JP5009533B2 - Reagent container - Google Patents

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この発明は、試薬用容器に関するものである。   The present invention relates to a reagent container.

近年、化学反応やDNA反応、たんぱく質反応などをチップ上にて行うμ−Total Analysis System技術やLab−on−Chip技術が研究され実現してきており、今まで大型の実験装置や大量の試薬が必要であった反応実験が数ミリ角以下のチップで少量の試薬で行えるようになってきている。
DNA反応の例としては、酵素反応によるDNA増幅反応や、既知の配列を有するプローブDNAを用い、ハイブリダイゼーション法により検体DNAの配列を検出する方法、DNAの配列決定の中でもSNP(一塩基多型)の検出法などがある。
SNPの検出法としては、インベーダー法、タックマンPCR法をタイピング工程に用いる方法が知られている(特許文献1参照)。
In recent years, μ-Total Analysis System technology and Lab-on-Chip technology for performing chemical reactions, DNA reactions, protein reactions, etc. on the chip have been researched and realized, and so far large-scale experimental devices and a large amount of reagents are required. It is now possible to perform reaction experiments with a small amount of reagent on a chip of several millimeters or less.
Examples of the DNA reaction include DNA amplification reaction by enzymatic reaction, a method of detecting a sample DNA sequence by a hybridization method using a probe DNA having a known sequence, and SNP (single nucleotide polymorphism) in DNA sequencing. ) Detection method.
As a method for detecting SNP, a method using an invader method or a Tuckman PCR method in a typing process is known (see Patent Document 1).

一般的にDNAを用いた検出反応には血液等を採取し抽出したものを用いるが、採取する血液等の試料を少量で済ませるため、検体DNAの調整法として、酵素反応によるDNA増幅反応を用いることが多い。
資料中に含まれる微量のDNAを増加させる方法には主種の方法が知られているが、その代表的な方法として、PCR増幅反応が知られている。この方法は、試料中の二本鎖DNAの分離工程(一本鎖に変性)、アニーリング工程(一本鎖DNAとプライマーを結合)、伸長工程(プライマーからDNAを合成)から構成される3工程を1サイクルとし、このサイクルを繰り返して試料中のDNAを増加させる方法である。分離工程は約95℃、アニーリング工程は50〜60℃、伸長工程は60〜80℃で行われることからPCR増幅反応はこの熱サイクルを繰り返す必要がある。また、1サイクルに要する時間はせいぜい数分程度であるが、このサイクルを繰り返して必要量のDNAを増幅するためにはそれなりの時間を要する。
In general, a detection reaction using DNA is performed by collecting and extracting blood or the like. However, in order to use a small amount of sample such as blood to be collected, a DNA amplification reaction by an enzymatic reaction is used as a method for preparing a sample DNA. There are many cases.
As a method for increasing a small amount of DNA contained in a document, a main method is known, and a PCR amplification reaction is known as a typical method. This method consists of three steps consisting of a separation step of double-stranded DNA in a sample (denaturation into single strands), an annealing step (binding single-stranded DNA and primers), and an extension step (synthesize DNA from primers). Is one cycle, and this cycle is repeated to increase the DNA in the sample. Since the separation step is performed at about 95 ° C., the annealing step is performed at 50 to 60 ° C., and the extension step is performed at 60 to 80 ° C., the PCR amplification reaction needs to repeat this thermal cycle. The time required for one cycle is about several minutes at most, but it takes some time to amplify a necessary amount of DNA by repeating this cycle.

SNPの検出法の一つであるインベーダー法は、一部が自己ハイブリダイゼーションして二本鎖になっており、蛍光標識(レポーター)及び蛍光を失活させるクエンチャーを有するオリゴヌクレオチド(フレットプローブ)、二種の非標識オリゴヌクレオチド(アレルプローブ、インベーダープローブ)、及び制限酵素(クリベース)を作用させ、蛍光検出によりSNPの検出を行う方法である。
このインベーダー法においては、まずアレルプローブの一部を検査対象のDNAの塩基配列のうちSNPを中心として一方の側にハイブリダイゼーションさせる。次にインベーダープローブを検査対象のもう一方の側にハイブリダイゼーションさせる。この時、SNPの部位のところで検査対象、アレルプローブ、インベーダープローブが三重に重なった状態になる。この三重に重なった部分に制限酵素(クリベース)を作用させることによりアレルプローブの検査対象のDNAとハイブリだーゼーションしていない部分(フラップ)を切断し遊離させる。
The invader method, which is one of the SNP detection methods, is partially self-hybridized to become double-stranded, and has a fluorescent label (reporter) and a quencher that deactivates fluorescence (fret probe). In this method, two types of unlabeled oligonucleotides (allele probe, invader probe) and restriction enzyme (chrybase) are allowed to act, and SNP is detected by fluorescence detection.
In this invader method, first, a part of the allele probe is hybridized to one side of the base sequence of the DNA to be examined centering on the SNP. The invader probe is then hybridized to the other side of the test object. At this time, the test object, the allele probe, and the invader probe are in a state where they are overlapped at the SNP site. A restriction enzyme (chrybase) is allowed to act on the triple overlapped portion to cleave and release the portion (flap) that has not hybridized with the DNA to be examined by the allele probe.

次に遊離したフラップと、フレットプローブをハイブリダイゼーションさせる。これによりフレットの自己ハイブリダイゼーションしている部分に、フラップが一部重なり、フレットプローブ、フラップが三重に重なった状態になる。フレットプローブには蛍光標識(レポーター)及び蛍光を失活させるクエンチャーが付いているが、この三重に重なった部分に制限酵素(クリベース)を作用させると、蛍光標識(レポーター)が遊離し、クエンチャーから離されるため、蛍光を発する。なお、この場合、励起源としては一般的に紫外線が用いられる。   Next, the released flap is hybridized with the fret probe. As a result, the flap partially overlaps with the self-hybridized portion of the fret, and the fret probe and the flap are overlapped in triplicate. The fret probe has a fluorescent label (reporter) and a quencher that inactivates fluorescence. When a restriction enzyme (cribase) is allowed to act on this triplet, the fluorescent label (reporter) is released and the quencher is released. Since it is separated from the char, it emits fluorescence. In this case, ultraviolet light is generally used as the excitation source.

チップを用いて、これらの反応を行う場合、DNAの配列を決定する場合などは、スライドガラス上にプローブDNAを固定し、その上でハイブリダイゼーション反応を行う方法が知られている。
また、チップ上に設けたウェルと呼ばれる微小な穴やくぼみが形成され反応場として用いることも知られている。ウェルは、半導体やガラスにエッチングで設けたり、穴のあいた板を積層することで形成されていた。
ウェルを用いる場合、試薬を基板上に固定する必要がなく、またPCR反応などにも適用できる。
また、これらのウェルは、極微量な試薬を所定の位置に充填後、緩衝液などその他の試薬との混合場として利用できる。
ウェルタイプのものとしては、例えば、基板表面に多数のウェルが設けられている検出用基板が開示されている(特許文献2、3、4参照)。
また、内部に流路を設け、両端に開口部を有する、PCR反応用の装置も知られている(特許文献5参照)。
これらはいずれもウェル内の空洞部に試薬を供給するものであるが、酵素や核酸など充填する試薬の量も極微量である。ここで、ウェル内に試薬を注入したり、ウェル内の試薬を分取したりするときには、注射針やスポイトなどによって試薬を吸引・吐出することによって行われる。
特開2002−300894号公報 国際公開第2003/031972号パンフレット 特開平09−99932号公報 特開2003−70456号公報 特許第2759071号公報
When these reactions are performed using a chip, or when the sequence of DNA is determined, a method is known in which probe DNA is immobilized on a slide glass and a hybridization reaction is performed thereon.
It is also known that a minute hole or depression called a well provided on a chip is formed and used as a reaction field. The well has been formed by etching a semiconductor or glass or laminating a plate with holes.
In the case of using wells, it is not necessary to fix the reagent on the substrate, and it can be applied to a PCR reaction or the like.
In addition, these wells can be used as a mixing place with other reagents such as a buffer solution after a very small amount of reagent is filled in a predetermined position.
As a well-type substrate, for example, a detection substrate having a large number of wells provided on the substrate surface is disclosed (see Patent Documents 2, 3, and 4).
An apparatus for PCR reaction is also known which has a flow path inside and has openings at both ends (see Patent Document 5).
These all supply reagents to the cavity in the well, but the amount of reagents to be filled such as enzymes and nucleic acids is extremely small. Here, when the reagent is injected into the well or the reagent in the well is dispensed, the reagent is aspirated and discharged by an injection needle or a dropper.
Japanese Patent Laid-Open No. 2002-300894 International Publication No. 2003/031972 Pamphlet JP 09-99932 A JP 2003-70456 A Japanese Patent No. 2759071

しかしながら、注射針などによって吸引・吐出しようとすると、ウェル内の試薬がウェル外に飛散してしまうという問題がある。すなわち、ウェル内に試薬を注入するときには、注射針などからウェル内に試薬を吐出させるが、このときウェル外に試薬が飛散するおそれがある。また、ウェル内の試薬を分取するときには、その試薬に注射針などを入れて試薬を吸引するが、試薬に注射針などを入れたときや試薬を吸引しているとき、さらには試薬を吸引してから注射針などを引き抜くときに、試薬がウェル外に飛散するおそれがある。そして、ウェル外に試薬が飛散すると、他のウェル内に試薬が混入してしまうおそれがある。   However, there is a problem that, when trying to suck and discharge with an injection needle or the like, the reagent in the well is scattered outside the well. That is, when injecting a reagent into the well, the reagent is discharged into the well from an injection needle or the like. At this time, the reagent may be scattered outside the well. Also, when separating the reagent in the well, an injection needle is inserted into the reagent and the reagent is aspirated. However, when the injection needle is inserted into the reagent or when the reagent is aspirated, the reagent is further aspirated. Then, when the injection needle or the like is pulled out, the reagent may be scattered out of the well. And if a reagent scatters out of a well, there exists a possibility that a reagent may mix in another well.

本発明は、このような事情に鑑みてなされたものであって、凹部又は流路内への試薬の注入や、凹部又は流路からの試薬の分取などを容易かつ適切に行うことができ、迅速かつ高精度に試験を行うことができる試薬用容器を提供することを目的とする。   The present invention has been made in view of such circumstances, and can easily and appropriately perform the injection of the reagent into the recess or the flow path, the separation of the reagent from the recess or the flow path, and the like. An object of the present invention is to provide a reagent container capable of performing a test quickly and with high accuracy.

上記課題を解決するために、本発明は以下の手段を提供する。
本発明に係る試薬用容器は、試薬が注入される凹部又は流路と、これら凹部又は流路の開口部を覆う第1の蓋部材と、この第1の蓋部材を介して前記開口部を覆う第2の蓋部材と、を備え、前記第1の蓋部材と前記第2の蓋部材との間にクリアランスが設けられ、前記凹部が、この凹部の開口部を構成する大径凹部と、この大径凹部の底部に設けられ、前記大径凹部よりも小径に設定された小径凹部とを備えており、前記小径凹部に前記第1の蓋部材が設けられ、前記大径凹部に前記第2の蓋部材が設けられていることを特徴とする。
In order to solve the above problems, the present invention provides the following means.
The reagent container according to the present invention includes a recess or a channel into which a reagent is injected, a first lid member that covers an opening of the recess or the channel, and the opening through the first lid member. e Bei and second cover members for covering, a clearance is provided between the said first cover member and the second lid member, the recess, and a large-diameter concave portion constituting the opening portion of the recess A small-diameter concave portion provided at the bottom of the large-diameter concave portion and having a smaller diameter than the large-diameter concave portion, the first lid member being provided in the small-diameter concave portion, A second lid member is provided .

この発明に係る試薬用容器においては、第1の蓋部材と第2の蓋部材とにわたって注射針やスポイトなどを貫通させて、凹部又は流路に試薬を注入し、凹部又は流路に注入された試薬を分取する。このとき、試薬の飛沫が凹部又は流路の外方に漏出しようとする動きが、第1の蓋部材及び第2の蓋部材によって規制される。
これにより、第1の蓋部材及び第2の蓋部材によって、凹部又は流路の外に試薬が飛散することを防止することができる。
また、クリアランスを介して第1の蓋部材と第2の蓋部材とにわたって注射針などを貫通させて、凹部又は流路に試薬を注入し、凹部又は流路に注入された試薬を分取する。このとき、試薬の飛沫が凹部又は流路の外方に漏出しようとする動きが、まず第1の蓋部材によって規制される。そして、第1の蓋部材の外に試薬が漏出したとしても、その試薬はクリアランス内に浸入し、さらに、凹部又は流路の外方に漏出しようとするクリアランス内の試薬の動きが第2の蓋部材によって規制される。
これにより、試薬が凹部又は流路の外に飛散することを確実に防止することができる。
また、第1の蓋部材と第2の蓋部材との間にクリアランスを確実に設けることができる。
In the reagent container according to the present invention, the injection needle, the syringe, or the like is passed through the first lid member and the second lid member, the reagent is injected into the recess or the channel, and is injected into the recess or the channel. Collect the reagent. At this time, the movement of the droplets of the reagent trying to leak out of the recess or the flow path is restricted by the first lid member and the second lid member.
Thereby, it is possible to prevent the reagent from splashing out of the recess or the flow path by the first lid member and the second lid member.
Further, an injection needle or the like is passed through the first lid member and the second lid member through the clearance, the reagent is injected into the recess or the channel, and the reagent injected into the recess or the channel is collected. . At this time, the movement that the droplets of the reagent try to leak out to the outside of the recess or the flow path is first regulated by the first lid member. Even if the reagent leaks out of the first lid member, the reagent enters the clearance, and the movement of the reagent in the clearance that attempts to leak out of the recess or the flow path is the second It is regulated by the lid member.
Thereby, it can prevent reliably that a reagent scatters out of a recessed part or a flow path.
Moreover, a clearance can be reliably provided between the first lid member and the second lid member.

また、本発明に係る試薬用容器は、前記凹部の前記開口部の周囲に、上方に立ち上げられた凸部が設けられ、前記第2の蓋部材は前記凸部に接触するように設けられていることを特徴とする。 In the reagent container according to the present invention, a convex portion raised upward is provided around the opening of the concave portion, and the second lid member is provided so as to contact the convex portion. It is characterized by.

また、本発明に係る試薬用容器は、前記凹部を複数備え、複数の前記凹部の前記開口部の周囲に設けられた前記凸部同士は、同じ高さで連結されていることを特徴とする。 The reagent container according to the present invention includes a plurality of the concave portions, and the convex portions provided around the openings of the plurality of concave portions are connected to each other at the same height. .

また、本発明に係る試薬用容器は、前記反応部が、基板に形成された複数の貫通孔と、前記基板の一方の面に複数の前記貫通孔にわたって形成された溝部と、前記基板の前記一方の面に貼り合わされ前記溝部を覆うフィルムとにより構成されることを特徴とする。 Further, in the reagent container according to the present invention, the reaction portion includes a plurality of through holes formed in the substrate, a groove portion formed over the plurality of through holes on one surface of the substrate, and the substrate of the substrate. It is characterized by comprising a film bonded to one surface and covering the groove .

また、本発明に係る試薬用容器は、前記第1の蓋部材が、硬質アルミニウム層及びシール層を備えるフィルムであることを特徴とする。 In the reagent container according to the present invention, the first lid member is a film including a hard aluminum layer and a seal layer .

この発明に係る試薬用容器においては、第1の蓋部材と第2の蓋部材とにわたって注射針を容易に貫通させることができる。さらに、その貫通孔の周縁が注射針などの外周面に密着することを防止することができ、貫通孔の周縁と注射針などの外周面との隙間を介して気体の流通を確保することができる。そのため、注射針などから試薬を容易かつ迅速に吸引・吐出することができる。 In the reagent container according to the present invention, the injection needle can be easily passed through the first lid member and the second lid member. Furthermore, it is possible to prevent the peripheral edge of the through-hole from coming into close contact with the outer peripheral surface of the injection needle or the like, and to ensure the gas flow through the gap between the peripheral edge of the through-hole and the outer peripheral surface of the injection needle or the like. it can. Therefore, the reagent can be sucked and discharged easily and quickly from an injection needle or the like.

本発明によれば、試薬が凹部又は流路の外に飛散することを防止することができることから、凹部又は流路内への試薬の注入や、凹部又は流路からの試薬の分取などを容易かつ適切に行うことができ、迅速かつ高精度に試験を行うことができる。   According to the present invention, it is possible to prevent the reagent from splashing out of the recess or the channel, so that the injection of the reagent into the recess or the channel, the separation of the reagent from the recess or the channel, etc. The test can be performed easily and appropriately, and the test can be performed quickly and with high accuracy.

以下、本発明の第1の実施形態における試薬用容器について、図面を参照して説明する。なお、この実施の形態では、化学反応やDNA反応、たんぱく質反応等をチップ上で行うμ―Total Analysis System技術やLab−on−Chip技術で利用される試薬用容器を一例に説明する。
図1において、符号1は試薬用容器を示している。
試薬用容器1は、縦横寸法が数ミリ角以下に設定された略長方形で板状の基板2を備えている。
Hereinafter, the reagent container according to the first embodiment of the present invention will be described with reference to the drawings. In this embodiment, a reagent container used in the μ-Total Analysis System technology or the Lab-on-Chip technology for performing a chemical reaction, a DNA reaction, a protein reaction or the like on a chip will be described as an example.
In FIG. 1, the code | symbol 1 has shown the container for reagents.
The reagent container 1 includes a substantially rectangular and plate-like substrate 2 whose vertical and horizontal dimensions are set to several millimeters or less.

基板2の材質としては、試薬に悪影響を与えないものであればよい。また、基板2上において試薬の反応を行う場合、反応系に悪影響を与えないことが必要である。さらに、反応を検出する際、基板2の下方から光学検出する場合は透明性が高い方が好ましい。
このようなものとして、例えば、PC(ポリカーボネート)、PP(ポリプロピレン)、シクロオレフィン系ポリマー、フッ素ポリマー、シリコーン樹脂などを用いることができる。
なお、透明性、耐熱性、耐薬品性や反応系に対する影響などの点からシクロオレフィン系樹脂(ゼオノア(日本ゼオン株式会社製))やメチルペンテン系樹脂(TPX(三井化学株式会社製))を用いることが好ましい。
このような合成樹脂を用いて基板2を作成すれば、耐熱性、耐薬品性、成形加工性などに優れているため好ましい。さらに、2種類以上の樹脂を接合して用いてもよい。この場合、それぞれの樹脂の特徴を活かして基板2を作成することにより、試薬及び試料等の特性に応じた多様な基板2とすることが可能となり、用途ごとに使い分けることができる。例えば、基板2の上半分と下半分とで材料を分けたりすることも可能となる。また、後述の試薬収容部8や反応部6など部分ごとに材料を分けることもできる。
なお、基板2の素材としてガラスを用いてもよい。
The material of the substrate 2 may be any material that does not adversely affect the reagent. In addition, when the reagent is reacted on the substrate 2, it is necessary that the reaction system is not adversely affected. Furthermore, when detecting the reaction, when optical detection is performed from below the substrate 2, it is preferable that the transparency is high.
As such a thing, PC (polycarbonate), PP (polypropylene), a cycloolefin type polymer, a fluoropolymer, a silicone resin etc. can be used, for example.
In addition, cycloolefin resin (Zeonor (manufactured by ZEON Corporation)) and methylpentene resin (TPX (manufactured by Mitsui Chemicals))) are used in terms of transparency, heat resistance, chemical resistance and influence on the reaction system. It is preferable to use it.
It is preferable to make the substrate 2 using such a synthetic resin because it is excellent in heat resistance, chemical resistance, moldability, and the like. Further, two or more kinds of resins may be joined and used. In this case, by making the substrate 2 by making use of the characteristics of each resin, it is possible to make various substrates 2 according to the characteristics of the reagent, the sample, and the like, which can be used for each application. For example, it is possible to divide the material between the upper half and the lower half of the substrate 2. Further, the material can be divided for each part such as a reagent storage unit 8 and a reaction unit 6 described later.
Glass may be used as the material for the substrate 2.

基板2の長さ方向の一端側の領域には、基板2の厚さ方向に窪んだウェル状の試薬収容部8が形成されている。試薬収容部8は、試薬が注入されてその試薬を収容するためのものである。すなわち、試薬収容部8は、凹部として機能するものである。
また、試薬収容部8は、基板2の材質がプラスチックや合成樹脂系であれば、切削加工、成型加工により形成することができ、基板2の材質がガラスであれば、切削加工により形成することができる。
また、試薬収容部8の数は、目的に応じて適宜設定できる。試薬収容部8を複数設ける場合、大きさが異なっていても良い。
In a region on one end side in the length direction of the substrate 2, a well-like reagent storage portion 8 that is depressed in the thickness direction of the substrate 2 is formed. The reagent storage unit 8 is for receiving a reagent after it is injected. That is, the reagent storage unit 8 functions as a recess.
The reagent container 8 can be formed by cutting or molding if the material of the substrate 2 is plastic or synthetic resin, and can be formed by cutting if the material of the substrate 2 is glass. Can do.
Moreover, the number of the reagent storage parts 8 can be suitably set according to the purpose. When a plurality of reagent storage units 8 are provided, the sizes may be different.

また、試薬収容部8は、予め一つの試薬を入れておき、後から別の試薬を入れ、混合させる混合場として用いることもできる。
試薬収容部8の容量は、10〜300μlの範囲内であることが好ましい。化学反応、特にDNAを扱う生化学反応、生物反応などライフサイエンス分野では、微量試薬を用いることが多い。血液から採取されるDNAは通常多くても数百nl〜数μl程度である。そのため、反応に用いる試薬、希釈剤なども多くても数百μl程度になり、前述の範囲内であることが好ましい。
In addition, the reagent storage unit 8 can be used as a mixing place in which one reagent is put in advance and another reagent is put and mixed later.
The volume of the reagent storage unit 8 is preferably in the range of 10 to 300 μl. In life science fields such as chemical reactions, especially biochemical reactions and biological reactions that handle DNA, trace amounts of reagents are often used. The DNA collected from blood is usually about several hundred nl to several μl at most. Therefore, the number of reagents, diluents, etc. used in the reaction is at most several hundred μl, and is preferably within the above-mentioned range.

一方、基板2の長さ方向の他端側の領域には、基板2の厚さ方向に窪んだウェル状の検出部7が形成されている。検出部7は、基板2の縦横方向に複数形成されている。これら検出部7は、その底部が平坦であり開口部7aから底部まで側壁面が傾斜している円錐台形状であることが好ましい。検出部7が円錐台形状であれば、下方からの光学的な検出に有利である。なぜなら、例えば、検出部7に蛍光物質を入れ、下方から紫外線を照射することによって、その蛍光物質の蛍光状態を下方から検出する場合、検出部7の形状が球状やその他複雑な形状であると、蛍光物質の励起源である紫外線が屈折、散乱して蛍光物質に照射される量が減少してしまうからである。また、生じた蛍光も屈折、散乱し、検出する蛍光強度の低下、誤検出などの原因となってしまうからである。   On the other hand, in the region on the other end side in the length direction of the substrate 2, a well-shaped detection unit 7 that is depressed in the thickness direction of the substrate 2 is formed. A plurality of detection units 7 are formed in the vertical and horizontal directions of the substrate 2. These detection parts 7 are preferably in the shape of a truncated cone having a flat bottom part and an inclined side wall surface from the opening part 7a to the bottom part. If the detection unit 7 has a truncated cone shape, it is advantageous for optical detection from below. This is because, for example, when the fluorescent state of the fluorescent material is detected from below by putting a fluorescent material in the detection unit 7 and irradiating ultraviolet rays from below, the shape of the detection unit 7 is spherical or other complicated shape. This is because the amount of ultraviolet light that is an excitation source of the fluorescent material is refracted and scattered, and the amount of the fluorescent material irradiated is reduced. In addition, the generated fluorescence is also refracted and scattered, which causes a decrease in detected fluorescence intensity, false detection, and the like.

なお、検出部7に、開口部7aを覆う保護フィルムを設けてもよい。保護フィルムを設けることにより、ごみ、汚染物質などによる汚染を防ぐことができる。
保護フィルムとしては、フィルム状のものを用いることができる。このようなものとしては、例えばポリエチレン、ポリプロピレン、ポリメチルペンテン等のポリオレフィンフィルム、ポリメチルアクリレート、ポリメチルメタクリレート等のアクリル系フィルム、ポリスチレンフィルム、ポリアセタールフィルム、ポリアミドフィルム、ポリアクリロニトリルフィルム、ポリカーボネートフィルム、シクロオレフィン系フィルム、シリコン樹脂系フィルム、フッ素系樹脂フィルムなどが挙げられる。また、アルミニウムなどの金属箔や、金属箔と前述の樹脂フィルムとの積層フィルムを用いても良い。これらの保護フィルムは、接着剤を用いて貼り合わせることができる。接着剤としては、耐熱性の硬化性接着剤を用いることができる。また、ヒートシールにより貼り合わせてもかまわない。検出部7内に予め試薬を収容しておく場合、ヒートシールであれば、試薬への接着剤の影響を考慮しなくても良いので好ましい。また、保護フィルムは使用する前に剥がす必要があるため、易剥離性であることが好ましい。
In addition, you may provide the protective film which covers the opening part 7a in the detection part 7. FIG. By providing the protective film, it is possible to prevent contamination by dust, contaminants, and the like.
A film-like thing can be used as a protective film. Examples of such films include polyolefin films such as polyethylene, polypropylene and polymethylpentene, acrylic films such as polymethyl acrylate and polymethyl methacrylate, polystyrene films, polyacetal films, polyamide films, polyacrylonitrile films, polycarbonate films, Examples include olefin-based films, silicon resin-based films, and fluorine-based resin films. Moreover, you may use metal foil, such as aluminum, and the laminated film of metal foil and the above-mentioned resin film. These protective films can be bonded using an adhesive. As the adhesive, a heat-resistant curable adhesive can be used. Further, it may be bonded by heat sealing. When the reagent is stored in the detection unit 7 in advance, it is preferable to use heat sealing because it is not necessary to consider the influence of the adhesive on the reagent. Moreover, since it is necessary to peel off a protective film before using, it is preferable that it is easy to peel.

また、図2に示すように、開口部7aの周囲に、上方に立ち上げられた凸部25を設けても良い。凸部25を設けることにより、保護フィルムを貼り合わせやすくできる。特にヒートシールにより貼り合わせる場合、加熱する部分が、後述する基材14(図7に示す)全体ではなく、凸部25に接触するところだけでよいので、検出部7内に予め試薬を収容しておく場合、試薬への熱的な影響を低減させることができる。
また、保護フィルムを剥離する際も、保護フィルムと基板2との接点が開口部7aを除いた基板2全体ではなく、凸部25上だけになるので容易に剥離することができる。
このような凸部25としては、幅が0.1〜3mm、高さが0.05〜2mmの範囲内であることが好ましい。
また、凸部25同士を凸部25と同じ高さで連結させても良い。そのようにすることで、剥離する際に、引っ掛かりをなくしてスムーズに剥離することができる。
Moreover, as shown in FIG. 2, you may provide the convex part 25 raised upwards around the opening part 7a. By providing the convex portion 25, the protective film can be easily bonded. In particular, when pasting together by heat sealing, the portion to be heated is not the entire base material 14 (shown in FIG. 7), which will be described later, but only a place where it comes into contact with the convex portion 25. In this case, the thermal influence on the reagent can be reduced.
Further, when the protective film is peeled off, the contact between the protective film and the substrate 2 is not on the whole substrate 2 except the opening 7a but only on the convex portion 25, so that the protective film can be easily peeled off.
Such a convex portion 25 preferably has a width in the range of 0.1 to 3 mm and a height in the range of 0.05 to 2 mm.
Further, the convex portions 25 may be connected at the same height as the convex portions 25. By doing so, when peeling, it can be smoothly peeled without being caught.

さらに、基板2の長さ方向の中央の領域(検出部7と試薬収容部8とによって挟まれた領域)には、厚さ方向に窪んだウェル状の反応部6が一つ形成されている。
反応部6は、基板2の材質がプラスチック、合成樹脂系であれば、切削加工、成型加工により形成することができる。また、基板2の材質がガラスであれば、切削加工により形成することができる。反応部6の開口径(開口部6aの直径)は0.1〜5mmの範囲内、深さが0.1〜5mm範囲内であることが好ましい。前述のようにライフサイエンス分野では、微量試薬を用いることが多く、効率的に反応を行うためには、前記範囲内であることが好ましい。また、反応液に、この反応液よりも比重の低い不揮発性液体を重層して蒸発を防ぐことができる。不揮発性液体としては、ミネラルオイル、シリコーンオイル、植物油、動物油、流動パラフィン等が挙げられる。
また、反応部6をフィルムなどで被覆してもよい。
Furthermore, one well-like reaction portion 6 that is depressed in the thickness direction is formed in a central region in the length direction of the substrate 2 (region sandwiched between the detection unit 7 and the reagent storage unit 8). .
The reaction part 6 can be formed by cutting or molding if the material of the substrate 2 is plastic or synthetic resin. Moreover, if the material of the board | substrate 2 is glass, it can form by cutting. The opening diameter of the reaction part 6 (the diameter of the opening part 6a) is preferably in the range of 0.1 to 5 mm and the depth is preferably in the range of 0.1 to 5 mm. As described above, in the life science field, a small amount of reagent is often used, and in order to perform the reaction efficiently, it is preferably within the above range. Further, the reaction liquid can be overlaid with a non-volatile liquid having a specific gravity lower than that of the reaction liquid to prevent evaporation. Nonvolatile liquids include mineral oil, silicone oil, vegetable oil, animal oil, liquid paraffin, and the like.
Further, the reaction part 6 may be covered with a film or the like.

また、反応部6の側断面(反応部6の深さ方向の縦断面)は、特に限定はしないが、開口部6aを構成する側部が円筒状で底部が半球状のもの、または、全体が半球状のものが好ましい。半球状であれば試薬を注入する際、試薬の飛散、気泡の混入を可及的に防ぐことができる。また注入された試薬を取り出す際の取り出し性に優れたものとなる。   The side section of the reaction part 6 (the longitudinal section in the depth direction of the reaction part 6) is not particularly limited, but the side part constituting the opening 6a is cylindrical and the bottom part is hemispherical, or the whole Is preferably hemispherical. If it is hemispherical, when the reagent is injected, it is possible to prevent scattering of the reagent and mixing of bubbles as much as possible. Moreover, it becomes excellent in the taking-out property at the time of taking out the injected reagent.

また、反応部6が一つ設けられるとしたが、その設置数は目的に応じて適宜設定できる。例えば、反応を2種類以上行う場合、第二反応部を設けても良い。
例えば、反応がDNAの検出反応に用いる場合、第二反応部はPCR反応部にすることができる。PCR反応部を設けることにより、同一チップ上で検体の調整、DNAの検出を行うことができる。
第二反応部としては、ウェル状の反応部を設けても良いし、流路を設け(流路状第二反応部)、流路内で反応を行っても良い。例えば、図3に示すように、流路状第二反応部6´としては、複数の開口部6aと、これら複数の開口部6aを繋ぐ流路26とを有する構成が例として挙げられる。この場合、それぞれの開口径は5mm以下程度、開口部6aの深さは1mm〜5mm程度である。
Moreover, although the one reaction part 6 was provided, the number of installation can be suitably set according to the objective. For example, when performing 2 or more types of reaction, you may provide a 2nd reaction part.
For example, when the reaction is used for a DNA detection reaction, the second reaction part can be a PCR reaction part. By providing a PCR reaction section, sample preparation and DNA detection can be performed on the same chip.
As the second reaction part, a well-like reaction part may be provided, or a flow path may be provided (channel-like second reaction part), and the reaction may be performed in the flow path. For example, as shown in FIG. 3, a configuration having a plurality of openings 6 a and a flow path 26 connecting the plurality of openings 6 a is given as an example of the flow path-shaped second reaction section 6 ′. In this case, each opening diameter is about 5 mm or less, and the depth of the opening 6a is about 1 mm to 5 mm.

また、流路状第二反応部を以下のように形成してもよい。すなわち、図4に示すように、基板2に貫通孔30を複数形成する。それから、図5に示すように、基板2の裏面に、複数の貫通孔30にわたって溝部31を形成する。さらに、図6に示すように、基板2の裏面に、溝部31を覆う底部形成用フィルム32を貼り合わせる。これにより、流路26´が容易に形成される。このときの溝部31の幅、高さはそれぞれ1mm〜5mmの範囲内であることが好ましい。
溝部31は貫通孔30を直線で結んでいても良いし、試薬や検査対象の蒸発を防ぐために屈曲した形状であっても良い。
Moreover, you may form a flow path-shaped 2nd reaction part as follows. That is, as shown in FIG. 4, a plurality of through holes 30 are formed in the substrate 2. Then, as shown in FIG. 5, grooves 31 are formed on the back surface of the substrate 2 over the plurality of through holes 30. Further, as shown in FIG. 6, a bottom forming film 32 that covers the groove 31 is bonded to the back surface of the substrate 2. Thereby, the flow path 26 ′ is easily formed. The width and height of the groove 31 at this time are preferably in the range of 1 mm to 5 mm, respectively.
The groove 31 may be formed by connecting the through holes 30 with a straight line, or may have a bent shape to prevent evaporation of the reagent or the test object.

底部形成用フィルム32としてはフィルム状のものを用いることができる。このようなものとしては、例えばポリエチレン、ポリプロピレン、ポリメチルペンテン等のポリオレフィンフィルム、ポリメチルアクリレート、ポリメチルメタクリレート等のアクリル系フィルム、ポリスチレンフィルム、ポリアセタールフィルム、ポリアミドフィルム、ポリアクリロニトリルフィルム、ポリカーボネートフィルム、シクロオレフィン系フィルム、シリコン樹脂系フィルム、フッ素系樹脂フィルムなどが挙げられる。また、アルミニウムなどの金属箔や、金属箔と前述の樹脂フィルムの積層フィルムを用いても良い。底部形成用フィルムは接着剤を用いて貼り合わせることができる。また、ヒートシールにより貼り合わせても良い。ヒートシールであれば、反応部内への接着剤の影響を考慮しなくても良いので好ましい。
また、底部形成用フィルム32は、その一部が溝部31へ食い込む形状であれば好ましい。なぜなら、基板2と底部形成用フィルム32との間に隙間が生じず、試薬や検査対象の漏れがないものとなるからである。
A film-like film can be used as the bottom forming film 32. Examples of such films include polyolefin films such as polyethylene, polypropylene and polymethylpentene, acrylic films such as polymethyl acrylate and polymethyl methacrylate, polystyrene films, polyacetal films, polyamide films, polyacrylonitrile films, polycarbonate films, Examples include olefin-based films, silicon resin-based films, and fluorine-based resin films. Moreover, you may use metal foil, such as aluminum, and the laminated film of metal foil and the above-mentioned resin film. The bottom forming film can be bonded using an adhesive. Moreover, you may bond together by heat sealing. A heat seal is preferable because it is not necessary to consider the influence of the adhesive in the reaction part.
Further, it is preferable that the bottom forming film 32 has a shape in which a part thereof bites into the groove 31. This is because there is no gap between the substrate 2 and the bottom forming film 32, and there is no leakage of reagents and test objects.

さらに、本実施形態における試薬収容部8の側断面は、図7に示すように、二段階にして形成されている。すなわち、試薬収容部8内には、試薬収容部8の開口部8aを構成するとともに、開口部8aと略同一の径を有する大径凹部11が形成されている。大径凹部11の周壁部は、所定の高さ寸法に設定されている。そして、大径凹部11の底部には、試薬収容部8の深さ方向(基板2の厚さ方向)のうちの深い方に向けられた小径凹部12が形成されている。小径凹部12は、大径凹部11よりも小径に設定されている。
小径凹部12の側断面の形状は、特に限定はしないが、開口部12aを構成する側部が円筒状で底部が半球状のもの、または、全体が半球状のものが好ましい。半球状であれば試薬を注入する際、試薬の飛散、気泡の混入を可及的に防ぐことができる。また注入された試薬を取り出す際の取り出し性に優れたものとなる。
また、小径凹部12には、小径凹部12の開口部12aを覆い小径凹部12内を密閉する第1の被覆フィルム(第1の蓋部材)16が設けられており、大径凹部11には、その開口部11aを覆い大径凹部11内を密閉する第2の被覆フィルム(第2の蓋部材)17が設けられている。そのため、第1の被覆フィルム16と第2の被覆フィルム17との間には、大径凹部11の高さと同一の高さを有するクリアランス20が形成されている。
Furthermore, as shown in FIG. 7, the side cross section of the reagent storage unit 8 in the present embodiment is formed in two stages. That is, a large-diameter recess 11 having an opening 8a of the reagent storage 8 and a diameter substantially the same as the opening 8a is formed in the reagent storage 8. The peripheral wall portion of the large-diameter recess 11 is set to a predetermined height dimension. A small-diameter concave portion 12 is formed at the bottom of the large-diameter concave portion 11 so as to be directed deeper in the depth direction of the reagent containing portion 8 (thickness direction of the substrate 2). The small diameter recess 12 is set to have a smaller diameter than the large diameter recess 11.
The shape of the side cross section of the small-diameter recess 12 is not particularly limited, but the side part constituting the opening 12a is cylindrical and the bottom part is hemispherical or the whole is preferably hemispherical. If it is hemispherical, when the reagent is injected, it is possible to prevent scattering of the reagent and mixing of bubbles as much as possible. Moreover, it becomes excellent in the taking-out property at the time of taking out the injected reagent.
The small diameter recess 12 is provided with a first covering film (first lid member) 16 that covers the opening 12 a of the small diameter recess 12 and seals the inside of the small diameter recess 12. A second covering film (second lid member) 17 that covers the opening 11a and seals the inside of the large-diameter concave portion 11 is provided. Therefore, a clearance 20 having the same height as that of the large-diameter concave portion 11 is formed between the first covering film 16 and the second covering film 17.

第1及び第2の被覆フィルム16,17は、上層に基材(硬質アルミニウム層)14、下層にシール層15が配置された2層構造となっている。また、第1及び第2の被覆フィルム16,17は、下層に配置されたシール層15によって、大径凹部11の底部及び基板2の表面にそれぞれ接着固定され、試薬収容部8内に注入された液状の試薬24が密封されるようになっている。
基材14は、硬質アルミニウムで構成されており、その厚さが10μm以下、伸びが1%/cm2以下とされている。また、注射針や分注用のディスポーサブルチップに見立てた先端径0.9mm、内径0.5mmの管状物を垂直方向の上方から突き刺した時の過重を測定し、その際の荷重が0.5kgf以下であることが好ましい。
一方、シール層15は、共重合ポリエステル系樹脂であるシート状の酸成分変性PET(ポリエチレンテレフタレート)で構成されており、その厚さが15μm以下とされている。さらに、上記のように突き刺した時の荷重は、0.5kgf以下であることが好ましい。
The first and second coating films 16 and 17 have a two-layer structure in which a base material (hard aluminum layer) 14 is disposed in the upper layer and a seal layer 15 is disposed in the lower layer. The first and second coating films 16 and 17 are bonded and fixed to the bottom of the large-diameter recess 11 and the surface of the substrate 2 by the seal layer 15 disposed in the lower layer, and injected into the reagent storage unit 8. The liquid reagent 24 is sealed.
The base material 14 is made of hard aluminum, and has a thickness of 10 μm or less and an elongation of 1% / cm 2 or less. In addition, when a tubular object having a tip diameter of 0.9 mm and an inner diameter of 0.5 mm as viewed as a syringe needle or a disposable tip for dispensing is pierced from above in the vertical direction, the load is 0.5 kgf. The following is preferable.
On the other hand, the seal layer 15 is made of sheet-like acid component-modified PET (polyethylene terephthalate), which is a copolyester resin, and has a thickness of 15 μm or less. Furthermore, the load when pierced as described above is preferably 0.5 kgf or less.

第1の被覆フィルム16は、それぞれの試薬収容部8の小径凹部12に個々に設けられており、第2の被覆フィルム17は、図1に示すように、それぞれの試薬収容部8にわたるようにして一枚設けられている。ただし、図8に示すように、それぞれの試薬収容部8にわたるようにして大きな大径凹部11を形成すれば、その大きな大径凹部11の底部に、それぞれの小径凹部12にわたって一枚の第1の被覆フィルム16を設けることができ、開口部11aに一枚の第2の被覆フィルム17を設けることができる。   The first coating film 16 is individually provided in the small-diameter recess 12 of each reagent storage unit 8, and the second coating film 17 extends over each reagent storage unit 8 as shown in FIG. 1. One is provided. However, as shown in FIG. 8, if a large large-diameter concave portion 11 is formed so as to extend over each reagent storage portion 8, one first sheet is formed on the bottom of the large large-diameter concave portion 11 over each small-diameter concave portion 12. The covering film 16 can be provided, and one second covering film 17 can be provided in the opening 11a.

また、第1及び第2の被覆フィルム16,17の他の態様として、シール層15に加えて、基材14の上面に保護層を設けて、第1及び第2の被覆フィルム16,17を三層構造にしても良い。この保護層は、厚さが15μm以下、伸びが30%/180mm以下、破裂度が2kg/cm2以下のアクリル系樹脂、ポリエステル系樹脂フィルムを用いることができ、サンドブラスト等を用いて表面をマット状に加工した脆性樹脂であるマットPETを用いれば注射器などの針による突き刺し性を向上できるため好ましい。なお、脆性樹脂とは衝撃に対して弱く所謂“脆い”性質を持った樹脂であり、表面がマット状のもの以外に、例えば、発泡状のものを用いても良い。   Further, as another embodiment of the first and second coating films 16 and 17, in addition to the seal layer 15, a protective layer is provided on the upper surface of the base material 14, and the first and second coating films 16 and 17 are provided. A three-layer structure may be used. The protective layer can be made of an acrylic resin or polyester resin film having a thickness of 15 μm or less, an elongation of 30% / 180 mm or less, and a rupture degree of 2 kg / cm 2 or less. It is preferable to use mat PET, which is a brittle resin processed into a shape, because it can improve the piercing property with a needle such as a syringe. Note that the brittle resin is a resin that is weak against impact and has a so-called “brittle” property. In addition to a mat-like surface, for example, a foam-like resin may be used.

このように第1及び第2の被覆フィルム16,17を、保護層、基材14、シール層15の3層構造にする場合には、保護層の分だけ第1及び第2の被覆フィルム16,17の厚さが増加して前述した突き刺し性が低下してしまう。そこで、シール層15としてヒートシールラッカー等の液状のシール剤を塗付して厚さが5μm以下となるように設定し、さらに、基材14の硬質アルミニウムの厚さを10μm以下、好ましくは8μm以下に設定する。このようにすることで、突き刺し性を低下させずに第1及び第2の被覆フィルム16,17を3層構造とすることができる。   As described above, when the first and second coating films 16 and 17 have a three-layer structure of the protective layer, the base material 14 and the seal layer 15, the first and second coating films 16 corresponding to the protective layer are used. , 17 increases, and the piercing property described above decreases. Therefore, a liquid sealant such as a heat seal lacquer is applied as the seal layer 15 so as to have a thickness of 5 μm or less, and the thickness of the hard aluminum of the substrate 14 is 10 μm or less, preferably 8 μm. Set as follows. By doing in this way, the 1st and 2nd coating films 16 and 17 can be made into 3 layer structure, without reducing piercing property.

なお、試薬収容部8の開口径は、1〜50mmの範囲内であることが好ましい。
試薬の量は、数百nl程度の極微量〜数百μl程度であり、また一般的な分注針の径は数十μm〜数mm程度である。そのため、分注適正、目的容量を考慮すると、試薬収容部8の開口径は1〜50mmの範囲内であることが好ましい。
また、試薬収容部8の深さは1〜50mmの範囲内であることが好ましい。
また、第1及び第2の被覆フィルム16,17の材質は適宜変更可能である。例えば、ポリエチレン、ポリプロピレン、ポリメチルペンテン等のポリオレフィンフィルム、ポリメチルアクリレート、ポリメチルメタクリレート等のアクリル系フィルム、ポリスチレンフィルム、ポリアセタールフィルム、ポリアミドフィルム、ポリアクリロニトリルフィルム、ポリカーボネートフィルム、シクロオレフィン系フィルム、シリコン樹脂系フィルム、フッ素系樹脂フィルムなどが挙げられる。また、アルミニウムなどの金属箔や、金属箔と前述の樹脂フィルムの積層フィルムを用いても良い。これらのフィルム状の蓋部材は、接着剤を用いて貼り合わせることができる。接着剤としては、耐熱性の硬化性接着剤を用いることができる。また、ヒートシールにより貼り合わせてもかまわない。ヒートシールであれば、試薬への接着剤の影響を考慮しなくても良いので好ましい。
In addition, it is preferable that the opening diameter of the reagent accommodating part 8 exists in the range of 1-50 mm.
The amount of the reagent is from a very small amount of about several hundred nl to about several hundred μl, and the diameter of a general dispensing needle is about several tens μm to several mm. For this reason, in consideration of appropriate dispensing and target volume, the opening diameter of the reagent storage unit 8 is preferably in the range of 1 to 50 mm.
Moreover, it is preferable that the depth of the reagent accommodating part 8 exists in the range of 1-50 mm.
Moreover, the material of the 1st and 2nd coating films 16 and 17 can be changed suitably. For example, polyolefin films such as polyethylene, polypropylene and polymethylpentene, acrylic films such as polymethyl acrylate and polymethyl methacrylate, polystyrene films, polyacetal films, polyamide films, polyacrylonitrile films, polycarbonate films, cycloolefin films, silicone resins Examples thereof include a fluorine-based film and a fluorine-based resin film. Moreover, you may use metal foil, such as aluminum, and the laminated film of metal foil and the above-mentioned resin film. These film-like lid members can be bonded together using an adhesive. As the adhesive, a heat-resistant curable adhesive can be used. Further, it may be bonded by heat sealing. A heat seal is preferable because it is not necessary to consider the influence of the adhesive on the reagent.

また、図9に示すように、試薬収容部8の開口部8aの周囲に、反応部6の場合と同様に凸部21を設けても良い。凸部21は、試薬24の飛散などを可及的に防止するために、開口部8aの全周から立ち上げられた筒状であることが好ましい。凸部21を設けることにより、第1及び第2の被覆フィルム16,17を貼り合わせやすくできる。
特にヒートシールにより貼り合わせる場合、加熱する部分が、基材14全体ではなく、凸部21と接触するところだけでよいので、試薬収容部内の試薬への熱的な影響を低減することができる。
このような凸部21としては、幅が0.1〜3mm、高さが0.05〜2mmの範囲内であることが好ましい。
Further, as shown in FIG. 9, a convex portion 21 may be provided around the opening 8 a of the reagent storage unit 8 as in the case of the reaction unit 6. The convex portion 21 is preferably a cylindrical shape raised from the entire circumference of the opening 8a in order to prevent the reagent 24 from being scattered as much as possible. By providing the convex portion 21, the first and second coating films 16 and 17 can be easily bonded together.
In particular, when pasting together by heat sealing, it is only necessary that the portion to be heated is in contact with the convex portion 21 instead of the entire base material 14, so that the thermal influence on the reagent in the reagent storage portion can be reduced.
As such a convex part 21, it is preferable that the width is within a range of 0.1 to 3 mm and the height is within a range of 0.05 to 2 mm.

また、図10に示すように、試薬収容部8の開口部8aの開口径よりも大きな径を有する筒状の凸部21を設けるようにしてもよい。このようにすれば、試薬収容部8の側断面を略半球状に形成することができ、試薬収容部8の構成を簡易にしつつ、クリアランス20を容易に形成することができる。
また、試薬収容部8をウェル状にしたが、これに限ることはなく、流路を設けるようにしてもよい。
Further, as shown in FIG. 10, a cylindrical convex portion 21 having a diameter larger than the opening diameter of the opening portion 8 a of the reagent storage portion 8 may be provided. In this way, the side cross section of the reagent container 8 can be formed in a substantially hemispherical shape, and the clearance 20 can be easily formed while simplifying the configuration of the reagent container 8.
Moreover, although the reagent storage part 8 was made into a well shape, it is not restricted to this, You may make it provide a flow path.

次に、本実施形態における試薬用容器1の作用について説明する。
なお、ここでは、DNA検出を行う場合について説明する。
検体DNA試薬である液状の試薬24を試薬収容部8に収容しておく。そして、第1及び第2の被覆フィルム16,17にわたって注射針を突き通す。このとき、第1及び第2の被覆フィルム16,17が注射針の径方向外方に裂け、第1及び第2の被覆フィルム16,17に形成された貫通孔の周縁と、注射針の外周面との間に隙間が生じる。この隙間によって、試薬収容部8の内外における気体の流通が確保される。
Next, the operation of the reagent container 1 in this embodiment will be described.
Here, a case where DNA detection is performed will be described.
A liquid reagent 24 which is a sample DNA reagent is stored in the reagent storage unit 8. Then, the injection needle is passed through the first and second coating films 16 and 17. At this time, the first and second coating films 16 and 17 are torn radially outward of the injection needle, and the periphery of the through hole formed in the first and second coating films 16 and 17 and the outer periphery of the injection needle A gap is created between the surface. This gap ensures the gas flow inside and outside the reagent storage unit 8.

次いで、試薬24の一部を吸引し分取してから注射針を引き抜く。そして、予め核酸プローブを配置してある反応部6内に、注射針から試薬24を吐出させて試薬24を注入する。それから、これら試薬24と核酸プローブとの反応の有無を検出する。この際、検体DNAに標識物質を付けておくことにより反応の有無を検出できる。また、反応部6を複数設けておき、それぞれ異なる配列を有する核酸プローブを配置しておけば、検体DNAの配列を効率的に検出することができる。また、DNA反応の中でも一塩基遺伝子多型(SNP)の解析に用いることができる。なお、この場合、核酸プローブやその他検出に用いる試薬は複数あっても良く、それらの試薬の一つが標識されていればよい。また、SNP解析には、サードウェイブテクノロジーズ,Inc(米国ウィスコンシン州マディソン市)が開発したインベーダー法を用いてもよい。   Next, a part of the reagent 24 is aspirated and separated, and then the injection needle is pulled out. And the reagent 24 is inject | poured in the reaction part 6 which has arrange | positioned the nucleic acid probe beforehand from the injection needle. Then, the presence or absence of a reaction between the reagent 24 and the nucleic acid probe is detected. At this time, the presence or absence of a reaction can be detected by attaching a labeling substance to the sample DNA. If a plurality of reaction units 6 are provided and nucleic acid probes each having a different sequence are arranged, the sequence of the sample DNA can be detected efficiently. Moreover, it can be used for the analysis of single nucleotide polymorphism (SNP) in DNA reaction. In this case, there may be a plurality of nucleic acid probes and other reagents used for detection, and one of those reagents only needs to be labeled. The SNP analysis may use an invader method developed by Third Wave Technologies, Inc. (Madison, Wisconsin, USA).

ここで、従来では、図11に示すように、注射針35によって試薬24を分取する場合、すなわち注射針35を試薬24に入れるとき、又は、注射針35によって試薬24を吸引するとき、又は、試薬24を吸引した注射針35を引き抜くときに、試薬24が収容部36の外方に飛散してしまうことがあった。また、注射針35から試薬24を吐出して、収容部36などに試薬24を注入するときにも、試薬24が飛散してしまうことがあった。   Here, conventionally, as shown in FIG. 11, when the reagent 24 is dispensed by the injection needle 35, that is, when the injection needle 35 is put into the reagent 24, or when the reagent 24 is aspirated by the injection needle 35, or When the injection needle 35 that has sucked the reagent 24 is pulled out, the reagent 24 may be scattered to the outside of the accommodating portion 36. In addition, when the reagent 24 is discharged from the injection needle 35 and the reagent 24 is injected into the housing portion 36 or the like, the reagent 24 may be scattered.

本実施形態における試薬用容器1では、以下のようにして試薬24の飛散が防止される。すなわち、図12に示すように、第1及び第2の被覆フィルム16,17にわたって注射針を突き通して、試薬24を注入したり分取したりするとき、小径凹部12が第1の被覆フィルム16によって密閉されていることから、小径凹部12に収容された試薬24の飛沫の動き、すなわち小径凹部12の外方に漏出しようとする動きが規制される。さらに、仮に小径凹部12の外方である大径凹部11に試薬24が漏出したとしても、大径凹部11が第1の被覆フィルム16によって密閉されていることから、大径凹部11の外方、すなわち試薬収容部8の外方に、クリアランス20内の試薬24が漏出する動きが規制される。   In the reagent container 1 in the present embodiment, scattering of the reagent 24 is prevented as follows. That is, as shown in FIG. 12, when the reagent 24 is injected or dispensed through the injection needle through the first and second coating films 16 and 17, the small-diameter concave portion 12 is formed into the first coating film. Therefore, the movement of the droplets of the reagent 24 accommodated in the small-diameter recess 12, that is, the movement to leak out of the small-diameter recess 12 is restricted. Furthermore, even if the reagent 24 leaks into the large-diameter recess 11 that is outside the small-diameter recess 12, the large-diameter recess 11 is sealed by the first coating film 16. That is, the movement of the reagent 24 in the clearance 20 leaking out of the reagent storage unit 8 is restricted.

以上より、本実施形態における試薬用容器1によれば、上述のように、試薬収容部8の外方に試薬24が漏出する動きが規制されることから、試薬24が試薬収容部8の外に飛散することを防止することができる。そのため、試薬収容部8への試薬の注入や試薬収容部8からの試薬の分取などを容易かつ適切に行うことができ、迅速かつ高精度に試験を行うことができる。   As described above, according to the reagent container 1 of the present embodiment, the movement of the reagent 24 leaking out of the reagent storage unit 8 is restricted as described above. Can be prevented from being scattered. Therefore, the injection of the reagent into the reagent storage unit 8 and the sorting of the reagent from the reagent storage unit 8 can be performed easily and appropriately, and the test can be performed quickly and with high accuracy.

また、第1及び第2の被覆フィルム16,17に注射針を刺したとき、隙間によって気体の流通が確保されることから、注射針から試薬24を吸引するときには、隙間を介して空気を流入させ、一方、注射針から試薬24を吐出するときには、隙間を介して空気を流出させることができる。そのため、試薬収容部8内の圧力に応じて、隙間を介して空気を流出入させることができ、注射針から試薬24を容易かつ迅速に吸引・吐出することができる。さらに、注射針を容易に突き刺すことができる。
また、クリアランス20が形成されていることから、小径凹部12から漏出した試薬24を滞留させることができ、試薬が試薬収容部8の外に飛散することを確実に防止することができる。
In addition, when the injection needle is inserted into the first and second coating films 16 and 17, the gas flow is ensured by the gap. Therefore, when the reagent 24 is aspirated from the injection needle, the air flows through the gap. On the other hand, when the reagent 24 is discharged from the injection needle, the air can flow out through the gap. Therefore, air can flow in and out through the gap according to the pressure in the reagent storage unit 8, and the reagent 24 can be sucked and discharged from the injection needle easily and quickly. Furthermore, the injection needle can be easily pierced.
Further, since the clearance 20 is formed, the reagent 24 leaked from the small-diameter recess 12 can be retained, and the reagent can be reliably prevented from scattering out of the reagent storage unit 8.

なお、本実施形態においては、第1及び第2の被覆フィルム16,17を試薬収容部8に設けうるとしたが、これに限ることはなく、反応部6に設けてもよい。この場合、反応部6が凹部又は流路として機能する。
また、反応部6、検出部7及び試薬収容部8を一つの基板2に設けるとしたが、これに限ることはなく、それぞれ別個の基板に設けるようにしてもよい。
また、基板2を矩形板状としたが、これに限ることはなく、その形状は適宜変更可能である。例えば、チューブ状、ボトル状等の様々な形状の容器に試薬を充填して開口部を第1及び第2の被覆フィルム16,17で覆うようにしても良い。
なお、本発明の技術範囲は上記の実施形態に限定されるものではなく、本発明の趣旨を逸脱しない範囲において、種々の変更を加えることが可能である。
In the present embodiment, the first and second coating films 16 and 17 can be provided in the reagent storage unit 8. However, the present invention is not limited to this and may be provided in the reaction unit 6. In this case, the reaction part 6 functions as a recessed part or a flow path.
Moreover, although the reaction part 6, the detection part 7, and the reagent storage part 8 were provided in one board | substrate 2, it is not restricted to this, You may make it provide in a respectively separate board | substrate.
Moreover, although the board | substrate 2 was made into the rectangular plate shape, it is not restricted to this, The shape can be changed suitably. For example, the container may be filled with various shapes such as tubes and bottles, and the openings may be covered with the first and second coating films 16 and 17.
The technical scope of the present invention is not limited to the above embodiment, and various modifications can be made without departing from the spirit of the present invention.

本発明に係る試薬用容器の実施形態を示す斜視図である。It is a perspective view which shows embodiment of the container for reagents which concerns on this invention. 本実施形態の反応部に凸部を設けた様子を示す側断面図である。It is a sectional side view which shows a mode that the convex part was provided in the reaction part of this embodiment. 本実施形態の反応部の変形例を示す側断面図である。It is a sectional side view which shows the modification of the reaction part of this embodiment. 流路の形成過程を説明する図であって、基板に貫通孔を設けた様子を示す側断面図である。It is a figure explaining the formation process of a flow path, Comprising: It is a sectional side view which shows a mode that the through-hole was provided in the board | substrate. 流路の形成過程を説明する図であって、図4の基板の裏面に溝を設けた様子を示す側断面図である。It is a figure explaining the formation process of a flow path, Comprising: It is a sectional side view which shows a mode that the groove | channel was provided in the back surface of the board | substrate of FIG. 流路の形成過程を説明する図であって、図5の溝に底部形成用フィルムを設けた様子を示す側断面図である。It is a figure explaining the formation process of a flow path, Comprising: It is a sectional side view which shows a mode that the film for bottom part formation was provided in the groove | channel of FIG. 図1の試薬収容部を拡大して示す側断面図である。It is a sectional side view which expands and shows the reagent accommodating part of FIG. 図1の試薬収容部の変形例を示す斜視図である。It is a perspective view which shows the modification of the reagent accommodating part of FIG. 図7の試薬収容部に凸部を設けた様子を示す側断面図である。It is a sectional side view which shows a mode that the convex part was provided in the reagent accommodating part of FIG. 図9の試薬収容部の変形例を示す側断面図である。FIG. 10 is a side sectional view showing a modification of the reagent storage unit of FIG. 9. 従来の試薬用容器の収容部を示す図であって、試薬が飛散した様子を示す説明図である。It is a figure which shows the accommodating part of the conventional reagent container, Comprising: It is explanatory drawing which shows a mode that the reagent scattered. 本実施形態の試薬収容部において、試薬を注入・分取する様子を示す説明図である。It is explanatory drawing which shows a mode that a reagent is inject | poured and fractionated in the reagent storage part of this embodiment.

符号の説明Explanation of symbols

1 試薬容器 6 反応部 8 試薬収容部(凹部) 11 大径凹部 12 小径凹部 14 基材(硬質アルミニウム層) 15 シール層 16 第1の被覆フィルム(第1の蓋部材) 17 第2の被覆フィルム(第2の蓋部材) 20 クリアランス 24 試薬 26 流路
DESCRIPTION OF SYMBOLS 1 Reagent container 6 Reaction part 8 Reagent accommodating part (recessed part) 11 Large diameter recessed part 12 Small diameter recessed part 14 Base material (hard aluminum layer) 15 Seal layer 16 1st coating film (1st cover member) 17 2nd coating film (Second lid member) 20 Clearance 24 Reagent 26 Flow path

Claims (5)

試薬が注入される凹部又は流路と、
これら凹部又は流路の開口部を覆う第1の蓋部材と、
この第1の蓋部材を介して前記開口部を覆う第2の蓋部材と、
を備え、
前記第1の蓋部材と前記第2の蓋部材との間にクリアランスが設けられ、
前記凹部が、この凹部の開口部を構成する大径凹部と、この大径凹部の底部に設けられ、前記大径凹部よりも小径に設定された小径凹部とを備えており、前記小径凹部に前記第1の蓋部材が設けられ、前記大径凹部に前記第2の蓋部材が設けられていることを特徴とする試薬用容器。
A recess or flow path into which the reagent is injected;
A first lid member covering the recess or the opening of the flow path;
A second lid member that covers the opening through the first lid member;
Bei to give a,
A clearance is provided between the first lid member and the second lid member;
The concave portion includes a large-diameter concave portion constituting an opening of the concave portion, and a small-diameter concave portion provided at the bottom of the large-diameter concave portion and set to have a smaller diameter than the large-diameter concave portion. A reagent container, wherein the first lid member is provided, and the second lid member is provided in the large-diameter recess .
前記凹部の前記開口部の周囲に、上方に立ち上げられた凸部が設けられ、Around the opening of the concave portion, a convex portion raised upward is provided,
前記第2の蓋部材は前記凸部に接触するように設けられていることを特徴とする請求項1に記載の試薬用容器。The reagent container according to claim 1, wherein the second lid member is provided so as to be in contact with the convex portion.
前記凹部を複数備え、A plurality of the recesses,
複数の前記凹部の前記開口部の周囲に設けられた前記凸部同士は、同じ高さで連結されていることを特徴とする請求項2に記載の試薬用容器。The reagent container according to claim 2, wherein the convex portions provided around the openings of the plurality of concave portions are connected to each other at the same height.
前記反応部が、基板に形成された複数の貫通孔と、前記基板の一方の面に複数の前記貫通孔にわたって形成された溝部と、前記基板の前記一方の面に貼り合わされ前記溝部を覆うフィルムとにより構成されることを特徴とする請求項1から請求項3のいずれか一項に記載の試薬用容器。The reaction portion is a plurality of through holes formed in the substrate, a groove portion formed on one surface of the substrate over the plurality of through holes, and a film that is bonded to the one surface of the substrate and covers the groove portion The reagent container according to any one of claims 1 to 3, wherein the reagent container is configured as follows. 前記第1の蓋部材が、硬質アルミニウム層及びシール層を備えるフィルムであることを特徴とする請求項1から請求項4のいずれか一項に記載の試薬用容器。 The reagent container according to any one of claims 1 to 4, wherein the first lid member is a film including a hard aluminum layer and a seal layer.
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