JP6560872B2 - 炭酸感を増強させる化合物をスクリーニングする方法および炭酸感増強剤並びに炭酸感増強剤を含む飲食品 - Google Patents
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Description
(1)炭酸感を増強する化合物のスクリーニング方法であって、
(a)三叉神経由来の細胞または非ヒト動物の舌と被検化合物を含有する炭酸水とを接触させることと、
(b)上記接触により発生する三叉神経由来の細胞または前記動物の三叉神経の生理学的応答を検出することと、
(c)被検化合物存在時の生理学的応答の強度が、被検化合物非存在時の生理学的応答の強度よりも高まることを指標として炭酸感を増強する化合物を選択することと
を含む、スクリーニング方法。
(2)三叉神経由来の細胞が、TRPA1チャネル非発現細胞である、上記(1)に記載のスクリーニング方法。
(3)上記(c)において、被検化合物を含有する無炭酸水を接触させても三叉神経または三叉神経由来の細胞に対して生理学的応答を実質的に生じさせない濃度で炭酸感を増強することを指標として化合物を選択する、上記(1)または(2)に記載のスクリーニング方法。
(4)生理学的応答が、神経の活動電位であるか、または、細胞内へのカルシウムイオンの流入である、上記(1)〜(3)のいずれかに記載のスクリーニング方法。
(5)生理学的応答が、細胞内へのカルシウムイオンの流入であり、かつ、被検化合物存在時の生理学的応答の強度が、被検化合物非存在時の生理学的応答の強度に対して1.1倍以上9.0倍以下である、上記(4)に記載のスクリーニング方法。
(6)上記(1)〜(5)のいずれかに記載のスクリーニング方法により得られる化合物。
(7)上記(1)〜(5)のいずれかに記載のスクリーニング方法により得られた化合物を炭酸飲料と混合することを含む、炭酸飲料の炭酸感の増強方法。
(8)上記(3)に記載のスクリーニング方法により得られた化合物を、無炭酸水中では生理学的応答を実質的に生じさせない濃度で炭酸飲料と混合することを含む、炭酸飲料の炭酸感の増強方法。
(9)30μM〜200mMのスピラントールを含む、炭酸感増強剤。
(10)上記(9)に記載の炭酸感増強剤を飲食品と混合することを含む、炭酸を含む飲食品の炭酸感の増強方法。
(11)上記(6)に記載の化合物または上記(9)に記載の炭酸感増強剤を含む、炭酸を含む飲食品。
(12)上記(9)に記載の炭酸感増強剤を飲食品と混合することを含み、これにより炭酸感増強剤を飲食品の総重量に対して0.01〜1重量%となるように調節する、炭酸を含む飲食品の炭酸感の増強方法。
(13)上記(9)に記載の炭酸感増強剤を0.01〜1重量%含む、炭酸を含む飲食品。
(a)三叉神経由来の細胞または非ヒト動物の舌と被検化合物を含有する炭酸水とを接触させることと、
(b)上記接触により発生する三叉神経由来の細胞または前記動物の三叉神経の生理学的応答を検出することと、
(c)被検化合物存在時の生理学的応答の強度が、被検化合物非存在時の生理学的応答の強度よりも高まることを指標として炭酸感を増強する化合物を選択することと
を含む、スクリーニング方法が提供される。
被検化合物としては、特に限定されないが、例えば、刺激物質を用いることができる。刺激物質としては、オランダセンニチ、カプシカム(トウガラシ)、ペッパー(コショウ)、ジンジャー(ショウガ)、オニオン(タマネギ)、ガーリック(ニンニク)、マスタード(カラシ)、ワサビ、ダイコン、サンショウなどに含まれる刺激物質を用いることができる。具体的には、スピラントール、カプサイシン、ピペリン、ジンゲロール、ショーガオール、アリルイソチオシアネートおよびα−サンショオール並びにこれらの類縁体などが挙げられる。
三叉神経由来の細胞または非ヒト動物の三叉神経は、炭酸刺激により生理学的応答を引き起こす。従って、工程(b)では、炭酸刺激に応じて生じる三叉神経由来の細胞の生理学的応答を検出する。上記工程(a)において非ヒト動物の舌を用いた場合には、工程(b)では、炭酸刺激に応じて生じる該動物の三叉神経の生理学的応答を検出する。生理学的応答としては、神経細胞内へのカルシウムイオンの流入や神経細胞の膜電位の脱分極が挙げられ、これらを検出することができる。
工程(c)では、被検化合物を混入させた炭酸水に対する三叉神経由来の細胞または前記動物の三叉神経の生理学的応答(すなわち、被検化合物存在時の生理学的応答)と、被検化合物を含まない炭酸水に対する三叉神経または三叉神経由来の細胞の生理学的応答(すなわち、被検化合物非存在時の生理学的応答)とを比較して、生理学的応答の強度が高まったか否かを評価することができる。
新生児マウスより三叉神経節を切除し、ハンクス平衡塩溶液中でトリプシン(0.0625%)、コラゲナーゼ(1mg/ml)、DNase(0.1mg/mL)で順次処理し細胞を解離させ、続いてパーコール(Percoll)を用いて髄鞘などを除去した。このようにして得られた細胞は100ng/mLのNGFを添加したNeurobasal(商標)培地中で、5%CO2、37℃条件下で18時間培養した。その後、80μg/mL F−127 pluronic acidの共存下で、5μMのFura−2AM(シグマアルドリッチ社製、製品番号:F0888)を得られた細胞に導入した。
本実施例では、スピラントールの炭酸感増強効果について三叉神経節由来の細胞を用いたカルシウムイメージング法とヒトによる官能評価との関係を調べた。
Claims (4)
- 炭酸感を増強する化合物のスクリーニング方法であって、
(a)三叉神経由来の細胞と被検化合物を含有する炭酸水とを接触させることと、
(b)上記接触により発生する三叉神経由来の細胞の生理学的応答を検出することと、
(c)被検化合物存在時の生理学的応答の強度が、被検化合物非存在時の生理学的応答の強度よりも高まることを指標として炭酸感を増強する化合物を選択することと
を含み、
前記生理学的応答は、神経細胞内へのカルシウムイオンの流入であり、カルシウムイメージング法により検出される、
スクリーニング方法。 - 三叉神経由来の細胞が、TRPA1チャネル非発現細胞である、請求項1に記載のスクリーニング方法。
- 工程(c)において、被検化合物を含有する無炭酸水を接触させても三叉神経由来の細胞に対して生理学的応答を実質的に生じさせない濃度で炭酸感を増強することを指標として化合物を選択する、請求項1または2に記載のスクリーニング方法。
- 被検化合物存在時の生理学的応答の強度が、被検化合物非存在時の生理学的応答の強度に対して1.1倍以上9.0倍以下である、請求項1〜3のいずれか一項に記載のスクリーニング方法。
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