JP5805464B2 - Fermented food and anti-cariogenic agent containing planteose - Google Patents

Fermented food and anti-cariogenic agent containing planteose Download PDF

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Description

本発明は、プランテオースを含有する食品組成物及びその製造方法、プランテオースを有効成分として含有する医薬品等に関するものである。   The present invention relates to a food composition containing planteose, a method for producing the same, a pharmaceutical product containing planteose as an active ingredient, and the like.

近年の健康志向を背景に、ヒトなどに有益な生理作用をもたらす天然成分(いわゆる機能性成分)が注目されており、その代表格として挙げられるのが機能性糖質素材である。機能性糖質素材とは、生活習慣病(高血圧、糖尿病など)予防治療、腸内環境改善、抗ストレス、虫歯予防治療などの作用を有する単糖、オリゴ糖、多糖類、糖アルコールなどを指す。   Natural ingredients (so-called functional ingredients) that have beneficial physiological effects on humans and the like have been attracting attention against the background of health-consciousness in recent years, and functional carbohydrate materials are listed as typical examples. Functional carbohydrate materials refer to monosaccharides, oligosaccharides, polysaccharides, sugar alcohols, etc. that have effects such as lifestyle-related diseases (hypertension, diabetes, etc.) prevention treatment, intestinal environment improvement, anti-stress, caries prevention treatment, etc. .

このうち、機能性糖質素材の虫歯予防治療用途としての抗う蝕効果については、いくつかの具体的な報告がされている。例えば、オリゴ糖であるパラチノースの抗う蝕効果(非特許文献1)やジフルクトース・ジアンヒドリドの抗う蝕効果(特許文献1)、糖アルコールであるキシリトールの抗う蝕効果などが報告され、これらを添加した機能性食品や、これらを有効成分とした医薬品などが開発されている。   Among these, some specific reports have been made on the anti-cariogenic effect of functional carbohydrate materials for use in preventing and treating caries. For example, the anti-cariogenic effect of palatinose, an oligosaccharide (Non-patent Document 1), the anti-cariogenic effect of difructose dianhydride (Patent Document 1), the anti-cariogenic effect of xylitol, a sugar alcohol, etc. have been reported. Functional foods that have been developed and pharmaceuticals that use these as active ingredients have been developed.

また、機能性糖質素材の腸内環境改善用途としてのビフィズス菌増殖効果については、オリゴ糖であるラフィノースのビフィズス菌増殖効果(非特許文献2)などが具体的に報告されている。そして、ラフィノース等を添加した機能性食品や、これらを有効成分とした医薬品なども同様に開発されている。   In addition, regarding the bifidobacteria growth effect of the functional carbohydrate material as an intestinal environment improvement application, the bifidobacteria growth effect of raffinose, which is an oligosaccharide (Non-patent Document 2), has been specifically reported. And functional foods to which raffinose or the like is added, and pharmaceuticals using these as active ingredients have been developed in the same manner.

なお、機能性糖質素材の多くは元来植物等に含まれているものであるが、その含有量はごくわずかであるため、通常そのような植物等をそのまま摂取しても十分な効果を得ることは難しい。また、ラフィノースのように末端にフラクトシル基がβ2,1結合で結合した機能性糖質素材は酵母菌などの発酵菌により資化されるため、例えば発酵食品において、このような機能性糖質素材を含有させたものを製造する際には、通常、単に素材を添加するだけでは当該発酵食品中に有効量を残存させることは困難であり、当該糖質素材を有効成分とする機能性発酵食品を得ること自体が困難であった。よって、微生物を利用する食品等での機能性糖質素材の利用においては、発酵菌などの利用微生物の資化性を勘案して製造する必要があった。このような背景から、当業界において、より幅広く利用しやすい新規な機能性糖質素材の開発が常に期待されている。   Although most functional carbohydrate materials are originally contained in plants, etc., the content is very small, so usually it is sufficient to ingest such plants as they are. Difficult to get. Moreover, since a functional carbohydrate material having a fructosyl group bonded to the end thereof by β2,1 bonds, such as raffinose, is assimilated by a fermenting bacterium such as a yeast, for example, in a fermented food, such a functional carbohydrate material is used. In general, it is difficult to leave an effective amount in the fermented food simply by adding a raw material, and a functional fermented food containing the carbohydrate material as an active ingredient. It was difficult to obtain. Therefore, in the use of functional carbohydrate materials in foods that use microorganisms, it has been necessary to manufacture in consideration of the assimilation of microorganisms used such as fermentation bacteria. Against this background, the development of new functional carbohydrate materials that can be used more widely is always expected in this industry.

一方、最近、低カロリーな新規糖質素材としてプランテオースが見いだされ、その製造方法などが報告されている(特許文献2)。このプランテオース(α−D−galactopyranosyl−(1→6)−β−D−fructofuranosyl α−D−glucopyranoside)は、ガラクトースとスクロースのフラクトシル基が1,6結合した構造を有するα−ガラクトオリゴ糖であり、オオバコ属植物、タバコ、ゴマ、サルビアの種子などに含まれている。   On the other hand, planteose has recently been found as a low-calorie novel carbohydrate material, and its production method has been reported (Patent Document 2). This planteose (α-D-galactopyranosyl- (1 → 6) -β-D-fructofuranosyl α-D-glucopyranoside) is an α-galacto-oligosaccharide having a structure in which the fructosyl groups of galactose and sucrose are linked to 1,6. It is contained in seeds of the plant of the genus Psyllium, tobacco, sesame and salvia.

しかし、プランテオースについては、標品が試薬として市販されていないため、その生理機能の詳細について未だ具体的な報告はない。また、プランテオースの酵母菌、ビフィズス菌、う蝕原性細菌等による資化性についても詳細は確認されていない。   However, for planteose, since the standard is not commercially available as a reagent, there is no specific report yet on the details of its physiological function. Further, details of assimilation by planteose yeast, bifidobacteria, cariogenic bacteria, etc. have not been confirmed.

特開2004−284985号公報JP 2004-284985 A 特開2009−148189号公報JP 2009-148189 A

小児歯科科学雑誌,23(3),678(1985)Journal of Pediatric Dental Science, 23 (3), 678 (1985) Bifidobacteria Microflora,6,59−63(1987)Bifidobacterium Microflora, 6, 59-63 (1987)

本発明は、低カロリーな機能性糖質素材を有効成分とした、ヒト及びヒトを除く動物に有用な生理作用を発揮する食品組成物及びその製造方法、有用な医薬品等を提供することを目的とする。また、この機能性糖質素材の添加量(有効量)が維持された発酵食品及びその簡便な製造方法の提供を副次的な目的とする。   An object of the present invention is to provide a food composition that exhibits a physiological action useful for humans and animals other than humans, a method for producing the same, a useful pharmaceutical, and the like, comprising a low-calorie functional carbohydrate material as an active ingredient. And In addition, a secondary object is to provide a fermented food in which the addition amount (effective amount) of the functional carbohydrate material is maintained and a simple production method thereof.

上記目的を達成するため、本発明者らは、純度の高いプランテオースを酵素合成法によって量的に得ることに成功し、その生理機能の詳細について鋭意研究の結果、所定量のプランテオースを有効成分として添加することで抗う蝕作用及び/又はビフィズス菌増殖作用を発揮する食品組成物及び医薬品を提供できることを見いだした。さらに、本発明者らは、プランテオースが耐イースト性を有することも見いだし、酵母菌による発酵食品の製造時にプランテオースを添加しても、製品中に添加したプランテオースがほぼ残存することも明らかにした。そして、プランテオースの添加により、抗う蝕作用及び/又はビフィズス菌増殖作用の発揮が可能な発酵食品を簡便かつ効率的に提供できることを見いだした。   In order to achieve the above object, the present inventors have succeeded in quantitatively obtaining high-purity planteose by an enzymatic synthesis method, and as a result of earnest research on details of its physiological function, a predetermined amount of planteose is effective. It has been found that food compositions and pharmaceuticals that exhibit anti-cariogenic activity and / or bifidobacteria growth activity can be provided by adding them as ingredients. Furthermore, the present inventors have also found that planteose has yeast resistance, and it is clear that even if planteose is added during the production of fermented foods by yeast, the planteose added in the product remains substantially. I made it. And it discovered that the fermented food which can exhibit an anti-cariogenic effect and / or bifidobacteria growth effect can be provided simply and efficiently by addition of planteose.

すなわち、本発明の実施形態は次のとおりである。
(1)プランテオースを食品100g当り1g以上(好ましくは2g以上)含有してなることを特徴とする食品組成物。
(2)発酵食品であることを特徴とする(1)に記載の食品組成物。
(3)発酵菌として酵母菌(特に、パン酵母及び/又は酒精酵母)のみを用いて製造してなる発酵食品であることを特徴とする、(2)に記載の食品組成物。
(4)発酵食品の製造に用いる酵母菌が、Saccharomyces cerevisiaeであることを特徴とする(2)又は(3)に記載の食品組成物。
(5)パン類、清酒類、ビール類、ワイン類から選ばれる少なくともひとつであることを特徴とする(2)〜(4)のいずれか1つに記載の食品組成物。
(6)抗う蝕機能を有することを特徴とする(1)〜(5)のいずれか1つに記載の食品組成物。
(7)ビフィズス菌増殖機能を有することを特徴とする(1)〜(5)のいずれか1つに記載の食品組成物。
(8)プランテオースを添加した後に、発酵菌として酵母菌(特に、パン酵母及び/又は酒精酵母)のみを用いて製造することを特徴とするプランテオースを食品100g当り1g以上(好ましくは2g以上)含有する発酵食品の製造方法。
(9)酵母菌が、Saccharomyces cerevisiaeであることを特徴とする(8)に記載の製造方法。
(10)パン類、清酒類、ビール類、ワイン類から選ばれる少なくともひとつの製造方法であることを特徴とする(8)又は(9)に記載の製造方法。
(11)プランテオースを有効成分として含有することを特徴とする抗う蝕剤。
(12)プランテオースを有効成分として含有することを特徴とするビフィズス菌増殖剤。
(13)経口投与により、1日あたりプランテオースとして0.2〜500mg/kg・体重、好ましくは1〜250mg/kg・体重、更に好ましくは10〜150mg/kg・体重の量で用いられることを特徴とする(11)又は(12)に記載の剤。
That is, the embodiment of the present invention is as follows.
(1) A food composition comprising 1 g or more (preferably 2 g or more) of planteose per 100 g of food.
(2) The food composition according to (1), which is a fermented food.
(3) The food composition according to (2), which is a fermented food produced by using only yeast (particularly baker's yeast and / or alcoholic yeast) as a fermenting bacterium.
(4) The food composition according to (2) or (3), wherein the yeast used for producing the fermented food is Saccharomyces cerevisiae.
(5) The food composition according to any one of (2) to (4), which is at least one selected from breads, sakes, beers, and wines.
(6) The food composition according to any one of (1) to (5), which has an anti-cariogenic function.
(7) The food composition according to any one of (1) to (5), which has a bifidobacteria growth function.
(8) After adding planteose, 1 g or more (preferably 2 g or more, preferably) of planteose per 100 g of food produced by using only yeast (particularly baker's yeast and / or alcoholic yeast) as a fermenter ) Manufacturing method of fermented food to contain.
(9) The production method according to (8), wherein the yeast is Saccharomyces cerevisiae.
(10) The production method according to (8) or (9), wherein the production method is at least one production method selected from breads, sakes, beers, and wines.
(11) An anticaries agent containing planteose as an active ingredient.
(12) A bifidobacteria growth agent comprising planteose as an active ingredient.
(13) It should be used in an amount of 0.2 to 500 mg / kg / body weight, preferably 1 to 250 mg / kg / body weight, more preferably 10 to 150 mg / kg / body weight, as planteose per day by oral administration. The agent according to (11) or (12), which is characterized.

本発明によれば、プランテオースを有効成分として含有する抗う蝕作用及び/又はビフィズス菌増殖作用を有する食品組成物及び医薬品を提供できる。そして、酵母菌を用いて発酵製造した発酵食品にプランテオースを添加しても、当該成分について安定的に有効量(添加量)を残存させることができ、抗う蝕作用及び/又はビフィズス菌増殖作用の発揮が可能な発酵食品を簡便かつ効率的に製造できる。   ADVANTAGE OF THE INVENTION According to this invention, the food composition and pharmaceutical which have an anti-caries action and / or bifidobacteria growth action which contain planteose as an active ingredient can be provided. And even if planteose is added to fermented foods fermented and produced using yeast, an effective amount (added amount) can remain stably for the component, and an anticaries action and / or a bifidobacteria growth action Can be easily and efficiently produced.

各種糖質素材含有液へのStreptococcus mutans MT8148株添加時のpH変化グラフを示す。なお、図中のSucはスクロース、Plaはプランテオース、DFAIIIはジフルクトース・ジアンヒドリドIII、Rafはラフィノース、Xyl−OHはキシリトールを示す。The pH change graph at the time of Streptococcus mutans MT8148 stock addition to various sugar material content liquid is shown. In the figure, Suc represents sucrose, Pla represents planteose, DFAIII represents difructose dianhydride III, Raf represents raffinose, and Xyl-OH represents xylitol. 各種糖質素材含有液へのStreptococcus mutans 6715株添加時のpH変化グラフを示す。なお、図中のSucはスクロース、Plaはプランテオース、DFAIIIはジフルクトース・ジアンヒドリドIII、Rafはラフィノース、Xyl−OHはキシリトールを示す。The pH change graph at the time of addition of Streptococcus mutans 6715 strain | stump | stock to various carbohydrate raw material containing liquid is shown. In the figure, Suc represents sucrose, Pla represents planteose, DFAIII represents difructose dianhydride III, Raf represents raffinose, and Xyl-OH represents xylitol. プランテオース及びラフィノースの耐イースト性確認試験結果(イースト資化処理による残存率)を示すグラフである。It is a graph which shows the yeast resistance confirmation test result (residual rate by yeast utilization process) of a planteose and raffinose. プランテオース(Pla)、スクロース(Suc)、ラフィノース(Raf)の酸性条件における熱安定性試験結果(100℃、30min処理後の残存率)を示すグラフである。It is a graph which shows the thermal-stability test result (100 degreeC, the residual rate after 30 min process) in the acidic conditions of planteose (Pla), sucrose (Suc), and raffinose (Raf).

本発明においては、プランテオースを有効成分として使用する。プランテオース(α−D−galactopyranosyl−(1→6)−β−D−fructofuranosyl α−D−glucopyranoside)は、オオバコ属植物、タバコ、ゴマ、サルビアの種子などから抽出して得た抽出物、その精製物などが使用できるが、スクロースとガラクトースを含む原料から微生物由来の酵素等によって合成して得たものなどの合成品を用いても良い。また、試薬レベルの純品を用いることも差し支えない。これらを食品又は医薬品に有効量添加する。   In the present invention, planteose is used as an active ingredient. Planteose (α-D-galactopyranosyl- (1 → 6) -β-D-fructofuranosyl α-D-glucopyranoside) is an extract obtained by extracting from seeds of the genus Planta, tobacco, sesame, salvia, etc. A purified product or the like can be used, but a synthetic product such as a product obtained by synthesizing a raw material containing sucrose and galactose with a microorganism-derived enzyme or the like may be used. Moreover, it is possible to use a pure product at a reagent level. An effective amount of these is added to food or medicine.

まず、医薬品の場合、その形態としては例えば錠剤、カプセル剤、顆粒剤、細粒剤、散剤、シロップ剤等をあげることができる。これらの各種製剤は、常法にしたがって有効成分であるプランテオースを賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、矯味矯臭剤、溶解補助剤、懸濁剤、コーティング剤などの医薬の製剤技術分野において通常使用しうる既知の補助剤等を用いて製剤化することができる。
また、食品組成物の形態についても限定はなく、プランテオースを添加できる形態であれば固体状(粉末、顆粒状その他)、ゲル状、ペースト状、液状ないしは懸濁状などどのような形態でも良く、さらにはこれらを通常の食品(飲料、発酵食品、乳製品や畜肉加工品等の動物性加工食品、小麦粉製品や豆加工品等の植物性加工食品など)に添加、混合するなど、適宜選択することができる
First, in the case of a pharmaceutical, examples of the form include tablets, capsules, granules, fine granules, powders, syrups and the like. These various preparations are pharmaceutical preparations such as excipients, binders, disintegrants, lubricants, flavoring agents, solubilizers, suspension agents, coating agents, etc. according to conventional methods. It can be formulated using known adjuvants or the like that can be usually used in the technical field.
The form of the food composition is not limited, and any form such as solid (powder, granule, etc.), gel, paste, liquid or suspension can be used as long as it can be added with planteose. In addition, these can be selected as appropriate by adding and mixing them with ordinary foods (beverages, fermented foods, processed animal products such as dairy products and processed meat products, processed vegetable products such as flour products and processed bean products) can do

本発明に係る医薬品は、ヒト又はヒトを除く動物に経口投与を行う。投与量は、例えば1日あたりプランテオースとして0.2〜500mg/kg・体重、好ましくは1〜250mg/kg・体重、更に好ましくは10〜150mg/kg・体重の量で用いるのが有効である。一部のヒトを除く動物などにおいては、ヒトへの投与量等から常用される所定の換算を行って、適宜投与量を設定、変更してもよい。
医薬品へのプランテオース配合量は、上記投与量にしたがって適宜設定すればよい。なお、プランテオースは非常に安全性の高い天然成分であるため、上記投与量を超えて設計してもその安全性に問題はない。
The pharmaceutical agent according to the present invention is orally administered to humans or animals other than humans. The effective dose is, for example, 0.2 to 500 mg / kg · body weight, preferably 1 to 250 mg / kg · body weight, more preferably 10 to 150 mg / kg · body weight as planteose per day. . In animals other than some humans, the dose may be appropriately set and changed by performing a predetermined conversion that is commonly used from the dose to humans.
What is necessary is just to set the planteose compounding quantity to a pharmaceutical suitably according to the said dosage. Since planteose is a very safe natural ingredient, there is no problem in its safety even if it is designed to exceed the above dose.

本発明に係る食品組成物は、プランテオースを食品100g当り1g以上(好ましくは2〜3g以上)含有させる。これにより、天然の植物などには見られない濃度のプランテオースを含有した食品組成物を提供できる。なお、発酵食品の場合には、プランテオースを添加した後に酵母菌によって発酵させて製造するのがプランテオースの特性利用や簡便性という点で好適である。しかし、発酵後にプランテオースを添加する方法も選択できる。酵母菌としては、パン酵母及び/又は酒精酵母を使用するのが好ましく、特に、サッカロマイセス・セレビシエ(Saccharomyces cerevisiae)を使用するのが好ましいが、これらに限定されるものではない。   The food composition according to the present invention contains 1 g or more (preferably 2 to 3 g or more) of planteose per 100 g of food. Thereby, the food composition containing the planteose of the density | concentration which is not seen in a natural plant etc. can be provided. In addition, in the case of fermented food, it is preferable that fermented foods are produced by adding yeast and then fermented with yeast in terms of utilization and simplicity of planteose. However, a method of adding planteose after fermentation can also be selected. As the yeast, baker's yeast and / or alcoholic yeast is preferably used, and in particular, Saccharomyces cerevisiae is preferably used, but is not limited thereto.

本発明に係る発酵食品は、製造に利用する発酵菌(主にアルコール発酵)として酵母菌のみを用いて製造してなることが特徴であり、限定されるものでないが、パン類、清酒類、ビール類、ワイン類が例示される。なお、本発明の「酵母菌のみ」とは、発酵菌としてではなく、原料中の澱粉類の糖化などの目的で麹菌等の酵母菌以外の微生物を利用する発酵食品も含まれるし、製造に利用する微生物が酵母菌だけの発酵食品(つまり、微生物として酵母菌だけを利用して製造する発酵食品)も本発明の範囲に含まれる。また、いわゆる発酵食品でなくとも、酵母菌のアルコールや炭酸ガス産生作用等を利用する食品も除外されない。   The fermented food according to the present invention is characterized by being produced using only yeast as a fermenting bacterium (mainly alcoholic fermentation) used for production, but is not limited to breads, sakes, Examples include beers and wines. In addition, “only yeast” of the present invention includes fermented foods that use microorganisms other than yeasts such as koji molds for the purpose of saccharification of starches in raw materials, not as fermenting bacteria, Fermented foods that use only yeasts as microorganisms (that is, fermented foods that are produced using only yeasts as microorganisms) are also included in the scope of the present invention. Moreover, even if it is not what is called a fermented food, the food which utilizes the alcohol, carbon dioxide production, etc. of a yeast is not excluded.

上記のような酵母菌以外の微生物を利用する発酵食品の例としては、麹菌を利用する清酒類が挙げられる。清酒製造においては、最初にプランテオースを添加して製造することもできるが、もろみ仕込み工程を経た後、発酵工程直前にプランテオースを添加するのがより好ましい。   Examples of fermented foods that use microorganisms other than yeast as described above include sakes that use koji molds. In refined sake production, it can be produced by adding planteose first, but it is more preferable to add planteose immediately after the mashing process and immediately before the fermentation process.

このようにして得られる本発明のプランテオースを有効成分とする食品組成物又は医薬品を給与又は投与(特に経口投与)することにより、ヒト又はヒトを除く動物に対してビフィズス菌増殖促進作用(腸内環境改善作用)及び/又は抗う蝕作用(虫歯予防治療作用)という有益な生理作用をもたらすことができる。
したがって、プランテオースを有効成分として配合することで、有用な虫歯予防治療医薬品・食品、腸内環境改善医薬品・食品等が提供できる。
By feeding or administering (especially oral administration) a food composition or a pharmaceutical comprising the thus obtained planteose of the present invention as an active ingredient, bifidobacteria growth-promoting action (intestinal It is possible to bring about a beneficial physiological action such as an internal environment improving action) and / or an anti-cariogenic action (caries prevention and treatment action).
Therefore, by incorporating planteose as an active ingredient, it is possible to provide useful caries preventive and therapeutic drugs / foods, enteric environment improving drugs / foods, and the like.

以下、本発明の実施例について述べるが、本発明はこれらの実施例のみに限定されるものではなく、本発明の技術的思想内においてこれらの様々な変形が可能である。   Examples of the present invention will be described below, but the present invention is not limited to these examples, and various modifications can be made within the technical idea of the present invention.

(う蝕原性細菌の各種糖質素材資化性確認)
う蝕は、う蝕原性細菌(虫歯菌)が糖質素材を資化して生成する有機酸が歯のエナメル質を脱灰することで起こる。そこで、う蝕原性細菌の各種糖質素材の資化性について確認するため、以下の試験を実施した。
(Confirmation of assimilation of various carbohydrate materials of cariogenic bacteria)
Caries occur when organic acids produced by cariogenic bacteria (caries fungi) assimilating saccharide materials decalcify tooth enamel. Therefore, the following tests were conducted to confirm the assimilation of various carbohydrate materials of cariogenic bacteria.

う蝕原性細菌としては、独立行政法人 理化学研究所 バイオリソースセンターより入手したStreptococcus mutans MT8148株(JCM5175)及びStreptococcus mutans 6715株(JCM5176)を使用した。また、糖質素材としてはスクロース、プランテオース、ジフルクトース・ジアンヒドリドIII、ラフィノース、キシリトール、パラチノースを使用した。なお、ジフルクトース・ジアンヒドリドIII及びラフィノースは日本甜菜製糖株式会社製品を用い、プランテオースは酵素縮合反応により調製した凍結乾燥品(純度95%)を使用し、その他は試薬グレードの精製品を使用した。   As the cariogenic bacteria, Streptococcus mutans MT8148 strain (JCM5175) and Streptococcus mutans 6715 strain (JCM5176) obtained from RIKEN BioResource Center were used. In addition, sucrose, planteose, difructose dianhydride III, raffinose, xylitol and palatinose were used as carbohydrate materials. In addition, difructose dianhydride III and raffinose use products from Nippon Sugar Sugar Co., Ltd., planteose uses freeze-dried products (purity 95%) prepared by enzyme condensation reaction, and others use reagent grade purified products. did.

まず、上記のう蝕原性細菌をそれぞれNUTRIENT液体培地(関東化学株式会社製品)300μLにて懸濁した。そして、この菌体懸濁液200μLをBLAIN HEART INFUSION液体培地(BHI液体培地,関東化学株式会社製品)5mLに加え、37℃で24時間静置培養した。同じ操作をもう一度行って継代培養し、培養液をBHI液体培地100mLに加えて37℃で24時間攪拌しながら本培養を行った。   First, the cariogenic bacteria were suspended in 300 μL of NUTRIENT liquid medium (Kanto Chemical Co., Ltd.). And 200 microliters of this microbial cell suspension was added to 5 mL of BLAIN HEART INFUSION liquid culture medium (BHI liquid culture medium, Kanto Chemical Co., Ltd. product), and statically cultured at 37 degreeC for 24 hours. The same operation was repeated once for subculture, and the culture was added to 100 mL of BHI liquid medium and main culture was performed with stirring at 37 ° C. for 24 hours.

上記本培養液を容器に移し、7000rpmで10分間遠心分離を行い、上清を分離除去したあと5mM濃度のPBS(リン酸生理食塩水)で2回洗浄処理した。得られた菌体をPBSにてOD550が10〜15となるように調製し、試験に使用する菌液とした。 The main culture solution was transferred to a container, centrifuged at 7000 rpm for 10 minutes, the supernatant was separated and removed, and then washed twice with 5 mM PBS (phosphate physiological saline). The obtained bacterial cells were prepared with PBS so that the OD 550 was 10 to 15, and used as a bacterial solution used for the test.

上記の7種糖質素材をそれぞれ5%溶液(10mL)となるように調製し、これらを37℃でインキュベートし、菌液2mLを加えてから最初5分間は1分おきに、その後は5分おきにガラス電極のpHメーターでpHの経時変化を測定した。なお、純水に菌液を添加したものをコントロールとした。   Prepare the above 7 kinds of carbohydrate materials so that each becomes a 5% solution (10 mL), incubate them at 37 ° C., add 2 mL of bacterial solution every 5 minutes for the first 5 minutes, then 5 minutes Every other time, the pH change with time was measured with a pH meter of a glass electrode. In addition, what added the bacterial solution to the pure water was set as control.

測定結果を図1及び図2に示した。Streptococcus mutans MT8148株及びStreptococcus mutans 6715株のいずれについてもプランテオース添加でのpH変化はほとんどなく、いずれの菌株もプランテオースを資化せず有機酸を産生しないことが示された。   The measurement results are shown in FIGS. For both Streptococcus mutans MT8148 and Streptococcus mutans 6715 strains, there was almost no pH change upon addition of planteose, indicating that none of the strains assimilated planteose and produced organic acids.

(ビフィズス菌の各種糖質素材資化性確認)
ビフィズス菌のグルコース、ラフィノース、プランテオース資化性について確認するため、以下の試験を実施した。
(Confirmation of assimilation of various carbohydrate materials of bifidobacteria)
The following tests were conducted to confirm bifidobacterial glucose, raffinose, and planteose utilization.

ビフィズス菌としては、独立行政法人 理化学研究所 バイオリソースセンターより入手したBifidobacterium adolescentis(JCM1275)、Bifidobacterium longum(JCM1277)、Bifidobacterium breve(JCM1192)、Bifidobacterium bifidum(JCM1255)、Bifidobacterium pseudocatenulatum(JCM1200)、Bifidobacterium catenulatum(JCM1194)を使用した。 The bifidobacteria were obtained from RIKEN Bioresource Center Bifidobacterium adolescentis (JCM1275 T), Bifidobacterium longum (JCM1277 T), Bifidobacterium breve (JCM1192 T), Bifidobacterium bifidum (JCM1255 T), Bifidobacterium pseudocatenulatum (JCM1200 T) Bifidobacterium catenatum (JCM1194 T ) was used.

まず、糖分解試験用GAM半流動培地(日水製薬株式会社製品)に0.2%ブロモクレゾールパープルを20mL/Lの割合で添加し、これに上記糖質素材を各0.5%添加した。これを試験管に2.5mLずつ分注後、高圧滅菌(115℃15分)したものを試験培地とした。なお、グルコースは試薬グレードの精製品を、ラフィノースは日本甜菜製糖株式会社製品を用い、プランテオースは酵素縮合反応により調製した凍結乾燥末品(純度95%)を使用した。   First, 0.2% bromocresol purple was added at a rate of 20 mL / L to a GAM semi-fluid culture medium (product of Nissui Pharmaceutical Co., Ltd.) for saccharide degradation test, and 0.5% of each of the above saccharide materials was added thereto. . A 2.5 mL portion of this was dispensed into a test tube and then autoclaved (115 ° C. for 15 minutes) to obtain a test medium. Glucose was a reagent-grade purified product, raffinose was a product from Nippon Sugar Sugar Co., Ltd., and planteose was a freeze-dried powder (purity 95%) prepared by an enzyme condensation reaction.

各ビフィズス菌はBL培地(日水製薬株式会社製品)で嫌気培養し、発育したコロニーをシステイン・HClチオグリコール液に懸濁して試験培地の底部に0.02mL/2.5mLの割合で摂取した。これを37℃で3日間培養し、pHの変化を調べた。   Each bifidobacteria was anaerobically cultured in BL medium (product of Nissui Pharmaceutical Co., Ltd.), and the grown colonies were suspended in cysteine / HCl thioglycol solution and ingested at a rate of 0.02 mL / 2.5 mL at the bottom of the test medium. . This was cultured at 37 ° C. for 3 days, and the change in pH was examined.

各ビフィズス菌の培地の色調変化を表1に示した。ラフィノースは一部菌株で資化できないものが見られたが、プランテオースはグルコースと同様にほぼ全ての菌株で資化性が見られた。よって、プランテオースは、ビフィズス菌増殖作用を有することが示された。   Table 1 shows changes in the color tone of each bifidobacteria medium. Some raffinose was not assimilated by some strains, but planteose was assimilated by almost all strains like glucose. Therefore, it was shown that planteose has a bifidobacteria growth action.

Figure 0005805464
Figure 0005805464

(プランテオースの耐イースト性確認試験)
プランテオース等のイーストによる資化の有無(耐イースト性)を確認する目的で、以下の試験を実施した。
(Planteose yeast resistance confirmation test)
The following tests were conducted for the purpose of confirming the presence or absence of assimilation by yeast such as planteose (yeast resistance).

糖質素材としては、プランテオース及びラフィノース(いずれも日本甜菜製糖株式会社製品)を使用した。イーストは、パン酵母(スーパーカメリアドライイースト、日清フーズ株式会社製品)を使用した。
まず、Bx40に調整したプランテオース又はラフィノースの糖溶液各1.3gに、イーストを0.13g加えて60℃で反応させた。そして、その反応液を経時的にサンプリングし、HPLC(パルスドアンペロメトリー法)にて糖液を分析した。
As the carbohydrate material, planteose and raffinose (both manufactured by Nippon Sugar Sugar Co., Ltd.) were used. For yeast, baker's yeast (Super Camellia Dry Yeast, Nisshin Foods Co., Ltd. product) was used.
First, 0.13 g of yeast was added to each 1.3 g of sugar solution of planteose or raffinose adjusted to Bx40, and reacted at 60 ° C. Then, the reaction solution was sampled over time, and the sugar solution was analyzed by HPLC (pulsed amperometry method).

結果を図3に示した。ラフィノースは反応開始後徐々に加水分解され、メリビオースとフルクトースにまで分解された。そして、反応開始後15分にはラフィノースは残存率0%となった。これに対し、プランテオースは全く加水分解されず、耐イースト性を有することが明らかとなった。   The results are shown in FIG. Raffinose was gradually hydrolyzed after the start of the reaction and decomposed to melibiose and fructose. And 15 minutes after the start of the reaction, raffinose remained at 0%. On the other hand, it was revealed that planteose was not hydrolyzed at all and had yeast resistance.

(プランテオースの酸性条件における熱安定性確認試験)
プランテオースを含む各種糖質素材の酸性条件における熱安定性を確認するため、以下の試験を実施した。
(Thermal stability confirmation test of planteose under acidic conditions)
The following tests were conducted to confirm the thermal stability of various carbohydrate materials including planteose under acidic conditions.

糖質素材としてはスクロース、プランテオース、ラフィノースを使用した。なお、ラフィノースは日本甜菜製糖株式会社製品を用い、その他は試薬グレードの精製品を使用した。
まず、各糖を1%含む水溶液10mLを撹拌しながら1N塩酸を加え、ガラス電極のpHメーターでpHを測定しながらpH1、2、3、4、5に調整し、各pHで700μLサンプリングした。そして、このサンプルを100℃で30分間作用させた後、直ちに氷冷し、HPLC(KS−801カラム法)にて各糖の残存率を求めた。
Sucrose, planteose, and raffinose were used as carbohydrate materials. In addition, raffinose used the product of Nippon Beet Sugar Manufacturing Co., Ltd., and used the reagent grade refined product for others.
First, 1N hydrochloric acid was added while stirring 10 mL of an aqueous solution containing 1% of each saccharide, and the pH was adjusted to 1, 2, 3, 4, and 5 while measuring the pH with a pH meter of a glass electrode, and 700 μL was sampled at each pH. And after making this sample act at 100 degreeC for 30 minute (s), it immediately ice-cooled and calculated | required the residual rate of each saccharide | sugar by HPLC (KS-801 column method).

結果を図4に示した。酸性条件における熱安定性(糖残存率)は、プランテオース、ラフィノース及びスクロースの順であった。プランテオースは、pH3〜5付近での安定性はラフィノースやスクロースより高いが、pH1〜2での安定性はラフィノースやスクロースとあまり変わらなかった。   The results are shown in FIG. The thermal stability (sugar residual ratio) under acidic conditions was in the order of planteose, raffinose and sucrose. Planteose has higher stability around pH 3-5 than raffinose and sucrose, but stability at pH 1-2 was not much different from raffinose and sucrose.

(プランテオース含有製剤及び食品組成物の製造)
製剤としては、プランテオース80重量部、コーンスターチ20重量部を混合し、得られた混合物をヒドロキシプロピルメチルセルロースの5%水溶液で流動層造粒し、プランテオースを主成分とする細粒剤を得た。
(Manufacture of planteose-containing preparations and food compositions)
As a preparation, 80 parts by weight of planteose and 20 parts by weight of corn starch were mixed, and the obtained mixture was fluidized-bed granulated with a 5% aqueous solution of hydroxypropylmethylcellulose to obtain a fine granule mainly composed of planteose. .

また、食品組成物としては、強力粉200gに塩、砂糖、イーストフード等を適量添加したものにプランテオースを対粉3%添加し、これに136g加水して混捏しパン生地を作製した後、市販パン酵母(スーパーカメリアドライイースト,日清フーズ株式会社製品)を用いて定法により発酵させ、プランテオースを約3%含有する食パン(発酵食品)を得た。   In addition, as a food composition, 3% planteose is added to 200 g of strong flour and a suitable amount of salt, sugar, yeast food, etc., and 136 g is added to the mixture to knead to prepare bread dough. Fermentation was performed using yeast (Super Camellia Dry Yeast, Nisshin Foods Co., Ltd.) by a conventional method to obtain bread (fermented food) containing about 3% of planteose.

本発明を要約すれば、以下の通りである。   The present invention is summarized as follows.

本発明は、低カロリーな機能性糖質素材を有効成分として含有する、ヒト及びヒトを除く動物に有用な生理作用を発揮する食品組成物及びその製造方法、有用な医薬品等を提供することを目的とする。   The present invention provides a food composition that contains a low-calorie functional carbohydrate material as an active ingredient and exhibits a physiological effect useful for humans and animals other than humans, a method for producing the same, a useful pharmaceutical product, and the like. Objective.

そして、プランテオースを1%以上含有する食品組成物を製造することで、抗う蝕作用及び/又はビフィズス菌増殖作用が期待できる食品組成物を簡便かつ効率的に提供し、また、プランテオースを有効成分として含有させることで、抗う蝕作用及び/又はビフィズス菌増殖作用を発揮する医薬品を提供する。   And, by producing a food composition containing 1% or more of planteose, a food composition that can be expected to have an anti-cariogenic effect and / or a bifidobacteria growth effect can be provided simply and efficiently, and planteose is effective. Provided as a component is a pharmaceutical product that exhibits an anticaries action and / or a bifidobacteria growth action.

Claims (11)

プランテオースを食品100g当り1g以上含有してなることを特徴とする発酵食品1. A fermented food comprising 1 g or more of planteose per 100 g of food . 発酵菌として酵母菌のみを用いて製造してなる発酵食品であることを特徴とする、請求項1に記載の発酵食品The fermented food according to claim 1, wherein the fermented food is produced by using only yeast as a fermenting bacterium. 発酵食品の製造に用いる酵母菌が、Saccharomyces cerevisiaeであることを特徴とする請求項1又は2に記載の発酵食品Yeast used for the production of fermented foods, fermented food according to claim 1 or 2, characterized in that it is Saccharomyces cerevisiae. パン類、清酒類、ビール類、ワイン類から選ばれる少なくともひとつであることを特徴とする請求項1〜3のいずれか1項に記載の発酵食品The fermented food according to any one of claims 1 to 3, wherein the fermented food is at least one selected from breads, sakes, beers, and wines. 抗う蝕機能を有することを特徴とする請求項1〜4のいずれか1項に記載の発酵食品The fermented food according to any one of claims 1 to 4, which has an anti-cariogenic function. ビフィズス菌増殖機能を有することを特徴とする請求項1〜4のいずれか1項に記載の発酵食品It has a bifidobacteria growth function, The fermented food of any one of Claims 1-4 characterized by the above-mentioned. プランテオースを添加した後に、発酵菌として酵母菌のみを用いて製造することを特徴とするプランテオースを食品100g当り1g以上含有する発酵食品の製造方法。   A method for producing a fermented food comprising 1 g or more of planteose per 100 g of food, wherein the planteose is added and then only yeast is used as a fermentative bacterium. 酵母菌が、Saccharomyces cerevisiaeであることを特徴とする請求項7に記載の製造方法。   The method according to claim 7, wherein the yeast is Saccharomyces cerevisiae. パン類、清酒類、ビール類、ワイン類から選ばれる少なくともひとつの製造方法であることを特徴とする請求項7又は8に記載の製造方法。   The production method according to claim 7 or 8, wherein the production method is at least one production method selected from breads, sakes, beers, and wines. プランテオースを有効成分として含有することを特徴とする抗う蝕剤。   An anti-cariogenic agent characterized by containing planteose as an active ingredient. 経口投与により、1日あたりプランテオースとして0.2〜500mg/kg・体重の量で用いられることを特徴とする請求項10に記載の剤。   The agent according to claim 10, wherein the agent is used in an amount of 0.2 to 500 mg / kg · body weight as planteose per day by oral administration.
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