JP7033774B2

JP7033774B2 - 抗サイトカイン抗体療法

Info

Publication number: JP7033774B2
Application number: JP2017161755A
Authority: JP
Inventors: 歩吉崎; 毅倫深澤; 伸一佐藤; 武彦北森; 和真馬渡; 裕嘉副
Original assignee: University of Tokyo NUC
Current assignee: University of Tokyo NUC
Priority date: 2017-08-25
Filing date: 2017-08-25
Publication date: 2022-03-11
Anticipated expiration: 2037-08-25
Also published as: JP2019038774A

Description

本発明は、抗サイトカイン抗体を用いた治療法における改善技術に関する。

乾癬、関節リウマチ等に代表される自己免疫疾患の治療手段として抗体医薬が上市され、臨床的に大きな治療効果が得られている。例えば、乾癬治療薬として、抗ＴＮＦ－α抗体であるインフリキシマブ、アダリムマブが使用されており、抗ＩＬ－１２／２３抗体であるウステキヌマブ、抗ＩＬ－１７抗体であるセクキヌマブ、イキセキズマブ、抗ＩＬ－１７受容体抗体であるブロダルマブが使用されている。また、関節リウマチ治療薬として、抗ＴＮＦ－α抗体であるインフリキシマブ、エタネルセプト、アダリムマブ、ゴリムマブ、セルトリズマブ、抗ＩＬ－６受容体抗体であるトシリズマブが使用されている（非特許文献１～１２）。

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しかしながら、前記の抗体医薬には、いくつかの問題点がある。すなわち、これらの抗体医薬による治療効果は患者によって大きく異なることが知られている。様々な検査や臨床所見を用いても、抗体医薬の効果予測は極めて困難であり、実際に使用するまではその抗体医薬が効果的であるかは不明であり、また適切な投与量も明らかではない。このことは、適切な時期に効果的な治療が行えず、病態の進行や合併症の併発を来し得ることにつながっている。
さらには、抗体医薬による、当初想定されていなかった有害事象が生じることが報告されており、有効でない抗体医薬を使用することの危険性を高めている。加えて、抗体医薬は高価であり、有効でない抗体医薬の使用は、医療経済的に負担が大きいことも社会的に問題となっている。
従って、本発明の課題は、抗サイトカイン抗体療法における患者毎の有効性を予測する手段を提供することにある。

そこで本発明者は、乾癬等の自己免疫疾患患者に対する抗サイトカイン抗体の有効性と患者毎の治療開始前血液中サイトカインプロファイルとを対比したところ、抗サイトカイン抗体が作用対象とするサイトカイン濃度は、治療効果と相関せず、それ以外のサイトカインの濃度が治療効果の予測に役立つことが判明した。つまり、抗TNFα抗体薬はTNFαを除去することで、乾癬や自己免疫疾患の病勢を抑制すると考えられているため、治療前のTNFα濃度は、抗TNFα抗体薬による治療効果に相関すると広く考えられてきたが、実際には、TNFα濃度と治療効果には相関が認められておらず、他のサイトカイン濃度が治療効果の予測に役立つことが判明した。また、同じ乾癬患者であっても患者毎にサイトカインプロファイルは相違し、現在製造承認を受けている抗サイトカイン抗体の１つには治療効果が得られず、他剤を使用することで、効果が得られることも判明した。これらの知見に基づき、種々検討した結果、予め患者の血液中サイトカインプロファイルを測定しておけば、有効な抗サイトカイン抗体の選択が可能となることを見出し、本発明を完成した。

すなわち、本発明は、次の〔１〕～〔１２〕を提供するものである。

〔１〕抗サイトカイン抗体療法を必要とする患者の複数の血液中サイトカインプロファイルを測定し、得られたプロファイルに基づき投与すべき抗サイトカイン抗体の種類及び投与量を決定することを特徴とする抗サイトカイン抗体療法。
〔２〕抗サイトカイン抗体療法を必要とする患者が、乾癬患者であって、測定されるサイトカインプロファイルがＩＬ－１β、ＩＬ－６、ＩＬ－１０、ＩＬ－１７Ａ、ＩＬ－１７Ｆ、ＩＬ－１７Ｃ、ＩＬ－２１、ＩＬ－２３、ＩＬ－３５及びＴＮＦ－αから選ばれる３種以上である〔１〕記載の抗サイトカイン抗体療法。
〔３〕抗サイトカイン抗体療法を必要とする患者が関節リウマチ患者であって、測定されるサイトカインプロファイルがＩＬ－１β、ＩＬ－６、ＩＬ－１０、ＩＬ－１７Ａ、ＩＬ－１７Ｆ、ＩＬ－１７Ｃ、ＩＬ－２１、ＩＬ－２３、ＩＬ－３５及びＴＮＦ－αから選ばれる３種以上である〔１〕記載の抗サイトカイン抗体療法。
〔４〕血液中サイトカインプロファイルの測定がμＥＬＩＳＡで行われる〔１〕～〔３〕のいずれかに記載の抗サイトカイン抗体療法。
〔５〕投与すべき抗サイトカイン抗体の種類及び投与量を決定する目的で、抗サイトカイン抗体療法を必要とする患者の複数の血液中サイトカインプロファイルを測定する方法。
〔６〕抗サイトカイン抗体療法を必要とする患者が、乾癬患者であって、測定されるサイトカインプロファイルがＩＬ－１β、ＩＬ－６、ＩＬ－１０、ＩＬ－１７Ａ、ＩＬ－１７Ｆ、ＩＬ－１７Ｃ、ＩＬ－２１、ＩＬ－２３、ＩＬ－３５及びＴＮＦ－αから選ばれる３種以上である〔５〕記載のサイトカインプロファイルの測定方法。
〔７〕抗サイトカイン抗体療法を必要とする患者が関節リウマチ患者であって、測定されるサイトカインプロファイルがＩＬ－１β、ＩＬ－６、ＩＬ－１０、ＩＬ－１７Ａ、ＩＬ－１７Ｆ、ＩＬ－１７Ｃ、ＩＬ－２１、ＩＬ－２３、ＩＬ－３５及びＴＮＦ－αから選ばれる３種以上である〔５〕記載のサイトカインプロファイルの測定方法。
〔８〕血液中サイトカインプロファイルの測定がμＥＬＩＳＡで行われる〔５〕～〔７〕のいずれかに記載のサイトカインプロファイルの測定方法。
〔９〕投与すべき抗サイトカイン抗体の種類及び投与量を決定するために使用される試薬であって、抗サイトカイン抗体療法を必要とする患者の複数の血液中サイトカインプロファイルの測定試薬。
〔10〕抗サイトカイン抗体療法を必要とする患者が、乾癬患者であって、測定されるサイトカインプロファイルがＩＬ－１β、ＩＬ－６、ＩＬ－１０、ＩＬ－１７Ａ、ＩＬ－１７Ｆ、ＩＬ－１７Ｃ、ＩＬ－２１、ＩＬ－２３、ＩＬ－３５及びＴＮＦ－αから選ばれる３種以上である〔９〕記載の測定試薬。
〔11〕抗サイトカイン抗体療法を必要とする患者が関節リウマチ患者であって、測定されるサイトカインプロファイルがＩＬ－１β、ＩＬ－６、ＩＬ－１０、ＩＬ－１７Ａ、ＩＬ－１７Ｆ、ＩＬ－１７Ｃ、ＩＬ－２１、ＩＬ－２３、ＩＬ－３５及びＴＮＦ－αから選ばれる３種以上である〔９〕記載の測定試薬。
〔12〕血液中サイトカインプロファイルの測定がμＥＬＩＳＡで行われる〔９〕～〔１１〕のいずれかに記載の測定試薬。

本発明によれば、患者毎のサイトカインプロファイルを測定することにより、治療前に、その患者毎に有効な抗サイトカイン抗体の種類と投与量を予測することができる。従って、無効な抗体医薬が投与されることによって生じる有害事象の防止に役立つとともに医療経済の負担も軽減できる。

アダリムマブ８０ｍｇ投与群の血液中サイトカインの濃度変化を示す。アダリムマブ８０ｍｇ投与群の血液中サイトカインの濃度変化を示す。ウステキマブ投与群の血液中サイトカインの濃度変化を示す。ウステキマブ投与群の血液中サイトカインの濃度変化を示す。セクキヌマブ投与群の血液中サイトカインの濃度変化を示す。セクキヌマブ投与群の血液中サイトカインの濃度変化を示す。ブロダルマブ投与群の血液中サイトカインの濃度変化を示す。ブロダルマブ投与群の血液中サイトカインの濃度変化を示す。

本発明の抗サイトカイン抗体療法は、抗サイトカイン抗体療法を必要とする患者の複数の血液中サイトカインプロファイルを測定し、得られたサイトカインプロファイルに基づき投与すべき抗サイトカイン抗体の種類及び投与量を決定することを特徴とする。

本発明において用いられる抗サイトカイン抗体としては、抗サイトカイン抗体及び抗サイトカイン受容体抗体のいずれも含まれる。サイトカインとしては、各種の自己免疫疾患に関与することが知られているサイトカインが挙げられ、ＴＮＦ－α、ＩＬ－１β、ＩＬ－６、ＩＬ－１０、ＩＬ－１２、ＩＬ－１７Ａ、ＩＬ－１７Ｆ、ＩＬ－１７Ｃ、ＩＬ－１８、ＩＬ－２１、ＩＬ－２２、ＩＬ－２３、ＩＬ－３５、ＩＬ－３６γ、ＩＦＮ－α、ＴＧＦ－β１等が挙げられる。抗サイトカイン受容体抗体としては、これらのサイトカイン受容体に対する抗体が挙げられる。
また、これらの抗サイトカイン抗体は、マウス抗体等の非ヒト抗体であってもよく、キメラ抗体、ヒト化抗体、完全ヒト化抗体のいずれでもよい。

抗サイトカイン抗体療法を必要とする患者の疾患としては、自己免疫疾患、例えば乾癬、関節リウマチ、全身性エリテマトーデス、抗リン脂質抗体症候群、多発性筋炎／皮膚節炎、強皮症、シェーグレン症候群、ＩｇＧ４関連疾患、血管炎症候群、混合性結合組織病、ギランバレー症候群、重症筋無力症、強直性脊椎炎、潰瘍性大腸炎、クローン病、急速進行性糸球体腎炎、巨赤芽球性貧血、自己免疫性溶血性貧血、自己免疫性好中球減少症、特発性血小板減少性紫斑病、バセドウ病、橋本病、ぶどう膜炎等が挙げられる。このうち、関節リウマチ、乾癬、潰瘍性大腸炎、クローン病、ベーチェット病、強直性脊椎炎が好ましく、関節リウマチ、乾癬がより好ましく、乾癬がさらに好ましい。

血液中サイトカインプロファイルは、対象患者の血液中の複数のサイトカイン濃度を測定することにより作製することができる。そのサイトカインの種類としては、前記の自己免疫疾患に関与することが知られている複数のサイトカインであり、例えば、ＴＮＦ－α、ＩＬ－１β、ＩＬ－６、ＩＬ－１０、ＩＬ－１２、ＩＬ－１７Ａ、ＩＬ－１７Ｆ、ＩＬ－１７Ｃ、ＩＬ－１８、ＩＬ－２１、ＩＬ－２２、ＩＬ－２３、ＩＬ－３５、ＩＬ－３６γ、ＩＦＮ－α、ＴＧＦ－β１から選ばれる２種以上が挙げられる。

ここで、血液中サイトカインプロファイルの測定にあたっては、より低濃度（ｐｇ／ｍＬオーダー）のサイトカインを定量することができるμＥＬＩＳＡを使用するのが好ましい。μＥＬＩＳＡは、例えばマイクロフルイディクス（微小流体工学）と熱レンズ顕微鏡を応用したＥＬＩＳＡ（ＢＵＮＳＥＫＩＫＡＧＡＫＵＶｏｌ．６４，Ｎｏ．６，ｐｐ．４６１－４６８（２０１５））によって測定するのが好ましい。μＥＬＩＳＡ分析装置は、反応場として捕捉抗体を固相化したビーズを用いる。ビーズはガラス製のマイクロ化学チップの流路内（幅４００μｍ，深さ２００μｍ）にあるダム構造によって堰き止められ、検体、酵素標識２次抗体、発色基質を順次送液することにより反応させる。検出は流路下部に取り付けられた熱レンズプローブを用いる。また、反応生成物の検出は、ストップ／フロー検出法を用いる。すなわち、ビーズ充填部位に基質を送り込み、一定時間送液を停止した後、再送液することによって高濃度の反応生成物が検出部に送られ、反応生成物のシグナルがピークとして検出される。
このようなμＥＬＩＳＡ分析装置としては、マイクロ化学技術研製のマイクロＥＬＩＳＡ分析装置（臨床用μＥＬＩＳＡ）が挙げられる。

本発明者の経験によれば、乾癬治療薬として製造承認されている抗ＴＮＦ－α抗体、抗ＩＬ－１２／２３抗体及び抗ＩＬ－１７抗体を用いて治療しても有効でない乾癬患者が多数存在する。また、抗ＴＮＦ－α抗体で症状が改善する乾癬患者の中には、抗ＴＮＦ－α抗体の通常投与量４０ｍｇで症状が改善する患者と、８０ｍｇ投与しなければ症状が改善しない患者も存在する。
本発明者は、抗ＴＮＦ－α抗体（アダリムマブ）４０ｍｇ投与して有効であった患者、及びアダリムマブ４０ｍｇ投与で効果が認められないため抗ＴＮＦ－α抗体（アダリムマブ）投与量を８０ｍｇに増量した患者の血液中サイトカインプロファイルを測定した。その結果、全く意外なことに、アダリムマブ４０ｍｇ投与により乾癬の症状が改善した患者と、アダリムマブ４０ｍｇ投与で症状が改善しなかった患者において、血液中ＴＮＦ－α濃度に差はなかった。また、アダリムマブ８０ｍｇ投与によって、症状が改善した症例も存在した。
一方、アダリムマブ４０ｍｇ投与有効群とアダリムマブ４０ｍｇ無効群において、血液中濃度に大きな差があったサイトカインは、ＩＬ－６、ＩＬ－１０、ＩＬ－１７Ａ、ＩＬ－２３、ＩＬ－３５であり、４０ｍｇ無効群で有意に減少していたのはＩＬ－１０及びＩＬ－３５であり、ＩＬ－６、ＩＬ－１７Ａ及びＩＬ－２３は有意に増加していた。この結果は、ＴＮＦ－α４０ｍｇ投与無効群は、血液中ＩＬ－６、ＩＬ－１７Ａ及びＩＬ－２３濃度が高かったためと考えられる。かかる検討結果に基づけば、これらの乾癬患者においては、抗ＴＮＦ－α抗体の多量投与、抗ＩＬ－６抗体投与、抗ＩＬ－１７抗体又は抗ＩＬ－２３抗体投与が有効であると考えられる。従って、乾癬患者の血液中サイトカインプロファイルを測定しておき、病態の惹起、伸展過程で変化する可能性のあるサイトカインに対する抗体を投与すれば、有効に乾癬治療が可能となる。乾癬患者においては、変化するサイトカインはＩＬ－６、ＩＬ－１０、ＩＬ－１７Ａ、ＩＬ－２３、ＩＬ－３５、ＴＮＦ－αである可能性が高いことから、予め、これらの血液中サイトカインプロファイルの３種以上を測定しておき、これらのサイトカインプロファイルに基づき、投与すべき抗サイトカイン抗体及びその投与量を決定することができる。

同様に、関節リウマチ患者の場合には、ＩＬ－１β、ＩＬ－６、ＩＬ－１０、ＩＬ－１７Ａ、ＩＬ－１７Ｆ、ＩＬ－１７Ｃ、ＩＬ－２１、ＩＬ－２３、ＩＬ－３５及びＴＮＦ－αから選ばれる３種以上の血液中サイトカインプロファイルを測定し、投与すべき抗サイトカイン抗体及びその投与量を決定するのが好ましい。

同様に、全身性エリテマトーデス、抗リン脂質抗体症候群、多発性筋炎皮膚節炎、強皮症、シェーグレン症候群、ＩｇＧ４関連疾患、血管炎症候群、混合性結合組織病、ギランバレー症候群、重症筋無力症、潰瘍性大腸炎、クローン病、急速進行性糸球体腎炎、巨赤芽球性貧血、自己免疫性溶血性貧血、自己免疫性好中球減少症、特発性血小板減少性紫斑病、バセドウ病、橋本病患者の場合には、ＩＬ－１β、ＩＬ－６、ＩＬ－１０、ＩＬ－１７Ａ、ＩＬ－１７Ｆ、ＩＬ－１７Ｃ、ＩＬ－２１、ＩＬ－２３、ＩＬ－３５及びＴＮＦ－αから選ばれる３種以上の血液中サイトカインプロファイルを測定し、投与すべき抗サイトカイン抗体及びその投与量を決定するのが好ましい。

より詳細には、種々の自己免疫疾患患者におけるサイトカインプロファイルと抗サイトカイン抗体療法の効果との関係を検討し、サイトカインプロファイルと抗サイトカイン抗体療法の効果との関係を示すパネルを作製しておけば、患者毎に有効な抗サイトカイン抗体療法を適宜選択することができる。

次に実施例を挙げて本発明を更に詳細に説明する。

実施例１
（１）未治療の乾癬患者に対して、アダリムマブ（抗ＴＮＦ－α抗体）４０ｍｇを投与した乾癬患者１３名（ＡＤＡ４０ｍｇ投与群）、及びアダリムマブ４０ｍｇを投与して治療効果が得られなかったため８０ｍｇ投与に増量した乾癬患者８名（ＡＤＡ４０→８０ｍｇ投与群）の臨床症状及び血液中サイトカイン量を測定した。その結果を表１及び表２に示す。

ここで、血液中サイトカイン濃度は、ＢＵＮＳＥＫＩＫＡＧＡＫＵＶｏｌ．６４，Ｎｏ．６，ｐｐ．４６１－４６８（２０１５）記載のマイクロＥＬＩＳＡ分析装置（臨床用μＥＬＩＳＡ，マイクロ化学技研製）を用いて測定した。

表１及び表２から、アダリムマブ４０ｍｇ投与による有効群と無効群の間でＴＮＦ－α量には差がなかった。これは、アダリムマブ４０ｍｇによる無効がＴＮＦ－αの量に依存していない、つまり治療前に存在するＴＮＦ－αの量に対して、アダリムマブの量が少ないので無効となったわけではないことを示す。
一方、アダリムマブ４０ｍｇ有効群よりも無効群で濃度が高かったサイトカインはＩＬ－６、ＩＬ－１７Ａ及びＩＬ－２３であった。また、アダリムマブ４０ｍｇ無効群よりも有効群で濃度が高かったサイトカインはＩＬ－１０及びＩＬ－３５であった。この結果から、抗ＴＮＦ－α抗体４０ｍｇ投与で有効でなかった乾癬患者は、ＩＬ－６、ＩＬ－１７Ａ又はＩＬ－２３濃度が高かったためであると予想される。従って、抗ＩＬ－６抗体、抗ＩＬ－１７抗体又は抗ＩＬ－２３抗体投与で治療が可能と考えられる。

表２のアダリムマブ８０ｍｇ投与群は、乾癬の症状が改善した。アダリムマブ８０ｍｇ投与により乾癬の症状（ＰＡＳＩ）が改善した症例の血液中サイトカインの濃度変化を図１～図２に示す。アダリムマブ８０ｍｇ投与後は、ＴＮＦ－α、ＩＬ－６、ＩＬ－１７、ＩＬ－２３といった炎症性サイトカインが低下し、ＩＬ－１０、ＩＬ－３５といった抑制性サイトカインが上昇していた。

実施例２
実施例１の結果から、アダリムマブ４０ｍｇ投与で治療効果が得られなかった乾癬患者１５名に対し、抗ＩＬ－１２／２３抗体であるウステキヌマブ４５ｍｇ投与（ＵＳＴ投与群）、抗ＩＬ－１７Ａ抗体であるセクキヌマブ３００ｍｇ投与（ＳＥＣ投与群）、及び抗ＩＬ－１７Ａ受容体抗体であるブロダルマブ２１０ｍｇ投与を行った。それらの患者の臨床症状及び血液中サイトカイン量を測定した。
その結果を表３及び表４に示す。

表４のウステキマブ（抗ＩＬ－１２／２３）投与群全例で、乾癬の症状が改善した。ウステキマブ投与により乾癬の症状（ＰＡＳＩ）が改善した症例の血液中サイトカイン濃度の変化を図３～図４に示す。
表４のセクキヌマブ（抗ＩＬ－１７Ａ抗体）投与群全例で、乾癬の症状が改善した。セクキヌマブ投与により乾癬の症状（ＰＡＳＩ）が改善した症例の血液中サイトカインの変化を図５～図６に示す。
表４のブロダルマブ（抗ＩＬ－１７Ａ受容体抗体）投与群全例で、乾癬の症状が改善した。ブロダルマブ投与により乾癬の症状（ＰＡＳＩ）が改善した症例の血液中サイトカイン濃度の変化を図７～図８に示す。
炎症性サイトカイン（ＴＮＦ－α、ＩＬ－６、ＩＬ－１７、ＩＬ－２３）はウステキマブ、セクキヌマブ、ブロダルマブ投与群で低下した。ＩＬ－１０、ＩＬ－３５といった抑制性のサイトカインはウステキマブ投与群で著明に上昇したが、セクキヌマブ、ブロダルマブ投与群では明らかな上昇を示さなかった。

実施例３
関節リウマチ患者のサイトカインプロファイル（表５）及びトシリズマブ（抗ＩＬ－６抗体）を投与して有効であった症例のサイトカインプロファイルを示す（表６）。

Claims

乾癬患者のＴＮＦ－αと、ＩＬ－６、ＩＬ－１０、ＩＬ－１７Ａ、ＩＬ－２３及びＩＬ－３５から選ばれる２種以上の血液中サイトカインプロファイルとを測定し、得られたサイトカインプロファイルに基づき投与すべき抗ＴＮＦ－α抗体と前記抗サイトカイン抗体の種類及び投与量を決定するための材料を提供することを特徴とする、サイトカインプロファイルの測定方法。
血液中サイトカインプロファイルの測定がμＥＬＩＳＡで行われる請求項１記載のサイトカインプロファイルの測定方法。