JP7429391B2 - 表面が親水化された生分解性繊維からなる骨再生用材料、及びその製造方法 - Google Patents
表面が親水化された生分解性繊維からなる骨再生用材料、及びその製造方法 Download PDFInfo
- Publication number
- JP7429391B2 JP7429391B2 JP2020554976A JP2020554976A JP7429391B2 JP 7429391 B2 JP7429391 B2 JP 7429391B2 JP 2020554976 A JP2020554976 A JP 2020554976A JP 2020554976 A JP2020554976 A JP 2020554976A JP 7429391 B2 JP7429391 B2 JP 7429391B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- biodegradable
- biodegradable fiber
- fiber
- calcium carbonate
- particles
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 239000000835 fiber Substances 0.000 title claims description 199
- 239000000463 material Substances 0.000 title claims description 61
- 230000010478 bone regeneration Effects 0.000 title claims description 38
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims description 12
- 230000005660 hydrophilic surface Effects 0.000 title description 2
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 192
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims description 106
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 claims description 102
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 claims description 98
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 claims description 96
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 claims description 96
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 claims description 66
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 59
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 52
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 38
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 31
- BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L disodium hydrogen phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].OP([O-])([O-])=O BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 29
- 230000002188 osteogenic effect Effects 0.000 claims description 23
- 229920006167 biodegradable resin Polymers 0.000 claims description 14
- 229920005989 resin Polymers 0.000 claims description 10
- 239000011347 resin Substances 0.000 claims description 10
- 229920001606 poly(lactic acid-co-glycolic acid) Polymers 0.000 claims description 9
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 claims description 8
- 230000009477 glass transition Effects 0.000 claims description 7
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims description 5
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 50
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 32
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 23
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 22
- 239000010954 inorganic particle Substances 0.000 description 18
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 16
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 15
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L Carbonate Chemical compound [O-]C([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 12
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 11
- 239000002131 composite material Substances 0.000 description 11
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 11
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 11
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 11
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 10
- 230000008569 process Effects 0.000 description 10
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 9
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 8
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 8
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 8
- 238000009987 spinning Methods 0.000 description 8
- 238000010306 acid treatment Methods 0.000 description 7
- 229910052586 apatite Inorganic materials 0.000 description 7
- KPUWHANPEXNPJT-UHFFFAOYSA-N disiloxane Chemical class [SiH3]O[SiH3] KPUWHANPEXNPJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 7
- 238000001523 electrospinning Methods 0.000 description 7
- VSIIXMUUUJUKCM-UHFFFAOYSA-D pentacalcium;fluoride;triphosphate Chemical compound [F-].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O VSIIXMUUUJUKCM-UHFFFAOYSA-D 0.000 description 7
- 229920005594 polymer fiber Polymers 0.000 description 7
- PYWVYCXTNDRMGF-UHFFFAOYSA-N rhodamine B Chemical compound [Cl-].C=12C=CC(=[N+](CC)CC)C=C2OC2=CC(N(CC)CC)=CC=C2C=1C1=CC=CC=C1C(O)=O PYWVYCXTNDRMGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 229940043267 rhodamine b Drugs 0.000 description 7
- 229910052710 silicon Inorganic materials 0.000 description 7
- XUIMIQQOPSSXEZ-UHFFFAOYSA-N Silicon Chemical compound [Si] XUIMIQQOPSSXEZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000002657 fibrous material Substances 0.000 description 6
- 230000011164 ossification Effects 0.000 description 6
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 6
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 6
- 239000010703 silicon Substances 0.000 description 6
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 6
- 230000003592 biomimetic effect Effects 0.000 description 5
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 5
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 5
- 238000007598 dipping method Methods 0.000 description 5
- 238000002074 melt spinning Methods 0.000 description 5
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 5
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 5
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 4
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 4
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 4
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 description 4
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 description 4
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 4
- 238000000445 field-emission scanning electron microscopy Methods 0.000 description 4
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 4
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 4
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 230000021164 cell adhesion Effects 0.000 description 3
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 3
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 3
- 239000004745 nonwoven fabric Substances 0.000 description 3
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 3
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 3
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920000742 Cotton Polymers 0.000 description 2
- UEZVMMHDMIWARA-UHFFFAOYSA-N Metaphosphoric acid Chemical compound OP(=O)=O UEZVMMHDMIWARA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 2
- 229910001424 calcium ion Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 2
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 2
- 230000009881 electrostatic interaction Effects 0.000 description 2
- KIUKXJAPPMFGSW-MNSSHETKSA-N hyaluronan Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)C1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H](C(O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O3)C(O)=O)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)[C@@H](C(O)=O)O1 KIUKXJAPPMFGSW-MNSSHETKSA-N 0.000 description 2
- 229940099552 hyaluronan Drugs 0.000 description 2
- 229920002674 hyaluronan Polymers 0.000 description 2
- 238000002354 inductively-coupled plasma atomic emission spectroscopy Methods 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 2
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 2
- 239000012890 simulated body fluid Substances 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 229910000391 tricalcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000019731 tricalcium phosphate Nutrition 0.000 description 2
- 229940078499 tricalcium phosphate Drugs 0.000 description 2
- 229910021532 Calcite Inorganic materials 0.000 description 1
- BHPQYMZQTOCNFJ-UHFFFAOYSA-N Calcium cation Chemical compound [Ca+2] BHPQYMZQTOCNFJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JVTAAEKCZFNVCJ-REOHCLBHSA-N L-lactic acid Chemical compound C[C@H](O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- 229920001410 Microfiber Polymers 0.000 description 1
- 229920006127 amorphous resin Polymers 0.000 description 1
- 238000005452 bending Methods 0.000 description 1
- 239000012620 biological material Substances 0.000 description 1
- AXCZMVOFGPJBDE-UHFFFAOYSA-L calcium dihydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[Ca+2] AXCZMVOFGPJBDE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000000920 calcium hydroxide Substances 0.000 description 1
- 229910001861 calcium hydroxide Inorganic materials 0.000 description 1
- CADZRPOVAQTAME-UHFFFAOYSA-L calcium;hydroxy phosphate Chemical compound [Ca+2].OOP([O-])([O-])=O CADZRPOVAQTAME-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-N carbonic acid Chemical compound OC(O)=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 1
- 239000013068 control sample Substances 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- MNNHAPBLZZVQHP-UHFFFAOYSA-N diammonium hydrogen phosphate Chemical compound [NH4+].[NH4+].OP([O-])([O-])=O MNNHAPBLZZVQHP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910000388 diammonium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019838 diammonium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 230000001700 effect on tissue Effects 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 230000005611 electricity Effects 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 1
- 229920001477 hydrophilic polymer Polymers 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 229910052588 hydroxylapatite Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000007943 implant Substances 0.000 description 1
- 239000012784 inorganic fiber Substances 0.000 description 1
- 239000011256 inorganic filler Substances 0.000 description 1
- 229910003475 inorganic filler Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910001410 inorganic ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000004898 kneading Methods 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 238000010899 nucleation Methods 0.000 description 1
- 229920000620 organic polymer Polymers 0.000 description 1
- 210000000963 osteoblast Anatomy 0.000 description 1
- XYJRXVWERLGGKC-UHFFFAOYSA-D pentacalcium;hydroxide;triphosphate Chemical compound [OH-].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O XYJRXVWERLGGKC-UHFFFAOYSA-D 0.000 description 1
- 239000013500 performance material Substances 0.000 description 1
- 238000009832 plasma treatment Methods 0.000 description 1
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 1
- 229920001432 poly(L-lactide) Polymers 0.000 description 1
- -1 poly(ethylene) Polymers 0.000 description 1
- 229920000747 poly(lactic acid) Polymers 0.000 description 1
- 229920001610 polycaprolactone Polymers 0.000 description 1
- 230000001376 precipitating effect Effects 0.000 description 1
- 230000002250 progressing effect Effects 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 239000005871 repellent Substances 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000001878 scanning electron micrograph Methods 0.000 description 1
- 238000007493 shaping process Methods 0.000 description 1
- 238000002791 soaking Methods 0.000 description 1
- 230000003068 static effect Effects 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- 230000003313 weakening effect Effects 0.000 description 1
- 238000004804 winding Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
- A61L27/02—Inorganic materials
- A61L27/12—Phosphorus-containing materials, e.g. apatite
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
- A61L27/14—Macromolecular materials
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
- A61L27/14—Macromolecular materials
- A61L27/18—Macromolecular materials obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
- A61L27/28—Materials for coating prostheses
- A61L27/30—Inorganic materials
- A61L27/32—Phosphorus-containing materials, e.g. apatite
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
- A61L27/40—Composite materials, i.e. containing one material dispersed in a matrix of the same or different material
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
- A61L27/50—Materials characterised by their function or physical properties, e.g. injectable or lubricating compositions, shape-memory materials, surface modified materials
- A61L27/58—Materials at least partially resorbable by the body
-
- D—TEXTILES; PAPER
- D06—TREATMENT OF TEXTILES OR THE LIKE; LAUNDERING; FLEXIBLE MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
- D06M—TREATMENT, NOT PROVIDED FOR ELSEWHERE IN CLASS D06, OF FIBRES, THREADS, YARNS, FABRICS, FEATHERS OR FIBROUS GOODS MADE FROM SUCH MATERIALS
- D06M11/00—Treating fibres, threads, yarns, fabrics or fibrous goods made from such materials, with inorganic substances or complexes thereof; Such treatment combined with mechanical treatment, e.g. mercerising
- D06M11/68—Treating fibres, threads, yarns, fabrics or fibrous goods made from such materials, with inorganic substances or complexes thereof; Such treatment combined with mechanical treatment, e.g. mercerising with phosphorus or compounds thereof, e.g. with chlorophosphonic acid or salts thereof
- D06M11/70—Treating fibres, threads, yarns, fabrics or fibrous goods made from such materials, with inorganic substances or complexes thereof; Such treatment combined with mechanical treatment, e.g. mercerising with phosphorus or compounds thereof, e.g. with chlorophosphonic acid or salts thereof with oxides of phosphorus; with hypophosphorous, phosphorous or phosphoric acids or their salts
- D06M11/71—Salts of phosphoric acids
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Oral & Maxillofacial Surgery (AREA)
- Transplantation (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Inorganic Chemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Textile Engineering (AREA)
- Composite Materials (AREA)
- Materials Engineering (AREA)
- Materials For Medical Uses (AREA)
- Chemical Or Physical Treatment Of Fibers (AREA)
Description
骨形成性粒子を含有する生分解性繊維の表面にバテライト相炭酸カルシウム粒子を、摩擦帯電法を用いて静電的に付着させ、
前記バテライト相炭酸カルシウム粒子が付着した前記生分解性繊維を、前記生分解性繊維の生分解性樹脂のガラス転移点以上の温度で加熱することによって、前記生分解性繊維の表面に前記バテライト相炭酸カルシウム粒子を接着固定し、
前記バテライト相炭酸カルシウム粒子が接着固定された前記生分解性繊維を所定の濃度のリン酸イオンを含む水溶液に所定時間浸漬することによって、前記生分解性繊維の表面に接着固定された前記バテライト相炭酸カルシウム粒子を起点として、非晶質リン酸カルシウムを前記生分解性繊維の表面に沿って成長させて前記生分解性繊維の表面全体を被覆し、
前記非晶質リン酸カルシウムで表面を被覆された前記生分解性繊維からなる骨再生用材料を前記リン酸イオンを含む水溶液から取り出して乾燥させる、
前記表面が親水化された生分解性繊維からなる骨再生用材料を製造する方法、という発明に到達した。
前記骨再生用材料を構成する前記生分解性繊維は骨形成性粒子を含有しており、
前記生分解性繊維の表面の全域が、実質的に結晶相を含まない非晶質リン酸カルシウム層で被覆されている、
表面が親水化された生分解性繊維からなる骨再生用材料、という発明に到達した。
骨形成性粒子を含有する生分解性繊維の表面にバテライト相炭酸カルシウム粒子を、摩擦帯電法を用いて静電的に付着させ、
前記バテライト相炭酸カルシウム粒子が付着した前記生分解性繊維を、前記生分解性繊維の生分解性樹脂のガラス転移点以上の温度で加熱することによって、前記生分解性繊維の表面に前記バテライト相炭酸カルシウム粒子を接着固定し、
前記バテライト相炭酸カルシウム粒子が接着固定された前記生分解性繊維を所定の濃度のリン酸イオンを含む水溶液に所定時間浸漬することによって、前記生分解性繊維の表面に接着固定された前記バテライト相炭酸カルシウム粒子を起点として、非晶質リン酸カルシウムを前記生分解性繊維の表面に沿って成長させて前記生分解性繊維の表面全体を被覆し、
前記非晶質リン酸カルシウムで表面を被覆された前記生分解性繊維からなる骨再生用材料を前記リン酸イオンを含む水溶液から取り出して乾燥させる、
前記表面が親水化された生分解性繊維を製造する方法、という発明に到達した。
前記生分解性繊維は骨形成性粒子を含有しており、
前記生分解性繊維の表面の全域が、実質的に結晶相を含まない非晶質リン酸カルシウム層で被覆されている、
前記表面が親水化された生分解性繊維、という発明に到達した。
細胞培養基材を構成する前記生分解性繊維の表面にバテライト相炭酸カルシウム粒子を、摩擦帯電法を用いて静電的に付着させ、
前記バテライト相炭酸カルシウム粒子が付着した前記生分解性繊維を前記生分解性繊維の生分解性樹脂のガラス転移点以上の温度で加熱することによって、前記生分解性繊維の表面に前記バテライト相炭酸カルシウム粒子を接着固定し、
前記バテライト相炭酸カルシウム粒子が接着固定された前記生分解性繊維を所定の濃度のリン酸イオンを含む水溶液に所定時間浸漬することによって、前記生分解性繊維の表面に接着固定された前記バテライト相炭酸カルシウム粒子を起点として、非晶質リン酸カルシウムを前記生分解性繊維の表面に沿って成長させて前記生分解性繊維の表面全体を被覆し、
前記非晶質リン酸カルシウムで表面を被覆された前記生分解性繊維を前記リン酸イオンを含む水溶液から取り出して乾燥させる、
前記細胞培養基材を構成する前記生分解性繊維の表面を親水化する方法、という発明に到達した。
前記細胞培養用基材を構成する前記生分解性繊維は無機フィラーを含有しており、
前記生分解性繊維の表面の実質的に全域が非晶質リン酸カルシウム層で被覆されており、
前記非晶質リン酸カルシウム層は、リン酸カルシウムの一部に結晶構造に炭酸を含有する炭酸アパタイトを含んでもよい、
前記表面が親水化された生分解性繊維からなる細胞培養基材、という発明に到達した。
前記生分解性繊維は実質的に生分解性樹脂のみからなり、
前記生分解性繊維の表面の実質的に全域が非晶質リン酸カルシウム層で被覆されており、
前記表面が親水化された生分解性繊維、という発明に到達した。
生分解性繊維は実質的に生分解性樹脂のみからなり、無機粒子を含有していない。
<生分解性繊維>
本発明の骨再生用材料は、エレクトロスピニング法又はメルトスピニング法によって紡糸された生分解性繊維から構成される。本発明で用いる生分解性繊維にはリン酸カルシウム等の骨形成性粒子を含有し、材料が体内にインプラントされて生分解樹脂が分解されるとその過程で繊維に含有されている骨形成性粒子からイオンが溶出し、患部における骨形成を促進する。紡糸された生分解性繊維を綿状又は不織布状に回収することで、繊維質の骨再生用材料が形成される。
しかし、エレクトロスピニング法は装置のノズルから繊維状に出射された紡糸溶液がコレクターに到達する前の飛行中に飛行軌道が不安定化(bending instability)して巻回する過程で溶剤が揮発すると共に極細繊維化する現象を利用するものであるため、それで紡糸される繊維の径は通常数十nm~数μmであり、10μm以上の径にするのは困難である。本発明の発明者等は、口径が大きいノズルを下向きに設置し、シリンジに充填した紡糸溶液をノズルの出射口に速い速度で送り出して紡糸溶液を垂直下方に出射することによって、10μm以上の径の生分解性繊維を安定して紡糸することに成功している(特願2019-73453)。
本発明において骨再生用材料とは、生分解性繊維を不織布状又は綿状に回収したインプラント材料を含む。本発明の骨再生用材料の好ましい使用方法として、術者は、骨再生用材料をそのまま骨欠損部に充填するか、又はあらかじめ材料を血液と混和したうえで骨欠損部に埋め込む(図19参照)。
本発明において、骨形成性粒子とは、骨再生用材料に含有されて、それと共に人体にインプラントされることで、体液又は血液と接して骨形成を促進するイオンを溶出する無機粒子をいう。骨形成性粒子には、リン酸三カルシウム、ハイドロキシアパタイト、炭酸カルシウム等が含まれるが、これらに限定されない。
本発明において、摩擦帯電法を用いて生分解性繊維の表面に付着固定させる無機粒子としては、バテライト相炭酸カルシウム粒子を好適に用いる。炭酸カルシウムには、常温常圧で最安定なカルサイト相、準安定相であるアラゴナイト相、準安定なバテライト相が存在するが、リン酸イオンを含む水溶液に浸漬して粒子を起点としてリン酸カルシウム相を生成させるためには、水に対する溶解性が高いバテライト相が最も適している。
粒子形状で回収するバテライト相炭酸カルシウムの粒径の範囲は、粒子を付着させる対象である生分解性繊維の太さよりも小さいことが重要である。さらに、粒径は、大きいよりも小さい方がリン酸イオンを含む水溶液との反応が速くなるので好ましい。
本発明において摩擦帯電法とは、ポリマー繊維の表面に無機粒子を付着固定させるための方法をいう。具体的には、無機粒子の粉体と繊維材料とをプラスチック製の袋等の容器に収容して、その状態で収容物を容器ごと高速で上下又は前後左右に振動させると、無機粒子と繊維の樹脂表面とがこすれて静電気が発生し、発生した静電引力によって無機粒子が繊維材料の表面全体にまんべんなく付着される(図1参照)。または、材料をボールミルに投入し、ボールを加えず(ポットのみで)回転させることにて均一に付着させることができる。
無機粒子を表面に付着固定した繊維材料をリン酸イオンを含む水溶液に浸漬し、一定の時間、所定の温度条件下で静置する。その後、繊維材料をリン酸イオンを含む水溶液から取り出して、乾燥させる(図3参照)。
本発明において非晶質リン酸カルシウムには、炭酸アパタイト(Ca10-x(HPO4, CO3)x(PO4)6-x(OH, CO3)2-x・nH2O)及び/又はカルシウム欠損リン酸カルシウム(Ca10-x(HPO4)x(PO4)6-x(OH)2-x・nH2Oが含まれてもよい。非晶質リン酸カルシウムは、中性付近のpHで溶解性が高く、水と接すると短時間で溶解する。
本発明では、骨再生用材料をリン酸イオンを含む水溶液に浸漬すると、摩擦帯電法で繊維の表面に固定したバテライト相炭酸カルシウム粒子を起点として非晶質リン酸カルシウム層が繊維の表面に沿って生成し、繊維の表面全体を覆う。
本発明において、細胞培養基材とは、エレクトロスピニング法によって紡糸された生分解性繊維からなる不織布によって構成される。細胞培養基材を構成する生分解性繊維の表面を非晶質リン酸カルシウムによって被覆することによって繊維表面に対するタンパク質吸着が向上するので、高い細胞初期接着を得ることができる。
実験に用いるサンプルは以下に示す材料を用いて作製した。
・ReBOSSIS(登録商標)(外径10~60 μmの生分解性繊維からなる綿状骨再生用材料。 販売元ORTHOREBIRTH Co., LTD)ReBOSSIS(登録商標)の組成:PLGA30wt%/β-TCP40 wt%/SiV30 wt%)
・PLLA: PGA (85:15) Evonik社LG855S (D体を含まない)
・β-TCP:太平化学産業(株)β-TCPー100 粒径1.7mmのものを4μm程度に粉砕したβ-TCP粉砕品を用いた。
・SiV(ケイ素溶出型バテライト相炭酸カルシウム):水酸化カルシウム(試薬特級純度96%以上 和光純薬工業(株))、メタノール(試薬特級純度99.8%以上 和光純薬(株))、γ-アミノプロピルトリエトシシラン(SILQUEST A-1100 純度98.5%以上 モメンティブ・パーフォーマンス・マテリアルズ・ジャパン合同会社)、炭酸ガス(高純度液化炭酸ガス純度99.9% 大洋化学工業(株))を用いてSi含有量2.9重量%のバテライト相炭酸カルシウムを調製した。SiVの粒子径:1~1.5μm。SiVの製造方法の詳細は、特開平2008-100878(ケイ素溶出型炭酸カルシウム、及びその製造方法)に開示されている。
ステップ1.繊維表面にSiV粒子を接着
SiV粉末1.0 gとReBOSSIS(登録商標)0.1 gをガラスボトル(5 cmφ×10 cm)に入れて回転 (264 rpm, 2 min.)させて仮接着、熱処理した(60℃, 10 min.)。その後、試料表面に存在する静電的に付着していないSiV粒子をコンプレッサーにて除去して、サンプルを調製した。
ステップ2.サンプルをリン酸イオンを含む水溶液に浸漬
サンプル(SiV粉末を接着したReBOSSIS(登録商標))を37 ℃の条件下で異なる濃度 (19.2, 192 mM, 1.92 M)のリン酸水素二ナトリウム水溶液50 mlに5, 10 minそれぞれ浸漬した。
ステップ3.乾燥
サンプルをリン酸水素二ナトリウム水溶液から取り出し、その後乾燥機で乾燥させた (50℃, 2 h)。その結果得られたサンプルの繊維の表面のSEM画像をリン酸水素二ナトリウム水溶液の濃度ごとに、サンプル(19.2mM)、サンプル(192mM)、サンプル(1.92M)としてそれぞれ、図7(A)(B)、図8(A)(B)、図9(A)(B)に示す。
サンプル(19.2mM)、サンプル(192mM)、サンプル(1.92M)をそれぞれ20 mgを取り分けて試験管に入れ、重り(56.5 mg)を載せ2 min.プレスした。その後、重りを外し、Rhodamine Bを蒸留水に溶かした赤色溶液を試料に5 μl滴下し、親水性を評価した。その結果をそれぞれ 図10(A)(B)、図11(A)(B)、図12(A)(B)に示す。
(1)全体を通して、リン酸溶液の濃度を上昇させるにつれて赤色溶液が染み込むまでの時間が短くなる様子が観察された。
(2)全体を通して、リン酸イオンを含む水溶液に浸漬した時間が5分よりも10分のサンプルの方が赤色溶液が染み込むまでの時間が短くなる様子が観察された。
(3)19.2 mMでリン酸処理したサンプルに関しては、部分的にリン酸カルシウムあるいは他のリン酸カルシウム塩が生成してはいるが、付着量が不均一であったため赤色溶液が染み込むまでに時間を要したと思われる。処理時間を長くするにつれて染み込むまでの時間は短くなった。
(4)1.92 Mでリン酸処理した試料に関しては、繊維表面に孔が生成する様子が観察された。この孔は、SiV粒子が埋め込まれていた部分と考えられる。1.92 Mの高濃度で処理することで、PLGAが浸食されSiV粒子が脱落したと考えられる。1.92 Mでリン酸処理した試料に関しては、試料が一部崩れ、形状を維持できない様子が観察された。これは、ReBOSSIS(登録商標)の繊維がリン酸水素二ナトリウム水溶液(アルカリ性)によって侵食されたことを示していると考えられる。
バテライト相炭酸カルシウムからリン酸カルシウムを析出させるという目的のためにはリン酸水素二ナトリウムの濃度は高い方が良い(例えば192 mM/L)が、濃度が高すぎるとPLGAが侵されてSiV粒子が脱落する可能性がある。
その原因は、37℃で乾燥すると、4時間経っても十分に乾燥できず、リン酸液が付いたまま4時間も放置されることとなった結果、反応が進み、繊維の亀裂部分に高濃度のリン酸液がしみこみそこにリン酸カルシウムが析出してくるため、それが破壊の原因となったと考えられる。
このような現象を避けるためには、リン酸水素二ナトリウム水溶液に浸漬した後は50℃以上でできるだけ早く乾燥させる必要があると考えられる。温度の上限は110℃で限定できる可能性があるが、60℃以上の場合、析出したリン酸カルシウム相が再度PLGAに埋もれてしまう点から、50~60℃が最適と考えられる。
本発明の非晶質リン酸カルシウム被覆のタンパク質吸着に対して及ぼす影響を見るために、非晶質リン酸カルシウムで被覆したサンプル(192mM)に対するBSA吸着量とリン酸カルシウム被覆していないサンプルに対するBSA吸着量とを比較した。図13にその結果を示す。
(1)非晶質リン酸カルシウム被覆によって親水化したサンプルは、比表面積が大きいため、タンパク質の吸着量が大きくなったと考えられる。
(2)リン酸カルシウム被覆をしていないサンプルでは、繊維中に含まれる骨形成性粒子のSiVが表面付近にも存在するため、BSA分子のCOO-と静電相互作用によって吸着したと考えられる。
(3)非晶質リン酸カルシウム被覆で親水化したサンプルでは、繊維表面に存在する非晶質リン酸カルシウム表面のCa2+、SiV中のNH4+とBSA分子のCOO- が静電相互作用によって吸着に寄与していると考えられる。
(4)一定時間経過後に吸着量がほぼ一定になったのは、吸着サイトがなくなったためであると考えられる。
骨芽細胞様細胞MC3T3-E1株を使用して培養試験を行った。図14にその概要を示す。24ウェルプレート一穴あたり骨再生用材料を80 mg投入し、α-MEM培地を2 mL注入した後、細胞を播種し、37℃, 5 % CO2存在下で培養試験を行った。細胞播種密度は90,000 cells/mLで、培養タイムポイントはそれぞれ3 hr, 24 hr, 72 hrとした。ICP-AESによる培地中のイオン量の評価を行った後、未使用のウェルプレートに溶液を移してAlamar Blueを4時間反応させることによる代謝活性評価を行い、細胞が増殖した後の骨再生用材料についてはFE-SEMによる試料表面の形態観察を行った。
FE-SEMによる試料表面の形態観察からは、親水化した複合体は未処理の複合体に比べて凹凸が大きい粗な表面であることがわかった。細胞の被覆は親水化した複合体の方が多く、繊維表面を全体的に細胞が覆っていた。図16にその結果を示す。24時間の培養後の繊維表面は未処理の複合体も親水化した複合体もCaP相が生成されており、後者においてはCaP相の生成が進行していた。未処理の複合体でCaP相が部分的に生成されていたが、これはバイオミメティック法と同様の機序に拠るものと考えられる。図17にその結果を示す。
Claims (10)
- 表面が親水化された生分解性繊維からなる骨再生用材料を製造する方法であって、
骨形成性粒子を含有する生分解性繊維の表面にバテライト相炭酸カルシウム粒子を、摩擦帯電法を用いて静電的に付着させ、
前記バテライト相炭酸カルシウム粒子が付着した前記生分解性繊維を、前記生分解性繊維の生分解性樹脂のガラス転移点以上の温度で加熱することによって、前記生分解性繊維の表面に前記バテライト相炭酸カルシウム粒子を接着固定し、
前記バテライト相炭酸カルシウム粒子が接着固定された前記生分解性繊維を所定の濃度のリン酸イオンを含む水溶液に所定時間浸漬することによって、前記生分解性繊維の表面に接着固定された前記バテライト相炭酸カルシウム粒子を起点として、非晶質リン酸カルシウムを前記生分解性繊維の表面に沿って成長させて前記生分解性繊維の表面全体を被覆し、
前記非晶質リン酸カルシウムで表面を被覆された前記生分解性繊維からなる骨再生用材料を前記リン酸イオンを含む水溶液から取り出して乾燥させる、
前記表面が親水化された生分解性繊維からなる骨再生用材料を製造する方法。
- 前記生分解性繊維の径は10μm~100μmである、請求項1に記載の方法。
- 前記バテライト相炭酸カルシウム粒子の径は0.5μm~4μmである、請求項1又は2に記載の方法。
- 前記リン酸イオンを含む水溶液はリン酸水素二ナトリウム溶液である、請求項1~3のいずれか一項に記載の方法。
- 前記生分解性繊維は、PLGA樹脂を含む、請求項1~4のいずれか一項に記載の方法。
- 表面が親水化された生分解性繊維を製造する方法であって、
骨形成性粒子を含有する前記生分解性繊維の表面にバテライト相炭酸カルシウム粒子を、摩擦帯電法を用いて静電的に付着させ、
前記バテライト相炭酸カルシウム粒子が付着した前記生分解性繊維を、前記生分解性繊維の生分解性樹脂のガラス転移点以上の温度で加熱することによって、前記生分解性繊維の表面に前記バテライト相炭酸カルシウム粒子を接着固定し、
前記バテライト相炭酸カルシウム粒子が接着固定された前記生分解性繊維を所定の濃度のリン酸イオンを含む水溶液に所定時間浸漬することによって、前記生分解性繊維の表面に接着固定された前記バテライト相炭酸カルシウム粒子を起点として、非晶質リン酸カルシウムを前記生分解性繊維の表面に沿って成長させて前記生分解性繊維の表面全体を被覆し、
前記非晶質リン酸カルシウムで表面を被覆された前記生分解性繊維を前記リン酸イオンを含む水溶液から取り出して乾燥させる、
前記表面が親水化された生分解性繊維を製造する方法。
- 前記生分解性繊維の径は10μm~100μmである、請求項6に記載の方法。
- 前記バテライト相炭酸カルシウム粒子の径は0.5μm~4μmである、請求項6又は7に記載の方法。
- 前記リン酸イオンを含む水溶液はリン酸水素二ナトリウム溶液である、請求項6~8のいずれか一項に記載の方法。
- 前記生分解性繊維は、PLGA樹脂を含む、請求項6~9のいずれか一項に記載の方法。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US201862755387P | 2018-11-02 | 2018-11-02 | |
US62/755,387 | 2018-11-02 | ||
PCT/JP2019/043010 WO2020091035A1 (ja) | 2018-11-02 | 2019-11-01 | 表面が親水化された生分解性繊維からなる骨再生用材料、及びその製造方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPWO2020091035A1 JPWO2020091035A1 (ja) | 2021-10-21 |
JP7429391B2 true JP7429391B2 (ja) | 2024-02-08 |
Family
ID=70461928
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2020554976A Active JP7429391B2 (ja) | 2018-11-02 | 2019-11-01 | 表面が親水化された生分解性繊維からなる骨再生用材料、及びその製造方法 |
Country Status (2)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JP7429391B2 (ja) |
WO (1) | WO2020091035A1 (ja) |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2004112856A1 (ja) | 2003-06-24 | 2004-12-29 | Kyushu Tlo Company Limited | 医療用骨補填材およびその製造方法 |
WO2017188435A1 (ja) | 2016-04-28 | 2017-11-02 | 国立大学法人名古屋工業大学 | エレクトロスピニング法を用いて生分解性繊維からなる骨再生用材料を製造するための方法 |
Family Cites Families (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH06285151A (ja) * | 1993-04-01 | 1994-10-11 | Nippon Sherwood Kk | 非晶質リン酸カルシウムをコートした医療用具 |
JP7177460B2 (ja) * | 2018-04-10 | 2022-11-24 | 株式会社バイオアパタイト | 微小繊維 |
-
2019
- 2019-11-01 WO PCT/JP2019/043010 patent/WO2020091035A1/ja active Application Filing
- 2019-11-01 JP JP2020554976A patent/JP7429391B2/ja active Active
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2004112856A1 (ja) | 2003-06-24 | 2004-12-29 | Kyushu Tlo Company Limited | 医療用骨補填材およびその製造方法 |
WO2017188435A1 (ja) | 2016-04-28 | 2017-11-02 | 国立大学法人名古屋工業大学 | エレクトロスピニング法を用いて生分解性繊維からなる骨再生用材料を製造するための方法 |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
MUCALO, M.R. et al.,Growth of calcium phosphate on surface-modified cotton,Journal of Materials Science:Materials in Medicine,1995年,Vol.6,,pp.597-605,Abstract、第597左欄第1段落-598頁左欄第1段落 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JPWO2020091035A1 (ja) | 2021-10-21 |
WO2020091035A1 (ja) | 2020-05-07 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US9498561B2 (en) | Fiber wadding for filling bone defects | |
AU2016226095B2 (en) | Coating scaffolds | |
Surmenev et al. | Significance of calcium phosphate coatings for the enhancement of new bone osteogenesis–a review | |
Maeda et al. | Preparation of poly (L-lactic acid)-polysiloxane-calcium carbonate hybrid membranes for guided bone regeneration | |
Kasuga et al. | Siloxane-poly (lactic acid)-vaterite composites with 3D cotton-like structure | |
MX2013003089A (es) | Aparato de control de presion. | |
JP6162916B2 (ja) | 骨欠損部充填材料、及びその製造方法 | |
Sachot et al. | Hybrid organic-inorganic scaffolding biomaterials for regenerative therapies | |
Jongpaiboonkit et al. | Growth of hydroxyapatite coatings on biodegradable polymer microspheres | |
GB2461125A (en) | A silk membrane for bone graft material | |
Koh et al. | Modification of polyglutamic acid with silanol groups and calcium salts to induce calcification in a simulated body fluid | |
MX2013000371A (es) | Guata de fibra para rellenar defectos de huesos. | |
JP2023059926A (ja) | インプラント及び他の基材用のジルコニウム及びリン酸チタンコーティング | |
US20110245922A1 (en) | Material for filling bone defects and production method thereof | |
JP7429391B2 (ja) | 表面が親水化された生分解性繊維からなる骨再生用材料、及びその製造方法 | |
US20120219595A1 (en) | Biodegradable fiber and fiber wadding for filling bone defects and method for producing the same | |
US20110009522A1 (en) | Material for filling bone defects and production method thereof | |
KR20160136345A (ko) | 기능성 인자를 함유하는 나노 스캐폴드 및 이의 제조방법 | |
Kim et al. | Apatite coating of electrospun PLGA fibers using a PVA vehicle system carrying calcium ions | |
JP7365533B1 (ja) | 生体適合性樹脂繊維から構成された不織マットからなる細胞培養基材、及びその製造方法 | |
Hong et al. | Fabrication of hollow hydroxyapatite spherical granules for hard tissue regeneration and alternative method for drug release test | |
JP2021151409A (ja) | 薬剤を担持した骨修復材料及びその製造方法 | |
RU2122365C1 (ru) | Способ лечения дефектов челюстно-лицевой области | |
Obata | Development of biomaterials with inorganic ions stimulating osteogenic cell functions | |
Nakamura et al. | Preparation of siloxane-containing vaterite/poly (L-lactic acid) hybrid microbeads with silicate and calcium ions-releasing ability |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20210907 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20221020 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20230927 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20231025 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20240116 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20240119 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 7429391 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |