JP4796489B2 - Method for measuring cholesterol in high density lipoprotein - Google Patents

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Description

本発明は、検体中の高密度リポ蛋白中のコレステロールの測定方法、測定用試薬および測定用キットに関する。  The present invention relates to a method for measuring cholesterol in high-density lipoprotein in a specimen, a measuring reagent, and a measuring kit.

生体中リポ蛋白は、その比重により高密度リポ蛋白(以下、HDLと略記する)、低密度リポ蛋白(以下、LDLと略記する)、超低密度リポ蛋白(以下、VLDLと略記する)、カイロミクロン(以下、CMと略記する)に分類されており、それぞれ主にアポ蛋白の種類の違いによって生体中での働きが大きく異なっており、脂質組成もさまざまである。その中で、HDLは、動脈壁を含めた各組織からコレステロールを受け取るために細胞内に蓄積したコレステロールの除去作用に関係し、冠動脈硬化症をはじめとする各種動脈硬化症の危険予防因子であり、その血中レベルは動脈硬化性疾患の発症予知の有用な指針となることが知られている。  Lipoproteins in living bodies are high density lipoproteins (hereinafter abbreviated as HDL), low density lipoproteins (hereinafter abbreviated as LDL), very low density lipoproteins (hereinafter abbreviated as VLDL), cairo. It is classified into micron (hereinafter abbreviated as CM), and its function in the living body is greatly different mainly depending on the kind of apoprotein, and the lipid composition is also various. Among them, HDL is related to the removal action of cholesterol accumulated in cells to receive cholesterol from tissues including arterial wall and is a risk prevention factor for various arteriosclerosis including coronary arteriosclerosis. The blood level is known to be a useful guide for predicting the onset of arteriosclerotic diseases.

従来のHDL中のコレステロール(以下、HDLコレステロールと略記する)の測定法は、超遠心法、免疫化学的方法、電気泳動法、沈殿法等による分画操作とコレステロール定量操作の2段階からなる。しかしながら、分画操作は、操作が煩雑であり、長時間を要するものであり、また、安全性の点でも問題があった。従って、これらの分離操作を伴う測定法は極めて効率が悪く、実用化に適さない方法であった。  A conventional method for measuring cholesterol in HDL (hereinafter abbreviated as HDL cholesterol) consists of two steps: fractionation by ultracentrifugation, immunochemical method, electrophoresis, precipitation, etc. and cholesterol quantification. However, the fractionation operation is complicated and takes a long time, and there is a problem in terms of safety. Therefore, these measuring methods involving separation operations are extremely inefficient and unsuitable for practical use.

近年、上記の問題を解決するために、種々の測定法が報告されている。例えば、血清または血漿を、コレステロールエステラーゼ、コレステロールオキシダーゼ、および、胆汁酸塩または胆汁酸誘導体またはジオクチルスルホサクシネートを含有する緩衝液中で当該酵素と反応させ、VLDLおよびLDL中のコレステロールをHDLコレステロールに先駆けて反応させ、生成した過酸化水素を測定した後、非イオン系のポリオキシエチレンオキシド基含有界面活性剤を反応液に添加し、HDLコレステロールと当該酵素とを反応させ、HDLコレステロールを特異的に分別定量する方法(特許文献1参照)、血清を、特定のpHおよび特定の温度の下、膵臓由来のコレステロールエステラーゼ、コレステロールオキシダーゼ、胆汁酸群の界面活性剤、および、非イオン系界面活性剤を含有する緩衝液中で当該酵素と反応させることによりHDLコレステロールを測定する方法(特許文献2参照)が知られている。特許文献2に記載の測定法では、まず、LDLコレステロールと当該酵素との反応が進行し、次いで、HDLコレステロールと当該酵素との反応が進行し、HDLコレステロールの測定が可能となる。しかしながら、これらの測定法は、測定に長時間を要し、また、必ずしも、HDLコレステロールに特異的な測定法ではなかった。  In recent years, various measurement methods have been reported to solve the above problems. For example, serum or plasma is reacted with the enzyme in a buffer containing cholesterol esterase, cholesterol oxidase, and bile salts or bile acid derivatives or dioctylsulfosuccinate, and cholesterol in VLDL and LDL is converted to HDL cholesterol. After pioneering the reaction and measuring the generated hydrogen peroxide, a nonionic polyoxyethylene oxide group-containing surfactant is added to the reaction solution, the HDL cholesterol reacts with the enzyme, and the HDL cholesterol is specifically reacted. A method for fractional quantification (see Patent Document 1), serum, pancreatic cholesterol esterase, cholesterol oxidase, bile acid group surfactant, and nonionic surfactant under a specific pH and a specific temperature In the buffer containing Method for measuring HDL cholesterol (see Patent Document 2) it is known by reaction with. In the measurement method described in Patent Document 2, first, the reaction between LDL cholesterol and the enzyme proceeds, and then the reaction between HDL cholesterol and the enzyme proceeds, whereby HDL cholesterol can be measured. However, these measurement methods require a long time for measurement, and are not necessarily measurement methods specific to HDL cholesterol.

HDL以外のリポ蛋白を凝集させてHDLコレステロールを測定する方法としては、例えばデキストラン硫酸等のHDL以外のリポ蛋白を凝集させる試薬、2価の金属塩、および、化学的に修飾された酵素を用いる測定法(特許文献3参照)、ポリアニオン等のHDL以外のリポ蛋白と複合体を形成する試薬と、ポリオキシエチレン−ポリオキシプロピレン縮合物等のリポ蛋白を溶解しない界面活性剤とを用いる測定法(特許文献4参照)、デキストラン硫酸等のポリアニオン、2価の金属塩、特定の非イオン性界面活性剤および試料由来のアルブミンとは別異のアルブミンとを用いる測定法(特許文献5参照)、血清または血漿を、リポ蛋白分画剤(デキストラン硫酸等のポリアニオンとマグネシウムイオン等の2価陽イオンとの組み合わせ)を含む溶液で処理し、得られた混合液を固体および液体の分離処理することなく、アニオン性界面活性剤(アルキルスルホン酸または胆汁酸もしくはその誘導体)の存在下に、コレステロールエステラーゼおよびコレステロールオキシダーゼと反応させ、生成した過酸化水素を測定することを特徴とする血清または血漿中のHDLコレステロールを測定する方法(特許文献6参照)等が知られている。  As a method for aggregating lipoproteins other than HDL and measuring HDL cholesterol, for example, a reagent that aggregates lipoproteins other than HDL such as dextran sulfate, a divalent metal salt, and a chemically modified enzyme are used. Measurement method (see Patent Document 3), measurement method using a reagent that forms a complex with lipoproteins other than HDL such as polyanions, and a surfactant that does not dissolve lipoproteins such as polyoxyethylene-polyoxypropylene condensate (Refer to Patent Document 4), measurement method using polyanion such as dextran sulfate, divalent metal salt, specific nonionic surfactant and albumin different from albumin derived from sample (refer to Patent Document 5), Serum or plasma is combined with lipoprotein fractions (polyanions such as dextran sulfate and divalent cations such as magnesium ions) Cholesterol esterase and cholesterol oxidase in the presence of an anionic surfactant (alkylsulfonic acid or bile acid or derivative thereof) without subjecting the resulting mixture to a solid and liquid separation treatment. There is known a method for measuring HDL cholesterol in serum or plasma (see Patent Document 6), which comprises measuring the amount of hydrogen peroxide produced by reacting with glycerol.

しかしながら、これらのHDL以外のリポ蛋白を凝集させるHDLコレステロール測定法においては、従来の基準法と良好な相関性があるものの、反応で生成する凝集物による濁りに起因する不正確性、反応セルのアルカリ洗浄の際に、反応液中の金属塩との反応で生成する金属水酸化物の析出による自動分析装置への過度の負荷等の問題がある。
HDL以外のリポ蛋白を凝集させずにHDLコレステロールを測定する方法としては、例えば生体試料と、膵臓由来のコレステロールエステラーゼおよびコレステロールオキシダーゼとを、胆汁酸もしくはその塩およびアルブミン存在下に反応させ、当該酵素反応により消費または生成する化合物を測定することによる生体試料中のHDLコレステロールの測定方法(特許文献7参照)、HDL画分に対して反応選択性をもつHLB値が16以上の非イオン性界面活性剤の存在下に、検体と、HDL画分に優先的に作用するリポプロテインリパーゼおよび/またはコレステロールエステラーゼならびにコレステロール酸化酵素とを反応させて、検体中のHDLコレステロールを測定する方法(特許文献8参照)等が知られている。また、アシルポリオキシエチレンソルビタンエステルによりHDL以外のリポ蛋白中のコレステロールを優先的に過酸化水素へ変換し、生成した過酸化水素を消去した後、ポリオキシエチレンアルキルエーテルの添加により、HDLコレステロールを酵素的に測定する方法(特許文献9参照)も知られている。
However, in the HDL cholesterol measurement method for aggregating these lipoproteins other than HDL, although there is a good correlation with the conventional reference method, inaccuracy due to turbidity due to aggregates produced in the reaction, reaction cell When washing with alkali, there are problems such as excessive load on the automatic analyzer due to precipitation of metal hydroxide generated by reaction with the metal salt in the reaction solution.
As a method for measuring HDL cholesterol without aggregating lipoproteins other than HDL, for example, a biological sample is reacted with pancreatic cholesterol esterase and cholesterol oxidase in the presence of bile acid or a salt thereof and albumin. A method for measuring HDL cholesterol in a biological sample by measuring a compound consumed or produced by the reaction (see Patent Document 7), a nonionic surfactant having a reaction selectivity with respect to the HDL fraction and having an HLB value of 16 or more A method of measuring HDL cholesterol in a specimen by reacting a specimen with lipoprotein lipase and / or cholesterol esterase and cholesterol oxidase that preferentially acts on the HDL fraction in the presence of an agent (see Patent Document 8) ) Etc. are known. In addition, acyl polyoxyethylene sorbitan ester converts cholesterol in lipoproteins other than HDL to hydrogen peroxide preferentially, erases the generated hydrogen peroxide, and then adds polyoxyethylene alkyl ether to add HDL cholesterol. An enzymatic measurement method (see Patent Document 9) is also known.

しかしながら、これらのHDL以外のリポ蛋白を凝集させないHDLコレステロールの測定法においては、HDL以外のリポ蛋白中コレステロールの不完全な消去や、HDL以外のリポ蛋白中のコレステロールに対する非特異反応に起因する測定値の不正確性が問題となる場合がある。
特開昭62−69999号公報 特開昭63−126498号公報 特開平8−131197号公報 特開平8−201393号公報 特開平9−285298号公報 特開平8−116996号公報 国際公開第97/40376号パンフレット 国際公開第00/52480号パンフレット 特開平9−299号公報
However, in the method for measuring HDL cholesterol which does not aggregate lipoproteins other than HDL, measurement resulting from incomplete elimination of cholesterol in lipoproteins other than HDL or nonspecific reaction to cholesterol in lipoproteins other than HDL. Value inaccuracy may be a problem.
JP-A 62-69999 JP-A 63-126498 JP-A-8-131197 JP-A-8-201393 JP-A-9-285298 JP-A-8-116996 WO 97/40376 pamphlet International Publication No. 00/52480 Pamphlet JP-A-9-299

本発明の目的は、簡便で、かつ、正確な測定ができるHDLコレステロールの測定方法、測定用試薬および測定用キットを提供することにある。  An object of the present invention is to provide a method for measuring HDL cholesterol, a reagent for measurement, and a kit for measurement that can be easily and accurately measured.

本発明は、下記[1]〜[19]に関する。
[1]検体と、i)コレステロールエステル加水分解酵素およびコレステロール酸化酵素、または、ii)コレステロールエステル加水分解酵素、酸化型補酵素およびコレステロール脱水素酵素とを、アルキルアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物、ポリオキシエチレンアルキルアミンサルフェート、ポリオキシエチレンベンジル−アルキル四級アンモニウム塩、ポリオキシエチレン酸アミド、アルキルアミンオキシドおよびアルキルプロピレンジアミン誘導体からなる群より選ばれる少なくとも一つの物質を含有する水性媒体中で反応させ過酸化水素または還元型補酵素を生成させること、および、生成した過酸化水素または還元型補酵素を測定することを含む検体中の高密度リポ蛋白中のコレステロールの測定方法。
The present invention relates to the following [1] to [19].
[1] Alkylamine polyoxyethylene polyoxypropylene condensate containing a specimen and i) cholesterol ester hydrolase and cholesterol oxidase, or ii) cholesterol ester hydrolase, oxidized coenzyme and cholesterol dehydrogenase In an aqueous medium containing at least one substance selected from the group consisting of polyoxyethylene alkylamine sulfates, polyoxyethylene benzyl-alkyl quaternary ammonium salts, polyoxyethylene acid amides, alkylamine oxides and alkylpropylenediamine derivatives A method for measuring cholesterol in high-density lipoprotein in a sample, which comprises reacting to produce hydrogen peroxide or reduced coenzyme, and measuring the produced hydrogen peroxide or reduced coenzyme.

[2]水性媒体が、さらに、ポリアニオン、胆汁酸誘導体、エチレンジアミンテトラポリオキシアルキレン、ポリオキシエチレンアルキルアミンおよびポリオキシエチレンアルケニルアミンからなる群より選ばれる少なくとも一つの物質を含有する[1]記載の方法。
[3]ポリアニオンが、デキストラン硫酸またはその塩である[2]記載の方法。
[2] The aqueous medium further contains at least one substance selected from the group consisting of a polyanion, a bile acid derivative, ethylenediaminetetrapolyoxyalkylene, polyoxyethylenealkylamine, and polyoxyethylenealkenylamine. Method.
[3] The method according to [2], wherein the polyanion is dextran sulfate or a salt thereof.

[4]胆汁酸誘導体が、コール酸もしくはその塩、タウロコール酸もしくはその塩、グリココール酸もしくはその塩、リトコール酸もしくはその塩、デオキシコール酸もしくはその塩、ケノデオキシコール酸もしくはその塩、ウルソデオキシコール酸もしくはその塩、7−オキソリトコール酸もしくはその塩、12−オキソリトコール酸もしくはその塩、12−オキソケノデオキシコール酸もしくはその塩、7−オキソデオキシコール酸もしくはその塩、ヒオコール酸もしくはその塩、ヒオデオキシコール酸もしくはその塩、デヒドロコール酸もしくはその塩、一般式(I)  [4] The bile acid derivative is cholic acid or a salt thereof, taurocholic acid or a salt thereof, glycocholic acid or a salt thereof, lithocholic acid or a salt thereof, deoxycholic acid or a salt thereof, chenodeoxycholic acid or a salt thereof, ursodeoxycholic acid Or a salt thereof, 7-oxolithocholic acid or a salt thereof, 12-oxolithocholic acid or a salt thereof, 12-oxochenodeoxycholic acid or a salt thereof, 7-oxodeoxycholic acid or a salt thereof, hyocholic acid or a salt thereof, hyodeoxycholic Acid or salt thereof, dehydrocholic acid or salt thereof, general formula (I)

Figure 0004796489
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[式中、Rは、3−(3−コラミドプロピル)ジメチルアンモニオ基であり、Rは、水素原子または水酸基である]で表される化合物、および一般式(II)Wherein R 1 is a 3- (3-colamidopropyl) dimethylammonio group and R 2 is a hydrogen atom or a hydroxyl group, and the general formula (II)

Figure 0004796489
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(Xは、水素原子または水酸基を表し、RおよびRは、同一または異なって、置換もしくは非置換のアルキル基、または、置換もしくは非置換のアルカノイル基を表す)で表される化合物からなる群より選ばれる少なくとも一つの物質である[2]または[3]記載の方法。
[5]水性媒体が、さらに、アルブミンを含有する[2]〜[4]のいずれかに記載の方法。
(X represents a hydrogen atom or a hydroxyl group, and R 3 and R 4 are the same or different and each represents a substituted or unsubstituted alkyl group or a substituted or unsubstituted alkanoyl group). The method according to [2] or [3], which is at least one substance selected from the group.
[5] The method according to any one of [2] to [4], wherein the aqueous medium further contains albumin.

[6]アルキルアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物、ポリオキシエチレンアルキルアミンサルフェート、ポリオキシエチレンベンジル−アルキル四級アンモニウム塩、ポリオキシエチレン酸アミド、アルキルアミンオキシドおよびアルキルプロピレンジアミン誘導体からなる群より選ばれる少なくとも一つの物質、コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素ならびに過酸化水素測定用試薬を含有することを特徴とする高密度リポ蛋白中のコレステロール測定用試薬。  [6] From the group consisting of alkylamine polyoxyethylene polyoxypropylene condensate, polyoxyethylene alkylamine sulfate, polyoxyethylene benzyl-alkyl quaternary ammonium salt, polyoxyethylene acid amide, alkylamine oxide and alkylpropylenediamine derivatives A reagent for measuring cholesterol in high-density lipoprotein, comprising at least one selected substance, cholesterol esterase, cholesterol oxidase and a reagent for measuring hydrogen peroxide.

[7]アルキルアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物、ポリオキシエチレンアルキルアミンサルフェート、ポリオキシエチレンベンジル−アルキル四級アンモニウム塩、ポリオキシエチレン酸アミド、アルキルアミンオキシドおよびアルキルプロピレンジアミン誘導体からなる群より選ばれる少なくとも一つの物質、コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素ならびに酸化型補酵素を含有することを特徴とする高密度リポ蛋白中のコレステロール測定用試薬。  [7] From the group consisting of alkylamine polyoxyethylene polyoxypropylene condensate, polyoxyethylene alkylamine sulfate, polyoxyethylene benzyl-alkyl quaternary ammonium salt, polyoxyethylene acid amide, alkylamine oxide and alkylpropylenediamine derivatives A reagent for measuring cholesterol in high-density lipoprotein, comprising at least one selected substance, cholesterol esterase, cholesterol dehydrogenase, and oxidized coenzyme.

[8]さらに、還元型補酵素測定用試薬を含有する[7]記載の試薬。
[9]さらに、ポリアニオン、胆汁酸誘導体、エチレンジアミンテトラポリオキシアルキレン、ポリオキシエチレンアルキルアミンおよびポリオキシエチレンアルケニルアミンからなる群より選ばれる物質を少なくとも一つ含有す[6]〜[8]のいずれかに記載の試薬。
[8] The reagent according to [7], further containing a reagent for measuring reduced coenzyme.
[9] Any of [6] to [8], further comprising at least one substance selected from the group consisting of polyanions, bile acid derivatives, ethylenediaminetetrapolyoxyalkylene, polyoxyethylenealkylamines and polyoxyethylenealkenylamines A reagent according to any one of the above.

[10]ポリアニオンが、デキストラン硫酸またはその塩である[9]記載の試薬。
[11]胆汁酸誘導体が、コール酸もしくはその塩、タウロコール酸もしくはその塩、グリココール酸もしくはその塩、リトコール酸もしくはその塩、デオキシコール酸もしくはその塩、ケノデオキシコール酸もしくはその塩、ウルソデオキシコール酸もしくはその塩、7−オキソリトコール酸もしくはその塩、12−オキソリトコール酸もしくはその塩、12−オキソケノデオキシコール酸もしくはその塩、7−オキソデオキシコール酸もしくはその塩、ヒオコール酸もしくはその塩、ヒオデオキシコール酸もしくはその塩、デヒドロコール酸もしくはその塩、一般式(I)
[10] The reagent according to [9], wherein the polyanion is dextran sulfate or a salt thereof.
[11] The bile acid derivative is cholic acid or a salt thereof, taurocholic acid or a salt thereof, glycocholic acid or a salt thereof, lithocholic acid or a salt thereof, deoxycholic acid or a salt thereof, chenodeoxycholic acid or a salt thereof, ursodeoxycholic acid Or a salt thereof, 7-oxolithocholic acid or a salt thereof, 12-oxolithocholic acid or a salt thereof, 12-oxochenodeoxycholic acid or a salt thereof, 7-oxodeoxycholic acid or a salt thereof, hyocholic acid or a salt thereof, hyodeoxycholic Acid or salt thereof, dehydrocholic acid or salt thereof, general formula (I)

Figure 0004796489
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[式中、Rは、3−(3−コラミドプロピル)ジメチルアンモニオ基であり、Rは、水素原子または水酸基である]で表される化合物、および一般式(II)Wherein R 1 is a 3- (3-colamidopropyl) dimethylammonio group and R 2 is a hydrogen atom or a hydroxyl group, and the general formula (II)

Figure 0004796489
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(Xは、水素原子または水酸基を表し、RおよびRは、同一または異なって、置換もしくは非置換のアルキル基、または、置換もしくは非置換のアルカノイル基を表す)で表される化合物からなる群より選ばれる少なくとも一つの物質である[9]または[10]記載の試薬。
[12]さらに、アルブミンを含有する[9]〜[11]のいずれかに記載の試薬。
(X represents a hydrogen atom or a hydroxyl group, and R 3 and R 4 are the same or different and each represents a substituted or unsubstituted alkyl group or a substituted or unsubstituted alkanoyl group). The reagent according to [9] or [10], which is at least one substance selected from the group.
[12] The reagent according to any one of [9] to [11], further containing albumin.

[13]第一試薬および第二試薬を含有するキットであって、過酸化水素測定用試薬を第一試薬および第二試薬に含有し、コレステロール酸化酵素を第二試薬に含有し、アルキルアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物、ポリオキシエチレンアルキルアミンサルフェート、ポリオキシエチレンベンジル−アルキル四級アンモニウム塩、ポリオキシエチレン酸アミド、アルキルアミンオキシドおよびアルキルプロピレンジアミン誘導体からなる群より選ばれる少なくとも一つの物質、および、コレステロールエステル加水分解酵素を、第一試薬、第二試薬のいずれかまたは両方に含有することを特徴とする高密度リポ蛋白中のコレステロール測定用キット。  [13] A kit containing a first reagent and a second reagent, wherein the hydrogen peroxide measurement reagent is contained in the first reagent and the second reagent, the cholesterol oxidase is contained in the second reagent, At least one substance selected from the group consisting of oxyethylene polyoxypropylene condensate, polyoxyethylene alkylamine sulfate, polyoxyethylene benzyl-alkyl quaternary ammonium salt, polyoxyethylene acid amide, alkylamine oxide and alkylpropylenediamine derivative A kit for measuring cholesterol in high-density lipoprotein, comprising cholesterol ester hydrolase in either or both of the first reagent and the second reagent.

[14]第一試薬および第二試薬を含有するキットであって、酸化型補酵素を第一試薬に含有し、コレステロール脱水素酵素を第二試薬に含有し、アルキルアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物、ポリオキシエチレンアルキルアミンサルフェート、ポリオキシエチレンベンジル−アルキル四級アンモニウム塩、ポリオキシエチレン酸アミドアルキルアミンオキシドおよびアルキルプロピレンジアミン誘導体からなる群より選ばれる少なくとも一つ物質、および、コレステロールエステル加水分解酵素を、第一試薬、第二試薬のいずれかまたは両方に含有することを特徴とする高密度リポ蛋白中のコレステロール測定用キット。
[15]さらに、還元型補酵素測定用試薬を、第一試薬、第二試薬のいずれかまたは両方に含有する[14]記載のキット。
[16]さらに、ポリアニオン、胆汁酸誘導体、エチレンジアミンテトラポリオキシアルキレン、ポリオキシエチレンアルキルアミンおよびポリオキシエチレンアルケニルアミンからなる群より選ばれる少なくとも一つの物質を、第一試薬、第二試薬のいずれかまたは両方に含有する[13]〜[15]のいずれかに記載のキット。
[14] A kit containing a first reagent and a second reagent, comprising an oxidized coenzyme in the first reagent, a cholesterol dehydrogenase in the second reagent, and an alkylamine polyoxyethylene polyoxypropylene condensates, polyoxyethylene alkylamine sulfates, polyoxyethylene benzyl - alkyl quaternary ammonium salts, polyoxyethylene acid amide, at least one material selected from the group consisting of alkyl amine oxides and alkyl propylene diamine derivative, and cholesterol A kit for measuring cholesterol in high-density lipoprotein, comprising an ester hydrolase in one or both of the first reagent and the second reagent.
[15] The kit according to [14], further comprising a reduced coenzyme measurement reagent in one or both of the first reagent and the second reagent.
[16] Further, at least one substance selected from the group consisting of a polyanion, a bile acid derivative, ethylenediaminetetrapolyoxyalkylene, polyoxyethylenealkylamine, and polyoxyethylenealkenylamine is selected from the first reagent and the second reagent. Or the kit in any one of [13]-[15] contained in both.

[17]ポリアニオンが、デキストラン硫酸またはその塩である[16]記載のキット。
[18]胆汁酸誘導体が、コール酸もしくはその塩、タウロコール酸もしくはその塩、グリココール酸もしくはその塩、リトコール酸もしくはその塩、デオキシコール酸もしくはその塩、ケノデオキシコール酸もしくはその塩、ウルソデオキシコール酸もしくはその塩、7−オキソリトコール酸もしくはその塩、12−オキソリトコール酸もしくはその塩、12−オキソケノデオキシコール酸もしくはその塩、7−オキソデオキシコール酸もしくはその塩、ヒオコール酸もしくはその塩、ヒオデオキシコール酸もしくはその塩、デヒドロコール酸もしくはその塩、一般式(I)
[17] The kit according to [16], wherein the polyanion is dextran sulfate or a salt thereof.
[18] The bile acid derivative is cholic acid or a salt thereof, taurocholic acid or a salt thereof, glycocholic acid or a salt thereof, lithocholic acid or a salt thereof, deoxycholic acid or a salt thereof, chenodeoxycholic acid or a salt thereof, ursodeoxycholic acid Or a salt thereof, 7-oxolithocholic acid or a salt thereof, 12-oxolithocholic acid or a salt thereof, 12-oxochenodeoxycholic acid or a salt thereof, 7-oxodeoxycholic acid or a salt thereof, hyocholic acid or a salt thereof, hyodeoxycholic Acid or salt thereof, dehydrocholic acid or salt thereof, general formula (I)

Figure 0004796489
Figure 0004796489

[式中、Rは、3−(3−コラミドプロピル)ジメチルアンモニオ基であり、Rは、水素原子または水酸基である]で表される化合物、および一般式(II)Wherein R 1 is a 3- (3-colamidopropyl) dimethylammonio group and R 2 is a hydrogen atom or a hydroxyl group, and the general formula (II)

Figure 0004796489
Figure 0004796489

(Xは、水素原子または水酸基を表し、RおよびRは、同一または異なって、置換もしくは非置換のアルキル基、または、置換もしくは非置換のアルカノイル基を表す)で表される化合物からなる群より選ばれる少なくとも一つの物質である[16]または[17]記載のキット。
[19]さらに、アルブミンを第一試薬、第二試薬のいずれかまたは両方に含有する[16]〜[18]のいずれかに記載のキット。
(X represents a hydrogen atom or a hydroxyl group, and R 3 and R 4 are the same or different and each represents a substituted or unsubstituted alkyl group or a substituted or unsubstituted alkanoyl group). The kit according to [16] or [17], which is at least one substance selected from the group.
[19] The kit according to any one of [16] to [18], further comprising albumin in one or both of the first reagent and the second reagent.

本発明により、簡便で、かつ、正確なHDLコレステロールの測定方法、測定用試薬、および、測定用キットが提供される。The present invention provides a simple and accurate method for measuring HDL cholesterol, a reagent for measurement, and a kit for measurement.

本発明のHDLコレステロールの測定方法は、HDL以外のリポ蛋白中のコレステロールを消去することなく、HDLコレステロールを測定する方法である。
本発明の測定方法において用いられる検体としては、例えば全血、血漿、血清、髄液、唾液、羊水、尿、汗、膵液等が挙げられるが、血漿および血清が好ましい。
The method for measuring HDL cholesterol of the present invention is a method for measuring HDL cholesterol without erasing cholesterol in lipoproteins other than HDL.
Examples of the specimen used in the measurement method of the present invention include whole blood, plasma, serum, cerebrospinal fluid, saliva, amniotic fluid, urine, sweat, pancreatic juice and the like, and plasma and serum are preferred.

本発明におけるコレステロールエステル加水分解酵素としては、コレステロールエステルを加水分解する能力を有する酵素であれば特に限定はなく、例えば動物、植物または微生物由来のコレステロールエステラーゼ、リポプロテインリパーゼの他、遺伝子工学的な手法により製造されるコレステロールエステラーゼ、リポプロテインリパーゼ等も用いることができる。  The cholesterol ester hydrolase in the present invention is not particularly limited as long as it is an enzyme having the ability to hydrolyze cholesterol esters. For example, cholesterol esterase derived from animals, plants or microorganisms, lipoprotein lipase, genetic engineering Cholesterol esterase, lipoprotein lipase and the like produced by the technique can also be used.

コレステロールエステル加水分解酵素としては、無修飾のコレステロールエステル加水分解酵素も、化学的に修飾されたコレステロールエステル加水分解酵素も使用することができる。また、コレステロールエステル加水分解酵素としては市販品を使用することもできる。
市販されているコレステロールエステル加水分解酵素としては、コレステロールエステラーゼ“Amano”2(CHE2;天野エンザイム社製)、コレステロールエステラーゼ“Amano”3(CHE3;天野エンザイム社製)、リポプロテインリパーゼ(LPL311;東洋紡製社製)、リポプロテインリパーゼ“Amano”6(LPL6;天野エンザイム社製)、43kDaエステラーゼ(天野エンザイム社製)、コレステロールエステラーゼ[COE313(化学的に修飾されたコレステロールエステラーゼ);東洋紡績社製]等が挙げられる。また、本発明においては、2種類以上のコレステロールエステル加水分解酵素を組み合わせて用いることもできる。
As the cholesterol ester hydrolase, an unmodified cholesterol ester hydrolase or a chemically modified cholesterol ester hydrolase can be used. Moreover, a commercial item can also be used as a cholesterol ester hydrolase.
As commercially available cholesterol ester hydrolases, cholesterol esterase “Amano” 2 (CHE2; manufactured by Amano Enzyme), cholesterol esterase “Amano” 3 (CHE3; manufactured by Amano Enzyme), lipoprotein lipase (LPL311; manufactured by Toyobo) Lipoprotein lipase “Amano” 6 (LPL6; Amano Enzyme), 43 kDa esterase (Amano Enzyme), cholesterol esterase [COE313 (Chemically modified cholesterol esterase); Toyobo Co., Ltd.], etc. Is mentioned. In the present invention, two or more kinds of cholesterol ester hydrolases can be used in combination.

コレステロールエステル加水分解酵素の化学修飾において当該酵素を修飾する基(化学修飾基)としては、例えばポリエチレングリコールを主成分とする基、ポリプロピレングリコールを主成分とする基、ポリプロピレングリコールとポリエチレングリコールの共重合体を有する基、水溶性多糖類を含有する基、スルホプロピル基、スルホブチル基、ポリウレタン基、キレート機能を有する基等が挙げられるが、ポリエチレングリコールを主成分とする基が好ましい。水溶性多糖類としては、例えばデキストラン、プルラン、可溶性デンプン等が挙げられる。  Examples of a group (chemical modification group) that modifies the enzyme in chemical modification of cholesterol ester hydrolase include, for example, a group mainly composed of polyethylene glycol, a group mainly composed of polypropylene glycol, and a co-polymerization of polypropylene glycol and polyethylene glycol. Examples include a group having a combination, a group containing a water-soluble polysaccharide, a sulfopropyl group, a sulfobutyl group, a polyurethane group, a group having a chelating function, and the like, and a group having polyethylene glycol as a main component is preferable. Examples of the water-soluble polysaccharide include dextran, pullulan, and soluble starch.

コレステロールエステル加水分解酵素を化学的に修飾するための試薬(化学修飾剤)としては、上記の化学修飾基と、酵素のアミノ基、カルボキシル基、スルフヒドリル基等と反応し得る官能基または構造とを併せ持つ化合物等が挙げられる。酵素中のアミノ基と反応し得る官能基または構造としては、例えばカルボキシル基、活性エステル基(N−ヒドロキシサクシンイミド基等)、酸無水物、酸塩化物、アルデヒド、エポキシド基、1,3−プロパンスルトン、1,4−ブタンスルトン等が挙げられる。酵素中のカルボキシル基と反応し得る官能基または構造としては、例えばアミノ基等が挙げられる。酵素中のスルフヒドリル基と反応性がある基または構造としては、例えばマレイミド基、ジスルフィド、α−ハロエステル(α−ヨードエステル等)等が挙げられる。  As a reagent (chemical modifier) for chemically modifying cholesterol ester hydrolase, the above-mentioned chemical modification group and a functional group or structure capable of reacting with the amino group, carboxyl group, sulfhydryl group, etc. of the enzyme are used. The compound etc. to have together are mentioned. Examples of functional groups or structures capable of reacting with amino groups in enzymes include carboxyl groups, active ester groups (N-hydroxysuccinimide groups, etc.), acid anhydrides, acid chlorides, aldehydes, epoxide groups, 1,3- Examples thereof include propane sultone and 1,4-butane sultone. Examples of the functional group or structure capable of reacting with the carboxyl group in the enzyme include an amino group. Examples of groups or structures reactive with sulfhydryl groups in enzymes include maleimide groups, disulfides, α-haloesters (α-iodoesters, etc.) and the like.

化学修飾剤として、市販品を使用することもできる。市販されている化学修飾剤としては、ポリエチレングリコールを主成分とする基とN−ヒドロキシサクシンイミド基とを有するサンブライトVFM−4101、サンブライトME−050AS、サンブライトDE−030AS(いずれも日本油脂社製)、ポリアルキレングリコールを主成分とする基と酸無水物構造とを有するサンブライトAKMシリーズ(例えば、サンブライトAKM−1510等)、サンブライトADMシリーズ、サンブライトACMシリーズ(いずれも日本油脂社製)、ポリエチレングリコールを主成分とする基とエポキシド基とを有するEPOX−3400、M−EPOX−5000(いずれもSheawater Polymers社製)、キレート機能を有する基と酸無水物構造とを有するジエチレントリアミン−N,N,N’,N’’,N’’−ペンタ無水二酢酸(DTPA anhydride;同仁化学社製)等が挙げられる。  A commercial item can also be used as a chemical modifier. Commercially available chemical modifiers include Sunbright VFM-4101, Sunbright ME-050AS, and Sunbright DE-030AS having a group mainly composed of polyethylene glycol and an N-hydroxysuccinimide group (Nippon Yushi). Manufactured by the company), Sunbright AKM series (for example, Sunbright AKM-1510, etc.) having a group mainly composed of polyalkylene glycol and an acid anhydride structure, Sunbright ADM series, Sunbright ACM series (all of which are Japanese fats and oils) ), EPOX-3400 having a group mainly composed of polyethylene glycol and an epoxide group, M-EPOX-5000 (both manufactured by Sheawater Polymers), diethylenetriamine having a chelate group and an acid anhydride structure N, N, N ', N' ', N' '- penta anhydride diacetate (DTPA anhydride; Dojin Chemical Co., Ltd.).

コレステロールエステル加水分解酵素の化学修飾は、例えば以下の方法で行うことができるが、本方法に限定されるものではない。まず、コレステロールエステル加水分解酵素をpH8.0以上の緩衝液(例えばHEPES緩衝液)に溶解し、0〜55℃で0.01〜500倍モル量の化学修飾剤を添加し、5分間〜5時間攪拌する。実際の酵素反応においては、化学的に修飾されたコレステロールエステル加水分解酵素として、この反応液そのもののみならず、必要に応じて限外濾過膜等により未反応の化学修飾剤等を除去したものも、使用することもできる。  The chemical modification of cholesterol ester hydrolase can be performed, for example, by the following method, but is not limited to this method. First, cholesterol esterase is dissolved in a pH 8.0 or higher buffer solution (for example, HEPES buffer solution), and 0.01 to 500-fold molar amount of a chemical modifier is added at 0 to 55 ° C. for 5 minutes to 5 minutes. Stir for hours. In the actual enzyme reaction, as a chemically modified cholesterol ester hydrolase, not only the reaction solution itself but also an unreacted chemical modifier etc. removed by an ultrafiltration membrane or the like as necessary. Can also be used.

本反応の方法に用いられるコレステロールエステル加水分解酵素の濃度としては、本発明のHDLコレステロールの測定を可能とする濃度であれば特に制限はないが、反応液中で0.01〜400U/mLの濃度であることが好ましく、0.02〜200U/mLであることがより好ましい。
本発明におけるコレステロール酸化酵素としては、コレステロールを酸化して過酸化水素を生成する能力を有する酵素であれば特に制限はなく、例えば動物、植物または微生物由来のコレステロールオキシダーゼの他、遺伝子工学的な手法により製造されるコレステロールオキシダーゼ等も用いることができ、コレステロールオキシダーゼ“Amano”1(CHOD1;天野エンザイム社製)、コレステロールオキシダーゼ(CO−PE;キッコーマン社製)、コレステロールオキシダーゼ(COO321;東洋紡績社製)、コレステロールオキシダーゼ協和(協和醗酵社製)等の市販品を用いることもできる。また、本発明においては、2種類以上のコレステロール酸化酵素を組み合わせて用いることもできる。
The concentration of the cholesterol ester hydrolase used in the method of this reaction is not particularly limited as long as it is a concentration that enables measurement of HDL cholesterol of the present invention, but is 0.01 to 400 U / mL in the reaction solution. The concentration is preferably 0.02 to 200 U / mL.
The cholesterol oxidase in the present invention is not particularly limited as long as it is an enzyme having the ability to oxidize cholesterol to generate hydrogen peroxide. For example, in addition to cholesterol oxidase derived from animals, plants or microorganisms, genetic engineering techniques Can also be used, such as cholesterol oxidase “Amano” 1 (CHOD1; manufactured by Amano Enzyme), cholesterol oxidase (CO-PE; manufactured by Kikkoman), cholesterol oxidase (COO321; manufactured by Toyobo Co., Ltd.) Commercial products such as cholesterol oxidase Kyowa (manufactured by Kyowa Hakko) can also be used. In the present invention, two or more kinds of cholesterol oxidases can be used in combination.

コレステロール酸化酵素は、無修飾の酵素であっても、化学的に修飾された酵素であってもよい。化学的に修飾されたコレステロール酸化酵素は、例えば前述の化学修飾剤を用いて、前述の化学修飾方法により作製することができる。
本反応の方法に用いられるコレステロール酸化酵素の濃度としては、本発明のHDLコレステロールの測定を可能とする濃度であれば特に制限はないが、反応液中で0.01〜400U/mLの濃度であることが好ましく、0.02〜200U/mLの濃度であることがより好ましい。
The cholesterol oxidase may be an unmodified enzyme or a chemically modified enzyme. A chemically modified cholesterol oxidase can be produced, for example, by the aforementioned chemical modification method using the aforementioned chemical modifier.
The concentration of cholesterol oxidase used in the reaction method is not particularly limited as long as it is a concentration that enables measurement of HDL cholesterol of the present invention, but it is 0.01 to 400 U / mL in the reaction solution. It is preferable that the concentration is 0.02 to 200 U / mL.

本発明におけるコレステロール脱水素酵素としては、酸化型補酵素の存在下にコレステロールを酸化して還元型補酵素を生成する能力を有する酵素であれば特に制限はなく、例えば動物、植物または微生物由来のコレステロールデヒドロゲナーゼの他、遺伝子工学的な手法により製造されるコレステロールデヒドロゲナーゼ等も用いることができる。コレステロールデヒドロゲナーゼ“Amano”5(CHDH5;天野エンザイム社製)等の市販品を用いることもできる。また、本発明においては、2種類以上のコレステロール脱水素酵素を組み合わせて用いることもできる。コレステロール脱水素酵素は、無修飾の酵素であっても、化学的に修飾された酵素であってもよい。化学的に修飾されたコレステロール脱水素酵素は、例えば前述の化学修飾剤を用いて、前述の化学修飾方法により作製することができる。  The cholesterol dehydrogenase in the present invention is not particularly limited as long as it is an enzyme having the ability to oxidize cholesterol in the presence of an oxidized coenzyme to produce a reduced coenzyme. In addition to cholesterol dehydrogenase, cholesterol dehydrogenase produced by genetic engineering techniques and the like can also be used. Commercial products such as cholesterol dehydrogenase “Amano” 5 (CHDH5; manufactured by Amano Enzyme Co., Ltd.) can also be used. In the present invention, two or more kinds of cholesterol dehydrogenases can be used in combination. Cholesterol dehydrogenase may be an unmodified enzyme or a chemically modified enzyme. A chemically modified cholesterol dehydrogenase can be produced by the above-described chemical modification method using, for example, the above-described chemical modifier.

本反応の方法に用いられるコレステロール脱水素酵素の濃度としては、本発明のHDLコレステロールの測定を可能とする濃度であれば特に制限はないが、反応液中で0.01〜400U/mLの濃度であることが好ましく、0.02〜200U/mLの濃度であることがより好ましい。
本発明のコレステロール脱水素酵素を用いた測定法においては、酸化型補酵素が使用される。酸化型補酵素としては、例えばNAD、NADP、thio−NAD、thio−NADP等が挙げられる。
The concentration of cholesterol dehydrogenase used in this reaction method is not particularly limited as long as it is a concentration that enables measurement of HDL cholesterol of the present invention, but a concentration of 0.01 to 400 U / mL in the reaction solution. It is preferable that the concentration is 0.02 to 200 U / mL.
In the measurement method using the cholesterol dehydrogenase of the present invention, an oxidized coenzyme is used. Examples of the oxidized coenzyme include NAD, NADP, thio-NAD, thio-NADP and the like.

本発明において用いられるアルキルアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物、ポリオキシエチレンアルキルアミンサルフェート、ポリオキシエチレンベンジル−アルキル四級アンモニウム塩、ポリオキシエチレン酸アミド、アルキルアミンオキシド、アルキルプロピレンジアミン誘導体としては、本発明のHDLコレステロールの測定を可能とするものであれば特に制限はない。  Examples of the alkylamine polyoxyethylene polyoxypropylene condensate, polyoxyethylene alkylamine sulfate, polyoxyethylene benzyl-alkyl quaternary ammonium salt, polyoxyethylene acid amide, alkylamine oxide, and alkylpropylenediamine derivatives used in the present invention There is no particular limitation as long as it enables measurement of HDL cholesterol of the present invention.

アルキルアミンオキシドとしては、例えばアルキルジメチルアミンオキシド、ジヒドロキシエチルアルキルアミンオキシド、ポリオキシエチレンジメチルアミンオキシド等が挙げられる。アルキルプロピレンジアミン誘導体としては、アルキルプロピレンジアミン、ポリオキシエチレンアルキルプロピレンジアミン等が挙げられる。
アルキルアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物、ポリオキシエチレンアルキルアミンサルフェート、ポリオキシエチレンベンジル−アルキル四級アンモニウム塩、ポリオキシエチレン酸アミド、アルキルアミンオキシドおよびアルキルプロピレンジアミン誘導体におけるアルキルとしては、直鎖または分枝状の炭素数6〜30の、例えばヘキシル、ヘプチル、オクチル、イソオクチル、ノニル、デシル、ウンデシル、ドデシル(ラウリル)、トリデシル、テトラデシル(ミリスチル)、ペンタデシル、ヘキサデシル(セチル)、ヘプタデシル、オクタデシル(ステアリル)、ノナデシル、イコシル、ヘネイコシル、ドコシル(ベヘニル)、トリコシル、テトラコシル、ペンタコシル、ヘキサコシル、ヘプタコシル、オクタコシル、ノナコシル、トリアコンシル等が挙げられる。
Examples of the alkyl amine oxide include alkyl dimethyl amine oxide, dihydroxyethyl alkyl amine oxide, polyoxyethylene dimethyl amine oxide, and the like. Examples of the alkylpropylenediamine derivative include alkylpropylenediamine and polyoxyethylene alkylpropylenediamine.
As alkyl in the alkylamine polyoxyethylene polyoxypropylene condensate, polyoxyethylene alkylamine sulfate, polyoxyethylene benzyl-alkyl quaternary ammonium salt, polyoxyethylene acid amide, alkylamine oxide and alkylpropylenediamine derivatives, linear Alternatively, branched 6 to 30 carbon atoms such as hexyl, heptyl, octyl, isooctyl, nonyl, decyl, undecyl, dodecyl (lauryl), tridecyl, tetradecyl (myristyl), pentadecyl, hexadecyl (cetyl), heptadecyl, octadecyl ( Stearyl), nonadecyl, icosyl, heneicosyl, docosyl (behenyl), tricosyl, tetracosyl, pentacosyl, hexacosyl, heptacosyl, octacosyl Le, nonacosyl, Toriakonshiru and the like.

アルキルアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物、ポリオキシエチレンアルキルアミンサルフェート、ポリオキシエチレンベンジル−アルキル四級アンモニウム塩、ポリオキシエチレン酸アミド、ポリオキシエチレンジメチルアミンオキシドおよびポリオキシエチレンアルキルプロピレンジアミンにおけるオキシエチレン鎖の重合度としては、好ましくは1〜100、より好ましくは1〜50である。  Oxygen in alkylamine polyoxyethylene polyoxypropylene condensate, polyoxyethylene alkylamine sulfate, polyoxyethylene benzyl-alkyl quaternary ammonium salt, polyoxyethylene acid amide, polyoxyethylene dimethylamine oxide and polyoxyethylene alkylpropylene diamine The degree of polymerization of the ethylene chain is preferably 1 to 100, more preferably 1 to 50.

アルキルアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物の具体例(製品を含む)としては、BLAUNON SAP3004、BLAUNON SAP3010(牛脂アミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物;いずれも青木油脂社製)、C16EO30PO10[セチルアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物(オキシエチレン鎖の重合度:30;オキシプロピレン鎖の重合度:10)日本油脂社製]、C16EO30PO20[セチルアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物(オキシエチレン鎖の重合度:30;オキシプロピレン鎖の重合度:20)日本油脂社製]、C16EO40PO10[セチルアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物(オキシエチレン鎖の重合度:40;オキシプロピレン鎖の重合度:10)日本油脂社製]、C16EO20PO10[セチルアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物(オキシエチレン鎖の重合度:20;オキシプロピレン鎖の重合度:10)日本油脂社製]等が挙げられる。  Specific examples (including products) of alkylamine polyoxyethylene polyoxypropylene condensates include BLAUNON SAP3004, BLAUNON SAP3010 (tallow amine polyoxyethylene polyoxypropylene condensate; both manufactured by Aoki Yushi Co., Ltd.), C16EO30PO10 [cetylamine Polyoxyethylene polyoxypropylene condensate (degree of polymerization of oxyethylene chain: 30; degree of polymerization of oxypropylene chain: 10) manufactured by NOF Corporation, C16EO30PO20 [cetylamine polyoxyethylene polyoxypropylene condensate (of oxyethylene chain) Degree of polymerization: 30; Degree of polymerization of oxypropylene chain: 20) manufactured by NOF Corporation, C16EO40PO10 [Cetylamine polyoxyethylene polyoxypropylene condensate (degree of polymerization of oxyethylene chain) : 40; degree of polymerization of oxypropylene chain: 10) manufactured by NOF Corporation, C16EO20PO10 [cetylamine polyoxyethylene polyoxypropylene condensate (degree of polymerization of oxyethylene chain: 20; degree of polymerization of oxypropylene chain: 10) Japan Manufactured by Yushi Co., Ltd.].

ポリオキシエチレンアルキルアミンサルフェートの具体例(製品)としては、例えばレベロンA−625X(一方社油脂社製)、ミグノールPA−30(一方社油脂社製)、ニューポールPE−61(三洋化成社製)等が挙げられる。
ポリオキシエチレンベンジル−アルキル四級アンモニウム塩の具体例(製品)としては、ビスノールSK(一方社油脂社製)等が挙げられる。
Specific examples (products) of polyoxyethylene alkylamine sulfate include, for example, Levelon A-625X (manufactured by Yushi Co., Ltd.), Mignol PA-30 (manufactured by Yushi Co., Ltd.), New Pole PE-61 (manufactured by Sanyo Chemical Co., Ltd.) ) And the like.
Specific examples (products) of the polyoxyethylene benzyl-alkyl quaternary ammonium salt include bisnor SK (manufactured by Yushi Co., Ltd.).

ポリオキシエチレン酸アミドの具体例(製品)としては、例えばニッコールTAMDS15(日光ケミカルズ社製)、ナイミッドMT−215(日本油脂社製)等が挙げられる。
アルキルアミンオキシドの具体例(製品)としては、例えばユニセーフA−LE(ジヒドロキシエチルラウリルアミンオキシド;日本油脂社製)、ユニセーフA−LM(アルキルジメチルアミンオキシド;日本油脂社製)、ユニセーフA−LY(ポリオキシエチレンヤシ油アルキルジメチルアミンオキシド;日本油脂社製)等が挙げられる。
Specific examples (products) of polyoxyethylene acid amide include, for example, Nikkor TAMDS15 (manufactured by Nikko Chemicals), Nymid MT-215 (manufactured by NOF Corporation) and the like.
Specific examples (products) of alkylamine oxide include, for example, Unisafe A-LE (dihydroxyethyl laurylamine oxide; manufactured by NOF Corporation), Unisafe A-LM (alkyldimethylamine oxide; manufactured by NOF Corporation), Unisafe A-LY. (Polyoxyethylene coconut oil alkyldimethylamine oxide; manufactured by NOF Corporation) and the like.

アルキルプロピレンジアミン誘導体の具体例(製品)としては、例えばBLAUNON DT03、BLAUNON DT15(アルキルプロピレンジアミン;いずれも青木油脂社製)、アスファゾール#10(ポリオキシエチレン牛脂プロピレンジアミン;日本油脂社製)等が挙げられる。
また、本発明においては、アルキルアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物、ポリオキシエチレンアルキルアミンサルフェート、ポリオキシエチレンベンジル−アルキル四級アンモニウム塩、ポリオキシエチレン酸アミド、アルキルアミンオキシドおよびアルキルプロピレンジアミン誘導体からなる群より選ばれる少なくとも一つの物質を使用すればよいが、任意に組み合わせて複数使用することもできる。本発明のHDLコレステロールの測定方法における、アルキルアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物、ポリオキシエチレンアルキルアミンサルフェート、ポリオキシエチレンベンジル−アルキル四級アンモニウム塩、ポリオキシエチレン酸アミド、アルキルアミンオキシドおよびアルキルプロピレンジアミン誘導体からなる群から選ばれる少なくとも一つの物質の濃度としては、本発明のHDLコレステロールの測定を可能とする濃度であれば特に制限はないが、反応液中の濃度が0.0001〜1%であることが好ましく、0.001〜0.1%がより好ましい。
Specific examples (products) of alkylpropylenediamine derivatives include, for example, BLAUNON DT03, BLAUNON DT15 (alkylpropylenediamine; both are manufactured by Aoki Yushi Co., Ltd.), asfazole # 10 (polyoxyethylene beef tallow propylenediamine; manufactured by Nippon Yushi Co., Ltd.) Is mentioned.
Further, in the present invention, alkylamine polyoxyethylene polyoxypropylene condensate, polyoxyethylene alkylamine sulfate, polyoxyethylene benzyl-alkyl quaternary ammonium salt, polyoxyethylene acid amide, alkylamine oxide and alkylpropylenediamine derivative Although at least one substance selected from the group consisting of may be used, a plurality may be used in any combination. Alkylamine polyoxyethylene polyoxypropylene condensate, polyoxyethylene alkylamine sulfate, polyoxyethylene benzyl-alkyl quaternary ammonium salt, polyoxyethylene acid amide, alkylamine oxide and alkyl in the method for measuring HDL cholesterol of the present invention The concentration of at least one substance selected from the group consisting of propylenediamine derivatives is not particularly limited as long as it is a concentration that enables measurement of HDL cholesterol of the present invention, but the concentration in the reaction solution is 0.0001 to 1. % Is preferable, and 0.001 to 0.1% is more preferable.

本発明において用いられるポリアニオンとしては、本発明のHDLコレステロールの測定を可能とするポリアニオンであれば特に制限はなく、例えばデキストラン硫酸もしくはその塩、ヘパリンもしくはその塩、リンタングステン酸またはその塩、硫酸化シクロデキストリンまたはその塩、硫酸化オリゴ糖またはその塩等が挙げられるが、デキストラン硫酸もしくはその塩が好ましい。デキストラン硫酸としては、例えば分子量が4万、8万、20万、50万、100万、200万等のデキストラン硫酸が挙げられる。硫酸化オリゴ糖としては、例えば硫酸化アガロース、硫酸化トレハロース、コンドロイチン硫酸等が挙げられる。塩としては、例えばナトリウム塩、カリウム塩、リチウム塩、アンモニウム塩、マグネシウム塩等が挙げられる。また、本発明においては、ポリアニオンを2種以上用いてもよい。本発明のHDLコレステロールの測定におけるポリアニオンの濃度としては、本発明のHDLコレステロールの測定を可能とする濃度であれば特に制限はないが、反応液中の濃度が0.001〜10%であることが好ましく、0.01〜1%がより好ましい。  The polyanion used in the present invention is not particularly limited as long as it is a polyanion capable of measuring HDL cholesterol of the present invention. For example, dextran sulfate or a salt thereof, heparin or a salt thereof, phosphotungstic acid or a salt thereof, sulfated Examples include cyclodextrin or a salt thereof, sulfated oligosaccharide or a salt thereof, and dextran sulfate or a salt thereof is preferable. Examples of dextran sulfate include dextran sulfate having a molecular weight of 40,000, 80,000, 200,000, 500,000, 1 million, 2 million, and the like. Examples of sulfated oligosaccharides include sulfated agarose, sulfated trehalose, and chondroitin sulfate. Examples of the salt include sodium salt, potassium salt, lithium salt, ammonium salt, magnesium salt and the like. In the present invention, two or more polyanions may be used. The concentration of the polyanion in the measurement of HDL cholesterol of the present invention is not particularly limited as long as it is a concentration capable of measuring the HDL cholesterol of the present invention, but the concentration in the reaction solution is 0.001 to 10%. Is preferable, and 0.01 to 1% is more preferable.

本発明における胆汁酸誘導体としては、本発明のHDLコレステロールの測定を可能とする胆汁酸誘導体であれば特に制限はないが、例えば陰イオン性界面活性作用を有する胆汁酸誘導体、両性界面活性作用を有する胆汁酸誘導体、非イオン性界面活性作用を有する胆汁酸誘導体等が挙げられる。
陰イオン性界面活性作用を有する胆汁酸誘導体としては、例えばコール酸もしくはその塩、タウロコール酸もしくはその塩、グリココール酸もしくはその塩、リトコール酸もしくはその塩、デオキシコール酸もしくはその塩、ケノデオキシコール酸もしくはその塩、ウルソデオキシコール酸もしくはその塩、7−オキソリトコール酸もしくはその塩、12−オキソリトコール酸もしくはその塩、12−オキソケノデオキシコール酸もしくはその塩、7−オキソデオキシコール酸もしくはその塩、ヒオコール酸もしくはその塩、ヒオデオキシコール酸もしくはその塩、デヒドロコール酸もしくはその塩等が挙げられる。塩としては、例えばアンモニウム塩、リチウム塩、ナトリウム塩、カリウム塩、マグネシウム塩、カルシウム塩等が挙げられる。陰イオン性界面活性作用を有する胆汁酸誘導体の濃度としては、本発明のHDLコレステロールの測定を可能とする濃度であれば特に制限はないが、反応液中の濃度が0.001〜10%であることが好ましく、0.01〜1%がより好ましい。
The bile acid derivative in the present invention is not particularly limited as long as it is a bile acid derivative that enables measurement of HDL cholesterol of the present invention. For example, a bile acid derivative having an anionic surfactant activity, an amphoteric surfactant activity And bile acid derivatives having a nonionic surfactant activity.
Examples of bile acid derivatives having an anionic surfactant activity include cholic acid or a salt thereof, taurocholic acid or a salt thereof, glycocholic acid or a salt thereof, lithocholic acid or a salt thereof, deoxycholic acid or a salt thereof, chenodeoxycholic acid or Salts thereof, ursodeoxycholic acid or salts thereof, 7-oxolithocholic acid or salts thereof, 12-oxolithocholic acid or salts thereof, 12-oxochenodeoxycholic acid or salts thereof, 7-oxodeoxycholic acid or salts thereof, hyocholic acid Or the salt, hyodeoxycholic acid or its salt, dehydrocholic acid or its salt, etc. are mentioned. Examples of the salt include ammonium salt, lithium salt, sodium salt, potassium salt, magnesium salt, calcium salt and the like. The concentration of the bile acid derivative having an anionic surfactant activity is not particularly limited as long as it is a concentration that enables measurement of HDL cholesterol of the present invention, but the concentration in the reaction solution is 0.001 to 10%. It is preferable that 0.01 to 1% is more preferable.

両性界面活性作用を有する胆汁酸誘導体としては、例えば一般式(I)  Examples of bile acid derivatives having an amphoteric surfactant activity include, for example, the general formula (I)

Figure 0004796489
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[式中、Rは、3−(3−コラミドプロピル)ジメチルアンモニオ基であり、Rは、水素原子または水酸基である]で表される化合物[以下、化合物(I)という]等が挙げられる。以下、Rが水素原子である化合物(I)をCHAPSと、Rが水酸基である化合物(I)をCHAPSOとよぶ。両性界面活性作用を有する胆汁酸誘導体の濃度としては、本発明のHDLコレステロールの測定を可能とする濃度であれば特に制限はないが、反応液中の濃度が0.001〜10%であることが好ましく、0.01〜1%がより好ましい。[Wherein R 1 is a 3- (3-colamidopropyl) dimethylammonio group, and R 2 is a hydrogen atom or a hydroxyl group] [hereinafter referred to as compound (I)] and the like Is mentioned. Hereinafter, the compound (I) in which R 2 is a hydrogen atom is referred to as CHAPS, and the compound (I) in which R 2 is a hydroxyl group is referred to as CHAPSO. The concentration of the bile acid derivative having an amphoteric surfactant activity is not particularly limited as long as it is a concentration that enables measurement of HDL cholesterol of the present invention, but the concentration in the reaction solution is 0.001 to 10%. Is preferable, and 0.01 to 1% is more preferable.

非イオン性界面活性作用を有する胆汁酸誘導体としては、例えば一般式(II)  Examples of bile acid derivatives having a nonionic surfactant activity include, for example, the general formula (II)

Figure 0004796489
Figure 0004796489

(Xは、水素原子または水酸基を表し、RおよびRは、同一または異なって、置換もしくは非置換のアルキル、または、置換もしくは非置換のアルカノイルを表す)で表される化合物[以下、化合物(II)という]等が挙げられる。アルキル、アルカノイルにおけるアルキルとしては、直鎖または分枝状の炭素数1〜10の、例えばメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、sec−ブチル、tert−ブチル、ペンチル、ネオペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル、ノニル、デシル等が挙げられる。置換アルキルおよび置換アルカノイルにおける置換基としては、例えば水酸基、ハロゲン原子等が挙げられる。ハロゲン原子は、フッ素、塩素、臭素、ヨウ素の各原子を意味する。化合物(II)のうち、RおよびRが共に、Wherein X represents a hydrogen atom or a hydroxyl group, and R 3 and R 4 are the same or different and each represents a substituted or unsubstituted alkyl, or a substituted or unsubstituted alkanoyl. (Referred to as (II)). Examples of alkyl and alkyl in alkanoyl include linear or branched carbon atoms having 1 to 10, for example, methyl, ethyl, propyl, isopropyl, butyl, isobutyl, sec-butyl, tert-butyl, pentyl, neopentyl, hexyl, heptyl , Octyl, nonyl, decyl and the like. Examples of the substituent in the substituted alkyl and the substituted alkanoyl include a hydroxyl group and a halogen atom. The halogen atom means each atom of fluorine, chlorine, bromine and iodine. Among compounds (II), R 3 and R 4 are both

Figure 0004796489
Figure 0004796489

(以下、置換基Aという)である化合物が好ましい。以下、X、RおよびRがそれぞれ、水素原子、置換基Aおよび置換基Aである化合物をdeoxy−BIGCHAP、水酸基、置換基Aおよび置換基Aである化合物をBIGCHAPという。非イオン性界面活性を有する胆汁酸誘導体の濃度としては、本発明のHDLコレステロールの測定を可能とする濃度であれば特に制限はないが、反応液中の濃度が0.001〜10%であることが好ましく、0.01〜1%がより好ましい。本発明においては、胆汁酸誘導体を2種類以上用いても良い。A compound which is (hereinafter referred to as substituent A) is preferred. Hereinafter, a compound in which X, R 3 and R 4 are each a hydrogen atom, a substituent A and a substituent A is referred to as deoxy-BIGCHAP, and a compound in which the hydroxyl group, the substituent A and the substituent A are referred to as BIGCHAP. The concentration of the bile acid derivative having nonionic surface activity is not particularly limited as long as it is a concentration that enables measurement of HDL cholesterol of the present invention, but the concentration in the reaction solution is 0.001 to 10%. Is preferable, and 0.01 to 1% is more preferable. In the present invention, two or more bile acid derivatives may be used.

エチレンジアミンテトラポリオキシアルキレンとしては、例えばエチレンジアミンポリオキシプロピレンポリオキシエチレン縮合物、エチレンジアミンテトラポリオキシエチレン、エチレンジアミンポリオキシプロピレンなどが挙げられる。エチレンジアミンテトラポリオキシアルキレンの具体例(製品を含む)としては、例えばアデカプルロニックTR704、アデカプルロニックTR701、アデカプルロニックTR913R(いずれもエチレンジアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物;旭電化社製)、ユニルーブ32TY−65BI(エチレンジアミンテトラポリオキシアルキレン;日本油脂社製)、エチレンジアミンPO52EO60(オキシエチレン鎖の重合度の総和:60;オキシプロピレン鎖の重合度の総和:52;日本油脂社製)等が挙げられる。エチレンジアミンテトラポリオキシアルキレンの重合数は、好ましくは1〜100、より好ましくは1〜60である。本発明においては、エチレンジアミンテトラポリオキシアルキレンを2種以上用いてもよい。エチレンジアミンテトラポリオキシアルキレンの濃度としては、本発明のHDLコレステロールの測定を可能とする濃度であれば特に制限はないが、反応液中の濃度が0.001〜10%であることが好ましく、0.01〜1%がより好ましい。ポリオキシエチレンアルキルアミンおよびポリオキシエチレンアルケニルアミンとしては、例えば一般式(III)  Examples of the ethylenediamine tetrapolyoxyalkylene include ethylenediamine polyoxypropylene polyoxyethylene condensate, ethylenediamine tetrapolyoxyethylene, ethylenediamine polyoxypropylene, and the like. Specific examples (including products) of ethylenediaminetetrapolyoxyalkylene include, for example, Adekapluronic TR704, Adekapluronic TR701, Adekapluronic TR913R (all are ethylenediamine polyoxyethylene polyoxypropylene condensates; manufactured by Asahi Denka Co., Ltd.), Uniluve 32TY- 65BI (ethylenediaminetetrapolyoxyalkylene; manufactured by NOF Corporation), ethylenediamine PO52EO60 (total of the degree of polymerization of oxyethylene chains: 60; summation of the degree of polymerization of oxypropylene chains: 52; manufactured by NOF Corporation), and the like. The number of polymerizations of ethylenediaminetetrapolyoxyalkylene is preferably 1 to 100, more preferably 1 to 60. In the present invention, two or more kinds of ethylenediaminetetrapolyoxyalkylene may be used. The concentration of ethylenediaminetetrapolyoxyalkylene is not particularly limited as long as the concentration of HDL cholesterol of the present invention can be measured, but the concentration in the reaction solution is preferably 0.001 to 10%. 0.01 to 1% is more preferable. Examples of the polyoxyethylene alkylamine and polyoxyethylene alkenylamine include those represented by the general formula (III)

Figure 0004796489
Figure 0004796489

[式中、Rは直鎖または分岐状のアルキル基またはアルケニル基を表し、Xは水素原子または(CHCHO)Hを表し、mおよびnは同一または異なって、1〜100の整数を表し、m+nは2〜200の整数である]で表される化合物[以下、化合物(III)という]が挙げられ、化合物(III)におけるアルキルとしては、直鎖または分枝状の炭素数6〜30の、例えばヘキシル、ヘプチル、オクチル、イソオクチル、ノニル、デシル、ウンデシル、ドデシル(ラウリル)、トリデシル、テトラデシル(ミリスチル)、ペンタデシル、ヘキサデシル(セチル)、ヘプタデシル、オクタデシル(ステアリル)、ノナデシル、イコシル、ヘネイコシル、ドコシル(ベヘニル)、トリコシル、テトラコシル、ペンタコシル、ヘキサコシル、ヘプタコシル、オクタコシル、ノナコシル、トリアコンシル等が挙げられ、化合物(III)におけるアルケニルとしては、直鎖または分枝上の炭素数6〜30の、例えばヘキセニル、ヘプテニル、オクテニル、ノネニル、デセニル、シトロネリル、ウンデセニル、ドデセニル、トリデセニル、テトラデセニル、ペンタデセニル、ヘキサデセニル、ヘプタデセニル、オレイル、ノナデセニル、エイコセニル、ヘンエイコセニル、ドコセニル、トリコセニル、テトラコセニル、ペンタコセニル、ヘキサコセニル、ヘプタコセニル、オクタコセニル、ノナコセニル、トリアコンテニル等が挙げられる。[Wherein, R represents a linear or branched alkyl group or alkenyl group, X represents a hydrogen atom or (CH 2 CH 2 O) n H, and m and n are the same or different, and And an integer of 2 to 200] [hereinafter referred to as compound (III)]. As alkyl in compound (III), linear or branched carbon number is exemplified. 6-30, such as hexyl, heptyl, octyl, isooctyl, nonyl, decyl, undecyl, dodecyl (lauryl), tridecyl, tetradecyl (myristyl), pentadecyl, hexadecyl (cetyl), heptadecyl, octadecyl (stearyl), nonadecyl, icosyl, Heneicosyl, docosyl (behenyl), tricosyl, tetracosyl, pentacosyl, hex Kosyl, heptacosyl, octacosyl, nonacosyl, triaconsyl and the like can be mentioned, and examples of the alkenyl in the compound (III) include straight-chain or branched 6 to 30 carbon atoms such as hexenyl, heptenyl, octenyl, nonenyl, decenyl, citronellyl, Undecenyl, dodecenyl, tridecenyl, tetradecenyl, pentadecenyl, hexadecenyl, heptadecenyl, oleyl, nonadecenyl, eicosenyl, heneicosenyl, dococenyl, tricosenyl, tetracosenyl, pentacocenyl, hexacocenyl, heptacosenyl, octaconenyl, triaconenyl, triaconenyl, etc.

ポリオキシエチレンアルキルアミンまたはポリオキシエチレンアルケニルアミンの具体例(製品)としては、例えばナイミーンL201(オキシエチレンドデシルアミン;日本油脂社製)、ナイミーンL207(ポリオキシエチレンドデシルアミン;日本油脂社製)、ナイミーンS204、ナイミーンS210(ポリオキシエチレンオクタデシルアミン;日本油脂社製)、ニューコールOD420(ポリオキシエチレンオクタデシルアミン;日本乳化剤社製)、パイオニンD3104(ポリオキシエチレンラウリルアミン;竹本油脂社製)、パイオニンD3110(ポリオキシエチレンラウリルアミン;竹本油脂社製)、パイオニンD3605[ポリオキシエチレンアルキル(大豆)アミン;竹本油脂社製]、パイオニンD3615T[ポリオキシエチレンアルキル(牛脂)アミン;竹本油脂社製]、BLAUNON O209(ポリオキシエチレンオレイルアミノエーテル;青木油脂社製)等が挙げられる。ポリオキシエチレンアルキルアミンおよびポリオキシエチレンアルキレンアミンにおけるオキシエチレン鎖の重合度は、好ましくは1〜100、より好ましくは1〜60である。本発明においては、ポリオキシエチレンアルキルアミンおよびポリオキシエチレンアルキレンアミンを2種類以上用いても良い。ポリオキシエチレンアルキルアミンおよびポリオキシエチレンアルキレンアミンの濃度としては、本発明のHDLコレステロールの測定を可能とする濃度であれば特に制限はないが、反応液中の濃度が0.0001〜1%であることが好ましく、0.001〜0.1%がより好ましい。  Specific examples (products) of polyoxyethylene alkylamine or polyoxyethylene alkenylamine include, for example, Nimine L201 (oxyethylene dodecylamine; manufactured by NOF Corporation), Naimine L207 (polyoxyethylene dodecylamine; manufactured by NOF Corporation), Naimine S204, Naimine S210 (polyoxyethylene octadecylamine; manufactured by Nippon Oil & Fats Co., Ltd.), New Coal OD420 (polyoxyethylene octadecylamine; manufactured by Nippon Emulsifier Co., Ltd.), Pionine D3104 (polyoxyethylene laurylamine; manufactured by Takemoto Oil & Fats Co., Ltd.), Pionein D3110 (polyoxyethylene laurylamine; manufactured by Takemoto Yushi Co., Ltd.), Pionine D3605 [polyoxyethylene alkyl (soybean) amine; manufactured by Takemoto Yushi Co., Ltd.], Pionine D3615T [Poly Carboxymethyl ethylene alkyl (beef tallow) amine; Takemoto Oil & Fat Co., Ltd.], BLAUNON O209 (polyoxyethylene oleyl amino ether, manufactured by Aoki Oil Co., Ltd.). The degree of polymerization of the oxyethylene chain in the polyoxyethylene alkylamine and polyoxyethylene alkyleneamine is preferably 1 to 100, more preferably 1 to 60. In the present invention, two or more polyoxyethylene alkylamines and polyoxyethylene alkyleneamines may be used. The concentration of polyoxyethylene alkylamine and polyoxyethylene alkyleneamine is not particularly limited as long as the concentration of HDL cholesterol of the present invention can be measured, but the concentration in the reaction solution is 0.0001 to 1%. It is preferable that 0.001 to 0.1% is more preferable.

本発明において用いられるアルブミンとしては、本発明のHDLコレステロールの測定を可能とするアルブミンであれば特に限定はなく、例えばウシ、ウマ、ヒツジ、ヒト由来のアルブミン等が挙げられるが、ウシ血清アルブミン(BSA)が好ましい。また、遺伝子工学的な手法により製造されたアルブミンも用いることができる。本発明においては、2種類以上のアルブミンを組み合わせて使用することもできる。本発明のHDLコレステロールの測定におけるアルブミンの濃度としては、本発明のHDLコレステロールの測定を可能とする濃度であれば特に制限はないが、反応液中の濃度が0.001〜10%であることが好ましく、0.01〜1%がより好ましい。  The albumin used in the present invention is not particularly limited as long as it is an albumin capable of measuring the HDL cholesterol of the present invention, and examples thereof include bovine, horse, sheep, human-derived albumin and the like. BSA) is preferred. Also, albumin produced by genetic engineering techniques can be used. In the present invention, two or more types of albumin can be used in combination. The concentration of albumin in the measurement of HDL cholesterol of the present invention is not particularly limited as long as it is a concentration that enables measurement of HDL cholesterol of the present invention, but the concentration in the reaction solution is 0.001 to 10%. Is preferable, and 0.01 to 1% is more preferable.

本発明のHDLコレステロール測定方法において使用される水性媒体としては、例えば脱イオン水、蒸留水、緩衝液等が挙げられるが、緩衝液が好ましい。緩衝液に用いる緩衝剤としては、例えばトリス(ヒドロキシメチル)アミノメタン緩衝剤、リン酸緩衝剤、ホウ酸緩衝剤、グッドの緩衝剤等が挙げられる。グッドの緩衝剤としては、例えば2−モルホリノエタンスルホン酸(MES)、ビス(2−ヒドロキシエチル)イミノトリス(ヒドロキシメチル)メタン(Bis−Tris)、N−(2−アセトアミド)イミノ二酢酸(ADA)、ピペラジン−N,N’−ビス(2−エタンスルホン酸)(PIPES)、N−(2−アセトアミド)−2−アミノエタンスルホン酸(ACES)、3−モルホリノ−2−ヒドロキシプロパンスルホン酸(MOPSO)、N,N−ビス(2−ヒドロキシエチル)−2−アミノエタンスルホン酸(BES)、3−モルホリノプロパンスルホン酸(MOPS)、N−〔トリス(ヒドロキシメチル)メチル〕−2−アミノエタンスルホン酸(TES)、2−〔4−(2−ヒドロキシエチル)−1−ピペラジニル〕エタンスルホン酸(HEPES)、3−〔N,N−ビス(2−ヒドロキシエチル)アミノ〕−2−ヒドロキシプロパンスルホン酸(DIPSO)、N−〔トリス(ヒドロキシメチル)メチル〕−2−ヒドロキシ−3−アミノプロパンスルホン酸(TAPSO)、ピペラジン−N,N’−ビス(2−ヒドロキシプロパンスルホン酸)(POPSO)、3−〔4−(2−ヒドロキシエチル)−1−ピペラジニル〕−2−ヒドロキシプロパンスルホン酸(HEPPSO)、3−〔4−(2−ヒドロキシエチル)−1−ピペラジニル〕プロパンスルホン酸〔(H)EPPS〕、N−〔トリス(ヒドロキシメチル)メチル〕グリシン(Tricine)、N,N−ビス(2−ヒドロキシエチル)グリシン(Bicine)、N−トリス(ヒドロキシメチル)メチル−3−アミノプロパンスルホン酸(TAPS)、N−シクロヘキシル−2−アミノエタンスルホン酸(CHES)、N−シクロヘキシル−3−アミノ−2−ヒドロキシプロパンスルホン酸(CAPSO)、N−シクロヘキシル−3−アミノプロパンスルホン酸(CAPS)等が挙げられる。緩衝液の濃度は測定に適した濃度であれば特に制限はされないが、0.001〜2.0mol/Lが好ましく、0.005〜1.0mol/Lがより好ましい。  Examples of the aqueous medium used in the HDL cholesterol measurement method of the present invention include deionized water, distilled water, and a buffer solution, and a buffer solution is preferable. Examples of the buffer used in the buffer include tris (hydroxymethyl) aminomethane buffer, phosphate buffer, borate buffer, Good's buffer, and the like. Good buffering agents include, for example, 2-morpholinoethanesulfonic acid (MES), bis (2-hydroxyethyl) iminotris (hydroxymethyl) methane (Bis-Tris), N- (2-acetamido) iminodiacetic acid (ADA) Piperazine-N, N′-bis (2-ethanesulfonic acid) (PIPES), N- (2-acetamido) -2-aminoethanesulfonic acid (ACES), 3-morpholino-2-hydroxypropanesulfonic acid (MOPSO) ), N, N-bis (2-hydroxyethyl) -2-aminoethanesulfonic acid (BES), 3-morpholinopropanesulfonic acid (MOPS), N- [tris (hydroxymethyl) methyl] -2-aminoethanesulfone Acid (TES), 2- [4- (2-hydroxyethyl) -1-piperazinyl] ethane Lufonic acid (HEPES), 3- [N, N-bis (2-hydroxyethyl) amino] -2-hydroxypropanesulfonic acid (DIPSO), N- [tris (hydroxymethyl) methyl] -2-hydroxy-3- Aminopropanesulfonic acid (TAPSO), piperazine-N, N′-bis (2-hydroxypropanesulfonic acid) (POPSO), 3- [4- (2-hydroxyethyl) -1-piperazinyl] -2-hydroxypropanesulfone Acid (HEPPSO), 3- [4- (2-hydroxyethyl) -1-piperazinyl] propanesulfonic acid [(H) EPPS], N- [tris (hydroxymethyl) methyl] glycine (Tricine), N, N- Bis (2-hydroxyethyl) glycine (Bicine), N-tris (hydroxymethyl) 3-aminopropanesulfonic acid (TAPS), N-cyclohexyl-2-aminoethanesulfonic acid (CHES), N-cyclohexyl-3-amino-2-hydroxypropanesulfonic acid (CAPSO), N-cyclohexyl-3- Examples include aminopropane sulfonic acid (CAPS). The concentration of the buffer solution is not particularly limited as long as it is a concentration suitable for measurement, but is preferably 0.001 to 2.0 mol / L, more preferably 0.005 to 1.0 mol / L.

以下に、本発明のHDLコレステロールの測定方法、測定用試薬および測定用キットを具体的に説明する。
(HDLコレステロールの測定方法)
本発明のHDLコレステロールの測定方法としては、例えば以下の態様の方法が挙げられる。
Below, the measuring method of HDL cholesterol, the reagent for a measurement, and the kit for a measurement of this invention are demonstrated concretely.
(Measurement method of HDL cholesterol)
Examples of the method for measuring HDL cholesterol of the present invention include the methods of the following aspects.

測定方法
(1)検体と、コレステロールエステル加水分解酵素およびコレステロール酸化酵素、または、コレステロールエステル加水分解酵素、酸化型補酵素およびコレステロール脱水素酵素とを、アルキルアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物、ポリオキシエチレンアルキルアミンサルフェート、ポリオキシエチレンベンジル−アルキル四級アンモニウム塩、ポリオキシエチレン酸アミド、アルキルアミンオキシドおよびアルキルプロピレンジアミン誘導体からなる群より選ばれる少なくとも一つの物質を含有し、必要に応じ、ポリアニオン、胆汁酸誘導体、エチレンジアミンテトラポリオキシアルキレン、ポリオキシエチレンアルキルアミン、ポリオキシエチレンアルケニルアミンおよびアルブミンからなる群より選ばれる少なくとも一つの物質を含有する水性媒体中で反応させ過酸化水素または還元型補酵素を生成させ、
(2)生成した過酸化水素または還元型補酵素を測定し、
(3)(2)で測定した値と、予め作成した検量線とから、検体中のHDLコレステロール濃度を算出することにより、検体中のHDLコレステロールを測定することができる。
本測定法においては、(1)の反応は、例えば10〜50℃で、好ましくは20〜40℃で、1〜60分間、好ましくは2〜30分間行う。
Measurement method (1) A specimen, cholesterol ester hydrolase and cholesterol oxidase, or cholesterol ester hydrolase, oxidized coenzyme and cholesterol dehydrogenase, alkylamine polyoxyethylene polyoxypropylene condensate, poly Containing at least one substance selected from the group consisting of oxyethylene alkylamine sulfate, polyoxyethylene benzyl-alkyl quaternary ammonium salt, polyoxyethylene acid amide, alkylamine oxide and alkylpropylenediamine derivatives, and if necessary, polyanion Selected from the group consisting of bile acid derivatives, ethylenediaminetetrapolyoxyalkylene, polyoxyethylene alkylamine, polyoxyethylene alkenylamine and albumin At least one substance is reacted in an aqueous medium containing a to generate hydrogen peroxide or reduced coenzyme that,
(2) Measure the generated hydrogen peroxide or reduced coenzyme,
(3) HDL cholesterol in a sample can be measured by calculating the HDL cholesterol concentration in the sample from the value measured in (2) and a calibration curve prepared in advance.
In this measurement method, the reaction of (1) is performed at, for example, 10 to 50 ° C., preferably 20 to 40 ° C., for 1 to 60 minutes, preferably 2 to 30 minutes.

生成した過酸化水素の量は、例えば過酸化水素測定用試薬により測定することができる。過酸化水素測定用試薬は、生成した過酸化水素を検出可能な物質へ変換するための試薬である。検出可能な物質としては、例えば色素、発光等が挙げられるが、色素が好ましい。検出可能な物質が色素の場合には、過酸化水素測定用試薬は、酸化発色型色原体およびペルオキシダーゼ等の過酸化活性物質を含有する。酸化発色型色原体としては、例えば後述の酸化発色型色原体が挙げられる。検出可能な物質が発光の場合には、過酸化水素測定用試薬は、化学発光物質を含有する。化学発光物質としては、例えばルミノール、イソルミノール、ルシゲニン、アクリジニウムエステル等があげられる。  The amount of generated hydrogen peroxide can be measured, for example, with a hydrogen peroxide measuring reagent. The reagent for measuring hydrogen peroxide is a reagent for converting the generated hydrogen peroxide into a detectable substance. Examples of detectable substances include dyes and luminescence, and dyes are preferred. When the detectable substance is a dye, the reagent for measuring hydrogen peroxide contains an oxidative coloring type chromogen and a peroxidase active substance such as peroxidase. Examples of the oxidative coloring type chromogen include the following oxidative coloring type chromogen. When the detectable substance is luminescence, the hydrogen peroxide measuring reagent contains a chemiluminescent substance. Examples of the chemiluminescent substance include luminol, isoluminol, lucigenin, acridinium ester and the like.

過酸化水素測定用試薬として、酸化発色型色原体およびペルオキシダーゼ等の過酸化活性物質を含有する試薬を用いる場合には、過酸化水素は、過酸化活性物質の存在下に酸化発色型色原体と反応して色素を生成し、生成した色素を定量することにより、過酸化水素を定量することができる。また、化学発光物質を含有する過酸化水素測定用試薬を用いる場合には、過酸化水素は、化学発光物質と反応してフォトンを生じ、生じたフォトンを定量することにより、過酸化水素を定量することができる。  When a reagent containing an oxidative coloring chromogen and a peroxidase active substance such as peroxidase is used as the hydrogen peroxide measurement reagent, hydrogen peroxide is oxidized in the presence of the peroxidase active substance. Hydrogen peroxide can be quantified by reacting with the body to produce a pigment and quantifying the pigment produced. When a reagent for measuring hydrogen peroxide containing a chemiluminescent substance is used, hydrogen peroxide reacts with the chemiluminescent substance to generate photons, and the generated photons are quantified to quantify hydrogen peroxide. can do.

酸化発色型色原体としては、例えばロイコ型色原体、酸化カップリング発色型色原体等が挙げられる。ロイコ型色原体は、過酸化水素およびペルオキシダーゼ等の過酸化活性物質の存在下、単独で色素へ変換される物質である。具体的には、10−N−カルボキシメチルカルバモイル−3,7−ビス(ジメチルアミノ)−10H−フェノチアジン(CCAP)、10−N−メチルカルバモイル−3,7−ビス(ジメチルアミノ)−10H−フェノチアジン(MCDP)、N−(カルボキシメチルアミノカルボニル)−4,4’−ビス(ジメチルアミノ)ジフェニルアミンナトリウム塩(DA−64)、4,4’−ビス(ジメチルアミノ)ジフェニルアミン、ビス〔3−ビス(4−クロロフェニル)メチル−4−ジメチルアミノフェニル〕アミン(BCMA)等が挙げられる。  Examples of the oxidative coloring chromogen include a leuco chromogen and an oxidative coupling coloring chromogen. A leuco chromogen is a substance that is converted into a pigment by itself in the presence of a peroxide active substance such as hydrogen peroxide and peroxidase. Specifically, 10-N-carboxymethylcarbamoyl-3,7-bis (dimethylamino) -10H-phenothiazine (CCAP), 10-N-methylcarbamoyl-3,7-bis (dimethylamino) -10H-phenothiazine (MCDP), N- (carboxymethylaminocarbonyl) -4,4′-bis (dimethylamino) diphenylamine sodium salt (DA-64), 4,4′-bis (dimethylamino) diphenylamine, bis [3-bis ( 4-chlorophenyl) methyl-4-dimethylaminophenyl] amine (BCMA) and the like.

酸化カップリング発色型色原体は、過酸化水素およびペルオキシダーゼ等の過酸化活性物質の存在下、2つの化合物が酸化的カップリングして色素を生成する物質である。2つの化合物の組み合わせとしては、カプラーとアニリン類との組み合わせ、カプラーとフェノール類との組み合わせ等が挙げられる。カプラーとしては、例えば4−アミノアンチピリン(4−AA)、3−メチル−2−ベンゾチアゾリノンヒドラジン等が挙げられる。アニリン類としては、N−(3−スルホプロピル)アニリン、N−エチル−N−(2−ヒドロキシ−3−スルホプロピル)−3−メチルアニリン(TOOS)、N−エチル−N−(2−ヒドロキシ−3−スルホプロピル)−3,5−ジメチルアニリン(MAOS)、N−エチル−N−(2−ヒドロキシ−3−スルホプロピル)−3,5−ジメトキシアニリン(DAOS)、N−エチル−N−(3−スルホプロピル)−3−メチルアニリン(TOPS)、N−(2−ヒドロキシ−3−スルホプロピル)−3,5−ジメトキシアニリン(HDAOS)、N,N−ジメチル−3−メチルアニリン、N,N−ジ(3−スルホプロピル)−3,5−ジメトキシアニリン、N−エチル−N−(3−スルホプロピル)−3−メトキシアニリン、N−エチル−N−(3−スルホプロピル)アニリン、N−エチル−N−(3−スルホプロピル)−3,5−ジメトキシアニリン、N−(3−スルホプロピル)−3,5−ジメトキシアニリン、N−エチル−N−(3−スルホプロピル)−3,5−ジメチルアニリン、N−エチル−N−(2−ヒドロキシ−3−スルホプロピル)−3−メトキシアニリン、N−エチル−N−(2−ヒドロキシ−3−スルホプロピル)アニリン、N−エチル−N−(3−メチルフェニル)−N’−サクシニルエチレンジアミン(EMSE)、N−エチル−N−(3−メチルフェニル)−N’−アセチルエチレンジアミン、N−エチル−N−(2−ヒドロキシ−3−スルホプロピル)−4−フルオロ−3,5−ジメトキシアニリン(F−DAOS)等が挙げられる。フェノール類としては、フェノール、4−クロロフェノール、3−メチルフェノール、3−ヒドロキシ−2,4,6−トリヨード安息香酸(HTIB)等が挙げられる。  The oxidative coupling chromogen is a substance that forms a dye by oxidative coupling of two compounds in the presence of a peroxide active substance such as hydrogen peroxide and peroxidase. Examples of the combination of the two compounds include a combination of a coupler and an aniline, a combination of a coupler and a phenol. Examples of the coupler include 4-aminoantipyrine (4-AA) and 3-methyl-2-benzothiazolinone hydrazine. Examples of anilines include N- (3-sulfopropyl) aniline, N-ethyl-N- (2-hydroxy-3-sulfopropyl) -3-methylaniline (TOOS), N-ethyl-N- (2-hydroxy). -3-sulfopropyl) -3,5-dimethylaniline (MAOS), N-ethyl-N- (2-hydroxy-3-sulfopropyl) -3,5-dimethoxyaniline (DAOS), N-ethyl-N- (3-sulfopropyl) -3-methylaniline (TOPS), N- (2-hydroxy-3-sulfopropyl) -3,5-dimethoxyaniline (HDAOS), N, N-dimethyl-3-methylaniline, N , N-di (3-sulfopropyl) -3,5-dimethoxyaniline, N-ethyl-N- (3-sulfopropyl) -3-methoxyaniline, N-ethyl- -(3-sulfopropyl) aniline, N-ethyl-N- (3-sulfopropyl) -3,5-dimethoxyaniline, N- (3-sulfopropyl) -3,5-dimethoxyaniline, N-ethyl-N -(3-sulfopropyl) -3,5-dimethylaniline, N-ethyl-N- (2-hydroxy-3-sulfopropyl) -3-methoxyaniline, N-ethyl-N- (2-hydroxy-3- Sulfopropyl) aniline, N-ethyl-N- (3-methylphenyl) -N′-succinylethylenediamine (EMSE), N-ethyl-N- (3-methylphenyl) -N′-acetylethylenediamine, N-ethyl- N- (2-hydroxy-3-sulfopropyl) -4-fluoro-3,5-dimethoxyaniline (F-DAOS) and the like can be mentioned. Examples of phenols include phenol, 4-chlorophenol, 3-methylphenol, 3-hydroxy-2,4,6-triiodobenzoic acid (HTIB) and the like.

過酸化水素の測定において、過酸化活性物質の濃度は、測定に適した濃度であれば特に制限はないが、過酸化活性物質としてペルオキシダーゼを用いる場合は、1〜100kU/Lが好ましい。また、酸化発色型色原体の濃度は、測定に適した濃度であれば特に制限はないが、0.01〜10g/Lが好ましい。
還元型補酵素の測定方法としては、例えば生成した還元型補酵素の吸光度を測定する方法、還元型補酵素測定用試薬を用いる方法等が挙げられる。還元型補酵素の吸光度を測定する方法における吸光度としては、300〜500nmが好ましく、330〜400nmがより好ましく、340nm付近が特に好ましい。還元型補酵素測定用試薬は、生成した還元型補酵素を検出可能な物質へ変換するための試薬である。検出可能な物質としては、例えば色素等が挙げられる。検出可能な物質が色素の場合の還元型補酵素測定用試薬としては、例えばジアホラーゼ、電子キャリアーおよび還元発色型色原体を含有する試薬が挙げられる。電子キャリアーとしては、例えば1−メトキシ−5−メチルフェナジウムメチルサルフェート等が挙げられる。還元型補酵素測定用試薬として、ジアホラーゼ、電子キャリアーおよび還元発色型色原体を含有する試薬を用いる場合には、還元発色型色原体が変換されて生成した色素を定量することにより、還元型補酵素を定量することができる。
In the measurement of hydrogen peroxide, the concentration of the peroxide active substance is not particularly limited as long as it is a concentration suitable for the measurement. However, when peroxidase is used as the peroxide active substance, 1 to 100 kU / L is preferable. The concentration of the oxidative coloring type chromogen is not particularly limited as long as it is a concentration suitable for measurement, but is preferably 0.01 to 10 g / L.
Examples of the method for measuring reduced coenzyme include a method of measuring the absorbance of the produced reduced coenzyme, a method using a reagent for measuring reduced coenzyme, and the like. The absorbance in the method for measuring the absorbance of the reduced coenzyme is preferably 300 to 500 nm, more preferably 330 to 400 nm, and particularly preferably around 340 nm. The reagent for measuring reduced coenzyme is a reagent for converting the produced reduced coenzyme into a detectable substance. Examples of the detectable substance include a dye. Examples of the reagent for measuring reduced coenzyme when the detectable substance is a dye include a reagent containing diaphorase, an electron carrier and a reduced chromogenic chromogen. Examples of the electron carrier include 1-methoxy-5-methylphenadium methyl sulfate. When a reagent containing diaphorase, an electron carrier and a reduced chromogenic chromogen is used as a reagent for measuring reduced coenzyme, the reduction is achieved by quantifying the dye produced by conversion of the reduced chromogenic chromogen. The type coenzyme can be quantified.

還元発色型色原体としては、例えば3−(4,5−ジメチル−2−チアゾリル)−2,5−ジフェニル−2H−テトラゾリウム ブロミド(MTT)、2−(4−ヨードフェニル)−3−(4−ニトロフェニル)−5−(2,4−ジスルホフェニル)−2H−テトラゾリウム モノナトリウム塩(WST−1)、2−(4−ヨードフェニル)−3−(2,4−ジニトロフェニル)−5−(2,4−ジスルホフェニル)−2H−テトラゾリウム モノナトリウム塩(WST−3)等が挙げられる。  For example, 3- (4,5-dimethyl-2-thiazolyl) -2,5-diphenyl-2H-tetrazolium bromide (MTT), 2- (4-iodophenyl) -3- ( 4-Nitrophenyl) -5- (2,4-disulfophenyl) -2H-tetrazolium monosodium salt (WST-1), 2- (4-iodophenyl) -3- (2,4-dinitrophenyl)- 5- (2,4-disulfophenyl) -2H-tetrazolium monosodium salt (WST-3) and the like.

(HDLコレステロール測定用試薬)
本発明のHDLコレステロール測定用試薬は、アルキルアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物、ポリオキシエチレンアルキルアミンサルフェート、ポリオキシエチレンベンジル−アルキル四級アンモニウム塩、ポリオキシエチレン酸アミド、アルキルアミンオキシドおよびアルキルプロピレンジアミン誘導体からなる群より選ばれる少なくとも一つの物質、コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素ならびに過酸化水素測定用試薬を含有し、必要に応じてポリアニオン、胆汁酸誘導体、エチレンジアミンテトラポリオキシアルキレン、ポリオキシエチレンアルキルアミンおよびポリオキシエチレンアルケニルアミンからなる群より選ばれる少なくとも一つの物質を含有する
また、本発明のHDLコレステロール測定用試薬は、アルキルアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物、ポリオキシエチレンアルキルアミンサルフェート、ポリオキシエチレンベンジル−アルキル四級アンモニウム塩、ポリオキシエチレン酸アミド、アルキルアミンオキシドおよびアルキルプロピレンジアミン誘導体からなる群より選ばれる少なくとも一つの物質、コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素ならびに酸化型補酵素を含有し、必要に応じて、ポリアニオン、胆汁酸誘導体、エチレンジアミンテトラポリオキシアルキレン、ポリオキシエチレンアルキルアミンおよびポリオキシエチレンアルケニルアミンからなる群より選ばれる少なくとも一つの物質または還元型補酵素測定用試薬を含有する。
(Reagent for HDL cholesterol measurement)
The reagent for measuring HDL cholesterol of the present invention comprises an alkylamine polyoxyethylene polyoxypropylene condensate, polyoxyethylene alkylamine sulfate, polyoxyethylene benzyl-alkyl quaternary ammonium salt, polyoxyethylene acid amide, alkylamine oxide and alkyl. Contains at least one substance selected from the group consisting of propylenediamine derivatives, cholesterol ester hydrolase, cholesterol oxidase and a reagent for measuring hydrogen peroxide, and if necessary, polyanion, bile acid derivative, ethylenediaminetetrapolyoxyalkylene, Containing at least one substance selected from the group consisting of polyoxyethylene alkylamines and polyoxyethylene alkenylamines. Reagents for terol measurement are alkylamine polyoxyethylene polyoxypropylene condensate, polyoxyethylene alkylamine sulfate, polyoxyethylene benzyl-alkyl quaternary ammonium salt, polyoxyethylene acid amide, alkylamine oxide and alkylpropylenediamine derivatives. Contains at least one substance selected from the group consisting of cholesterol esterase, cholesterol dehydrogenase and oxidized coenzyme, and if necessary, polyanion, bile acid derivative, ethylenediaminetetrapolyoxyalkylene, polyoxyethylenealkyl It contains at least one substance selected from the group consisting of amines and polyoxyethylene alkenylamines or a reagent for measuring reduced coenzyme.

本発明のHDLコレステロール測定用試薬としては、例えば以下の態様の試薬が挙げられるがこれらは本発明の範囲を何ら限定するものではない。
なお、アルキルアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物、ポリオキシエチレンアルキルアミンサルフェート、ポリオキシエチレンベンジル−アルキル四級アンモニウム塩、ポリオキシエチレン酸アミド、アルキルアミンオキシドおよびアルキルプロピレンジアミン誘導体からなる群から選ばれる少なくとも一つの物質を以下「化合物A」という。
Examples of the reagent for measuring HDL cholesterol of the present invention include the reagents of the following embodiments, but these do not limit the scope of the present invention.
In addition, it is selected from the group consisting of alkylamine polyoxyethylene polyoxypropylene condensate, polyoxyethylene alkylamine sulfate, polyoxyethylene benzyl-alkyl quaternary ammonium salt, polyoxyethylene acid amide, alkylamine oxide and alkylpropylenediamine derivatives. The at least one substance is hereinafter referred to as “Compound A”.

また、ポリアニオン、胆汁酸誘導体、エチレンジアミンテトラポリオキシアルキレン、ポリオキシエチレンアルキルアミンおよびポリオキシエチレンアルケニルアミンからなる群から選ばれる少なくとも一つの物質を以下「化合物B」という。本発明の測定用試薬においては、化合物Aを1つまたは複数用いることができ、化合物Bを1つまたは複数用いることができる。  In addition, at least one substance selected from the group consisting of a polyanion, a bile acid derivative, ethylenediaminetetrapolyoxyalkylene, polyoxyethylenealkylamine, and polyoxyethylenealkenylamine is hereinafter referred to as “compound B”. In the measuring reagent of the present invention, one or more compounds A can be used, and one or more compounds B can be used.

試薬1
化合物A、コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素および過酸化水素測定用試薬を含有する試薬。
Reagent 1
A reagent comprising Compound A, cholesterol esterase, cholesterol oxidase and a reagent for measuring hydrogen peroxide.

試薬2
化合物A、化合物B、コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素および過酸化水素測定用試薬を含有する試薬。
Reagent 2
A reagent comprising Compound A, Compound B, cholesterol esterase, cholesterol oxidase and a reagent for measuring hydrogen peroxide.

試薬3
化合物A、化合物B、アルブミン、コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素および過酸化水素測定用試薬を含有する試薬。
Reagent 3
A reagent containing Compound A, Compound B, albumin, cholesterol esterase, cholesterol oxidase, and a reagent for measuring hydrogen peroxide.

試薬4
化合物A、コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素および酸化型補酵素を含有する試薬。
Reagent 4
A reagent containing Compound A, cholesterol esterase, cholesterol dehydrogenase and oxidized coenzyme.

試薬5
化合物A、化合物B、コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素および酸化型補酵素を含有する試薬。
Reagent 5
A reagent containing Compound A, Compound B, cholesterol esterase, cholesterol dehydrogenase and oxidized coenzyme.

試薬6
化合物A、化合物B、アルブミン、コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素および酸化型補酵素を含有する試薬。
Reagent 6
A reagent containing Compound A, Compound B, albumin, cholesterol esterase, cholesterol dehydrogenase, and oxidized coenzyme.

試薬7
化合物A、コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、酸化型補酵素および還元型補酵素測定用試薬を含有する試薬。
Reagent 7
A reagent comprising Compound A, cholesterol esterase, cholesterol dehydrogenase, oxidized coenzyme and reagent for measuring reduced coenzyme.

試薬8
化合物A、化合物B、コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、酸化型補酵素および還元型補酵素測定用試薬を含有する試薬。
Reagent 8
A reagent comprising Compound A, Compound B, cholesterol esterase, cholesterol dehydrogenase, oxidized coenzyme and reduced coenzyme measuring reagent.

試薬9
化合物A、化合物B、アルブミン、コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、酸化型補酵素および還元型補酵素測定用試薬を含有する試薬。
Reagent 9
A reagent containing Compound A, Compound B, albumin, cholesterol esterase, cholesterol dehydrogenase, oxidized coenzyme, and reduced coenzyme measuring reagent.

本発明のHDLコレステロール測定用試薬においては、前述の本発明のHDLコレステロールの測定方法において挙げられた、アルキルアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物、ポリオキシエチレンアルキルアミンサルフェート、ポリオキシエチレンベンジル−アルキル四級アンモニウム塩、ポリオキシエチレン酸アミド、アルキルアミンオキシド、アルキルプロピレンジアミン誘導体、コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素、コレステロール脱水素酵素、ポリアニオン、胆汁酸誘導体、エチレンジアミンテトラポリオキシアルキレン、ポリオキシエチレンアルキルアミン、ポリオキシエチレンアルケニルアミン、アルブミン、過酸化水素測定用試薬、酸化型補酵素、還元型補酵素測定用試薬を用いることができる。  In the reagent for measuring HDL cholesterol of the present invention, the alkylamine polyoxyethylene polyoxypropylene condensate, polyoxyethylene alkylamine sulfate, polyoxyethylene benzyl-alkyl mentioned in the above-described method for measuring HDL cholesterol of the present invention. Quaternary ammonium salt, polyoxyethylene acid amide, alkylamine oxide, alkylpropylenediamine derivative, cholesterol ester hydrolase, cholesterol oxidase, cholesterol dehydrogenase, polyanion, bile acid derivative, ethylenediaminetetrapolyoxyalkylene, polyoxyethylene Using alkylamine, polyoxyethylene alkenylamine, albumin, hydrogen peroxide measuring reagent, oxidized coenzyme, reducing coenzyme measuring reagent It is possible.

(HDLコレステロール測定用キット)
本発明のHDLコレステロール測定用試薬は、キットの形態で保存、流通および使用されてもよい。キットの形態としては、特に制限はなく、2試薬系、3試薬系等のいずれであってもよいが、2試薬系が好ましい。
第一試薬と第二試薬とからなる2試薬系のHDLコレステロール測定用キットにおいては、コレステロールエステル加水分解酵素と、コレステロール酸化酵素またはコレステロール脱水素酵素とは、第一試薬と第二試薬に別々に含有されても、第二試薬に一緒に含有されてもよいが、第一試薬と第二試薬に別々に含有される場合には、コレステロールエステル加水分解酵素が第一試薬に、コレステロール酸化酵素またはコレステロール脱水素酵素が第二試薬に含有される態様が好ましい。アルキルアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物、ポリオキシエチレンアルキルアミンサルフェート、ポリオキシエチレンベンジル−アルキル四級アンモニウム塩、ポリオキシエチレン酸アミド、アルキルアミンオキシド、アルキルプロピレンジアミン誘導体、胆汁酸誘導体、エチレンジアミンテトラポリオキシアルキレン、ポリオキシエチレンアルキルアミン、ポリオキシエチレンアルケニルアミンおよびアルブミンは、第一試薬、第二試薬のいずれかまたは両方に含有されてもよい。コレステロール脱水素酵素を用いた測定法において使用される酸化型補酵素は、第一試薬、第二試薬のいずれかまたは両方に含有されてもよい。
(HDL cholesterol measurement kit)
The reagent for measuring HDL cholesterol of the present invention may be stored, distributed and used in the form of a kit. The form of the kit is not particularly limited and may be any of a two-reagent system and a three-reagent system, but a two-reagent system is preferred.
In a two-reagent HDL cholesterol measurement kit comprising a first reagent and a second reagent, cholesterol ester hydrolase and cholesterol oxidase or cholesterol dehydrogenase are separately used for the first reagent and the second reagent. May be contained together with the second reagent, or when separately contained in the first reagent and the second reagent, cholesterol esterase is added to the first reagent, cholesterol oxidase or An embodiment in which cholesterol dehydrogenase is contained in the second reagent is preferable. Alkylamine polyoxyethylene polyoxypropylene condensate, polyoxyethylene alkylamine sulfate, polyoxyethylene benzyl-alkyl quaternary ammonium salt, polyoxyethylene acid amide, alkyl amine oxide, alkyl propylene diamine derivative, bile acid derivative, ethylene diamine tetra Polyoxyalkylene, polyoxyethylene alkylamine, polyoxyethylene alkenylamine and albumin may be contained in either or both of the first reagent and the second reagent. The oxidized coenzyme used in the measurement method using cholesterol dehydrogenase may be contained in either or both of the first reagent and the second reagent.

過酸化水素測定用試薬は、第一試薬、第二試薬のいずれかまたは両方に含有されてもよいが、当該試薬が酸化カップリング型色原体を含有する場合には、酸化カップリング型色原体のそれぞれの化合物は別々の試薬に含有される態様が好ましい。還元性補酵素測定用試薬は、第一試薬、第二試薬のいずれかまたは両方に含有されてもよいが、第一試薬、第二試薬の両方に含有されることが好ましい。  The reagent for measuring hydrogen peroxide may be contained in one or both of the first reagent and the second reagent. However, when the reagent contains an oxidative coupling type chromogen, the oxidative coupling type color is used. An embodiment in which each of the original compounds is contained in a separate reagent is preferred. The reducing coenzyme measuring reagent may be contained in either or both of the first reagent and the second reagent, but is preferably contained in both the first reagent and the second reagent.

本発明のHDLコレステロール測定用キットとしては、例えば以下の態様のキットが挙げられるがこれらは本発明の範囲を何ら限定するものではない。  Examples of the kit for measuring HDL cholesterol of the present invention include the kits of the following embodiments, but these do not limit the scope of the present invention.

キット1
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素
第二試薬
コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物A
Kit 1
First reagent Cholesterol ester hydrolase second reagent Cholesterol oxidase, Reagent for measuring hydrogen peroxide, Compound A

キット2
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素
第二試薬
コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物A、化合物B
Kit 2
First reagent Cholesterol ester hydrolase second reagent Cholesterol oxidase, Reagent for measuring hydrogen peroxide, Compound A, Compound B

キット3
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素
第二試薬
コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物A、化合物B、アルブミン
Kit 3
First reagent Cholesterol ester hydrolase second reagent Cholesterol oxidase, Reagent for hydrogen peroxide measurement, Compound A, Compound B, Albumin

キット4
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、化合物B
第二試薬
コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物A
Kit 4
First reagent Cholesterol ester hydrolase, Compound B
Second reagent Cholesterol oxidase, reagent for measuring hydrogen peroxide, Compound A

キット5
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、化合物B、アルブミン
第二試薬
コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物A
Kit 5
First reagent Cholesterol ester hydrolase, Compound B, Albumin second reagent Cholesterol oxidase, Reagent for measuring hydrogen peroxide, Compound A

キット6
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、化合物B
第二試薬
コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物A、化合物B
Kit 6
First reagent Cholesterol ester hydrolase, Compound B
Second reagent Cholesterol oxidase, Reagent for hydrogen peroxide measurement, Compound A, Compound B

キット7
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、化合物B、アルブミン
第二試薬
コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物A、化合物B
Kit 7
First reagent Cholesterol ester hydrolase, Compound B, Albumin second reagent Cholesterol oxidase, Reagent for measuring hydrogen peroxide, Compound A, Compound B

キット8
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、化合物A
第二試薬
コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬
Kit 8
First reagent Cholesterol ester hydrolase, Compound A
Second reagent Reagent for cholesterol oxidase and hydrogen peroxide measurement

キット9
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、化合物A
第二試薬
コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物B
Kit 9
First reagent Cholesterol ester hydrolase, Compound A
Second reagent Cholesterol oxidase, reagent for measuring hydrogen peroxide, Compound B

キット10
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、化合物A
第二試薬
コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物B、アルブミン
Kit 10
First reagent Cholesterol ester hydrolase, Compound A
Second reagent Cholesterol oxidase, reagent for measuring hydrogen peroxide, compound B, albumin

キット11
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、化合物A、化合物B
第二試薬
コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬
Kit 11
First reagent Cholesterol ester hydrolase, Compound A, Compound B
Second reagent Reagent for cholesterol oxidase and hydrogen peroxide measurement

キット12
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、化合物A、化合物B、アルブミン
第二試薬
コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬
Kit 12
First reagent Cholesterol ester hydrolase, Compound A, Compound B, Albumin second reagent Cholesterol oxidase, Reagent for measuring hydrogen peroxide

キット13
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、化合物A、化合物B
第二試薬
コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物B
Kit 13
First reagent Cholesterol ester hydrolase, Compound A, Compound B
Second reagent Cholesterol oxidase, reagent for measuring hydrogen peroxide, Compound B

キット14
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、化合物A、化合物B、アルブミン
第二試薬
コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物B
Kit 14
First reagent Cholesterol ester hydrolase, Compound A, Compound B, Albumin second reagent Cholesterol oxidase, Reagent for measuring hydrogen peroxide, Compound B

キット15
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、化合物A
第二試薬
コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物A
Kit 15
First reagent Cholesterol ester hydrolase, Compound A
Second reagent Cholesterol oxidase, reagent for measuring hydrogen peroxide, Compound A

キット16
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、化合物A
第二試薬
コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物A、化合物B
Kit 16
First reagent Cholesterol ester hydrolase, Compound A
Second reagent Cholesterol oxidase, Reagent for hydrogen peroxide measurement, Compound A, Compound B

キット17
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、化合物A
第二試薬
コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物A、化合物B、アルブミン
Kit 17
First reagent Cholesterol ester hydrolase, Compound A
Second reagent Cholesterol oxidase, Reagent for hydrogen peroxide measurement, Compound A, Compound B, Albumin

キット18
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、化合物A、化合物B
第二試薬
コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物A
Kit 18
First reagent Cholesterol ester hydrolase, Compound A, Compound B
Second reagent Cholesterol oxidase, reagent for measuring hydrogen peroxide, Compound A

キット19
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、化合物A、アルブミン、化合物B
第二試薬
コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物A
Kit 19
First reagent Cholesterol ester hydrolase, Compound A, Albumin, Compound B
Second reagent Cholesterol oxidase, reagent for measuring hydrogen peroxide, Compound A

キット20
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、化合物A、化合物B
第二試薬
コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物A、化合物B
Kit 20
First reagent Cholesterol ester hydrolase, Compound A, Compound B
Second reagent Cholesterol oxidase, Reagent for hydrogen peroxide measurement, Compound A, Compound B

キット21
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、化合物A、化合物B、アルブミン
第二試薬
コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物A、化合物B
Kit 21
First reagent Cholesterol ester hydrolase, Compound A, Compound B, Albumin second reagent Cholesterol oxidase, Reagent for measuring hydrogen peroxide, Compound A, Compound B

キット22
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、過酸化水素測定用試薬
第二試薬
コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物A
Kit 22
First reagent Cholesterol ester hydrolase, Reagent for measuring hydrogen peroxide Second reagent Cholesterol oxidase, Reagent for measuring hydrogen peroxide, Compound A

キット23
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、過酸化水素測定用試薬
第二試薬
コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物A、化合物B
Kit 23
First reagent Cholesterol ester hydrolase, Reagent for hydrogen peroxide measurement Second reagent Cholesterol oxidase, Reagent for hydrogen peroxide measurement, Compound A, Compound B

キット24
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、過酸化水素測定用試薬
第二試薬
コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物A、化合物B、アルブミン
Kit 24
First reagent Cholesterol ester hydrolase, Reagent for measuring hydrogen peroxide Second reagent Cholesterol oxidase, Reagent for measuring hydrogen peroxide, Compound A, Compound B, Albumin

キット25
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物B
第二試薬
コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物A
Kit 25
First reagent Cholesterol ester hydrolase, Reagent for hydrogen peroxide measurement, Compound B
Second reagent Cholesterol oxidase, reagent for measuring hydrogen peroxide, Compound A

キット26
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物B、アルブミン
第二試薬
コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物A
Kit 26
1st reagent Cholesterol ester hydrolase, reagent for measuring hydrogen peroxide, compound B, albumin 2nd reagent cholesterol oxidase, reagent for measuring hydrogen peroxide, compound A

キット27
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物B
第二試薬
コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物A、化合物B
Kit 27
First reagent Cholesterol ester hydrolase, Reagent for hydrogen peroxide measurement, Compound B
Second reagent Cholesterol oxidase, Reagent for hydrogen peroxide measurement, Compound A, Compound B

キット28
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物B、アルブミン
第二試薬
コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物A、化合物B
Kit 28
First reagent Cholesterol ester hydrolase, hydrogen peroxide measurement reagent, compound B, albumin second reagent Cholesterol oxidase, hydrogen peroxide measurement reagent, compound A, compound B

キット29
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物A
第二試薬
コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬
Kit 29
First reagent Cholesterol ester hydrolase, Reagent for measuring hydrogen peroxide, Compound A
Second reagent Reagent for cholesterol oxidase and hydrogen peroxide measurement

キット30
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物A
第二試薬
コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物B
Kit 30
First reagent Cholesterol ester hydrolase, Reagent for measuring hydrogen peroxide, Compound A
Second reagent Cholesterol oxidase, reagent for measuring hydrogen peroxide, Compound B

キット31
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物A
第二試薬
コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物B、アルブミン
Kit 31
First reagent Cholesterol ester hydrolase, Reagent for measuring hydrogen peroxide, Compound A
Second reagent Cholesterol oxidase, reagent for measuring hydrogen peroxide, compound B, albumin

キット32
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物A、化合物B
第二試薬
コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬
Kit 32
First reagent Cholesterol ester hydrolase, Reagent for hydrogen peroxide measurement, Compound A, Compound B
Second reagent Reagent for cholesterol oxidase and hydrogen peroxide measurement

キット33
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物A、化合物B、アルブミン
第二試薬
コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬
Kit 33
First reagent Cholesterol ester hydrolase, Hydrogen peroxide measurement reagent, Compound A, Compound B, Albumin second reagent Cholesterol oxidase, Hydrogen peroxide measurement reagent

キット34
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物A、化合物B
第二試薬
コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物B
Kit 34
First reagent Cholesterol ester hydrolase, Reagent for hydrogen peroxide measurement, Compound A, Compound B
Second reagent Cholesterol oxidase, reagent for measuring hydrogen peroxide, Compound B

キット35
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物A、化合物B、アルブミン
第二試薬
コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物B
Kit 35
First reagent Cholesterol ester hydrolase, Hydrogen peroxide measurement reagent, Compound A, Compound B, Albumin second reagent Cholesterol oxidase, Hydrogen peroxide measurement reagent, Compound B

キット36
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物A
第二試薬
コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物A
Kit 36
First reagent Cholesterol ester hydrolase, Reagent for measuring hydrogen peroxide, Compound A
Second reagent Cholesterol oxidase, reagent for measuring hydrogen peroxide, Compound A

キット37
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物A
第二試薬
コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物A、化合物B
Kit 37
First reagent Cholesterol ester hydrolase, Reagent for measuring hydrogen peroxide, Compound A
Second reagent Cholesterol oxidase, Reagent for hydrogen peroxide measurement, Compound A, Compound B

キット38
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物A
第二試薬
コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物A、化合物B、アルブミン
Kit 38
First reagent Cholesterol ester hydrolase, Reagent for measuring hydrogen peroxide, Compound A
Second reagent Cholesterol oxidase, Reagent for hydrogen peroxide measurement, Compound A, Compound B, Albumin

キット39
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物A、化合物B
第二試薬
コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物A
Kit 39
First reagent Cholesterol ester hydrolase, Reagent for hydrogen peroxide measurement, Compound A, Compound B
Second reagent Cholesterol oxidase, reagent for measuring hydrogen peroxide, Compound A

キット40
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物B、アルブミン、化合物A
第二試薬
コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物A
Kit 40
First reagent Cholesterol ester hydrolase, Reagent for measuring hydrogen peroxide, Compound B, Albumin, Compound A
Second reagent Cholesterol oxidase, reagent for measuring hydrogen peroxide, Compound A

キット41
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物A、化合物B
第二試薬
コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物A、化合物B
Kit 41
First reagent Cholesterol ester hydrolase, Reagent for hydrogen peroxide measurement, Compound A, Compound B
Second reagent Cholesterol oxidase, Reagent for hydrogen peroxide measurement, Compound A, Compound B

キット42
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物A、化合物B、アルブミン
第二試薬
コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物A、化合物B
Kit 42
First reagent Cholesterol ester hydrolase, Hydrogen peroxide measurement reagent, Compound A, Compound B, Albumin second reagent Cholesterol oxidase, Hydrogen peroxide measurement reagent, Compound A, Compound B

キット43
第一試薬
化合物B
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物A
Kit 43
First reagent Compound B
Second reagent Cholesterol ester hydrolase, cholesterol oxidase, reagent for measuring hydrogen peroxide, compound A

キット44
第一試薬
化合物B、アルブミン
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物A
Kit 44
First reagent Compound B, Albumin second reagent Cholesterol ester hydrolase, Cholesterol oxidase, Reagent for measuring hydrogen peroxide, Compound A

キット45
第一試薬
化合物B
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物A、化合物B
Kit 45
First reagent Compound B
Second reagent Cholesterol ester hydrolase, cholesterol oxidase, reagent for measuring hydrogen peroxide, compound A, compound B

キット46
第一試薬
化合物B、アルブミン
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物A、化合物B
Kit 46
First reagent Compound B, Albumin second reagent Cholesterol ester hydrolase, Cholesterol oxidase, Reagent for measuring hydrogen peroxide, Compound A, Compound B

キット47
第一試薬
化合物A
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬
Kit 47
First reagent Compound A
Second reagent Cholesterol ester hydrolase, cholesterol oxidase, reagent for measuring hydrogen peroxide

キット48
第一試薬
化合物A
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物B
Kit 48
First reagent Compound A
Second reagent Cholesterol ester hydrolase, cholesterol oxidase, reagent for measuring hydrogen peroxide, compound B

キット49
第一試薬
化合物A
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物B、アルブミン
Kit 49
First reagent Compound A
Second reagent Cholesterol ester hydrolase, cholesterol oxidase, reagent for measuring hydrogen peroxide, compound B, albumin

キット50
第一試薬
化合物A、化合物B
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬
Kit 50
First reagent Compound A, Compound B
Second reagent Cholesterol ester hydrolase, cholesterol oxidase, reagent for measuring hydrogen peroxide

キット51
第一試薬
化合物A、化合物B、アルブミン
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬
Kit 51
First reagent Compound A, Compound B, Albumin second reagent Cholesterol ester hydrolase, Cholesterol oxidase, Reagent for hydrogen peroxide measurement

キット52
第一試薬
化合物A、化合物B
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物B
Kit 52
First reagent Compound A, Compound B
Second reagent Cholesterol ester hydrolase, cholesterol oxidase, reagent for measuring hydrogen peroxide, compound B

キット53
第一試薬
化合物A、化合物B、アルブミン
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物B
Kit 53
First reagent Compound A, Compound B, Albumin second reagent Cholesterol ester hydrolase, Cholesterol oxidase, Reagent for measuring hydrogen peroxide, Compound B

キット54
第一試薬
化合物A
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物A
Kit 54
First reagent Compound A
Second reagent Cholesterol ester hydrolase, cholesterol oxidase, reagent for measuring hydrogen peroxide, compound A

キット55
第一試薬
化合物A
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物A、化合物B
Kit 55
First reagent Compound A
Second reagent Cholesterol ester hydrolase, cholesterol oxidase, reagent for measuring hydrogen peroxide, compound A, compound B

キット56
第一試薬
化合物A
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物A、化合物B、アルブミン
Kit 56
First reagent Compound A
Second reagent Cholesterol ester hydrolase, cholesterol oxidase, reagent for measuring hydrogen peroxide, compound A, compound B, albumin

キット57
第一試薬
化合物A、化合物B
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物A
Kit 57
First reagent Compound A, Compound B
Second reagent Cholesterol ester hydrolase, cholesterol oxidase, reagent for measuring hydrogen peroxide, compound A

キット58
第一試薬
化合物A、化合物B、アルブミン
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物A
Kit 58
First reagent Compound A, Compound B, Albumin second reagent Cholesterol ester hydrolase, Cholesterol oxidase, Reagent for measuring hydrogen peroxide, Compound A

キット59
第一試薬
化合物A、化合物B
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物A、化合物B
Kit 59
First reagent Compound A, Compound B
Second reagent Cholesterol ester hydrolase, cholesterol oxidase, reagent for measuring hydrogen peroxide, compound A, compound B

キット60
第一試薬
化合物A、化合物B、アルブミン
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物A、化合物B
Kit 60
First reagent Compound A, Compound B, Albumin second reagent Cholesterol ester hydrolase, Cholesterol oxidase, Reagent for hydrogen peroxide measurement, Compound A, Compound B

キット61
第一試薬
過酸化水素測定用試薬
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物A
Kit 61
First reagent Reagent for hydrogen peroxide measurement Second reagent Cholesterol ester hydrolase, cholesterol oxidase, Reagent for hydrogen peroxide measurement, Compound A

キット62
第一試薬
過酸化水素測定用試薬
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物A、化合物B
Kit 62
First reagent Reagent for hydrogen peroxide measurement Second reagent Cholesterol ester hydrolase, cholesterol oxidase, Reagent for hydrogen peroxide measurement, Compound A, Compound B

キット63
第一試薬
過酸化水素測定用試薬
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物A、化合物B、アルブミン
Kit 63
First reagent Reagent for hydrogen peroxide measurement Second reagent Cholesterol ester hydrolase, cholesterol oxidase, reagent for hydrogen peroxide measurement, Compound A, Compound B, Albumin

キット64
第一試薬
過酸化水素測定用試薬、化合物B
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物A
Kit 64
First reagent Reagent for hydrogen peroxide measurement, Compound B
Second reagent Cholesterol ester hydrolase, cholesterol oxidase, reagent for measuring hydrogen peroxide, compound A

キット65
第一試薬
過酸化水素測定用試薬、化合物B、アルブミン
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物A
Kit 65
First reagent Hydrogen peroxide measurement reagent, compound B, albumin second reagent cholesterol ester hydrolase, cholesterol oxidase, hydrogen peroxide measurement reagent, compound A

キット66
第一試薬
過酸化水素測定用試薬、化合物B
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物A、化合物B
Kit 66
First reagent Reagent for hydrogen peroxide measurement, Compound B
Second reagent Cholesterol ester hydrolase, cholesterol oxidase, reagent for measuring hydrogen peroxide, compound A, compound B

キット67
第一試薬
過酸化水素測定用試薬、化合物B、アルブミン
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物A、化合物B
Kit 67
First reagent Hydrogen peroxide measurement reagent, compound B, albumin second reagent cholesterol ester hydrolase, cholesterol oxidase, hydrogen peroxide measurement reagent, compound A, compound B

キット68
第一試薬
過酸化水素測定用試薬、化合物A
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬
Kit 68
First reagent Hydrogen peroxide measurement reagent, Compound A
Second reagent Cholesterol ester hydrolase, cholesterol oxidase, reagent for measuring hydrogen peroxide

キット69
第一試薬
過酸化水素測定用試薬、化合物A
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物B
Kit 69
First reagent Hydrogen peroxide measurement reagent, Compound A
Second reagent Cholesterol ester hydrolase, cholesterol oxidase, reagent for measuring hydrogen peroxide, compound B

キット70
第一試薬
過酸化水素測定用試薬、化合物A
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物B、アルブミン
Kit 70
First reagent Hydrogen peroxide measurement reagent, Compound A
Second reagent Cholesterol ester hydrolase, cholesterol oxidase, reagent for measuring hydrogen peroxide, compound B, albumin

キット71
第一試薬
過酸化水素測定用試薬、化合物A、化合物B
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬
Kit 71
First reagent Reagent for hydrogen peroxide measurement, Compound A, Compound B
Second reagent Cholesterol ester hydrolase, cholesterol oxidase, reagent for measuring hydrogen peroxide

キット72
第一試薬
過酸化水素測定用試薬、化合物A、化合物B、アルブミン
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬
Kit 72
First reagent Hydrogen peroxide measurement reagent, Compound A, Compound B, Albumin second reagent Cholesterol ester hydrolase, cholesterol oxidase, Hydrogen peroxide measurement reagent

キット73
第一試薬
過酸化水素測定用試薬、化合物A、化合物B
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物B
Kit 73
First reagent Reagent for hydrogen peroxide measurement, Compound A, Compound B
Second reagent Cholesterol ester hydrolase, cholesterol oxidase, reagent for measuring hydrogen peroxide, compound B

キット74
第一試薬
過酸化水素測定用試薬、化合物A、化合物B、アルブミン
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物B
Kit 74
First reagent Reagent for hydrogen peroxide measurement, Compound A, Compound B, Albumin second reagent Cholesterol ester hydrolase, Cholesterol oxidase, Reagent for hydrogen peroxide measurement, Compound B

キット75
第一試薬
過酸化水素測定用試薬、化合物A
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物A
Kit 75
First reagent Hydrogen peroxide measurement reagent, Compound A
Second reagent Cholesterol ester hydrolase, cholesterol oxidase, reagent for measuring hydrogen peroxide, compound A

キット76
第一試薬
過酸化水素測定用試薬、化合物A
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物A、化合物B
Kit 76
First reagent Hydrogen peroxide measurement reagent, Compound A
Second reagent Cholesterol ester hydrolase, cholesterol oxidase, reagent for measuring hydrogen peroxide, compound A, compound B

キット77
第一試薬
過酸化水素測定用試薬、化合物A
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物A、化合物B、アルブミン
Kit 77
First reagent Hydrogen peroxide measurement reagent, Compound A
Second reagent Cholesterol ester hydrolase, cholesterol oxidase, reagent for measuring hydrogen peroxide, compound A, compound B, albumin

キット78
第一試薬
過酸化水素測定用試薬、化合物A、化合物B
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物A
Kit 78
First reagent Reagent for hydrogen peroxide measurement, Compound A, Compound B
Second reagent Cholesterol ester hydrolase, cholesterol oxidase, reagent for measuring hydrogen peroxide, compound A

キット79
第一試薬
過酸化水素測定用試薬、化合物A、化合物B、アルブミン
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物A
Kit 79
First reagent Hydrogen peroxide measurement reagent, compound A, compound B, albumin second reagent cholesterol ester hydrolase, cholesterol oxidase, hydrogen peroxide measurement reagent, compound A

キット80
第一試薬
過酸化水素測定用試薬、化合物A、化合物B
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物A、化合物B
Kit 80
First reagent Reagent for hydrogen peroxide measurement, Compound A, Compound B
Second reagent Cholesterol ester hydrolase, cholesterol oxidase, reagent for measuring hydrogen peroxide, compound A, compound B

キット81
第一試薬
過酸化水素測定用試薬、化合物A、化合物B、アルブミン
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素、過酸化水素測定用試薬、化合物A、化合物B
Kit 81
First reagent Reagent for hydrogen peroxide measurement, Compound A, Compound B, Albumin second reagent Cholesterol ester hydrolase, cholesterol oxidase, Reagent for hydrogen peroxide measurement, Compound A, Compound B

キット82
第一試薬
酸化型補酵素
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、化合物A
Kit 82
First reagent Oxidized coenzyme second reagent Cholesterol ester hydrolase, cholesterol dehydrogenase, Compound A

キット83
第一試薬
酸化型補酵素
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、化合物A、化合物B
Kit 83
First reagent Oxidized coenzyme second reagent Cholesterol ester hydrolase, cholesterol dehydrogenase, Compound A, Compound B

キット84
第一試薬
酸化型補酵素
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、化合物A、化合物B、アルブミン
Kit 84
First reagent Oxidized coenzyme second reagent Cholesterol ester hydrolase, cholesterol dehydrogenase, Compound A, Compound B, Albumin

キット85
第一試薬
酸化型補酵素、化合物B
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、化合物A
Kit 85
First reagent: oxidized coenzyme, Compound B
Second reagent Cholesterol ester hydrolase, cholesterol dehydrogenase, Compound A

キット86
第一試薬
酸化型補酵素、化合物B、アルブミン
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、化合物A
Kit 86
First reagent Oxidized coenzyme, Compound B, Albumin second reagent Cholesterol ester hydrolase, Cholesterol dehydrogenase, Compound A

キット87
第一試薬
酸化型補酵素、化合物B
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、化合物A、化合物B
Kit 87
First reagent: oxidized coenzyme, Compound B
Second reagent Cholesterol ester hydrolase, cholesterol dehydrogenase, Compound A, Compound B

キット88
第一試薬
酸化型補酵素、化合物B、アルブミン
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、化合物A、化合物B
Kit 88
First reagent Oxidized coenzyme, Compound B, Albumin second reagent Cholesterol ester hydrolase, Cholesterol dehydrogenase, Compound A, Compound B

キット89
第一試薬
酸化型補酵素、化合物A
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素
Kit 89
First reagent Oxidized coenzyme, Compound A
Second reagent Cholesterol ester hydrolase, cholesterol dehydrogenase

キット90
第一試薬
酸化型補酵素、化合物A
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、化合物B
Kit 90
First reagent Oxidized coenzyme, Compound A
Second reagent Cholesterol ester hydrolase, cholesterol dehydrogenase, Compound B

キット91
第一試薬
酸化型補酵素、化合物A
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、化合物B、アルブミン
Kit 91
First reagent Oxidized coenzyme, Compound A
Second reagent Cholesterol ester hydrolase, cholesterol dehydrogenase, compound B, albumin

キット92
第一試薬
酸化型補酵素、化合物A、化合物B
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素
Kit 92
First reagent Oxidized coenzyme, Compound A, Compound B
Second reagent Cholesterol ester hydrolase, cholesterol dehydrogenase

キット93
第一試薬
酸化型補酵素、化合物A、化合物B、アルブミン
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素
Kit 93
First reagent Oxidized coenzyme, Compound A, Compound B, Albumin second reagent Cholesterol ester hydrolase, Cholesterol dehydrogenase

キット94
第一試薬
酸化型補酵素、化合物A、化合物B
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、化合物B
Kit 94
First reagent Oxidized coenzyme, Compound A, Compound B
Second reagent Cholesterol ester hydrolase, cholesterol dehydrogenase, Compound B

キット95
第一試薬
酸化型補酵素、化合物A、化合物B、アルブミン
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、化合物B
Kit 95
First reagent Oxidized coenzyme, Compound A, Compound B, Albumin second reagent Cholesterol ester hydrolase, Cholesterol dehydrogenase, Compound B

キット96
第一試薬
酸化型補酵素、化合物A
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、化合物A
Kit 96
First reagent Oxidized coenzyme, Compound A
Second reagent Cholesterol ester hydrolase, cholesterol dehydrogenase, Compound A

キット97
第一試薬
酸化型補酵素、化合物A
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、化合物A、化合物B
Kit 97
First reagent Oxidized coenzyme, Compound A
Second reagent Cholesterol ester hydrolase, cholesterol dehydrogenase, Compound A, Compound B

キット98
第一試薬
酸化型補酵素、化合物A
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、化合物A、化合物B、アルブミン
Kit 98
First reagent Oxidized coenzyme, Compound A
Second reagent Cholesterol ester hydrolase, cholesterol dehydrogenase, Compound A, Compound B, Albumin

キット99
第一試薬
酸化型補酵素、化合物A、化合物B
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、化合物A
Kit 99
First reagent Oxidized coenzyme, Compound A, Compound B
Second reagent Cholesterol ester hydrolase, cholesterol dehydrogenase, Compound A

キット100
第一試薬
酸化型補酵素、化合物A、化合物B、アルブミン
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、化合物A
Kit 100
First reagent Oxidized coenzyme, Compound A, Compound B, Albumin second reagent Cholesterol ester hydrolase, Cholesterol dehydrogenase, Compound A

キット101
第一試薬
酸化型補酵素、化合物A、化合物B
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、化合物A、化合物B
Kit 101
First reagent Oxidized coenzyme, Compound A, Compound B
Second reagent Cholesterol ester hydrolase, cholesterol dehydrogenase, Compound A, Compound B

キット102
第一試薬
酸化型補酵素、化合物A、化合物B、アルブミン
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、化合物A、化合物B
Kit 102
First reagent Oxidized coenzyme, Compound A, Compound B, Albumin second reagent Cholesterol ester hydrolase, Cholesterol dehydrogenase, Compound A, Compound B

キット103
第一試薬
酸化型補酵素、還元型補酵素測定用試薬
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、化合物A
Kit 103
First reagent Oxidized coenzyme, Reagent for measuring reduced coenzyme Second reagent Cholesterol ester hydrolase, cholesterol dehydrogenase, Compound A

キット104
第一試薬
酸化型補酵素、還元型補酵素測定用試薬
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物A、化合物B
Kit 104
First reagent: oxidized coenzyme, reagent for measuring reduced coenzyme second reagent: cholesterol ester hydrolase, cholesterol dehydrogenase, reagent for measuring reduced coenzyme, compound A, compound B

キット105
第一試薬
酸化型補酵素、還元型補酵素測定用試薬
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物A、化合物B、アルブミン
Kit 105
First reagent: oxidized coenzyme, reagent for measuring reduced coenzyme second reagent: cholesterol esterase, cholesterol dehydrogenase, reagent for measuring reduced coenzyme, compound A, compound B, albumin

キット106
第一試薬
酸化型補酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物B
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物A
Kit 106
First reagent: Oxidized coenzyme, Reagent for reducing coenzyme, Compound B
Second reagent Cholesterol ester hydrolase, cholesterol dehydrogenase, reagent for measuring reduced coenzyme, Compound A

キット107
第一試薬
酸化型補酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物B、アルブミン
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物A
Kit 107
First reagent: oxidized coenzyme, reagent for measuring reduced coenzyme, compound B, albumin second reagent, cholesterol ester hydrolase, cholesterol dehydrogenase, reagent for measuring reduced coenzyme, compound A

キット108
第一試薬
酸化型補酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物B
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物A、化合物B
Kit 108
First reagent: Oxidized coenzyme, Reagent for reducing coenzyme, Compound B
Second reagent Cholesterol ester hydrolase, cholesterol dehydrogenase, reagent for measuring reduced coenzyme, Compound A, Compound B

キット109
第一試薬
酸化型補酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物B、アルブミン
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物A、化合物B
Kit 109
First reagent: oxidized coenzyme, reagent for measuring reduced coenzyme, compound B, albumin second reagent, cholesterol ester hydrolase, cholesterol dehydrogenase, reagent for measuring reduced coenzyme, compound A, compound B

キット110
第一試薬
酸化型補酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物A
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素
Kit 110
First reagent Oxidized coenzyme, Reagent for reducing coenzyme, Compound A
Second reagent Cholesterol ester hydrolase, cholesterol dehydrogenase

キット111
第一試薬
酸化型補酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物A
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物B
Kit 111
First reagent Oxidized coenzyme, Reagent for reducing coenzyme, Compound A
Second reagent Cholesterol ester hydrolase, cholesterol dehydrogenase, reagent for measuring reduced coenzyme, Compound B

キット112
第一試薬
酸化型補酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物A
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物B、アルブミン
Kit 112
First reagent Oxidized coenzyme, Reagent for reducing coenzyme, Compound A
Second reagent Cholesterol ester hydrolase, cholesterol dehydrogenase, reagent for measuring reduced coenzyme, compound B, albumin

キット113
第一試薬
酸化型補酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物A、化合物B
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬
Kit 113
First reagent Oxidized coenzyme, Reducing coenzyme measuring reagent, Compound A, Compound B
Second reagent Cholesterol ester hydrolase, cholesterol dehydrogenase, reagent for measuring reduced coenzyme

キット114
第一試薬
酸化型補酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物A、化合物B、アルブミン
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬
Kit 114
First reagent Oxidized coenzyme, Reductive coenzyme measuring reagent, Compound A, Compound B, Albumin second reagent Cholesterol ester hydrolase, Cholesterol dehydrogenase, Reducing coenzyme measuring reagent

キット115
第一試薬
酸化型補酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物A、化合物B
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物B
Kit 115
First reagent Oxidized coenzyme, Reducing coenzyme measuring reagent, Compound A, Compound B
Second reagent Cholesterol ester hydrolase, cholesterol dehydrogenase, reagent for measuring reduced coenzyme, Compound B

キット116
第一試薬
酸化型補酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物A、化合物B、アルブミン
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物B
Kit 116
First reagent Oxidized coenzyme, Reductive coenzyme measuring reagent, Compound A, Compound B, Albumin second reagent Cholesterol ester hydrolase, Cholesterol dehydrogenase, Reducing coenzyme measuring reagent, Compound B

キット117
第一試薬
酸化型補酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物A
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、化合物B
Kit 117
First reagent Oxidized coenzyme, Reagent for reducing coenzyme, Compound A
Second reagent Cholesterol ester hydrolase, cholesterol dehydrogenase, Compound B

キット118
第一試薬
酸化型補酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物A
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物A、化合物B
Kit 118
First reagent Oxidized coenzyme, Reagent for reducing coenzyme, Compound A
Second reagent Cholesterol ester hydrolase, cholesterol dehydrogenase, reagent for measuring reduced coenzyme, Compound A, Compound B

キット119
第一試薬
酸化型補酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物A
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物A、化合物B、アルブミン
Kit 119
First reagent Oxidized coenzyme, Reagent for reducing coenzyme, Compound A
Second reagent Cholesterol ester hydrolase, cholesterol dehydrogenase, reagent for measuring reduced coenzyme, compound A, compound B, albumin

キット120
第一試薬
酸化型補酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物A、化合物B
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物A
Kit 120
First reagent Oxidized coenzyme, Reducing coenzyme measuring reagent, Compound A, Compound B
Second reagent Cholesterol ester hydrolase, cholesterol dehydrogenase, reagent for measuring reduced coenzyme, Compound A

キット121
第一試薬
酸化型補酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物A、化合物B、アルブミン
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物A
Kit 121
First reagent Oxidized coenzyme, Reductive coenzyme measuring reagent, Compound A, Compound B, Albumin second reagent Cholesterol ester hydrolase, Cholesterol dehydrogenase, Reducing coenzyme measuring reagent, Compound A

キット122
第一試薬
酸化型補酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物A、化合物B
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物A、化合物B
Kit 122
First reagent Oxidized coenzyme, Reducing coenzyme measuring reagent, Compound A, Compound B
Second reagent Cholesterol ester hydrolase, cholesterol dehydrogenase, reagent for measuring reduced coenzyme, Compound A, Compound B

キット123
第一試薬
酸化型補酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物A、化合物B、アルブミン
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物A、化合物B
Kit 123
First reagent: oxidized coenzyme, reagent for measuring reduced coenzyme, compound A, compound B, albumin second reagent: cholesterol ester hydrolase, cholesterol dehydrogenase, reagent for measuring reduced coenzyme, compound A, compound B

キット124
第一試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素
第二試薬
コレステロール脱水素酵素、化合物A
Kit 124
First reagent Oxidized coenzyme, Cholesterol ester hydrolase Second reagent Cholesterol dehydrogenase, Compound A

キット125
第一試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素
第二試薬
コレステロール脱水素酵素、化合物A、化合物B
Kit 125
First reagent Oxidized coenzyme, Cholesterol ester hydrolase Second reagent Cholesterol dehydrogenase, Compound A, Compound B

キット126
第一試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素
第二試薬
コレステロール脱水素酵素、化合物A、化合物B、アルブミン
Kit 126
First reagent Oxidized coenzyme, Cholesterol ester hydrolase Second reagent Cholesterol dehydrogenase, Compound A, Compound B, Albumin

キット127
第一試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素、化合物B
第二試薬
コレステロール脱水素酵素、化合物A
Kit 127
First reagent Oxidized coenzyme, cholesterol esterase, Compound B
Second reagent Cholesterol dehydrogenase, Compound A

キット128
第一試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素、化合物B、アルブミン
第二試薬
コレステロール脱水素酵素、化合物A
Kit 128
First reagent Oxidized coenzyme, cholesterol esterase, Compound B, Albumin second reagent Cholesterol dehydrogenase, Compound A

キット129
第一試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素、化合物B
第二試薬
コレステロール脱水素酵素、化合物A、化合物B
Kit 129
First reagent Oxidized coenzyme, cholesterol esterase, Compound B
Second reagent Cholesterol dehydrogenase, Compound A, Compound B

キット130
第一試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素、化合物B、アルブミン
第二試薬
コレステロール脱水素酵素、化合物A、化合物B
Kit 130
First reagent Oxidized coenzyme, cholesterol esterase, Compound B, Albumin second reagent Cholesterol dehydrogenase, Compound A, Compound B

キット131
第一試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素、化合物A
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素
Kit 131
First reagent Oxidized coenzyme, cholesterol esterase, Compound A
Second reagent Cholesterol ester hydrolase, cholesterol dehydrogenase

キット132
第一試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素、化合物A
第二試薬
コレステロール脱水素酵素、化合物B
Kit 132
First reagent Oxidized coenzyme, cholesterol esterase, Compound A
Second reagent Cholesterol dehydrogenase, Compound B

キット133
第一試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素、化合物A
第二試薬
コレステロール脱水素酵素、化合物B、アルブミン
Kit 133
First reagent Oxidized coenzyme, cholesterol esterase, Compound A
Second reagent Cholesterol dehydrogenase, Compound B, Albumin

キット134
第一試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素、化合物A、化合物B
第二試薬
コレステロール脱水素酵素
Kit 134
First reagent Oxidized coenzyme, cholesterol esterase, Compound A, Compound B
Second reagent cholesterol dehydrogenase

キット135
第一試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素、化合物A、化合物B、アルブミン
第二試薬
コレステロール脱水素酵素
Kit 135
First reagent Oxidized coenzyme, Cholesterol ester hydrolase, Compound A, Compound B, Albumin second reagent Cholesterol dehydrogenase

キット136
第一試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素、化合物A、化合物B
第二試薬
コレステロール脱水素酵素、化合物B
Kit 136
First reagent Oxidized coenzyme, cholesterol esterase, Compound A, Compound B
Second reagent Cholesterol dehydrogenase, Compound B

キット137
第一試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素、化合物A、化合物B、アルブミン
第二試薬
コレステロール脱水素酵素、化合物B
Kit 137
First reagent Oxidized coenzyme, cholesterol esterase, Compound A, Compound B, Albumin second reagent Cholesterol dehydrogenase, Compound B

キット138
第一試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素、化合物A
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、化合物A
Kit 138
First reagent Oxidized coenzyme, cholesterol esterase, Compound A
Second reagent Cholesterol ester hydrolase, cholesterol dehydrogenase, Compound A

キット139
第一試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素、化合物A
第二試薬
コレステロール脱水素酵素、化合物A、化合物B
Kit 139
First reagent Oxidized coenzyme, cholesterol esterase, Compound A
Second reagent Cholesterol dehydrogenase, Compound A, Compound B

キット140
第一試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素、化合物A
第二試薬
コレステロール脱水素酵素、化合物A、化合物B、アルブミン
Kit 140
First reagent Oxidized coenzyme, cholesterol esterase, Compound A
Second reagent Cholesterol dehydrogenase, Compound A, Compound B, Albumin

キット141
第一試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素、化合物A、化合物B
第二試薬
コレステロール脱水素酵素、化合物A
Kit 141
First reagent Oxidized coenzyme, cholesterol esterase, Compound A, Compound B
Second reagent Cholesterol dehydrogenase, Compound A

キット142
第一試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素、化合物A、化合物B、アルブミン
第二試薬
コレステロール脱水素酵素、化合物A
Kit 142
First reagent Oxidized coenzyme, cholesterol esterase, Compound A, Compound B, Albumin second reagent Cholesterol dehydrogenase, Compound A

キット143
第一試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素、化合物A、化合物B
第二試薬
コレステロール脱水素酵素、化合物A、化合物B
Kit 143
First reagent Oxidized coenzyme, cholesterol esterase, Compound A, Compound B
Second reagent Cholesterol dehydrogenase, Compound A, Compound B

キット144
第一試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素、化合物A、化合物B、アルブミン
第二試薬
コレステロール脱水素酵素、化合物A、化合物B
Kit 144
First reagent Oxidized coenzyme, cholesterol esterase, Compound A, Compound B, Albumin second reagent Cholesterol dehydrogenase, Compound A, Compound B

キット145
第一試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素、還元型補酵素測定用試薬
第二試薬
コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物A
Kit 145
First reagent: oxidized coenzyme, cholesterol esterase, reagent for measuring reduced coenzyme second reagent: cholesterol dehydrogenase, reagent for measuring reduced coenzyme, compound A

キット146
第一試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素、還元型補酵素測定用試薬
第二試薬
コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物A、化合物B
Kit 146
First reagent: oxidized coenzyme, cholesterol esterase, reagent for measuring reduced coenzyme Second reagent: cholesterol dehydrogenase, reagent for measuring reduced coenzyme, compound A, compound B

キット147
第一試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素、還元型補酵素測定用試薬
第二試薬
コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物A、化合物B、アルブミン
Kit 147
First reagent: oxidized coenzyme, cholesterol esterase, reagent for measuring reduced coenzyme Second reagent: cholesterol dehydrogenase, reagent for measuring reduced coenzyme, compound A, compound B, albumin

キット148
第一試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物B
第二試薬
コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物A
Kit 148
First reagent Oxidized coenzyme, cholesterol esterase, reagent for measuring reduced coenzyme, Compound B
Second reagent Cholesterol dehydrogenase, Reductive coenzyme measuring reagent, Compound A

キット149
第一試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物B、アルブミン
第二試薬
コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物A
Kit 149
First reagent Oxidized coenzyme, cholesterol esterase, Reductive coenzyme measuring reagent, Compound B, Albumin second reagent Cholesterol dehydrogenase, Reducing coenzyme measuring reagent, Compound A

キット150
第一試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物B
第二試薬
コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物A、化合物B
Kit 150
First reagent Oxidized coenzyme, cholesterol esterase, reagent for measuring reduced coenzyme, Compound B
Second reagent Cholesterol dehydrogenase, Reductive coenzyme measurement reagent, Compound A, Compound B

キット151
第一試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物B、アルブミン
第二試薬
コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物A、化合物B
Kit 151
First reagent: oxidized coenzyme, cholesterol esterase, reduced coenzyme measuring reagent, compound B, albumin second reagent, cholesterol dehydrogenase, reduced coenzyme measuring reagent, compound A, compound B

キット152
第一試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物A
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬
Kit 152
First reagent: oxidized coenzyme, cholesterol esterase, reagent for measuring reduced coenzyme, compound A
Second reagent Cholesterol ester hydrolase, cholesterol dehydrogenase, reagent for measuring reduced coenzyme

キット153
第一試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物A
第二試薬
コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物B
Kit 153
First reagent: oxidized coenzyme, cholesterol esterase, reagent for measuring reduced coenzyme, compound A
Second reagent Cholesterol dehydrogenase, Reductive coenzyme measuring reagent, Compound B

キット154
第一試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物A
第二試薬
コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物B、アルブミン
Kit 154
First reagent: oxidized coenzyme, cholesterol esterase, reagent for measuring reduced coenzyme, compound A
Second reagent Cholesterol dehydrogenase, Reductive coenzyme measurement reagent, Compound B, Albumin

キット155
第一試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物A、化合物B
第二試薬
コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬
Kit 155
First reagent Oxidized coenzyme, cholesterol ester hydrolase, reagent for measuring reduced coenzyme, Compound A, Compound B
Second reagent Reagent for cholesterol dehydrogenase and reduced coenzyme

キット156
第一試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物A、化合物B、アルブミン
第二試薬
コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬
Kit 156
First reagent: oxidized coenzyme, cholesterol esterase, reagent for measuring reduced coenzyme, compound A, compound B, second reagent for albumin cholesterol dehydrogenase, reagent for measuring reduced coenzyme

キット157
第一試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物A、化合物B
第二試薬
コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物B
Kit 157
First reagent Oxidized coenzyme, cholesterol ester hydrolase, reagent for measuring reduced coenzyme, Compound A, Compound B
Second reagent Cholesterol dehydrogenase, Reductive coenzyme measuring reagent, Compound B

キット158
第一試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物A、化合物B、アルブミン
第二試薬
コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物B
Kit 158
First reagent Oxidized coenzyme, cholesterol esterase, Reductive coenzyme measuring reagent, Compound A, Compound B, Albumin second reagent Cholesterol dehydrogenase, Reducing coenzyme measuring reagent, Compound B

キット159
第一試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物A
第二試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物A
Kit 159
First reagent: oxidized coenzyme, cholesterol esterase, reagent for measuring reduced coenzyme, compound A
Second reagent Cholesterol ester hydrolase, cholesterol dehydrogenase, reagent for measuring reduced coenzyme, Compound A

キット160
第一試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物A
第二試薬
コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物A、化合物B
Kit 160
First reagent: oxidized coenzyme, cholesterol esterase, reagent for measuring reduced coenzyme, compound A
Second reagent Cholesterol dehydrogenase, Reductive coenzyme measurement reagent, Compound A, Compound B

キット161
第一試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物A
第二試薬
コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物A、化合物B、アルブミン
Kit 161
First reagent: oxidized coenzyme, cholesterol esterase, reagent for measuring reduced coenzyme, compound A
Second reagent Cholesterol dehydrogenase, Reductive coenzyme measurement reagent, Compound A, Compound B, Albumin

キット162
第一試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物A、化合物B
第二試薬
コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物A
Kit 162
First reagent Oxidized coenzyme, cholesterol ester hydrolase, reagent for measuring reduced coenzyme, Compound A, Compound B
Second reagent Cholesterol dehydrogenase, Reductive coenzyme measuring reagent, Compound A

キット163
第一試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物A、化合物B、アルブミン
第二試薬
コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物A
Kit 163
First reagent: oxidized coenzyme, cholesterol esterase, reduced coenzyme measuring reagent, compound A, compound B, albumin second reagent cholesterol dehydrogenase, reduced coenzyme measuring reagent, compound A

キット164
第一試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物A、化合物B
第二試薬
コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物A、化合物B
Kit 164
First reagent Oxidized coenzyme, cholesterol ester hydrolase, reagent for measuring reduced coenzyme, Compound A, Compound B
Second reagent Cholesterol dehydrogenase, Reductive coenzyme measurement reagent, Compound A, Compound B

キット165
第一試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物A、化合物B、アルブミン
第二試薬
コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物A、化合物B
Kit 165
First reagent Oxidized coenzyme, cholesterol esterase, Reductive coenzyme measuring reagent, Compound A, Compound B, Albumin second reagent Cholesterol dehydrogenase, Reducing coenzyme measuring reagent, Compound A, Compound B

キット166
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素
第二試薬
酸化型補酵素、コレステロール脱水素酵素、化合物A
Kit 166
First reagent Cholesterol ester hydrolase second reagent Oxidized coenzyme, cholesterol dehydrogenase, Compound A

キット167
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、
第二試薬
酸化型補酵素、コレステロール脱水素酵素、化合物A、化合物B
Kit 167
First reagent cholesterol esterase,
Second Reagent Oxidized Coenzyme, Cholesterol Dehydrogenase, Compound A, Compound B

キット168
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、
第二試薬
酸化型補酵素、コレステロール脱水素酵素、化合物A、化合物B、アルブミン
Kit 168
First reagent cholesterol esterase,
Second Reagent Oxidized Coenzyme, Cholesterol Dehydrogenase, Compound A, Compound B, Albumin

キット169
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、化合物B
第二試薬
酸化型補酵素、コレステロール脱水素酵素、化合物A
Kit 169
First reagent Cholesterol ester hydrolase, Compound B
Second reagent Oxidized coenzyme, cholesterol dehydrogenase, Compound A

キット170
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、化合物B、アルブミン
第二試薬
酸化型補酵素、コレステロール脱水素酵素、化合物A
Kit 170
First reagent Cholesterol ester hydrolase, Compound B, Albumin second reagent Oxidized coenzyme, Cholesterol dehydrogenase, Compound A

キット171
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、化合物B
第二試薬
酸化型補酵素、コレステロール脱水素酵素、化合物A、化合物B
Kit 171
First reagent Cholesterol ester hydrolase, Compound B
Second Reagent Oxidized Coenzyme, Cholesterol Dehydrogenase, Compound A, Compound B

キット172
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、化合物B、アルブミン
第二試薬
酸化型補酵素、コレステロール脱水素酵素、化合物A、化合物B
Kit 172
First reagent Cholesterol ester hydrolase, Compound B, Albumin second reagent Oxidized coenzyme, Cholesterol dehydrogenase, Compound A, Compound B

キット173
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、化合物A
第二試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素
Kit 173
First reagent Cholesterol ester hydrolase, Compound A
Second reagent Oxidized coenzyme, cholesterol esterase, cholesterol dehydrogenase

キット174
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、化合物A
第二試薬
酸化型補酵素、コレステロール脱水素酵素、化合物B
Kit 174
First reagent Cholesterol ester hydrolase, Compound A
Second reagent: oxidized coenzyme, cholesterol dehydrogenase, compound B

キット175
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、化合物A
第二試薬
酸化型補酵素、コレステロール脱水素酵素、化合物B、アルブミン
Kit 175
First reagent Cholesterol ester hydrolase, Compound A
Second reagent Oxidized coenzyme, cholesterol dehydrogenase, compound B, albumin

キット176
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、化合物A、化合物B
第二試薬
酸化型補酵素、コレステロール脱水素酵素
Kit 176
First reagent Cholesterol ester hydrolase, Compound A, Compound B
Second reagent: oxidized coenzyme, cholesterol dehydrogenase

キット177
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、化合物A、化合物B、アルブミン
第二試薬
酸化型補酵素、コレステロール脱水素酵素、
Kit 177
First reagent Cholesterol ester hydrolase, Compound A, Compound B, Albumin second reagent Oxidized coenzyme, Cholesterol dehydrogenase,

キット178
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、化合物A、化合物B
第二試薬
酸化型補酵素、コレステロール脱水素酵素、化合物B
Kit 178
First reagent Cholesterol ester hydrolase, Compound A, Compound B
Second reagent: oxidized coenzyme, cholesterol dehydrogenase, compound B

キット179
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、化合物A、化合物B、アルブミン
第二試薬
酸化型補酵素、コレステロール脱水素酵素、化合物B
Kit 179
First reagent Cholesterol ester hydrolase, Compound A, Compound B, Albumin second reagent Oxidized coenzyme, Cholesterol dehydrogenase, Compound B

キット180
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、化合物A
第二試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、化合物A
Kit 180
First reagent Cholesterol ester hydrolase, Compound A
Second reagent: oxidized coenzyme, cholesterol esterase, cholesterol dehydrogenase, compound A

キット181
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、化合物A
第二試薬
酸化型補酵素、コレステロール脱水素酵素、化合物A、化合物B
Kit 181
First reagent Cholesterol ester hydrolase, Compound A
Second Reagent Oxidized Coenzyme, Cholesterol Dehydrogenase, Compound A, Compound B

キット182
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、化合物A
第二試薬
酸化型補酵素、コレステロール脱水素酵素、化合物A、化合物B、アルブミン
Kit 182
First reagent Cholesterol ester hydrolase, Compound A
Second Reagent Oxidized Coenzyme, Cholesterol Dehydrogenase, Compound A, Compound B, Albumin

キット183
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、化合物A、化合物B
第二試薬
酸化型補酵素、コレステロール脱水素酵素、化合物A
Kit 183
First reagent Cholesterol ester hydrolase, Compound A, Compound B
Second reagent Oxidized coenzyme, cholesterol dehydrogenase, Compound A

キット184
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、化合物A、化合物B、アルブミン
第二試薬
酸化型補酵素、コレステロール脱水素酵素、化合物A
Kit 184
First reagent Cholesterol ester hydrolase, Compound A, Compound B, Albumin second reagent Oxidized coenzyme, Cholesterol dehydrogenase, Compound A

キット185
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、化合物A、化合物B
第二試薬
酸化型補酵素、コレステロール脱水素酵素、化合物A、化合物B
Kit 185
First reagent Cholesterol ester hydrolase, Compound A, Compound B
Second Reagent Oxidized Coenzyme, Cholesterol Dehydrogenase, Compound A, Compound B

キット186
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、化合物A、化合物B、アルブミン
第二試薬
酸化型補酵素、コレステロール脱水素酵素、化合物A、化合物B
Kit 186
First reagent Cholesterol ester hydrolase, Compound A, Compound B, Albumin second reagent Oxidized coenzyme, Cholesterol dehydrogenase, Compound A, Compound B

キット187
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、還元型補酵素測定用試薬
第二試薬
酸化型補酵素、コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物A
Kit 187
First reagent Cholesterol ester hydrolase, Reagent for reducing coenzyme Second reagent Oxidized coenzyme, cholesterol dehydrogenase, Reagent for measuring reduced coenzyme, Compound A

キット188
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、還元型補酵素測定用試薬
第二試薬
酸化型補酵素、コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物A、化合物B
Kit 188
First reagent Cholesterol ester hydrolase, Reagent for reducing coenzyme Second reagent Oxidized coenzyme, cholesterol dehydrogenase, Reagent for measuring reduced coenzyme, Compound A, Compound B

キット189
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、還元型補酵素測定用試薬
第二試薬
酸化型補酵素、コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物A、化合物B、アルブミン
Kit 189
First reagent Cholesterol ester hydrolase, Reagent for reducing coenzyme Second reagent Oxidized coenzyme, cholesterol dehydrogenase, Reagent for measuring reduced coenzyme, Compound A, Compound B, Albumin

キット190
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物B
第二試薬
酸化型補酵素、コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物A
Kit 190
First reagent Cholesterol ester hydrolase, Reductive coenzyme measurement reagent, Compound B
Second reagent Oxidized coenzyme, cholesterol dehydrogenase, reagent for measuring reduced coenzyme, Compound A

キット191
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物B、アルブミン
第二試薬
酸化型補酵素、コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物A
Kit 191
First reagent Cholesterol ester hydrolase, reagent for measuring reduced coenzyme, compound B, albumin second reagent Oxidized coenzyme, cholesterol dehydrogenase, reagent for measuring reduced coenzyme, compound A

キット192
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物B
第二試薬
酸化型補酵素、コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物A、化合物B
Kit 192
First reagent Cholesterol ester hydrolase, Reductive coenzyme measurement reagent, Compound B
Second reagent Oxidized coenzyme, cholesterol dehydrogenase, reagent for measuring reduced coenzyme, Compound A, Compound B

キット193
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物B、アルブミン
第二試薬
酸化型補酵素、コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物A、化合物B
Kit 193
First reagent Cholesterol ester hydrolase, Reductive coenzyme measuring reagent, Compound B, Albumin second reagent Oxidized coenzyme, Cholesterol dehydrogenase, Reductive coenzyme measuring reagent, Compound A, Compound B

キット194
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物A
第二試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬
Kit 194
First reagent Cholesterol ester hydrolase, Reductive coenzyme measuring reagent, Compound A
Second reagent Oxidized coenzyme, cholesterol ester hydrolase, cholesterol dehydrogenase, reagent for measuring reduced coenzyme

キット195
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物A
第二試薬
酸化型補酵素、コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物B
Kit 195
First reagent Cholesterol ester hydrolase, Reductive coenzyme measuring reagent, Compound A
Second reagent Oxidized coenzyme, cholesterol dehydrogenase, reagent for measuring reduced coenzyme, Compound B

キット196
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物A
第二試薬
酸化型補酵素、コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物B、アルブミン
Kit 196
First reagent Cholesterol ester hydrolase, Reductive coenzyme measuring reagent, Compound A
Second reagent: oxidized coenzyme, cholesterol dehydrogenase, reagent for measuring reduced coenzyme, compound B, albumin

キット197
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物A、化合物B
第二試薬
酸化型補酵素、コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬
Kit 197
First reagent Cholesterol ester hydrolase, Reductive coenzyme measuring reagent, Compound A, Compound B
Second reagent Reagent for measuring oxidized coenzyme, cholesterol dehydrogenase, reduced coenzyme

キット198
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物A、化合物B、アルブミン
第二試薬
酸化型補酵素、コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬
Kit 198
First reagent Cholesterol ester hydrolase, Reductive coenzyme measuring reagent, Compound A, Compound B, Albumin second reagent Oxidized coenzyme, Cholesterol dehydrogenase, Reductive coenzyme measuring reagent

キット199
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物A、化合物B
第二試薬
酸化型補酵素、コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物B
Kit 199
First reagent Cholesterol ester hydrolase, Reductive coenzyme measuring reagent, Compound A, Compound B
Second reagent Oxidized coenzyme, cholesterol dehydrogenase, reagent for measuring reduced coenzyme, Compound B

キット200
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物A、化合物B、アルブミン
第二試薬
酸化型補酵素、コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物B
Kit 200
First reagent Cholesterol ester hydrolase, Reductive coenzyme measuring reagent, Compound A, Compound B, Albumin second reagent Oxidized coenzyme, Cholesterol dehydrogenase, Reductive coenzyme measuring reagent, Compound B

キット201
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物A
第二試薬
酸化型補酵素、コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物A
Kit 201
First reagent Cholesterol ester hydrolase, Reductive coenzyme measuring reagent, Compound A
Second reagent: oxidized coenzyme, cholesterol esterase, cholesterol dehydrogenase, reagent for measuring reduced coenzyme, compound A

キット202
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物A
第二試薬
酸化型補酵素、コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物A、化合物B
Kit 202
First reagent Cholesterol ester hydrolase, Reductive coenzyme measuring reagent, Compound A
Second reagent Oxidized coenzyme, cholesterol dehydrogenase, reagent for measuring reduced coenzyme, Compound A, Compound B

キット203
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物A
第二試薬
酸化型補酵素、コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物A、化合物B、アルブミン
Kit 203
First reagent Cholesterol ester hydrolase, Reductive coenzyme measuring reagent, Compound A
Second reagent: oxidized coenzyme, cholesterol dehydrogenase, reagent for measuring reduced coenzyme, compound A, compound B, albumin

キット204
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物A、化合物B
第二試薬
酸化型補酵素、コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物A
Kit 204
First reagent Cholesterol ester hydrolase, Reductive coenzyme measuring reagent, Compound A, Compound B
Second reagent Oxidized coenzyme, cholesterol dehydrogenase, reagent for measuring reduced coenzyme, Compound A

キット205
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物A、化合物B、アルブミン
第二試薬
酸化型補酵素、コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物A
Kit 205
First reagent Cholesterol ester hydrolase, Reductive coenzyme measuring reagent, Compound A, Compound B, Albumin second reagent Oxidized coenzyme, Cholesterol dehydrogenase, Reductive coenzyme measuring reagent, Compound A

キット206
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物A、化合物B
第二試薬
酸化型補酵素、コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物A、化合物B
Kit 206
First reagent Cholesterol ester hydrolase, Reductive coenzyme measuring reagent, Compound A, Compound B
Second reagent Oxidized coenzyme, cholesterol dehydrogenase, reagent for measuring reduced coenzyme, Compound A, Compound B

キット207
第一試薬
コレステロールエステル加水分解酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物A、化合物B、アルブミン
第二試薬
酸化型補酵素、コレステロール脱水素酵素、還元型補酵素測定用試薬、化合物A、化合物B
Kit 207
First reagent Cholesterol ester hydrolase, reagent for measuring reduced coenzyme, compound A, compound B, albumin second reagent Oxidized coenzyme, cholesterol dehydrogenase, reagent for measuring reduced coenzyme, compound A, compound B

本発明のHDLコレステロール測定用キットにおいては、前述の本発明のHDLコレステロールの測定方法において挙げられたコレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素、コレステロール脱水素酵素、アルキルアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物、ポリオキシエチレンアルキルアミンサルフェート、ポリオキシエチレンベンジル−アルキル四級アンモニウム塩、ポリオキシエチレン酸アミド、アルキルアミンオキシド、アルキルプロピレンジアミン誘導体、ポリアニオン、胆汁酸誘導体、エチレンジアミンテトラポリオキシアルキレン、ポリオキシエチレンアルキルアミン、ポリオキシエチレンアルケニルアミン、アルブミン、過酸化水素測定用試薬、酸化型補酵素、還元型補酵素測定用試薬を用いることができる。  In the kit for measuring HDL cholesterol of the present invention, the cholesterol ester hydrolase, cholesterol oxidase, cholesterol dehydrogenase, alkylamine polyoxyethylene polyoxypropylene condensate mentioned in the above-mentioned method for measuring HDL cholesterol of the present invention , Polyoxyethylene alkylamine sulfate, polyoxyethylenebenzyl-alkyl quaternary ammonium salt, polyoxyethylene acid amide, alkylamine oxide, alkylpropylenediamine derivative, polyanion, bile acid derivative, ethylenediaminetetrapolyoxyalkylene, polyoxyethylenealkyl Using amine, polyoxyethylene alkenylamine, albumin, hydrogen peroxide measuring reagent, oxidized coenzyme, reducing coenzyme measuring reagent It is possible.

本発明のHDLコレステロール測定用試薬および測定用キットには、必要に応じて、水性媒体、安定化剤、防腐剤、影響物質消去剤、反応促進剤等が含有されてもよい。水性媒体としては、例えば前述の水性媒体等が挙げられる。安定化剤としては、例えばエチレンジアミン四酢酸(EDTA)、シュークロース、塩化カルシウム等が挙げられる。防腐剤としては、例えばアジ化ナトリウム、抗生物質等が挙げられる。影響物質消去剤としては、例えばアスコルビン酸の影響を消去するためのアスコルビン酸オキシダーゼ等が挙げられる。反応促進剤としては、例えばコリパーゼ、ホスホリパーゼ等の酵素、硫酸ナトリウム、塩化ナトリウム等の塩類等が挙げられる。  The HDL cholesterol measurement reagent and measurement kit of the present invention may contain an aqueous medium, a stabilizer, a preservative, an influencing substance erasing agent, a reaction accelerator and the like, if necessary. As an aqueous medium, the above-mentioned aqueous medium etc. are mentioned, for example. Examples of the stabilizer include ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA), sucrose, calcium chloride and the like. Examples of the preservative include sodium azide and antibiotics. Examples of the influence substance eliminating agent include ascorbate oxidase for eliminating the influence of ascorbic acid. Examples of the reaction accelerator include enzymes such as colipase and phospholipase, and salts such as sodium sulfate and sodium chloride.

本発明のHDLコレステロール測定用試薬および測定用キットは、凍結乾燥された状態でも、水性媒体に溶解された状態でもよい。凍結乾燥された状態の試薬を用いて検体中のHDLコレステロールを測定する場合には、当該試薬は水性媒体に溶解して使用される。
本発明のHDLコレステロール測定用試薬および測定用キットにおけるコレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素、コレステロール脱水素酵素の含量としては、水性媒体で溶解された状態での濃度が0.01〜1200U/mLとなる含量が好ましく、0.02〜600U/mLとなる含量がより好ましい。本発明のHDLコレステロール測定用試薬および測定用キットにおけるアルキルアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物、ポリオキシエチレンアルキルアミンサルフェート、ポリオキシエチレンベンジル−アルキル四級アンモニウム塩、ポリオキシエチレン酸アミド、アルキルアミンオキシド、アルキルプロピレンジアミン誘導体の含量としては、水性媒体で溶解された状態での濃度が0.0001〜3%となる含量が好ましく、0.001〜0.3%となる含量がより好ましい。本発明のHDLコレステロール測定用試薬および測定用キットにおけるポリアニオンの含量としては、水性媒体で溶解された状態での濃度が0.001〜30%となる含量が好ましく、0.01〜3%となる含量がより好ましい。
The reagent for HDL cholesterol measurement and the measurement kit of the present invention may be lyophilized or dissolved in an aqueous medium. When measuring HDL cholesterol in a specimen using a lyophilized reagent, the reagent is used after being dissolved in an aqueous medium.
The content of cholesterol ester hydrolase, cholesterol oxidase and cholesterol dehydrogenase in the reagent for measuring HDL cholesterol and the kit for measurement of the present invention is 0.01 to 1200 U / mL when dissolved in an aqueous medium. A content of 0.02 to 600 U / mL is more preferable. Alkylamine polyoxyethylene polyoxypropylene condensate, polyoxyethylene alkylamine sulfate, polyoxyethylene benzyl-alkyl quaternary ammonium salt, polyoxyethylene acid amide, alkylamine in HDL cholesterol measurement reagent and measurement kit of the present invention The content of the oxide and alkylpropylenediamine derivative is preferably such that the concentration in a state dissolved in an aqueous medium is 0.0001 to 3%, and more preferably 0.001 to 0.3%. The polyanion content in the reagent for measuring HDL cholesterol and the kit for measurement of the present invention is preferably such that the concentration in a state dissolved in an aqueous medium is 0.001 to 30%, and is 0.01 to 3%. The content is more preferable.

本発明のHDLコレステロール測定用試薬および測定用キットにおける胆汁酸誘導体の含量としては、水性媒体で溶解された状態での濃度が0.001〜30%となる含量が好ましく、0.01〜3%となる含量がより好ましい。
本発明のHDLコレステロール測定用試薬および測定用キットにおけるエチレンジアミンテトラポリオキシアルキレンの含量としては、水性媒体で溶解された状態での濃度が0.001〜30%となる含量が好ましく、0.01〜3%となる含量がより好ましい。
The content of the bile acid derivative in the reagent for measuring HDL cholesterol and the kit for measurement of the present invention is preferably such that the concentration in a state dissolved in an aqueous medium is 0.001 to 30%, 0.01 to 3% The content is more preferable.
The content of ethylenediaminetetrapolyoxyalkylene in the reagent for measuring HDL cholesterol and the kit for measurement of the present invention is preferably such that the concentration in a state dissolved in an aqueous medium is 0.001 to 30%, 0.01 to A content of 3% is more preferable.

本発明のHDLコレステロール測定用試薬および測定用キットにおけるポリオキシアルキルアミンまたはポリオキシエチレンアルケニルアミンの含量としては、水性媒体で溶解された状態での濃度が0.0001〜3%となる含量が好ましく、0.001〜0.3%となる含量がより好ましい。
本発明のHDLコレステロール測定用試薬および測定用キットにおけるアルブミンの含量としては、水性媒体で溶解された状態での濃度が0.001〜30%となる含量が好ましく、0.01〜3%となる含量がより好ましい。
The content of polyoxyalkylamine or polyoxyethylene alkenylamine in the HDL cholesterol measurement reagent and measurement kit of the present invention is preferably such that the concentration when dissolved in an aqueous medium is 0.0001 to 3%. A content of 0.001 to 0.3% is more preferable.
The content of albumin in the reagent for measuring HDL cholesterol and the kit for measurement of the present invention is preferably such that the concentration in a state dissolved in an aqueous medium is 0.001 to 30%, and is 0.01 to 3%. The content is more preferable.

以下、実施例により本発明をより詳細に説明するが、これらは本発明の範囲を何ら限定するものではない。尚、本実施例においては、下記メーカーの試薬および酵素を使用した。
HEPES(BDH Laboratory社製)、EMSE(ダイトーケミックス社製)、デキストラン硫酸ナトリウム(分子量50万)(ファルマシア社製)、ウシ血清アルブミン(BSA;プロライアント社製)、4−アミノアンチピリン(埼京化成社製)、ペルオキシダーゼ(東洋紡績社製)、COO321(コレステロール酸化酵素;東洋紡績社製)、CHODI(コレステロール酸化酵素;天野エンザイム社製)、CHOD協和(コレステロール酸化酵素;協和醗酵社製)、LPL311(コレステロールエステル加水分解酵素;東洋紡績社製)、LPL6(コレステロールエステル加水分解酵素;天野エンザイム社製)、43kDaエステラーゼ(コレステロールエステル加水分解酵素;天野エンザイム社製)、BLAUNON SAP3010、BLAUNON SAP3004(いずれも牛脂アミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物;青木油脂社製)、C16EO30PO10、C16EO30PO20、C16EO40PO10、C16EO20PO10(いずれもセチルアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物;日本油脂社製)、ビスノールSK(ポリオキシエチレンベンジル−アルキル四級アンモニウム塩;一方社油脂社製)、ミグノールPA−30(ポリオキシエチレンアルキルアミンサルフェート;一方社油脂社製)、ニッコールTAMDS15(ポリオキシエチレンステアリン酸アミド;日光ケミカルズ社製)、ナイミッドMT−215(ポリオキシエチレン酸アミド;日本油脂社製)、BLAUNON DT03、BLAUNON DT15(いずれもアルキルプロピレンジアミン誘導体;青木油脂社製)、ユニセーフA−LM(アルキルジメチルアミンオキシド;日本油脂社製)、ユニセーフA−LY(ポリオキシエチレンヤシ油アルキルジメチルアミンオキシド;日本油脂社製)、アスファゾール#10(ポリオキシエチレン牛脂プロピレンジアミン;日本油脂社製)、エチレンジアミンPO52EO60(エチレンジアミンテトラポリオキシアルキレン;日本油脂社製)、アデカプルロニックTR704(エチレンジアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物;旭電化社製)、ナイミーンL207(ポリオキシエチレンドデシルアミン;日本油脂社製)、コール酸ナトリウム(陰イオン性胆汁酸誘導体;ACROS社製)、CHAPS(両性胆汁酸誘導体;同仁化学社製)、BIGCHAP(非イオン性胆汁酸誘導体;同仁化学社製)。
EXAMPLES Hereinafter, although an Example demonstrates this invention in detail, these do not limit the scope of the present invention at all. In this example, reagents and enzymes from the following manufacturers were used.
HEPES (manufactured by BDH Laboratory), EMSE (manufactured by Daito Chemix), sodium dextran sulfate (molecular weight 500,000) (manufactured by Pharmacia), bovine serum albumin (BSA; manufactured by Proliant), 4-aminoantipyrine (manufactured by Saikyo Chemical Co., Ltd.) ), Peroxidase (manufactured by Toyobo), COO321 (cholesterol oxidase; manufactured by Toyobo), CHODI (cholesterol oxidase; manufactured by Amano Enzyme), CHOD Kyowa (cholesterol oxidase; manufactured by Kyowa Hakko), LPL311 (cholesterol) manufactured by Toyobo Co., Ltd.), LPL6 (cholesterol esterase; esterase manufactured by Amano enzyme Inc.), 43 kDa esterase (cholesterol esterase; manufactured by Amano enzyme Inc.), BLAUNO SAP3010, BLAUNON SAP3004 (both tallow amine polyoxyethylene polyoxypropylene condensate, manufactured by Aoki Yushi), C16EO30PO10, C16EO30PO20, C16EO40PO10, C16EO20PO10 ( both cetyl amine polyoxyethylene polyoxypropylene condensate, manufactured by NOF Corporation) , Bisnol SK (polyoxyethylene benzyl-alkyl quaternary ammonium salt; manufactured by Yushi Co., Ltd.), Mignol PA-30 (polyoxyethylene alkylamine sulfate; manufactured by Yushi Co., Ltd.), Nikkor TAMDS15 (polyoxyethylene stearamide) ; Nikko Chemicals), Nymid MT-215 (polyoxyethylene acid amide; manufactured by NOF Corporation), BLAUNON DT03, BLA UNON DT15 (all alkylpropylenediamine derivatives; manufactured by Aoki Yushi Co., Ltd.), Unisafe A-LM (alkyl dimethylamine oxide; manufactured by Nippon Oil & Fats Co., Ltd.), Unisafe A-LY (polyoxyethylene coconut oil alkyldimethylamine oxide; Nippon Oil & Fat Co., Ltd.) Manufactured), asfazole # 10 (polyoxyethylene beef tallow propylenediamine; manufactured by NOF Corporation), ethylenediamine PO52EO60 (ethylenediamine tetrapolyoxyalkylene; manufactured by NOF Corporation), Adekapluronic TR704 (ethylenediamine polyoxyethylene polyoxypropylene condensate; Asahi Denka Co., Ltd.), Nimene L207 (polyoxyethylene dodecylamine; manufactured by NOF Corporation), sodium cholate (anionic bile acid derivative; manufactured by ACROS), CHAPS (amphoteric bile) Bile acid derivative; manufactured by Dojin Chemical Co., Ltd.), BIGCHAP (nonionic bile acid derivative; manufactured by Dojin Chemical Co., Ltd.).

参考例1 化学修飾LPL311(化学的に修飾されたLPL311)の調製
HEPES緩衝液(pH8.5,0.15mol/L)に、LPL311を33g/Lとなるように加え5℃に冷却した後、サンブライトVFM−4101(日本油脂社製)を330g/Lとなるよう加え、さらに3時間反応させた。得られた修飾酵素溶液を精製分離せずそのまま化学修飾LPL311として使用した。
(化合物Aを用いた測定用キット)
Reference Example 1 Preparation of Chemically Modified LPL311 (Chemically Modified LPL311) To HEPES buffer (pH 8.5, 0.15 mol / L), LPL311 was added to 33 g / L and cooled to 5 ° C. Sunbright VFM-4101 (manufactured by Nippon Oil & Fats Co., Ltd.) was added at 330 g / L and further reacted for 3 hours. The resulting modified enzyme solution was used as chemically modified LPL311 without purification and separation.
(Measurement kit using Compound A)

以下の第一試薬(試薬A)および第二試薬(試薬a)からなるHDLコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬(試薬A)
HEPES(pH7.5) 10mmol/L
EMSE 0.3g/L
第二試薬(試薬a
HEPES(pH7.0) 10mmol/L
4−アミノアンチピリン 0.3g/L
ペルオキシダーゼ 20kU/L
化学修飾LPL311 0.2kU/L
COO321 5.0kU/L
BLAUNON SAP3004 0.1g/L
A kit for measuring HDL cholesterol comprising the following first reagent (reagent A) and second reagent (reagent a 1 ) was prepared.
First reagent (Reagent A)
HEPES (pH 7.5) 10 mmol / L
EMSE 0.3g / L
Second reagent (reagent a 1 )
HEPES (pH 7.0) 10 mmol / L
4-Aminoantipyrine 0.3g / L
Peroxidase 20 kU / L
Chemical modification LPL311 0.2 kU / L
COO321 5.0 kU / L
BLAUNON SAP3004 0.1g / L

以下の第一試薬(試薬A)および第二試薬(試薬a)からなるHDLコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬(試薬A)
HEPES(pH7.5) 10mmol/L
EMSE 0.3g/L
第二試薬(試薬a
HEPES(pH7.0) 10mmol/L
4−アミノアンチピリン 0.3g/L
ペルオキシダーゼ 20kU/L
化学修飾LPL311 0.2kU/L
COO321 5.0kU/L
BLAUNON SAP3010 0.5g/L
A HDL cholesterol measurement kit comprising the following first reagent (reagent A) and second reagent (reagent a 2 ) was prepared.
First reagent (Reagent A)
HEPES (pH 7.5) 10 mmol / L
EMSE 0.3g / L
Second reagent (reagent a 2 )
HEPES (pH 7.0) 10 mmol / L
4-Aminoantipyrine 0.3g / L
Peroxidase 20 kU / L
Chemical modification LPL311 0.2 kU / L
COO321 5.0 kU / L
BLAUNON SAP3010 0.5g / L

以下の第一試薬(試薬A)および第二試薬(試薬a)からなるHDLコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬(試薬A)
HEPES(pH7.5) 10mmol/L
EMSE 0.3g/L
第二試薬(試薬a
HEPES(pH7.0) 10mmol/L
4−アミノアンチピリン 0.3g/L
ペルオキシダーゼ 20kU/L
化学修飾LPL311 0.2kU/L
COO321 5.0kU/L
C16EO30PO10 0.5g/L
A kit for measuring HDL cholesterol comprising the following first reagent (reagent A) and second reagent (reagent a 3 ) was prepared.
First reagent (Reagent A)
HEPES (pH 7.5) 10 mmol / L
EMSE 0.3g / L
Second reagent (reagent a 3 )
HEPES (pH 7.0) 10 mmol / L
4-Aminoantipyrine 0.3g / L
Peroxidase 20 kU / L
Chemical modification LPL311 0.2 kU / L
COO321 5.0 kU / L
C16EO30PO10 0.5g / L

以下の第一試薬(試薬A)および第二試薬(試薬a)からなるHDLコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬(試薬A)
HEPES(pH7.5) 10mmol/L
EMSE 0.3g/L
第二試薬(試薬a
HEPES(pH7.0) 10mmol/L
4−アミノアンチピリン 0.3g/L
ペルオキシダーゼ 20kU/L
化学修飾LPL311 0.2kU/L
COO321 5.0kU/L
C16EO40PO10 1.0g/L
An HDL cholesterol measurement kit comprising the following first reagent (reagent A) and second reagent (reagent a 4 ) was prepared.
First reagent (Reagent A)
HEPES (pH 7.5) 10 mmol / L
EMSE 0.3g / L
Second reagent (reagent a 4 )
HEPES (pH 7.0) 10 mmol / L
4-Aminoantipyrine 0.3g / L
Peroxidase 20 kU / L
Chemical modification LPL311 0.2 kU / L
COO321 5.0 kU / L
C16EO40PO10 1.0g / L

以下の第一試薬(試薬A)および第二試薬(試薬a)からなるHDLコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬(試薬A)
HEPES(pH7.5) 10mmol/L
EMSE 0.3g/L
第二試薬(試薬a
HEPES(pH7.0) 10mmol/L
4−アミノアンチピリン 0.3g/L
ペルオキシダーゼ 20kU/L
化学修飾LPL311 0.2kU/L
COO321 5.0kU/L
C16EO30PO20 0.5g/L
A HDL cholesterol measurement kit comprising the following first reagent (reagent A) and second reagent (reagent a 5 ) was prepared.
First reagent (Reagent A)
HEPES (pH 7.5) 10 mmol / L
EMSE 0.3g / L
Second reagent (reagent a 5 )
HEPES (pH 7.0) 10 mmol / L
4-Aminoantipyrine 0.3g / L
Peroxidase 20 kU / L
Chemical modification LPL311 0.2 kU / L
COO321 5.0 kU / L
C16EO30PO20 0.5g / L

以下の第一試薬(試薬A)および第二試薬(試薬a)からなるHDLコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬(試薬A)
HEPES(pH7.5) 10mmol/L
EMSE 0.3g/L
第二試薬(試薬a
HEPES(pH7.0) 10mmol/L
4−アミノアンチピリン 0.3g/L
ペルオキシダーゼ 20kU/L
化学修飾LPL311 0.2kU/L
COO321 5.0kU/L
C16EO20PO10 0.5g/L
A HDL cholesterol measurement kit comprising the following first reagent (reagent A) and second reagent (reagent a 6 ) was prepared.
First reagent (Reagent A)
HEPES (pH 7.5) 10 mmol / L
EMSE 0.3g / L
Second reagent (reagent a 6 )
HEPES (pH 7.0) 10 mmol / L
4-Aminoantipyrine 0.3g / L
Peroxidase 20 kU / L
Chemical modification LPL311 0.2 kU / L
COO321 5.0 kU / L
C16EO20PO10 0.5g / L

以下の第一試薬(試薬A)および第二試薬(試薬a)からなるHDLコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬(試薬A)
HEPES(pH7.5) 10mmol/L
EMSE 0.3g/L
第二試薬(試薬a
HEPES(pH7.0) 10mmol/L
4−アミノアンチピリン 0.3g/L
ペルオキシダーゼ 20kU/L
化学修飾LPL311 0.2kU/L
COO321 5.0kU/L
ビスノールSK 0.3g/L
A kit for measuring HDL cholesterol comprising the following first reagent (reagent A) and second reagent (reagent a 7 ) was prepared.
First reagent (Reagent A)
HEPES (pH 7.5) 10 mmol / L
EMSE 0.3g / L
Second reagent (reagent a 7 )
HEPES (pH 7.0) 10 mmol / L
4-Aminoantipyrine 0.3g / L
Peroxidase 20 kU / L
Chemical modification LPL311 0.2 kU / L
COO321 5.0 kU / L
Bisnoll SK 0.3g / L

以下の第一試薬(試薬A)および第二試薬(試薬a)からなるHDLコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬(試薬A)
HEPES(pH7.5) 10mmol/L
EMSE 0.3g/L
第二試薬(試薬a
HEPES(pH7.0) 10mmol/L
4−アミノアンチピリン 0.3g/L
ペルオキシダーゼ 20kU/L
化学修飾LPL311 0.2kU/L
COO321 5.0kU/L
ミグノールPA−30 0.5g/L
A HDL cholesterol measurement kit comprising the following first reagent (reagent A) and second reagent (reagent a 8 ) was prepared.
First reagent (Reagent A)
HEPES (pH 7.5) 10 mmol / L
EMSE 0.3g / L
Second reagent (reagent a 8 )
HEPES (pH 7.0) 10 mmol / L
4-Aminoantipyrine 0.3g / L
Peroxidase 20 kU / L
Chemical modification LPL311 0.2 kU / L
COO321 5.0 kU / L
Mignol PA-30 0.5g / L

以下の第一試薬(試薬A)および第二試薬(試薬a)からなるHDLコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬(試薬A)
HEPES(pH7.5) 10mmol/L
EMSE 0.3g/L
第二試薬(試薬a
HEPES(pH7.0) 10mmol/L
4−アミノアンチピリン 0.3g/L
ペルオキシダーゼ 20kU/L
化学修飾LPL311 0.2kU/L
COO321 5.0kU/L
ニッコールTAMDS15 0.1g/L
A HDL cholesterol measurement kit comprising the following first reagent (reagent A) and second reagent (reagent a 9 ) was prepared.
First reagent (Reagent A)
HEPES (pH 7.5) 10 mmol / L
EMSE 0.3g / L
Second reagent (reagent a 9 )
HEPES (pH 7.0) 10 mmol / L
4-Aminoantipyrine 0.3g / L
Peroxidase 20 kU / L
Chemical modification LPL311 0.2 kU / L
COO321 5.0 kU / L
Nikkor TAMDS15 0.1g / L

以下の第一試薬(試薬A)および第二試薬(試薬a10)からなるHDLコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬(試薬A)
HEPES(pH7.5) 10mmol/L
EMSE 0.3g/L
第二試薬(試薬a10
HEPES(pH7.0) 10mmol/L
4−アミノアンチピリン 0.3g/L
ペルオキシダーゼ 20kU/L
化学修飾LPL311 0.2kU/L
COO321 5.0kU/L
BLAUNON DT03 0.5g/L
A kit for measuring HDL cholesterol comprising the following first reagent (reagent A) and second reagent (reagent a 10 ) was prepared.
First reagent (Reagent A)
HEPES (pH 7.5) 10 mmol / L
EMSE 0.3g / L
Second reagent (reagent a 10 )
HEPES (pH 7.0) 10 mmol / L
4-Aminoantipyrine 0.3g / L
Peroxidase 20 kU / L
Chemical modification LPL311 0.2 kU / L
COO321 5.0 kU / L
BLAUNON DT03 0.5g / L

以下の第一試薬(試薬A)および第二試薬(試薬a11)からなるHDLコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬(試薬A)
HEPES(pH7.5) 10mmol/L
EMSE 0.3g/L
第二試薬(試薬a11
HEPES(pH7.0) 10mmol/L
4−アミノアンチピリン 0.3g/L
ペルオキシダーゼ 20kU/L
化学修飾LPL311 0.2kU/L
COO321 5.0kU/L
BLAUNON DT15 0.1g/L
A kit for measuring HDL cholesterol comprising the following first reagent (reagent A) and second reagent (reagent a 11 ) was prepared.
First reagent (Reagent A)
HEPES (pH 7.5) 10 mmol / L
EMSE 0.3g / L
Second reagent (reagent a 11 )
HEPES (pH 7.0) 10 mmol / L
4-Aminoantipyrine 0.3g / L
Peroxidase 20 kU / L
Chemical modification LPL311 0.2 kU / L
COO321 5.0 kU / L
BLAUNON DT15 0.1g / L

以下の第一試薬(試薬A)および第二試薬(試薬a12)からなるHDLコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬(試薬A)
HEPES(pH7.5) 10mmol/L
EMSE 0.3g/L
第二試薬(試薬a12
HEPES(pH7.0) 10mmol/L
4−アミノアンチピリン 0.3g/L
ペルオキシダーゼ 20kU/L
化学修飾LPL311 0.2kU/L
COO321 5.0kU/L
アスファゾール#10 0.1g/L
An HDL cholesterol measurement kit comprising the following first reagent (reagent A) and second reagent (reagent a 12 ) was prepared.
First reagent (Reagent A)
HEPES (pH 7.5) 10 mmol / L
EMSE 0.3g / L
Second reagent (reagent a 12)
HEPES (pH 7.0) 10 mmol / L
4-Aminoantipyrine 0.3g / L
Peroxidase 20 kU / L
Chemical modification LPL311 0.2 kU / L
COO321 5.0 kU / L
Asfazole # 10 0.1 g / L

比較例1
以下の第一試薬(試薬A)および第二試薬(試薬a)からなるHDLコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬(試薬A)
HEPES(pH7.5) 10mmol/L
EMSE 0.3g/L
第二試薬(試薬a)
HEPES(pH7.0) 10mmol/L
4−アミノアンチピリン 0.3g/L
ペルオキシダーゼ 20kU/L
化学修飾LPL311 0.2kU/L
COO321 5.0kU/L
Comparative Example 1
An HDL cholesterol measurement kit comprising the following first reagent (reagent A) and second reagent (reagent a) was prepared.
First reagent (Reagent A)
HEPES (pH 7.5) 10 mmol / L
EMSE 0.3g / L
Second reagent (reagent a)
HEPES (pH 7.0) 10 mmol / L
4-Aminoantipyrine 0.3g / L
Peroxidase 20 kU / L
Chemical modification LPL311 0.2 kU / L
COO321 5.0 kU / L

実施例1のキットを用いて、ヒト血清30検体中のHDLコレステロールを測定した。
(1)検量線の作成
標準液として、生理食塩水(HDLコレステロール濃度:0.0mg/dL)および血清(HDLコレステロール濃度:80.0mg/dL)を、実施例1のキットを用いて、日立7170S形自動分析装置により、HDLコレステロール濃度と「吸光度」との間の関係を示す検量線を作成した。
Using the kit of Example 1, HDL cholesterol in 30 samples of human serum was measured.
(1) Preparation of calibration curve As standard solutions, physiological saline (HDL cholesterol concentration: 0.0 mg / dL) and serum (HDL cholesterol concentration: 80.0 mg / dL) were obtained using the kit of Example 1, Hitachi. A calibration curve showing the relationship between the HDL cholesterol concentration and the “absorbance” was created by the 7170S type automatic analyzer.

ここでの「吸光度」とは、以下の反応で測定された2つの吸光度(E1およびE2)を基に、E2からE1を差し引くことにより得られた値を表す。
反応セルへ標準液(2μL)と第一試薬(0.15mL)とを添加し37℃で5分間加温し、反応液の吸光度(E1)を主波長600nm、副波長700nmで測定し、次いで、この反応液に第二試薬(0.05mL)を添加しさらに37℃で5分間加温し、反応液の吸光度(E2)を主波長600nm、副波長700nmで測定した。
(2)ヒト血清検体と実施例1または比較例1のキットとの反応による当該検体における「吸光度」の算出
(1)の検量線の作成において用いた標準液の代わりにヒト血清検体を用いる以外は、(1)の「吸光度」の算出方法と同様の方法により、当該検体における「吸光度」を算出した。
(3)ヒト血清検体中のHDLコレステロール濃度の測定
(2)で算出した「吸光度」と、(1)で作成した検量線とから、各検体中のHDLコレステロール濃度を測定した。
Here, “absorbance” represents a value obtained by subtracting E1 from E2 based on two absorbances (E1 and E2) measured in the following reaction.
Standard solution (2 μL) and first reagent (0.15 mL) were added to the reaction cell, heated at 37 ° C. for 5 minutes, and the absorbance (E1) of the reaction solution was measured at a main wavelength of 600 nm and a subwavelength of 700 nm. Then, a second reagent (0.05 mL) was added to the reaction solution, and the mixture was further heated at 37 ° C. for 5 minutes, and the absorbance (E2) of the reaction solution was measured at a main wavelength of 600 nm and a sub wavelength of 700 nm.
(2) Calculation of “absorbance” in the sample by the reaction between the human serum sample and the kit of Example 1 or Comparative Example 1 Other than using the human serum sample in place of the standard solution used in the preparation of the calibration curve in (1) The “absorbance” in the sample was calculated by the same method as the “absorbance” calculation method in (1).
(3) Measurement of HDL cholesterol concentration in human serum sample From the “absorbance” calculated in (2) and the calibration curve prepared in (1), the HDL cholesterol concentration in each sample was measured.

実施例1のキットの代わりに実施例2のキットを用いる以外は実施例13の測定法と同様にして、日立7170形自動分析装置によりヒト血清30検体中のHDLコレステロールを測定した。  HDL cholesterol in 30 samples of human serum was measured by Hitachi 7170 automatic analyzer in the same manner as in the measurement method of Example 13 except that the kit of Example 2 was used instead of the kit of Example 1.

実施例1のキットの代わりに実施例3のキットを用いる以外は実施例13の測定法と同様にして、日立7170形自動分析装置によりヒト血清30検体中のHDLコレステロールを測定した。  HDL cholesterol in 30 samples of human serum was measured by Hitachi 7170 automatic analyzer in the same manner as in the measurement method of Example 13 except that the kit of Example 3 was used instead of the kit of Example 1.

実施例1のキットの代わりに実施例4のキットを用いる以外は実施例13の測定法と同様にして、日立7170形自動分析装置によりヒト血清30検体中のHDLコレステロールを測定した。  HDL cholesterol in 30 samples of human serum was measured by Hitachi 7170 automatic analyzer in the same manner as in the measurement method of Example 13 except that the kit of Example 4 was used instead of the kit of Example 1.

実施例1のキットの代わりに実施例5のキットを用いる以外は実施例13の測定法と同様にして、日立7170形自動分析装置によりヒト血清30検体中のHDLコレステロールを測定した。  HDL cholesterol in 30 samples of human serum was measured by Hitachi 7170 automatic analyzer in the same manner as in the measurement method of Example 13 except that the kit of Example 5 was used instead of the kit of Example 1.

実施例1のキットの代わりに実施例6のキットを用いる以外は実施例13の測定法と同様にして、日立7170形自動分析装置によりヒト血清30検体中のHDLコレステロールを測定した。  HDL cholesterol in 30 samples of human serum was measured with a Hitachi 7170 automatic analyzer in the same manner as in the measurement method of Example 13, except that the kit of Example 6 was used instead of the kit of Example 1.

実施例1のキットの代わりに実施例7のキットを用いる以外は実施例13の測定法と同様にして、日立7170形自動分析装置によりヒト血清30検体中のHDLコレステロールを測定した。  HDL cholesterol in 30 samples of human serum was measured with a Hitachi 7170 automatic analyzer in the same manner as in the measurement method of Example 13 except that the kit of Example 7 was used instead of the kit of Example 1.

実施例1のキットの代わりに実施例8のキットを用いる以外は実施例13の測定法と同様にして、日立7170形自動分析装置によりヒト血清30検体中のHDLコレステロールを測定した。  HDL cholesterol in 30 samples of human serum was measured by Hitachi 7170 automatic analyzer in the same manner as in the measurement method of Example 13 except that the kit of Example 8 was used instead of the kit of Example 1.

実施例1のキットの代わりに実施例9のキットを用いる以外は実施例13の測定法と同様にして、日立7170形自動分析装置によりヒト血清30検体中のHDLコレステロールを測定した。  HDL cholesterol in 30 samples of human serum was measured by Hitachi 7170 automatic analyzer in the same manner as in the measurement method of Example 13 except that the kit of Example 9 was used instead of the kit of Example 1.

実施例1のキットの代わりに実施例10のキットを用いる以外は実施例13の測定法と同様にして、日立7170形自動分析装置によりヒト血清30検体中のHDLコレステロールを測定した。  HDL cholesterol in 30 samples of human serum was measured by Hitachi 7170 automatic analyzer in the same manner as in the measurement method of Example 13 except that the kit of Example 10 was used instead of the kit of Example 1.

実施例1のキットの代わりに実施例11のキットを用いる以外は実施例13の測定法と同様にして、日立7170形自動分析装置によりヒト血清30検体中のHDLコレステロールを測定した。  HDL cholesterol in 30 samples of human serum was measured by Hitachi 7170 automatic analyzer in the same manner as in the measurement method of Example 13, except that the kit of Example 11 was used instead of the kit of Example 1.

実施例1のキットの代わりに実施例12のキットを用いる以外は実施例13の測定法と同様にして、日立7170形自動分析装置によりヒト血清30検体中のHDLコレステロールを測定した。  HDL cholesterol in 30 samples of human serum was measured by Hitachi 7170 automatic analyzer in the same manner as in the measurement method of Example 13 except that the kit of Example 12 was used instead of the kit of Example 1.

比較例2
実施例1のキットの代わりに比較例1のキットを用いる以外は実施例13の測定法と同様にして、日立7170形自動分析装置によりヒト血清30検体中のHDLコレステロールを測定した。
Comparative Example 2
HDL cholesterol in 30 samples of human serum was measured by Hitachi 7170 automatic analyzer in the same manner as in the measurement method of Example 13 except that the kit of Comparative Example 1 was used instead of the kit of Example 1.

次に、実施例13〜24および比較例2の測定において用いたヒト血清30検体を用いて、クリニカルケミストリー第45巻、10号(1999年)に記載されたDCM法(Designated Comparison Method)により当該検体中のHDLコレステロールを測定し、各実施例および比較例での値と比較した。各実施例および比較例それぞれの測定と、DCM法による測定との相関係数を第1表に示す。  Next, using the human serum 30 samples used in the measurements of Examples 13 to 24 and Comparative Example 2, the DCM method (Designated Comparison Method) described in Clinical Chemistry Vol. 45, No. 10 (1999) was used. HDL cholesterol in the specimen was measured and compared with the values in each Example and Comparative Example. Table 1 shows the correlation coefficient between the measurement of each example and comparative example and the measurement by the DCM method.

Figure 0004796489
Figure 0004796489

実施例13〜24と比較例2との比較から、化合物A(特に、アルキルアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物、ポリオキシエチレンアルキルアミンサルフェート、ポリオキシエチレンベンジル−アルキル四級アンモニウム塩、ポリオキシエチレン酸アミドまたはアルキルプロピレンジアミン誘導体)を用いたキットにおいて、DCM法による測定と良い相関係数が得られることが判明した。
[化合物Aと化合物B(ポリアニオン)との併用例]
以下の組成からなる第一試薬(試薬B)を調製した。
From comparison between Examples 13 to 24 and Comparative Example 2, compound A (in particular, alkylamine polyoxyethylene polyoxypropylene condensate, polyoxyethylene alkylamine sulfate, polyoxyethylene benzyl-alkyl quaternary ammonium salt, polyoxy It was found that a kit using an ethylene acid amide or an alkylpropylenediamine derivative) provides a good correlation coefficient with the measurement by the DCM method.
[Combination example of Compound A and Compound B (polyanion)]
A first reagent (reagent B) having the following composition was prepared.

以下の第一試薬(試薬B)および第二試薬(試薬a)からなるHDLコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬(試薬B)
HEPES(pH7.5) 10mmol/L
EMSE 0.3g/L
デキストラン硫酸ナトリウム 1.0g/L
第二試薬(試薬a
HEPES(pH7.0) 10mmol/L
4−アミノアンチピリン 0.3g/L
ペルオキシダーゼ 20kU/L
化学修飾LPL311 0.2kU/L
COO321 5.0kU/L
BLAUNON SAP3010 0.5g/L
A kit for measuring HDL cholesterol comprising the following first reagent (reagent B) and second reagent (reagent a 2 ) was prepared.
First reagent (Reagent B)
HEPES (pH 7.5) 10 mmol / L
EMSE 0.3g / L
Dextran sulfate sodium 1.0 g / L
Second reagent (reagent a 2 )
HEPES (pH 7.0) 10 mmol / L
4-Aminoantipyrine 0.3g / L
Peroxidase 20 kU / L
Chemical modification LPL311 0.2 kU / L
COO321 5.0 kU / L
BLAUNON SAP3010 0.5g / L

以下の第一試薬(試薬B)および第二試薬(試薬a)からなるHDLコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬(試薬B)
HEPES(pH7.5) 10mmol/L
EMSE 0.3g/L
デキストラン硫酸ナトリウム 1.0g/L
第二試薬(試薬a
HEPES(pH7.0) 10mmol/L
4−アミノアンチピリン 0.3g/L
ペルオキシダーゼ 20kU/L
化学修飾LPL311 0.2kU/L
COO321 5.0kU/L
C16EO30PO20 0.5g/L
A kit for measuring HDL cholesterol comprising the following first reagent (reagent B) and second reagent (reagent a 5 ) was prepared.
First reagent (Reagent B)
HEPES (pH 7.5) 10 mmol / L
EMSE 0.3g / L
Dextran sulfate sodium 1.0 g / L
Second reagent (reagent a 5 )
HEPES (pH 7.0) 10 mmol / L
4-Aminoantipyrine 0.3g / L
Peroxidase 20 kU / L
Chemical modification LPL311 0.2 kU / L
COO321 5.0 kU / L
C16EO30PO20 0.5g / L

以下の第一試薬(試薬B)および第二試薬(試薬a)からなるHDLコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬(試薬B)
HEPES(pH7.5) 10mmol/L
EMSE 0.3g/L
デキストラン硫酸ナトリウム 1.0g/L
第二試薬(試薬a
HEPES(pH7.0) 10mmol/L
4−アミノアンチピリン 0.3g/L
ペルオキシダーゼ 20kU/L
化学修飾LPL311 0.2kU/L
COO321 5.0kU/L
ビスノールSK 0.3g/L
A HDL cholesterol measurement kit comprising the following first reagent (reagent B) and second reagent (reagent a 7 ) was prepared.
First reagent (Reagent B)
HEPES (pH 7.5) 10 mmol / L
EMSE 0.3g / L
Dextran sulfate sodium 1.0 g / L
Second reagent (reagent a 7 )
HEPES (pH 7.0) 10 mmol / L
4-Aminoantipyrine 0.3g / L
Peroxidase 20 kU / L
Chemical modification LPL311 0.2 kU / L
COO321 5.0 kU / L
Bisnoll SK 0.3g / L

以下の第一試薬(試薬B)および第二試薬(試薬a)からなるHDLコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬(試薬B)
HEPES(pH7.5) 10mmol/L
EMSE 0.3g/L
デキストラン硫酸ナトリウム 1.0g/L
第二試薬(試薬a
HEPES(pH7.0) 10mmol/L
4−アミノアンチピリン 0.3g/L
ペルオキシダーゼ 20kU/L
化学修飾LPL311 0.2kU/L
COO321 5.0kU/L
ニッコールTAMDS15 0.1g/L
A HDL cholesterol measurement kit comprising the following first reagent (reagent B) and second reagent (reagent a 9 ) was prepared.
First reagent (Reagent B)
HEPES (pH 7.5) 10 mmol / L
EMSE 0.3g / L
Dextran sulfate sodium 1.0 g / L
Second reagent (reagent a 9 )
HEPES (pH 7.0) 10 mmol / L
4-Aminoantipyrine 0.3g / L
Peroxidase 20 kU / L
Chemical modification LPL311 0.2 kU / L
COO321 5.0 kU / L
Nikkor TAMDS15 0.1g / L

以下の第一試薬(試薬B)および第二試薬(試薬a13)からなるHDLコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬(試薬B)
HEPES(pH7.5) 10mmol/L
EMSE 0.3g/L
デキストラン硫酸ナトリウム 1.0g/L
第二試薬(試薬a13
HEPES(pH7.0) 10mmol/L
4−アミノアンチピリン 0.3g/L
ペルオキシダーゼ 20kU/L
化学修飾LPL311 0.2kU/L
COO321 5.0kU/L
ユニセーフA−LM 0.5g/L
A HDL cholesterol measurement kit comprising the following first reagent (reagent B) and second reagent (reagent a 13 ) was prepared.
First reagent (Reagent B)
HEPES (pH 7.5) 10 mmol / L
EMSE 0.3g / L
Dextran sulfate sodium 1.0 g / L
Second reagent (reagent a 13 )
HEPES (pH 7.0) 10 mmol / L
4-Aminoantipyrine 0.3g / L
Peroxidase 20 kU / L
Chemical modification LPL311 0.2 kU / L
COO321 5.0 kU / L
Unisafe A-LM 0.5g / L

以下の第一試薬(試薬B)および第二試薬(試薬a10)からなるHDLコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬(試薬B)
HEPES(pH7.5) 10mmol/L
EMSE 0.3g/L
デキストラン硫酸ナトリウム 1.0g/L
第二試薬(試薬a10
HEPES(pH7.0) 10mmol/L
4−アミノアンチピリン 0.3g/L
ペルオキシダーゼ 20kU/L
化学修飾LPL311 0.2kU/L
COO321 5.0kU/L
BLAUNON DT03 0.5g/L
It was prepared HDL cholesterol measurement kit consisting of the following first reagent (Reagent B) and second reagent (Reagent a 10).
First reagent (Reagent B)
HEPES (pH 7.5) 10 mmol / L
EMSE 0.3g / L
Dextran sulfate sodium 1.0 g / L
Second reagent (reagent a 10 )
HEPES (pH 7.0) 10 mmol / L
4-Aminoantipyrine 0.3g / L
Peroxidase 20 kU / L
Chemical modification LPL311 0.2 kU / L
COO321 5.0 kU / L
BLAUNON DT03 0.5g / L

比較例3
以下の第一試薬(試薬B)および第二試薬(試薬a)からなるHDLコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬(試薬B)
HEPES(pH7.5) 10mmol/L
EMSE 0.3g/L
デキストラン硫酸ナトリウム 1.0g/L
第二試薬(試薬a)
HEPES(pH7.0) 10mmol/L
4−アミノアンチピリン 0.3g/L
ペルオキシダーゼ 20kU/L
化学修飾LPL311 0.2kU/L
COO321 5.0kU/L
Comparative Example 3
A HDL cholesterol measurement kit comprising the following first reagent (reagent B) and second reagent (reagent a) was prepared.
First reagent (Reagent B)
HEPES (pH 7.5) 10 mmol / L
EMSE 0.3g / L
Dextran sulfate sodium 1.0 g / L
Second reagent (reagent a)
HEPES (pH 7.0) 10 mmol / L
4-Aminoantipyrine 0.3g / L
Peroxidase 20 kU / L
Chemical modification LPL311 0.2 kU / L
COO321 5.0 kU / L

実施例1のキットの代わりに実施例25のキットを用いる以外は実施例13の測定法と同様にして、日立7170形自動分析装置によりヒト血清30検体中のHDLコレステロールを測定した。  HDL cholesterol in 30 samples of human serum was measured with a Hitachi 7170 automatic analyzer in the same manner as in the measurement method of Example 13, except that the kit of Example 25 was used instead of the kit of Example 1.

実施例1のキットの代わりに実施例26のキットを用いる以外は実施例13の測定法と同様にして、日立7170形自動分析装置によりヒト血清30検体中のHDLコレステロールを測定した。  HDL cholesterol in 30 samples of human serum was measured by Hitachi 7170 automatic analyzer in the same manner as in the measurement method of Example 13 except that the kit of Example 26 was used instead of the kit of Example 1.

実施例1のキットの代わりに実施例27のキットを用いる以外は実施例13の測定法と同様にして、日立7170形自動分析装置によりヒト血清30検体中のHDLコレステロールを測定した。  HDL cholesterol in 30 samples of human serum was measured by Hitachi 7170 automatic analyzer in the same manner as in the measurement method of Example 13, except that the kit of Example 27 was used instead of the kit of Example 1.

実施例1のキットの代わりに実施例28のキットを用いる以外は実施例13の測定法と同様にして、日立7170形自動分析装置によりヒト血清30検体中のHDLコレステロールを測定した。  HDL cholesterol in 30 samples of human serum was measured by Hitachi 7170 automatic analyzer in the same manner as the measurement method of Example 13 except that the kit of Example 28 was used instead of the kit of Example 1.

実施例1のキットの代わりに実施例29のキットを用いる以外は実施例13の測定法と同様にして、日立7170形自動分析装置によりヒト血清30検体中のHDLコレステロールを測定した。  HDL cholesterol in 30 samples of human serum was measured by Hitachi 7170 automatic analyzer in the same manner as in the measurement method of Example 13 except that the kit of Example 29 was used instead of the kit of Example 1.

実施例1のキットの代わりに実施例30のキットを用いる以外は実施例13の測定法と同様にして、日立7170形自動分析装置によりヒト血清30検体中のHDLコレステロールを測定した。  HDL cholesterol in 30 samples of human serum was measured by Hitachi 7170 automatic analyzer in the same manner as in the measurement method of Example 13 except that the kit of Example 30 was used instead of the kit of Example 1.

比較例4
実施例1のキットの代わりに比較例3のキットを用いる以外は実施例13の測定法と同様にして、日立7170形自動分析装置によりヒト血清30検体中のHDLコレステロールを測定した。
Comparative Example 4
HDL cholesterol in 30 samples of human serum was measured by Hitachi 7170 automatic analyzer in the same manner as in the measurement method of Example 13 except that the kit of Comparative Example 3 was used instead of the kit of Example 1.

実施例31〜36および比較例4のそれぞれの測定と、DCM法による測定との相関係数を表2に示す。  Table 2 shows the correlation coefficients between the measurements of Examples 31 to 36 and Comparative Example 4 and the measurement by the DCM method.

Figure 0004796489
Figure 0004796489

第2表から、化合物Aを含有するキットを用いた測定においては、化合物B(ポリアニオン)を共存させてもDCMとの相関関係が認められない。また、第2表から、化合物A(特に、アルキルアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物、ポリオキシエチレンベンジル−アルキル四級アンモニウム塩、ポリオキシエチレン酸アミド、アルキルアミンオキシドまたはアルキルプロピレンジアミン誘導体)および化合物B(ポリアニオン)を用いたキットにおいて、DCM法による測定と良い相関係数が得られることが判明した。また、実施例31と実施例14との比較、実施例32と実施例17との比較、実施例33と実施例19との比較、実施例34と実施例21との比較、および、実施例36と実施例22との比較から、化合物Aと化合物B(ポリアニオン)とを用いることにより、DCM法による測定との相関係数が向上することが判明した。
[化合物Aと化合物B(非イオン性胆汁酸誘導体)との併用例]
From Table 2, in the measurement using the kit containing Compound A, no correlation with DCM is observed even when Compound B (polyanion) is present. Also from Table 2, compound A (especially alkylamine polyoxyethylene polyoxypropylene condensate, polyoxyethylenebenzyl-alkyl quaternary ammonium salt, polyoxyethylene acid amide, alkylamine oxide or alkylpropylenediamine derivative) and It was found that in the kit using Compound B (polyanion), a good correlation coefficient can be obtained when measured by the DCM method. Also, a comparison between Example 31 and Example 14, a comparison between Example 32 and Example 17, a comparison between Example 33 and Example 19, a comparison between Example 34 and Example 21, and an Example From a comparison between Example 36 and Example 22, it was found that the use of Compound A and Compound B (polyanion) improved the correlation coefficient with the measurement by the DCM method.
[Combination example of Compound A and Compound B (nonionic bile acid derivative)]

以下の第一試薬(試薬A)および第二試薬(試薬b)からなるHDLコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬(試薬A)
HEPES(pH7.5) 10mmol/L
EMSE 0.3g/L
第二試薬(試薬b
HEPES(pH7.0) 10mmol/L
4−アミノアンチピリン 0.3g/L
ペルオキシダーゼ 20kU/L
BIGCHAP 3.0g/L
化学修飾LPL311 0.2kU/L
COO321 5.0kU/L
C16EO30PO20 0.24g/L
A kit for measuring HDL cholesterol comprising the following first reagent (reagent A) and second reagent (reagent b 1 ) was prepared.
First reagent (Reagent A)
HEPES (pH 7.5) 10 mmol / L
EMSE 0.3g / L
Second reagent (reagent b 1 )
HEPES (pH 7.0) 10 mmol / L
4-Aminoantipyrine 0.3g / L
Peroxidase 20 kU / L
BIGCHAP 3.0g / L
Chemical modification LPL311 0.2 kU / L
COO321 5.0 kU / L
C16EO30PO20 0.24g / L

比較例5
以下の第一試薬(試薬A)および第二試薬(試薬b)からなるHDLコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬(試薬A)
HEPES(pH7.5) 10mmol/L
EMSE 0.3g/L
第二試薬(試薬b)
HEPES(pH7.0) 10mmol/L
4−アミノアンチピリン 0.3g/L
ペルオキシダーゼ 20kU/L
BIGCHAP 3.0g/L
化学修飾LPL311 0.2kU/L
COO321 5.0kU/L
Comparative Example 5
An HDL cholesterol measurement kit comprising the following first reagent (reagent A) and second reagent (reagent b) was prepared.
First reagent (Reagent A)
HEPES (pH 7.5) 10 mmol / L
EMSE 0.3g / L
Second reagent (reagent b)
HEPES (pH 7.0) 10 mmol / L
4-Aminoantipyrine 0.3g / L
Peroxidase 20 kU / L
BIGCHAP 3.0g / L
Chemical modification LPL311 0.2 kU / L
COO321 5.0 kU / L

実施例1のキットの代わりに実施例37のキットを用いる以外は実施例13の測定法と同様にして、日立7170形自動分析装置によりヒト血清30検体中のHDLコレステロールを測定した。  HDL cholesterol in 30 samples of human serum was measured with a Hitachi 7170 automatic analyzer in the same manner as in the measurement method of Example 13, except that the kit of Example 37 was used instead of the kit of Example 1.

比較例6
実施例1のキットの代わりに比較例5のキットを用いる以外は実施例13の測定法と同様にして、日立7170形自動分析装置によりヒト血清30検体中のHDLコレステロールを測定した。
比較例6および実施例38それぞれの測定と、前述のDCM法による測定との相関係数を第3表に示す。
Comparative Example 6
HDL cholesterol in 30 samples of human serum was measured by Hitachi 7170 automatic analyzer in the same manner as in the measurement method of Example 13 except that the kit of Comparative Example 5 was used instead of the kit of Example 1.
Table 3 shows the correlation coefficients between the measurements of Comparative Example 6 and Example 38 and the measurement by the DCM method described above.

Figure 0004796489
Figure 0004796489

第3表から、化合物B(非イオン性胆汁酸誘導体)を含有するキットを用いた測定において、化合物Aを共存させることにより、DCMとの相関関係がより良好となることが判明した。また、実施例17と実施例38との比較から、アルキルアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物(化合物A)に非イオン性胆汁酸誘導体(化合物B)を共存させることにより、DCMによる測定との相関関係がより良好となることが判明した。
[化合物Aと化合物B(陰イオン性胆汁酸誘導体)との併用例]
From Table 3, it was found that in the measurement using the kit containing Compound B (nonionic bile acid derivative), the presence of Compound A makes the correlation with DCM better. Further, from the comparison between Example 17 and Example 38, it was found that the nonionic bile acid derivative (Compound B) was allowed to coexist in the alkylamine polyoxyethylene polyoxypropylene condensate (Compound A), and the measurement with DCM was It was found that the correlation was better.
[Combination example of Compound A and Compound B (anionic bile acid derivative)]

以下の第一試薬(試薬A)および第二試薬(試薬c)からなるHDLコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬(試薬A)
HEPES(pH7.5) 10mmol/L
EMSE 0.3g/L
第二試薬(試薬c
HEPES(pH7.0) 10mmol/L
4−アミノアンチピリン 0.3g/L
ペルオキシダーゼ 20kU/L
コール酸ナトリウム 6.0g/L
化学修飾LPL311 0.2kU/L
COO321 5.0kU/L
C16EO30PO20 0.2g/L
A kit for measuring HDL cholesterol comprising the following first reagent (reagent A) and second reagent (reagent c 1 ) was prepared.
First reagent (Reagent A)
HEPES (pH 7.5) 10 mmol / L
EMSE 0.3g / L
Second reagent (reagent c 1 )
HEPES (pH 7.0) 10 mmol / L
4-Aminoantipyrine 0.3g / L
Peroxidase 20 kU / L
Sodium cholate 6.0 g / L
Chemical modification LPL311 0.2 kU / L
COO321 5.0 kU / L
C16EO30PO20 0.2g / L

比較例7
以下の第一試薬(試薬A)および第二試薬(試薬c)からなるHDLコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬(試薬A)
HEPES(pH7.5) 10mmol/L
EMSE 0.3g/L
第二試薬(試薬c)
HEPES(pH7.0) 10mmol/L
4−アミノアンチピリン 0.3g/L
ペルオキシダーゼ 20kU/L
コール酸ナトリウム 6.0g/L
化学修飾LPL311 0.2kU/L
COO321 5.0kU/L
Comparative Example 7
A HDL cholesterol measurement kit comprising the following first reagent (reagent A) and second reagent (reagent c) was prepared.
First reagent (Reagent A)
HEPES (pH 7.5) 10 mmol / L
EMSE 0.3g / L
Second reagent (reagent c)
HEPES (pH 7.0) 10 mmol / L
4-Aminoantipyrine 0.3g / L
Peroxidase 20 kU / L
Sodium cholate 6.0 g / L
Chemical modification LPL311 0.2 kU / L
COO321 5.0 kU / L

実施例1のキットの代わりに実施例39のキットを用いる以外は実施例13の測定法と同様にして、日立7170形自動分析装置によりヒト血清30検体中のHDLコレステロールを測定した。  HDL cholesterol in 30 samples of human serum was measured by Hitachi 7170 automatic analyzer in the same manner as in the measurement method of Example 13 except that the kit of Example 39 was used instead of the kit of Example 1.

比較例8
実施例1のキットの代わりに比較例7のキットを用いる以外は実施例13の測定法と同様にして、日立7170形自動分析装置によりヒト血清30検体中のHDLコレステロールを測定した。
Comparative Example 8
HDL cholesterol in 30 samples of human serum was measured with a Hitachi 7170 automatic analyzer in the same manner as in the measurement method of Example 13 except that the kit of Comparative Example 7 was used instead of the kit of Example 1.

比較例6
および実施例40それぞれの測定と、前述のDCM法による測定との相関係数を第4表に示す。
Comparative Example 6
Table 4 shows the correlation coefficient between each measurement of Example 40 and the measurement by the DCM method described above.

Figure 0004796489
Figure 0004796489

第4表から、化合物B(陰イオン性胆汁酸誘導体)を含有するキットを用いた測定において、化合物Aを共存させることにより、DCMとの相関関係がより良好となることが判明した。また、実施例17と実施例40との比較から、アルキルアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物(化合物A)に陰イオン性胆汁酸誘導体(化合物B)を共存させることにより、DCMによる測定との相関関係がより良好となることが判明した。
[化合物Aと化合物B(両性胆汁酸誘導体)との併用例]
From Table 4, it was found that in the measurement using the kit containing Compound B (anionic bile acid derivative), the presence of Compound A makes the correlation with DCM better. Further, from the comparison between Example 17 and Example 40, the presence of an anionic bile acid derivative (Compound B) in the alkylamine polyoxyethylene polyoxypropylene condensate (Compound A) can be measured with DCM. It was found that the correlation was better.
[Combination example of Compound A and Compound B (amphoteric bile acid derivative)]

以下の第一試薬(試薬A)および第二試薬(試薬d)からなるHDLコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬(試薬A)
HEPES(pH7.5) 10mmol/L
EMSE 0.3g/L
第二試薬(試薬d
HEPES(pH7.0) 10mmol/L
4−アミノアンチピリン 0.3g/L
ペルオキシダーゼ 20kU/L
CHAPS 6.0g/L
化学修飾LPL311 0.2kU/L
COO321 5.0kU/L
C16EO30PO20 0.2g/L
A kit for measuring HDL cholesterol comprising the following first reagent (reagent A) and second reagent (reagent d 1 ) was prepared.
First reagent (Reagent A)
HEPES (pH 7.5) 10 mmol / L
EMSE 0.3g / L
Second reagent (reagent d 1 )
HEPES (pH 7.0) 10 mmol / L
4-Aminoantipyrine 0.3g / L
Peroxidase 20 kU / L
CHAPS 6.0g / L
Chemical modification LPL311 0.2 kU / L
COO321 5.0 kU / L
C16EO30PO20 0.2g / L

比較例9
以下の第一試薬(試薬A)および第二試薬(試薬d)からなるHDLコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬(試薬A)
HEPES(pH7.5) 10mmol/L
EMSE 0.3g/L
第二試薬(試薬d)
HEPES(pH7.0) 10mmol/L
4−アミノアンチピリン 0.3g/L
ペルオキシダーゼ 20kU/L
CHAPS 6.0g/L
化学修飾LPL311 0.2kU/L
COO321 5.0kU/L
Comparative Example 9
An HDL cholesterol measurement kit comprising the following first reagent (reagent A) and second reagent (reagent d) was prepared.
First reagent (Reagent A)
HEPES (pH 7.5) 10 mmol / L
EMSE 0.3g / L
Second reagent (reagent d)
HEPES (pH 7.0) 10 mmol / L
4-Aminoantipyrine 0.3g / L
Peroxidase 20 kU / L
CHAPS 6.0g / L
Chemical modification LPL311 0.2 kU / L
COO321 5.0 kU / L

実施例1のキットの代わりに実施例41のキットを用いる以外は実施例13の測定法と同様にして、日立7170形自動分析装置によりヒト血清30検体中のHDLコレステロールを測定した。  HDL cholesterol in 30 samples of human serum was measured by Hitachi 7170 automatic analyzer in the same manner as in the measurement method of Example 13 except that the kit of Example 41 was used instead of the kit of Example 1.

比較例10
実施例1のキットの代わりに比較例9のキットを用いる以外は実施例13の測定法と同様にして、日立7170形自動分析装置によりヒト血清30検体中のHDLコレステロールを測定した。
Comparative Example 10
HDL cholesterol in 30 samples of human serum was measured by Hitachi 7170 automatic analyzer in the same manner as in the measurement method of Example 13 except that the kit of Comparative Example 9 was used instead of the kit of Example 1.

比較例10
および実施例42それぞれの測定と、前述のDCM法による測定との相関係数を第5表に示す。
Comparative Example 10
Table 5 shows the correlation coefficient between each measurement of Example 42 and the measurement by the DCM method described above.

Figure 0004796489
Figure 0004796489

第5表から、化合物B(両性胆汁酸誘導体)を含有するキットを用いた測定において、化合物Aを共存させることにより、DCMとの相関関係がより良好となることが判明した。また、実施例17と実施例42との比較から、アルキルアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物(化合物A)に両性胆汁酸誘導体(化合物B)を共存させることにより、DCMによる測定との相関関係がより良好となることが判明した。
[化合物Aと2つの化合物B(ポリアニオンおよび陰イオン性胆汁酸誘導体)との併用例]
From Table 5, it was found that in the measurement using the kit containing Compound B (amphoteric bile acid derivative), the presence of Compound A makes the correlation with DCM better. Further, from the comparison between Example 17 and Example 42, the presence of the amphoteric bile acid derivative (Compound B) in the alkylamine polyoxyethylene polyoxypropylene condensate (Compound A) correlates with the measurement by DCM. Was found to be better.
[Combination example of compound A and two compounds B (polyanion and anionic bile acid derivative)]

以下の第一試薬(試薬B)および第二試薬(試薬c)からなるHDLコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬(試薬B)
HEPES(pH7.5) 10mmol/L
EMSE 0.3g/L
デキストラン硫酸 1.0g/L
第二試薬(試薬c
HEPES(pH7.0) 10mmol/L
4−アミノアンチピリン 0.3g/L
ペルオキシダーゼ 20kU/L
コール酸ナトリウム 6.0g/L
化学修飾LPL311 0.2kU/L
COO321 5.0kU/L
C16EO30PO20 0.2g/L
A kit for measuring HDL cholesterol comprising the following first reagent (reagent B) and second reagent (reagent c 1 ) was prepared.
First reagent (Reagent B)
HEPES (pH 7.5) 10 mmol / L
EMSE 0.3g / L
Dextran sulfate 1.0 g / L
Second reagent (reagent c 1 )
HEPES (pH 7.0) 10 mmol / L
4-Aminoantipyrine 0.3g / L
Peroxidase 20 kU / L
Sodium cholate 6.0 g / L
Chemical modification LPL311 0.2 kU / L
COO321 5.0 kU / L
C16EO30PO20 0.2g / L

以下の第一試薬(試薬B)および第二試薬(試薬c)からなるHDLコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬(試薬B)
HEPES(pH7.5) 10mmol/L
EMSE 0.3g/L
デキストラン硫酸 1.0g/L
第二試薬(試薬c
HEPES(pH7.0) 10mmol/L
4−アミノアンチピリン 0.3g/L
ペルオキシダーゼ 20kU/L
コール酸ナトリウム 6.0g/L
化学修飾LPL311 0.2kU/L
COO321 5.0kU/L
ビスノールSK 0.3g/L
A HDL cholesterol measurement kit comprising the following first reagent (reagent B) and second reagent (reagent c 2 ) was prepared.
First reagent (Reagent B)
HEPES (pH 7.5) 10 mmol / L
EMSE 0.3g / L
Dextran sulfate 1.0 g / L
Second reagent (reagent c 2 )
HEPES (pH 7.0) 10 mmol / L
4-Aminoantipyrine 0.3g / L
Peroxidase 20 kU / L
Sodium cholate 6.0 g / L
Chemical modification LPL311 0.2 kU / L
COO321 5.0 kU / L
Bisnoll SK 0.3g / L

比較例11
以下の第一試薬(試薬B)および第二試薬(試薬c)からなるHDLコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬(試薬B)
HEPES(pH7.5) 10mmol/L
EMSE 0.3g/L
デキストラン硫酸ナトリウム 1.0g/L
第二試薬(試薬c)
HEPES(pH7.0) 10mmol/L
4−アミノアンチピリン 0.3g/L
ペルオキシダーゼ 20kU/L
コール酸ナトリウム 6.0g/L
化学修飾LPL311 0.2kU/L
COO321 5.0kU/L
Comparative Example 11
An HDL cholesterol measurement kit comprising the following first reagent (reagent B) and second reagent (reagent c) was prepared.
First reagent (Reagent B)
HEPES (pH 7.5) 10 mmol / L
EMSE 0.3g / L
Dextran sulfate sodium 1.0 g / L
Second reagent (reagent c)
HEPES (pH 7.0) 10 mmol / L
4-Aminoantipyrine 0.3g / L
Peroxidase 20 kU / L
Sodium cholate 6.0 g / L
Chemical modification LPL311 0.2 kU / L
COO321 5.0 kU / L

実施例1のキットの代わりに実施例43のキットを用いる以外は実施例13の測定法と同様にして、日立7170形自動分析装置によりヒト血清30検体中のHDLコレステロールを測定した。  HDL cholesterol in 30 samples of human serum was measured by Hitachi 7170 automatic analyzer in the same manner as in the measurement method of Example 13 except that the kit of Example 43 was used instead of the kit of Example 1.

実施例1のキットの代わりに実施例44のキットを用いる以外は実施例13の測定法と同様にして、日立7170形自動分析装置によりヒト血清30検体中のHDLコレステロールを測定した。  HDL cholesterol in 30 samples of human serum was measured by Hitachi 7170 automatic analyzer in the same manner as in the measurement method of Example 13 except that the kit of Example 44 was used instead of the kit of Example 1.

比較例12
実施例1のキットの代わりに比較例11のキットを用いる以外は実施例13の測定法と同様にして、日立7170形自動分析装置によりヒト血清30検体中のHDLコレステロールを測定した。
Comparative Example 12
HDL cholesterol in 30 samples of human serum was measured by Hitachi 7170 automatic analyzer in the same manner as in the measurement method of Example 13 except that the kit of Comparative Example 11 was used instead of the kit of Example 1.

比較例12、実施例45および実施例46
それぞれの測定と、前述のDCM法による測定との相関係数を第6表に示す。
Comparative Example 12, Example 45 and Example 46
Table 6 shows the correlation coefficient between each measurement and the above-described measurement by the DCM method.

Figure 0004796489
Figure 0004796489

第6表から、ポリアニオンおよび陰イオン性胆汁酸誘導体(ともに化合物B)を含有するキットを用いた測定において、化合物Aを共存させることにより、DCMとの相関関係がより良好となることが判明した。また、実施例17と実施例45との比較、および、実施例19と実施例46との比較から、アルキルアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物(化合物A)にポリアニオンおよび陰イオン性胆汁酸誘導体(2つの化合物B)を共存させることにより、また、ポリオキシエチレンベンジル−アルキル四級アンモニウム塩(化合物A)にポリアニオンおよび陰イオン性胆汁酸誘導体(2つの化合物B)を共存させることにより、DCM法による測定との相関関係がより良好となることが判明した。
[化合物A、2つの化合物B(ポリアニオンおよび陰イオン性胆汁酸誘導体)およびアルブミンの併用例]
From Table 6, it was found that in the measurement using a kit containing a polyanion and an anionic bile acid derivative (both compounds B), the presence of compound A makes the correlation with DCM better. . Further, from the comparison between Example 17 and Example 45 and the comparison between Example 19 and Example 46, polyanion and anionic bile acid derivative were added to the alkylamine polyoxyethylene polyoxypropylene condensate (Compound A). (2 compounds B) by coexisting, and polyoxyethylenebenzyl-alkyl quaternary ammonium salt (compound A) by coexisting a polyanion and an anionic bile acid derivative (2 compounds B), DCM It was found that the correlation with the measurement by the method was better.
[Combination example of compound A, two compounds B (polyanion and anionic bile acid derivative) and albumin]

以下の第一試薬(試薬C)および第二試薬(試薬c)からなるHDLコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬(試薬C)
HEPES(pH7.5) 10mmol/L
EMSE 0.3g/L
デキストラン硫酸 1.0g/L
BSA 1.0g/L
第二試薬(試薬c
HEPES(pH7.0) 10mmol/L
4−アミノアンチピリン 0.3g/L
ペルオキシダーゼ 20kU/L
コール酸ナトリウム 6.0g/L
化学修飾LPL311 0.2kU/L
COO321 5.0kU/L
C16EO30PO20 0.2g/L
An HDL cholesterol measurement kit comprising the following first reagent (reagent C) and second reagent (reagent c 1 ) was prepared.
First reagent (reagent C)
HEPES (pH 7.5) 10 mmol / L
EMSE 0.3g / L
Dextran sulfate 1.0 g / L
BSA 1.0g / L
Second reagent (reagent c 1 )
HEPES (pH 7.0) 10 mmol / L
4-Aminoantipyrine 0.3g / L
Peroxidase 20 kU / L
Sodium cholate 6.0 g / L
Chemical modification LPL311 0.2 kU / L
COO321 5.0 kU / L
C16EO30PO20 0.2g / L

比較例13
以下の第一試薬(試薬C)および第二試薬(試薬c)からなるHDLコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬(試薬C)
HEPES(pH7.5) 10mmol/L
EMSE 0.3g/L
デキストラン硫酸 1.0g/L
BSA 1.0g/L
第二試薬(試薬c)
HEPES(pH7.0) 10mmol/L
4−アミノアンチピリン 0.3g/L
ペルオキシダーゼ 20kU/L
コール酸ナトリウム 6.0g/L
化学修飾LPL311 0.2kU/L
COO321 5.0kU/L
Comparative Example 13
An HDL cholesterol measurement kit comprising the following first reagent (reagent C) and second reagent (reagent c) was prepared.
First reagent (reagent C)
HEPES (pH 7.5) 10 mmol / L
EMSE 0.3g / L
Dextran sulfate 1.0 g / L
BSA 1.0g / L
Second reagent (reagent c)
HEPES (pH 7.0) 10 mmol / L
4-Aminoantipyrine 0.3g / L
Peroxidase 20 kU / L
Sodium cholate 6.0 g / L
Chemical modification LPL311 0.2 kU / L
COO321 5.0 kU / L

実施例1のキットの代わりに実施例47のキットを用いる以外は実施例13の測定法と同様にして、日立7170形自動分析装置によりヒト血清30検体中のHDLコレステロールを測定した。  HDL cholesterol in 30 samples of human serum was measured by Hitachi 7170 automatic analyzer in the same manner as in the measurement method of Example 13 except that the kit of Example 47 was used instead of the kit of Example 1.

比較例14
実施例1のキットの代わりに比較例13のキットを用いる以外は実施例13の測定法と同様にして、日立7170形自動分析装置によりヒト血清30検体中のHDLコレステロールを測定した。
Comparative Example 14
HDL cholesterol in 30 samples of human serum was measured with a Hitachi 7170 automatic analyzer in the same manner as the measurement method of Example 13 except that the kit of Comparative Example 13 was used instead of the kit of Example 1.

比較例14および実施例48それぞれの測定と、前述のDCM法による測定との相関係数を第7表に示す。  Table 7 shows the correlation coefficients between the measurements of Comparative Example 14 and Example 48 and the measurement by the DCM method described above.

Figure 0004796489
Figure 0004796489

第7表から、ポリアニオン、陰イオン性胆汁酸誘導体およびアルブミン(いずれも化合物B)を含有するキットを用いた測定において、化合物A(アルキルアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物)を共存させることにより、DCMとの相関関係がより良好となることが判明した。また、実施例17と実施例48との比較から、アルキルアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物(化合物A)にポリアニオン、陰イオン性胆汁酸誘導体(2つの化合物B)およびアルブミンを共存させることにより、DCM法による測定との相関関係がより良好となることが判明した。
[化合物Aおよび化合物B(エチレンジアミンテトラポリオキシアルキレン)の併用例]
From Table 7, in the measurement using a kit containing a polyanion, an anionic bile acid derivative and albumin (all of which are compound B), compound A (alkylamine polyoxyethylene polyoxypropylene condensate) was allowed to coexist. The correlation with DCM was found to be better. Further, from the comparison between Example 17 and Example 48, the polyamine, the anionic bile acid derivative (two compounds B) and albumin were allowed to coexist in the alkylamine polyoxyethylene polyoxypropylene condensate (compound A). The correlation with the measurement by the DCM method was found to be better.
[Combination example of Compound A and Compound B (ethylenediaminetetrapolyoxyalkylene)]

以下の第一試薬(試薬A)および第二試薬(試薬e)からなるHDLコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬(試薬A)
HEPES(pH7.5) 10mmol/L
EMSE 0.3g/L
第二試薬(試薬e
HEPES(pH7.0) 10mmol/L
4−アミノアンチピリン 0.3g/L
ペルオキシダーゼ 20kU/L
アデカプルロニックTR704 5.0g/L
化学修飾LPL311 0.2kU/L
COO321 5.0kU/L
BLAUNON SAP3010 0.5g/L
A kit for measuring HDL cholesterol comprising the following first reagent (reagent A) and second reagent (reagent e 1 ) was prepared.
First reagent (Reagent A)
HEPES (pH 7.5) 10 mmol / L
EMSE 0.3g / L
Second reagent (reagent e 1 )
HEPES (pH 7.0) 10 mmol / L
4-Aminoantipyrine 0.3g / L
Peroxidase 20 kU / L
Adeka Pluronic TR704 5.0g / L
Chemical modification LPL311 0.2 kU / L
COO321 5.0 kU / L
BLAUNON SAP3010 0.5g / L

以下の第一試薬(試薬A)および第二試薬(試薬e)からなるHDLコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬(試薬A)
HEPES(pH7.5) 10mmol/L
EMSE 0.3g/L
第二試薬(試薬e
HEPES(pH7.0) 10mmol/L
4−アミノアンチピリン 0.3g/L
ペルオキシダーゼ 20kU/L
アデカプルロニックTR704 5.0g/L
化学修飾LPL311 0.2kU/L
COO321 5.0kU/L
ミグノールPA−30 0.5g/L
A kit for measuring HDL cholesterol comprising the following first reagent (reagent A) and second reagent (reagent e 2 ) was prepared.
First reagent (Reagent A)
HEPES (pH 7.5) 10 mmol / L
EMSE 0.3g / L
Second reagent (reagent e 2 )
HEPES (pH 7.0) 10 mmol / L
4-Aminoantipyrine 0.3g / L
Peroxidase 20 kU / L
Adeka Pluronic TR704 5.0g / L
Chemical modification LPL311 0.2 kU / L
COO321 5.0 kU / L
Mignol PA-30 0.5g / L

以下の第一試薬(試薬A)および第二試薬(試薬e)からなるHDLコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬(試薬A)
HEPES(pH7.5) 10mmol/L
EMSE 0.3g/L
第二試薬(試薬e
HEPES(pH7.0) 10mmol/L
4−アミノアンチピリン 0.3g/L
ペルオキシダーゼ 20kU/L
アデカプルロニックTR704 5.0g/L
化学修飾LPL311 0.2kU/L
COO321 5.0kU/L
ユニセーフA−LY 0.5g/L
A kit for measuring HDL cholesterol comprising the following first reagent (reagent A) and second reagent (reagent e 3 ) was prepared.
First reagent (Reagent A)
HEPES (pH 7.5) 10 mmol / L
EMSE 0.3g / L
Second reagent (reagent e 3 )
HEPES (pH 7.0) 10 mmol / L
4-Aminoantipyrine 0.3g / L
Peroxidase 20 kU / L
Adeka Pluronic TR704 5.0g / L
Chemical modification LPL311 0.2 kU / L
COO321 5.0 kU / L
Unisafe A-LY 0.5g / L

比較例15
以下の第一試薬(試薬A)および第二試薬(試薬e)からなるHDLコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬(試薬A)
HEPES(pH7.5) 10mmol/L
EMSE 0.3g/L
第二試薬(試薬e)
HEPES(pH7.0) 10mmol/L
4−アミノアンチピリン 0.3g/L
ペルオキシダーゼ 20kU/L
アデカプルロニックTR704 5.0g/L
化学修飾LPL311 0.2kU/L
COO321 5.0kU/L
Comparative Example 15
An HDL cholesterol measurement kit comprising the following first reagent (reagent A) and second reagent (reagent e) was prepared.
First reagent (Reagent A)
HEPES (pH 7.5) 10 mmol / L
EMSE 0.3g / L
Second reagent (reagent e)
HEPES (pH 7.0) 10 mmol / L
4-Aminoantipyrine 0.3g / L
Peroxidase 20 kU / L
Adeka Pluronic TR704 5.0g / L
Chemical modification LPL311 0.2 kU / L
COO321 5.0 kU / L

実施例1のキットの代わりに実施例49のキットを用いる以外は実施例13の測定法と同様にして、日立7170形自動分析装置によりヒト血清30検体中のHDLコレステロールを測定した。  HDL cholesterol in 30 samples of human serum was measured by Hitachi 7170 automatic analyzer in the same manner as in the measurement method of Example 13 except that the kit of Example 49 was used instead of the kit of Example 1.

実施例1のキットの代わりに実施例50のキットを用いる以外は実施例13の測定法と同様にして、日立7170形自動分析装置によりヒト血清30検体中のHDLコレステロールを測定した。  HDL cholesterol in 30 samples of human serum was measured with a Hitachi 7170 automatic analyzer in the same manner as in the measurement method of Example 13, except that the kit of Example 50 was used instead of the kit of Example 1.

実施例1のキットの代わりに実施例51のキットを用いる以外は実施例13の測定法と同様にして、日立7170形自動分析装置によりヒト血清30検体中のHDLコレステロールを測定した。  HDL cholesterol in 30 samples of human serum was measured by Hitachi 7170 automatic analyzer in the same manner as in the measurement method of Example 13 except that the kit of Example 51 was used instead of the kit of Example 1.

比較例16
実施例1のキットの代わりに比較例15のキットを用いる以外は実施例13の測定法と同様にして、日立7170形自動分析装置によりヒト血清30検体中のHDLコレステロールを測定した。
Comparative Example 16
HDL cholesterol in 30 samples of human serum was measured with a Hitachi 7170 automatic analyzer in the same manner as in the measurement method of Example 13, except that the kit of Comparative Example 15 was used instead of the kit of Example 1.

比較例16、実施例52、実施例53
および実施例54それぞれの測定と、前述のDCM法による測定との相関係数を第8表に示す。
Comparative Example 16, Example 52, Example 53
Table 8 shows the correlation coefficients between the measurements of Example 54 and the measurement by the DCM method described above.

Figure 0004796489
Figure 0004796489

第8表から、エチレンジアミンテトラポリオキシアルキレン(化合物B)を含有するキットを用いた測定において、化合物A(アルキルアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物、ポリオキシエチレンアルキルアミンサルフェートまたはアルキルアミンオキシド)を共存させることにより、DCMとの相関関係がより良好となることが判明した。また、実施例14と実施例52との比較から、アルキルアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物(化合物A)にエチレンジアミンテトラポリオキシアルキレンを共存させることにより、DCM法による測定との相関係数が向上することが判明した。実施例20と実施例53との比較から、ポリオキシエチレンアルキルアミンサルフェート(化合物A)にエチレンジアミンテトラポリオキシアルキレン(化合物B)を共存させることにより、DCM法による測定との相関係数が向上することが判明した。また、実施例53と実施例54との比較から、ポリオキシエチレンアルキルアミンサルフェートの代わりにアルキルアミンオキシド(化合物A)を用いて、エチレンジアミンテトラポリオキシアルキレン(化合物B)を共存させることにより、DCM法による測定との相関関係がより良好となることが判明した。
[化合物Aおよび2つの化合物B(ポリアニオンおよびエチレンジアミンテトラポリオキシアルキレン)の併用例]
From Table 8, compound A (alkylamine polyoxyethylene polyoxypropylene condensate, polyoxyethylene alkylamine sulfate or alkylamine oxide) was measured in a measurement using a kit containing ethylenediaminetetrapolyoxyalkylene (compound B). By coexistence, it was found that the correlation with DCM becomes better. Further, from the comparison between Example 14 and Example 52, the presence of ethylenediaminetetrapolyoxyalkylene in the alkylamine polyoxyethylene polyoxypropylene condensate (Compound A) gives a correlation coefficient with the measurement by the DCM method. It turned out to improve. From a comparison between Example 20 and Example 53, the presence of ethylenediaminetetrapolyoxyalkylene (Compound B) in the polyoxyethylene alkylamine sulfate (Compound A) improves the correlation coefficient with the measurement by the DCM method. It has been found. Further, from the comparison between Example 53 and Example 54, DCM was obtained by using ethylenediaminetetrapolyoxyalkylene (Compound B) together with alkylamine oxide (Compound A) instead of polyoxyethylene alkylamine sulfate. It was found that the correlation with the measurement by the method was better.
[Combination example of compound A and two compounds B (polyanion and ethylenediaminetetrapolyoxyalkylene)]

以下の第一試薬(試薬B)および第二試薬(試薬e)からなるHDLコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬(試薬B)
HEPES(pH7.5) 10mmol/L
EMSE 0.3g/L
デキストラン硫酸ナトリウム 1.0g/L
第二試薬(試薬e
HEPES(pH7.0) 10mmol/L
4−アミノアンチピリン 0.3g/L
ペルオキシダーゼ 20kU/L
アデカプルロニックTR704 5.0g/L
化学修飾LPL311 0.2kU/L
COO321 5.0kU/L
BLAUNON SAP3010 0.5g/L
A kit for measuring HDL cholesterol comprising the following first reagent (reagent B) and second reagent (reagent e 1 ) was prepared.
First reagent (Reagent B)
HEPES (pH 7.5) 10 mmol / L
EMSE 0.3g / L
Dextran sulfate sodium 1.0 g / L
Second reagent (reagent e 1 )
HEPES (pH 7.0) 10 mmol / L
4-Aminoantipyrine 0.3g / L
Peroxidase 20 kU / L
Adeka Pluronic TR704 5.0g / L
Chemical modification LPL311 0.2 kU / L
COO321 5.0 kU / L
BLAUNON SAP3010 0.5g / L

以下の第一試薬(試薬B)および第二試薬(試薬e)からなるHDLコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬(試薬B)
HEPES(pH7.5) 10mmol/L
EMSE 0.3g/L
デキストラン硫酸ナトリウム 1.0g/L
第二試薬(試薬e
HEPES(pH7.0) 10mmol/L
4−アミノアンチピリン 0.3g/L
ペルオキシダーゼ 20kU/L
アデカプルロニックTR704 5.0g/L
化学修飾LPL311 0.2kU/L
COO321 5.0kU/L
ミグノールPA−30 0.5g/L
A HDL cholesterol measurement kit comprising the following first reagent (reagent B) and second reagent (reagent e 2 ) was prepared.
First reagent (Reagent B)
HEPES (pH 7.5) 10 mmol / L
EMSE 0.3g / L
Dextran sulfate sodium 1.0 g / L
Second reagent (reagent e 2 )
HEPES (pH 7.0) 10 mmol / L
4-Aminoantipyrine 0.3g / L
Peroxidase 20 kU / L
Adeka Pluronic TR704 5.0g / L
Chemical modification LPL311 0.2 kU / L
COO321 5.0 kU / L
Mignol PA-30 0.5g / L

以下の第一試薬(試薬B)および第二試薬(試薬e)からなるHDLコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬(試薬B)
HEPES(pH7.5) 10mmol/L
EMSE 0.3g/L
デキストラン硫酸ナトリウム 1.0g/L
第二試薬(試薬e
HEPES(pH7.0) 10mmol/L
4−アミノアンチピリン 0.3g/L
ペルオキシダーゼ 20kU/L
アデカプルロニックTR704 5.0g/L
化学修飾LPL311 0.2kU/L
COO321 5.0kU/L
ユニセーフA−LY 0.5g/L
A HDL cholesterol measurement kit comprising the following first reagent (reagent B) and second reagent (reagent e 3 ) was prepared.
First reagent (Reagent B)
HEPES (pH 7.5) 10 mmol / L
EMSE 0.3g / L
Dextran sulfate sodium 1.0 g / L
Second reagent (reagent e 3 )
HEPES (pH 7.0) 10 mmol / L
4-Aminoantipyrine 0.3g / L
Peroxidase 20 kU / L
Adeka Pluronic TR704 5.0g / L
Chemical modification LPL311 0.2 kU / L
COO321 5.0 kU / L
Unisafe A-LY 0.5g / L

以下の第一試薬(試薬B)および第二試薬(試薬e)からなるHDLコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬(試薬B)
HEPES(pH7.5) 10mmol/L
EMSE 0.3g/L
デキストラン硫酸ナトリウム 1.0g/L
第二試薬(試薬e
HEPES(pH7.0) 10mmol/L
4−アミノアンチピリン 0.3g/L
ペルオキシダーゼ 20kU/L
アデカプルロニックTR704 5.0g/L
化学修飾LPL311 0.2kU/L
COO321 5.0kU/L
ビスノールSK 0.3g/L
A HDL cholesterol measurement kit comprising the following first reagent (reagent B) and second reagent (reagent e 4 ) was prepared.
First reagent (Reagent B)
HEPES (pH 7.5) 10 mmol / L
EMSE 0.3g / L
Dextran sulfate sodium 1.0 g / L
Second reagent (reagent e 4 )
HEPES (pH 7.0) 10 mmol / L
4-Aminoantipyrine 0.3g / L
Peroxidase 20 kU / L
Adeka Pluronic TR704 5.0g / L
Chemical modification LPL311 0.2 kU / L
COO321 5.0 kU / L
Bisnoll SK 0.3g / L

以下の第一試薬(試薬B)および第二試薬(試薬e)からなるHDLコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬(試薬B)
HEPES(pH7.5) 10mmol/L
EMSE 0.3g/L
デキストラン硫酸ナトリウム 1.0g/L
第二試薬(試薬e
HEPES(pH7.0) 10mmol/L
4−アミノアンチピリン 0.3g/L
ペルオキシダーゼ 20kU/L
アデカプルロニックTR704 5.0g/L
化学修飾LPL311 0.2kU/L
COO321 5.0kU/L
ナイミッドMT−215 0.3g/L
A HDL cholesterol measurement kit comprising the following first reagent (reagent B) and second reagent (reagent e 5 ) was prepared.
First reagent (Reagent B)
HEPES (pH 7.5) 10 mmol / L
EMSE 0.3g / L
Dextran sulfate sodium 1.0 g / L
Second reagent (reagent e 5 )
HEPES (pH 7.0) 10 mmol / L
4-Aminoantipyrine 0.3g / L
Peroxidase 20 kU / L
Adeka Pluronic TR704 5.0g / L
Chemical modification LPL311 0.2 kU / L
COO321 5.0 kU / L
Nymid MT-215 0.3g / L

比較例17
以下の第一試薬(試薬B)および第二試薬(試薬e)からなるHDLコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬(試薬B)
HEPES(pH7.5) 10mmol/L
EMSE 0.3g/L
デキストラン硫酸ナトリウム 1.0g/L
第二試薬(試薬e)
HEPES(pH7.0) 10mmol/L
4−アミノアンチピリン 0.3g/L
ペルオキシダーゼ 20kU/L
アデカプルロニックTR704 5.0g/L
化学修飾LPL311 0.2kU/L
COO321 5.0kU/L
Comparative Example 17
A HDL cholesterol measurement kit comprising the following first reagent (reagent B) and second reagent (reagent e) was prepared.
First reagent (Reagent B)
HEPES (pH 7.5) 10 mmol / L
EMSE 0.3g / L
Dextran sulfate sodium 1.0 g / L
Second reagent (reagent e)
HEPES (pH 7.0) 10 mmol / L
4-Aminoantipyrine 0.3g / L
Peroxidase 20 kU / L
Adeka Pluronic TR704 5.0g / L
Chemical modification LPL311 0.2 kU / L
COO321 5.0 kU / L

実施例1のキットの代わりに実施例55のキットを用いる以外は実施例13の測定法と同様にして、日立7170形自動分析装置によりヒト血清30検体中のHDLコレステロールを測定した。  HDL cholesterol in 30 samples of human serum was measured by Hitachi 7170 automatic analyzer in the same manner as in the measurement method of Example 13 except that the kit of Example 55 was used instead of the kit of Example 1.

実施例1のキットの代わりに実施例56のキットを用いる以外は実施例13の測定法と同様にして、日立7170形自動分析装置によりヒト血清30検体中のHDLコレステロールを測定した。  HDL cholesterol in 30 samples of human serum was measured by Hitachi 7170 automatic analyzer in the same manner as in the measurement method of Example 13 except that the kit of Example 56 was used instead of the kit of Example 1.

実施例1のキットの代わりに実施例57のキットを用いる以外は実施例13の測定法と同様にして、日立7170形自動分析装置によりヒト血清30検体中のHDLコレステロールを測定した。  HDL cholesterol in 30 samples of human serum was measured by Hitachi 7170 automatic analyzer in the same manner as in the measurement method of Example 13 except that the kit of Example 57 was used instead of the kit of Example 1.

実施例1のキットの代わりに実施例58のキットを用いる以外は実施例13の測定法と同様にして、日立7170形自動分析装置によりヒト血清30検体中のHDLコレステロールを測定した。  HDL cholesterol in 30 samples of human serum was measured with a Hitachi 7170 automatic analyzer in the same manner as in the measurement method of Example 13, except that the kit of Example 58 was used instead of the kit of Example 1.

実施例1のキットの代わりに実施例59のキットを用いる以外は実施例13の測定法と同様にして、日立7170形自動分析装置によりヒト血清30検体中のHDLコレステロールを測定した。  HDL cholesterol in 30 samples of human serum was measured with a Hitachi 7170 automatic analyzer in the same manner as in the measurement method of Example 13, except that the kit of Example 59 was used instead of the kit of Example 1.

比較例18
実施例1のキットの代わりに比較例17のキットを用いる以外は実施例13の測定法と同様にして、日立7170形自動分析装置によりヒト血清30検体中のHDLコレステロールを測定した。
Comparative Example 18
HDL cholesterol in 30 samples of human serum was measured by Hitachi 7170 automatic analyzer in the same manner as in the measurement method of Example 13 except that the kit of Comparative Example 17 was used instead of the kit of Example 1.

比較例18および実施例60〜64
それぞれの測定と前述のDCM法による測定との相関係数を第9表に示す。
Comparative Example 18 and Examples 60-64
Table 9 shows the correlation coefficient between each measurement and the above-described measurement by the DCM method.

Figure 0004796489
Figure 0004796489

第9表から、ポリアニオンとエチレンジアミンテトラポリオキシアルキレン(ともに化合物B)とを含有するキットを用いた測定において、化合物A(アルキルアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物、ポリオキシエチレンアルキルアミンサルフェート、アルキルアミンオキシド、ポリオキシエチレンベンジル−アルキル四級アンモニウム塩またはポリオキシエチレン酸アミド)を共存させることにより、DCMとの相関関係がより良好となることが判明した。また、実施例14と実施例60との比較から、アルキルアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物(化合物A)にポリアニオンおよびエチレンジアミンテトラポリオキシアルキレン(2つの化合物B)を共存させることにより、DCM法による測定との相関関係がより良好となることが判明した。実施例20と実施例61との比較から、ポリオキシエチレンアルキルアミンサルフェート(化合物A)にポリアニオンおよびエチレンジアミンテトラポリオキシアルキレン(2つの化合物B)を共存させることにより、DCM法による測定との相関関係がより良好となることが判明した。実施例61と実施例62との比較から、化合物Aとしてポリオキシエチレンアルキルアミンサルフェートの代わりにアルキルアミンオキシドを用いた場合でも、DCM法による測定との相関関係がより良好となることが判明した。  From Table 9, compound A (alkylamine polyoxyethylene polyoxypropylene condensate, polyoxyethylene alkylamine sulfate, alkyl, in the measurement using a kit containing polyanion and ethylenediaminetetrapolyoxyalkylene (both compounds B) The presence of amine oxide, polyoxyethylene benzyl-alkyl quaternary ammonium salt or polyoxyethylene acid amide) has been found to provide better correlation with DCM. Further, from the comparison between Example 14 and Example 60, a DCM method was obtained by allowing a polyanion and ethylenediaminetetrapolyoxyalkylene (two compounds B) to coexist in an alkylamine polyoxyethylene polyoxypropylene condensate (compound A). It has been found that the correlation with the measurement by is better. From the comparison between Example 20 and Example 61, the polyoxyethylene alkylamine sulfate (compound A) was allowed to coexist with the polyanion and ethylenediaminetetrapolyoxyalkylene (two compounds B), thereby correlating with the measurement by the DCM method. Was found to be better. From a comparison between Example 61 and Example 62, it was found that even when alkylamine oxide was used as compound A instead of polyoxyethylene alkylamine sulfate, the correlation with the measurement by the DCM method was better. .

さらに、実施例19と実施例63との比較から、ポリオキシエチレンベンジル−アルキル四級アンモニウム塩(化合物A)にポリアニオンおよびエチレンジアミンテトラポリオキシアルキレン(2つの化合物B)を共存させることにより、DCM法による測定との相関関係がより良好となることが判明した。また、実施例63と実施例64との比較から、化合物Aとしてポリオキシエチレンベンジル−アルキル四級アンモニウム塩の代わりにポリオキシエチレン酸アミドを用いた場合でも、DCM法による測定との相関関係がより良好となることが判明した。
[化合物A、3つの化合物B(ポリアニオン、ポリオキシエチレンアルキルアミンおよび胆汁酸誘導体)およびアルブミンの併用例]
Further, from the comparison between Example 19 and Example 63, the polyoxyethylene benzyl-alkyl quaternary ammonium salt (Compound A) was allowed to coexist with a polyanion and ethylenediaminetetrapolyoxyalkylene (two compounds B), whereby the DCM method It has been found that the correlation with the measurement by is better. Further, from the comparison between Example 63 and Example 64, even when polyoxyethylene acid amide was used instead of polyoxyethylene benzyl-alkyl quaternary ammonium salt as compound A, there was a correlation with measurement by the DCM method. It turned out to be better.
[Combination example of compound A, three compounds B (polyanion, polyoxyethylene alkylamine and bile acid derivative) and albumin]

以下の第一試薬(試薬D)および第二試薬(試薬f)からなるHDLコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬(試薬D)
HEPES(pH7.5) 10mmol/L
EMSE 0.3g/L
硫酸ナトリウム 5.0g/L
デキストラン硫酸ナトリウム 1.0g/L
BSA 2.0g/L
第二試薬(試薬f
HEPES(pH7.0) 10mmol/L
4−アミノアンチピリン 0.3g/L
ペルオキシダーゼ 20kU/L
ナイミーンL207 0.3g/L
コール酸ナトリウム 1.5g/L
化学修飾LPL311 0.1kU/L
COO321 5.0kU/L
BLAUNON SAP3004 0.15g/L
An HDL cholesterol measurement kit comprising the following first reagent (reagent D) and second reagent (reagent f 1 ) was prepared.
First reagent (Reagent D)
HEPES (pH 7.5) 10 mmol / L
EMSE 0.3g / L
Sodium sulfate 5.0 g / L
Dextran sulfate sodium 1.0 g / L
BSA 2.0g / L
Second reagent (reagent f 1 )
HEPES (pH 7.0) 10 mmol / L
4-Aminoantipyrine 0.3g / L
Peroxidase 20 kU / L
Naimine L207 0.3g / L
Sodium cholate 1.5g / L
Chemical modification LPL311 0.1 kU / L
COO321 5.0 kU / L
BLAUNON SAP3004 0.15g / L

以下の第一試薬(試薬D)および第二試薬(試薬f)からなるHDLコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬(試薬D)
HEPES(pH7.5) 10mmol/L
EMSE 0.3g/L
硫酸ナトリウム 5.0g/L
デキストラン硫酸ナトリウム 1.0g/L
BSA 2.0g/L
第二試薬(試薬f
HEPES(pH7.0) 10mmol/L
4−アミノアンチピリン 0.3g/L
ペルオキシダーゼ 20kU/L
ナイミーンL207 0.3g/L
コール酸ナトリウム 1.5g/L
化学修飾LPL311 0.1kU/L
COO321 5.0kU/L
C16EO30PO10 0.3g/L
A kit for measuring HDL cholesterol comprising the following first reagent (reagent D) and second reagent (reagent f 2 ) was prepared.
First reagent (Reagent D)
HEPES (pH 7.5) 10 mmol / L
EMSE 0.3g / L
Sodium sulfate 5.0 g / L
Dextran sulfate sodium 1.0 g / L
BSA 2.0g / L
Second reagent (reagent f 2 )
HEPES (pH 7.0) 10 mmol / L
4-Aminoantipyrine 0.3g / L
Peroxidase 20 kU / L
Naimine L207 0.3g / L
Sodium cholate 1.5g / L
Chemical modification LPL311 0.1 kU / L
COO321 5.0 kU / L
C16EO30PO10 0.3g / L

比較例19
以下の第一試薬(試薬D)および第二試薬(試薬f)からなるHDLコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬(試薬D)
HEPES(pH7.5) 10mmol/L
EMSE 0.3g/L
硫酸ナトリウム 5.0g/L
デキストラン硫酸ナトリウム 1.0g/L
BSA 2.0g/L
第二試薬(試薬f)
HEPES(pH7.0) 10mmol/L
4−アミノアンチピリン 0.3g/L
ペルオキシダーゼ 20kU/L
ナイミーンL207 0.3g/L
コール酸ナトリウム 1.5g/L
化学修飾LPL311 0.1kU/L
COO321 5.0kU/L
Comparative Example 19
An HDL cholesterol measurement kit comprising the following first reagent (reagent D) and second reagent (reagent f) was prepared.
First reagent (Reagent D)
HEPES (pH 7.5) 10 mmol / L
EMSE 0.3g / L
Sodium sulfate 5.0 g / L
Dextran sulfate sodium 1.0 g / L
BSA 2.0g / L
Second reagent (reagent f)
HEPES (pH 7.0) 10 mmol / L
4-Aminoantipyrine 0.3g / L
Peroxidase 20 kU / L
Naimine L207 0.3g / L
Sodium cholate 1.5g / L
Chemical modification LPL311 0.1 kU / L
COO321 5.0 kU / L

実施例1のキットの代わりに実施例65のキットを用いる以外は実施例13の測定法と同様にして、日立7170形自動分析装置によりヒト血清30検体中のHDLコレステロールを測定した。  HDL cholesterol in 30 samples of human serum was measured by Hitachi 7170 automatic analyzer in the same manner as in the measurement method of Example 13 except that the kit of Example 65 was used instead of the kit of Example 1.

実施例1のキットの代わりに実施例66のキットを用いる以外は実施例13の測定法と同様にして、日立7170形自動分析装置によりヒト血清30検体中のHDLコレステロールを測定した。  HDL cholesterol in 30 samples of human serum was measured by Hitachi 7170 automatic analyzer in the same manner as in the measurement method of Example 13 except that the kit of Example 66 was used instead of the kit of Example 1.

比較例20
実施例1のキットの代わりに比較例19のキットを用いる以外は実施例13の測定法と同様にして、日立7170形自動分析装置によりヒト血清30検体中のHDLコレステロールを測定した。
Comparative Example 20
HDL cholesterol in 30 samples of human serum was measured by Hitachi 7170 automatic analyzer in the same manner as in the measurement method of Example 13 except that the kit of Comparative Example 19 was used instead of the kit of Example 1.

比較例20、実施例67および68それぞれの測定と、前述のDCM法による測定との相関係数を第10表に示す。  Table 10 shows the correlation coefficients between the measurements of Comparative Example 20 and Examples 67 and 68 and the measurement by the DCM method described above.

Figure 0004796489
Figure 0004796489

第10表から、ポリアニオン、ポリオキシエチレンアルキルアミンおよび胆汁酸誘導体(いずれも化合物B)ならびにアルブミンを含有するキットを用いた測定において、化合物A(アルキルアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物)を共存させることにより、DCMとの相関関係がより良好となることが判明した。
[化合物A、3つの化合物B(ポリアニオン、ポリオキシエチレンアルキルアミンおよびエチレンジアミンテトラポリオキシアルキレン)およびアルブミンの併用例]
From Table 10, compound A (alkylamine polyoxyethylene polyoxypropylene condensate) coexisted in a measurement using a kit containing polyanion, polyoxyethylene alkylamine and bile acid derivative (both compound B) and albumin. As a result, it was found that the correlation with DCM was improved.
[Combination example of compound A, three compounds B (polyanion, polyoxyethylene alkylamine and ethylenediaminetetrapolyoxyalkylene) and albumin]

以下の第一試薬(試薬D)および第二試薬(試薬g)からなるHDLコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬(試薬D)
HEPES(pH7.5) 10mmol/L
EMSE 0.3g/L
硫酸ナトリウム 5.0g/L
デキストラン硫酸ナトリウム 1.0g/L
BSA 2.0g/L
第二試薬(試薬g
HEPES(pH7.0) 10mmol/L
4−アミノアンチピリン 0.3g/L
ペルオキシダーゼ 20kU/L
ナイミーンL207 0.3g/L
エチレンジアミンPO52EO60 1.0g/L
化学修飾LPL311 0.1kU/L
COO321 5.0kU/L
BLAUNON SAP3004 0.05g/L
An HDL cholesterol measurement kit comprising the following first reagent (reagent D) and second reagent (reagent g 1 ) was prepared.
First reagent (Reagent D)
HEPES (pH 7.5) 10 mmol / L
EMSE 0.3g / L
Sodium sulfate 5.0 g / L
Dextran sulfate sodium 1.0 g / L
BSA 2.0g / L
Second reagent (reagent g 1 )
HEPES (pH 7.0) 10 mmol / L
4-Aminoantipyrine 0.3g / L
Peroxidase 20 kU / L
Naimine L207 0.3g / L
Ethylenediamine PO52EO60 1.0 g / L
Chemical modification LPL311 0.1 kU / L
COO321 5.0 kU / L
BLAUNON SAP3004 0.05g / L

以下の第一試薬(試薬D)および第二試薬(試薬g)からなるHDLコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬(試薬D)
HEPES(pH7.5) 10mmol/L
EMSE 0.3g/L
硫酸ナトリウム 5.0g/L
デキストラン硫酸ナトリウム 1.0g/L
BSA 2.0g/L
第二試薬(試薬g
HEPES(pH7.0) 10mmol/L
4−アミノアンチピリン 0.3g/L
ペルオキシダーゼ 20kU/L
ナイミーンL207 0.3g/L
エチレンジアミンPO52EO60 1.0g/L
化学修飾LPL311 0.1kU/L
COO321 5.0kU/L
C16EO30PO10 0.2g/L
A HDL cholesterol measurement kit comprising the following first reagent (reagent D) and second reagent (reagent g 2 ) was prepared.
First reagent (Reagent D)
HEPES (pH 7.5) 10 mmol / L
EMSE 0.3g / L
Sodium sulfate 5.0 g / L
Dextran sulfate sodium 1.0 g / L
BSA 2.0g / L
Second reagent (reagent g 2 )
HEPES (pH 7.0) 10 mmol / L
4-Aminoantipyrine 0.3g / L
Peroxidase 20 kU / L
Naimine L207 0.3g / L
Ethylenediamine PO52EO60 1.0 g / L
Chemical modification LPL311 0.1 kU / L
COO321 5.0 kU / L
C16EO30PO10 0.2g / L

以下の第一試薬(試薬D)および第二試薬(試薬g)からなるHDLコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬(試薬D)
HEPES(pH7.5) 10mmol/L
EMSE 0.3g/L
硫酸ナトリウム 5.0g/L
デキストラン硫酸ナトリウム 1.0g/L
BSA 2.0g/L
第二試薬(試薬g
HEPES(pH7.0) 10mmol/L
4−アミノアンチピリン 0.3g/L
ペルオキシダーゼ 20kU/L
ナイミーンL207 0.3g/L
エチレンジアミンPO52EO60 1.0g/L
化学修飾LPL311 0.1kU/L
COO321 5.0kU/L
ナイミッドMT−215 0.06g/L
A kit for measuring HDL cholesterol comprising the following first reagent (reagent D) and second reagent (reagent g 3 ) was prepared.
First reagent (Reagent D)
HEPES (pH 7.5) 10 mmol / L
EMSE 0.3g / L
Sodium sulfate 5.0 g / L
Dextran sulfate sodium 1.0 g / L
BSA 2.0g / L
Second reagent (reagent g 3 )
HEPES (pH 7.0) 10 mmol / L
4-Aminoantipyrine 0.3g / L
Peroxidase 20 kU / L
Naimine L207 0.3g / L
Ethylenediamine PO52EO60 1.0 g / L
Chemical modification LPL311 0.1 kU / L
COO321 5.0 kU / L
Nymid MT-215 0.06g / L

以下の第一試薬(試薬D)および第二試薬(試薬g)からなるHDLコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬(試薬D)
HEPES(pH7.5) 10mmol/L
EMSE 0.3g/L
硫酸ナトリウム 5.0g/L
デキストラン硫酸ナトリウム 1.0g/L
BSA 2.0g/L
第二試薬(試薬g
HEPES(pH7.0) 10mmol/L
4−アミノアンチピリン 0.3g/L
ペルオキシダーゼ 20kU/L
ナイミーンL207 0.3g/L
エチレンジアミンPO52EO60 1.0g/L
化学修飾LPL311 0.1kU/L
COO321 5.0kU/L
ビスノールSK 0.1g/L
A HDL cholesterol measurement kit comprising the following first reagent (reagent D) and second reagent (reagent g 4 ) was prepared.
First reagent (Reagent D)
HEPES (pH 7.5) 10 mmol / L
EMSE 0.3g / L
Sodium sulfate 5.0 g / L
Dextran sulfate sodium 1.0 g / L
BSA 2.0g / L
Second reagent (reagent g 4 )
HEPES (pH 7.0) 10 mmol / L
4-Aminoantipyrine 0.3g / L
Peroxidase 20 kU / L
Naimine L207 0.3g / L
Ethylenediamine PO52EO60 1.0 g / L
Chemical modification LPL311 0.1 kU / L
COO321 5.0 kU / L
Bisnoll SK 0.1g / L

比較例21
以下の第一試薬(試薬D)および第二試薬(試薬g)からなるHDLコレステロール測定用キットを調製した。
第一試薬(試薬D)
HEPES(pH7.5) 10mmol/L
EMSE 0.3g/L
硫酸ナトリウム 5.0g/L
デキストラン硫酸ナトリウム 1.0g/L
BSA 2.0g/L
第二試薬(試薬g)
HEPES(pH7.0) 10mmol/L
4−アミノアンチピリン 0.3g/L
ペルオキシダーゼ 20kU/L
ナイミーンL207 0.3g/L
エチレンジアミンPO52EO60 1.0g/L
化学修飾LPL311 0.1kU/L
COO321 5.0kU/L
Comparative Example 21
A kit for measuring HDL cholesterol comprising the following first reagent (reagent D) and second reagent (reagent g) was prepared.
First reagent (Reagent D)
HEPES (pH 7.5) 10 mmol / L
EMSE 0.3g / L
Sodium sulfate 5.0 g / L
Dextran sulfate sodium 1.0 g / L
BSA 2.0g / L
Second reagent (reagent g)
HEPES (pH 7.0) 10 mmol / L
4-Aminoantipyrine 0.3g / L
Peroxidase 20 kU / L
Naimine L207 0.3g / L
Ethylenediamine PO52EO60 1.0 g / L
Chemical modification LPL311 0.1 kU / L
COO321 5.0 kU / L

実施例1のキットの代わりに実施例69のキットを用いる以外は実施例13の測定法と同様にして、日立7170形自動分析装置によりヒト血清30検体中のHDLコレステロールを測定した。  HDL cholesterol in 30 samples of human serum was measured by Hitachi 7170 automatic analyzer in the same manner as in the measurement method of Example 13 except that the kit of Example 69 was used instead of the kit of Example 1.

実施例1のキットの代わりに実施例70のキットを用いる以外は実施例13の測定法と同様にして、日立7170形自動分析装置によりヒト血清30検体中のHDLコレステロールを測定した。  HDL cholesterol in 30 samples of human serum was measured by Hitachi 7170 automatic analyzer in the same manner as in the measurement method of Example 13, except that the kit of Example 70 was used instead of the kit of Example 1.

実施例1のキットの代わりに実施例71のキットを用いる以外は実施例13の測定法と同様にして、日立7170形自動分析装置によりヒト血清30検体中のHDLコレステロールを測定した。  HDL cholesterol in 30 samples of human serum was measured with a Hitachi 7170 automatic analyzer in the same manner as in the measurement method of Example 13, except that the kit of Example 71 was used instead of the kit of Example 1.

実施例1のキットの代わりに実施例72のキットを用いる以外は実施例13の測定法と同様にして、日立7170形自動分析装置によりヒト血清30検体中のHDLコレステロールを測定した。  HDL cholesterol in 30 samples of human serum was measured with a Hitachi 7170 automatic analyzer in the same manner as in the measurement method of Example 13, except that the kit of Example 72 was used instead of the kit of Example 1.

比較例22
実施例1のキットの代わりに比較例21のキットを用いる以外は実施例13の測定法と同様にして、日立7170形自動分析装置によりヒト血清30検体中のHDLコレステロールを測定した。
Comparative Example 22
HDL cholesterol in 30 samples of human serum was measured by Hitachi 7170 automatic analyzer in the same manner as in the measurement method of Example 13 except that the kit of Comparative Example 21 was used instead of the kit of Example 1.

比較例22および実施例73〜76それぞれの測定と、前述のDCM法による測定との相関係数を第11表に示す。  Table 11 shows the correlation coefficients between the measurements of Comparative Example 22 and Examples 73 to 76 and the measurement by the DCM method described above.

Figure 0004796489
Figure 0004796489

第11表から、ポリアニオン、ポリオキシエチレンアルキルアミンおよび胆汁酸誘導体(いずれも化合物B)ならびにアルブミンを含有するキットを用いた測定において、化合物A(アルキルアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物、ポリオキシエチレンベンジル−アルキル四級アンモニウム塩またはポリオキシエチレン酸アミド)を共存させることにより、DCMとの相関関係がより良好となることが判明した。  From Table 11, compound A (alkylamine polyoxyethylene polyoxypropylene condensate, polyoxypropylene condensate, polyoxyethylene alkylamine and bile acid derivative (all compounds B) and a measurement using a kit containing albumin were used. Coexistence with ethylenebenzyl-alkyl quaternary ammonium salt or polyoxyethylene acid amide) was found to be better correlated with DCM.

本発明により、動脈硬化などの疾患の診断に有用なHDLコレステロールの簡便で、かつ、正確な測定方法、測定用試薬および測定用キットが提供される。The present invention provides a simple and accurate measurement method, measurement reagent, and measurement kit for HDL cholesterol useful for diagnosis of diseases such as arteriosclerosis.

Claims (19)

検体と、i)コレステロールエステル加水分解酵素およびコレステロール酸化酵素、または、ii)コレステロールエステル加水分解酵素、酸化型補酵素およびコレステロール脱水素酵素とを、アルキルアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物を含有する水性媒体中で反応させ過酸化水素または還元型補酵素を生成させること、および、生成した過酸化水素または還元型補酵素を測定することを含む検体中の高密度リポ蛋白中のコレステロールの測定方法。And the sample, i) cholesterol esterase and cholesterol oxidase or,, ii) cholesterol esterase, oxidized coenzyme and cholesterol dehydrogenase, containing alkylamine polyoxyethylene polyoxypropylene condensates Method for measuring cholesterol in high-density lipoprotein in a sample comprising reacting in an aqueous medium to produce hydrogen peroxide or reduced coenzyme, and measuring the produced hydrogen peroxide or reduced coenzyme . 水性媒体が、さらに、ポリアニオン、胆汁酸誘導体、エチレンジアミンテトラポリオキシアルキレン、ポリオキシエチレンアルキルアミンおよびポリオキシエチレンアルケニルアミンからなる群より選ばれる少なくとも一つの物質を含有する請求項1記載の方法。The method according to claim 1, wherein the aqueous medium further contains at least one substance selected from the group consisting of a polyanion, a bile acid derivative, ethylenediaminetetrapolyoxyalkylene, polyoxyethylenealkylamine, and polyoxyethylenealkenylamine. ポリアニオンが、デキストラン硫酸またはその塩である請求項2記載の方法。The method according to claim 2, wherein the polyanion is dextran sulfate or a salt thereof. 胆汁酸誘導体が、コール酸もしくはその塩、タウロコール酸もしくはその塩、グリココール酸もしくはその塩、リトコール酸もしくはその塩、デオキシコール酸もしくはその塩、ケノデオキシコール酸もしくはその塩、ウルソデオキシコール酸もしくはその塩、7−オキソリトコール酸もしくはその塩、12−オキソリトコール酸もしくはその塩、12−オキソケノデオキシコール酸もしくはその塩、7−オキソデオキシコール酸もしくはその塩、ヒオコール酸もしくはその塩、ヒオデオキシコール酸もしくはその塩、デヒドロコール酸もしくはその塩、一般式(I)
Figure 0004796489
[式中、Rは、3−(3−コラミドプロピル)ジメチルアンモニオ基であり、Rは、水素原子または水酸基である]で表される化合物、および一般式(II)
Figure 0004796489
(Xは、水素原子または水酸基を表し、RおよびRは、同一または異なって、置換もしくは非置換のアルキル基、または、置換もしくは非置換のアルカノイル基を表す)で表される化合物からなる群より選ばれる少なくとも一つの物質である請求項2または3記載の方法。
The bile acid derivative is cholic acid or a salt thereof, taurocholic acid or a salt thereof, glycocholic acid or a salt thereof, lithocholic acid or a salt thereof, deoxycholic acid or a salt thereof, chenodeoxycholic acid or a salt thereof, ursodeoxycholic acid or a salt thereof 7-oxolithocholic acid or its salt, 12-oxolithocholic acid or its salt, 12-oxochenodeoxycholic acid or its salt, 7-oxodeoxycholic acid or its salt, hyocholic acid or its salt, hyodeoxycholic acid or its Salt, dehydrocholic acid or salt thereof, general formula (I)
Figure 0004796489
Wherein R 1 is a 3- (3-colamidopropyl) dimethylammonio group and R 2 is a hydrogen atom or a hydroxyl group, and the general formula (II)
Figure 0004796489
(X represents a hydrogen atom or a hydroxyl group, and R 3 and R 4 are the same or different and each represents a substituted or unsubstituted alkyl group or a substituted or unsubstituted alkanoyl group). The method according to claim 2 or 3, which is at least one substance selected from the group.
水性媒体が、さらに、アルブミンを含有する請求項2〜4のいずれかに記載の方法。The method according to claim 2, wherein the aqueous medium further contains albumin. アルキルアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物、コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール酸化酵素ならびに過酸化水素測定用試薬を含有することを特徴とする高密度リポ蛋白中のコレステロール測定用試薬。Alkylamine polyoxyethylene polyoxypropylene condensate, cholesterol esterase, cholesterol measuring reagent in high density lipoprotein, characterized in that it contains cholesterol oxidase and a reagent for quantitatively determining hydrogen peroxide. アルキルアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物、コレステロールエステル加水分解酵素、コレステロール脱水素酵素ならびに酸化型補酵素を含有することを特徴とする高密度リポ蛋白中のコレステロール測定用試薬。Alkylamine polyoxyethylene polyoxypropylene condensate, cholesterol esterase, cholesterol dehydrogenase and cholesterol determination reagent in high density lipoprotein, which comprises an oxidized coenzyme. さらに、還元型補酵素測定用試薬を含有する請求項7記載の試薬。The reagent according to claim 7, further comprising a reducing coenzyme measurement reagent. さらに、ポリアニオン、胆汁酸誘導体、エチレンジアミンテトラポリオキシアルキレン、ポリオキシエチレンアルキルアミンおよびポリオキシエチレンアルケニルアミンからなる群より選ばれる少なくとも一つの物質を含有する請求項6〜8のいずれかに記載の試薬。The reagent according to any one of claims 6 to 8, further comprising at least one substance selected from the group consisting of a polyanion, a bile acid derivative, ethylenediaminetetrapolyoxyalkylene, polyoxyethylenealkylamine, and polyoxyethylenealkenylamine. . ポリアニオンが、デキストラン硫酸またはその塩である請求項9記載の試薬。The reagent according to claim 9, wherein the polyanion is dextran sulfate or a salt thereof. 胆汁酸誘導体が、コール酸もしくはその塩、タウロコール酸もしくはその塩、グリココール酸もしくはその塩、リトコール酸もしくはその塩、デオキシコール酸もしくはその塩、ケノデオキシコール酸もしくはその塩、ウルソデオキシコール酸もしくはその塩、7−オキソリトコール酸もしくはその塩、12−オキソリトコール酸もしくはその塩、12−オキソケノデオキシコール酸もしくはその塩、7−オキソデオキシコール酸もしくはその塩、ヒオコール酸もしくはその塩、ヒオデオキシコール酸もしくはその塩、デヒドロコール酸もしくはその塩、一般式(I)
Figure 0004796489
[式中、Rは、3−(3−コラミドプロピル)ジメチルアンモニオ基であり、Rは、水素原子または水酸基である]で表される化合物、および一般式(II)
Figure 0004796489
(Xは、水素原子または水酸基を表し、RおよびRは、同一または異なって、置換もしくは非置換のアルキル基、または、置換もしくは非置換のアルカノイル基を表す)で表される化合物からなる群より選ばれる少なくとも一つの物質である請求項9または10記載の試薬。
The bile acid derivative is cholic acid or a salt thereof, taurocholic acid or a salt thereof, glycocholic acid or a salt thereof, lithocholic acid or a salt thereof, deoxycholic acid or a salt thereof, chenodeoxycholic acid or a salt thereof, ursodeoxycholic acid or a salt thereof 7-oxolithocholic acid or its salt, 12-oxolithocholic acid or its salt, 12-oxochenodeoxycholic acid or its salt, 7-oxodeoxycholic acid or its salt, hyocholic acid or its salt, hyodeoxycholic acid or its Salt, dehydrocholic acid or a salt thereof, general formula (I)
Figure 0004796489
Wherein R 1 is a 3- (3-colamidopropyl) dimethylammonio group and R 2 is a hydrogen atom or a hydroxyl group, and the general formula (II)
Figure 0004796489
(X represents a hydrogen atom or a hydroxyl group, and R 3 and R 4 are the same or different and each represents a substituted or unsubstituted alkyl group or a substituted or unsubstituted alkanoyl group). The reagent according to claim 9 or 10, which is at least one substance selected from the group.
さらに、アルブミンを含有する請求項9〜11のいずれかに記載の試薬。Furthermore, the reagent in any one of Claims 9-11 containing albumin. 第一試薬および第二試薬を含有するキットであって、過酸化水素測定用試薬を第一試薬および第二試薬に含有し、コレステロール酸化酵素を第二試薬に含有し、アルキルアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物、および、コレステロールエステル加水分解酵素を、第一試薬、第二試薬のいずれかまたは両方に含有することを特徴とする高密度リポ蛋白中のコレステロール測定用キット。A kit containing a first reagent and a second reagent, wherein the reagent for measuring hydrogen peroxide is contained in the first reagent and the second reagent, the cholesterol oxidase is contained in the second reagent, and the alkylamine polyoxyethylene polymer oxypropylene condensate, and the cholesterol esterase, the first reagent, any or cholesterol measurement kit in high density lipoprotein, characterized in that it contains both the second reagent. 第一試薬および第二試薬を含有するキットであって、酸化型補酵素を第一試薬に含有し、コレステロール脱水素酵素を第二試薬に含有し、アルキルアミンポリオキシエチレンポリオキシプロピレン縮合物、および、コレステロールエステル加水分解酵素を、第一試薬、第二試薬のいずれかまたは両方に含有することを特徴とする高密度リポ蛋白中のコレステロール測定用キット。A kit containing a first reagent and second reagent, oxidized coenzyme contained in the first reagent, cholesterol dehydrogenase contained in the second reagent, alkylamine polyoxyethylene polyoxypropylene condensate, And a kit for measuring cholesterol in high-density lipoprotein, comprising cholesterol esterase in either or both of the first reagent and the second reagent. さらに、還元型補酵素測定用試薬を、第一試薬、第二試薬のいずれかまたは両方に含有する請求項14記載のキット。The kit according to claim 14, further comprising a reagent for measuring reduced coenzyme in one or both of the first reagent and the second reagent. さらに、ポリアニオン、胆汁酸誘導体、エチレンジアミンテトラポリオキシアルキレン、ポリオキシエチレンアルキルアミンおよびポリオキシエチレンアルケニルアミンからなる群より選ばれる少なくとも一つの物質を、第一試薬、第二試薬のいずれかまたは両方に含有する請求項13〜15のいずれかに記載のキット。Furthermore, at least one substance selected from the group consisting of a polyanion, a bile acid derivative, ethylenediaminetetrapolyoxyalkylene, polyoxyethylenealkylamine, and polyoxyethylenealkenylamine is used as one or both of the first reagent and the second reagent. The kit according to any one of claims 13 to 15, which is contained. ポリアニオンが、デキストラン硫酸またはその塩である請求項16記載のキット。The kit according to claim 16, wherein the polyanion is dextran sulfate or a salt thereof. 胆汁酸誘導体が、コール酸もしくはその塩、タウロコール酸もしくはその塩、グリココール酸もしくはその塩、リトコール酸もしくはその塩、デオキコール酸もしくはその塩、ケノデオキシコール酸もしくはその塩、ウルソデオキシコール酸もしくはその塩、7−オキソリトコール酸もしくはその塩、12−オキソリトコール酸もしくはその塩、12−オキソケノデオキシコール酸もしくはその塩、7−オキソデオキシコール酸もしくはその塩、ヒオコール酸もしくはその塩、ヒオデオキシコール酸もしくはその塩、デヒドロコール
酸もしくはその塩、一般式(I)
Figure 0004796489
[式中、Rは、3−(3−コラミドプロピル)ジメチルアンモニオ基であり、Rは、水素原子または水酸基である]で表される化合物、および一般式(II)
Figure 0004796489
(Xは、水素原子または水酸基を表し、RおよびRは、同一または異なって、置換もしくは非置換のアルキル基、または、置換もしくは非置換のアルカノイル基を表す)で表される化合物からなる群より選ばれる少なくとも一つの物質である請求項16または17記載のキット。
The bile acid derivative is cholic acid or a salt thereof, taurocholic acid or a salt thereof, glycocholic acid or a salt thereof, lithocholic acid or a salt thereof, deoxycholic acid or a salt thereof, chenodeoxycholic acid or a salt thereof, ursodeoxycholic acid or a salt thereof, 7-oxolithocholic acid or its salt, 12-oxolithocholic acid or its salt, 12-oxochenodeoxycholic acid or its salt, 7-oxodeoxycholic acid or its salt, hyocholic acid or its salt, hyodeoxycholic acid or its salt Dehydrocholic acid or a salt thereof, general formula (I)
Figure 0004796489
Wherein R 1 is a 3- (3-colamidopropyl) dimethylammonio group and R 2 is a hydrogen atom or a hydroxyl group, and the general formula (II)
Figure 0004796489
(X represents a hydrogen atom or a hydroxyl group, and R 3 and R 4 are the same or different and each represents a substituted or unsubstituted alkyl group or a substituted or unsubstituted alkanoyl group). The kit according to claim 16 or 17, which is at least one substance selected from the group.
さらに、アルブミンを第一試薬、第二試薬のいずれかまたは両方に含有する請求項16〜18のいずれかに記載のキット。Furthermore, the kit in any one of Claims 16-18 which contains albumin in any one or both of a 1st reagent and a 2nd reagent.
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