JP7066293B2 - Composition for enhancing expression of sirtuin 1 (SIRT1) - Google Patents
Composition for enhancing expression of sirtuin 1 (SIRT1) Download PDFInfo
- Publication number
- JP7066293B2 JP7066293B2 JP2019204950A JP2019204950A JP7066293B2 JP 7066293 B2 JP7066293 B2 JP 7066293B2 JP 2019204950 A JP2019204950 A JP 2019204950A JP 2019204950 A JP2019204950 A JP 2019204950A JP 7066293 B2 JP7066293 B2 JP 7066293B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- extract
- sirt1
- sirtuin
- composition
- expression
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
Images
Landscapes
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Description
本発明は、サーチュインの１つであるＳＩＲＴ１の発現増強作用を有する組成物に関する。 The present invention relates to a composition having an expression enhancing action of SIRT1, which is one of sirtuins.
サーチュイン遺伝子は、長寿遺伝子とも呼ばれ、その活性化により生物の寿命が延びるとされる。サーチュイン遺伝子の活性化により合成されるタンパク質、サーチュイン（Ｓｉｒｔｕｉｎ）はヒストン脱アセチル化酵素であり、ヒストンとＤＮＡの結合に作用し、遺伝的な調節を行うことで寿命を延ばすと考えられている。 The sirtuin gene, also called a longevity gene, is said to extend the lifespan of an organism by its activation. Sirtuin, a protein synthesized by activation of the sirtuin gene, is a histone deacetylase, which is thought to act on the binding of histones to DNA and prolong life by genetic regulation.
サーチュイン１（ＳＩＲＴ１）は、加齢によって発現が低下する一方、カロリー制限により活性化されること、またブドウの果皮や赤ワイン、ピーナッツ等に含まれるポリフェノールであるレスベラトロールによって活性化されることが知られている（非特許文献１）。 Sirtuin 1 (SIRT1) can be activated by calorie restriction while its expression decreases with aging, and by resveratrol, which is a polyphenol contained in grape skins, red wine, peanuts, etc. It is known (Non-Patent Document 1).
サーチュイン１（ＳＩＲＴ１）は各組織において様々な役割を担っており、アルツハイマー型老年認知症、骨粗鬆症、動脈硬化、骨格筋減少症などの老化関連疾患との関連についての研究も行われている。 Sirtuin 1 (SIRT1) plays various roles in each tissue, and studies on its association with aging-related diseases such as Alzheimer-type senile dementia, osteoporosis, arteriosclerosis, and skeletal muscle hypoplasia are also being conducted.
例えば中枢神経系における作用として、アルツハイマー型認知症モデルマウスを使った研究では、レスベラトロール投与によるサーチュイン１（ＳＩＲＴ１）の活性化により、海馬での神経変性を抑制し、認知機能の改善が認められた報告がある（非特許文献２）。一方、末梢神経系における作用としては、ブルーベリー抽出物等がサーチュイン１（ＳＩＲＴ１）の活性化を通して、屈折異常等の眼疾患治療用組成物として提供されている例や（特許文献１）、糖尿病網膜症の抑制に効果をもたらすといった報告（非特許文献３）がある。
このように、サーチュイン１（ＳＩＲＴ１）の活性化剤はその用途に期待が高く、サーチュイン１（ＳＩＲＴ１）のさらなる活性化剤への要望は強い。
For example, as an action in the central nervous system, in a study using Alzheimer's disease model mice, activation of sirtuin 1 (SIRT1) by resveratrol suppressed neurodegenerative disease in the hippocampus and improved cognitive function. There is a report (Non-Patent Document 2). On the other hand, as an action on the peripheral nervous system, an example in which a blueberry extract or the like is provided as a composition for treating eye diseases such as refractive error through activation of sirtuin 1 (SIRT1) (Patent Document 1), diabetic retina, etc. There is a report (Non-Patent Document 3) that it is effective in suppressing the disease.
As described above, the activator of sirtuin 1 (SIRT1) is highly expected for its use, and there is a strong demand for a further activator of sirtuin 1 (SIRT1).
一方、ニガキ科に属する植物の一種であるトンカットアリ（和名：ニガキ科ナガエカサ、学名：Ｅｕｒｙｃｏｍａ ｌｏｎｇｉｆｏｌｉａ）の抽出物は、マレーシアなどの東南アジアでは古来より解熱剤、マラリア治療および胃病等の民間薬として用いられてきた。近年この抽出物に男性更年期障害の改善作用が見いだされた（特許文献２）。また、特許文献３には、トンカットアリの男性機能に対する活性は、クアシノイド類、クマリン類などの配糖体にあり、極性有機溶媒で抽出できることが記載されている。また、トンカットアリに含まれるユーリペプチドがコレステロールを出発点とする男性ホルモンの生合成に関与していることがわかり、生合成されたテストステロンが男性生殖器や脳、皮膚、筋肉、骨、腎臓、肝臓などの様々な標的部位で活性を示すことが報告されている。さらに、特許文献４には、トンカットアリの根から水抽出した後、ゲル濾過法によって分画することによってテストステロン作用を有する物質を単離できることが記載されている。また、男女問わずトンカットアリ抽出物の摂取により、免疫力が向上したことを示す報告がある。このように、トンカットアリはヒトへの様々な生理作用が報告されている摂取経験の多い植物であるが、サーチュイン１（ＳＩＲＴ１）の発現増強作用は、これまで知られていなかった。 On the other hand, the extract of Tonkat Ali (Japanese name: Simaroubaceae Nagaekasa, scientific name: Eurycoma longifolia), which is a kind of plant belonging to the family Simaroubaceae, has been used as a folk medicine for antipyretic agents, malaria treatment and stomach disease since ancient times in Southeast Asia such as Malaysia. Has been used. In recent years, this extract has been found to have an improving effect on male menopausal disorders (Patent Document 2). Further, Patent Document 3 describes that the activity of Tonkat Ali for male function lies in glycosides such as quasinoids and coumarins, and can be extracted with a polar organic solvent. In addition, it was found that the Yuri peptide contained in Tonkat Ali is involved in the biosynthesis of male hormones starting from cholesterol, and the biosynthesized testosterone is used in the male reproductive organs, brain, skin, muscles, bones, kidneys, etc. It has been reported to show activity at various target sites such as the liver. Further, Patent Document 4 describes that a substance having a testosterone action can be isolated by extracting water from the roots of Tonkat Ali and then fractionating by a gel filtration method. In addition, there is a report showing that the immunity was improved by ingesting Tonkat Ali extract regardless of gender. As described above, Tonkat Ali is a plant with many ingestion experiences that has been reported to have various physiological effects on humans, but the expression-enhancing effect of sirtuin 1 (SIRT1) has not been known so far.
本発明は、トンカットアリ抽出物を有効成分として含有する、サーチュイン１（ＳＩＲＴ１）の発現増強用組成物を提供することを課題とする。 An object of the present invention is to provide a composition for enhancing the expression of sirtuin 1 (SIRT1), which contains a toncat ant extract as an active ingredient.
本発明者らは、多数の天然物や化合物の網膜由来ミュラー細胞に対する作用を研究する過程で、ミュラー細胞に作用してサーチュイン１（ＳＩＲＴ１）の発現を増強する効果を有する物質を見出し、本発明をなした。 In the process of studying the effects of a large number of natural substances and compounds on retinal-derived Muller cells, the present inventors have found a substance having an effect of acting on Muller cells and enhancing the expression of sirtuin 1 (SIRT1). Made.
すなわち、
本発明は、以下の構成からなる。
（１）トンカットアリの抽出物を有効成分として含有する、サーチュイン１（ＳＩＲＴ１）の発現増強用組成物。
（２）トンカットアリの抽出物がトンカットアリの水及び／又は有機溶剤抽出物である（１）に記載の組成物。
（３）トンカットアリの抽出物が、ユーリコマノンを含有する抽出物である（１）（２）のいずれかに記載の組成物。
（４）ユーリコマノンを有効成分として含有する、サーチュイン１（ＳＩＲＴ１）の発現増強用組成物。
That is,
The present invention has the following configuration.
(1) A composition for enhancing the expression of sirtuin 1 (SIRT1), which contains an extract of Tonkat Ali as an active ingredient.
(2) The composition according to (1), wherein the extract of Tonkat Ali is water and / or an organic solvent extract of Tonkat Ali.
(3) The composition according to any one of (1) and (2), wherein the extract of Tonkat Ali is an extract containing yuricomanone.
(4) A composition for enhancing the expression of sirtuin 1 (SIRT1), which contains yuricomanone as an active ingredient.
本発明により、トンカットアリの抽出物を有効成分とする、サーチュイン１（ＳＩＲＴ１）の発現を増強する組成物が提供される。 INDUSTRIAL APPLICABILITY The present invention provides a composition containing an extract of Tonkat Ali as an active ingredient and enhancing the expression of sirtuin 1 (SIRT1).
本発明について具体的に説明する。
なお、本発明でいう「組成物」とは、トンカットアリの抽出物を含有し、サーチュイン１（以下「ＳＩＲＴ１」）の発現を増強するものをいう。「組成物」には飲食品、医薬品、健康食品を包含する。
The present invention will be specifically described.
The term "composition" as used in the present invention refers to a composition containing an extract of Tonkat Ali and enhancing the expression of sirtuin 1 (hereinafter referred to as "SIRT1"). The "composition" includes foods and drinks, pharmaceuticals, and health foods.
本発明に用いられるトンカットアリの抽出物としては、特に限定されるものではないが、東南アジアに生育する樹木の幹または根の抽出物が好ましく用いられる。中でも、トンカットアリの根の水性溶媒抽出物が好ましく用いられる。 The extract of Tonkat Ali used in the present invention is not particularly limited, but an extract of the trunk or root of a tree growing in Southeast Asia is preferably used. Among them, an aqueous solvent extract of the root of Tonkat Ali is preferably used.
トンカットアリの抽出物は、特許文献４に開示されている還流冷却器を付した熱水抽出法によって抽出することが好ましい。またアルコール或いは水とアルコールの混合溶液による抽出でも良い。抽出液は、凍結乾燥等の乾燥手段によって溶媒を除去し、抽出エキスとしても良い。なお、このような抽出エキスは、トンカットアリ乾燥エキスとして市販されており、これを本発明に用いても良い。市販されているものとして「トンカットアリ（Ｐｈｙｓｔａ：登録商標）フィスタ：アスク薬品株式会社」を例示できる。 The extract of Tonkat Ali is preferably extracted by the hot water extraction method provided with the reflux condenser disclosed in Patent Document 4. Further, extraction with alcohol or a mixed solution of water and alcohol may be used. The extract may be used as an extract by removing the solvent by a drying means such as freeze-drying. Such an extract is commercially available as a dried Tonkat Ali extract, and this may be used in the present invention. As a commercially available product, "Tonkat Ali (Physta: registered trademark) Fista: Ask Pharmaceutical Co., Ltd." can be exemplified.
さらに抽出物は、公知の分離精製方法を適宜組み合わせて活性を高めることもできる。
トンカットアリの抽出物をヒトに投与する場合は、経口投与が好ましく、具体的には、飲食品、医薬品、サプリメント等の健康食品として使用可能である。
Further, the extract can be enhanced in activity by appropriately combining known separation and purification methods.
When the extract of Tonkat Ali is administered to humans, oral administration is preferable, and specifically, it can be used as a health food such as food and drink, pharmaceuticals, and supplements.
トンカットアリの抽出物を食品・飲料として使用する場合、例えば、果汁飲料、炭酸飲料、茶系飲料、乳飲料、アルコール飲料、清涼飲料等の飲料、ゼリー状食品や各種スナック類、焼き菓子、ケーキ類、チョコレート、ガム、飴、スープ類等、あらゆる食品・飲料形態とすることができる。 When the Tonkat Ali extract is used as food / beverage, for example, fruit juice beverages, carbonated beverages, tea-based beverages, dairy beverages, alcoholic beverages, soft beverages and other beverages, jelly-like foods and various snacks, baked goods, etc. It can be in any food / beverage form such as cakes, chocolate, gum, candy, soups, etc.
また、トンカットアリの抽出物を含有する組成物をサプリメントや医薬品として使用する場合、例えば、錠剤、顆粒剤等の経口用固形成形剤、内服液剤、シロップ剤等の経口用液体製剤として利用することができる。 When the composition containing the extract of Tonkat Ali is used as a supplement or a pharmaceutical product, for example, it is used as an oral solid molding agent such as tablets and granules, and an oral liquid preparation such as an internal liquid preparation and a syrup preparation. be able to.
トンカットアリの抽出物を医薬品やサプリメントの製剤とする場合は、トンカットアリの抽出物を一般的な製造法により、直接又は製剤上許容し得る担体とともに混合、分散した後、所望の形態に加工することによって、容易に得ることができる。この場合、本発明に用いられる抽出物の他に、かかる形態に一般的に用いられる植物油、動物油等の油性基剤、ｐＨ調整剤、防腐剤、増粘剤、色素、香料等を本発明の効果を妨害しない範囲で適宜配合することができる。 When the extract of Tonkat Ali is used as a pharmaceutical product or supplement, the extract of Tonkat Ali is mixed and dispersed by a general manufacturing method directly or with a carrier that is acceptable for the formulation, and then in the desired form. It can be easily obtained by processing. In this case, in addition to the extract used in the present invention, oily bases such as vegetable oils and animal oils commonly used in such forms, pH adjusters, preservatives, thickeners, pigments, fragrances and the like are used in the present invention. It can be appropriately blended as long as it does not interfere with the effect.
本発明のトンカットアリの抽出物を含有する組成物は、特に限定されるものではないが、好ましくは抽出物の乾燥物として通常全組成の０．００００１～９９．５質量％の範囲で含有される組成物とする。 The composition containing the extract of Tonkat Ali of the present invention is not particularly limited, but is preferably contained as a dried product of the extract in the range of 0.00001 to 99.5% by mass of the total composition. The composition to be used.
実施例、試験例を示し、本発明についてさらに説明する。
＜実施例１．ＳＩＲＴ１発現増強作用＞
（１）初代ミュラー細胞の調製
初代ミュラー細胞は次の方法で調製した。
７日齢のＳＤラット１０匹から網膜を単離した。単離した網膜は、ＰＢＳ（－）で５倍希釈したトリプシン－ＥＤＴＡ（Ｓｉｇｍａ Ｔ３９２４）にＤＮａｓｅＩ（Ｒｏｃｈｅ）を終濃度１００ｎｇ／ｍｌで添加した溶液１０ｍｌ中で、３７℃で３０分間静置した。ピペッティング操作により網膜組織を分散させ、２，４００ｒｐｍ、室温で５分間遠心した。上清を吸引除去した後、１０％ＦＢＳ（ｂｉｏｓｅｒａ）、１％ペニシリン－ストレプトマイシン（Ｓｉｇｍａ）を含むＤＭＥＭ－Ｆ１２培地（Ｇｉｂｃｏ）２５ｍｌに懸濁した。懸濁液を７０μＭのセルストレーナー（ＦＡＬＣＯＮ）に通した後、細胞数を計測し、４．２ｘ１０６ｃｅｌｌｓ／ｍｌの濃度になるよう希釈した。Ｔ－７５細胞培養用フラスコ（住友ベークライト株式会社）に１０ｍｌずつ播種し、３７℃、５％ＣＯ２下で培養した（培養０日目）。培養３日目に、培地を吸引除去し、新しい培地２０ｍｌに交換し、再び３７℃、５％ＣＯ２下で培養した。培養７日目に、Ｗｅｉ－Ｔａｏ Ｓｏｎｇらの方法（Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ ２０１３；６（６）：７７８－７８４）に準じて、ミュラー細胞を純化した。培養８日目に、ミュラー細胞を剥がし、４ｘ１０５ｃｅｌｌ／ｍｌの濃度になるよう懸濁し、９６ｗｅｌｌ ｃｅｌｌ ｃｕｌｔｕｒｅ ｐｌａｔｅ （ＦＡＬＣＯＮ）に１００μＬずつ播種し、３７℃、５％ＣＯ２下で培養した。
Examples and test examples will be shown, and the present invention will be further described.
<Example 1. SIRT1 expression enhancing effect>
(1) Preparation of primary Muller cells Primary Muller cells were prepared by the following method.
Retinas were isolated from 10 7-day-old SD rats. The isolated retina was allowed to stand at 37 ° C. for 30 minutes in 10 ml of a solution of trypsin-EDTA (Sigma T3924) diluted 5-fold with PBS (-) and DNase I (Roche) added at a final concentration of 100 ng / ml. The retinal tissue was dispersed by a pipetting operation and centrifuged at 2,400 rpm at room temperature for 5 minutes. The supernatant was removed by suction and then suspended in 25 ml of DMEM-F12 medium (Gibco) containing 10% FBS (biosera) and 1% penicillin-streptomycin (Sigma). The suspension was passed through a 70 μM cell strainer (FALCON), then the number of cells was counted and diluted to a concentration of 4.2x10 6 cells / ml. 10 ml each was seeded in a T-75 cell culture flask (Sumitomo Bakelite Co., Ltd.) and cultured at 37 ° C. under 5% CO 2 (culture day 0). On the 3rd day of culturing, the medium was removed by suction, replaced with 20 ml of new medium, and cultured again at 37 ° C. under 5% CO 2 . On day 7 of culture, Muller cells were purified according to the method of Wei-Tao Song et al. (Ophthalmol 2013; 6 (6): 778-784). On the 8th day of culture, Muller cells were peeled off, suspended to a concentration of 4x10 5 cell / ml, inoculated in 100 μL each on a 96-well cell culture plate (FALCON), and cultured at 37 ° C. under 5% CO 2 .
（２）トンカットアリ抽出物のＳＩＲＴ１発現増強作用の確認
トンカットアリ抽出物のＳＩＲＴ１発現増強作用について、以下の方法で試験した。
１）試験試料
トンカットアリ抽出物は、アスク薬品株式会社より入手した（製品番号０１２．１０５「トンカットアリ乾燥エキス Ｐｈｙｓｔａ」）を試験に用いた。このエキスは、Ｅｕｒｙｃｏｍａ ｌｏｎｇｉｆｏｌｉａ Ｊａｃｋの乾燥根から水抽出されたものであって、規格成分として、ユーリコマノンを０．８～１．５質量％、グリコサポニンを３５質量％以上、総多糖類を３０質量％以上、総蛋白を２２質量％以上含有する粉末である。以下の試験においては、ＤＭＳＯで溶解して使用した。
(2) Confirmation of SIRT1 expression enhancing effect of Tonkat Ali extract The SIRT1 expression enhancing effect of Tonkat Ali extract was tested by the following method.
1) Test sample As the Tonkat Ali extract, obtained from Ask Pharmaceutical Co., Ltd. (Product No. 012.105 "Tonkat Ali Dry Extract Physta") was used for the test. This extract is water-extracted from the dried roots of Eurycoma longifolia Jack, and has 0.8 to 1.5% by mass of yuricomanone, 35% by mass or more of glycosaponin, and 30% by mass of total polysaccharide as standard components. It is a powder containing% or more and 22% by mass or more of total protein. In the following tests, it was dissolved in DMSO and used.
２）ＳＩＲＴ１発現増強
実施例１に記載の方法で調製した培養９日目の初代ミュラー細胞の培地を全量除去し、１％ＦＢＳを含むＤＭＥＭ－Ｆ１２培地１００μＬに交換し、３７℃、５％ＣＯ２で９０分間培養することで血清飢餓状態に置いた。
上記のトンカットアリ根抽出物を、０、５０、１００μｇ／ｍｌに濃度になるように添加し、９０分間培養後に上清を除去し、ＲＮｅａｓｙ ９６ ｋｉｔ（ＱＩＡＧＥＮ）を用い添付の説明書に従ってＲＮＡを調製した。ＲＮＡ調製の際、ＤＮａｓｅＩＫｉｔ（ＱＩＡＧＥＮ）を用い、ゲノムＤＮＡの除去を行った。約４０ｎｇの調製したＲＮＡは、ＰｒｉｍｅＳｃｒｉｐｔ ＲＴ ｒｅａｇｅｎｔ ｋｉｔ（Ｔａｋａｒａ）を用いて添付の説明書に従いｃＤＮＡを作製した。
ＳＩＲＴ１の発現量はＡｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ ＴａｑＭａｎ Ｇｅｎｅ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ Ａｓｓａｙを用い、内在性コントロールにはラットＧａｐｄｈ Ｔａｑｍａｎ ｐｒｏｂｅを用いて、次の方法で定量した。１μＬのｃＤＮＡとラットＧＡＰＤＨ Ｔａｑｍａｎ ｐｒｏｂｅ、ラットＳＩＲＴ１ Ｔａｑｍａｎ ｐｒｏｂｅ、Ｔａｑｍａｎ Ｍｕｌｔｉｐｌｅｘ Ｍａｓｔｅｒ Ｍｉｘを所定の割合で混合し、計１０μＬとなるようにＰＣＲ ｇｒａｄｅ ｗａｔｅｒ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を添加し混合したものを反応液とした。
調製した反応液は、Ｑｕａｎｔ Ｓｔｕｄｉｏ ５（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）を用い、［（９５℃、２０秒）→（９５℃、１秒）→（６０℃、２０秒）］ｘ４５サイクルの反応条件で測定を行った。
測定により得られたＣｔ値からＧａｐｄｈを内部標準としてΔΔＣｔ法により、各サンプルの相対的遺伝子発現量を求めた。
使用したＴａｑｍａｎ ｐｒｏｂｅの製品情報、仕様は以下のとおりである。
Ｇａｐｄｈ：Ａｐｐｉｌｉｅｄ ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ Ａｓｓａｙ ＩＤ：Ｒｎ０１４６２６６２＿ｇ１（Ｄｙｅ：ＶＩＣ，Ｑｕｅｎｃｈｅｒ：ＭＧＢ）
ＳＩＲＴ１：Ａｐｐｌｉｅｄ ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ Ａｓｓａｙ ＩＤ：Ｒｎ０１４２８０９６＿ｍ１（Ｄｙｅ：ＦＡＭ，Ｑｕｅｎｃｈｅｒ：ＭＧＢ）
３）結果
測定結果を図１に示した。図１から、ラット初代ミュラー細胞において、トンカットアリ根抽出物は、添加濃度依存的にＳＩＲＴ１の発現を増強した。
2) Enhancement of SIRT1 expression The whole medium of the primary Muller cells prepared by the method described in Example 1 on the 9th day of culture was removed and replaced with 100 μL of DMEM-F12 medium containing 1% FBS at 37 ° C. and 5% CO. The cells were placed in serum starvation by culturing at 2 for 90 minutes.
The above Tonkat ant root extract was added to a concentration of 0, 50, 100 μg / ml, the supernatant was removed after culturing for 90 minutes, and RNA was used according to the attached instructions using RNeasy 96 kit (QIAGEN). Was prepared. At the time of RNA preparation, genomic DNA was removed using DNaseIKit (QIAGEN). About 40 ng of prepared RNA was prepared using PrimeScript RT reagent kit (Takara) according to the attached instructions.
The expression level of SIRT1 was quantified by the following method using Applied Biosystems TaqMan Gene Expression Assay and rat Gapdh Taqman probe for endogenous control. 1 μL of cDNA was mixed with rat GAPDH Taqman probe, rat SIRT1 Taqman probe, and Taqman Multiplex Master Mix at a predetermined ratio, and PCR grade water (Invitrogen) was added to make a total of 10 μL.
The prepared reaction solution was measured using Quant Studio 5 (Applied Biosystems) under the reaction conditions of [(95 ° C., 20 seconds) → (95 ° C., 1 second) → (60 ° C., 20 seconds)] x 45 cycles. rice field.
From the Ct value obtained by the measurement, the relative gene expression level of each sample was determined by the ΔΔCt method using Gapdh as an internal standard.
The product information and specifications of the Taqman probe used are as follows.
Gapdh: Applied biosystems Assay ID: Rn01462662_g1 (Dye: VIC, Quencher: MGB)
SIRT1: Applied biosystems Assay ID: Rn01428096_m1 (Dye: FAM, Quencher: MGB)
3) Results The measurement results are shown in FIG. From FIG. 1, in rat primary Muller cells, the Tonkat ant root extract enhanced the expression of SIRT1 in a concentration-dependent manner.
＜実施例２．ユーリコマノンによるＳＩＲＴ１の発現増強作用＞
トンカットアリ根抽出物中に含有されるユーリコマノンのＳＩＲＴ１発現増強作用について、以下の方法で試験した。
（１）試験方法
１）試験試料
ユーリコマノンは富士フイルム和光純薬株式会社より購入し、試験に用いた。試験にあたってＤＭＳＯで溶解し使用した。
<Example 2. SIRTO1 expression enhancing effect by Yuricomanone>
The SIRT1 expression-enhancing effect of Yuricomanone contained in the Tonkat ant root extract was tested by the following method.
(1) Test method 1) Test sample Yuricomanone was purchased from Fujifilm Wako Pure Chemical Industries, Ltd. and used for the test. In the test, it was dissolved in DMSO and used.
２）ＳＩＲＴ１発現増強
実施例１に記載の方法で調製した培養９日目の初代ミュラー細胞の培地を全量除去し、１％ＦＢＳを含むＤＭＥＭ－Ｆ１２培地１００μＬに交換し、３７℃、５％ＣＯ２で９０分間培養することで血清飢餓状態に置いた。
上記のユーリコマノンを、０、１０、３０μＭの濃度になるように添加し、９０分間培養後に上清を除去し、ＲＮｅａｓｙ ９６ ｋｉｔ（ＱＩＡＧＥＮ）を用い添付の説明書に従ってＲＮＡを調製した。次いで、実施例１に記載の方法で、ＳＩＲＴ１の相対的遺伝子発現量を定量した。
2) Enhancement of SIRT1 expression The whole medium of the primary Muller cells prepared by the method described in Example 1 on the 9th day of culture was removed and replaced with 100 μL of DMEM-F12 medium containing 1% FBS at 37 ° C. and 5% CO. The cells were placed in serum starvation by culturing at 2 for 90 minutes.
The above yuricomanone was added to a concentration of 0, 10, 30 μM, the supernatant was removed after culturing for 90 minutes, and RNA was prepared using RNeasy 96 kit (QIAGEN) according to the attached instructions. Then, the relative gene expression level of SIRT1 was quantified by the method described in Example 1.
（２）結果
測定結果を図２に示した。
図２に示すように、ラット初代ミュラー細胞において、ユーリコマノンは、添加濃度依存的にＳＩＲＴ１の発現を増強した。したがって、ユーリコマノンは、トンカットアリの示すＳＩＲＴ１発現増強作用の有効成分の１つであることが明らかになった。
(2) Results The measurement results are shown in FIG.
As shown in FIG. 2, in rat primary Muller cells, uricomanone enhanced the expression of SIRT1 in a concentration-dependent manner. Therefore, it was clarified that Yuricomanone is one of the active ingredients of SIRT1 expression enhancing action shown by Tonkat Ali.
以上の試験結果から、トンカットアリ抽出物は、ＳＩＲＴ１の発現を増強する。 From the above test results, the Tonkat Ali extract enhances the expression of SIRT1.
Claims (4)
A composition for enhancing the expression of sirtuin 1 (SIRT1) containing yuricomanone as an active ingredient (however, for improving proliferative retinopathy, visual function , osteoporosis, age-related decline in sexual function, Alzheimer's disease and dementia). Excluding the composition ).
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2019204950A JP7066293B2 (en) | 2019-11-12 | 2019-11-12 | Composition for enhancing expression of sirtuin 1 (SIRT1) |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2019204950A JP7066293B2 (en) | 2019-11-12 | 2019-11-12 | Composition for enhancing expression of sirtuin 1 (SIRT1) |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2021075501A JP2021075501A (en) | 2021-05-20 |
| JP7066293B2 true JP7066293B2 (en) | 2022-05-13 |
Family
ID=75898824
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2019204950A Active JP7066293B2 (en) | 2019-11-12 | 2019-11-12 | Composition for enhancing expression of sirtuin 1 (SIRT1) |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP7066293B2 (en) |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2018505167A (en) | 2015-01-28 | 2018-02-22 | イーライ リリー アンド カンパニー | VEGFA / Ang2 compound |
| JP2019524679A (en) | 2016-06-27 | 2019-09-05 | ラオフ・レキク | Salbutamol-containing ophthalmic medicine |
| JP2020147516A (en) | 2019-03-13 | 2020-09-17 | 株式会社ファンケル | Composition for enhancing expression of bFGF and BDNF |
-
2019
- 2019-11-12 JP JP2019204950A patent/JP7066293B2/en active Active
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2018505167A (en) | 2015-01-28 | 2018-02-22 | イーライ リリー アンド カンパニー | VEGFA / Ang2 compound |
| JP2019524679A (en) | 2016-06-27 | 2019-09-05 | ラオフ・レキク | Salbutamol-containing ophthalmic medicine |
| JP2020147516A (en) | 2019-03-13 | 2020-09-17 | 株式会社ファンケル | Composition for enhancing expression of bFGF and BDNF |
Non-Patent Citations (5)
| Title |
|---|
| Archives of Pharmacy Practice, 2016, Vol. 7, Suppl. 1, pp. S39-42 |
| International Journal of Pharmacy and Pharmaceutical Sciences, 2011, Vol. 3, Issue 4, pp. 343-347 |
| Journal of Applied Pharmaceutical Science, April 2019, Vol. 9, pp. 077-081 |
| Microvascular Research, 2013, Vol.90, pp.30-39 |
| Nutrients, 2018, Vol. 10, 799, pp. 1-16 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP2021075501A (en) | 2021-05-20 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP7015822B2 (en) | NOX inhibitors and NFκB inhibitors containing methoxyflavones | |
| WO2014042261A1 (en) | Sirtuin gene potentiator, and pharmaceutical product, cosmetic product, and food product using same | |
| KR100706279B1 (en) | Medicine and food compositions for improvement of obesity | |
| WO2011108487A1 (en) | Muscular atrophy inhibitor | |
| JP2006109754A (en) | Food inducing expression of thioredoxin | |
| JP7066293B2 (en) | Composition for enhancing expression of sirtuin 1 (SIRT1) | |
| Russo et al. | A new ginger extract characterization: Immunomodulatory, antioxidant effects and differential gene expression | |
| JP4856852B2 (en) | Blood cholesterol reducing agent and blood phospholipid reducing agent | |
| JP7229513B2 (en) | Brain function improving agent and food and drink for improving brain function | |
| JP7221094B2 (en) | Composition for enhancing expression of bFGF and BDNF | |
| JP6995812B2 (en) | Composition for enhancing expression of NT3 | |
| KR101732146B1 (en) | Composition for anti-obesity with the extract of corn silk and Poncirus trifoliata | |
| JP4319735B2 (en) | Monoamine oxidase inhibitor and food and drink | |
| JP2007320859A (en) | Inhibitor on expression of enzyme producing active oxygen species | |
| JPH09255568A (en) | Testosterone-5alpha-reductase inhibitor, preventive and remedy for prostatic hypertrophy and ingesta thereof | |
| JP4637508B2 (en) | Antioxidant and AGE production inhibitor containing acerola pulp extract and food containing them | |
| TW202128130A (en) | Sirtuin-1 activation agent and skin cosmetic for activating sirtuin 1 | |
| Hussein et al. | Mir-140 and Mir-34a as molecular markers for apoptotic brain in sunset yellow and carmoisine intoxicated mice | |
| JP6462755B2 (en) | Brain function improving agent and food and drink for improving brain function | |
| WO2021210673A1 (en) | Agent for improving symptoms of menopause | |
| JP2014152118A (en) | Aging retardant | |
| KR100701269B1 (en) | Medicine and Food Compositions for Improvement of Obesity | |
| JP7166965B2 (en) | Composition for enhancing bFGF expression | |
| TW201424743A (en) | Igf-1 production promoter | |
| JP6993480B2 (en) | Composition for improving hearing function |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20210701 |
|
| A871 | Explanation of circumstances concerning accelerated examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A871 Effective date: 20210701 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20210817 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20211018 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20211124 |
|
| A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20220215 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20220323 |
|
| C60 | Trial request (containing other claim documents, opposition documents) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: C60 Effective date: 20220323 |
|
| A911 | Transfer to examiner for re-examination before appeal (zenchi) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A911 Effective date: 20220331 |
|
| C21 | Notice of transfer of a case for reconsideration by examiners before appeal proceedings |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: C21 Effective date: 20220405 |
|
| TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
| A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20220426 |
|
| A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20220426 |
|
| R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 7066293 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |