JP4934802B2 - リンパ系の細胞接着物質、リンパ系薬物輸送材およびそれを含有する薬剤 - Google Patents
リンパ系の細胞接着物質、リンパ系薬物輸送材およびそれを含有する薬剤 Download PDFInfo
- Publication number
- JP4934802B2 JP4934802B2 JP2005157371A JP2005157371A JP4934802B2 JP 4934802 B2 JP4934802 B2 JP 4934802B2 JP 2005157371 A JP2005157371 A JP 2005157371A JP 2005157371 A JP2005157371 A JP 2005157371A JP 4934802 B2 JP4934802 B2 JP 4934802B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- lymphatic
- cells
- colloidal particles
- drug
- group
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
Images
Landscapes
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Description
診断薬および/または治療薬とが、
コロイド粒子に含有され、該リガンド基含有化合物が該コロイド粒子の表面から露出していることを特徴とするリンパ系薬物輸送材である。
請求項4に記載の発明は、該リガンド基含有化合物が、前記式(I)で示されることを特徴とする請求項3に記載のリンパ系薬物輸送材である。
該コロイド粒子を分散させる分散液とを
含んでいることを特徴とするリンパ系疾患用薬剤である。
診断薬および/または治療薬とが、
コロイド粒子に含有され、
該リガンド基含有化合物が該コロイド粒子の表面から露出しているリンパ系薬物輸送材と、
該コロイド粒子を分散させる分散液とを、
含んでいることを特徴とするリンパ系疾患用薬剤である。
請求項7に記載の発明は、該リガンド基含有化合物が、前記式(I)で示されることを特徴とする請求項6に記載のリンパ系疾患用薬剤である。
請求項8に記載の発明は、該コロイド粒子が、リポソーム、金属含有コロイド粒子、生体分解性樹脂コロイド粒子、フチン酸含有コロイド粒子、硫黄コロイド粒子またはタンパク質コロイド粒子であることを特徴とする請求項6に記載のリンパ系疾患用薬剤である。
(1)AGS細胞の調製
始めに非特許文献1および2に記載の方法でα1,4−N−アセチルグルコサミン転移酵素(α4GnT)を調製した。
(i)ヒト由来のリンパ管内皮細胞を播種した培養皿で、細胞質染色用蛍光色素CFSE(株式会社同人化学研究所製:商品名)により標識したα1,4−GlcNAc発現AGS細胞を共培養し、静置した。30分後、培養皿を3回洗浄し、接着していないAGS細胞と浮遊しているAGS細胞とを除去した。この培養皿を、位相差顕微鏡と蛍光顕微鏡とを用いて、リンパ管内皮細胞に接着して蛍光しているAGS細胞を観察した。その結果を図1(a)に示す。
対照のため、α1,4−GlcNAc発現AGS細胞に代えて、α1,4−GlcNAc非発現AGS細胞を用いたこと以外は、前記(2)の(i)および(ii)と同様にして、リンパ管内皮細胞に接着して蛍光しているAGS細胞を観察した。その結果を図1(c)および(d)に示す。
TNF−α添加のα1,4−GlcNAc発現AGS細胞(図1(b)参照)は、TNF−α非添加のα1,4−GlcNAc発現AGS細胞(同図(a))よりも、多く培養ヒトリンパ管内皮細胞に接着していた。
(1)リンパ管内皮細胞のE−セレクチン発現試験
乳癌患者の乳腺内分泌外科手術をし、その承諾を得たヒトリンパ管内皮細胞を、培養し、免疫細胞化学像を観察したところ、培養ヒトリンパ管内皮細胞は、E−セレクチンを発現していることが確認された。リンパ行性ヒト胃癌細胞から大量に産生される炎症性サイトカインであるTNF−αを培養ヒトリンパ管内皮細胞に添加したところ、E−セレクチンの発現が増強していることが示された。
この試験から、リンパ管内皮細胞とリンパ球との細胞接着機構にリンパ管内皮細胞のE−セレクチンが関与していた。したがって、このリガンド基含有化合物としてシリアルルイスXが露出したリンパ系薬物輸送材は、AGS細胞であるリンパ行性腫瘍細胞存在下でリンパ管内皮細胞に極めて接着し易いものであることが示された。
卵黄レシチンより調製されたリン脂質をクロロホルムに溶いて、薄膜を作製した。これに、ジエチルエーテルとリン酸バッファーを加えて超音波で分散させた。さらにこれを超音波処理して、最終的にリン脂質濃度が20mg/mlであるSUVリポソームを調製した。このリポソーム0.5mlに、蛍光剤であるPKH26(Zynaxis社製)の1μlを加え、1分間震盪した後、ウシ胎児血清0.5mlを加えさらに1分間震盪して、リンパ系疾患用診断薬剤として、蛍光リポソームを得た。この薬剤は、蛍光剤がリポソームのリン脂質二重膜を標識して蛍光しているものである。
雄性ddYマウスにペントバルビタール75mg/kgBWを腹腔内投与して、麻酔を行った。調製実施例1で得たリンパ系疾患用診断薬剤を、マウスの足底に10μL皮下注入し、5分間足底のマッサージを負荷した。その後、足底と膝窩リンパ節とを、目視観察および蛍光観察した。いずれも蛍光が認められた。その結果を、図2の(a)および(b)に示す。なお、矢印は注射針刺入点である。その他の組織に蛍光は認められなかった。対照のためリンパ系疾患用診断薬剤無投与のマウスを同様に観察したが蛍光は認められなかった(同図(c)および(d)参照)。したがって、リンパ系疾患用診断薬剤は、リンパ節に集積することが確認された。
卵黄レシチンより調製されたリン脂質をクロロホルムに溶いて、薄膜を作製した。これに、ジエチルエーテルと蛍光剤であるローダミン6Gとが含まれたリン酸バッファーを加えた後、震盪させることにより分散させた。これを蒸発ゲル化させた後リン酸バッファー中に震盪分散させ、最終的なリン脂質濃度を20mg/mlにして、リンパ系疾患用診断薬剤としてREVリポソームを調製した。この薬剤は、蛍光剤がリポソームのリン脂質二重膜内空に封入されて蛍光しているものである。
雄の日本白色家兎にペントバルビタール20mg/kgBWとケタミン20mg/kgBWとを静脈内投与して、麻酔を行った。その後、ポリエチレンチューブを用いて膝窩リンパ節の節前リンパ管、または節後リンパ管へ逆行性にカニュレーションした。リン脂質に換算したリポソーム濃度10mg/mLである前記調製実施例2のリンパ系疾患用診断薬剤を、足背皮下に0.1mL注入した。1時間後、十分なリンパ流を得るため下肢全体の回転運動を行いながらリンパ液を採集した。その後、さらに15分間注入部位にマッサージを負荷して、リンパ液を採集した。それらを蛍光顕微鏡で観察したところ、マッサージ負荷によりリポソームのリンパ管への取込み量は著明に増加することが分った。
非特許文献1〜3の記載に従い、シアル酸トランスポーターの欠損した変異型チャイニーズハムスター卵巣(CHO)細胞であるLec2細胞に、α4GnTとコア2β1,6−N−アセチルグルコサミン転移酵素−I(C2GnT−I)を、可溶化CD43とともに遺伝子導入し、コア2分岐型O−グリカンの非還元末端にα1,4−N−アセチルグルコサミン含有糖鎖基を持つO−グリカンである前記化学式(I)のリガンド基含有化合物を調製した。
Claims (8)
- リンパ管内皮細胞およびセンチネルリンパ節細胞の少なくともいずれかの細胞に存在しそれにリンパ球またはリンパ行性腫瘍細胞を接着させる細胞接着因子のレセプターへ結合し得る、リガンド基含有化合物が、含まれており、その化合物の該リガンド基が、α1,4−N−アセチルグルコサミン含有糖鎖基とする非還元末端α1,4−N−アセチルアミノ糖含有糖鎖基であることを特徴とするリンパ系の細胞接着物質。
- リンパ管内皮細胞およびセンチネルリンパ節細胞の少なくともいずれかの細胞に存在しそれにリンパ球またはリンパ行性腫瘍細胞を接着させる細胞接着因子のレセプターへ結合し得るリガンド基含有化合物を、含んでおり、その化合物の該リガンド基が、α1,4−N−アセチルグルコサミン含有糖鎖基とする非還元末端α1,4−N−アセチルアミノ糖含有糖鎖基であるリンパ系の細胞接着物質と、
診断薬および/または治療薬とが、
コロイド粒子に含有され、該リガンド基含有化合物が該コロイド粒子の表面から露出していることを特徴とするリンパ系薬物輸送材。 - 該コロイド粒子が、リポソーム、金属含有コロイド粒子、生体分解性樹脂コロイド粒子、フチン酸含有コロイド粒子、硫黄コロイド粒子またはタンパク質コロイド粒子であることを特徴とする請求項3に記載のリンパ系薬物輸送材。
- リンパ管内皮細胞およびセンチネルリンパ節細胞の少なくともいずれかの細胞に存在しそれにリンパ球またはリンパ行性腫瘍細胞を接着させる細胞接着因子のレセプターへ結合し得るリガンド基含有化合物を、含んでおり、その化合物の該リガンド基が、α1,4−N−アセチルグルコサミン含有糖鎖基とする非還元末端α1,4−N−アセチルアミノ糖含有糖鎖基であるリンパ系の細胞接着物質と、
診断薬および/または治療薬とが、
コロイド粒子に含有され、
該リガンド基含有化合物が該コロイド粒子の表面から露出しているリンパ系薬物輸送材と、
該コロイド粒子を分散させる分散液とを、
含んでいることを特徴とするリンパ系疾患用薬剤。 - 該コロイド粒子が、リポソーム、金属含有コロイド粒子、生体分解性樹脂コロイド粒子、フチン酸含有コロイド粒子、硫黄コロイド粒子またはタンパク質コロイド粒子であることを特徴とする請求項6に記載のリンパ系疾患用薬剤。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2005157371A JP4934802B2 (ja) | 2005-05-30 | 2005-05-30 | リンパ系の細胞接着物質、リンパ系薬物輸送材およびそれを含有する薬剤 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2005157371A JP4934802B2 (ja) | 2005-05-30 | 2005-05-30 | リンパ系の細胞接着物質、リンパ系薬物輸送材およびそれを含有する薬剤 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2006328028A JP2006328028A (ja) | 2006-12-07 |
JP4934802B2 true JP4934802B2 (ja) | 2012-05-23 |
Family
ID=37550100
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2005157371A Active JP4934802B2 (ja) | 2005-05-30 | 2005-05-30 | リンパ系の細胞接着物質、リンパ系薬物輸送材およびそれを含有する薬剤 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JP4934802B2 (ja) |
Families Citing this family (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CA2717489A1 (en) * | 2008-02-29 | 2009-09-24 | Shinshu University | Kit for detecting cancer cells metastasizing into sentinel lymph node |
Family Cites Families (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US6191271B1 (en) * | 1997-09-05 | 2001-02-20 | Glycim Oy | Synthetic divalent sLex containing polylactosamines and methods for use |
AU5270500A (en) * | 1999-05-14 | 2000-12-05 | Regents Of The University Of California, The | Macromolecular carrier for drug and diagnostic agent delivery |
-
2005
- 2005-05-30 JP JP2005157371A patent/JP4934802B2/ja active Active
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JP2006328028A (ja) | 2006-12-07 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Mariño et al. | Targeting galectin-driven regulatory circuits in cancer and fibrosis | |
Doerschuk et al. | CD18-dependent and-independent mechanisms of neutrophil emigration in the pulmonary and systemic microcirculation of rabbits. | |
CN103480007B (zh) | 用于分子成像的超声造影剂 | |
US20030133972A1 (en) | Targeted multivalent macromolecules | |
US20100111840A1 (en) | Stabilized therapeutic and imaging agents | |
US20020071843A1 (en) | Targeted therapeutic agents | |
JPH11504329A (ja) | 細胞死の抑制および細胞中への作用物の分配に有用な組成物および方法 | |
US20030129223A1 (en) | Targeted multivalent macromolecules | |
US20030082103A1 (en) | Targeted therapeutic lipid constructs having cell surface targets | |
Hockl et al. | Glyco-nano-oncology: Novel therapeutic opportunities by combining small and sweet | |
Li et al. | Targeted imaging of CD206 expressing tumor-associated M2-like macrophages using mannose-conjugated antibiofouling magnetic iron oxide nanoparticles | |
Wang et al. | Exploring carbohydrates for therapeutics: A review on future directions | |
Dinu et al. | The antibiotic vancomycin induces complexation and aggregation of gastrointestinal and submaxillary mucins | |
US20040067196A1 (en) | Targeted therapeutic lipid constructs | |
JP2021504446A (ja) | 治療用ナノ生物学的組成物による訓練免疫の促進 | |
CN1953736A (zh) | 利用免疫应答系统的药物传递系统 | |
CN101208075A (zh) | 用于诱导免疫的脂质体组合物 | |
JP2004535407A (ja) | 標的化多価高分子 | |
Ahmed et al. | Molecular imaging of a new multimodal microbubble for adhesion molecule targeting | |
JPWO2007018273A1 (ja) | 糖鎖修飾リポソームを含有する診断薬送達組成物 | |
JP4934802B2 (ja) | リンパ系の細胞接着物質、リンパ系薬物輸送材およびそれを含有する薬剤 | |
WO2003028643A2 (en) | Targeted therapeutic lipid constructs having cell surface targets | |
WO2011091154A2 (en) | Use of human erythrocytes for prevention and treatment of cancer dissemination and growth | |
EP1420831A1 (en) | Lipid constructs as therapeutic and imaging agents | |
Mossenta et al. | Novel nanotechnology approaches to overcome drug resistance in the treatment of hepatocellular carcinoma: glypican 3 as a useful target for innovative therapies |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20080529 |
|
A977 | Report on retrieval |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971007 Effective date: 20110811 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20110816 |
|
A521 | Written amendment |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20111014 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20120124 |
|
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |