JP4915726B2 - Method and apparatus for measuring blood flow velocity - Google Patents

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  • Measuring Pulse, Heart Rate, Blood Pressure Or Blood Flow (AREA)
  • Image Analysis (AREA)

Description

この発明は、血流速度を画像分析により測定する方法及び装置に関するものである。   The present invention relates to a method and apparatus for measuring blood flow velocity by image analysis.

従来血流速度を測定する手段としては、脈波を用いるもの(例えば特開2005−279056号)、超音波を用いるもの(例えば特開2005−130969号)などが知られている。そして、画像処理により測定するものとしては特開2003−180641号の発明が提案されている。   Conventional means for measuring the blood flow velocity include those using pulse waves (for example, Japanese Patent Application Laid-Open No. 2005-279056) and those using ultrasonic waves (for example, Japanese Patent Application Laid-Open No. 2005-130969). Japanese Patent Laid-Open No. 2003-180641 has been proposed for measuring by image processing.

特開2003−180641号公報 この公報に記載された発明は、時系列的に記憶された画像のうち少なくとも3枚の画像に基づき画素の出力変動を測定し、出力変動に基づき演算処理を行うことにより血流速度を算出するものである。 また、この公報に従来技術として記載されている発明は、記憶された多数の画像における各画像の画素の出力変動を測定し、出力変動に基づき演算処理を行うことにより血流速度を算出するものである。In the invention described in this publication, pixel output fluctuations are measured based on at least three images among images stored in time series, and arithmetic processing is performed based on the output fluctuations. Is used to calculate the blood flow velocity. The invention described in this publication as the prior art measures the output fluctuations of the pixels of each image in a large number of stored images, and calculates the blood flow velocity by performing arithmetic processing based on the output fluctuations. It is.

このように、画像を分析することにより血流速度を算出する技術は存在しているが、血流の明度変化に着目して現実の血流を測定することにより血流速度を直接に測定する用にした技術は存在しない。   As described above, there is a technique for calculating the blood flow velocity by analyzing the image, but the blood flow velocity is directly measured by measuring the actual blood flow by paying attention to the change in the brightness of the blood flow. There is no technology to use.

この発明は、血流速度を直接的に測定可能とすることを課題とするものである。   An object of the present invention is to make it possible to directly measure the blood flow velocity.

請求項1ないし請求項4の発明は血流速度の測定方法に係るものであり、請求項1の発明は以下の手順により血流速度を測定する。
顕微鏡で照射した血流をビデオレコーダーなどの動画記録手段で記録する録画ステップ、記録された全ての画像の同じ位置におけるRGB色の平均値を計算して平均画像を得ることによりノイズを除去して血管画像を顕在化した画像を得るノイズ除去ステップ、編集画像から特定の血管を抽出する測定血管抽出ステップ、抽出された血管における明度の分布を経時的に測定、記録する測定ステップ、前記経時的な明度の分布の変化に基づき血流速度を計算する計算ステップ。
The first to fourth aspects of the present invention relate to a blood flow velocity measuring method, and the first aspect of the invention measures a blood flow velocity by the following procedure.
Recording step to record blood flow irradiated by microscope with video recording means such as video recorder , calculate average value of RGB color at the same position of all recorded images and obtain noise average image to remove noise A noise removing step for obtaining an image that reveals a blood vessel image, a measuring blood vessel extracting step for extracting a specific blood vessel from the edited image, a measuring step for measuring and recording the distribution of brightness in the extracted blood vessel over time, A calculation step for calculating a blood flow velocity based on a change in lightness distribution.

上記において、血流の録画は250−300コマ程度行うことが望ましく、時間では
8−10秒程度となる。また、観察部位は手の指の爪の付け根部分が好ましい。指先の爪との境目である爪上皮の部分は皮膚が薄いため、この部分を顕微鏡を用いて拡大すると該当部分の毛細血管が透けてみえやすいためである。そして、観察された部位は200倍程度以上に拡大して録画し、以後の処理を行うことが好ましい。そのためにオプティカルズーム200倍を持っているカメラ、レンズを用いることが適当である。
また、録画中に指の位置が移動する場合があるので、録画ステップに次いで、各画像における動画記録手段との位置のずれを修正する位置情報修正ステップを付加することが好ましい(請求項2)。また、被写体の50ピクセル以上の範囲を位置補正可能なカメラを用いて撮影すれば、位置情報修正作業は不要である。
前記位置情報修正ステップの具体的手段としては、録画された1枚の画像から特定の一部分の画像を指定し、全画像の画像ごとに指定された画像の近傍の範囲の中の画像と当該指定画像との相関関数を計算し、その計算で得られた相関値に基づいて各画像の位置情報を修正する方法が好適であるが、その他公知の手法を採用することもできる。
前記1枚の画像から特定の一部分を指定する際には、生画像では血管部分を認識しにくいので、RGBに色分解を行い、血管が認識しやすい色分解画像に基づいて行うと作業が容易である。経験的には赤又は緑の分解画像において血管が認識しやすい。なお、特定の画像は画像位置の相関関数の計算が可能であればよく、血管に限られない。
In the above, it is desirable to record blood flow about 250-300 frames, and the time is about 8-10 seconds. The observation site is preferably the base of the fingernail. This is because the portion of the nail epithelium, which is the boundary between the fingertip and the nail, has thin skin, and when this portion is enlarged using a microscope, the capillary blood vessels in the portion can easily be seen through. Then, it is preferable that the observed portion is enlarged and recorded by about 200 times or more, and the subsequent processing is performed. For this purpose, it is appropriate to use a camera and lens having an optical zoom of 200 times.
Further, since the position of the finger may move during recording, it is preferable to add a position information correction step for correcting a positional deviation of each image from the moving image recording means after the recording step. . In addition, if the range of 50 pixels or more of the subject is photographed using a camera capable of correcting the position, the position information correction work is unnecessary.
As specific means of the position information correction step, a specific part of an image is specified from one recorded image, and an image in a range in the vicinity of the specified image is specified for each image of all images and the specified A method of calculating a correlation function with an image and correcting position information of each image based on a correlation value obtained by the calculation is suitable, but other known methods can also be adopted.
When a specific part is specified from the one image, it is difficult to recognize a blood vessel part in a raw image. Therefore, if color separation is performed on RGB and a color separation image on which blood vessels are easy to recognize is used, the work is easy. It is. Empirically, blood vessels are easily recognized in red or green decomposition images. Note that the specific image is not limited to the blood vessel as long as the correlation function of the image position can be calculated.

録画された生画像は、血管部分とそれ以外の部分との明度差が比較的小さく、血管部分を明瞭に認識することが難しい。そこで、血管部分とそれ以外の部分との明度差を大きくして血管部分を明瞭に認識できるようにするためにノイズの除去を行う。
ノイズ除去の手段としては、各画像に明度差を拡大するフィルターをかける等の手法も考えられるが、各画像の同じ位置におけるRGB各色の平均値を計算して行うと効果的な結果が得られる。
経時的に記録された複数枚の画像におけるRGBの各色を平均化すると、各画像におけるノイズが打ち消しあい血管の部分が鮮明化されたノイズの低い画像を作成することが可能となる。
したがって、上記の手法を採ることにより、各画像は血管部分とそれ以外の部分の明度差が大きく、血管が明瞭に表された画像となる。以下ノイズが除去された画像を平均画像という。
The recorded raw image has a relatively small brightness difference between the blood vessel portion and the other portions, and it is difficult to clearly recognize the blood vessel portion. Therefore, noise is removed to increase the brightness difference between the blood vessel portion and the other portions so that the blood vessel portion can be clearly recognized.
As a means for removing noise, a method of applying a filter for increasing the brightness difference to each image may be considered. However, if an average value of each color of RGB at the same position of each image is calculated, an effective result can be obtained. .
When the RGB colors in a plurality of images recorded over time are averaged, it is possible to create a low noise image in which the noise in each image is canceled and the blood vessel portion is sharpened.
Therefore, by adopting the above-described method, each image has a large brightness difference between the blood vessel portion and the other portions, and the image is a blood vessel clearly represented. Hereinafter, an image from which noise has been removed is referred to as an average image.

上記において得られた平均画像により、測定に適した血管を選択する。測定に適した血管の条件は、ある程度の直線距離を備えることと血流における明度差が明瞭であることである。血流における明度差が明瞭であるとは、血液中の血球のない血液すなわち血漿がはっきりと区別できるということである。血漿は白く見えるので黒く見える血球との明度差が明瞭となる。   A blood vessel suitable for measurement is selected based on the average image obtained above. The blood vessel conditions suitable for the measurement are that a certain linear distance is provided and that the brightness difference in the blood flow is clear. A clear lightness difference in the bloodstream means that blood without blood cells in blood, ie plasma, can be clearly distinguished. Since the plasma appears white, the brightness difference from the black blood cells becomes clear.

次いで、全ての画像における前ステップで特定された測定対象血管の明度の分布の変異の画像信号に基づき経時的に測定する。具体的には前記血漿の移動を測定し、記録する。次いで、測定対象血管の長さと明度分布の移動の速度から、血流の速度を計算する。この課程は抽出した血管画像を動画として画面に表示して行うと、血流を視認しつつ測定することができるが、必ずしも画面に表示する必要はない。
前記明度分布の移動の測定は、血管の中心線において行うと精度が高い(請求項4)
Next, measurement is performed over time based on the image signal of the variation in the lightness distribution of the blood vessels to be measured specified in the previous step in all images. Specifically, the movement of the plasma is measured and recorded. Next, the blood flow velocity is calculated from the length of the blood vessel to be measured and the movement speed of the brightness distribution. In this process, when the extracted blood vessel image is displayed on the screen as a moving image, the blood flow can be measured while being visually recognized, but it is not necessarily displayed on the screen.
The measurement of the movement of the brightness distribution, high precision is performed in the center of the vessel (claim 4).

請求項5の発明は、上記方法を実施するための装置に関するものであり、顕微鏡で照射した血流を記録するビデオレコーダーなどの動画記録手段、記録されたすべての画像の同じ位置におけるRGB色の平均値を計算して平均画像を得ることによりノイズを除去して血管画像を顕在化した平均画像を得るノイズ除去手段、平均画像から測定対象となる血管を抽出する血管抽出手段、抽出された血管における明度の分布を経時的に測定、記録する測定手段、前記経時的な明度の分布の変化に基づき血流速度を計算する計算手段で構成する。
上記において、録画された1枚の画像から特定の一部分の画像を指定し、全画像の画像ごとに指定された画像の近傍の範囲の中の画像と当該指定画像との相関関数を計算し、その計算した相関値を修正する位置情報修正手段を付加することが好ましい。
The invention of claim 5 relates to an apparatus for carrying out the above method, and includes moving picture recording means such as a video recorder for recording blood flow irradiated by a microscope, and RGB colors at the same position of all recorded images . A noise removing unit that obtains an average image that reveals a blood vessel image by removing noise by calculating an average value and obtaining an average image, a blood vessel extracting unit that extracts a blood vessel to be measured from the average image, and an extracted blood vessel Measuring means for measuring and recording the lightness distribution over time, and calculating means for calculating the blood flow velocity based on the change in the lightness distribution over time.
In the above, a specific partial image is designated from one recorded image, and a correlation function between the designated image and an image in the vicinity of the designated image is calculated for each image of all images, It is preferable to add position information correction means for correcting the calculated correlation value.

前記位置情報修正手段は例えば以下の手順を実行するプログラムとして構成する。   The position information correcting means is configured as a program for executing the following procedure, for example.

(関心領域の抽出)
任意の1枚の画像(例えば1枚目の画像、以下「参照画像」という。)において、相関関数を計算する基礎となる範囲(以下「関心領域」という。)を特定するステップである。関心領域の抽出に際しては、まず指定画像を選択し、次いで選択画像を含む一定の範囲を関心領域として決定する。
前記指定画像は位置情報修正の要となる画像であるから、周辺の画像との明度差が顕著なものを選択する。そして、前記指定画像を中心として任意の領域を区切り、これを関心領域として決定する。
(Extract region of interest)
This is a step of specifying a range (hereinafter referred to as “region of interest”) as a basis for calculating a correlation function in an arbitrary image (for example, the first image, hereinafter referred to as “reference image”). When extracting a region of interest, a designated image is first selected, and then a certain range including the selected image is determined as a region of interest.
Since the designated image is an image that requires correction of position information, an image having a remarkable brightness difference from surrounding images is selected. Then, an arbitrary region is divided around the designated image, and this is determined as a region of interest.

(相関関数の計算)
相関関数の計算は、前記関心領域全体を基におこなう。具体的には例えば以下のように参照画像における関心領域と他の全ての画像(以下「比較画像」という。)との間で以下の計算を行う。
まず、参照画像における関心領域の各ピクセルのピクセル値(明度)と、参照画像における関心領域と比較画像における同じサイズの画像のピクセル値とを測定し、相関関数(両者のずれの大小)を算出する。比較画像の位置は前のコマから計算した最大相関関数に該当する位置になる。次いで、参照画像における関心領域とX軸方向に1ピクセルずれた位置における比較画像のピクセル値を測定し、参照画像との相関関数を算出し、同様にX軸、Y軸方向に所定範囲に亘り(例えばX軸方向に+15ピクセル、−15ピクセル、Y軸方向に+15ピクセル、−15ピクセル程度の範囲)1ピクセルずつ範囲を移動させつつ、各位置における相関関数を算出する。
(Calculation of correlation function)
The correlation function is calculated based on the entire region of interest. Specifically, for example, the following calculation is performed between the region of interest in the reference image and all other images (hereinafter referred to as “comparison images”) as follows.
First, measure the pixel value (brightness) of each pixel of the region of interest in the reference image and the pixel value of the region of interest in the reference image and the image of the same size in the comparison image, and calculate the correlation function (the difference between the two) To do. The position of the comparison image is a position corresponding to the maximum correlation function calculated from the previous frame. Next, the pixel value of the comparison image at a position shifted by one pixel in the X-axis direction from the region of interest in the reference image is measured, and a correlation function with the reference image is calculated. (For example, a range of about +15 pixels and −15 pixels in the X-axis direction, +15 pixels and −15 pixels in the Y-axis direction) The correlation function at each position is calculated while moving the range one pixel at a time.

前記における比較画像の移動毎に計算される相関関数を比較し、相関関数が最大である位置を検出する。相関関数が最大であるということは、当該領域の画像が参照画像における関心領域の画像と最も近似した特徴を備えているということであり、当該画像を平行移動することにより参照画像における指定画像と比較画像中の指定画像が重なる程度が高いことを意味する。
参照画像における関心領域における特定画像の位置と比較画像の特定画像の位置とが完全に一致していれば(両方の画像が、位置は異なるものの完全に同じ内容の関心領域を持っている場合)相関関数は1となり、関心領域の内容がほぼ一致している場合は1に近づく。
以下、全ての参照画像において同様の作業を行う。
The correlation functions calculated for each movement of the comparison image are compared, and the position where the correlation function is the maximum is detected. That the correlation function is maximum means that the image of the region has a feature most similar to the image of the region of interest in the reference image. This means that the degree of overlapping of the designated images in the comparative image is high.
If the position of the specific image in the region of interest in the reference image and the position of the specific image in the comparison image are exactly the same (when both images have different regions of interest but have the exact same content) The correlation function is 1, and approaches 1 when the contents of the region of interest are almost the same.
Thereafter, the same operation is performed on all reference images.

(レジストレーション)
二つの画像があって、一つの画像(参照画像)の中にある特徴を別の画像(比較画像)で探し、その特徴を二つの画像の中の位置を関連づけることがレジストレーション(Registration)である。
前記相関関数の計算ステップにおいて比較画像毎に参照画像の関心領域と相関関数が最大の画像位置が選択されている。そこで、相関関数が最大の画像位置に基づき各画像の位置情報を修正する。例えば、2枚目の画像においてX軸方向に+4,Y軸方向に−5移動した位置における画像の相関関数が最大であるとすれば、2枚目の画像の位置情報をX軸方向に−4,Y軸方向に+5修正する。
各画像においてこの作業を行うことにより参照画像及び全ての比較画像における特定画像の位置はほぼ一致することとなる。
以上の作業の後、処理されたデータを保存し、以下の処理はこの位置情報が修正されたデータにより行う。
(registration)
Registration is to search for a feature in one image (reference image) in another image (comparison image) and associate the feature with the position in the two images. is there.
In the correlation function calculating step, the region of interest of the reference image and the image position having the maximum correlation function are selected for each comparison image. Therefore, the position information of each image is corrected based on the image position having the maximum correlation function. For example, if the correlation function of the image at the position moved by +4 in the X-axis direction and −5 in the Y-axis direction in the second image is the maximum, the position information of the second image is − in the X-axis direction. 4. Correct +5 in the Y-axis direction.
By performing this operation for each image, the positions of the specific images in the reference image and all the comparative images are substantially the same.
After the above operations, the processed data is saved, and the following processing is performed using the data whose position information is corrected.

前記ノイズ除去は血管の画像を明瞭化する作業、すなわち血管と血管以外の部分との明度差を大きくする作業であり、手段は以下の手順を実行するプログラムである。
全画像にピクセル単位で番地を付与し、各番地におけるピクセル値をRGBごとに合算して画像の数で割って、その番地のRGBの平均値を出す。全部の番地ごとに全画像のピクセル値を平均値に揃えて平均画像とする。
The noise removal is an operation for clarifying an image of a blood vessel, that is, an operation for increasing a brightness difference between a blood vessel and a portion other than the blood vessel, and the means is a program for executing the following procedure.
Addresses are assigned to all images in units of pixels, and the pixel values at each address are added together for each RGB and divided by the number of images to obtain the average value of RGB at that address. For all addresses, the pixel values of all images are aligned with the average value to obtain an average image.

前記測定血管選択手段は、画像から血流が観察しやすい血管を抽出するものであり、前記平均画像を用いて行うことが好ましい。
血管の抽出効果を高めるためにコントラストを強くする。そして血管の外縁(Edge)の抽出をする。外縁の抽出の結果から極値の点を探し、連続している点を線にし、独立している点を削除し、線をスムージングして表し、血管を抽出する。
The measurement blood vessel selecting means extracts blood vessels in which blood flow is easy to observe from an image, and is preferably performed using the average image.
Increase the contrast to enhance the blood vessel extraction effect. Then, the outer edge (Edge) of the blood vessel is extracted. An extreme point is found from the result of extraction of the outer edge, continuous points are made into lines, independent points are deleted, lines are smoothed, and blood vessels are extracted.

前記血管の明度の分布を経時的に測定、記録する測定手段は、以下の手順を実行するプログラムで構成する。
抽出した血管画像においてその血管の連続方向における明度を記録する。次いで連続する画像における抽出した血管画像に対応する血管画像の連続方向における明度をそれぞれ記録する。
画像のひとつひとつの血管のピクセル明度値をとり、時間と位置との関係を計算する。時間とは、第一画像フレームの時間をゼロ秒として、画像毎に決定し、位置とは、番地番号の間の距離のことである。
この時間と位置とにより血流における明度の分布の変化速度を計算し、血流の速度を得る。
The measuring means for measuring and recording the distribution of lightness of blood vessels over time is constituted by a program that executes the following procedure.
The brightness in the continuous direction of the blood vessel is recorded in the extracted blood vessel image. Next, the brightness in the continuous direction of the blood vessel image corresponding to the extracted blood vessel image in the continuous image is recorded.
Take the pixel brightness value of each blood vessel in the image and calculate the relationship between time and position. The time is determined for each image with the time of the first image frame being zero seconds, and the position is a distance between the address numbers.
Based on this time and position, the rate of change of the lightness distribution in the bloodstream is calculated to obtain the bloodstream velocity.

この発明は、血流を録画し、記録されたすべての画像のノイズを除去して血管画像を顕在化した平均画像を得、平均画像から認識できる血管を抽出し、抽出された血管における明度の分布を経時的に測定、記録し、前記経時的な明度の分布の変化に基づき血流速度を計算するものであるから、血流を直接測定することが可能であり、簡易、迅速に正確な血流速度を求めることができる。
そして、この発明の方法において、画像に表示される血流を視認することが可能であるが、各処理ステップをプログラム化した場合、全自動化も可能であり、また全自動化した場合には、血流画像を表示しない装置として構成することもできる。
The present invention records blood flow, removes noise in all recorded images, obtains an average image that reveals blood vessel images, extracts blood vessels that can be recognized from the average image, and calculates the brightness of the extracted blood vessels. Since the distribution is measured and recorded over time, and the blood flow velocity is calculated based on the change in lightness distribution over time, the blood flow can be measured directly, and it is simple, quick and accurate. Blood flow velocity can be determined.
In the method of the present invention, it is possible to visually recognize the blood flow displayed in the image. However, when each processing step is programmed, full automation is possible, and when fully automated, It can also be configured as a device that does not display a stream image.

(録画)
200倍程度の倍率の顕微鏡からの光学画像をCCDセンサー上に照射し、その画像を毎秒30コマで録画する。録画時間は10秒程度を目処とし、コマ数は280から300コマ程度となる。
(Recording)
An optical image from a microscope with a magnification of about 200 times is irradiated on the CCD sensor, and the image is recorded at 30 frames per second. The recording time is about 10 seconds, and the number of frames is about 280 to 300 frames.

(位置情報修正)
(1)血管の外縁の抽出
任意の1枚の画像(例えば1枚目の画像、以下「参照画像」という。)において、血管の外縁を抽出するステップである。画像の中の明度の高いピクセルを線でつなぐと血管の外縁が得られる。U字状をなす外縁が、後における相関関数の測定において正確な結果が期待できる。
(Position information correction)
(1) Extraction of outer edge of blood vessel In this step, the outer edge of the blood vessel is extracted from any one image (for example, the first image, hereinafter referred to as “reference image”). The outer edge of the blood vessel can be obtained by connecting pixels of high brightness in the image with lines. The U-shaped outer edge can be expected to give accurate results in later correlation function measurements.

(2)関心領域の決定
相関関数の測定に適している血管の外縁は、U字状をなし、かつ長さが長く、画像の外枠から一定の距離(例えばX=30ピクセル,Y=30ピクセル)離れているものである。この程度離れていないと、比較画像において画面の外枠からはみ出すおそれがあるためである。
上記の条件を満たす外縁は一般にピクセル数が多いので、1枚の画像から得られる複数の血管の外縁を、ピクセル数の多い順に並べることにより、好適な外縁を自動的に選定することができる。
ここで選定された外縁を特定画像1と決定し、この特定画像を中央にしてX、Y方向共に30ピクセル程度の枠を設定して、これを関心領域2とする(図1)。関心領域に対応する位置における比較画像では、録画時の指の微動によりコマ毎に特定画像の位置が僅かに移動している(図2)。
(2) Determination of region of interest The outer edge of the blood vessel suitable for the measurement of the correlation function is U-shaped and long, and is a certain distance from the outer frame of the image (for example, X = 30 pixels, Y = 30). Pixels) This is because the comparison image may protrude from the outer frame of the screen if it is not so far away.
Since the outer edge that satisfies the above conditions generally has a large number of pixels, a suitable outer edge can be automatically selected by arranging the outer edges of a plurality of blood vessels obtained from one image in the order of the number of pixels.
The outer edge selected here is determined as the specific image 1, and a frame of about 30 pixels is set in the X and Y directions with the specific image as the center, and this is set as the region of interest 2 (FIG. 1). In the comparative image at the position corresponding to the region of interest, the position of the specific image is slightly moved for each frame due to the fine movement of the finger during recording (FIG. 2).

(相関関数の計算)
相関関数の計算は、前記関心領域全体を基におこなう。具体的には例えば以下のように参照画像における関心領域と他の全ての画像(比較画像)との間で以下の計算を行う。
まず、参照画像における関心領域の各ピクセルのピクセル明度値と、参照画像における関心領域と一致する位置及び範囲における比較画像のピクセル明度値とを測定し、相関関数(両者のずれの大小)を算出する。次いで、参照画像における関心領域とX軸方向に1ピクセルずれた位置における比較画像のピクセル明度値を測定し、参照画像の関心領域のピクセル明度値との相関関数を算出し、同様にX軸方向に+15ピクセル、−15ピクセル、Y軸方向に+15ピクセル、−15ピクセル程度の範囲に亘り1ピクセルずつ範囲を移動させつつ、各位置におけるピクセル明度値の相関関数を算出する(図3)。
(Calculation of correlation function)
The correlation function is calculated based on the entire region of interest. Specifically, for example, the following calculation is performed between the region of interest in the reference image and all other images (comparison images) as follows.
First, measure the pixel brightness value of each pixel of the region of interest in the reference image and the pixel brightness value of the comparison image at a position and range that matches the region of interest in the reference image, and calculate the correlation function (the magnitude of the difference between the two) To do. Next, the pixel brightness value of the comparison image at a position shifted by one pixel in the X-axis direction from the region of interest in the reference image is measured, and a correlation function with the pixel brightness value of the region of interest in the reference image is calculated. The correlation function of the pixel brightness value at each position is calculated while moving the range by 1 pixel over a range of +15 pixels, −15 pixels, +15 pixels in the Y-axis direction, and −15 pixels (FIG. 3).

前記における比較画像の移動毎に計算される相関関数を比較し、相関関数が最大である位置を検出する。
以下、全ての参照画像において同様の作業を行う。
図4は各画像における相関関数が最大である画像と参照画像における関心領域のずれをX軸、Y軸ごとに示したものである。
The correlation functions calculated for each movement of the comparison image are compared, and the position where the correlation function is the maximum is detected.
Thereafter, the same operation is performed on all reference images.
FIG. 4 shows the deviation of the region of interest in the image having the maximum correlation function in each image and the reference image for each X axis and Y axis.

(レジストレーション)
前記相関関数の計算ステップにおいて比較画像毎に参照画像の関心領域と相関関数が最大の画像位置が選択されている。そこで、相関関数が最大の画像位置に基づきその相関関数が最大の画像位置が参照画像の関心領域の位置と一致するように各画像の位置情報を修正する。
各画像においてこの作業を行うことにより参照画像及び全ての比較画像における特定画像の位置をほぼ一致させる。
以上の作業の後、処理されたデータを保存し、以下の処理はこの位置情報が修正されたデータにより行う。
(registration)
In the correlation function calculating step, the region of interest of the reference image and the image position having the maximum correlation function are selected for each comparison image. Therefore, based on the image position with the maximum correlation function, the position information of each image is corrected so that the image position with the maximum correlation function matches the position of the region of interest of the reference image.
By performing this operation on each image, the positions of the specific images in the reference image and all the comparative images are substantially matched.
After the above operations, the processed data is saved, and the following processing is performed using the data whose position information is corrected.

(3)ノイズ除去
ノイズ除去により血管の画像を明瞭にする。
前記ノイズ除去手段は以下の手順を実行するプログラムである。
レジストレーションされた全画像にピクセル単位で番地を付け、全ての番地におけるピクセル値を測定する。次いで、全画像の同一の番地のピクセルにおけるRGBに色分解された各色の数値をそれぞれ合計し、画像の数で割ることによって、その番地の全ての画像のRGBに分解された色毎のピクセル値の平均値を得る。
次いで、全画像の全部の番地のピクセル値を前記操作で得たピクセルの平均値に置き換えて平均画像を得る。
この作業により、各画像のノイズが打ち消される結果、血管が不鮮明な処理前の画像(図5)から、血管が鮮明に表れた画像(図6)が得られる。
(3) Noise removal Clarify blood vessel images by noise removal.
The noise removing means is a program for executing the following procedure.
All registered images are assigned addresses in pixels, and pixel values at all addresses are measured. Next, the pixel values for each color separated into RGB of all the images at that address by summing the numerical values of each color separated into RGB at the pixels at the same address of all the images and dividing by the number of images Get the average value of.
Subsequently, the pixel values of all addresses in all the images are replaced with the average value of the pixels obtained by the above operation, thereby obtaining an average image.
As a result of this operation, the noise of each image is canceled, and as a result, an image (FIG. 6) in which the blood vessels appear clearly is obtained from the image before the processing (FIG. 5) where the blood vessels are unclear.

(血管抽出)
前記平均画像に基づいて、血流を測定する血管を抽出する。
平均画像を読み込み、G色(他の色でもよいがG又はRが好適)のピクセル値に基づいて血管の輪郭(エッジ・Edge)を抽出する(図7)。次いで、横方向、縦方向、対角線方向(左上から右下、右上から左下)の4方向においてピクセル値の変化を測定しそれぞれの方向における局部極値を得る。図8は横方向のピクセル値を示すグラフであり、丸印を付した値が局部極値である。
次いで、全方向の局部極値を結んだ線を得て、独立している点を削除する(図9)。
双線のU形の部分を探して、U形の部分から下向きに連続する血管を抽出する(図10)。
血管の抽出処理が終わったら血管に直接接続していない線は不要のため削除し、ノイズのない画面とする。
(Blood vessel extraction)
A blood vessel for measuring blood flow is extracted based on the average image.
The average image is read, and the outline (edge / edge) of the blood vessel is extracted based on the pixel value of G color (which may be other colors but G or R is preferable) (FIG. 7). Next, changes in pixel values are measured in four directions: horizontal direction, vertical direction, and diagonal direction (upper left to lower right, upper right to lower left) to obtain local extreme values in the respective directions. FIG. 8 is a graph showing the pixel values in the horizontal direction, and the values with circles are local extreme values.
Next, a line connecting local extreme values in all directions is obtained, and independent points are deleted (FIG. 9).
The U-shaped portion of the double line is searched, and blood vessels that continue downward from the U-shaped portion are extracted (FIG. 10).
When the blood vessel extraction process is completed, the lines that are not directly connected to the blood vessels are unnecessary and are deleted so that the screen is free from noise.

(血流の測定)
抽出した血管画像を行ごとにスキャンする。スキャンの一つの血管の行の開始の番地番号と終了の番地番号のX軸方向の真中の番地番号は、その血管の行の中心点の番地番号になり、抽出した血管画像の全長に亘り中心点の番地番号を取得する。この中心点を線でつなぐと血管の中心線が得られる。
前記の血管の中心線の上の全ての中心点のピクセル値(明度)を測定する。中心線の明度を測定すると、血漿に対応する部分では明度が高く、図11のようなグラフが得られる。図11において、縦軸は明度、横軸は距離(ピクセル)であり、230コマ目と231コマ目を示している。
同じようにこの画像のすべての血管の中心線のグラフをつくる。そして、同様にすべての画像の時間に対応するすべての血管の中心線のグラフをつくると同じ血管のグラフがゼロ秒から最後のフレーム相当の時間まで揃う。図12は1つの血管の測定結果を230コマ目から250コマ目まで表示したものであるが、300コマの画像を撮影したときは、このようなデータが300表示されることになる。そして、1秒30コマで録画した場合、コマ間の時間差は1/30秒である。
(Measurement of blood flow)
The extracted blood vessel image is scanned line by line. The middle address number in the X-axis direction of the start address number and end address number of one blood vessel row of the scan is the address number of the center point of the row of the blood vessel, and is centered over the entire length of the extracted blood vessel image. Get the address number of a point. When this center point is connected by a line, the center line of the blood vessel is obtained.
The pixel values (brightness) of all center points on the blood vessel center line are measured. When the brightness of the center line is measured, the brightness corresponding to plasma is high and a graph as shown in FIG. 11 is obtained. In FIG. 11, the vertical axis represents lightness, and the horizontal axis represents distance (pixels), indicating the 230th frame and the 231st frame.
Similarly, create a graph of the centerline of all blood vessels in this image. Similarly, if a graph of the center line of all blood vessels corresponding to the time of all images is created, the same blood vessel graph is aligned from zero seconds to the time corresponding to the last frame. FIG. 12 shows the measurement result of one blood vessel from the 230th frame to the 250th frame, but when 300 frames of images are taken, 300 such data are displayed. When recording at 30 frames per second, the time difference between frames is 1/30 seconds.

以下、図11に示した2コマの結果に基づき血流速度の計算方法を示す。
まず連続する二つのコマの画像を移動させつつ1ピクセル移動する毎に信号の相関関数を計算し、相関関数が最大となる位置における二つのコマの位置の差を求める。この差がコマ間における血流の移動距離である。具体的には以下の手順で行う。
Hereinafter, a blood flow velocity calculation method will be described based on the results of the two frames shown in FIG.
First, the signal correlation function is calculated every time one pixel is moved while moving the images of two consecutive frames, and the difference between the positions of the two frames at the position where the correlation function is maximized is obtained. This difference is the moving distance of blood flow between frames. Specifically, the following procedure is performed.

すべての画像のおなじ中心線の番地番号のピクセル値(明度)を合算して画像の数で割り、その番地番号のピクセルの平均値を得る。そして、すべての同じ番地番号のグラフ値からこの平均値を引き、同じ中心線の違う時間のグラフの値との相関関数を計算する。その結果によって明度のピークの移動距離を計算する。
平均値をとることにより明度の変化がきわだって見えるようになる。
The pixel values (brightness) of the address numbers of the same center line of all the images are added together and divided by the number of images to obtain the average value of the pixels of the address numbers. Then, the average value is subtracted from the graph values of all the same address numbers, and a correlation function with the graph values of the same center line at different times is calculated. Based on the result, the moving distance of the lightness peak is calculated.
By taking the average value, the change in brightness can be seen clearly.

平均値による処理を行った後、図11における231コマ目の信号を左へ30ピクセル移動してこの位置から右へ61ピクセルの位置まで移動させつつ(当初位置を基準にすると、+−各30ピクセルの移動となる)、1ピクセル移動させる毎に、番地毎に230コマ目の対応する番地の明度との相関値を計算する。相関値(C)の計算は、番地毎に230コマ目の明度(xk)と231コマ目の信号値(yk)を掛け合わせ、各番地における計算結果を合算し、その数値と230コマ目及び231コマ目の各番地の信号値を二乗した値の合算値とを比較して計算する。
具体的な計算式は以下のとおりである。

n・・・画像中のピクセル数
x・・・参照画像の特定の番地の明度
y・・・比較画像の特定の番地の明度
a・・・参照画像の全て簿番地の明度の平均値
b・・・比較画像の全ての番地の明度の平均値
その結果、図13のようなグラフが得られる。
このグラフにおいて相関値が最も高い点は−8ピクセルの位置(231コマ目の信号を左に8ピクセル移動した位置)である。
このことから、230コマ目から231コマ目の間で血漿の位置は8ピクセル移動したことが分かる。そして、二つのコマの時間差は1/30秒であるから、この間の血漿の移動速度は
8(ピクセル)/1/30(秒)=240ピクセル/秒
となる。
1ミリ=82ピクセルであるから、
血流速度は、240ピクセル/秒 × (1/82)ミリ/ピクセル となる。
After processing by the average value, the signal of the 231st frame in FIG. 11 is moved 30 pixels to the left and moved from this position to the position of 61 pixels to the right (with reference to the initial position, + −each 30 Each time one pixel is moved, a correlation value with the lightness of the corresponding address at the 230th frame is calculated for each address. The correlation value (C) is calculated by multiplying the lightness (xk) at the 230th frame by the signal value (yk) at the 231st frame for each address, adding up the calculation results at each address, Calculation is performed by comparing the sum of the squared values of the signal values at the addresses of the 231st frame.
The specific calculation formula is as follows.

n: Number of pixels in the image x: Lightness of a specific address in the reference image
y ・ ・ ・ Lightness of a specific address in the comparison image
a ... Average value of the brightness of all the reference addresses in the reference image
b: Average value of brightness of all addresses in the comparison image As a result, a graph as shown in FIG. 13 is obtained.
In this graph, the point having the highest correlation value is the position of -8 pixels (the position obtained by moving the signal of the 231st frame to the left by 8 pixels).
From this, it can be seen that the position of the plasma moved 8 pixels between the 230th frame and the 231st frame. Since the time difference between the two frames is 1/30 seconds, the plasma moving speed during this period is 8 (pixels) / 1/30 (seconds) = 240 pixels / second.
Since 1 mm = 82 pixels,
The blood flow velocity is 240 pixels / second × (1/82) millimeter / pixel.

以上要するに、血管中の特定の血漿の移動を追跡して血流速度を求めるものである。したがって、理論的には所定の時間を空けて撮影した二枚の画像に基づいて血流速度を求めることが可能である。
しかしながら、血漿が全ての画像(コマ)に存在するとは限らない。また血漿の位置が測定対象としている血管の中心線からずれている場合もある。このような場合、ピクセル値の相関関数の計算が不能であったり不正確であったりし、血流速度を正確に求めることができない。
そこで、上記のように多数枚の画像を用意し、隣接するコマのピクセル値の相関関数を求めることにより、正確な血流速度が得られるようにしている。
In short, blood flow velocity is obtained by tracking the movement of specific plasma in blood vessels. Therefore, theoretically, it is possible to obtain the blood flow velocity based on two images taken with a predetermined time interval.
However, plasma is not necessarily present in all images (frames). In some cases, the position of plasma is shifted from the center line of the blood vessel to be measured. In such a case, the calculation of the correlation function of the pixel value is impossible or inaccurate, and the blood flow velocity cannot be obtained accurately.
Therefore, an accurate blood flow velocity is obtained by preparing a large number of images as described above and obtaining a correlation function of pixel values of adjacent frames.

この発明は、顕微鏡で照射した血流を動画として記録する録画ステップ、記録されたすべての画像のノイズを除去して血管画像を顕在化した平均画像を得るノイズ除去ステップ、平均画像から認識できる血管を抽出する血管抽出ステップ、抽出された血管における明度の分布を経時的に測定、記録する測定ステップ、前記経時的な明度の分布の変化に基づき血流速度を計算する計算ステップ、を順次行うことにより、血管を画像として抽出し、血流の明度の変化に基づいて血流速度を測定するものであって、血流速度を簡易にかつ正確に測定することができる。
また、画像処理をプログラム化することにより、血流速度の測定を自動化することも可能であり、産業上の利用可能性を有するものである。
The present invention provides a recording step for recording a blood flow irradiated by a microscope as a moving image, a noise removal step for removing an image of all recorded images to obtain an average image in which a blood vessel image is actualized, and a blood vessel that can be recognized from the average image A blood vessel extraction step for extracting the blood flow, a measurement step for measuring and recording the lightness distribution in the extracted blood vessel over time, and a calculation step for calculating the blood flow velocity based on the change in the lightness distribution over time. Thus, blood vessels are extracted as an image and the blood flow velocity is measured based on the change in the brightness of the blood flow, and the blood flow velocity can be measured easily and accurately.
In addition, by measuring the image processing, it is possible to automate the measurement of blood flow velocity, which has industrial applicability.

特定画像と関心領域を示す図Diagram showing specific image and region of interest 連続する5コマにおける特定画像の位置のずれを示す図The figure which shows the shift | offset | difference of the position of the specific image in five continuous frames 相関関数の算出手法を示す図Diagram showing correlation function calculation method コマ間の関心領域のずれを示すグラフGraph showing the shift of the region of interest between frames 1コマの画像をRGB色分解した画像Image obtained by RGB color separation of one frame image 全てのコマの平均画像をRGB色分解した画像Image obtained by RGB color separation of the average image of all frames 血管のEdgeを抽出した画像Extracted image of blood vessel edge ピクセル値の変化を示すグラフGraph showing changes in pixel values 局部極値を線で結び独立した点を削除した画像Image with local extrema connected by lines and independent points removed U形部分に連続する血管を抽出した画像An image of blood vessels extracted from the U-shaped part 連続する2コマの血管の中心におけるピクセル値を示すグラフGraph showing the pixel value at the center of two consecutive blood vessels 連続する20コマの血管の中心におけるピクセル値を示すグラフGraph showing the pixel value at the center of 20 consecutive blood vessels 血流速度計算の手法を示すグラフGraph showing blood flow velocity calculation method

符号の説明Explanation of symbols

1 特定画像
2 関心領域
1 specific image 2 region of interest

Claims (6)

顕微鏡で照射した血流を動画記録手段により記録する録画ステップ、
記録されたすべての画像の同じ位置におけるRGB色の平均値を計算して平均画像を得ることによりノイズを除去して血管画像を顕在化した平均画像を得るノイズ除去ステップ、
平均画像から認識できる血管を抽出する血管抽出ステップ、
抽出された血管における明度の分布を経時的に測定、記録する測定ステップ、
前記経時的な明度の分布の変化に基づき血流速度を計算する計算ステップ、
よりなる血流速度の測定方法。
Recording step of recording blood flow irradiated with a microscope by a moving image recording means,
A noise removal step of obtaining an average image that reveals a blood vessel image by removing the noise by calculating an average value of RGB colors at the same position of all recorded images to obtain an average image;
A blood vessel extraction step for extracting blood vessels that can be recognized from the average image;
A measurement step for measuring and recording the distribution of lightness in the extracted blood vessel over time;
A calculation step of calculating a blood flow velocity based on a change in lightness distribution over time;
A method for measuring blood flow velocity.
指と動画記録手段との相対位置の変動のため録画された画像の中の血管には位置のズレがあるため、位置のずれを修正する位置情報修正ステップを付加した、請求項1記載の血流速度の測定方法。 2. The blood according to claim 1, further comprising a position information correction step for correcting a positional shift because there is a positional shift in the blood vessel in the recorded image due to a change in relative position between the finger and the moving image recording means. Measurement method of flow velocity. 位置情報修正ステップは、録画された1枚の画像から特定の一部分の画像を指定し、全画像の画像ごとに前記指定された画像の近傍の範囲の中の画像と当該指定画像との相関関数を計算し、その計算した相関値に基づき各画像の位置情報を修正することとした。請求項2記載の血流速度の測定方法。 The position information correction step designates a specific partial image from one recorded image, and a correlation function between an image in a range in the vicinity of the designated image and the designated image for each image of all images And the position information of each image is corrected based on the calculated correlation value. The blood flow velocity measuring method according to claim 2. 血管における明度の分布の測定は、抽出した血管の中心線において行うこととした、請求項1記載の血流速度の測定方法。 The method for measuring blood flow velocity according to claim 1, wherein the measurement of the distribution of lightness in the blood vessel is performed at the center line of the extracted blood vessel. 顕微鏡で照射した血流を記録する動画記録手段、記録されたすべての画像の同じ位置におけるRGB色の平均値を計算して平均画像を得ることによりノイズを除去して血管画像を顕在化した平均画像を得るノイズ除去手段、平均画像から認識できる血管を抽出する血管抽出手段、抽出された血管における明度の分布を経時的に測定、記録する測定手段、前記経時的な明度の分布の変化に基づき血流速度を計算する計算手段、よりなる血流速度の測定装置。 Moving picture recording means for recording blood flow irradiated with a microscope, average of RGB values at the same position of all recorded images and obtaining an average image to remove noise and reveal the blood vessel image Noise removing means for obtaining an image, blood vessel extracting means for extracting a recognizable blood vessel from an average image, measurement means for measuring and recording a lightness distribution in the extracted blood vessel over time, based on the change in lightness distribution over time A blood flow velocity measuring device comprising a calculation means for calculating a blood flow velocity. 録画された1枚の画像から特定の一部分の画像を指定し、全画像ごとに前記指定された画像の近傍の範囲の中の画像と当該指定画像との相関関数を計算し、その計算した相関値に基づき各画像の位置情報を修正する位置情報修正手段が付加された、請求項5記載の血流速度の測定装置。 A specific partial image is designated from one recorded image, and a correlation function between the designated image and the image in the vicinity of the designated image is calculated for every image, and the calculated correlation is calculated. 6. The blood flow velocity measuring device according to claim 5 , further comprising position information correcting means for correcting the position information of each image based on the value.
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