JP5697983B2 - 修飾成長ホルモンポリペプチド - Google Patents
修飾成長ホルモンポリペプチド Download PDFInfo
- Publication number
- JP5697983B2 JP5697983B2 JP2010528468A JP2010528468A JP5697983B2 JP 5697983 B2 JP5697983 B2 JP 5697983B2 JP 2010528468 A JP2010528468 A JP 2010528468A JP 2010528468 A JP2010528468 A JP 2010528468A JP 5697983 B2 JP5697983 B2 JP 5697983B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- seq
- nucleic acid
- acid sequence
- amino acid
- polypeptide
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
- 108010051696 Growth Hormone Proteins 0.000 title claims description 65
- 102000018997 Growth Hormone Human genes 0.000 title claims description 65
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims description 69
- 239000000122 growth hormone Substances 0.000 claims description 64
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 53
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims description 52
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims description 51
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 claims description 36
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims description 33
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims description 33
- 239000000710 homodimer Substances 0.000 claims description 22
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 20
- 102100020948 Growth hormone receptor Human genes 0.000 claims description 19
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 claims description 13
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 11
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 10
- 108010068542 Somatotropin Receptors Proteins 0.000 claims description 5
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 4
- 206010000599 Acromegaly Diseases 0.000 claims description 3
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 claims description 3
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 2
- 230000003442 weekly effect Effects 0.000 claims description 2
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims 3
- 229940124013 Growth hormone receptor antagonist Drugs 0.000 claims 1
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 claims 1
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 claims 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 46
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 18
- 238000000034 method Methods 0.000 description 15
- 101001075287 Homo sapiens Growth hormone receptor Proteins 0.000 description 13
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 10
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 10
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 description 9
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 9
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 9
- 108091008146 restriction endonucleases Proteins 0.000 description 9
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 9
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 8
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 8
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 8
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 8
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 7
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 7
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 7
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 7
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 6
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Natural products NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000013613 expression plasmid Substances 0.000 description 5
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 5
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 5
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 4
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 4
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 4
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 4
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 4
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 4
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 4
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 4
- NHXLMOGPVYXJNR-ATOGVRKGSA-N somatostatin Chemical compound C([C@H]1C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CC=2C3=CC=CC=C3NC=2)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@H](C(=O)N1)[C@@H](C)O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)N)C(O)=O)=O)[C@H](O)C)C1=CC=CC=C1 NHXLMOGPVYXJNR-ATOGVRKGSA-N 0.000 description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 3
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 3
- 101000599951 Homo sapiens Insulin-like growth factor I Proteins 0.000 description 3
- 102100037852 Insulin-like growth factor I Human genes 0.000 description 3
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 3
- OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N Propanedioic acid Natural products OC(=O)CC(O)=O OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 description 3
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 102000005157 Somatostatin Human genes 0.000 description 3
- 108010056088 Somatostatin Proteins 0.000 description 3
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 3
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 3
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 3
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 3
- 230000001817 pituitary effect Effects 0.000 description 3
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 3
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 3
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 3
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 3
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 3
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 3
- 229960000553 somatostatin Drugs 0.000 description 3
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 3
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 3
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 3
- PUPZLCDOIYMWBV-UHFFFAOYSA-N (+/-)-1,3-Butanediol Chemical compound CC(O)CCO PUPZLCDOIYMWBV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 2
- 102000004506 Blood Proteins Human genes 0.000 description 2
- 108010017384 Blood Proteins Proteins 0.000 description 2
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 2
- 206010061818 Disease progression Diseases 0.000 description 2
- 101710099093 Growth hormone receptor Proteins 0.000 description 2
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N Hydrogen bromide Chemical compound Br CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108060001084 Luciferase Proteins 0.000 description 2
- 239000005089 Luciferase Substances 0.000 description 2
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000007913 Pituitary Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 2
- 206010039491 Sarcoma Diseases 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108700005078 Synthetic Genes Proteins 0.000 description 2
- 208000009956 adenocarcinoma Diseases 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 210000004198 anterior pituitary gland Anatomy 0.000 description 2
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 description 2
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 description 2
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 2
- OSASVXMJTNOKOY-UHFFFAOYSA-N chlorobutanol Chemical compound CC(C)(O)C(Cl)(Cl)Cl OSASVXMJTNOKOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 2
- 230000005750 disease progression Effects 0.000 description 2
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 2
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 2
- 230000002124 endocrine Effects 0.000 description 2
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 2
- 230000000762 glandular Effects 0.000 description 2
- 210000003016 hypothalamus Anatomy 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 2
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 2
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 2
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 2
- 210000002429 large intestine Anatomy 0.000 description 2
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 2
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 2
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 239000000346 nonvolatile oil Substances 0.000 description 2
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 2
- 210000001236 prokaryotic cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000017854 proteolysis Effects 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 2
- YGSDEFSMJLZEOE-UHFFFAOYSA-N salicylic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1O YGSDEFSMJLZEOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 2
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 2
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 2
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 2
- DEQANNDTNATYII-OULOTJBUSA-N (4r,7s,10s,13r,16s,19r)-10-(4-aminobutyl)-19-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-16-benzyl-n-[(2r,3r)-1,3-dihydroxybutan-2-yl]-7-[(1r)-1-hydroxyethyl]-13-(1h-indol-3-ylmethyl)-6,9,12,15,18-pentaoxo-1,2-dithia-5,8,11,14,17-pentazacycloicosane-4-carboxa Chemical compound C([C@@H](N)C(=O)N[C@H]1CSSC[C@H](NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H](CC=2C3=CC=CC=C3NC=2)NC(=O)[C@H](CC=2C=CC=CC=2)NC1=O)C(=O)N[C@H](CO)[C@H](O)C)C1=CC=CC=C1 DEQANNDTNATYII-OULOTJBUSA-N 0.000 description 1
- PUDHBTGHUJUUFI-SCTWWAJVSA-N (4r,7s,10s,13r,16s,19r)-10-(4-aminobutyl)-n-[(2s,3r)-1-amino-3-hydroxy-1-oxobutan-2-yl]-19-[[(2r)-2-amino-3-naphthalen-2-ylpropanoyl]amino]-16-[(4-hydroxyphenyl)methyl]-13-(1h-indol-3-ylmethyl)-6,9,12,15,18-pentaoxo-7-propan-2-yl-1,2-dithia-5,8,11,14,17-p Chemical compound C([C@H]1C(=O)N[C@H](CC=2C3=CC=CC=C3NC=2)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CSSC[C@@H](C(=O)N1)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=C2C=CC=CC2=CC=1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(N)=O)=O)C(C)C)C1=CC=C(O)C=C1 PUDHBTGHUJUUFI-SCTWWAJVSA-N 0.000 description 1
- WRIDQFICGBMAFQ-UHFFFAOYSA-N (E)-8-Octadecenoic acid Natural products CCCCCCCCCC=CCCCCCCC(O)=O WRIDQFICGBMAFQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LQJBNNIYVWPHFW-UHFFFAOYSA-N 20:1omega9c fatty acid Natural products CCCCCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O LQJBNNIYVWPHFW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QSBYPNXLFMSGKH-UHFFFAOYSA-N 9-Heptadecensaeure Natural products CCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O QSBYPNXLFMSGKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- BTBUEUYNUDRHOZ-UHFFFAOYSA-N Borate Chemical compound [O-]B([O-])[O-] BTBUEUYNUDRHOZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000009010 Bradford assay Methods 0.000 description 1
- 201000000274 Carcinosarcoma Diseases 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- 208000000461 Esophageal Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 201000003741 Gastrointestinal carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 1
- 101001075374 Homo sapiens Gamma-glutamyl hydrolase Proteins 0.000 description 1
- 101000664737 Homo sapiens Somatotropin Proteins 0.000 description 1
- 229940123502 Hormone receptor antagonist Drugs 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 206010022489 Insulin Resistance Diseases 0.000 description 1
- 241000221960 Neurospora Species 0.000 description 1
- GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N Nitric acid Chemical compound O[N+]([O-])=O GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108020004711 Nucleic Acid Probes Proteins 0.000 description 1
- 108010016076 Octreotide Proteins 0.000 description 1
- 206010030155 Oesophageal carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 239000005642 Oleic acid Substances 0.000 description 1
- ZQPPMHVWECSIRJ-UHFFFAOYSA-N Oleic acid Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 241000235648 Pichia Species 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 description 1
- 208000006265 Renal cell carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 241000235070 Saccharomyces Species 0.000 description 1
- 229920002684 Sepharose Polymers 0.000 description 1
- 101150052859 Slc9a1 gene Proteins 0.000 description 1
- 241000256248 Spodoptera Species 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N Succinic acid Natural products OC(=O)CCC(O)=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000024313 Testicular Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 206010057644 Testis cancer Diseases 0.000 description 1
- 108700009124 Transcription Initiation Site Proteins 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000001261 affinity purification Methods 0.000 description 1
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 1
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001340 alkali metals Chemical class 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 229960000686 benzalkonium chloride Drugs 0.000 description 1
- CADWTSSKOVRVJC-UHFFFAOYSA-N benzyl(dimethyl)azanium;chloride Chemical compound [Cl-].C[NH+](C)CC1=CC=CC=C1 CADWTSSKOVRVJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001588 bifunctional effect Effects 0.000 description 1
- 239000012148 binding buffer Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 201000008275 breast carcinoma Diseases 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-NUQCWPJISA-N butanedioic acid Chemical compound O[14C](=O)CC[14C](O)=O KDYFGRWQOYBRFD-NUQCWPJISA-N 0.000 description 1
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- 159000000007 calcium salts Chemical class 0.000 description 1
- 230000000711 cancerogenic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 231100000315 carcinogenic Toxicity 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 239000006143 cell culture medium Substances 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 210000004978 chinese hamster ovary cell Anatomy 0.000 description 1
- 229960004926 chlorobutanol Drugs 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 1
- 239000007857 degradation product Substances 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 description 1
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 208000018554 digestive system carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 230000008034 disappearance Effects 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 239000002270 dispersing agent Substances 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- -1 elixirs Substances 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 201000004101 esophageal cancer Diseases 0.000 description 1
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 1
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 1
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 210000004553 finger phalanx Anatomy 0.000 description 1
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 1
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 1
- 125000003630 glycyl group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 1
- 210000004007 growth hormone secreting cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000003128 head Anatomy 0.000 description 1
- 239000003689 hormone receptor blocking agent Substances 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 1
- 229910000042 hydrogen bromide Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910000041 hydrogen chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N hydrogen chloride Substances Cl.Cl IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002267 hypothalamic effect Effects 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 229940102223 injectable solution Drugs 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- QXJSBBXBKPUZAA-UHFFFAOYSA-N isooleic acid Natural products CCCCCCCC=CCCCCCCCCC(O)=O QXJSBBXBKPUZAA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000001847 jaw Anatomy 0.000 description 1
- 238000011005 laboratory method Methods 0.000 description 1
- 108010021336 lanreotide Proteins 0.000 description 1
- 229960002437 lanreotide Drugs 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 210000004324 lymphatic system Anatomy 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N maleic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N 0.000 description 1
- 239000011976 maleic acid Substances 0.000 description 1
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 230000001394 metastastic effect Effects 0.000 description 1
- 206010061289 metastatic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 1
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 1
- 210000004877 mucosa Anatomy 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- 238000001426 native polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 210000003739 neck Anatomy 0.000 description 1
- 210000005036 nerve Anatomy 0.000 description 1
- 210000004412 neuroendocrine cell Anatomy 0.000 description 1
- 229910017604 nitric acid Inorganic materials 0.000 description 1
- 208000002154 non-small cell lung carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002853 nucleic acid probe Substances 0.000 description 1
- 229960002700 octreotide Drugs 0.000 description 1
- ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N oleic acid Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 210000004789 organ system Anatomy 0.000 description 1
- 230000002611 ovarian Effects 0.000 description 1
- FJKROLUGYXJWQN-UHFFFAOYSA-N papa-hydroxy-benzoic acid Natural products OC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 FJKROLUGYXJWQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- 108700037519 pegvisomant Proteins 0.000 description 1
- 229960002995 pegvisomant Drugs 0.000 description 1
- 239000000813 peptide hormone Substances 0.000 description 1
- 239000008177 pharmaceutical agent Substances 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 208000010916 pituitary tumor Diseases 0.000 description 1
- 210000004258 portal system Anatomy 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 210000002307 prostate Anatomy 0.000 description 1
- 201000001514 prostate carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 230000006798 recombination Effects 0.000 description 1
- 238000005215 recombination Methods 0.000 description 1
- 230000022532 regulation of transcription, DNA-dependent Effects 0.000 description 1
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 1
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 1
- 230000000241 respiratory effect Effects 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 229960004889 salicylic acid Drugs 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 238000007493 shaping process Methods 0.000 description 1
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 1
- 201000002314 small intestine cancer Diseases 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 238000003153 stable transfection Methods 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- 239000000375 suspending agent Substances 0.000 description 1
- 239000012747 synergistic agent Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 230000002381 testicular Effects 0.000 description 1
- 201000003120 testicular cancer Diseases 0.000 description 1
- 238000011285 therapeutic regimen Methods 0.000 description 1
- 230000008719 thickening Effects 0.000 description 1
- RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L thimerosal Chemical compound [Na+].CC[Hg]SC1=CC=CC=C1C([O-])=O RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229940033663 thimerosal Drugs 0.000 description 1
- 210000001685 thyroid gland Anatomy 0.000 description 1
- 210000003853 toe phalanges Anatomy 0.000 description 1
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000005026 transcription initiation Effects 0.000 description 1
- 230000001960 triggered effect Effects 0.000 description 1
- 239000013638 trimer Substances 0.000 description 1
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 1
- 208000001072 type 2 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 description 1
- 210000004291 uterus Anatomy 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019786 weight gain Nutrition 0.000 description 1
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/575—Hormones
- C07K14/61—Growth hormone [GH], i.e. somatotropin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
- A61P5/06—Drugs for disorders of the endocrine system of the anterior pituitary hormones, e.g. TSH, ACTH, FSH, LH, PRL, GH
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
- A61P5/06—Drugs for disorders of the endocrine system of the anterior pituitary hormones, e.g. TSH, ACTH, FSH, LH, PRL, GH
- A61P5/08—Drugs for disorders of the endocrine system of the anterior pituitary hormones, e.g. TSH, ACTH, FSH, LH, PRL, GH for decreasing, blocking or antagonising the activity of the anterior pituitary hormones
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Physical Education & Sports Medicine (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Description
i)配列番号1に表記される核酸配列;
ii)配列番号2に表記される核酸配列;
iii)配列番号4に表記される核酸配列:
iv)配列番号5に表記される核酸配列:
v)配列番号7に表記される核酸配列;
vi)配列番号8に表記される核酸配列:
vii)配列番号10に表記される核酸配列:
viii)配列番号11に表記される核酸配列;
viiii)配列番号13に表記される核酸配列:
x)配列番号14に表記される核酸配列:
xi)配列番号16に表記される核酸配列;
xii)配列番号17に表記される核酸配列:
xiii)配列番号19に表記される核酸配列:
xiv)配列番号20に表記される核酸配列;
xv)配列番号22に表記される核酸配列:
xvi)配列番号23に表記される核酸配列:
xvii)配列番号1、2、4、5、7、8、10、11、13、14、16、17、19、20、22または23に、限定されたハイブリダイゼーション条件下でハイブリダイズし、成長ホルモン受容体拮抗剤活性を有するポリペプチドをコードする核酸配列を含む核酸分子。
ハイブリダイゼーション: 5xSSC、65℃にて16時間
洗浄2回: 2xSSC、室温(RT)にて各15分
洗浄2回: 0.5xSSC、65℃にて各20分
高限定条件(少なくとも80%の同一性を有する配列がハイブリダイズしうる条件)
ハイブリダイゼーション: 5−6xSSC、65−70℃にて16−20時間
洗浄2回: 2xSSC、RTにて各5−20分
洗浄2回: 1xSSC、55−70℃にて各30分
低限定条件(少なくとも50%の同一性を有する配列がハイブリダイズしうる条件)
ハイブリダイゼーション: 6xSSC、RTから55℃にて16−20時間
洗浄最低2回: 2x−3xSSC、RTから55℃にて各20−30分
本発明の好ましい実施例において、該核酸分子は配列番号2に表記される核酸配列を含む、または、より構成される。
本発明の好ましい実施例において、該核酸分子は配列番号4に表記される核酸配列を含む、または、より構成される。
本発明の好ましい実施例において、該核酸分子は配列番号5に表記される核酸配列を含む、または、より構成される。
本発明の好ましい実施例において、該核酸分子は配列番号7に表記される核酸配列を含む、または、より構成される。
本発明の好ましい実施例において、該核酸分子は配列番号8に表記される核酸配列を含む、または、より構成される。
本発明の好ましい実施例において、該核酸分子は配列番号10に表記される核酸配列を含む、または、より構成される。
本発明の好ましい実施例において、該核酸分子は配列番号11に表記される核酸配列を含む、または、より構成される。
本発明の好ましい実施例において、該核酸分子は配列番号13に表記される核酸配列を含む、または、より構成される。
本発明の好ましい実施例において、該核酸分子は配列番号16に表記される核酸配列を含む、または、より構成される。
本発明の好ましい実施例において、該核酸分子は配列番号17に表記される核酸配列を含む、または、より構成される。
本発明の好ましい実施例において、該核酸分子は配列番号19に表記される核酸配列を含む、または、より構成される。
本発明の好ましい実施例において、該核酸分子は配列番号20に表記される核酸配列を含む、または、より構成される。
本発明の好ましい実施例において、該核酸分子は配列番号22に表記される核酸配列を含む、または、より構成される。
本発明の好ましい実施例において、該核酸分子は配列番号23に表記される核酸配列を含む、または、より構成される。
本発明の態様として、該発明に基づく核酸によってコードされたポリペプチドを提供する。
i) 配列番号3に表記されるアミノ酸
ii) 配列番号6に表記されるアミノ酸
iii) 配列番号9に表記されるアミノ酸
iv) 配列番号12に表記されるアミノ酸
v) 配列番号15に表記されるアミノ酸
vi) 配列番号18に表記されるアミノ酸
vii) 配列番号21に表記されるアミノ酸
viii) 配列番号24に表記されるアミノ酸
ix) 配列番号25に表記されるアミノ酸
x) 配列番号26に表記されるアミノ酸
xi) 配列番号27に表記されるアミノ酸
xii) 配列番号28に表記されるアミノ酸
xiii) 配列番号29に表記されるアミノ酸
xiv) 配列番号30に表記されるアミノ酸
xv) 配列番号31に表記されるアミノ酸
xvi) 配列番号32に表記されるアミノ酸
ここで示したポリペプチドは成長ホルモン受容体拮抗剤活性を有する。
本発明の好ましい実施例において、該ポリペプチドは配列番号6に表記されるアミノ酸配列を含む、または、より構成される。
本発明の好ましい実施例において、該ポリペプチドは配列番号9に表記されるアミノ酸配列を含む、または、より構成される。
本発明の好ましい実施例において、該ポリペプチドは配列番号12に表記されるアミノ酸配列を含む、または、より構成される。
本発明の好ましい実施例において、該ポリペプチドは配列番号15に表記されるアミノ酸配列を含む、または、より構成される。
本発明の好ましい実施例において、該ポリペプチドは配列番号18に表記されるアミノ酸配列を含む、または、より構成される。
本発明の好ましい実施例において、該ポリペプチドは配列番号21に表記されるアミノ酸配列を含む、または、より構成される。
本発明の好ましい実施例において、該ポリペプチドは配列番号24に表記されるアミノ酸配列を含む、または、より構成される。
本発明の好ましい実施例において、該ポリペプチドは配列番号26に表記されるアミノ酸配列を含む、または、より構成される。
本発明の好ましい実施例において、該ポリペプチドは配列番号27に表記されるアミノ酸配列を含む、または、より構成される。
本発明の好ましい実施例において、該ポリペプチドは配列番号28に表記されるアミノ酸配列を含む、または、より構成される。
本発明の好ましい実施例において、該ポリペプチドは配列番号29に表記されるアミノ酸配列を含む、または、より構成される。
本発明の好ましい実施例において、該ポリペプチドは配列番号30に表記されるアミノ酸配列を含む、または、より構成される。
本発明の好ましい実施例において、該ポリペプチドは配列番号31に表記されるアミノ酸配列を含む、または、より構成される。
本発明の好ましい実施例において、該ポリペプチドは配列番号32に表記されるアミノ酸配列を含む、または、より構成される。
本発明の更なる態様として、配列番号6を含む、または、より構成される2つのポリペプチドよりなるホモダイマーを提供する。
本発明の更なる態様として、配列番号9を含む、または、より構成される2つのポリペプチドよりなるホモダイマーを提供する。
本発明の更なる態様として、配列番号12を含む、または、より構成される2つのポリペプチドよりなるホモダイマーを提供する。
本発明の更なる態様として、配列番号15を含む、または、より構成される2つのポリペプチドよりなるホモダイマーを提供する。
本発明の更なる態様として、配列番号18を含む、または、より構成される2つのポリペプチドよりなるホモダイマーを提供する。
本発明の更なる態様として、配列番号21を含む、または、より構成される2つのポリペプチドよりなるホモダイマーを提供する。
本発明の更なる態様として、配列番号24を含む、または、より構成される2つのポリペプチドよりなるホモダイマーを提供する。
本発明の更なる態様として、配列番号26を含む、または、より構成される2つのポリペプチドよりなるホモダイマーを提供する。
本発明の更なる態様として、配列番号27を含む、または、より構成される2つのポリペプチドよりなるホモダイマーを提供する。
本発明の更なる態様として、配列番号28を含む、または、より構成される2つのポリペプチドよりなるホモダイマーを提供する。
本発明の更なる態様として、配列番号29を含む、または、より構成される2つのポリペプチドよりなるホモダイマーを提供する。
本発明の更なる態様として、配列番号30を含む、または、より構成される2つのポリペプチドよりなるホモダイマーを提供する。
本発明の更なる態様として、配列番号31を含む、または、より構成される2つのポリペプチドよりなるホモダイマーを提供する。
本発明の更なる態様として、配列番号32を含む、または、より構成される2つのポリペプチドよりなるホモダイマーを提供する。
本発明の好ましい実施例においては、該ベクターは該発明に基づく核酸分子を発現する様に構築された発現ベクターである。
該発明に基づいた核酸を含むベクターはプロモーターやその他の制御配列を含む必要はなく、特に該ベクターが、安定にトランスフェクションするべく、ゲノムへの組み替えのために細胞に核酸を導入するのに使用される場合が該当する。好ましくは、ベクター中の核酸は、宿主細胞内で、適当なプロモーターまたはその他の転写制御エレメントに実行可能な形で連結されている。該ベクターは、多くの宿主で機能する二機能性の発現ベクターであってもよい。「プロモーター」とは、転写開始部位から上流にある核酸配列であり、転写に必要な全ての制御領域を含んでいるものを意味する。適当なプロモーターとは、真核または原核細胞中での発現における、常時発現、組織特異的、誘導可能、発生時、またはその他のプロモーターを含む。「実施可能な形で連結されている」とは、同一の核酸分子の一部として、該プロモーターから転写が開始されるべく、適切な位置及び向きを有して結合していることを意味する。プロモーターに実施可能な形で連結しているDNAは、該プロモーターの「転写開始制御下に」あることとなる。
好ましい実施例においては、該プロモーターは、常時発現、誘導可能、又は調節可能なプロモーターである。
好ましくは、該細胞は真核細胞である。さもなくば、該細胞は原核細胞である。
本発明の好ましい実施例としては、該細胞が、菌細胞(例えば、Pichia spp、Saccharomyces spp、Neurospora spp)、昆虫細胞(例えば、Spodoptera spp),哺乳類細胞(例えば、COS細胞、CHO細胞)、植物細胞により構成されるグループから選択される。
本発明の好ましい実施例においては、該医薬組成物は更なる治療薬と組み合わせている。
投与時において、本発明の医薬組成物は製薬上容認しうる調製状態で投与される。このような調製は、通常、製薬上容認しうる濃度の塩、緩衝剤、防腐剤、適合性のある担体、及び随意にその他の治療薬を含んでいてもよい。
本発明の医薬組成物は、注射を含む、いかなる既存の経路によっても投与されうる。このような投与及び塗布は、例えば、経口、静脈内、腹腔内、筋肉内、口腔内、関節内、皮下、局所(目)、皮膚(例えば、皮膚又は粘膜へのクリーム脂質溶性挿入物)、経皮、又は鼻腔内であってもよい。
医薬構成物は、また、任意に、塩化ベンザルコニウム、クロロブタノール、パラベンスおよびチメロサールといった、適当な保存剤を含んでいてもよい。
医薬組成物は、また、簡便のために、単位ごとの剤形になっていてもよく、製薬の当業者に周知のいかなる方法によって調製されてもよい。全ての方法は、活性物質を1または2以上の付属的な成分からなる担体と組み合わせるステップを含んでいる。一般に、該構成物は、活性物質と、液状担体、微細な粉末状の固形担体、またはその両方が、むらなく、緊密に組み合わされることにより調製され、その後、もし必要であれば、製剤として成形される。
非経口による投与に適した組成物は、簡便のため、滅菌済みの水溶性、又は非水溶性の調製物を含み、これらは、好ましくは、被投与者の血液と等張である。こうした調製物は、適当な分散剤又は湿潤剤および懸濁化剤を用いた公知の方法に従い、処方されてもよい。滅菌済みの注射可能な調製物は、また、滅菌済みの注射可能な溶液、又は、非毒性の非経口として容認しうる希釈剤又は溶媒、例えば、1,3−ブタンジオール溶液、による懸濁物であってもよい。利用可能な容認しうる溶媒としては、水、リンゲル液、および等張の食塩水がある。これに加えて、滅菌済みの不揮発性油は、従来、溶媒又は懸濁液として使用される。この目的のために、いかなる無菌の不揮発性油を使用してよく、これには合成モノ−又はジ−グリセリドが含まれる。さらに、オレイン酸のような脂肪酸を、注射可能なものに調製するのに使用してもよい。経口、皮下、静脈内、筋肉内等への投与に適当な担体の処方は、Remington‘s Pharmaceutical Sciences,Mack Publishing Co.Easton,PAに見出しうる。
本発明の好ましい方法としては、該ポリペプチドを静脈内に投与する。
これに代わる本発明の好ましい方法としては、該ポリペプチドを皮下に投与する。
本発明の好ましい方法としては、該成長ホルモン過剰は末端肥大症を引き起こす。
本発明のさらなる態様として、本発明に基づく少なくとも1つのポリペプチドを有効容量投与することを含む、癌で苦しむヒト被験者の治療方法を提供する。
本発明の好ましい方法において、該癌は前立腺癌である。
本明細書の詳細な説明及び請求の範囲を通して、単数表現は、文脈上、単数に限定することが求められていない限り、複数の場合も包含する。特に、不定冠詞が使われている場合は、該明細書は、文脈上、単数に限定することを求められていない限り、単数のみならず複数をも想定しているものと理解されるべきである。
本発明の特別な態様、実施例又は例と関連して描写される特徴、整数、特性、化合物、化学成分、又はグループは、それと共には両立しえない場合を除いて、ここで記載されているその他のいかなる態様、実施例又は例に応用できるものと理解されるべきである。
表1は1B8v2画分のBradford法を示す。
1B8拮抗剤分子の構築
該分子は、GH分子のサイト2(低親和性サイト)中の120位グリシンをアルギニンに変異させることにより構築される(G120R)。該GH分子の、高親和性サイト1を介したGH受容体への結合には影響はないが、GHサイト2を介した受容体への結合は、アルギニン分子のかさばる側鎖により阻害される。
300bpのBsu361−Not1断片をベクターから切り出し、哺乳類発現プラスミドpGHsecTag−1B7につなぎ(GHをGHR細胞外ドメインA及びBに連結)、pGHsecTag−1B8を生産した(GH分泌シグナルにより分泌発現は誘導される)。図9参照。
該分子はGH分子のサイト1及びサイト2の両方において、アミノ酸を変異することにより構築される。高親和性サイト1を介したGH分子のGH受容体への結合はこれら変異によって亢進されるが、GHサイト2を介した該受容体との結合は1つのグリシンをアルギニンに置き換えることで阻害される。
単ストランドDNA特異的変異というやり方が、サイト1及びサイト2での変異を含むGH分子を生産するのに使われた。適当な制限酵素部位を用いて、該分子のTrc−His及びpET21a(+)発現プラスミドへのクローニングを行った。PCRを用いて、GHシグナル配列(GHss)を含み、Nhe1及びNot1サイトを側面に持つクローンを構築した。これを哺乳類発現プラスミドpGHsecTag−1B8v0につなぎ(GHをGHR細胞外ドメインA及びBに連結)、pGHsecTag−1B9v0を産生した(GH分泌シグナルにより分泌発現は誘導される)。図10参照。
プラスミドpGHsecTag−1B7v3は制限酵素HindIII−EcoRVを用いて切断され、該断片はプラスミドpGHsecTag−1B8v0及び1B9v0に連結され、プラスミドpGHsecTag−1B8v1及び1B9v1が構築された(これらの分子は3‘末端に外側配列を有していない)。次の段階で、リンカー領域の制限酵素部位は除去され、プラスミドpGHsecTag−1B8v2及び1B9v2が産生された。これは、人工遺伝子合成を用いて達成され、オリジナルのリンカーはG4Sx5リンカーにより置換された。
以下の断片は、側面に繋がる制限酵素部位、Narl及びAvrilと共に、人工遺伝子合成により構築され、pGHsecTag−1B8v1又は1B9v1のいずれかにつなげられた;図11及び12参照。
各キメラ分子の体外での生物活性を、GH特異的ルシフェラーゼ受容体アッセイを用いて評価した。基本的に、ヒト由来の細胞株は、安定にヒトGH受容体を遺伝子導入し、一過的にルシフェラーゼシグナルレポーターを導入する。本アッセイはGHの生理的レベルを検出する。図14参照。
分泌産物として1B8v2及び1B9v2の両方を発現するCHO Flp−In細胞株を蛋白不含培地にて培養した。培地を回収、濃縮し、アフィニティー精製前に浄化した。精製のために、20mlのNHS−活性化Sepharose4 Fast Flow樹脂にhGHに対する5E1モノクローン抗体を結合したものを調製した。通常は、培地サンプルを10倍濃縮し、精製前に結合用緩衝液(25mM Tris HCl/150mM NaCl,pH7.4)にて1:1に希釈した。
試料をカラムに、流速2ml/分にてロードした。洗浄後、結合した蛋白を1ml/分
で200mM グリシン、pH2.7にて溶出し、1M Tris HCl、pH9.0にて中和した。サンプルはSDS−PAGEにて分析した(図15a及び15b参照)。図17a及び17bは、未変性の成長ホルモンキメラ蛋白と比較して、1B9が二量体を形成していることを示している。
6匹の健康な正常ラットに、1nMol(75μg)の蛋白を皮下(SC、図16a)又は静脈内(IV、図16b)より単回投与した。対照ラットは溶媒のみを投与した。サンプルを10日の期間中、時間間隔を取って取得し、インハウスのGH Elisaアッセイを用いて1B8の有無を評価した。
Claims (10)
- 成長ホルモン受容体拮抗剤活性を有するポリペプチドをコードし、配列番号22および配列番号23からなる群から選択されるヌクレオチド配列に表記される核酸配列を含む核酸分子。
- 配列番号24および配列番号32からなる群から選択されるアミノ酸配列に表記されるアミノ酸配列を含み、成長ホルモン受容体拮抗剤活性を有するポリペプチド。
- 配列番号24および配列番号32からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む2つのポリペプチドを含むホモダイマー。
- 賦形剤又は担体を含み、請求項2記載のポリペプチド又は請求項3に記載のホモダイマーを含む医薬組成物。
- 前記組成物が更なる治療薬と組み合わされた請求項4に記載の医薬組成物。
- 請求項2に記載のポリペプチド又は請求項3に記載のホモダイマーを含む、成長ホルモン過剰の治療のための医薬組成物。
- 前記ポリペプチド又はホモダイマ−が毎週投与される請求項6に記載の医薬組成物。
- 前記ポリペプチド又はホモダイマ−が隔週投与される請求項6に記載の医薬組成物。
- 前記ポリペプチド又はホモダイマ−が毎月投与される請求項6に記載の医薬組成物。
- 前記成長ホルモン過剰が巨人症又は末端肥大症である、請求項6から9のいずれか一項に記載の医薬組成物。
Applications Claiming Priority (5)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US97901007P | 2007-10-10 | 2007-10-10 | |
US60/979,010 | 2007-10-10 | ||
GB0719818.7 | 2007-10-11 | ||
GBGB0719818.7A GB0719818D0 (en) | 2007-10-11 | 2007-10-11 | Growth hormone fusion polypeptides |
PCT/GB2008/003056 WO2009047474A2 (en) | 2007-10-10 | 2008-09-10 | Modified growth hormone polypeptides |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2011507487A JP2011507487A (ja) | 2011-03-10 |
JP2011507487A5 JP2011507487A5 (ja) | 2011-10-27 |
JP5697983B2 true JP5697983B2 (ja) | 2015-04-08 |
Family
ID=38787949
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2010528468A Expired - Fee Related JP5697983B2 (ja) | 2007-10-10 | 2008-09-10 | 修飾成長ホルモンポリペプチド |
Country Status (17)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US8273552B2 (ja) |
EP (2) | EP2886553A1 (ja) |
JP (1) | JP5697983B2 (ja) |
KR (1) | KR20100067686A (ja) |
CN (1) | CN101932600B (ja) |
AR (1) | AR068038A1 (ja) |
AU (1) | AU2008309386A1 (ja) |
BR (1) | BRPI0818639A2 (ja) |
CA (1) | CA2701369A1 (ja) |
DK (1) | DK2209798T3 (ja) |
ES (1) | ES2532600T3 (ja) |
GB (1) | GB0719818D0 (ja) |
IL (1) | IL203073A0 (ja) |
MX (1) | MX2010003892A (ja) |
RU (1) | RU2471808C2 (ja) |
TW (1) | TW200918098A (ja) |
WO (1) | WO2009047474A2 (ja) |
Families Citing this family (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
GB0606946D0 (en) * | 2006-04-06 | 2006-05-17 | Asterion Ltd | Polypeptide antagonist |
GB201104285D0 (en) * | 2011-03-15 | 2011-04-27 | Asterion Ltd | Modified receptor fusion proteins |
Family Cites Families (10)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CH20A (fr) * | 1888-12-05 | Joseph Magnat | Une pompe à bière automatique fonctionnant par la pression de l'eau | |
DE69635026T2 (de) * | 1995-09-21 | 2006-05-24 | Genentech Inc., San Francisco | Varianten des menschlichen wachstumshormons |
GB0018891D0 (en) * | 2000-08-01 | 2000-09-20 | Novartis Ag | Organic compounds |
CA2447632C (en) * | 2000-06-16 | 2011-08-02 | Asterion Limited | Fusion protein agonist comprising a growth hormone binding portion and an external domain of a growth hormone receptor |
US7704509B2 (en) | 2001-11-21 | 2010-04-27 | United States Of America | Recovery of recombinant human parainfluenza virus type 1 (HPIV1) from cDNA and use of recombinant HPIV1 in immunogenic compositions and as vectors to elicit immune responses against PIV and other human pathogens |
GB2389115B (en) * | 2001-12-14 | 2005-03-16 | Asterion Ltd | Polypeptide having a plurality of modified growth hormone receptor binding domains of growth hormone |
WO2004090135A2 (en) * | 2003-04-09 | 2004-10-21 | Asterion Limited | Cytokine polypeptides and antibodies containing a signal sequence for the attachement of glycosylphosphatidylinositol |
NZ553224A (en) * | 2004-07-26 | 2009-05-31 | Asterion Ltd | Linkers |
GB0717985D0 (en) | 2007-07-20 | 2007-10-24 | Asterion Ltd | Growth hormone fusion proteins |
WO2009103965A1 (en) * | 2008-02-19 | 2009-08-27 | Asterion Limited | Modified linkers |
-
2007
- 2007-10-11 GB GBGB0719818.7A patent/GB0719818D0/en not_active Ceased
-
2008
- 2008-08-20 TW TW097131758A patent/TW200918098A/zh unknown
- 2008-08-26 AR ARP080103700A patent/AR068038A1/es not_active Application Discontinuation
- 2008-09-10 EP EP14197613.4A patent/EP2886553A1/en not_active Withdrawn
- 2008-09-10 EP EP08788565.3A patent/EP2209798B1/en not_active Not-in-force
- 2008-09-10 AU AU2008309386A patent/AU2008309386A1/en not_active Abandoned
- 2008-09-10 US US12/678,282 patent/US8273552B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2008-09-10 JP JP2010528468A patent/JP5697983B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2008-09-10 ES ES08788565.3T patent/ES2532600T3/es active Active
- 2008-09-10 CA CA2701369A patent/CA2701369A1/en not_active Abandoned
- 2008-09-10 DK DK08788565T patent/DK2209798T3/en active
- 2008-09-10 KR KR1020107010215A patent/KR20100067686A/ko not_active Application Discontinuation
- 2008-09-10 CN CN200880106595.1A patent/CN101932600B/zh not_active Expired - Fee Related
- 2008-09-10 MX MX2010003892A patent/MX2010003892A/es not_active Application Discontinuation
- 2008-09-10 RU RU2010103159/10A patent/RU2471808C2/ru not_active IP Right Cessation
- 2008-09-10 WO PCT/GB2008/003056 patent/WO2009047474A2/en active Application Filing
- 2008-09-10 BR BRPI0818639 patent/BRPI0818639A2/pt not_active Application Discontinuation
-
2009
- 2009-12-31 IL IL203073A patent/IL203073A0/en unknown
-
2012
- 2012-08-22 US US13/592,252 patent/US20120322735A1/en not_active Abandoned
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
AU2008309386A1 (en) | 2009-04-16 |
RU2010103159A (ru) | 2011-11-20 |
US20120322735A1 (en) | 2012-12-20 |
US8273552B2 (en) | 2012-09-25 |
WO2009047474A2 (en) | 2009-04-16 |
RU2471808C2 (ru) | 2013-01-10 |
EP2209798B1 (en) | 2014-12-31 |
IL203073A0 (en) | 2010-11-30 |
WO2009047474A3 (en) | 2010-09-02 |
GB0719818D0 (en) | 2007-11-21 |
EP2209798A2 (en) | 2010-07-28 |
ES2532600T3 (es) | 2015-03-30 |
JP2011507487A (ja) | 2011-03-10 |
CN101932600B (zh) | 2014-05-28 |
BRPI0818639A2 (pt) | 2015-04-07 |
KR20100067686A (ko) | 2010-06-21 |
CA2701369A1 (en) | 2009-04-16 |
US20100197589A1 (en) | 2010-08-05 |
CN101932600A (zh) | 2010-12-29 |
MX2010003892A (es) | 2010-05-17 |
EP2886553A1 (en) | 2015-06-24 |
DK2209798T3 (en) | 2015-03-23 |
TW200918098A (en) | 2009-05-01 |
AR068038A1 (es) | 2009-10-28 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
TWI760333B (zh) | Gdf15融合蛋白及其用途 | |
AU778939B2 (en) | Expression and export of anti-obesity proteins as Fc fusion proteins | |
FI117055B (fi) | Menetelmä asyloidun insuliinin valmistamiseksi | |
EP0954588B1 (en) | Ob fusion protein compositions and methods | |
US8703717B2 (en) | Growth hormone polypeptides and methods of making and using same | |
JP2010043100A (ja) | 修飾ポリペプチド | |
AU2008278907B2 (en) | Growth hormone fusion proteins | |
EP2318529A2 (en) | Fgfr extracellular domain acidic region muteins | |
JP5697983B2 (ja) | 修飾成長ホルモンポリペプチド | |
JPH02207099A (ja) | PTHrP関連ペプチド、その製造法及び用途 | |
JP6029601B2 (ja) | 改変受容体融合タンパク質 | |
EP3711772A1 (en) | Recombinant proteins and fusion proteins | |
CA3190959A1 (en) | Exendin-4 peptide analogues |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20110830 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20110830 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20130222 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20130516 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20130523 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20130614 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20130621 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20130718 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20130725 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20130821 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20140418 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20140710 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20140717 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20141017 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20150130 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20150212 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 5697983 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |