JP5797432B2

JP5797432B2 - Gray hair prevention agent

Info

Publication number: JP5797432B2
Application number: JP2011065440A
Authority: JP
Inventors: 千晶並木; 川瀬　一朗; 一朗川瀬
Original assignee: SSP Co Ltd
Current assignee: SSP Co Ltd
Priority date: 2011-03-24
Filing date: 2011-03-24
Publication date: 2015-10-21
Anticipated expiration: 2031-03-24
Also published as: JP2012201606A

Description

本発明は、色素細胞におけるメラニン生成を促進して白髪の発生を防止改善することができる白髪防止剤に関する。 The present invention relates to a gray hair preventing agent that can promote the generation of melanin in pigment cells to prevent and improve the generation of gray hair.

白髪の増加は、男女を問わず、美容上大きな問題であるが、これに対する対応手段としては染毛が主である。しかし、近年、色素細胞におけるメラニン生成を促進させる成分が見出され、白髪防止剤として有用であることが報告されている。そのような白髪防止剤としては、ｃＡＭＰ増加剤とプロテインキナーゼＣ阻害剤とを配合した白髪防止黒化剤（特許文献１）、スギナ、スイカズラ、ヒキオコシ、ブドウ、ヘチマ、セイヨウニワトコ、ブッチャーブハーム、タイソウ、キンギンカ等の植物抽出物を含有する毛髪防止剤（特許文献２、３、４）、シメジ科、ハリタケ科等の担子菌の培養液を配合した頭髪料（特許文献５）等が報告されている。 The increase in gray hair is a major cosmetic problem regardless of gender, but the main means of dealing with this is hair dyeing. However, in recent years, a component that promotes melanin production in pigment cells has been found and reported to be useful as a gray hair preventing agent. As such a gray hair preventive agent, a black hair preventive blackening agent (Patent Document 1) containing a cAMP increasing agent and a protein kinase C inhibitor, Japanese horsetail, honeysuckle, baboon, grape, loofah, elderberry, butcher bucharm, An anti-hair agent containing plant extracts such as Taisou and goldfish (Patent Documents 2, 3, and 4), a hair material (Patent Document 5) and the like containing a culture solution of basidiomycetes such as shimeji mushrooms and agaricaceae are reported. ing.

特開平０４−１２４１２２号公報Japanese Patent Laid-Open No. 04-124122 特開平１１−１２４３１８号公報JP-A-11-124318 特開２００１−２８８０９８号公報JP 2001-288098 A 特開２０１０−２８０７２０号公報JP 2010-280720 A 特開平０７−３１６０２６号公報Japanese Patent Laid-Open No. 07-316026

しかしながら、これらの白髪防止剤は、未だ十分満足すべき効果を有さないとともに安全性や使用性の点で解決すべき点がある。
従って、本発明の課題は、メラノサイトに作用し、メラノサイトにおけるメラニン生成を強く促進し、かつ長期間使用可能な白髪防止剤を提供することにある。 However, these gray hair preventing agents still do not have a sufficiently satisfactory effect and have problems to be solved in terms of safety and usability.
Accordingly, an object of the present invention is to provide a gray hair inhibitor that acts on melanocytes, strongly promotes melanin production in melanocytes, and can be used for a long period of time.

そこで本発明者は、従来から医薬品として使用され、安全性が確認されている成分を対象としてメラノーマにおけるメラニン生成に対する作用を検討してきた結果、アラントイン等の特定の成分が優れたメラニン生成促進作用を有し、白髪防止剤として有用であることを見出し、本発明を完成した。 Therefore, the present inventor has studied the action on melanin production in melanoma for ingredients that have been used as pharmaceuticals and have been confirmed to be safe, and as a result, specific ingredients such as allantoin have an excellent melanin production promoting action. And the present invention was completed.

すなわち、本発明は、アラントイン又はその塩、エテンザミド、フェニレフリン又はその塩、グアイフェネシン、スルファメトキサゾール、パルミチン酸レチノール、ビサコジル、ネオスチグミン又はその塩及びレゾルシンから選ばれる化合物を有効成分とする白髪防止剤を提供するものである。
また、本発明は、アラントイン又はその塩、エテンザミド、フェニレフリン又はその塩、グアイフェネシン、スルファメトキサゾール、パルミチン酸レチノール、ビサコジル、ネオスチグミン又はその塩及びレゾルシンから選ばれる化合物を有効成分とするメラニン生成促進剤を提供するものである。 That is, the present invention relates to a gray hair inhibitor comprising as an active ingredient a compound selected from allantoin or a salt thereof, ethenamide, phenylephrine or a salt thereof, guaifenesin, sulfamethoxazole, retinol palmitate, bisacodyl, neostigmine or a salt thereof and resorcin. Is to provide.
In addition, the present invention promotes melanin production comprising as an active ingredient a compound selected from allantoin or a salt thereof, ethenamide, phenylephrine or a salt thereof, guaifenesin, sulfamethoxazole, retinol palmitate, bisacodyl, neostigmine or a salt thereof and resorcin. An agent is provided.

本発明の白髪防止剤は、色素細胞（メラノサイト）におけるメラニン生成量を顕著に増加させる作用を有し、その結果白髪の発生を防止する。従って、本発明の白髪防止剤を用いれば、白髪の発生が防止され、白髪が減少する。 The gray hair preventing agent of the present invention has an effect of remarkably increasing the amount of melanin produced in pigment cells (melanocytes), and as a result, prevents the generation of gray hair. Therefore, if the anti-whitening agent of the present invention is used, the generation of white hair is prevented and the white hair is reduced.

本発明の白髪防止剤及びメラニン生成促進剤の有効成分は、アラントイン又はその塩、エテンザミド、フェニレフリン又はその塩、グアイフェネシン、スルファメトキサゾール、パルミチン酸レチノール、ビサコジル、ネオスチグミン又はその塩及びレゾルシンから選ばれる化合物である。
このうち、アラントイン又はその塩としては、アラントイン、アルジオキサ（ジヒドロキシアルミニウムアラントイネート）等が挙げられ、このうちアルジオキサが好ましい。アラントイン又はその塩は、傷修復作用、抗潰瘍作用等を有することが知られているが、メラニン生成に対する作用は知られていない。
エテンザミド（２−エトキシベンズアミド）は、サリチル酸系の解熱鎮痛消炎剤として知られているが、メラニン生成に対する作用は知られていない。 The active ingredient of the gray hair preventing agent and melanin production accelerator of the present invention is selected from allantoin or a salt thereof, ethenzamide, phenylephrine or a salt thereof, guaifenesin, sulfamethoxazole, retinol palmitate, bisacodyl, neostigmine or a salt thereof and resorcin It is a compound.
Among these, examples of allantoin or a salt thereof include allantoin and aldioxa (dihydroxyaluminum allantoate), and among these, aldioxa is preferable. Allantoin or a salt thereof is known to have a wound repair action, an anti-ulcer action and the like, but is not known to have an action on melanin production.
Ethenzamid (2-ethoxybenzamide) is known as a salicylic acid-based antipyretic analgesic / anti-inflammatory agent, but its action on melanin production is not known.

フェニレフリン又はその塩としては、フェニレフリン、塩酸フェニレフリン、硝酸フェニレフリン、硫酸フェニレフリン等が挙げられるが、塩酸フェニレフリンが特に好ましい。フェニレフリン又はその塩は、α₁アドレナリン作動薬の一種であり、鼻粘膜の血管を収縮させることにより鼻炎治療薬として用いられる。しかし、フェニレフリン又はその塩のメラニン生成に対する作用は知られていない。
グアイフェネシン（グアヤコールグリセリルエーテル）は、視床下部の抑制及び気管支の弛緩による鎮咳作用と気道分泌液の増加による去痰作用を有し、鎮咳去痰剤として用いられている。しかし、メラニン生成に対する作用は知られていない。
スルファメトキサゾールは、スルホンアミド系の抗菌剤として広く知られているが、メラニン生成に対する作用は知られていない。 Examples of phenylephrine or a salt thereof include phenylephrine, phenylephrine hydrochloride, phenylephrine nitrate, phenylephrine sulfate, and the like, but phenylephrine hydrochloride is particularly preferable. Phenylephrine or a salt thereof is a kind of α ₁ adrenergic drug, and is used as a therapeutic drug for rhinitis by contracting blood vessels of the nasal mucosa. However, the effect of phenylephrine or its salt on melanogenesis is not known.
Guaifenesin (guaiacol glyceryl ether) has an antitussive effect by suppressing the hypothalamus and relaxing the bronchi and an expectorant effect by increasing the respiratory tract secretion, and is used as an antitussive expectorant. However, the effect on melanin production is not known.
Sulfamethoxazole is widely known as a sulfonamide antibacterial agent, but its action on melanogenesis is not known.

パルミチン酸レチノールは、パルミチン酸とレチノール（ビタミンＡ）のエステルであり、皮膚保護作用、網膜細胞保護作用等が知られているが、メラニン生成に対する作用は知られていない。
ビサコジル（４，４’−（ピリジン−２−イルメチレン）ビス（フェニルアセテート）は、大腸を刺激して排便を促進する便秘薬として広く知られているが、メラニン生成に対する作用は知られていない。
ネオスチグミン又はその塩としては、ネオスチグミン、ネオスチグミンメチル硫酸塩等が挙げられる。ネオスチグミン又はその塩は、コリンエステラーゼを阻害し、眼の調節機能を改善する目的で目薬に広く用いられている。しかし、メラニン生成に対する作用は知られていない。
レゾルシン（レゾルシノール）は防腐剤、殺菌剤として用いられているが、メラニン生成に対する作用は知られていない。 Retinol palmitate is an ester of palmitic acid and retinol (vitamin A), and is known to have a skin protecting action, a retinal cell protecting action, etc., but no action on melanin production.
Bisacodyl (4,4 ′-(pyridin-2-ylmethylene) bis (phenylacetate) is widely known as a constipation drug that stimulates the large intestine and promotes defecation, but its action on melanin production is not known.
Examples of neostigmine or a salt thereof include neostigmine and neostigmine methyl sulfate. Neostigmine or a salt thereof is widely used in eye drops for the purpose of inhibiting cholinesterase and improving the regulatory function of the eye. However, the effect on melanin production is not known.
Resorcin (resorcinol) is used as an antiseptic and fungicide, but its action on melanin production is not known.

これらの成分は、いずれも医薬品又は医薬品原料として広く用いられており、市販品を用いることができる。 All of these components are widely used as pharmaceuticals or pharmaceutical raw materials, and commercially available products can be used.

これらの成分は、後記実施例に示すように、メラノサイトにおけるメラニン生成を促進し、メラノサイト中のメラニン量を顕著に増加させる作用を有することから、メラニン生成促進剤及び白髪防止剤として有用である。 These components are useful as a melanin production promoter and a gray hair prevention agent because they have the effect of accelerating the production of melanin in melanocytes and significantly increasing the amount of melanin in the melanocytes, as shown in Examples below.

本発明の白髪防止剤及びメラニン生成促進剤中の前記有効成分の含有量は、特に制限されないが、０．００１〜９０質量％が好ましく、０．０１〜２０質量％がより好ましい。 Although content in particular of the said active ingredient in the gray hair inhibitor and melanin production promoter of this invention is not restrict | limited, 0.001-90 mass% is preferable and 0.01-20 mass% is more preferable.

本発明の白髪防止剤及びメラニン生成促進剤は、種々の製剤とすることができ、例えば経口投与用製剤、注射用製剤、皮膚外用剤等とすることができるが、皮膚外用剤の形態とするのが好ましい。皮膚外用剤の形態としては、液剤、ローション、乳液、クリーム、軟膏、ゲル軟膏、坐剤、エアゾール、チンキ、貼付剤、テープ等の形態が挙げられる。 The gray hair inhibitor and melanin production promoter of the present invention can be various preparations, for example, oral preparations, injection preparations, skin external preparations, etc. Is preferred. Examples of the external preparation for skin include liquids, lotions, emulsions, creams, ointments, gel ointments, suppositories, aerosols, tinctures, patches, tapes and the like.

本発明の白髪防止剤又はメラニン生成促進剤は、医薬品、医薬部外品及び化粧品のいずれでもよい。 The gray hair inhibitor or the melanin production promoter of the present invention may be any of pharmaceuticals, quasi drugs and cosmetics.

本発明の白髪防止剤又はメラニン生成促進剤を前記の投与形態にするには、各投与形態に応じた各種添加剤を配合することができる。経口投与用製剤の場合には、賦形剤、結合剤、崩壊剤、安定剤、安定化剤、界面活性剤、可塑剤、滑沢剤、滑沢化剤、可溶剤、可溶化剤、還元剤、緩衝剤、甘味剤、基剤、稀釈剤、吸着剤、矯味剤、懸濁剤、懸濁化剤、抗酸化剤、光沢化剤、コーティング剤、剤皮、湿潤剤、湿潤調整剤、充填剤、消泡剤、清涼化剤、接着剤、咀嚼剤、着色剤、着香剤、香料、糖衣剤、等張化剤、軟化剤、乳化剤、粘稠剤、粘稠化剤、発泡剤、ｐＨ調整剤、分散剤、崩壊補助剤、崩壊延長剤、芳香剤、防湿剤、放出制御膜、防腐剤、保存剤、溶解剤、溶解補助剤、溶剤、流動化剤、増量剤、保湿剤、付湿剤等を配合することができる。一方、皮膚外用剤の場合には、溶剤、油性成分、乳化剤、安定化剤、安定剤、界面活性剤、可塑剤、可溶剤、可溶化剤、還元剤、緩衝剤、基剤、稀釈剤、吸着剤、結合剤、懸濁剤、懸濁化剤、抗酸化剤、支持体、湿潤剤、湿潤調整剤、充填剤、消泡剤、清涼化剤、接着剤、着色剤、着香剤、香料、等張化剤、軟化剤、粘着剤、粘着増強剤、粘稠剤、粘稠化剤、発泡剤、ｐＨ調整剤、皮膚保護剤、賦形剤、分散剤、噴射剤、崩壊剤、崩壊補助剤、崩壊延長剤、芳香剤、防湿剤、放出制御膜、防腐剤、保存剤、無痛化剤、溶解剤、溶解補助剤、流動化剤、帯電防止剤、増量剤、保湿剤、付湿剤等を配合することができる。このような添加剤の例は、医薬品添加物事典、食添、医薬部外品原料規格、日本汎用化粧品原料集、化粧品種別許可基準、化粧品原料基準外成分規格、ＣＴＦＡ等に記載されている。 In order to make the gray hair inhibitor or melanin production promoter of the present invention into the above-mentioned dosage form, various additives according to each dosage form can be blended. For preparations for oral administration, excipients, binders, disintegrants, stabilizers, stabilizers, surfactants, plasticizers, lubricants, lubricants, solubilizers, solubilizers, reductions Agent, buffer, sweetener, base, diluent, adsorbent, taste-masking agent, suspending agent, suspending agent, antioxidant, brightener, coating agent, skin, wetting agent, wetting regulator, Fillers, antifoaming agents, cooling agents, adhesives, chewing agents, coloring agents, flavoring agents, fragrances, sugar coatings, tonicity agents, softening agents, emulsifying agents, thickening agents, thickening agents, foaming agents , PH adjuster, dispersant, disintegration aid, disintegration extender, fragrance, dampproofing agent, controlled release film, preservative, preservative, solubilizer, solubilizer, solvent, fluidizer, extender, moisturizer A moistening agent or the like can be blended. On the other hand, in the case of an external preparation for skin, a solvent, an oil component, an emulsifier, a stabilizer, a stabilizer, a surfactant, a plasticizer, a solubilizer, a solubilizer, a reducing agent, a buffer, a base, a diluent, Adsorbent, binder, suspending agent, suspending agent, antioxidant, support, wetting agent, wetting regulator, filler, antifoaming agent, cooling agent, adhesive, coloring agent, flavoring agent, Perfume, isotonic agent, softener, adhesive, adhesion enhancer, thickener, thickener, foaming agent, pH adjuster, skin protectant, excipient, dispersant, propellant, disintegrant, Disintegration aid, disintegration extender, fragrance, moisture barrier, controlled release film, antiseptic, preservative, soothing agent, solubilizer, solubilizer, fluidizer, antistatic agent, bulking agent, moisturizer A moistening agent or the like can be blended. Examples of such additives are described in the Pharmaceutical Additives Dictionary, food additives, quasi-drug raw material standards, Japanese general-purpose cosmetic raw material collection, permission standards for cosmetic varieties, cosmetic raw material non-standard ingredient standards, CTFA, and the like.

本発明の白髪防止剤及びメラニン生成促進剤は、各有効成分量として成人１日あたり０．０１ｍｇ〜５ｇ投与することができる。 The gray hair inhibitor and the melanin production promoter of the present invention can be administered in an amount of 0.01 mg to 5 g per adult day as the amount of each active ingredient.

以下実施例を挙げて本発明を詳細に説明するが、本発明はこれら実施例に限定されるものではない。 EXAMPLES Hereinafter, the present invention will be described in detail with reference to examples, but the present invention is not limited to these examples.

実施例１
（１）細胞調製：試験はＢ１６Ｆ０メラノーマ（Ｂ１６Ｆ０）細胞の組織培養系を用いた。Ｂ１６Ｆ０メラノーマ細胞はＡＴＣＣ（ＡｍｅｒｉｃａｎＴｙｐｅＣｕｌｔｕｒｅＣｏｌｌｅｃｔｉｏｎ：カタログＮｏ．ＣＲＬ−６３２２）より購入し、１０％牛胎児血清及び抗生物質を含むダルベッコ改変イーグル培地（Ｄｕｌｂｅｃｃｏ’ｓＭｏｄｉｆｉｅｄＥａｇｌｅＭｅｄｉｕｍ：ＤＭＥＭ：シグマ社製）で維持・継代しているものを用いた。 Example 1
(1) Cell preparation: The test used a tissue culture system of B16F0 melanoma (B16F0) cells. B16F0 melanoma cells were purchased from ATCC (American Type Culture Collection: Catalog No. CRL-6322), Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM: Sigma) containing 10% fetal bovine serum and antibiotics. The one maintained and passaged in was used.

（２）被験物質：アルジオキサ、エテンザミド、塩酸フェニレフリン、グアイフェネシン、スルファメトキサゾール、パルミチン酸レチノール、ビサコジル、メチル硫酸ネオスチグミン及びレゾルシンはそれぞれ１０％ＤＭＥＭで溶解し、メンブランフィルターで除菌後、所定濃度に調製した。メラニン生成阻害の陽性対照物質としてはホルボール１２−ミリステート１３−アセテート（ｐｈｏｒｂｏｌ１２−ｍｙｒｉｓｔａｔｅ１３−ａｃｅｔａｔｅ：ＰＭＡ）あるいはコウジ酸（ｋｏｊｉｃａｃｉｄ：Ｋ．Ａ．）を用いた。 (2) Test substances: aldioxa, etenzamide, phenylephrine hydrochloride, guaifenesin, sulfamethoxazole, retinol palmitate, bisacodyl, neostigmine methylsulfate, and resorcinol were each dissolved in 10% DMEM, sterilized with a membrane filter, and given concentration Prepared. As a positive control substance for inhibiting melanin production, phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA) or kojic acid (KA) was used.

（３）試験方法：Ｂ１６Ｆ０メラノーマ細胞は、１０％ＤＭＥＭ培地で４×１０⁴／ｍＬに調製し、その２ｍＬを６穴プレートの各穴に添加し、５％二酸化炭素濃度、３７℃で一晩培養した。翌日、所定濃度に調製した被験物質あるいはＰＭＡをＢ１６Ｆ０メラノーマ細胞にそれぞれ２ｍＬ添加し、さらに５％二酸化炭素濃度、３７℃で７２時間培養した。培養終了後、細胞内のメラニン含有量の測定はカゲヤマらの方法（ＴｈｅＪｏｕｒｎａｌｏｆＢｉｏｌｏｇｉｃａｌＣｈｅｍｉｓｔｒｙ，２７９（２６），２７７７４−２７７８０（２００４））を一部改変して行った。Ｂ１６Ｆ０細胞は、リン酸緩衝生理食塩液で洗浄後、１Ｎの水酸化ナトリウムを添加し、室温で２０〜６０分間放置した。続いてマイクロプレート・ミキサーで攪拌し、細胞を完全に溶解させ、細胞溶解液とした。細胞溶解液の１２０μＬを２００μＬのマイクロチューブに移し、サーマル・サイクラーで８０℃、１時間処理後、それぞれの８０μＬを９６穴プレートの各穴に移し、マイクロ・プレートリーダーで４０５ｎｍの吸収波長を指標にして細胞内メラニン量を測定した。なお、細胞内メラニン量は予め作成しておいた標準メラニンの標準曲線より算出した。また、上記細胞溶解液をリン酸緩衝生理食塩液で１０倍希釈したＢ１６Ｆ０細胞溶解液中の総タンパク質量はビーシーエープロテインアッセイキット（ＢＣＡＰｒｏｔｅｉｎＡｓｓａｙＫｉｔ：ＰＩＥＲＣＥ社製）を用いて測定した。Ｂ１６Ｆ０細胞のメラニン含量は、上記で測定された処理液中のメラニン量と細胞溶解液中の総タンパクの質量から、処理液中のメラニン量（μｇ）／細胞溶解液中の総タンパク質量（ｍｇ）で表し、媒体対照群と比較したメラニン生成率を求めた。この結果を以下に示した。なお、試験結果はいずれも３例の平均値である。 (3) Test method: B16F0 melanoma cells were prepared to 4 × 10 ⁴ / mL with 10% DMEM medium, and 2 mL thereof was added to each well of a 6-well plate, and 5% carbon dioxide concentration at 37 ° C. overnight. Cultured. On the next day, 2 mL each of the test substance or PMA prepared to a predetermined concentration was added to B16F0 melanoma cells, and further cultured at 5% carbon dioxide concentration and 37 ° C. for 72 hours. After completion of the culture, the intracellular melanin content was measured by partially modifying the method of Kageyama et al. (The Journal of Biological Chemistry, 279 (26), 27774-27780 (2004)). B16F0 cells were washed with phosphate buffered saline, 1N sodium hydroxide was added, and the mixture was allowed to stand at room temperature for 20 to 60 minutes. Subsequently, the mixture was stirred with a microplate mixer to completely lyse the cells to obtain a cell lysate. Transfer 120 μL of the cell lysate to a 200 μL microtube, treat with a thermal cycler at 80 ° C. for 1 hour, transfer 80 μL of each to each hole of a 96-well plate, and use a microplate reader with the absorption wavelength of 405 nm as an index. Then, the amount of intracellular melanin was measured. The amount of intracellular melanin was calculated from a standard curve of standard melanin prepared in advance. Further, the total protein amount in the B16F0 cell lysate obtained by diluting the cell lysate 10 times with phosphate buffered saline was measured using a BCA protein assay kit (manufactured by PIERCE). The melanin content of B16F0 cells is calculated from the amount of melanin in the treatment solution measured above and the total protein mass in the cell lysate, and the amount of melanin in the treatment solution (μg) / total protein in the cell lysis solution (mg ) And the melanin production rate compared with the vehicle control group was determined. The results are shown below. In addition, all the test results are average values of three cases.

表１から明らかなように、アルジオキサ、エテンザミド、塩酸フェニレフリン、グアイフェネシン、スルファメトキサゾール、パルミチン酸レチノール、ビサコジル、メチル硫酸ネオスチグミン及びレゾルシンは、優れたメラニン生成促進効果を示し、白髪防止剤として有用である。 As is apparent from Table 1, aldioxa, etenzamide, phenylephrine hydrochloride, guaifenesin, sulfamethoxazole, retinol palmitate, bisacodyl, neostigmine methylsulfate and resorcin have an excellent melanin production promoting effect and are useful as a gray hair prevention agent. It is.

Claims

A gray hair inhibitor comprising retinol palmitate.

Melanin production promoter consisting of retinol palmitate.