JP7126163B2 - リンパ系の機能を評価する方法 - Google Patents

Description

実施形態は、リンパ系の機能を評価する方法に関する。

リンパ系は、リンパ節、リンパ管及びその他のリンパ組織等からなる、リンパ液の循環系として機能するネットワークである。リンパ系の疾患（例えば、リンパ浮腫）等を診断する手法として、インドシアニングリーン等の蛍光色素を注入し、蛍光観察等によりリンパ管を造影する方法、^９９ｍＴｃ標識スズコロイド等の放射性同位体を注入し、シンチグラフィーで可視化する方法等のリンパ系造影検査法が知られている（例えば、非特許文献１及び非特許文献２）

Ｕｎｎｏ Ｎ．ら，Ｊ．Ｖａｓｃ．Ｓｕｒｇ．，２００７年，４５巻５号，ｐｐ．１０１６－１０２１ Ｍａｅｇａｗａ Ｊ．ら，Ｍｉｃｒｏｓｕｒｇｅｒｙ，２０１０年，３０巻６号，ｐｐ．４３７－４４２

リンパ系造影検査は、リンパ浮腫診断に欠かせない検査であるが、解剖学的な問題に由来する根本的な問題を抱えている。リンパ管は、盲端から始まり、無数に存在しているため、造影剤を注入する部位の候補が無数にある。また、リンパ系の起始部とそれにつながるリンパ管やリンパ節との関係を検討した報告は、これまでに存在しない。つまり、造影剤の注射部位と、それに対応して造影剤が取り込まれてイメージングされるリンパルートとの関係を把握できる情報は、これまでに存在しない。そのため、従来行われているリンパ系造影検査には、解剖学的なエビデンスを持って注射部位が決定できているものはない。これが様々な注射部位の検査プロトコールを生み出す原因となっている。

実際、下肢の場合、大伏在静脈に伴走する前内側束を狙って第一指間部のみに造影剤を注射している場合が多いが、他部位又は多点に造影剤を注射している場合もある。注射部位が異なるのに検査結果を同様に比べてよいかは検討されていない。さらに小伏在静脈に伴走する後外側束を狙って踵部付近に造影剤を注射している場合もあるが、それに対応する起始部の情報はなく、また後外側束を確実に造影できる決められた注射部位は不明である。上肢の場合も同様に定まった情報はない。

リンパ系を造影するための統一された完全な検査プロトコールが存在しないことは、診断時のみならず、治療方針さらにはそれらの効果を共通して判断する材料がないことを意味している。

本発明者らは、下肢及び上肢のリンパ系造影検査時の注射部位決定に必要な解剖学的情報、及びそれにより造影され得るリンパルートの詳細のマッピングに成功した。そして、それらの情報に基づいて、リンパ系造影を行うための適切な注射部位とそれで可視化し得るリンパルートの関係を明らかにした。実施形態はこれらの新規知見に基づいており、リンパルートマップを用いたリンパ系機能の評価方法を提供すること、及び当該評価方法に使用するリンパ系機能評価装置を提供することを目的としている。

実施形態は、リンパ系の機能を評価する方法であって、四肢に複数存在するリンパルートから、評価対象となる１又は複数のリンパルートを選択するステップと、選択したリンパルートと、それに対応する四肢末梢の注入部位との情報に基づき、可視化剤の注入部位を決定するステップと、選択した注入部位から可視化剤を注入するステップと、注入した可視化剤を可視化し、評価対象となる１又は複数のリンパルートの機能を評価するステップと、を含む、方法に関する。

実施形態は、被験者の四肢末梢における可視化剤の注入部位の情報を取得する第１の取得手段と、可視化剤を注入された被験者の可視化剤像を取得する第２の取得手段と、第１の取得手段により取得した情報、及び四肢に複数存在するリンパルートとそれに対応する四肢末梢の注入部位との情報に基づき、第２の取得手段により取得した可視化剤像に、四肢に複数存在するリンパルート毎に異なる色を設定する色設定手段と、色設定手段により色を付した可視化剤像を出力する出力手段と、を備える、リンパ系機能評価装置にも関する。

実施形態は、コンピュータを、被験者の四肢末梢における可視化剤の注入部位の情報を取得する第１の取得手段、可視化剤を注入された被験者の可視化剤像を取得する第２の取得手段、第１の取得手段により取得した情報、及び四肢に複数存在するリンパルートとそれに対応する四肢末梢の注入部位との情報に基づき、第２の取得手段により取得した可視化剤像に、四肢に複数存在するリンパルート毎に異なる色を設定する色設定手段、色設定手段により色を付した可視化剤像を出力する出力手段、として機能させるためのリンパ系機能評価プログラムにも関する。

実施形態は、リンパ系機能評価プログラムが記録されたコンピュータ読み取り可能な記録媒体にも関する。

本発明によれば、リンパルートマップを用いたリンパ系機能の評価方法を提供することが可能となる。

図１は、造影剤の下肢注入部位１～１９を示す下肢末梢の模式図である。各下肢注入部位は、足背－足底の境界線上に対し、解剖学的ランドマークに従って設定したものであり、詳細は以下に示すとおりである。 下肢注入部位１：内果の下 下肢注入部位５：第１中足骨の頭(head of first metatarsal bone) 下肢注入部位６：第１基節骨の底(base of first proximal phalanx) 下肢注入部位７：第１指間部 下肢注入部位８：第２指間部 下肢注入部位９：第３指間部 下肢注入部位１０：第４指間部 下肢注入部位１１：第５基節骨の底(base of fifth proximal phalanx) 下肢注入部位１２：第５中足骨の頭(head of fifth metatarsal bone) 下肢注入部位１６：外果の下 下肢注入部位１８：踵骨隆起(calcaneal tuberosity) 下肢注入部位３：下肢注入部位１及び下肢注入部位５の中間点 下肢注入部位２：下肢注入部位１及び下肢注入部位３の中間点 下肢注入部位４：下肢注入部位３及び下肢注入部位５の中間点 下肢注入部位１４：下肢注入部位１２及び下肢注入部位１６の中間点 下肢注入部位１３：下肢注入部位１２及び下肢注入部位１４の中間点 下肢注入部位１５：下肢注入部位１４及び下肢注入部位１６の中間点 下肢注入部位１７：下肢注入部位１６及び下肢注入部位１８の中間点 下肢注入部位１９：下肢注入部位１８及び下肢注入部位１の中間点 図２は、造影剤の上肢注入部位１～１７を示す上肢末梢の模式図である。各上肢注入部位は、手背－手掌の境界線上に対し、解剖学的ランドマークに従って設定したものであり、詳細は以下に示すとおりである。 上肢注入部位１：橈骨茎状突起遠位端(distal of radial styloid process) 上肢注入部位５：第１中手骨頭(the first head of metacarpi) 上肢注入部位３：上肢注入部位１及び上肢注入部位５の中間点 上肢注入部位２：上肢注入部位１及び上肢注入部位３の中間点 上肢注入部位４：上肢注入部位３及び上肢注入部位５の中間点 上肢注入部位６：第１指間(the first interdigital space) 上肢注入部位７：第２指間(the second interdigital space) 上肢注入部位８：第３指間(the third interdigital space) 上肢注入部位９：第４指間(the fourth interdigital space) 上肢注入部位１０：第５中手骨頭(the fifth head of metacarpi) 上肢注入部位１４：尺骨茎状突起遠位端(distal of radial styloid process) 上肢注入部位１２：上肢注入部位１０及び上肢注入部位１４の中間点 上肢注入部位１１：上肢注入部位１０及び上肢注入部位１２の中間点 上肢注入部位１３：上肢注入部位１２及び上肢注入部位１４の中間点 上肢注入部位１６：上肢注入部位１及び上肢注入部位１４の中間点（手掌側） 上肢注入部位１５：上肢注入部位１４及び上肢注入部位１６の中間点 上肢注入部位１７：上肢注入部位１６及び上肢注入部位１の中間点 図３は、一実施形態に係るリンパ系機能評価システムの概略構成を示すブロック図である。 図４は、一実施形態に係るリンパ系機能評価装置のハードウェア的構成を示す概要図である。 図５は、一実施形態に係るリンパ系機能評価装置の機能的構成を示す概要図である。 図６（Ａ）は、下肢のリンパ系造影検査結果の一例を示す写真である。「×」は、外果の後縁を示す。「△」は、内果の前縁を示す。「〇」は、踵骨粗面を示す。「□」は、内果の前縁と外果の後縁との間の前方の中点を示す。「×」と「△」を境界として踵側が「後」であり、その反対側が「前」である。「内」と「外」は、踵骨粗面（「〇」で示す。）と、内果の前縁と外果の後縁との間の前方の中点（「□」で示す。）を基準として定義した。「〇」と「□」を境界として内果側が「内」であり、外果側が「外」である。図６（Ｂ）は、図６（Ａ）をトレースしたトレース図である。 図７（Ａ）は、下肢の前内側ルートを造影した結果の一例を示す写真である。「□」は内果の前縁と外果の後縁との間の前方の中点を示す。「◇」は、「□」と脛骨粗面との中点を示す。図７（Ｂ）は、図７（Ａ）をトレースしたトレース図である。 図８（Ａ）は、下肢の前外側ルートを造影した結果の一例を示す写真である。「×」は外果の後縁を示す。「□」は内果の前縁と外果の後縁との間の前方の中点を示す。「◇」は、「□」と脛骨粗面との中点を示す。図８（Ｂ）は、図８（Ａ）をトレースしたトレース図である。 図９（Ａ）は、下肢の後内側ルートを造影した結果の一例を示す写真である。「△」は内果の前縁を示す。図９（Ｂ）は、図９（Ａ）をトレースしたトレース図である。 図１０は、下腿のリンパ管に色素を注入後、解剖して撮影した写真である。 図１１は、下腿のリンパ管に色素を注入後、解剖して撮影した写真である。 図１２は、下腿のリンパ管に色素を注入後、解剖して撮影した写真である。 図１３は、下腿のリンパ管に色素を注入後、解剖して撮影した写真である。 図１４は、図１０～図１３の結果を模式的にまとめた図である。 図１５は、各献体における下肢注入部位１～１９と、それぞれに対応する下肢のリンパルート（前内側ルート、後外側ルート、前外側ルート又は後内側ルート）との関係をマッピングした表である。 図１６は、下肢の各リンパルート（前内側ルート、後外側ルート、前外側ルート又は後内側ルート）について、造影が可能であった頻度を下肢注入部位毎に示すグラフである。 図１７は、下肢下方において、下肢の各リンパルート（前内側ルート、後外側ルート、前外側ルート又は後内側ルート）が占める領域をマッピングした模式図である。 図１８（Ａ）は、実施形態の方法によりリンパ管を造影した患者の下肢を示す写真である。図１８（Ｂ）は、図１８（Ａ）をトレースしたトレース図である。 図１９は、本明細書における鼠径部の浅リンパ節群の定義を示す図である。 図２０は、後内側ルートを造影したときのリンパルートの走行を示すＣＴリンパ管造影画像を３次元構築した像である。 図２１は、後内側ルートが最初に到達するリンパ節の頻度をプロットしたグラフである。 図２２は、前内側ルートを造影したときのリンパルートの走行を示すＣＴリンパ管造影画像を３次元構築した像である。 図２３は、前内側ルートが最初に到達するリンパ節の頻度をプロットしたグラフである。 図２４は、前外側ルートを造影したときのリンパルートの走行を示すＣＴリンパ管造影画像を３次元構築した像である。 図２５は、前外側ルートが最初に到達するリンパ節の頻度をプロットしたグラフである。 図２６は、後外側ルートを造影したときのリンパルートの走行を示すＣＴリンパ管造影画像を３次元構築した像である。 図２７は、後外側ルートが最初に到達するリンパ節の頻度をプロットしたグラフである。 図２８は、下肢の各リンパルートが２番目以降に到達するリンパ節（最初に到達するリンパ節以外で、各リンパルートが到達するリンパ節）の頻度をプロットしたグラフである。 図２９（Ａ）は、上肢のリンパ管造影検査結果の一例を示す写真である。図２９（Ｂ）は、図２９（Ａ）のトレース図である。 図３０は、リンパルートの走行を説明するための上肢領域の定義を示す図である。 図３１は、各献体における上肢注入部位１～１７と、それぞれに対応する上肢のリンパルート（副橈側ルート、副尺側ルート、橈側ルート、尺側ルート及び前腕正中ルート）との関係をマッピングした表である。 図３２は、各リンパルート（副橈側ルート、副尺側ルート、橈側ルート、尺側ルート及び前腕正中ルート）について、造影が可能であった頻度（造影が可能であった献体数／総献体数）を上肢注入部位毎に示すグラフである。 図３３は、上肢において、各リンパルート（副橈側ルート、副尺側ルート、橈側ルート、尺側ルート及び前腕正中ルート）が占める領域をマッピングした模式図である。

以下、実施形態について詳細に説明する。ただし、実施形態は、これらに限定されるものではなく、その要旨に沿って、種々の変形が可能である。

〔リンパ系の機能を評価する方法〕
本実施形態のリンパ系の機能を評価する方法は、四肢に複数存在するリンパルートから、評価対象となる１又は複数のリンパルートを選択するステップと、選択したリンパルートと、それに対応する四肢末梢の注入部位との情報に基づき、可視化剤の注入部位を決定するステップと、選択した注入部位から可視化剤を注入するステップと、注入した可視化剤を可視化し、評価対象となる１又は複数のリンパルートの機能を評価するステップと、を含む。

本明細書における「リンパ系」には、リンパ節、リンパ管及びその他のリンパ組織（例えば、胸管、胸腺、脾臓等）が含まれる。

選択ステップは、四肢に複数存在するリンパルートから、評価対象となる１又は複数のリンパルートを選択するステップである。

リンパ系を構成するリンパ管は、四肢（特に四肢下方）では、互いに連通しない独立のリンパルート（リンパの経路）を形成している場合が多い。選択ステップでは、評価対象とする１又は複数のリンパルートを選択する。選択ステップでは、評価対象として、互いに連通しない独立のリンパルートを全て網羅するように、複数のリンパルートを選択するものであってもよい。

選択ステップは、下肢の前内側ルート、前外側ルート、後内側ルート及び後外側ルートから、評価対象となる１又は複数のリンパルートを選択するものであってもよい。

下肢の前内側ルート、前外側ルート、後内側ルート及び後外側ルートとは、下肢を足関節レベルで４つの領域に分割したとき、下肢の足関節レベルにおいてリンパ管が通過する領域に応じて命名される下肢のリンパルートである。ここで、外果の後縁と内果の前縁を境界として、踵側が「後」であり、その反対側が「前」である。踵骨粗面と、内果の前縁と外果の後縁との間の前方の中点を境界として、内果側が「内」であり、外果側が「外」である。前内側ルートは、下肢の足関節レベルにおいてリンパ管が「前」かつ「内」の領域を通過する下肢のリンパルートを意味する。同様に、前外側ルートは、下肢の足関節レベルにおいてリンパ管が「前」かつ「外」の領域を通過する下肢のリンパルートを意味する。後内側ルートは、下肢の足関節レベルにおいてリンパ管が「後」かつ「内」の領域を通過する下肢のリンパルートを意味する。後外側ルートは、下肢の足関節レベルにおいてリンパ管が「後」かつ「外」の領域を通過する下肢のリンパルートを意味する。

選択ステップはまた、上肢の前腕正中ルート、橈側ルート、副橈側ルート、尺側ルート又は副尺側ルートから、評価対象となる１又は複数のリンパルートを選択するものであってもよい。

上肢の前腕正中ルート、橈側ルート、副橈側ルート、尺側ルート及び副尺側ルートとは、各リンパルートに概ね一致して走行する上肢皮静脈系の分類に基づいて命名した上肢のリンパルートである。

選択ステップでは、下肢の前内側ルート、前外側ルート、後内側ルート及び後外側ルートの全てを評価対象として選択してもよい。これにより、下肢のリンパ管の機能を網羅的に評価することができる。同様に、選択ステップでは、上肢の前腕正中ルート、橈側ルート、副橈側ルート、尺側ルート及び副尺側ルートの全てを評価対象として選択してもよい。これにより、上肢のリンパ管の機能を網羅的に評価することができる。

決定ステップは、選択したリンパルートと、それに対応する四肢末梢の注入部位との情報に基づき、可視化剤の注入部位を決定するステップである。

従来、可視化剤の注入部位と、それに対応して可視化剤が取り込まれてイメージングされるリンパルートとの関係を把握できる情報は存在しなかった。実施形態では、後述の実施例で具体的に示したとおり、解剖学的情報に基づいて設定した可視化剤の注入部位と、それに対応して可視化剤が取り込まれてイメージングされるリンパルートとの対応関係のマッピングに成功した（例えば、図１、図１５及び図１６、並びに図２、図３１及び図３２）。そして、当該情報（例えば、図１５及び図１６、並びに図３１及び図３２に示した対応関係）又はそれに準ずる情報（例えば、更なる検体について取得した情報等）に基づけば、選択したリンパルートを可視化し得る注入部位を決定することができる。

決定ステップでは、選択した１のリンパルートに対して、注入部位を１カ所のみ選んで可視化剤の注入部位として決定してもよいし、注入部位を２カ所以上選んで可視化剤の注入部位として決定してもよい。後述の実施例で示したとおり、例えば、下肢の前内側ルート及び前外側ルートでは、可視化剤（造影剤）が取り込まれる確率がピーク（極大値）を示す下肢注入部位が２つ存在している。例えば、これらの下肢注入部位の一方を可視化剤の注入部位に選んでもよく、これらの下肢注入部位の両方を可視化剤の注入部位に選んでもよい（なお、これら以外の下肢注入部位を可視化剤の注入部位に選んでもよい。）。

例えば、選択ステップにおいて、下肢のリンパルートを選択した場合、可視化剤の注入部位は、図１に示す下肢注入部位１～１９から選択される１又は複数の注入部位であってよく、図１に示す下肢注入部位１、７、１４及び１６から選択される１又は複数の注入部位であってもよい。

また、例えば、選択ステップにおいて、下肢の前内側ルート、前外側ルート、後内側ルート及び後外側ルートの全てを評価対象として選択した場合、可視化剤の注入部位は、図１に示す下肢注入部位１、７、１４及び１６であってよい。下肢注入部位１、７、１４及び１６の全てを可視化剤の注入部位とすることで、下肢の４つのリンパルートの全てを網羅的に評価することができる。

また、例えば、選択ステップにおいて、上肢のリンパルートを選択した場合、可視化剤の注入部位は、図２に示す上肢注入部位１～１７から選択される１又は複数の注入部位であってよく、図２に示す上肢注入部位４、７、９、１４及び１６から選択される１又は複数の注入部位であってもよい。

また、例えば、選択ステップにおいて、上肢の前腕正中ルート、橈側ルート、副橈側ルート、尺側ルート及び副尺側ルートの全てを評価対象として選択した場合、可視化剤の注入部位は、図２に示す上肢注入部位４、７、９、１４及び１６であってよい。上肢注入部位４、７、９、１４及び１６の全てを可視化剤の注入部位とすることで、上肢の５つのリンパルートの全てを網羅的に評価することができる。

可視化剤は、人体への投与が許容されるものであれば、特に制限されない。また、可視化剤は、可視化方法（検出方法）に応じて、適切なものを選択すればよい。可視化剤としては、例えば、従来リンパ系造影検査法に用いられている造影剤（例えば、リピオドール、インドシアニングリーン、^９９ｍＴｃ標識スズコロイド等）を用いることができる。可視化剤としては、従来の造影剤に加えて、例えば、その他の色素（例えば、パテントブルー）、蛍光色素（例えば、インジコカルミン）、放射性同位体標識化合物（例えば、^９９ｍＴｃ標識テクネチウム人血清アルブミン）を用いることもできる。

注入ステップは、選択した注入部位から可視化剤を注入するステップである。

可視化剤の注入方法は、特に制限されず、従来の造影剤の注入方法と同様の方法を採用できる。例えば、生理食塩水、緩衝液等の適切な溶媒に溶解又は懸濁させた可視化剤を注射器を使用して注入部位に注射する方法等を採用することができる。

評価ステップは、注入した可視化剤を可視化し、評価対象となる１又は複数のリンパルートの機能を評価するステップである。

可視化剤の可視化方法は、使用する可視化剤の種類に応じて選択すればよい。例えば、可視化剤として蛍光色素（例えば、インドシアニングリーン、リピオドール、パテントブルー、インジコカルミン）を採用した場合、当該蛍光色素を励起及び蛍光検出可能な光源（又はフィルター）を備えた赤外観察カメラシステムにより、可視化及びデータ収集が可能である。赤外観察カメラシステムとしては、例えば、ＰＤＥ（浜松ホトニクス社製）、ハイパーアイメディカルシステム（ミズホ社製）、ＬＩＧＨＴＶＩＳＩＯＮ（島津製作所社製）、ＳＰＹシステム（Ｎｏｖａｄａｑ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ社製）などを挙げることができる。また、例えば、可視化剤として放射性同位体標識化合物（例えば、^９９ｍＴｃ標識スズコロイド、^９９ｍＴｃ標識フィチン酸塩、^９９ｍＴｃ標識テクネチウム人血清アルブミン）を採用した場合、放射線検出器により、可視化及びデータ収集が可能である。放射線検出器としては、例えば、ガンマカメラ、単一光子放射断層撮影（ＳＰＥＣＴ）装置、ポジトロン断層法（ＰＥＴ）装置、ＳＰＥＣＴ－ＣＴ装置を挙げることができる。

注入した可視化剤を可視化した結果、リンパルートが可視化されなかった場合は、リンパ管が消失している、リンパがリンパ管内を移動できない等の理由が考えられ、リンパ系（リンパ管）の機能が障害されていると判断することができる。また、注入した可視化剤を可視化した結果、注入部位から想定されるリンパルートとは異なるリンパルートが可視化された場合は、想定されるリンパルートが何らかの障害を受け、可視化されたリンパルートが、代替ルートになっている等の理由が考えられ、同様にリンパ系（リンパ管）の機能が障害されていると判断することができる。

また、リンパ管はリンパ節等の他のリンパ組織と連結しているため、実施形態の方法によれば、リンパ管のみならず、リンパ節及び他のリンパ組織をも選択的に可視化することができる。したがって、例えば、リンパ節が可視化されなかった場合、リンパ節が消失している、リンパ管とリンパ節の連結が途切れている等の理由が考えられ、リンパ系（リンパ節、リンパ管）の機能が障害されていると判断することもできる。

実施形態の方法は、例えば、原発性リンパ浮腫、続発性リンパ浮腫、静脈性浮腫、廃用性浮腫等の疾患の診断、治療効果の確認、予後の診断等に応用することができる。実施形態の方法はまた、例えば、リンパ節郭清術後のリンパ浮腫予防のためのリバースマッピングに応用することもできる。

〔リンパ系機能評価装置〕
一実施形態において、リンパ系機能評価装置は、撮像装置と組み合わせてリンパ系機能評価システムとして使用される。撮像装置としては、例えば、蛍光検出器、放射線検出器が挙げられる。

図３は、一実施形態に係るリンパ系機能評価システム１の概略構成を示すブロック図である。図３に示すリンパ系機能評価システム１は、撮像装置３及び光照射装置５を内蔵するカメラユニット７（蛍光検出器）とリンパ系機能評価装置Ｄとにより構成される。

（カメラユニット）
光照射装置５は、観察対象物Ｐ（例えば、被験者）に対して蛍光観察のために蛍光色素を励起するための励起光Ｌ_１を出力する光源５ａと、光源５ａの励起光Ｌ_１の出力を制御する光源制御部５ｂとを内蔵する。光源５ａは、ＬＥＤ（発光ダイオード）、ＬＤ（レーザダイオード）及びＳＬＤ（スーパールミネッセントダイオード）等の発光素子、並びにハロゲンランプ及びキセノンランプ等のランプ光源などであり、蛍光色素を励起する波長の光を出力する。例えば、蛍光色素がＩＣＧの場合、蛍光色素の吸収波長のピークが体内で８００ｎｍ付近であるため、光源５ａは、例えば、出力光の波長が７００ｎｍ～８１０ｎｍのものが使用される。光源制御部５ｂは、電気的に接続された光照射制御部（図示せず）による制御により、光源５ａの励起光Ｌ_１の出力及び出力強度（照射強度）を制御する光照射制御回路（例えば、プロセッサ）である。なお、光源５ａから出力される光の波長は蛍光の波長を含まないことが好ましいが、光源５ａから出力される光の波長が蛍光の波長を含む場合、光照射装置５は、光源５ａから出力される光のうち蛍光の波長と同じ波長の光を遮光する光学フィルタ（図示せず）を備えてもよい。

光照射制御部は、光照射装置５による励起光照射に関する光照射条件を設定する。そして、光照射制御部は、設定した光照射条件で励起光を照射するように、光源制御部５ｂを制御する。光照射制御部は、光照射条件の設定や光源制御部５ｂの制御を行う光照射制御回路（例えば、プロセッサ）である。光照射制御部は、リンパ系機能評価装置Ｄに内蔵されていてもよい。

撮像装置３は、撮像制御部（図示せず）の制御によって観察対象物Ｐからの蛍光を含む観察光Ｌ_２の像を撮像する装置である。撮像装置３は、蛍光色素が発する蛍光の波長を含む光を透過させ、励起光Ｌ_１の波長の光を遮断する光学フィルタ３ａと、光学フィルタ３ａを透過した観察光Ｌ_２を受光し、それらの光を光電変換することにより画像データを出力する撮像素子（ｉｍａｇｅ ｓｅｎｓｏｒ）３ｂと、撮像制御部の制御により撮像素子３ｂの露光タイミング、露光時間、及び信号読み出しを制御する撮像素子制御部３ｃとを含んで構成される。撮像素子制御部３ｃは、撮像制御部の制御により撮像素子３ｂのフレームレート、露光タイミング、露光時間、及び信号読み出し等を制御する撮像制御回路（例えば、プロセッサ）である。撮像素子３ｂは、ＣＣＤイメージセンサ又はＣＭＯＳイメージセンサ等のエリアイメージセンサであり、２次元的に配列された複数の画素（光電変換素子）によって構成された受光面を有している。この撮像素子３ｂは、撮像制御部３ｃからの制御により露光時間を可変に調整可能にされている。

撮像制御部は、撮像装置３の動作を制御する撮像制御回路（例えば、プロセッサ）である。具体的には、例えば、撮像制御部は、撮像素子３ｂの露光時間、露光タイミング、フレームレート等の撮像条件を設定し、設定された撮像条件に基づいて撮像を行うように撮像素子制御部３ｃを制御する。撮像素子３ｂとしては、ＣＣＤイメージセンサ、又はグローバルシャッタ方式のＣＭＯＳイメージセンサ、ローリングシャッタ方式のＣＭＯＳイメージセンサ等が挙げられる。露光時間の調整は、ＣＣＤイメージセンサ又はＣＭＯＳイメージセンサの電子シャッタにより調整してもよいし、観察対象物Ｐと撮像素子３ｂとの間に物理的な絞りやシャッタ等を設け、それらの開閉を制御してもよいし、それらの開閉量を調整してもよい。撮像制御部は、リンパ系機能評価装置Ｄに内蔵されていてもよい。

上記構成のカメラユニット７により、撮像素子３ｂは観察対象物Ｐからの蛍光を含む観察光Ｌ_２を受光（撮像）し、それに応じて画像データを出力する。リンパ系機能評価装置Ｄは、第２の取得手段によりこの画像データ（可視化剤を注入された被験者の可視化剤像）を取得する。

（リンパ系機能評価装置）
リンパ系機能評価装置Ｄの構成について説明する。図４は、一実施形態に係るリンパ系機能評価装置Ｄのハードウェア的構成を示す概要図であり、図５は、一実施形態に係るリンパ系機能評価装置Ｄの機能的構成を示す概要図である。

図４に示すように、リンパ系機能評価装置Ｄは、物理的には、ＣＰＵ Ｄ１１、ＲＯＭ Ｄ１２及びＲＡＭ Ｄ１３等の主記憶装置、キーボード、マウス及びタッチスクリーン等の入力デバイスＤ１４、ディスプレイ（タッチスクリーンを含む）等の出力デバイスＤ１５、例えばカメラユニット７（蛍光検出器）等の他の装置との間でデータの送受信を行うためのネットワークカード等の通信モジュールＤ１６、ハードディスク等の補助記憶装置Ｄ１７などを含む、通常のコンピュータとして構成される。後述するリンパ系機能評価装置Ｄの各機能は、ＣＰＵ Ｄ１１、ＲＯＭ Ｄ１２、ＲＡＭ Ｄ１３等のハードウェア上に所定のコンピュータソフトウェアを読み込ませることにより、ＣＰＵ Ｄ１１の制御の下で入力デバイスＤ１４、出力デバイスＤ１５、通信モジュールＤ１６を動作させるとともに、主記憶装置Ｄ１２、Ｄ１３、及び補助記憶装置Ｄ１７におけるデータの読み出し及び書き込みを行うことで実現される。

図５に示すように、リンパ系機能評価装置Ｄは、機能的構成要素として、第１の取得手段Ｄ１、第２の取得手段Ｄ２、色設定手段Ｄ３、及び出力手段Ｄ４を備える。また、リンパ系機能評価装置Ｄは、機能的構成要素として、撮像装置を制御する撮像制御部、及び／又は光照射装置を制御する光照射制御部を更に備えるものであってもよい。

第１の取得手段Ｄ１は、被験者の四肢末梢における可視化剤の注入部位の情報を取得するものである。例えば、出力デバイスに図１に示すような図を表示し、当該図の番号に基づき、可視化剤を注入する注入部位の番号を入力デバイスから入力することで、第１の取得手段が、被験者の四肢末梢における可視化剤の注入部位の情報を取得する。また、例えば、出力デバイスがタッチスクリーンで構成されている場合、タッチスクリーンに図１に示すような図を表示し、可視化剤を注入する注入部位をタッチすることで、第１の取得手段が、被験者の四肢末梢における可視化剤の注入部位の情報を取得するものであってもよい。

第２の取得手段Ｄ２は、可視化剤を注入された被験者の可視化剤像（例えば、蛍光像）を取得するものである。例えば、撮像装置が出力する可視化剤像（例えば、蛍光像、放射線像）を第２の取得手段が取得する。

色設定手段Ｄ３は、第１の取得手段により取得した情報、及び四肢に複数存在するリンパルートとそれに対応する四肢末梢の注入部位との情報に基づき、第２の取得手段により取得した可視化剤像に、四肢に複数存在するリンパルート毎に異なる色を設定するものである。例えば、下肢におけるリンパルートは、少なくとも４つのリンパルート（前内側ルート、前外側ルート、後内側ルート及び後外側ルート）に分類でき、可視化剤の注入部位によって、可視化剤が流れるリンパルートが異なる。そこで、色設定部は、可視化剤の注入部位の情報、及び下肢のリンパルートとそれに対応する下肢末梢の注入部位との情報（例えば、図１、図１５及び図１６に示した対応関係の情報、又はそれに準ずる情報（例えば、更なる検体について取得した情報等））に基づいて、可視化剤像がそれぞれのリンパルートに対応する色（例えば、前内側ルートは青、前外側ルートは緑、後内側ルートは紫、後外側ルートは赤など）となるように設定する。これにより、各リンパルートを視覚的に把握しやすくなり、リンパ系の評価が容易に行えるようになる。また、例えば、上肢におけるリンパルートは、少なくとも５つのリンパルート（前腕正中ルート、橈側ルート、副橈側ルート、尺側ルート及び副尺側ルート）に分類でき、可視化剤の注入部位によって、可視化剤が流れるリンパルートが異なる。そこで、色設定部は、可視化剤の注入部位の情報、及び上肢のリンパルートとそれに対応する上肢の注入部位との情報（例えば、図２、図３１及び図３２に示した対応関係の情報、又はそれに準ずる情報（例えば、更なる検体について取得した情報等））に基づいて、可視化剤像がそれぞれのリンパルートに対応する色（例えば、前腕正中ルートはピンク、橈側ルートは紫、副橈側ルートは青、尺側ルートは赤、副尺側ルートは緑など）となるように設定する。これにより、各リンパルートを視覚的に把握しやすくなり、リンパ系の評価が容易に行えるようになる。

出力手段Ｄ４は、色設定手段により色を付した可視化剤像を出力するものである。色を付した可視化剤像は、出力デバイスに出力してもよいし、通信モジュールから他の装置に出力してもよいし、補助記憶装置に出力して記録してもよい。

〔リンパ系機能評価プログラム〕
リンパ系機能評価プログラムは、コンピュータを、上述した第１の取得手段Ｄ１、第２の取得手段Ｄ２、色設定手段Ｄ３、及び出力手段Ｄ４として機能させるものである。コンピュータにリンパ系機能評価プログラムを読み込ませることにより、コンピュータはリンパ系機能評価装置Ｄとして動作する。リンパ系機能評価プログラムは、例えば、コンピュータ読み取り可能な記録媒体に記録されて提供される。記録媒体は、非一時的記録媒体であってもよい。記録媒体としては、フレキシブルディスク、ＣＤ、ＤＶＤ等の記録媒体、ＲＯＭ等の記録媒体、半導体メモリ等が例示される。

（リンパ系機能の評価方法）
リンパ系機能評価装置Ｄにより行われるリンパ系機能の評価方法について説明する。最初に、第１の取得手段Ｄ１が被験者の四肢末梢における可視化剤の注入部位の情報を取得する。次に、第２の取得手段Ｄ２が可視化剤を注入された被験者の可視化剤像を取得する。第１の取得手段Ｄ１及び第２の取得手段Ｄ２による情報の取得は、逆の順番であってもよい。

次に、色設定手段Ｄ３が、第１の取得手段により取得した情報、及び四肢に複数存在するリンパルートとそれに対応する四肢末梢の注入部位との情報（例えば、図１、図１５及び図１６、並びに図２、図３１及び図３２に示した対応関係の情報、又はそれに準ずる情報（例えば、更なる検体について取得した情報等））に基づき、第２の取得手段により取得した可視化剤像に、四肢に複数存在するリンパルート毎に異なる色を設定する。次いで、出力手段Ｄ４が、色設定手段により色を付した可視化剤像を出力する。例えば、各リンパルートが異なる色付けをされた被験者のリンパ系の可視化剤像（例えば、蛍光像）が、出力手段Ｄ４により表示等される。

以下、実施形態を試験例に基づいてより具体的に説明する。以下の全ての試験は、岡山大学病院の倫理委員会の承認（Ｋ１６０５－０２０）のもと実施された。

〔試験例１：下肢のリンパルートのマッピング〕
＜材料及び方法＞
５３体のヒト新鮮遺体の下肢１００本（５５本は男性、４５本は女性）に対して、インドシアニングリーン（ＩＣＧ）リンパ管造影検査を実施した。全ての献体者から事前に書面によるインフォームドコンセントを得た。

（ＩＣＧリンパ管造影検査）
インドシアニングリーン（Ｄｉａｇｎｏｇｒｅｅｎ（登録商標），第一三共株式会社製）２５ｍｇを純水１０ｍＬに溶解させた。注射針（３０Ｇ）を使用して、ＩＣＧ溶液０．０５ｍＬを、図１に示す下肢注入部位１～１９それぞれの皮下層に注射した（１９注入部位／１下肢）。

図１に示す下肢注入部位１～１９は、足背－足底の境界線上に対し、解剖学的ランドマークに従って設定した。各下肢注入部位の詳細は以下に示すとおりである。
下肢注入部位１：内果の下
下肢注入部位５：第１中足骨の頭(head of first metatarsal bone)
下肢注入部位６：第１基節骨の底(base of first proximal phalanx)
下肢注入部位７：第１指間部
下肢注入部位８：第２指間部
下肢注入部位９：第３指間部
下肢注入部位１０：第４指間部
下肢注入部位１１：第５基節骨の底(base of fifth proximal phalanx)
下肢注入部位１２：第５中足骨の頭(head of fifth metatarsal bone)
下肢注入部位１６：外果の下
下肢注入部位１８：踵骨隆起(calcaneal tuberosity)
下肢注入部位３：下肢注入部位１及び下肢注入部位５の中間点
下肢注入部位２：下肢注入部位１及び下肢注入部位３の中間点
下肢注入部位４：下肢注入部位３及び下肢注入部位５の中間点
下肢注入部位１４：下肢注入部位１２及び下肢注入部位１６の中間点
下肢注入部位１３：下肢注入部位１２及び下肢注入部位１４の中間点
下肢注入部位１５：下肢注入部位１４及び下肢注入部位１６の中間点
下肢注入部位１７：下肢注入部位１６及び下肢注入部位１８の中間点
下肢注入部位１９：下肢注入部位１８及び下肢注入部位１の中間点

ＩＣＧ溶液を注射後、直ちに注射部位を優しく手でマッサージした。ＩＣＧの蛍光像は、赤外観察カメラシステムで撮影した（励起波長７６０ｎｍ，蛍光波長８３０ｎｍ）。赤外観察カメラシステムのスライダーで撮影した像をイメージコンポジットエディタ（マイクロソフト社製）で合成し、リンパルート毎に異なる色を設定したパノラマ写真を得た。

＜結果＞
（下肢のリンパルートの分類）
図６（Ａ）は、下肢のリンパ管造影検査結果の一例を示す写真（パノラマ写真）である。図６（Ｂ）は、図６（Ａ）のトレース図である。下肢を足関節レベルで４つの領域（前内側、前外側、後内側、及び後外側）に分割した。「前」と「後」は、外果の後縁（「×」で示す。）と内果の前縁（「△」で示す。）を基準として定義した。「×」と「△」を境界として踵側が「後」であり、その反対側が「前」である。「内」と「外」は、踵骨粗面（「〇」で示す。）と、内果の前縁と外果の後縁との間の前方の中点（「□」で示す。）を基準として定義した。「〇」と「□」を境界として内果側が「内」であり、外果側が「外」である。

下肢のリンパ管は、足関節レベルで通過する位置に応じて、前内側ルート、後外側ルート、前外側ルート、及び後内側ルートの４つのリンパルートに大別できることが判明した。図６（Ｂ）中、各リンパルート（前内側ルート、後外側ルート、前外側ルート又は後内側ルート）は、ハッチングの種類の違いにより区別している。

（各リンパルートの詳細分析）
１．前内側ルート
図７（Ａ）は、前内側ルートを造影した結果の一例を示す写真である。図７（Ｂ）は、図７（Ａ）のトレース図である。「□」は内果の前縁と外果の後縁との間の前方の中点を示し、「◇」は、「□」と脛骨粗面との中点を示す。前内側ルートは、従来から認識されてきた前内側束に一致しており、出現率は１００％（１００／１００）であった。

前内側ルートは、足背部の大部分から始まり、足背部では多くの分岐及び融合を繰り返しているが、足関節以後（足関節より中枢側）は分岐融合は少なくなる。前内側ルートは、足関節レベルでは、はっきりとした束となって、前内側を通過する（１００％：１００／１００）。前内側ルートが、足関節レベルで前外側又は後内側まで広がる例は、ごく少数であった（４％：４／１００）。

前内側ルートは、下腿下方では外側に弧を描き、かつ下腿上方では内側に弧を描くため、シグモイドを描きながら上向する。前内側ルートは、下腿中点において前外側まで広がって通過するものはまれであった（１５％：１５／１００）。前内側ルートは、下腿途中で後内側に移動し、かつ膝関節では内側から後面を通るため、下腿途中で大伏在静脈を乗り越える形で上向する。

２．後外側ルート
後外側ルートは、従来から認識されてきた後外側束に一致しており、出現率は９２％（９２／１００）であった。

後外側ルートは、踵部外側から始まり、足関節レベルでは、１又は２本の直線として後外側を通過した（９８．９１％：９１／９２）。後外側ルートが、足関節レベルで後外側以外の領域に広がる例は、ごく少数であった（４．４％：４／９２）。

後外側ルートは、膝窩付近まで上向した後、大腿部の深部に移行する。後外側ルートが、膝窩から鼠径部にかけて大腿部内側の表層を上向する例も時々観察された。後外側ルートが、後内側ルート又は前外側ルートと連結する例が、まれに観察された（７．６％：４／９２）。

３．前外側ルート
図８（Ａ）は、前外側ルートを造影した結果の一例を示す写真である。図８（Ｂ）は、図８（Ａ）のトレース図である。「×」は外果の後縁を示し、「□」は内果の前縁と外果の後縁との間の前方の中点を示し、「◇」は、「□」と脛骨粗面との中点を示す。前外側ルートは、前内側ルート（前内側束）の外側に位置しており、出現率は８７％（８７／１００）であった。

前外側ルートは、足背部の外側から始まっており、また前内側ルートとは明らかに独立した始部（盲端）を有する。前外側ルートは、足関節レベルでは、１又は２本の直線として前外側を上向しており、前内側ルートの束からは離れた領域を通過している。

前外側ルートは、下腿では前外側を上向することがほとんどだが、時に大きく後外側にまで広がる場合もある。前外側ルートは、最終的には前内側に移動するが、下腿の中点以下で前内側に移行するもの（１１．５％：１０／８７）、下腿の中点と脛骨粗面の間で前内側に移行するもの（４９．４％：４３／８７）、脛骨粗面より上で前内側に移行するもの（３９．１％：３４／８７）があった。

前外側ルートは、大腿部で前内側ルートと近接するが、前内側ルートとは交錯せず、相対的な位置関係は変わらない。前外側ルートが、前内側ルートと連結する例が、少数観察された（１７．２％：１７／８７）。

４．後内側ルート
図９（Ａ）は、後内側ルートを造影した結果の一例を示す写真である。図９（Ｂ）は、図９（Ａ）のトレース図である。「△」は内果の前縁を示す。後内側ルートは、前内側ルート（前内側束）の内側に位置しており、出現率は９５％（９５／１００）であった。

後内側ルートは、足側部の中央から始まっており、前内側ルートとは独立した始部（盲端）を有する。後内側ルートは、下腿では直線的に、又は前側に弧を描いて上向する。後内側ルートは、大部分は下腿で前内側ルートの下側（足の深部方向）に潜り込んでいた（６９．４７％：６６／９５）。後内側ルートは、大伏在静脈に沿ったルートであった。

後内側ルートと前内側ルートとの連結の詳細は、両ルートが交錯しているため観察できなかった。しかし、下腿において、両者が少なくとも数点で連結していることが確認された。

図１０～図１３は、下腿のリンパ管に色素を注入後、解剖して撮影した写真である。図１０から、後内側ルート（実線矢印で示す。）が、大伏在静脈本幹（破線矢印で示す。）に沿っていること、前内側ルート（矢印頭で示す。）が、大伏在静脈本幹（破線矢印で示す。）とは伴走しないことが分かる。図１１から、前内側ルート（矢印頭で示す。）が、大伏在静脈分枝（破線矢印で示す。）と伴走することが分かる。図１２から、前内側ルート（矢印頭で示す。）をめくると、大伏在静脈本幹（破線矢印で示す。）に沿って、後内側ルート（実線矢印で示す。）が伴走するのが更によく分かる。図１３から、後内側ルート（実線矢印で示す。）が、筋膜直上に存在することが分かる。図１４は、図１０～図１３から分かることを模式的にまとめたものである（図１４（Ｂ）は、下肢の断面図である。）。図１４に示すとおり、後内側ルートは、大伏在静脈本幹に沿ったメインルートであること、従来メインルートだと考えられていた前内側ルートは、大伏在静脈分枝に沿ったサブルートであることが分かる。

（下腿下方における各リンパルートの始部（盲端）のマッピング）
図１５は、各献体における下肢注入部位１～１９と、それぞれに対応する下肢のリンパルート（前内側ルート、後外側ルート、前外側ルート又は後内側ルート）との関係をマッピングした表である。図１６は、各リンパルート（前内側ルート、後外側ルート、前外側ルート又は後内側ルート）について、造影が可能であった頻度（造影が可能であった献体数／総献体数）を下肢注入部位毎に示すグラフである。

図１５及び図１６に示すとおり、１つの下肢注入部位に対して１つのリンパルートにのみ造影剤が取り込まれる場合が大多数であったが、１つの下肢注入部位から２つのリンパルートに造影剤が取り込まれることも稀にあった。一方、１つの下肢注入部位から３つ以上のリンパルートに造影剤が取り込まれることはなかった。

図１５及び図１６に示すとおり、前内側ルートは、下肢注入部位７及び１０に造影が可能であった頻度のピーク（極大値）を有していた。後外側ルートは、下肢注入部位１６に造影が可能であった頻度のピーク（極大値）を有していた。前外側ルートは、下肢注入部位１０及び１４に造影が可能であった頻度のピーク（極大値）を有していた。後内側ルートは、下肢注入部位１に造影が可能であった頻度のピーク（極大値）を有していた。

＜考察＞
本試験により、下肢のリンパルートは、前内側ルート、後外側ルート、前外側ルート、及び後内側ルートの４つのリンパルートに大別できることが判明した。これら４つのリンパルートは、特に下腿では各リンパルート同士の合流が少なく、独立して存在していた。

また、これら４つのリンパルートを造影し得る造影剤の注入部位は、足背－足底の境界線上にリンパルート毎に分布しており、各下肢注入部位に対して各リンパルートに造影剤が取り込まれる確率（造影が可能であった頻度）が明らかとなった。図１７は、試験例１の結果に基づき、下肢下方において、各リンパルート（前内側ルート、後外側ルート、前外側ルート又は後内側ルート）が占める領域をマッピングした模式図である。

下腿では各リンパルート同士の合流が少ないため、従来行われているように下肢末梢から一つのリンパルートのみを造影しても、他のリンパルートの評価が充分ではない可能性が高い。特にリンパ管が変性を起こし、リンパルート障害が生じているリンパ浮腫では、内側有意の浮腫が多いため、障害されるリンパルートに偏りがあることが予想される。そのため、存在し得るリンパルート全てを評価する必要があると考えられる。このような評価は、残存するリンパ管・リンパ節やリンパルートを検索することが重要になるリンパ管静脈吻合術、及びリンパ節移植時に必須になる。加えて、全てのリンパ系造影法でも、独立した４つのリンパルートを意識して、検査プロトコールを作成することが今後必要になる。

〔試験例２：患者における下肢のリンパ管の造影〕
＜方法＞
患者は、骨盤内リンパ節郭清、及び骨盤の放射線治療により、右下肢に続発性リンパ浮腫（ISL（international society of lymphology）分類ステージ２）を発症した７２歳の女性であった。左下肢には浮腫はなかった(ISL分類ステージ0)。

この患者に対し、試験例１のＩＣＧリンパ管造影検査と同様の手順で下肢のリンパ管造影を実施した。造影剤の注入部位は、試験例１で得られた結果（特に、図１、図１５及び図１６に示す結果）を参考にして決定した。

＜結果及び考察＞
図１８（Ａ）に造影結果を示した。図１８（Ｂ）は、図１８（Ａ）をトレースしたトレース図である。図１８（Ｂ）中、下肢の各リンパルート（前内側ルート、後外側ルート、前外側ルート又は後内側ルート）は、線種の違いにより区別している。前内側ルート：一点鎖線、後外側ルート：二点鎖線、前外側ルート：実線、後内側ルート：破線。

右下肢は、下肢注入部位１６（図１参照）から造影剤を注入することで、後外側ルートを下腿途中まで造影できたが、途中でリンパ液溜まり（ダーマルバックフロー）に変化した。右下肢の後内側ルートは、いずれの下肢注入部位からも造影することができず、下肢注入部位１（図１参照）に注入した場合は、注入部位からリンパ液溜まりが造影された。下肢注入部位１及び１６に造影剤を注入した後、前内側ルート及び前外側ルートは造影されなかった。

右下肢の下肢注入部位７、１０及び１６（図１参照）に造影剤を注入することで、前外側ルートのみが造影された。前内側ルートは欠損していた。前外側ルートは、下腿途中でリンパ液溜まりに変化した。

試験例１では、前内側ルートの出現率が１００％であり、下肢注入部位７からは５％の確率でしか前外側ルートは造影されなかった。このことから、本患者において、下肢注入部位７から前外側ルートが造影されたこと、及び前内側ルートが造影されなかったことは、異常状態を示しているといえる。

患者の左下肢は、下肢注入部位１、７、１０、１４及び１６から造影剤を注入することで、全リンパルートが問題なく造影された。なお、図１５及び図１６に示した結果から分かるように、下肢注入部位１、７、１４及び１６から造影剤を注入することで、全リンパルートを造影可能である。

〔試験例３：下肢のリンパ管及びリンパ節の造影〕
試験例１で定義した下肢の各リンパルート（前内側ルート、後外側ルート、前外側ルート及び後内側ルート）について、（ｉ）最初に到達するリンパ節、（ｉｉ）２番目以降に到達するリンパ節、及び（ｉｉｉ）各リンパルートの走行を解析した。

＜方法＞
ヒト新鮮遺体の下肢１２０本に対して、コンピューター断層撮影（以下、CT）リンパ系造影検査を実施した。全ての献体者から事前に書面によるインフォームドコンセントを得た。

（CTリンパ系造影検査）
各リンパルートあたり、下肢３０本（４リンパルートで計１２０本）をCTリンパ系造影検査に供した。まずＩＣＧリンパ管造影を行い同定したリンパ管に直接ＣＴ造影剤を注入することでＣＴリンパ系造影の画像を得た。全てのリンパルートの造影検査では、図１に示す下肢注入部位１～１９にＩＣＧ溶液を注射し、解剖学的特徴に基づいてリンパ管を同定した。

ＩＣＧ溶液を注射後、直ちに注射部位を優しく手でマッサージした。ＩＣＧの蛍光像は、赤外観察カメラシステムで撮影した（励起波長７６０ｎｍ，蛍光波長８３０ｎｍ）。同定されたリンパ管を足関節付近で剖出した。ＣＴ造影剤はヨード化ケシ油脂肪酸エチルエステル注射液（リピオドール（登録商標），ゲルベ・ジャパン）５ｍｌをジエチルエーテル２０ｍＬに溶解させた溶液とした。注射針（３２Ｇ）を使用して、同定し剖出されたリンパ管にリピオドール溶液２ｍＬを直接注射した。

＜結果＞
図１９は、本明細書における鼠径部の浅リンパ節群の定義を示す図である（参考：Foldi's Textbook of Lymphology 3rd Edition for Physicians andLymphedema Therapists, Editors: Michael Foldi, Ethel Foldi, Published Date:30th April 2012, Imprint: Urban & Fischer）。図１９に示すとおり、鼠径部の浅リンパ節群を、大伏在静脈を縦軸、伏在裂孔（大腿静脈との合流部）から水平を横軸にとり、（１）下外側群（ＩＬ１～３）、（２）下内側群（ＩＭ１～３）、（３）上内側群（ＳＭ）、（４）上外側群（ＳＬ）及び（５）中心群（Ｃ）に分ける。そして、ＩＬ及びＩＭリンパ節群は、大伏在静脈に沿ったものを１番（ＩＬ１）、横軸付近のものを３番（ＩＬ３）、その間を２番（ＩＬ２）と定義する。

（後内側ルート）
図２０は、後内側ルートを造影したときのリンパルートの走行を示すＣＴリンパ系造影画像を３次元構築したものである。３カ所の下肢断面図において、リンパルートが白く造影されている。後内側ルートは、実際の解剖所見と同様に脛骨内縁に沿うように上行し、深筋膜直上の層を走行した。後内側ルートは、大腿部では縫工筋後縁に沿うように上行した。後内側ルートは、大伏在静脈と同等又は深い層を走行した。後内側ルートは、一部大腿遠位部で深筋膜下に潜り込み、大腿動脈付近を走行した。リンパ節に達する前に深部系と合流する走行は、他のリンパルートにはない所見である。後内側ルートは、概して大伏在静脈本幹の走行に一致する。

図２１は、後内側ルートが最初に到達するリンパ節の頻度をプロットしたグラフである。図２１に示すとおり、後内側ルートの多くは、ＩＬ１リンパ節に到達した。また、後内側ルートの一部は、ＩＬ２リンパ節、ＩＭ１～ＩＭ３リンパ節に到達した。さらに、後内側ルートの中には、頻度は低いものの、直接深鼠径リンパ節（ＤＩ）に合流したものがあった。ＤＩに合流するのは、他のリンパルートにはない特徴である。

（前内側ルート）
図２２は、前内側ルートを造影したときのリンパルートの走行を示すＣＴリンパ系造影画像を３次元構築したものである。３カ所の下肢断面図において、リンパルートが白く造影されている。前内側ルートは、下腿では脛骨内縁を交差するように走行した。前内側ルートは、大腿部では縫工筋より内側を走行した。前内側ルートは、大伏在静脈本幹と同等か浅い層を走行した。

図２３は、前内側ルートが最初に到達するリンパ節の頻度をプロットしたグラフである。図２３に示すとおり、前内側ルートが最初に到達するリンパ節の分布は、後内側ルートのものとよく似ていたが、深鼠径リンパ節（ＤＩ）に到達することはなかった。また、前内側ルートは、ＩＬ３リンパ節、ＩＬ２リンパ節、ＩＭ１リンパ節及びＩＭ２リンパ節に到達する頻度が、後内側ルートより高かった。

（前外側ルート）
図２４は、前外側ルートを造影したときのリンパルートの走行を示すＣＴリンパ系造影画像を３次元構築したものである。３カ所の下肢断面図において、リンパルートが白く造影されている。前外側ルートは、下腿前面を外側より通過し、下腿近位にて下肢内側に移行した。前外側ルートは、大腿部では縫工筋の前面を通過した。

図２５は、前外側ルートが最初に到達するリンパ節の頻度をプロットしたグラフである。図２５に示すとおり、前外側ルートは、ＩＬ２リンパ節に最も多く到達し、次いでＩＬ１リンパ節に多く到達した。また、前外側ルートの一部は、ＳＬリンパ節群に到達した。ＳＬリンパ節群に到達するのは、他のリンパルートにはない特徴である。

（後外側ルート）
図２６は、後外側ルートを造影したときのリンパルートの走行を示すＣＴリンパ系造影画像を３次元構築したものである。３カ所の下肢断面図において、リンパルートが白く造影されている。後外側ルートは、１～２本存在し、下腿の後面を上行した。後外側ルートは、膝下で浅膝下リンパ節に合流した後は、筋膜下に入り、多くは大腿動脈に沿って上行した。後外側ルートの一部は、下腿若しくは膝下から、又は時折大腿部の途中で、前内側又は前外側グループに枝を出した。

図２７は、後外側ルートが最初に到達するリンパ節の頻度をプロットしたグラフである。図２７には、他のリンパルートが最初に到達するリンパ節の頻度も併せてプロットしてある（すなわち、図２１、図２３及び図２５のプロットも併合している。）。図２７に示すとおり、後外側ルートは、ほとんどが、浅膝下リンパ節（ＳＰ）に到着した。後外側ルートの一部は、下腿、膝下又は大腿部で枝を出すことにより、ＩＬ２リンパ節又はＩＬ１リンパ節に到達した。

下記表１に下肢の各リンパルートが最初に到達するリンパ節の頻度を示す。

図２８は、下肢の各リンパルートが２番目以降に到達するリンパ節（すなわち、最初に到達するリンパ節以外で、各リンパルートが到達するリンパ節）の頻度をプロットしたグラフである。図２８に示すとおり、後内側ルートは、ＳＬリンパ節群、ＩＬ３リンパ節、ＩＬ２リンパ節、ＩＭ２リンパ節、ＩＭ３リンパ節、ＳＭリンパ節群、深鼠径リンパ節（ＤＩ）及びＣリンパ節群に到達した。図２８に示すとおり、前内側ルートは、ＳＬリンパ節群、ＩＬ３リンパ節、ＩＬ２リンパ節、ＩＭ２リンパ節、ＩＭ３リンパ節、深鼠径リンパ節（ＤＩ）及びＣリンパ節群に到達した。図２８に示すとおり、前外側ルートは、ＳＬリンパ節群、ＩＬ３リンパ節、ＩＭ２リンパ節、ＩＭ３リンパ節、ＳＭリンパ節群、深鼠径リンパ節（ＤＩ）及びＣリンパ節群に到達した。図２８に示すとおり、後外側ルートは、ＩＬ１リンパ節、ＩＭ２リンパ節、ＳＭリンパ節群、深鼠径リンパ節（ＤＩ）及び深膝下リンパ節（ＤＰ）に到達した。

図２８に示すとおり、前内側ルートが最も高い頻度で２番目以降のリンパ節に到達した。中でも、前内側ルートは、ＳＬリンパ節群に到達する頻度が最も高く、また他のどのリンパ節にも到達する可能性があった。下肢の各リンパルートのいずれも、ＩＬ１リンパ節及びＩＬ２リンパ節に２番目以降に到達する可能性はほぼなかった。

＜考察＞
下肢のリンパルートを網羅的に解析した結果、下肢末梢側からのリンパは、ＩＬ１リンパ節、ＩＬ２リンパ節及び浅膝下リンパ節のいずれかのリンパ節に高頻度に最初に到達することが分かった。下肢末梢側からのリンパは、鼠径部の浅リンパ節群のうち、ＩＬ１リンパ節、ＩＬ２リンパ節及び浅膝下リンパ節以外のリンパ節に到達する頻度（可能性）は低いため、ＩＬ１リンパ節、ＩＬ２リンパ節及び浅膝下リンパ節以外のリンパ節は、補助的な役割を果たしていると推察される。また、下肢末梢側からのリンパが、２番目以降に到達するリンパ節は無数のつながりを有していた。試験例３の結果より、下肢のリンパ節を評価する際は、ＩＬ１リンパ節、ＩＬ２リンパ節及び浅膝下リンパ節を造影対象とすることで、下肢末梢からのリンパ系（リンパ節、リンパ管）の機能全体を評価できることが分かる。

従来、下肢のリンパ系造影検査時に１カ所造影剤を注入することで、全てのリンパ節を検査できていると考えられていた。しかし、試験例３の結果は、下肢の各リンパルート（前内側ルート、後外側ルート、前外側ルート及び後内側ルート）は、責任リンパ節（最初に到達するリンパ節）が必ずしも一致するわけではないことを示しており、リンパ節を網羅的に評価するためには、下肢のリンパルートを網羅的に解析する必要があることが分かる。また、無数にある鼠径リンパ節のうち、下肢リンパ系の責任リンパ節と、それ以外の補助リンパ節を分けて機能評価することができる。

〔試験例４：上肢のリンパルートのマッピング〕
＜材料及び方法＞
５３体のヒト新鮮遺体の上肢１００本に対して、インドシアニングリーン（ＩＣＧ）リンパ管造影検査を実施した。全ての献体者から事前に書面によるインフォームドコンセントを得た。

（ＩＣＧリンパ管造影検査）
インドシアニングリーン（Ｄｉａｇｎｏｇｒｅｅｎ（登録商標），第一三共株式会社製）２５ｍｇを純水１０ｍＬに溶解させた。注射針（３０Ｇ）を使用して、ＩＣＧ溶液０．０５ｍＬを、図２に示す上肢注入部位１～１７それぞれの皮下層に注射した（１７注入部位／１上肢）。

図２に示す上肢注入部位１～１７は、手背－手掌の境界線上に対し、解剖学的ランドマークに従って設定した。各上肢注入部位の詳細は以下に示すとおりである。
上肢注入部位１：橈骨茎状突起遠位端(distal of radial styloid process)
上肢注入部位５：第１中手骨頭(the first head of metacarpi)
上肢注入部位３：上肢注入部位１及び上肢注入部位５の中間点
上肢注入部位２：上肢注入部位１及び上肢注入部位３の中間点
上肢注入部位４：上肢注入部位３及び上肢注入部位５の中間点
上肢注入部位６：第１指間(the first interdigital space)
上肢注入部位７：第２指間(the second interdigital space)
上肢注入部位８：第３指間(the third interdigital space)
上肢注入部位９：第４指間(the fourth interdigital space)
上肢注入部位１０：第５中手骨頭(the fifth head of metacarpi)
上肢注入部位１４：尺骨茎状突起遠位端(distal of radial styloid process)
上肢注入部位１２：上肢注入部位１０及び上肢注入部位１４の中間点
上肢注入部位１１：上肢注入部位１０及び上肢注入部位１２の中間点
上肢注入部位１３：上肢注入部位１２及び上肢注入部位１４の中間点
上肢注入部位１６：上肢注入部位１及び上肢注入部位１４の中間点（手掌側）
上肢注入部位１５：上肢注入部位１４及び上肢注入部位１６の中間点
上肢注入部位１７：上肢注入部位１６及び上肢注入部位１の中間点

ＩＣＧ溶液を注射後、直ちに注射部位を優しく手でマッサージした。ＩＣＧの蛍光像は、赤外観察カメラシステムで撮影した（励起波長７６０ｎｍ，蛍光波長８３０ｎｍ）。赤外観察カメラシステムのスライダーで撮影した像をイメージコンポジットエディタ（マイクロソフト社製）で合成し、リンパルート毎に異なる色を設定したパノラマ写真を得た。

＜結果＞
（上肢のリンパルートの分類）
図２９（Ａ）は、上肢のリンパ管造影検査結果の一例を示す写真（パノラマ写真）である。図２９（Ｂ）は、図２９（Ａ）のトレース図である。上肢のリンパルートを、それらの解剖学的な走行に応じて、サブグループに分類した。上肢のリンパ管は、腋窩リンパ節方向へ収束するように走行していくため、上腕では非常に密集している。そのため、手関節から肘までのリンパ管の走行に対して、解剖学的ランドマークを用いて分類した。その結果、副橈側ルート（Accessory cephalic）、副尺側ルート（Accessory basilic）、橈側ルート（Cephalic）、尺側ルート（Basilic）及び前腕正中ルート（Median）の５つのサブグループに分けることができた（図２９（Ｂ）参照）。これらは概ね皮静脈の走行に一致していたため、それに応じた名前をつけている。

更に、解剖学的なランドマークとして、上腕骨内側上顆（図２９及び図３０中、「×」で示す。）、上腕骨外側上顆（図２９及び図３０中、「△」で示す。）、橈骨茎状突起（図２９及び図３０中、「□」で示す。）、尺骨茎状突起（図２９及び図３０中、「○」で示す。）及び肘頭を用いて、リンパルートを分類した。図３０は、リンパルートの走行を説明するための上肢領域の定義を示す図である。まず、肘窩において上腕骨内側上顆と上腕骨外側上顆との間を４等分し、内側から順にゾーン（Zone）Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ及びＩＶとし、ゾーンＩ～ＩＶ以外の肘頭をゾーンＶと設定し、走行するリンパルートを分類した。また、前腕において、橈側では上腕骨外側上顆と橈骨茎状突起の中点（図３０のＲ点）を設定し、尺側では上腕骨内側上顆と尺骨茎状突起の中点（図３０のＵ点）を設定し、指標とした。

（各リンパルートの詳細分析）
１．副橈側ルート
副橈側ルートは、主に手背橈側から起始し、副橈側皮静脈に沿って走行する。副橈側ルートの出現率は９４％（９４／１００）であった。副橈側ルートは、手関節レベルでは平均２．０本のリンパ管が通過し全体的に橈側にゆるくＳ状のカーブを描きながらＲ点より近位を通り上行し、肘窩でゾーンＩＶを通るリンパ管が主であった（９６％：８６／９０）。他に、肘窩のゾーンＩＩＩ（３％：３／９４）、ゾーンＶ（１％：１／９４）のみを通過する場合が認められた。１１肢において、前腕で副尺側ルートとコネクションを有していた（１１％：１１／１００）。また、鎖骨上リンパ節へつながるルートを持つものが１２肢認められた（１２％：１２／１００）。

２．橈側ルート
橈側ルートは、母指中手骨中点あたりに起始部を持ち、橈側皮静脈に沿って走行する。橈側ルートの出現率は９９％（９９／１００）であった。橈側ルートは、手関節レベルでは平均１．８本のリンパ管が通過し、橈骨茎状突起より手背側を回り込み、Ｒ点より遠位で前腕屈側に達し肘窩ゾーンＩＩＩを通って上腕に至るリンパ管が主であった（９６％：９５／９９）。他に肘窩ゾーンＩＩを通るものが認められた（４％：４／９９）。副橈側ルートよりやや屈側を橈側皮静脈に沿って走行する。肘窩を通った後に上腕二頭筋間のリンパ節を介して深部へ消えるものが３例のみ認められた（３％：３／９５）。上腕では、前腕正中ルートのリンパ管と重なるため、近赤外分析（NIR）によって区別ができないことが多かった。

３．副尺側ルート
副尺側ルートは、主に、手背尺側から起始し、尺骨茎状突起を回り込み前腕尺側方向へカーブして屈側へと至り上行する。副尺側ルートの出現率は１００％（１００／１００）であった。副尺側ルートは、手関節レベルでは平均２．８本のリンパ管が通過し肘窩ゾーンＩを通過し上腕へ至るリンパ管が主であった（９６％：９６／１００）。４０肢はゾーンＶを通り上腕へ上行するリンパ管も併存した。副尺側ルートのリンパ管は、前腕Ｕ点の近位と遠位の両方を通るものが多く、上腕の尺側を広く走行した。

４．尺側ルート
尺側ルートは、尺骨遠位端の掌側と手背の境界部から起始し、尺側皮静脈に沿って前腕を上行し、肘窩ゾーンＩを通過して上腕へ至る。尺側ルートの出現率は８１％（８１／１００）であった。尺側ルートは、１又は２本のリンパ管が走行し、前腕尺側において数本の副尺側ルートのリンパ管と合流しながら上行した。

５．前腕正中ルート
前腕正中ルートは、手関節腹側を起始部として、手関節レベルでは平均４．８本のリンパ管が通過し、前腕正中を上行する。前腕正中ルートの出現率は、１００％（１００／１００）であった。前腕正中ルートは、次第に１又は２本のリンパ管に収束しながら肘窩ゾーンＩＩを通り上腕へ至る。上腕では橈側ルートと重なり上行する。

（上肢における各リンパルートの始部（盲端）のマッピング）
図３１は、各献体における上肢注入部位１～１７と、それぞれに対応する上肢のリンパルート（副橈側ルート、副尺側ルート、橈側ルート、尺側ルート及び前腕正中ルート）との関係をマッピングした表である。図３２は、各リンパルート（副橈側ルート、副尺側ルート、橈側ルート、尺側ルート及び前腕正中ルート）について、造影が可能であった頻度（造影が可能であった献体数／総献体数）を上肢注入部位毎に示すグラフである。

図３１及び図３２に示すとおり、各上肢注入部位に対応するリンパルートはほとんど同一であり、それぞれの上肢注入部位は、特定のリンパルートの起始であることが示された。また、１つの上肢注入部位から２つのリンパルートに造影剤が取り込まれることがあったが、３つ以上のリンパルートに造影剤が取り込まれることはなかった。上肢背側では、副尺側ルートが最も大きな皮膚リンパテリトリーを有し、上肢腹側では前腕正中ルートが大きい皮膚リンパテリトリーを有していた。副橈側ルートが発達しているものでは、副尺側ルートの皮膚リンパテリトリーが小さい場合も認められた。一般的に橈側ルート及び尺側ルートの皮膚リンパテリトリーは小さかった。

＜考察＞
図３１及び図３２に示すとおり、橈側ルートは、上肢注入部位４に造影が可能であった頻度のピーク（極大値）を有していた。副橈側ルートは、上肢注入部位７に造影が可能であった頻度のピーク（極大値）を有していた。副尺側ルートは、上肢注入部位９に造影が可能であった頻度のピーク（極大値）を有していた。尺側ルートは、上肢注入部位１４に造影が可能であった頻度のピーク（極大値）を有していた。前腕正中ルートは、上肢注入部位１６に造影が可能であった頻度のピーク（極大値）を有していた。また、これら５箇所の上肢注入部位で上肢における５つのリンパルート全てを検出することができる。これら５箇所の上肢注入部位の解剖学的仕様は以下のとおりである。橈骨遠位端と母指中手骨頭との中点（上肢注入部位４）、第２指間（上肢注入部位７）、第４指間（上肢注入部位９）、尺骨遠位端の腹側と背側の境界点（上肢注入部位１４）、手関節腹側正中（上肢注入部位１６）。

図３３は、試験例４の結果に基づき、上肢において、各リンパルート（副橈側ルート、副尺側ルート、橈側ルート、尺側ルート及び前腕正中ルート）が占める領域をマッピングした模式図である。

一実施形態において、リンパ系機能評価系システム１によるリンパ系機能評価の結果に基づいて、リンパマッサージや弾圧ストッキングによって、当該リンパ系を加圧してもよい。

１…リンパ系機能評価システム、３…撮像装置、３ａ…光学フィルタ、３ｂ…撮像素子、３ｃ…撮像素子制御部、５…光照射装置、５ａ…光源、５ｂ…光源制御部、７…カメラユニット、Ｄ…リンパ系機能評価装置、Ｐ…観察対象物、Ｌ_１…励起光、Ｌ_２…観察光、Ｄ１…第１の取得手段、Ｄ２…第２の取得手段、Ｄ３…色設定手段、Ｄ４…出力手段、Ｄ１２，Ｄ１３…主記憶装置、Ｄ１４…入力デバイス、Ｄ１５…出力デバイス、Ｄ１６…通信モジュール、Ｄ１７…補助記憶装置。

Claims (4)

1. 被験者の四肢末梢における可視化剤の注入部位の情報を取得する第１の取得手段と、
   可視化剤を注入された被験者の可視化剤像を取得する第２の取得手段と、
   第１の取得手段により取得した情報、及び四肢に複数存在するリンパルートとそれに対応する四肢末梢の注入部位との情報に基づき、第２の取得手段により取得した可視化剤像に、四肢に複数存在するリンパルート毎に異なる色を設定する色設定手段と、
   色設定手段により色を付した可視化剤像を出力する出力手段と、を備える、リンパ系機能評価装置。
2. コンピュータを、
   被験者の四肢末梢における可視化剤の注入部位の情報を取得する第１の取得手段、
   可視化剤を注入された被験者の可視化剤像を取得する第２の取得手段、
   第１の取得手段により取得した情報、及び四肢に複数存在するリンパルートとそれに対応する四肢末梢の注入部位との情報に基づき、第２の取得手段により取得した可視化剤像に、四肢に複数存在するリンパルート毎に異なる色を設定する色設定手段、
   色設定手段により色を付した可視化剤像を出力する出力手段、
   として機能させるためのリンパ系機能評価プログラム。
3. 請求項２に記載のリンパ系機能評価プログラムが記録されたコンピュータ読み取り可能な記録媒体。
4. 非一時的記録媒体である、請求項３に記載の記録媒体。

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