JP5829483B2

JP5829483B2 - Method for producing bifidobacteria fermented milk

Info

Publication number: JP5829483B2
Application number: JP2011235549A
Authority: JP
Inventors: 亮太郎星; 彰久松井
Original assignee: Yakult Honsha Co Ltd
Current assignee: Yakult Honsha Co Ltd
Priority date: 2011-10-27
Filing date: 2011-10-27
Publication date: 2015-12-09
Anticipated expiration: 2031-10-27
Also published as: JP2013090604A

Description

本発明は、ビフィズス菌発酵乳の製造方法及び該方法により製造されたビフィズス菌発酵乳に関する。 The present invention relates to a method for producing bifidobacteria fermented milk and a bifidobacteria fermented milk produced by the method.

ビフィズス菌は、人腸内で生育する有用な細菌であって、有機酸の生産に伴う腸内ｐＨの低下による病原菌の生育抑制作用等を有することが知られている。 Bifidobacterium is a useful bacterium that grows in the human intestine, and is known to have a growth-inhibiting action of pathogenic bacteria due to a decrease in intestinal pH accompanying the production of organic acids.

しかし、一般に、ビフィズス菌は以下のような性質を有しているため、ビフィズス菌を含有する発酵乳の製造及び発酵乳中の生菌数の維持の点で問題となっていた。 However, since bifidobacteria generally have the following properties, there has been a problem in the production of fermented milk containing bifidobacteria and the maintenance of the number of viable bacteria in the fermented milk.

１.栄養要求性が複雑かつ厳格で、酵母エキス等の生育促進物質を含有しない純粋な牛乳培地では増殖せず、生育促進物質は一般に高価であると共に、その添加は培養物の風味を損ねる。
２.偏性嫌気性であるため、酸素の存在下では生育が遅く、死滅しやすい。
３.通常の乳業用乳酸菌に比較して著しく耐酸性が低く、発酵乳のような低ｐＨ領域で長時間生育させることは困難である。 1. Complex and strict auxotrophy, does not grow on pure milk media that do not contain growth promoters such as yeast extract, growth promoters are generally expensive, and their addition impairs the flavor of the culture.
2. Because it is obligately anaerobic, it grows slowly in the presence of oxygen and is likely to die.
3. Remarkably low acid resistance compared to ordinary lactic acid bacteria for dairy industry, it is difficult to grow for a long time in a low pH region such as fermented milk.

このため、ビフィズス菌の生残性を向上させるために種々の研究が行われており、例えば、特許文献１には、ビフィズス菌と、ラクトバチラス・アシドフィルス、ラクトバチラス・サリバリウス等の遅酸性乳酸菌と混合培養することにより、好気的条件下においてもビフィズス菌及び乳酸菌の増殖性と生菌数が向上することが記載されている。 For this reason, various studies have been conducted to improve the viability of bifidobacteria. For example, Patent Literature 1 discloses mixed culture with bifidobacteria and slow-acid lactic acid bacteria such as Lactobacillus acidophilus and Lactobacillus salivalus. Thus, it is described that the growth and viable count of bifidobacteria and lactic acid bacteria are improved even under aerobic conditions.

一方、わが国における発酵乳は、厚生労働省の乳等省令（乳及び乳製品の成分規格等に関する省令）によって乳酸菌の使用が義務づけられている。この省令によって発酵乳は、『乳又はこれと同等以上の無脂乳固形分を含む乳等を乳酸菌又は酵母で発酵させ、糊状又は液状にしたもの又はこれらを凍結したもの』と定義され、その成分規格は次のようになっている。 On the other hand, fermented milk in Japan is obliged to use lactic acid bacteria according to the Ministry of Health, Labor and Welfare Ministry's Ordinance for Milk (Ministerial Ordinance on Component Standards for Milk and Dairy Products). According to this ministerial ordinance, fermented milk is defined as "milk or milk containing non-fat milk solids equal to or greater than this, fermented with lactic acid bacteria or yeast, made pasty or liquid, or frozen." The component specifications are as follows.

無脂乳固形分：８．０％以上
乳酸菌数または酵母数：１０００万個／ｍｌ以上
大腸菌群：陰性 Non-fat milk solid content: 8.0% or more Number of lactic acid bacteria or yeast: 10 million cells / ml or more coliform group: negative

また、市販されている発酵乳を形状で大別すると、液状発酵乳と糊状発酵乳に分けられる。液状発酵乳は、乳酸菌で発酵後生じたカードを均質化機を用いて完全に液状化したものである。糊状発酵乳は、さらに前発酵タイプの発酵乳と後発酵タイプの発酵乳に区分され、前者は発酵を行ってから容器に充填したものであり、後者は容器に充填してから発酵を行うものである。 Moreover, when fermented milk marketed is divided roughly according to a shape, it can be divided into liquid fermented milk and pasty fermented milk. Liquid fermented milk is obtained by completely liquefying a card produced after fermentation with lactic acid bacteria using a homogenizer. Paste-like fermented milk is further divided into pre-fermented type fermented milk and post-fermented type fermented milk. The former is fermented and then filled into a container, and the latter is filled into a container and then fermented. Is.

ビフィズス菌を利用した発酵乳は、前記の乳等省令によって規制されることになるため、ビフィズス菌以外に乳酸菌を規格値以上含有しなければならない。また、ビフィズス菌のみを利用した場合は、酢酸の風味が強くなり嗜好性が低いため、一定量の乳酸菌も併用する必要がある。しかしながら、上記の通り、乳酸菌に比べてビフィズス菌は増殖性が悪いため、乳酸菌とビフィズス菌を同量接種した場合、ビフィズス菌の生菌数は非常に少なくなるという問題があった。したがって、前発酵タイプの発酵乳を製造する場合、通常、ビフィズス菌と乳酸菌を別々の乳培地で培養し、ビフィズス菌、乳酸菌共に一定の生菌数を確保した後、それらの培養液を混合する方法が用いられている。また、前発酵タイプの発酵乳の製造においては、ビフィズス菌と乳酸菌を混合培養し、その際に添加するスターターの量をビフィズス菌は多く、乳酸菌は少なくする方法も用いられている。このような方法を採ることによって、前発酵タイプの発酵乳の場合は一定量のビフィズス菌を含有する発酵乳を製造することが可能である。 Since fermented milk using bifidobacteria is regulated by the aforementioned ministerial ordinance such as milk, it must contain lactic acid bacteria in excess of the standard value in addition to bifidobacteria. In addition, when only bifidobacteria are used, the taste of acetic acid is strong and the palatability is low, so that it is necessary to use a certain amount of lactic acid bacteria together. However, as described above, the bifidobacteria are poorer in growth than the lactic acid bacteria, and therefore there is a problem that the viable count of the bifidobacteria becomes very small when the same amount of lactic acid bacteria and bifidobacteria are inoculated. Therefore, when producing pre-fermented type fermented milk, normally, bifidobacteria and lactic acid bacteria are cultured in separate milk media, and after ensuring a certain number of viable bacteria for both bifidobacteria and lactic acid bacteria, the culture solutions are mixed. The method is used. Further, in the production of pre-fermented type fermented milk, a method is also used in which bifidobacteria and lactic acid bacteria are mixed and cultured, and the amount of starter added at that time is large in bifidobacteria and less in lactic acid bacteria. By adopting such a method, in the case of pre-fermented type fermented milk, it is possible to produce fermented milk containing a certain amount of bifidobacteria.

一方、前発酵タイプの発酵乳では、より固形状に近い性状にする場合には、寒天やゼラチン等の増粘（安定）剤を添加する必要がある。これに対し、後発酵タイプの発酵乳は、このような添加剤を用いることなく固形状の発酵乳を得ることができるため、健康志向の高い消費者に好まれている。 On the other hand, in the case of a pre-fermented type fermented milk, it is necessary to add a thickening (stabilizing) agent such as agar or gelatin in order to make the properties closer to solid. On the other hand, fermented milk of post-fermentation type is preferred by health-conscious consumers because solid fermented milk can be obtained without using such additives.

ところが、後発酵タイプの発酵乳の場合は、乳培地を容器に充填した後に培養する必要があるため、上記した前発酵タイプのようなビフィズス菌と乳酸菌を別々の培地で培養した後に混合する製造方法は用いることができなかった。また、後発酵タイプの発酵乳の製造において、上記したビフィズス菌と乳酸菌を混合培養し、その際に添加するスターターの量をビフィズス菌は多く、乳酸菌は少なくする方法を用いた場合、一般的な条件において培養に約２４時間も要することが判明した。後発酵タイプの発酵乳の場合、このように容器に充填した後の培養に長時間要する方法は工業的生産には適しておらず、生産効率の観点から一般的に８時間以内とすることが望ましいとされる。このように、限られた時間の中で一定数以上のビフィズス菌を含有する後発酵タイプの発酵乳の新規な製造方法の確立が望まれていた。 However, in the case of post-fermentation type fermented milk, it is necessary to culture after filling the milk medium into the container, so that the bifidobacteria and lactic acid bacteria like the above-mentioned pre-fermentation type are mixed after being cultured in separate media The method could not be used. In addition, in the production of post-fermentation type fermented milk, when the above-mentioned bifidobacteria and lactic acid bacteria are mixed and cultured, the amount of starter added at that time is high in bifidobacteria and less in lactic acid bacteria. Under the conditions, it was found that the culture takes about 24 hours. In the case of post-fermented type fermented milk, the method that requires a long time for culturing after filling into a container in this way is not suitable for industrial production, and is generally within 8 hours from the viewpoint of production efficiency. Desirable. Thus, establishment of the novel manufacturing method of the post-fermentation type fermented milk containing a fixed number or more of bifidobacteria within the limited time was desired.

特開昭５４−１４５８５号公報Japanese Patent Laid-Open No. 54-14585

したがって、本発明は、後発酵タイプのビフィズス菌発酵乳の製造方法において、容器充填後、短時間の培養によってビフィズス菌を多く含有する発酵乳を得ることができる方法を提供することを課題とするものである。 Accordingly, an object of the present invention is to provide a method for obtaining fermented milk containing a large amount of bifidobacteria by culturing in a short time after filling in a container in a method for producing a post-fermentation type bifidobacteria fermented milk. Is.

本発明者らは、上記課題を解決すべく鋭意研究した結果、乳を主成分とする培地にビフィズス菌を接種し、一次培養した後、得られた培養液に乳酸菌を接種し、容器に充填した後に二次培養することにより、ビフィズス菌の生菌数が高い後発酵タイプのビフィズス菌発酵乳が得られることを見出し、本発明を完成した。 As a result of diligent research to solve the above problems, the present inventors inoculated bifidobacteria into a medium mainly composed of milk, and after primary culture, inoculated lactic acid bacteria into the obtained culture solution and filled the container After that, it was found that a post-fermentation-type bifidobacteria fermented milk having a high viable count of bifidobacteria can be obtained by secondary culture, and the present invention has been completed.

すなわち、本発明は、乳を主成分とする培地にビフィズス菌を接種し、一次培養する工程、及び前記工程により得られた培養液に乳酸菌を接種し、容器に充填した後に二次培養する工程を具備することを特徴とするビフィズス菌発酵乳の製造方法である。 That is, the present invention includes a step of inoculating bifidobacteria in a medium mainly composed of milk and performing primary culture, and a step of inoculating lactic acid bacteria in the culture solution obtained by the above-described step and filling the container, followed by secondary culture. It is a manufacturing method of bifidobacteria fermented milk characterized by comprising.

また本発明は、上記製造方法において、二次培養終了時のビフィズス菌の生菌数が５．０×１０^８個／ｍｌ以上であるものである。 Further, the present invention is the above production method, wherein the viable count of bifidobacteria at the end of the secondary culture is 5.0 × 10 ⁸ cells / ml or more.

また本発明は上記製造方法において、一次培養終了時のｐＨを５．３〜６．０の範囲とするものである。 Moreover, this invention makes pH at the time of completion | finish of primary culture into the range of 5.3-6.0 in the said manufacturing method.

また本発明は、上記製造方法において、ビフィズス菌としてビフィドバクテリウム・ビフィダム又はビフィドバクテリウム・ブレーベを用いるものである。 Moreover, this invention uses a Bifidobacterium bifidum or a Bifidobacterium breve as a Bifidobacterium in the said manufacturing method.

さらに本発明は、上記製造方法によって製造されたビフィズス菌発酵乳である。 Furthermore, this invention is the bifidobacteria fermented milk manufactured by the said manufacturing method.

また本発明は、上記製造方法によって製造され、１０℃で２１日間保存した場合のビフィズス菌の生菌数が１．０×１０^８個／ｍｌ以上であり、かつ乳酸菌の生菌数が１．０×１０^７個／ｍｌ以上であるビフィズス菌発酵乳である。 The present invention also provides a viable Bifidobacterium count of 1.0 × 10 ⁸ cells / ml or more and a lactic acid bacteria viable count of 1. It is a Bifidobacterium fermented milk that is 0 × 10 ⁷ cells / ml or more.

また本発明は、１０℃で２１日間保存した場合のビフィズス菌の生菌数が１．０×１０^８個／ｍｌ以上であり、かつ乳酸菌の生菌数が１．０×１０^７個／ｍｌ以上である後発酵タイプのビフィズス菌発酵乳である。 In the present invention, the viable count of bifidobacteria when stored at 10 ° C. for 21 days is 1.0 × 10 ⁸ cells / ml or more, and the viable count of lactic acid bacteria is 1.0 × 10 ⁷ cells / ml. It is the post-fermentation type Bifidobacterium fermented milk as described above.

本発明の製造方法によれば、製造時のビフィズス菌の生菌数が多く、また、発酵乳の保存後のビフィズス菌生残性も良好であり、口あたりがなめらかで嗜好性に優れた後発酵タイプのビフィズス菌発酵乳を効率的に製造することができる。 According to the production method of the present invention, the number of viable bacteria of bifidobacteria at the time of production is large, and the viability of bifidobacteria after storage of fermented milk is also good, the mouthfeel is smooth and excellent in palatability Fermented milk of fermented bifidobacteria can be efficiently produced.

本発明のビフィズス菌発酵乳の製造方法は、乳を主成分とする培地にビフィズス菌を接種し、一次培養する工程、及び前記工程により得られた培養液に乳酸菌を接種し、容器に充填した後に二次培養する工程を具備するものである。
ここで、ビフィズス菌を培養するに際して用いる培地としては、乳を主成分とするものであればよく、特に限定されるものではない。例えば通常乳酸菌培養に供される牛乳、山羊乳、羊乳、豆乳などの動物及び植物由来の液状乳、脱脂粉乳、全粉乳、或いは粉乳や濃縮乳から還元した乳をそのまま或いは水で希釈したものを用いることができる。なお、従来ビフィズス菌又は乳酸菌用の培地に対してしばしば添加されていた酵母エキス、ペプトン等の生育促進物質やＬ−アスコルビン酸、Ｌ−システイン等の還元剤は、本発明では、製品の性質上障害とならない場合において使用することができる。 The method for producing a bifidobacteria fermented milk according to the present invention includes inoculating bifidobacteria in a medium mainly composed of milk, performing primary culture, and inoculating lactic acid bacteria in the culture solution obtained by the above step, and filling the container. A step of performing secondary culture later is provided.
Here, the medium used for culturing the bifidobacteria is not particularly limited as long as it is mainly composed of milk. For example, animal milk such as cow milk, goat milk, sheep milk, soy milk, etc., which are usually used for lactic acid bacteria culture, liquid milk powder, skim milk powder, whole milk powder, milk reduced from powdered milk or concentrated milk, or diluted with water Can be used. In the present invention, growth promoters such as yeast extract and peptone, and reducing agents such as L-ascorbic acid and L-cysteine, which are often added to a medium for bifidobacteria or lactic acid bacteria, are used in the present invention. Can be used when it does not become an obstacle.

本発明の方法においては、まず、前記の乳を主成分とする培地にビフィズス菌を接種し、一次培養する。ここで用いられるビフィズス菌としては、通常、食品に使用されるものであれば特に限定されるものではなく、例えばビフィドバクテリウム・ブレーベ、ビフィドバクテリウム・ビフィダム、ビフィドバクテリウム・ロンガム、ビフィドバクテリウム・インファンティス、ビフィドバクテリウム・アドレッセンティス、ビフィドバクテリウム・アンギュラータム、ビフィドバクテリウム・カテヌラータム、ビフィドバクテリウム・シュードカテヌラータム、ビフィドバクテリウム・デンティアム等のビフィズス菌を挙げることができ、これらは、１種単独で用いることもできるし、２種以上を組み合わせて用いることもできるが、ヨーグルトの嗜好性の点から、ビフィドバクテリウム・ブレーベ又はビフィドバクテリウム・ビフィダムを用いることが好ましい。 In the method of the present invention, first, bifidobacteria are inoculated into the above-described medium containing milk as a main component, followed by primary culture. The bifidobacteria used here is not particularly limited as long as it is usually used in foods. For example, Bifidobacterium breve, Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium longum, Bifidobacterium infantis, Bifidobacterium addressentis, Bifidobacterium angularum, Bifidobacterium catenuratum, Bifidobacterium pseudocatenuratam, Bifidobacterium dentineum Can be used singly or in combination of two or more. From the viewpoint of the taste of yogurt, Bifidobacterium breve or Using Bifidobacterium bifidum It is preferable.

ビフィズス菌の乳を含む培地への接種量は、特に限定されるものではないが、ビフィズス菌の増殖性の点から、培地中のビフィズス菌数が１×１０^６個／ｍｌ以上となる量が好ましく、特に５×１０^６個／ｍｌ以上となる量が好ましい。例えば、１０ｗ／ｗ％の脱脂粉乳と０．１ｗ／ｗ％の酵母エキスを含有する溶液を培地として、ｐＨ４．７程度まで嫌気培養して得たビフィズス菌スターターを用いる場合、乳を含む培地に対して０．１ｖ／ｖ％以上接種することが好ましく、特に１ｖ／ｖ％以上接種することが好ましい。 The inoculation amount of the bifidobacteria into the medium containing milk is not particularly limited, but from the viewpoint of the growth of the bifidobacteria, the amount of bifidobacteria in the medium is 1 × 10 ⁶ cells / ml or more. An amount of 5 × 10 ⁶ pieces / ml or more is particularly preferable. For example, when using a Bifidobacterium starter obtained by anaerobic culture up to about pH 4.7 using a solution containing 10 w / w% skim milk powder and 0.1 w / w% yeast extract as a medium, On the other hand, it is preferable to inoculate 0.1 v / v% or more, and it is particularly preferable to inoculate 1 v / v% or more.

前記ビフィズス菌の培養温度は、ビフィズス菌が生育する温度、具体的には２５〜４５℃、特に３３〜３７℃が好ましく、培養はビフィズス菌が一定の菌数となるのに十分な時間行えばよいが、ビフィズス菌発酵乳の口当たりと嗜好性、ビフィズス菌の増殖性の点から、ｐＨが５．２〜６．２、さらに５．３〜６．０となるまで行うことが好ましい。また、発酵方法としては、静置発酵、攪拌発酵、振とう発酵等から適宜選択して用いればよいが、ビフィズス菌発酵乳の口当たりと嗜好性の点から、静置発酵を用いることが好ましい。 The culture temperature of the bifidobacteria is preferably the temperature at which the bifidobacteria grows, specifically 25 to 45 ° C., particularly 33 to 37 ° C. The culture is carried out for a time sufficient for the bifidobacteria to have a certain number of bacteria. Although it is good, it is preferable to carry out until pH becomes 5.2-6.2 and also 5.3-6.0 from the point of the mouthfeel and palatability of bifidobacteria fermented milk, and the growth property of bifidobacteria. Moreover, as a fermentation method, it should just select and use suitably from stationary fermentation, stirring fermentation, shake fermentation, etc., but it is preferable to use stationary fermentation from the point of taste and palatability of bifidobacteria fermented milk.

次いで、前記工程で得られた培養液に乳酸菌を接種する。ここで用いる乳酸菌としては、通常、食品に使用されるものであれば、特に限定されるものではなく、例えばラクトバチルス・カゼイ、ラクトバチルス・マリ、ラクトバチルス・アシドフィルス、ラクトバチルス・デルブルッキィサブスピーシーズブルガリカス、ラクトバチルス・ヘルベティカス等のラクトバチルス属細菌；ストレプトコッカス・サーモフィルス等のストレプトコッカス属細菌；ラクトコッカス・ラクチスサブスピーシーズクレモリス等のラクトコッカス属細菌を挙げることができる。なお、これらの乳酸菌は単独で用いても、或いは２種以上を併用してもよい。これらの乳酸菌の培養液への接種量は、特に限定されるものではないが、乳酸菌の増殖性の点から、培養液中の乳酸菌数が１×１０^６個／ｍｌ以上となる量が好ましく、特に１×１０^７個／ｍｌ以上となる量が好ましい。例えば、１０ｗ／ｗ％の脱脂粉乳の溶液を培地として、ｐＨ４．４程度まで嫌気培養して得た乳酸菌スターターを用いる場合、培養液に対して０．１ｖ／ｖ％以上接種することが好ましく、特に１ｖ／ｖ％以上接種することが好ましい。 Next, lactic acid bacteria are inoculated into the culture solution obtained in the above step. The lactic acid bacteria used here are not particularly limited as long as they are usually used in foods. For example, Lactobacillus casei, Lactobacillus mari, Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus delbruchy Subspecies Bulgari Examples include bacteria of the genus Lactobacillus such as Kas, Lactobacillus helveticus; Streptococcus bacteria such as Streptococcus thermophilus; Lactococcus bacteria such as Lactococcus lactis In addition, these lactic acid bacteria may be used independently or may use 2 or more types together. The amount of these lactic acid bacteria inoculated into the culture solution is not particularly limited, but from the viewpoint of the growth of lactic acid bacteria, an amount such that the number of lactic acid bacteria in the culture solution is 1 × 10 ⁶ cells / ml or more is preferable. An amount of 1 × 10 ⁷ pieces / ml or more is particularly preferable. For example, when a lactic acid bacteria starter obtained by anaerobic culture to pH 4.4 is used as a medium with a solution of skim milk powder of 10 w / w%, it is preferable to inoculate 0.1% / v% or more of the culture solution, It is particularly preferable to inoculate 1 v / v% or more.

また、上記乳酸菌に他の微生物、例えば、サッカロミセス属、キャンディダ属、ロドトルーラ属、ピチア属、シゾサッカロミセス属、トルラ属、チゴサッカロミセス属等の酵母類、あるいは、アスペルギルス属、ペニシリウム属、ユウロチウム属、モナスカス属、ムコール属、ニュウロスポラ属、リゾープス属等の糸状菌等を併用しても良い。 In addition to the above-mentioned lactic acid bacteria, other microorganisms, for example, yeasts such as Saccharomyces, Candida, Rhodotorula, Pichia, Schizosaccharomyces, Torula, Tigosaccharomyces, or Aspergillus, Penicillium, Eurothium In addition, filamentous fungi such as Monascus genus, Mucor genus, Neurospora genus and Rhizopus genus may be used in combination.

このようにして乳酸菌等を接種した培養液を容器に充填する。ビフィズス菌は酸素に弱い性質を有するため、一般的にビフィズス菌発酵乳には酸素透過性の低い容器を用いることが好ましいとされるが、本発明の方法により得られたビフィズス菌発酵乳は、後述のように保存後のビフィズス菌の生残性が非常に良好であるため、酸素を遮断する加工が施されていない紙製や樹脂製の容器も用いることができる。また、充填方法は特に制限されるものではなく、発酵乳や乳酸菌飲料において通常用いられる充填方法を用いればよい。 In this way, the container is filled with the culture solution inoculated with lactic acid bacteria and the like. Since bifidobacteria have a property of being vulnerable to oxygen, it is generally preferable to use a container having low oxygen permeability for the bifidobacteria fermented milk, but the bifidobacteria fermented milk obtained by the method of the present invention is Since the viability of the bifidobacteria after storage is very good as will be described later, it is possible to use a paper or resin container that has not been processed to block oxygen. Moreover, the filling method is not particularly limited, and a filling method usually used in fermented milk or lactic acid bacteria beverages may be used.

次いで、容器に充填された培養液を二次培養する。この二次培養では、培養温度は乳酸菌およびビフィズス菌が生育する温度、具体的には２５〜４５℃、特に３５〜４２℃が好ましく、培養は乳酸菌およびビフィズス菌が一定の菌数となるのに十分な時間行えばよく、具体的には、ｐＨが４．２〜５．０、特に４．４〜４．８となるまで行えばよい。また、培養終了時（製造時）のビフィズス菌の生菌数は特に制限されないが、プロバイオティクスとして生理機能を訴求する観点から５．０×１０^８個／ｍｌ以上であることが好ましく、より好ましくは、１．０×１０^９個／ｍｌ以上である。一方、乳酸菌の生菌数は、前記した乳等省令の規制上１．０×１０^７個／ｍｌ以上であることが必要であり、好ましくは１．０×１０^８個／ｍｌ以上である。なお、発酵方法としては、予め所望の培養温度に設定した培養室に培養液が充填された容器ごと入れるなどの方法で静置発酵すればよい。二次培養の時間は、ビフィズス菌および乳酸菌の種類、接種量等によって適宜設定できるが、生産効率の観点から８時間以内で終了することが好ましい。 Next, the culture solution filled in the container is subjected to secondary culture. In this secondary culture, the culture temperature is preferably the temperature at which lactic acid bacteria and bifidobacteria grow, specifically 25 to 45 ° C., particularly 35 to 42 ° C. The culture is performed when lactic acid bacteria and bifidobacteria have a certain number of bacteria. It may be performed for a sufficient time, and specifically, it may be performed until the pH becomes 4.2 to 5.0, particularly 4.4 to 4.8. In addition, the viable count of bifidobacteria at the end of the culture (during manufacture) is not particularly limited, but is preferably 5.0 × 10 ⁸ cells / ml or more from the viewpoint of appealing physiological functions as probiotics. Preferably, it is 1.0 × 10 ⁹ pieces / ml or more. On the other hand, the number of living lactic acid bacteria is required to be 1.0 × 10 ⁷ cells / ml or more, preferably 1.0 × 10 ⁸ cells / ml or more in accordance with the regulations of the above-mentioned ministerial ordinances. In addition, as a fermentation method, stationary fermentation may be performed by a method in which a container filled with a culture solution is placed in a culture chamber set in advance to a desired culture temperature. The duration of the secondary culture can be appropriately set depending on the types of bifidobacteria and lactic acid bacteria, the amount of inoculation, and the like, but it is preferable to end within 8 hours from the viewpoint of production efficiency.

本発明のビフィズス菌発酵乳の製造方法は、まずビフィズス菌を培養し（一次培養）、次いで乳酸菌を接種し、容器に充填した後に培養（二次培養）することが重要であり、ビフィズス菌と乳酸菌を一緒に接種する、或いは、一次培養で乳酸菌を用い、二次培養でビフィズス菌を用いた場合には、後述する実施例に示すとおり所望の効果を十分に得ることができない。 In the method for producing fermented milk of bifidobacteria of the present invention, it is important to first culture bifidobacteria (primary culture), then inoculate lactic acid bacteria, fill the container, and then culture (secondary culture). When lactic acid bacteria are inoculated together or lactic acid bacteria are used in the primary culture and bifidobacteria are used in the secondary culture, the desired effect cannot be sufficiently obtained as shown in the examples described later.

このようにして得られる本発明のビフィズス菌発酵乳は、その保存後のビフィズス菌生残性について特に制限されるものではないが、本発明のビフィズス菌発酵乳は、保存後のビフィズス菌生残性も良好であるため、例えば、酸素を遮断する加工を施していない紙製容器に培養物を、窒素置換等の操作を行うことなく大気雰囲気下で充填して、アルミキャップで密閉した後に二次培養することにより得られた当該製品を１０℃の恒温室中において、大気雰囲気下で２１日間保存した場合、ビフィズス菌の生菌数が１．０×１０^８個／ｍｌ以上、好ましくは２．０×１０^８個／ｍｌ以上であるとともに、乳酸菌の生菌数が１．０×１０^７個／ｍｌ以上、好ましくは２．０×１０^７個／ｍｌ以上のものである。本発明により、工業的な生産条件において初めてこのように製造時のビフィズス菌の生菌数が多く、かつ、保存後のビフィズス菌の生残性も良好な後発酵タイプの発酵乳の製造が可能となった。本発明の発酵乳は、プレーンタイプ、フレーバータイプ、ハードタイプ、フルーツタイプ、ソフトタイプ、ドリンクタイプ、フローズンタイプなどの形態のものが含まれる。 The bifidobacteria fermented milk of the present invention thus obtained is not particularly limited with respect to the viability of the bifidobacteria after storage, but the bifidobacteria fermented milk of the present invention is a bifidobacteria fermented milk after storage. For example, the culture is filled in a paper container that has not been processed to block oxygen in an air atmosphere without performing an operation such as nitrogen substitution and sealed with an aluminum cap. When the product obtained by the subsequent culturing is stored in a constant temperature room at 10 ° C. for 21 days in an air atmosphere, the viable count of bifidobacteria is 1.0 × 10 ⁸ cells / ml or more, preferably 2 0.0 × 10 ⁸ cells / ml or more and the number of viable lactic acid bacteria is 1.0 × 10 ⁷ cells / ml or more, preferably 2.0 × 10 ⁷ cells / ml or more. According to the present invention, it is possible to produce a fermented milk of a post-fermentation type that has a large number of Bifidobacteria at the time of production and good survival after storage in industrial production conditions for the first time. It became. Examples of the fermented milk of the present invention include plain types, flavor types, hard types, fruit types, soft types, drink types, and frozen types.

本発明のビフィズス菌発酵乳には、さらに、食品として通常用いられる種々の食品素材を配合することができる。例えば、シロップなどの甘味料、増粘（安定）剤、乳化剤、乳脂肪、酸味料、各種ビタミン類、ミネラル分、フレーバー等の任意成分を適宜配合することができる。具体的には、ショ糖、グルコース、フルクトース、パラチノース、トレハロース、ラクトース、キシロース、麦芽糖等の糖質；ソルビトール、キシリトール、エリスリトール、ラクチトール、パラチニット、還元水飴、還元麦芽糖水飴等の糖アルコール；アスパルテーム、ソーマチン、スクラロース、アセスルファムK、ステビア等の高甘味度甘味料；寒天、ゼラチン、カラギーナン、グァーガム、キサンタンガム、ペクチン、ローカストビーンガム、ジェランガム、カルボキシメチルセルロース、大豆多糖類、アルギン酸プロピレングリコール等の各種増粘（安定）剤；ショ糖脂肪酸エステル、グリセリン脂肪酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、レシチン等の乳化剤；クリーム、バター、サワークリーム等の乳脂肪；クエン酸、乳酸、酢酸、リンゴ酸、酒石酸、グルコン酸等の酸味料；ビタミンA、ビタミンB類、ビタミンC、ビタミンE類等の各種ビタミン類；カルシウム、マグネシウム、亜鉛、鉄、マンガン等のミネラル分；ヨーグルト系、ベリー系、オレンジ系、花梨系、紫蘇系、シトラス系、アップル系、ミント系、グレープ系、アプリコット系、ペア、カスタードクリーム、ピーチ、メロン、バナナ、トロピカル系、ハーブ系、紅茶、コーヒー系等のフレーバー類を挙げることができる。なお、本発明のビフィズス菌発酵乳は、後発酵タイプのものであるため、上記増粘（安定）剤を実質的に含有しなくても、糊状〜固形状の性状とし、これを安定的に保持することが可能である。 The bifidobacteria fermented milk of the present invention may further contain various food materials that are usually used as food. For example, optional ingredients such as sweeteners such as syrup, thickener (stabilizer), emulsifier, milk fat, acidulant, various vitamins, minerals, and flavors can be appropriately blended. Specifically, sugars such as sucrose, glucose, fructose, palatinose, trehalose, lactose, xylose, maltose; sugar alcohols such as sorbitol, xylitol, erythritol, lactitol, palatinit, reduced starch syrup, reduced maltose starch syrup; aspartame, thaumatin , Sucralose, acesulfame K, stevia and other high-sweetness sweeteners; various thickening (stable, such as agar, gelatin, carrageenan, guar gum, xanthan gum, pectin, locust bean gum, gellan gum, carboxymethylcellulose, soybean polysaccharide, propylene glycol alginate ) Agents; emulsifiers such as sucrose fatty acid ester, glycerin fatty acid ester, polyglycerin fatty acid ester, sorbitan fatty acid ester, lecithin; cream, butter, sawarkuri Milk fat such as citric acid, lactic acid, acetic acid, malic acid, tartaric acid, gluconic acid, etc .; various vitamins such as vitamin A, vitamin B, vitamin C, vitamin E; calcium, magnesium, zinc, Mineral content such as iron and manganese: yogurt, berry, orange, quince, shiso, citrus, apple, mint, grape, apricot, pair, custard cream, peach, melon, banana, tropical Flavors such as tea, herb, tea and coffee. In addition, since the bifidobacteria fermented milk of the present invention is of a post-fermentation type, even if it does not substantially contain the above thickening (stabilizing) agent, it is made into a paste-like to solid property and stable. It is possible to hold it.

以下に実施例を挙げて本発明について更に詳細に説明するが、本発明がこれら実施例に限定を受けないことは言うまでもない。 Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to examples, but it goes without saying that the present invention is not limited to these examples.

実施例１
８ｗ／ｗ％（以下、培地組成中の「％」は「ｗ／ｗ％」を意味する）の脱脂粉乳、７％の砂糖、１％の乳たんぱく（Nutrilac YO-8113：アーラフーズイングレディエンツジャパン株式会社）、０．０６％の乳ペプチド（LE80GF-US、日本新薬株式会社）を含む水溶液を９０℃で３０分間殺菌し、基本培地を得た。この培地に、別途１０％の脱脂粉乳と０．１％の酵母エキスの溶液を培地として、ｐＨ４．７程度まで嫌気培養して得たビフィドバクテリウム・ビフィダム（ＹＩＴ１０３４７）スターターを培地に対して１ｖ／ｖ％（培地中のビフィズス菌数が７．０×１０^６個／ｍｌとなるように）接種し、３７℃でｐＨ５．６となるまで密閉した培養容器を用いて、窒素置換等の操作は行わずに一次培養して培養物を得た。この培養物に、別途１０％の脱脂粉乳溶液を培地として、ｐＨ４．４程度まで嫌気培養して得たストレプトコッカス・サーモフィルス（ＹＩＴ２０２１）スターターを培養物に対して１ｖ／ｖ％（培養物中の乳酸菌数が１．２×１０^７個／ｍｌとなるように）接種した後に３８℃に昇温し、１２０ｍｌの容量の紙製容器に培養物１００ｍｌを充填した後、アルミキャップで密閉した。充填および密閉作業は大気雰囲気下で行い、特に窒素置換等の操作は行わなかった。また、使用した紙製容器は酸素を遮断するような加工が施されていないものである。このようにして培養物を充填した容器を、３７℃の恒温室中において大気雰囲気下でｐＨ４．６となるまで二次培養し、５℃に冷却して乳製品（固形状発酵乳）を得た。 Example 1
Non-fat dry milk of 8 w / w% (hereinafter “%” in the medium composition means “w / w%”), 7% sugar, 1% milk protein (Nutrilac YO-8113: Arahus Ingredients) Japan Co., Ltd.) and an aqueous solution containing 0.06% milk peptide (LE80GF-US, Nippon Shinyaku Co., Ltd.) were sterilized at 90 ° C. for 30 minutes to obtain a basic medium. In this medium, a Bifidobacterium bifidum (YIT10347) starter obtained by anaerobically culturing to a pH of about 4.7 using a 10% nonfat dry milk and 0.1% yeast extract solution as a medium. Inoculate 1v / v% (so that the number of bifidobacteria in the medium is 7.0 × 10 ⁶ cells / ml), and use a culture vessel sealed at 37 ° C. until pH 5.6. A primary culture was performed without performing the operation to obtain a culture. In this culture, a Streptococcus thermophilus (YIT2021) starter obtained by anaerobic culture to about 4.4 using a 10% nonfat dry milk solution as a culture medium was 1 v / v% (in the culture). After inoculation (so that the number of lactic acid bacteria was 1.2 × 10 ⁷ cells / ml), the temperature was raised to 38 ° C., a paper container with a capacity of 120 ml was filled with 100 ml of the culture, and then sealed with an aluminum cap. Filling and sealing operations were performed in an air atmosphere, and operations such as nitrogen replacement were not performed. Further, the used paper container is not subjected to a process for blocking oxygen. The container filled with the culture in this way is subcultured in a constant temperature room at 37 ° C. until it reaches pH 4.6 in the atmosphere, and cooled to 5 ° C. to obtain a dairy product (solid fermented milk). It was.

比較例１
一次培養にストレプトコッカス・サーモフィルス（ＹＩＴ２０２１）スターターを用い、二次培養にビフィドバクテリウム・ビフィダム（ＹＩＴ１０３４７）スターターを用いる以外は実施例１と同様にして、乳製品を得た。 Comparative Example 1
A dairy product was obtained in the same manner as in Example 1 except that a Streptococcus thermophilus (YIT2021) starter was used for primary culture and a Bifidobacterium bifidum (YIT10347) starter was used for secondary culture.

比較例２
一次培養の工程を経ることなく、ビフィドバクテリウム・ビフィダム（ＹＩＴ１０３４７）スターター１ｖ／ｖ％（以下、スターターの接種量について、「％」は「ｖ／ｖ％」を意味する）とストレプトコッカス・サーモフィルス（ＹＩＴ２０２１）スターター１％を基本培地に接種した後に、３８℃に昇温し、カップに充填した。これを３７℃でｐＨ４．６となるまで培養し、５℃に冷却して乳製品を得た。 Comparative Example 2
Bifidobacterium bifidum (YIT10347) starter 1v / v% (hereinafter, "%" means "v / v%" for the inoculum of the starter) and Streptococcus thermos without undergoing the primary culture process After inoculating a basic medium with 1% of Filus (YIT2021) starter, the temperature was raised to 38 ° C. and filled into a cup. This was cultured at 37 ° C. until pH 4.6 and cooled to 5 ° C. to obtain a dairy product.

比較例３
ビフィドバクテリウム・ビフィダム（ＹＩＴ１０３４７）スターターを１０％接種する以外は比較例２と同様にして、乳製品を得た。 Comparative Example 3
Dairy products were obtained in the same manner as in Comparative Example 2 except that 10% of Bifidobacterium bifidum (YIT10347) starter was inoculated.

比較例４
ストレプトコッカス・サーモフィルス（ＹＩＴ２０２１）スターターを０．０１％接種する以外は比較例３と同様にして、乳製品を得た。 Comparative Example 4
A dairy product was obtained in the same manner as in Comparative Example 3, except that 0.01% of Streptococcus thermophilus (YIT2021) starter was inoculated.

試験例１
実施例１および比較例１〜４で得られた乳製品の製造時（二次培養終了時）のビフィズス菌数をＴＯＳ培地（ヤクルト薬品工業株式会社）を用いて測定した。また乳製品中の製造時（二次培養終了時）の乳酸菌数をＢＣＰ培地（栄研化学株式会社）により測定した。更に、得られた乳製品の風味を下記評価基準により専門パネル３名で評価した。結果を表１に示す。 Test example 1
The number of bifidobacteria at the time of production of dairy products obtained in Example 1 and Comparative Examples 1 to 4 (at the end of secondary culture) was measured using a TOS medium (Yakult Pharmaceutical Co., Ltd.). In addition, the number of lactic acid bacteria at the time of production in dairy products (at the end of secondary culture) was measured using a BCP medium (Eiken Chemical Co., Ltd.). Furthermore, the taste of the obtained dairy product was evaluated by three specialist panels according to the following evaluation criteria. The results are shown in Table 1.

＜風味評価基準＞
記号内容
◎ ：とてもなめらかな食感である
○ ：なめらかな食感である
△ ：ややなめらかな食感である
× ：なめらかな食感とは言えない <Flavor evaluation criteria>
Symbol Contents ◎: Very smooth texture ○: Smooth texture △: Slightly smooth texture ×: It cannot be said that the texture is smooth

表１から明らかなように、一次培養でビフィズス菌を培養し、次いで乳酸菌を接種してから二次培養を行った実施例１では、短時間の二次培養でビフィズス菌数が高く、風味も優れた乳製品を製造することができた。これに対し、一次培養で乳酸菌を培養した後ビフィズス菌を接種して二次培養を行った比較例１では、実施例１と比較してビフィズス菌の菌数が低く、また風味も劣るものであった。また、ビフィズス菌の一次培養を行わず、ビフィズス菌と乳酸菌を混合培養した場合には、ビフィズス菌スターターを１０％接種しても実施例１と比べビフィズス菌の菌数は低いものであった（比較例３および４）。 As is clear from Table 1, in Example 1 where bifidobacteria were cultured in primary culture and then inoculated with lactic acid bacteria, followed by secondary culture, the number of bifidobacteria was high in the short-term secondary culture and the flavor was also high. An excellent dairy product could be produced. On the other hand, in Comparative Example 1 in which lactic acid bacteria were cultured in primary culture and then inoculated with bifidobacteria and subjected to secondary culture, the number of bifidobacteria was lower and the flavor was inferior to Example 1. there were. In addition, when bifidobacteria and lactic acid bacteria were mixed and cultured without performing the primary culture of bifidobacteria, the number of bifidobacteria was low compared to Example 1 even when 10% of bifidobacteria starter was inoculated ( Comparative examples 3 and 4).

実施例２
一次培養において、ｐＨが５.２、５.３、５.４、５.８、６.０または６.２となるまで培養を行った以外は実施例１と同様にして、それぞれ乳製品（固形状発酵乳）を得た。得られた乳製品について、製造時（二次培養終了時）のビフィズス菌数をＴＯＳ培地（ヤクルト薬品工業株式会社）を用いて測定した。また製造時（二次培養終了時）の乳酸菌数をＢＣＰ培地（栄研化学株式会社）により測定した。更に当該乳製品を容器のまま１０℃の恒温室中において大気雰囲気下で、２１日間保存後のビフィズス菌数および乳酸菌数についても同様にして測定した。また、得られた乳製品の風味を実施例１と同様に評価した。結果を表２に示す。なお、表２には表１の実施例１（一次培養終了時のｐＨが５．６）のデータも記載した。 Example 2
In the primary culture, each of the dairy products (in the same manner as in Example 1) except that the culture was performed until the pH became 5.2, 5.3, 5.4, 5.8, 6.0, or 6.2. Solid fermented milk) was obtained. About the obtained dairy product, the bifidobacteria count at the time of manufacture (at the time of secondary culture completion) was measured using the TOS culture medium (Yakult Pharmaceutical Co., Ltd.). The number of lactic acid bacteria at the time of production (at the end of secondary culture) was measured using a BCP medium (Eiken Chemical Co., Ltd.). Further, the number of bifidobacteria and the number of lactic acid bacteria after 21 days of storage in a constant temperature room at 10 ° C. in a container at 10 ° C. were measured in the same manner. Further, the flavor of the obtained dairy product was evaluated in the same manner as in Example 1. The results are shown in Table 2. Table 2 also shows data of Example 1 in Table 1 (pH at the end of primary culture is 5.6).

表２から明らかなように一次培養終了時のｐＨを５．２〜６．２の範囲とした場合は、ビフィズス菌数および風味の点で商品として許容可能なビフィズス菌発酵乳を得ることができた。また、特に一次培養終了時のｐＨを５．３〜６．０の範囲とした場合は、ビフィズス菌数が高く、風味も良好な乳製品を得ることができた。また保存後のビフィズス菌生残性も良好であった。 As is apparent from Table 2, when the pH at the end of primary culture is in the range of 5.2 to 6.2, fermented milk of Bifidobacterium that is acceptable as a product in terms of the number of Bifidobacterium and flavor can be obtained. It was. In particular, when the pH at the end of primary culture was in the range of 5.3 to 6.0, a dairy product having a high bifidobacteria count and good flavor could be obtained. The viability of bifidobacteria after storage was also good.

実施例３
一次培養においてビフィドバクテリウム・ビフィダム（ＹＩＴ１０３４７）の代わりにビフィドバクテリウム・ブレーベ（ＹＩＴ１２２７２）を用いる以外は実施例１と同様にして、乳製品（固形状発酵乳）を得た。
得られた乳製品について、製造時（二次培養終了時）のビフィズス菌数をＴＯＳ培地（ヤクルト薬品工業株式会社）を用いて測定した。また製造時（二次培養終了時）の乳酸菌数をＢＣＰ培地（栄研化学株式会社）により測定した。更に１０℃、２１日間保存後のビフィズス菌数および乳酸菌数について、実施例２と同様にして測定した。また得られた乳製品の風味を実施例１と同様に評価した。結果を表３に示す。 Example 3
A dairy product (solid fermented milk) was obtained in the same manner as in Example 1 except that Bifidobacterium breve (YIT12272) was used instead of Bifidobacterium bifidum (YIT10347) in the primary culture.
About the obtained dairy product, the bifidobacteria count at the time of manufacture (at the time of secondary culture completion) was measured using the TOS culture medium (Yakult Pharmaceutical Co., Ltd.). The number of lactic acid bacteria at the time of production (at the end of secondary culture) was measured using a BCP medium (Eiken Chemical Co., Ltd.). Furthermore, the number of bifidobacteria and the number of lactic acid bacteria after storage at 10 ° C. for 21 days were measured in the same manner as in Example 2. Further, the flavor of the obtained dairy product was evaluated in the same manner as in Example 1. The results are shown in Table 3.

表３から明らかなように、一次培養において、ビフィドバクテリウム・ブレーベを用いた場合でも、ビフィドバクテリウム・ビフィダムを用いた場合と同様に、ビフィズス菌数が多く、風味の良好な乳製品を製造できることが認められた。また保存後のビフィズス菌生残性も良好であった。 As is apparent from Table 3, even in the case of using Bifidobacterium breve in the primary culture, the dairy product having a high number of Bifidobacteria and a good flavor as in the case of using Bifidobacterium bifidum. It was found that can be manufactured. The viability of bifidobacteria after storage was also good.

実施例４
二次培養においてストレプトコッカス・サーモフィルス（ＹＩＴ２０２１）の代わりに、ラクトバチルス・デルブルッキィサブスピーシーズブルガリカス（ＹＩＴ０４４６）、またはストレプトコッカス・サーモフィルス（ＹＩＴ２０２１）、ラクトバチルス・デルブルッキィサブスピーシーズブルガリカス（ＹＩＴ０４４６）およびストレプトコッカス・サーモフィルス（ＹＩＴ２０８４）の３菌混合スターターを用いる以外は実施例１と同様にして、乳製品を得た。
得られた乳製品について、製造時（二次培養終了時）のビフィズス菌数をＴＯＳ培地（ヤクルト薬品工業株式会社）を用いて測定した。また製造時（二次培養終了時）の乳酸菌数をＢＣＰ培地（栄研化学株式会社）により測定した。更に１０℃、２１日間保存後のビフィズス菌数および乳酸菌数についても実施例２と同様にして測定した。また得られた乳製品の風味を実施例１と同様に評価した。結果を表４に示す。 Example 4
Instead of Streptococcus thermophilus (YIT2021) in secondary culture, Lactobacillus delbrukii subspecies Bulgaricus (YIT0446), or Streptococcus thermophilus (YIT2021), Lactobacillus delbruxy subspecies Bulgaricas (YIT0446) and Streptococcus spp. A dairy product was obtained in the same manner as in Example 1 except that a three-fungus mixed starter of Thermophilus (YIT2084) was used.
About the obtained dairy product, the bifidobacteria count at the time of manufacture (at the time of secondary culture completion) was measured using the TOS culture medium (Yakult Pharmaceutical Co., Ltd.). The number of lactic acid bacteria at the time of production (at the end of secondary culture) was measured using a BCP medium (Eiken Chemical Co., Ltd.). Further, the number of bifidobacteria and the number of lactic acid bacteria after storage at 10 ° C. for 21 days were measured in the same manner as in Example 2. Further, the flavor of the obtained dairy product was evaluated in the same manner as in Example 1. The results are shown in Table 4.

表４から明らかなように、二次培養において、ラクトバチルス・デルブルッキィサブスピーシーズブルガリカス、または乳酸菌３菌の混合スターターを用いた場合でも、ストレプトコッカス・サーモフィルスを用いた場合と同様に、ビフィズス菌数が多く、風味の良好な乳製品を製造できることが認められた。特に乳酸菌３菌の混合スターターを用いると優れた風味のものが得られ、保存後のビフィズス菌生残性も良好であった。 As can be seen from Table 4, even when using a mixed starter of Lactobacillus delbruchy subspecies Bulgaricus or three lactic acid bacteria in the secondary culture, the number of bifidobacteria was the same as when Streptococcus thermophilus was used. It was confirmed that dairy products having a good flavor could be produced. In particular, when a mixed starter of 3 lactic acid bacteria was used, an excellent flavor was obtained and the viability of bifidobacteria after storage was also good.

本発明の方法は、従来工業的生産が困難であった後発酵タイプのビフィズス菌発酵乳の製造を可能としたものであり、ビフィズス菌の生菌数が高く、風味の良好なビフィズス菌発酵乳を効率的に製造し得る方法として有用なものである。
以上

The method of the present invention enables the production of fermented milk of bifidobacteria after fermentation, which has been difficult for industrial production, and has a high viable count of bifidobacteria and has a good flavor. It is useful as a method that can be produced efficiently.
that's all

Claims

A step of inoculating bifidobacteria into a milk-based medium and performing primary culture, and a step of inoculating a lactic acid bacterium into the culture solution obtained by the above step and filling the container, followed by a secondary culture at 25 to 45 ° C. The manufacturing method of bifidobacteria fermented milk characterized by comprising.

2. The method for producing bifidobacteria fermented milk according to claim 1, wherein the viable count of bifidobacteria at the end of the secondary culture is 5.0 × 10 ⁸ cells / ml or more.

The pH at the end of primary culture is 5.3 to 6.0, The method for producing bifidobacteria fermented milk according to claim 1 or 2.

The method for producing fermented milk of Bifidobacterium according to any one of claims 1 to 3, wherein the Bifidobacterium is Bifidobacterium bifidum or Bifidobacterium breve.