロクエンスTH−15の菌学的
性質を以下に示す。The mycological properties of Protomonas extroquens TH-15 are shown below.
1、形態
メタノール含有液体培地およびメタノール含有寒天培地
のそれぞれで30°Cで3日間培養した。1. Cultured at 30°C for 3 days in a methanol-containing liquid medium and a methanol-containing agar medium, respectively.
■ 直桿菌 幅0.9〜1.2JIrR長さ1 、5〜
4 jpm■ 集団、単細胞または双細胞となる。■ Straight rod Width 0.9~1.2 JIrR Length 1, 5~
4 jpm■ Population, unicellular or bicellular.
■ 運動性あり。極鞭毛を有する。■ Has motility. It has polar flagella.
■ 胞子の有無 生産されない。■ Presence or absence of spores Not produced.
■ ダラム染色 陰性。■ Durham staining Negative.
■ 抗酸性 陰性。■ Anti-acidity Negative.
■ 細胞外粘着物 生産されない。■ Extracellular adhesive is not produced.
2、次の各培地における生育状態
(特に断らなければ30℃で3日間の培養)■ 肉汁寒
天平板培地
コロニーの形態および性状:
外形−円形、大きさ一2〜3mm。2. Growth status in each of the following media (culture at 30°C for 3 days unless otherwise specified) Morphology and properties of colonies on broth agar plate: External shape - circular, size - 2 to 3 mm.
隆起−半球形、構造−均質、表面−平滑。Ridges - hemispherical, structure - homogeneous, surface - smooth.
辺縁−金縁で滑らか1色−赤色またはピンク色、透明度
−不透明、硬度−ハタ−質。Margin: Smooth with golden edge, Single color: Red or pink, Transparency: Opaque, Hardness: Grainy.
■ メタノール含有寒天平板培地 肉汁寒天平板培地におけると同し。■ Methanol-containing agar plate medium Same as in broth agar plates.
■ 肉汁寒天斜面培地 接種線に一様に旺盛に生育する。■ Broth agar slant medium Grows vigorously and uniformly along the inoculation line.
コロニーの形態および性状: 隆起−中程度1表面−平滑9辺縁−滑らか。Colony morphology and properties: Ridges - Moderate 1 Surface - Smooth 9 Edges - Smooth.
色−赤色またはピンク色、透明度−不透明。Color - red or pink, transparency - opaque.
硬度−バター質。Hardness - buttery.
■ メタノール含有寒天斜面培地 肉汁寒天斜面培地におけると同じ。■ Methanol-containing agar slant medium Same as in broth agar slants.
■ 肉汁液体培地 全体に弱く生育する。沈殿あり。菌環を形成しない。■ Broth liquid medium Grows weakly throughout. There is precipitation. Does not form bacterial rings.
■ ペプトン水液体培地 全体に弱く生育する。沈殿あり。菌環を形成しない。■ Peptone water liquid medium Grows weakly throughout. There is precipitation. Does not form bacterial rings.
■ メタノール含有液体培地 全体に生育する。沈殿あり。菌環を形成しない。■ Methanol-containing liquid medium Grows all over. There is precipitation. Does not form bacterial rings.
■ 肉汁寒天穿刺培養
小乳頭状に一様に生育する。培地表面では、直径2〜4
胴位の円状に生育する。■ Meat juice agar puncture culture Grows uniformly in the shape of small papillae. On the surface of the medium, the diameter is 2-4
Grows in a circular shape on the trunk.
■ メタノール含有寒天穿刺培養
小乳頭状に一様に生育する。培地表面では、直径2〜4
薗位の円状に生育する。■ Puncture culture on agar containing methanol Grows uniformly in the shape of small papillae. On the surface of the medium, the diameter is 2-4
Grows in a circular shape.
[相] 肉汁ゼラチン高層培養 20°Cで10日間培養。[Phase] Gravy gelatin high-rise culture Culture at 20°C for 10 days.
菌の生育は認められるが、ゼラチンは液化されない。Bacterial growth is observed, but gelatin is not liquefied.
■ リドマスミルク 30″Cで4週間培養。■ Ridmus milk Cultured at 30″C for 4 weeks.
国の生育は認められるが、アルカリは生産されない。Although it is allowed to grow in the country, it does not produce alkali.
3、生理学的性質
■ 硝酸塩の還元 硝酸塩を亜硝酸塩に弱く還元する
。3. Physiological properties ■ Reduction of nitrate Weakly reduces nitrate to nitrite.
■ MRテスト 陰性。■ MR test Negative.
■ VPテスト 陰性。■ VP test Negative.
■ インドールの生成 陰性。■ Indole production Negative.
■ 硫化水素の生成 陰性。■ Generation of hydrogen sulfide Negative.
■ でん粉の加水分解 陰性。■ Starch hydrolysis Negative.
■ くえん酸の利用(コーザKoser培地とクリステ
ンセンChris tensen培地を併用)利用しな
い。■ Use of citric acid (combined Koser medium and Chris Tensen medium) Do not use.
■ 窒素源の利用
アンモニウム塩、硝酸塩、尿素およびペプトンを窒素源
としてそれぞれ利用する。■ Use of nitrogen sources Ammonium salts, nitrates, urea and peptone are used as nitrogen sources.
■ 色素の生成 赤色の非水溶性色素を菌体中に生成する。■ Production of pigment Produces a red water-insoluble pigment in the bacterial cells.
[相] ウレアーゼ 陽性。[Phase] Urease positive.
■ カフラーゼ 陽性。■ Kafrase positive.
@ アンモニアの生成 生成する。@Generation of ammonia Generate.
■ 生育の範囲
p]15〜9の範囲で生育する。p116〜8の範囲が
好ましい。■ Growth range p] Grows in the range of 15 to 9. The range of p116 to 8 is preferable.
温度5〜35“Cで生育する。25〜32゛cが好まし
い。Grows at temperatures between 5 and 35"C. Preferably between 25 and 32"C.
■ 酸素に対する態度 好気性。■ Attitude towards oxygen Aerobic.
■ オキシダーゼ 陰性。■ Oxidase Negative.
■ O−Fテスト(ヒユー ライフソン FlughL
eifson法による)
糖を酸化的に分解するが、醗酵的に分解しない。
(以下余白)■ 糖類の資化性なら
びに酸の生成およびガスの生成
資化性:資化して、分解する。■ O-F test (Hyu Lifeson FlughL
(by Eifson method) Decomposes sugar oxidatively, but not fermentatively.
(Left below) ■ Assimilation of sugars, production of acids, and production of gas Assimilation: Assimilates and decomposes.
■ 糖類以外の炭素源の資化性 □ [相] 耐塩性 3wtχNaC1含有培地で生育しない。■ Assimilation of carbon sources other than sugars □ [Phase] Salt resistance 3wtχNaC1-containing medium does not grow.
[相] ビタミン要求性 ビタミンを絶対的に要求しない。[Phase] Vitamin requirement Absolutely does not require vitamins.
0 脱窒反応 陰性。0 Denitrification reaction Negative.
@CC(グアニン+シトシン)含量 67.3mo1% 0 主要な菌体脂肪酸組成 モノ不飽和脂肪酸 C+a:+ ■ 主要なヒドロキシ酸 3−ヒドロキシ酸 C34,。@CC (guanine + cytosine) content 67.3mo1% 0 Main bacterial fatty acid composition Monounsaturated fatty acids C+a:+ ■ Major hydroxy acids 3-hydroxy acid C34.
@ キノン・タイプ ユビキノンQIO[相]
分離源 土壌。@ Quinone type Ubiquinone QIO [phase]
Separation source soil.
この菌株は、その菌学的性質のうち、極鞭毛を存し、赤
色コロニーを形成するダラム陰性のメタノール資化性菌
であり、CC含量が67.3mol!、モノ不飽和脂肪
酸CI8.lを主要な菌体脂肪酸組成とし、3−ヒドロ
キシ酸CI4+。を主要なヒドロキシ酸とし、かつ、キ
ノン・タイプがユビキノンQ、。Among its mycological properties, this strain has polar flagella, is a Durham-negative methanol-assimilating bacterium that forms red colonies, and has a CC content of 67.3 mol! , monounsaturated fatty acid CI8. 1 is the main bacterial fatty acid composition, and 3-hydroxy acid CI4+. is the main hydroxy acid, and the quinone type is ubiquinone Q.
であることから、油上および駒形の分類(TeiziU
rakami & Kazuo Komagata、”
rnt、J、5yst、Bacteriol、”圓、1
88〜201 (1984))のグループ2のメタノー
ル資化性細菌に属する細菌であり、プロトモナスエクス
トロクエンスに属する微生物と同定される。Therefore, oil-based and Komagata classification (TeiziU
rakami & Kazuo Komagata,”
rnt, J, 5yst, Bacteriol, ``En, 1
88-201 (1984)), and is identified as a microorganism belonging to Protomonas extroquens.
なお、1985年に、ボースフィールド(Bousf
1eld)とグリーン(Green)とは、この菌種は
、メチロバクテリウムMethylobacteriu
m属に属する菌種であり、メチロバクテリウム エクス
トロクエンスMethylobacterium ex
torquensとすべきであると提案している〔“I
ntj、5yst、Bacteriol、” 35+
209(1985) )。In addition, in 1985, Bousfield
1eld) and Green, this bacterial species is Methylobacterium Methylobacterium.
Methylobacterium ex is a bacterial species belonging to the genus m.
It is proposed that it should be called “I
ntj, 5yst, Bacteriol,” 35+
209 (1985)).
このように、プロトモナス エクストロクエンスは、メ
チロバクテリウム エクストロクエンスとも称され、そ
の分類学的名称は、現在の処、流動的であって確定して
いないが、本発明では、以下、プロトモナス エクスト
ロクエンスと一応記することにする。As described above, Protomonas extroquens is also called Methylobacterium extroquens, and its taxonomic name is currently in flux and has not been finalized. I'll just call it Extroquence.
なお、前記の浦上および駒形の論文に記載されている菌
株のうち、プロトモナス エクストロクエンスTK 0
001 (=NCIB 9399. シュードモナス
エクストロクエンス)、 同TK 0003(=ATC
C8457=DS門1340= I静1081=IFO
3708=NCIB 2879.プロタミノバクタ−ル
ーバー、同TK 0004 (JTCC1471B=D
SM 1338=NCIB 9133= r’eel
& Quale AM 1. シュードモナス エス
ピー)などの菌株が、ジメチルアミン類を旺盛に資化1
分解することができる。Of the strains described in the paper by Urakami and Komagata, Protomonas extroquens TK 0
001 (=NCIB 9399. Pseudomonas extroquence), same TK 0003 (=ATC
C8457 = DS Gate 1340 = I-Shin 1081 = IFO
3708=NCIB 2879. Protaminobacter Louver, same TK 0004 (JTCC1471B=D
SM 1338=NCIB 9133= r'eel
& Quale AM 1. Bacterial strains such as Pseudomonas sp. actively assimilate dimethylamines1.
Can be disassembled.
メチロファーガ属に屈する菌株の代表例としては、メチ
ロファーガ サラシカNCMB 2162.同ATCC
33145およびメチロファーガ エスピー 微工研菌
寄第3169号、同 微工研菌寄第3622号などがあ
る。メチロファーガ エスピー 微工研菌寄第3169
号および同 微工研菌寄第3622号は、それぞれ、シ
ュードモナス サランメタノリカ 微工研菌寄第316
9号およびメチロモナス サラシカ 微工研苗寄第36
22号として寄託されたが、現在では、浦上および駒形
の分R(”J、Gen、Appl、Microbio+
、”32、317〜341 (1986) および“
J、Gen、Appl、Micro−biol、”33
.135〜165 (1987) 〕により、メチo7
ファガ属に属する菌株とされている。A representative example of a bacterial strain succumbing to the genus Methylophaga is Methylophaga salicica NCMB 2162. Same ATCC
33145, and Methylophaga sp. Microtechnical Research Institute No. 3169 and Methylophaga Sp. Microtechnology Research Institute No. 3622. Methylophaga sp. 3169
Pseudomonas sarummetanolica and the same number are 3622, respectively.
No. 9 and Methylomonas Sarasica Phys. No. 36
It was deposited as No. 22, but now it is used as Urakami and Komagata part R ("J, Gen, Appl, Microbio+
, “32, 317-341 (1986) and “
J, Gen, Appl, Micro-biol,”33
.. 135-165 (1987)], Methi o7
It is said to be a bacterial strain belonging to the genus Faga.
シュードモナス属に属する菌株の代表例としては、シュ
ードモナス アミノボランスTl−3(微工研菌寄第9
467号)、 同DM−81(微工研菌寄第9498号
)などがある。A representative example of a strain belonging to the genus Pseudomonas is Pseudomonas aminovorans Tl-3
467), and DM-81 (Feikoken Bibori No. 9498).
これらの菌株は、本発明者らが、土壌から分離した菌株
である。These strains were isolated from soil by the present inventors.
これらの菌株の菌学的性質を以下に示す。The mycological properties of these strains are shown below.
1、形態
肉汁液体培地および肉汁寒天培地のそれぞれで30°C
で1日間培養した。1. At 30°C for both the liquid broth medium and agar agar medium.
The cells were cultured for 1 day.
■ 直桿菌 幅0.9〜1.2− 長さ1.5〜4μ■
集団、単細胞または双細胞となる。■ Direct rod width 0.9~1.2- length 1.5~4μ■
Can be clustered, unicellular or bicellular.
■ 運動性あり。極鞭毛を有する。■ Has motility. It has polar flagella.
■ 胞子の有無 生産されない。■ Presence or absence of spores Not produced.
Q グラム染色 陰性。Q Gram staining Negative.
■ 抗酸性 陰性。■ Anti-acidity Negative.
■ 細胞外粘着物 生産されない。■ Extracellular adhesive is not produced.
2、次の各培地における生育状態
(特に断らなければ30°Cで3日間の培養)■ 肉汁
寒天培地
コロニーの形態および性状:
外形−円形、大きさ一2〜3mm。2. Growth status on each of the following media (culture at 30°C for 3 days unless otherwise specified) Morphology and properties of colonies on broth agar medium: External shape - round, size - 2 to 3 mm.
隆起−半球形、構造−均質、表面−平滑。Ridges - hemispherical, structure - homogeneous, surface - smooth.
辺縁−金縁で滑らか3色−白色または黄白色、透明度−
不透明、硬度−バター質。Edges: Smooth with gold edges, 3 colors: white or yellowish white, transparency.
Opaque, hardness - buttery.
■ モノメチルアミン含有寒天平板培地肉汁寒天平板培
地におけると同じ。■ Monomethylamine-containing agar plates Same as in broth agar plates.
■ 肉汁寒天斜面培地 接′4rfi線に一様に旺盛に生育する。■ Broth agar slant medium Grows uniformly and vigorously along the tangent '4 rfi line.
コロニーの形態および性状: 隆起−中程度5表面−平滑2辺縁−滑らか。Colony morphology and properties: Raised - Moderate 5 Surface - Smooth 2 Margin - Smooth.
色−白色または黄白色、透明度−不透明。Color - white or yellow-white, transparency - opaque.
硬度−ハタ−質。Hardness: Hardness.
■ モノメチルアミン含有寒天斜面培地肉汁寒天斜面培
地におけると同じ。■ Monomethylamine-containing agar slants Same as in broth agar slants.
■ 肉汁液体培地
全体に生育する。沈殿あり。閉環を形成しない。Tl1
−3は褐色を呈する。■ Grows throughout the broth liquid medium. There is precipitation. Does not form a closed ring. Tl1
-3 exhibits brown color.
■ ペプトン水液体培地 全体に弱く生育する。沈殿あり。閉環を形成しない。■ Peptone water liquid medium Grows weakly throughout. There is precipitation. Does not form a closed ring.
■ モノメチルアミン含有液体培地 全体に生育する。沈殿あり。閉環を形成しない。■ Monomethylamine-containing liquid medium Grows all over. There is precipitation. Does not form a closed ring.
■ 肉汁寒天穿刺培養
小乳頭状に一様に生育する。培地表面では、直径2〜4
mm位の円状に生育する。■ Meat juice agar puncture culture Grows uniformly in the shape of small papillae. On the surface of the medium, the diameter is 2-4
Grows in a circular shape about mm in diameter.
■ モノメチルアミン含有寒天穿刺培養小乳頭状に一様
に生育する。培地表面では、直径2〜4胴位の円状に生
育する。■ Monomethylamine-containing agar puncture culture Grows uniformly in the shape of small papillae. On the surface of the medium, it grows in a circular shape with a diameter of 2 to 4 inches.
[相] 肉汁ゼラチン高層培養 20°Cで10日間培養。[Phase] Gravy gelatin high-rise culture Culture at 20°C for 10 days.
菌の生育は認められるが、ゼラチンは液化されない。Bacterial growth is observed, but gelatin is not liquefied.
■ リドマスミルク 30°Cで4週間培養。■ Ridmus milk Cultured at 30°C for 4 weeks.
菌の生育は認められるが、アルカリは生産されない。Although bacterial growth is observed, alkali is not produced.
3、生理学的性質 ■ 硝酸塩の還元 硝酸塩を亜硝酸塩に還元する。3. Physiological properties ■ Reduction of nitrate Reducing nitrate to nitrite.
■ MRテスト 陰性。■ MR test Negative.
■ vpテスト 陰性。■ VP test Negative.
■ インドールの生成 陰性。■ Indole production Negative.
■ 硫化水素の生成 陰性。■ Generation of hydrogen sulfide Negative.
■ でん粉の加水分解 陰性。■ Starch hydrolysis Negative.
■ くえん酸の利用(コーザKoser培地とクリステ
ンセンChris tensen培地を併用)利用しな
い。■ Use of citric acid (combined Koser medium and Chris Tensen medium) Do not use.
■ 窒素源の利用
アンモニウム塩、硝酸塩、尿素およびペプトンを窒素源
としてそれぞれ利用する。■ Use of nitrogen sources Ammonium salts, nitrates, urea and peptone are used as nitrogen sources.
■ 色素の生成 生成しない。■ Pigment generation No generation.
[相] ウレアーゼ 陽性。[Phase] Urease positive.
■ カタラーゼ 陽性。■ Catalase positive.
@ アンモニアの生成 生成する。@Generation of ammonia Generate.
■ 生育の範囲
ρ116〜8の範囲で生育する。pl+ 6.5〜7.
5の範囲が好ましい。■Growth range: Grows in the range of ρ116 to 8. pl+ 6.5-7.
A range of 5 is preferred.
温度5〜35°Cで生育する。10〜32゛cが好まし
い。Grows at temperatures between 5 and 35°C. 10-32°C is preferred.
■ 酸素に対する態度 好気性。■ Attitude towards oxygen Aerobic.
■ オキシダーゼ 陰性。■ Oxidase Negative.
■ O−Fテスト(ヒユー ライフソン II u g
hLeifson法による)
糖を酸化的に分解するが、醗酵的に分解しない。
(以下余白)o jIH頚の資化性
ならびに酸の生成およびガスの生成
Dト81
@ 糖類以外の炭素源の資化性
■ 耐塩性
3wtχNaC1含有培地で生育しない。■ O-F test (Hyu Lifeson II u g
hLeifson method) Decomposes sugar oxidatively, but not fermentatively.
(Left below) o jIH Cervical assimilation, acid production, and gas production D 81 @ Assimilation of carbon sources other than sugar ■ Salt tolerance 3wtχ Does not grow in NaC1-containing medium.
[相] ビタミン要求性 ビタミンを絶対的に要求しない。[Phase] Vitamin requirement Absolutely does not require vitamins.
■ 脱窒反応 陰性。■ Denitrification reaction Negative.
@GC(グアニン+シトシン)含量
Tl1−3 63.5molχDM
−8163,2mol!
O主要な菌体脂肪酸組成
モノ不飽和脂肪酸 C,a、。@GC (guanine + cytosine) content Tl1-3 63.5 molχDM
-8163,2mol! O Main bacterial fatty acid composition Monounsaturated fatty acids C, a.
■ 主要なヒドロキシ酸 3−ヒドロキシ酸 CIZ+。■ Major hydroxy acids 3-Hydroxy acid CIZ+.
[相] キノン・タイプ ユビキノンQI。[Phase] Quinone type Ubiquinone QI.
[相] 分離源 土壌。[Phase] Separation source Soil.
これらの苗株は、その菌学的性質のうち、極鞭毛を有し
、白色または黄白色のコロニーを形成し、ダラム陰性の
モノメチルアミン資化性細菌であり、GC含量が63.
5mol!または63.2molχ、モノ不飽和脂肪酸
Cl811を主要な菌体脂肪酸組成とし、3−ヒドロキ
シ酸CIti。を主要なヒドロキシ酸とし、かつ、キノ
ン・タイプがユビキノンQ1゜であることから、油上お
よび駒形の分類じJ、Gen、Micro−biol、
’32.317〜341 (1986) )のグループ
1のモノメチルアミン資化性細菌であるシュードモナス
アミノボランスPseudomonas aminov
oransに属する菌株と同定される。Among the mycological properties, these seedlings have polar flagella, form white or yellow-white colonies, are Durham-negative monomethylamine-assimilating bacteria, and have a GC content of 63.
5mol! or 63.2 molχ, with monounsaturated fatty acid Cl811 as the main bacterial fatty acid composition, and 3-hydroxy acid CIti. is the main hydroxy acid, and the quinone type is ubiquinone Q1°, so it is classified as oil-based and komagata J, Gen, Micro-biol,
'32.317-341 (1986)), a group 1 monomethylamine-assimilating bacterium, Pseudomonas aminovorans.
The strain was identified as belonging to S. orans.
なお、シュードモナス アミノボランスに屈する菌株と
して、NIJB 9039があるが、この苗株は、ジメ
チルアミン類を旺盛に資化1分解しながった。Note that NIJB 9039 is a strain that succumbs to Pseudomonas aminovorans, but this seedling strain did not actively assimilate or degrade dimethylamines.
また、油上および駒形の論文〔“J、Gen、Appl
、Micro−biol”32.317〜341 (1
986) およびC“J、Gen、Appl−Mic
robiol、” 33.135〜I65 (19B?
))には、シュードモナス アミノボランスの近縁菌お
して、シュードモナスエスピーTK 3002 (JT
CC2389=NCII311509)、同TK 30
03 (=ATCC25262)が示されテいるが、こ
れらの2菌株も、ジメチルアミン類を旺盛に資化9分解
することができなかった。In addition, the paper by Yugami and Komagata [“J, Gen, Appl.
, Micro-biol”32.317-341 (1
986) and C"J, Gen, Appl-Mic
robiol,” 33.135~I65 (19B?
)) is a close relative of Pseudomonas aminovorans, and Pseudomonas sp. TK 3002 (JT
CC2389=NCII311509), same TK 30
03 (=ATCC25262), but these two strains were also unable to actively assimilate or degrade dimethylamines.
アースロバクター属に属する菌株の代表例として、アー
スロバクターグロビホルミスJCM 1332(=AT
CC8010,、NCIB 8907=IF01213
7)および同11”012438がある。As a representative example of a bacterial strain belonging to the genus Arthrobacter, Arthrobacter globiformis JCM 1332 (=AT
CC8010,, NCIB 8907=IF01213
7) and 11"012438.
ミコバクテリウム属に屈する菌株としては、本発明者ら
が土壌から分離したミコバクテリウムメタノリカP−2
3(微工研菌寄第8825号)、 同P−70(微工研
菌寄第9496号)、 同Tl+−30(微工研菌寄第
9465号および同T11−35 (微工研菌寄第94
97号)などがある。As a strain belonging to the genus Mycobacterium, Mycobacterium methanolica P-2, which the present inventors isolated from soil,
3 (FEI Research Institute No. 8825), P-70 (FEI Research Institute No. 9496), Tl+-30 (FEI Research Institute No. 9465 and T11-35 (FEI Research Institute No. 9496), No. 94
No. 97).
これらの菌株の蘭学的性質を以下に示す。The orchidological properties of these strains are shown below.
1、形態
肉汁液体培地および肉汁寒天培地のそれぞれで30°C
で3日間培養した。1. At 30°C for both the liquid broth medium and agar agar medium.
The cells were cultured for 3 days.
■ 通常は、短桿菌 幅0.5〜0.8I!m 長さ
1〜3廁。■型の分裂細胞が認められる。■ Normally short rod width 0.5-0.8I! m length 1~3 yuan. ■ type of dividing cells are observed.
■ 運動性 なし。■ Motility None.
■ 胞子の有無 生産されない。■ Presence or absence of spores Not produced.
■ ダラム染色 陽性。■ Durham staining positive.
■ 抗酸性 陽性。■ Anti-acidity positive.
2、次の各培地における生育状態
(特に断らなければ37°Cで3日間の培養)■ 肉汁
寒天平板培地
中程度の生育を示す。2. Growth status in each of the following media (cultured at 37°C for 3 days unless otherwise specified) ■ Medium growth on broth agar plate medium.
コロニーの形態および性状: 外形−円形、大きさ一2〜3+r++n。Colony morphology and properties: External shape - circular, size 12-3+r++n.
隆起−半球形、構造−均質、表面−粗面。Ridges - hemispherical, structure - homogeneous, surface - rough.
辺縁−波状9色−黄白色で光沢なし。Margin: Wavy 9 colors: Yellowish white, no gloss.
透明度−不透明、硬度−バター質。Transparency - opaque, hardness - buttery.
■ メタノール含有寒天平板培地 肉汁寒天平板培地におけると同じ。■ Methanol-containing agar plate medium Same as in broth agar plates.
■ 肉汁寒天斜面培地 接種線に一様に旺盛に生育する。■ Broth agar slant medium Grows vigorously and uniformly along the inoculation line.
コロニーの形態および性状: 隆起−中程度1表面−粗面1辺縁−波状。Colony morphology and properties: Ridges - Moderate 1 Surface - Rough 1 Margin - Wavy.
色−黄白色で光沢なし、透明度−不透明。Color: Yellow-white, non-glossy; Transparency: Opaque.
硬度−バター質。Hardness - buttery.
■ メタノール含有寒天斜面培地 肉汁寒天斜面培地におけると同じ。■ Methanol-containing agar slant medium Same as in broth agar slants.
■ 肉汁液体培地
白クリーム色の閉環を形成する。また、皮膜を形成する
。■ Gravy liquid medium forms a white cream-colored closed ring. It also forms a film.
■ ペプトン水液体培地 肉汁液体培地におけると同じ。■ Peptone water liquid medium Same as in broth liquid medium.
■ メタノール含有液体培地
旺盛に生育する。白クリーム色の閉環を形成する。また
、皮膜を形成する。■ Grows vigorously in liquid medium containing methanol. Forms a white cream-colored closed ring. It also forms a film.
■ 肉汁ゼラチン穿刺培養 20°Cで4週間培養。■ Meat juice gelatin puncture culture Cultured at 20°C for 4 weeks.
生育する。しかし、ゼラチンを液化しない。Grow. However, it does not liquefy gelatin.
■ リドマスミルク 37°Cで4週間培養。■ Ridmus milk Cultured at 37°C for 4 weeks.
生育し、培養液はアルカリ性に変化(pl+ 6.8→
pl+ 6.8)するが、ペプトン化しない。The culture medium grows alkaline (pl+ 6.8 →
pl+ 6.8) but without peptonization.
[相] 1χ小川培地 旺盛に生育する。コロニーの性状はスムースである。[Phase] 1χ Ogawa medium Grows vigorously. The colony is smooth in appearance.
■ HA培地(塩酸ヒドロキシルアミン500躍/mβ
添加1χ小川培地)
37°Cで5日間培養。■ HA medium (hydroxylamine hydrochloride 500 parts/mβ
Supplemented with 1χ Ogawa medium) Cultured at 37°C for 5 days.
P−23、P−70は旺盛に生育する。P-23 and P-70 grow vigorously.
TH−30,TH−35は弱く生育する。TH-30 and TH-35 grow weakly.
@ PAS培地(バラアミノサリチル酸ナトリウム2
mg / ml添加1χ小川培地)37°Cで7日間
培養。@ PAS medium (sodium aminosalicylate 2
1χ Ogawa medium supplemented with mg/ml) and cultured at 37°C for 7 days.
旺盛に生育し、培地が黒変する。It grows vigorously and the medium turns black.
ただし、P−23のみは、培地を黒変させない。However, only P-23 does not turn the medium black.
■ ピクリン酸培地(0,2χピクリン酸添加変法5a
uton寒天培地)
37°Cで2週間培養。■ Picric acid medium (modified method 5a with 0.2χ picric acid addition)
Uton agar medium) Cultured at 37°C for 2 weeks.
旺盛に生育し、培地が赤褐色となる。It grows vigorously and the medium turns reddish brown.
ただし、P−23のみは、培地が赤褐色にならない。However, only with P-23, the medium does not turn reddish brown.
@ PNB培地(パラニトロ安息香酸500μg /
ml添加1χ小川培地)
37°Cで7日間培養。@ PNB medium (500 μg paranitrobenzoic acid /
Cultured at 37°C for 7 days (added 1ml Ogawa medium).
旺盛に生育する。Grows vigorously.
■ EB培地(エタンブトール5 H/ ml!添加1
2小川培地)
37°Cで7日間培養。■ EB medium (5 H/ml of ethambutol! added 1
2 Ogawa medium) Cultured at 37°C for 7 days.
旺盛に生育する。Grows vigorously.
3、生理学的性質 ■ 硝酸塩の還元 硝酸塩を亜硝酸塩に還元する。3. Physiological properties ■ Reduction of nitrate Reducing nitrate to nitrite.
■ MRテスト 陰性。■ MR test Negative.
■ vpテスト 陰性。■ VP test Negative.
■ インドールの生成 陰性。■ Indole production Negative.
■ 硫化水素の生成 陽性。■ Production of hydrogen sulfide Positive.
■ でん粉の加水分解 陰性。■ Starch hydrolysis Negative.
■ 窒素源の利用
アンモニウム塩、硝酸塩、尿素およびペプトンを窒素源
としてそれぞれ利用する。■ Use of nitrogen sources Ammonium salts, nitrates, urea and peptone are used as nitrogen sources.
■ 色素の生成 生成しない。■ Pigment generation No generation.
■ ウレアーゼ 陽性。■ Urease positive.
[相] カタラーゼ 陽性。[Phase] Catalase Positive.
■ アンモニアの生成 生成する。■ Production of ammonia Produce.
@ 脱窒反応 陰性。@ Denitrification reaction Negative.
■ オキシダーゼ 陰性。■ Oxidase Negative.
00−Fテスト(ヒユー ライフソン HughLei
fson法による) 陰性。00-F Test (HughLei
fson method) Negative.
■ 生育の範囲
pH5〜9の範囲で生育する。pH6〜8の範囲が好ま
しい。■Growth range: Grows in a pH range of 5 to 9. A pH range of 6 to 8 is preferred.
温度5°C143°Cでは生育しない。温度lO〜40
”Cが好ましい。It does not grow at temperatures of 5°C and 143°C. Temperature lO~40
"C is preferred.
■ 酸素に対する態度 好気性。■ Attitude towards oxygen Aerobic.
@ it、[の資化性ならびに酸の生成(a) f1
化性
(b)酸の生成
+(w) :弱いが生成する。@it, assimilation and acid production (a) f1
(b) Acid production + (w): It is weak, but it is produced.
■ Il!頻以外の炭素源の資化性 B :培交敢が黒変する。■ Il! Assimilation of carbon sources other than carbon B: Peijiaoyan turns black.
■ 耐塩性 3wtχNacl含有培地で旺盛に生育する。■ Salt resistance Grows vigorously in a medium containing 3wtχNacl.
6wL% NaCl含有培地では旺盛に生育しない。It does not grow vigorously in a medium containing 6wL% NaCl.
[相] ビタミン要求性 ビタミンを絶対的に要求しない。[Phase] Vitamin requirement Absolutely does not require vitamins.
■ 光発色試験 陰性。■ Photochromic test Negative.
■ 暗発色試験 陰性。■ Dark color test Negative.
@ ツイーン80水解試験 P−23,P−10陰性。@ Tween 80 hydrolysis test P-23, P-10 negative.
Tl1−30 、 Tl−35弱陽性。Tl1-30, Tl-35 slightly positive.
[相] ミコール酸の含有 陽性。[Phase] Contains mycolic acid. Positive.
@GC(グアニン+シトシン)金遣
P−2367,2molχ
r’−70 、 67.2molχ
Tit−3066,0mol!
Tl−3566’、 4molX
@ 主要な菌体脂肪酸組成
直鎮脂肪酸 C36,。@GC (guanine + cytosine) money P-2367, 2 molχ r'-70, 67.2 molχ
Tit-3066,0mol! Tl-3566', 4 molX @ Major bacterial fatty acid composition Direct fatty acid C36.
モノ不飽和脂肪酸 Cl6:IIcI□110メ
チル脂肪酸 IQ−methyl C+q+。Monounsaturated fatty acid Cl6: IIcI□110 Methyl fatty acid IQ-methyl C+q+.
0 キノン・タイプ メナキノンMK−9(H
□)[相] 細胞壁の構造
meso−ジアミノピメリン酸を含有する。0 Quinone type Menaquinone MK-9 (H
□) [Phase] Contains cell wall structure meso-diaminopimelic acid.
@ 分離源 土壌。@ Separation source Soil.
「バーシーズ マニュアル オプ システマティック
バクテリオロジーじBergey’s Manual
ofSystematic Bacteriology
’″第2巻1編集者 スニース(Sneath)、マイ
アー(Maxr)、シャープ(Sharpe)およびホ
Jレト(float) ’ウィIJアムズ アンドウ
ィルキンス(Williams & Wilkins)
社、 (1986) )によると、これらの菌株は、桿
菌であり、運動性がなく、ダラム陽性であり、抗酸性で
あり、ミコール酸を含有し、好気的であるところから、
ミコバクテリウム属に属する細菌であると判断した。``Birshi's Manual Op Systematic''
Bacteriology Bergey's Manual
of Systematic Bacteriology
'''Volume 2 1 Editor Sneath, Maxr, Sharpe and float 'Williams & Wilkins
(1986)), these strains are bacilli, non-motile, Durham positive, acid-fast, contain mycolic acid, and are aerobic.
It was determined that the bacteria belonged to the genus Mycobacterium.
このことは、さらに、GC含量、菌体脂肪酸組成、キノ
ン・タイプおよび細胞壁の構造などの諸点からも支持さ
れる。This is further supported by various aspects such as GC content, cell fatty acid composition, quinone type, and cell wall structure.
さらに、これらの菌株は、本発明者の1人のなした発明
に基づいてなされた特許出願(特願昭6l−15156
5)に開示されたミコバクテリウム メタノリカと酷似
しており、ミコバクテリウム メタノリカと同定された
。Furthermore, these strains have been disclosed in a patent application (Japanese Patent Application No. 61-15156) based on the invention made by one of the present inventors.
It is very similar to Mycobacterium methanolica disclosed in 5) and was identified as Mycobacterium methanolica.
本発明において、菌学的性質を調べるための実験方法は
、「バージイズ マニュアル オプ システマテインク
バクテリオロジーじBergey’ sManual
of 5yste+++atic Bacterio
logy″第1巻編集者 クリーブ(Krieg)およ
びボルト(Holt):嘗シイリアムズ アンド ゥィ
ルキンス (Williams& Wilkins)社
、(1984)) J 、前記の「バーシーズ マニュ
アル オプ システマティック バクテリオロジー’B
ergey’s Manual of Systema
tic Bact−eriology’第2巻」、医科
学研究所学友会編「細菌学実習提要J (1958)お
よび長谷用 弐治 曙著「微生物の分類と同定J (1
975)に準拠した。In the present invention, the experimental method for investigating mycological properties is described in Bergey's Manual of Bacteriology.
of 5yste+++atic Bacterio
Krieg and Holt (1984)) J, 'Birshi's Manual of Systematic Bacteriology'
ergey's Manual of Systema
tic Bact-eriology' Volume 2'', edited by the Institute of Medical Science Alumni Association, ``Bacteriology Practical Summary J (1958),'' and ``Classification and Identification of Microorganisms J'' (1958) by Niji Akebono Hase.
975).
メタノール含有寒天平板培地およびメタノール含有寒天
斜面培地は次の如くにして調製された。A methanol-containing agar plate medium and a methanol-containing agar slant medium were prepared as follows.
すなわち、(NH4)2S043g、 KIl、r’0
41.4g、 Nazllr’Oa2.1g、 MgS
O4’711□00.2g+ CaC1z’2tLzO
30mg。That is, (NH4)2S043g, KIl, r'0
41.4g, Nazllr'Oa2.1g, MgS
O4'711□00.2g+ CaC1z'2tLzO
30mg.
FeC6H507’XIIzO30mg、 MnCl2
’4Hz05mg、 ZnSO4°7+1.05mg、
CuSO4・5HzO0,51ngおよび酵母エキス
0.2gを水12に溶解し、pl+を7.1に調整した
後、さらに寒天15g/7を添加し、これを加温溶解し
た後、これにメタノール8g/!を添加し、次いで、1
kg / ci Gで20分間殺菌した。FeC6H507'XIIzO30mg, MnCl2
'4Hz05mg, ZnSO4°7+1.05mg,
After dissolving 0.51 ng of CuSO4・5HzO and 0.2 g of yeast extract in 12 parts of water and adjusting pl+ to 7.1, 15 g/7 of agar was further added, and this was dissolved by heating, followed by 8 g/7 of methanol. ! and then 1
Sterilized at kg/ci G for 20 minutes.
メタノール含有液体培地としては、前記のメタノール含
有寒天平板培地およびメタノール含有寒天斜面培地の組
成において、寒天を添加しない培地を用いた。As the methanol-containing liquid medium, a medium with the same composition as the methanol-containing agar plate medium and the methanol-containing agar slant medium without adding agar was used.
また、モノメチルアミン含有寒天平板培地およびモノメ
チルアミン含有寒天斜面培地は次の如くにして調製され
た。すなわち、(NH4) 2S043 g 。Furthermore, a monomethylamine-containing agar plate medium and a monomethylamine-containing agar slant medium were prepared as follows. That is, (NH4) 2S043 g.
KIIZPO41,4g、 NaztlPO42,1g
+ MgSO4’7Hz00.2gt CaC1z’2
tLzO30mg、 FeC6H5O,°X1(zo
30mg、 MnC1z’4tlzO5mg1ZnSO
i°7H205mg、 CuSO4’5Hz00.5m
g。KIIZPO41.4g, NaztlPO42.1g
+ MgSO4'7Hz00.2gt CaC1z'2
tLzO30mg, FeC6H5O, °X1(zo
30mg, MnC1z'4tlzO5mg1ZnSO
i°7H205mg, CuSO4'5Hz00.5m
g.
酵母エキス0.2gおよびモノメチルアミン塩酸塩5g
を純水llに溶解し、pHを7.1に調整したのちに、
さらに寒天15g/lを添加し、これを加温溶解して、
1kg/c+flGで20分間殺菌した。Yeast extract 0.2g and monomethylamine hydrochloride 5g
After dissolving in 1 liter of pure water and adjusting the pH to 7.1,
Furthermore, 15 g/l of agar was added and dissolved by heating.
It was sterilized with 1 kg/c+flG for 20 minutes.
モノメチルアミン含有液体培地としては、前記のモノメ
チルアミン含有寒天斜面培地およびモノメチルアミン含
有寒天斜面培地の組成において、寒天を添加しない培地
を用いた。As the monomethylamine-containing liquid medium, a medium with the composition of the monomethylamine-containing agar slant medium and the monomethylamine-containing agar slant medium without adding agar was used.
なお、ジメチルアミンを含有する水溶液は、アルカリ性
であるため、細菌がジメチルアミンを効率よく資化2分
解するためには、この水溶液のpHを、たとえば、塩酸
および硫酸のような酸性物質によってほぼ中性にするこ
とが好ましい。この水溶液のpl+を中性に調整するこ
とにより、ジメチルアミンは、たとえば、ジメチルアミ
ン塩酸塩およびジメチルアミン硫酸塩のようなジメチル
アミン塩に変化せしめられ、細菌によって一層資化1分
解され易くなるために、この水溶液中のジメチルアミン
が一層容易に除去されるものと推察される。Note that an aqueous solution containing dimethylamine is alkaline, so in order for bacteria to efficiently assimilate and decompose dimethylamine, the pH of this aqueous solution must be adjusted to approximately neutral level using an acidic substance such as hydrochloric acid or sulfuric acid. It is preferable to make it a gender. By adjusting the PL+ of this aqueous solution to neutrality, dimethylamine is changed into dimethylamine salts such as dimethylamine hydrochloride and dimethylamine sulfate, and is more easily assimilated and decomposed by bacteria. It is presumed that dimethylamine in this aqueous solution is more easily removed.
ジメチルアミン類を含有する液(以下 被処理液 と記
すこともある)を無害化するためには、被処理液に各種
の栄養成分を添加して、これを培地として、前記の各属
に属し、ジメチルアミン類を資化1分解し得る細菌(以
下 本細菌 と記す)を培養するとの方法がある。In order to detoxify a liquid containing dimethylamines (hereinafter sometimes referred to as the liquid to be treated), various nutritional components are added to the liquid to be treated, and this is used as a culture medium to treat liquids belonging to the above-mentioned genera. There is a method of culturing bacteria (hereinafter referred to as "the bacteria") that can assimilate and decompose dimethylamines.
すなわち、被処理液に添加される栄養成分は、使用され
る本細菌が資化し得る物質であればよく、特に制限はな
く、炭素源、窒素源、無機成分およびその他の成分があ
る。That is, the nutritional components added to the liquid to be treated are not particularly limited as long as they can be assimilated by the bacteria used, and include carbon sources, nitrogen sources, inorganic components, and other components.
炭素源としては、被処理液中のジメチルアミン類のみで
もよいが、使用される本細菌が責化し得る他の炭素源−
たとえば、グルコース、フラクトースおよびガラクトー
スなどのtin、D−ソルビトールおよびD−マンニト
ールなどの糖アルコール類ならびにモノメチルアミンな
どのアルキルアミン類などを併用することもできる。Dimethylamines alone in the liquid to be treated may be used as the carbon source, but other carbon sources that can be used by the present bacteria may also be used.
For example, tin such as glucose, fructose and galactose, sugar alcohols such as D-sorbitol and D-mannitol, and alkylamines such as monomethylamine can also be used in combination.
窒素源としては、たとえば、アンモニウム塩および硝酸
塩などの無機窒素化合物および/またはたとえば、尿素
、コーン・ステイープ・リカー、カゼイン、ペプトンお
よび肉エキスなどの有機窒素含有物が用いられる。As nitrogen sources, use is made of inorganic nitrogen compounds, such as, for example, ammonium salts and nitrates, and/or organic nitrogen-containing substances, such as, for example, urea, corn steep liquor, casein, peptone and meat extract.
なお、ジメチルアミン類は、窒素化合物であるので、他
の窒素源を特に添加しな(でも、本細菌はいずれも充分
に生育、増殖し、ジメチンチルアミン類を資化2分解す
ることができる。Note that dimethylamines are nitrogen compounds, so no other nitrogen sources are added (but these bacteria can grow and proliferate sufficiently and are able to assimilate and decompose dimethynthylamines). .
また、無機成分としては、たとえば、カルシウム塩、マ
グネシウム塩、カリウム塩、ナトリウム塩、りん酸塩、
マンガン塩、亜鉛塩、鉄塩、銅塩、モリブデン塩、コバ
ルト塩、はう素化合物およびよう素化合物などが用いら
れる。In addition, examples of inorganic components include calcium salts, magnesium salts, potassium salts, sodium salts, phosphates,
Manganese salts, zinc salts, iron salts, copper salts, molybdenum salts, cobalt salts, boromine compounds, iodine compounds, and the like are used.
さらにビタミンなどの栄養物質を要求する菌株を使用す
る場合には、その菌株が要求する栄養物質を添加する。Furthermore, when using a bacterial strain that requires nutritional substances such as vitamins, the nutritional substances required by the strain are added.
被処理液中のジメチルアミン類の濃度は、使用された本
細菌が資化2分解できるような濃度であればよく、特に
制限はないが、通常は、ジメチルアミンとして1wt%
以下が好ましく 、0.5wtX以下が特に好ましい。The concentration of dimethylamines in the liquid to be treated is not particularly limited as long as it can be assimilated and decomposed by the bacteria used, but it is usually 1 wt% as dimethylamine.
The following is preferable, and 0.5wtX or less is particularly preferable.
ミコバクテリウム メタノリカに属する菌株のなかには
、ジメチルアミン類に対する耐性が特に大きい菌株が存
在するが、このような菌株を使用する場合には、被処理
液中のジメチルアミン類の濃度の上限は、ジメチルアミ
ンとして2w tZ程度であってもよい。Among the strains belonging to Mycobacterium methanolica, there are strains that are particularly resistant to dimethylamines, but when using such strains, the upper limit of the concentration of dimethylamines in the liquid to be treated should be The amine may be about 2wtZ.
培養条件は、使用される細菌が生育、増殖できる条件で
あればよいが、一般には、たとえば、温度は5〜45°
C1好ましくは、10〜40°Cとされ、pHは6〜8
、好ましくは、6.5〜7.5とされる。The culture conditions may be any conditions that allow the bacteria used to grow and multiply, but generally the temperature is, for example, 5 to 45 degrees.
C1 Preferably, the temperature is 10-40°C, and the pH is 6-8
, preferably 6.5 to 7.5.
このような条件で好気的に培養を行なう。Culture is carried out aerobically under these conditions.
また、培養液の溶存酸素濃度は、本細菌が生育。In addition, the dissolved oxygen concentration of the culture solution is low enough for this bacterium to grow.
増殖できるような溶存酸素濃度であればよく、特に制限
はないが、通常は、0.5〜20ppm程度が好ましい
。このような溶存酸素濃度とするためには、通気ガス量
を調節したり、撹拌したり、通気ガスとして酸素ガスま
たは酸素と空気との混合ガスを使用したり、また、培養
槽内の圧力を高めるなどの手段が採用される。There is no particular restriction on the dissolved oxygen concentration as long as it allows proliferation, but usually about 0.5 to 20 ppm is preferable. In order to achieve such a dissolved oxygen concentration, it is necessary to adjust the amount of aeration gas, stir it, use oxygen gas or a mixed gas of oxygen and air as the aeration gas, and adjust the pressure inside the culture tank. Measures such as increasing the
本細菌の生育、増殖が比較的悪くなり、ジメチルアミン
類除去9分解の効率が相対的に低下するが、これらの条
件をはずして培養することを妨げない。Although the growth and proliferation of this bacterium will be relatively poor and the efficiency of dimethylamine removal and decomposition will be relatively reduced, this does not preclude culturing under these conditions.
また、培養方式は、回分培養、連続培養または半連続培
養のいずれでもよい。Furthermore, the culture method may be batch culture, continuous culture, or semi-continuous culture.
窒素源として、アンモニウム塩またはアルキルアミン塩
を使用した場合には、培養期間中に、アンモニアが菌体
生産のために消費されて培養液のpl+が低下する。こ
の場合には、培養液のpl+を所定の値に保つために、
アンモニア、苛性カリおよび苛性ソーダなどのアルカリ
を添加するが、アンモニアを添加することが好ましい。When an ammonium salt or an alkylamine salt is used as a nitrogen source, ammonia is consumed for bacterial cell production during the culture period, resulting in a decrease in pl+ of the culture solution. In this case, in order to maintain the pl+ of the culture solution at a predetermined value,
Alkali such as ammonia, caustic potash and caustic soda are added, preferably ammonia.
前記のような被処理液を培地として本細菌を培養するこ
とにより、この被処理液を無害化するとの方法の他に、
予め培養された本細菌の菌体ならびに本細菌の菌体処理
物−たとえば、本細菌の菌体を含有する培養液、本細菌
の菌体の破砕物および本細菌の菌体を合成樹脂などで固
定化した固定化菌体−(これらを総称して、以下 菌体
類 と記することもある)などを被処理液に接触させる
こともできる。In addition to the method of making the liquid to be treated harmless by culturing the bacteria using the liquid to be treated as a medium as described above,
Pre-cultured cells of this bacterium and processed materials of this bacterium - for example, culture solution containing cells of this bacterium, crushed cells of this bacterium, and cells of this bacterium are prepared using synthetic resin, etc. Immobilized microbial cells (hereinafter sometimes referred to as "microbial cells") can also be brought into contact with the liquid to be treated.
たとえば、(イ)菌体類を被処理液に添加する(口)前
記の菌体、培養液および菌体の破砕物などが混入された
活性汚泥と被処理液とを接触させるおよび(ハ)固定化
菌体が充填されたカラム中を被処理液を通過させるなど
の方法がある。For example, (a) adding microbial cells to the liquid to be treated; (c) bringing the liquid to be treated into contact with activated sludge mixed with the bacterial cells, culture solution, and crushed bacterial cells; and (c) There are methods such as passing the liquid to be treated through a column filled with immobilized bacterial cells.
なお、ジメチルアミン類を含有している排液には、他の
物質も含有している場合が多いので、このような排液の
処理には、他の物質を分解し得る菌株を本細菌とともに
併用することができ、かつ、好ましい。In addition, since wastewater containing dimethylamines often also contains other substances, when treating such wastewater, a strain of bacteria that can decompose other substances should be used together with this bacterium. They can be used together and are preferred.
処理終了後、被処理液中のジメチルアミンの濃度が許容
濃度以下になった処理済の液は、そのまま、または、必
要に応じて菌体および/または菌体処理物を除去した後
、放流される。After the treatment is completed, the treated liquid in which the concentration of dimethylamine in the liquid to be treated has become below the permissible concentration may be discharged as is or after removing the bacterial cells and/or the bacterial treated material as necessary. Ru.
〔実施例]
実施例によって、本発明をさらに具体的に説明する。な
お、本発明は、実施例に限定されるものではない。[Example] The present invention will be explained in more detail with reference to Examples. Note that the present invention is not limited to the examples.
実施例1
純水1j2あたり、ffH4) zsO43g 、KH
暑PO4t、4g+NaJPO42,1g9MgSO4
’7HgO0,2g 、 CaC1z’2tlzO30
mg + FeCbHs(JroにH,030mg、
MnC1z’4Hz05mg、 Zn5Q4”711z
05mg、 Cu5Oa’511tOO,5■、酵母エ
キス0.2gおよびジメチルアミン塩酸塩2.8gを添
加しpi!7.1に調整した培地に、種々の菌株を接種
し、30°Cで14日間培養を行なって、各菌株につい
てジメチルアミン類の資化性を調べた。結果を第1表に
示す。Example 1 Per 1j2 of pure water, ffH4) zsO43g, KH
Hot PO4t, 4g+NaJPO42, 1g9MgSO4
'7HgO0,2g, CaC1z'2tlzO30
mg + FeCbHs (H, 030 mg to Jro,
MnC1z'4Hz05mg, Zn5Q4"711z
05mg, Cu5Oa'511tOO, 5■, yeast extract 0.2g and dimethylamine hydrochloride 2.8g were added pi! Various strains were inoculated into a medium adjusted to 7.1, cultured at 30°C for 14 days, and the ability of each strain to assimilate dimethylamines was examined. The results are shown in Table 1.
第1表に示すように、各菌株は、いずれもジメチルアミ
ン塩酸塩を資化1分解した。(以下余白)第1表(その
1)
第1表(その2)
第1表(その3)
実施例2
純水11あたり、(NHs)zsO43g、 KHzP
o、 1.4g。As shown in Table 1, each strain assimilated and degraded dimethylamine hydrochloride. (Margin below) Table 1 (Part 1) Table 1 (Part 2) Table 1 (Part 3) Example 2 Per 11 pure water, (NHs)zsO43g, KHzP
o, 1.4g.
NazHPO42,1g 1MgSO4・711zOO
,2g 、 CaC1z・2HJ30mg、 PeCJ
507・XH2O30mg、 MnC1z’4Hz05
mg、 Zn5On。NazHPO42,1g 1MgSO4・711zOO
,2g, CaC1z・2HJ30mg, PeCJ
507・XH2O30mg, MnC1z'4Hz05
mg, Zn5On.
IHzo 5mg、 CuSO4’5HzOo、smg
および酵母エキス0.2gを添加し、pH7,1に調整
された培地を基礎培地とし、これに、10wtχジメチ
ルジメチルアミン濃度を添加してpH7,0に調整され
た液を、ジメチルアミン濃度が0.15wLX、 0.
3wtχ、 0.5wtX、 1wtL1.5wtχ、
2wjχ、 3wtχおよび5匈tχとなるように添
加して、培地を作成した。これらの培地のそれぞれに、
各菌株を接種して、30°Cで7日間培養した。IHzo 5mg, CuSO4'5HzOo, smg
A medium containing 0.2 g of yeast extract and adjusted to pH 7.1 was used as a basal medium, and a solution adjusted to pH 7.0 by adding 10 wt χ dimethyldimethylamine concentration was used as a basal medium, and a dimethylamine concentration of 0. .15wLX, 0.
3wtχ, 0.5wtX, 1wtL1.5wtχ,
A medium was prepared by adding 2wjχ, 3wtχ and 5wtχ. For each of these media,
Each strain was inoculated and cultured at 30°C for 7 days.
結果を第2表に示す。この結果によれば、プロトモナス
エクストロクエンスは、ジメチルアミン濃度1.0i
vt%以下で、また、シュードモナスアミノボランスお
よびアースロバタター グロビホルミスは、ともに、ジ
メチルアミン濃度0.5wL2以下でジメチルアミン類
を資化1分解した。The results are shown in Table 2. According to this result, Protomonas extroquens has a dimethylamine concentration of 1.0 i
vt% or less, and both Pseudomonas aminovorans and Arthrobata globiformis assimilated and decomposed dimethylamines at a dimethylamine concentration of 0.5 wL2 or less.
また、ミコバクテリウム メクノリ力に属する4菌株は
、ジメチルアミン濃度3wtχでもジメチルアミン類を
資化1分解した。特に2wt%以下では旺盛に資化9分
解した。 (以下余白)第2表(その1)
第2表(その2)
実施例3
純水11あたり、(NI+4) zsOa 3 g 、
KH2PO41,4g 。In addition, four strains belonging to Mycobacterium mekunorichi assimilated and degraded dimethylamines even at a dimethylamine concentration of 3wtχ. Particularly, when it was less than 2 wt%, it was actively assimilated and degraded. (Margin below) Table 2 (Part 1) Table 2 (Part 2) Example 3 Per 11 pure water, (NI+4) zsOa 3 g,
KH2PO41.4g.
NazHPOa 2.1 g 、 Mg5Oa°7)1
zo 0.2 g 、 CaC1z’ 211z030
mg、 FeCa1lsO7・XHzO30mg、 M
nC1z’4Hz05mL ZIISO4’7Hz05
mg+ CLISO4°5H200,5mg、酵母エキ
ス0.2gおよび10−tχジメチルアミン水溶液に塩
酸を添加してpH7,0に調整された液50m1を添加
して、ptt’y、iに調整された培地200mNを1
!容三角フラスコに入れ、120°Cで20分間殺菌し
た。NazHPOa 2.1 g, Mg5Oa°7)1
zo 0.2 g, CaC1z' 211z030
mg, FeCa1lsO7・XHzO30mg, M
nC1z'4Hz05mL ZIISO4'7Hz05
200 mN of medium adjusted to ptt'y, i by adding 50 ml of a solution adjusted to pH 7.0 by adding hydrochloric acid to a 10-tχ dimethylamine aqueous solution, 200.5 mg of CLISO4°5H, 0.2 g of yeast extract, and 10-tχ dimethylamine aqueous solution. 1
! The mixture was placed in an Erlenmeyer flask and sterilized at 120°C for 20 minutes.
この培地に、前記と同様な培地で予め培養して得られた
ミコバクテリウム メタノリカT11−30の前培養液
(菌体濃度 OD610.、−2.0)を1volχと
なるように接種して、30°Cで40時間培養し、得ら
れた培養液の菌体濃度(OD、、。、、、として表示)
および培養液のpnは、それぞれ、5.8.および5.
1であった。また、培養上澄液中にはジメチルアミン類
は検出されなかった。Into this medium, a pre-culture solution of Mycobacterium methanolica T11-30 (bacterial cell concentration OD610., -2.0) obtained by culturing in advance in the same medium as above was inoculated to 1 volχ. Cultured at 30°C for 40 hours, resulting in bacterial cell concentration (expressed as OD,...)
and the pn of the culture solution are 5.8. and 5.
It was 1. Furthermore, no dimethylamines were detected in the culture supernatant.
なお、世代時間は、約4.5時間であった。Note that the generation time was approximately 4.5 hours.
実施例4
ジメチルアミンを1wtχ含有し、pH12,2の工場
排液に、実施例3における基礎培地の組成から(NI+
4) zsOaを除いた培地組成となるように栄養成分
を添加し、さらにpH7,0に調整した液に、実施例3
と同様な培地で予め培養して得られた前培養液から分離
されたミコバクテリウム メタノリカTl+−30の菌
体1gを懸濁させて、通気および撹拌しながら、培養液
のpHおよび液温を、それぞれ、7.0および30°C
に保った。Example 4 From the composition of the basal medium in Example 3, (NI +
4) Example 3 was added to the solution, which had been adjusted to pH 7.0 by adding nutritional components so as to have a medium composition excluding zsOa.
1 g of Mycobacterium methanolica Tl+-30 cells isolated from a preculture solution obtained by culturing in a medium similar to the above was suspended, and the pH and temperature of the culture solution were adjusted while aerating and stirring. , 7.0 and 30°C, respectively
I kept it.
この工場排液中のジメチルアミン類が検出されなくなる
までには約20時間要した。It took about 20 hours until dimethylamines were no longer detected in the factory effluent.
なお、前記の各実施例において、液中のジメチルアミン
の分析は、東洋聾達(Toyo 5oda)イオンクロ
マトグラフィーで行なった。In each of the above Examples, dimethylamine in the liquid was analyzed using Toyo 5oda ion chromatography.
ポンプ: Toyo 5oda CCPD検出器: T
oyo 5oda CM−8000カラム: TSKg
el IC−Cation (Toyo 5oda)〔
発明の効果〕
本発明により、安定で分解され難く、有害な物質である
ジメチルアミン類を効率よく分解、除去することが可能
となり、以て、ジメチルアミン類を含有する有害な排液
を効率よく無害化することができ、環境衛生保全上の価
値は極めて高い。Pump: Toyo 5oda CCPD detector: T
oyo 5oda CM-8000 column: TSKg
el IC-Cation (Toyo 5oda)
[Effects of the Invention] The present invention makes it possible to efficiently decompose and remove dimethylamines, which are stable, difficult to decompose, and harmful substances, and thereby efficiently remove harmful wastewater containing dimethylamines. It can be rendered harmless and has extremely high value in terms of preserving environmental health.
特許出願人 三菱瓦斯化学株式会社 代表者長野 和書Patent applicant: Mitsubishi Gas Chemical Co., Ltd. Representative Nagano Japanese book
Claims (1)
する液と、メチロバチルス属、プロトモナス属、メチロ
ファーガ属、シュードモナス属、アースロバクター属お
よびミコバクテリウム属のいずれかの属に属し、ジメチ
ルアミンおよび/またはジメチルアミン塩を資化、分解
し得る細菌の菌体および/または該細菌の菌体処理物と
を接触させて、該液中のジメチルアミンおよび/または
ジメチルアミン塩を分解、除去することを特徴とするジ
メチルアミン類の除去方法。A liquid containing dimethylamine and/or a dimethylamine salt, belonging to any of the genera Methylobacillus, Protomonas, Methylophaga, Pseudomonas, Arthrobacter and Mycobacterium, and dimethylamine and/or dimethylamine. Dimethylamine and/or dimethylamine salts in the liquid are decomposed and removed by contacting with bacterial cells that can assimilate and decompose salts and/or a bacterial cell-treated product of the bacteria. How to remove dimethylamines.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP27326187A JPH01115499A (en) | 1987-10-30 | 1987-10-30 | Method for removing dimethyl amines |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP27326187A JPH01115499A (en) | 1987-10-30 | 1987-10-30 | Method for removing dimethyl amines |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPH01115499A true JPH01115499A (en) | 1989-05-08 |
Family
ID=17525363
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP27326187A Pending JPH01115499A (en) | 1987-10-30 | 1987-10-30 | Method for removing dimethyl amines |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JPH01115499A (en) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN106976963A (en) * | 2017-04-05 | 2017-07-25 | 新宇药业股份有限公司 | Black Liquor with Efficient Bacteria strengthens the biochemical processing method of dimethylamine waste water |
-
1987
- 1987-10-30 JP JP27326187A patent/JPH01115499A/en active Pending
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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CN106976963A (en) * | 2017-04-05 | 2017-07-25 | 新宇药业股份有限公司 | Black Liquor with Efficient Bacteria strengthens the biochemical processing method of dimethylamine waste water |
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