JP7841766B2 - オタネニンジン抽出物のフィルム剤の製造における使用、オタネニンジン口腔フィルム剤およびその製造方法と使用 - Google Patents
オタネニンジン抽出物のフィルム剤の製造における使用、オタネニンジン口腔フィルム剤およびその製造方法と使用Info
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Description
本発明は、漢方薬の技術分野に属し、具体的には、オタネニンジン抽出物のフィルム剤の製造における使用、オタネニンジン口腔フィルム剤およびその製造方法と使用に関する。
オタネニンジン（Ｐａｎａｘ ｇｉｎｓｅｎｇ Ｃ．Ａ．Ｍｅｙ．）は、ウコギ科・多年生植物であり、記憶力減退および空間認知能力の改善、ならびに抗がんおよび抗糖尿病性活性を含む様々な有益な効果を有することが知られており、その機能的利益には、肝機能の改善、血圧や血糖の調節、および抗酸化活性の提供も含まれる。オタネニンジンには、ジンセノサイド、酸性多糖類、フラボン類、有機酸類、ポリアセチレン、アルカロイド、フェノール類化合物等の様々な成分が含まれる。ここで、Ｒｇ１、Ｒｂ１、Ｒｅ、Ｒｇ３、Ｒｈ２等のジンセノサイドは、オタネニンジンの主な薬理活性成分であり、そのうち、Ｒｇ１はより多くの生物活性を有しており、広く注目されている。
水煎じ法およびエタノール還流抽出法は従来の抽出方法であり、この２種類の抽出方法は操作しやすく、コストが低いという利点を有し、実際の生産過程において、依然として多くの生産企業および研究室で一般的に使用されている抽出方法であるが、現在の抽出プロセスでは、ジンセノサイドＲｇ１の抽出率は不良である。
本発明は、オタネニンジン抽出物のフィルム剤の製造における使用、オタネニンジン口腔フィルム剤およびその製造方法と使用を提供することにあり、本発明が提供する使用において、得られたオタネニンジン抽出物Ｒｇ１の含有量が高い。
上記目的を達成するために、本発明は、以下の技術的解決手段を提供する。
本発明は、オタネニンジン抽出物のフィルム剤の製造における使用を提供し、前記オタネニンジン抽出物の製造方法は、
エタノール水溶液を抽出溶媒とし、オタネニンジンを還流抽出し、前記オタネニンジン抽出物を得るステップを含み、
前記オタネニンジンとエタノール水溶液の質量比が０．５～１：６～８であり、
前記エタノール水溶液におけるエタノールの体積分率が６５～７５％であり、
前記還流抽出の単回抽出時間が０．５～１．５ｈであり、回数が１～３回である。
エタノール水溶液を抽出溶媒とし、オタネニンジンを還流抽出し、前記オタネニンジン抽出物を得るステップを含み、
前記オタネニンジンとエタノール水溶液の質量比が０．５～１：６～８であり、
前記エタノール水溶液におけるエタノールの体積分率が６５～７５％であり、
前記還流抽出の単回抽出時間が０．５～１．５ｈであり、回数が１～３回である。
本発明は、オタネニンジン口腔フィルム剤をさらに提供し、順に積層されている裏打ち層および薬物含有層を含み、
前記薬物含有層は、質量部数で、ヒドロキシプロピルメチルセルロース１０～１２部、カルボマー０．１～１部、オタネニンジン抽出物９～１１部および脂肪酸０．１～０．３部を含み、前記オタネニンジン抽出物は、上記技術的解決手段に記載のオタネニンジン抽出物であり、
前記裏打ち層は、前記ヒドロキシプロピルメチルセルロースの質量部数を基準として、エチルセルロース０．６～０．８部を含む。
前記薬物含有層は、質量部数で、ヒドロキシプロピルメチルセルロース１０～１２部、カルボマー０．１～１部、オタネニンジン抽出物９～１１部および脂肪酸０．１～０．３部を含み、前記オタネニンジン抽出物は、上記技術的解決手段に記載のオタネニンジン抽出物であり、
前記裏打ち層は、前記ヒドロキシプロピルメチルセルロースの質量部数を基準として、エチルセルロース０．６～０．８部を含む。
好ましくは、前記脂肪酸は、カプロン酸、カプリル酸、カプリン酸、ラウリン酸、ステアリン酸、オレイン酸およびリノール酸のうちの１種以上を含む。
本発明は、上記技術的解決手段に記載のオタネニンジン口腔フィルム剤の製造方法をさらに提供し、
エチルセルロース溶液を接着防止容器に順に第１の注入および第１の成形を行い、裏打ち層を得るステップと、
カルボマーを水中で膨潤させ、ヒドロキシプロピルメチルセルロースと第１の混合を行い、第１のフィルム液を得るステップと、
脂肪酸溶液と前記第１のフィルム液との第２の混合を行い、第２のフィルム液を得るステップと、
前記オタネニンジン抽出物と前記第２のフィルム液との第３の混合を行い、薬物含有層フィルム液を得るステップと、
前記薬物含有層フィルム液を裏打ち層に順に第２の注入および第２の成形を行い、前記オタネニンジン口腔フィルム剤を得るステップと、を含む。
エチルセルロース溶液を接着防止容器に順に第１の注入および第１の成形を行い、裏打ち層を得るステップと、
カルボマーを水中で膨潤させ、ヒドロキシプロピルメチルセルロースと第１の混合を行い、第１のフィルム液を得るステップと、
脂肪酸溶液と前記第１のフィルム液との第２の混合を行い、第２のフィルム液を得るステップと、
前記オタネニンジン抽出物と前記第２のフィルム液との第３の混合を行い、薬物含有層フィルム液を得るステップと、
前記薬物含有層フィルム液を裏打ち層に順に第２の注入および第２の成形を行い、前記オタネニンジン口腔フィルム剤を得るステップと、を含む。
好ましくは、前記第１の混合の温度は７０～９０℃である。
好ましくは、前記エチルセルロース溶液の密度は０．７～０．９ｇ／ｃｍ３であり、
前記薬物含有層フィルム液の密度は１．３～１．４ｇ／ｃｍ３である。
前記薬物含有層フィルム液の密度は１．３～１．４ｇ／ｃｍ３である。
好ましくは、前記第１の成形の温度は５０～７０℃であり、時間は２０～４０ｍｉｎである。
好ましくは、前記第２の成形の温度は６０～８０℃であり、時間は１～３ｈである。
本発明は、上記技術的解決手段に記載のオタネニンジン口腔フィルム剤の抗がん製剤または抗糖尿病製剤の製造における使用をさらに提供する。
本発明は、上記技術的解決手段に記載のオタネニンジン口腔フィルム剤の血圧調節製剤、血糖調節製剤または抗酸化製剤の製造における使用をさらに提供する。
本発明は、オタネニンジン抽出物のフィルム剤の製造における使用を提供し、前記オタネニンジン抽出物の製造方法は、エタノール水溶液を抽出溶媒とし、オタネニンジンを還流抽出し、前記オタネニンジン抽出物を得るステップを含み、前記オタネニンジンとエタノール水溶液の質量比が０．５～１：６～８であり、前記エタノール水溶液におけるエタノールの体積分率が６５～７５％であり、前記還流抽出の単回抽出時間が０．５～１．５ｈであり、回数が１～３回である。本発明は、エタノール水溶液を抽出溶媒とし、還流抽出によりジンセノサイドＲｇ１を効果的に抽出し、得られたオタネニンジン抽出物中のジンセノサイドＲｇ１の含有量が高くなるように適切なパラメータ範囲を限定することにより、原料コストを削減し、大量生産に適している。
本発明が提供するオタネニンジン口腔フィルム剤は、皮膚よりもバリア機能の弱い口腔頬粘膜に直接作用し、皮膚角質層のジンセノサイドの浸透に対する阻害作用および初回通過効果を避けることができ、さらにＲｇ１の生物学的利用能を向上させる役割を果たすことができる。同時に、前記オタネニンジン口腔フィルム剤は、滑らかで平らであり、薬物結晶がなく、良好な機械的性能を備え、溶解率が良好であり、服用しやすく、患者のコンプライアンスが良好である。
本発明の実施例または従来技術の技術的解決手段をより明確に説明するために、以下に実施例で使用する必要がある図面を簡単に説明するが、当然ながら、以下に記載する図面は単に本発明の実施例の一部であって、当業者であれば、創造的な労力をすることなく、これらの図面に基づいて他の図面を得ることができる。
本発明は、オタネニンジン抽出物のフィルム剤の製造における使用を提供し、前記オタネニンジン抽出物の製造方法は、
エタノール水溶液を抽出溶媒とし、オタネニンジンを還流抽出し、前記オタネニンジン抽出物を得るステップを含み、
前記オタネニンジンとエタノール水溶液の質量比が０．５～１：６～８であり、
前記エタノール水溶液におけるエタノールの体積分率が６５～７５％であり、
前記還流抽出の単回抽出時間が０．５～１．５ｈであり、回数が１～３回である。
エタノール水溶液を抽出溶媒とし、オタネニンジンを還流抽出し、前記オタネニンジン抽出物を得るステップを含み、
前記オタネニンジンとエタノール水溶液の質量比が０．５～１：６～８であり、
前記エタノール水溶液におけるエタノールの体積分率が６５～７５％であり、
前記還流抽出の単回抽出時間が０．５～１．５ｈであり、回数が１～３回である。
本発明において、特に断りのない限り、前記原料成分はすべて当業者によく知っている市販製品である。
本発明は、エタノール水溶液を抽出溶媒とし、オタネニンジンを還流抽出し、前記オタネニンジン抽出物を得る。
本発明において、前記オタネニンジンとエタノール水溶液の質量比は、０．５～１：６～８、好ましくは１：６～８、より好ましくは１：７～８であり、
前記エタノール水溶液におけるエタノールの体積分率は、６５～７５％、好ましくは６７～７３％、より好ましくは６９～７１％であり、
前記還流抽出の単回抽出時間は、０．５～１．５ｈ、好ましくは０．７～１．３ｈ、より好ましくは０．９～１．１ｈであり、回数は、１～３回、より好ましくは２～３回である。
前記エタノール水溶液におけるエタノールの体積分率は、６５～７５％、好ましくは６７～７３％、より好ましくは６９～７１％であり、
前記還流抽出の単回抽出時間は、０．５～１．５ｈ、好ましくは０．７～１．３ｈ、より好ましくは０．９～１．１ｈであり、回数は、１～３回、より好ましくは２～３回である。
本発明が提供するオタネニンジン抽出物のフィルム剤の製造における使用は、エタノール水溶液を抽出溶媒とし、還流抽出によりジンセノサイドＲｇ１を効果的に抽出し、得られたオタネニンジン抽出物中のジンセノサイドＲｇ１の含有量が高くなるように適切なパラメータ範囲を限定することにより、原料コストを削減し、大量生産に適している。
本発明は、オタネニンジン口腔フィルム剤をさらに提供し、順に積層されている裏打ち層および薬物含有層を含み、
前記薬物含有層は、質量部数で、ヒドロキシプロピルメチルセルロース１０～１２部、カルボマー０．１～１部、オタネニンジン抽出物９～１１部および脂肪酸０．１～０．３部を含み、前記オタネニンジン抽出物は、上記技術的解決手段に記載のオタネニンジン抽出物であり、
前記裏打ち層は、前記ヒドロキシプロピルメチルセルロースの質量部数を基準として、エチルセルロース０．６～０．８部を含む。
前記薬物含有層は、質量部数で、ヒドロキシプロピルメチルセルロース１０～１２部、カルボマー０．１～１部、オタネニンジン抽出物９～１１部および脂肪酸０．１～０．３部を含み、前記オタネニンジン抽出物は、上記技術的解決手段に記載のオタネニンジン抽出物であり、
前記裏打ち層は、前記ヒドロキシプロピルメチルセルロースの質量部数を基準として、エチルセルロース０．６～０．８部を含む。
前記薬物含有層は、質量部数で、ヒドロキシプロピルメチルセルロース１０～１２部、好ましくは１１～１２部を含む。
前記薬物含有層は、前記ヒドロキシプロピルメチルセルロースの質量部数を基準として、カルボマー０．１～１部、好ましくは０．３～０．８部、より好ましくは０．５～０．７部を含む。
前記薬物含有層は、前記ヒドロキシプロピルメチルセルロースの質量部数を基準として、オタネニンジン抽出物９～１１部、好ましくは１０～１１部を含む。
前記薬物含有層は、前記ヒドロキシプロピルメチルセルロースの質量部数を基準として、脂肪酸０．１～０．３部を含み，好ましくは０．２～０．３部である。
本発明において、前記脂肪酸は、カプロン酸、カプリル酸、カプリン酸、ラウリン酸、ステアリン酸、オレイン酸およびリノール酸のうちの１種以上を含むことが好ましく、カプリル酸、カプリン酸、オレイン酸およびリノール酸のうちの１種以上を含むことがより好ましく、カプリン酸を含むことが最も好ましい。前記脂肪酸が上記具体的な選択のうちの２種または２種以上を含む場合、本発明は前記脂肪酸の配合比率を特に限定するものではない。
本発明において、前記薬物含有層の厚さは、好ましくは１．４５～１．５ｍｍ、より好ましくは１．４５～１．４８ｍｍ、最も好ましくは１．４５ｍｍである。
前記裏打ち層は、前記ヒドロキシプロピルメチルセルロースの質量部数を基準として、エチルセルロース０．６～０．８部、好ましくは０．７～０．８部を含む。
本発明において、前記裏打ち層の厚さは、好ましくは０．６～０．８、より好ましくは０．６～０．７ｍｍ、最も好ましくは０．６ｍｍである。
本発明が提供するオタネニンジン口腔フィルム剤は、皮膚よりもバリア機能の弱い口腔頬粘膜に直接作用し、皮膚角質層のジンセノサイドの浸透に対する阻害作用と初回通過効果を避けることができ、さらにＲｇ１の生物学的利用能を向上させる役割を果たすことができる。同時に、前記オタネニンジン口腔フィルム剤は滑らかで平らであり、薬物結晶がなく、良好な機械的性能を備え、溶解率が良好であり、服用しやすく、患者のコンプライアンスが良好である。
本発明は、上記技術的解決手段に記載のオタネニンジン口腔フィルム剤の製造方法をさらに提供し、
エチルセルロース溶液を接着防止容器に順に第１の注入および第１の成形を行い、裏打ち層を得るステップと、
カルボマーを水中で膨潤させ、ヒドロキシプロピルメチルセルロースと第１の混合を行い、第１のフィルム液を得るステップと、
脂肪酸溶液と前記第１のフィルム液との第２の混合を行い、第２のフィルム液を得るステップと、
前記オタネニンジン抽出物と前記第２のフィルム液との第３の混合を行い、薬物含有層フィルム液を得るステップと、
前記薬物含有層フィルム液を裏打ち層に順に第２の注入および第２の成形を行い、前記オタネニンジン口腔フィルム剤を得るステップとを含む。
エチルセルロース溶液を接着防止容器に順に第１の注入および第１の成形を行い、裏打ち層を得るステップと、
カルボマーを水中で膨潤させ、ヒドロキシプロピルメチルセルロースと第１の混合を行い、第１のフィルム液を得るステップと、
脂肪酸溶液と前記第１のフィルム液との第２の混合を行い、第２のフィルム液を得るステップと、
前記オタネニンジン抽出物と前記第２のフィルム液との第３の混合を行い、薬物含有層フィルム液を得るステップと、
前記薬物含有層フィルム液を裏打ち層に順に第２の注入および第２の成形を行い、前記オタネニンジン口腔フィルム剤を得るステップとを含む。
本発明は、エチルセルロース溶液を接着防止容器に順に第１の注入および第１の成形を行い、裏打ち層を得る。
本発明において、前記エチルセルロース溶液の濃度は、好ましくは０．０１～０．０４ｇ／ｍＬ、より好ましくは０．０１５～０．０３５ｇ／ｍＬ、最も好ましくは０．０２～０．０３ｇ／ｍＬであり、前記エチルセルロース溶液の密度は、好ましくは０．７～０．９ｇ／ｃｍ３、より好ましくは０．７５～０．８５ｇ／ｃｍ３、最も好ましくは０．８０～０．８３ｇ／ｃｍ３であり、前記エチルセルロース溶液の溶媒は、好ましくはエタノール、より好ましくは無水エタノールである。
本発明において、前記第１の成形の温度は、好ましくは５０～７０℃、より好ましくは５５～６５℃、最も好ましくは６０～６５℃であり、時間は、好ましくは２０～４０ｍｉｎ、より好ましくは２５～３５ｍｉｎ、最も好ましくは３０～３５ｍｉｎであり、前記第１の成形は、真空乾燥の方式で行うことが好ましい。
本発明は、前記裏打ち層を得た後、カルボマーを水中で膨潤させ、ヒドロキシプロピルメチルセルロースと第１の混合を行い、第１のフィルム液を得る。
本発明において、前記カルボマーと水の質量比は、好ましくは１～４：８０～１３０、より好ましくは１～３：９０～１２０、最も好ましくは１～２：１００～１０３である。
本発明において、前記第１の混合の温度は、好ましくは５０～７０℃、より好ましくは５５～６５℃、最も好ましくは６０～６５℃である。
本発明は、第１のフィルム液を得た後、脂肪酸溶液と前記第１のフィルム液との第２の混合を行い、第２のフィルム液を得る。
本発明において、前記脂肪酸溶液の濃度は、好ましくは０．４～０．５ｇ／ｍＬ、より好ましくは０．４２～０．４８ｇ／ｍＬ、最も好ましくは０．４３～０．４７ｇ／ｍＬであり、前記脂肪酸溶液の溶媒は、好ましくはプロピレングリコールである。
本発明は、前記第２の混合の過程に対していかなる特別な限定もなく、当業者に周知の方式を採用すればよい。
本発明は、前記第２のフィルム液を得た後、前記オタネニンジン抽出物と前記第２のフィルム液との第３の混合を行い、薬物含有層フィルム液を得る。
本発明において、前記薬物含有層フィルム液の密度は、好ましくは１．３～１．４ｇ／ｃｍ３、より好ましくは１．３１～１．３５ｇ／ｃｍ３、最も好ましくは１．３１～１．３２ｇ／ｃｍ３であり、
本発明において、前記第３の混合は室温で行うことが好ましく、本発明は、前記第３の混合の過程に対していかなる特別な限定もなく、当業者に周知の方式を採用すればよい。
本発明において、前記第３の混合は室温で行うことが好ましく、本発明は、前記第３の混合の過程に対していかなる特別な限定もなく、当業者に周知の方式を採用すればよい。
本発明は、薬物含有層フィルム液を得た後、前記薬物含有層フィルム液を裏打ち層に順に第２の注入および第２の成形を行い、前記オタネニンジン口腔フィルム剤を得る。
本発明において、前記第２の成形の温度は、好ましくは６０～８０℃、より好ましくは６５～７５℃、最も好ましくは７０～７５℃であり、時間は、好ましくは１～３ｈ、より好ましくは１．５～２．５ｈ、最も好ましくは２～２．５ｈであり、前記第２の成形は真空乾燥の方式で行うことが好ましい。
本発明が提供する製造方法は、便利かつ迅速であり、品質の管理が容易である。
本発明は、上記技術的解決手段に記載のオタネニンジン口腔フィルム剤の抗がん製剤または抗糖尿病製剤の製造における使用をさらに提供する。
本発明は、上記技術的解決手段に記載のオタネニンジン口腔フィルム剤の血圧調節製剤、血糖調節製剤または抗酸化製剤の製造における使用をさらに提供する。
本発明をさらに説明するために、以下に図面および実施例を参照しながら本発明が提供するオタネニンジン抽出物のフィルム剤の製造における使用、オタネニンジン口腔フィルム剤およびその製造方法と使用を詳細に説明するが、それらは本発明の保護範囲を限定するものと理解すべきではない。
実施例１
抽出溶媒として体積分率が７０％のエタノール水溶液を用い、固液比１：８、抽出時間１ｈ、抽出回数２回で、オタネニンジン抽出物に対して還流抽出を行い、オタネニンジン抽出物を得た。
抽出溶媒として体積分率が７０％のエタノール水溶液を用い、固液比１：８、抽出時間１ｈ、抽出回数２回で、オタネニンジン抽出物に対して還流抽出を行い、オタネニンジン抽出物を得た。
実施例２
エチルセルロースを無水エタノールに溶解して濃度が０．０２５ｇ／ｍＬのエチルセルロース溶液を得、０．８１ｇ／ｃｍ３の密度でシャーレに注入し、６０℃で３０ｍｉｎ真空乾燥させ、裏打ち層を得た。
カルボマー０．７８６ｇを水中で１２ｈ膨潤させ、ウォーターバス中でフィルム液を９０℃に加熱し、次にヒドロキシプロピルメチルセルロース１０．７４２ｇを加えて１ｈ溶解して第１のフィルム液を得、カプリン酸をプロピレングリコールに溶解して濃度が０．４７ｇ／ｍＬのカプリン酸溶液を得、第１のフィルム液に加え、第２のフィルム液を得た。第２のフィルム液が室温まで冷却した後、オタネニンジン抽出物１０．１５５ｇを加え、溶解するまで撹拌し、密度が１．３１ｇ／ｃｍ３の薬物含有層フィルム液を得た。
薬物含有層フィルム液を裏打ち層に注入し、７０℃で２ｈ真空乾燥させ、オタネニンジン口腔フィルム剤を得た。
エチルセルロースを無水エタノールに溶解して濃度が０．０２５ｇ／ｍＬのエチルセルロース溶液を得、０．８１ｇ／ｃｍ３の密度でシャーレに注入し、６０℃で３０ｍｉｎ真空乾燥させ、裏打ち層を得た。
カルボマー０．７８６ｇを水中で１２ｈ膨潤させ、ウォーターバス中でフィルム液を９０℃に加熱し、次にヒドロキシプロピルメチルセルロース１０．７４２ｇを加えて１ｈ溶解して第１のフィルム液を得、カプリン酸をプロピレングリコールに溶解して濃度が０．４７ｇ／ｍＬのカプリン酸溶液を得、第１のフィルム液に加え、第２のフィルム液を得た。第２のフィルム液が室温まで冷却した後、オタネニンジン抽出物１０．１５５ｇを加え、溶解するまで撹拌し、密度が１．３１ｇ／ｃｍ３の薬物含有層フィルム液を得た。
薬物含有層フィルム液を裏打ち層に注入し、７０℃で２ｈ真空乾燥させ、オタネニンジン口腔フィルム剤を得た。
試験例１ オタネニンジン抽出方法の確立
１．１ 試薬と機器
１．１．１ 実験材料と試薬
本実験で使用した材料と試薬を表１－１に示す。
１．１．２ 実験機器
本実験で使用した実験機器を表１－２に示す。
１．１ 試薬と機器
１．１．１ 実験材料と試薬
本実験で使用した材料と試薬を表１－１に示す。
本実験で使用した実験機器を表１－２に示す。
１．２ Ｒｇ１のＨＰＬＣ含有量の測定方法
高速液体クロマトグラフィーを用いて、抽出物中のＲｇ１の含有量を測定した。
１．２．１ クロマトグラフィー条件
ＨＰＬＣによるＲｇ１測定のためのクロマトグラフィー条件を表１－３に示す。
１．２．２ 溶液の調製
標準物質溶液：Ｒｇ１標準物質５．０ｍｇを秤量し、メタノールを加えて１０ｍＬに定容し、Ｒｇ１０．５ｍｇ／ｍＬの溶液を調製し、使用時に対応する濃度に希釈した。
被験物質溶液：オタネニンジン乾燥抽出物１００．０ｍｇを秤量し、１０ｍＬのメスフラスコに入れ、かつメタノール５ｍＬを加え、３０ｍｉｎ超音波処理し、放冷し、メタノールを標線まで加えて被験物質溶液１０ｍＬを得た。
１．２．３ 特異性実験の結果
特異性結果Ｒｇ１の保持時間は８．１０ｍｉｎであり、該成分のクロマトグラフィーのピーク形状が良好であり、溶媒ピークや他の成分からよく分離されているため、このクロマトグラフィー条件はＲｇ１の含有量測定に使用できる。
１．２．４ 方法論的考察結果
Ｒｇ１の含有量測定のための方法論的考察結果を表１－４、表１－５に示す。結果は、確立されたＨＰＬＣ法が信頼でき、オタネニンジン抽出物中のＲｇ１の含有量測定に使用できることを示している。
高速液体クロマトグラフィーを用いて、抽出物中のＲｇ１の含有量を測定した。
１．２．１ クロマトグラフィー条件
ＨＰＬＣによるＲｇ１測定のためのクロマトグラフィー条件を表１－３に示す。
標準物質溶液：Ｒｇ１標準物質５．０ｍｇを秤量し、メタノールを加えて１０ｍＬに定容し、Ｒｇ１０．５ｍｇ／ｍＬの溶液を調製し、使用時に対応する濃度に希釈した。
被験物質溶液：オタネニンジン乾燥抽出物１００．０ｍｇを秤量し、１０ｍＬのメスフラスコに入れ、かつメタノール５ｍＬを加え、３０ｍｉｎ超音波処理し、放冷し、メタノールを標線まで加えて被験物質溶液１０ｍＬを得た。
１．２．３ 特異性実験の結果
特異性結果Ｒｇ１の保持時間は８．１０ｍｉｎであり、該成分のクロマトグラフィーのピーク形状が良好であり、溶媒ピークや他の成分からよく分離されているため、このクロマトグラフィー条件はＲｇ１の含有量測定に使用できる。
１．２．４ 方法論的考察結果
Ｒｇ１の含有量測定のための方法論的考察結果を表１－４、表１－５に示す。結果は、確立されたＨＰＬＣ法が信頼でき、オタネニンジン抽出物中のＲｇ１の含有量測定に使用できることを示している。
１．３ 直交試験結果の分析
１．３．１ 抽出物中のＲｇ１の含有量の結果分析
Ｌ９（３３）直交設計試験表に従って抽出し、３つの因子はそれぞれ固液比、抽出時間、抽出回数であり、得られた抽出液を凍結乾燥させると、抽出物を得た。抽出物を秤量し、抽出物中のＲｇ１の含有量をＨＰＬＣにより測定し、結果を表１－６、表１－７に示し、分散分析表を表１－８、表１－９に示し、分散分析結果は、いずれの因子も抽出物中のＲｇ１の含有量に有意な影響を及ぼさないことを示している。水煎じ法における抽出物Ｒｇ１の含有量が最も高い抽出プロセスはＡ１Ｂ１Ｃ１であり、影響因子はＲＣ＞ＲＢ＞ＲＡであり、エタノール還流抽出法における抽出物中のＲｇ１の含有量が最も高い抽出プロセスはＡ２Ｂ２Ｃ２であり、影響因子はＲＡ＞ＲＢ＞ＲＣである。
Ｒ２＝０．９３３
Ｒ２＝０．７４４
１．３．１ 抽出物中のＲｇ１の含有量の結果分析
Ｌ９（３３）直交設計試験表に従って抽出し、３つの因子はそれぞれ固液比、抽出時間、抽出回数であり、得られた抽出液を凍結乾燥させると、抽出物を得た。抽出物を秤量し、抽出物中のＲｇ１の含有量をＨＰＬＣにより測定し、結果を表１－６、表１－７に示し、分散分析表を表１－８、表１－９に示し、分散分析結果は、いずれの因子も抽出物中のＲｇ１の含有量に有意な影響を及ぼさないことを示している。水煎じ法における抽出物Ｒｇ１の含有量が最も高い抽出プロセスはＡ１Ｂ１Ｃ１であり、影響因子はＲＣ＞ＲＢ＞ＲＡであり、エタノール還流抽出法における抽出物中のＲｇ１の含有量が最も高い抽出プロセスはＡ２Ｂ２Ｃ２であり、影響因子はＲＡ＞ＲＢ＞ＲＣである。
１．４ まとめ
水煎じ法およびエタノール還流抽出法は従来の抽出方法であり、この２種類の抽出方法は操作しやすく、コストが低いという利点を有し、実際の生産過程において、依然として多くの生産企業および研究室で一般的に使用されている抽出方法であり、Ｒｇ１の抽出率を高めるために、実際の生産に適した最適な抽出プロセスを選択する必要がある。水煎じ法の直交設計試験の結果は、抽出時間と抽出回数の増加に伴い、Ｒｇ１の抽出率が逆に低下し、一方では、長時間の加熱によりＲｇ１が分解する可能性があり、他方では、水中での溶解度がより高いオタネニンジン多糖類等の化合物は水での抽出率がより高いことを示している。実験結果をまとめて、オタネニンジン抽出物を製造する最適な抽出プロセスは、エタノール水溶液を抽出溶媒とし、オタネニンジンを還流抽出し、前記オタネニンジン抽出物を得ることであり、前記オタネニンジンとエタノール水溶液の質量比が０．５～１：６～８であり、前記エタノール水溶液におけるエタノールの体積分率が６５～７５％であり、前記還流抽出の単回抽出時間が０．５～１．５ｈであり、回数が１～３回である。
水煎じ法およびエタノール還流抽出法は従来の抽出方法であり、この２種類の抽出方法は操作しやすく、コストが低いという利点を有し、実際の生産過程において、依然として多くの生産企業および研究室で一般的に使用されている抽出方法であり、Ｒｇ１の抽出率を高めるために、実際の生産に適した最適な抽出プロセスを選択する必要がある。水煎じ法の直交設計試験の結果は、抽出時間と抽出回数の増加に伴い、Ｒｇ１の抽出率が逆に低下し、一方では、長時間の加熱によりＲｇ１が分解する可能性があり、他方では、水中での溶解度がより高いオタネニンジン多糖類等の化合物は水での抽出率がより高いことを示している。実験結果をまとめて、オタネニンジン抽出物を製造する最適な抽出プロセスは、エタノール水溶液を抽出溶媒とし、オタネニンジンを還流抽出し、前記オタネニンジン抽出物を得ることであり、前記オタネニンジンとエタノール水溶液の質量比が０．５～１：６～８であり、前記エタノール水溶液におけるエタノールの体積分率が６５～７５％であり、前記還流抽出の単回抽出時間が０．５～１．５ｈであり、回数が１～３回である。
試験例２ 脂肪酸のオタネニンジン抽出物の浸透性に対する研究
本試験例は、主に脂肪酸のＲｇ１に対する浸透促進効果を調べ、オタネニンジン抽出物中のＲｇ１を指標成分とし、５種類の飽和脂肪酸、すなわちカプロン酸（Ｃ６）、カプリル酸（Ｃ８）、カプリン酸（Ｃ１０）、ラウリン酸（Ｃ１２）、ステアリン酸（Ｃ１８）、２種類の不飽和脂肪酸、すなわちオレイン酸（Ｃ１８：１）、リノール酸（Ｃ１８：２）の浸透促進効果を考察し、考察指標には、定常状態流束、見かけの浸透係数、浸透増強倍数、遅延時間および４ｈ累積透過量が含まれる。主成分分析法を用いて異なる脂肪酸の浸透促進効果を評価し、オタネニンジン口腔フィルム剤における浸透促進剤の合理的な使用に参照根拠を提供する。
本試験例は、主に脂肪酸のＲｇ１に対する浸透促進効果を調べ、オタネニンジン抽出物中のＲｇ１を指標成分とし、５種類の飽和脂肪酸、すなわちカプロン酸（Ｃ６）、カプリル酸（Ｃ８）、カプリン酸（Ｃ１０）、ラウリン酸（Ｃ１２）、ステアリン酸（Ｃ１８）、２種類の不飽和脂肪酸、すなわちオレイン酸（Ｃ１８：１）、リノール酸（Ｃ１８：２）の浸透促進効果を考察し、考察指標には、定常状態流束、見かけの浸透係数、浸透増強倍数、遅延時間および４ｈ累積透過量が含まれる。主成分分析法を用いて異なる脂肪酸の浸透促進効果を評価し、オタネニンジン口腔フィルム剤における浸透促進剤の合理的な使用に参照根拠を提供する。
２．１ 試薬と機器
２．１．１ 実験材料と試薬
本実験で使用した材料と試薬を表２－１に示す。
２．１．２ 実験機器
本実験で使用した実験機器を表２－２に示す。
２．１．１ 実験材料と試薬
本実験で使用した材料と試薬を表２－１に示す。
本実験で使用した実験機器を表２－２に示す。
２．２ 方法
２．２．１ 溶液の調製
Ｒｇ１標準物質１１０．０ｍｇを秤量し、ｐＨ＝６．８のＰＢＳ溶液１０ｍＬに溶解し、１ｈ振盪し、１ｈ超音波処理し、同じ濃度（１１ｍｇ／ｍＬ）のＲｇ１を含有するオタネニンジン抽出物供給液１０ｍＬを調製し、供給液を４℃で保存して使用に備え、使用する前に供給液を５ｍｉｎボルテックスした。
２．２．２ 脂肪酸類浸透促進剤溶液の調製
７種類の脂肪酸、すなわちカプロン酸、カプリル酸、カプリン酸、ラウリン酸、ステアリン酸、オレイン酸およびリノール酸を、９５％エタノールで溶解し、それぞれ（１～１０ｍｇ／ｍＬ）濃度の浸透促進剤溶液を得た。
２．２．３ インビトロ浸透実験
処理されたブタ食道上皮をフランツ拡散セル（拡散面積１．７６ｃｍ２、受容室溶液体積４．５ｍＬ）の中央に挟んだ。ブタ食道上皮の外層を供給室に向け、ブタ食道上皮の内層を受容室に向け、供給室にｐＨ＝６．８のＰＢＳ溶液１．０ｍＬを加え、５ｍｉｎ後、受容室に、ブタ食道上皮の破損または拡散セルの不適切な取り付けにより、供給室の溶液が漏れるか否かを確認し、異常がないことを確認した後、供給室の溶液を廃棄し、拭き取った。供給室に浸透促進剤溶液４０．０μＬを加え、供給室を開いたまま１ｈ放置し、エタノール溶媒の揮発乾燥を確保し、溶媒の干渉を除去した。受容室にｐＨ＝７．４のＰＢＳ溶液４．５ｍＬを加え、供給室に供給液０．２ｍＬを加え、フランツ拡散セルを経皮拡散装置に置き、磁気撹拌子を加え、回転数を６００ｒｐｍに設定し、温度を３７℃±０．５℃に設定し、それぞれ０、０．２５、０．５、０．７５、１、１．５、２．５、３、４ｈに受容室から受容液０．３ｍＬを吸引し、かつ受容室に新鮮な等温のｐＨ＝７．４のＰＢＳ緩衝液０．３ｍＬを補充した。
２．２．４ データ分析
測定されたブタ食道上皮浸透データは、見かけの浸透係数Ｐ、遅延時間ＴＬおよび定常状態流量Ｊであり、計算方法を式１、式２、式３および式４に示す。
式１において、Ｊは定常状態流束であり、単位はμｇ／ｃｍ２／ｈであり、ｔは時間であり、単位はｈｒであり、ＱはＲｇ１がブタ食道上皮を通って受容室に浸透した量であり、単位はμｇであり、Ａは拡散層の面積であり、単位はｃｍ２である。
式２において、Ｐは見かけの浸透係数であり、単位はｃｍ／ｈであり、Ｃｄは薬物の初期濃度であり、単位はｍｇ／ｍＬである。
式３において、ＥＲは浸透増強倍数であり、Ｐは浸透促進剤を使用した場合の見かけの浸透係数であり、Ｐ０は浸透促進剤を使用しない場合の見かけの浸透係数である。
式４において、ＴＬは遅延時間であり、単位はｈｒである。
２．２．５ 主成分分析法
主成分分析法（Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅ Ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ Ａｎａｌｙｓｉｓ，ＰＣＡ）に基づいて、７種類の脂肪酸に対して、各種類の脂肪酸の３種類の異なる濃度の浸透促進効果を分析し、オタネニンジン抽出物に対して浸透促進効果が最も強い脂肪酸を選別した。
２．２．１ 溶液の調製
Ｒｇ１標準物質１１０．０ｍｇを秤量し、ｐＨ＝６．８のＰＢＳ溶液１０ｍＬに溶解し、１ｈ振盪し、１ｈ超音波処理し、同じ濃度（１１ｍｇ／ｍＬ）のＲｇ１を含有するオタネニンジン抽出物供給液１０ｍＬを調製し、供給液を４℃で保存して使用に備え、使用する前に供給液を５ｍｉｎボルテックスした。
２．２．２ 脂肪酸類浸透促進剤溶液の調製
７種類の脂肪酸、すなわちカプロン酸、カプリル酸、カプリン酸、ラウリン酸、ステアリン酸、オレイン酸およびリノール酸を、９５％エタノールで溶解し、それぞれ（１～１０ｍｇ／ｍＬ）濃度の浸透促進剤溶液を得た。
２．２．３ インビトロ浸透実験
処理されたブタ食道上皮をフランツ拡散セル（拡散面積１．７６ｃｍ２、受容室溶液体積４．５ｍＬ）の中央に挟んだ。ブタ食道上皮の外層を供給室に向け、ブタ食道上皮の内層を受容室に向け、供給室にｐＨ＝６．８のＰＢＳ溶液１．０ｍＬを加え、５ｍｉｎ後、受容室に、ブタ食道上皮の破損または拡散セルの不適切な取り付けにより、供給室の溶液が漏れるか否かを確認し、異常がないことを確認した後、供給室の溶液を廃棄し、拭き取った。供給室に浸透促進剤溶液４０．０μＬを加え、供給室を開いたまま１ｈ放置し、エタノール溶媒の揮発乾燥を確保し、溶媒の干渉を除去した。受容室にｐＨ＝７．４のＰＢＳ溶液４．５ｍＬを加え、供給室に供給液０．２ｍＬを加え、フランツ拡散セルを経皮拡散装置に置き、磁気撹拌子を加え、回転数を６００ｒｐｍに設定し、温度を３７℃±０．５℃に設定し、それぞれ０、０．２５、０．５、０．７５、１、１．５、２．５、３、４ｈに受容室から受容液０．３ｍＬを吸引し、かつ受容室に新鮮な等温のｐＨ＝７．４のＰＢＳ緩衝液０．３ｍＬを補充した。
２．２．４ データ分析
測定されたブタ食道上皮浸透データは、見かけの浸透係数Ｐ、遅延時間ＴＬおよび定常状態流量Ｊであり、計算方法を式１、式２、式３および式４に示す。
２．２．５ 主成分分析法
主成分分析法（Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅ Ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ Ａｎａｌｙｓｉｓ，ＰＣＡ）に基づいて、７種類の脂肪酸に対して、各種類の脂肪酸の３種類の異なる濃度の浸透促進効果を分析し、オタネニンジン抽出物に対して浸透促進効果が最も強い脂肪酸を選別した。
２．３ 結果
２．３．１ ７種類の脂肪酸のＲｇ１に対する浸透促進効果
浸透実験過程において、受容液の濃度はすべてシンク条件に達することができ、異なる時点の受容液の薬物含有濃度が測定され、データに対して計算処理を行い、Ｒｇ１がブタ食道上皮を通って浸透した定常状態流束、見かけの浸透係数、浸透増強倍数、４ｈ累積透過量、遅延時間等のパラメータを得、表２－３に示す。結果は、Ｒｇ１の累積透過量が時間と良好な線形関係を有することを示している。ブランク群に比べて、１ｍｇ／ｍＬ、５ｍｇ／ｍＬのステアリン酸（Ｃ１８）は、ＥＲに有意差がなく（ｐ＞０．０５）、１ｍｇ／ｍＬ、５ｍｇ／ｍＬのステアリン酸はＲｇ１に対して浸透促進効果がないことが証明された。残りの脂肪酸はすべて異なる程度でＲｇ１の浸透係数を増加させることができ、飽和脂肪酸の中で１ｍｇ／ｍＬのカプリン酸（Ｃ１０）の浸透増強倍数が最大であり、ＥＲ：１９．２４±１．８９であり、不飽和脂肪酸の中で浸透増強倍数が最大ものは５ｍｇ／ｍＬのリノール酸（Ｃ１８：２）であり、ＥＲ：９．４０±１．００である。
２．３．２ 主成分分析法による浸透促進剤のＲｇ１に対する影響の分析
（１）浸透データの標準化処理および因子分析の適用性実験
表２－３中のデータをＩＢＭ ＳＰＳＳ Ｓｔａｔｉｓｔｉｃｓ ２６．０ソフトウェアに代入し、標準化処理を行い、異なる指標における単位の影響をなくし、標準化データを得、次に因子分析の適用性実験を行い、結果を表２－４に示す。主成分分析を用いて情報濃縮研究を行う場合、まずデータが主成分分析に適するか否かを分析する必要があり、ＫＭＯ値が０．７９７に等しく、これは５種類の指標の間に一定の関連性を有することを示しており、Ｂａｒｔｅｌｅｔｔ球形性検定において、Ｓｉｇ値が０．０００（ｐ＜０．０５）であり、相関係数が単位行列であることを拒絶し、すなわち各指標が関連していることを示しており、２つの結果検定は、該データが主成分分析に適することを示している。
（２）主成分特徴ベクトルの計算
ＳＰＳＳソフトウェアによって相関係数の固有値および分散寄与率を求め、結果を表２－５に示す。成分１と成分２の寄与率はそれぞれ８１．６６％と１８．１３％であり、累積寄与率は９９．７８％＞８５．００％であり、これは、成分１と成分２が５つの指標情報の９９．７８％を表すことができることを示している。これにより、成分１と成分２は、浸透促進剤のＲｇ１に対する浸透促進効果の総合的な判断を表すことができると判定できる。
成分１＝０．２４４×定常状態流束＋０．２４４×見かけの浸透係数＋０．２４４４×浸透増強倍数＋０．２４３×４ｈ累積透過量＋０．０８５×遅延時間；
成分２＝－０．０８５×定常状態流束－０．０８５×見かけの浸透係数－０．０８５×浸透増強倍数－０．１０７×４ｈ累積透過量＋１．０３５×遅延時間。
（３）主成分得点および総合得点のデータ計算
処理された各変数の標準化データを線形方程式に代入し、総合得点は分散説明率と成分得点を乗じて累積的に計算され、総合得点の計算式は、総合得点＝（８１．６６％×成分１＋１８．１２％×成分２）／９９．７８３％であり、総合得点をソートし、結果を表２－６に示す。表の順位付けから、１％カプリン酸＞５％カプリン酸＞５％リノール酸＞１％リノール酸＞１％オレイン酸＞５％オレイン酸＞１０％カプリン酸＞１０％オレイン酸＞１０％リノール酸＞１０％カプロン酸＞１％カプリル酸＞１％カプロン酸＞５％カプロン酸＞１％ラウリン酸＞５％ラウリン酸＞１０％ステアリン酸＞１０％ラウリン酸＞１％ステアリン酸＞５％ステアリン酸＞ブランク群＞５％カプリル酸＞１０％カプリル酸であることがわかり、総合得点から、浸透促進効果が最も高いのは１％カプリン酸であることがわかった。
２．３．１ ７種類の脂肪酸のＲｇ１に対する浸透促進効果
浸透実験過程において、受容液の濃度はすべてシンク条件に達することができ、異なる時点の受容液の薬物含有濃度が測定され、データに対して計算処理を行い、Ｒｇ１がブタ食道上皮を通って浸透した定常状態流束、見かけの浸透係数、浸透増強倍数、４ｈ累積透過量、遅延時間等のパラメータを得、表２－３に示す。結果は、Ｒｇ１の累積透過量が時間と良好な線形関係を有することを示している。ブランク群に比べて、１ｍｇ／ｍＬ、５ｍｇ／ｍＬのステアリン酸（Ｃ１８）は、ＥＲに有意差がなく（ｐ＞０．０５）、１ｍｇ／ｍＬ、５ｍｇ／ｍＬのステアリン酸はＲｇ１に対して浸透促進効果がないことが証明された。残りの脂肪酸はすべて異なる程度でＲｇ１の浸透係数を増加させることができ、飽和脂肪酸の中で１ｍｇ／ｍＬのカプリン酸（Ｃ１０）の浸透増強倍数が最大であり、ＥＲ：１９．２４±１．８９であり、不飽和脂肪酸の中で浸透増強倍数が最大ものは５ｍｇ／ｍＬのリノール酸（Ｃ１８：２）であり、ＥＲ：９．４０±１．００である。
（１）浸透データの標準化処理および因子分析の適用性実験
表２－３中のデータをＩＢＭ ＳＰＳＳ Ｓｔａｔｉｓｔｉｃｓ ２６．０ソフトウェアに代入し、標準化処理を行い、異なる指標における単位の影響をなくし、標準化データを得、次に因子分析の適用性実験を行い、結果を表２－４に示す。主成分分析を用いて情報濃縮研究を行う場合、まずデータが主成分分析に適するか否かを分析する必要があり、ＫＭＯ値が０．７９７に等しく、これは５種類の指標の間に一定の関連性を有することを示しており、Ｂａｒｔｅｌｅｔｔ球形性検定において、Ｓｉｇ値が０．０００（ｐ＜０．０５）であり、相関係数が単位行列であることを拒絶し、すなわち各指標が関連していることを示しており、２つの結果検定は、該データが主成分分析に適することを示している。
ＳＰＳＳソフトウェアによって相関係数の固有値および分散寄与率を求め、結果を表２－５に示す。成分１と成分２の寄与率はそれぞれ８１．６６％と１８．１３％であり、累積寄与率は９９．７８％＞８５．００％であり、これは、成分１と成分２が５つの指標情報の９９．７８％を表すことができることを示している。これにより、成分１と成分２は、浸透促進剤のＲｇ１に対する浸透促進効果の総合的な判断を表すことができると判定できる。
成分２＝－０．０８５×定常状態流束－０．０８５×見かけの浸透係数－０．０８５×浸透増強倍数－０．１０７×４ｈ累積透過量＋１．０３５×遅延時間。
（３）主成分得点および総合得点のデータ計算
処理された各変数の標準化データを線形方程式に代入し、総合得点は分散説明率と成分得点を乗じて累積的に計算され、総合得点の計算式は、総合得点＝（８１．６６％×成分１＋１８．１２％×成分２）／９９．７８３％であり、総合得点をソートし、結果を表２－６に示す。表の順位付けから、１％カプリン酸＞５％カプリン酸＞５％リノール酸＞１％リノール酸＞１％オレイン酸＞５％オレイン酸＞１０％カプリン酸＞１０％オレイン酸＞１０％リノール酸＞１０％カプロン酸＞１％カプリル酸＞１％カプロン酸＞５％カプロン酸＞１％ラウリン酸＞５％ラウリン酸＞１０％ステアリン酸＞１０％ラウリン酸＞１％ステアリン酸＞５％ステアリン酸＞ブランク群＞５％カプリル酸＞１０％カプリル酸であることがわかり、総合得点から、浸透促進効果が最も高いのは１％カプリン酸であることがわかった。
２．４ まとめ
脂肪酸は、Ｒｇ１がブタ食道上皮を通る浸透能力を高めることができ、０．２２７ｍｇ／ｃｍ２のカプリン酸がブタ食道上皮に作用する時、浸透促進効果が最も高い。
脂肪酸は、Ｒｇ１がブタ食道上皮を通る浸透能力を高めることができ、０．２２７ｍｇ／ｃｍ２のカプリン酸がブタ食道上皮に作用する時、浸透促進効果が最も高い。
試験例３ オタネニンジン口腔フィルム剤の調製研究
３．１ 試薬と機器
３．１．１ 実験材料と試薬
本実験で使用した材料と試薬を表３－１に示す。
３．１．２ 実験機器
本実験で使用した実験機器を表３－２に示す。
３．１ 試薬と機器
３．１．１ 実験材料と試薬
本実験で使用した材料と試薬を表３－１に示す。
本実験で使用した実験機器を表３－２に示す。
３．２ 方法
オタネニンジン口腔フィルム剤を二層フィルム剤に製造し、１つの層は水に溶解しない裏打ち層であり、薬物の一方向放出を制御できるだけでなく、薬物含有層を唾液の侵食から保護することもできる。もう一つの層は薬物含有層であり、一定のインビトロ接着力を有する親水性高分子材料で製造され、フィルム剤が頬粘膜の表面に接着することを保証し、薬物の浸透を維持する。
３．２．１ フィルム形成方法の選択
一般的なフィルム剤の生産製造方法には、塗膜法、溶媒注入法、複合製膜法、ホットメルト押出法、熱可塑性製膜法、半固体溶媒注入法、固体分散押出法および球形化法等が含まれる。生産において、一般的に塗膜法、溶媒注入法が用いられ、この２種類のフィルム形成方法は操作しやすく、乾燥が速く、生産速度が速い。塗膜法は、厚さを制御しにくく、薬物担持量が低すぎ、漢方薬フィルム剤の製造方式に適合しない。溶媒注入法は、一定体積の容器に接着剤溶液を流し込み、フィルム形成材料の使用量や面積を制御することができる。実験室で漢方薬フィルム剤を製造することに適している。
３．２．２ 薬物含有層フィルム形成材料の選択
フィルム剤は本質的にポリマーマトリックスであり、一つまたは複数のポリマーで構成され、現在一般的に使用されている材料には、ゼラチン、シェラック、カルボキシメチルセルロース、プルラン、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、アルギン酸ナトリウム等が含まれる。ヒドロキシプロピルメチルセルロースは、そのフィルム形成後の優れた機械的特性および薬物担持能力のため、本課題はヒドロキシプロピルメチルセルロースを主なフィルム形成材料として選択し、またセルロース誘導体を単独で使用するとその粘膜接着性が低いため、適量のカルボマーを接着剤として添加して薬物担体の生体接着性を向上させ、同時にカルボマーとヒドロキシプロピルメチルセルロースとの組み合わせはフィルム剤の徐放性骨格材料として、薬物放出を維持することができる。
３．２．３ 薬物含有層の可塑剤の選択
フィルム形成材料を単独で使用して製造されたフィルム剤は、テクスチャーが硬く、機械的特性が低く、可塑剤の添加はフィルム剤の柔軟性を改善し、かつフィルム剤の脆性を低下させることができ、フィルム剤の輸送と保存に有利である。グリセリンを可塑剤とし、フィルム剤の間に接着が発生し、フィルム剤の保存に不利であり、クエン酸トリエチルを可塑剤とする場合、フィルム剤の表面は滑らかであるが、脆性が高く、柔軟性が低く、プロピレングリコールを本処方の可塑剤とする場合、フィルム剤の表面は滑らかであり、柔軟性が適切であり、本処方の可塑剤とすることに適している。
３．２．４ 裏打ち層材料の選択
オタネニンジンは主薬として水に溶解しやすく、オタネニンジン抽出物はフィルム剤中に均一に分散できるが、オタネニンジンが苦いため、患者のコンプライアンスが低下し、口腔フィルム剤の服用に不利である。同時に、単層の薬物含有フィルム剤は唾液に侵食され、急速に膨潤し、崩壊し、口腔内に長時間滞留することができない。患者のコンプライアンスと口腔滞留時間を考慮して、薬物含有層に裏打ち層を追加して、二層の口腔フィルム剤を製造する。裏打ち層は、選択されたフィルム形成材料が、人間の体温で水に溶解しないこと、薬物含有層に緊密に接着することの両方を必要とする。最終的に、エチルセルロースを裏打ち層材料として選択する。
３．２．５ 考察方法
（１）フィルム剤の外観
フィルム剤の外観の要求は、外観が完全で滑らかで、厚さが一致し、色が均一で、明らかな気泡がないことである。複数回用量のフィルム剤の場合、分割圧痕が均一で明瞭であり、かつ圧痕を押して引き裂くことができる。
（２）フィルム液
薬局方ではフィルム液に要求されていないが、溶媒注入法は、フィルム液の流動性が適切であることが要求される。フィルム液が粘稠すぎると、気泡を排除しにくく、容器から注ぎ出しにくく、フィルム液の流動性が高すぎると、乾燥時間が長く、製造されたフィルム剤の品質を管理しにくい。接着剤液系は均一であるべきで、肉眼で見える明らかな不溶性の塊状固体がないことを基準とする。
（３）溶解時間
（２．２ｃｍ×３．２ｃｍ）口腔フィルム剤をシャーレの上方に置き、フィルム剤の上方に３７℃の人工唾液（ＫＨ２ＰＯ４ １２ｍＭ、ＮａＣｌ ４０ｍＭ、ＣａＣｌ ２１．５ｍＭ、Ｈ２Ｏ １Ｌ、ｐＨ値＝６．８に調整する）２００μＬを滴下し、液滴がフィルム剤を貫通してシャーレに滴下するまで続け、フィルム剤を貫通してシャーレの底部に滴下する時間を測定し、溶解時間として記録した。各群のサンプルを６回測定し、平均値を記録した。
（４）インビトロ接着力
本明細書における口腔フィルム剤の投与部位は口腔頬粘膜であり、これは口腔フィルム剤が口腔頬粘膜組織に接着してＲｇ１を放出し、頬粘膜を貫通して血液循環に入る必要があり、これは、フィルム剤が口腔粘膜に対して一定の接着力を有することを必要とする。艾徳堡ＨＬＢ万能材料試験機を用いて、台座に一枚のスライドガラスを固定した。もう１枚のスライドガラスを用いて、スライドガラスの中心点にクリップを固定し、作製されたクリップ付きスライドガラスを万能材料試験機の上層のクリップで固定し、上下２枚のスライドガラスを水平にした。次に、製造されたフィルム剤隔離層を両面テープで上部のクリップ付きのスライドガラスに固定し、台座のスライドガラスに５％（ｗ／ｗ）ムチン溶液２００μＬを滴下し、上部のスライドガラスと下部のスライドガラスを密着させ、その上に２ｇの重りを３０ｓ置き、続いて等速０．１ｍｍ／ｓでスライドガラスを上向きに引き上げ、２つの部分のスライドガラスが引き離された瞬間に、該時刻の万能材料試験機に示された張力読み取り値を、フィルム剤のインビトロ接着力として記録した。
オタネニンジン口腔フィルム剤を二層フィルム剤に製造し、１つの層は水に溶解しない裏打ち層であり、薬物の一方向放出を制御できるだけでなく、薬物含有層を唾液の侵食から保護することもできる。もう一つの層は薬物含有層であり、一定のインビトロ接着力を有する親水性高分子材料で製造され、フィルム剤が頬粘膜の表面に接着することを保証し、薬物の浸透を維持する。
３．２．１ フィルム形成方法の選択
一般的なフィルム剤の生産製造方法には、塗膜法、溶媒注入法、複合製膜法、ホットメルト押出法、熱可塑性製膜法、半固体溶媒注入法、固体分散押出法および球形化法等が含まれる。生産において、一般的に塗膜法、溶媒注入法が用いられ、この２種類のフィルム形成方法は操作しやすく、乾燥が速く、生産速度が速い。塗膜法は、厚さを制御しにくく、薬物担持量が低すぎ、漢方薬フィルム剤の製造方式に適合しない。溶媒注入法は、一定体積の容器に接着剤溶液を流し込み、フィルム形成材料の使用量や面積を制御することができる。実験室で漢方薬フィルム剤を製造することに適している。
３．２．２ 薬物含有層フィルム形成材料の選択
フィルム剤は本質的にポリマーマトリックスであり、一つまたは複数のポリマーで構成され、現在一般的に使用されている材料には、ゼラチン、シェラック、カルボキシメチルセルロース、プルラン、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、アルギン酸ナトリウム等が含まれる。ヒドロキシプロピルメチルセルロースは、そのフィルム形成後の優れた機械的特性および薬物担持能力のため、本課題はヒドロキシプロピルメチルセルロースを主なフィルム形成材料として選択し、またセルロース誘導体を単独で使用するとその粘膜接着性が低いため、適量のカルボマーを接着剤として添加して薬物担体の生体接着性を向上させ、同時にカルボマーとヒドロキシプロピルメチルセルロースとの組み合わせはフィルム剤の徐放性骨格材料として、薬物放出を維持することができる。
３．２．３ 薬物含有層の可塑剤の選択
フィルム形成材料を単独で使用して製造されたフィルム剤は、テクスチャーが硬く、機械的特性が低く、可塑剤の添加はフィルム剤の柔軟性を改善し、かつフィルム剤の脆性を低下させることができ、フィルム剤の輸送と保存に有利である。グリセリンを可塑剤とし、フィルム剤の間に接着が発生し、フィルム剤の保存に不利であり、クエン酸トリエチルを可塑剤とする場合、フィルム剤の表面は滑らかであるが、脆性が高く、柔軟性が低く、プロピレングリコールを本処方の可塑剤とする場合、フィルム剤の表面は滑らかであり、柔軟性が適切であり、本処方の可塑剤とすることに適している。
３．２．４ 裏打ち層材料の選択
オタネニンジンは主薬として水に溶解しやすく、オタネニンジン抽出物はフィルム剤中に均一に分散できるが、オタネニンジンが苦いため、患者のコンプライアンスが低下し、口腔フィルム剤の服用に不利である。同時に、単層の薬物含有フィルム剤は唾液に侵食され、急速に膨潤し、崩壊し、口腔内に長時間滞留することができない。患者のコンプライアンスと口腔滞留時間を考慮して、薬物含有層に裏打ち層を追加して、二層の口腔フィルム剤を製造する。裏打ち層は、選択されたフィルム形成材料が、人間の体温で水に溶解しないこと、薬物含有層に緊密に接着することの両方を必要とする。最終的に、エチルセルロースを裏打ち層材料として選択する。
３．２．５ 考察方法
（１）フィルム剤の外観
フィルム剤の外観の要求は、外観が完全で滑らかで、厚さが一致し、色が均一で、明らかな気泡がないことである。複数回用量のフィルム剤の場合、分割圧痕が均一で明瞭であり、かつ圧痕を押して引き裂くことができる。
（２）フィルム液
薬局方ではフィルム液に要求されていないが、溶媒注入法は、フィルム液の流動性が適切であることが要求される。フィルム液が粘稠すぎると、気泡を排除しにくく、容器から注ぎ出しにくく、フィルム液の流動性が高すぎると、乾燥時間が長く、製造されたフィルム剤の品質を管理しにくい。接着剤液系は均一であるべきで、肉眼で見える明らかな不溶性の塊状固体がないことを基準とする。
（３）溶解時間
（２．２ｃｍ×３．２ｃｍ）口腔フィルム剤をシャーレの上方に置き、フィルム剤の上方に３７℃の人工唾液（ＫＨ２ＰＯ４ １２ｍＭ、ＮａＣｌ ４０ｍＭ、ＣａＣｌ ２１．５ｍＭ、Ｈ２Ｏ １Ｌ、ｐＨ値＝６．８に調整する）２００μＬを滴下し、液滴がフィルム剤を貫通してシャーレに滴下するまで続け、フィルム剤を貫通してシャーレの底部に滴下する時間を測定し、溶解時間として記録した。各群のサンプルを６回測定し、平均値を記録した。
（４）インビトロ接着力
本明細書における口腔フィルム剤の投与部位は口腔頬粘膜であり、これは口腔フィルム剤が口腔頬粘膜組織に接着してＲｇ１を放出し、頬粘膜を貫通して血液循環に入る必要があり、これは、フィルム剤が口腔粘膜に対して一定の接着力を有することを必要とする。艾徳堡ＨＬＢ万能材料試験機を用いて、台座に一枚のスライドガラスを固定した。もう１枚のスライドガラスを用いて、スライドガラスの中心点にクリップを固定し、作製されたクリップ付きスライドガラスを万能材料試験機の上層のクリップで固定し、上下２枚のスライドガラスを水平にした。次に、製造されたフィルム剤隔離層を両面テープで上部のクリップ付きのスライドガラスに固定し、台座のスライドガラスに５％（ｗ／ｗ）ムチン溶液２００μＬを滴下し、上部のスライドガラスと下部のスライドガラスを密着させ、その上に２ｇの重りを３０ｓ置き、続いて等速０．１ｍｍ／ｓでスライドガラスを上向きに引き上げ、２つの部分のスライドガラスが引き離された瞬間に、該時刻の万能材料試験機に示された張力読み取り値を、フィルム剤のインビトロ接着力として記録した。
３．３ 結果
３．３．１ Ｂｏｋ－Ｂｅｈｎｋｅｎ応答面法によるブランクフィルム剤の処方組成の最適化
実験設計案、結果を表３－３に示す。実験データは、Ｄｉｓｉｇｎ Ｅｘｐｅｒｔ １２を用いて分析され、ブランクフィルム剤の溶解時間、インビトロ接着力を評価指標（Ｙ１）、（Ｙ２）として、選択された３つの因子に対して多重非線形回帰フィッティングを行った。ソフトウェアを用いて２つの指標と３つの因子の等高線図および３次元応答面図を作成した。
Ｄｉｓｉｇｎ Ｅｘｐｅｒｔ １２ソフトウェアを用いて、表中のデータに対して統計的処理を行い、溶解時間が各因子をフィッティングする多重非線形フィッティング方程式および関連係数はそれぞれ、以下の通りである。
Ｙ＝１２２．５４＋１６．６８Ａ＋８６．６４Ｂ－１６．０７Ｃ－１７．２７ＡＢ－１１．７８ＡＣ－１０．９５ＢＣ－２０．４１Ａ２＋３６．６８Ｂ２－５２．３０Ｃ２、Ｒ＝０．９６７４。分散分析結果を表３－４に示す。
表３－４からわかるように、ｐ＜０．０５は有意差とみなされ、使用する非線形モデルは有意性を有することを示している。同時に、不適合項の値が０．０５より大きい場合は有意ではなく、該方程式の実験に対するフィッティングが良好であることを示している。ここで、Ｂ、Ｂ２、Ｃ２はＹ１に対して顕著な影響を与える。
インビトロ接着力が各因子をフィッティングする多重非線形フィッティング方程式および関連係数はそれぞれ、以下の通りである。
Ｙ＝７．２８＋０．７４７１Ａ＋２．８５Ｂ＋１．１１Ｃ－０．６４１７ＡＢ－０．０３９２ＡＣ＋０．５８７８５ＢＣ＋０．０６９５Ａ２－１．０８Ｂ２＋０．４６５６Ｃ２、Ｒ＝０．９７２３。分散分析結果を表３－５に示す。
ｐ＜０．０５は有意差とみなされ、使用する非線形モデルが有意性を有することを示している。同時に、不適合項の値が０．０５より大きい場合は有意ではなく、該方程式の実験に対するフィッティングが良好であることを示している。ここで、Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｂ２はＹ２に対して顕著な影響を与える。
次に、Ｄｓｉｇｎ Ｅｘｐｅｒｔ １０．０ソフトウェアの分析モジュールを利用して、各因子の相互作用の総スコアに対する三次元効果面図および等高線図を作成したところ、カルボマーの使用量（Ａ）、ＨＰＭＣの使用量（Ｂ）、プロピレングリコールの使用量（Ｃ）はブランクフィルム剤の溶解時間とインビトロ接着力に対してある程度の影響を与えることがわかった。実験結果をＤｅｓｉｇｎ－Ｅｘｐｅｒｔ １２ソフトウェアで処理した後、最長溶解時間と最大インビトロ接着力を評価指標とし、フィルム剤が最適化された処方、すなわち、カルボマー：０．１～１ｇ、ＨＰＭＣ：１～５ｇ、プロピレングリコール：０．１～０．３ｇを得た。
最適化された処方に従って三回の検証試験を行い、得られた平均溶解時間は２２５．５８ｓであり、平均インビトロ接着力は９．６３Ｎであり、予測値との相対誤差はそれぞれ０．４８％、０．３１％であり、処方が安定して信頼できることを示している。
３．３．２ 薬物担持量の考察
オタネニンジン抽出物がそれぞれ固形物含有量の２５％、４５％、６５％を占める時、顕微鏡で観察したところ、オタネニンジン抽出物が固形物含有量の６５％を占める時、視野にハイライト結晶が現れ、最終的に、薬物担持量は固形物含有量の４５％であると決定された。
３．３．３ 乾燥装置の選別
最適化された処方に従って、オタネニンジン口腔フィルム剤を製造する乾燥方法を考察した。実験室の既存の条件に従って、真空乾燥方法、熱風乾燥箱乾燥法、加熱板乾燥法の３種類の乾燥方法を選択し、薬局方の外観評価指標で選別し、実験結果を表３－６に示す。真空乾燥法は、真空負圧原理を利用して水の沸点を下げ、フィルム液中の水分の蒸発を加速し、乾燥が終了した後、フィルムの表面が滑らかで平らかつ均一であり、気泡がなく、熱風乾燥箱乾燥法は、乾燥箱内に流動する熱風を十分に充填し、フィルム液中の水分を除去し、乾燥が終了した後、熱風がフィルム液の表面に吹き付けるため、フィルムの表面にしわが発生し、フィルムが平らではなく、薬局方のフィルムの外観に対する要求に合致せず、加熱板乾燥法は、機器における加熱装置が均等に配置されず、かつ加熱板とフィルム液との間にシャーレが挟まれるため、フィルム液を加熱する時に加熱が均一ではなく、フィルム剤の厚さが異なるという状況が発生するので、フィルム液に対する乾燥方式は真空乾燥法を選択した。
３．３．４ 乾燥温度と時間の選別
乾燥温度と時間の選別の結果を表３－７に示す。乾燥方式は真空乾燥を選択し、乾燥温度と乾燥時間はオタネニンジン口腔フィルム剤の最低水分含有量を選択基準とし、温度が７０℃である場合、２ｈと３ｈとの間のデータには有意差がなく（ｐ＞０．０５）、最終的に、乾燥時間およびコストを節約するために、乾燥温度７０℃、乾燥時間２ｈを選択した。
３．３．５ 最適な製剤処方
オタネニンジン口腔フィルム剤の処方を表３－８に示す。オタネニンジン口腔フィルム剤の主薬はオタネニンジン抽出物であり、カプリン酸を浸透促進剤とし、ＨＰＭＣを主なフィルム形成材料とし、カルボマーを接着剤とし、プロピレングリコールを可塑剤とした。
３．３．６ 最適な製造プロセス
まず、カルボマーを１２ｈ膨潤させ、ウォーターバス中でフィルム液を９０℃に加熱し、次に、ヒドロキシプロピルメチルセルロースを加えて１ｈ溶解し、カプリン酸をプロピレングリコールに溶解してフィルム液に加えた。フィルム液が室温まで冷却した後、オタネニンジン抽出物を加え、溶解するまで撹拌し、放置して使用に備えた。エチルセルロースを無水エタノールに溶解し、０．８１ｇ／ｃｍ３の密度でシャーレに注入し、６０℃で３０ｍｉｎ真空乾燥させ、裏打ち層を作製した。次に、薬物含有層フィルム液を裏打ち層に注入し、７０℃で２ｈ真空乾燥させ、オタネニンジン口腔フィルム剤を得た。Ｒｇ１は熱不安定性を有し、加熱時間の増加に伴い、分解が発生するため、製造過程において室温まで冷却した後にオタネニンジン抽出物を加える必要がある。
３．３．１ Ｂｏｋ－Ｂｅｈｎｋｅｎ応答面法によるブランクフィルム剤の処方組成の最適化
実験設計案、結果を表３－３に示す。実験データは、Ｄｉｓｉｇｎ Ｅｘｐｅｒｔ １２を用いて分析され、ブランクフィルム剤の溶解時間、インビトロ接着力を評価指標（Ｙ１）、（Ｙ２）として、選択された３つの因子に対して多重非線形回帰フィッティングを行った。ソフトウェアを用いて２つの指標と３つの因子の等高線図および３次元応答面図を作成した。
Ｙ＝１２２．５４＋１６．６８Ａ＋８６．６４Ｂ－１６．０７Ｃ－１７．２７ＡＢ－１１．７８ＡＣ－１０．９５ＢＣ－２０．４１Ａ２＋３６．６８Ｂ２－５２．３０Ｃ２、Ｒ＝０．９６７４。分散分析結果を表３－４に示す。
表３－４からわかるように、ｐ＜０．０５は有意差とみなされ、使用する非線形モデルは有意性を有することを示している。同時に、不適合項の値が０．０５より大きい場合は有意ではなく、該方程式の実験に対するフィッティングが良好であることを示している。ここで、Ｂ、Ｂ２、Ｃ２はＹ１に対して顕著な影響を与える。
Ｙ＝７．２８＋０．７４７１Ａ＋２．８５Ｂ＋１．１１Ｃ－０．６４１７ＡＢ－０．０３９２ＡＣ＋０．５８７８５ＢＣ＋０．０６９５Ａ２－１．０８Ｂ２＋０．４６５６Ｃ２、Ｒ＝０．９７２３。分散分析結果を表３－５に示す。
ｐ＜０．０５は有意差とみなされ、使用する非線形モデルが有意性を有することを示している。同時に、不適合項の値が０．０５より大きい場合は有意ではなく、該方程式の実験に対するフィッティングが良好であることを示している。ここで、Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｂ２はＹ２に対して顕著な影響を与える。
最適化された処方に従って三回の検証試験を行い、得られた平均溶解時間は２２５．５８ｓであり、平均インビトロ接着力は９．６３Ｎであり、予測値との相対誤差はそれぞれ０．４８％、０．３１％であり、処方が安定して信頼できることを示している。
３．３．２ 薬物担持量の考察
オタネニンジン抽出物がそれぞれ固形物含有量の２５％、４５％、６５％を占める時、顕微鏡で観察したところ、オタネニンジン抽出物が固形物含有量の６５％を占める時、視野にハイライト結晶が現れ、最終的に、薬物担持量は固形物含有量の４５％であると決定された。
３．３．３ 乾燥装置の選別
最適化された処方に従って、オタネニンジン口腔フィルム剤を製造する乾燥方法を考察した。実験室の既存の条件に従って、真空乾燥方法、熱風乾燥箱乾燥法、加熱板乾燥法の３種類の乾燥方法を選択し、薬局方の外観評価指標で選別し、実験結果を表３－６に示す。真空乾燥法は、真空負圧原理を利用して水の沸点を下げ、フィルム液中の水分の蒸発を加速し、乾燥が終了した後、フィルムの表面が滑らかで平らかつ均一であり、気泡がなく、熱風乾燥箱乾燥法は、乾燥箱内に流動する熱風を十分に充填し、フィルム液中の水分を除去し、乾燥が終了した後、熱風がフィルム液の表面に吹き付けるため、フィルムの表面にしわが発生し、フィルムが平らではなく、薬局方のフィルムの外観に対する要求に合致せず、加熱板乾燥法は、機器における加熱装置が均等に配置されず、かつ加熱板とフィルム液との間にシャーレが挟まれるため、フィルム液を加熱する時に加熱が均一ではなく、フィルム剤の厚さが異なるという状況が発生するので、フィルム液に対する乾燥方式は真空乾燥法を選択した。
乾燥温度と時間の選別の結果を表３－７に示す。乾燥方式は真空乾燥を選択し、乾燥温度と乾燥時間はオタネニンジン口腔フィルム剤の最低水分含有量を選択基準とし、温度が７０℃である場合、２ｈと３ｈとの間のデータには有意差がなく（ｐ＞０．０５）、最終的に、乾燥時間およびコストを節約するために、乾燥温度７０℃、乾燥時間２ｈを選択した。
オタネニンジン口腔フィルム剤の処方を表３－８に示す。オタネニンジン口腔フィルム剤の主薬はオタネニンジン抽出物であり、カプリン酸を浸透促進剤とし、ＨＰＭＣを主なフィルム形成材料とし、カルボマーを接着剤とし、プロピレングリコールを可塑剤とした。
まず、カルボマーを１２ｈ膨潤させ、ウォーターバス中でフィルム液を９０℃に加熱し、次に、ヒドロキシプロピルメチルセルロースを加えて１ｈ溶解し、カプリン酸をプロピレングリコールに溶解してフィルム液に加えた。フィルム液が室温まで冷却した後、オタネニンジン抽出物を加え、溶解するまで撹拌し、放置して使用に備えた。エチルセルロースを無水エタノールに溶解し、０．８１ｇ／ｃｍ３の密度でシャーレに注入し、６０℃で３０ｍｉｎ真空乾燥させ、裏打ち層を作製した。次に、薬物含有層フィルム液を裏打ち層に注入し、７０℃で２ｈ真空乾燥させ、オタネニンジン口腔フィルム剤を得た。Ｒｇ１は熱不安定性を有し、加熱時間の増加に伴い、分解が発生するため、製造過程において室温まで冷却した後にオタネニンジン抽出物を加える必要がある。
試験例４ オタネニンジン口腔フィルム剤の品質研究
本試験例は、オタネニンジン口腔フィルム剤の品質に対して初期研究を行った。
４．１ 試薬と機器
４．１．１ 実験材料と試薬
本実験で使用した材料と試薬を表４－１に示す。
４．１．２ 実験機器
本実験で使用した実験機器を表４－２に示す。
本試験例は、オタネニンジン口腔フィルム剤の品質に対して初期研究を行った。
４．１ 試薬と機器
４．１．１ 実験材料と試薬
本実験で使用した材料と試薬を表４－１に示す。
本実験で使用した実験機器を表４－２に示す。
４．２ 方法
４．２．１ 外観検査
オタネニンジン口腔フィルム剤には、明らかな気泡、変形および不均一な色があるか否かを目視で観察した。
４．２．２ 微視的な検査
コールドフィールドエミッション走査型電子顕微鏡（ＳＵ ８０１０）を使用して、高真空環境および電子ビーム照射下で口腔フィルム剤の表面を衝撃することにより、表面に薬物が析出した結晶を有するか否か、構造が完全であるか否か等を含む口腔フィルム剤の表面の微視的な構造形態を取得し、取得したデータは口腔フィルム剤の他の特性、機械的特性、溶解率等と相互に裏付けられた。薬物が担持されていないブランク口腔フィルム剤、オタネニンジン口腔フィルム剤を予め４０℃の真空乾燥箱に１２ｈ入れて、口腔フィルム剤中の水分の揮発を確保し、乾燥した口腔フィルム剤を導電性接着剤によって金属台に接着し、良好な導電性を取得するためにフィルム剤の表面に金をスプレーし、２種類の口腔フィルム剤の表面の微視的な構造形態を考察した。
４．２．３ 重量差異限界検査
オタネニンジン口腔フィルム剤をそれぞれ２０錠取り、総重量を精密に秤量し、平均重量を求め、次に、各錠の重量をそれぞれ精密に秤量し、各錠の重量を平均重量と比較し、重量差異を検査した。
４．２．４ インビトロ滞留時間検査
口腔フィルム剤が口腔内で唾液流動、洗い流し等の機械的因子の影響を受けた後、口腔内に滞留できる時間をシミュレートするために、以下の装置を特別に製造した。上部は直線往復運動の機械装置であり、伸縮レバーにスライドガラスが固定され、スライドガラスに５％（ｗ／ｗ）ムチン溶液が十分に塗布され、口腔粘膜の表面をシミュレートするために用いられ、裁断された薬物が担持されていないブランク口腔フィルム剤とオタネニンジン口腔フィルム剤の薬物含有層をその表面に貼り付け、２ｇの重りをフィルム剤の表面に３０ｓ置き、下部は人工唾液を試験媒体とし、スライドガラスが上下に移動し、フィルム剤の上縁が人工唾液に浸漬し、下縁が人工唾液から離れるのを１回と計算し、機械装置を６０回／ｍｉｎに設定し、フィルム剤がスライドガラスから完全に離れる時間を記録して、口腔フィルム剤の口腔内での滞留時間をシミュレートした。
４．２．５ 引張強度検査
中華人民共和国国家標準ＧＢＴ １０４０．２－２００６の要件に従って、薬物が担持されていないブランク口腔フィルム剤とオタネニンジン口腔フィルム剤をダンベルカッターでダンベル形状に裁断し、裁断されたフィルム剤をＷＤＴ－１０電子万能試験機の２つのクランプ間のゲージ距離４０ｍｍに固定し、口腔フィルム剤が破断するまで、口腔フィルム剤は５０ｍｍ／ｍｉｎの速度で長手方向に引き伸ばされ、６つのサンプルを測定した。計算式を式５、式６に示す。
式５において、σは引張強度であり、単位はＮ／ｍｍ２であり、Ｆｂはサンプルが破断する時に受けた最大力であり、単位はＮであり、Ｓｏはサンプルの元の断面積であり、単位はｍｍ２である。
式６において、ｅは破断伸びであり、単位はパーセント（％）であり、Ｌ０はサンプルの実験前の長さであり、Ｌａはサンプルを引き切ったときの長さである。
４．２．６ 靭性検査
ＳＭＳ Ｐｌｕｓテクスチャ分析器のＣ００２ＳＴプローブ（直径が２ｍｍである）を使用して、プローブの下向きの運動速度が０．５ｍｍ／ｓであり、テクスチャ分析器のクランプに固定された薬物が担持されていないブランク口腔フィルム剤とオタネニンジン口腔フィルム剤が貫通されるのに必要な力を測定し、穿刺力は、硬い物体の貫通に抵抗するフィルム剤の能力を反映でき、６つのサンプルを測定した。
４．２．７ 濡れ性検査
フィルム剤をＴｈｅｔａ ＱＣ光学接触角計の観測台に置き、液滴量が４μＬであり、１０ｓ安定した後に測定し、液滴の両側の角度を記録し、抽出物の添加による口腔フィルム剤への影響を考察した。濡れ角が＜９０°の場合、フィルム剤の表面が親水性を有することを意味し、角度が小さいほど材料の濡れ性が高いことを意味し、濡れ角が＞９０°の場合、フィルム剤の表面が疎水性を有することを意味し、角度が大きいほど材料の濡れ性が低いことを意味した。濡れ角＝１８０°の場合、材料が完全に疎水性であることを意味した。優れた濡れ性は、フィルム剤が口腔粘膜に密着して、フィルム材料から薬物を放出することを確保することができる。
４．２．８ 含有量の測定
オタネニンジン口腔フィルム剤を取り、細かく切った後、ＰＢＳ ５ｍＬを加え、一晩振盪した。３０ｍｉｎ超音波処理し、１５０００ｒｐｍで１５ｍｉｎ高速遠心分離した。上澄み液１ｍＬを取り、０．２２μｍの精密ろ過膜でろ過した後、「２．１．２．１」液相法で検出した。
４．２．９ 溶解率の測定
小カップ法を用いて溶解率を検出し、オタネニンジン口腔フィルム剤を５ｍＬの小カップに入れ、人工唾液４．５ｍＬを溶出媒体とした。小カップ内の温度は３７±０．５℃であり、回転数は６００ｒｐｍであり、サンプリング時間間隔は０、１、３、５、１０、１５、２０、３０および６０ｍｉｎであり、毎回０．３ｍＬサンプリングし、０．３ｍＬ液体を補充した。
４．２．１０ 安定性影響因子試験
製造されたオタネニンジン口腔フィルム剤に対して影響因子試験を行い、オタネニンジン口腔フィルム剤の包装、貯蔵条件に根拠を提供し、影響因子試験は全部で高温試験、高湿試験、強光試験に分けられた。
（１）高温試験
６錠のオタネニンジン口腔フィルム剤を開いたシャーレに積み重ね、シャーレを薬剤安定性試験箱に入れて温度を６０℃に設定し、恒温で１０ｄ放置し、それぞれ０ｄ、５ｄ、１０ｄにサンプルを取り出し、その外観、重量、薬物含有量をそれぞれ検出し、０ｄとデータを比較した。
（２）高湿試験
６錠のオタネニンジン口腔フィルム剤を開いたシャーレに積み重ね、シャーレを薬剤安定性試験箱に入れて温度を２５℃に、湿度を９０％±５％に設定し、恒温で１０ｄ放置し、それぞれ０ｄ、５ｄ、１０ｄにサンプルを取り出し、その外観、重量，薬物含有量をそれぞれ検出し、０ｄとデータを比較した。
（３）光照射試験
６錠のオタネニンジン口腔フィルム剤を開いたシャーレに積み重ね、シャーレを光照射インキュベーターに入れ、室温、湿潤条件下で、４５００ｌｘ±５００ｌｘ光照射し、恒温で１０ｄ放置し、それぞれ０ｄ、５ｄおよび１０ｄにサンプルを取り出し、その外観、重量、薬物含有量をそれぞれ検出し、０ｄとデータを比較した。
４．２．１ 外観検査
オタネニンジン口腔フィルム剤には、明らかな気泡、変形および不均一な色があるか否かを目視で観察した。
４．２．２ 微視的な検査
コールドフィールドエミッション走査型電子顕微鏡（ＳＵ ８０１０）を使用して、高真空環境および電子ビーム照射下で口腔フィルム剤の表面を衝撃することにより、表面に薬物が析出した結晶を有するか否か、構造が完全であるか否か等を含む口腔フィルム剤の表面の微視的な構造形態を取得し、取得したデータは口腔フィルム剤の他の特性、機械的特性、溶解率等と相互に裏付けられた。薬物が担持されていないブランク口腔フィルム剤、オタネニンジン口腔フィルム剤を予め４０℃の真空乾燥箱に１２ｈ入れて、口腔フィルム剤中の水分の揮発を確保し、乾燥した口腔フィルム剤を導電性接着剤によって金属台に接着し、良好な導電性を取得するためにフィルム剤の表面に金をスプレーし、２種類の口腔フィルム剤の表面の微視的な構造形態を考察した。
４．２．３ 重量差異限界検査
オタネニンジン口腔フィルム剤をそれぞれ２０錠取り、総重量を精密に秤量し、平均重量を求め、次に、各錠の重量をそれぞれ精密に秤量し、各錠の重量を平均重量と比較し、重量差異を検査した。
４．２．４ インビトロ滞留時間検査
口腔フィルム剤が口腔内で唾液流動、洗い流し等の機械的因子の影響を受けた後、口腔内に滞留できる時間をシミュレートするために、以下の装置を特別に製造した。上部は直線往復運動の機械装置であり、伸縮レバーにスライドガラスが固定され、スライドガラスに５％（ｗ／ｗ）ムチン溶液が十分に塗布され、口腔粘膜の表面をシミュレートするために用いられ、裁断された薬物が担持されていないブランク口腔フィルム剤とオタネニンジン口腔フィルム剤の薬物含有層をその表面に貼り付け、２ｇの重りをフィルム剤の表面に３０ｓ置き、下部は人工唾液を試験媒体とし、スライドガラスが上下に移動し、フィルム剤の上縁が人工唾液に浸漬し、下縁が人工唾液から離れるのを１回と計算し、機械装置を６０回／ｍｉｎに設定し、フィルム剤がスライドガラスから完全に離れる時間を記録して、口腔フィルム剤の口腔内での滞留時間をシミュレートした。
４．２．５ 引張強度検査
中華人民共和国国家標準ＧＢＴ １０４０．２－２００６の要件に従って、薬物が担持されていないブランク口腔フィルム剤とオタネニンジン口腔フィルム剤をダンベルカッターでダンベル形状に裁断し、裁断されたフィルム剤をＷＤＴ－１０電子万能試験機の２つのクランプ間のゲージ距離４０ｍｍに固定し、口腔フィルム剤が破断するまで、口腔フィルム剤は５０ｍｍ／ｍｉｎの速度で長手方向に引き伸ばされ、６つのサンプルを測定した。計算式を式５、式６に示す。
４．２．６ 靭性検査
ＳＭＳ Ｐｌｕｓテクスチャ分析器のＣ００２ＳＴプローブ（直径が２ｍｍである）を使用して、プローブの下向きの運動速度が０．５ｍｍ／ｓであり、テクスチャ分析器のクランプに固定された薬物が担持されていないブランク口腔フィルム剤とオタネニンジン口腔フィルム剤が貫通されるのに必要な力を測定し、穿刺力は、硬い物体の貫通に抵抗するフィルム剤の能力を反映でき、６つのサンプルを測定した。
４．２．７ 濡れ性検査
フィルム剤をＴｈｅｔａ ＱＣ光学接触角計の観測台に置き、液滴量が４μＬであり、１０ｓ安定した後に測定し、液滴の両側の角度を記録し、抽出物の添加による口腔フィルム剤への影響を考察した。濡れ角が＜９０°の場合、フィルム剤の表面が親水性を有することを意味し、角度が小さいほど材料の濡れ性が高いことを意味し、濡れ角が＞９０°の場合、フィルム剤の表面が疎水性を有することを意味し、角度が大きいほど材料の濡れ性が低いことを意味した。濡れ角＝１８０°の場合、材料が完全に疎水性であることを意味した。優れた濡れ性は、フィルム剤が口腔粘膜に密着して、フィルム材料から薬物を放出することを確保することができる。
４．２．８ 含有量の測定
オタネニンジン口腔フィルム剤を取り、細かく切った後、ＰＢＳ ５ｍＬを加え、一晩振盪した。３０ｍｉｎ超音波処理し、１５０００ｒｐｍで１５ｍｉｎ高速遠心分離した。上澄み液１ｍＬを取り、０．２２μｍの精密ろ過膜でろ過した後、「２．１．２．１」液相法で検出した。
４．２．９ 溶解率の測定
小カップ法を用いて溶解率を検出し、オタネニンジン口腔フィルム剤を５ｍＬの小カップに入れ、人工唾液４．５ｍＬを溶出媒体とした。小カップ内の温度は３７±０．５℃であり、回転数は６００ｒｐｍであり、サンプリング時間間隔は０、１、３、５、１０、１５、２０、３０および６０ｍｉｎであり、毎回０．３ｍＬサンプリングし、０．３ｍＬ液体を補充した。
４．２．１０ 安定性影響因子試験
製造されたオタネニンジン口腔フィルム剤に対して影響因子試験を行い、オタネニンジン口腔フィルム剤の包装、貯蔵条件に根拠を提供し、影響因子試験は全部で高温試験、高湿試験、強光試験に分けられた。
（１）高温試験
６錠のオタネニンジン口腔フィルム剤を開いたシャーレに積み重ね、シャーレを薬剤安定性試験箱に入れて温度を６０℃に設定し、恒温で１０ｄ放置し、それぞれ０ｄ、５ｄ、１０ｄにサンプルを取り出し、その外観、重量、薬物含有量をそれぞれ検出し、０ｄとデータを比較した。
（２）高湿試験
６錠のオタネニンジン口腔フィルム剤を開いたシャーレに積み重ね、シャーレを薬剤安定性試験箱に入れて温度を２５℃に、湿度を９０％±５％に設定し、恒温で１０ｄ放置し、それぞれ０ｄ、５ｄ、１０ｄにサンプルを取り出し、その外観、重量，薬物含有量をそれぞれ検出し、０ｄとデータを比較した。
（３）光照射試験
６錠のオタネニンジン口腔フィルム剤を開いたシャーレに積み重ね、シャーレを光照射インキュベーターに入れ、室温、湿潤条件下で、４５００ｌｘ±５００ｌｘ光照射し、恒温で１０ｄ放置し、それぞれ０ｄ、５ｄおよび１０ｄにサンプルを取り出し、その外観、重量、薬物含有量をそれぞれ検出し、０ｄとデータを比較した。
４．３ 結果
４．３．１ フィルム剤の外観
オタネニンジン口腔フィルム剤の外観を図１に示し、図１から、得られたオタネニンジン口腔フィルム剤は完全で滑らかであり、厚さが一致し、色が均一であり、明らかな気泡がなく、表面が淡黄色を呈し、特別な匂いがないことがわかった。
４．３．２ 微視的な検査
電子顕微鏡で結果を検査し、フィルム剤をコールドフィールドエミッション走査型電子顕微鏡下に置き、１０００倍に拡大した視野下で観察したところ、薬物が担持されていないブランク口腔フィルム剤とオタネニンジン口腔フィルム剤の表面は緻密で滑らかで平らであり、孔、気泡、しわ、薬物結晶は見られず、両者の表面形態に明らかな差はなかった。
４．３．３ 重量差異限界検査
フィルム剤の重量差異限界要件を表４－３に示す。オタネニンジン口腔フィルム剤の平均重量範囲は０．０２ｇ～０．２ｇであり、差異限界範囲を１０％以内に制御する必要がある。
重量差異限界検査の結果を表４－４に示す。オタネニンジン口腔フィルム剤２０錠を検査し、測定したところ、オタネニンジン口腔フィルム剤の重量差異限界は１０％以内であった。結果は、オタネニンジン口腔フィルム剤の重量差異限界が要件を満たすことを示している。
４．３．４ インビトロ滞留時間検査
オタネニンジン抽出物中のＲｇ１の放出には、オタネニンジン口腔フィルム剤が口腔内に長時間滞留し、薬物が頬粘膜を浸透して血液循環に入る必要がある。ここで、オタネニンジン口腔フィルム剤のインビトロ滞留時間が有意に延長され（ｐ＜０．０５）、実験では、溶液によるフィルム剤の侵食がフィルム剤の周囲から開始し、中心に向かって侵食され、またそれ自体のインビトロ接着性のため、薬物を担持したフィルム剤は口腔内の唾液の洗い流しをシミュレーションする状態で、３ｈ以上滞留できることが観察された。結果は、裏打ち層の添加により、溶液によるフィルム剤の浸食を効果的に防止し、インビトロ滞留時間を延長し、Ｒｇ１の放出、浸透を保証することができることを示している。
４．３．５ 引張強度検査
口腔フィルム剤の応力曲線と引張強度の結果を表４－５に示す。結果は、オタネニンジン抽出物の添加により、フィルム剤の最大抵抗力が低下し（ｐ＜０．０１）、引張強度が極めて有意に低下する（ｐ＜０．００１）ことを示している。オタネニンジン口腔フィルム剤の破断伸びが有意に上昇し（ｐ＜０．０１）、引張強度の検査結果は、ブランクフィルム剤が薬物を担持した後、元の均一な構造が破壊されることを示している。
ブランク口腔フィルム剤と比較して、＊ｐ＜０．０５、＊＊ｐ＜０．０１、＊＊＊ｐ＜０．００１であった。
４．３．６ 靭性検査
靭性検査の結果を表４－６に示す。２種類のフィルム剤は、フィルム剤の表面圧縮力にある程度抵抗できることを示しているが、薬物を担持したフィルム剤の穿刺抵抗力は有意に低下した（ｐ＜０．０５）。穿刺実験と引張実験は共に、口腔フィルム剤が薬物を担持した後にそれ自体の構造を破壊することを示しており、機械的特性の差異性を反映した。
注：＊ブランクフィルム剤の穿刺力と比較して、ｐ＜０．０５であった。
４．３．７ 濡れ性検査
濡れ性検査の結果を表４－７に示す。ブランク口腔フィルム剤とオタネニンジン口腔フィルム剤の濡れ角が９０°未満である場合、その表面が親水性、良好な濡れ性を有することを示しており、フィルム剤中のＲｇ１の放出に有利である。ここで、オタネニンジン口腔フィルム剤の濡れ角は、ブランク口腔フィルム剤の濡れ角と比較して有意に増加し（ｐ＜０．０５）、これは、抽出物の添加により、表面の疎水性が高まることを示しており、これはオタネニンジン抽出物の抽出方式に関連している可能性がある。オタネニンジンは７０％エタノールで抽出され、その結果、抽出物は一定の疎水性を有し、濡れ角が増加した。
注：＊ブランクフィルム剤の濡れ角と比較して、ｐ＜０．０５であった。
４．３．８ 含有量の測定
オタネニンジン口腔フィルム剤Ｒｇ１の含有量を表４－８に示す。ＲＳＤ＜５％は、口腔フィルム剤中のＲｇ１の含有量が均一であることを示している。
４．３．９ 溶解率
溶解率の結果を図２に示す。オタネニンジン口腔フィルム剤の人工唾液溶出媒体内での累積放出は８０％以上であり、６０ｍｉｎでの累積溶解率は約８８．５７％であり、溶解率は良好であった。
４．３．１０ 安定性影響因子試験
（１）高温試験
高温試験の結果を表４－９に示す。６０℃の高温条件下で、フィルム剤が曲がり、重量が減少し、これは、高温条件下でフィルム剤の水分が失われるためであり、Ｒｇ１の含有量は０ｄに比べて差異性を有さなかった。したがって、高温試験の結果は、該フィルム剤は常温または低温で保管する必要があることを示している。
（２）高湿試験
高湿試験の結果を表４－１０に示す。温度が２５℃、湿度が９０％±５％である条件下で、フィルム剤の変形が深刻であり、フィルム剤の四辺が収縮し、１０ｄに口腔フィルム剤の間に接着が発生し、フィルム剤が柔らかくなった。Ｒｇ１の含有量は０ｄと比較して差異性がなかった。高湿試験の結果は、該フィルム剤は高湿条件下で外観の変化が大きく、フィルム剤の保管に不利であり、湿潤環境下でフィルム剤の変質を引き起こす可能性があるため、該フィルム剤を乾燥した場所に密閉保管する必要があることを示している。
（３）光照射試験
光照射試験の結果を表４－１１に示す。強光４５００ｌｘ±５００ｌｘの条件下で、フィルム剤の形状が変化し、両端が中間に向かって反り、重量が減少し、Ｒｇ１の含有量は０ｄと比較して差異性がなかった。したがって、光照射試験の結果は、該フィルム剤を遮光して保管する必要があることを示している。
４．３．１ フィルム剤の外観
オタネニンジン口腔フィルム剤の外観を図１に示し、図１から、得られたオタネニンジン口腔フィルム剤は完全で滑らかであり、厚さが一致し、色が均一であり、明らかな気泡がなく、表面が淡黄色を呈し、特別な匂いがないことがわかった。
４．３．２ 微視的な検査
電子顕微鏡で結果を検査し、フィルム剤をコールドフィールドエミッション走査型電子顕微鏡下に置き、１０００倍に拡大した視野下で観察したところ、薬物が担持されていないブランク口腔フィルム剤とオタネニンジン口腔フィルム剤の表面は緻密で滑らかで平らであり、孔、気泡、しわ、薬物結晶は見られず、両者の表面形態に明らかな差はなかった。
４．３．３ 重量差異限界検査
フィルム剤の重量差異限界要件を表４－３に示す。オタネニンジン口腔フィルム剤の平均重量範囲は０．０２ｇ～０．２ｇであり、差異限界範囲を１０％以内に制御する必要がある。
重量差異限界検査の結果を表４－４に示す。オタネニンジン口腔フィルム剤２０錠を検査し、測定したところ、オタネニンジン口腔フィルム剤の重量差異限界は１０％以内であった。結果は、オタネニンジン口腔フィルム剤の重量差異限界が要件を満たすことを示している。
オタネニンジン抽出物中のＲｇ１の放出には、オタネニンジン口腔フィルム剤が口腔内に長時間滞留し、薬物が頬粘膜を浸透して血液循環に入る必要がある。ここで、オタネニンジン口腔フィルム剤のインビトロ滞留時間が有意に延長され（ｐ＜０．０５）、実験では、溶液によるフィルム剤の侵食がフィルム剤の周囲から開始し、中心に向かって侵食され、またそれ自体のインビトロ接着性のため、薬物を担持したフィルム剤は口腔内の唾液の洗い流しをシミュレーションする状態で、３ｈ以上滞留できることが観察された。結果は、裏打ち層の添加により、溶液によるフィルム剤の浸食を効果的に防止し、インビトロ滞留時間を延長し、Ｒｇ１の放出、浸透を保証することができることを示している。
４．３．５ 引張強度検査
口腔フィルム剤の応力曲線と引張強度の結果を表４－５に示す。結果は、オタネニンジン抽出物の添加により、フィルム剤の最大抵抗力が低下し（ｐ＜０．０１）、引張強度が極めて有意に低下する（ｐ＜０．００１）ことを示している。オタネニンジン口腔フィルム剤の破断伸びが有意に上昇し（ｐ＜０．０１）、引張強度の検査結果は、ブランクフィルム剤が薬物を担持した後、元の均一な構造が破壊されることを示している。
４．３．６ 靭性検査
靭性検査の結果を表４－６に示す。２種類のフィルム剤は、フィルム剤の表面圧縮力にある程度抵抗できることを示しているが、薬物を担持したフィルム剤の穿刺抵抗力は有意に低下した（ｐ＜０．０５）。穿刺実験と引張実験は共に、口腔フィルム剤が薬物を担持した後にそれ自体の構造を破壊することを示しており、機械的特性の差異性を反映した。
４．３．７ 濡れ性検査
濡れ性検査の結果を表４－７に示す。ブランク口腔フィルム剤とオタネニンジン口腔フィルム剤の濡れ角が９０°未満である場合、その表面が親水性、良好な濡れ性を有することを示しており、フィルム剤中のＲｇ１の放出に有利である。ここで、オタネニンジン口腔フィルム剤の濡れ角は、ブランク口腔フィルム剤の濡れ角と比較して有意に増加し（ｐ＜０．０５）、これは、抽出物の添加により、表面の疎水性が高まることを示しており、これはオタネニンジン抽出物の抽出方式に関連している可能性がある。オタネニンジンは７０％エタノールで抽出され、その結果、抽出物は一定の疎水性を有し、濡れ角が増加した。
４．３．８ 含有量の測定
オタネニンジン口腔フィルム剤Ｒｇ１の含有量を表４－８に示す。ＲＳＤ＜５％は、口腔フィルム剤中のＲｇ１の含有量が均一であることを示している。
溶解率の結果を図２に示す。オタネニンジン口腔フィルム剤の人工唾液溶出媒体内での累積放出は８０％以上であり、６０ｍｉｎでの累積溶解率は約８８．５７％であり、溶解率は良好であった。
４．３．１０ 安定性影響因子試験
（１）高温試験
高温試験の結果を表４－９に示す。６０℃の高温条件下で、フィルム剤が曲がり、重量が減少し、これは、高温条件下でフィルム剤の水分が失われるためであり、Ｒｇ１の含有量は０ｄに比べて差異性を有さなかった。したがって、高温試験の結果は、該フィルム剤は常温または低温で保管する必要があることを示している。
高湿試験の結果を表４－１０に示す。温度が２５℃、湿度が９０％±５％である条件下で、フィルム剤の変形が深刻であり、フィルム剤の四辺が収縮し、１０ｄに口腔フィルム剤の間に接着が発生し、フィルム剤が柔らかくなった。Ｒｇ１の含有量は０ｄと比較して差異性がなかった。高湿試験の結果は、該フィルム剤は高湿条件下で外観の変化が大きく、フィルム剤の保管に不利であり、湿潤環境下でフィルム剤の変質を引き起こす可能性があるため、該フィルム剤を乾燥した場所に密閉保管する必要があることを示している。
光照射試験の結果を表４－１１に示す。強光４５００ｌｘ±５００ｌｘの条件下で、フィルム剤の形状が変化し、両端が中間に向かって反り、重量が減少し、Ｒｇ１の含有量は０ｄと比較して差異性がなかった。したがって、光照射試験の結果は、該フィルム剤を遮光して保管する必要があることを示している。
４．４ まとめ
製造されたオタネニンジン口腔フィルム剤の外観は、重量差異限界が標準に合致し、含有量が均一であり、走査型電子顕微鏡で観察したところ、フィルム剤は滑らかで平らであり、薬物結晶がなかった。シミュレーションされたインビトロ口腔環境下で３時間以上滞留でき、良好な機械的特性を備え、切断、使用および輸送が容易である。溶解率は１ｈ以内に８０％以上に達し、日陰で乾燥した場所に保管する必要がある。
製造されたオタネニンジン口腔フィルム剤の外観は、重量差異限界が標準に合致し、含有量が均一であり、走査型電子顕微鏡で観察したところ、フィルム剤は滑らかで平らであり、薬物結晶がなかった。シミュレーションされたインビトロ口腔環境下で３時間以上滞留でき、良好な機械的特性を備え、切断、使用および輸送が容易である。溶解率は１ｈ以内に８０％以上に達し、日陰で乾燥した場所に保管する必要がある。
試験例５ オタネニンジン口腔フィルム剤の薬物動態実験
５．１ 材料と機器
５．１．１ 実験動物
ゴールデンハムスター１２匹、雄、体重１１０±１０ｇ、長春長生生物技術有限公司から購入した。ライセンス番号：ＮＯ．ＳＣＸＫ（遼）２０２０－０００１、本学校の動物部屋で、温度（２２±２）℃、換気、湿度（５０±１０）％で１週間適応飼育した。
５．１．２ 材料と機器
５．１ 材料と機器
５．１．１ 実験動物
ゴールデンハムスター１２匹、雄、体重１１０±１０ｇ、長春長生生物技術有限公司から購入した。ライセンス番号：ＮＯ．ＳＣＸＫ（遼）２０２０－０００１、本学校の動物部屋で、温度（２２±２）℃、換気、湿度（５０±１０）％で１週間適応飼育した。
５．１．２ 材料と機器
５．２ 実験方法
５．２．１ 標準物質溶液の調製
Ｒｇ１標準物質溶液の調製：Ｒｇ１標準物質１．０ｍｇを精密に秤量し、メタノールで調製・溶解して１０ｍＬのメスフラスコに定容し、濃度が１００μｇ／ｍＬの標準物質原液を調製した。使用時に所望の濃度に希釈した。
内部標準物質のサンキノシドＲ１標準物質の調製（ＩＳ）：サンキノシドＲ１ １．０ｍｇを精密に秤量し、メタノールで溶解して１０ｍＬのメスフラスコに定容し、サンキノシドＲ１原液を調製し、使用直前にメタノールで５μｇ／ｍＬに希釈した。
５．２．１ クロマトグラフィー条件及と質量分析条件
クロマトグラフィー条件と質量分析条件を表５－３、表５－４に示す。
５．２．３ 血漿サンプルの処理
血漿サンプル１００μＬを取り、ＩＳ溶液（Ｒ１ ５μｇ／ｍＬ）２０μＬを加え、均一に混合した後、抽出溶媒であるメタノール１０００μＬを加え、１０ｍｉｎボルテックスして均一に混合した後、１５ｍｉｎ遠心分離した（１５０００ｒｐｍ）。すべての上澄み液を取り、窒素ブロワー装置で乾燥させた。メタノール２００μＬを加えて再溶解し、５ｍｉｎボルテックスして均一に混合した後、すべての溶液を取り、０．２２μｍのろ過膜でろ過し、サンプルを注入して分析した。
５．２．４ 方法論の考察
（１）線形関係の考察
ブランク血漿５０μＬを取り、異なる濃度の混合標準物質溶液５０μＬを加え、その濃度をそれぞれ０．１、０．５、１、５、１０、５０、１００、５００、１０００ｎｇ／ｍＬにして均一に混合した後、「２．１．３」項の血漿処理方法に従って処理した。Ｒｇ１ピーク面積とＲ１ピーク面積の比をＹとし、サンプル濃度をＸとし、線形回帰を行った。
（２）安定性の考察
ブランク血漿を取り、濃度がそれぞれ５、１０および５００ｎｇ／ｍＬのＲｇ１を含む品質管理血漿サンプルを調製した。血漿サンプルを室温で２４ｈ放置して短期安定性を考察し、オートサンプラーに２４ｈ保管してオートサンプラーの安定性を考察し、－８０℃で凍結融解を３回繰り返して凍結融解サイクル安定性を考察し、－８０℃で７ｄ冷凍保存してサンプルの長期安定性を考察した。
（３）精密さと正確さの考察
ブランク血漿を取り、低、中、高の３つの濃度のサンプルを調製し、「２．１．３」項の血漿サンプルの処理方法に従って処理し、ＵＨＰＬＣ－ＭＳ／ＭＳに注入して分析した。３つの分析バッチを連続的に考察し、各バッチの各濃度について６つのサンプルを調製し、Ｒｇ１のピーク面積およびＩＳのピーク面積を記録し、Ｒｇ１とＩＳの日内、日間ＲＳＤ値を計算した。
（４）マトリックス効果の考察
３つの濃度のＲｇ１標準物質溶液（５、１０、５００ｎｇ／ｍＬ）を調製し、「２．１．３」の方法に従って処理し、「２．１．２」の条件に従って測定し、各濃度のサンプルを６つ並行して調製し、Ｒｇ１およびＩＳのピーク面積１を記録し、ブランク血漿の上澄み液を取り、同様の３つの濃度（５、１０、５００ｎｇ／ｍＬ）に調製し、「２．１．３」の方法に従って処理し、「２．１．２」の条件に従って測定し、各濃度を６つ並行して調製し、Ｒｇ１およびＩＳのピーク面積２を記録し、ピーク面積２とピーク面積１の比を用いて、Ｒｇ１とＩＳのマトリックス効果を計算した。
（５）回収率の考察
ブランク血漿を取ってＩＳを加えない条件下で、「２．１．３」項の血漿サンプルの処理方法に従ってサンプルを処理し、窒素でブローして乾燥させた後、対応する濃度のＲｇ１および内部標準物質溶液を加えて、その濃度を５、１０、５００ｎｇ／ｍＬにし、各サンプルを６つ並行して製造し、Ｒｇ１およびＩＳのピーク面積３を記録した。ピーク面積３と「２．１．４．４」ピーク面積２の比を用いて、回収率を計算した。
５．２．３ ゴールデンハムスターにおけるインビボ薬物動態研究
７日間の適応飼育の間、毎日、ゴールデンハムスターの頬袋を生理食塩水に浸した綿棒で洗浄し、清潔に維持した。体重が１００～１２０ｇの範囲内にある健康な雄ゴールデンハムスター１２匹を胃内投与群および口腔頬粘膜投与群という２群にランダムに分けた。実験前に２４時間絶食させ、ゴールデンハムスターの頬袋を生理食塩水に浸した綿棒で洗浄した。２群のゴールデンハムスターにそれぞれ５００ｍｇ／ｋｇのオタネニンジン抽出物および等量のオタネニンジン口腔フィルム剤（同時にゴールデンハムスターの左右頬袋に入れた）を投与し、投与してから０、０．０８、０．２５、０．５、０．７５、１、１．５、２、３、４、５、６ｈ後に眼窩静脈叢から０．３ｍＬ／回採血し、ヘパリンナトリウム生理食塩水で湿潤させたＴｕｂｅ管に入れた。採取した全血を遠心分離し（１５０００ｒｐｍ、１０ｍｉｎ）、上澄み液１００μＬを取り、「２．１．３」項に従って処理し、「２．１．２」の条件に従って測定し、データを記録した。
５．２．４ データ処理
ＤＡＳ ２．０ソフトウェアを用いて、1-コンパートメントモデル法に従って主な薬物動態学パラメータを計算し、表５－８に示す。相対的生物学的利用能の計算式を式７に示す。
式７において、Ｆは相対的生物学的利用能であり、ＡＵＣａは口腔頬粘膜投与のＡＵＣであり、ＡＵＣｂは経口投与のＡＵＣであり、ＸａおよびＸｂはそれぞれ、口腔頬粘膜投与および経口投与用量である。
５．２．１ 標準物質溶液の調製
Ｒｇ１標準物質溶液の調製：Ｒｇ１標準物質１．０ｍｇを精密に秤量し、メタノールで調製・溶解して１０ｍＬのメスフラスコに定容し、濃度が１００μｇ／ｍＬの標準物質原液を調製した。使用時に所望の濃度に希釈した。
内部標準物質のサンキノシドＲ１標準物質の調製（ＩＳ）：サンキノシドＲ１ １．０ｍｇを精密に秤量し、メタノールで溶解して１０ｍＬのメスフラスコに定容し、サンキノシドＲ１原液を調製し、使用直前にメタノールで５μｇ／ｍＬに希釈した。
５．２．１ クロマトグラフィー条件及と質量分析条件
クロマトグラフィー条件と質量分析条件を表５－３、表５－４に示す。
血漿サンプル１００μＬを取り、ＩＳ溶液（Ｒ１ ５μｇ／ｍＬ）２０μＬを加え、均一に混合した後、抽出溶媒であるメタノール１０００μＬを加え、１０ｍｉｎボルテックスして均一に混合した後、１５ｍｉｎ遠心分離した（１５０００ｒｐｍ）。すべての上澄み液を取り、窒素ブロワー装置で乾燥させた。メタノール２００μＬを加えて再溶解し、５ｍｉｎボルテックスして均一に混合した後、すべての溶液を取り、０．２２μｍのろ過膜でろ過し、サンプルを注入して分析した。
５．２．４ 方法論の考察
（１）線形関係の考察
ブランク血漿５０μＬを取り、異なる濃度の混合標準物質溶液５０μＬを加え、その濃度をそれぞれ０．１、０．５、１、５、１０、５０、１００、５００、１０００ｎｇ／ｍＬにして均一に混合した後、「２．１．３」項の血漿処理方法に従って処理した。Ｒｇ１ピーク面積とＲ１ピーク面積の比をＹとし、サンプル濃度をＸとし、線形回帰を行った。
（２）安定性の考察
ブランク血漿を取り、濃度がそれぞれ５、１０および５００ｎｇ／ｍＬのＲｇ１を含む品質管理血漿サンプルを調製した。血漿サンプルを室温で２４ｈ放置して短期安定性を考察し、オートサンプラーに２４ｈ保管してオートサンプラーの安定性を考察し、－８０℃で凍結融解を３回繰り返して凍結融解サイクル安定性を考察し、－８０℃で７ｄ冷凍保存してサンプルの長期安定性を考察した。
（３）精密さと正確さの考察
ブランク血漿を取り、低、中、高の３つの濃度のサンプルを調製し、「２．１．３」項の血漿サンプルの処理方法に従って処理し、ＵＨＰＬＣ－ＭＳ／ＭＳに注入して分析した。３つの分析バッチを連続的に考察し、各バッチの各濃度について６つのサンプルを調製し、Ｒｇ１のピーク面積およびＩＳのピーク面積を記録し、Ｒｇ１とＩＳの日内、日間ＲＳＤ値を計算した。
（４）マトリックス効果の考察
３つの濃度のＲｇ１標準物質溶液（５、１０、５００ｎｇ／ｍＬ）を調製し、「２．１．３」の方法に従って処理し、「２．１．２」の条件に従って測定し、各濃度のサンプルを６つ並行して調製し、Ｒｇ１およびＩＳのピーク面積１を記録し、ブランク血漿の上澄み液を取り、同様の３つの濃度（５、１０、５００ｎｇ／ｍＬ）に調製し、「２．１．３」の方法に従って処理し、「２．１．２」の条件に従って測定し、各濃度を６つ並行して調製し、Ｒｇ１およびＩＳのピーク面積２を記録し、ピーク面積２とピーク面積１の比を用いて、Ｒｇ１とＩＳのマトリックス効果を計算した。
（５）回収率の考察
ブランク血漿を取ってＩＳを加えない条件下で、「２．１．３」項の血漿サンプルの処理方法に従ってサンプルを処理し、窒素でブローして乾燥させた後、対応する濃度のＲｇ１および内部標準物質溶液を加えて、その濃度を５、１０、５００ｎｇ／ｍＬにし、各サンプルを６つ並行して製造し、Ｒｇ１およびＩＳのピーク面積３を記録した。ピーク面積３と「２．１．４．４」ピーク面積２の比を用いて、回収率を計算した。
５．２．３ ゴールデンハムスターにおけるインビボ薬物動態研究
７日間の適応飼育の間、毎日、ゴールデンハムスターの頬袋を生理食塩水に浸した綿棒で洗浄し、清潔に維持した。体重が１００～１２０ｇの範囲内にある健康な雄ゴールデンハムスター１２匹を胃内投与群および口腔頬粘膜投与群という２群にランダムに分けた。実験前に２４時間絶食させ、ゴールデンハムスターの頬袋を生理食塩水に浸した綿棒で洗浄した。２群のゴールデンハムスターにそれぞれ５００ｍｇ／ｋｇのオタネニンジン抽出物および等量のオタネニンジン口腔フィルム剤（同時にゴールデンハムスターの左右頬袋に入れた）を投与し、投与してから０、０．０８、０．２５、０．５、０．７５、１、１．５、２、３、４、５、６ｈ後に眼窩静脈叢から０．３ｍＬ／回採血し、ヘパリンナトリウム生理食塩水で湿潤させたＴｕｂｅ管に入れた。採取した全血を遠心分離し（１５０００ｒｐｍ、１０ｍｉｎ）、上澄み液１００μＬを取り、「２．１．３」項に従って処理し、「２．１．２」の条件に従って測定し、データを記録した。
５．２．４ データ処理
ＤＡＳ ２．０ソフトウェアを用いて、1-コンパートメントモデル法に従って主な薬物動態学パラメータを計算し、表５－８に示す。相対的生物学的利用能の計算式を式７に示す。
５．３ 実験結果
５．３．１ ゴールデンハムスター頬袋の外観
ゴールデンハムスターの頬袋を開けると、豊富な毛細血管および大面積の頬粘膜が観察され、オタネニンジン口腔フィルム剤は頬粘膜と密着した後、排出できず、口腔フィルム剤の薬物動態学的モデルとして非常に適している。
５．３．２ ＵＨＰＬＣ－ＭＳ／ＭＳ方法論の考察結果
（１）検量線
ＵＨＰＬＣ－ＭＳ／ＭＳで検出されたゴールデンハムスター血漿中のＲｇ１とＲ１のイオンクロマトグラムから、Ｒｇ１とＲ１は「２．１．２」項のクロマトグラフィー条件と質量分析条件下で、クロマトグラフィーピークの形状が鋭いことがわかった。同時に、血漿中の内因性物質または代謝産物は標的成分の測定に干渉せず、Ｒｇ１とＲ１の保持時間はそれぞれ３．８１ｍｉｎ，３．６５ｍｉｎであった。回帰方程式は、Ｙ＝７７０．４４Ｘ－１４４．０５であり、ゴールデンハムスター血漿中のＲｇ１は、０．１～１０００ｎｇ／ｍＬの範囲内で直線関係が良好であり、Ｒ２＝０．９９９９であった。
（２）安定性の考察
安定性の考察、実験結果を表５－５に示す。結果は、４種類の処理方式における血漿サンプルの安定性が薬局方の関連規定ＲＳＤ＜１０％に合致し、血漿サンプルの処理方法およびＵＨＰＬＣ－ＭＳ／ＭＳ検出方法が合理的であることを示している。
（３）精密さの考察
精密さの考察、実験結果を表５－６に示す。Ｒｇ１の日内精密さと日間精密さは両方とも３％未満であり、薬局方の規定に合致する。
（４）回収率とマトリックス効果の考察
マトリックス効果の考察結果を表５－７に示す。表から、該方法の回収率は＞８０％であり、マトリックス効果と回収率の偏差は８％未満であり、サンプルの処理方法が安定して信頼できることを示している。
５．３．３ 平均血中濃度－時間曲線
ゴールデンハムスターに同じ用量のオタネニンジン抽出物（５００ｍｇ／ｋｇ）を胃内投与および口腔頬粘膜投与した後、血漿中のＲｇ１の平均血中濃度－時間曲線を図３に示す。胃内投与群と比較して、口腔頬粘膜投与群のＲｇ１血中濃度－時間曲線下面積ＡＵＣが有意に増大した。胃内投与の場合、約１．５ｈで第２の薬物ピークが現れ、これは、ゴールデンハムスターの胃腸管の酸性環境においてジンセノサイドの間に相互変換が起こり、血漿中のＲｇ１の含有量が増加したためであり、第２の薬物ピークが現れる具体的な理由については、さらなる研究が必要である。
５．３．４ ゴールデンハムスターにおけるインビボ薬物動態学パラメータ分析
測定されたデータから主な動態学パラメーターを計算し、結果を表５－８に示す。同じ用量のオタネニンジン抽出物を投与した後、血漿中のＲｇ１の被測定成分のＡＵＣ（０－ｔ）は、胃内投与群が口腔頬粘膜投与群より有意に低かった（ｐ＜０．００１）。胃内投与群と比較して、口腔頬粘膜投与群は、ゴールデンハムスターにおけるＲｇ１の薬物半減期を有意に延長した（ｐ＜０．０５）。しかしながら、Ｃｍａｘには有意差がなく、ＡＵＣ（０－ｔ）は、口腔頬粘膜投与群が胃内投与群より高いことを示しており、これは、オタネニンジン口腔フィルム剤がゴールデンハムスターの頬袋に約３ｈ付着でき、頬粘膜を通って全身血液循環に入るためである。口腔頬粘膜投与の相対的生物学的利用能Ｆは３６９．５７％であり、オタネニンジン口腔フィルム剤の製造が製剤の目的を達成したことを示している。
胃内投与群Ｒｇ１と比較して、＊ｐ＜０．０５、＊＊ｐ＜０．０１、＊＊＊ｐ＜０．００１であった。
５．３．１ ゴールデンハムスター頬袋の外観
ゴールデンハムスターの頬袋を開けると、豊富な毛細血管および大面積の頬粘膜が観察され、オタネニンジン口腔フィルム剤は頬粘膜と密着した後、排出できず、口腔フィルム剤の薬物動態学的モデルとして非常に適している。
５．３．２ ＵＨＰＬＣ－ＭＳ／ＭＳ方法論の考察結果
（１）検量線
ＵＨＰＬＣ－ＭＳ／ＭＳで検出されたゴールデンハムスター血漿中のＲｇ１とＲ１のイオンクロマトグラムから、Ｒｇ１とＲ１は「２．１．２」項のクロマトグラフィー条件と質量分析条件下で、クロマトグラフィーピークの形状が鋭いことがわかった。同時に、血漿中の内因性物質または代謝産物は標的成分の測定に干渉せず、Ｒｇ１とＲ１の保持時間はそれぞれ３．８１ｍｉｎ，３．６５ｍｉｎであった。回帰方程式は、Ｙ＝７７０．４４Ｘ－１４４．０５であり、ゴールデンハムスター血漿中のＲｇ１は、０．１～１０００ｎｇ／ｍＬの範囲内で直線関係が良好であり、Ｒ２＝０．９９９９であった。
（２）安定性の考察
安定性の考察、実験結果を表５－５に示す。結果は、４種類の処理方式における血漿サンプルの安定性が薬局方の関連規定ＲＳＤ＜１０％に合致し、血漿サンプルの処理方法およびＵＨＰＬＣ－ＭＳ／ＭＳ検出方法が合理的であることを示している。
精密さの考察、実験結果を表５－６に示す。Ｒｇ１の日内精密さと日間精密さは両方とも３％未満であり、薬局方の規定に合致する。
マトリックス効果の考察結果を表５－７に示す。表から、該方法の回収率は＞８０％であり、マトリックス効果と回収率の偏差は８％未満であり、サンプルの処理方法が安定して信頼できることを示している。
ゴールデンハムスターに同じ用量のオタネニンジン抽出物（５００ｍｇ／ｋｇ）を胃内投与および口腔頬粘膜投与した後、血漿中のＲｇ１の平均血中濃度－時間曲線を図３に示す。胃内投与群と比較して、口腔頬粘膜投与群のＲｇ１血中濃度－時間曲線下面積ＡＵＣが有意に増大した。胃内投与の場合、約１．５ｈで第２の薬物ピークが現れ、これは、ゴールデンハムスターの胃腸管の酸性環境においてジンセノサイドの間に相互変換が起こり、血漿中のＲｇ１の含有量が増加したためであり、第２の薬物ピークが現れる具体的な理由については、さらなる研究が必要である。
５．３．４ ゴールデンハムスターにおけるインビボ薬物動態学パラメータ分析
測定されたデータから主な動態学パラメーターを計算し、結果を表５－８に示す。同じ用量のオタネニンジン抽出物を投与した後、血漿中のＲｇ１の被測定成分のＡＵＣ（０－ｔ）は、胃内投与群が口腔頬粘膜投与群より有意に低かった（ｐ＜０．００１）。胃内投与群と比較して、口腔頬粘膜投与群は、ゴールデンハムスターにおけるＲｇ１の薬物半減期を有意に延長した（ｐ＜０．０５）。しかしながら、Ｃｍａｘには有意差がなく、ＡＵＣ（０－ｔ）は、口腔頬粘膜投与群が胃内投与群より高いことを示しており、これは、オタネニンジン口腔フィルム剤がゴールデンハムスターの頬袋に約３ｈ付着でき、頬粘膜を通って全身血液循環に入るためである。口腔頬粘膜投与の相対的生物学的利用能Ｆは３６９．５７％であり、オタネニンジン口腔フィルム剤の製造が製剤の目的を達成したことを示している。
５．４ まとめ
オタネニンジン抽出物が口腔フィルム剤に製造された後、ゴールデンハムスターの頬粘膜の表面に長時間付着され、血中Ｒｇ１の消失半減期が有意に延長される。胃内投与の方式と比較して、ＡＵＣ（０－ｔ）は３．７０倍増大し、相対的生物学的利用能は３６９．５７％であり、結果は、オタネニンジン口腔フィルム剤が製剤の目的を達成し、生物学的利用能を効果的に向上させることができることを示している。
オタネニンジン抽出物が口腔フィルム剤に製造された後、ゴールデンハムスターの頬粘膜の表面に長時間付着され、血中Ｒｇ１の消失半減期が有意に延長される。胃内投与の方式と比較して、ＡＵＣ（０－ｔ）は３．７０倍増大し、相対的生物学的利用能は３６９．５７％であり、結果は、オタネニンジン口腔フィルム剤が製剤の目的を達成し、生物学的利用能を効果的に向上させることができることを示している。
以上の実施例からわかるように、本発明が提供するオタネニンジン抽出物のフィルム剤の製造における使用は、エタノール水溶液を抽出溶媒とし、還流抽出によりジンセノサイドＲｇ１を効果的に抽出し、得られたオタネニンジン抽出物中のジンセノサイドＲｇ１の含有量が高くなるように適切なパラメータ範囲を限定することにより、原料コストを削減し、大量生産に適している。
本発明が提供するオタネニンジン口腔フィルム剤は、皮膚よりもバリア機能の弱い口腔頬粘膜に直接作用し、皮膚角質層のジンセノサイドの浸透に対する阻害作用と初回通過効果を避けることができ、さらにＲｇ１の生物学的利用能を向上させる役割を果たすことができる。同時に、前記オタネニンジン口腔フィルム剤は滑らかで平らであり、薬物結晶がなく、良好な機械的性能を備え、溶解率が良好であり、服用しやすく、患者のコンプライアンスが良好である。
上記実施例は本発明を詳細に説明したが、それは本発明の一部の実施例に過ぎず、すべての実施例ではなく、進歩性なしに本実施例に基づいて他の実施例を取得することができ、これらの実施例はいずれも本発明の保護範囲に属する。
Claims (2)
- オタネニンジン口腔フィルム剤の製造方法であって、前記オタネニンジン口腔フィルム剤は順に積層されている裏打ち層および薬物含有層を含み、
前記薬物含有層は、質量部数で、ヒドロキシプロピルメチルセルロース１０～１２部、カルボマー０．１～１部、オタネニンジン抽出物９～１１部および脂肪酸０．１～０．３部を含み、
前記裏打ち層は、前記ヒドロキシプロピルメチルセルロースの質量部数を基準として、エチルセルロース０．６～０．８部を含み、
前記脂肪酸は、カプロン酸、カプリル酸、カプリン酸、ラウリン酸、ステアリン酸、オレイン酸およびリノール酸のうちの１種以上を含み、
オタネニンジン抽出物の製造方法は、エタノール水溶液を抽出溶媒とし、オタネニンジンを還流抽出し、前記オタネニンジン抽出物を得るステップを含み、
前記オタネニンジンとエタノール水溶液の質量比が０．５～１：６～８であり、
前記エタノール水溶液におけるエタノールの体積分率が６５～７５％であり、
前記還流抽出の単回抽出時間が０．５～１．５時間であり、回数が１～３回であり、
前記オタネニンジン口腔フィルム剤の製造方法は、
エチルセルロース溶液を接着防止容器に順に第１の注入および第１の成形を行い、裏打ち層を得るステップと、
カルボマーを水中で膨潤させ、ヒドロキシプロピルメチルセルロースと第１の混合を行い、第１のフィルム液を得るステップと、
脂肪酸溶液と前記第１のフィルム液との第２の混合を行い、第２のフィルム液を得るステップと、
前記オタネニンジン抽出物と前記第２のフィルム液との第３の混合を行い、薬物含有層フィルム液を得るステップと、
前記薬物含有層フィルム液を裏打ち層に順に第２の注入および第２の成形を行い、前記オタネニンジン口腔フィルム剤を得るステップと、を含み、
前記エチルセルロース溶液の濃度は、０．０１～０．０４ｇ／ｍＬであり、前記エチルセルロース溶液の密度は、０．７～０．９ｇ／ｃｍ ３ であり、前記エチルセルロース溶液の溶媒は、エタノールであり、前記第１の成形は、真空乾燥の方式で行い、
前記第１の混合の温度は７０～９０℃であり、
前記脂肪酸溶液の濃度は、０．４～０．５ｇ／ｍＬであり、前記脂肪酸溶液の溶媒は、プロピレングリコールであり、
前記第２の成形は真空乾燥の方式で行い、
前記第１の成形の温度は５０～７０℃であり、時間は２０～４０分であり、
前記第２の成形の温度は６０～８０℃であり、時間は１～３時間である
ことを特徴とするオタネニンジン口腔フィルム剤の製造方法。 - 前記薬物含有層フィルム液の密度は１．３～１．４ｇ／ｃｍ３であることを特徴とする請求項１に記載の製造方法。
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| Journal of Drug Delivery Science and Technology，2022年，Vol.76，No.103701 |
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