JP4675291B2 - 農作物、植物又は種子の生育向上方法及び土壌改良方法。 - Google Patents
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0.5%酵母エキス、1.5%ペプトン、0.3%尿素、0.2%K2HPO4、10%L−グルタミン酸一ナトリウム、8%グルコースを含有する培養用ブロス300L(pH6.8)を調製し、600Lの発酵槽に添加後、標準的な手続きに従って蒸気滅菌した。次に、枯草菌を植菌し、10%NaOH溶液でpHを調整した。37℃で96時間、連続発酵させたところ培養ブロスのγ−PGA含量が40g/Lに達した。この培養ブロスを15グラムずつ採取し、50mLキャップ付きサンプル瓶3本にそれぞれ移した。続いて、グリセロール系又はソルビトール系ポリグリシジルエーテル600μLを培養ブロス含有サンプル瓶それぞれに添加しキャップをした。各反応混合物を振とう式インキュベーター中で60℃、24時間反応させた。インキュベーターの回転速度は中程度とした。次に、反応後の混合物を50mLサンプル瓶から採取し、4℃で一晩、十分量の水に浸した。水和膨潤後にヒドロゲルが生成した。続いて、得られたヒドロゲルを80メッシュ金属製スクリーンで濾過し、水分を除いて乾燥させた。明らかに分かる自由水がない状態の膨潤ヒドロゲルの重量を測定記録した。次いで、このゲルを同一のビーカーを用いて4℃で一晩、十分量の水に再度浸した。同様の手続きを5日間連続で繰り返し、求めた吸水率を表2に示した。
重量測定済みの乾燥ヒドロゲルサンプル(W1)を過剰量の水に浸し、水中に放置し一晩膨潤させ、最大限に水和させた。80メッシュ金属製スクリーンを用いて水和ヒドロゲルを濾過し自由水を除去して、水分を除き乾燥させた。次いで、乾燥ヒドロゲルの重量を測定した(W2)。吸水量(W)は、差:W=W2−W1で表される。
吸水率:X=W/W1=(W2−W1)/W1
実験例1の方法に従って、5%γ−PGAナトリウム溶液のサンプルと、ポリグリシジル系架橋化合物としてジグリセロールポリグリシジルエーテルとを用いて別の実験を行った。サンプルのpHは表3に示すpHに調整した。得られた反応混合物を培養振とう器に設置した。培養振とう器の回転速度は中程度とした。反応は60℃で24時間連続して行った。反応終了後、吸水率を求め、結果を表3に示した。
実験例1の方法に従って、5%γ−PGAナトリウム溶液のサンプルとポリグリシジル系架橋化合物としてジグリセロールポリグリシジルエーテルとを用いて別の実験を行った。各溶液のpHは6.0に調整した。ジグリセロールポリグリシジルエーテルの使用量を変えて架橋反応を行った。反応は60℃で24時間連続して行った。各サンプルの各水和時間での吸水率を求め、その結果を表4に示した。
実験例1の方法に従って実験を行った。実験例1と同様にして枯草菌を植菌し培養物中に増殖させた。増殖時間を変えて培養ブロスサンプルを発酵槽から回収し本実験に使用した。ジグリセロールポリグリシジルエーテルを架橋剤として用いた。溶液のpHは6.0に調整した。反応は実験例1と同様、60℃で24時間連続して行った。各培養時間におけるサンプルの吸水率を表5に示した。
γ−ポリグルタミン酸カルシウムは、中性pH付近での高い溶解性と、次のpH滴定曲線(即ち、図5B)に示される良好なpH緩衝能(pH4〜7.0)とを有するため、種子、根及び植物の生育促進のための土壌調製に有利に使用できる。
γ−ポリグルタメート(Na+体)とγ−ポリグルタメートヒドロゲル(γ−ポリグルタメートNa+体から調製)について、農業関連病原菌の個体群の増殖又は増殖阻止に対する有効性試験を行った。試験は標準的なポテトデキストロース寒天法(PDAディスク)に従った。病原菌の生育に対する阻止能を測定した。阻止試験に使用したγ−ポリグルタメート(Na+体)とγ−ポリグルタメートヒドロゲル(γ−ポリグルタメートNa+体から調製)の濃度は1%〜5%とした。
選択した病原菌サンプルをプレーンポテトデキストロース寒天(PDA)ディスクの中央に植菌して、病原菌の種類に応じ3〜9日間インキュベート(25℃)してから使用した。ディスク一面に病原菌が増殖したPDAディスクから直径4mmのサンプルを滅菌済み4mm径パーフォレータで採取し、新しいPDAディスクの中央に載置して、スペアサンプルとしてインキュベーター(25℃)に保管した。
γ−ポリグルタメート(Na+体)サンプル3gを200mLエーレンマイヤーフラスコに加え、滅菌水27mLを添加し10倍希釈サンプル溶液を調製した。次いで、サンプル含有フラスコをレシプロ式振とう器で200rpm、30℃で1時間振とうした。続いて、フラスコを60℃の湯浴中でインキュベートし、温度が60℃に到達後、更に30分維持してから使用した。
新鮮な発酵ブロスサンプル50mLを滅菌フラスコに加え、滅菌水50mLを添加し十分混合した後、10000rpmで30分間超遠心分離して細胞を分離させた。次に、最上部の透明溶液を0.4μmマイクロ濾過膜に通し、これを50%発酵ブロス溶液として使用した。
病原性細菌を濃度107〜8cfu/mLに調製した。この調製物0.1mLをペトリディスクのNAに移し均一に塗布した。次に、各濃度の試験サンプルを含んだ直径1.0cmの濾紙2枚を載置した。実験は3連で行った。対照として、試験サンプルを含まない濾紙を用いた。NAの入ったペトリディスクを25℃で2〜4日間インキュベートし、増殖面積の直径を記録した。
面積1000M2(10M×100M)の屋外圃場を、幅20cm×高さ25cmのトラフ(trough)で2等分した(1区画:5M×100M)。各区画をロットA、ロットBとし、ロットAは対照用、ロットBは実験用に使用した。ダイアナスイカの幼苗(1週齢)を両区画に2本ずつ1m間隔で植えた。定期的に与える肥料と灌漑は標準的なプログラム及び手続きに従い、区画Aには、台湾・ファーティライザー・オーガニックNo.39(12−18−12)を使用し3回灌漑を行い、区画Bには、3.5%γ−PGA(Na+体)含有γ−PGA発酵ブロスを多く含む灌漑液を用い、0.75kg/500M2の供給速度で灌漑を行った。γ−PGA発酵ブロスは約300倍に希釈した。灌漑は、区画A、Bいずれも20日間隔で3回ずつ行い、自動制御送水ポンプを用いて同量の液を両区画に供給した。60日後、ダイアナスイカを収穫し評価した結果を表11に示した。
ダイアナスイカの代わりにアマトウガラシの幼苗(1週齢)を用いて、実験例7と同様にして屋外場での研究を行った。植込みから60日後にアマトウガラシを収穫し評価した結果を表12に示す。
ダイアナスイカの代わりに東洋で古くから知られている薬草のタイツリオウギを用いて、実験例7と同様の屋外農場研究を実施した。タイツリオウギの幼苗(1週齢)を使用した。まず、2%可溶性マグネシウム強化有機肥料チャンピオン(Champion)280(12−8−10)を用いて土壌を肥やした。幼苗を植え込んだ後、苗の両脇から20cm離れた場所に直径1.5インチ、深さ10cmの穴を2箇所開けた。この穴は、肥料と3.5%γ−PGA(Na+体)含有γ−PGA発酵用ブロスを追加する際に使用した。2個の穴は苗の両脇に対向するように設けた。幼苗を植え込んだ後、24日間隔で更に2回肥料を与えた。追加の肥料としては、台湾・ファーティライザー・オーガニックNo.39(12−18−12)(60g/穴)と、300倍希釈3.5%γ−PGA(Na+体)含有γ−PGA発酵用ブロス(500mL)をそれぞれ使用した。96日後、タイツリオウギの草本を収穫し、根を回収、洗浄した。新鮮な根と葉について評価した結果を表13に示した。
Claims (14)
- 植物病原体に起因する病害の抑制の向上剤:当該剤は、γ−ポリグルタミン酸(「γ−PGA」、H体)及び/又はその塩、γ−ポリグルタメートヒドロゲル、γ−PGA、その塩及び/又はγ−ポリグルタメートヒドロゲルを含む発酵ブロス、又はそれらの混合物を含有し、
前記塩は、γ−ポリグルタメートNa+体、γ−ポリグルタメートK+体、γ−ポリグルタメートNH4 +体、γ−ポリグルタメートMg++体又はγ−ポリグルタメートCa++体であり、
前記γ−ポリグルタメートヒドロゲルは、γ−ポリグルタメートNa+体、γ−ポリグルタメートK+体、γ−ポリグルタメートNH4 +体、γ−ポリグルタメートMg++体、γ−ポリグルタメートCa++体又はそれらの混合物を、ジグリセロールポリグリシジルエーテル、ポリグリセロールポリグリシジルエーテル、ソルビトールポリグリシジルエーテル、ポリオキシエチレンソルビトールポリグリシジルエーテル、ポリソルビトールポリグリシジルエーテル、ポリエチレングリコールジグリシジルエーテル又はそれらの混合物で架橋するか、あるいはガンマ線又は電子ビームを照射して架橋することによって調製され、
当該剤は、農作物、植物又は種子、あるいは農作物、植物又は種子を成長させる圃場に適用されるものである。 - 殺生剤として使用される、請求項1に記載の剤。
- 種子にコーティングされるものである、請求項2に記載の剤。
- 水に溶解させ、25℃におけるpHを5.0〜8.0に調整して用いられる、請求項1に記載の剤。
- γ−PGA及び/又はその塩の濃度は0.001w/w%〜15w/w%である、請求項4に記載の剤。
- γ−ポリグルタメートヒドロゲルの濃度は0.001w/w%〜10w/w%である、請求項4に記載の剤。
- 農作物、植物又は種子の生育を向上させ、植物の茎と幹を同時に強化し、農作物の収穫高を増加させるための剤:当該剤は、γ−ポリグルタメートヒドロゲル、γ−ポリグルタメートヒドロゲルを含む発酵ブロス、又はそれらの混合物を含有し、
前記γ−ポリグルタメートヒドロゲルは、γ−ポリグルタメートNa+体、γ−ポリグルタメートK+体、γ−ポリグルタメートNH4 +体、γ−ポリグルタメートMg++体、γ−ポリグルタメートCa++体又はそれらの混合物を、ジグリセロールポリグリシジルエーテル、ポリグリセロールポリグリシジルエーテル、ソルビトールポリグリシジルエーテル、ポリオキシエチレンソルビトールポリグリシジルエーテル、ポリソルビトールポリグリシジルエーテル又はそれらの混合物で架橋することによって調製され、
当該剤は、農作物、植物又は種子、あるいは農作物、植物又は種子を成長させる圃場に適用されるものである。 - 土壌調製・改良用湿潤剤、植物の葉に噴霧して使用するための又は農作物圃場又は植物圃場の灌漑に使用するための成長刺激剤、農作物、植物又は種子を生育させる圃場に存在する重金属を除去するためのキレート剤、ならびに/又は可溶性カルシウム及び/若しくはマグネシウムを生成するための錯化剤として使用される、請求項7に記載の剤。
- 種子にコーティングされるものである、請求項8に記載の剤。
- 水に溶解させ、25℃におけるpHを5.0〜8.0に調整して用いられる、請求項8に記載の剤。
- γ−ポリグルタメートヒドロゲルの濃度は0.001w/w%〜10w/w%である、請求項8に記載の剤。
- γ−ポリグルタミン酸及び/又はその塩をさらに含む、請求項8に記載の剤。
- 前記塩は、γ−ポリグルタメートNa+体、γ−ポリグルタメートK+体、γ−ポリグルタメートNH4 +体、γ−ポリグルタメートMg++体又はγ−ポリグルタメートCa++体である、請求項12に記載の剤。
- 前記γ−ポリグルタミン酸及び/又はその塩の濃度は0.001w/w%〜15w/w%である、請求項12に記載の剤。
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