JP5787899B2

JP5787899B2 - アミノアルコール誘導体およびそれらの治療活性

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Publication number: JP5787899B2
Application number: JP2012546410A
Authority: JP
Inventors: ジャンパオロネグリソーリ、; レナートカネヴォッティ、; マッシーモプレヴィターリ、; ジャンカルロアルディーニ、; マリナカリーニ、; マリカオリオーリ、; ジュリオヴィストーリ、
Original assignee: Flamma SpA; Universita degli Studi di Milano
Current assignee: Flamma SpA; Universita degli Studi di Milano
Priority date: 2009-12-29
Filing date: 2010-12-20
Publication date: 2015-09-30
Anticipated expiration: 2030-12-20
Also published as: IT1397212B1; JP2013515753A; US20120316212A1; CN102791696A; US8623900B2; WO2011080139A1; CN102791696B; EP2519507A1; ITMI20092317A1; EP2519507B1; ES2439322T3

Description

本発明は、カルボニル化合物に対する代謝性消失活性(metabolic quenching activity)を有する窒素複素環基を含むアミノアルコール誘導体に関する。

（従来技術）
酸化損傷が、老化、炎症性障害、糖尿病、心血管系疾患および神経変性過程を含む、多様な生理病理過程の誘発に影響を与えることは、異論なく認識されている。酸化損傷、例えば、ラジカル反応性酸素種によってもたらされるタンパク質、脂質および核酸の構造損傷、および変化させられた細胞の酸化還元状態に関与する主要な分子メカニズムもまた、よく知られている[ＨａｌｌｉｗｅｌｌＢ、ＧｕｔｔｅｒｉｄｇｅＪＭ．、ＦｒｅｅＲａｄｉｃａｌｓｉｎＢｉｏｌｏｇｙａｎｄＭｅｄｉｃｉｎｅ(２００１)ＯｘｆｏｒｄＳｃｉｅｎｃｅＰｕｂｌｉｃａｔｉｏｎｓ、第３編］。

ケト／アルデヒド官能基を特徴とする脂質酸化のいくつかの生成物が、重要な細胞毒性酸化メディエーターとして作用し、生体分子の不可逆的な構造的改変を誘発し、その結果、細胞機能の変化をもたらすことも明らかにされた［ＵｃｈｉｄａＫ.ＦｒｅｅＲａｄｉｃ.Ｂｉｏｌ.Ｍｅｄ.２０００、２８：１６８５〜９６頁、ＰｏｌｉＧ.ら、ＩＵＢＭＢＬｉｆｅ.２０００、５０：３１５〜２１頁］。

研究されたカルボニル化合物は、４−ヒドロキシ−トランス−２−ノネナール(ＨＮＥ)およびアクロレイン（ＡＣＲ）などのα、β−不飽和アルデヒドを含む、多価不飽和脂肪酸の酸化の生成物を含む［ＥｓｔｅｒｂａｕｅｒＨ.ら、ＦｒｅｅＲａｄｉｃ.Ｂｉｏｌ.Ｍｅｄ.１９９１、１１:８１〜１２８頁］。

酸化に基づく多様な病理過程への不飽和アルデヒドの関与は、モノクローナル抗体およびポリクローナル抗体の使用によって実証された［ＵｃｈｉｄａＫ. Ｐｒｏｇ. ＬｉｐｉｄＲｅｓ. ２００３、４２:３１８〜４３頁］。特に、タンパク質とＨＮＥおよびアクロレインとの付加物(adducts between HNE and acrolein with proteins)が、糖尿病、アテローム性動脈硬化、筋ジストロフィー、関節リウマチ、脳虚血、並びにアルツハイマー病およびパーキンソン病などの神経変性疾患に罹患している患者の生検および剖検組織において確認された[ＵｃｈｉｄａＫ. Ｐｒｏｇ.ＬｉｐｉｄＲｅｓ.２００３、４２:３１８〜４３頁、ＺａｒｋｏｖｉｃＮ.Ｍｏｌ.ＡｓｐｅｃｔｓＭｅｄ.２００３、２４:２８１〜９１頁.、ＺａｒｋｏｖｉｃＮ. Ｍｏｌ. ＡｓｐｅｃｔｓＭｅｄ. ２００３、２４:２９３〜３０３頁、Ｍ.Ｃａｒｉｎｉら「ＲｅｄｏｘＰｒｏｔｅｏｍｉｃｓ：ｆｒｏｍＰｒｏｔｅｉｎＭｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎｓｔｏＣｅｌｌｕｌａｒＤｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎａｎｄＤｉｓｅａｓｅｓ」において（Ｅｄ.Ｉ.Ｄａｌｌｅ−Ｄｏｎｎｅ、Ａ.ＳｃａｌｏｎｉおよびＡ.Ｂｕｔｔｅｒｆｉｅｌｄ）、ＷｉｌｅｙＩｎｔｅｒＳｃｉｅｎｃｅＢｏｏｋｓ、ＪｏｈｎＷｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓより（２００５）。

病原性因子としてのＨＮＥの役割は、例えば、線維症[ＣｈｉａｒｐｏｔｔｏＡＮＤ.ら、Ｂｉｏｆａｃｔｏｒｓ.２００５、２４(１〜４):２２９〜３６頁］、糖尿病性腎症［ＦｕｒｆａｒｏＡＬ.らＢｉｏｆａｃｔｏｒｓ.２００５、２４(１〜４)：２９１〜８頁］、アテローム動脈硬化過程[ＬｅｏｎａｒｄｕｚｚｉＧ.ら、ＭｏｌＮｕｔｒＦｏｏｄＲｅｓ. ２００５１１月、４９(１１):１０４４〜９頁]、および神経変性障害[ＺａｒｋｏｖｉｃＫ. ＭｏｌＡｓｐｅｃｔｓＭｅｄ. ２００３８月〜１０月、２４(４〜５):２９３〜３０３頁]を含む、多様な障害について分子レベルで実証された。

したがって、カルボニル生成物、特に、ＨＮＥなどの反応性カルボニル化合物が、カルボニル消失活性(carbonyl-quenching activity)を有する、新しい種類の生物活性分子の開発のための重要な対象であることは、明らかである。

この重要性は、カルボニル消失活性を有する化合物、特に、カルノシンと相関する特定のジペプチド化合物を記載する、かなりの数の論文および特許によって明らかに実証されている［ＨｉｐｋｉｓｓｓＡ.Ｒ.、Ｊ.Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ'ｓＤｉｓ.２００７、１１、２２９〜２４０頁（非特許文献１）、ＧｕｉｏｔｔｏＡ.らＣｕｒｒ.Ｍｅｄ.Ｃｈｅｍ.２００５、１２、２２９３〜２３１５頁、ＶｉｓｔｏｌｉＧ.ら、Ｃｈｅｍ.Ｍｅｄ.Ｃｈｅｍ.２００９、４、１〜１０頁］。

ＨｉｐｋｉｓｓｓＡ.Ｒ.、Ｊ.Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ'ｓＤｉｓ.２００７、１１、２２９〜２４０頁

発明の説明
本発明は、窒素複素環残基を含むアミノアルコール誘導体に関し、このようなアミノアルコール誘導体は、神経変性障害、慢性炎症性障害、心血管系疾患、および糖尿病と白内障との合併症などのかなりの数の慢性障害の発症への寄与が知られている、酸化脂質ストレスの二次生成物、特にマロンジアルデヒドおよびヒドロキシノネナールなどの不飽和アルデヒドの二次生成物を阻害する興味深い活性を示した。ある種のヒト体組織の中に存在して、インビトロでの不飽和カルボニル化合物を消失させるその活性がよく知られている、内在性のジペプチドＬ−カルノシンの構造に由来するものとして研究された、本発明による化合物は、モデルカルボニル化合物の消失においてジペプチドより驚くほど大きな活性を示し、モデル化合物と比較した場合に極めて高い代謝の安定性を示し、そのため、本発明による化合物は、反応性カルボニル化合物の存在に相関する全ての障害における治療的使用に適切である。

本発明はまた、前記障害の治療または予防のための医薬の調製に前記化合物を使用することに関する。

本発明の化合物は、一般式Ｉ

［式中、
Ｒ_１は、１または複数の窒素原子を含み、その窒素原子の少なくとも１つが−ＮＨ−基である、任意選択で縮合され、任意選択で置換されている窒素複素環であり、
Ｒ_２は、水素、直鎖状、分枝状若しくは環状のＣ_１〜Ｃ_１０アルキル基、直鎖状、分枝状若しくは環状のＣ_１〜Ｃ_８アルキルカルボニル基、任意選択で置換されているアリールカルボニルまたはアリールアルキルカルボニル基であり、
Ｒ_３は、式ＩＩ

［式中、
Ｒ_４およびＲ_５は、同一でもまたは異なっていてもよく、水素、直鎖状若しくは分枝状のＣ_１〜Ｃ_８アルキルまたは環状のＣ_３〜Ｃ_７アルキル基、アリール−Ｃ_１〜Ｃ_５アルキルまたはヘテロアリール−Ｃ_１〜Ｃ_５−アルキル基、アリールまたはヘテロアリール基であり、
Ｒ_６およびＲ_７は、同一でもまたは異なっていてもよく、水素、直鎖状、分枝状若しくは環状Ｃ_１〜Ｃ_８アルキル基、１または複数の二重結合を任意選択で含む直鎖状若しくは分枝状Ｃ_１〜Ｃ_２０アルキルカルボニルまたは環状Ｃ_３〜Ｃ_７アルキルカルボニル基、アリールカルボニルまたはアリールアルキルカルボニル基、１または複数の二重結合を任意選択で含む直鎖状若しくは分枝状Ｃ_１〜Ｃ_１０アルキルオキシカルボニルまたは環状Ｃ_３〜Ｃ_７アルキルオキシカルボニル基、アリールオキシカルボニルまたはアリールアルキルオキシカルボニル基、アミノ基、または一般式ＩＩＩ

（式中、Ｍは、窒素、酸素または硫黄であり、Ａは、水素またはアミノ基である）
の基である］の基である］を有する。

式Ｉの多くの化合物は、少なくとも１つのキラル中心を有し、したがって、本発明は、本発明の生成物の全ての光学異性体および任意の割合でのそれらの混合物、並びに個別に得られる全ての可能なジアステレオマーまたは任意の割合でのそれらの混合物を含む。

Ｒ_１は、好ましくは、任意選択で置換されているイミダゾール、ピロール、ピラゾール、インドール、イソインドール、インダゾール、ベンズイミダゾールであり、より好ましくは、Ｒ_１は２位または４位で、直鎖状、分枝状若しくは環状Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル基またはハロゲン原子によって任意選択で置換されているイミダゾール環である。

Ｒ_２は、好ましくは、水素、直鎖状、分枝状若しくは環状Ｃ_１〜Ｃ_８アルキルカルボニル、アリールカルボニルまたはアリールアルキルカルボニル基である。

より好ましくは、Ｒ_２は水素である。

Ｒ_３は、好ましくは、式ＩＩ

［式中、
Ｒ_４およびＲ_５は、同一または異なることもあり、水素、直鎖状若しくは分枝状Ｃ_１〜Ｃ_８アルキルまたは環状Ｃ_３〜Ｃ_７アルキル、アリール−Ｃ_１〜Ｃ_５アルキルまたはヘテロアリール−Ｃ_１〜Ｃ_５−アルキル、アリールまたはヘテロアリール基であり、
Ｒ_６およびＲ_７は、同一でもまたは異なっていてもよく、水素、１または複数の二重結合を任意選択で含む直鎖状若しくは分枝状Ｃ_１〜Ｃ_１０アルキルカルボニルまたは環状Ｃ_３〜Ｃ_７アルキルカルボニル基、アリールカルボニルまたはアリールアルキルカルボニル基、１または複数の二重結合を任意選択で含む直鎖状若しくは分枝状Ｃ_１〜Ｃ_１０アルキルオキシカルボニルまたは環状Ｃ_３〜Ｃ_７アルキルオキシカルボニル基、アリールオキシカルボニルまたはアリールアルキルオキシカルボニル基、またはアミノ基である］
の基である。
Ｒ_４およびＲ_５は、好ましくは水素である。
Ｒ_６およびＲ_７は、好ましくは、互いに独立して、水素、アルキルカルボニル、アリールカルボニル、アリールアルキルカルボニル、アルコキシカルボニル、アリールアルコキシカルボニル基である。
より好ましくは、Ｒ_４、Ｒ_５、Ｒ_６、Ｒ_７は水素である。

アリールカルボニルまたはアリールアルキルカルボニル基は、好ましくはフェニルカルボニルまたはベンジルカルボニル基であって、フェニル部分は、フッ素、塩素、臭素若しくはヨウ素などのハロゲン原子および／またはメチル、メトキシ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、シアノ、ニトロ、アミノカルボニル基から選択される、１から３つの置換基によって置換されていてもよい。

ヘテロアリール−Ｃ_１〜Ｃ_５−アルキル基は、例えば、ピリジルアルキル、フラニルアルキル、チエニルアルキル基であり、アリール基は、例えば、フェニル基または上記のように置換されているフェニルである。ヘテロアリール基は、例えば、ピリジル、フリル、チエニル、チアゾリル、イミダゾリル基である。

アリールオキシカルボニルまたはアリールアルキルオキシカルボニル基は、好ましくは、フェノキシカルボニルおよびベンジルオキシカルボニル基である。

本発明の特に好ましい化合物の例は、
・３−アミノ−Ｎ−［（１Ｓ）−２−ヒドロキシ−１−（１Ｈ−ベンゾイミダゾール−４−イル−メチル）−エチル］プロパンアミド
・３−アミノ−Ｎ−［（１Ｓ）−２−ヒドロキシ−１−（１Ｈ−ピロール−２−イル−メチル）エチル］−プロパンアミド
・３−アミノ−Ｎ−［（１Ｓ）−２−メトキシ−１−（１Ｈ−イミダゾール−５−イル−メチル）エチル］−プロパンアミド
・３−（アセチルアミノ）−Ｎ−［（１Ｓ）−２−ヒドロキシ−１−（１Ｈ−イミダゾール−５−イル−メチル）−エチル］プロパンアミド
・３−アミノ−Ｎ−［（１Ｓ）−２−（アセチルオキシ）−１−（１Ｈ−イミダゾール−５−イル−メチル）エチル］−プロパンアミド
・３−アミノ−Ｎ−［（１Ｒ）−２−ヒドロキシ−１−（１Ｈ−イミダゾール−５−イル−メチル）エチル］−プロパンアミド
・３−（プロピオニルアミノ）−Ｎ−［（１Ｓ）−２−ヒドロキシ−１−（１Ｈ−イミダゾール−５−イル−メチル）エチル］プロパンアミド
・３−アミノ−Ｎ−［２−ヒドロキシ−１−（１Ｈ−イミダゾール−５−イル−メチル）エチル］−プロパンアミド
・３−アミノ−Ｎ−［（１Ｓ）−２−ヒドロキシ−１−（１Ｈ−イミダゾール−５−イル−メチル）エチル］−プロパンアミド
・３−メチルアミノ−Ｎ−［（１Ｓ）−２−ヒドロキシ−１−（１Ｈ−イミダゾール−５−イル−メチル）−エチル］プロパンアミド
・３−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−Ｎ−［（１Ｓ）−２−ヒドロキシ−１−（１Ｈ−イミダゾール−５−イル−メチル）−エチル］プロパンアミド
・３−アミノ−Ｎ−［（１Ｓ）−２−ヒドロキシ−１−（４−メチル−１Ｈ−イミダゾール−５−イル−メチル）エチル］プロパンアミド
・３−アミノ−Ｎ−［（１Ｓ）−２−ヒドロキシ−１−（４−クロロ−１Ｈ−イミダゾール−５−イル−メチル）−エチル］−プロパンアミド
である。

さらに、本発明は、本発明の１つまたは複数の化合物の有効量を、適切な賦形剤と組み合わせて含む組成物に関する。

本発明による化合物は、文献、例えば、Ｈｏｕｂｅｎ−Ｗｅｉｌ「Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓｏｆｐｅｐｔｉｄｅｓａｎｄｐｅｐｔｉｄｏｍｉｍｅｔｉｃｓ」、Ｅ２２ａ〜ｄ、およびＪ.Ｊｏｎｅｓ「Ａｍｉｎｏａｃｉｄａｎｄｐｅｐｔｉｄｅｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」において報告された、固相または溶液中における既知のペプチド合成法によって合成した。合成において使用したアミノ酸は、すでに保護された形態において入手できない場合には、Ｔ.Ｗ.Ｇｒｅｅｎｅ、Ｐ.Ｇ.Ｍ.Ｗｕｔｓ「ＰｒｏｔｅｃｔｉｖｅｇｒｏｕｐｉｎＯｒｇａｎｉｃＳｙｎｔｈｅｓｉｓ」およびＰ.Ｊ.Ｋｏｃｉｅｎｓｋｉ「ＰｒｏｔｅｃｔｉｎｇＧｒｏｕｐｓ」において報告されている方法などの既知の方法を使用して、必要な保護基によって適切に官能化した。合成において使用したアミノアルコールは、不活性溶媒中で適切な金属または有機金属水素化物を使用して対応するアミノ酸の誘導体を還元することによって調製し、アミノアシルアミノアルコール誘導体へのジペプチドの還元において、同様の手順を使用した。

得られた最終生成物は、必要に応じて、既知の方法の１つによって、例えば、結晶化、クロマトグラフィー精製、または必要な純度を有する化合物を得るのに必要な任意のその他の技術を使用して精製した。

本発明による化合物の薬理活性を、多数の障害への関与が知られている、４−ヒドロキシノネナール（ＨＮＥ）に対する化合物のカルボニル消失活性を評価することによって、インビトロで判定した。

考えられる使用のために、本発明による化合物が、経口、非経口、局所または経皮投与に適切な、従来の医薬用、化粧用または栄養組成物として好都合に製剤化される。これらの組成物の例としては、カプセル剤、錠剤、シロップ剤、注射剤または懸濁剤、軟膏剤、坐剤、放出制御製剤等、および水溶性顆粒化物(granulates)が挙げられる。従来の担体および賦形剤と一緒に、これらの組成物はまた、相補的な活性を有するかまたはさもなければ当該障害の治療／予防に有用である、その他の活性成分も含むことができる。

本発明は、以下の例によって詳細に例証される。

例１：３−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）プロピオニル−Ｌ−ヒスチジン
０．５Ｌ丸底フラスコに、３−アミノプロピオニル−ヒスチジン２２．６ｇ、水１５０ｍｌおよびアセトン３０ｍｌを入れる。３０％水酸化ナトリウムによって溶液をｐＨ１３．００に調整し、次に０〜５℃に冷却し、その温度で、水酸化ナトリウムによってｐＨを１２〜１３の維持しながら、クロロギ酸ベンジル１８．７ｇを、約１時間で滴加する。その後、混合物を２０〜２５℃で１５時間攪拌し、３７％塩酸によってｐＨ２．０〜２．５に酸性化し、次に、白色固体残留物となるまでイソプロパノールによって繰り返し蒸発を実施しながら、最高５０℃で真空濃縮する。残留物４０ｇを得る。
１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）ｐｐｍ：８．３８（ｓ１Ｈ）；７．３２（ｍ５Ｈ）；７．０８（ｓ１Ｈ）；５．０５（ｍ２Ｈ）；４．４０（ｍ１Ｈ）；３．３０（ｍ２Ｈ）；３．１０（ｄｄ１Ｈ）；２．９５（ｄｄ１Ｈ）；２．４１（ｍ２Ｈ）。

例２：３−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）プロピオニル−Ｌ−ヒスチジンエチルエステル
１Ｌ丸底フラスコに、窒素雰囲気下で、３−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）プロピオニル−Ｌ−ヒスチジン４０ｇ、無水エタノール２００ｇおよび８ＭＨＣｌエタノール溶液８０ｇを入れる。

ＴＬＣによって反応をモニターしながら、混合物を２０〜３０℃で１５時間攪拌し、次に最高４０℃で真空濃縮し、そのようにして出発重量を８０％減少させる。次に濃縮を中断し、次に混合物を１０〜１５℃に冷却し、温度を１５℃未満に維持しながら、イソブタノール１００ｇ、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル１００ｇおよび重炭酸ナトリウム飽和水溶液１００ｇを、そこに加える。混合物を０〜５℃にさらに冷却し、その温度で、３０％水酸化ナトリウムによって系をｐＨ７．０〜７．５に調整する。混合物を３０分間攪拌し、その間に温度が２０〜２５℃に戻り、次に攪拌を中断し、相を２０分間分離させる。水相を捨てる一方で、有機相を最高５０℃で真空濃縮して、粘稠な油性残留物を約８０ｇ得る。これは、その後の反応においてそのままで使用する。

例３：３−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−Ｎ−［（１Ｓ）２−ヒドロキシ−１−（１Ｈ−イミダゾール−５−イル−メチル）エチル］プロパンアミド
１Ｌ丸底フラスコに、窒素雰囲気下で、例２からの油性残留物８０ｇ、メタノール１００ｇおよび水３００ｇを入れる。混合物を２０〜３０℃で１５分間攪拌して、溶解を完了させる。次に塩化リチウム４．２４ｇおよび引き続きＮａＢＨ４１３ｇを、３０分間の間に少しずつ入れる。その後、混合物を２０〜２５℃で１５時間攪拌し、４０℃で真空濃縮して、出発重量の８０％まで還元し、最終的にイソブタノール（４×５０ｇ）によって取り除く。残留物をメタノール１００ｇおよびＭＴＢＥ２００ｇに溶解する。混合物を２０〜２５℃で２時間攪拌する。塩をセライトで濾過して、メタノール／ＭＴＢＥ（１：２ｖ／ｖ）で洗浄する。濾過物を最高５０℃で一定重量まで真空濃縮する。油性残留物５２ｇを得る。試料を、シリカカラムクロマトグラフィー（溶出剤、ＣＨ２Ｃｌ２８０：ＭｅＯＨ２０）によって精製する。
１Ｈ−ＮＭＲ：（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯＤ６）ｐｐｍ：７．７８（ｄ,１Ｈ）；７．６０（ｓ１Ｈ）；７．３５（ｍ５Ｈ）；６．７８（ｓ１Ｈ）；５．０２（ｓ２Ｈ）；３．９２（ｍ１Ｈ）；３．３５（ｍ２Ｈ）；３．１５（ｍ２Ｈ）；２．７５（ｄｄ１Ｈ）；２．６０（ｄｄ１Ｈ）；２．２４（ｍ２Ｈ）。

例４：３−アミノ−Ｎ−［（１Ｓ）−２−ヒドロキシ−１−（１Ｈ−イミダゾール−５−イル−メチル）−エチル］プロパンアミド
丸底フラスコに、不活性雰囲気下で、例３からの油性生成物２６ｇおよび１：１のメタノール／水混合物１００ｇを入れる。混合物を攪拌して、溶解を完了し、次に１０％のＰｄ／Ｃ２．６ｇを加える。洗浄サイクルを窒素−真空下で実施し、次に混合物を４０℃まで加熱し、出発生成物の完全な消滅まで、水素をそこでゆっくり泡立てる。混合物を３０℃まで冷却し、触媒をセライトパッドで濾過し、メタノール−水混合物によって２回洗浄する。溶媒を蒸発させて除去し、残留物をイソブタノールによって繰り返し溶解し、蒸発させて、白い固体９ｇを得る。
１Ｈ−ＮＭＲ：（３００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）ｐｐｍ：７．５５（ｓ１Ｈ）；６．８０（ｓ１Ｈ）；４．０５（ｍ１Ｈ）；３．５５（ｄｄ１Ｈ）；３．４５（ｄｄ１Ｈ）；２．８０〜２．５０（ｍｍ４Ｈ）；２．２４（ｍ２Ｈ）。

薬理試験
本特許が関係する選択した一連の化合物のカルボニル消失活性を、３７℃においてリン酸塩緩衝液（ｐＨ７．４）（１０ｍＭ）中でＨＮＥ（５０μＭ）を研究対象の分子（１ｍＭ）とともにインキュベートすることによって、インビトロで実証した。インキュベーションの１、２および３時間後に、ＡｌｄｉｎｉＧ.ら［ＢｉｏｃｈｅｍＢｉｏｐｈｙｓＲｅｓＣｏｍｍｕｎ. ２００２１１月１５日、２９８（５）:６９９〜７０６頁］によって以前に記載されたような逆相クロマトグラフィーによって残留ＨＮＥ含有量を測定して、活性を評価した。カルボニル消失活性は、被験分子の非在下でのＨＮＥ含有量と比較して、反応させたＨＮＥのパーセンテージに基づいて評価する。一例として、化合物３−アミノ−Ｎ−［（１Ｓ）−２−ヒドロキシ−１−（１Ｈ−イミダゾール−５−イル−メチル）エチル］プロパンアミドの活性は、標準物質としたβ−アラニルヒスチジンの活性より１．６６倍高いことがわかった。

ヒト血清、ラット血漿、ラット肝分画Ｓ９０００およびヒト肝分画Ｓ９０００における化合物の安定性をまた、３７℃でのインキュベーション並びに０．１５および３０分、１時間および２時間後の連続的なサンプリングによって評価した。適切に処理された各マトリックスから採取した試料を、ＨＰＬＣ−ＭＳによって分析したところ、２時間後に初期値の８５〜９３％を回復した。腹腔内投与によるラットにおける予備毒性研究をまた、同一の化合物（単一投与量１００ｍｇ／ｋｇ）、ＩＶ（３連続投与量、３、１０および３０ｍｇ／ｋｇ）および経口（経管栄養、１００ｍｇ／ｋｇ／日を７日間）について実施し、毒性効果は観察されなかった。

Claims

一般式Ｉ

［式中、
Ｒ_１は、１または複数の窒素原子を含み、その窒素原子の少なくとも１つが−ＮＨ−基である、任意選択で縮合され、任意選択で置換されている窒素複素環であり、
Ｒ_２は、水素、直鎖状または分枝状のＣ_１〜Ｃ_１０アルキル基、環状のＣ _３〜Ｃ _１０アルキル基、直鎖状または分枝状のＣ_１〜Ｃ_８アルキルカルボニル基、環状のＣ _３〜Ｃ _８アルキルカルボニル基、任意選択で置換されているアリールカルボニルまたはアリールアルキルカルボニル基であり、
Ｒ_３は、式ＩＩ

［式中、
Ｒ_４およびＲ_５は、同一でもまたは異なっていてもよく、水素、直鎖状若しくは分枝状のＣ_１〜Ｃ_８アルキルまたは環状のＣ_３〜Ｃ_７アルキル基、アリール−Ｃ_１〜Ｃ_５アルキルまたはヘテロアリール−Ｃ_１〜Ｃ_５−アルキル基、アリールまたはヘテロアリール基であり、
Ｒ_６およびＲ_７は、同一でもまたは異なっていてもよく、水素、直鎖状または分枝状Ｃ_１〜Ｃ_８アルキル基、環状Ｃ _３〜Ｃ _８アルキル基、１または複数の二重結合を任意選択で含む直鎖状若しくは分枝状のＣ_１〜Ｃ_２０アルキルカルボニルまたは環状Ｃ_３〜Ｃ_７アルキルカルボニル基、アリールカルボニルまたはアリールアルキルカルボニル基、１または複数の二重結合を任意選択で含む直鎖状若しくは分枝状のＣ_１〜Ｃ_１０アルキルオキシカルボニルまたは環状Ｃ_３〜Ｃ_７アルキルオキシカルボニル基、アリールオキシカルボニルまたはアリールアルキルオキシカルボニル基、アミノ基、または一般式ＩＩＩ

（式中、Ｍは、酸素または硫黄であり、Ａは、水素またはアミノ基である）
の基である］
の基である］の化合物、エナンチオマー、ジアステレオマーまたはそれらの混合物。
Ｒ_１が、任意選択で置換されているイミダゾール、ピロール、ピラゾール、インドール、イソインドール、インダゾール、およびベンズイミダゾールから選択される、請求項１に記載の化合物。
Ｒ_１およびＲ_２が、それぞれ請求項２および請求項１において定義された通りであるが、Ｒ_３が一般式ＩＩ

［式中、
Ｒ_４、Ｒ_５は、請求項１に定義された通りであり、
Ｒ_６およびＲ_７は、同一でもまたは異なっていてもよく、水素、１または複数の二重結合を任意選択で含む直鎖状若しくは分枝状のＣ_１〜Ｃ_１０アルキルカルボニルまたは環状Ｃ_３〜Ｃ_７アルキルカルボニル基、アリールカルボニルまたはアリールアルキルカルボニル基、１または複数の二重結合を任意選択で含む直鎖状若しくは分枝状のＣ_１〜Ｃ_１０アルキルオキシカルボニルまたは環状Ｃ_３〜Ｃ_７アルキルオキシカルボニル基、アリールオキシカルボニルまたはアリールアルキルオキシカルボニル基、またはアミノ基である］
の基である、請求項２に記載の化合物。
Ｒ_４およびＲ_５が水素である、請求項３に記載の化合物。
Ｒ_１が２位または４位で、直鎖状若しくは分枝状のＣ_１〜Ｃ_６アルキル基、環状のＣ _３〜Ｃ _６アルキル基、またはハロゲン原子によって任意選択で置換されているイミダゾール環である、請求項４に記載の化合物。
Ｒ_２が、水素、直鎖状または分枝状のＣ_１〜Ｃ_８アルキルカルボニル、環状のＣ _３〜Ｃ _８アルキルカルボニル、アリールカルボニルまたはアリールアルキルカルボニル基であり、
Ｒ_３が、式ＩＩ［式中、Ｒ_４およびＲ_５は、水素であり、Ｒ_６およびＲ_７は、独立して水素、またはアルキルカルボニル、アリールカルボニル、アリールアルキルカルボニル、アルキルオキシカルボニル、アリールアルキルオキシカルボニル基である］の基である、
請求項５に記載の化合物。
Ｒ_２が水素である、請求項６に記載の化合物。
Ｒ_３が、式ＩＩ［式中、Ｒ_４、Ｒ_５、Ｒ_６、Ｒ_７は水素である］の基である、請求項６に記載の化合物。
・３−アミノ−Ｎ−［（１Ｓ）−２−ヒドロキシ−１−（１Ｈ−ベンゾイミダゾール−４−イル−メチル）−エチル］プロパンアミド
・３−アミノ−Ｎ−［（１Ｓ）−２−ヒドロキシ−１−（１Ｈ−ピロール−２−イル−メチル）エチル］−プロパンアミド
・３−アミノ−Ｎ−［（１Ｓ）−２−メトキシ−１−（１Ｈ−イミダゾール−５−イル−メチル）エチル］−プロパンアミド
・３−（アセチルアミノ）−Ｎ−［（１Ｓ）−２−ヒドロキシ−１−（１Ｈ−イミダゾール−５−イル−メチル）−エチル］プロパンアミド
・３−アミノ−Ｎ−［（１Ｓ）−２−（アセチルオキシ）−１−（１Ｈ−イミダゾール−５−イル−メチル）エチル］−プロパンアミド
・３−アミノ−Ｎ−［（１Ｒ）−２−ヒドロキシ−１−（１Ｈ−イミダゾール−５−イル−メチル）エチル］−プロパンアミド
・３−（プロピオニルアミノ）−Ｎ−［（１Ｓ）−２−ヒドロキシ−１−（１Ｈ−イミダゾール−５−イル−メチル）エチル］プロパンアミド
・３−アミノ−Ｎ−［２−ヒドロキシ−１−（１Ｈ−イミダゾール−５−イル−メチル）エチル］−プロパンアミド
・３−アミノ−Ｎ−［（１Ｓ）−２−ヒドロキシ−１−（１Ｈ−イミダゾール−５−イル−メチル）エチル］−プロパンアミド
・３−メチルアミノ−Ｎ−［（１Ｓ）−２−ヒドロキシ−１−（１Ｈ−イミダゾール−５−イル−メチル）−エチル］プロパンアミド
・３−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−Ｎ−［（１Ｓ）−２−ヒドロキシ−１−（１Ｈ−イミダゾール−５−イル−メチル）エチル］プロパンアミド
・３−アミノ−Ｎ−［（１Ｓ）−２−ヒドロキシ−１−（４−メチル−１Ｈ−イミダゾール−５−イル−メチル）エチル］プロパンアミド
・３−アミノ−Ｎ−［（１Ｓ）−２−ヒドロキシ−１−（４−クロロ−１Ｈ−イミダゾール−５−イル−メチル）エチル］プロパンアミド
から選択される、請求項１に記載の化合物。
請求項１から９に記載の１つまたは複数の化合物の有効量を、適切な賦形剤と組み合わせて含む組成物。