JP5296054B2 - 診断用液体のマイクロ流体装置内への圧電ディスペンシング - Google Patents
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Description
生体試料、たとえば尿、血液、唾液、又は粘液又は組織の抽出物中の分析対象物量を測定するための多くの器具が開発されてきた。一般的には、試料液体は、分析対象物と反応する試薬を含む表面に適用される。試薬は、分析対象物量が測定され、それに関連性のある検出可能な反応を起こす。表面は、普通は本質的に親水性かあるいは疎水性であり、たとえばポリスチレンと比較したろ紙である。いくつかの装置は表面の組み合わせを用い、たとえば尿検査片試験で、疎水性のポリスチレンのハンドルの先端に親水性のろ紙を用いる。一般的な試験では、未反応の試薬を含む細片が、液体試料中に浸漬され、すなわち十分に浸されて、試料中の分析対象物と試薬との間の反応が、普通は任意の方法によって測定される。未反応の試薬自体は、水溶性又は不水溶性であってもよい。これらを付着させるか又は固定化して、多孔質基体内で乾燥させる。基体は、支持面上に取り付けられるか又は設置される。加えて、試薬を含むか又は含まない液体を検定中に用いることができる。乾燥させた試薬をすでに含む基体の表面に、液体試薬を分析対象物との反応の前、後又は最中に適用することができるが、一般的には試料が適用された後に加えられる。試料及び試薬の量をできるかぎり少なくすべきなのは、費用及び利便性に関する明白な理由からである。あまり明白でないのは、試薬を含む表面に、少量の液体試薬又は生体試料を適用した場合、均一で正確な反応を得ることが困難であることが多いことである。分析対象物の試薬との反応は、より少量の分析対象物での反応領域が存在する場合よりも小さい。
生体試料とそれに関連する液体とを、生体試料の検定に用いられるマイクロ流体装置に加えることは、さまざまな手法によって行うことができる。血液、尿等の非常に少ない試料は、そのような装置内に導入され、そこで試料内に発見される分析対象物の存在及び量を示すことが可能である試薬と接触する。
本明細書で用いられる以下の用語は、次のように定義される。
本発明は、多孔質基体(「パッド」)内部で生じる反応の改善された制御を提供し、基体は乾燥した試薬を含み、マイクロ流体装置内部に位置付けられる。反応は、試料液体と、試薬を含むパッドとの間の相互作用によって起こる。
米国特許出願第10/608,671号は、US2004/0265172A1で公開され、マイクロ流体装置に含まれた試薬と生体試料との接触への参入及び移動について述べている。そのような装置は、一般的には総容量約0.1〜200μLを有するが、その用途に依存して、大容量又は小容量を有していてもよい。通常、マイクロ流体装置は、毛管止めまでか、又は第2の液体の必要量を誘導するまで、所定量の第2の液体で第1の液体を動かすことによって動作することができる。本発明の方法は、マイクロ流体装置内の液体のより正確な動きを提供する。
以下の略語が用いられる。
PBS−リン酸緩衝生理食塩水
BSA−ウシ血清アルブミン
FITC−フルオレセインイソチオシアネート
前記の実施例で用いられたマイクロディスペンシングヘッドは、約100pLの液滴を85滴/ミリ秒の割合で計量分配することが可能であった。液体が計量分配されないときに間隔で区切られた計量分配期間に加え、各期間の計量分配量、すなわち各期間の液滴数を制御することができた。この能力は、マイクロ流体装置を通る試料及び希釈剤の移動をより正確に制御することを可能にするものであった。上記のHbA1C 検定では、試料と結合体とのインキュベーションのための適切な時間と、検定片を洗浄する前に試料/結合体の反応を完了させることが重要であった。これには、試料の進行を監視して、希釈剤の追加のタイミングを制御することが求められる。試料及び試料/結合体を一定の速度で移動させて検定を最適化することが重要である。これは、試料及び試料/結合体の位置が連続的に監視されて、それによって希釈剤の追加が制御されているときに可能である。
Claims (21)
- 少なくとも1つの試料入口ポートと、少なくとも1つの通気口と、少なくとも1つの試薬を含むチャンバとを有するマイクロ流体装置で、生体液中の分析対象物量を検定する方法であって、
(a)前記マイクロ流体装置の前記少なくとも1つの試料入口ポート内に、前記生体液の、毛管力によって前記少なくとも1つの試料入口と連通している毛管通路を通って毛管止めまで移動する試料を計量分配することと、
(b)前記試料に前記毛管止めを通過させるために十分であり、前記試料が導入された後に所定の時間で加えられる(a)の前記試料と異なる一部の液体を、液滴が計量分配されないときは時間間隔によって区切られ、0.05〜1mmの範囲内の直径を有する液滴群の形で、(a)の前記少なくとも1つの入口ポート内に計量分配することと、
を含む方法。 - 前記毛管止めを越えてすべての前記試料を前記マイクロ流体装置内の位置に押し退けるのに十分な量の、(b)の前記異なる液体が導入される、請求項1記載の方法。
- 請求項2の前記押し退けられた試料が、前記少なくとも1つの試薬を含むチャンバに計量分配された試薬に接触し、前記少なくとも1つのチャンバ内にある空気を押し退ける、請求項2記載の方法。
- 前記試料及び前記試薬が反応して、前記試料中の前記分析対象物量に関連する検出可能な結果をもたらす、請求項3記載の方法。
- 前記押し退けられた試料が、調整剤又はキャリア剤に接触して、試料が続いて試薬と接触する準備をする、請求項2記載の方法。
- (b)の前記異なる液体の前記液滴群が、約3万〜15万滴/秒の割合で、マイクロディスペンシングノズルによって供給される、請求項1記載の方法。
- 前記マイクロ流体装置が、総容量約0.1〜200μLを有する、請求項1記載の方法。
- 最小液滴群が、体積約100pLを有する、請求項1記載の方法。
- 前記計量分配のタイミング精度が、約0.01ミリ秒である、請求項8記載の方法。
- 少なくとも1つの試料入口ポートと、少なくとも1つの通気口と、少なくとも1つの試薬を含むチャンバとを有するマイクロ流体装置で、前記少なくとも1つの入口ポート内に前記生体液の試料を計量分配することと、前記少なくとも1つの入口ポート内に前記試料と異なる液体を計量分配して前記試料を押し退けることとを含む、生体液中の分析対象物量を検定する方法において、改善点が、前記異なる液体を、0.05〜1mmの範囲内の直径を有し、液滴が計量分配されないときに時間間隔によって区切られる液滴群の形で計量分配することを含む方法。
- 前記生体液の試料が、毛管力によって、少なくとも1つの試料入口と連通している毛管通路内の毛管止めまで移動し、前記異なる液体が、前記試料に前記毛管止めを通過させるために十分な量で計量分配される、請求項10記載の方法。
- 前記生体液の試料が、前記毛管止めを通過して、前記少なくとも1つの試薬を含むチャンバ内に送り込まれる、請求項11記載の方法。
- 前記試料及び前記試薬が反応して、前記試料中の前記分析対象物量に関連する検出可能な結果をもたらす、請求項11記載の方法。
- 前記押し退けられた試料が、調整剤又はキャリア剤に接触して、試料が続いて試薬と接触する準備をする、請求項11記載の方法。
- 前記異なる液体の前記液滴群が、約3万〜15万滴/秒の割合で、マイクロディスペンシングノズルによって計量分配される、請求項10記載の方法。
- 前記マイクロ流体装置が、総容量約0.1〜200μLを有する、請求項10記載の方法。
- 最小液滴群が、体積約100pLを有する、請求項10記載の方法。
- 前記計量分配のタイミング精度が、約0.01ミリ秒である、請求項10記載の方法。
- 計量分配された異なる液体の体積が約5nLである、請求項11記載の方法。
- 少なくとも1つの入口ポートと、少なくとも1つの通気口と、少なくとも1つのチャンバとを有するマイクロ流体装置を作動させる方法であって、
(a)前記少なくとも1つの入口ポート内に、第1の液体を、0.05〜1mmの範囲内の直径を有する液滴群の形で所定量を計量分配することと、
(b)前記第1の液体を導入した後に所定時間で加えられ、前記少なくとも1つの入口ポートから前記第1の液体を押し退けるのに十分な所定量の第2の液体を、液滴が計量分配されないときは時間間隔によって区切られ、0.05〜1mmの範囲内の直径を有する液滴群の形で、前記少なくとも1つの入口ポート内に計量分配することと、
を含む方法。 - 前記マイクロ流体装置が、前記少なくとも1つの入口ポートと、前記少なくとも1つのチャンバとの間で連通している毛管通路を含み、前記第1の液体が、前記入口ポートから前記少なくとも一つのチャンバの入口の毛管止めまで、毛管力によって移動する、請求項20記載の方法。
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