JP7176902B2 - Method for evaluating or searching for cosmetics exhibiting richness - Google Patents

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Description

本発明は、使用時にコクを呈する化粧料若しくはその原料の評価又は探索方法に関する。 TECHNICAL FIELD The present invention relates to a method for evaluating or searching for a cosmetic that exhibits richness when used or a raw material thereof.

近年、化粧料は、塗布時の使用感が重要な要求特性であり、近年、塗布時にある程度の重さが感じられ、濃度の高い感触が得られるような使用感、所謂「コク」のある使用感(コク感)が好まれる傾向にある。そのようなコクを呈する化粧料を調製するために、合成高分子化合物や増粘性多糖類等の増粘剤、高級アルコール、有機粉末等を配合するような処方が考案されている(例えば、特許文献1、2、3)。しかしながら、「コク感」のような肌に塗布する際の感触を客観的に評価するには専門家による判断が必要であり、そのような専門家を育成することは容易なことではない。また非専門家で感触を客観的に判断するためには多くの人数が必要であり、容易なことではない。 In recent years, the feeling of use at the time of application is an important requirement for cosmetics. There is a tendency to prefer the feeling (rich feeling). In order to prepare cosmetics exhibiting such richness, formulations have been devised that incorporate thickeners such as synthetic polymer compounds and thickening polysaccharides, higher alcohols, organic powders, etc. (for example, patent References 1, 2, 3). However, in order to objectively evaluate the sensation of application to the skin, such as "richness", judgment by experts is required, and it is not easy to train such experts. In addition, many people are required to objectively judge the feeling by non-experts, which is not an easy task.

一方、オキシトシン(Oxytocin)は、9個のアミノ酸から構成されるペプチドホルモンで、主に脳の視床下部で合成されている。オキシトシンは、授乳中の母親で産生が増大し、射乳に関与しているが、近年、女性だけでなく男性でも産生されることが明らかにされ、また、動物を用いた解析により、生物間の愛着/社会性形成に関与することが報告されている(非特許文献1)。 On the other hand, oxytocin is a peptide hormone composed of 9 amino acids and is mainly synthesized in the hypothalamus of the brain. Oxytocin production increases in lactating mothers and is involved in milk ejection, but in recent years it has been clarified that it is produced not only in women but also in men. has been reported to be involved in the formation of attachment/sociality (Non-Patent Document 1).

また、オキシトシン産生促進物質には、抗不安作用やシワ及び皮膚柔軟性の改善作用があること(特許文献4)、オキシトシン活性物質が、ケラチノサイトにおけるTGF-β1の産生を増大し、熱傷等の皮膚傷害に有効であること、また表皮におけるバリア形成を促進すること等(特許文献5)が報告されている。 In addition, oxytocin production-promoting substances have anti-anxiety effects and improve wrinkles and skin flexibility (Patent Document 4). It has been reported that it is effective against injuries and that it promotes barrier formation in the epidermis (Patent Document 5).

しかしながら、生体中のオキシトシン量と化粧料の使用感との関連性は明らかにされていない。 However, the relationship between the amount of oxytocin in the body and the feeling of using cosmetics has not been clarified.

特開2013-95737号公報JP 2013-95737 A 特開2006-160619号公報JP 2006-160619 A 特開2014-205628号公報JP 2014-205628 A 特開2011-98898号公報JP 2011-98898 A 特表2002-525337号公報Japanese Patent Publication No. 2002-525337

Lieberwirth and Wang, CURRENT OPINION IN NEUROBIOLOGY, doi: 10.1016/j.conb.2016.05.006, 2016Lieberwirth and Wang, CURRENT OPINION IN NEUROBIOLOGY, doi: 10.1016/j.conb.2016.05.006, 2016

本発明は、コクを呈する化粧料若しくはその原料を客観的且つ効率よく評価又は探索する方法を提供することに関する。 The present invention relates to providing a method for objectively and efficiently evaluating or searching for a rich-bodied cosmetic or its raw material.

本発明者らは、コクを呈する化粧料を一定期間塗布した場合、生体内のオキシトシン量が上昇することを見出した。したがって、当該オキシトシン量を指標として、コクを呈する化粧料若しくはその原料の評価又は探索が可能であり、またコクを指標として、生体内オキシトシンを上昇させる化粧料又はその原料の評価又は探索が可能であると考えられる。 The present inventors found that the amount of oxytocin in the body increases when a rich cosmetic is applied for a certain period of time. Therefore, using the amount of oxytocin as an index, it is possible to evaluate or search for a cosmetic or its raw material that exhibits richness. It is believed that there is.

すなわち、本発明は、以下の1)~2)に係るものである。
1)以下の工程(A)~(C)を含む、コクを呈する化粧料若しくはその原料の評価又は探索方法。
(A)ヒトの皮膚に試験試料を施与する工程
(B)前記ヒトから採取された生体試料中のオキシトシン量を測定する工程
(C)前記オキシトシン量を基準値と比較し、オキシトシン量を増加させる試験試料を、コクを呈する化粧料若しくはその原料として評価又は選択する工程
2)以下の工程(D)~(F)を含む、生体内オキシトシンを上昇させる化粧料又はその原料の評価又は探索方法。
(D)ヒトの皮膚に試験試料を施与する工程
(E)前記試験試料施与の際に感じられるコクを評価する工程
(F)前記評価結果に基づき、コクを呈する試験試料を、生体内オキシトシンを上昇させる化粧料若しくはその原料として評価又は選択する工程
That is, the present invention relates to the following 1) and 2).
1) A method for evaluating or searching for a rich-bodied cosmetic or raw material thereof, comprising the following steps (A) to (C).
(A) Step of applying a test sample to human skin (B) Step of measuring the amount of oxytocin in the biological sample collected from the human (C) Comparing the amount of oxytocin with a reference value and increasing the amount of oxytocin 2) A method for evaluating or searching for a cosmetic or its raw material that increases in vivo oxytocin, including the following steps (D) to (F): .
(D) A step of applying a test sample to human skin (E) A step of evaluating the richness felt when applying the test sample (F) Based on the evaluation results, a test sample exhibiting richness is in vivo A process of evaluating or selecting a cosmetic or its raw material that increases oxytocin

本発明によれば、コクを呈する化粧料若しくはその原料を客観的且つ効率よく評価又は探索することができ、また生体内オキシトシンを上昇させる化粧料又はその原料を評価又は探索できる。 INDUSTRIAL APPLICABILITY According to the present invention, it is possible to objectively and efficiently evaluate or search for a cosmetic or its raw material exhibiting richness, and to evaluate or search for a cosmetic or its raw material that increases in vivo oxytocin.

コクを呈する化粧料の継続塗布による唾液中オキシトシン量の変化を示すグラフ。A graph showing changes in salivary oxytocin levels due to continuous application of a rich cosmetic.

本発明において、「コク」とは、化粧品の使用時に関わる官能評価用語で、化粧料を肌に塗布した時からなじませるまでの濃厚で厚みや重さのある感触を指し、濃厚感、高級感、リッチ感等と表現される場合もある。 In the present invention, "rich" is a sensory evaluation term related to the use of cosmetics, and refers to a rich, thick and heavy feel from the time the cosmetic is applied to the skin until it is blended. , rich feeling, and the like.

本発明の「コクを呈する化粧料」としては、例えば、乳液、クリーム、ローション、ジェル、エッセンス等の基礎化粧料、口紅、ファンデーション、リキッドファンデーション、メイクアッププレスパウダー等のメイクアップ化粧料、洗顔料等の清浄用化粧料等が挙げられる。このうち、基礎化粧料やメイクアップ化粧料が好ましく、乳液、クリーム、ローション、ジェル、エッセンスがより好ましい。
また、その形態は特に限定されず、油中水型乳化組成物、水中油型乳化組成物、水性組成物、ゲル状組成物等のいずれでもよい。
Examples of the "cosmetics exhibiting richness" of the present invention include, for example, basic cosmetics such as milky lotions, creams, lotions, gels, and essences; makeup cosmetics such as lipsticks, foundations, liquid foundations, makeup press powders; and other cleansing cosmetics. Of these, basic cosmetics and make-up cosmetics are preferred, and emulsions, creams, lotions, gels and essences are more preferred.
Moreover, the form thereof is not particularly limited, and may be any of a water-in-oil emulsion composition, an oil-in-water emulsion composition, an aqueous composition, a gel composition, and the like.

「コクを呈する化粧料の原料」とは、コクを呈する化粧料を製造するための原料であって、好ましくは、コク感を付与するために化粧料に配合される成分(例えば、合成高分子化合物や増粘性多糖類等の増粘剤、高級アルコール等)やこれらを含む組成物が挙げられる。 The “raw material for a rich-bodied cosmetic” is a raw material for producing a rich-bodied cosmetic, preferably a component (e.g., a synthetic polymer compounds, thickening agents such as thickening polysaccharides, higher alcohols, etc.) and compositions containing these.

後記実施例に示すとおり、女性33名を対象に、専門家によってコクがあると評価されたクリームを、朝・夜の1日2回、洗顔後の全顔へ4週間継続して塗布し、唾液中オキシトシン量の変化を測定したところ、オキシトシン量の有意な上昇が認められた。この結果は、生体中のオキシトシン量を指標として、コクを呈する化粧料若しくはその原料の評価又は探索が可能であることを示すものである。またこの結果は、コクを指標として、生体内オキシトシンを上昇させる化粧料又はその原料が評価又は探索できることを示すものと考えられる。 As shown in the examples below, 33 female subjects applied a cream that was evaluated as having richness by an expert twice a day in the morning and at night to the entire face after cleansing for 4 weeks continuously. A significant increase in the amount of oxytocin was observed when the amount of oxytocin in saliva was measured. This result indicates that the amount of oxytocin in the living body can be used as an index to evaluate or search for a rich-tasting cosmetic or its raw material. In addition, it is considered that this result indicates that it is possible to evaluate or search for cosmetics or their raw materials that increase oxytocin in the body using richness as an index.

本発明のコクを呈する化粧料若しくはその原料の評価又は探索方法は、以下の工程(A)~(C)により行われる。
(A)ヒトの皮膚に試験試料を施与する工程
(B)前記ヒトから採取された生体試料中のオキシトシン量を測定する工程
(C)前記オキシトシン量を基準値と比較し、オキシトシン量を増加させる試験試料を、コクを呈する化粧料若しくはその原料として評価又は選択する工程
The method for evaluating or searching for the cosmetic material exhibiting richness of the present invention or its raw material is carried out by the following steps (A) to (C).
(A) Step of applying a test sample to human skin (B) Step of measuring the amount of oxytocin in the biological sample collected from the human (C) Comparing the amount of oxytocin with a reference value and increasing the amount of oxytocin A process of evaluating or selecting a test sample that exhibits richness as a cosmetic or raw material thereof

工程(A)における「ヒト」としては、その性別や年齢は限定されないが、健常成人であるのが好ましい。 The "human" in step (A) is not limited in sex or age, but is preferably a healthy adult.

また、上記ヒトの皮膚に塗布される試験試料としては、化粧料若しくはその原料として使用可能な物質又は組成物であれば、特に制限されないが、好ましくは、ヒトの肌に施与した際にコクを呈することが期待される化粧料若しくはその原料である。 In addition, the test sample to be applied to the human skin is not particularly limited as long as it is a substance or composition that can be used as a cosmetic or a raw material thereof. It is a cosmetic or its raw material that is expected to exhibit

試験試料の施与形態は、皮膚への塗布であり、施与期間及び施与回数も適宜設定することができるが、好ましくは、1日1回~3回、好ましくは1日2回で、使用直後~5週間、好ましくは、1~4週間、より好ましくは2~4週間の継続使用である。また試験試料塗布後は、最後の刺激から少なくとも2時間空けて採取するのが好ましい。 The application form of the test sample is application to the skin, and the application period and application frequency can be set as appropriate, preferably once to three times a day, preferably twice a day, Continuous use for 5 weeks immediately after use, preferably 1 to 4 weeks, more preferably 2 to 4 weeks. After application of the test sample, samples should preferably be taken at least 2 hours after the last stimulus.

本発明において、生体試料は、被験者から採取された試料であり、具体的には、血液(血漿、血清、血球(赤血球、白血球)を含む)、尿、唾液、リンパ液などが挙げられ、好ましくは唾液、血液(血漿、血清、血球を含む)、尿が挙げられ、より好ましくは唾液である。 In the present invention, a biological sample is a sample collected from a subject, and specifically includes blood (including plasma, serum, blood cells (red blood cells, white blood cells)), urine, saliva, lymph, and the like, preferably Examples include saliva, blood (including plasma, serum, and blood cells), and urine, more preferably saliva.

工程(B)において、生体試料中のオキシトシン量が測定される。
オキシトシンは、9個のアミノ酸残基からなるペプチドホルモンである。オキシトシンは、大脳の視床下部の室傍核や視索上核に存在する大細胞性神経細胞で合成され、脳下垂体後葉から血中に放出されることが知られる。
オキシトシン量の測定は、液体クロマトグラフ(HPLC)、液体クロマトグラフ質量分析計(LC-MS)、液体クロマトグラフタンデム型質量分析計(LC-MS/MS)、ガスクロマトグラフ質量分析計(GC-MS)、あるいは酵素免疫測定法(ELISA)などの免疫学的手法により可能である。これらの測定条件は公知であり、常法に従い容易に定量できる。
前記ELISA法は、例えばOxytocin ELISA kit(Enzo)を使用して実施することができる。
In step (B), the amount of oxytocin in the biological sample is measured.
Oxytocin is a peptide hormone consisting of nine amino acid residues. Oxytocin is known to be synthesized in magnocellular neurons present in the paraventricular nucleus and supraoptic nucleus of the hypothalamus of the cerebrum and released into the blood from the posterior pituitary gland.
The amount of oxytocin is measured using a liquid chromatograph (HPLC), a liquid chromatograph mass spectrometer (LC-MS), a liquid chromatograph tandem mass spectrometer (LC-MS/MS), a gas chromatograph mass spectrometer (GC-MS). ), or immunological techniques such as enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). These measurement conditions are known and can be easily quantified according to a conventional method.
The ELISA method can be performed using, for example, the Oxytocin ELISA kit (Enzo).

次いで、オキシトシン量が基準値と比較され、オキシトシン量を増加させる試験試料が、コクを呈する化粧料若しくはその原料として評価又は選択される(工程(C))。
すなわち、オキシトシン量(例えば生体試料中のタンパク質当たりのオキシトシン量)を基準値と比較することにより、オキシトシン量を増加させる試験試料が同定される。基準値としては、コクの程度が異なる試験試料を施与(例えば、コクの程度がより低い試験試料施与群、プラセボ群(コクを呈さない試験試料施与群))した場合に測定されるオキシトシン量や、試験試料施与前に測定されるオキシトシン量の他、試験試料を施与しない個体における所定のオキシトシン量等が挙げられる。
具体的には、コクの程度がより高い試験試料施与群とコクの程度がより低い試験試料施与群との間;試験試料施与群とプラセボ群との間;又は試験試料施与前後で、オキシトシン量を比較し、試験試料の施与又はコクの程度がより高い試験試料の施与によりオキシトシン量が上昇する場合にその増加量や増加率に基づいて、又は所定のオキシトシン量を超える場合にその値に基づいて当該試験試料を、当該オキシトシン量を増加させる試料として同定することができる。
例えば、試験試料施与群におけるオキシトシン量が、対照群と比較して20%以上、好ましくは50%以上に増加していれば、当該試験試料を、オキシトシン量を増加させる試料として同定することができる。また、試験試料施与群におけるオキシトシン量が、所定のオキシトシン量(例えば、単位タンパク量当たり5pg)を超える場合に、当該試験試料を、オキシトシン量を増加させる試料として同定することができる。
そして、同定されたオキシトシン量を増加させる試験試料は、コクを呈する化粧料若しくはその原料として評価又は選択することができる。
Next, the amount of oxytocin is compared with the reference value, and the test sample that increases the amount of oxytocin is evaluated or selected as a rich cosmetic or its raw material (step (C)).
That is, by comparing the amount of oxytocin (eg, the amount of oxytocin per protein in a biological sample) with a reference value, test samples that increase the amount of oxytocin are identified. The reference value is measured when test samples with different degrees of richness are administered (e.g., test sample administration group with lower degree of richness, placebo group (test sample administration group that does not exhibit richness)). Examples include the amount of oxytocin, the amount of oxytocin measured before administration of the test sample, and the predetermined amount of oxytocin in individuals not administered the test sample.
Specifically, between the test sample administration group with a higher degree of richness and the test sample administration group with a lower degree of richness; between the test sample administration group and the placebo group; or before and after the test sample administration , the amount of oxytocin is compared, and if the amount of oxytocin increases due to the application of the test sample or the test sample with a higher degree of richness, based on the amount or rate of increase, or exceeds the predetermined amount of oxytocin Based on that value in some cases, the test sample can be identified as a sample that increases the amount of oxytocin.
For example, if the amount of oxytocin in the test sample administration group is increased by 20% or more, preferably by 50% or more compared to the control group, the test sample can be identified as a sample that increases the amount of oxytocin. can. In addition, when the amount of oxytocin in the test sample-administered group exceeds a predetermined amount of oxytocin (eg, 5 pg per unit protein amount), the test sample can be identified as a sample that increases the amount of oxytocin.
Then, the identified test sample that increases the amount of oxytocin can be evaluated or selected as a rich cosmetic or its raw material.

このようにして選択されたコクを呈する化粧料は、肌への塗布時からなじませるまでに、濃厚で厚みや重さのある感触を与え、高級感、リッチ感を醸し出す上質な化粧料となり得る。また、選択された化粧料原料は、当該コクを呈する化粧料の製造において、コク感を付与するための原料として利用できる。 A cosmetic material selected in this manner and exhibiting richness can be a high-quality cosmetic material that imparts a rich, thick, and heavy feel to the skin from the time of application to the time of blending, and creates a luxurious and rich feeling. . In addition, the selected cosmetic raw material can be used as a raw material for imparting a rich feeling in the production of the rich cosmetic.

また、コクを指標とした生体内オキシトシンを上昇させる化粧料又はその原料の評価又は探索は、以下の工程(D)~(F)により行われる。
(D)ヒトの皮膚に試験試料を施与する工程
(E)前記試験試料施与の際に感じられるコクを評価する工程
(F)前記評価結果に基づき、コクを呈する試験試料を、生体内オキシトシンを上昇させる化粧料若しくはその原料として評価又は選択する工程
In addition, the evaluation or search for a cosmetic or its raw material that raises oxytocin in vivo using body as an index is carried out by the following steps (D) to (F).
(D) A step of applying a test sample to human skin (E) A step of evaluating the richness felt when applying the test sample (F) Based on the evaluation results, a test sample exhibiting richness is in vivo A process of evaluating or selecting a cosmetic or its raw material that increases oxytocin

ここで、(D)のヒトの皮膚への試験試料の施与は、前記(A)と同様である。
(E)のコクを評価は、被験者において、試験試料施与の際に感じられるコク感を、例えば<1>コクがない、<2>あまりコクがない、<3>どちらともいえない、<4>ややコクがある、<5>コクがある、のような基準で判定することが挙げられる。
前記評価結果に基づき、コクを呈すると認められた試験試料は、生体内オキシトシンを上昇させる化粧料若しくはその原料として評価又は選択できる(F)。
Here, the application of the test sample to the human skin in (D) is the same as in (A) above.
Evaluation of (E) richness is performed by evaluating the richness felt when the test sample is administered to the subject, for example, <1> no richness, <2> not much richness, <3> neither, < Determination can be made based on criteria such as 4> Slightly rich and <5> Rich.
Based on the evaluation results, the test sample recognized as exhibiting richness can be evaluated or selected as a cosmetic or its raw material that increases oxytocin in the body (F).

上述した実施形態に関し、本発明においては更に以下の態様が開示される。
<1>以下の工程(A)~(C)を含む、コクを呈する化粧料若しくはその原料の評価又は探索方法。
(A)ヒトの皮膚に試験試料を施与する工程
(B)前記ヒトから採取された生体試料中のオキシトシン量を測定する工程
(C)前記オキシトシン量を基準値と比較し、オキシトシン量を増加させる試験試料を、コクを呈する化粧料若しくはその原料として評価又は選択する工程
<2>生体試料が血液、血清、血漿、尿又は唾液である<1>の方法。
<3>以下の工程(D)~(F)を含む、生体内オキシトシンを上昇させる化粧料又はその原料の評価又は探索方法。
(D)ヒトの皮膚に試験試料を施与する工程
(E)前記試験試料施与の際に感じられるコクを評価する工程
(F)前記評価結果に基づき、コクを呈する試験試料を、生体内オキシトシンを上昇させる化粧料若しくはその原料として評価又は選択する工程
<4>化粧料が、クリーム、ローション、乳液及びエッセンスから選ばれる<1>~<3>のいずれかの方法。
The following aspects are further disclosed in this invention regarding embodiment mentioned above.
<1> A method for evaluating or searching for a rich-bodied cosmetic or raw material thereof, comprising the following steps (A) to (C).
(A) Step of applying a test sample to human skin (B) Step of measuring the amount of oxytocin in the biological sample collected from the human (C) Comparing the amount of oxytocin with a reference value and increasing the amount of oxytocin <2> The method of <1>, wherein the biological sample is blood, serum, plasma, urine or saliva.
<3> A method for evaluating or searching for a cosmetic or raw material thereof that increases in vivo oxytocin, comprising the following steps (D) to (F).
(D) A step of applying a test sample to human skin (E) A step of evaluating the richness felt when applying the test sample (F) Based on the evaluation results, a test sample exhibiting richness is in vivo <4> The method of any one of <1> to <3>, wherein the cosmetic is selected from creams, lotions, milky lotions and essences.

1.クリームの官能評価
(1)方法
1)クリームの作製
クリームP及びQを作製した。クリームPはクリームQと比べて、高級アルコールやペースト油剤を多く配合することでコク感を生み出し、さらに粘剤の量を増やすことでよりコク感を増やしたものである。クリームP又はクリームQのコク感は、以下に示す官能評価試験により確認した。
1. Sensory evaluation of cream (1) Method 1) Preparation of cream Creams P and Q were prepared. Cream P, compared to cream Q, contains a large amount of higher alcohol and paste oil to create a rich feeling, and further increases the amount of sticky agent to increase the rich feeling. The richness of cream P or cream Q was confirmed by the following sensory evaluation test.

2)官能評価試験概要
30-54歳の女性33名に、クリームP又はクリームQを、両ほほ、鼻(鼻筋)、あごの5ヶ所に置き(約0.5g)、指がすべらなくなるまで両手で顔全体になじませるよう求めた。
2) Overview of sensory evaluation test 33 women aged 30 to 54 applied Cream P or Cream Q to 5 points on both cheeks, nose (nose bridge), and chin (about 0.5 g), and applied it to both hands until fingers no longer slipped. I asked him to apply it to the whole face.

3)コク評価
各クリーム塗布後に、塗布中にコクがあったか評価を求めた。評価尺度は5段階のスコアとし(<1>当てはまらない、<2>あまり当てはまらない、<3>どちらともいえない、<4>やや当てはまる、<5>当てはまる)、各クリームのスコア評価値の平均値を求めた。
3) Richness Evaluation After applying each cream, an evaluation was made as to whether or not there was a richness during application. The evaluation scale is a five-level score (<1> not applicable, <2> not very applicable, <3> neither, <4> somewhat applicable, <5> applicable), and the average of the score evaluation values for each cream. sought the value.

(2)結果
各クリームのコク評価値の平均値を求めた結果、クリームQは2.88、クリームPは3.61だった。このことから、クリームPは塗布中のコクが高いクリームであることが明らかになった。なお、専門家による官能評価においても、クリームPの方がコク感を呈することを確認した。
(2) Result As a result of calculating the average value of the richness evaluation value of each cream, Cream Q was 2.88 and Cream P was 3.61. From this, it became clear that the cream P is a cream with a high richness during application. Sensory evaluation by an expert also confirmed that cream P exhibited a richer taste.

2.クリーム継続使用前後のオキシトシン変化解析
(1)方法
1)試験概要
20-30代の女性35名を対象に、朝・夜の1日2回、洗顔後の日常のスキンケア後に、全顔へのクリームP又はQの塗布(約0.5 g)を4週間継続して頂いた。
2. Analysis of changes in oxytocin before and after continuous use of the cream (1) Method 1) Outline of the study Targeting 35 women in their 20s and 30s, twice a day in the morning and at night, after daily skin care after washing the face, the cream was applied to the entire face. Application of P or Q (about 0.5 g) was continued for 4 weeks.

2)唾液採取
クリームP又はQ使用前と4週間継続使用後の唾液を採取した。4週間継続使用後の唾液は、最後の刺激から少なくとも2時間空けて採取した。口腔内を水で漱口後、全唾液を遠沈管に10分間吐出を求めた。唾液は直ちにドライアイスで凍結し、-80 ℃で保管した。
2) Saliva Collection Saliva was collected before using Cream P or Q and after 4 weeks of continuous use. After 4 weeks of continuous use, saliva was collected at least 2 hours after the last stimulation. After rinsing the oral cavity with water, all saliva was discharged into a centrifuge tube for 10 minutes. Saliva was immediately frozen in dry ice and stored at -80°C.

3)唾液中オキシトシン測定
全唾液の遠心分離後の上清(1.5~3.0mL)と等量の0.1%(v/v)トリフルオロ酢酸(TFA)水溶液を混和した。遠心分離(3,000rpm、30min)後の上清を、Sep-pak C18カラム(200mg、3cc、Waters)に供し、下記のように抽出を行った。C18カラムに1mLの100%アセトニトリル(ACN)、次いで10mLの0.1%TFA水溶液(v/v)を通し、その後で0.1%TFA水溶液(v/v)と混和した全唾液(3.0~6.0mL)を通し、10mLの0.1%TFA水溶液(v/v)で洗浄した後、3mLの(95%ACN/5%(0.1%TFA水溶液))(v/v)で溶出させた。溶出した溶液のACNをN2ガスで揮発させ、残った水溶液を凍結乾燥に供し、凍結乾燥品をOxytocin ELISA kit(Enzo)中の250μlのAssay Bufferに溶解して、上記キットを用いて定量した。Bio-rad Protein assay(BIO-RAD)で、ウシ血清アルブミンで作成した検量線を基に、抽出・濃縮前の唾液中のタンパク濃度(mg/mL)を定量し、単位タンパク量当たりのオキシトシン量を算出し、クリーム使用前の量を100とした変化率を算出した。
3) Oxytocin measurement in saliva The supernatant (1.5 to 3.0 mL) after centrifugation of whole saliva was mixed with an equal volume of 0.1% (v/v) trifluoroacetic acid (TFA) aqueous solution. After centrifugation (3,000 rpm, 30 min), the supernatant was applied to a Sep-pak C18 column (200 mg, 3 cc, Waters) and extracted as follows. 1 mL of 100% acetonitrile (ACN) and then 10 mL of 0.1% TFA aqueous solution (v/v) were passed through a C18 column, after which whole saliva (3. 0-6.0 mL), washed with 10 mL of 0.1% TFA aqueous solution (v/v), then 3 mL of (95% ACN/5% (0.1% TFA aqueous solution)) (v/v) was eluted with ACN in the eluted solution was volatilized with N gas, the remaining aqueous solution was freeze-dried, the freeze-dried product was dissolved in 250 μl of Assay Buffer in the Oxytocin ELISA kit (Enzo), and quantified using the above kit. Using the Bio-rad Protein assay (BIO-RAD), the protein concentration (mg/mL) in saliva before extraction/concentration was quantified based on a calibration curve created with bovine serum albumin, and the amount of oxytocin per unit protein amount was calculated. was calculated, and the rate of change was calculated with the amount before using the cream set to 100.

(3)結果
クリームP又はQ継続使用前後の唾液中のオキシトシン量の変化を検討した結果、図1に示すようにクリームP継続使用により有意な上昇が認められた。一方で、クリームQでは有意な上昇は認められなかった。このことから、コクを呈するクリームPを継続使用することにより、生体内のオキシトシンが上昇することが明らかになった。
(3) Results As a result of examining changes in the amount of oxytocin in saliva before and after continuous use of Cream P or Q, a significant increase was observed with continuous use of Cream P, as shown in FIG. On the other hand, Cream Q showed no significant increase. From this, it became clear that oxytocin in the body is increased by continuous use of the rich cream P.

Claims (3)

以下の工程(A)~(C)を含む、コクを呈する化粧料若しくはその原料の評価又は探索方法。
(A)ヒトの皮膚に試験試料を施与する工程
(B)前記ヒトから採取された唾液中のオキシトシン量を測定する工程
(C)前記オキシトシン量を基準値と比較し、オキシトシン量を増加させる試験試料を、コクを呈する化粧料若しくはその原料として評価又は選択する工程
A method for evaluating or searching for a rich-bodied cosmetic or raw material thereof, comprising the following steps (A) to (C).
(A) Step of applying a test sample to human skin (B) Step of measuring the amount of oxytocin in saliva collected from the human (C) Comparing the amount of oxytocin with a reference value and increasing the amount of oxytocin A process of evaluating or selecting a test sample as a cosmetic or its raw material exhibiting richness
以下の工程(D)~(F)を含む、生体内オキシトシンを上昇させる化粧料又はその原料の評価又は探索方法。
(D)ヒトの皮膚に試験試料を施与する工程
(E)前記試験試料施与の際に感じられるコクを評価する工程
(F)前記評価結果に基づき、コクを呈する試験試料を、生体内オキシトシンを上昇させる化粧料若しくはその原料として評価又は選択する工程
A method for evaluating or searching for a cosmetic or raw material thereof that increases oxytocin in vivo, comprising the following steps (D) to (F).
(D) a step of applying a test sample to human skin; (E) a step of evaluating the richness felt when applying the test sample; A process of evaluating or selecting a cosmetic or its raw material that increases oxytocin
化粧料が、クリーム、ローション、乳液及びエッセンスから選ばれる請求項1又は2記載の方法。 3. The method according to claim 1 or 2 , wherein the cosmetics are selected from creams, lotions, emulsions and essences.
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Title
坂本孝司 他,快感情を喚起する触覚刺激の生理作用に着目した化粧品技術開発,SCCJ研究討論会 (第 82 回) 講演要旨集,2018年07月12日,p.22-23

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