JP6407512B2 - Myb28についての遺伝子マーカー - Google Patents
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Description
本出願は、その全体が参照によって本明細書において組み込まれる、2012年9月13日に提出された米国仮特許出願第61/700,731号の利益を主張する。
マイクロソフトウィンドウズ(登録商標)オペレーティングシステムで21キロバイトと計測され、2012年9月12日に作成された「SEMB009US_ST25」という名のファイルに含まれる配列表は、電子的に本明細書と共に提出され、参照により本明細書に組み込まれる。
本発明は、グルコシノレートレベルの増加を付与する転写因子Myb28遺伝子座と密接に関係する分子マーカーの同定およびグルコシノレートレベルが増加したアブラナ科野菜植物を産生するための方法に関する。
アブラナ科野菜植物(ブロッコリーのようなブラシカ(Brassica)植物など)は、4−メチルスルフィニルブチルグルコシノレート(グルコラファニン)および3−メチルスルフィニルブチルグルコシノレート(グルコイベリン)を蓄積する。これらのグルコシノレートは、イソチオシアネートに加水分解される。疫学的研究により、アブラナ科野菜が豊富な食事は、癌の危険性の低下と関連づけられている。国際公開第99/52345号パンフレットおよび国際出願GB2009/001648号明細書において記載されるように、高グルコシノレートアブラナ科野菜(たとえば高グルコシノレートブロッコリー)が開発された。アブラナ科野菜植物におけるグルコシノレートの産生は、図4において示される植物における硫黄フラックスのマップから分かるように、複雑である。本発明に先立って、メチルチオアルキルマレートシンターゼ(MAM)代謝または分子マーカーが、育種プログラムにおいて使用された。MAM1およびMAM3は、高グルコシノレート形質と密に関連することが知られていた。
本発明の独創性に富んだ発見は、転写因子Myb28遺伝子座が、アブラナ科野菜植物(ブラシカ(Brassica)植物、たとえばブロッコリーなど)における、レベルが増加したグルコシノレート、特に4−メチルスルフィニルブチルグルコシノレート(グルコラファニン)および3−メチルスルフィニルブチルグルコシノレート(グルコイベリン)の産生において重要な遺伝子座であるということである。
a.配列番号:1のヌクレオチド83、136、226、563、610、830、995、1116、1513、1577、1606、1620、1825、1863、1877、もしくは2026に対応する位置の一塩基多型(SNP)または
b.配列番号:1のヌクレオチド323〜332、ヌクレオチド521〜524、ヌクレオチド783〜786、ヌクレオチド909〜914、ヌクレオチド1365〜1369、1811〜1821、もしくはヌクレオチド2046〜2056に存在するヌクレオチドの番号における多型または
c.配列番号:1のヌクレオチド836〜837、ヌクレオチド867〜868、もしくはヌクレオチド943〜944に存在するヌクレオチドの番号における多型
のうちの少なくとも1つを含む。
a.配列番号:1のヌクレオチド83、136、226、563、610、830、995、1116、1513、1577、1606、1620、1825、1863、1877、もしくは2026に対応する位置の一塩基多型(SNP)または
b.配列番号:1のヌクレオチド323〜332、ヌクレオチド521〜524、ヌクレオチド783〜786、ヌクレオチド909〜914、ヌクレオチド1365〜1369、1811〜1821、もしくはヌクレオチド2046〜2056に存在するヌクレオチドの番号における多型または
c.配列番号:1のヌクレオチド836〜837、ヌクレオチド867〜868、もしくはヌクレオチド943〜944に存在するヌクレオチドの番号における多型
である。
特に定義されない限り、本明細書において使用される技術用語および科学用語はすべて、本開示が属する当技術分野の当業者によって一般に理解されるものと同じ意味を有する。Singleton, et al., DICTIONARY OF MICROBIOLOGY AND MOLECULAR BIOLOGY, 20 ED., John Wiley and Sons, New York (1994)およびHale & Marham, THE HARPER COLLINS DICTIONARY OF BIOLOGY, Harper Perennial, NY (1991)は、本開示において使用される多くの用語の一般的な辞書を当業者に提供する。
a)配列番号:1のヌクレオチド83、136、226、563、610、830、995、1116、1513、1577、1606、1620、1825、1863、1877、もしくは2026に対応する位置の一塩基多型(SNP)または
b)配列番号:1のヌクレオチド323〜332、ヌクレオチド521〜524、ヌクレオチド783〜786、ヌクレオチド909〜914、ヌクレオチド1365〜1369、1811〜1821、もしくはヌクレオチド2046〜2056に存在するヌクレオチドの番号における多型または
c)配列番号:1のヌクレオチド836〜837、ヌクレオチド867〜868、もしくはヌクレオチド943〜944に存在するヌクレオチドの番号における多型
からなる群から選択される少なくとも1つの多型を除いて配列番号:1を含むmyb28遺伝子によるブラシカ(Brassica)植物の形質転換に関する。
適切には「グルコシノレートレベルが増加したアブラナ科野菜植物」または「グルコシノレートレベルが増加したブロッコリー」という用語は、それぞれ、従来の様々なそのアブラナ科野菜またはブロッコリーと比較して、グルコシノレートのレベルが増加したアブラナ科野菜またはブロッコリー植物を意味する。ブロッコリーにおいて、従来の品種は、B.オレラセアGD33、育種者系(breeder line)560216、または育種者IDフィールド番号(breeder ID field number)2153であってもよい。
グルコシノレートレベルが増加したアブラナ科野菜(グルコシノレートレベルが増加したブロッコリーなど)という用語は、その新鮮な自然の状態の、すなわち、ブロッコリー花部および茎などのような頭部全体としての植物材料だけではなく、たとえば小房化(floreting)、個別急速凍結(IQF)、浸軟、均質化、乾燥、凍結、圧縮などのような、1つまたは複数のさらなる加工ステップにかけられた場合のアブラナ科野菜(ブロッコリーなど)をも指すことが理解されるであろう。
当業者は、高グルコシノレートブロッコリー以外の、グルコシノレートを含む植物が知られていることに気づくであろう。グルコシノレートは、フウチョウソウ目由来の植物において存在する。この目は、約18の科を含み、このうちでアブラナ科およびフウチョウソウ科の2つが最も大きい。
*ブロッコリー
*ロケット(カキネガラシ(Sisymbrium officinale);エルーカ・サティバ(Eruca sativa)(ルッコラ)、ディプロタクシス・エルコイデス(Diplotaxis erucoides)(ロボウガラシ)、ディプロタクシス・テヌイフォリア(Diplotaxis tenuifolia)(野生のロケット)、およびブニアス・オリエンタリス(Bunias orientalis)(トルコロケット(Turkish Rocket))を含む);ならびに
*オランダガラシ(ロリパ・ナスタルチウム・アクアチカム(Rorippa nasturtium aquaticum)およびナスタルチウム・オフィシナーレ(Nasturtium officinale)を含む)。
*カリフラワー、
*ケール、
*カブ、
*コラード、
*コールラビ、
*芽キャベツ、
*ハクサイ、
*キャノーラ、
*キャベツ、および
*ラディッシュ。
Myb28のリアルタイムRT−PCR
Myb28配列は、BRADブラシカ(Brassica)データベースでMyb28(Bra029311)についてB.ラパ配列を使用して、BLAST検索によって同定した(Cheng et al., 2011 BRAD, the genetics and genomics database for Brassica plants. BMC Plant Biology 2011;11:136. doi: 10.1186/1471−2229−11−136)。アッセイは、ABI PRISM Primer Express Software v2(Applied Biosystems)を使用して設計した。プライマーならびに5’−FAMおよび3’−TAMRA修飾を有するTaqManプローブは、MWG UKから購入し、配列(配列番号:26〜28)は、
Myb28 For 5’−CTCTTCCTCTTTCCTCGGGTTT−3’、
Myb28 Rev 5’− TGCAACTCAAGGAACCTCTCTGA−3’、
Myb28 プローブ 5’−AACCCGGTTTCCGAGATCACCACAC−3’である。
Myb28配列は、BRADブラシカ(Brassica)データベースでMyb28(Bra029311)についてB.ラパ配列を使用して、BLAST検索によって同定する(Cheng, F.; Liu, S.; Wu, J.; Fang, L.; Sun, S.; Liu, B.; Li, P.; Hua, W.; Wang, X., BRAD, The genetics and genomics database for Brassica plants. BMC Plant Biology 2011, 11, 136)。
B.ビロサおよびB.オレラセア育種系の間のMYB28コード領域における多型の同定
ブラシカ・オレラセア変種イタリカ(Brassica oleracea var italica)R2R3(NCBI受託番号GQ478992.1)由来のMYB28 mRNA全コード配列を使用して、300〜500bpの断片を増幅するために、プライマーを手で設計した(表1)。
GD33
育種系統560216
育種系統IDフィールド番号2153とする。
育種系統560526(MSP)
育種系統580333(MSB)
育種系統BRM 51−1162(MSP)
育種系統BRM51−1210(MSP)とする。
a.配列番号:1のヌクレオチド83、136、226、563、610、830、995、1116、1513、1577、1606、1620、1825、1863、1877、もしくは2026に対応する位置の一塩基多型(SNP)および
b.配列番号:1のヌクレオチド323〜332、ヌクレオチド521〜524、ヌクレオチド783〜786、ヌクレオチド909〜914、ヌクレオチド1365〜1369、1811〜1821、もしくはヌクレオチド2046〜2056に存在するヌクレオチドの番号における多型および
c.配列番号:1のヌクレオチド836〜837、ヌクレオチド867〜868、もしくはヌクレオチド943〜944に存在するヌクレオチドの番号における多型である。
新しいマーカーの検証
TaqManアッセイ(NBOLI009111370)は、実施例2において同定された配列多型のうちの1つに基づいて設計した。
GACCACCTAAAGACAAGAATAGTGAAAGAGATAAGATGGAAGACCAAAGTTAATCAAATTTATTTTGAAGCTTTT[C/T]TATGGAATAGAGACTAAAATGATGTGTGCTATTGCAATTTTTAGTCACATATTGCTAATCAAACACATATTTTGCATCAGAGAATTGTCAAATACATGAAAAAAATAAAGAATAATTTTT
リバースプライマー(配列番号:31):GTGACTAAAAATTGCAATAGCACACATCA
Vicプローブ(配列番号:32):CTATTCCATAGAAAAGC
Famプローブ(配列番号:33):CTATTCCATAAAAAAGC
新しいマーカーの開発
FT69対立遺伝子およびB.オレラセア対立遺伝子の間の保存配列(SFPの中間の配列)を決定した、また、これらは、Myb28コード領域の外側の配列および多型決定のために、Siebert et al., (1995) (An improved PCR method for walking in uncloned genomic DNA. Nucleic Acids Res. 23: 1087−1088) によって記載されるようにプライマー設計およびゲノムウォーキングに使用することができる。ゲノムウォーキングのこの方法から決定されたさらなる多型は、本明細書において記載される他のマーカーに対するそれらの物理的に近い距離および遺伝的な関係により、高グルコシノレート形質を追跡するのにさらに有用となるであろう。これらのマーカーは、Myb28に対して1、3、5、または10cM以内にあってもよく、高グルコシノレート表現型を追跡するのに有用なさらなるマーカーアッセイを提供してもよい。
Claims (38)
- グルコシノレートレベルが増加したアブラナ科野菜植物の遺伝子型を決定するための方法であって、前記植物由来の核酸のサンプルまたはその一部分を得るステップおよびグルコシノレートレベルの増加と遺伝的に関係するMyb28遺伝子座での多型を前記核酸において検出するステップを含む方法。
- 検出するステップが、PCRを含む、請求項1に記載の方法。
- 遺伝子型の決定が、共優性アッセイを含む、請求項1または請求項2に記載の方法。
- 検出するステップが、DNAハイブリダイゼーションを含む、請求項1〜3のいずれか一項に記載の方法。
- 多型が、
a)配列番号:1のヌクレオチド88、137、226、563、610、830、995、1116、1513、1577、1606、1620、1825、1863、1877、もしくは2026に対応する位置の一塩基多型(SNP)または
b)配列番号:1のヌクレオチド323〜332、ヌクレオチド521〜524、ヌクレオチド783〜786、ヌクレオチド909〜914、ヌクレオチド1365〜1369、1811〜1821、もしくはヌクレオチド2046〜2056に存在するヌクレオチドの番号における多型または
c)配列番号:1のヌクレオチド836〜837、ヌクレオチド867〜868、もしくはヌクレオチド943〜944に存在するヌクレオチドの番号における多型
のうちの少なくとも1つを含む、請求項1〜4のいずれか一項に記載の方法。 - 多型が、(a)配列番号:1のヌクレオチド88、137、226、563、610、830、995、1116、1513、1577、1606、1620、1825、1863、1877、もしくは2026に対応する位置の一塩基多型(SNP)のうちの少なくとも1つまたはその組み合わせ、(b)配列番号:1のヌクレオチド323〜332、ヌクレオチド521〜524、ヌクレオチド783〜786、ヌクレオチド909〜914、ヌクレオチド1365〜1369、1811〜1821、もしくはヌクレオチド2046〜2056に存在するヌクレオチドの1つもしくは複数の欠失、(c)配列番号:1のヌクレオチド323〜332、ヌクレオチド521〜524、ヌクレオチド783〜786、ヌクレオチド909〜914、ヌクレオチド1365〜1369、1811〜1821、もしくはヌクレオチド2046〜2056に存在するヌクレオチドのすべての欠失、(d)配列番号:1のヌクレオチド324、325、326、327、328、329、330、331、522、523、784、785、910、911、912、913、1366、1367、1368、1812、1813、1814、1815、1816、1817、1818、1819、1820、2047、2048、2049、2050、2051、2052、2053、2054、または2055に対応する位置での少なくとも1つのヌクレオチドの欠失、(e)以下の位置:配列番号:1の324〜331、522〜523、784〜785、910〜913、1366〜1368、1812〜1820、もしくは2047〜2055またはその組み合わせでのヌクレオチドの欠失、または(f)配列番号:1のヌクレオチド836〜837、867〜868、もしくは943〜944の1つもしくは複数のヌクレオチドの挿入を含む、請求項1〜5のいずれか一項に記載の方法。
- (a)ヌクレオチド836〜837の挿入が、2つのヌクレオチドである、(b)ヌクレオチド836〜837の挿入が、TTである、(c)ヌクレオチド867〜868の挿入が、1つのヌクレオチドである、(d)ヌクレオチド867〜868の挿入が、Aである、(e)ヌクレオチド943〜944の挿入が、13ヌクレオチド以下である、または(f)ヌクレオチド943〜944の挿入が、TATTAAAAAAGTAである、請求項6に記載の方法。
- 多型が、配列番号:3、配列番号:4、配列番号:5、配列番号:6、配列番号:7、配列番号:8、配列番号:9、配列番号:10、配列番号:11、配列番号:12、配列番号:13、配列番号:14、配列番号:15、配列番号:16、配列番号:17、配列番号:18、配列番号:19、配列番号:20、配列番号:21、配列番号:22、および配列番号:23からなる群から選択される少なくとも1つの第1の配列の使用を含むスクリーニング法によって検出される、請求項1〜7のいずれか一項に記載の方法。
- グルコシノレートのレベルの増加についてアブラナ科野菜植物の表現型をアッセイするステップをさらに含む、請求項1〜8のいずれか一項に記載の方法。
- グルコシノレートが、4−メチルスルフィニルブチルグルコシノレート(MSB)、3−メチルスルフィニルプロピルグルコシノレート(MSP)、またはその組み合わせである、請求項1〜9のいずれか一項に記載の方法。
- アブラナ科野菜植物が、少なくとも10マイクロモル/乾燥重量gの量の、少なくとも1つのグルコシノレートを含む、請求項1〜10のいずれか一項に記載の方法。
- アブラナ科野菜植物が、少なくとも10マイクロモル/乾燥重量gの量の4−メチルスルフィニルブチルグルコシノレート(MSB)、3−メチルスルフィニルプロピルグルコシノレート(MSP)、またはその組み合わせを含む、請求項1〜11のいずれか一項に記載の方法。
- アブラナ科野菜植物が、ブロッコリーである、請求項1〜12のいずれか一項に記載の方法。
- グルコシノレートレベルのMyb28媒介性の増加を有するブラシカ・オレラセア植物を産生するための方法であって、グルコシノレートレベルの増加と遺伝的に関係する、ブラシカ・ビロサ由来の、Myb28遺伝子座での多型を含む第1の子孫植物を選択するステップを含む方法。
- (a)グルコシノレートレベルが増加したブロッコリー植物を第2のブロッコリー植物と交雑させるステップおよび(b)グルコシノレートレベルの増加と遺伝的に関係する、ブラシカ・ビロサ由来の、Myb28遺伝子座での多型を含む少なくとも1つの第1の子孫ブロッコリー植物を選択するステップを含む、請求項14に記載の方法。
- 選択するステップが、PCRを含む、請求項14または請求項15に記載の方法。
- 選択するステップが、DNAハイブリダイゼーションを含む、請求項14〜16のいずれか一項に記載の方法。
- myb28対立遺伝子が、配列番号:3、配列番号:4、配列番号:5、配列番号:6、配列番号:7、配列番号:8、配列番号:9、配列番号:10、配列番号:11、配列番号:12、配列番号:13、配列番号:14、配列番号:15、配列番号:16、配列番号:17、配列番号:18、配列番号:19、配列番号:20、配列番号:21、配列番号:22、および配列番号:23からなる群から選択される配列を含むオリゴヌクレオチドの使用を含むスクリーニング法によって検出される、請求項14〜17のいずれか一項に記載の方法。
- 選択が、共優性遺伝子マーカーを検出することを含む、請求項14〜18のいずれか一項に記載の方法。
- 第1の子孫の選択が、少なくとも1つの第1のさらなる形質と遺伝的に関係する、第2のブロッコリー植物由来の1つまたは複数の遺伝子マーカーの存在に基づいて子孫を選択することをさらに含む、請求項15〜19のいずれか一項に記載の方法。
- さらなる形質が、収量、耐病性、出芽活力、生長活力、ストレス耐性、草丈、花部品質、花部直径、花部重量、花部サイズ、花部形状、花部色、および開花までの日数からなる群から選択される、請求項20に記載の方法。
- 多型が、
a)配列番号:1のヌクレオチド88、137、226、563、610、830、995、1116、1513、1577、1606、1620、1825、1863、1877、もしくは2026に対応する位置の一塩基多型(SNP)または
b)配列番号:1のヌクレオチド323〜332、ヌクレオチド521〜524、ヌクレオチド783〜786、ヌクレオチド909〜914、ヌクレオチド1365〜1369、1811〜1821、もしくはヌクレオチド2046〜2056に存在するヌクレオチドの番号における多型または
c)配列番号:1のヌクレオチド836〜837、ヌクレオチド867〜868、もしくはヌクレオチド943〜944に存在するヌクレオチドの番号における多型
のうちの少なくとも1つを含む、請求項14〜21のいずれか一項に記載の方法。 - 多型が、(a)配列番号:1のヌクレオチド88、137、226、563、610、830、995、1116、1513、1577、1606、1620、1825、1863、1877、もしくは2026に対応する位置の一塩基多型(SNP)のうちの少なくとも1つまたはその組み合わせを含む、(b)配列番号:1のヌクレオチド323〜332、ヌクレオチド521〜524、ヌクレオチド783〜786、ヌクレオチド909〜914、ヌクレオチド1365〜1369、1811〜1821、もしくはヌクレオチド2046〜2056に存在するヌクレオチドの1つもしくは複数の欠失を含む、(c)配列番号:1のヌクレオチド323〜332、ヌクレオチド521〜524、ヌクレオチド783〜786、ヌクレオチド909〜914、ヌクレオチド1365〜1369、1811〜1821、もしくはヌクレオチド2046〜2056に存在するヌクレオチドのすべての欠失を含む、(d)配列番号:1のヌクレオチド324、325、326、327、328、329、330、331、522、523、784、785、910、911、912、913、1366、1367、1368、1812、1813、1814、1815、1816、1817、1818、1819、1820、2047、2048、2049、2050、2051、2052、2053、2054、もしくは2055に対応する位置での少なくとも1つのヌクレオチドの欠失を含む、(e)以下の位置:配列番号:1の324〜331、522〜523、784〜785、910〜913、1366〜1368、1812〜1820、もしくは2047〜2055またはその組み合わせでのヌクレオチドの欠失を含む、または(f)配列番号:1のヌクレオチド836〜837、867〜868、もしくは943〜944の1つもしくは複数のヌクレオチドの挿入を含む、請求項14〜22のいずれか一項に記載の方法。
- (a)ヌクレオチド836〜837の間の挿入が、2つのヌクレオチドである、(b)ヌクレオチド836〜837の間の挿入が、TTである、(c)ヌクレオチド867〜868の間の挿入が、1つのヌクレオチドである、(d)ヌクレオチド867〜868の間の挿入が、Aである、(e)ヌクレオチド943〜944の間の挿入が、13個までのヌクレオチドである、または(f)ヌクレオチド943〜944の間の挿入が、TATTAAAAAAGTAである、請求項23に記載の方法。
- (c)子孫植物を、それ自体または第3の植物と交雑させ、次世代の子孫植物を産生するステップをさらに含む、請求項14〜24のいずれか一項に記載の方法。
- (d)次世代の子孫植物を、それ自体または第2の植物と交雑させるステップおよび(e)さらなる3〜10世代についてステップ(c)および(d)を繰り返し、レベルが増加したグルコシノレートを含む同系交配ブロッコリー植物を産生するステップをさらに含み、少なくとも1つの次世代の子孫植物が、グルコシノレート産生に遺伝的に関係するMyb28遺伝子座での多型の存在についてスクリーニングされる、請求項25に記載の方法。
- 次世代の前記子孫植物が、グルコシノレートおよび所望の形質の存在に基づいて交雑のために選択される、請求項26に記載の方法。
- 次世代の子孫植物が、グルコシノレートレベルの増加および所望の形質の存在に基づいて交雑のためにそれぞれの世代で選択される、請求項26または27に記載の方法。
- ステップ(e)が、グルコシノレートの増加の形質を含み、他の点では第2のブロッコリー植物の農業形質を含む同系交配ブロッコリー植物を得るために、十分な同系交配により繰り返される、請求項26〜28のいずれか一項に記載の方法。
- グルコシノレートが、4−メチルスルフィニルブチルグルコシノレート(MSB)、3−メチルスルフィニルプロピルグルコシノレート(MSP)、またはその組み合わせである、請求項14〜29のいずれか一項に記載の方法。
- ブロッコリー植物が、少なくとも10マイクロモル/乾燥重量gの量の、少なくとも1つのグルコシノレートを含む、請求項14〜30のいずれか一項に記載の方法。
- ブロッコリー植物が、少なくとも10マイクロモル/乾燥重量gの量の4−メチルスルフィニルブチルグルコシノレート(MSB)、3−メチルスルフィニルプロピルグルコシノレート(MSP)、またはその組み合わせを含む、請求項14〜31のいずれか一項に記載の方法。
- 植物が、配列番号:24を含むmyb28遺伝子または配列番号:24と少なくとも97%の同一性を有する配列により形質転換される、請求項24に記載の方法。
- コンピュータ読み取り可能な媒体上に、多型を検出するステップの結果を保存するステップをさらに含む、請求項1〜13のいずれか一項に記載の方法。
- 配列番号:3、配列番号:4、配列番号:5、配列番号:6、配列番号:7、配列番号:8、配列番号:9、配列番号:10、配列番号:11、配列番号:12、配列番号:13、配列番号:14、配列番号:15、配列番号:16、配列番号:17、配列番号:18、配列番号:19、配列番号:20、配列番号:21、配列番号:22、および配列番号:23からなる群から選択される配列を含む単離核酸であって、前記核酸は、アブラナ科野菜植物のグルコシノレートレベルの増加と遺伝的に関係するMyb28遺伝子座での遺伝子多型を同定するためのプライマーである、単離核酸。
- 配列番号:1のヌクレオチド88、137、226、563、610、830、995、1116、1513、1577、1606、1620、1825、1863、1877、もしくは2026に対応する位置の少なくとも1つの多型を増幅するおよび/もしくはそれにハイブリダイズするまたは配列番号:1のヌクレオチド323〜332、ヌクレオチド521〜524、ヌクレオチド783〜786、ヌクレオチド909〜914、ヌクレオチド1365〜1369、1811〜1821、もしくはヌクレオチド2046〜2056に対応する位置に存在する多型を増幅するおよび/もしくはそれにハイブリダイズするまたは配列番号:1のヌクレオチド836〜837、ヌクレオチド867〜868、もしくはヌクレオチド943〜944に存在する多型を増幅するおよび/もしくはそれにハイブリダイズするプライマーまたはプローブであって、前記プライマーまたはプローブは、アブラナ科野菜植物のグルコシノレートレベルの増加と遺伝的に関係する遺伝子多型を同定することができる、プライマーまたはプローブ。
- 配列番号:1のヌクレオチド836〜837、867〜868、または943〜944の1つまたは複数のヌクレオチドの挿入を含む多型を増幅するおよび/またはそれにハイブリダイズする、請求項36に記載のプライマーまたはプローブ。
- (a)ヌクレオチド836〜837の間の挿入が、2つのヌクレオチドである、(b)ヌクレオチド836〜837の間の挿入が、TTである、(c)ヌクレオチド867〜868の間の挿入が、1つのヌクレオチドである、(d)ヌクレオチド867〜868の間の挿入が、Aである、(e)ヌクレオチド943〜944の間の挿入が、13個までのヌクレオチドである、(f)ヌクレオチド943〜944の間の挿入が、TATTAAAAAAGTAである、請求項37に記載のプライマーまたはプローブ。
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